JP2020158438A

JP2020158438A - Cancer metastasis inhibitor

Info

Publication number: JP2020158438A
Application number: JP2019059018A
Authority: JP
Inventors: 鈴木　元; Hajime Suzuki; 鈴木　　元; 俊幸竹内; Toshiyuki Takeuchi; 隆高橋; Takashi Takahashi; 久徳磯村; Hisanori Isomura; 惠子小泉; Keiko Koizumi; 隆幸安藤; Takayuki Ando
Original assignee: Fujita Health University
Current assignee: Fujita Health University
Priority date: 2019-03-26
Filing date: 2019-03-26
Publication date: 2020-10-01

Abstract

To provide a cancer metastasis inhibitor that is useful even for cancer therapy.SOLUTION: The present invention provides a compound represented by the following formula or a salt thereof [where X is a substituted or unsubstituted C6-10 aryl or 5 membered-10 membered heteroaryl; R1 is hydrogen, halogen, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl or C1-6 alkoxy; R2 is hydrogen, halogen, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl, C1-6 alkoxy, a substituted or unsubstituted C6-10 aryl or 5 membered or 6 membered heteroaryl; R3 is hydrogen, halogen, carboxyl, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl, C1-6 alkoxy, C1-6 alkoxycarbonyl, or a substituted or unsubstituted C6-10 aryl; or R2 and R3 form, together with atoms to which they bind, a substituted or unsubstituted 6 membered ring.].SELECTED DRAWING: None

Description

本発明は、がん転移抑制剤に関する。具体的には、本発明は、トリアゾロピリミジン骨格を有する化合物またはその塩を含有するがん転移抑制剤に関する。 The present invention relates to a cancer metastasis inhibitor. Specifically, the present invention relates to a cancer metastasis inhibitor containing a compound having a triazolopyrimidine skeleton or a salt thereof.

セラミド合成酵素の一種である、Ceramide synthase 6（以下、ＣＥＲＳ６と称する）は、スフィンゴ脂質代謝経路において、スフィンガニンからセラミドを合成する働きをする酵素である。
ＣＥＲＳ６は、肺がんにおいて過剰発現することが知られており、その過剰発現したＣＥＲＳ６は、Ｃ１６セラミドと呼ばれる生理活性脂質を合成し、合成された生理活性脂質が細胞内のプロテインキナーゼζ・ＲＡＣ１複合体を活性化することにより、細胞表面にラメリポディアと呼ばれる細胞遊走に必須となる形態を形成して、がん細胞の転移を促進することが報告されている（非特許文献１）。 Ceramide synthase 6 (hereinafter referred to as CERS6), which is a kind of ceramide synthase, is an enzyme that functions to synthesize ceramide from sphinganine in the sphingolipid metabolic pathway.
CERS6 is known to be overexpressed in lung cancer, and the overexpressed CERS6 synthesizes a bioactive lipid called C16 ceramide, and the synthesized bioactive lipid is an intracellular protein kinase ζ / RAC1 complex. It has been reported that by activating ceramide, a morphology called lamellipodia, which is essential for cell migration, is formed on the cell surface to promote the metastasis of cancer cells (Non-Patent Document 1).

がんに対しては外科的治療、化学療法、放射線療法が主な治療法として行われているが、十分な効果が得られる治療法はいまだ確立されていない。また、がん治療においてがん自体の根絶と共にがん転移を阻止することも重要であり、がん転移を効果的に抑制する方法の確立も求められている。そのため、ＣＥＲＳ６を標的とした薬剤の開発は、がんの新たながんの治療法につながることが期待される。 Surgical treatment, chemotherapy, and radiation therapy are the main treatments for cancer, but no treatment that is fully effective has yet been established. In addition, it is important to prevent cancer metastasis as well as eradicate the cancer itself in cancer treatment, and it is also required to establish a method for effectively suppressing cancer metastasis. Therefore, the development of drugs targeting CERS6 is expected to lead to new cancer therapies.

これまでに、セラミド合成酵素阻害剤としては、フモニシンＢ_１が知られているが、これは、トリアゾロピリミジン骨格を有する化合物とは全く構造が異なる。また、トリアゾロピリミジン骨格を有する化合物がＣＳＲＳ６阻害活性を有するとの報告はない。 So far, as a ceramide synthase inhibitor, but fumonisin B ₁ is known, which is quite different structure from the compounds having the triazolopyrimidine skeleton. In addition, there is no report that a compound having a triazolopyrimidine skeleton has a CSRS6 inhibitory activity.

Journal of Clinical Investigation, 2016Journal of Clinical Investigation, 2016

本発明は、トリアゾロピリミジン骨格を有する化合物またはその塩を含有するがん転移抑制剤を提供することを目的とする。 An object of the present invention is to provide a cancer metastasis inhibitor containing a compound having a triazolopyrimidine skeleton or a salt thereof.

本発明者らは、上記課題を解決すべく、ＣＥＲＳ６が肺がんにおいて高発現することによりがん転移が促進されるとの知見に基づき、約27,000種類の化合物のスクリーニングを行い、既存化合物の中から優れたＣＥＲＳ６阻害活性を有する化合物を鋭意検討した結果、様々な構造を有する被験化合物の中で、トリアゾロピリミジン骨格を有する、下記式（Ｉ）で示される化合物またはその塩（以下、「本発明の化合物」と称することもある。）が優れたＣＥＲＳ６阻害活性を有し、さらに、がん細胞遊走能の阻害活性を有することを見出し、本発明を完成させた。 In order to solve the above problems, the present inventors screened about 27,000 kinds of compounds based on the finding that high expression of CERS6 in lung cancer promotes cancer metastasis, and among existing compounds. As a result of diligent studies on compounds having excellent CERS6 inhibitory activity, among the test compounds having various structures, the compound represented by the following formula (I) or a salt thereof having a triazolopyrimidine skeleton (hereinafter, "the present invention"). (Sometimes referred to as "compound of") has an excellent CERS6 inhibitory activity, and further has an inhibitory activity on cancer cell migration ability, and completed the present invention.

すなわち、本発明は、以下の態様を提供するものである。
［１］式（Ｉ）：
［式中：
Ｘは、Ｃ_６−１０アリールまたは５員〜１０員のヘテロアリールであり、ここで、該Ｃ_６−１０アリールまたは５員〜１０員のヘテロアリールは、置換可能な位置で、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、フェニルおよびベンジルオキシからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよく；
Ｒ^１は、水素、ハロゲン、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキルまたはＣ_１−６アルコキシであり；および
Ｒ^２は、水素、ハロゲン、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、Ｃ_６−１０アリールまたは５員もしくは６員のヘテロアリールであり、ここで、該Ｃ_６−１０アリールおよび５員もしくは６員のヘテロアリールは、置換可能な位置で、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、フェニルおよびベンジルオキシからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよく、Ｒ^３は、水素、ハロゲン、カルボキシル、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、Ｃ_１−６アルコキシカルボニルまたはＣ_６−１０アリールであり、ここで、該Ｃ_６−１０アリールは、置換可能な位置で、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、フェニルおよびベンジルオキシからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよいか、あるいは、Ｒ^２およびＲ^３は、それらの結合する原子と一緒になって、６員環を形成し、ここで、該６員環は、置換可能な位置で、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、＝Ｏ、フェニル、−Ｃ_１−４アルキレン−フェニルおよび＝ＣＨ−フェニルからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい（該フェニルは、置換可能な位置で、ハロゲンおよびＣ_１−６アルコキシからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい）］
で示される化合物またはその塩を含む、がん転移抑制剤。
［２］Ｘが、フェニルまたはヘテロ原子として少なくとも１個の酸素原子のみを含有する５員〜１０員のヘテロアリールであり、ここで、該フェニルおよび５員〜１０員のヘテロアリールは、置換可能な位置で、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシおよびベンジルオキシからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよく；
Ｒ^１が、水素またはＣ_１−６ハロアルキルであり；および
Ｒ^２が、Ｃ_１−６アルキル、フェニルまたはヘテロ原子として１個の酸素原子のみを含有する５員のヘテロアリールであり、ここで、該フェニルおよび５員のヘテロアリールは、ハロゲン、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシおよびフェニルからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよく、Ｒ^３が、水素、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシカルボニルまたはＣ_１−６アルキルもしくはＣ_１−６アルコキシで置換されているフェニルであるか、あるいは、Ｒ^２およびＲ^３が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、Ｃ_６炭素環を形成し、ここで、該Ｃ_６炭素環は、＝Ｏ、フェニルまたは＝ＣＨ−フェニルで置換されていてもよい（該フェニルは、ハロゲンまたはＣ_１−６アルコキシで置換されていてもよい）、［１］のがん転移抑制剤。
［３］Ｘが、フェニル、フランまたは１，３−ベンゾジオキソールであり、ここで、該フェニル、フランおよび１，３−ベンゾジオキソールは、置換可能な位置で、ハロゲン、ヒドロキシ、メチル、メトキシおよびベンジルオキシからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよく；
Ｒ^１が、水素またはＣ_１ハロアルキルであり；および
Ｒ^２が、メチル、フェニルまたはフランであり、ここで、該フェニルおよびフランは、ハロゲン、メチル、メトキシまたはフェニルで置換されていてもよく、Ｒ^３が、水素、メチル、メトキシカルボニルまたはメトキシフェニルであるか、あるいは、Ｒ^２およびＲ^３が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、＝ＣＨ−フェニル（該フェニルは、ハロゲンで置換されている）で置換されているシクロヘキセンまたはメトキシフェニルで置換されているシクロヘキセノンを形成する、［１］または［２］のがん転移抑制剤。
［４］Ｘが、フェニル、フランまたは１，３−ベンゾジオキソールであり、ここで、該フェニルは、置換可能な位置で、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヒドロキシ、メチル、メチルメトキシおよびベンジルオキシからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されており；
Ｒ^１が、水素またはトリフルオロメチルであり；および
Ｒ^２が、メチル、フェニルまたはフランであり、ここで、該フェニルは、フルオロ、クロロ、メチル、メトキシまたはフェニルで置換されていてもよく、Ｒ^３が、水素、メチル、メトキシカルボニルまたはメトキシフェニルであるか、あるいは、Ｒ^２およびＲ^３が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、＝ＣＨ−ブロモフェニルで置換されているシクロヘキセンまたはメトキシフェニルで置換されている２−シクロヘキセン−１−オンを形成する、［１］〜［３］のいずれかのがん転移抑制剤。
［５］化合物が、以下：
から選択される、［１］〜［４］のいずれかのがん転移抑制剤。
［６］式（Ｉ）：
［式中：
Ｘは、Ｃ_６−１０アリールまたは５員〜１０員のヘテロアリールであり、ここで、該Ｃ_６−１０アリールまたは５員〜１０員のヘテロアリールは、置換可能な位置で、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、フェニルおよびベンジルオキシからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよく；
Ｒ^１は、水素、ハロゲン、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキルまたはＣ_１−６アルコキシであり；および
Ｒ^２は、水素、ハロゲン、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、Ｃ_６−１０アリールまたは５員もしくは６員のヘテロアリールであり、ここで、該Ｃ_６−１０アリールおよび５員もしくは６員のヘテロアリールは、置換可能な位置で、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、フェニルおよびベンジルオキシからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよく、Ｒ^３は、水素、ハロゲン、カルボキシル、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、Ｃ_１−６アルコキシカルボニルまたはＣ_６−１０アリールであり、ここで、該Ｃ_６−１０アリールは、置換可能な位置で、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、フェニルおよびベンジルオキシからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよいか、あるいは、Ｒ^２およびＲ^３は、それらの結合する原子と一緒になって、６員環を形成し、ここで、該６員環は、置換可能な位置で、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、＝Ｏ、フェニル、−Ｃ_１−４アルキレン−フェニルおよび＝ＣＨ−フェニルからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい（該フェニルは、置換可能な位置で、ハロゲンおよびＣ_１−６アルコキシからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい）］
で示される化合物またはその塩を含む、がん治療剤。
［７］化合物が、以下：
から選択される、［６］のがん治療剤。
［８］式（Ｉ）：
［式中：
Ｘは、Ｃ_６−１０アリールまたは５員〜１０員のヘテロアリールであり、ここで、該Ｃ_６−１０アリールまたは５員〜１０員のヘテロアリールは、置換可能な位置で、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、フェニルおよびベンジルオキシからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよく；
Ｒ^１は、水素、ハロゲン、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキルまたはＣ_１−６アルコキシであり；および
Ｒ^２は、水素、ハロゲン、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、Ｃ_６−１０アリールまたは５員もしくは６員のヘテロアリールであり、ここで、該Ｃ_６−１０アリールおよび５員もしくは６員のヘテロアリールは、置換可能な位置で、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、フェニルおよびベンジルオキシからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよく、Ｒ^３は、水素、ハロゲン、カルボキシル、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、Ｃ_１−６アルコキシカルボニルまたはＣ_６−１０アリールであり、ここで、該Ｃ_６−１０アリールは、置換可能な位置で、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、フェニルおよびベンジルオキシからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよいか、あるいは、Ｒ^２およびＲ^３は、それらの結合する原子と一緒になって、６員環を形成し、ここで、該６員環は、置換可能な位置で、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、＝Ｏ、フェニル、−Ｃ_１−４アルキレン−フェニルおよび＝ＣＨ−フェニルからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい（該フェニルは、置換可能な位置で、ハロゲンおよびＣ_１−６アルコキシからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい）］
で示される化合物またはその塩を含む、転移ニッチ形成阻害剤。
［９］化合物が、以下：
から選択される、［８］の転移ニッチ形成阻害剤。
［１０］式（Ｉ）：
［式中：
Ｘは、Ｃ_６−１０アリールまたは５員〜１０員のヘテロアリールであり、ここで、該Ｃ_６−１０アリールまたは５員〜１０員のヘテロアリールは、置換可能な位置で、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、フェニルおよびベンジルオキシからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよく；
Ｒ^１は、水素、ハロゲン、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキルまたはＣ_１−６アルコキシであり；および
Ｒ^２は、水素、ハロゲン、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、Ｃ_６−１０アリールまたは５員もしくは６員のヘテロアリールであり、ここで、該Ｃ_６−１０アリールおよび５員もしくは６員のヘテロアリールは、置換可能な位置で、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、フェニルおよびベンジルオキシからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよく、Ｒ^３は、水素、ハロゲン、カルボキシル、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、Ｃ_１−６アルコキシカルボニルまたはＣ_６−１０アリールであり、ここで、該Ｃ_６−１０アリールは、置換可能な位置で、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、フェニルおよびベンジルオキシからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよいか、あるいは、Ｒ^２およびＲ^３は、それらの結合する原子と一緒になって、６員環を形成し、ここで、該６員環は、置換可能な位置で、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、＝Ｏ、フェニル、−Ｃ_１−４アルキレン−フェニルおよび＝ＣＨ−フェニルからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい（該フェニルは、置換可能な位置で、ハロゲンおよびＣ_１−６アルコキシからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい）］
で示される化合物またはその塩を含む、ＣＥＲＳ６阻害剤。
［１１］化合物が、以下：
から選択される、［１０］のＣＥＲＳ６阻害剤。 That is, the present invention provides the following aspects.
[1] Equation (I):
[During the ceremony:
X is a C _6-10 aryl or a 5- to 10-membered heteroaryl, wherein the C _6-10 aryl or a 5- to 10-membered heteroaryl is a halogen, hydroxy, at a substitutable position. It may be substituted with one or two or more groups selected from the group consisting of C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl and benzyloxy;
R ¹ is hydrogen, halogen, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl or C _1-6 alkoxy; and R ² is hydrogen, halogen, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C. _1-6 alkoxy, C _6-10 aryl or 5- or 6-membered heteroaryl, wherein the C _6-10 aryl and 5- or 6-membered heteroaryl are halogen, at substitutable positions. It may be substituted with one or two or more groups selected from the group consisting of hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl and benzyloxy. R ³ is hydrogen, halogen, carboxyl, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, C _1-6 alkoxycarbonyl or C _6-10 aryl, wherein the C _{6- The 10} aryl is one or the same or different 2 selected from the group consisting of halogen, hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl and benzyloxy at substitutable positions. It may be substituted with one or more groups, or R ² and R ³ together with their bonding atoms form a 6-membered ring, where the 6-membered ring is substituted. Select from the group consisting of halogen, hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, = O, phenyl, -C _1-4 alkylene-phenyl and = CH-phenyl where possible It may be substituted with one or two or more groups that are identical or different (the phenyl is one or the same or the same or selected from the group consisting of halogens and C _1-6 alkoxy at substitutable positions. It may be substituted with two or more different groups)]
A cancer metastasis inhibitor containing the compound indicated by or a salt thereof.
[2] X is a 5- to 10-membered heteroaryl containing only at least one oxygen atom as a phenyl or heteroatom, where the phenyl and the 5- to 10-membered heteroaryl are substitutable. At appropriate positions, they may be substituted with one or more than one group selected from the group consisting of halogen, hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 alkoxy and benzyloxy;
R ¹ is hydrogen or C _1-6 haloalkyl; and R ² is C _1-6 alkyl, a 5-membered heteroaryl containing only one oxygen atom as phenyl or heteroatom, where. The phenyl and the 5-membered heteroaryl may be substituted with one or two or more groups selected from the group consisting of halogen, C _1-6 alkyl, C _1-6 alkoxy and phenyl. , R ³ is a phenyl substituted with hydrogen, C _1-6 alkyl, C _1-6 alkoxycarbonyl or C _1-6 alkyl or C _1-6 alkoxy, or R ² and R ³ are together with the carbon atoms to which they are attached form a C ₆ carbocyclic ring, wherein said C ₆ carbocyclic ring, = O, phenyl or = CH- optionally substituted with phenyl (said phenyl , May be substituted with halogen or C _1-6 alkoxy), the cancer metastasis inhibitor of [1].
[3] X is phenyl, furan or 1,3-benzodioxole, where the phenyl, furan and 1,3-benzodioxole are at substitutable positions, halogen, hydroxy, methyl. , Which may be substituted with one or more identical or different groups selected from the group consisting of methoxy and benzyloxy;
R ¹ is hydrogen or C ₁ haloalkyl; and R ² is methyl, phenyl or furan, where the phenyl and furan may be substituted with halogen, methyl, methoxy or phenyl, R. ³ is hydrogen, methyl, methoxycarbonyl or methoxyphenyl, or R ² and R ³ together with the carbon atom to which they are attached = CH-phenyl (the phenyl is substituted with halogen). The cancer metastasis inhibitor of [1] or [2] that forms cyclohexene substituted with () or cyclohexenone substituted with methoxyphenyl.
[4] X is phenyl, furan or 1,3-benzodioxole, where the phenyl is from fluoro, chloro, bromo, hydroxy, methyl, methylmethoxy and benzyloxy at substitutable positions. Substituted with one or more identical or different groups selected from the group;
R ¹ is hydrogen or trifluoromethyl; and R ² is methyl, phenyl or furan, where the phenyl may be substituted with fluoro, chloro, methyl, methoxy or phenyl, R. Cyclohexene or methoxy where ³ is hydrogen, methyl, methoxycarbonyl or methoxyphenyl, or R ² and R ³ are substituted with = CH-bromophenyl, together with the carbon atom to which they are attached. The cancer metastasis inhibitor according to any one of [1] to [3], which forms 2-cyclohexene-1-one substituted with phenyl.
[5] The compounds are as follows:
A cancer metastasis inhibitor selected from any of [1] to [4].
[6] Equation (I):
[During the ceremony:
X is a C _6-10 aryl or a 5- to 10-membered heteroaryl, wherein the C _6-10 aryl or a 5- to 10-membered heteroaryl is a halogen, hydroxy, at a substitutable position. It may be substituted with one or two or more groups selected from the group consisting of C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl and benzyloxy;
R ¹ is hydrogen, halogen, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl or C _1-6 alkoxy; and R ² is hydrogen, halogen, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C. _1-6 alkoxy, C _6-10 aryl or 5- or 6-membered heteroaryl, wherein the C _6-10 aryl and 5- or 6-membered heteroaryl are halogen, at substitutable positions. It may be substituted with one or two or more groups selected from the group consisting of hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl and benzyloxy. R ³ is hydrogen, halogen, carboxyl, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, C _1-6 alkoxycarbonyl or C _6-10 aryl, wherein the C _{6- The 10} aryl is one or the same or different 2 selected from the group consisting of halogen, hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl and benzyloxy at substitutable positions. It may be substituted with one or more groups, or R ² and R ³ together with their bonding atoms form a 6-membered ring, where the 6-membered ring is substituted. Select from the group consisting of halogen, hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, = O, phenyl, -C _1-4 alkylene-phenyl and = CH-phenyl where possible It may be substituted with one or two or more groups that are identical or different (the phenyl is one or the same or the same or selected from the group consisting of halogens and C _1-6 alkoxy at substitutable positions. It may be substituted with two or more different groups)]
A cancer therapeutic agent containing the compound indicated by or a salt thereof.
[7] The compounds are as follows:
The cancer therapeutic agent of [6] selected from.
[8] Equation (I):
[During the ceremony:
X is a C _6-10 aryl or a 5- to 10-membered heteroaryl, wherein the C _6-10 aryl or a 5- to 10-membered heteroaryl is a halogen, hydroxy, at a substitutable position. It may be substituted with one or two or more groups selected from the group consisting of C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl and benzyloxy;
R ¹ is hydrogen, halogen, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl or C _1-6 alkoxy; and R ² is hydrogen, halogen, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C. _1-6 alkoxy, C _6-10 aryl or 5- or 6-membered heteroaryl, wherein the C _6-10 aryl and 5- or 6-membered heteroaryl are halogen, at substitutable positions. It may be substituted with one or two or more groups selected from the group consisting of hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl and benzyloxy. R ³ is hydrogen, halogen, carboxyl, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, C _1-6 alkoxycarbonyl or C _6-10 aryl, wherein the C _{6- The 10} aryl is one or the same or different 2 selected from the group consisting of halogen, hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl and benzyloxy at substitutable positions. It may be substituted with one or more groups, or R ² and R ³ together with their bonding atoms form a 6-membered ring, where the 6-membered ring is substituted. Select from the group consisting of halogen, hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, = O, phenyl, -C _1-4 alkylene-phenyl and = CH-phenyl where possible It may be substituted with one or two or more groups that are identical or different (the phenyl is one or the same or the same or selected from the group consisting of halogens and C _1-6 alkoxy at substitutable positions. It may be substituted with two or more different groups)]
A transition niche formation inhibitor comprising the compound indicated by or a salt thereof.
[9] The compounds are as follows:
The transfer niche formation inhibitor of [8] selected from.
[10] Equation (I):
[During the ceremony:
X is a C _6-10 aryl or a 5- to 10-membered heteroaryl, wherein the C _6-10 aryl or a 5- to 10-membered heteroaryl is a halogen, hydroxy, at a substitutable position. It may be substituted with one or two or more groups selected from the group consisting of C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl and benzyloxy;
R ¹ is hydrogen, halogen, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl or C _1-6 alkoxy; and R ² is hydrogen, halogen, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C. _1-6 alkoxy, C _6-10 aryl or 5- or 6-membered heteroaryl, wherein the C _6-10 aryl and 5- or 6-membered heteroaryl are halogen, at substitutable positions. It may be substituted with one or two or more groups selected from the group consisting of hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl and benzyloxy. R ³ is hydrogen, halogen, carboxyl, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, C _1-6 alkoxycarbonyl or C _6-10 aryl, wherein the C _{6- The 10} aryl is one or the same or different 2 selected from the group consisting of halogen, hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl and benzyloxy at substitutable positions. It may be substituted with one or more groups, or R ² and R ³ together with their bonding atoms form a 6-membered ring, where the 6-membered ring is substituted. Select from the group consisting of halogen, hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, = O, phenyl, -C _1-4 alkylene-phenyl and = CH-phenyl where possible. It may be substituted with one or two or more groups that are identical or different (the phenyl is one or the same or the same or selected from the group consisting of halogens and C _1-6 alkoxy at substitutable positions. It may be substituted with two or more different groups)]
A CERS6 inhibitor comprising the compound represented by or a salt thereof.
[11] The compounds are as follows:
The CERS6 inhibitor of [10] selected from.

さらに、本発明は、以下の態様を提供する。
［１２］治療を必要とする患者に、治療上の有効量の式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を投与することを特徴とする、がん転移を抑制する方法。
［１３］がん転移の抑制に使用する、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩。
［１４］がん転移抑制剤の製造における、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩の使用。
［１５］治療を必要とする患者に、治療上の有効量の式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を投与することを特徴とする、がん細胞遊走能を抑制する方法。
［１６］治療を必要とする患者に、治療上の有効量の式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を投与することを特徴とする、がん細胞浸潤を抑制する方法。
［１７］実験用試薬である、［１０］または［１１］のＣＥＲＳ６阻害剤。 Furthermore, the present invention provides the following aspects.
[12] A method for suppressing cancer metastasis, which comprises administering a therapeutically effective amount of a compound represented by the formula (I) or a salt thereof to a patient in need of treatment.
[13] A compound represented by the formula (I) or a salt thereof, which is used for suppressing cancer metastasis.
[14] Use of the compound represented by the formula (I) or a salt thereof in the production of a cancer metastasis inhibitor.
[15] A method for suppressing cancer cell migration ability, which comprises administering a therapeutically effective amount of a compound represented by the formula (I) or a salt thereof to a patient in need of treatment.
[16] A method for suppressing cancer cell infiltration, which comprises administering a therapeutically effective amount of a compound represented by the formula (I) or a salt thereof to a patient in need of treatment.
[17] The CERS6 inhibitor of [10] or [11], which is an experimental reagent.

本発明によれば、ＣＥＲＳ６阻害によってがん細胞遊走能を阻害することにより、がん転移を効果的に抑制することが期待できる。本発明は、がん治療における診断確定から手術実施までの待機期間中のがん転移を抑制すること、また、外科的治療後の患者に本発明の化合物を投与することで、がんを再発した場合でもがん転移を再発部位の局所のみに抑えることが期待される。
さらに、本発明は、がんを治療すること、および転移ニッチ形成を阻害することも期待できる。また、本発明の化合物はＣＥＲＳ６阻害剤として、実験用試薬で使用することができる。 According to the present invention, it can be expected that cancer metastasis can be effectively suppressed by inhibiting cancer cell migration ability by inhibiting CERS6. The present invention suppresses cancer metastasis during the waiting period from confirmation of diagnosis in cancer treatment to execution of surgery, and relapses cancer by administering the compound of the present invention to a patient after surgical treatment. Even if it does, it is expected that cancer metastasis will be suppressed only locally at the recurrence site.
In addition, the present invention can be expected to treat cancer and inhibit metastatic niche formation. In addition, the compound of the present invention can be used as a CERS6 inhibitor in an experimental reagent.

本明細書における用語について、以下に説明する。 The terms used herein will be described below.

本明細書における、「ハロゲン」とは、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を意味する。 As used herein, the term "halogen" means fluorine, chlorine, bromine or iodine.

本明細書における、「Ｃ_１−６アルキル」とは、１〜６個の炭素原子を有する、直鎖状または分枝鎖状の飽和炭化水素を意味する。これらは、置換可能な位置で、所望により本発明に含まれる１以上の置換基で置換されていてもよい。その例として、限定されるものではないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ぺンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル等が挙げられる。 As used herein, "C _1-6 alkyl" means a linear or branched-chain saturated hydrocarbon having 1 to 6 carbon atoms. These may be optionally substituted with one or more substituents included in the present invention at substitutable positions. Examples thereof include, but are not limited to, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, sec-butyl, tert-butyl, pentyl, isopentyl, neopentyl, hexyl and the like.

本明細書における、「Ｃ_１−４アルキレン」とは、１〜４個の炭素原子を有する、直鎖状または分枝鎖状の二価の飽和炭化水素基を意味する。その例として、例えば、メチレン、エチレン、プロピレン、ブチレン、１−メチルメチレン、１−エチルメチレン、１−プロピルメチレン、１−メチルエチレン、２−メチルエチレン、１−エチルエチレン等が挙げられる。 As used herein, the term "C _1-4 alkylene" means a linear or branched divalent saturated hydrocarbon group having 1 to 4 carbon atoms. Examples thereof include methylene, ethylene, propylene, butylene, 1-methylmethylene, 1-ethylmethylene, 1-propylmethylene, 1-methylethylene, 2-methylethylene, 1-ethylethylene and the like.

本明細書における、「Ｃ_１−６ハロアルキル」とは、１個以上の水素原子がハロゲン原子（複数可）によって置き換えられている、１〜６個の炭素原子を有する上記のアルキル基を意味する。置き換えられている水素原子の数は、１個から、最大で親アルキル基に他に存在しうる水素原子の総数の範囲まで及びうる。ハロゲン原子を複数有する場合は、同一または異なるハロゲン原子で置換されていてもよい。その例として、限定されるものではないが、フルオロメチル、クロロメチル、ブロモエチル、トリフルオロメチル、２，２，２−トリフルオロエチル等が挙げられる。 As used herein, the term "C _1-6 haloalkyl" means the above-mentioned alkyl group having 1 to 6 carbon atoms in which one or more hydrogen atoms are replaced by halogen atoms (s). .. The number of hydrogen atoms being replaced can range from one to a maximum of the total number of other hydrogen atoms that can be present in the parent alkyl group. When it has a plurality of halogen atoms, it may be substituted with the same or different halogen atoms. Examples thereof include, but are not limited to, fluoromethyl, chloromethyl, bromoethyl, trifluoromethyl, 2,2,2-trifluoroethyl and the like.

本明細書における、「Ｃ_１−６アルコキシ」とは、１〜６個の炭素原子を有する上記のアルキル基が酸素原子を介して結合している基を意味する。その例として、限定されるものではないが、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブチルオキシ、ペンチルオキシ、イソペンチルオキシ、ネオペンチルオキシ、ヘキシルオキシ等が挙げられる。 As used herein, the term "C _1-6 alkoxy" means a group in which the above-mentioned alkyl group having 1 to 6 carbon atoms is bonded via an oxygen atom. Examples thereof include, but are not limited to, methoxy, ethoxy, propoxy, isopropoxy, butyloxy, pentyloxy, isopentyloxy, neopentyloxy, hexyloxy and the like.

本明細書における、「Ｃ_１−６アルコキシカルボニル」とは、上記のアルコキシ基が結合している、カルボニル基を意味する。その例として、限定されるものではないが、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、プロポキシカルボニル、ブトキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、ヘキシルオキシカルボニル等が挙げられる。 As used herein, the term "C _1-6 alkoxycarbonyl" means a carbonyl group to which the above alkoxy group is attached. Examples thereof include, but are not limited to, methoxycarbonyl, ethoxycarbonyl, propoxycarbonyl, butoxycarbonyl, tert-butoxycarbonyl, hexyloxycarbonyl and the like.

本明細書における、「Ｃ_６炭素環」とは、６個の炭素原子を有する単環式の飽和または不飽和炭化水素基を意味する。これらは、置換可能な位置で、所望により本発明に含まれる１以上の置換基で置換されていてもよい。その例として、限定されるものではないが、シクロヘキサン、シクロヘキセン、シクロヘキサジエン、シクロヘキサノン、シクロヘキセノン等が挙がられる。 In this specification, the "C ₆ carbocycle" refers to a monocyclic saturated or unsaturated hydrocarbon group having 6 carbon atoms. These may be optionally substituted with one or more substituents included in the present invention at substitutable positions. Examples thereof include, but are not limited to, cyclohexane, cyclohexene, cyclohexadiene, cyclohexanone, cyclohexenone and the like.

本明細書における、「アリール」とは、芳香族環に結合する１個の水素原子が除外された、６個以上の炭素原子を有する単環または二環の芳香族炭化水素基を意味する。これらは、置換可能な位置で、所望により本発明に含まれる１以上の置換基で置換されていてもよい。好ましいアリールは、Ｃ_６−１０アリール、Ｃ_６−８アリール、Ｃ_６−７アリールが挙げられる。その例として、限定されるものではないが、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、アントラセニル等が挙げられる。 As used herein, the term "aryl" means a monocyclic or bicyclic aromatic hydrocarbon group having 6 or more carbon atoms, excluding one hydrogen atom bonded to the aromatic ring. These may be optionally substituted with one or more substituents included in the present invention at substitutable positions. Preferred aryls include C _6-10 aryls, C _6-8 aryls and C _6-7 aryls. Examples thereof include, but are not limited to, phenyl, 1-naphthyl, 2-naphthyl, anthracenyl and the like.

本明細書における、「ヘテロアリール」とは、環炭素の少なくとも１個が窒素原子、酸素原子および硫黄原子からなる群から選択されるヘテロ原子で置き換えられている、単環または二環の芳香族複素環基を意味する。これらは、置換可能な位置で、所望により本発明に含まれる１以上の置換基で置換されていてもよい。好ましいヘテロアリールは、３員〜１０員のヘテロアリール、５員〜１０員のヘテロアリール、５員または６員のヘテロアリールが挙げられる。例えば、「５員または６員のヘテロアリール」は、窒素原子、硫黄原子または酸素原子から選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含む、５員または６員の単環式複素環基を示す。その例として、限定されるものではないが、チオフェン、フラン、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、チアゾール、オキサゾール、イソチアゾール、イソオキサゾール、ピリジン、ピリミジン、ピラジン、ピリダジン、トリアジン、インドール、プリン、キノリン、イソキノリン等が挙げられる。 As used herein, "heteroaryl" is a monocyclic or bicyclic aromatic in which at least one of the ring carbons is replaced with a heteroatom selected from the group consisting of nitrogen, oxygen and sulfur atoms. It means a heterocyclic group. These may be optionally substituted with one or more substituents included in the present invention at substitutable positions. Preferred heteroaryls include 3- to 10-membered heteroaryls, 5- to 10-membered heteroaryls, and 5- or 6-membered heteroaryls. For example, "5- or 6-membered heteroaryl" refers to a 5- or 6-membered monocyclic heterocyclic group containing at least one heteroatom selected from nitrogen, sulfur or oxygen atoms. Examples thereof include, but are not limited to, thiophene, furan, pyrrole, imidazole, pyrazole, thiazole, oxazole, isothiazole, isoxazole, pyridine, pyrimidine, pyrazine, pyridazine, triazine, indol, purine, quinoline, isoquinoline and the like. Can be mentioned.

本明細書における、「置換されていてもよい」とは、基の置換可能な位置が置換されていない場合（無置換）と置換されている場合を含む。「無置換」とは、基の置換可能な位置が全て水素原子であることを意味する。置換されている場合は、可能であれば複数の置換基で置換されていてもよく、その置換基は同一であっても異なっていてもよい。置換される置換基の例として、限定されるものではないが、ハロゲン、ヒドロキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシ、ハロアルコキシ、ヒドロキシアルコキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、カルバモイル、カルボキシル、ホルミル、アセチル、メシル、ベンゾイル、ベンゾイルオキシ、アシルアミノ等が挙げられる。本発明の好ましい置換基としては、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、フェニル、−Ｃ_１−４アルキレン−フェニルおよび＝ＣＨ−フェニル、ベンジルオキシ等が挙げられる。 As used herein, the term "may be substituted" includes the case where the substitutable position of the group is not substituted (unsubstituted) and the case where the group is substituted. "Unsubstituted" means that all substitutable positions of the group are hydrogen atoms. When substituted, it may be substituted with a plurality of substituents if possible, and the substituents may be the same or different. Examples of substituents to be substituted include, but are not limited to, halogen, hydroxy, alkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, haloalkyl, hydroxyalkyl, alkoxy, haloalkoxy, hydroxyalkoxy, amino, nitro, cyano, carbamoyl. , Carboxyl, formyl, acetyl, mesyl, benzoyl, benzoyloxy, acylamino and the like. Preferred substituents of the present invention include halogen, hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl, -C _1-4 alkylene-phenyl and = CH-phenyl, benzyloxy and the like. Can be mentioned.

本発明において、式（Ｉ）の化合物は、塩形態であってもよく、医薬として許容される塩であれば特に限定されない。その塩の例としては、塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩等の無機酸塩；乳酸塩、リンゴ酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、メタンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、アスコルビン酸塩等の有機酸塩；ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩等のアルカリ金属塩；カルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ土類金属塩；およびテトラメチルアンモニウム塩等のアンモニウム塩等が挙げられる。 In the present invention, the compound of the formula (I) may be in the salt form, and is not particularly limited as long as it is a pharmaceutically acceptable salt. Examples of such salts are inorganic acid salts such as hydrochlorides, sulfates, phosphates, nitrates; lactates, malates, tartrates, citrates, maleates, fumarates, methanesulfonates. , Organic acid salts such as p-toluene sulfonate, benzene sulfonate, ascorbate; alkali metal salts such as sodium salt, potassium salt, lithium salt; alkaline earth metal salts such as calcium salt, magnesium salt; and Examples thereof include ammonium salts such as tetramethylammonium salts.

本明細書における、「がん転移」とは、がん細胞が原発巣から、血管やリンパ管に入り込み、血液やリンパ液に運ばれて別の臓器や器官に移動して、そこで細胞を増殖することおよび、がん細胞が原発巣から浸潤を経て別の臓器や器官、腔内に移動して、そこで細胞を増殖することを意味する。がん転移は、対象となるがんの治療前、治療中または治療後のいずれの転移であってもよい。
本明細書における、「がん転移抑制」とは、がん病巣において過剰発現したＣＥＲＳ６の作用を抑制することによって、がん細胞の原発巣から遠隔部位に移動する過程（がん細胞の遊走）を予防、抑制または遅延させることを意味する。 In the present specification, "cancer metastasis" means that cancer cells enter blood vessels and lymph vessels from the primary lesion, are carried to blood and lymph, move to another organ or organ, and proliferate there. It also means that cancer cells invade from the primary lesion and move into another organ, organ, or cavity where they proliferate. The cancer metastasis may be any metastasis of the cancer of interest before, during, or after treatment.
As used herein, "cancer metastasis suppression" refers to the process of moving from the primary tumor of cancer cells to a distant site by suppressing the action of CERS6 overexpressed in the cancer lesion (cancer cell migration). Means to prevent, suppress or delay.

本明細書における、「がん」とは、特に限定されないが、肺がん、胃がん、大腸がん、肝臓がん、膵臓がん、腎臓がん、副腎がん、胆のう・胆道がん、食道がん、咽頭がん、喉頭がん、口腔がん、膀胱がん、舌がん、甲状腺がん、皮膚がん、乳がん、前立腺がん、精巣がん、子宮がん、子宮頸がん、卵巣がん等が挙げられる。その中でも、好ましくは肺がんである。 The term "cancer" as used herein is not particularly limited, but is limited to lung cancer, stomach cancer, colon cancer, liver cancer, pancreatic cancer, kidney cancer, adrenal cancer, cholecyst / biliary tract cancer, and esophageal cancer. , Pharyngeal cancer, laryngeal cancer, oral cancer, bladder cancer, tongue cancer, thyroid cancer, skin cancer, breast cancer, prostate cancer, testicular cancer, uterine cancer, cervical cancer, ovary And so on. Among them, lung cancer is preferable.

本明細書における、「転移ニッチ形成」とは、がん細胞が環境因子等の影響により、細胞の生存および増殖に適した場を構築することを意味する。転移ニッチ形成は、転移標的臓器到達前でも到達後であってもよい。
本発明において、「転移ニッチ形成阻害」とは、がん病巣において過剰発現したＣＥＲＳ６の作用の抑制により、がん細胞の原発巣から遠隔部位に転移する過程を抑制することでがん細胞が転移しやすい環境の構築を阻害することを意味する。 As used herein, the term "metastasis niche formation" means that cancer cells establish a suitable field for cell survival and proliferation due to the influence of environmental factors and the like. Metastatic niche formation may occur before or after reaching the metastatic target organ.
In the present invention, "inhibition of metastasis niche formation" means that cancer cells metastasize by suppressing the process of metastasis from the primary tumor to a distant site by suppressing the action of CERS6 overexpressed in the cancer lesion. It means hindering the construction of an easy-to-use environment.

本明細書における、「治療」とは、哺乳動物、特にヒトにおける、がんおよびその症状のあらゆる治療が含まれる。例えば、がん腫瘍を完全に取り除くこと、がん細胞を消滅させること、がん細胞の増殖を抑制すること、がんの転移を阻止すること、転移ニッチ形成を阻止すること、がんの再発を阻止すること、がんに伴う症状を取り除くこと、がんに伴う症状を緩和または軽減すること、がんおよびその症状の悪化を防止もしくは遅延すること、がんおよびその症状の進行を防止もしくは遅延すること、がん患者の生活の質を向上させること、がん患者の生存を延長させること、がんおよびその症状の発症を防止もしくは遅延すること、がんおよびその症状の発症の危険性を低下させること等が挙げられる。 As used herein, "treatment" includes any treatment of cancer and its symptoms in mammals, especially humans. For example, completely removing cancer tumors, eliminating cancer cells, suppressing the growth of cancer cells, preventing cancer metastasis, preventing the formation of metastatic niches, and recurrence of cancer. To prevent the cancer and the symptoms associated with the cancer, to alleviate or alleviate the symptoms associated with the cancer, to prevent or delay the exacerbation of the cancer and its symptoms, to prevent the progression of the cancer and its symptoms Delaying, improving the quality of life of cancer patients, prolonging the survival of cancer patients, preventing or delaying the onset of cancer and its symptoms, the risk of developing cancer and its symptoms For example, to reduce the amount of cancer.

本明細書における、「患者」とは、ヒトおよびその他の動物、例えば、イヌ、ネコ、ウマ等を意味する。患者は、好ましくは哺乳動物であり、より好ましくはヒトである。 As used herein, the term "patient" means humans and other animals such as dogs, cats, horses and the like. The patient is preferably a mammal, more preferably a human.

本明細書における、「治療上の有効量」とは、未治療対象と比べて、がんの治癒、改善、予防および／または軽減をもたらす量、がん症状の進行の防止または遅延をもたらす量、あるいはがん転移の抑制をもたらす量を意味する。該用語は、その範囲内に、正常な生理的機能を促進するのに有効な量も含む。
かかる有効量として、本発明の化合物単独の量、本発明の化合物の組み合わせの量および／またはがん治療に有用な他の活性成分と組み合わせた本発明の化合物の量が挙げられる。 As used herein, the term "therapeutically effective amount" means an amount that cures, improves, prevents and / or alleviates cancer, and prevents or delays the progression of cancer symptoms as compared to an untreated subject. , Or an amount that suppresses cancer metastasis. The term also includes, within that range, an amount effective in promoting normal physiological function.
Such effective amounts include the amount of the compound of the present invention alone, the amount of the combination of the compounds of the present invention and / or the amount of the compound of the present invention in combination with other active ingredients useful for cancer treatment.

本発明のがん転移抑制剤とは、がんにおいて過剰発現したＣＥＲＳ６の作用を抑制して、がん細胞の原発巣から遠隔部位に転移する過程を抑制する薬剤である。本発明のがん転移抑制剤は、例えば、がんとの診断の確定から手術実施までの待機期間中のがん転移を抑制する、外科的治療後に患者ががんを再発した場合でもがん転移を再発部位の局所のみに抑える等の効果をもたらしうる。 The cancer metastasis inhibitor of the present invention is an agent that suppresses the action of CERS6 overexpressed in cancer and suppresses the process of metastasis from the primary tumor of cancer cells to a distant site. The cancer metastasis inhibitor of the present invention suppresses cancer metastasis during the waiting period from the confirmation of the diagnosis of cancer to the performance of surgery, for example, even if the patient recurs cancer after surgical treatment. It can bring about effects such as suppressing metastasis only locally at the recurrence site.

本発明の転移ニッチ形成阻害剤とは、がん病巣において過剰発現したＣＥＲＳ６の作用の抑制により、がん細胞の原発巣から遠隔部位に転移する過程を抑制することでがん細胞が転移しやすい環境の構築を阻害する薬剤である。 The metastasis niche formation inhibitor of the present invention is a cancer cell that easily metastasizes by suppressing the process of metastasis from the primary tumor to a distant site by suppressing the action of CERS6 overexpressed in the cancer lesion. It is a drug that inhibits the construction of the environment.

本発明のＣＥＲＳ６阻害剤は、ＣＥＲＳ６を阻害するための薬剤であり、in vivoでの医薬だけでなく、in vivo, in vitroでの実験用試薬としても使用することができる。 The CERS6 inhibitor of the present invention is a drug for inhibiting CERS6, and can be used not only as a drug in vivo but also as a reagent for experiments in vivo and in vitro.

式（Ｉ）で表される本発明の化合物の中のＸ、Ｒ^１、Ｒ^２、およびＲ^３に関して、好ましいものは以下のとおりであるが、本発明の技術的範囲は下記に挙げられた化合物の範囲に限定されるものではない。 Among the compounds of the present invention represented by the formula (I), the preferred ones with respect to X, R ¹ , R ² and R ³ are as follows, and the technical scope of the present invention is listed below. It is not limited to the range of compounds.

Ｘとして、好ましくはＣ_６−１０アリールまたは５員〜１０員のヘテロアリール（該Ｃ_６−１０アリールおよび５員〜１０員のヘテロアリールは、置換可能な位置で、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、フェニルおよびベンジルオキシからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい）であり、より好ましくはフェニルまたは少なくとも１個の酸素原子を含有する５員〜１０員のヘテロアリール（該フェニルおよび５員〜１０員のヘテロアリールは、置換可能な位置で、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシおよびベンジルオキシからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい）であり、さらに好ましくはフェニル、フランまたは１，３−ベンゾジオキソール（該フェニル、フランおよび１，３−ベンゾジオキソールは、置換可能な位置で、ハロゲン、ヒドロキシ、メチル、メトキシおよびベンジルオキシからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい）であり、さらにより好ましくはフェニル、フランまたは１，３−ベンゾジオキソール（該フェニルは、置換可能な位置で、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヒドロキシ、メチル、メチルメトキシおよびベンジルオキシからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されている）である。 As X, preferably C _6-10 aryl or 5- to 10-membered heteroaryl (the C _6-10 aryl and 5- to 10-membered heteroaryl are halogen, hydroxy, C _1- at substitutable positions. _It may be substituted with one or two or more groups of the same or different selected from the group consisting of _6alkyl , C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl and benzyloxy), more preferred. Is a 5- to 10-membered heteroaryl containing phenyl or at least one oxygen atom (the phenyl and the 5- to 10-membered heteroaryl are in substitutable positions, halogen, hydroxy, C _1-6 alkyl, It may be substituted with one or more identical or different groups selected from the group consisting of C _1-6 alkoxy and benzyloxy), more preferably phenyl, furan or 1,3-benzodio. Xol (the phenyl, furan and 1,3-benzodioxol are one or more identical or different selected from the group consisting of halogen, hydroxy, methyl, methoxy and benzyloxy at substitutable positions. (May be substituted with a group of), and even more preferably phenyl, furan or 1,3-benzodioxol (where the phenyl is substitutable, fluoro, chloro, bromo, hydroxy, methyl, It is substituted with one or two or more groups that are the same or different, selected from the group consisting of methylmethoxy and benzyloxy).

Ｒ^１として、好ましくは水素、ハロゲン、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキルまたはＣ_１−６アルコキシであり、より好ましくは水素またはＣ_１−６ハロアルキルであり、さらに好ましくは水素またはＣ_１ハロアルキル、さらにより好ましくは水素またはトリフルオロメチルである。 The R ¹ is preferably hydrogen, halogen, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl or C _1-6 alkoxy, more preferably hydrogen or C _1-6 haloalkyl, still more preferably hydrogen or C ₁ Haloalkyl, even more preferably hydrogen or trifluoromethyl.

Ｒ^２として、好ましくは水素、ハロゲン、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、Ｃ_６−１０アリールまたは５員もしくは６員のヘテロアリール（該Ｃ_６−１０アリールおよび５員もしくは６員のヘテロアリールは、置換可能な位置で、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、フェニルおよびベンジルオキシからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい）であり、より好ましくはＣ_１−６アルキル、フェニルまたは１個の酸素原子を含有する５員のヘテロアリール（該フェニルおよび５員のヘテロアリールは、ハロゲン、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシおよびフェニルからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい）であり、さらに好ましくはメチル、フェニルまたはフラン（該フェニルおよびフランは、ハロゲン、メチル、メトキシまたはフェニルで置換されていてもよい）であり、さらにより好ましくはメチル、フェニルまたはフラン（該フェニルは、フルオロ、クロロ、メチル、メトキシまたはフェニルで置換されていてもよい）である。 As R ^2, preferably hydrogen, _{halogen, C 1-6} _{alkyl, C 1-6} _{haloalkyl, C 1-6} _{alkoxy, C 6-10} aryl or a 5- or 6-membered heteroaryl (said _{C 6-10} aryl and The 5- or 6-membered heteroaryl is selected from the group consisting of halogen, hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl and benzyloxy at substitutable positions. It may be substituted with one or more identical or different groups), more preferably a 5-membered heteroaryl containing C _1-6 alkyl, phenyl or one oxygen atom (the phenyl and 5). The member heteroaryl is (may be substituted with one or two or more groups identical or different) selected from the group consisting of halogen, C _1-6 alkyl, C _1-6 alkoxy and phenyl). More preferably, it is methyl, phenyl or furan (the phenyl and furan may be substituted with halogen, methyl, methoxy or phenyl), and even more preferably methyl, phenyl or furan (the phenyl is fluoro, chloro). , May be substituted with methyl, methoxy or phenyl).

Ｒ^３として、好ましくは水素、ハロゲン、カルボキシル、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、Ｃ_１−６アルコキシカルボニルまたはＣ_６−１０アリール（該Ｃ_６−１０アリールは、置換可能な位置で、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、フェニルおよびベンジルオキシからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい）であり、より好ましくは水素、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシカルボニルまたはＣ_１−６アルキルもしくはＣ_１−６アルコキシで置換されているフェニルであり、さらに好ましくは水素、メチル、メトキシカルボニルまたはメトキシフェニルである。 As R ³ , preferably hydrogen, halogen, carboxyl, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, C _1-6 alkoxycarbonyl or C _6-10 aryl (the C _6-10 aryl is One or two or more selected from the group consisting of halogen, hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl and benzyloxy at substitutable positions. It may be substituted with a group), more preferably a phenyl substituted with hydrogen, C _1-6 alkyl, C _1-6 alkoxycarbonyl or C _1-6 alkyl or C _1-6 alkoxy. More preferably, it is hydrogen, methyl, methoxycarbonyl or methoxyphenyl.

また、Ｒ^２およびＲ^３は、それらが結合する炭素原子と一緒になって、好ましくは置換されていてもよい６員環を形成することができる。前記６員環は、より好ましくは置換されていてもよいＣ_６炭素環、さらに好ましくは置換されていてもよいシクロヘキセンまたはシクロヘキセノン、よりさらに好ましくは置換されていてもよいシクロヘキセンまたは２−シクロヘキセン−１−オンである。
前記６員環の置換基としては、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６ハロアルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、＝Ｏ、フェニル、−Ｃ_１−４アルキレン−フェニル、＝ＣＨ−フェニル（該フェニルは、置換可能な位置で、ハロゲンおよびＣ_１−６アルコキシからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい）が挙げられ、前記Ｃ_６炭素環の置換基としては、＝Ｏ、フェニルまたは＝ＣＨ−フェニル（該フェニルは、ハロゲンまたはＣ_１−６アルコキシで置換されていてもよい）が挙げられ、前記シクロヘキセンの置換基としては、＝ＣＨ−フェニル（該フェニルは、ハロゲン（特に、ブロモ）で置換されている）が挙げられ、シクロヘキセノンおよび２−シクロヘキセン−１−オンの置換基としては、メトキシフェニルが挙げられる。 Also, R ² and R ³ can be combined with the carbon atoms to which they are attached to form a 6-membered ring, which may preferably be substituted. The 6-membered ring, and more preferably in C ₆ carbocyclic ring which may be substituted, more preferably cyclohexene may be substituted or cyclohexenone, even more preferably cyclohexene may be substituted or 2-cyclohexen - 1-on.
Examples of the 6-membered ring substituent include halogen, hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, = O, phenyl, -C _1-4 alkylene-phenyl, = CH-phenyl. (The phenyl may be substituted at a substitutable position with one or two or more groups of the same or different selection from the group consisting of halogen and C _1-6 alkoxy). Examples of the substituent of the _6- carbon ring include = O, phenyl or = CH-phenyl (the phenyl may be substituted with halogen or C _1-6 alkoxy), and the substituent of the cyclohexene includes = CH-Phenyl (the phenyl is substituted with halogen (particularly bromo)) and examples of the substituents on cyclohexenone and 2-cyclohexen-1-one include methoxyphenyl.

本発明のがん転移抑制剤、がん治療剤、転移ニッチ形成阻害剤およびＣＥＲＳ６阻害剤（以下、「本発明の薬剤」と称する）は、本発明の化合物を有効成分として含むものであればよく、その有効成分の効果を妨げない限り、他の医薬活性成分をさらに含んでいてもよい。 The cancer metastasis inhibitor, cancer therapeutic agent, metastasis niche formation inhibitor and CERS6 inhibitor of the present invention (hereinafter referred to as "drug of the present invention") are as long as they contain the compound of the present invention as an active ingredient. Often, other pharmaceutically active ingredients may be further included as long as they do not interfere with the effect of the active ingredient.

さらに、本発明の薬剤は、単剤だけでなく、他の抗がん剤と併用して用いることができる。他の抗がん剤と併用する場合、本発明の薬剤と併用薬剤の投与時期は、特に限定されず、これらを投与対象に対し、同時に投与してもよいし、時間差で投与してもよい。本発明の薬剤を、併用薬剤に対して先に、同時に、または後に投与してもよい。
抗がん剤の例としては、アルキル化剤、代謝拮抗剤、分子標的治療剤、白金製剤などが挙げられる。これらは単独または２種以上を組み合わせて用いてもよい。 Furthermore, the agent of the present invention can be used not only as a single agent but also in combination with other anticancer agents. When used in combination with other anticancer agents, the administration time of the agent of the present invention and the concomitant agent is not particularly limited, and these may be administered to the administration subject at the same time or at different times. .. The agent of the present invention may be administered earlier, simultaneously or later than the concomitant agent.
Examples of anticancer agents include alkylating agents, antimetabolites, molecular targeted therapies, platinum preparations and the like. These may be used alone or in combination of two or more.

本発明の薬剤は、外科的治療、化学療法、放射線療法などのがん治療と組み合わせて使用することができる。かかる場合、本発明の投与時期は、治療前、治療中または治療後のいずれかであってもよい。 The agents of the present invention can be used in combination with cancer treatments such as surgical treatment, chemotherapy and radiation therapy. In such cases, the time of administration of the present invention may be either before treatment, during treatment, or after treatment.

本発明の薬剤は、経口または非経口（例えば、皮下、静脈、局所、経鼻、経肺、直腸など）投与することができる。 The agents of the present invention can be administered orally or parenterally (eg, subcutaneous, intravenous, topical, nasal, pulmonary, rectal, etc.).

本発明の剤形は、対象の身体状況、健康状態などに応じて適宜選択し、調製することができる。例えば、錠剤（口腔内崩壊錠、チュアブル錠、発泡錠、分散錠、溶解錠）、カプセル剤、顆粒剤（発泡顆粒剤）、散剤、経口液剤（エリキシル剤、懸濁剤、乳剤、リモナーデ剤）、シロップ剤（シロップ用剤）、経口ゼリー剤、口腔用錠剤（トローチ剤、舌下錠、バッカル錠、付着錠、ガム剤）、口腔用スプレー剤、口腔用半固形剤、含嗽剤、注射剤（輸液剤、埋め込み注射剤、持続性注射剤）、透析用剤（腹膜透析用剤、血液透析用剤）、吸入剤（吸入粉末剤、吸入液剤、吸入エアゾール剤）、坐剤、直腸用半固形剤、注腸剤、点眼剤、眼軟膏剤、点耳剤、点鼻剤（点鼻粉末剤、点鼻液剤）、膣錠、膣用坐剤、外用固形剤（外用散剤）、外用液剤（リニメント剤、ローション剤）、スプレー剤（外用エアゾール剤、ポンプスプレー剤）、軟膏剤、クリーム剤、ゲル剤、貼付剤（テープ剤、パップ剤）などの剤形に、公知の方法により調製されうる。 The dosage form of the present invention can be appropriately selected and prepared according to the physical condition, health condition, etc. of the subject. For example, tablets (orally disintegrating tablets, chewable tablets, effervescent tablets, dispersion tablets, dissolving tablets), capsules, granules (foaming granules), powders, oral solutions (elixyl agents, suspending agents, emulsions, limonade agents) , Suppositories (syrups), oral jelly, oral tablets (troche, sublingual tablets, buccal tablets, adhesive tablets, gums), oral sprays, oral semi-solids, gargles, injections (Infusion, implantable injection, continuous injection), dialysis agent (peritoneal dialysis agent, blood dialysis agent), inhalant (inhalation powder, inhalation solution, inhalation aerosol), suppository, half for rectal Solids, enema, eye drops, eye ointments, ear drops, nasal drops (nasal drops, nasal drops), vaginal tablets, vaginal suppositories, topical solids (topical powders), topical solutions (Liniment agent, lotion agent), spray agent (external aerosol agent, pump spray agent), ointment, cream agent, gel agent, patch (tape agent, pap agent), etc. prepared by a known method. sell.

本発明の薬剤は、必要に応じ、賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、緩衝剤、懸濁化剤、乳化剤、甘味剤、香料等の添加剤を用いることができる。添加剤の具体例として、乳糖、白糖、Ｄ−マンニトール、カルメロース、ヒドロキシプロピルセルロース、結晶セルロース、ステアリン酸マグネシウム、タルク、プロピレングリコール、リン酸水素ナトリウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、グリセリン脂肪酸エステル等が挙げられる。 As the agent of the present invention, additives such as excipients, disintegrants, binders, lubricants, buffers, suspending agents, emulsifiers, sweeteners and flavors can be used, if necessary. Specific examples of the additive include lactose, sucrose, D-mannitol, carmellose, hydroxypropyl cellulose, crystalline cellulose, magnesium stearate, talc, propylene glycol, sodium hydrogen phosphate, sodium carboxymethyl cellulose, glycerin fatty acid ester and the like.

本発明の化合物の投与量は、投与方法、対象の年齢、疾患の程度、症状、剤形等により適宜選択されるが、例えば、一日あたり、０．００１ｍｇ〜１ｇの用量で投与することができる。１日あたりの本発明の化合物の量を、１回〜数回に分けて投与してもよい。 The dose of the compound of the present invention is appropriately selected depending on the administration method, age of the subject, degree of disease, symptoms, dosage form, etc., and for example, it may be administered at a dose of 0.001 mg to 1 g per day. it can. The amount of the compound of the present invention per day may be administered in 1 to several divided doses.

以下に実施例を挙げて本発明をさらに説明するが、これらは本発明の範囲を限定するものではない。 Hereinafter, the present invention will be further described with reference to examples, but these do not limit the scope of the present invention.

実施例１：ＣＥＲＳ６阻害活性を有する候補化合物のスクリーニング
以下の方法にしたがって、ファルマバレーセンターより入手した約２７，０００種類の化合物を含む化合物ライブラリーについてスクリーニングを行い、１２８種類の共通のコア構造を有する化合物を選別し、その選別した化合物の生化学的ＣＥＲＳ６阻害活性（ＩＣ_５０（μＭ））を測定し、ＩＣ_５０＜１００μＭを示す１８種類の化合物を候補化合物（化合物１〜１８）として選別した。 Example 1: Screening of candidate compounds having CERS6 inhibitory activity A compound library containing about 27,000 compounds obtained from the Pharma Valley Center was screened according to the following method to obtain 128 common core structures. Compounds having were selected, the biochemical CERS6 inhibitory activity (IC ₅₀ (μM)) of the selected compounds was measured, and 18 kinds of compounds showing IC ₅₀ <100 μM were selected as candidate compounds (Compounds 1 to 18). ..

方法
ヒト気管支上皮細胞株ＢＥＡＳ−２Ｂ細胞株［ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ−９６０９］にＣＥＲＳ６遺伝子産物を過剰発現した抽出液を使用して、以下の方法にしたがってＣＥＲＳ６活性を測定した。 Method Using an extract overexpressing the CERS6 gene product in the human bronchial epithelial cell line BEAS-2B cell line [ATCC® CRL-9609], CERS6 activity was measured according to the following method.

５０ｍＭＨＥＰＥＳ−ＫＯＨ（ｐＨ７．４）１０ｍＬにｃＯｍｐｌｅｔｅ（商標）ＭｉｎｉＥＤＴＡ−ｆｒｅｅＰｒｏｔｅａｓｅＩｎｈｉｂｉｔｏｒＣｏｃｋｔａｉｌ（Ｒｏｃｈｅ；１８３６１７０）１錠を溶解した希釈液で、試験用細胞抽出液の濃度を２ｍｇ／ｍＬに調整した。試験用細胞抽出液を４．０μＬ使用し、反応液（ＮＢＤ−Ｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ（ｄ１８：０）１２０ｎｇ（Ａｖａｎｔｉ；８１０２０５Ｐ）、２５μＭ１６：０ＣｏｅｎｚｙｍｅＡ（Ａｖａｎｔｉ；８７０７１６Ｐ）、５００μＭＤＴＴ、１ｍＭＭｇＣｌ_２、５０ｍＭＨＥＰＥＳ−ＫＯＨ（ｐＨ７．５））と候補化合物が最終濃度０〜２５μＭ、合計８０μＬになる条件下で３７℃で３０分間インキュベートを行った。
インキュベート後、クロロホルム：メタノール１：１混合溶液（８０μＬ）を加え、ｖｏｒｔｅｘにより反応を止めた。その後、冷却遠心機にて１５，０００ｒｐｍ、４℃および２分の条件で遠心分離し、上清を取り除いて遠心エバポレータにて下層の溶媒を乾燥させた。
調整したサンプルに、クロロホルムおよびメタノールを２：１の質量比で混合した溶液（８μＬ）を添加・溶解して、そのサンプルをシリカゲルプレート（ＭＥＲＣＫ；Ｐ／Ｎ１．０５６４１．０００１）にスポットした。展開槽に、クロロホルム、メタノールおよびアンモニア水を１００：２５：２．５の質量比で混合した展開溶媒を入れ、そこにシリカゲルプレートを入れて展開させた。展開後、プレートを乾燥させ、スキャニングまで遮光保存を行った。
次いで、シリカゲルプレートを蛍光イメージアナライザー：ＦｕｊｉＦＬＡ３０００にてスキャニングを行い、画像ファイルを出力した。得られた画像ファイルを、画像処理ソフトウェア：ＩｍａｇｅＪ（ｖｅｒ．１．５１）にて展開し、基質および生成物の像からそれぞれ数値化を行い、生成物／（生成物＋基質）の割合を求めた。
候補化合物の濃度と生成物／（生成物＋基質）の割合をグラフ化し、生化学的ＣＥＲＳ６阻害活性（ＩＣ_５０（μｍ））を測定し、ＩＣ_５０＜１００μＭの化合物を選別した。 A diluted solution of 1 tablet of compacte ™ Mini EDTA-free Protease Inhibitor Cocktail (Roche; 1 836 170) in 10 mL of 50 mM HEPES-KOH (pH 7.4), and the concentration of the test cell extract was adjusted to 2 mg / mL. It was adjusted. Using 4.0 μL of test cell extract, reaction solution (NBD-Sphingosine (d18: 0) 120 ng (Avanti; 810205P), 25 μM 16: 0 Coenzyme A (Avanti; 870716P), 500 μM DTT, 1 mM MgCl ₂ , 50 mM Incubation was carried out at 37 ° C. for 30 minutes under the condition that HEPES-KOH (pH 7.5)) and the candidate compound had a final concentration of 0 to 25 μM, for a total of 80 μL.
After incubation, a 1: 1 mixed solution of chloroform: methanol (80 μL) was added, and the reaction was stopped by vortex. Then, the mixture was centrifuged in a cooling centrifuge at 15,000 rpm at 4 ° C. and 2 minutes, the supernatant was removed, and the solvent in the lower layer was dried by a centrifugal evaporator.
A solution (8 μL) of a mixture of chloroform and methanol in a mass ratio of 2: 1 was added to and dissolved in the prepared sample, and the sample was spotted on a silica gel plate (MERCK; P / N1.05641.0001). A developing solvent in which chloroform, methanol and aqueous ammonia were mixed at a mass ratio of 100: 25: 2.5 was placed in a developing tank, and a silica gel plate was placed therein to develop the mixture. After unfolding, the plate was dried and stored in the dark until scanning.
Next, the silica gel plate was scanned with a fluorescence image analyzer: Fuji FLA3000, and an image file was output. The obtained image file is developed by image processing software: Image J (ver. 1.51), digitized from the image of the substrate and the product, respectively, and the ratio of product / (product + substrate) is calculated. I asked.
The concentration of the candidate compound and the product / (product + substrate) ratio were graphed, the biochemical CERS6 inhibitory activity (IC ₅₀ (μm)) was measured, and compounds with an IC ₅₀ <100 μM were selected.

結果
ＩＣ_５０＜１００μＭを示す化合物として、化合物１〜１８が得られた。化合物１〜１８の構造およびそのＩＣ_５０値を、表１〜３に示す。

Results Compounds 1 to 18 were obtained as compounds exhibiting IC ₅₀ <100 μM. The structure and _{an IC 50} value of compounds 1 to 18 shown in Table 1-3.

実施例２：本発明化合物におけるがん細胞遊走能阻害効果の検討
実施例１で選定した化合物の中で特に優れたＩＣ_５０値を有する化合物４および５について、以下の方法にしたがって細胞遊走能活性阻害効果を測定した。 Example 2: Compound 4 and 5 in particular have excellent IC ₅₀ values in the compounds selected in consideration Example 1 cancer cell migration ability inhibitory effects of the present invention compounds, cell migratory activity of the following methods The inhibitory effect was measured.

方法
ヒト肺腺癌細胞株Ａ５４９細胞株［ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＣＬ−１８５］を１００ｍｍｘ２０ｍｍ細胞培養用ディッシュ（Ｆａｌｃｏｎ；３５３００３）にて培養を行った。細胞数が約８０％コンフレント状態のとき、細胞を１ｘＰＢＳ（−）で洗浄し、ＲＰＭＩ１６４０培地にＮ−２サプリメント（ｇｉｂｃｏ；１７５０２−０４８）を加えた培養液（１０ｍＬ）を添加し、３７℃、５％ＣＯ_２条件下で培養を行った。培地交換から４８時間後、１ｘＰＢＳ（−）で細胞を洗浄し、１ｘＰＢＳ（−）中５ｍＭＥＤＴＡ（１ｍＬ）を加えて少し静置し、ＲＰＭＩ１６４０培地＋５％ＦＣＳ（９ｍＬ）を加えて、細胞浮遊液を作製した。
冷却遠心機にて１，５００ｒｐｍ、４℃、５分の条件下で遠心分離し、アスピレータにて培地を除去した。ペレット状の細胞に１ｘＰＢＳ（−）（５ｍＬ）を加えて懸濁し、冷却遠心機にて１，５００ｒｐｍ、４℃、５分の条件下で遠心分離し、アスピレータにて１ｘＰＢＳ（−）を除去した。この作業を２回行った。
次いで、ＲＰＭＩ１６４０＋０．１％ＦＣＳ培地を加えて細胞を懸濁し、細胞数をカウントして、細胞数が４ｘ１０^４個／ｍＬに調整した。ＲＰＭＩ１６４０＋０．１％ＦＣＳ培地１１００μＬに、生化学的ＣＥＲＳ６阻害活性結果から最終濃度が目的の濃度になるように調整した候補化合物（５．５μＬ）を混合し、そのうち１．０ｍＬをセルカルチャーインサートコンパニオンプレート２４ウェル（Ｆａｌｃｏｎ；３５３５０４）のウェルに加え、その後セルカルチャーインサート２４ウェル用８．０μｍＰＥＴ（Ｆａｌｃｏｎ；３５３０９７）をセットした。細胞数を調整したヒト肺腺癌細胞株Ａ５４９細胞株６００μＬとウェルと同じ濃度になるように調整した候補化合物３μＬを混合し、そのうち５００μＬを、セットしたセルカルチャーインサートに加えた（最終細胞数は２ｘ１０^４個／ウェル）。３７℃、５％ＣＯ２条件下で２０時間培養を行った。
セルカルチャーインサートのメンブレン上層に残ったヒト肺腺癌細胞株Ａ５４９細胞株を綿棒できれいにふき取り、下層に移動し残ったヒト肺腺癌細胞株Ａ５４９細胞株を７０％エタノール溶液で室温で３０分間固定を行った。
固定後、１ｘＰＢＳ（−）でセルカルチャーインサートのメンブレンの洗浄を２回行ったのち、ギムザ染色液で染色した。下層に移動しギムザ染色で染色された細胞数を顕微鏡で計測し、本発明化合物の濃度と下層に移動し残った細胞数から細胞遊走能阻害活性を測定した。 Method Human lung adenocarcinoma cell line A549 cell line [ATCC® CCL-185] was cultured in a 100 mm x 20 mm cell culture dish (Falcon; 353003). When the number of cells was about 80% confident, the cells were washed with 1xBSB (-), and a culture solution (10 mL) containing an N-2 supplement (gibco; 17502-048) was added to RPMI1640 medium at 37 ° C. Culturing was carried out under 5% CO ₂ conditions. 48 hours after the medium exchange, the cells were washed with 1xPBS (-), 5 mM EDTA (1 mL) in 1 x PBS (-) was added and allowed to stand for a while, RPMI1640 medium + 5% FCS (9 mL) was added, and the cell suspension was added. Was produced.
Centrifuge was performed under the conditions of 1,500 rpm, 4 ° C., and 5 minutes in a cooling centrifuge, and the medium was removed with an ejector. 1xPBS (-) (5 mL) was added to the pellet-shaped cells to suspend them, and the cells were centrifuged with a cooling centrifuge at 1,500 rpm at 4 ° C. for 5 minutes, and the 1xPBS (-) was removed with an ejector. .. This work was done twice.
The cells were then suspended by adding RPMI1640 + 0.1% FCS medium and the cell count was counted to adjust the cell count to 4x10 ⁴ cells / mL. 1100 μL of RPMI1640 + 0.1% FCS medium was mixed with a candidate compound (5.5 μL) adjusted so that the final concentration was the desired concentration based on the results of biochemical CERS6 inhibitory activity, of which 1.0 mL was mixed with a cell culture insert companion plate. In addition to the 24-well (Falcon; 353504) wells, then 8.0 μm PET (Falcon; 353097) for cell culture inserts for 24 wells was set. 600 μL of the adjusted human lung adenocarcinoma cell line A549 cell line and 3 μL of the candidate compound adjusted to have the same concentration as the well were mixed, and 500 μL of them was added to the set cell culture insert (final cell number was: 2x10 ⁴ pieces / well). The cells were cultured for 20 hours under the conditions of 37 ° C. and 5% CO2.
Wipe off the human lung adenocarcinoma cell line A549 cell line remaining on the upper layer of the cell culture insert with a cotton swab, move to the lower layer, and fix the remaining human lung adenocarcinoma cell line A549 cell line in a 70% ethanol solution at room temperature for 30 minutes. Was done.
After fixation, the membrane of the cell culture insert was washed twice with 1xPBS (-), and then stained with Giemsa stain. The number of cells that moved to the lower layer and stained with Giemsa stain was measured with a microscope, and the cell migration inhibitory activity was measured from the concentration of the compound of the present invention and the number of cells that moved to the lower layer and remained.

結果
化合物４および５の測定された細胞遊走能阻害活性（ＥＣ_５０（μＭ））を、表４に示す。
Results The measured cell migration inhibitory activity (EC ₅₀ (μM)) of compounds 4 and 5 is shown in Table 4.

上記実施例１および２の結果より、本発明の化合物は、ＣＥＲＳ６阻害活性を有することが示され、さらに、がん細胞の遊走能阻害活性を有することが示された。そのため、本発明の化合物は、ＣＥＲＳ６阻害剤として有用であり、そして、がん転移抑制作用を有することが示唆された。 From the results of Examples 1 and 2 above, it was shown that the compound of the present invention had a CERS6 inhibitory activity, and further showed that it had a cancer cell migration ability inhibitory activity. Therefore, it was suggested that the compound of the present invention is useful as a CERS6 inhibitor and has a cancer metastasis inhibitory action.

本発明は、ＣＥＲＳ６阻害によってがん細胞遊走能を阻害することにより、がん転移の抑制に有用でありうる。本発明によれば、がん治療における診断確定から手術実施までの待機期間中のがん転移を抑制すること、また、外科的治療後の患者に本発明の化合物を投与することで、がんを再発した場合でもがん転移を再発部位の局所のみに抑えることを可能とする。
さらに、本発明は、がんの治療および転移ニッチ形成阻害にも有用でありうる。また、本発明の化合物はＣＥＲＳ６阻害剤として、実験用試薬で使用することができる。 The present invention may be useful in suppressing cancer metastasis by inhibiting cancer cell migration ability by inhibiting CERS6. According to the present invention, cancer is suppressed by suppressing cancer metastasis during the waiting period from confirmation of diagnosis in cancer treatment to execution of surgery, and by administering the compound of the present invention to a patient after surgical treatment. Even if the cancer recurs, it is possible to suppress the cancer metastasis only locally at the recurrence site.
In addition, the present invention may also be useful in treating cancer and inhibiting metastatic niche formation. In addition, the compound of the present invention can be used as a CERS6 inhibitor in an experimental reagent.

Claims

Equation (I):
[During the ceremony:
X is a C _6-10 aryl or a 5- to 10-membered heteroaryl, wherein the C _6-10 aryl or a 5- to 10-membered heteroaryl is a halogen, hydroxy, at a substitutable position. It may be substituted with one or two or more groups selected from the group consisting of C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl and benzyloxy;
R ¹ is hydrogen, halogen, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl or C _1-6 alkoxy; and R ² is hydrogen, halogen, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C. _1-6 alkoxy, C _6-10 aryl or 5- or 6-membered heteroaryl, wherein the C _6-10 aryl and 5- or 6-membered heteroaryl are halogen, at substitutable positions. It may be substituted with one or two or more groups selected from the group consisting of hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl and benzyloxy. R ³ is hydrogen, halogen, carboxyl, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, C _1-6 alkoxycarbonyl or C _6-10 aryl, wherein the C _{6- The 10} aryl is one or the same or different 2 selected from the group consisting of halogen, hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl and benzyloxy at substitutable positions. It may be substituted with one or more groups, or R ² and R ³ together with their bonding atoms form a 6-membered ring, where the 6-membered ring is substituted. Select from the group consisting of halogen, hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, = O, phenyl, -C _1-4 alkylene-phenyl and = CH-phenyl where possible It may be substituted with one or two or more groups that are identical or different (the phenyl is one or the same or the same or selected from the group consisting of halogens and C _1-6 alkoxy at substitutable positions. It may be substituted with two or more different groups)]
A cancer metastasis inhibitor containing the compound indicated by or a salt thereof.

X is a 5- to 10-membered heteroaryl containing at least one oxygen atom as a phenyl or hetero atom, wherein the phenyl and the 5- to 10-membered heteroaryl are at substitutable positions. , Halogen, hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 alkoxy and benzyloxy may be substituted with one or two or more groups selected from the group;
R ¹ is hydrogen or C _1-6 haloalkyl; and R ² is a 5-membered heteroaryl containing only one oxygen atom as C _1-6 alkyl, phenyl or hetero atom, where , The phenyl and the 5-membered heteroaryl may be substituted with one or the same or different two or more groups selected from the group consisting of halogen, C _1-6 alkyl, C _1-6 alkoxy and phenyl. Often, R ³ is a phenyl substituted with hydrogen, C _1-6 alkyl, C _1-6 alkoxycarbonyl or C _1-6 alkyl or C _1-6 alkoxy, or R ² and R ³ are , together with the carbon atoms to which they are attached form a C ₆ carbocyclic ring, wherein said C ₆ carbocyclic ring, = O, optionally substituted phenyl or = CH- phenyl (said phenyl May be replaced with halogen or C _1-6 alkoxy), the cancer metastasis inhibitor according to claim 1.

X is phenyl, furan or 1,3-benzodioxole, where the phenyl, furan and 1,3-benzodioxole are in substitutable positions such as halogen, hydroxy, methyl, methoxy and It may be substituted with one or more identical or different groups selected from the group consisting of benzyloxy;
R ¹ is hydrogen or C ₁ haloalkyl; and R ² is methyl, phenyl or furan, where the phenyl and furan may be substituted with halogen, methyl, methoxy or phenyl, R. ³ is hydrogen, methyl, methoxycarbonyl or methoxyphenyl, or R ² and R ³ together with the carbon atom to which they are attached = CH-phenyl (the phenyl is substituted with halogen). The cancer metastasis inhibitor according to claim 1 or 2, which forms cyclohexene substituted with () or cyclohexenone substituted with methoxyphenyl.

X is phenyl, furan or 1,3-benzodioxole, where the phenyl is from the group consisting of fluoro, chloro, bromo, hydroxy, methyl, methylmethoxy and benzyloxy at substitutable positions. Substituted with one selected group or two or more identical or different groups;
R ¹ is hydrogen or trifluoromethyl; and R ² is methyl, phenyl or furan, where the phenyl may be substituted with fluoro, chloro, methyl, methoxy or phenyl, R. Cyclohexene or methoxy where ³ is hydrogen, methyl, methoxycarbonyl or methoxyphenyl, or R ² and R ³ are substituted with = CH-bromophenyl, together with the carbon atom to which they are attached. The cancer metastasis inhibitor according to any one of claims 1 to 3, which forms 2-cyclohexene-1-one substituted with phenyl.

The compounds are:
The cancer metastasis inhibitor according to any one of claims 1 to 4, which is selected from.

Equation (I):
[During the ceremony:
X is a C _6-10 aryl or a 5- to 10-membered heteroaryl, wherein the C _6-10 aryl or a 5- to 10-membered heteroaryl is a halogen, hydroxy, at a substitutable position. It may be substituted with one or two or more groups selected from the group consisting of C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl and benzyloxy;
R ¹ is hydrogen, halogen, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl or C _1-6 alkoxy; and R ² is hydrogen, halogen, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C. _1-6 alkoxy, C _6-10 aryl or 5- or 6-membered heteroaryl, wherein the C _6-10 aryl and 5- or 6-membered heteroaryl are halogen, at substitutable positions. It may be substituted with one or two or more groups selected from the group consisting of hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl and benzyloxy. R ³ is hydrogen, halogen, carboxyl, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, C _1-6 alkoxycarbonyl or C _6-10 aryl, wherein the C _{6- The 10} aryl is one or the same or different 2 selected from the group consisting of halogen, hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl and benzyloxy at substitutable positions. It may be substituted with one or more groups, or R ² and R ³ together with their bonding atoms form a 6-membered ring, where the 6-membered ring is substituted. Select from the group consisting of halogen, hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, = O, phenyl, -C _1-4 alkylene-phenyl and = CH-phenyl where possible It may be substituted with one or two or more groups that are identical or different (the phenyl is one or the same or the same or selected from the group consisting of halogens and C _1-6 alkoxy at substitutable positions. It may be substituted with two or more different groups)]
A cancer therapeutic agent containing the compound indicated by or a salt thereof.

The compounds are:
The cancer therapeutic agent according to claim 6, which is selected from.

Equation (I):
[During the ceremony:
X is a C _6-10 aryl or a 5- to 10-membered heteroaryl, wherein the C _6-10 aryl or a 5- to 10-membered heteroaryl is a halogen, hydroxy, at a substitutable position. It may be substituted with one or two or more groups selected from the group consisting of C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl and benzyloxy;
R ¹ is hydrogen, halogen, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl or C _1-6 alkoxy; and R ² is hydrogen, halogen, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C. _1-6 alkoxy, C _6-10 aryl or 5- or 6-membered heteroaryl, wherein the C _6-10 aryl and 5- or 6-membered heteroaryl are halogen, at substitutable positions. It may be substituted with one or two or more groups selected from the group consisting of hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl and benzyloxy. R ³ is hydrogen, halogen, carboxyl, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, C _1-6 alkoxycarbonyl or C _6-10 aryl, wherein the C _{6- The 10} aryl is one or the same or different 2 selected from the group consisting of halogen, hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl and benzyloxy at substitutable positions. It may be substituted with one or more groups, or R ² and R ³ together with their bonding atoms form a 6-membered ring, where the 6-membered ring is substituted. Select from the group consisting of halogen, hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, = O, phenyl, -C _1-4 alkylene-phenyl and = CH-phenyl where possible It may be substituted with one or two or more groups that are identical or different (the phenyl is one or the same or the same or selected from the group consisting of halogens and C _1-6 alkoxy at substitutable positions. It may be substituted with two or more different groups)]
A transition niche formation inhibitor comprising the compound indicated by or a salt thereof.

The compounds are:
The transfer niche formation inhibitor according to claim 8, which is selected from.

Equation (I):
[During the ceremony:
X is a C _6-10 aryl or a 5- to 10-membered heteroaryl, wherein the C _6-10 aryl or a 5- to 10-membered heteroaryl is a halogen, hydroxy, at a substitutable position. It may be substituted with one or two or more groups selected from the group consisting of C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl and benzyloxy;
R ¹ is hydrogen, halogen, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl or C _1-6 alkoxy; and R ² is hydrogen, halogen, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C. _1-6 alkoxy, C _6-10 aryl or 5- or 6-membered heteroaryl, wherein the C _6-10 aryl and 5- or 6-membered heteroaryl are halogen, at substitutable positions. It may be substituted with one or two or more groups selected from the group consisting of hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl and benzyloxy. R ³ is hydrogen, halogen, carboxyl, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, C _1-6 alkoxycarbonyl or C _6-10 aryl, wherein the C _{6- The 10} aryl is one or the same or different 2 selected from the group consisting of halogen, hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl and benzyloxy at substitutable positions. It may be substituted with one or more groups, or R ² and R ³ together with their bonding atoms form a 6-membered ring, where the 6-membered ring is substituted. Select from the group consisting of halogen, hydroxy, C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, = O, phenyl, -C _1-4 alkylene-phenyl and = CH-phenyl where possible It may be substituted with one or two or more groups that are identical or different (the phenyl is one or the same or the same or selected from the group consisting of halogens and C _1-6 alkoxy at substitutable positions. It may be substituted with two or more different groups)]
A CERS6 inhibitor comprising the compound represented by or a salt thereof.

The compounds are:
The CERS6 inhibitor of claim 10, which is selected from.