JP2018174708A - 高機能性成分含有植物の育成方法 - Google Patents

Abstract

【課題】高機能性成分含有する植物を育成する方法の提供。【解決手段】セファリオフォラ属の微生物の固体培地培養物を含む培養土を用いて、植物を育成することにより、β−カロテン、レチノール当量、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ビタミンＣ、クロロゲン酸、ポリフェノール等の高機能性成分を多く含む高機能性成分野菜を育成することができる。セファリオフォラ属の微生物としては、受託番号ＮＩＴＥ Ｐ−０２４３８で寄託したセファリオフォラ属（Ｃｅｐｈａｌｉｏｐｈｏｒａｓｐ．）ｘｓｄ０８００１株を用いることができる。【選択図】 図３

Description

本発明は、セファリオフォラ属の微生物の固体培地培養物を含む培養土を用い、カロテノイド、ビタミン類、ポリフェノール類であるβ−カロテン、レチノール当量、ビタミンＥ（α−トコフェロール）、ビタミンＫ、ビタミンＣ、クロロゲン酸、ポリフェノール等の高機能性成分を多く含む高機能性成分野菜を育成（製造）するための方法に関するものである。

食用とする目的で栽培する草本植物を野菜という。利用される部分によって葉菜 edible leaves、根菜 edible root、果菜 fruitsに分ける。葉菜は主として葉および柔らかな茎を食べるもので、キャベツ、ハクサイ、ホウレンソウ、根菜は主として根、ときとして地下茎を食べるもので、ダイコン、ニンジン、ハスなど、果菜は果実を食べるもので、トマト、キュウリ、エンドウマメなどである。野菜は食品として植物繊維、脂質、タンパク質、炭水化物、カルシウム、カリウムなどの無機塩類およびビタミンなどの各種栄養分の補給に必須の素材である。

非特許文献１によると、機能性を持った食品としては、食物繊維、ポリフェノール類、カロテノイド類が主要なものとされている。それらの研究成果としての機能性食品は、特定保健用食品として機能性が表示されて販売されるか、いわゆる健康食品として販売されている。新たな機能性表示制度の検討が規制改革の一環として消費者庁で実施され、２０１５年４月から、事業者が責任を持って自主的な機能性表示が可能とした制度（農林水産物も対象）がスタートした。「機能性食品」（非特許文献２参照）は、事業者の責任で、科学的根拠（臨床試験、研究レビュー）を基に商品パッケージに機能性を表示するものとして、消費者庁に届け出された食品であり、健常者や未病者の健康維持・増進に係る部位表現も範囲となった。
このように健康維持機能を野菜に求めようとする研究開発、施策が国内、海外でも積極的に進められ、野菜ジュースや野菜加工食品、野菜入り補助食品などを求める消費者の嗜好が強くなってきている。健康維持機能性成分（以下、機能性成分という。）を含有する野菜には、例えばニンジン、ホウレンソウ、パセリ、シュンギク、コマツナ、ニラ、カボチャ、ブロッコリー、サヤエンドウ、シソ、アスパラガスのように生体重当り１００ｇ中にβ−カロテンを６００μｇ以上含んでいるもの、およびβ−カロテンの含有量が生体重当り１００ｇ中に６００μｇ以下であっても、多く食べられているトマトやピーマンなどは緑黄色野菜と定義され、日常的に多く摂取することが推奨されている（非特許文献３及び４参照）。

β−カロテンは人体内に摂取されるとビタミンＡと同様の活性作用をもたらし、抗酸化作用により活性酸素を取り除き、血液が流れる作用や老化の防止やがんの増殖阻害、免疫機能の強化、体細胞の活性化などの機能性が知られている。葉菜類においては葉緑素（クロロフィル）とβ−カロテンは極めて高い相関を示すと知られているため、葉緑素含量が多い、すなわち葉色が濃い緑であるほどβ−カロテンの含量も高くなる傾向があることが知られている。
またβ−カロテンと同様に、カロテノイド色素に属するルテインも抗酸化物質で人体では目の網膜の中心にある黄斑に多く存在し、紫外線によって生じる活性酸素を不活性化して黄斑を保護し、加齢を原因とする黄斑変性にならないようにしているとされている。

近年、農業では自然界に存在している有効微生物を利用する試みが進められているが、植物の病害防除においてである。これらの病害防除に利用されている有効微生物は病原菌に対して拮抗性を持ち病原菌の増殖を抑制するものであり、化学合成農薬とは違い、自ら増殖するので防除効果が長続きする、農薬耐性菌の発生が抑えられる、元々自然界に存在する微生物であるので環境汚染の恐れが少ない等の利点がある。作物収穫を目的とした農園芸生産における上記有効微生物の利用技術は、広く知られている（特許文献１〜５）。
しかしながら、作物収穫を目的とした農園芸生産における上記有効微生物の利用技術は開発されていない。

特許第３２０９５６５号公報 特許第２９５５６４２号公報 特許第３１７３９９０号公報 特許第３１３８２３４号公報 特許第３６９１２６５号公報

（一財）食品分析開発センターSUNATEC 山本（前田）万里著「新たな機能性表示制度における機能性農林水産物」<www.mac.or.jp/mail/151201/01.shtml＞ 機能性表示食品に関する情報（消費者庁）：<http://www.caa.go.jp/foods/index23.html＞ 図説 野菜新書、矢澤進著、2003年、朝倉書店発行 平成８年度秋季大会シンポジウム講演要旨、1996年、園芸学会発行、146−169

上述のような背景のもと、日常、継続的に機能性成分を摂取するためには、野菜をはじめとする青果物から食物として無理なく食することが重要なことであり、野菜等の生産者にとっては栽培条件の改善により機能性成分の含有量を高めることは、一般消費者の健康維持、増進に寄与するだけではなく、野菜等の青果物の消費拡大や国際化が進む国内農業市場において競争力を付与することになると考えられる。
本発明は、β−カロテン、レチノール当量、ビタミンＥ（α−トコフェロール）、ビタミンＫ、ビタミンＣ、クロロゲン酸、ポリフェノール等の高機能性成分を多く含む高機能性成分野菜を育成（製造）するための方法を提供することを目的とする。

本発明は、セファリオフォラ属の微生物、特に、受託番号ＮＩＴＥ Ｐ−０２４３８で寄託された微生物であるセファリオフォラ属（Ｃｅｐｈａｌｉｏｐｈｏｒａ ｓｐ．）ｘｓｄ０８００１株の固体培地培養物を含む培養土を用いることにより、固体培地培養物を含まない培養土を用いる育成方法と比べて、植物固有の機能性成分を増加させることを特徴とする植物の育成方法を要旨としている。

また、本発明は、受託番号ＮＩＴＥ Ｐ−０２４３８で寄託された微生物であるセファリオフォラ属（Ｃｅｐｈａｌｉｏｐｈｏｒａ ｓｐ．）ｘｓｄ０８００１株、およびその固体培地培養物を要旨としている。

本発明により、本発明は、β−カロテン、レチノール当量、ビタミンＥ（α−トコフェロール）、ビタミンＫ、ビタミンＣ、クロロゲン酸、ポリフェノール等の高機能性成分を多く含む高機能性成分野菜を育成（製造）するための方法を提供することができる。このようにして栽培条件の改善により野菜の機能性成分の含有量を高めることができる。機能性成分の含有量を高めた野菜から日常、継続的に機能性成分を食物として無理なく食することができる。
また、本発明により、高機能性成分を多く含む高機能性成分野菜を育成（製造）するための受託番号ＮＩＴＥ Ｐ−０２４３８で寄託された微生物であるセファリオフォラ属（Ｃｅｐｈａｌｉｏｐｈｏｒａ ｓｐ．）ｘｓｄ０８００１株を提供することができる。

実施例１のサラダナを慣行農法モデルに基づいて育成した結果を示す。 実施例１の収穫したサラダナ地上部の生重量を示す。 実施例１の収穫したサラダナ地上部の機能性成分の分析結果を示す。 実施例２のサラダナを有機農法モデルに基づいて育成した結果を示す。 実施例２の収穫したサラダナ地上部の生重量を示す。 実施例２の収穫したサラダナ地上部の機能性成分の分析結果を示す。 実施例４のホウレンソウを慣行農法モデルに基づいて育成した結果を示す。 実施例４の収穫したホウレンソウ地上部の生重量を示す。 実施例４の収穫したホウレンソウ地上部の機能性成分の分析結果を示す。 実施例４で育成したホウレンソウ地上部におけるカビ毒「ロリトレムＢ」の含量を食環境衛生研究所にて分析した結果を示す。 実施例５のトウモロコシを慣行農法モデルに基づいて育成した結果を示す。 実施例５で収穫した皮付きトウモロコシの生重量を示す。 実施例５で収穫した皮付きトウモロコシの大きさを示す。 実施例６で収穫したナスの収穫結果を示す。 実施例６で収穫したナスの収穫量と機能性成分の分析結果を示す。

［ｘｓｄ０８００１株の同定］
本発明者は土壌中から数多く単離した菌株の中に、その固体培地培養物を含む培養土を用いて育成すると、固体培地培養物を用いない育成方法と比べて、植物固有の機能性成分を増加させる微生物ｘｓｄ０８００１株を見出した。
ｘｓｄ０８００１株は、一般的に微生物の同定に用いられる近隣結合法（ｎｅｉｇｈｂｏｒ−ｊｏｉｎｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄ）により、ＩＴＳ５ＳｒＲＮＡ領域のシークエンスデータが即知であるＣｅｐｈａｌｉｏｐｈｏｒａ ｓｐ．と９６％の類似性を示した。
これをＣｅｐｈａｌｉｏｐｈｏｒａ ｓｐ．ｘｓｄ０８００１と命名した。
本出願に際し、Ｃｅｐｈａｌｉｏｐｈｏｒａ ｓｐ．ｘｓｄ０８００１は、千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８所在の独立行政法人製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター（ＮＰＭＤ）に２０１７年３月６日付で寄託し、ＡＰ−０２４３８として受領書が発行された。微生物の生存確認試験が実施されて受託証が発行され、受託番号ＮＩＴＥ Ｐ−０２４３８として寄託された。
すなわち、本発明の実施例で使用した微生物は、Ｃｅｐｈａｌｉｏｐｈｏｒａ ｓｐ． ｘｓｄ０８００１と命名され、受託番号ＮＩＴＥ Ｐ−０２４３８として寄託された微生物である。

［固体培地］
固体培地には、オカラ、竹粉、その他、オガクズ、フスマ、モミガラ、バガス、セルロースパウダー、セロビオース、コーヒー粕、デンプンなど、常用されている成分が用いられる。オカラまたは竹粉は元来、農業資材として使用されているものであり、本微生物を固体培地で培養した微生物を含む培養物を、そのまま培養土に用いることができる。
培養は乾燥した固体培地に適度な水分を加えて滅菌する。放冷後に固体培地上に微生物Ｃｅｐｈａｌｉｏｐｈｏｒａ ｓｐ．ｘｓｄ０８００１の培養片をそっと置き、２５度（室温で可）で約２０日静置しておく。１０日後には滅菌雰囲気下にて固体培地を混ぜ、全体に微生物が繁殖するようにした。

［育成の対象とする野菜］
本発明が育成の対象とする野菜は、特に限定されない。
野菜の青果栽培、つまり市場出荷や食用を目的とした栽培では、例えば、キャベツ、ハクサイ、ホウレンソウ等の葉部を食用とする葉菜類や、ダイコン、カブ、ニンジン、ネギ等の根茎部を食用とする根菜類では、花芽分化、抽だい、開花させることなく、植物学的には未熟な成長段階で収穫されるものである。また、ブロッコリー、カリフラワー等は、未熟な花蕾の段階で収穫されるものであり、開花させるには至らない。また、果実生産を目的とするキュウリ、ピーマン、ナス等の果菜類も未熟な果実を収穫するものである。
育成の対象とする野菜は、例えばホウレンソウ、フダンソウ、テンサイ等のアカザ科作物、レタス、サラダナ、シュンギク、ゴボウ等のキク科作物、キャベツ、ブロッコリー、ハクサイ、ダイコン、カブ等のアブラナ科作物、タマネギ、ネギ等のユリ科作物、ニンジン、セルリー、ミツバ等のセリ科作物、トマト、ナス、ピーマン、トウガラシ、トルバム、アカナス、タバコ等のナス科作物、キュウリ、メロン、スイカ、カボチャ、カンピョウ等のウリ科作物、スイートコーン等のイネ科作物、及び、エンドウ、ソラマメ、インゲン、ダイズ等のマメ科作物などを挙げることができる。

［野菜の育成方法］
（１）慣行農法に基づいて、各地域において、農薬、肥料の投入量や散布回数等において相当数の生産者が実施している一般的な農法で育成した。
（２）有機農法モデルに基づいて、元肥のない土壌に有機堆肥を添加し、土壌中の有機物を栄養に作物を作る農法で育成した。

［機能性成分含量の分析］
＜ビタミンＡ（α-カロテン，β-カロテン）＞
高速液体クロマトグラフ法（可視部吸光光度検出，ＯＤＳ系順相カラム使用）にて、試料中のα-カロテン，β-カロテンの含量を求めた。試料溶液調整、測定条件は日本食品標準成分表分析マニュアル（七訂）に準じて行った。そのβ-カロテンの値よりレチノール当量を下式（１）にて求めた。
（１）β-カロテン値÷１２＝レチノール当量

（測定例）
試料を包丁で粗く切断し、４ｇを１００ｍｌ容白色広口全量フラスコに量り取る。ピロガロール２ｇ、水５ｍｌ、ＨＡＥＴ混液（ヘキサン−アセトン−エタノール−トルエン １０：７：６：７）４０ｍｌ及びエタノール２０ｍｌを加え、１５分間振とうする。エタノールで定容し、超音波槽に１０分間放置する。抽出液８ｍｌを５０ｍｌ容共栓褐色遠沈管に量り取り、エタノール８ｍｌ、６０ｗ/ｖ％水酸化カリウム溶液１．６ｍｌを加え、ガラス棒で時々かき混ぜながら７０℃水浴中で３０分間加熱けん化する。水冷後１ｗ/ｖ％塩化ナトリウム水溶液１８．４ｍｌとｎ-ヘキサン−２-プロパノール−酢酸エチル混液（９：１．５：１）１０ｍｌを加え。１０分間振とう、遠心分離後上層（有機層）をナス型フラスコに移す。下層（水層）にｎ-ヘキサン−２-プロパノール−酢酸エチル混液１０ｍｌを加え、更に２回同様に抽出する。抽出液を４０℃で減圧濃縮後エタノールに溶解して高速液体クロマトグラフに注入し、α-カロテン，β-カロテンのピーク面積を測定する。

（高速液体クロマトグラフ操作条件）
カラム：Ｉｎｅｒｔｓｉｌ ＯＤＳ-Ｐ ＧＬ-Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｉｎｃ
移動相：メタノール８５：エタノール１５
流速：１．０ｍｌ/ｍｉｎ
温度：４０℃
測定波長：４５５ｎｍ

＜ビタミンＣ（アスコルビン酸）＞
高速液体クロマトグラフ法（可視部吸光光度検出，シリカゲル順相カラム使用）にて、試料中のアスコルビン酸含量を求めた。試料溶液調整、測定条件は日本食品標準成分表分析マニュアル（七訂）に準じて行った。

＜ビタミンＥ（α-トコフェロール）＞
高速液体クロマトグラフ法（蛍光検出，シリカゲル順相カラム使用）にて、試料中のα-トコフェロール含量を求めた。試料溶液調整、測定条件は日本食品標準成分表分析マニュアル（七訂）に準じて行った。

＜ビタミンＫ（フィロキノン）＞
高速液体クロマトグラフ法（蛍光検出，ＯＤＳ系逆相カラム，白金カラム（還元カラム）使用）にて、試料中のフィロキノン含量を求めた。試料溶液調整、測定条件は日本食品標準成分表分析マニュアル（七訂）に準じて行った。

［機能性成分の分析に使用する植物体の部位］
機能性成分の分析に使用する植物体の部位は発芽後から開花開始期までの栄養成長期間中の茎葉であれば特に限定されない。例えば、展開した子葉（一般に貝割れと称す）や展開途中や完全展開した成葉、開花開始前の花序部が使用できる。展開とは、生長点で分化した葉が生長して広がり葉身が受光する形態になることをいう。つまり、可食部である。

本発明を実施例により詳細に説明する。本発明は、これらの実施例により限定されることはない。

固体培地（成分 オカラ又は竹粉、その他前述のものでも可）に適度の水分を加えて約２０日間、約２５度（室温も可）で培養した。その後、３０度の乾燥機に入れて滅菌する。それを放冷後に固体培地上に微生物Ｃｅｐｈａｌｉｏｐｈｏｒａ ｓｐ．ｘｓｄ０８００１の培養片をそっと置き、２５℃(室温で可)で約２０日間静置しておく。１０日後には滅菌雰囲気下にて固体培地を混ぜ、全体に微生物が繁殖するようにした。培養後乾燥し、粉砕した。その粉砕したｘｓｄ０８００１株を含む固体培地の培養物を一定の割合で培養土に添加し野菜を育成した。

［実施例１］
サラダナを慣行農法モデルに基づいて育成した。
使用培養土：タキイ野菜の土（肥料内容 １リットルあたり Ｎ ２８０ｍｇ、Ｐ ３２０ｍｇ、Ｋ ３００ｍｇ）６７０ｇ／１鉢
試供種：サラダナ（岡山サラダナ）２株／1鉢、３反復
ハウス内温度：１８〜２５℃
固体培地の培養物添加量：１／０％
収穫物：図１参照
収穫したサラダナ地上部の生重量を図２に、これらの機能性成分の分析結果を図３に示す。

結果は、図１に示したように、ｘｓｄ０８００１株の固体培地培養物を添加した培養土で育成したサラダナの方が、見た目でも生長促進されていることがわかり、葉の数も多く、しかも１枚当たりの面積も大きい。収穫した地上部の生重量について比較したものが図２であって、固体培地培養物を添加した培養土で育成したサラダナの方が約１．５倍重い収量であり、そのサラダナの地上部１００ｇ当たりのβ-カロテン、ビタミンＥ、ビタミンＣ、ビタミンＫの含有量も、無添加培養土のものに比べ、それぞれ約１０５％、１２７％、２００％、１３０％と増加していることが図３に示されている。

［実施例２］
サラダナを有機農法モデルに基づいて育成した。
使用培養土：そのきや培養土（ＮＰＫ 元肥一切なし）６７０ｇ／１鉢
堆肥：バイオダルマ ｐＨ７．０−７．２（Ｎ ３．４％、Ｐ_２Ｏ_５ ６％、
Ｋ_２Ｏ ３．６％、ＣａＯ ２０％）主な成分は畜糞
試供種：サラダナ（岡山サラダナ） ２株／１鉢、３反復
ハウス内温度：１８−２５℃
固体培地培養物の添加量：１．０％
収穫物：図４参照
収穫したサラダナ地上部の生重量を図５に、これらの機能性成分の分析結果を図６に示す。

結果は、図４に示したように、ｘｓｄ０８００１株の固体培地培養物を添加した培養土で育成したサラダナの方が、２倍以上に成長し、生長促進されていた。葉の数も多く、１枚当たりの面積も大きい。収穫した地上部の生重量について比較したものが図５であって、固体培地培養物を添加した培養土で育成したサラダナの方が約３．８倍重い収量であり、そのサラダナの地上部１００ｇ当たりのβ-カロテン、ビタミンＥ、ビタミンＣ、ビタミンＫの含有量も、無添加培養土のものに比べ、それぞれ約１２１％、１２０％、１１１％、１１７％と増加していることが図６に示されている。

［実施例３］
固体培地培養物を含む培養土を用いて育成した野菜の安全性試験を行った。Ｃｅｐｈａｌｉｏｐｈｏｒａ ｓｐ．は糸状菌であるため、カビ毒を発生すると食中毒の原因となる。海外では残留基準値の設定はなく、日本国内でも同様だが、注意喚起として１８００ｐｐｂ−１２００ｐｐｂ以下とされている。
ロリトレムＢの含量を調べた結果は図１０であり、定量下限値以下であった。

［実施例４］
ホウレンソウを慣行農法にてハウス内圃場にて育成した。
試供種：ホウレンソウ（トライ）
使用肥料：ＩＢ化成Ｓ１号
固体培地培養物の添加量：１０ｇ／ｍ^２
対照としては、培養物を添加せずに育成した。
収穫物：図７参照
収穫したホウレンソウ地上部の生重量を図８にこれらの機能性成分の分析結果を図９に示す。

[実施例５]
トウモロコシを慣行農法にてハウス内圃場にて育成した。
試供種：ゴールドラッシュ８８
使用肥料：ＩＢ化成Ｓ１号
固体培地培養物の添加量：１０ｇ／ｍ^２
対照としては、培養物を添加せずに育成した。
収穫物：図１１参照
収穫した皮付きトウモロコシの生重量を図１２に大きさを図１３に示す。

[実施例６]
ナスを慣行農法にて露地栽培した。
試供種：千両ナス
使用肥料：サンライム、鶏フン
固体培地培養物の添加量：１０ｇ／ｍ^２
対照としては、培養物を添加せずに栽培した。
収穫物：４日間の収穫物を図１４に示す。
４日間のナス収穫量とこれらの機能性成分の分析結果を図１５に示す。

［結果と考察］
有機農法で堆肥を使用した場合、化学肥料のように植物が根から吸収できる養分ではなく、地中において微生物等により分解された後のものしか吸収することができない。図１と図４を比較すると、図４の堆肥を使用した場合の方が、セファリオフォラ属を添加すると無添加の場合に比べて生長促進効果が２倍になり、よりその機能が働くことがわかった。
セファリオフォラ属は野菜の根部において、有機肥料を分解し、サラダナの生長が無添加に比べて著しく現れたものと思われる。
植物は地中に根を張った部分からのみ土壌成分を吸収することができるが、セファリオフォラ属は地中に広く菌糸を広げ、広範囲の土壌成分を自らの菌糸中に吸収、分解し、植物の根へその成分を送ると思われる。植物はセファリオフォラ属から得た土壌成分をもとに成長し、機能性成分を生成する。そして、その過程で生成した糖（炭素分）をセファリオフォラ属へ与え、セファリオフォラ属はより良い環境を求めて、広い範囲へと菌糸を伸ばしていく。このように本発明のセファリオフォラ属は植物と共生関係にあるエンドファイトではないかと考えられる。

前述のような機能性成分を無理することなく摂取するためには、野菜をはじめとする青果物から食物として食することが重要であり、近年、品種改良によって高機能性野菜が市販されている。例えば、「坊ちゃんかぼちゃ」は、β−カロテンが従来の３−４倍、「こどもピーマンピー太郎」はβ−カロテンが従来の２倍である、また、「赤帯ゴーヤ」はビタミンＣが従来の1.5倍、紫アスパラガスはグリーンアスパラの約１０倍とされる。しかし、本発明のＣｅｐｈａｌｉｏｐｈｏｒａ ｓｐ．の固体培養物を培養土に添加すると、品種改良をしていなくても、β−カロテン、レチノール当量、ビタミンＥ（α−トコフェロール）、ビタミンＫ、ビタミンＣ、クロロゲン酸、ポリフェノール等の高機能性成分を多く含む高機能性成分野菜を育成できる。

Claims (9)

1. セファリオフォラ属の微生物の固体培地培養物を含む培養土を用いることにより、固体培地培養物を含まない培養土を用いる育成方法と比べて植物固有の機能性成分を増加させることを特徴とする植物の育成方法。
2. セファリオフォラ属の微生物が受託番号ＮＩＴＥ Ｐ−０２４３８で寄託された微生物であるセファリオフォラ属（Ｃｅｐｈａｌｉｏｐｈｏｒａ ｓｐ．）ｘｓｄ０８００１株である請求項１に記載の植物の育成方法。
3. 上記植物が、ホウレンソウ、レタス、サラダナ、キャベツ、ブロッコリー、ハクサイ、ダイコン、タマネギ、ネギ、ニンジン、セルリー、ミツバ、トマト、ナス、ピーマン、キュウリ、イネ、コムギ、オオムギ、ライムギ、オートムギ、トウモロコシ、サトウキビ、エンドウ、ソラマメ、インゲン、ライグラス類、ケンタッキーブルーグラス、フェスク類、ベントグラス類、ノシバ、コウライシバ、およびバミューダグラスからなる群から選ばれた野菜である請求項１に記載の植物の育成方法。
4. 植物固有の機能性成分がカロテノイド類、ビタミン類、ポリフェノール類である請求項１に記載の植物の育成方法。
5. 固体培地がオカラ又は竹粉を主成分とするものであることを特徴とする、請求項１または２に記載の植物の育成方法。
6. セファリオフォラ属の微生物の固体培地培養物を含む培養土を用いて植物を育成することを特徴とする植物の生長促進方法。
7. セファリオフォラ属の微生物が、受託番号ＮＩＴＥ Ｐ−０２４３８で寄託された微生物であるセファリオフォラ属（Ｃｅｐｈａｌｉｏｐｈｏｒａ ｓｐ．）ｘｓｄ０８００１株である請求項６に記載の植物の生長促進方法。
8. 受託番号ＮＩＴＥ Ｐ−０２４３８で寄託された微生物であるセファリオフォラ属（Ｃｅｐｈａｌｉｏｐｈｏｒａ ｓｐ．）ｘｓｄ０８００１株の固体培地培養物。
9. 受託番号ＮＩＴＥ Ｐ−０２４３８で寄託された微生物であるセファリオフォラ属（Ｃｅｐｈａｌｉｏｐｈｏｒａ ｓｐ．）ｘｓｄ０８００１株。