JP2019180282A - Plant trait regulator - Google Patents

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Abstract

To provide a technique that regulates plant traits including a petal trait.SOLUTION: A polynucleotide is introduced into a plant, the polynucleotide including A) a base sequence encoding a rice-derived specific amino acid sequence, or B) a base sequence encoding an amino acid sequence identical by 90% or more with the amino acid sequence.SELECTED DRAWING: None

Description

本発明は、植物形質調節剤等に関する。   The present invention relates to plant trait regulators and the like.

花弁は、その観賞価値の向上、観賞期間の向上等の観点から、形質調節の対象となっている。例えば、花弁の色を変化させる、花弁の形状を変化させる、花弁の寿命を延長させる等の試みがなされている。   The petals are subject to phenotypic control from the viewpoints of improving the appreciation value and the appreciation period. For example, attempts have been made to change the color of petals, change the shape of petals, extend the life of petals, and the like.

このような形質調節には、分子育種が多く利用されている。例えば、APETALA3-1 (AP3-1)遺伝子、SEPALLATA (SEP)遺伝子、UNUSUAL FLORAL ORGANS (UFO)遺伝子、PISTILLATA (PI)遺伝子等を調節することにより、シロイヌナズナの花弁の形質を調節したことが報告されている(非特許文献1〜4)。しかしながら、これらの遺伝子を調節した場合、花弁ががくや葉のように変化してしまい、花弁らしさ(花弁の薄さ、形状の美しさ等)を失ってしまうという問題があった。また、非特許文献5では、EPHEMERAL1遺伝子がアサガオの花弁老化を制御していることが報告されている。   Molecular breeding is often used for such trait regulation. For example, it has been reported that by controlling APETALA3-1 (AP3-1) gene, SEPALLATA (SEP) gene, UNUSUAL FLORAL ORGANS (UFO) gene, PISTILLATA (PI) gene, etc., the trait of Arabidopsis petals was regulated. (Non-Patent Documents 1 to 4). However, when these genes are regulated, there is a problem that the petal changes like a leaf or a leaf and loses the petalness (the petal is thin and the shape is beautiful). Non-Patent Document 5 reports that the EPHEMERAL1 gene controls petal senescence of morning glory.

Yi Y, Jack T. An intragenic suppressor of the Arabidopsis floral organ identity mutant apetala3-1 functions by suppressing defects in splicing. Plant Cell. 1998 10:1465-1477.Yi Y, Jack T. An intragenic suppressor of the Arabidopsis floral organ identity mutant apetala3-1 functions by suppressing defects in splicing.Plant Cell. 1998 10: 1465-1477. Pelaz S, Ditta GS, Baumann E, Wisman E, Yanofsky MF. B and C floral organ identity functions require SEPALLATA MADS-box genes. Nature. 2000 405:200-203.Pelaz S, Ditta GS, Baumann E, Wisman E, Yanofsky MF.B and C floral organ identity functions require SEPALLATA MADS-box genes.Nature. 2000 405: 200-203. Queenie E, Tan KG, Hill TA, Irish VF. An Arabidopsis F-box protein acts as a transcriptional co-factor to regulate floral development. Development 2008 135:1235-1245.Queenie E, Tan KG, Hill TA, Irish VF.An Arabidopsis F-box protein acts as a transcriptional co-factor to regulate floral development.Development 2008 135: 1235-1245. Ng M, Yanofsky MF. Activation of the Arabidopsis B class homeotic genes by APETALA1. Plant Cell. 2001 13:739-753.Ng M, Yanofsky MF.Activation of the Arabidopsis B class homeotic genes by APETALA1.Plant Cell. 2001 13: 739-753. Kenichi Shibuya, Keiichi Shimizu, Tomoko Niki, Kazuo Ichimura Identification of a NAC transcription factor, EPHEMERAL1, that controls petal senescence in Japanese morning glory. Plant J. (2014) 79, 1044-1051.Kenichi Shibuya, Keiichi Shimizu, Tomoko Niki, Kazuo Ichimura Identification of a NAC transcription factor, EPHEMERAL1, that controls petal senescence in Japanese morning glory.Plant J. (2014) 79, 1044-1051.

本発明は、花弁形質を含む植物形質を調節する技術を提供することを課題とする。好ましくは、本発明は、花弁形質を、花弁らしさ(花弁の薄さ、形状の美しさ等)をより保ちながら調節する技術を提供することを課題とする。より好ましくは、本発明は、花弁の寿命、花弁の形状、及び花弁の色からなる群より選択される少なくとも1種の花弁形質を調節する技術を提供することを課題とする。   An object of the present invention is to provide a technique for regulating plant traits including petal traits. Preferably, an object of the present invention is to provide a technique for adjusting a petal character while maintaining a petal character (a thin petal, a beautiful shape, etc.). More preferably, an object of the present invention is to provide a technique for regulating at least one petal trait selected from the group consisting of petal life, petal shape, and petal color.

本発明者は上記課題に鑑みて鋭意研究を進めた結果、A)配列番号1に示されるアミノ酸配列をコードする塩基配列、又はB)配列番号1に示されるアミノ酸配列と90%以上の同一性を有するアミノ酸配列をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチドを植物に導入することにより、植物形質、特に花弁の寿命、花弁の形状、及び花弁の色からなる群より選択される少なくとも1種を、花弁らしさ(花弁の薄さ、形状の美しさ等)をより保ちながら、調節することができることを見出した。本発明者は、この知見に基づいてさらに研究を進めた結果、本発明を完成させた。   As a result of diligent research in view of the above problems, the present inventor has found that A) a base sequence encoding the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1, or B) 90% or more identity with the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1. By introducing into a plant a polynucleotide comprising a base sequence encoding an amino acid sequence having at least one species selected from the group consisting of plant traits, particularly petal life, petal shape, and petal color, It has been found that adjustments can be made while maintaining the appearance (thinness of petals, beauty of shape, etc.). As a result of further research based on this knowledge, the present inventor completed the present invention.

即ち、本発明は、下記の態様を包含する。   That is, the present invention includes the following aspects.

項1. A)配列番号1に示されるアミノ酸配列をコードする塩基配列、又はB)配列番号1に示されるアミノ酸配列と90%以上の同一性を有するアミノ酸配列をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチドを含有する、植物形質調節剤。   Item 1. A) containing a polynucleotide comprising a base sequence encoding the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1, or B) a base sequence encoding an amino acid sequence having 90% or more identity with the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1. , Plant trait regulator.

項2. 前記形質が花弁形質を含む、項1に記載の植物形質調節剤。   Item 2. Item 2. The plant character regulator according to Item 1, wherein the character includes a petal character.

項3. 前記形質が、花弁の寿命、花弁の形状、及び花弁の色からなる群より選択される少なくとも1種の花弁形質を含む、項1又は2に記載の植物形質調節剤。   Item 3. Item 3. The plant trait regulator according to Item 1 or 2, wherein the character includes at least one petal character selected from the group consisting of petal life, petal shape, and petal color.

項4. 前記形質が、花弁の寿命及び花弁の形状からなる群より選択される少なくとも1種の花弁形質を含む、項1〜3のいずれかに記載の植物形質調節剤。   Item 4. Item 4. The plant trait regulator according to any one of Items 1 to 3, wherein the character includes at least one petal character selected from the group consisting of petal life and petal shape.

項5. 前記形質調節が花弁の緑色化である、項1〜4のいずれかに記載の植物形質調節剤。   Item 5. Item 5. The plant trait regulator according to any one of Items 1 to 4, wherein the trait regulation is greening of petals.

項6. 前記ポリヌクレオチドがベクターを構成している、項1〜5のいずれかに記載の植物形質調節剤。   Item 6. Item 6. The plant trait regulator according to any one of Items 1 to 5, wherein the polynucleotide constitutes a vector.

項7. A)配列番号1に示されるアミノ酸配列をコードする塩基配列、又はB)配列番号1に示されるアミノ酸配列と90%以上の同一性を有するアミノ酸配列をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチドを含有する細胞を含む、形質調節された植物又はその部分構造体。   Item 7. A) containing a polynucleotide comprising a base sequence encoding the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1, or B) a base sequence encoding an amino acid sequence having 90% or more identity with the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1. A trait-regulated plant or a partial structure thereof containing cells.

項8. A)配列番号1に示されるアミノ酸配列をコードする塩基配列、又はB)配列番号1に示されるアミノ酸配列と90%以上の同一性を有するアミノ酸配列をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチドを含有する細胞を含み、且つ形質調節された器官を含む植物から得られる、或いは該植物へ発生する、種子。   Item 8. A) containing a polynucleotide comprising a base sequence encoding the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1, or B) a base sequence encoding an amino acid sequence having 90% or more identity with the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1. Seeds that are obtained from or develop into a plant that contains cells and contains a phenotypically regulated organ.

項9. A)配列番号1に示されるアミノ酸配列をコードする塩基配列、又はB)配列番号1に示されるアミノ酸配列と90%以上の同一性を有するアミノ酸配列をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチドを植物又は植物細胞に導入する工程を含む、植物形質調節方法。   Item 9. A) a base sequence encoding the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1, or B) a polynucleotide comprising a base sequence encoding an amino acid sequence having 90% or more identity with the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1 A plant trait regulation method comprising a step of introducing a plant cell.

項10. A)配列番号1に示されるアミノ酸配列をコードする塩基配列、又はB)配列番号1に示されるアミノ酸配列と90%以上の同一性を有するアミノ酸配列をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチドを植物又は植物細胞に導入する工程を含む、形質調節された植物の製造方法。   Item 10. A) a base sequence encoding the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1, or B) a polynucleotide comprising a base sequence encoding an amino acid sequence having 90% or more identity with the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1 A method for producing a trait-regulated plant, comprising a step of introducing the plant cell.

本発明によれば、花弁形質を含む植物形質を調節する技術を提供することができる。好ましくは、本発明によれば、花弁形質を、花弁らしさ(花弁の薄さ、形状の美しさ等)をより保ちながら調節する技術を提供することができる。より好ましくは、本発明によれば、花弁の寿命、花弁の形状、及び花弁の色からなる群より選択される少なくとも1種の花弁形質を調節する技術を提供することができる。   According to the present invention, a technique for regulating plant traits including petal traits can be provided. Preferably, according to the present invention, it is possible to provide a technique for adjusting the petal character while maintaining the petal character (the thinness of the petal, the beauty of the shape, etc.). More preferably, according to the present invention, a technique for regulating at least one petal trait selected from the group consisting of petal life, petal shape, and petal color can be provided.

実施例4におけるシロイヌナズナの観察像を示す。Aは花序における花及び長角果を示す。A中、WTは野生型のシロイヌナズナを示し、GPP oxは実施例1で得られたシロイヌナズナを示す。BはAの像中、最も古い花及びその花弁を示す。B中、スケールバーは1 mmを表す。The observation image of Arabidopsis thaliana in Example 4 is shown. A shows the flower and long-horned fruit in an inflorescence. In A, WT represents wild-type Arabidopsis thaliana and GPP ox represents the Arabidopsis thaliana obtained in Example 1. B shows the oldest flower and its petals in the image of A. In B, the scale bar represents 1 mm. 実施例4におけるアサガオの花の観察像を示す。WTは野生型のアサガオを示し、escape (n37-2)は実施例2でGPPを導入したもののエスケープにより非形質転換体となった株を示し、GPP oxの3つの株それぞれは実施例2で得られたアサガオを示す。The observation image of the morning glory flower in Example 4 is shown. WT indicates wild-type morning glory, escape (n37-2) indicates a strain that has been introduced with GPP in Example 2 but has become non-transformed by escape, and each of the three GPP ox strains in Example 2. The obtained morning glory is shown. 実施例4におけるアサガオの花の経時的観察像を示す。WTは野生型のアサガオを示し、GPP oxは実施例2で得られたアサガオを示す。The time-sequential observation image of the morning glory flower in Example 4 is shown. WT represents wild type morning glory, and GPP ox represents morning glory obtained in Example 2. 実施例4における、実施例3で得られたペチュニアの花の観察像を示す。The observation image of the petunia flower obtained in Example 3 in Example 4 is shown.

本明細書中において、「含有」及び「含む」なる表現については、「含有」、「含む」、「実質的にからなる」及び「のみからなる」という概念を含む。   In this specification, the expressions “containing” and “including” include the concepts of “containing”, “including”, “consisting essentially of”, and “consisting only of”.

本明細書中において、アミノ酸配列の「同一性」とは、2以上の対比可能なアミノ酸配列の、お互いに対するアミノ酸配列の一致の程度をいう。従って、ある2つのアミノ酸配列の一致性が高いほど、それらの配列の同一性又は類似性は高い。アミノ酸配列の同一性のレベルは、例えば、配列分析用ツールであるFASTAを用い、デフォルトパラメータを用いて決定される。若しくは、Karlin及びAltschulによるアルゴリズムBLAST(KarlinS,Altschul SF.“Methods for assessing the statistical significance of molecular sequence features by using general scoringschemes”Proc Natl Acad Sci USA.87:2264−2268(1990)、KarlinS,Altschul SF.“Applications and statistics for multiple high−scoring segments in molecular sequences.”Proc Natl Acad Sci USA.90:5873−7(1993))を用いて決定できる。このようなBLASTのアルゴリズムに基づいたblastpと呼ばれるプログラムやtblastnと呼ばれるプログラムが開発されている。これらの解析方法の具体的な手法は公知であり、National Center of Biotechnology Information(NCBI)のウェエブサイト(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)を参照すればよい。また、塩基配列の「同一性」も上記に準じて定義される。   In the present specification, “identity” of amino acid sequences refers to the degree of amino acid sequence match between two or more comparable amino acid sequences. Therefore, the higher the identity between two amino acid sequences, the higher the identity or similarity of those sequences. The level of amino acid sequence identity is determined, for example, using FASTA, a sequence analysis tool, using default parameters. Alternatively, the algorithm BLAST (KarlinS, Altschul SF. “Methods for assessing the statistical significance of molecular sequence features by using general scoringschemes” Proc Natl Acad Sci USA. 87: 2264-2268 (1990), Karlin S, Altschul SF. "Applications and statistics for multiple high-scoring segments in molecular sequences." Proc Natl Acad Sci USA. 90: 5873-7 (1993)). A program called blastp and a program called tblastn based on the BLAST algorithm have been developed. Specific methods of these analysis methods are known, and the website of the National Center of Biotechnology Information (NCBI) (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/) may be referred to. The “identity” of the base sequence is also defined according to the above.

本明細書中において、「保存的置換」とは、アミノ酸残基が類似の側鎖を有するアミノ酸残基に置換されることを意味する。例えば、リジン、アルギニン、ヒスチジンといった塩基性側鎖を有するアミノ酸残基同士で置換されることが、保存的な置換にあたる。その他、アスパラギン酸、グルタミン酸といった酸性側鎖を有するアミノ酸残基;グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、チロシン、システインといった非帯電性極性側鎖を有するアミノ酸残基;アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファンといった非極性側鎖を有するアミノ酸残基;スレオニン、バリン、イソロイシンといったβ−分枝側鎖を有するアミノ酸残基;チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジンといった芳香族側鎖を有するアミノ酸残基同士での置換も同様に、保存的な置換にあたる。   In the present specification, “conservative substitution” means that an amino acid residue is substituted with an amino acid residue having a similar side chain. For example, substitution with amino acid residues having basic side chains such as lysine, arginine, and histidine is a conservative substitution. In addition, amino acid residues having acidic side chains such as aspartic acid and glutamic acid; amino acid residues having non-charged polar side chains such as glycine, asparagine, glutamine, serine, threonine, tyrosine, and cysteine; alanine, valine, leucine, isoleucine, Amino acid residues with non-polar side chains such as proline, phenylalanine, methionine, and tryptophan; Amino acid residues with β-branched side chains such as threonine, valine, and isoleucine; Aromatic side chains such as tyrosine, phenylalanine, tryptophan, and histidine Similarly, substitutions between amino acid residues are conservative substitutions.

1.植物形質調節剤
本発明は、その一態様において、A)配列番号1に示されるアミノ酸配列をコードする塩基配列(塩基配列A)、又はB)配列番号1に示されるアミノ酸配列と90%以上の同一性を有するアミノ酸配列をコードする塩基配列(塩基配列B)を含むポリヌクレオチド(本明細書において、「本発明のポリヌクレオチド」と示すこともある。)を含有する、植物形質調節剤(本明細書において、「本発明の植物形質調節剤」と示すこともある。)に係る。以下に、これについて説明する。
1. Plant trait regulator In one aspect of the present invention, A) a nucleotide sequence encoding the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1 (base sequence A), or B) 90% or more of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1 A plant trait regulator (this book) containing a polynucleotide containing a base sequence (base sequence B) encoding an amino acid sequence having identity (sometimes referred to as “polynucleotide of the present invention” in the present specification). In the specification, it may be referred to as “plant trait regulator of the present invention”). This will be described below.

配列番号1に示されるアミノ酸配列からなるタンパク質は、イネの内在タンパク質であり、他の植物においても同様のタンパク質が存在すると考えられる。   The protein consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1 is an endogenous protein of rice, and it is considered that similar proteins exist in other plants.

塩基配列Aは、配列番号1に示されるアミノ酸配列をコードするものである限り特に制限されない。塩基配列Aとしては、好ましくは配列番号2に示される塩基配列が挙げられる。   The base sequence A is not particularly limited as long as it encodes the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1. The base sequence A preferably includes the base sequence represented by SEQ ID NO: 2.

塩基配列Bの定義において、塩基配列Bでコードされるタンパク質のアミノ酸配列と配列番号1に示されるアミノ酸配列との同一性は、好ましくは95%以上、より好ましくは97%以上、さらに好ましくは99%以上、よりさらに好ましくは99.5%以上である。   In the definition of the base sequence B, the identity between the amino acid sequence of the protein encoded by the base sequence B and the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1 is preferably 95% or more, more preferably 97% or more, and even more preferably 99. % Or more, more preferably 99.5% or more.

塩基配列Bの一態様としては、以下の塩基配列B1が挙げられる:
B1)配列番号1に示されるアミノ酸配列に対して1又は複数のアミノ酸が変異してなるアミノ酸配列をコードする塩基配列(塩基配列B1)。
One embodiment of the base sequence B includes the following base sequence B1:
B1) A nucleotide sequence (base sequence B1) encoding an amino acid sequence obtained by mutating one or more amino acids with respect to the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1.

塩基配列B1において、複数とは、例えば2〜100、好ましくは2〜50、より好ましくは2〜10、さらに好ましくは2〜5である。   In the base sequence B1, the plurality is, for example, 2 to 100, preferably 2 to 50, more preferably 2 to 10, and further preferably 2 to 5.

塩基配列B及びB1において、アミノ酸が変異する塩基配列の変異としては、特に制限されず、置換、欠失、挿入、付加等が挙げられる。これらの中でも、置換が好ましく、中でも保存的置換が好ましい。   In the nucleotide sequences B and B1, the mutation of the nucleotide sequence in which the amino acid is mutated is not particularly limited, and examples thereof include substitution, deletion, insertion and addition. Of these, substitution is preferred, and conservative substitution is preferred.

塩基配列B及びB1において、「配列番号1に示されるアミノ酸配列と90%以上の同一性を有するアミノ酸配列」は、該配列からなるタンパク質がその本来の機能を著しく損なわない限りにおいて特に制限されない。典型的には、該アミノ酸配列は、由来植物であるイネにおいて内在的に発現する、自然界において生じた変異を含む。   In the base sequences B and B1, the “amino acid sequence having 90% or more identity with the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1” is not particularly limited as long as the protein comprising the sequence does not significantly impair its original function. Typically, the amino acid sequence comprises naturally occurring mutations that are endogenously expressed in the plant plant rice.

塩基配列B及びB1は、好ましくは、塩基配列A(好ましくは配列番号2)の相補鎖と、ストリンジェントな条件でハイブリダイズすることができる。ストリンジェントな条件は、Berger and Kimmel (1987, Guide to Molecular Cloning Techniques Methods in Enzymology, Vol. 152, Academic Press, San Diego CA) に教示されるように、複合体或いはプローブを結合する核酸の融解温度(Tm)に基づいて決定することができる。例えばハイブリダイズ後の洗浄条件として、通常「1×SSC、0.1%SDS、37℃」程度の条件を挙げることができる。かかる条件で洗浄してもハイブリダイズ状態を維持するものであることが好ましい。特に制限されないが、より厳しいハイブリダイズ条件として「0.5×SSC、0.1%SDS、42℃」程度、さらに厳しいハイブリダイズ条件として「0.1×SSC、0.1%SDS、65℃」程度の洗浄条件を挙げることができる。   Base sequences B and B1 can preferably hybridize with a complementary strand of base sequence A (preferably SEQ ID NO: 2) under stringent conditions. Stringent conditions are determined by the melting temperature of the nucleic acid that binds the complex or probe, as taught by Berger and Kimmel (1987, Guide to Molecular Cloning Techniques Methods in Enzymology, Vol. 152, Academic Press, San Diego CA). It can be determined based on (Tm). For example, as washing conditions after hybridization, the conditions of about “1 × SSC, 0.1% SDS, 37 ° C.” can be mentioned. It is preferable that the hybridized state be maintained even when washed under such conditions. Although there is no particular limitation, the more stringent hybridization conditions are about “0.5 × SSC, 0.1% SDS, 42 ° C.”, and the more severe hybridization conditions are “0.1 × SSC, 0.1% SDS, 65 ° C.”. Can do.

本発明のポリヌクレオチドは、塩基配列A又はB以外にも、プロモーターを含むことが好ましい。プロモーターは、塩基配列A又はBでコードされるタンパク質を発現可能なように配置される。プロモーターとしては、植物細胞内で転写活性を有し得るものである限り特に制限されない。プロモーターの具体例としては、CaMV35Sプロモーター、UBQ(ユビキチン)プロモーター、NOSプロモーター等の器官非特異的な恒常性プロモーター; 器官特異的(例えば、花弁特異的)プロモーター等が挙げられる。   In addition to the base sequence A or B, the polynucleotide of the present invention preferably contains a promoter. The promoter is arranged so that the protein encoded by the base sequence A or B can be expressed. The promoter is not particularly limited as long as it can have transcription activity in plant cells. Specific examples of promoters include organ non-specific constitutive promoters such as CaMV35S promoter, UBQ (ubiquitin) promoter and NOS promoter; organ-specific (eg, petal-specific) promoters and the like.

本発明のポリヌクレオチドは、上記以外の他の塩基配列を含むことができる。他の塩基配列としては、例えば薬剤耐性遺伝子、レポータータンパク質コード配列、これらの発現カセット; タンパク質タグコード配列; シグナル配列コード配列; 複製起点; アグロバクテリウム法で使用されるバイナリーベクターの各エレメント配列(例えば左境界領域、右境界領域等)等が挙げられる。   The polynucleotide of the present invention can contain a nucleotide sequence other than those described above. Other base sequences include, for example, drug resistance genes, reporter protein coding sequences, expression cassettes thereof; protein tag coding sequences; signal sequence coding sequences; replication origins; each element sequence of binary vectors used in the Agrobacterium method ( For example, left boundary area, right boundary area, etc.).

薬剤耐性遺伝子としては、例えばクロラムフェニコール耐性遺伝子、テトラサイクリン耐性遺伝子、ネオマイシン耐性遺伝子、エリスロマイシン耐性遺伝子、スペクチノマイシン耐性遺伝子、カナマイシン耐性遺伝子、ハイグロマイシン耐性遺伝子、ピューロマイシン耐性遺伝子等が挙げられる。   Examples of drug resistance genes include chloramphenicol resistance gene, tetracycline resistance gene, neomycin resistance gene, erythromycin resistance gene, spectinomycin resistance gene, kanamycin resistance gene, hygromycin resistance gene, puromycin resistance gene and the like.

レポータータンパク質としては、特に制限されず、例えば特定の基質と反応して発光(発色)する発光(発色)タンパク質、或いは励起光によって蛍光を発する蛍光タンパク質等が挙げられる。発光(発色)タンパク質としては、例えばルシフェラーゼ、βガラクトシダーゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ、βグルクロニダーゼ等が挙げられ、蛍光タンパク質としては、例えばGFP、Azami-Green、ZsGreen、GFP2、HyPer、Sirius、BFP、CFP、Turquoise、Cyan、TFP1、YFP、Venus、ZsYellow、Banana、KusabiraOrange、RFP、DsRed、AsRed、Strawberry、Jred、KillerRed、Cherry、HcRed、mPlum等が挙げられる。また、レポータータンパク質には、発光(発色)タンパク質や蛍光タンパク質と、他のタンパク質(例えば種子特異的タンパク質)との融合タンパク質や、発光(発色)タンパク質や蛍光タンパク質に公知のタンパク質タグ、公知のシグナル配列等が付加されてなるタンパク質も包含される。   The reporter protein is not particularly limited, and examples thereof include a luminescent (colored) protein that emits light (colored) by reacting with a specific substrate, or a fluorescent protein that emits fluorescence by excitation light. Examples of the luminescent (coloring) protein include luciferase, β-galactosidase, chloramphenicol acetyltransferase, β-glucuronidase and the like, and examples of the fluorescent protein include GFP, Azami-Green, ZsGreen, GFP2, HyPer, Sirius, BFP, CFP, Turquoise, Cyan, TFP1, YFP, Venus, ZsYellow, Banana, KusabiraOrange, RFP, DsRed, AsRed, Strawberry, Jred, KillerRed, Cherry, HcRed, mPlum, and the like. The reporter protein includes a fusion protein of a luminescent (chromogenic) protein or fluorescent protein and another protein (eg, seed-specific protein), a known protein tag for the luminescent (chromogenic) protein or fluorescent protein, or a known signal. Proteins to which sequences and the like are added are also included.

タンパク質タグとしては、例えばビオチン、Hisタグ、FLAGタグ、Haloタグ、MBPタグ、HAタグ、Mycタグ、V5タグ、PAタグ等が挙げられる。   Examples of protein tags include biotin, His tag, FLAG tag, Halo tag, MBP tag, HA tag, Myc tag, V5 tag, and PA tag.

シグナル配列としては、例えば転写の終結シグナルが挙げられる。終結シグナルとしては、特に制限されず、例えば、ヒートショックタンパク質終結シグナル(HspT: Heat shock protein Terminator)、NosT (Noparin synthase Terminator)、35sT (CaMV35S Terminator)等が挙げられる。   Examples of the signal sequence include a transcription termination signal. The termination signal is not particularly limited, and examples thereof include a heat shock protein termination signal (HspT: Heat shock protein Terminator), NosT (Noparin synthase Terminator), and 35sT (CaMV35S Terminator).

本発明のポリヌクレオチドは、ベクターを構成していてもよい。ベクターの種類としては、特に制限されず、例えばプラスミドベクター; アグロバクテリウムベクター; タバコモザイクウイルス、キュウリモザイクウイルス、アフリカキャッサバモザイクウイルス、リンゴ小球形潜在ウイルス、オオムギ斑葉モザイクウイルス、Bean pod mottle virus、Beet curly top virus、Brome mosaic virus、Cabbage leaf curl virus、Cotton leaf crumple virus、シンビジュームモザイクウイルス、ブドウAウイルス、Pea early browning virus、Poplar mosaic virus、ジャガイモXウイルス、Rice tungro bacilliform virus、サテライトタバコモザイクウイルス、Tobacco curly shoot virus、タバコ茎えそウイルス等の植物ウイルスベクター等が挙げられる。また、上記のベクターのように、植物又は植物細胞への導入に適したベクター以外にも、このようなベクターに本発明のポリヌクレオチドを移し替えるためのベクター(例えば、ゲートウェイ(登録商標)のエントリークローンベクター等)も一例として挙げることができる。   The polynucleotide of the present invention may constitute a vector. The type of vector is not particularly limited. For example, plasmid vector; Agrobacterium vector; tobacco mosaic virus, cucumber mosaic virus, African cassava mosaic virus, apple small spherical latent virus, barley spotted mosaic virus, Bean pod mottle virus, Beet curly top virus, Brome mosaic virus, Cabbage leaf curl virus, Cotton leaf crumple virus, Symbidium mosaic virus, Grape A virus, Pea early browning virus, Poplar mosaic virus, Potato X virus, Rice tungro bacilliform virus, Satellite tobacco mosaic virus, Examples include plant virus vectors such as Tobacco curly shoot virus and tobacco stem virus. In addition to the vectors suitable for introduction into plants or plant cells as described above, vectors for transferring the polynucleotide of the present invention to such vectors (for example, gateway (registered trademark) entries). A clone vector etc. can also be mentioned as an example.

本発明のポリヌクレオチドが植物に導入された場合、内在性の転写制御領域の制御下で、及び/又は本発明のポリヌクレオチドがプロモーターを含む場合はそのプロモーターの制御下で、塩基配列A又はBでコードされるタンパク質を発現することができる。   When the polynucleotide of the present invention is introduced into a plant, the base sequence A or B is under the control of an endogenous transcription control region, and / or under the control of the promoter when the polynucleotide of the present invention includes a promoter. The protein encoded by can be expressed.

本発明のポリヌクレオチドは、公知の遺伝子工学的手法に従って容易に作製することができる。例えば、PCR、制限酵素切断、DNA連結技術、in vitro転写技術等を利用して作製することができる。   The polynucleotide of the present invention can be easily prepared according to a known genetic engineering technique. For example, it can be prepared using PCR, restriction enzyme cleavage, DNA ligation technology, in vitro transcription technology, and the like.

本発明の植物形質調節剤の形態は特に制限されず、例えば試薬の形態であっても、キットの形態であってもよい。   The form of the plant trait regulator of the present invention is not particularly limited, and may be, for example, a reagent form or a kit form.

試薬の形態である場合、本発明の植物形質調節剤は、本発明のポリヌクレオチドを含有する限りにおいて特に制限されず、必要に応じてさらに他の成分を含んでいてもよい。他の成分としては、特に限定されるものではないが、例えば基剤、担体、溶剤、分散剤、乳化剤、緩衝剤、安定剤、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、増粘剤、保湿剤、着色料、香料、キレート剤等が挙げられる。   When it is in the form of a reagent, the plant trait regulator of the present invention is not particularly limited as long as it contains the polynucleotide of the present invention, and may further contain other components as necessary. Examples of other components include, but are not limited to, bases, carriers, solvents, dispersants, emulsifiers, buffers, stabilizers, excipients, binders, disintegrants, lubricants, thickeners. Agents, moisturizers, colorants, fragrances, chelating agents and the like.

キットの形態である場合、本発明の植物形質調節剤は、本発明のポリヌクレオチド及び/又は上記試薬を含有する限りにおいて特に制限されず、必要に応じて核酸導入試薬、緩衝液等、本発明のゲノム編集方法の実施に必要な他の材料、試薬、器具等を適宜含んでいてもよい。   When it is in the form of a kit, the plant trait regulator of the present invention is not particularly limited as long as it contains the polynucleotide of the present invention and / or the reagent described above, and the present invention includes a nucleic acid introduction reagent, a buffer solution, etc. as necessary. Other materials, reagents, instruments and the like necessary for carrying out the genome editing method may be appropriately included.

本発明の形質調節対象である「植物」は、その成長過程において花弁を有することがある植物である限り特に制限されない。植物としては、例えば裸子植物、被子植物のモクレン類、単子葉類、真正双子葉類(バラ類I、バラ類II、キク類I、キク類II及びそれらの外群)を含む広い範囲の植物を挙げることができる。植物としては、被子植物が好ましい。植物のより具体的な例としては、アオイ科、アブラナ科、キク科、ヤナギ科、キンポウゲ科、クスノキ科、センリョウ科、ドクダミ科、サトイモ科、シソ科、スミレ科、セリ科、ツゲ科、ツツジ科、タデ科、ヒユ科、ヒルガオ科、バラ科、ビャクダン科、フウチョウソウ科、フウロソウ科、ブドウ科、ブナ科、スイカズラ科、マツムシソウ科、マメ科、ミカン科、ムクロジ科、ヤマモガシ科、ユキノシタ科、キョウチクトウ科、リンドウ科、オシダ科、ヒノキ科、ウリ科、ナス科、ゴマ科、オオバコ科、ハマウツボ科、アゼナ科、フウチョウボク科、カリケラ科、クサトベラ科、ミツガシワ科、スティリディウム科、ヒメハギ科、スリアナ科、ムンティンギア科、キティヌス科、フタバガキ科、サルコラエナ科、ハンニチバナ科、ベニノキ科、スファエロセパルム科、テトラメレス科、ベゴニア科、ダティスカ科、メギ科、ツヅラフジ科、ヒブリス科、スチルベ科、ゴマノハグサ科、サギゴケ科、ハエドクソウ科、キリ科、コショウ科、ディディメラ科、キンモウワラビ科、ツルキジノオシダ科、タマシダ科、ナナバケシダ科、ツルシダ科、ウラボシ科、シノブ科、キンモウワラビ科、ツルキジノオシダ科、タマシダ科、ナナバケシダ科、ツルシダ科、ウラボシ科、シノブ科等に属する植物が挙げられる。   The “plant” that is the target of trait regulation of the present invention is not particularly limited as long as it is a plant that may have a petal during its growth process. A wide range of plants including, for example, gymnosperms, angiosperm magnolias, monocotyledons, true dicotyledons (roses I, roses II, chrysanthemum I, chrysanthemum II and their outer groups) Can be mentioned. An angiosperm is preferable as the plant. More specific examples of plants include mallow, cruciferous, chrysanthemum, willows, buttercups, camphoraceae, cyperaceae, dolphins, taros, perillas, violets, celerys, boxwoods, azaleas Family, tadaceae, amaranthaceae, convolvulaceae, rose family, sandalwood family, scorpionaceae family, shrimp family, grape family, beech family, honeysuckle family, scorpion family, legume family, mandarin family, scallop family, genus department, saxifrage family, Oleander, Gentianaceae, Fernaceae, Cypressaceae, Cucurbitaceae, Eggplant, Sesameaceae, Psyllidae, Scorpionaceae, Azena, Pleurotusaceae, Calikerae, Scutellaria, Stagidae, Stiridium, Scorpionaceae , Suriana, Muntingia, Kitinaceae, Dipterocarpaceae, Sarcoraenaceae, Algeriaceae, Beninidae Sphaerocepalmaceae, Tetrameles, Begonias, Datiska, Barberry, Lapteridae, Hiblis, Stilbeidae, Scorpaenidae, Heronaceae, Haedokushi, Kiri, Pepperaceae, Didimera, Kinmowalabidae, Tsuruginoshinoda, Examples include plants belonging to the family Tamaidae, Tanabidae, Tsurudaida, Urabosiidae, Shinobuidae, Kinmowalabidae, Camellia pteridae, Tamidaiidae, Nanabaedaidae, Tsurudaidae, Urabosiidae, Shinobuidae, etc.

後述の実施例では、植物の分類上離れた種間(シロイヌナズナとアサガオ・ペチュニアとの間)で植物形質調節効果が得られたことから、この効果は、植物種を問わずに発揮されると考えられる。   In the examples described later, since the plant trait control effect was obtained between species that are separated from each other in the classification of plants (between Arabidopsis thaliana and Asagao petunia), this effect is exhibited regardless of the plant species. Conceivable.

また、限定的な解釈を望むものではないが、本発明のメカニズムの一端は次のように考えられる。本発明のポリヌクレオチドから発現した塩基配列A又はBでコードされるタンパク質は、花弁を構成する細胞内の葉緑体を増加させることにより花弁の色を変化させ、さらに花弁の構造を葉の構造に近付けることにより、花弁の形状を変化させ、また花弁の構造的強靭性を高めてその寿命を延長させると考えられる。   Moreover, although a limited interpretation is not desired, one end of the mechanism of the present invention is considered as follows. The protein encoded by the base sequence A or B expressed from the polynucleotide of the present invention changes the color of petals by increasing the number of chloroplasts in the cells constituting the petals, and further changes the petal structure to the leaf structure. It is considered that the shape of the petal is changed by approaching to the point, and the structural toughness of the petal is increased to extend its life.

本発明の植物形質調節剤によれば、各種植物形質、例えば花弁形質、より具体的には例えば花弁の寿命、花弁の形状、花弁の色等を調節することができる。これらのより具体的な例において、発明の植物形質調節剤によれば、花弁の寿命を延長することができ、或いは花弁の形状を変化させることができ、或いは花弁の色を変化(例えば緑色化)させることができる。この場合、本発明の植物形質調節剤は、花弁寿命延長剤、花弁老化抑制剤、花弁形状改変剤、花弁色改変剤、花弁緑色化剤等として使用することができる。   According to the plant trait modifier of the present invention, various plant traits such as petal traits, more specifically, for example, petal life, petal shape, petal color, and the like can be adjusted. In these more specific examples, the plant trait modifier of the invention can extend the life of the petals, change the shape of the petals, or change the color of the petals (eg greening). ). In this case, the plant trait regulator of the present invention can be used as a petal life extending agent, a petal aging inhibitor, a petal shape modifier, a petal color modifier, a petal greening agent, and the like.

本発明の植物形質調節剤は、後述の「2.植物形質調節方法、形質調節された植物又は植物細胞の製造方法」のように使用することができる。   The plant trait regulator of the present invention can be used as described in “2. Plant trait regulation method, trait-regulated plant or plant cell production method” described later.

2.植物形質調節方法、形質調節された植物の製造方法
本発明は、その一態様において、本発明のポリヌクレオチドを植物又は植物細胞に導入する工程を含む、植物形質調節方法、及び形質調節された植物の製造方法(本明細書において、これらを総称して「本発明の方法」と示すこともある。)に係る。以下に、これらについて説明する。
2. Plant trait regulation method, method for producing trait-regulated plant The present invention, in one aspect thereof, includes the step of introducing the polynucleotide of the present invention into a plant or plant cell, and a plant trait-regulated plant. (In the present specification, these may be collectively referred to as “the method of the present invention”). These will be described below.

導入対象の植物は、「1.植物形質調節剤」における定義と同様である。導入対象の植物細胞としては、花弁へと発生し得る細胞である限り特に制限されず、例えば卵細胞が挙げられる。また、植物における導入部位としては、特に制限されず、例えば花(特に、花の中の、卵細胞、花粉等)、葉、根等が挙げられる。   The plant to be introduced is the same as defined in “1. Plant trait regulator”. The plant cell to be introduced is not particularly limited as long as it is a cell that can develop into a petal, and examples thereof include egg cells. In addition, the introduction site in the plant is not particularly limited, and examples thereof include flowers (especially eggs, pollen, etc. in flowers), leaves, roots, and the like.

導入方法は、特に制限されず、導入する物の種類や導入対象に応じて、適宜選択することができる。導入方法としては、例えばフローラル・ディップ法、フローラル・スプレー法、アグロバクテリウム法、パーティクル・ガン法、インフィルトレーション法、爪楊枝接種法、吸引注入法、リーフディスク法、花序浸潤法、減圧濾過法、ウイルス媒介性核酸送達等が挙げられる。これらの中でも、簡便性や安全性等の観点から、好ましくはアグロバクテリウム法が挙げられる。   The introduction method is not particularly limited, and can be appropriately selected according to the type of the product to be introduced and the introduction target. Examples of introduction methods include the floral dip method, the floral spray method, the Agrobacterium method, the particle gun method, the infiltration method, the toothpick inoculation method, the suction injection method, the leaf disk method, the inflorescence infiltration method, and the vacuum filtration method. Virus-mediated nucleic acid delivery and the like. Among these, the Agrobacterium method is preferable from the viewpoint of convenience and safety.

導入後は、得られた植物又は植物細胞を成長させることにより、或いは得られた植物からカルスを経て成長させることにより、形質調節された植物を得ることができる。また、導入後は、必要に応じて、本発明のポリヌクレオチドが導入された細胞、組織等を、薬剤で選別することができる。   After the introduction, a trait-regulated plant can be obtained by growing the obtained plant or plant cell or by growing from the obtained plant via callus. In addition, after the introduction, cells, tissues and the like into which the polynucleotide of the present invention has been introduced can be selected with a drug as necessary.

本発明の方法によって、GPPの発現量等に応じて、形質調節の程度の異なる種々の植物が得られ得る。この場合、例えば花弁緑色化の程度、花弁形状等の観点から、望みの形質を有する植物をスクリーニングすることができる。   By the method of the present invention, various plants with different degrees of phenotypic regulation can be obtained depending on the expression level of GPP and the like. In this case, for example, a plant having a desired character can be screened from the viewpoint of the degree of petal greening, the petal shape, and the like.

3.植物、部分構造体、種子
本発明は、その一態様において、本発明のポリヌクレオチドを含有する細胞を含む、形質調節された植物又はその部分構造体、及び該植物から得られる、或いは該植物へ発生する、種子に係る。
3. Plant, substructure, seed The present invention, in one aspect thereof, is a trait-regulated plant or substructure comprising cells containing the polynucleotide of the present invention, and obtained from or to the plant. Generated seeds.

植物の部分構造体としては、特に制限されず、接木用の穂木、接木用の台木、枝、地上部等が挙げられ、特に花、つぼみを含む、或いはこれらが発生し得る部分構造体が好ましい。   The partial structure of the plant is not particularly limited, and examples include grafting scrubs, grafting rootstocks, branches, aerial parts, and the like, and in particular, partial structures that contain or can generate flowers and buds. Is preferred.

本項における植物、部分構造体、種子は、上述の「2.植物形質調節方法、形質調節された植物又は植物細胞の製造方法」に従って得ることができる。   The plant, partial structure, and seed in this section can be obtained according to the above-mentioned “2. Plant trait regulation method, plant-regulated plant or plant cell production method”.

以下に、実施例に基づいて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例によって限定されるものではない。   EXAMPLES The present invention will be described in detail below based on examples, but the present invention is not limited to these examples.

参考例1.GPP発現カセット含有ベクターの調製
カリフラワーモザイクウイルス35Sプロモーターの下流にGPP(Green Petal inducible Protein)タンパク質(アミノ酸配列は配列番号1)をコードする塩基配列(配列番号2)が配置されてなる発現カセットをバイナリーベクター(pBIG2113SF)に組み込み、GPP発現カセット含有バイナリーベクターを得た。
Reference example 1. Preparation of vector containing GPP expression cassette Binary expression cassette comprising base sequence (SEQ ID NO: 2) encoding GPP (Green Petal inducible Protein) protein (amino acid sequence SEQ ID NO: 1) downstream of the cauliflower mosaic virus 35S promoter It was incorporated into a vector (pBIG2113SF) to obtain a binary vector containing a GPP expression cassette.

実施例1.シロイヌナズナへのGPPの導入
GPP発現カセット含有バイナリーベクター(参考例1)を含有するアグロバクテリウム(Agrobacterium tumefaciens GV3101)をシロイヌナズナ(Arabidopsis thaliana (ecotype Col-0))の花に滴下して、種子を獲得した(既報:ドロップ法,Narusaka et al., Plant Biotechnol. 27: 349-351.)。得られた種子を選抜マーカー(ハイグロマイシン)を含む培地に播種し、培地上で生育したGPP発現カセットが導入されたシロイヌナズナ植物を獲得した。
Example 1. Introduction of GPP to Arabidopsis thaliana
Agrobacterium (Agrobacterium tumefaciens GV3101) containing a GPP expression cassette-containing binary vector (Reference Example 1) was dropped onto Arabidopsis thaliana (ecotype Col-0) flowers to obtain seeds (previously reported: drop method) , Narusaka et al., Plant Biotechnol. 27: 349-351.). The obtained seeds were sown in a medium containing a selection marker (hygromycin) to obtain an Arabidopsis plant into which a GPP expression cassette grown on the medium was introduced.

実施例2.アサガオへのGPPの導入
既報(Shimizu et al., (2003), J. Japan.Soc. Hort. Sci. 72: 409-414.及び Kikuchi et al., (2005), Plant Biotechnol. 22: 295-302.)に準じて、GPP発現カセット含有バイナリーベクター(参考例1)を含有するアグロバクテリウム(Agrobacterium tumefaciens EHA105)をアサガオ(Japanese morning glory (Ipomoea nil, the white petal mutant of ‘Violet’ :Ishimaru et al. (1996), J. Plant Physiol. 148: 672-676.))に導入した。導入後、カルスを経て、GPP発現カセットが導入されたアサガオを得た。
Example 2 GPP introduction to morning glory (Shimizu et al., (2003), J. Japan. Soc. Hort. Sci. 72: 409-414. And Kikuchi et al., (2005), Plant Biotechnol. 22: 295- 302.), Agrobacterium tumefaciens EHA105 containing a GPP expression cassette-containing binary vector (Reference Example 1) was transformed into Japanese morning glory (Ipomoea nil, the white petal mutant of 'Violet': Ishimaru et al. (1996), J. Plant Physiol. 148: 672-676.)). After introduction, the morning glory with the GPP expression cassette introduced was obtained through callus.

実施例3.ペチュニアへのGPPの導入
既報(Jorgensen et al.,1996. Plant Mol. Biol. 31, 957-73)に準じて、GPP発現カセット含有バイナリーベクター(参考例1)を含有するアグロバクテリウム(Agrobacterium tumefaciens GV3101)をペチュニア(Petunia×hybrida)に導入した。導入後、カルスを経て、GPP発現カセットが導入されたペチュニアを得た。
Example 3 Agrobacterium (Agrobacterium tumefaciens) containing a GPP expression cassette-containing binary vector (Reference Example 1) according to the previous report of introduction of GPP into petunia (Jorgensen et al., 1996. Plant Mol. Biol. 31, 957-73) GV3101) was introduced into Petunia × hybrida. After introduction, petunia into which the GPP expression cassette was introduced was obtained through callus.

実施例4.形質の評価
実施例1〜3で得られた植物を観察した。シロイヌナズナの観察像を図1に示し、アサガオの観察像を図2及び図3に示し、ペチュニアの観察像を図4に示す。
Example 4 Evaluation of traits The plants obtained in Examples 1 to 3 were observed. An observation image of Arabidopsis thaliana is shown in FIG. 1, an observation image of morning glory is shown in FIGS. 2 and 3, and an observation image of petunia is shown in FIG.

図1〜4より、GPPが導入された植物においては、花弁が、花弁らしさ(花弁の薄さ、形状の美しさ等)を維持しながらも緑色化していることが分かった。このことからGPPは花弁の色を調節する機能(花弁の緑色化能)を有することが分かった。   1-4, it turned out that in the plant in which GPP was introduced, the petals were greened while maintaining the petal-like nature (thinness of petals, beauty of shape, etc.). This indicates that GPP has a function to control petal color (petal greening ability).

図1より、GPPが導入されたシロイヌナズナの花弁は、野生型(データ非表示)に比べて、短く、且つ丸い形状であることが分かった。また、図2及び3より、GPPが導入されたアサガオの花弁は、野生型に比べて、先が尖っている(拮梗咲き)ことが分かった。さらに、図4より、GPPが導入されたペチュニアの花弁は、野生型(データ非表示)に比べて、少し縮れて、やや小さい傾向であった。これらの結果より、GPPは花弁の形状を変化させる機能を有することが分かった。   From FIG. 1, it was found that the petals of Arabidopsis introduced with GPP were shorter and rounder than the wild type (data not shown). 2 and 3, it was found that the morning glory petals into which GPP was introduced had a sharper tip (compete bloom) than the wild type. Furthermore, from FIG. 4, petunia petals into which GPP was introduced tended to be slightly smaller and slightly smaller than the wild type (data not shown). From these results, it was found that GPP has a function of changing the shape of petals.

図1より、GPPが導入されたシロイヌナズナの花弁は、より長い時間脱落せずに、開花時の形態をより長い時間保っていることが分かった。また、図3より、GPPが導入されたアサガオの花弁も、開花時の形態をより長い時間保っていることが分かった。これらの結果より、GPPは、花弁の寿命を延長させる機能(花弁老化抑制機能)を有することが分かった。   From FIG. 1, it was found that the Arabidopsis petals into which GPP was introduced did not fall off for a longer time, and maintained the flowering form for a longer time. In addition, it was found from FIG. 3 that the morning glory petals into which GPP was introduced also maintained the shape at the time of flowering for a longer time. From these results, it was found that GPP has a function of extending the life of petals (petal aging suppression function).

Claims (10)

A)配列番号1に示されるアミノ酸配列をコードする塩基配列、又は
B)配列番号1に示されるアミノ酸配列と90%以上の同一性を有するアミノ酸配列をコードする塩基配列
を含むポリヌクレオチドを含有する、植物形質調節剤。
A) a base sequence encoding the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1, or
B) A plant trait regulator containing a polynucleotide comprising a base sequence encoding an amino acid sequence having 90% or more identity with the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1.
前記形質が花弁形質を含む、請求項1に記載の植物形質調節剤。 The plant trait regulator of Claim 1 in which the said character contains a petal character. 前記形質が、花弁の寿命、花弁の形状、及び花弁の色からなる群より選択される少なくとも1種の花弁形質を含む、請求項1又は2に記載の植物形質調節剤。 The plant trait regulator according to claim 1 or 2, wherein the trait includes at least one petal trait selected from the group consisting of petal life, petal shape, and petal color. 前記形質が、花弁の寿命及び花弁の形状からなる群より選択される少なくとも1種の花弁形質を含む、請求項1〜3のいずれかに記載の植物形質調節剤。 The plant trait regulator according to any one of claims 1 to 3, wherein the trait includes at least one petal trait selected from the group consisting of petal life and petal shape. 前記形質調節が花弁の緑色化である、請求項1〜4のいずれかに記載の植物形質調節剤。 The plant trait regulator in any one of Claims 1-4 whose said trait regulation is greening of a petal. 前記ポリヌクレオチドがベクターを構成している、請求項1〜5のいずれかに記載の植物形質調節剤。 The plant trait regulator in any one of Claims 1-5 in which the said polynucleotide comprises the vector. A)配列番号1に示されるアミノ酸配列をコードする塩基配列、又は
B)配列番号1に示されるアミノ酸配列と90%以上の同一性を有するアミノ酸配列をコードする塩基配列
を含むポリヌクレオチドを含有する細胞を含む、形質調節された植物又はその部分構造体。
A) a base sequence encoding the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1, or
B) A trait-regulated plant or a partial structure thereof comprising a cell containing a polynucleotide comprising a base sequence encoding an amino acid sequence having 90% or more identity with the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1.
A)配列番号1に示されるアミノ酸配列をコードする塩基配列、又は
B)配列番号1に示されるアミノ酸配列と90%以上の同一性を有するアミノ酸配列をコードする塩基配列
を含むポリヌクレオチドを含有する細胞を含み、且つ形質調節された器官を含む植物から得られる、或いは該植物へ発生する、種子。
A) a base sequence encoding the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1, or
B) obtained from a plant comprising a cell containing a polynucleotide comprising a base sequence encoding an amino acid sequence having 90% or more identity with the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1 and comprising a trait-regulated organ; Alternatively, seeds that develop in the plant.
A)配列番号1に示されるアミノ酸配列をコードする塩基配列、又は
B)配列番号1に示されるアミノ酸配列と90%以上の同一性を有するアミノ酸配列をコードする塩基配列
を含むポリヌクレオチドを植物又は植物細胞に導入する工程を含む、植物形質調節方法。
A) a base sequence encoding the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1, or
B) A method for regulating plant traits, comprising the step of introducing a polynucleotide comprising a base sequence encoding an amino acid sequence having 90% or more identity with the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1 into a plant or plant cell.
A)配列番号1に示されるアミノ酸配列をコードする塩基配列、又は
B)配列番号1に示されるアミノ酸配列と90%以上の同一性を有するアミノ酸配列をコードする塩基配列
を含むポリヌクレオチドを植物又は植物細胞に導入する工程を含む、形質調節された植物の製造方法。
A) a base sequence encoding the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1, or
B) A method for producing a trait-regulated plant comprising the step of introducing into a plant or plant cell a polynucleotide comprising a nucleotide sequence encoding an amino acid sequence having 90% or more identity with the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1. .
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