JP2022520802A - がんの治療に使用するための併用療法 - Google Patents

Abstract

式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩は特に、例えばＮＳＣＬＣなどのＭＴＡＰ欠損性肺がん、または例えばＰＤＡＣなどのＭＴＡＰ欠損性膵がん、またはＭＴＡＰ欠損性食道がんの治療に有用であり、本明細書に記載されるように、単独で投与されたときの各剤を用いた治療と比較して、他の剤と併用されて使用されたときに治療利益を提供する。一つの実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、ＭＴＡＰ欠損性ＮＳＣＬＣまたはＭＴＡＰ欠損性ＰＤＡＣを含む、ＭＴＡＰ欠損性肺がんもしくはＭＴＡＰ欠損性膵がん、またはＭＴＡＰ欠損性食道がんの治療において、少なくとも一つの抗有糸分裂剤と併用して使用されたときに、治療上の利益を提供する。【選択図】なし

Description

関連出願への相互参照
本出願は、２０１９年２月１３日に出願された米国仮特許出願第６２／８０５，１７９号の利益を主張し、当該仮出願の開示内容は参照により本明細書に組み込まれる。

式（Ｉ）の化合物およびその薬学的に許容可能な塩は特に、例えば非小細胞肺がんもしくはＮＳＣＬＣなどのＭＴＡＰ欠損性肺がん、または例えば膵管腺がんもしくはＰＤＡＣなどのＭＴＡＰ欠損性膵がん、またはＭＴＡＰ欠損性食道がんの治療に有用であり、本明細書に記載されるように、単独で投与されたときの各剤を用いた治療と比較して、他の剤と併用されて使用されたときに治療利益を提供する。

Ｓ－アデノシルメチオニンｉｎシンテターゼとしても知られるメチオニンアデノシルトランスフェラーゼ（ＭＡＴ）は、メチオニンおよびＡＴＰからのＳ－アデノシルメチオニン（ＳＡＭ、またはＡｄｏＭｅｔ）の合成を触媒する細胞酵素であり、当該触媒はメチオニンサイクルの律速段階であると考えられている。ＳＡＭは、ポリアミン生合成のプロピルアミノドナーであり、ＤＮＡメチル化の主たるメチルドナーであり、遺伝子転写および細胞増殖に関与し、また二次代謝産物の産生に関与する。

ＭＡＴ１ＡおよびＭＡＴ２Ａと表される二つの遺伝子は、それぞれ別個の二つの触媒性ＭＡＴアイソフォームをコードする。第三の遺伝子、ＭＡＴ２Ｂは、ＭＡＴ２Ａ調節サブユニットをコードする。ＭＡＴ１Ａは成人肝臓で特異的に発現され、一方でＭＡＴ２Ａは広く分布している。ＭＡＴアイソフォーム同士は触媒運動性および調節性能において異なっているため、ＭＡＴ１Ａ発現細胞は、ＭＡＴ２Ａ発現細胞よりも著しく高いＳＡＭレベルを有する。ＭＡＴ２Ａプロモーターの低メチル化およびヒストンアセチル化は、ＭＡＴ２Ａ発現上昇を引き起こすことが分かっている。

肝細胞がん（ＨＣＣ）では、ＭＡＴ１Ａの発現低下およびＭＡＴ２Ａの発現上昇が起こるが、これはＭＡＴ１Ａ：ＭＡＴ２Ａスイッチとして知られている。このスイッチは、ＭＡＴ２Ｂの発現上昇を伴い、より低いＳＡＭ含量を導くが、これは肝腫細胞に対する増殖利益を提供する。ＭＡＴ２Ａは、肝腫細胞の増殖を促進する上で重要な役割を果たすため、抗腫瘍療法の標的である。最近の研究では、低分子干渉ＲＮＡを使用したサイレンシングが実質的に増殖を抑制し、肝腫細胞においてアポトーシスを誘発することが示されている。例えば、Ｔ．Ｌｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ ７（１０）（２０１６）１３１７－１３２７を参照されたい。

ＭＴＡＰ欠損である一部のがん細胞株は、特にＭＡＴ２Ａの阻害に感受性である。Ｍａｒｊｏｎ ｅｔ ａｌ．（Ｃｅｌｌ Ｒｅｐｏｒｔｓ １５（３）（２０１６）５７４－５８７）。ＭＴＡＰ（メチルチオアデノシンホスホリラーゼ）は、メチルチオアデノシン（ＭＴＡ）のアデニンおよび５－メチルチオリボース－１－リン酸塩への変換を触媒する、正常組織で広く発現される酵素である。アデニンは、アデノシン一リン酸を生成するために再利用され、５－メチルチオリボース－１－リン酸塩はメチオニンおよびギ酸塩に変換される。このサルベージ経路のため、ＭＴＡは、例えばＬ－アラノシンなどの代謝拮抗剤を用いて、デノボプリン合成が遮断されたときに代替的プリン源としての役割を果たすことができる。

ＭＡＴ２Ａは、肝細胞がんおよび白血病を含むＭＴＡＰ欠失を欠いているさらなるがんでは調節不全にされる。Ｊ．Ｃａｉ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５８（１９９８）１４４４－１４５０；Ｔ．Ｓ．Ｊａｎｉ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ．Ｒｅｓ．１９（２００９）３５８－３６９。ＲＮＡ干渉を介したＭＡＴ２Ａ発現のサイレンシングは、いくつかのがんモデルにおいて抗増殖効果をもたらす。Ｈ．Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １３３（２００７）２０７－２１８；Ｑ．Ｌｉｕ ｅｔ ａｌ．Ｈｅｐａｔｏｌ．Ｒｅｓ．３７（２００７）３７６－３８８。

多数のヒトおよびマウスの悪性細胞は、ＭＴＡＰ活性を欠いている。ＭＴＡＰ欠損は組織培養細胞において存在するだけでなく、当該欠損は原発性白血病、神経膠腫、黒色腫、膵がん、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、膀胱がん、星細胞腫、骨肉腫、頭頸部がん、粘液様軟骨肉腫、卵巣がん、子宮内膜がん、乳がん、軟部組織肉腫、非ホジキンリンパ腫、および中皮腫においても存在する。ヒトＭＴＡＰをコードする遺伝子は、ヒト染色体９ｐ上の領域９ｐ２１に位置する。この領域はまた、腫瘍抑制遺伝子ｐ１６ＩＮＫ４Ａ（ＣＤＫＮ２Ａとしても知られる）およびｐｌ５ＩＮＫ４Ｂも含有する。これら遺伝子は、それぞれサイクリンＤ依存性キナーゼｃｄｋ４およびｃｄｋ６の阻害剤である、ｐ１６およびｐ１５をコードする。

代わりとして、ｐ１６ＩＮＫ４Ａ転写物を代替的なリーディングフレーム（ＡＲＦ：ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ ｒｅａｄｉｎｇ ｆｒａｍｅ）として、ｐｌ４ＡＲＦをコードする転写物へとスプライシングさせることが可能である。ｐｌ４ＡＲＦはＭＤＭ２に結合し、ｐ５３の分解を防止する（Ｐｏｍｅｒａｎｔｚ ｅｔ ａｌ．（１９９８）Ｃｅｌｌ ９２：７１３－７２３）。９ｐ２１染色体領域は、白血病、ＮＳＬＣ、膵がん、神経膠腫、黒色腫、および中皮腫を含む、さまざまながんでホモ接合性欠失していることがよくあるため、関心対象である。欠失は複数の遺伝子を不活性化することが多い。例えば、Ｃａｉｒｎｓ ｅｔ．ａｌ．（（１９９５）Ｎａｔ．Ｇｅｎ．１１：２１０－２１２）は、５００を超える原発腫瘍を研究した後に、当該腫瘍において特定されたほぼすべての欠失が、ＭＴＡＰ、ｐｌ４ＡＲＦ、およびＰ１６ＩＮＫ４Ａを含有する１７０ｋｂ領域を含んでいたことを報告した。Ｃａｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ．（国際公開第９９／６７６３４号）は、ＭＴＡＰをコードする遺伝子およびｐ１６をコードする遺伝子の腫瘍発生段階とホモ接合性の喪失との間に相関関係が存在することを報告した。例えば、ｐ１６ＩＮＫ４Ａではないが、ＭＴＡＰ遺伝子の欠失は、発生の早期段階でのがんの兆候であることが報告されたが、ｐ１６およびＭＴＡＰをコードする遺伝子の欠失は、腫瘍発生のより進行した段階でのがんの兆候であることが報告された。一部の骨肉腫患者では、ＭＴＡＰ遺伝子は診断時に存在していたが、後の時点では欠失していた（Ｇａｒｃｉａ－Ｃａｓｔｅｌｌａｎｏ ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．８（３）２００２ ７８２－７８７）。
国際出願ＰＣＴ／ＵＳ２０１７／０４９４３９は、ＷＯ２０１８／０４５０７１として公開されており、３－（シクロヘキサ－１－エン－１－イル）－６－（４－メトキシフェニル）－２－フェニル－５－（ピリジン－３－イルアミノ）ピルゾロ［１，５－ａ］ピリミジン－７（４Ｈ）－オンを含む新規のＭＡＴ２Ａ阻害剤を記載し、生化学的アッセイおよび細胞アッセイにより実証している。

国際公開第１９９９／０６７６３４号 国際公開第２０１８／０４５０７１号

Ｔ．Ｌｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ ７（１０）（２０１６）１３１７－１３２７ Ｍａｒｊｏｎ ｅｔ ａｌ．（Ｃｅｌｌ Ｒｅｐｏｒｔｓ １５（３）（２０１６）５７４－５８７ Ｊ．Ｃａｉ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５８（１９９８）１４４４－１４５０ Ｔ．Ｓ．Ｊａｎｉ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ．Ｒｅｓ．１９（２００９）３５８－３６９ Ｈ．Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １３３（２００７）２０７－２１８ Ｑ．Ｌｉｕ ｅｔ ａｌ．Ｈｅｐａｔｏｌ．Ｒｅｓ．３７（２００７）３７６－３８８ Ｐｏｍｅｒａｎｔｚ ｅｔ ａｌ．（１９９８）Ｃｅｌｌ ９２：７１３－７２３ Ｃａｉｒｎｓ ｅｔ．ａｌ．（（１９９５）Ｎａｔ．Ｇｅｎ．１１：２１０－２１２ Ｇａｒｃｉａ－Ｃａｓｔｅｌｌａｎｏ ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．８（３）２００２ ７８２－７８７

化合物の３－（シクロヘキサ－１－エン－１－イル）－６－（４－メトキシフェニル）－２－フェニル－５－（ピリジン－３－イルアミノ）ピルゾロ［１，５－ａ］ピリミジン－７（４Ｈ）－オンは、本明細書において、以下の式（Ｉ）の化合物と呼称される場合がある。

参照を容易にするために、当該化合物は、化合物１と呼称される場合もある。本開示は、式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容可能な塩も含む。
式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は特に、例えばＮＳＣＬＣなどの肺がん、または例えばＰＤＡＣなどの膵がん、または食道がんの治療に有用であり、それらがんはＭＴＡＰ欠損性である。一つの実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、ＭＴＡＰ欠損性ＮＳＣＬＣまたはＭＴＡＰ欠損性ＰＤＡＣを含む、ＭＴＡＰ欠損性肺がんもしくはＭＴＡＰ欠損性膵がん、またはＭＴＡＰ欠損性食道がんの治療において、少なくとも一つの抗有糸分裂剤と併用して使用されたときに、治療上の利益を提供する。関連する抗有糸分裂剤としては、微小管安定化剤、および紡錘体集合チェックポイントを破壊する剤が挙げられる。抗有糸分裂剤の一例は、タキサンである。タキサンの例としては、パクリタキセル、ｎａｂ－パクリタキセル、もしくはドセタキセル、またはそれらの代替的な製剤が挙げられる。別の実施形態では、抗有糸分裂剤は、オーロラキナーゼ阻害剤であり、オーロラキナーゼＡまたはオーロラキナーゼＢの阻害剤が挙げられる。本出願のさらなる態様において、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、例えばＮＳＣＬＣなどのＭＴＡＰ欠損性肺がん、または例えばＰＤＡＣなどのＭＴＡＰ欠損性膵がんの治療において、ＤＮＡ合成阻害剤と併用されて使用されたときに、治療上の利益を提供する。ＤＮＡ合成阻害剤の一例は、ゲムシタビンである。別の実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と、ＤＮＡ合成阻害剤は、ＰＤＡＣを含むＭＴＡＰ欠損性膵がんの治療において、さらにタキサンと併用される。タキサンの例としては、ドセタキセル、およびナノ粒子－アルブミン結合型パクリタキセルを含むパクリタキセルが挙げられる。またさらなる実施形態において、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と、タキサンは、ＭＴＡＰ欠損性食道がんの治療において併用されて使用されるとき、治療上の利益を提供すると考えられる。またさらなる実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、ＭＴＡＰ欠損性ＮＳＣＬＣまたはＭＴＡＰ欠損性ＰＤＡＣを含む、ＭＴＡＰ欠損性肺がんもしくはＭＴＡＰ欠損性膵がん、またはＭＴＡＰ欠損性食道がんの治療において、少なくとも一つの抗代謝剤と併用して使用されたときに、治療上の利益を提供する。別の実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、ＭＴＡＰ欠損性中皮腫の治療において、少なくとも一つの抗代謝剤と併用して使用されたときに、治療上の利益を提供し得る。抗代謝剤の一例は、ペメトレキセド二ナトリウム（ペメトレキセド）である。またさらなる実施形態において、前述の治療方法の任意の方法は、本明細書に記載される追加の治療剤を一つ以上組み込んでもよい。

図１は、同期化ＨＣＴ１１６ ＭＴＡＰ^－／－における細胞サイクル解析の図であり、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩が、細胞サイクルの進行を阻害することを示す。

図２は、細胞サイクル進行中のオーロラＢおよびホスホ－Ｓｅｒ１０－Ｈ３のレベルに関するウェスタンブロット解析を示す。

図３Ａおよび図３Ｂは、免疫蛍光解析の結果を示しており、式（Ｉ）の化合物が、同期化ＨＣＴ１１６ ＭＴＡＰ^－／－細胞において、γＨ２ＡＸの増加をもたらすことを示す。

図４Ａおよび図４Ｂは、ＤＡＰＩ染色解析を示し、小核形成数の増加を示す。

図５Ａは、免疫蛍光解析の結果を示し、式（Ｉ）の化合物を用いた処置時の有糸分裂欠損を示す。図５Ｂは、γＨ２ＡＸ染色解析の結果を示し、式（Ｉ）の化合物が、ＨＣＴ１１６ ＭＴＡＰ^－／－細胞においてＤＮＡ損傷を誘導することを示す。

図６は、本明細書に定義されるＬｏｅｗｅ相乗効果スコアを示しており、散布図として提示され、記載される細胞株パネル全体の中央値スコアによりランク付けされている。

図７は、式（Ｉ）の化合物と、ドセタキセルおよびパクリタキセルの二つの異なるタキサン化合物を用いた、組み合わせ指数評価の結果を示す。相乗効果プロットは、Ｈ２１２２細胞株およびＫＰ４細胞株における、式（Ｉ）の化合物と併用されたドセタキセルおよびパクリタキセルの相互作用を示す。 同上。

図８は、実施例４の結果を示しており、膵臓ＫＰ４異種移植片モデルにおける、式（Ｉ）の化合物とドセタキセル療法の併用の結果を示す。

図９は、実施例５の結果を示しており、メスのＢＡＬＢ／ｃヌードマウスにおける、膵がん異種移植片モデル（ＰＡ０３７２）における式（Ｉ）の化合物とパクリタキセル療法の併用の結果を示す。

図１０は、実施例６の結果を示しており、膵臓ＰＡＸ０４１ ＰＤＸモデルにおける、式（Ｉ）の化合物とパクリタキセル療法の併用の結果を示す。

図１１は、実施例７の結果を示しており、膵臓ＰＡＸ０４１ ＰＤＸモデルにおける、式（Ｉ）の化合物とゲムシタビン療法の併用の結果を示す。

図１２は、実施例８の結果を示しており、膵臓ＰＤＸモデル（ＰＡＸ００１）における、式（Ｉ）の化合物とゲムシタビン療法の併用の結果を示す。

図１３は、実施例９の結果を示しており、膵臓ＫＰ４モデルにおける、式（Ｉ）の化合物とゲムシタビン療法の併用の結果を示す。

図１４は、実施例１０の結果を示しており、ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデル（ＬＵ６４１２）における、式（Ｉ）の化合物とドセタキセル療法の併用の結果を示す。

図１５は、実施例１１の結果を示しており、ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデル（ＣＴＧ－１１９４）における、式（Ｉ）の化合物とドセタキセル療法の併用の結果を示す。

図１６は、実施例１２の結果を示しており、膵臓ＰＤＸモデル（ＰＡＸ００１）における、式（Ｉ）の化合物とパクリタキセル療法の併用の結果を示す。

図１７は、実施例１３の結果を示しており、食道ＰＤＸモデル（ＥＳ２２６３）における、式（Ｉ）の化合物とドセタキセル療法の併用の結果を示す。

図１８は、実施例１４の結果を示しており、膵臓ＰＤＸモデル（ＰＡＸ０４１）における、式（Ｉ）の化合物とゲムシタビン療法の併用の結果を示す。

図１９は、実施例１５の結果を示しており、膵臓ＰＤＸモデル（ＰＡＸ００１）における、式（Ｉ）の化合物とゲムシタビン療法の併用の結果を示す。

図２０は、実施例１６の結果を示しており、膵臓異種移植片腫瘍（ＫＰ４）における、式（Ｉ）の化合物とゲムシタビン療法の併用の結果を示す。

図２１は、実施例１８の結果を示しており、ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデル（ＬＵ６４３１）における、式（Ｉ）の化合物とゲムシタビン療法の併用の結果を示す。

本明細書において上述されるように、および本出願において別段に記載されるように、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は特に、例えばＮＳＣＬＣなどのＭＴＡＰ欠損性肺がん、または例えばＰＤＡＣなどのＭＴＡＰ欠損性膵がん、またはＭＴＡＰ欠損性食道がんの治療に有用である。

一つの実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、ＭＴＡＰ欠損性肺がんまたはＭＴＡＰ欠損性膵がん、より具体的にはＭＴＡＰ欠損性ＮＳＣＬＣまたはＭＴＡＰ欠損性ＰＤＡＣの治療において、またはＭＴＡＰ欠損性食道がんの治療において、少なくとも一つの抗有糸分裂剤と併用して使用されたときに、治療上の利益を提供し得る。関連する抗有糸分裂剤としては、微小管安定化剤、および紡錘体集合チェックポイントを破壊する剤が挙げられる。一部の実施形態において、抗有糸分裂剤は、タキサンである。一部の実施形態において、タキサンの例としては、ドセタキセル、およびナノ粒子－アルブミン結合型パクリタキセル（ｎａｂ－パクリタキセル）を含むパクリタキセルが挙げられる。他の実施形態では、抗有糸分裂剤は、オーロラキナーゼ阻害剤であり、オーロラキナーゼＡまたはオーロラキナーゼＢの阻害剤が挙げられる。

本出願のさらなる態様において、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、例えばＮＳＣＬＣなどのＭＴＡＰ欠損性肺がん、または例えばＰＤＡＣなどのＭＴＡＰ欠損性膵がんの治療において、ＤＮＡ合成阻害剤と併用されて使用されたときに、治療上の利益を提供する。一部の実施形態では、ＤＮＡ合成阻害剤は、ゲムシタビンである。別の実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と、ＤＮＡ合成阻害剤は、例えばＰＤＡＣなどのＭＴＡＰ欠損性膵がんの治療において、さらにタキサンと併用される。一部の実施形態において、タキサンの例としては、ドセタキセル、およびナノ粒子－アルブミン結合型パクリタキセルを含むパクリタキセルが挙げられる。

別の実施形態において、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、ＭＴＡＰ欠損性食道がんの治療において抗有糸分裂剤と併用されて使用されるとき、治療上の利益を提供する。一部の実施形態において、抗有糸分裂剤はタキサンである。一部の実施形態において、タキサンとしては、ドセタキセル、およびナノ粒子－アルブミン結合型パクリタキセルを含むパクリタキセルが挙げられる。さらに別の実施形態では、ＭＴＡＰ欠損性食道がんの治療において、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩とタキサンはさらにプラチナ系化学療法剤と併用されて使用される。一部の実施形態では、プラチナ系化学療法剤は、シスプラチン、カルボプラチン、および／またはオキサリプラチンである。他の実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩とタキサンは、プラチナ系化学療法剤および抗代謝剤とさらに併用されて使用される。一部の実施形態では、抗代謝剤は、５－フルオロウラシルおよび／またはカペシタビンである。

他の実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、ＭＴＡＰ欠損性肺がんまたはＭＴＡＰ欠損性膵がんまたはＭＴＡＰ欠損性食道がんの治療において、抗代謝剤と併用されて使用されたときに、治療上の利益を提供する。一部の実施形態では、ＭＴＡＰ欠損性肺がんは、ＮＳＣＬＣである。さらに他の実施形態では、ＮＳＣＬＣは進行した非扁平上皮細胞性のＮＳＣＬＣである。一部の実施形態では、抗代謝剤は、ペメトレキセドである。他の実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩とペメトレキセドは、プラチナ系化学療法剤とさらに併用されて使用される。一部の実施形態では、プラチナ系化学療法剤は、シスプラチン、カルボプラチン、および／またはオキサリプラチンである。さらに他の実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩とペメトレキセドは、プラチナ系化学療法剤、および例えばペムブロリズマブなどのＰＤ－Ｌ１チェックポイント阻害剤とさらに併用されて使用される。

他の実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、ＭＴＡＰ欠損性中皮腫の治療において、抗代謝剤と併用されて使用されたときに治療上の利益を提供する。一部の実施形態では、抗代謝剤はペメトレキセドである。他の実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩とペメトレキセドは、プラチナ系化学療法剤とさらに併用されて使用される。一部の実施形態では、プラチナ系化学療法剤は、シスプラチン、カルボプラチン、および／またはオキサリプラチンである。

前述の治療方法のいずれかに関するさらに追加的な実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、および一つ以上の追加の治療剤は、同時に投与されてもよい。前述の治療方法のいずれかに関するさらに追加的な実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、および一つ以上の追加の治療剤は、連続して投与されてもよい。前述の治療方法のいずれかに関するさらに他の実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、経口投与される。前述の治療方法のいずれかに関するさらなる実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、１日に１回または２回投与される。
定義

「ＭＴＡＰ欠損性」の肺がんまたは「ＭＴＡＰ欠損性」の膵がんまたは「ＭＴＡＰ欠損性」の食道がんという文言は、代謝酵素のメチルチオアデノシンホスホリラーゼ（ＭＴＡＰ：Ｍｅｔｈｙｌｔｈｉｏａｄｅｎｏｓｉｎｅ Ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｓｅ）の活性を欠く肺がんまたは膵がんまたは食道がんを指す。したがって、ＭＴＡＰ欠損性肺がんまたはＭＴＡＰ欠損性膵がんまたはＭＴＡＰ欠損性食道がんは、ＭＴＡＰ遺伝子の発現に失敗している場所に発生する。発現の失敗は、ＭＴＡＰ遺伝子の非存在、ＭＴＡＰタンパク質発現の欠如、またはＭＴＡＰ基質であるＭＴＡの蓄積により評価されてもよい。一部の実施形態では、「ＭＴＡＰ欠損性」という用語は、「ＭＴＡＰが欠失した」および／または「ＭＴＡＰヌル」とも呼称される。したがって、当該用語は相互交換可能に使用されてもよい。例えば一部の実施形態では、「ＭＴＡＰが欠失した」もしくは「ＭＴＡＰヌル」の肺がん、または「ＭＴＡＰが欠失した」もしくは「ＭＴＡＰヌル」の膵がん、または「ＭＴＡＰが欠失した」もしくは「ＭＴＡＰヌル」の食道がんとは、ＭＴＡＰ遺伝子の染色体喪失を指し、喪失の結果、ＭＴＡＰ ＤＮＡのすべてまたは一部が喪失され、機能性全長ＭＴＡＰタンパク質の発現が妨げられる。一部の実施形態では、ＭＴＡＰ欠損性肺がん、またはＭＴＡＰ欠損性膵がんは、例えばＮＳＣＬＣまたはＰＤＡＣなどの肺がんまたは膵がんであり、当該がんにおいて、ＭＴＡＰ遺伝子は欠失され、喪失され、または別手段により不活化されている。同様に、ＭＴＡＰ欠損性食道がんは、ＭＴＡＰ遺伝子が欠失され、喪失され、または別手段により不活化されている食道がんである。一部の実施形態では、例えばＮＳＣＬＣなどのＭＴＡＰ欠損性肺がん、または例えばＰＤＡＣなどのＭＴＡＰ欠損性膵がんは、野生型ＭＴＡＰ遺伝子と比較して、ＭＴＡＰタンパク質が機能低下している、または機能的に障害を受けている肺がんまたは膵がんである。同様に、一部の実施形態では、ＭＴＡＰ欠損性食道がんは、野生型ＭＴＡＰ遺伝子と比較して、ＭＴＡＰタンパク質が機能低下している、または機能的に障害を受けている食道がんである。したがって、本開示の一実施形態では、対象の例えばＮＳＣＬＣなどのＭＴＡＰ欠損性肺がん、例えばＰＤＡＣなどのＭＴＡＰ欠損性膵がん、またはＭＴＡＰ欠損性食道がんを治療するための方法が提供され、当該肺がん、膵がん、または食道がんは、ＭＴＡＰ遺伝子および／またはＭＴＡＰタンパク質が存在し、完全に機能している肺がんまたは膵がんと比較して、または野生型ＭＴＡＰ遺伝子を有する肺がんまたは膵がんと比較して、（ｉ）ＭＴＡＰ発現が減少または非存在、（ｉｉ）ＭＴＡＰ遺伝子が非存在、および（ｉｉｉ）ＭＴＡＰタンパク質が機能低下、のうちの少なくとも一つを特徴とする。

本明細書において、「薬学的に許容可能な塩」は、本発明化合物の薬学的に許容可能な、有機もしくは無機の酸または塩基の塩である。代表的な薬学的に許容可能な塩としては、例えば、アルカリ金属塩、アルカリ土類塩、アンモニウム塩、例えば酢酸塩、アムソン酸塩（４，４－ジアミノスチルベン－２，２－ジスルホン酸塩）、ベンゼンスルホン酸塩、ベンゾネート（ｂｅｎｚｏｎａｔｅ）、重炭酸塩、重硫酸塩、重酒石酸塩、ホウ酸塩、臭化物、酪酸塩、カルシウム、エデト酸カルシウム、カンシル酸塩、炭酸塩、塩化物、クエン酸塩、クラブラリエート（ｃｌａｖｕｌａｒｉａｔｅ）、二塩酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストレート、エシレート、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニル酸塩、ヘキサフルオロリン酸塩、ヘキシルレゾルシナート（ｈｅｘｙｌｒｅｓｏｒｃｉｎａｔｅ）、ヒドラバミン、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、ヨウ化物、イソチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、臭化メチル、硝酸メチル、硫酸メチル、ムチン酸塩、ナプシル酸塩、硝酸塩、Ｎ－メチルグルカミンアンモニウム塩、３－ヒドロキシ－２－ナフトエ酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩（１，１－メテン－ビス－２－ヒドロキシ－３－ナフトエ酸塩、エインボナート（ｅｉｎｂｏｎａｔｅ））、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ピクリン酸塩、ポリガラクツロ酸塩、プロピオン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、スルホサリチル酸塩、スラマート（ｓｕｒａｍａｔｅ）、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、トシル酸塩、トリエチオダイドおよび吉草酸塩などの水溶性塩ならびに非水溶性塩が挙げられる。薬学的に許容可能な塩は、その構造中に複数の電荷を帯びた原子を有することができる。この場合、薬学的に許容可能な塩は、複数の対イオンを有することができる。従って、薬学的に許容可能な塩は、一つ以上の電荷を帯びた原子および／または一つ以上の対イオンを有することができる。

「治療する」、「治療すること」および「治療」という用語は、疾患、または疾患に関連する症状の改善または根絶を指す。ある実施形態では、当該用語は、一つ以上の予防剤または治療剤をそうした疾患を有する患者に投与することから生じる、疾患の拡大または悪化を最小限にすることを指す。

「予防する」、「予防すること」および「予防」という用語は、予防剤または治療剤の投与から生じる、患者の疾患の発症、再発もしくは拡大の予防または遅延を指す。

「有効量」という用語は、疾患の治療または予防において、治療的または予防的な利益を提供するために充分な、または疾患に関連する症状を遅延または最小限にするために充分な、式（Ｉ）の化合物または他の有効成分の量を指す。さらに、式（Ｉ）の化合物に関して治療有効量とは、単独での治療剤の量、または疾患の治療もしくは予防において治療的利益を提供する他の療法と組み合わせた治療剤の量を意味する。当該用語は、全体的な療法を改善する量、疾患の症状もしくは原因を減少させるまたは回避する量、または別の治療剤の治療効果を強化する量、または別の治療剤との相乗効果を強化する量を包含し得る。

「患者」または「対象」は、例えば、ヒト、ウシ、ウマ、ヒツジ、仔ヒツジ、ブタ、ニワトリ、シチメンチョウ、ウズラ、ネコ、イヌ、マウス、ラット、ウサギまたはモルモットなどの動物を含む。一部の実施形態によれば、動物は、例えば非霊長類および霊長類（例えば、サルおよびヒト）等の哺乳動物である。一つの実施形態では、患者は、例えばヒトの新生児、幼児、子供、青年、または成人などのヒトである。一つの実施形態では、患者は、誕生から１８歳までの患者を含む小児患者である。一つの実施形態では、患者は、青年の患者であり、青年の患者は、１２～１７歳の患者である。一つの実施形態では、患者は、成人の患者である。さらに別の実施形態では、患者の年齢を示す用語は、例えば米国ＦＤＡにより解説されるガイダンスなどの適切な規制ガイダンスに従い使用され、その場合、新生児は誕生から生後１か月、乳児は生後１か月から２歳まで、小児は２歳から１２歳まで、そして青年は１２歳から１６歳までである。

「阻害剤」とは、ＳＡＭの合成を阻害またはＳＡＭの合成量を低下させる化合物を意味する。ある実施形態では、阻害剤は、ＭＡＴ２Ａに結合する。

投与される式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩の「治療有効量」は、例えば、細胞毒性効果を発揮するため、またはＭＡＴ２Ａ活性を阻害するため、またはその両方に必要な最小量などの検討事項により規定されてもよい。そうした量は、正常な細胞に対して、または全体として患者に対して、毒性がある量を下回ってもよい。概して、投与される式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の初期の治療有効量は、１日当たり、約０．０１～約２００ｍｇ／患者体重ｋｇまたは約０．１～約２０ｍｇ／患者体重ｋｇの範囲であり、典型的な初期範囲は、約０．３～約１５ｍｇ／ｋｇ／日である。例えば錠剤およびカプセルなどの経口単位剤形は、約１ｍｇ～約１０００ｍｇの式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含有してもよい。別の実施形態では、そうした剤形は、約２０ｍｇ～約８００ｍｇの式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含有してもよい。さらに別の実施形態では、そうした剤形は、約２０ｍｇ、２５ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇ、５００ｍｇ、５５０ｍｇ、６００ｍｇ、６５０ｍｇ、７００ｍｇ、７５０ｍｇ、または８００ｍｇの式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含有してもよい。別の態様では、投与量は、式（Ｉ）の化合物の遊離形態当量に対応する量として測定される。本明細書で使用される場合、「遊離形態当量」とは、遊離形態（または遊離塩基形態）で存在するか、または塩として存在するかに関わらず、遊離形態の式（Ｉ）の化合物の所与の量に対応する、式（Ｉ）の化合物の当該量を指す。さらなる態様では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の治療有効量を投与することは、組み合わせ、すなわち、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的な塩と、一つ以上の追加の治療剤が、特定の期間内およびある期間、投与される状況を含む。一部の実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的な塩を含む剤形は、１日１回投与される。他の実施形態では、剤形は、１日２回投与される。本明細書で使用される場合、「毎日投与」という用語は、２４時間以内に遂行される、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に対する特定の投与スケジュールを意味する。

本明細書で使用される場合、「ペメトレキセド」という用語は、以下の構造を有する、（２Ｓ）－２－［［４－［２－（２－アミノ－４－オキシド－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）エチル］ベンゾイル］アミノ］ペンタン二酸を指す。「ペメトレキセド」はさらに、Ａｌｉｍｔａ（登録商標）として入手可能なペメトレキセド二ナトリウムなど、その薬学的に許容可能な塩も含む。

がんにおける肯定的な治療効果は、多くの方法で測定することができる。本明細書に記載される組み合わせの治療有効量の投与は、個々の成分化合物よりも利益がある。本明細書で使用される場合、「有益な組み合わせ」は、治療有効量の成分化合物の個々の投与と比較して、以下の改善特性のうちの少なくとも一つを提供する組み合わせである：ｉ）最も高い活性の単剤よりも大きな抗がん効果、ｉｉ）相乗的な抗がん効果、またはｉｉｉ）加法的な活性。

一部の実施形態では、相乗効果は、本明細書に記載されるモデルのうちの少なくとも一つを使用して決定される。組み合わせの効果は、各データ点と、単剤曲線から導かれた組み合わせ基準モデルのデータ点を比較することによって特徴解析されてもよい。一般的に、以下の三つのモデルが使用される：（１）最高単剤（Ｈｉｇｈｅｓｔ Ｓｉｎｇｌｅ Ａｇｅｎｔ）。シンプルな基準モデルであり、予測される組み合わせ効果が、対応する濃度での単剤応答の最大値である；（２）Ｂｌｉｓｓ独立モデル。独立した競合阻害剤に対する統計的期待値を表す；（３）Ｌｏｅｗｅ加法性モデル。両剤が実際には同一化合物である場合に予測される応答を表す；（４）Ｃｈｏｕ－Ｔａｌａｌａｙモデル。単剤治療および併用治療の用量－効果データから推定し、組み合わせ指数（ＣＩ：Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ Ｉｎｄｅｘ）スコアとして表される；または一つ以上のモデルの組み合わせ。

Ｌｏｅｗｅ加法性モデルは、相乗効果に関して最も一般的に受け容れられている基準であるため、Ｌｏｅｗｅ加法性モデルが使用され、測定基準は同モデルから導かれた。本明細書において、「Ｌｏｅｗｅ相乗効果スコア」と特徴付けられる。

Ｌｏｅｗｅ加法性モデル
Ｌｏｅｗｅ加法性モデルは、用量ベースであり、単剤により達成された活性レベルに対してのみ適用される。Ｌｏｅｗｅ体積を使用して、Ｌｏｅｗｅ加法性モデルを超える組み合わせの相互作用の全体的な大きさが評価される。Ｌｏｅｗｅ体積は、表現型活性における相乗的増加（肯定的Ｌｏｅｗｅ体積）と相乗的拮抗効果（否定的Ｌｏｅｗｅ体積）を識別するときに特に有用である。拮抗効果が観察されるとき、Ｌｏｅｗｅ体積を評価して、拮抗効果と、特定の薬剤標的－活性または細胞遺伝子型との間に何らかの相関が存在するかを検証しなければならない。このモデルは、非相乗的な組み合わせ相互作用として加法性を定義し、組み合わせの用量マトリクス表面は、それ自体と交差するいずれの薬剤とも識別不可能でなければならない。Ｌｏｅｗｅ加法性の計算は、以下である：
（Ｘ／Ｘ_Ｉ）＋（Ｙ／Ｙ_Ｉ）＝１を満たす、Ｉ_{Ｌｏｅｗｅ}
式中、Ｘ_ＩおよびＹ_Ｉは、観察された組み合わせ効果Ｉに対する単剤の有効濃度である。例えば、１μＭの薬剤Ａまたは１μＭの薬剤Ｂにより、５０％の阻害が別々に達成された場合、０．５μＭのＡと０．５μＭのＢの組み合わせも、５０％阻害するはずである。

Ｌｏｅｗｅ加法性を超えて観察された活性は、潜在的な相乗的相互作用を特定するものである。本解析について、経験的に導き出された組み合わせマトリクスが、実験的に収集された単剤用量反応曲線から構築された各Ｌｏｅｗｅ加法性モデルと比較された。用量応答マトリクス全体のこの余剰加法性の総計が、Ｌｏｅｗｅ体積と呼ばれる。肯定的Ｌｏｅｗｅ体積は潜在的な相乗効果を示唆しており、一方で否定的Ｌｏｅｗｅ体積は潜在的な拮抗効果を示唆している。

Ｌｏｅｗｅ相乗効果スコア
Ｌｏｅｗｅ加法性を超えた組み合わせ効果を測定するために、スカラー尺度が考案され、本明細書において「Ｌｏｅｗｅ相乗効果スコア」と呼ばれる相乗的相互作用の強度が特徴解析された。Ｌｏｅｗｅ相乗効果スコアは、以下のように計算される：
Ｌｏｅｗｅ相乗効果スコア＝ｌｏｇ ｆ_Ｘ ｌｏｇ ｆ_Ｙ Σ ｍａｘ（０，Ｉ_ｄａｔａ）（Ｉ_ｄａｔａ－Ｉ_{Ｌｏｅｗｅ}）

マトリクス中の各成分の剤および組み合わせの点に対する阻害率は、すべての未処置／ビヒクル処置の対照ウェルの中央値と比較して計算される。Ｌｏｅｗｅ相乗効果スコアの式は、加法性に関するＬｏｅｗｅモデルを使用して成分剤の活性から数値的に導かれた、モデル表面を超えるマトリクス中の各点で実験的に観察された活性体積を積分する。Ｌｏｅｗｅ相乗効果スコアの式（上記）における追加の条件を使用して、個々の剤に使用される様々な希釈因子を正規化し、実験全体の相乗効果スコアの比較を行うことができる。肯定的な阻害ゲーティングまたはＩ_ｄａｔａ乗数を含めると、ゼロの効果レベルに近いノイズが除去され、高活性レベルで発生する相乗的相互作用の結果にバイアスがかかる。より高い最大成長阻害（ＧＩ：Ｇｒｏｗｔｈ Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ）効果との組み合わせ、または低濃度で相乗的である効果との組み合わせは、Ｌｏｅｗｅ相乗効果スコアが高くなる。

以下の実施例に示されるように、さらに改変された組み合わせ統計解析を実施して、式（Ｉ）の化合物が、抗有糸分裂薬またはＤＮＡ合成阻害剤と組み合わされたときに、抗腫瘍性の併用利益をもたらすかが決定された。相乗効果スコアは、「インビボ相乗効果スコア」と呼称される場合もある。

より詳細には、この組み合わせ解析のインビボ方法論は以下の通りである：インプットデータは、連続する時点での各動物からの腫瘍体積からなる。各腫瘍体積について、１を加え、底を１０とするｌｏｇをとる。各動物について、各時点でのｌｏｇ（腫瘍体積＋１）から、最も早い時点でのｌｏｇ（腫瘍体積＋１）を差し引く。時間データに対して得られた差を使用して、各動物に対し、台形公式を使用して曲線下面積（ＡＵＣ）の値を計算する。各群の平均ＡＵＣを計算する。インビボ相乗効果スコア＝１００×（平均ＡＵＣＡＢ－平均ＡＵＣＡ－平均ＡＵＣＢ＋平均ＡＵＣＶ）／平均ＡＵＣＶ。この場合において平均ＡＵＣＡＢ、平均ＡＵＣＡ、平均ＡＵＣＢおよび平均ＡＵＣＶはそれぞれ、併用群、Ａ単剤群、Ｂ単剤群、およびビヒクル／対照群の平均ＡＵＣ値である。個々の動物のＡＵＣ値を使用して、インビボ相乗効果スコアがゼロであるか否かに関するＡＮＯＶＡ統計検定を実施し、ｐ値を取得する。相乗的であるとみなされる組み合わせについて、インビボ相乗効果スコアはゼロ未満でなければならない。インビボ相乗効果スコアがゼロであれば、まさに加法性である。インビボ相乗効果のスコアが０を超えると、スコアは加法性から拮抗性へと移行する。ｐ値が０．０５を超える場合、組み合わせは加法性であるとみなされる。ｐ値が０．０５未満であり、インビボ相乗効果スコアがゼロ未満である場合、組み合わせは相乗的であるとみなされる。ｐ値が０．０５未満であり、インビボ相乗効果スコアがゼロより大きく、組み合わせの平均ＡＵＣが単剤の最小平均ＡＵＣよりも低い場合、その組み合わせは、劣加法的であるとみなされる。ｐ値が０．０５未満であり、インビボ相乗効果スコアがゼロより大きく、組み合わせの平均ＡＵＣが単剤のうちの少なくとも一つの平均ＡＵＣよりも大きい場合、その組み合わせは、拮抗的であるとみなされる。

Ｃｈｏｕ－Ｔａｌａｌａｙモデル
相乗効果の代替モデルは、１９８３年に導入されたＣｈｏｕ－Ｔａｌａｌａｙモデルを使用した薬剤相互作用の評価である。この評価によって、併用実験において二つの薬剤の間の相互作用を推定することが可能となり、本明細書において、「組み合わせ指数（ＣＩ）スコア」と呼称される。このモデルによれば、相互作用は単剤治療および併用治療の用量－効果データから推定され、組み合わせ指数（ＣＩ）スコアとして表される。ＣＩは、（Ｄ１／ＥＤｘ１）＋（Ｄ２／ＥＤｘ２）として定義され、式中、ＥＤｘ１（またはＥＤｘ２）は、選択された効果ｘ（例えば５０％成長阻害など）を生じさせる単剤の薬剤１（または薬剤２）の用量であり、Ｄ１およびＤ２は、併用で与えられたときにも効果ｘを生じさせる薬剤１および薬剤２の用量である。所与の化合物ペアについて、複数の用量の組み合わせを（マトリクス設計において）探索し、最も低いＣＩを与えるＤ１／Ｄ２ペアを識別した。

ＣＩ＜１の場合、その二つの薬剤は相乗効果を有し、ＣＩ＞１の場合、その薬剤は拮抗効果を有する。最後に、ＣＩ＝１であれば、その薬剤が加法的効果を有することが示唆される。Ｃｈｏｕ，Ｔ．Ｃ．＆ Ｔａｌａｌａｙ，Ｐ．Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｄｏｓｅ－ｅｆｆｅｃｔ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ：ｔｈｅ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｄｒｕｇｓ ｏｒ ｅｎｚｙｍｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ．Ａｄｖ．Ｅｎｚｙｍｅ Ｒｅｇｕｌ．２２，２７－５５（１９８４）を参照のこと。

医薬組成物
本開示はまた、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩の治療有効量を、薬学的に許容可能な担体と混合して含む医薬組成物も提供する。いくつかの実施形態では、この組成物は、医薬化合物の受容された慣行に従って、一つ以上の追加的な治療剤、薬学的に許容可能な賦形剤、希釈剤、アジュバント、安定剤、乳化剤、保存剤、着色剤、緩衝剤、香味付与剤をさらに含有する。

式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の医薬組成物は、適正診療規範に準拠した様式で製剤化され、投薬され、および投与される。このような状況において考慮される因子としては、治療される特定の障害、治療される特定の患者、患者の臨床状態、障害の原因、剤の送達場所、投与方法、投与計画、および医療従事者に公知の他の因子が挙げられる。

医薬組成物は、投与単位製剤で吸入または噴霧または直腸的に、経口投与、局所投与、非経口投与されてもよい。本明細書において使用される場合、非経口という用語は、皮下注射、静脈内注射、筋肉内注射、もしくは胸骨内注射、または点滴技術を含む。

本発明に従う適切な経口組成物としては限定されないが、錠剤、トローチ、薬用キャンディ、水性もしくは油性の懸濁剤、分散性の粉剤もしくは顆粒剤、乳剤、硬質もしくは軟質のカプセル剤、シロップまたはエリキシルが挙げられる。

医薬組成物は、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩と、薬学的に許容可能な担体を含む、単回単位の投与量に好適であってもよい。

経口用途に適した医薬組成物は、医薬組成物の製造に関する分野に公知の任意の方法に従って調製されてもよい。例えば、液体製剤は、薬学的に好適な、および／または口当たりの良い調製物を提供するために、甘味剤、香味剤、着色剤および保存剤からなる群から選択される一つ以上の剤を含有してもよい。

錠剤の組成物について、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、錠剤の製造に使用される非毒性の薬学的に許容可能な賦形剤と混合されて製剤化されてもよい。そのような賦形剤の例としては、例えば炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウムまたはリン酸ナトリウム等の不活性希釈剤；例えばコーンスターチまたはアルギン酸等の造粒剤および崩壊剤；例えばデンプン、ゼラチンまたはアカシア等の結合剤；および例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸または滑石などの潤滑剤が挙げられるが、これらに限定されない。錠剤は被覆されていなくてもよく、または公知のコーティング技術で被覆されて消化管内での分解および吸収を遅延させて、それによって望ましい時間間隔にわたって持続的な治療作用をもたらしてもよい。例えば、モノステアリン酸グリセリンまたはジステアリン酸グリセリルなどの時間遅延材料が用いられ得る。

また、経口用途のための製剤は硬質ゼラチンカプセルであってもよく、この場合において有効成分は、例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウムもしくはカオリン等の不活性固形希釈剤と混合され、または軟質ゼラチンカプセルであってもよく、この場合において有効成分は、水性媒体、または例えばピーナッツ油、液体パラフィンもしくはオリーブ油等の油性媒体と混合される。

水性懸濁液については、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を賦形剤と混合して、安定的な懸濁液を維持してもよい。そのような賦形剤の例としては、カルボキシルメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントゴムおよびアカシアゴムが挙げられるが、これらに限定されない。

経口懸濁剤はまた、例えばレクチンである天然に存在するホスファチド等の分散剤もしくは浸潤剤、または例えばステアリン酸ポリオキシエチレンである脂肪酸を伴う酸化アルキレンの縮合物、または例えばヘプタデカエチレンオキシセタノールである長鎖脂肪族アルコールを伴う酸化エチレンの縮合物、または例えばモノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビトール等である脂肪酸とヘキシトールとに由来する部分エステルを伴う酸化エチレンの縮合物、または、例えばモノオレイン酸ポリエチレンソルビタンである脂肪酸とヘキシトール無水物とに由来する部分エステルを伴う酸化エチレンの縮合物を含有することもできる。水性懸濁剤はまた、例えば、エチルまたはｐ－ヒドロキシ安息香酸ｎ－プロピルである一つ以上の保存剤、一つ以上の着色剤、一つ以上の香味剤、および例えばショ糖またはサッカリンなどの一つ以上の甘味剤を含有し得る。

油性懸濁剤は、本開示の化合物を、例えばラッカセイ油、オリーブ油、ゴマ油、もしくはココナッツ油などの植物油中で、または例えば液体パラフィン等の鉱油中で懸濁することにより製剤化されてもよい。油性懸濁剤は、例えば蜜ろう、硬質パラフィンまたはセチルアルコールなどの増粘剤を含んでもよい。

上述のようなものである甘味剤、および香味剤は、味のよい経口調製物を提供するために追加してもよい。これら組成物は、アスコルビン酸等の抗酸化剤の添加によって保存され得る。

水の添加による水性懸濁剤の調製に適した分散性の粉剤および顆粒剤は、分散剤または湿潤剤、懸濁剤および一つ以上の保存剤と混合された本開示化合物を提供する。好適な分散剤または湿潤剤および懸濁剤は、既に上述したものによって例示されている。例えば、甘味剤、香味剤、着色剤である追加的な賦形剤もまた存在してもよい。

本開示の医薬組成物はまた、水中油型乳剤の形態であってもよい。油相は、例えばオリーブ油もしくはラッカセイ油である植物油、または例えば液体パラフィンもしくはこれらの混合物である鉱油類であり得る。好適な乳化剤は、例えばアカシアゴムまたはトラガカントゴムなどの天然のゴム、例えばダイズ、レシチンなどの天然のホスファチド、および脂肪酸とヘキシトールから誘導されるエステルまたは部分エステル、例えばモノオレイン酸ソルビタンなどの無水物、および例えばモノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタンなどの酸化エチレンを伴う当該部分エステルの縮合反応産物であってもよい。乳化剤はまた、甘味剤および香味剤を含有し得る。

シロップおよびエリキシルは、例えばグリセリン、プロピレングリコール、ソルビトールまたはスクロースなどの甘味剤と共に製剤化されてもよい。そうした製剤はさらに、粘滑剤、防腐剤、または香味剤および着色剤を含有してもよい。医薬組成物は、滅菌注射可能な形態である、水性懸濁液または油性懸濁液であってもよい。当該懸濁液は、上記に記載された、好適な分散剤または湿潤剤、および懸濁剤を使用し、当分野の技術に従い製剤化されてもよい。滅菌注射可能な調製物はさらに、非毒性で、非経口的に許容可能な希釈剤または溶媒中で、例えば１，３－ブタンジオール溶液として、滅菌注射溶液または滅菌注射懸濁液であってもよい。採用され得る許容可能なビヒクルおよび溶媒には、水、リンゲル溶液、および等張性塩化ナトリウム溶液がある。さらに滅菌された固定油を、溶媒または懸濁用媒体として採用してもよい。この目的に対し、合成のモノグリセリドまたはジグリセリドを含む任意の無菌性固定油を採用してもよい。さらに、例えばオレイン酸などの脂肪酸が、注射剤の調製の用途で使用されてもよい。

式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩はさらに、薬剤の直腸投与用の坐剤の形態で投与されてもよい。これらの組成物は、常温では固体であるが直腸温度では液体であり、したがって直腸内で融解して薬剤を放出する好適な非刺激性の賦形剤と薬剤とを混合することによって調製することができる。こうした材料は、カカオバターおよびポリエチレングリコールである。

非経口投与用組成物は、滅菌媒体中で投与される。使用されるビヒクルと製剤中の薬物の濃度の濃縮に応じて、非経口製剤は、溶解した薬物を含有する、懸濁剤または液剤のいずれかとすることができる。例えば局所麻酔薬、防腐剤および緩衝剤などのアジュバントもまた、非経口組成物に追加することができる。
使用方法

本明細書において上述されるように、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、ＭＴＡＰ欠損性である、例えばＮＳＣＬＣなどの肺がん、または例えばＰＤＡＣなどの膵がん、または食道がんの治療に有用である。一つの実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、例えばＮＳＣＬＣ等のＭＴＡＰ欠損性肺がん、または例えばＰＤＡＣなどのＭＴＡＰ欠損性膵がん、またはＭＴＡＰ欠損性食道がんの治療において、少なくとも一つの抗有糸分裂剤と併用して使用されたときに、治療上の利益を提供する。関連する抗有糸分裂剤としては、微小管安定化剤、および紡錘体集合チェックポイントを破壊する剤が挙げられる。抗有糸分裂剤の一例は、タキサンである。抗有糸分裂剤の他の例は、オーロラキナーゼ阻害剤であり、オーロラキナーゼＡまたはオーロラキナーゼＢの阻害剤が挙げられる。

本開示はさらに、中皮腫の治療における、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩の使用を提供する。一部の実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、ＭＴＡＰ欠損性中皮腫の治療において使用されたとき、抗代謝剤と併用されて使用されたときに、治療上の利益を提供する。関連する抗代謝剤としては、ペメトレキセドまたはその薬学的に許容可能な塩が挙げられる。他の実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩とペメトレキセドは、プラチナ系化学療法剤とさらに併用されて使用される。一部の実施形態では、プラチナ系化学療法剤は、カルボプラチン、オキサリプラチン、ネダプラチン、四硝酸トリプラチン、フェナントリプラチン、ピコプラチン、またはサトラプラチンである。他の実施形態では、プラチナ系化学療法剤は、カルボプラチンまたはシスプラチンである。

臨床現場において、例えばドセタキセルやパクリタキセルなどのタキサンはしばしば、他の化学療法剤と併せて使用される。例えば、ナノ粒子－アルブミン結合型パクリタキセル（ｎａｂ－パクリタキセルまたはＡｂｒａｘａｎｅ（登録商標）として知られる）は、ヌクレオシドアナログＤＮＡ合成阻害剤のゲムシタビン（Ｇｅｍｚａｒ（登録商標））と併用されて、膵管腺がん（ＰＤＡＣ）において広く使用されている。したがって、さらなる態様では、ＤＮＡ合成阻害剤およびタキサンと併用された式（Ｉ）の化合物の使用が、例えばＰＤＡＣ等のＭＴＡＰ欠損性膵がんの治療において治療上の利益を提供する。ＤＮＡ合成阻害剤の一例は、ゲムシタビンである。タキサンの一例は、ナノ粒子－アルブミン結合型パクリタキセルを含むパクリタキセルである。タキサンのもう一つの例は、ドセタキセルである。

一つの実施形態では、方法または使用は、その必要のある患者における、例えば非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）等のＭＴＡＰ欠損性肺がんの治療を含み、（ａ）以下の式（Ｉ）の化合物

またはその薬学的に許容可能な塩の治療有効量、および（ｂ）タキサンの治療有効量、を投与することを含む。

一つの態様では、タキサンは、ドセタキセル、パクリタキセル、もしくはｎａｂ－パクリタキセル、またはそれらの代替的な製剤である。一つの態様では、タキサンは、ドセタキセルである。一つの態様では、方法または使用はさらに、一つ以上の追加の治療剤を含む。一つの態様では、追加の治療剤は、プラチナ系化学療法剤である。一つの態様では、プラチナ系化学療法剤は、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、ネダプラチン、四硝酸トリプラチン、フェナントリプラチン、ピコプラチン、またはサトラプラチンである。一つの態様では、プラチナ系化学療法剤は、カルボプラチンまたはシスプラチンである。一つの態様では、使用方法はさらに、治療有効量のＤＮＡ合成阻害剤を含む。一つの態様では、ＤＮＡ合成阻害剤は、ゲムシタビンである。一つの態様では、肺がんは、ＭＴＡＰが欠失している、またはＭＴＡＰヌルである。一つの態様では、患者は、一つ以上の従前の治療選択の後に、反応せず、反応を停止し、または疾患の進行を経験した。一つの態様では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の投与は、ＭＴＡＰ欠損性肺がんの治療に対する第二の治療選択である。一つの態様では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の投与は、ＭＴＡＰ欠損性肺がんの治療に対する第三の治療選択である。一つの態様では、患者は、新たに診断される。一つの態様では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の投与量は、約２０ｍｇ～約８００ｍｇである。一つの態様では、投与量は、約２０ｍｇ、２５ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇ、５００ｍｇ、５５０ｍｇ、６００ｍｇ、６５０ｍｇ、７００ｍｇ、７５０ｍｇ、または８００ｍｇである。一つの態様では、投与量は、１日１回または２回の投与から選択される。一つの態様では、投与は、経口である。別の態様では、投与量は、式（Ｉ）の化合物の遊離形態当量に対応する量として測定される。

一つの実施形態では、方法または使用は、その必要のある患者における、ＭＴＡＰ欠損性膵がんの治療を含み、（ａ）以下の式（Ｉ）の化合物

またはその薬学的に許容可能な塩の治療有効量、および（ｂ）タキサンの治療有効量、を投与することを含む。

一つの態様では、タキサンは、パクリタキセル、ｎａｂ－パクリタキセル、もしくはドセタキセル、またはそれらの代替的な製剤である。一つの態様では、タキサンは、ｎａｂ－パクリタキセルである。一つの態様では、タキサンは、ドセタキセルである。一つの態様では、使用方法はさらに、治療有効量のＤＮＡ合成阻害剤を含む。一つの態様では、ＤＮＡ合成阻害剤は、ゲムシタビンである。一つの態様では、膵がんは、ＭＴＡＰが欠失している、またはＭＴＡＰヌルである。一つの態様では、患者は、一つ以上の従前の治療選択の後に、反応せず、反応を停止し、または疾患の進行を経験した。一つの態様では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の投与は、ＭＴＡＰ欠損性膵がんの治療に対する第二の治療選択である。一つの態様では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の投与は、ＭＴＡＰ欠損性膵がんの治療に対する第三の治療選択である。一つの態様では、患者は、新たに診断される。一つの態様では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の投与量は、約２０ｍｇ～約８００ｍｇである。一つの態様では、投与量は、約２０ｍｇ、２５ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇ、５００ｍｇ、５５０ｍｇ、６００ｍｇ、６５０ｍｇ、７００ｍｇ、７５０ｍｇ、または８００ｍｇである。別の態様では、投与量は、式（Ｉ）の化合物の遊離形態当量に対応する量として測定される。一つの態様では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の投与量は、１日１回の投与または１日２回の投与から選択される。一つの態様では、投与は、経口である。一つの態様では、ＭＴＡＰ欠損性膵がんは、膵管腺がん（ＰＤＡＣ）である。一つの態様では、ＭＴＡＰ欠損性膵がんは、切除されていない、局所的に進行している、または転移性である。

一つの実施形態では、方法または使用は、ＭＴＡＰ欠損性肺がんまたはＭＴＡＰ欠損性膵がんと診断された患者を治療することを含み、（ａ）以下の式（Ｉ）の化合物：

またはその薬学的に許容可能な塩の治療有効量、および（ｂ）少なくとも一つの抗有糸分裂剤、を投与することを含む。

一つの態様では、抗有糸分裂剤は、タキサンである。一つの態様では、タキサンは、ドセタキセル、パクリタキセル、もしくはｎａｂ－パクリタキセル、またはそれらの代替的な製剤である。一つの態様では、抗有糸分裂剤は、オーロラキナーゼ阻害剤である。一つの態様では、オーロラキナーゼ阻害剤は、ＡｕｒｏｒａキナーゼＡまたはＡｕｒｏｒａキナーゼＢに対して選択的である。一つの態様では、抗有糸分裂標的剤は、ＡＢＴ－３４８またはＡＺＤ１１５２である。一つの態様では、ＭＴＡＰ欠損性膵がんは、膵管腺がん（ＰＤＡＣ）である。一つの態様では、ＭＴＡＰ欠損性膵がんは、切除されていない、局所的に進行している、または転移性である。一つの態様では、ＭＴＡＰ欠損性肺がんは、非小細胞肺がんである。一つの態様では、ＭＴＡＰ欠損性肺がんは、扁平上皮細胞がんまたは腺がんである。

一つの実施形態では、方法または使用は、ＭＴＡＰ欠損性肺がんまたはＭＴＡＰ欠損性膵がんと診断された患者を治療することを含み、（ａ）以下の式（Ｉ）の化合物：

またはその薬学的に許容可能な塩の治療有効量、および（ｂ）少なくとも一つのＤＮＡ合成阻害剤、を投与することを含む。

一つの態様では、ＤＮＡ合成阻害剤は、ゲムシタビンである。一つの態様では、方法または使用はさらに、少なくとも一つのタキサンを含む。一つの態様では、タキサンは、ドセタキセル、パクリタキセル、もしくはｎａｂ－パクリタキセル、またはそれらの代替的な製剤である。一つの態様では、ＭＴＡＰ欠損性膵がんは、膵管腺がん（ＰＤＡＣ）である。一つの態様では、ＭＴＡＰ欠損性膵がんは、切除されていない、局所的に進行している、または転移性である。一つの態様では、ＭＴＡＰ欠損性肺がんは、非小細胞肺がんである。一つの態様では、ＭＴＡＰ欠損性肺がんは、扁平上皮細胞がんまたは腺がんである。

一つの実施形態では、方法または使用は、ＭＴＡＰ欠損性食道がんと診断された患者を治療することを含み、（ａ）以下の式（Ｉ）の化合物：

またはその薬学的に許容可能な塩の治療有効量、および（ｂ）少なくとも一つの抗有糸分裂剤、を投与することを含む。

一つの態様では、抗有糸分裂剤は、タキサンである。一つの態様では、タキサンは、ドセタキセル、パクリタキセル、もしくはｎａｂ－パクリタキセル、またはそれらの代替的な製剤である。別の態様では、タキサンは、ドセタキセルまたはパクリタキセルである。別の態様では、方法または使用はさらに、一つ以上の追加の治療剤の投与を含む。一つの態様では、患者は、一つ以上の従前の治療選択の後に、反応せず、反応を停止し、または疾患の進行を経験した。一つの態様では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の投与は、ＭＴＡＰ欠損性食道がんの治療に対する第二の治療選択である。一つの態様では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の投与は、ＭＴＡＰ欠損性食道がんの治療に対する第三の治療選択である。一つの態様では、患者は、新たに診断される。一つの態様では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の投与量は、約２０ｍｇ～約８００ｍｇである。一つの態様では、投与量は、約２０ｍｇ、２５ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇ、５００ｍｇ、５５０ｍｇ、６００ｍｇ、６５０ｍｇ、７００ｍｇ、７５０ｍｇ、または８００ｍｇである。一つの態様では、投与量は、１日１回または２回の投与から選択される。一つの態様では、投与は、経口である。別の態様では、投与量は、式（Ｉ）の化合物の遊離形態当量に対応する量として測定される。

さらなる実施形態では、方法または使用は、ＭＴＡＰ欠損性中皮腫と診断された患者を治療することを含み、（ａ）以下の式（Ｉ）の化合物：

またはその薬学的に許容可能な塩の治療有効量、および（ｂ）ペメトレキセド二ナトリウム、を投与することを含む。一つの態様では、方法または使用はさらに、一つ以上の追加の治療剤を投与することを含む。別の態様では、追加の治療剤は、プラチナ系化学療法剤である。さらなる態様では、プラチナ系化学療法剤は、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、ネダプラチン、四硝酸トリプラチン、フェナントリプラチン、ピコプラチン、またはサトラプラチンである。他の態様では、プラチナ系化学療法剤は、カルボプラチンまたはシスプラチンである。一つの態様では、患者は、一つ以上の従前の治療選択の後に、反応せず、反応を停止し、または疾患の進行を経験した。一つの態様では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の投与は、ＭＴＡＰ欠損性中皮腫の治療に対する第二の治療選択である。一つの態様では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の投与は、ＭＴＡＰ欠損性中皮腫の治療に対する第三の治療選択である。一つの態様では、患者は、新たに診断される。一つの態様では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の投与量は、約２０ｍｇ～約８００ｍｇである。一つの態様では、投与量は、約２０ｍｇ、２５ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇ、５００ｍｇ、５５０ｍｇ、６００ｍｇ、６５０ｍｇ、７００ｍｇ、７５０ｍｇ、または８００ｍｇである。一つの態様では、投与量は、１日１回または２回の投与から選択される。一つの態様では、投与は、経口である。別の態様では、投与量は、式（Ｉ）の化合物の遊離形態当量に対応する量として測定される。

実施形態および態様の各々に対し、さらなる態様は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、および一つ以上の追加の治療剤は、同時に投与されることを含む。実施形態および態様の各々に対し、さらなる態様は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、および一つ以上の追加の治療剤は、連続して投与されることを含む。実施形態および態様の各々に対し、使用方法はさらに、放射線療法を含んでもよい。

一つ以上の態様および実施形態は、具体的に記載されていないが、様々な実施形態に組み込まれ得る。すなわち、本明細書に記載されるすべての態様および実施形態は、任意の方法または組み合わせで組み合わせられ得る。

態様Ｉ
態様１：その必要のある患者において、ＭＴＡＰ欠損性非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）を治療する方法であって、
（ａ）以下の式（Ｉ）の化合物：

またはその薬学的に許容可能な塩の治療有効量、および
（ｂ）タキサンの治療有効量、を投与することを含む、方法。

態様２：当該タキサンが、ドセタキセル、パクリタキセル、もしくはｎａｂ－パクリタキセル、またはそれらの代替的な製剤である、態様１に記載の方法。

態様３：当該タキサンが、ドセタキセルである、態様２に記載の方法。

態様４：一つ以上の追加の治療剤をさらに含む、態様１～３のいずれか一つに記載の方法。

態様５：当該追加の治療剤が、プラチナ系化学療法剤である、態様４に記載の方法。

態様６：当該プラチナ系化学療法剤が、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、ネダプラチン、四硝酸トリプラチン、フェナントリプラチン、ピコプラチン、またはサトラプラチンである、態様５に記載の方法。

態様７：当該プラチナ系化学療法剤が、カルボプラチンまたはシスプラチンである、態様６に記載の方法。

態様８：当該ＮＳＣＬＣが、ＭＴＡＰが欠失している、またはＭＴＡＰヌルである、態様１～７のいずれか一つに記載の方法。

態様９：当該患者が、一つ以上の従前の治療選択の後に、反応せず、反応を停止し、または疾患の進行を経験した、態様１～８のいずれか一つに記載の方法。

態様１０：当該投与は、第二の治療選択である、態様９に記載の方法。

態様１１：当該投与は、第三の治療選択である、態様９に記載の方法。

態様１２：当該患者は、新たに診断される、態様１～１１のいずれか一つに記載の方法。

態様１３：式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の１日投与量は、約２０ｍｇ～約８００ｍｇである、態様１～１２のいずれか一つに記載の方法。

態様１４：当該１日投与量が、１日１回または１日２回の投与から選択される、態様１～１３のいずれか一つに記載の方法。

態様１５：当該投与が、経口である、態様１～１４のいずれか一つに記載の方法。

態様１６：その必要のある患者において、ＭＴＡＰ欠損性膵がんを治療する方法であって、
（ａ）以下の式（Ｉ）の化合物：

またはその薬学的に許容可能な塩の治療有効量、および
（ｂ）タキサンの治療有効量、を投与することを含む、方法。

態様１７：当該タキサンが、パクリタキセル、ｎａｂ－パクリタキセル、もしくはドセタキセル、またはそれらの代替的な製剤である、態様１６に記載の方法。

態様１８：当該タキサンが、ｎａｂ－パクリタキセルである、態様１７に記載の方法。

態様１９：治療有効量のＤＮＡ合成阻害剤をさらに含む、態様１６～１８のいずれか一つに記載の方法。

態様２０：当該ＤＮＡ合成阻害剤が、ゲムシタビンである、態様１９に記載の方法。

態様２１：当該膵がんが、ＭＴＡＰが欠失している、またはＭＴＡＰヌルである、態様１６～２０のいずれか一つに記載の方法。

態様２２：当該患者が、一つ以上の従前の治療選択の後に、反応せず、反応を停止し、または疾患の進行を経験した、態様１６～２１のいずれか一つに記載の方法。

態様２３：当該投与は、第二の治療選択である、態様２２に記載の方法。

態様２４：当該投与は、第三の治療選択である、態様２３に記載の方法。

態様２５：当該患者は、新たに診断される、態様１６～２４のいずれか一つに記載の方法。

態様２６：式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の１日投与量は、約２０ｍｇ～約８００ｍｇである、態様１６～２５のいずれか一つに記載の方法。

態様２７：当該１日投与量が、１日１回または１日２回の投与から選択される、態様１６～２６のいずれか一つに記載の方法。

態様２８：当該投与が、経口である、態様１６～２７のいずれか一つに記載の方法。

態様２９：当該膵がんが、膵管腺がん（ＰＤＡＣ）である、態様１６～２８のいずれか一つに記載の方法。

態様３０：当該膵がんが、切除されていない、局所的に進行している、または転移性である、態様１６～２９のいずれか一つに記載の方法。

態様３１：ＭＴＡＰ欠損性肺がんまたはＭＴＡＰ欠損性膵がんと診断された患者を治療する方法であって、
（ａ）以下の式（Ｉ）の化合物：

またはその薬学的に許容可能な塩の治療有効量、および
（ｂ）少なくとも一つの抗有糸分裂剤、を投与することを含む、方法。

態様３２：当該抗有糸分裂剤が、オーロラキナーゼ阻害剤、または両方である、態様３１に記載の方法。

態様３３：当該オーロラキナーゼ阻害剤が、オーロラキナーゼＡまたはオーロラキナーゼＢに対して選択的である、態様３２に記載の方法。

態様３４：当該抗有糸分裂標的剤は、ＡＢＴ－３４８またはＡＺＤ１１５２である、態様３２または３３に記載の方法。

態様３５：当該膵がんが、膵管腺がん（ＰＤＡＣ）である、態様３１～３４のいずれか一つに記載の方法。

態様３６：当該膵がんが、切除されていない、局所的に進行している、または転移性である、態様３１～３５のいずれか一つに記載の方法。

態様３７：当該肺がんが、非小細胞肺がんである、態様３１に記載の方法。

態様３８：当該肺がんが、扁平上皮細胞がんまたは腺がんである、態様３７に記載の方法。

態様３９：ＭＴＡＰ欠損性肺がんまたはＭＴＡＰ欠損性膵がんと診断された患者を治療する方法であって、
（ａ）以下の式（Ｉ）の化合物：

またはその薬学的に許容可能な塩の治療有効量、および
（ｂ）少なくとも一つのＤＮＡ合成阻害剤、を投与することを含む、方法。

態様４０：当該ＤＮＡ合成阻害剤が、ゲムシタビンである、態様３９に記載の方法。

態様４１：少なくとも一つのタキサンをさらに含む、態様３９または４０に記載の方法。

態様４２：当該タキサンが、ドセタキセル、パクリタキセル、もしくはｎａｂ－パクリタキセル、またはそれらの代替的な製剤である、態様４１に記載の方法。

態様４３：当該膵がんが、膵管腺がん（ＰＤＡＣ）である、態様３９～４２のいずれか一つに記載の方法。

態様４４：当該膵がんが、切除されていない、局所的に進行している、または転移性である、態様３９～４３のいずれか一つに記載の方法。

態様４５：当該肺がんが、非小細胞肺がんである、態様３９に記載の方法。

態様４６：当該肺がんが、扁平上皮細胞がんまたは腺がんである、態様４５に記載の方法。

態様４７：当該式（Ｉ）の化合物、および当該一つ以上の追加の治療剤が、同時に投与される、態様１～４６のいずれか一つに記載の方法。

態様４８：当該式（Ｉ）の化合物、および当該一つ以上の追加の治療剤が、連続して投与される、態様１～４６のいずれか一つに記載の方法。

態様４９：放射線療法をさらに含む、態様１～４８のいずれか一つに記載の方法。

態様５０：その必要のある患者において、ＭＴＡＰ欠損性食道がんを治療する方法であって、
（ａ）以下の式（Ｉ）の化合物：

またはその薬学的に許容可能な塩の治療有効量、および
（ｂ）タキサンの治療有効量、を投与することを含む、方法。

態様５１：当該タキサンが、パクリタキセル、ｎａｂ－パクリタキセル、もしくはドセタキセル、またはそれらの代替的な製剤である、態様５０に記載の方法。

態様５２：当該タキサンが、ドセタキセルである、態様５１に記載の方法。

態様５３：当該食道がんが、ＭＴＡＰが欠失している、またはＭＴＡＰヌルである、態様５０に記載の方法。

態様５４：当該患者が、一つ以上の従前の治療選択の後に、反応せず、反応を停止し、または疾患の進行を経験した、態様５０に記載の方法。

態様５５：当該投与は、第二の治療選択である、態様５４に記載の方法。

態様５６：当該投与は、第三の治療選択である、態様５４に記載の方法。

態様５７：当該患者は、新たに診断される、態様５０に記載の方法。

態様５８：当該１日投与量が、１日１回または１日２回の投与から選択される、態様５０に記載の方法。

態様５９：当該投与が、経口である、態様５０に記載の方法。

態様ＩＩ
態様１．その必要のある患者において、ＭＴＡＰ欠損性非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）を治療する方法であって、
（ａ）以下の式（Ｉ）の化合物：

またはその薬学的に許容可能な塩の治療有効量、および
（ｂ）タキサンの治療有効量、を投与することを含む、方法。

態様２．治療有効量のタキサンと併用される、ＭＴＡＰ欠損性非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）の治療における使用のための以下の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩：

。

態様３．当該タキサンが、ドセタキセル、パクリタキセル、またはｎａｂ－パクリタキセルである、態様１に記載の方法または態様２に記載の化合物。

態様４．当該タキサンが、ドセタキセルである、態様２に記載の方法または化合物。

態様５．一つ以上の追加の治療剤を投与することをさらに含む、態様１、３または４に記載の方法。

態様６．当該組み合わせが、一つ以上の追加の治療剤をさらに含む、態様２～４のいずれか一つに記載の化合物。

態様７．当該追加の治療剤が、プラチナ系化学療法剤である、態様５に記載の方法または態様６に記載の化合物。

態様８．当該プラチナ系化学療法剤が、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、ネダプラチン、四硝酸トリプラチン、フェナントリプラチン、ピコプラチン、またはサトラプラチンである、態様７に記載の方法または化合物。

態様９．当該プラチナ系化学療法剤が、カルボプラチンまたはシスプラチンである、態様７もしくは８に記載の方法または化合物。

態様１０．当該患者が、ＭＴＡＰ欠損性ＮＳＣＬＣを治療するための一つ以上の従前の治療選択の後に、反応せず、反応を停止し、または疾患の進行を経験した、態様１、３～５または７～９のいずれか一つに記載の方法。

態様１１．当該式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩が、ＭＴＡＰ欠損性ＮＳＣＬＣを治療するための第二の治療選択である、態様１０に記載の方法または化合物。

態様１２．当該式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩が、ＭＴＡＰ欠損性ＮＳＣＬＣを治療するための第三の治療選択である、態様１０に記載の方法または化合物。

態様１３．当該ＭＴＡＰ欠損性ＮＳＣＬＣが、新たに診断される、態様１～１２のいずれか一つに記載の方法または化合物。

態様１４．式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の投与量は、約２０ｍｇ～約８００ｍｇである、態様１～１３のいずれか一つに記載の方法または化合物。

態様１５．式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の投与量は、１日１回または１日２回の投与である、態様１～１４のいずれか一つに記載の方法または化合物。

態様１６．式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩が、経口投与される、または経口投与用に製剤化される、態様１～１５のいずれか一つに記載の方法または化合物。

態様１７．その必要のある患者において、ＭＴＡＰ欠損性膵がんを治療する方法であって、
（ａ）以下の式（Ｉ）の化合物：

またはその薬学的に許容可能な塩の治療有効量、および
（ｂ）タキサンの治療有効量、を投与することを含む、方法。

態様１８．治療有効量のタキサンと併用される、ＭＴＡＰ欠損性膵がんの治療における使用のための以下の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩：

。

態様１９．当該タキサンが、パクリタキセル、ｎａｂ－パクリタキセル、またはドセタキセルである、態様１７に記載の方法または態様１８に記載の化合物。

態様２０．当該タキサンが、ｎａｂ－パクリタキセルである、態様１９に記載の方法または化合物。

態様２１．治療有効量のＤＮＡ合成阻害剤を投与することをさらに含む、態様１７、１９または２０のいずれか一つに記載の方法。

態様２２．当該組み合わせが、治療有効量のＤＮＡ合成阻害剤をさらに含む、態様１８～２０のいずれか一つに記載の化合物。

態様２３．当該ＤＮＡ合成阻害剤が、ゲムシタビンである、態様２１もしくは２２に記載の方法または化合物。

態様２４．当該患者が、ＭＴＡＰ欠損性膵がんを治療するための一つ以上の従前の治療選択の後に、反応せず、反応を停止し、または疾患の進行を経験した、態様１７、１９～２１または２３のいずれか一つに記載の方法。

態様２５．当該式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩が、ＭＴＡＰ欠損性膵がんを治療するための第二の治療選択である、態様２４に記載の方法または化合物。

態様２６．当該式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩が、ＭＴＡＰ欠損性膵がんを治療するための第三の治療選択である、態様２５に記載の方法または化合物。

態様２７．当該ＭＴＡＰ欠損性膵がんが、新たに診断される、態様１７～２６のいずれか一つに記載の方法または化合物。

態様２８．式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の投与量は、約２０ｍｇ～約８００ｍｇである、態様１７～２７のいずれか一つに記載の方法または化合物。

態様２９．式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の投与量は、１日１回または１日２回の投与から選択される、態様１７～２８のいずれか一つに記載の方法または化合物。

態様３０．式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の投与が、経口であるか、または当該化合物が、経口投与用に製剤化される、態様１７～２９のいずれか一つに記載の方法または化合物。

態様３１．当該膵がんが、膵管腺がん（ＰＤＡＣ）である、態様１７～２７のいずれか一つに記載の方法または化合物。

態様３２．当該膵がんが、切除されていない、局所的に進行している、または転移性である、態様１７～３１のいずれか一つに記載の方法または化合物。

態様３３．式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、およびタキサンが、同時に投与される、態様１、３～５、７～１７、１９～２１、または２３～３２のいずれか一つに記載の方法。

態様３４．式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、およびタキサンが、連続して投与される、態様１、３～５、７～１７、１９～２１、または２３～３２のいずれか一つに記載の方法。

態様３５．ＭＴＡＰ欠損性肺がん、ＭＴＡＰ欠損性膵がん、またはＭＴＡＰ欠損性食道がんである癌と診断された患者を治療する方法であって、
（ａ）以下の式（Ｉ）の化合物：

またはその薬学的に許容可能な塩の治療有効量、および
（ｂ）少なくとも一つの抗有糸分裂剤、を投与することを含む、方法。

態様３６．ＭＴＡＰ欠損性肺がん、ＭＴＡＰ欠損性膵がん、またはＭＴＡＰ欠損性食道がんである癌の治療における、少なくとも一つの抗有糸分裂剤と併用される使用のための、以下の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩：

。

態様３７．当該抗有糸分裂剤が、オーロラキナーゼ阻害剤である、態様３５に記載の方法または態様３６に記載の化合物。

態様３８．当該オーロラキナーゼ阻害剤が、オーロラキナーゼＡまたはオーロラキナーゼＢに対して選択的である、態様３７に記載の方法または化合物。

態様３９．当該抗有糸分裂標的剤は、ＡＢＴ－３４８またはＡＺＤ１１５２である、態様３７もしくは３８に記載の方法または化合物。

態様４０．当該がんが、ＭＴＡＰ欠損性膵がんである、態様３５～３９のいずれか一つに記載の方法または化合物。

態様４１．当該ＭＴＡＰ欠損性膵がんが、膵管腺がん（ＰＤＡＣ）である、態様４０に記載の方法または化合物。

態様４２．当該膵がんが、切除されていない、局所的に進行している、または転移性である、態様４０もしくは４１に記載の方法または化合物。

態様４３．当該がんが、ＭＴＡＰ欠損性肺がんである、態様３５～３９のいずれか一つに記載の方法または化合物。

態様４４．当該ＭＴＡＰ欠損性肺がんが、非小細胞肺がんである、態様４３に記載の方法または化合物。

態様４５．当該ＭＴＡＰ欠損性肺がんが、扁平上皮細胞がんまたは腺がんである、態様４３もしくは４４に記載の方法または化合物。

態様４６．当該がんが、ＭＴＡＰ欠損性食道がんである、態様３５～３９のいずれか一つに記載の方法または化合物。

態様４７．ＭＴＡＰ欠損性肺がん、ＭＴＡＰ欠損性膵がん、またはＭＴＡＰ欠損性食道がんである癌と診断された患者を治療する方法であって、
（ａ）以下の式（Ｉ）の化合物：

またはその薬学的に許容可能な塩の治療有効量、および
（ｂ）少なくとも一つのＤＮＡ合成阻害剤、を投与することを含む、方法。

態様４８．ＭＴＡＰ欠損性肺がん、ＭＴＡＰ欠損性膵がん、またはＭＴＡＰ欠損性食道がんである癌の治療における、少なくとも一つのＤＮＡ合成阻害剤と併用される使用のための、以下の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩：

。

態様４９．当該ＤＮＡ合成阻害剤が、ゲムシタビンである、態様４７に記載の方法または態様４８に記載の化合物。

態様５０．少なくとも一つのタキサンを投与することをさらに含む、態様４７または４９に記載の方法。

態様５１．当該組み合わせが、少なくとも一つのタキサンをさらに含む、態様４８に記載の化合物。

態様５２．当該タキサンが、ドセタキセル、パクリタキセル、またはｎａｂ－パクリタキセルである、態様５０もしくは５１に記載の方法または化合物。

態様５３．当該がんが、ＭＴＡＰ欠損性膵がんである、態様４７～５２のいずれか一つに記載の方法または化合物。

態様５４．当該ＭＴＡＰ欠損性膵がんが、膵管腺がん（ＰＤＡＣ）である、態様５３に記載の方法または化合物。

態様５５．当該膵がんが、切除されていない、局所的に進行している、または転移性である、態様５３もしくは５４に記載の方法または化合物。

態様５６．当該がんが、ＭＴＡＰ欠損性肺がんである、態様４７～５２のいずれか一つに記載の方法または化合物。

態様５７．当該ＭＴＡＰ欠損性肺がんが、非小細胞肺がんである、態様５６に記載の方法または化合物。

態様５８．当該ＭＴＡＰ欠損性肺がんが、扁平上皮細胞がんまたは腺がんである、態様５６もしくは５７に記載の方法または化合物。

態様５９．当該がんが、ＭＴＡＰ欠損性食道がんである、態様４７～５２のいずれか一つに記載の方法または化合物。

態様６０．式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、およびＤＮＡ合成阻害剤が、同時に投与される、態様１、３～５、７～１７、１９～２１、２３～３２、３５、３７～５０、および５２のいずれか一つに記載の方法。

態様６１．式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、およびＤＮＡ合成阻害剤が、連続して投与される、態様１、３～５、７～１７、１９～２１、２３～３２、３５、３７～５０、および５２～５９のいずれか一つに記載の方法。

態様６２．放射線療法をさらに含む、態様１～６１のいずれか一つに記載の方法または化合物。

態様６３．その必要のある患者において、ＭＴＡＰ欠損性食道がんを治療する方法であって、
（ａ）以下の式（Ｉ）の化合物：

またはその薬学的に許容可能な塩の治療有効量、および
（ｂ）タキサンの治療有効量、を投与することを含む、方法。

態様６４．治療有効量のタキサンと併用される、ＭＴＡＰ欠損性食道がんの治療における使用のための以下の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩：

。

態様６５．当該タキサンが、パクリタキセル、ｎａｂ－パクリタキセル、またはドセタキセルである、態様６３に記載の方法または態様６４に記載の化合物。

態様６６．当該タキサンが、ドセタキセルである、態様６５に記載の方法または化合物。

態様６７．当該タキサンが、パクリタキセルである、態様６５に記載の方法または化合物。

態様６８．一つ以上の追加の治療剤を投与することをさらに含む、態様６３に記載の方法。

態様６９．当該組み合わせが、一つ以上の追加の治療剤をさらに含む、態様６４に記載の化合物。

態様７０．当該一つ以上の追加の治療剤が、プラチナ系化学療法剤である、態様６８に記載の方法または態様６９に記載の化合物。

態様７１．当該プラチナ系化学療法剤が、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、ネダプラチン、四硝酸トリプラチン、フェナントリプラチン、ピコプラチン、またはサトラプラチンである、態様７０に記載の方法または化合物。

態様７２．当該プラチナ系化学療法剤が、シスプラチン、カルボプラチンまたはオキサリプラチンである、態様７０もしくは７１に記載の方法または化合物。

態様７３．抗代謝剤を投与することをさらに含む、態様７０に記載の方法。

態様７４．当該組み合わせが、抗代謝剤をさらに含む、態様７０に記載の化合物。

態様７５．当該抗代謝剤が、５－フルオロウラシルまたはカペシタビンである、態様７３に記載の方法または態様７４に記載の化合物。

態様７６．当該患者が、ＭＴＡＰ欠損性食道がんを治療するための一つ以上の従前の治療選択の後に、反応せず、反応を停止し、または疾患の進行を経験した、態様６３に記載の方法。

態様７７．当該式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩が、ＭＴＡＰ欠損性食道がんを治療するための第二の治療選択である、態様６３に記載の方法または態様６４に記載の化合物。

態様７８．当該式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩が、ＭＴＡＰ欠損性食道がんを治療するための第三の治療選択である、態様６３に記載の方法または態様６４に記載の化合物。

態様７９．当該ＭＴＡＰ欠損性食道がんは、新たに診断される、態様６３に記載の方法または態様６４に記載の化合物。

態様８０．式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の投与量は、１日１回または１日２回の投与から選択される、態様６３に記載の方法または態様６４に記載の化合物。

態様８１．式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の投与が、経口であるか、または当該化合物が、経口投与用に製剤化される、態様６３に記載の方法または態様６４に記載の化合物。

態様８２．式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、およびタキサンが、同時に投与される、態様６３、６５～６８、または７０～８１のいずれか一つに記載の方法。

態様８３．式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、およびタキサンが、連続して投与される、態様６３、６５～６８、または７０～８１のいずれか一つに記載の方法。

態様８４．ＭＴＡＰ欠損性肺がん、ＭＴＡＰ欠損性膵がん、またはＭＴＡＰ欠損性食道がんである癌と診断された患者を治療する方法であって、
（ａ）以下の式（Ｉ）の化合物：

またはその薬学的に許容可能な塩の治療有効量、および
（ｂ）ペメトレキセド二ナトリウム、を投与することを含む、方法。

態様８５．ＭＴＡＰ欠損性肺がん、ＭＴＡＰ欠損性膵がん、またはＭＴＡＰ欠損性食道がんである癌の治療における、ペメトレキセド二ナトリウムと併用される使用のための、以下の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩：

。

態様８６．当該がんが、ＭＴＡＰ欠損性肺がんである、態様８４に記載の方法または態様８５に記載の化合物。

態様８７．当該ＭＴＡＰ欠損性肺がんが、非扁平上皮細胞非小細胞肺がんである、態様８６に記載の方法または化合物。

態様８８．一つ以上の追加の治療剤を投与することをさらに含む、態様８４、８６または８７のいずれか一つに記載の方法。

態様８９．当該組み合わせが、一つ以上の追加の治療剤をさらに含む、態様８５～８６のいずれか一つに記載の化合物。

態様９０．当該追加の治療剤が、プラチナ系化学療法剤である、態様８８に記載の方法または態様８９に記載の化合物。

態様９１．当該プラチナ系化学療法剤が、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、ネダプラチン、四硝酸トリプラチン、フェナントリプラチン、ピコプラチン、またはサトラプラチンである、態様９０に記載の方法または化合物。

態様９２．当該プラチナ系化学療法剤が、カルボプラチンまたはシスプラチンである、態様９０もしくは９１に記載の方法または化合物。

態様９３．ペンブロリズマブを投与することをさらに含む、態様８８または９０～９２のいずれか一つに記載の方法。

態様９４．ペンブロリズマブをさらに含む、態様８９～９２のいずれか一つに記載の化合物。

態様９５．当該がんが、切除されていない、局所的に進行している、または転移性である、態様８４～９４のいずれか一つに記載の方法または化合物。

態様９６．ＭＴＡＰ欠損性中皮腫と診断された患者を治療する方法であって、
（ａ）以下の式（Ｉ）の化合物：

またはその薬学的に許容可能な塩の治療有効量、および
（ｂ）ペメトレキセド二ナトリウム、を投与することを含む、方法。

態様９７．ペメトレキセド二ナトリウムと併用される、ＭＴＡＰ欠損性中皮腫の治療における使用のための以下の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩：

。

態様９８．一つ以上の追加の治療剤を投与することをさらに含む、態様９６に記載の方法。

態様９９．当該組み合わせが、一つ以上の追加の治療剤をさらに含む、態様９７に記載の化合物。

態様１００．当該追加の治療剤が、プラチナ系化学療法剤である、態様９８に記載の方法または態様９９に記載の化合物。

態様１０１．当該プラチナ系化学療法剤が、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、ネダプラチン、四硝酸トリプラチン、フェナントリプラチン、ピコプラチン、またはサトラプラチンである、態様１００に記載の方法または化合物。

態様１０２．当該プラチナ系化学療法剤が、カルボプラチンまたはシスプラチンである、態様１００もしくは１０１に記載の方法または化合物。

本開示は、以下の実施例を参照することにより、さらに完全に理解されるであろう。しかし本実施例は、本開示の範囲を限定するものと解釈されるべきではない。

上述のように、式（Ｉ）の化合物は、化合物１と呼称される場合もあり、国際出願番号ＰＣＴ／ＵＳ２０１７／０４９４３９に記載されるように合成されてもよい。当該出願は、ＷＯ２０１８／０４５０７１号として公開され、その全体で参照により本明細書に組み込まれる。

実施例１：分子機構
細胞サイクルの同期実験は、ダブルチミジンブロックを使用して実施された。これらの実験は、ＨＣＴ１１６ ＭＴＡＰ－／－（Ｈｏｒｉｚｏｎ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ社）を用いて実施された。この細胞株のＭＴＡＰ－／－の状態は、人工的に操作されたものであり、患者サンプルから誘導されたものではなかった。式（Ｉ）の化合物またはＤＭＳＯ対照を用いて７２時間の前処理を行った後、ダブルチミジンブロック処置を実施して、細胞を初期Ｓ期に同期化させた。

その後にダブルチミジン複製ブロックから放出された時点で、式（Ｉ）の化合物またはＤＭＳＯ対照を用いた処置後の細胞サイクルの進行が、フローサイトメトリーにより監視された。ＨＣＴ１１６ ＭＴＡＰ^－／－細胞での式（Ｉ）の化合物の処置により、Ｓ期からＧ２／Ｍ期への進行が減衰され、４Ｎ含有を伴う細胞の蓄積の減速により実証された。図１は、式（Ｉ）の化合物がＨＣＴ１１６ ＭＴＡＰ－／－細胞において選択的に細胞周期の進行を阻害することを示す。

この細胞周期の進行の減衰はさらに、ダブルチミジンブロックからの放出の際の、重要な有糸分裂調節因子であるオーロラキナーゼＢのタンパク質レベルの低下、ならびに有糸分裂マーカーであるリン酸化ヒストンＨ３（ｐｈＳ１０－Ｈ３）の出現の減衰とも相関していた。図２は、細胞サイクル進行中のオーロラＢおよびホスホ－Ｓｅｒ１０－Ｈ３のレベルに関するウェスタンブロット解析を示す。

化合物１で処置されたＨＣＴ１１６ ＭＴＡＰ^－／－細胞において有糸分裂への進行速度の低下が観察されたことから、これらの細胞は、損傷ＤＮＡの蓄積により複製ストレスを受けている可能性があることが示唆される。ＤＮＡ損傷のレベルを評価するために、免疫蛍光法を使用して、リン酸化Ｈ２ＡＸ（γＨ２ＡＸ）のレベルに関する解析を実施した。これらの実験の結果から、ＤＭＳＯ対照と比較し、化合物１で処理した後、γＨ２ＡＸ陽性細胞の数が３倍を超えて増加していたことが示された。図３Ａおよび３Ｂは、γＨ２ＡＸの免疫蛍光解析を示しており、化合物１を用いた処理の際のＨＣＴ１１６ ＭＴＡＰ^－／－におけるＤＮＡ損傷レベルの増加を示している。

ＨＣＴ１１６ ＭＴＡＰ^－／－細胞が、化合物１の存在下で正常な細胞分裂を行う能力があるかを評価した。

有糸分裂像の異常を伴う細胞の数を分析し、ＤＡＰＩ染色を使用して、小核形成の頻度を評価した。ＤＡＰＩ染色分析の結果から、化合物１を用いた処置の際の小核数の増加が示された。図４Ａおよび図４Ｂに示されるように、ＤＡＰＩ染色の免疫蛍光分析から、化合物１を用いた処置が、ＨＣＴ１１６ ＭＴＡＰ^－／－細胞における小核数の増加をもたらしたことが示された。

さらにＤＡＰＩ染色分析により、ＨＣＴ１１６ ＭＴＡＰ^－／－細胞において、他の有糸分裂欠損を伴う細胞数の増加が、化合物１処置と関連することが明らかとなった。図５Ａに示されるように、化合物１を用いた処理後に、非対称性に分割された核を有する細胞の数の増加、および二核または多核の細胞の数の増加があった。さらに図５Ｂに示されるように、γＨ２ＡＸでマーカーされる染色体異常を有する有糸分裂細胞の増加も観察された。

実施例２：相乗効果スコアリング
表１に示されるように、ＨＣＴ１１６ ＭＴＡＰヌルを含む２９個のＭＴＡＰヌル細胞株のパネルに対し、増殖阻害アッセイを実施した。当該アッセイは、Ｈｏｒｉｚｏｎ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ’ｓ Ｈｉｇｈ Ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｐｌａｔｆｏｒｍを利用して、化合物１と、現行の標準治療薬（ペメトレキセド、パクリタキセルおよびゲムシタビン塩酸塩）の間の有益な相互作用を評価した。細胞は、本明細書において「エンハンサー」と呼称される五つの剤、すなわちペメトレキセド、パクリタキセル、ゲムシタビン、ＡＢＴ－３４８、およびＡＺＤ１１５２－ＨＱＰＡと併用された化合物１からなる４つの組み合わせを用いて処理された。

図６に示されるように、Ｌｏｅｗｅ相乗効果スコアは散布図として提示され、散布図中に描かれた線により表される、細胞株パネル全体の相乗効果スコアの中央値によりランク付けされている。

以下の表は、実施例２から得られたＬｏｅｗｅ相乗効果スコアの結果を提示しており、その計算は本明細書において上述されている。

Ｌｏｅｗｅ相乗効果スコアにより示されるように、様々な腫瘍型の複数のＭＴＡＰヌル細胞株において、式（Ｉ）の化合物の併用でインビトロにおいて利益が観察された。式（Ｉ）の化合物と、ペメトレキセド、パクリタキセル、ゲムシタビン、またはオーロラキナーゼ阻害剤（ＡＢＴ－３４８およびＡＺＤ１１５２－ＨＱＰＡ）の組み合わせで、インビトロで有益な効果が観察された。

実施例３：組み合わせ指数評価
有糸分裂中に微小管を安定化させるという臨床的に関連性のある２種の化学療法剤、パクリタキセルとドセタキセルを用いて確認的インビトロ実験を実施した。パクリタキセルとドセタキセルのそれぞれの主要な作用機序は、微小管の超安定化である。微小管はα－チューブリンとβ－チューブリンの細胞骨格タンパク質の反復から構成され、有糸分裂中の適切な染色体分離を含む様々な細胞プロセスに関与している。パクリタキセルとドセタキセルは微小管と直接相互作用し、微小管に安定的付着しない動原体による染色体分離を阻害する微小管脱重合に対して作用する。パクリタキセルおよびドセタキセルで処置された、積極的に分裂するがん細胞は、紡錘体集合チェックポイントを活性化させて成長を中期に停止させ、または有糸分裂を低下させて四倍体細胞を生じさせ、最終的に細胞死へと向かう。Ｍｏｎｔｅｒｏ，Ａ．，Ｆｏｓｓｅｌｌａ，Ｆ．，Ｈｏｒｔｏｂａｇｙｉ，Ｇ．＆ Ｖａｌｅｒｏ，Ｖ．Ｄｏｃｅｔａｘｅｌ ｆｏｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｓｏｌｉｄ ｔｕｍｏｕｒｓ：ａ ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｄａｔａ．Ｌａｎｃｅｔ．Ｏｎｃｏｌ．６，２２９－３９（２００５）；およびＷｅａｖｅｒ，Ｂ．Ａ．Ｈｏｗ Ｔａｘｏｌ／ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ ｋｉｌｌｓ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．Ｃｅｌｌ ２５，２６７７－８１（２０１４）を参照のこと。

細胞増殖評価は、Ｃｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ－Ｇｌｏアッセイを使用して、ＨＣＴ１１６ ＭＴＡＰ－／－細胞株ならびにＫＰ４膵臓ＭＴＡＰ－／－細胞株、およびＨ２１２２ ＭＴＡＰ野生株非小細胞肺がん細胞株における読み取り値として実施された。それら細胞株はＭＴＡＰ阻害剤を使用してＭＴＡＰの「薬理学的」ヌルへと転換され、パクリタキセルおよびドセタキセルと、式Ｉの化合物の相互作用が評価された。ドセタキセル、パクリタキセル、および式（Ｉ）の化合物の間の有益な効果は、本明細書において上述される、薬剤の併用効果に関する定量的尺度を与える薬剤組み合わせ指数（ＣＩ）を使用して測定された。図７に示されるように、ＨＣＴ１１６ ＭＴＡＰ－／－、ＫＰ４、およびＨ２１２２のＭＴＡＰ「薬理学的」ヌル細胞における組み合わせ指数評価の結果から、パクリタキセルとドセタキセルの両方ともが、式（Ｉ）の化合物と併用されたときに細胞増殖阻害に対する相乗効果を有していることが示された。

実施例３の方法および材料を、以下に提示する。表７～１０は、細胞増殖評価のための材料を提示する。

ハイスループットスクリーニングを実施した方法を本明細書に記載する。本アッセイのエンドポイント読み取り値は、生細胞の指標としてのＡＴＰの定量に基づく。

液体窒素中に保存された細胞株は解凍され、増殖培地中で増殖される。細胞が予測倍加時間に達したら、スクリーニングを開始する。細胞は、増殖培地中、５００～１５００細胞／ウェル（アナライザーに記載される）で、黒色の３８４ウェル組織培養処理プレート中に播種される。細胞は遠心分離によりアッセイプレート中で平衡化され、３７℃で２４時間、インキュベーター（投与モジュールに付加）に置かれ、その後処理された。処理時に、１セットのアッセイプレート（処理を受けない）を収集し、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ ２．０（Ｐｒｏｍｅｇａ社）を加えることによってＡＴＰレベルが測定される。これらのＴｚｅｒｏ（Ｔ０）プレートは、Ｅｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ社）で超高感度ルミネッセンスを使用して読み取られる。アッセイプレートを化合物と共に９６時間インキュベートし、次いでＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ ２．０を使用して分析する。すべてのデータポイントは、自動化されたプロセスにより収集され、クオリティコントロールの対象となり、Ｈｏｒｉｚｏｎ所有のソフトウェアを使用して分析される。アッセイプレートは、以下のクオリティコントロール基準に合格した場合に受け入れられる：相対的な生データ値は、実験全体を通して一貫しており、Ｚ因子スコアは０．６より大きく、未処置／ビヒクル対照はプレート上で一貫した挙動をする。

増殖阻害（ＧＩ）は、細胞増殖の尺度として使用した。ＧＩパーセントは、以下の検定および方程式を適用することによって計算される：

式中、Ｔは、被験物質のシグナル測定値であり、Ｖは、未処置／ビヒクル処置対照の測定値であり、Ｖｏは、時間０（口語的にＴ０プレートとも呼ばれる）での未処置／ビヒクル対照の測定値である。この式は、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ ＩｎｓｔｉｔｕｔｅのＮＣＩ－６０ハイスループットスクリーニングで使用される増殖阻害計算法から導出される。すべてのデータ解析は、増殖阻害において行われた（記載がある場合を除く）。

ＧＩ測定値が０％とは、増殖阻害を示さず、９６時間でのＴ測定値が、それぞれの期間のＶ測定値と同等である場合に発生する。ＧＩが１００％とは、完全な増殖阻害（細胞静止）を表し、この場合、化合物で９６時間処置された細胞は、Ｔ０対照細胞と同じエンドポイント測定値を有している。ＧＩが２００％とは、培養ウェル内のすべての細胞の完全な死（細胞毒性）を表し、この場合、９６時間でのＴ測定値は、Ｔ０対照よりも低くなる（値はほぼゼロまたはゼロ）。

阻害は、細胞生存率の尺度として提供される。０％の阻害レベルは、処置による細胞増殖阻害が無いことを示す。１００％の阻害は、処置期間中の細胞数の倍加が無いことを示す。細胞静止性および細胞毒性の両処置は、１００％の阻害率をもたらし得る。阻害率は、以下のように計算される：Ｉ＝１－Ｔ／Ｕ。式中、Ｔは処置されたものであり、Ｕは未処置／ビヒクル対照である。

実施例４：膵臓ＫＰ４異種移植片モデルにおける式（Ｉ）の化合物とドセタキセル療法の併用
試験目的：本試験の目的は、メスマウスにおいて定着したＭＴＡＰ欠損性膵臓異種移植片腫瘍（ＫＰ４）に対する、単独およびドセタキセルとの併用における、式（Ｉ）の化合物の１日１回（ＰＯ）投与の潜在的な有効性を評価することであった。

試験デザイン：５～６週齢のメスのＣＢ－１７ ＳＣＩＤマウスに、無血清培地＋マトリゲル（１：１）中の１ｘ１０^７個のＫＰ４細胞を皮下接種した。２６日目に腫瘍が平均２００ｍｍ^３に達したときに、マウスを処置群に無作為化し、表１１に概説されるように投与した。

材料および方法：腫瘍体積はキャリパーを使用して２次元で週に２回測定され、体積は、以下の式を使用してｍｍ^３単位で表された：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）／２。式中、Ｖは腫瘍体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（最長の腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直）である。体重は、週に２回測定された。

式（Ｉ）の化合物は、非晶質の式（Ｉ）を含む製剤として供給された。化合物は、遮光されて４℃で保存された。式（Ｉ）の化合物は、ビヒクル中で毎日製剤化された。製剤化された式（Ｉ）の化合物は、４℃で遮光されて保存された場合、２４時間安定である。

式（Ｉ）の化合物は、１００ｍｇ／ｋｇで１日１回、２群および４群に経口投与された。

ドセタキセルはＭｙｏｄｅｒｍ社（カタログ番号６６７５８－００５０－０１）から購入され、滅菌注射用に０．９％ ＮａＣｌ中で製剤化された。ドセタキセルは、３群および４群に対して、５ｍｇ／ｋｇを使用してＩＶ投与された。

１群（ビヒクルのみ）のビヒクル調製は、式（Ｉ）の化合物の製剤と合致させた。ビヒクルは毎日新しく製剤化され、４℃で保存された場合、２４時間安定である。
結果：

試験中、ビヒクルを用いた処置は忍容性良好であり、体重減少（ＢＷＬ）は０であった。腫瘍体積は、１群終了の処置１９日目に１６８７．４ｍｍ^３の中央値に達した（表２８）。

１００ｍｇ／ｋｇの式（Ｉ）の化合物単独での処置（２群）は忍容性良好であり、処置４日目のＢＷＬの最大中央値は３％であった。腫瘍体積は、２群終了の処置３６日目に１４２６．７ｍｍ^３の中央値に達した。

５ｍｇ／ｋｇのドセタキセルの単独での処置は忍容性良好であり、処置１日目のＢＷＬの最大中央値は３％であった。腫瘍体積は、３群終了の処置３６日目に１３６５．８ｍｍ^３の中央値に達した。

式（Ｉ）の化合物とドセタキセルの組み合わせを用いた処置は忍容性良好であり、処置４日目のＢＷＬの中央値は３％であった。腫瘍体積は、４群終了の処置５４日目に１０７５．３ｍｍ^３の中央値に達した。

各群の腫瘍体積を表１２に示し、図８に図示する。組み合わせの方法論が本明細書に記載され、結果は表１３に示される。

実施例５：メスのＢＡＬＢ／ｃヌードマウスにおける、膵がん異種移植片モデル（ＰＡ０３７２）における式（Ｉ）の化合物とパクリタキセル療法の併用。
試験目的：本試験の目的は、メスのＢＡＬＢ／ｃヌードマウスにおける、式（Ｉ）の化合物の単一治療としての治療有効性、またはパクリタキセルとの併用治療の治療有効性の可能性を、ＨｕＰｒｉｍｅ（登録商標）膵臓異種移植片モデルＰＡ０３７２（ＭＴＡＰ欠損モデル）を用いて評価することであった。

試験デザイン：ＰＡ０３７２腫瘍断片をＢＡＬＢ／ｃヌードマウスに接種し、腫瘍が、約１５８ｍｍ^３の平均腫瘍体積に達したときに治療を開始した。被験剤である式（Ｉ）の化合物は、単一の剤として１００ｍｇ／ｋｇ（２群）で、および１５ｍｇ／ｋｇのパクリタキセルと併用された。

材料および方法：腫瘍体積はキャリパーを使用して２次元で週に２回測定され、体積は、以下の式を使用してｍｍ^３単位で表された：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）／２。式中、Ｖは腫瘍体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（最長の腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直）である。体重は、週に２回測定された。

式（Ｉ）の化合物は、非晶質の式（Ｉ）を含む製剤として供給された。化合物は、遮光されて４℃で保存された。式（Ｉ）の化合物は、ビヒクル中で毎日製剤化された。製剤化された式（Ｉ）の化合物は、４℃で遮光されて保存された場合、２４時間安定である。

式（Ｉ）の化合物は、１００ｍｇ／ｋｇで１日１回、２群および４群に経口投与された。

パクリタキセルは、Ｓｅｌｌｅｃｋ社（カタログ番号Ｓ１１５０）から購入され、５％ ＤＭＳＯ＋５％ Ｔｗｅｅｎ８０＋９０％ ｄｄＨ２Ｏ中で製剤化された。パクリタキセルは、３群および４群に対して、１５ｍｇ／ｋｇを使用してＩＶ投与された。

１群（ビヒクルのみ）のビヒクル調製は、式（Ｉ）の化合物の製剤と合致させた。ビヒクルは毎日新しく製剤化され、４℃で保存された場合、２４時間安定である。

ＰＡ０３７２ヒト原発性膵臓腫瘍を担持するストックマウスに由来する腫瘍を採取し、解剖して断片にして、ＢＡＬＢ／ｃヌードマウスに接種した。各マウスは、右側腹にＰＡ０３７２断片（Ｐ５、直径２～４ｍｍ）を皮下接種されて、腫瘍を発生させた。

腫瘍形成した動物を、その腫瘍体積に基づいて四つの異なる試験群に無作為に割り当てた。無作為化を行ったときの平均腫瘍体積は、１５８ｍｍ^３であった。無作為化および投与開始の日を、試験１日目と定義した。

結果：
試験中、ビヒクルを用いた処置は忍容性良好であり、体重減少（ＢＷＬ）は０であった。腫瘍体積は、１群終了の処置２９日目に１２２０．３９ｍｍ^３の中央値に達した。

試験中、１００ｍｇ／ｋｇの式（Ｉ）の化合物を用いた処置は忍容性良好であり、体重減少（ＢＷＬ）は０であった。腫瘍体積は、２群終了の処置２９日目に５９６．１３ｍｍ^３の中央値に達した。

試験中、１５ｍｇ／ｋｇのパクリタキセルを用いた処置は忍容性良好であり、体重減少（ＢＷＬ）は０であった。腫瘍体積は、３群終了の処置２９日目に９１３．７９ｍｍ^３の中央値に達した。

試験中、１５ｍｇ／ｋｇのパクリタキセルと併用された１００ｍｇ／ｋｇの式（Ｉ）の化合物を用いた処置は忍容性良好であり、体重減少（ＢＷＬ）は０であった。腫瘍体積は、４群終了の処置２９日目に３２６．７１ｍｍ^３の中央値に達した。

表１５の結果を、図９に示す。組み合わせの方法論が本明細書に記載され、結果は表１６に示される。

実施例６：膵臓ＰＡＸ０４１ ＰＤＸモデルにおける式（Ｉ）の化合物とパクリタキセル療法の併用
試験目的：本試験の目的は、メスのＮｕ／Ｎｕマウスにおいて定着した患者由来のＭＴＡＰ欠損性異種移植片腫瘍（ＰＤＸ）であるＰＡＸ０４１に対する、単独、およびパクリタキセルとの併用における、式（Ｉ）の化合物の１日１回（ＰＯ）投与の有効性を評価することであった。

試験デザイン：被験マウスは、接種後２３日目に、腫瘍体積の中央値が１３３ｍｍ^３であることに基づき四つの試験群に無作為化された。処置は接種後２３日目に開始された（処置の初日で、１日目と表示される）。表１７に処置スケジュールを要約する。

材料および方法：１８～２２ｇのメスＮｕ／Ｎｕマウスを、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｖｉｔａｌ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．Ｌｔｄ．（中国、北京）から購入し、ＰＡＸ０４１腫瘍断片を皮下移植した。ＰＡＸ０４１は、ＣｈｅｍＰａｒｔｎｅｒ社で確立されたヒトＭＴＡＰ欠損性原発性の膵がん異種移植片モデルである。処置は２３日目に開始され、投与スケジュールは表１７に記載されている。

腫瘍体積はキャリパーを使用して２次元で週に２回測定され、体積は、以下の式を使用してｍｍ^３単位で表された：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）／２。式中、Ｖは腫瘍体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（最長の腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直）である。各投与群の腫瘍増殖阻害率（ＴＧＩ％）を、以下の式に従って計算した：ＴＧＩ％＝［１－（ＴＶｉ－ＴＶ０）／（ＴＶｖｉ－ＴＶｖ０）］×１００％；ＴＶｉは、特定の日の投与群の平均腫瘍体積である。ＴＶ０は、初日の投与群の平均腫瘍体積である。ＴＶｖｉは、特定の日のビヒクル群の平均腫瘍体積である。ＴＶｖ０は、初日のビヒクル群の平均腫瘍体積である。体重は、週に２回測定された。

式（Ｉ）の化合物は、非晶質の式（Ｉ）を含む製剤として供給された。化合物は、遮光されて４℃で保存された。式（Ｉ）の化合物は、ビヒクル中で毎日製剤化された。製剤化された式（Ｉ）の化合物は、４℃で遮光されて保存された場合、２４時間安定である。

式（Ｉ）の化合物は、１００ｍｇ／ｋｇで１日１回、２群および４群に経口投与された。

パクリタキセルは、中国のＳｅｌｌｅｃｋ社（カタログ番号Ｓ１１５０）から購入され、５％ ＤＭＳＯ、５％ Ｔｗｅｅｎ８０およびｄｄＨ２Ｏ中で製剤化された。パクリタキセルは、３群および４群に対して、７．５ｍｐｋを使用してＩＰ投与された。

１群（ビヒクルのみ）のビヒクル調製は、式（Ｉ）の化合物の製剤と合致させた。ビヒクルは毎日新しく製剤化され、４℃で保存された場合、２４時間安定である。
結果：

試験中、ビヒクルを用いた処置（１群）は忍容性良好であり、体重減少（ＢＷＬ）は０であった。腫瘍体積は、試験終了の２８日目に８４７ｍｍ^３の中央値に達した。

１００ｍｇ／ｋｇの式（Ｉ）の化合物単独での処置（２群）は忍容性良好であり、処置１２日目のＢＷＬの最大中央値は３％であった。腫瘍体積は、試験終了の２８日目に４６１ｍｍ^３の中央値に達した（ＴＧＩ＝５５％）。

７．５ｍｇ／ｋｇのパクリタキセル単独での処置（３群）は忍容性良好であり、２日目のＢＷＬの最大中央値は１％であった。腫瘍体積は、試験終了の２８日目に７５６ｍｍ^３の中央値に達した（ＴＧＩ＝１２％）。本試験において、１日目、８日目、および２２日目に、より高い用量でのパクリタキセル（１５ｍｇ／ｋｇ）のＩＰ投与が探索されたことに留意されたい。この用量は忍容性良好ではなく、１２匹中２匹の動物がそれぞれ２０日目および２２日目に死亡していた。

式（Ｉ）の化合物とパクリタキセルの併用（４群）を用いた処置は忍容性良好であり、１１日目のＢＷＬの中央値は４％であった。腫瘍体積は、試験終了の２８日目に４９１ｍｍ^３の中央値に達した（ＴＧＩ＝５０％）。本試験において、１日目、８日目に、式（Ｉ）の化合物（１００ｍｇ／ｋｇ）と併用された、より高い用量でのパクリタキセル（１５ｍｇ／ｋｇ）のＩＰ投与が探索されたことに留意されたい。この併用は忍容性良好ではなく、１２匹中３匹の動物が２０日目に死亡していた。

表１８の結果を、図１０に示す。組み合わせの方法論が本明細書に記載され、結果は表１９に示される。

実施例７：食道ＥＳＸ０３０ ＰＤＸモデルにおける、式（Ｉ）に示される化合物とドセタキセル療法の併用
試験目的：本試験の目的は、メスのＮｕ／Ｎｕマウスにおいて定着した患者由来の異種移植片腫瘍（ＰＤＸ）であるＥＳＸ０３０に対する、単独、およびドセタキセルとの併用における、式（Ｉ）に示される化合物の１日１回（ＰＯ）投与の有効性を評価することであった。

試験デザイン：

被験マウスは、接種後２０日目に、腫瘍体積の中央値が１４２ｍｍ^３であることに基づき四つの試験群に無作為化された。処置は接種後２０日目に開始された（処置の初日で、１日目と表示される）。表２０に処置スケジュールを要約する。

材料および方法：

１８～２２ｇのメスＮｕ／Ｎｕマウスを、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｖｉｔａｌ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．Ｌｔｄ．（中国、北京）から購入し、ＥＳＸ０３０腫瘍断片を皮下移植した。ＥＳＸ０３０は、ＣｈｅｍＰａｒｔｎｅｒ社で確立されたヒト原発性食道がん異種移植片モデルである。

腫瘍体積はキャリパーを使用して２次元で週に２回測定され、体積は、以下の式を使用してｍｍ^３単位で表された：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）／２。式中、Ｖは腫瘍体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（最長の腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直）である。各投与群の腫瘍増殖阻害率（ＴＧＩ％）を、以下の式に従って計算した：ＴＧＩ％＝［１－（ＴＶ_ｉ－ＴＶ_０）／（ＴＶ_ｖｉ－ＴＶ_ｖ０）］×１００％；ＴＶ_ｉは、特定の日の投与群の平均腫瘍体積である。ＴＶ_０は、初日の投与群の平均腫瘍体積である。ＴＶ_ｖｉは、特定の日のビヒクル群の平均腫瘍体積である。ＴＶ_ｖ０は、初日のビヒクル群の平均腫瘍体積である。

体重は、週に２回測定された。

式（Ｉ）に示される化合物は、２５％の有効医薬品成分（ＡＰＩ）を含有する製剤として供給された。化合物は、遮光されて４℃で保存された。式（Ｉ）の化合物は、ビヒクル中で毎日製剤化された。製剤化された式（Ｉ）の化合物は、４℃で遮光されて保存された場合、２４時間安定である。
式Ｉの化合物は、１００ｍｇ／ｋｇで１日１回、２群、５群および６群に経口投与された。式Ｉの化合物の用量は、２００ｍｇ／ｋｇの１日ＭＴＤの１／２であるとして選択された。ヒストリカルデータは、２００ｍｇ／ｋｇの毎日投与が、２８日目にＥＳＸ０３０モデルにおいて、７４％のＴＧＩをもたらすことを実証した。

ドセタキセルは、中国のＳｅｌｌｅｃｋ社（カタログ番号Ｓ１１４８）から購入され、５％ ＤＭＳＯ、３０％ ＰＥＧ３００、５％ Ｔｗｅｅｎ８０およびｄｄＨ２Ｏ中で製剤化された。ドセタキセルは、３群および５群に対しては２．５ｍｐｋを使用してＩＶ投与され、４群および６群に対しては５．０ｍｐｋを使用してＩＶ投与された。

１群（ビヒクルのみ）のビヒクル調製は、式（Ｉ）の化合物の製剤と合致させた。ビヒクルは毎日新しく製剤化され、４℃で保存された場合、２４時間安定である。

結果：

ビヒクル処置（１群）は忍容性良好であり、処置２日目のＢＷＬの最大中央値は１％であった。腫瘍体積は、試験終了の３６日目に１９８６ｍｍ^３の中央値に達した。

１００ｍｇ／ｋｇの式Ｉの化合物単独での処置（２群）は忍容性良好であり、処置９日目のＢＷＬの最大中央値は２％であった。腫瘍体積は、試験終了の５７日目に１７１０ｍｍ^３の中央値に達した。

２．５ｍｇ／ｋｇのドセタキセルの単独での処置（３群）は忍容性良好であり、処置９日目のＢＷＬの最大中央値は２％であった。腫瘍体積は、試験終了の５０日目に２２０１ｍｍ^３の中央値に達した。

５．０ｍｇ／ｋｇのドセタキセルの単独での処置（４群）は忍容性良好であり、２日目のＢＷＬの最大中央値は１％であった。腫瘍体積は、試験終了の５０日目に１６４３ｍｍ^３の中央値に達した。

式（Ｉ）の化合物と２．５ｍｐｋのドセタキセルの併用（５群）を用いた処置は忍容性良好であり、１７日目のＢＷＬの中央値は２％であった。腫瘍体積は、試験終了の７１日目に１５４１ｍｍ^３の中央値に達した。

式（Ｉ）の化合物と５．０ｍｐｋのドセタキセルの併用（６群）を用いた処置は全体的に忍容性良好であり、２１日目のＢＷＬの中央値は２％であった。この群において１２匹中１匹の動物に２７％の体重減少があったため、この動物は５５日目から６０日目まで式（Ｉ）の化合物の投薬を休み、体重は４％まで回復した。腫瘍体積は、１２０日目に３７１ｍｍ^３の中央値に達した（図１１、表２１）。１２０日目に１２匹中３匹の動物が１０００ｍｍ^３を超える腫瘍を呈した。これら３匹の動物は試験から除外された。ドセタキセルの最終週の投与は１３４日目に行われ、式（Ｉ）の化合物の最終投与は１３５日目に行われた。１３６日目に残りの９匹のマウスのうちの３匹が、４２２ｍｍ^３、１４６ｍｍ^３、１２６ｍｍ^３の腫瘍体積を示した。これらのマウスは試験から除去された。残りの６匹のマウスは試験続行され、腫瘍は存在しなかった。そして１５５日目の試験終了まで腫瘍は存在しなかった。

腫瘍体積の結果を表２１に示し、図１１に示す。組み合わせの方法論が本明細書に記載され、結果は表２２および２３に示される。

実施例８：ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデル（ＬＵＸ００１）における、式（Ｉ）の化合物とドセタキセル療法の併用
ＭＴＡＰ欠損性ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデル（ＬＵＸ００１）において、ドセタキセル（２．５ｍｇ／ｋｇのＩＶ投与で、Ｑ７Ｄのスケジュール）を、式（Ｉ）の化合物（１００ｍｐｋ ＰＯで投与され、ＱＤスケジュール）と併用し、抗腫瘍の併用利益を評価した。各群には定着したＬＵＸ００１腫瘍を担持する８匹のメスのＮｕ／Ｎｕマウスが含まれた。１群は、ビヒクル処置群である。式（Ｉ）の化合物群において、数匹の動物にＢＷＬがあったため、１６～２１日目に投薬が休止された。１００ｍｇ／ｋｇの式（Ｉ）の化合物（２群）では、１匹の動物が１４日目に２０％ ＢＷＬを失い、投薬休止中に体重減少（ＢＷＬ）が回復した。３群は、ドセタキセル群である。式（Ｉ）の化合物＋ドセタキセルの併用群（４群）において、１匹の動物が２０％ ＢＷＬとなり、５４～５９、６５～７３、７７～８３日目に式（Ｉ）の化合物の投薬が休止された。１匹の動物が２０％を超えるＢＷＬとなり、３８～４６日目に式（Ｉ）の化合物の投薬が休止され、４２日目のドセタキセル投薬が休止された。これら両動物で体重減少は回復された。この群における最大平均ＢＷＬは、６％であった。腫瘍増殖阻害（本明細書に記載される方法）は２５日目に計算され、式（Ｉ）の化合物（２群）ではＴＧＩ＝７０％となり、ドセタキセル（３群）はＴＧＩ＝３８％となり、および併用（４群）はＴＧＩ＝９１％となった。腫瘍増殖曲線の結果を図１２に示す。併用の利益（本明細書に記載される方法）は１２０日目に評価された。併用群において、４匹の腫瘍形成動物が１２０日目に除去された。この群の残りの４匹の動物は、１１４日目に最終投与が行われるときも腫瘍は存在せず、これらの動物は、当該治療群が１４１日目に終了するまで腫瘍無しのままであった。

実施例９：ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデル（ＬＵＸ０３４）における、式（Ｉ）に示される化合物とドセタキセル療法の併用
ＭＴＡＰ欠損性ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデル（ＬＵＸ０３４）において、ドセタキセル（ＩＶ投与で、Ｑ７Ｄのスケジュール）を、式（Ｉ）の化合物（１００ｍｐｋ ＰＯで投与され、ＱＤスケジュール）と併用し、抗腫瘍の併用利益を評価した。各群には定着したＬＵＸ０３４腫瘍を担持する８匹のメスのＮｕ／Ｎｕマウスが含まれた。１群はビヒクル処置であり、２群は式（Ｉ）の化合物であり、３群はドセタキセル（２．５ｍｇ／ｋｇ）であり、４群はドセタキセル（５．０ｍｇ／ｋｇ）であり、５群は式（Ｉ）の化合物とドセタキセル（２．５ｍｇ／ｋｇ）の併用であり、６群は式（Ｉ）の化合物とドセタキセル（５ｍｇ／ｋｇ）の併用である。すべての処置は、忍容性良好であった。腫瘍増殖阻害（本明細書に記載される方法）は４３日目に計算され、式（Ｉ）の化合物（２群）は、ＴＧＩ＝４１％であり、ドセタキセル２．５ｍｇ／ｋｇ（３群）はＴＧＩ＝３２％であり、ドセタキセル５．０ｍｇ／ｋｇ（４群）はＴＧＩ＝２７％であり、式（Ｉ）の化合物＋ドセタキセル２．５ｍｇ／ｋｇの併用（５群）はＴＧＩ＝５１％であり、式（Ｉ）の化合物＋ドセタキセル５．０ｍｇ／ｋｇの併用（６群）はＴＧＩ＝６０％であった。腫瘍増殖曲線の結果を図１３に示す。併用の利益（本明細書に記載される方法）は４３日目に評価された。

実施例１０：ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデル（ＬＵ６４１２）における、式（Ｉ）の化合物とドセタキセル療法の併用
ＭＴＡＰ欠損性ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデル（ＬＵ６４１２）において、ドセタキセル（ＩＶ投与で、Ｑ７Ｄのスケジュール）を、式（Ｉ）の化合物（１００ｍｐｋ ＰＯで投与され、ＱＤスケジュール）と併用し、抗腫瘍の併用利益を評価した。各群には定着したＬＵ６４１２腫瘍を担持する８匹のメスのＢＡＬＢ／ｃヌードマウスが含まれた。１群はビヒクル処置であり、２群は式（Ｉ）の化合物であり、３群はドセタキセル（２．５ｍｇ／ｋｇ）であり、４群はドセタキセル（５．０ｍｇ／ｋｇ）であり、５群は式（Ｉ）の化合物とドセタキセル（２．５ｍｇ／ｋｇ）の併用であり、６群は式（Ｉ）の化合物とドセタキセル（５ｍｇ／ｋｇ）の併用である。すべての処置は、以下の例外を除いて忍容性であった：１）４群および６群は、６群の２匹の動物が投薬休止のＢＷＬリバウンド後に２０％のＢＷＬに達したことから、ドセタキセル（５ｍｇ／ｋｇ）の投与休止を受けた。２）５群において１匹の動物が１８日目に死亡したことが判明した。３）３８日目に８群の１匹の動物が２２．５％の体重減少があったため、式Ｉの化合物とドセタキセルの両方の投薬休止を受け、当該動物ではＢＷＬは回復した。最後に４）６群において１匹の動物が２４％の体重減少があり、１匹の動物が２２％ ＢＷ減少があった。両動物ともドセタキセルと式Ｉに示される化合物の両方の投薬休止を受けたが、回復せず、これら２群は３９日目に取り下げられた。腫瘍増殖阻害（本明細書に記載される方法）は３９日目に計算され、式（Ｉ）に示される化合物（２群）は、ＴＧＩ＝５２％であり、ドセタキセル２．５ｍｇ／ｋｇ（３群）はＴＧＩ＝２２％であり、ドセタキセル５．０ｍｇ／ｋｇ（４群）はＴＧＩ＝５７％であり、式（Ｉ）に示される化合物＋ドセタキセル２．５ｍｇ／ｋｇの併用（５群）はＴＧＩ＝６４％であり、式（Ｉ）に示される化合物＋ドセタキセル５．０ｍｇ／ｋｇの併用（６群）はＴＧＩ＝９２％であった。腫瘍増殖曲線の結果を図１４に示す。併用の利益（本明細書に記載される方法）は３９日目に評価された。

実施例１１：ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデル（ＣＴＧ－１１９４）における、式（Ｉ）の化合物とドセタキセル療法の併用
ＭＴＡＰ欠損性ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデル（ＣＴＧ－１１９４）において、ドセタキセル（ＩＶ投与で、Ｑ７Ｄのスケジュール）を、式（Ｉ）に示される化合物（１００ｍｐｋ ＰＯで投与され、ＱＤスケジュール）と併用し、抗腫瘍の併用利益を評価した。各群には定着したＣＴＧ－１１９４腫瘍を担持する１２匹のメスの無胸腺ヌードマウスが含まれた。１群はビヒクル処置であり、２群は式（Ｉ）の化合物であり、３群はドセタキセル（５．０ｍｇ／ｋｇ）であり、４群は式（Ｉ）の化合物とドセタキセル（５ｍｇ／ｋｇ）の併用である。すべての処置は忍容性良好であったが、４群の１匹の動物は１４日目に１５％のＢＷＬを示し、ゆえに１４日目にドセタキセルの投薬が休止され、ＢＷＬは回復した。腫瘍増殖阻害（本明細書に記載される方法）は１４日目に計算され、式（Ｉ）に示される化合物（２群）ではＴＧＩ＝３８％となり、ドセタキセル５．０ｍｇ／ｋｇ（３群）はＴＧＩ＝４１％となり、および式（Ｉ）の化合物とドセタキセル５．０ｍｇ／ｋｇの併用（４群）はＴＧＩ＝６６％となった。腫瘍増殖曲線の結果を図１５に示す。併用の利益（本明細書に記載される方法）は１２日目に評価された。

実施例１２：膵臓ＰＤＸモデル（ＰＡＸ００１）における、式（Ｉ）の化合物とドセタキセル療法の併用
ＭＴＡＰ欠損性膵臓ＰＤＸモデル（ＰＡＸ００１）において、パクリタキセル（ＩＶ投与で、Ｑ７Ｄｘ２のスケジュール）を、式（Ｉ）の化合物（１００ｍｐｋ ＰＯ投与で、ＱＤスケジュール）と併用し、抗腫瘍の併用利益を評価した。各群には定着したＰＡＸ００１腫瘍を担持する１２匹のメスのＮｕ／Ｎｕマウスが含まれた。１群はビヒクル処置であり、２群は式（Ｉ）の化合物であり、３群はパクリタキセル（５．０ｍｇ／ｋｇ）であり、４群はパクリタキセル（１０．０ｍｇ／ｋｇ）であり、５群は式（Ｉ）の化合物とパクリタキセル（５ｍｇ／ｋｇ）の併用であり、６群は式（Ｉ）の化合物とパクリタキセル（１０ｍｇ／ｋｇ）の併用である。すべての処置は、忍容性良好であった。腫瘍増殖阻害（本明細書に記載される方法）は２８日目に計算され、式（Ｉ）の化合物（２群）は、ＴＧＩ＝９４％であり、パクリタキセル５ｍｇ／ｋｇ（３群）はＴＧＩ＝０％であり、パクリタキセル１０．０ｍｇ／ｋｇ（４群）はＴＧＩ＝２２％であり、式（Ｉ）の化合物＋パクリタキセル５．０ｍｇ／ｋｇの併用（５群）はＴＧＩ＝９３％であり、式（Ｉ）の化合物＋パクリタキセル１０．０ｍｇ／ｋｇの併用（６群）はＴＧＩ＝９３％であった。腫瘍増殖曲線の結果を図１６に示す。併用の利益（本明細書に記載される方法）は２８日目に評価された。

実施例１３：食道ＰＤＸモデル（ＥＳ２２６３）における、式（Ｉ）の化合物とドセタキセル療法の併用
ＭＴＡＰ欠損性食道ＰＤＸモデル（ＥＳ２２６３）において、ドセタキセル（ＩＶ投与で、Ｑ７Ｄのスケジュール）を、式（Ｉ）の化合物（１００ｍｐｋ ＰＯで投与され、ＱＤスケジュール）と併用し、抗腫瘍の併用利益を評価した。各群には定着したＥＳ２２６３腫瘍を担持する１２匹のメスのＢＡＬＢ／ｃヌードマウスが含まれた。１群はビヒクル処置対照であり、２群は式（Ｉ）の化合物であり、３群はドセタキセル（２．５ｍｇ／ｋｇ）であり、４群はドセタキセル（５．０ｍｇ／ｋｇ）であり、５群は式（Ｉ）の化合物とドセタキセル（２．５ｍｇ／ｋｇ）の併用であり、６群は式（Ｉ）の化合物とドセタキセル（５ｍｇ／ｋｇ）の併用である。全ての処置が忍容性良好であったが、５群の１匹の動物は８日目に死亡が判明し、６群の１匹の動物は１９日目に死亡が判明した。腫瘍増殖阻害（本明細書に記載される方法）は１９日目に計算され、式（Ｉ）の化合物（２群）は、ＴＧＩ＝２７％であり、ドセタキセル２．５ｍｇ／ｋｇ（３群）はＴＧＩ＝－１７％であり、ドセタキセル５．０ｍｇ／ｋｇ（４群）はＴＧＩ＝１２％であり、式（Ｉ）の化合物＋ドセタキセル２．５ｍｇ／ｋｇの併用（５群）はＴＧＩ＝２５％であり、式（Ｉ）の化合物＋ドセタキセル５．０ｍｇ／ｋｇの併用（６群）はＴＧＩ＝５７％であった。腫瘍増殖曲線の結果を図１７に示す。併用の利益（本明細書に記載される方法）は１９日目に評価された。

実施例１４：膵臓ＰＡＸ０４１ ＰＤＸモデルにおける式（Ｉ）の化合物とゲムシタビン療法の併用
試験目的：本試験の目的は、メスマウスにおいて定着したＭＴＡＰ欠損性患者由来の異種移植片腫瘍（ＰＤＸ）であるＰＡＸ０４１に対する、単独、およびゲムシタビンとの併用における、式（Ｉ）の化合物の１日１回（ＰＯ）投与の有効性を評価することであった。

試験デザイン：被験マウスは、接種後２３日目に、腫瘍体積の中央値が１３３ｍｍ^３であることに基づき四つの試験群に無作為化された。処置は接種後２３日目に開始された（処置の初日で、１日目と表示される）。表２４に処置スケジュールを要約する。

材料および方法：１８～２２ｇのメスＮｕ／Ｎｕマウスを、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｖｉｔａｌ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．Ｌｔｄ．（中国、北京）から購入し、ＰＡＸ０４１腫瘍断片を皮下移植した。ＰＡＸ０４１は、ＣｈｅｍＰａｒｔｎｅｒ社で確立されたＭＴＡＰ欠損性ヒト原発性の膵がん異種移植片モデルである。

腫瘍体積はキャリパーを使用して２次元で週に２回測定され、体積は、以下の式を使用してｍｍ^３単位で表された：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）／２。式中、Ｖは腫瘍体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（最長の腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直）である。各投与群の腫瘍増殖阻害率（ＴＧＩ％）を、以下の式に従って計算した：ＴＧＩ％ ＝ ［１－（ＴＶｉ－ＴＶ０）／（ＴＶｖｉ－ＴＶｖ０）]
×１００％；ＴＶｉは、特定の日の投与群の平均腫瘍体積である。ＴＶ０は、初日の投与群の平均腫瘍体積である。ＴＶｖｉは、特定の日のビヒクル群の平均腫瘍体積である。ＴＶｖ０は、初日のビヒクル群の平均腫瘍体積である。体重は、週に２回測定された。

式（Ｉ）の化合物は、非晶質の式（Ｉ）の製剤として供給された。化合物は遮光されて４℃で保存された。式（Ｉ）の化合物はビヒクル中で毎日製剤化された。製剤化された式（Ｉ）の化合物は、４℃で遮光されて保存された場合、２４時間安定である。

式（Ｉ）の化合物は、１００ｍｇ／ｋｇで１日１回、２群および４群に経口投与された。

ゲムシタビンは中国のＳｅｌｌｅｃｋ社（カタログ番号Ｓ１１４９）から購入され、滅菌生理食塩水中で製剤化された。ゲムシタビンは、３群および４群に対して、２０ｍｐｋを使用してＩＰ投与された。１群（ビヒクルのみ）のビヒクル調製は、式（Ｉ）の化合物の製剤と合致させた。ビヒクルは毎日新しく製剤化され、４℃で保存された場合、２４時間安定である。
結果：

試験中、ビヒクルを用いた処置（１群）は忍容性良好であり、体重減少（ＢＷＬ）は０であった。腫瘍体積は、試験終了の２８日目に８４７ｍｍ^３の中央値に達した。

１００ｍｇ／ｋｇの式（Ｉ）の化合物単独での処置（２群）は忍容性良好であり、処置１２日目のＢＷＬの最大中央値は３％であった。腫瘍体積は、試験終了の２８日目に４６１ｍｍ^３の中央値に達した（ＴＧＩ＝５５％）。

２０ｍｐ／ｋｇのゲムシタビン単独（３群）での処置は忍容性良好であり、試験中のＢＷＬ中央値は無かった。腫瘍体積は、試験終了の２８日目に７２８ｍｍ^３の中央値に達した（ＴＧＩ＝１６％）。

式（Ｉ）の化合物とゲムシタビンの併用（４群）を用いた処置は忍容性良好であり、２４日目のＢＷＬの中央値は３％であった。腫瘍体積は、試験終了の２８日目に３５７ｍｍ^３の中央値に達した（ＴＧＩ＝６９％）。

表２５の腫瘍体積の結果を、図１８に示す。併用利益（本明細書に記載される方法）を、１～２６日目のデータを使用して評価した。当該分析の結果を表２６に示す。

実施例１５：膵臓ＰＤＸモデル（ＰＡＸ００１）における式（Ｉ）の化合物とゲムシタビン療法の併用
試験目的：本試験の目的は、メスマウスにおいて定着したＭＴＡＰ欠損性患者由来の異種移植片腫瘍（ＰＤＸ）であるＰＡＸ００１に対する、単独、およびゲムシタビンとの併用における、式（Ｉ）の化合物の１日１回（ＰＯ）投与の有効性を評価することであった。

試験デザイン：被験マウスは、接種後１８日目に、腫瘍体積の中央値が１８８ｍｍ^３であることに基づき四つの試験群に無作為化された。処置は接種後１８日目に開始された（処置の初日で、１日目と表示される）。表２７に処置スケジュールを要約する。

材料および方法：１８～２２ｇのメスＮｕ／Ｎｕマウスを、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｖｉｔａｌ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．Ｌｔｄ．（中国、北京）から購入し、ＰＡＸ００１腫瘍断片を皮下移植した。ＰＡＸ００１は、ＣｈｅｍＰａｒｔｎｅｒ社で確立されたＭＴＡＰ欠損性ヒト原発性の膵がん異種移植片モデルである。

腫瘍体積はキャリパーを使用して２次元で週に２回測定され、体積は、以下の式を使用してｍｍ^３単位で表された：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）／２。式中、Ｖは腫瘍体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（最長の腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直）である。各投与群の腫瘍増殖阻害率（ＴＧＩ％）を、以下の式に従って計算した：ＴＧＩ％＝［１－（ＴＶｉ－ＴＶ０）／（ＴＶｖｉ－ＴＶｖ０）］×１００％；ＴＶｉは、特定の日の投与群の平均腫瘍体積である。ＴＶ０は、初日の投与群の平均腫瘍体積である。ＴＶｖｉは、特定の日のビヒクル群の平均腫瘍体積である。ＴＶｖ０は、初日のビヒクル群の平均腫瘍体積である。体重は、週に２回測定された。

式（Ｉ）の化合物は、非晶質の式（Ｉ）を含む製剤として供給された。化合物は遮光されて４℃で保存された。式（Ｉ）の化合物はビヒクル中で毎日製剤化された。製剤化された式（Ｉ）の化合物は、４℃で遮光されて保存された場合、２４時間安定である。

式（Ｉ）の化合物は、１００ｍｇ／ｋｇで１日１回、２群および４群に経口投与された。

ゲムシタビンは中国のＳｅｌｌｅｃｋ社（カタログ番号Ｓ１１４９）から購入され、滅菌生理食塩水中で製剤化された。ゲムシタビンは、３群および４群に対して、２０ｍｐｋを使用してＩＰ投与された。

１群（ビヒクルのみ）のビヒクル調製は、式（Ｉ）の化合物の製剤と合致させた。ビヒクルは毎日新しく製剤化され、４℃で保存された場合、２４時間安定である。
結果：

ビヒクル処置（１群）は忍容性良好であり、処置２日目のＢＷＬの最大中央値は２％であった。腫瘍体積は、試験終了の２１日目に９６５ｍｍ^３の中央値に達した。

１００ｍｇ／ｋｇの式（Ｉ）の化合物単独での処置（２群）は忍容性良好であり、処置１４日目のＢＷＬの最大中央値は７％であった。腫瘍体積は、試験終了の２１日目に３２０ｍｍ^３の中央値に達した（ＴＧＩ＝８３％）。

１０ｍｐ／ｋｇのゲムシタビンの単独での処置は忍容性良好であり、８日目のＢＷＬの最大中央値は５％であった。腫瘍体積は、試験終了の２１日目に５２９ｍｍ^３の中央値に達した（ＴＧＩ＝５６％）。

式（Ｉ）の化合物とゲムシタビンの併用を用いた処置は忍容性良好であり、９日目のＢＷＬの中央値は５％であった。腫瘍体積は、試験終了の２１日目に２７４ｍｍ^３の中央値に達した（ＴＧＩ＝８９％）。

各群の腫瘍体積を表２８に示し、図１９に図示する。併用の利益（本明細書に記載される方法）は０～２１日目のデータを使用して評価された。併用の結果を表２９に示す。

実施例１６：膵臓ＫＰ４モデルにおける式（Ｉ）の化合物とゲムシタビン療法の併用
試験目的：本試験の目的は、メスマウスにおいて定着したＭＴＡＰ欠損性膵臓異種移植片腫瘍（ＫＰ４）に対する、単独およびゲムシタビンとの併用における、式（Ｉ）の化合物の１日１回（ＰＯ）投与の潜在的な有効性を評価することであった。

試験デザイン：５～６週齢のメスのＣＢ－１７ ＳＣＩＤマウスに、無血清培地＋マトリゲル（１：１）中の１ｘ１０^７個のＫＰ４細胞を皮下接種した。２６日目に腫瘍が平均２００ｍｍ３に達したときに、マウスを処置群に無作為化し、以下の表３０に概説されるように投与した。

材料および方法：腫瘍体積はキャリパーを使用して２次元で週に２回測定され、体積は、以下の式を使用してｍｍ^３単位で表された：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）／２。式中、Ｖは腫瘍体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（最長の腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直）である。体重は、週に２回測定された。

式（Ｉ）の化合物は、非晶質の式（Ｉ）を含む製剤として供給された。化合物は、遮光されて４℃で保存された。式（Ｉ）の化合物は、ビヒクル中で毎日製剤化された。製剤化された式（Ｉ）の化合物は、４℃で遮光されて保存された場合、２４時間安定である。

式（Ｉ）の化合物は、１００ｍｇ／ｋｇで１日１回、２群および４群に経口投与された。

ゲムシタビンはＭｙｏｄｅｒｍ社（カタログ番号００００２－７５０１－０１）から購入され、滅菌注射用に０．９％ ＮａＣｌ中で製剤化された。ゲムシタビンは、３群および４群に対して、２０ｍｇ／ｋｇを使用してＩＰ投与された。

１群（ビヒクルのみ）のビヒクル調製は、式（Ｉ）の化合物の製剤と合致させた。ビヒクルは毎日新しく製剤化され、４℃で保存された場合、２４時間安定である。
結果：

試験中、ビヒクルを用いた処置は忍容性良好であり、体重減少（ＢＷＬ）は０であった。腫瘍体積は、１群終了の処置１９日目に１６８７．４ｍｍ^３の中央値に達した。

１００ｍｇ／ｋｇの式（Ｉ）の化合物単独での処置（２群）は忍容性良好であり、処置４日目のＢＷＬの最大中央値は３％であった。腫瘍体積は、２群終了の処置３６日目に１４２６．７ｍｍ^３の中央値に達した。

２０ｍｐ／ｋｇのゲムシタビンの単独での処置は忍容性良好であり、処置３日目のＢＷＬの最大中央値は３％であった。腫瘍体積は、３群終了の処置２２日目に１３１８．６１ｍｍ^３の中央値に達した。

１００ｍｇ／ｋｇの式（Ｉ）の化合物と２０ｍｇ／ｋｇのゲムシタビンの併用を用いた処置は忍容性良好であり、処置１０日目のＢＷＬの中央値は５％であった。腫瘍体積は、４群終了の処置３６日目に１２８４．３ｍｍ^３の中央値に達した。

各群の腫瘍体積の結果を表３１に示し、図２０に図示する。併用の利益（本明細書に記載される方法）は０～１９日目のデータを使用して評価された。併用の結果を表３２に示す。

実施例１７：ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデルにおける式（Ｉ）の化合物とゲムシタビン療法の併用
ＭＴＡＰ欠損性ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデル（ＬＵ１５１３）において、ゲムシタビン（１、４、７、１０および１３日目にＩＰ ２０ｍｐｋ）を、式（Ｉ）の化合物（３８日間のＰＯ １００ｍｐｋ）と併用し、抗腫瘍の併用利益を評価した。実験の１１日目に、併用群の１２匹の動物中１匹が、処置前体重の２８％を失った。この併用は（このモデルにおいて）忍容性良好ではなく、抗腫瘍の併用利益評価から除外された。

実施例１８：ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデル（ＬＵ６４３１）における式（Ｉ）の化合物とゲムシタビン療法の併用
ＭＴＡＰ欠損性ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデル（ＬＵＸ６４３１）において、ゲムシタビン（ＩＰ投与で、Ｑ３Ｄのスケジュール）を、式（Ｉ）の化合物（１００ｍｐｋ ＰＯで投与され、ＱＤスケジュール）と併用し、抗腫瘍の併用利益を評価した。各群には定着したＬＵＸ６４３１腫瘍を担持する１２匹のメスのＢＡＬＢ／ｃマウスが含まれた。１群はビヒクル処置であり、２群は式（Ｉ）に示される化合物であり、３群はゲムシタビン（２０．０ｍｇ／ｋｇ）であり、４群は式（Ｉ）の化合物とゲムシタビン（２０．０ｍｇ／ｋｇ）の併用である。すべての処置は、忍容性良好であった。腫瘍増殖阻害（本明細書に記載される方法）は２２日目に計算され、式（Ｉ）の化合物（２群）ではＴＧＩ＝４５％となり、ゲムシタビン２０ｍｇ／ｋｇ（３群）はＴＧＩ＝４３％となり、および式（Ｉ）の化合物とゲムシタビン２０．０ｍｇ／ｋｇの併用（４群）はＴＧＩ＝６９％となった。腫瘍増殖曲線の結果を図２１に示す。併用の利益（本明細書に記載される方法）は２２日目に評価された。

実施例１９：ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデルにおける式（Ｉ）の化合物とパクリタキセル療法の併用
ＭＴＡＰ欠損性ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデル（ＬＵ１５１３）において、パクリタキセル（１、８、１５、および３８日目にＩＰ １５ｍｐｋ）を、式（Ｉ）の化合物（３８日間のＰＯ １００ｍｐｋ）と併用し、抗腫瘍の併用利益を評価した。ＬＵ１５１３モデルは、パクリタキセル耐性であることが判明し、ＴＧＩ＝－６％であった。この結果と一致して、式（Ｉ）の化合物の単剤のＴＧＩ（７４％）は、併用のＴＧＩ（７８％）と同等であった。このモデルはパクリタキセル耐性により併用利益の評価から除外された。

本明細書に引用される全ての公表文献、特許および特許出願は、当該引用が使用される教示に対し、参照により本明細書に組み込まれる。

観察される特定の応答は、選択された特定の活性化合物、または組み合わせの投与、ならびに採用される製剤のタイプおよび投与様式に従い、およびそれらに応じて変化し得る。そのように予測される結果の変動または差異は、本発明の実施に従い予期される。

本発明の特定の実施形態が本明細書に例証され、詳述されているが、本発明はそれに限定されるものではない。上述の発明を実施するための形態は、本発明の例示として提供され、本発明のいかなる制限を構成するものとしても解釈されるべきではない。改変は、当業者には明らかであり、本発明の趣旨から逸脱しないすべての改変は、添付の特許請求の範囲の適用範囲に含まれることが意図される。

Claims (34)

1. その必要のある患者において、ＭＴＡＰ欠損性非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）を治療する方法であって、
   （ａ）以下の式（Ｉ）の化合物：
   

   

   またはその薬学的に許容可能な塩の治療有効量、および
   （ｂ）タキサンの治療有効量、を投与することを含む、方法。
2. 治療有効量のタキサンと併用される、ＭＴＡＰ欠損性非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）の治療における使用のための以下の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩：
   

   

   。
3. 前記タキサンが、ドセタキセル、パクリタキセル、またはｎａｂ－パクリタキセルである、請求項１に記載の方法または請求項２に記載の化合物。
4. 前記タキサンが、ドセタキセルである、請求項３に記載の方法または化合物。
5. 一つ以上の追加の治療剤を投与することをさらに含む、請求項１、３または４に記載の方法。
6. 前記組み合わせが、一つ以上の追加の治療剤をさらに含む、請求項２～４のいずれか一項に記載の化合物。
7. 前記追加の治療剤が、プラチナ系化学療法剤である、請求項５に記載の方法または請求項６に記載の化合物。
8. 前記プラチナ系化学療法剤が、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、ネダプラチン、四硝酸トリプラチン、フェナントリプラチン、ピコプラチン、またはサトラプラチンである、請求項７に記載の方法または化合物。
9. 前記プラチナ系化学療法剤が、カルボプラチンまたはシスプラチンである、請求項７もしくは８に記載の方法または化合物。
10. 前記患者が、ＭＴＡＰ欠損性ＮＳＣＬＣを治療するための一つ以上の従前の治療選択の後に、反応せず、反応を停止し、または疾患の進行を経験した、請求項１、３～５または７～９のいずれか一項に記載の方法。
11. 式（Ｉ）の前記化合物またはその薬学的に許容可能な塩が、ＭＴＡＰ欠損性ＮＳＣＬＣを治療するための第二の治療選択である、請求項１０に記載の方法または化合物。
12. 式（Ｉ）の前記化合物またはその薬学的に許容可能な塩が、ＭＴＡＰ欠損性ＮＳＣＬＣを治療するための第三の治療選択である、請求項１０に記載の方法または化合物。
13. 前記ＭＴＡＰ欠損性ＮＳＣＬＣが、新たに診断される、請求項１～１２のいずれか一項に記載の方法または化合物。
14. 式（Ｉ）の前記化合物またはその薬学的に許容可能な塩の投与量は、約２０ｍｇ～約８００ｍｇである、請求項１～１３のいずれか一項に記載の方法または化合物。
15. 式（Ｉ）の前記化合物またはその薬学的に許容可能な塩の投与量は、１日１回または１日２回の投与である、請求項１～１４のいずれか一項に記載の方法または化合物。
16. 式（Ｉ）の前記化合物またはその薬学的に許容可能な塩が、経口投与される、または経口投与用に製剤化される、請求項１～１５のいずれか一項に記載の方法または化合物。
17. その必要のある患者において、ＭＴＡＰ欠損性膵がんを治療する方法であって、
    （ａ）以下の式（Ｉ）の化合物：
    

    

    またはその薬学的に許容可能な塩の治療有効量、および
    （ｂ）タキサンの治療有効量、を投与することを含む、方法。
18. 治療有効量のタキサンと併用される、ＭＴＡＰ欠損性膵がんの治療における使用のための以下の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩：
    

    

    。
19. 前記タキサンが、パクリタキセル、ｎａｂ－パクリタキセル、またはドセタキセルである、請求項１７に記載の方法または請求項１８に記載の化合物。
20. 前記タキサンが、ｎａｂ－パクリタキセルである、請求項１９に記載の方法または化合物。
21. 治療有効量のＤＮＡ合成阻害剤を投与することをさらに含む、請求項１７、１９または２０のいずれか一項に記載の方法。
22. 前記組み合わせが、治療有効量のＤＮＡ合成阻害剤をさらに含む、請求項１８～２０のいずれか一項に記載の化合物。
23. 前記ＤＮＡ合成阻害剤が、ゲムシタビンである、請求項２１もしくは２２に記載の方法または化合物。
24. 前記患者が、ＭＴＡＰ欠損性膵がんを治療するための一つ以上の従前の治療選択の後に、反応せず、反応を停止し、または疾患の進行を経験した、請求項１７、１９～２１または２３のいずれか一項に記載の方法。
25. 式（Ｉ）の前記化合物またはその薬学的に許容可能な塩が、ＭＴＡＰ欠損性膵がんを治療するための第二の治療選択である、請求項２４に記載の方法または化合物。
26. 式（Ｉ）の前記化合物またはその薬学的に許容可能な塩が、ＭＴＡＰ欠損性膵がんを治療するための第三の治療選択である、請求項２５に記載の方法または化合物。
27. 前記ＭＴＡＰ欠損性膵がんが、新たに診断される、請求項１７～２６のいずれか一項に記載の方法または化合物。
28. 式（Ｉ）の前記化合物またはその薬学的に許容可能な塩の投与量は、約２０ｍｇ～約８００ｍｇである、請求項１７～２７のいずれか一項に記載の方法または化合物。
29. 式（Ｉ）の前記化合物またはその薬学的に許容可能な塩の投与量は、１日１回または１日２回の投与から選択される、請求項１７～２８のいずれか一項に記載の方法または化合物。
30. 式（Ｉ）の前記化合物またはその薬学的に許容可能な塩の投与が、経口であるか、または前記化合物が、経口投与用に製剤化される、請求項１７～２９のいずれか一項に記載の方法または化合物。
31. 前記膵がんが、膵管腺がん（ＰＤＡＣ）である、請求項１７～２７のいずれか一項に記載の方法または化合物。
32. 前記膵がんが、切除されていない、局所的に進行している、または転移性である、請求項１７～３１のいずれか一項に記載の方法または化合物。
33. 式（Ｉ）の前記化合物またはその薬学的に許容可能な塩、および前記タキサンが、同時に投与される、請求項１、３～５、７～１７、１９～２１、または２３～３２のいずれか一項に記載の方法。
34. 式（Ｉ）の前記化合物またはその薬学的に許容可能な塩、および前記タキサンが、連続して投与される、請求項１、３～５、７～１７、１９～２１、または２３～３２のいずれか一項に記載の方法。

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