JP2018014958A - Lettuce variety E01C10216 - Google Patents
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- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
Description
本発明は、植物育種の分野に関する。特に、本発明は「E01C10216」と指定されたラクツカ・サチバ(Lactuca sativa)の品種に関する。 The present invention relates to the field of plant breeding. In particular, the present invention relates to Lactuca sativa varieties designated “E01C10216”.
栽培されているレタスは、食用の球部と葉を目的として栽培される、高度に多形性の種、ラクツカ・サチバに属する。農作物として、レタスは、環境が経済的に成功可能な収穫を生み出すところでは、どこでも商業的に栽培されている。レタスを植える時期は、典型的に３つの時期に分けられる（つまり、早期、中期及び晩期）。海岸地方は１月から８月に種がまかれ、砂漠地域は８月から１２月に種がまかれる。新鮮なレタスは、ほぼ新鮮な、生野菜としてのみ消費され、時折、調理された野菜として消費される。 Cultivated lettuce belongs to the highly polymorphic species Lactus sativa, which is cultivated for the purpose of edible bulbs and leaves. As an agricultural crop, lettuce is cultivated commercially wherever the environment produces an economically successful harvest. The time of planting lettuce is typically divided into three periods (ie, early, middle and late). The coastal region is seeded from January to August, and the desert region is seeded from August to December. Fresh lettuce is consumed only as almost fresh, raw vegetables, and occasionally as cooked vegetables.
ラクツカ・サチバは、キク科(Asteraceae(Compositae))のシコリエ連(Cichorieae)に属する。レタスは、チコリ、ヒマワリ、シオン、タンポポ、アーティチョークおよび菊と関係がある。サチバ(Sativa)は、ラクツカ(Lactuca)属にある約300種のうちの一つである。レタスには７種の形態上のタイプがある。パリパリした球部の系統群は、アイスバーグ(iceberg)及びバタビアン(batavian)タイプを包含する。アイスバーグレタスは、パリパリした質感と白い又はクリーム様の黄色の内部を有する大きな、しっかりした球部をもっている。バタビアンレタスはアイスバーグタイプより先に生み出され、比較的小さく、柔軟な球部を有する。バターヘッド(butterhead)系統群は、ほとんど油のような質感がある小さい、柔らかい球部を有している。タチチシャは、またコスレタス(cos lettuce)としても知られ、ゆるく集まった塊状の球部をつくる長い、立ち上がった葉をもち、他の葉はふつう深い緑色である。葉レタスは、またカッティングレタス(cutting lettuce)としても知られ、多くの品種があるが、いずれも球部を形成せず、緑色の樫の葉様の品種を含む。ラテンレタス(latin lettuce)は、グラッセタイプレタス(grasse-type lettuce)としても知られ、タチチシャとバターヘッドの両方を合わせたように見える。ステムレタス(stem lettuce)は、長い、狭い葉と、厚い食用の茎を有する。オイルシード(oilseed)レタスは油を得るために絞られる大きい種をとるために栽培されるタイプである。 Lactus sachiba belongs to the Asteraceae (Compositae) family of Cichorieae. Lettuce is related to chicory, sunflower, zion, dandelion, artichoke and chrysanthemum. Sativa is one of about 300 species in the genus Lactuca. There are seven morphological types of lettuce. The crispy sphere lineage includes iceberg and batavian types. Iceberg lettuce has a large, solid sphere with a crispy texture and a white or creamy yellow interior. Batavian lettuce is produced prior to the iceberg type and has a relatively small and flexible sphere. The butterhead family has small, soft spheres with almost oily texture. Tachichisha, also known as cos lettuce, has long, rising leaves that form loosely clustered spheres, and the other leaves are usually deep green. Leaf lettuce, also known as cutting lettuce, has many varieties, none of which form a bulbous part, and includes green vine leaf-like varieties. Latin lettuce, also known as grasse-type lettuce, appears to combine both tacitchi and butterhead. Stem lettuce has long, narrow leaves and thick edible stems. Oilseed lettuce is a type cultivated to take large seeds that are squeezed to obtain oil.
レタスは、ますます人気が高まっている作物である。世界中のレタスの消費は増加し続けている。この需要の結果、新しいレタスの品種が引き続き求められている。特に、安定した、高い収穫量を与え、農業経営上、健全な改良されたレタスの品種が求められている。 Lettuce is a growing crop. Consumption of lettuce around the world continues to increase. As a result of this demand, new lettuce varieties continue to be sought. In particular, there is a need for improved lettuce varieties that give stable, high yields and are healthy for agricultural management.
このような求めに応じるため、本願の発明は改良されたレタスの品種に関する。 In order to meet such demands, the present invention relates to an improved lettuce variety.
一実施態様では、本願の発明はレタス、ラクツカ・サチバ、その種子がNCIMB登録番号42568をもつ「E01C10216」と指定されたレタスに関する。一実施態様では、本願発明は、「E01C10216」レタスの種子を栽培して得られるラクツカ・サチバレタス植物体と、それから分離された一部に関する。別の実施態様では、本願発明は、NCIMB登録番号42568をもつ「E01C10216」レタスの種子を栽培して得られるラクツカ・サチバ植物体のすべての生理学的及び形態学的特性を有する、ラクツカ・サチバ植物体と、それから分離された一部に関する。さらに別の実施態様では、本願発明は、親として「E01C10216」を有するＦ１交配ラクツカ・サチバレタスの種子、この種子から得られた植物体及び、この植物体から分離された球部に関し、ここで「E01C10216」は、NCIMB登録番号42568をもつ「E01C10216」レタスの種子から得られる。 In one embodiment, the present invention relates to lettuce, Lactica sativa, lettuce whose seed is designated “E01C10216” with NCIMB accession number 42568. In one embodiment, the present invention relates to a Lactica sativaletus plant obtained by cultivating seeds of “E01C10216” lettuce, and a part isolated therefrom. In another embodiment, the present invention provides a Lactica sativa plant having all the physiological and morphological characteristics of a Lactica sativa plant obtained by growing seeds of "E01C10216" lettuce having NCIMB registration number 42568. Concerning the body and parts separated from it. In yet another embodiment, the present invention relates to an F 1 crossed Lactica sativaletus seed having “E01C10216” as a parent, a plant obtained from the seed, and a sphere separated from the plant, wherein “E01C10216” is obtained from seeds of “E01C10216” lettuce with NCIMB accession number 42568.
レタス植物体の一部は、レタスの球部、レタスの葉、レタスの葉の一部、花粉、胚珠、花等を含む。別の実施態様では、本願発明はさらに「E01C10216」レタス植物体から分離された、レタスの球部、レタスの葉、レタスの葉の一部、花、花粉、胚珠に関する。別の実施態様では、本願発明はさらに、「E01C10216」レタス植物体の組織培養物、この組織培養物から再生したレタス植物体に関し、ここで、この植物体は「E01C10216」レタス植物体の全ての形態学的及び生理学的特性を有している。 Part of the lettuce plant includes lettuce bulbs, lettuce leaves, part of lettuce leaves, pollen, ovules, flowers and the like. In another embodiment, the present invention further relates to lettuce bulbs, lettuce leaves, lettuce leaf parts, flowers, pollen, ovules isolated from “E01C10216” lettuce plants. In another embodiment, the present invention further relates to a tissue culture of the “E01C10216” lettuce plant, a lettuce plant regenerated from the tissue culture, wherein the plant is all of the “E01C10216” lettuce plant. Has morphological and physiological characteristics.
さらに別の実施態様では、本願発明はさらに「E01C10216」植物体の一部を包装する、包装材料に関する。そのような包装材料は箱、プラスチックの袋等を含むがこれらに限られない。「E01C10216」植物体の一部は、他の植物の品種の他の一部と組み合わされても良い。 In yet another embodiment, the present invention further relates to a packaging material for packaging a part of the “E01C10216” plant. Such packaging materials include, but are not limited to, boxes, plastic bags and the like. Part of the “E01C10216” plant may be combined with other parts of other plant varieties.
さらに、別の実施態様では、本願発明はさらに、a)「E01C10216」レタス植物体を栽培すること（「E01C10216」レタス植物体はNCIMB登録番号42568をもつレタスの種子から得られるレタス植物体である）、及び、b)工程a)からの植物体を選択することにより、レタス植物体を選ぶ方法に関する。別の一実施態様では、本願発明はさらに、レタス植物体、レタス植物体から得られるレタス植物体の一部及び種子に関する。ここで、レタス植物体は本発明の選択方法により分離される。 In yet another embodiment, the present invention further comprises a) cultivating an “E01C10216” lettuce plant (“E01C10216” lettuce plant is a lettuce plant obtained from a lettuce seed having NCIMB registration number 42568. And b) a method for selecting a lettuce plant by selecting the plant from step a). In another embodiment, the present invention further relates to a lettuce plant, a part of a lettuce plant obtained from a lettuce plant, and a seed. Here, lettuce plants are isolated by the selection method of the present invention.
別の実施態様では、本願発明は、さらにNCIMB登録番号42568をもつ「E01C10216」レタスの種子から育てられた植物体と、あるレタス植物体を交配することでレタス植物体を品種改良する方法に関する。さらに別の実施態様では、本願発明はさらにレタス植物体、レタス植物体の一部、レタス植物体から得られる種子に関する。ここで、上記レタス植物体は本発明の育種法により分離される。いくつかの実施態様では、上記育種法によって分離されたレタス植物体は、遺伝子が導入されたレタス植物体である。 In another embodiment, the present invention further relates to a method for breeding a lettuce plant by crossing a plant grown from seeds of “E01C10216” lettuce having NCIMB accession number 42568 with a lettuce plant. In still another embodiment, the present invention further relates to a lettuce plant, a part of the lettuce plant, and a seed obtained from the lettuce plant. Here, the lettuce plant is isolated by the breeding method of the present invention. In some embodiments, the lettuce plant isolated by the breeding method is a lettuce plant into which a gene has been introduced.
別の実施態様では、本願発明は、遺伝物質に１以上の導入遺伝子を含むレタス植物体を生産する方法、及びその方法により生産される遺伝子が導入されたレタス植物体に関する。 In another embodiment, the present invention relates to a method for producing a lettuce plant containing one or more transgenes in genetic material, and a lettuce plant into which a gene produced by the method has been introduced.
別の実施態様では、本願発明は「E01C10216」レタスの種子を栽培することにより生産されるレタス植物体に雄性不稔性を与える核酸分子を導入することにより雄性不稔性レタス植物体を生産する方法、及びそのような方法により生産される雄性不稔性レタス植物体に関する。 In another embodiment, the present invention produces a male sterile lettuce plant by introducing a nucleic acid molecule that confers male sterility to the lettuce plant produced by growing seeds of “E01C10216” lettuce. Methods and male sterile lettuce plants produced by such methods.
別の実施態様では、本願発明は「E01C10216」レタスの種子を栽培して生産されるレタス植物体に除草剤抵抗性を与える遺伝子を導入することにより、除草剤抵抗性レタス植物体を生産する方法に関する。ここで、この遺伝子は、グリフォセート(glyphosate)、スルフォニルウレア(sulfonylurea)、イミダゾリノン(imidazolinone)、ジカンバ(dicamba)、グルフォシネート(glufosinate)、フェノキシプロピオン酸(phenoxy propionic acid)、L-ホスフィノトリシン(L-phosphinothricin)、シクロヘキソン(cyclohexone)、シクロヘキサンジオン(cyclohexanedione)、トリアジン(triazine)及びベンゾニトリル(benzonitrile)から選択される。ある実施態様はまた、上記方法により生産される除草剤抵抗性レタス植物体に関する。 In another embodiment, the present invention relates to a method for producing a herbicide-resistant lettuce plant by introducing a gene that imparts herbicide resistance to a lettuce plant produced by growing seeds of “E01C10216” lettuce. About. Here, this gene includes glyphosate, sulfonylurea, imidazolinone, dicamba, glufosinate, phenoxypropionic acid, L-phosphinotricin ( L-phosphinothricin), cyclohexone, cyclohexanedione, triazine and benzonitrile. Certain embodiments also relate to herbicide-resistant lettuce plants produced by the above method.
別の実施態様では、本願発明は、害虫又は虫抵抗性を与える遺伝子を、「E01C10216」レタスの種子を栽培することにより生産されるレタス植物体に導入することにより、害虫または虫抵抗性レタス植物体を生産する方法、及びそのような方法により生産される害虫又は虫抵抗性レタス植物体に関する。ある実施態様では、害虫又は虫抵抗性を与える上記遺伝子は、バシルス・スリンギエンシス(Bacillus thuringiensis)のエンドトキシンをコードする。 In another embodiment, the present invention provides a pest or insect resistant lettuce plant by introducing a gene that confers pest or insect resistance into a lettuce plant produced by growing seeds of "E01C10216" lettuce. The present invention relates to a method for producing a body and a pest or insect-resistant lettuce plant produced by such a method. In one embodiment, the gene conferring pest or insect resistance encodes an endotoxin of Bacillus thuringiensis.
別の実施態様では、本願発明は、「E01C10216」レタスの種子を栽培することにより生産されるレタス植物体に病気抵抗性を与える遺伝子を導入することによる、病気抵抗性レタス植物体を生産する方法及びそのような方法により生産される病気抵抗性レタス植物体に関する。 In another embodiment, the present invention provides a method for producing a disease-resistant lettuce plant by introducing a gene conferring disease resistance into a lettuce plant produced by cultivating seeds of “E01C10216” lettuce. And a disease-resistant lettuce plant produced by such a method.
別の実施態様では、本願発明は「E01C10216」レタスの種子を栽培することにより生産されるレタス植物体に、価値を付加する形質を与える遺伝子を導入することによる、価値が付加された形質をもつレタス植物体を生産する方法に関する。ここで、この遺伝子はフェリチン、硝酸還元酵素、及びモネリンから選択されるタンパク質をコードする。ある実施態様は、またこの方法により生産される価値が付加された形質をもつレタス植物体に関する。 In another embodiment, the present invention has a trait with added value by introducing a gene that imparts a trait that adds value to a lettuce plant produced by cultivating seeds of "E01C10216" lettuce. The present invention relates to a method for producing a lettuce plant. Here, this gene encodes a protein selected from ferritin, nitrate reductase, and monelin. Certain embodiments also relate to a lettuce plant having a trait added to the value produced by this method.
別の実施態様では、本願の発明は、レタス品種「E01C120216」へ所望の形質を導入する方法に関する。本方法は、(a)「E01C10216」植物体（「EC01C10216」レタスの種子のサンプルはNCIMB登録番号42568で寄託されている）を、所望の形質を含む別のレタス品種の植物体と交配し、子孫の植物体を生産すること、ここで所望の形質は、雄性不稔性、除草剤耐性、虫又は害虫抵抗性、抽だいの変更(modified bolting)、細菌性疾病に対する抵抗性、菌類による疾病に対する抵抗性、又はウイルスによる疾病に対する抵抗性から選択される、(b)所望の形質をもつ１以上の子孫の植物体を選択すること、(c)選択した子孫の植物体を「E01C10216」植物体と戻し交配し、戻し交配された子孫の植物体を生産すること、(d)所望の形質と、レタスの品種「E01C10216」の全ての生理学的及び形態学的特性をもつ、戻し交配された子孫の植物体を選択すること、及び(e)(c)と(d)の工程を連続して２回以上繰り返し、３世代以降の所望の形質を含む戻し交配された子孫の植物体を生産することにより、レタス品種「E01C10216」に所望の形質を導入する方法に関する。ある実施態様は、またその方法により生産されるレタス植物体にも関する。ここで、この植物体は所望の形質と、レタス品種「E01C10216」の全ての生理学的及び形態学的特徴をもつ。ある実施態様では、所望の形質は除草剤抵抗性であり、この抵抗性は、グリフォセート、スルフォニルウレア、イミダゾリノン、ジカンバ、グルフォシネート、フェノキシプロピオン酸、L-ホスフィノトリシン、シクロヘキソン、シクロヘキサンジオン、トリアジン及びベンゾニトリルから選択される除草剤に対して与えられる。他の実施態様では、所望の形質は虫又は害虫抵抗性であり、虫又は害虫抵抗性はバシルス・スリンギエンシスのエンドトキシンをコードする導入遺伝子により与えられる。 In another embodiment, the present invention relates to a method for introducing a desired trait into a lettuce variety “E01C120216”. The method comprises: (a) crossing an "E01C10216" plant (a sample of seeds of "EC01C10216" lettuce is deposited under NCIMB accession number 42568) with a plant of another lettuce variety containing the desired trait, Producing offspring plants, where the desired traits are male sterility, herbicide resistance, insect or pest resistance, modified bolting, resistance to bacterial diseases, fungal disease (B) selecting one or more progeny plants having a desired trait; (c) selecting the selected progeny plants as "E01C10216" plants Backcross with the body to produce backcross progeny plants, (d) backcrossed with the desired traits and all the physiological and morphological characteristics of the lettuce cultivar "E01C10216" Select progeny plants and link steps (e), (c) and (d). Repeated two more times and, by producing plants backcrossed progeny containing desired trait three generations later, it relates to a method of introducing a desired trait into lettuce variety "E01C10216". Certain embodiments also relate to a lettuce plant produced by the method. Here, this plant has the desired traits and all the physiological and morphological characteristics of the lettuce cultivar “E01C10216”. In some embodiments, the desired trait is herbicide resistance, which resistance is glyphosate, sulfonylurea, imidazolinone, dicamba, glufosinate, phenoxypropionic acid, L-phosphinotricin, cyclohexone, cyclohexanedione, Provided for herbicides selected from triazines and benzonitriles. In another embodiment, the desired trait is insect or pest resistance, and the insect or pest resistance is provided by a transgene encoding an endotoxin of Bacillus thuringiensis.
別の実施態様では、本願発明は「E01C10216」の単一遺伝子で形質転換された植物体を与える。この単一の導入される遺伝子は、好ましくは優性対立遺伝子又は劣性対立遺伝子である。好ましくは、単一の導入される遺伝子は、雄性不稔性、除草剤抵抗性、虫又は害虫抵抗性、脂肪酸代謝の変更、炭水化物代謝の変更、細菌、菌類又はウイルス疾患への抵抗性、雄の妊性、栄養的品質の向上及び産業的用途のような特徴を与えるであろう。この単一遺伝子は天然のレタス遺伝子、又は遺伝子工学技術により導入された導入遺伝子である。 In another embodiment, the present invention provides a plant transformed with a single gene “E01C10216”. This single introduced gene is preferably a dominant or recessive allele. Preferably, the single introduced gene is male sterility, herbicide resistance, insect or pest resistance, altered fatty acid metabolism, altered carbohydrate metabolism, resistant to bacterial, fungal or viral diseases, male Such as fertility, improved nutritional quality and industrial use. This single gene is a natural lettuce gene or a transgene introduced by genetic engineering techniques.
さらなる実施態様では、本願発明は、選択の繰り返し、戻し交配、血統栽培（pedigree breeding）、制限酵素断片長多型性増強選択(restriction fragment length polymorphism enhanced selection)、遺伝子マーカ増強選択(genetic marker enhanced selection)、及び形質転換を含む植物育種技術を使うレタス植物育種プログラムにおいてレタス植物を開発する方法に関する。上記育種法によって生産された種子、レタス植物体及びそれらの一部もまた本発明の一部である。 In a further embodiment, the present invention provides selection selection, backcrossing, pedigree breeding, restriction fragment length polymorphism enhanced selection, genetic marker enhanced selection. And a method for developing lettuce plants in a lettuce plant breeding program using plant breeding techniques including transformation. Seeds, lettuce plants and parts thereof produced by the breeding method are also part of the present invention.
上記の例示的側面と実施態様に加え、さらなる側面と実施態様が、以下の記載の研究の参照により明らかになるであろう。 In addition to the exemplary aspects and embodiments described above, further aspects and embodiments will become apparent by reference to the work described below.
図１は、レタス品種「E01C10216」の球部を示す。 FIG. 1 shows the ball part of the lettuce variety “E01C10216”.
〔発明の詳細な説明〕
新しい、望ましいレタスの生殖質を調製する多くの段階がある。植物育種は現在のレタス生殖質の問題と弱点の分析、計画の目標の確立、具体的育種の目的の定義から始まる。次の段階は育種プログラムの目標に合致する形質をもつ生殖質の選択である。この目標は親の生殖質からの望ましい形質を単一の品種に組み合わせること、或いは、それらの形質の組み合わせをもつ改良されたものを交配することである。これらの重要な形質は、球部の大きさ及び重量の増加、高い種子の収量、改善された色、疾病と虫に対する抵抗性、干ばつと熱に対する抵抗性、及び良好な農学的品質を含んでも良い。
Detailed Description of the Invention
There are many steps to prepare a new, desirable lettuce germplasm. Plant breeding begins with analysis of current lettuce germplasm problems and weaknesses, establishment of planning goals, and definition of specific breeding objectives. The next step is the selection of germplasm with traits that meet the goals of the breeding program. The goal is to combine the desired traits from the parent's germplasm into a single breed, or to breed improved versions with combinations of those traits. These important traits may include increased bulb size and weight, high seed yield, improved color, disease and insect resistance, drought and heat resistance, and good agricultural quality. good.
育種又は選択方法の選択は植物の生殖方法、改良を受ける形質の遺伝性及び市販されている品種の種類（例．Ｆ１交配世代、純系品種等）により決めることができる。高度に遺伝的な形質に関しては、一か所で、評価された優れた個体植物を選択することが効果的であろう。一方、低い遺伝性を有する形質に関しては、選択は、関連する植物の科を繰り返し評価することから得られる平均値に基づくべきである。広く用いられる選択方法はふつう、系統選択、修飾された系統選択、集団選択及び繰り返し選択(recurrent selection)を含む。 Selection of breeding or selection methods may be determined reproductive process of the plant, the type of varieties that are transformed hereditary and commercial undergoing improvements (eg .F 1 breeding generations, pure line varieties, etc.). For highly genetic traits, it may be effective to select superior individual plants that are evaluated in one place. On the other hand, for traits with low heritability, the selection should be based on the average value obtained from repeated evaluation of the family of related plants. Widely used selection methods usually include lineage selection, modified lineage selection, population selection and recurrent selection.
複雑な遺伝は育種方法の選択に影響する。戻し交配育種は、望ましい品種へ高度に遺伝的な形質の一又は２，３の好ましい遺伝子を移すため使用される。この方法は疾病に抵抗性をもつ品種を育種するために広く使用されてきた。種々の繰り返し選択の技術は、多くの遺伝子により制御される遺伝的形質を定量的に改良するため使用される。自家受粉する作物の繰り返し選択の利用は、自家受粉の容易さ、受粉ごとの交配が成功する頻度及び成功した各受粉から得られる交配された子孫の数に依存する。 Complex inheritance affects the choice of breeding methods. Backcross breeding is used to transfer one or a few preferred genes of a highly genetic trait to the desired variety. This method has been widely used to breed varieties that are resistant to disease. Various iterative selection techniques are used to quantitatively improve the genetic traits controlled by many genes. The use of repeated selection of self-pollinated crops depends on the ease of self-pollination, the frequency of successful cross-pollination and the number of crossed offspring obtained from each successful pollination.
各育種プログラムは、育種手順の効率に対して定期的、客観的評価を含んでも良い。評価基準は目標と目的により変わり、適切な標準との比較、進んだ育種系統の総括的な値、一単位の入力ごと（例．年毎、費やしたドルごと）に生産された成功した品種の数に基づいて年毎の選択から得られる利益を含み得る。 Each breeding program may include regular and objective assessments of the efficiency of the breeding procedure. Evaluation criteria will vary depending on goals and objectives, comparison with appropriate standards, overall values of advanced breeding lines, successful varieties produced per unit of input (eg yearly, spent dollars spent) May include benefits derived from yearly selections based on numbers.
有望な進んだ育種系統は、３年以上、商用生産の目標地域を代表する環境において徹底的に試験されても良いし、適当な基準と比較されても良い。最良の系統は、次に、新しい商用の品種の候補となりえる。２，３の形質でなお欠点のある系統は、さらに選択をするための新しい個体群を生産するために親株として使用されてもよい。これらの手順は、販売促進及び配送という最終段階に至るが、最初の交配又は選択が行われてから１０から２０年かかっても良い。 Promising advanced breeding lines may be thoroughly tested for more than 3 years in an environment representative of a target area for commercial production, or compared to appropriate standards. The best line can then be a candidate for a new commercial variety. A strain that is still defective with a few traits may be used as a parent strain to produce a new population for further selection. These procedures reach the final stage of promotion and delivery, but may take 10 to 20 years after the initial mating or selection.
レタス植物体の育種の一つの目標は、新しい、独特な、遺伝学的に優れたレタスの品種を開発することである。育種家は、最初に２以上の親株の系統を選択、交配できる。その後、自家受粉と選択を繰り返し、多くの新しい遺伝的組み合わせを生産する。さらに、育種家は交配、自家受粉及び突然変異により複数の異なる遺伝的組み合わせを作ることができる。植物の育種家は、次に、どの生殖質を次の世代に進めるべきかを選択できる。これらの生殖質は異なる地理的、気候的及び土壌の条件で栽培されても良い。そして、さらなる選択が栽培する季節の間と終わりになされ得る。 One goal of lettuce plant breeding is to develop new, unique, genetically superior lettuce varieties. A breeder can initially select and cross two or more parental strains. It then repeats self-pollination and selection to produce many new genetic combinations. In addition, breeders can make several different genetic combinations by crossing, self-pollination and mutation. Plant breeders can then choose which germplasm to proceed to the next generation. These germplasms may be cultivated in different geographical, climatic and soil conditions. And further choices can be made during and at the end of the growing season.
市販用レタス品種の開発は、このように親レタス品種の開発、これらの品種の交配、交配の評価を必要とする。系統育種(pedigree breeding)と繰り返し選択育種方法(recurrent selection breeding method)は育種する個体群から品種を開発するために使用されても良い。育種プログラムは２以上の品種または種々の広範囲のソースから望ましい形質を育種プールへ組み合わせるために使用されても良い。この育種プールから新しい品種が自家受粉と望ましい表現型の選択により作られる。この新しい品種は、他の品種と交配され、これらの交配からの交配種はいずれが商用的に可能性があるかを決めるため評価される。 The development of commercial lettuce varieties thus requires the development of parent lettuce varieties, the crossing of these varieties, and the evaluation of the crossing. Pedigree breeding and recurrent selection breeding methods may be used to develop varieties from breeding populations. A breeding program may be used to combine desirable traits into a breeding pool from two or more varieties or from a wide variety of sources. New varieties are created from this breeding pool by self-pollination and selection of the desired phenotype. This new variety is crossed with other varieties and the crosses from these crosses are evaluated to determine which are commercially feasible.
系統育種は、一般的に自家受粉作物又は同系交配の他家受粉の作物の改良のために用いられる。好ましい相補的な形質をもつ２の親株が交配されＦ１を生産する。Ｆ２個体群は１株又は数株のＦ１を自家受粉することにより、又は２株のＦ１を相互交配（同胞交配）することにより生産される。最良の個体の選択は、ふつうＦ２個体群の中で始められる。その後、Ｆ３の始め、最良の系統の中の最良の個体が選択される。低い遺伝性をもつ形質を選択する効率を改善するため、系統又はこれらの系統の個体に関する交配による組み合わせの繰り返しの試験は、しばしばＦ４世代で行われる。同系交配を進めた段階（つまり、Ｆ6とＦ7）では、表現型が類似の系統のうちの最良の系統又は表現型が類似の系統の混合は、新しい品種として出荷できる可能性について試験される。 Line breeding is generally used to improve self-pollinated crops or cross-pollinated crops of inbreds. 2 parental with preferred complementary trait to produce F 1 is mated. F 2 populations are produced by self-pollination of one or several strains of F 1 or by cross-breeding (sibling mating) of two strains of F 1 . The selection of the best individual is usually started within the F 2 population. Then, the start of F 3, the best individuals in the best system is selected. To improve the efficiency of selecting a trait with a low genetic, repeated testing of the combination according to breeding about individual lines, or these lines are often performed in F 4 generations. At the stage of inbreeding (ie, F 6 and F 7 ), the best of the phenotypic strains or a mix of similar phenotypes is tested for the possibility of shipping as a new variety. The
集団選択又は繰り返し選択は自己受粉又は他家受粉の作物のいずれかの個体群を改良するために使用できる。ヘテロ接合をもつ個体の遺伝的に不定な個体群は、いくつかの異なった親株の交配により特定され又は調製され得る。最良の植物体は個体の優越性、優秀な子孫、または優れた組み合わせ能力(combining ability)にもとづいて選択される。選択された植物体は相互交配され新しい個体群をつくり、この個体群の中でさらに選択の繰り返しが続けられる。 Population selection or repeated selection can be used to improve the population of either self-pollinated or cross-pollinated crops. A genetically indeterminate population of individuals with a heterozygote can be identified or prepared by crossing several different parental strains. The best plants are selected based on individual superiority, excellent offspring, or excellent combining ability. The selected plants are crossed to create a new population, and the selection continues to be repeated in this population.
戻し交配育種は、単純に遺伝され、高度に遺伝できる形質に関する遺伝子を、反復親である、望ましいホモ接合の栽培品種又は系統へ移すために使用されてもよい。移動される形質の源はドナー親(donor parent)と呼ばれる。最初の交配の後、ドナー親の表現形をもつ個体が選択され、繰り返し、戻し親と交配（戻し交配）される。結果的に得られる植物体は、反復親（例、栽培品種）の性質とドナー親から移された望ましい形質をもつと期待される。 Backcross breeding may be used to transfer genes that are simply inherited and highly inheritable traits to the desired homozygous cultivar or line that is the recurrent parent. The source of the trait that is transferred is called the donor parent. After the first mating, an individual with the donor parent's phenotype is selected and repeatedly mated with the back parent (back mating). The resulting plant is expected to have the properties of recurrent parents (eg, cultivars) and desirable traits transferred from the donor parent.
厳密な意味で単粒系統法（the single-seed descent procedure）の栽培手順は、隔離した個体群を植え、１植物体あたり１個の種子のサンプルを収穫し、１個の種子のサンプルを使い次世代を植えることをいう。個体群がＦ２から同系交配の望ましい水準へ進んだとき、系統のもとになった植物体はそれぞれ異なるＦ２個体に遡る。ある個体群の植物体の数は、種子のなかには発芽しないものがあり、又は植物の中に１以上の種子を生産できないことにより各世代と共に減少する。その結果、世代進行を終えたとき、個体群の中で当初採取されたＦ２植物体の全てが、子孫により表されるわけではなくなるだろう。 In the strict sense, the single-seed descent procedure is to plant an isolated population, harvest one seed sample per plant, and use one seed sample. Planting the next generation. When the population progresses from F 2 to the desired level of inbreeding, the plants from which the line originated date back to different F 2 individuals. The number of plants in a population decreases with each generation because some seeds do not germinate or one or more seeds cannot be produced in a plant. As a result, not all of the F 2 plants originally harvested in the population will be represented by the offspring when the generation has finished.
表現型の観察に加え、植物の遺伝子型もまた、試験され得る。植物の遺伝子型の分析、比較又は特徴づけのために使用できる、本願技術分野で知られた、試験室で使える技術が多くある。そのような技術は、アイソザイム電気泳動法(Isozyme Electrophoresis)
、制限酵素断片長多型(Restriction Fragment Length Polymorphism, RFLPs)、無作為増幅多型DNAs(Randomly Amplified Polymorphic DNAs, RAPDs)、任意プライムポリメラーゼ連鎖反応(Arbitrarily Primed Polymerase Chain Reaction, AP-PCR)、ＤＮＡ増幅フィンガープリンティング(DNA Amplification Fingerprinting, DAF)、配列特性増幅領域(Sequence Characterized Amplified Regions, SCARs)、増幅断片長多型(Amplified Fragment Length polymorphisms, AFLPs)、単純反復配列(Simple Sequence Repeats、SSRs マイクロサテライト(Microsatelites)ともいわれる)、及び一塩基多型(Single Nucleotide Polymorphisms、SNPs)を含むが、これらに限定されない。
In addition to phenotypic observation, plant genotypes can also be examined. There are many techniques available in the laboratory known in the art that can be used for the analysis, comparison or characterization of plant genotypes. Such techniques are known as Isozyme Electrophoresis
, Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLPs), Randomly Amplified Polymorphic DNAs (RAPDs), Arbitrarily Primed Polymerase Chain Reaction (AP-PCR), DNA Amplification Fingerprinting (DNA Amplification Fingerprinting, DAF), Sequence Characterized Amplified Regions (SCARs), Amplified Fragment Length polymorphisms (AFLPs), Simple Sequence Repeats, SSRs Microsatellites ), And single nucleotide polymorphisms (SNPs), but are not limited thereto.
分子マーカーは、質的な形質を選択するための育種過程の間使用されてもよい。例えば、対立遺伝子の近くで連結するマーカー又は、問題の、実際の対立遺伝子内にある配列を含むマーカーは、戻し交配育種プログラムの間に、問題の対立遺伝子を含む植物体を選択するために使用できる。マーカーは、また反復親のゲノムの方を選択し、かつドナー親のマーカーを避けるため使用できる。この手順は、選択された植物に残っているドナー親からのゲノムの量を最小にするよう試みるものである。これは、戻し交配プログラムで必要とされる戻し親への戻し交配の数を減少するために使用できる。選択手順における分子マーカーの使用は、しばしば、遺伝的マーカー増強選択(genetic marker enhanced selection)又はマーカーアシスト選択(marker-assisted selection)と呼ばれる。分子マーカーは、交配による遺伝的プロファイルを追跡する手段を与えることにより、植物の親品種である、又は祖先種である生殖質のある源を特定し排除するために使用されても良い。 Molecular markers may be used during the breeding process to select qualitative traits. For example, a marker linked near an allele or a marker that contains a sequence that is within the actual allele of interest is used during the backcross breeding program to select plants that contain the allele of interest. it can. The markers can also be used to select the recurrent parent's genome and avoid the donor parent's marker. This procedure attempts to minimize the amount of genome from the donor parent remaining in the selected plant. This can be used to reduce the number of backcrossings to the return parent that is required by the backcross program. The use of molecular markers in the selection procedure is often referred to as genetic marker enhanced selection or marker-assisted selection. Molecular markers may be used to identify and eliminate certain sources of germplasm that are parental or ancestral species of plants by providing a means to track the genetic profile by crossing.
突然変異育種は、またレタス品種に新しい形質を導入するためにも使用されてよい。自発的に起こるまたは、人為的に誘導される突然変異は植物の育種家にとり、品種の有用な源となりえる。人為的突然変異生成の目標は、望ましい特性を得るための突然変異率を高めることである。突然変異率は、温度、長期間の種子の貯蔵、組織の培養条件、照射（例えば、Ｘ線、ガンマ線、中性子、ベータ線照射又は紫外線照射）、化学的突然変異誘発要因（例えば、5-ブロモウラシルのような塩基類縁物）、抗生剤、アルキル化剤（例えば、サルファマスタード、窒素マスタード、エポキシド、エチレンアミン、硫酸塩(sulfates)、スルホン酸塩(sulfonates)、スルホン又はラクトン）、アジド、ヒドロキシアミン、亜硝酸、またはアクリジンを含む多くの異なった手段により増やすことができる。突然変異誘発により一度、望ましい形質が観察されると、その形質は、次に伝統的な育種技術により既存の生殖質に組み入れられても良い。突然変異誘育種の詳細は、「品種開発の原理」（フェール、マクミリアン出版会社(1993)）(Principles of Cultivar Development by Fehr, Macmillan Publishing Company (1993))に見出すことができる。 Mutation breeding may also be used to introduce new traits into lettuce varieties. Spontaneous or artificially induced mutations can be a useful source of varieties for plant breeders. The goal of artificial mutagenesis is to increase the mutation rate to obtain desirable properties. Mutation rates can include temperature, long-term seed storage, tissue culture conditions, irradiation (eg, X-rays, gamma rays, neutrons, beta rays or ultraviolet radiation), chemical mutagens (eg, 5-bromo Base analogs such as uracil), antibiotics, alkylating agents (eg, sulfur mustard, nitrogen mustard, epoxide, ethyleneamine, sulfates, sulfonates, sulfones or lactones), azides, hydroxy It can be increased by a number of different means including amines, nitrous acid, or acridine. Once the desired trait has been observed by mutagenesis, that trait may then be incorporated into the existing germplasm by traditional breeding techniques. Details of mutant breeding can be found in "Principles of Cultivar Development by Fehr, Macmillan Publishing Company (1993)".
倍加半数体(double haploid)の生産は、育種プログラムにおいてホモ接合品種の開発のためにも使用され得る。倍加半数体は、一組のヘテロ接合植物からの染色体を二倍にして生産され、完全にホモ接合の個体を与える。例えば、Wan, et al.,Theor. Appl. Genet., 77: 889-892(1989)参照。 Production of double haploids can also be used for the development of homozygous varieties in breeding programs. Doubled haploids are produced by doubling the chromosomes from a set of heterozygous plants, giving a completely homozygous individual. See, for example, Wan, et al., Theor. Appl. Genet., 77: 889-892 (1989).
使用されても良い育種方法の非限定的な例は、Principles of Plant Breeding, John Wiley and Son, pp.115-161(1960); Allard(1960);Simmonds(1979));Sneep, et.al.(1979);Fehr(1987); 及び “Carrots and Related Vegetable Umbelliferae” Rubatzky, V.E.,et.al.(1999)に見出されるものである。 Non-limiting examples of breeding methods that may be used are: Principles of Plant Breeding, John Wiley and Son, pp. 115-161 (1960); Allard (1960); Simmonds (1979)); Sneep, et.al (1979); Fehr (1987); and “Carrots and Related Vegetable Umbelliferae” Rubatzky, VE, et.al. (1999).
〔定義〕
以下の明細書の中では、多くの用語が使用される。そのような用語に与えられる範囲を含めて、明細書と請求項の明確で一貫した理解を与えるために、以下の定義が与えられる。
[Definition]
In the following specification, a number of terms are used. In order to provide a clear and consistent understanding of the specification and claims, including the scope to be given such terms, the following definitions are provided.
対立遺伝子：対立遺伝子は、一遺伝子の一以上の代替型の一つである。それらの全ては一つの形質又は特性に関係する。二倍体の細胞又は生物においては、一の所与の遺伝子の二つの対立遺伝子は、一組の相同の染色体上の対応する遺伝子座を占める。 Allele: An allele is one of one or more alternative forms of a gene. All of them relate to one trait or characteristic. In a diploid cell or organism, the two alleles of a given gene occupy corresponding loci on a set of homologous chromosomes.
戻し交配：戻し交配は、育種家が繰り返し交雑された子孫を親株の一つに戻って交配する過程であり、たとえば、Ｆ１交配株の親の遺伝子型の一つと第一世代の交配株Ｆ１を交配する過程である。 Backcrossing: Backcrossing is a process in which a breeder crosses a crossed offspring back to one of the parent strains, for example, one of the parental genotypes of the F1 hybrid and the first generation hybrid F The process of mating 1
ビッグベインウイルス(Big Vein virus)：ビッグベインは菌類 オルピディウム・ヴィルレンツス(Olpidium virulentus)によって伝染される、レタスビッグベインウイルスにより引き起こされたレタスの疾患であり、植物体の葉脈がはっきり現れ、葉が縮み、その結果、低品質で、市場価値の低いレタスとなる。 Big Vein virus: Big Vein virus is a lettuce disease caused by the lettuce big vein virus, transmitted by the fungus Olpidium virulentus. The result is low quality, low market value lettuce.
抽だい：植物が食用作物を生産する前の、花をつける茎とその後の種子の早期の成長。。抽だいは、典型的には、遅い植え付けにより生じる。 Draft: Early growth of flowering stems and subsequent seeds before plants produce food crops. . Drawing is typically caused by slow planting.
ブレミア・ラクツアエ(Bremia lactuae)：清涼な栽培地域で、レタスにべと病を起こす卵菌類。 Bremia lactuae: An oomycete that causes downy mildew on lettuce in a cool cultivation area.
芯の長さ：切り取られ、刈り揃えられた球部の基部から茎部の先まで測定された、内部レタス茎部の長さ。 Core length: The length of the internal lettuce stalk measured from the base of the cut and trimmed sphere to the tip of the stalk.
コルク根(Corky root)：細菌、スフィンゴモナス・スベリファシエンス(Sphingomonas suberifaciens)により引き起こされる疾病であり、全主根を褐色にし、ひどくひび割れさせ、機能を失わせる。 Corky root: A disease caused by a bacterium, Sphingomonas suberifaciens, browns all major roots, causing them to crack and lose function.
子葉：種子植物の胚の最初の葉のうちの一枚；典型的には、単子葉植物では一枚以上、双子葉植物では２枚、裸子植物では２枚以上である。 Cotyledon: one of the first leaves of the seed plant embryo; typically one or more monocotyledonous plants, two dicotyledonous plants, two or more gymnosperms.
本質的にすべての生理学的及び形態学的特徴：本質的にすべての生理学的及び多型的特徴を有する植物とは、転換された遺伝子に由来する特徴を除き、戻し親の生理学的及び形態学的特徴をもつ植物をいう。 Essentially all physiological and morphological characteristics: Plants having essentially all physiological and polymorphic characteristics are the physiological and morphology of the returning parent, except for the characteristics derived from the transformed gene A plant with specific characteristics.
第一水やり日：種子が発芽のために適当な湿気を最初に受けた日。これは、植え付け日と同日であり得、多くの場合そうである。 First watering day: The day when the seed first received adequate moisture for germination. This can be the same day as the planting date, and in many cases.
遺伝子：本明細書では、「遺伝子」は核酸の一部をいう。遺伝子は、異なる種から又は同一種からであれ、形質転換法又は種々の育種法を使って種のゲノムに導入され得る。 Gene: As used herein, “gene” refers to a portion of a nucleic acid. Genes, whether from different species or from the same species, can be introduced into the genome of a species using transformation methods or various breeding methods.
球部の直径：切り取られ、刈り揃えられた球部の直径。垂直に薄く切られ、茎に垂直な、最も幅の大きい点で測定されたもの。 Diameter of sphere: Diameter of the sphere cut and trimmed. Measured at the widest point, sliced vertically and perpendicular to the stem.
球部の高さ：切り取られ、刈り揃えられた球部の高さ。垂直に薄く切られ、切られた茎の基部からカップリーフ(cup leaf)までを測定したもの。 Sphere height: The height of the sphere that has been cut and trimmed. Thinly cut vertically and measured from the base of the cut stem to the cup leaf.
球部の重量：切り取られ、刈り込まれて市販品質とされた市販できる、レタスの球部の重量。 Weight of sphere: The weight of a commercially available lettuce sphere that has been cut and trimmed to a commercial quality.
レタスモザイクウイルス(Lettuce Mosaic virus)：若いレタスに矮小な、変形した、又はまだらの模様を生じ得、かつ古いレタスには、黄色で、ねじれた、かつ変形した葉を生じ得る病気。 Lettuce Mosaic virus: A disease that can produce dwarf, deformed, or mottled patterns in young lettuce, and can produce yellow, twisted, and deformed leaves in old lettuce.
成熟日：成熟は植物体が、市販できる形状又は姿で、十分な大きさ又は最適な重量をもち商業的又は経済的価値をもつことをいう。 Maturity date: Maturation means that a plant body is commercially available in shape or shape, has a sufficient size or optimum weight and has commercial or economic value.
ナソノヴィア・リビスニグリ(Nasonovia ribisnigri)：レタス植物体の最も奥の葉に群棲するレタスのアブラムシ。殺虫剤で容易に処理できない領域を汚染している。 Nasonovia ribisnigri: A lettuce aphid that clusters in the deepest leaves of a lettuce plant. It contaminates areas that cannot be easily treated with pesticides.
量的形質遺伝子座(Quantitative Trait Loci)：量的形質遺伝子座(QTL)は、ふつう連続的に分布している数字で表され得る形質を、ある程度まで制御する遺伝子座をいう。 Quantitative trait loci: A quantitative trait locus (QTL) refers to a locus that controls to some extent a trait that can be represented by a normally distributed number.
球部の高さ/直径の比率：球部の高さを球部の直径で割ったものは、球部の姿の指標である；＜１は平ら、１＝まるであり、＞１は尖っている。 Sphere height / diameter ratio: The sphere height divided by the sphere diameter is an indicator of the sphere appearance; <1 is flat, 1 = round,> 1 is sharp Yes.
再生：再生は組織培養物から植物体をつくることをいう。 Regeneration: Regeneration refers to the production of plants from tissue culture.
ＲＨＳ：ＲＨＳは、定義された数値化システムにより定量的に色を特定する公式の植物学的色彩図を出版する英国王立園芸協会(Royal Horticultural Society of England)をさす。当該色彩図は、王立園芸協会エンタープライズ株式会社（Royal Horticulture Society Enterprise Ltd., RHS Garden; Wisley, Woking; Surrey GU236QB, UK）から購入可能である。 RHS: RHS refers to the Royal Horticultural Society of England, which publishes official botanical color diagrams that quantitatively identify colors with a defined quantification system. The color map can be purchased from Royal Horticulture Society Enterprise Ltd. (RHS Garden; Wisley, Woking; Surrey GU236QB, UK).
単一遺伝子転換(Single gene converted)：単一遺伝子転換された植物とは、戻し交配と呼ばれる植物育種技術又は遺伝子工学により開発された植物をいう。この場合、戻し交配技術又は遺伝子工学を経てある系統へ前記単一遺伝子が移されることに加えて、その系統の望ましい形態学的及び生理学的特徴のほぼ全てが、回復される。 Single gene converted: A single gene converted plant refers to a plant developed by plant breeding technology or genetic engineering called backcrossing. In this case, in addition to transferring the single gene to a strain via backcross techniques or genetic engineering, nearly all of the desired morphological and physiological characteristics of the strain are restored.
チップバーン(Tip burn)：カルシウムの不足への生理学的応答である、レタスの葉の端又は先端が褐色になること。 Tip burn: The brown end of a lettuce leaf or tip, a physiological response to calcium deficiency.
ウェットデート(Wet date) ウェットデートはレタスを植えた最初の日に相当する。 Wet date The wet date corresponds to the first day of planting lettuce.
〔品種「E01C10216」の概観〕
レタス品種「E01C10216」は、濃い緑のパリパリした（すなわち、クリスプヘッド(crisphead)）球部を結ばない、水耕栽培用に開発されたレタス品種である。「E01C10216」は、葉のふちが丸くへこみ、葉の先端は強く起伏している抽だいが遅い品種である。「E01C10216」は、オランダのような地域では春、夏、秋、冬を含む栽培時期をもち、温室での栽培に適している。加えて、レタス品種「E01C10216」は、レタスモザイクウイルス(LMV)菌株Ls-1と、ナソノビア・リビスニギリ(Nasonovia ribisnigri)生物型(biotype)0 (Nr:0)に抵抗性を有し、ブレミア・ラクツカエ（Bremia lactucae）（べと病）菌株Bl:2,、Bl:5、Bl:7、Bl:12、Bl:14−Bl:18、Bl:20−Bl:27及びBL:29−Bl:31に感受性がある。図１はレタス品種「E01C10216」の球部を示す。レタス品種「E01C10216」は、水耕法で育つ能力、その葉縁、葉の先端が起伏をもつこと、ナソノビア・リビスニギリへの抵抗性、並びに春、夏、秋及び冬の間、球部を結ぶ能力についての多くの世代にわたる植物選択の結果である。
[Overview of variety “E01C10216”]
The lettuce cultivar “E01C10216” is a lettuce cultivar developed for hydroponics that does not tie dark green crispy (ie, crisphead) bulbs. “E01C10216” is a slow-drawing variety with rounded dents and strong undulations at the leaf tips. “E01C10216” has a cultivation period including spring, summer, autumn and winter in an area like the Netherlands, and is suitable for cultivation in a greenhouse. In addition, lettuce cultivar E01C10216 is resistant to lettuce mosaic virus (LMV) strain Ls-1 and Nasonovia ribisnigri biotype 0 (Nr: 0), (Bremia lactucae) strains Bl: 2, Bl: 5, Bl: 7, Bl: 12, Bl: 14-Bl: 18, Bl: 20-Bl: 27 and BL: 29-Bl: 31 Sensitive to. FIG. 1 shows a ball portion of a lettuce variety “E01C10216”. Lettuce cultivar "E01C10216" has the ability to grow by hydroponics, its leaf edge, leaf tip has undulations, resistance to Nasonobia rivisnigiri, and connects the bulb during spring, summer, autumn and winter It is the result of plant selection over many generations of capacity.
この品種は、当該形質に対する環境の影響の限度内で、当該形質の均一性と安定性を示した。植物のタイプの均一性に対する注意深い関心をもって、十分な数の世代、自家受粉を受けた。この系統は、増やされたが均一性が継続して観察された。いずれの変化した形質も、品種「E01C10216」では、観察、予測されなかった。 This cultivar showed the uniformity and stability of the trait within the limits of the environmental influence on the trait. A sufficient number of generations have been self-pollinated with careful attention to plant type uniformity. This line was increased but homogeneity was continuously observed. None of the altered traits was observed or predicted in the breed “E01C10216”.
〔品種「E01C10216」の客観的性状〕
レタス品種「E01C10216」は、以下の形態及び他の特性をもつ：
草型：クリスプ(Crisp) (つまり、パリパリした球部)
種子：
色：白
成熟した葉：
縁：
外側の葉の緑の色合い：なし
外側の葉の色の強度：濃い（Dark）
アントシアニン呈色：なし
抽だい：
分類：晩期（例．フリリス(Frillice)に匹敵）
病気/害虫抵抗性：
レタスモザイクウイルス(LMV)株 Ls-1：抵抗性
べと病（Bremia Lactucae）(Bl)：Bl:2、Bl:5、Bl:7、Bl:12、Bl:14-Bl:18、Bl:20-Bl:27、及びBl:29-Bl:31に対して感受性
害虫：
ナソノヴィア・リビスニギリ生物型 0(Nr:0)：抵抗性
〔市販レタス品種との比較〕
下の表１は、レタス品種「E01C10216」の特徴をレタス品種「フリリス」と比較している。第１列は特徴を示し、第２列はレタス品種「E01C10216」の特徴を示し、第３列は、レタス品種「フリリス」の特徴を示す。
[Objective properties of cultivar "E01C10216"]
The lettuce variety “E01C10216” has the following forms and other characteristics:
Grass type: Crisp (ie crispy sphere)
seed:
Color: white Mature leaves:
edge:
Outer leaf green shade: None Outer leaf color intensity: Dark
Anthocyanin coloration: None
Classification: Late (eg, comparable to Frillice)
Disease / pest resistance:
Lettuce Mosaic Virus (LMV) Strain Ls-1: Bremia Lactucae (Bl): Bl: 2, Bl: 5, Bl: 7, Bl: 12, Bl: 14-Bl: 18, Bl: Sensitive to 20-Bl: 27 and Bl: 29-Bl: 31
Nasonovia rivisnigiri biotype 0 (Nr: 0): Resistance [Comparison with commercial lettuce varieties]
Table 1 below compares the characteristics of the lettuce variety “E01C10216” with the lettuce variety “Frillis”. The first column shows the features, the second column shows the features of the lettuce variety “E01C10216”, and the third column shows the features of the lettuce variety “Furiris”.
〔追加の実施態様〕
本発明は第一の親のレタス植物体と第２の親のレタス植物体を交配することによりレタス植物体を生産する方法にも関する。ここで、第１又は第２の親レタス植物体は、品種「E01C10216」のレタス植物体である。さらに、第１と第２の親レタス植物体の両者は、レタス品種「E01C10216」から生じ得る。従って、レタス品種「E01C10216」を使用する、どのような方法も本発明の一部である：自家受粉、戻し交配、交配種生産、個体群への交配等。１以上の親として、レタス品種「E01C10216」を使って生産される全ての植物体は、レタス品種「E01C10216」から生じた品種から開発されたものを含め、本発明の範囲内にある。このレタス品種は、優れた特徴をもった第１世代(F1)のレタス交配種の種子と植物体を生産するために、他の異なるレタス植物体と交配するときに使用されると有利である。本発明の品種は形質転換のためにも使用でき、外来の遺伝子が、本発明の品種により導入され発現される。レタス品種「E01C10216」を使う伝統的な育種法、または、本願技術分野の当業者に知られている多くの試験計画による品種E01C10216の形質転換のいずれかにより作られる遺伝による品種は、本発明の範囲内にある。
Additional embodiments
The present invention also relates to a method for producing a lettuce plant by crossing a first parent lettuce plant with a second parent lettuce plant. Here, the first or second parent lettuce plant is a lettuce plant of the variety “E01C10216”. Furthermore, both the first and second parent lettuce plants can arise from the lettuce variety “E01C10216”. Thus, any method that uses the lettuce variety “E01C10216” is part of the present invention: self-pollination, backcrossing, crossbreed production, crossbreeding to a population, and the like. All plants produced using the lettuce cultivar “E01C10216” as one or more parents are within the scope of the present invention, including those developed from varieties arising from the lettuce cultivar “E01C10216”. This lettuce variety is advantageously used when crossed with other different lettuce plants to produce first generation (F 1 ) lettuce hybrid seeds and plants with superior characteristics. is there. The varieties of the present invention can also be used for transformation, and foreign genes are introduced and expressed by the varieties of the present invention. Genetically produced varieties produced either by traditional breeding methods using lettuce cultivar "E01C10216" or by transformation of cultivar E01C10216 by a number of test plans known to those skilled in the art. Is in range.
以下は、さらにレタス植物体を開発する中で、レタス品種「E01C10216」に関して使用されても良い育種方法を述べるものである。一のそのような実施態様は、レタス植物体育種プログラムにおいて「E01C10216」子孫レタス植物体の品種を開発するための方法である。この方法は、品種「E01C10216」のレタス植物体、又はその一部を得、育種原料源として前記植物体又は植物体の一部を使用し、品種「E01C10216」と共通の分子マーカーにより、及び/または「品種「E01C10216」の客観的性状」という題の節に記載されている特徴から選択される形態学的及び/又は生理学的特徴で、「E01C10216」品種の子孫植物体を選ぶものである。レタス植物体育種プログラムで使用されても良い育種段階は、系統育種、戻し交配、突然変異育種及び繰り返し選択を含む。これらの段階と組み合わせて、RFLP-増強選択(RFLP-enhanced selection)、遺伝子マーカー増強選択(genetic marker enhanced selection)（例えば、SSRマーカー）、及び倍加半数体の作製のような技術が使用されても良い。 The following describes a breeding method that may be used for lettuce cultivar “E01C10216” in further developing lettuce plants. One such embodiment is a method for developing a variety of “E01C10216” progeny lettuce plants in a lettuce plant breeding program. This method obtains a lettuce plant of the cultivar `` E01C10216 '', or a part thereof, uses the plant or part of the plant as a breeding raw material source, and a molecular marker common to the cultivar `` E01C10216 '' and / or Alternatively, a progeny plant of the “E01C10216” variety is selected with morphological and / or physiological characteristics selected from the characteristics described in the section entitled “Objective Properties of the Variety“ E01C10216 ””. Breeding stages that may be used in the lettuce plant breeding program include line breeding, backcrossing, mutation breeding and repetitive selection. In combination with these steps, techniques such as RFLP-enhanced selection, genetic marker enhanced selection (eg, SSR markers), and generation of doubling haploids may be used. good.
別の方法は、「E01C10216」レタス品種を別のレタス植物体と交配し、それにより、レタス植物体の個体群を生産し、平均してその対立遺伝子の50%をレタス品種「E01C10216」から得ることにより、レタス品種「E01C10216」の子孫であるレタス植物体の個体群を生産することを含む。この個体群の植物体が選択され、そして繰り返し自家受粉され又はこれらの連続した交配世代から得られるレタス品種と同種交配されても良い。この発明の一実施態様は本方法により生産されたレタス品種であり、レタス品種「E01C10216」からの対立遺伝子の50%以上を得ているものである。植物育種の技術分野の当業者は、２種の植物品種の形質の評価法を知っており、これらの品種により発現された２つの形質の間に有意な相違があるか否かを決定するであろう。例えば、フェーラとヴァルト(Fehr and Walt)、「品種開発の原理」261-286頁(1987) (Principles of Variety Development, pp261-286(1987))参照。従って、本発明は、「品種「E01C10216」の客観的性状」との表題の節に記載されたものから選択された２以上の品種「E01C10216」の形質の組み合わせを含む、レタス品種「E01C10216」の子孫レタス植物体、あるいは、「発明の概要」に記載された形質をもつ品種「E01C10216」の交配種を含み、その結果、前記子孫レタス植物体は前記形質に関しては、同一の環境条件で栽培された場合に５％有意で検定されたとき、レタス品種「E01C10216」と有意には異ならない。本明細書に記載された技術を用いて、分子マーカーはレタス品種「E01C10216」の子孫の植物体として、前記子孫植物体を特定するために使用されてもよい。平均的な形質値は、形質の相違が有意であるかを決定するために使用されても良く、そして、この形質は、同一の環境条件下で栽培された植物体について測定されることが好ましい。そのような品種が一度開発されると、その値は重要である。なぜなら、収量、病気へ抵抗性、害虫への抵抗性及び極端な環境条件における植物体の性能のような形質を維持、改良するため、全体として生殖質ベースを進歩させることが重要であるからである。 Another method is to cross an “E01C10216” lettuce variety with another lettuce plant, thereby producing a population of lettuce plants and, on average, obtaining 50% of the allele from the lettuce variety “E01C10216” This includes producing a population of lettuce plants that are the progeny of the lettuce variety “E01C10216”. Plants of this population may be selected and cross-bred with lettuce varieties that are repeatedly self-pollinated or obtained from these consecutive cross generations. One embodiment of the present invention is a lettuce variety produced by the present method, and has obtained 50% or more of the allele from the lettuce variety “E01C10216”. Those skilled in the art of plant breeding know how to evaluate the traits of two plant varieties and determine whether there are significant differences between the two traits expressed by these varieties. I will. See, for example, Fehr and Walt, “Principles of Variety Development”, pages 261-286 (1987) (Principles of Variety Development, pp 261-286 (1987)). Accordingly, the present invention relates to a lettuce cultivar “E01C10216” comprising a combination of traits of two or more cultivars “E01C10216” selected from those described in the section titled “Objective properties of cultivar“ E01C10216 ””. Including a progeny lettuce plant or a hybrid of the cultivar “E01C10216” having the traits described in the “Summary of the Invention”, so that the progeny lettuce plant is cultivated under the same environmental conditions with respect to the traits When tested at 5% significance, it is not significantly different from the lettuce variety “E01C10216”. Using the techniques described herein, the molecular marker may be used as a progeny plant of the lettuce variety “E01C10216” to identify the progeny plant. The average trait value may be used to determine if the trait difference is significant, and this trait is preferably measured for plants grown under the same environmental conditions . Once such a variety is developed, its value is important. Because it is important to advance the germplasm base as a whole to maintain and improve traits such as yield, disease resistance, pest resistance and plant performance in extreme environmental conditions. is there.
レタス品種「E01C10216」の子孫はレタス品種「E01C10216」との世代的関係（例えば、レタス品種「E01C10216」との育種交配の回数がある回数以内にある）により特徴づけられてもよい。育種交配は子孫に新しい遺伝子を導入するために行われる交配であり、既存の対立遺伝子から選択するために行われる自家受粉又は同種交配とは区別される。系統内での育種において育種交配の回数が低いほど、レタス品種「E01C10216」とその子孫との関係は近い。例えば、本明細書に記載された方法により生産された子孫は、レタス品種「E01C10216」との１、２，３，４または５回の育種交配以内でも良い。 The offspring of the lettuce variety “E01C10216” may be characterized by a generational relationship with the lettuce variety “E01C10216” (eg, within a certain number of breeding matings with the lettuce variety “E01C10216”). Breeding mating is a mating performed to introduce a new gene into offspring, and is distinguished from self-pollination or homozygous mating performed to select from existing alleles. The lower the number of breeding mating in the breeding within the line, the closer the relationship between the lettuce variety “E01C10216” and its progeny. For example, the offspring produced by the methods described herein may be within 1, 2, 3, 4 or 5 breeding crosses with the lettuce variety “E01C10216”.
品種の再生産は組織培養と再生によっても起こり得る。レタスの種々の組織の組織培養と、組織から生じる植物体の再生はよく知られ、広く発表されている。例えば、テングら(Teng, et.al.,)、園芸科学 27:9,1030-1032(1992) (HortScience, 27:9, 1030-1032(1992))、テングら(Teng et.al.,)、園芸科学 28:6, 669-1671(1993) (HortScience, 28:6, 669-1671(1993))、ツァーングら(Zhang et.al.,)、遺伝学及び育種雑誌, 46:3, 287-290(1992)(Zhang, et al, Journal of Genetics and Breeding, 46:3, 287-290(1992))；ウェブら(Webb et.al.,)、植物細胞組織と器官培養 38:1, 77-79(1994)(Plant Cell Tissue and Organ Culture 38:1, 77-79(1994))；クルチスら(Curtis et.al.,)、実験植物学誌、45;279,1441-1449(1994)（Journal of Experimental Botany 45:279,1441-1449(1994)）、ナガタら(Nagata et.al.,)、アメリカ園芸科学協会誌、125:6, 669-672(2000)（Journal of the American Society of Horicultural Science, 125:6, 669-672(2000)）; 及びイブラヒムら(Ibrahim et.al.,)、植物細胞組織と器官培養、28(2),139-145(1992)(Plant Cell Tissue and Organ Culture 28(2), 139-145(1992))を参照してよい。本願の技術分野では、植物を得るこれらの方法が日常的に使用され、非常に高い成功率をもつことが文献から明らかである。したがって、本発明の別の側面は品種「E01C10216」の生理学的及び形態学的特徴をもつレタス植物体を、成長と分化により生み出す細胞を提供することである。 Variety reproduction can also occur by tissue culture and regeneration. Tissue culture of various tissues of lettuce and regeneration of plant bodies resulting from the tissue are well known and widely published. For example, Teng et al. (Teng, et.al.,) Horticultural Science 27: 9, 1030-1032 (1992) (HortScience, 27: 9, 1030-1032 (1992)), Teng et al., ), Horticulture Science 28: 6, 669-1671 (1993) (HortScience, 28: 6, 669-1671 (1993)), Zhang et.al., Genetics and Breeding, 46: 3, 287-290 (1992) (Zhang, et al, Journal of Genetics and Breeding, 46: 3, 287-290 (1992)); Web et al. (Webb et.al.,), plant cell tissue and organ culture 38: 1 , 77-79 (1994) (Plant Cell Tissue and Organ Culture 38: 1, 77-79 (1994)); Curtis et al., 45, 279, 1441-1449 ( 1994) (Journal of Experimental Botany 45: 279,1441-1449 (1994)), Nagata et al., Journal of the American Horticultural Science Association, 125: 6, 669-672 (2000) (Journal of the American Society of Horicultural Science, 125: 6, 669-672 (2000)); and Ibrahim et.al., Plant cell tissue and organ culture, 28 (2), 139-145 (1992) (Plant Cell Tissue and Organ Culture 28 (2), 139-145 (1992))In the technical field of the present application it is clear from the literature that these methods of obtaining plants are routinely used and have a very high success rate. Accordingly, another aspect of the present invention is to provide cells that, by growth and differentiation, produce lettuce plants having the physiological and morphological characteristics of the cultivar “E01C10216”.
本明細書に記載されているように、用語「組織培養物」は、同一又は異なるタイプの単離された細胞、または植物の一部に組織化されたそのような細胞の集合を含む組成物を示す。実施例の組織培養物のタイプは、プロトプラスト、カルス、成長点の細胞及び植物体の中で、損なわれていない組織培養物を生じ得る植物細胞、又は葉、花粉、胚、根、根端、葯、めしべ、花、種子、葉柄、吸根のような植物体の一部を発生できる植物細胞などである。植物組織培養物を調製し維持する手段は本願技術分野で良く知られている。例として、器官を含む組織培養物は再生植物を生産するため使用されてきた。米国特許5,959,185、5,973,234及び5,977,445はある技術群を説明し、この開示は引用により本願に組み入れられる。 As described herein, the term “tissue culture” refers to a composition comprising an isolated cell of the same or different type, or a collection of such cells organized into a part of a plant. Indicates. Examples of tissue culture types are protoplasts, callus, growth point cells and plant cells that can produce intact tissue culture, or leaves, pollen, embryos, roots, root tips, Plant cells that can generate a part of the plant body such as camellia, pistil, flower, seed, petiole, and root sucker. Means for preparing and maintaining plant tissue cultures are well known in the art. As an example, tissue cultures containing organs have been used to produce regenerated plants. US Pat. Nos. 5,959,185, 5,973,234, and 5,977,445 describe a group of technologies, the disclosure of which is incorporated herein by reference.
本願で使用されるとき、用語「植物体」は植物細胞、植物プロトプラスト、レタス植物が再生できる植物細胞組織培養物、植物カルス、植物集塊、及び植物の中の損なわれていない植物細胞、又は、葉、花粉、胚、子葉、胚軸、根、根端、葯、めしべ、花、胚珠、種子、茎のような植物の一部を含む。 As used herein, the term “plant” refers to plant cells, plant protoplasts, plant cell tissue cultures that can regenerate lettuce plants, plant callus, plant clumps, and intact plant cells in plants, or Including plant parts such as leaves, pollen, embryos, cotyledons, hypocotyls, roots, root tips, cocoons, pistils, flowers, ovules, seeds, stems.
本発明を述べる文脈において”a”、”an”及び”the”及び類似の指示（以下の請求項の文脈において特に）は、本明細書で別に指示されている場合、又は文脈から明確に否定されている場合でないならば、単数と複数の両方を意味すると解釈されるべきである。用語「含む(comprising)」、「もつ(having)」、「含む(including)」及び「含む(containing)」は、別に記載がないならば、開放型の用語として解釈されるべきである（つまり、「含むが限定されない」を意味する）。本明細書における数値の範囲の記載は、本明細書で別に指示がないならば、その範囲内にある各離れた値をそれぞれ指す速記的方法として働き、各離れた値は、別々に本明細書に引用されているように明細書に組み入れられる。例えば、範囲10-15が開示されているなら、11,12,13及び14もまた開示されている。本明細書に記載された全ての方法は、本明細書に別の指示がなく、文脈により明確に別に否定されていないならば、いずれの適当な順序によっても行われ得る。いずれかの及びすべての実施例の使用、または、本明細書に記載された例示的言語（例、「たとえば」）は単に発明を良く説明することが意図され、別に主張されていないならば、発明の範囲に限定を加えない。明細書のいかなる言葉も本発明の実施に欠くことができないものとして何らかの請求項にない発明の構成要素を示すものと解釈されてはならない。 In the context of describing the present invention, “a”, “an”, and “the” and similar instructions (particularly in the context of the following claims) are expressly negated if indicated otherwise in the specification. If not, it should be taken to mean both singular and plural. The terms “comprising”, “having”, “including” and “containing” should be interpreted as open terms unless otherwise stated (ie , "Including but not limited to"). The recitation of numerical ranges herein serves as a shorthand way to refer to each separate value within that range unless otherwise indicated herein, and each separate value is herein separately described. Are incorporated into the specification as cited in the text. For example, if range 10-15 is disclosed, 11, 12, 13, and 14 are also disclosed. All methods described herein can be performed in any suitable order unless otherwise indicated herein and otherwise clearly contradicted by context. The use of any and all examples, or the exemplary language described herein (eg, “e.g.,”) is merely intended to better explain the invention and is not claimed otherwise. The scope of the invention is not limited. No language in the specification should be construed as indicating any non-claimed element of the invention as essential to the practice of the invention.
多くの実施例の側面及び実施態様が、上記に開示されてきたが、本願技術分野の当業者はある変更、並べ替え、付加及びそれらのサブコンブネーションを認識するであろう。従って、以下に並べた請求項及びその後に導入された請求項は、全ての変更、並べ替え、付加及びサブコンブネーションを請求項の真意と範囲のうちにあるとして含むと解釈されることが意図されている。 Although many example aspects and embodiments have been disclosed above, those skilled in the art will recognize certain changes, permutations, additions and their sub-combinations. Accordingly, the claims listed below and those subsequently introduced are intended to be construed as including all modifications, permutations, additions and subcombinations as falling within the spirit and scope of the claims. Has been.
〔寄託に関する情報〕
レタス品種「E01C10216」の寄託は、７ハリスプレ−ス、サリナス、カルフォルニア93901、米国(7 Harris Place, Salinas, California 93901, United States)に住所があるエンザザーデン ＵＳＡ会社(Enza Zaden USA, Inc.,)により保管されている。この寄託へのアクセスは、連邦規則集 37巻1.14(37C.F.R. §1.14)及び特許法122条(35U.S.C§122)により特許商標庁の長官により、その資格が与えられると決定された者に対して、本願が継続している間に可能である。本願のいずれかの請求項についての許可があったときは、公衆が本品種を使用することに関するすべての制限は、工業的、食品及び海洋細菌株式会社(National Collection of Industrial, Food and Marine Bacteria Ltd.(NCIMB Ltd))、ファーガソンビルディング、クレイブストーン エステート、バックスバーン、アバディーン、AB21 9YA、連合王国(Ferguson Building, Craibstone Estate, Bucksburn, Aberdeen, AB21 9YA, United Kingdom)の国立コレクション(National Collection)に関して同じ品種の2,500個以上の種子の寄託へのアクセスを与えることにより、最終的に除かれる。
[Information on deposit]
The deposit of the lettuce variety “E01C10216” was entrusted by Enza Zaden USA, Inc., whose address is 7 Harris Place, Salinas, California 93901, USA (7 Harris Place, Salinas, California 93901, United States) It is stored. Access to this deposit may be granted by the Director of the Patent and Trademark Office in accordance with Federal Regulations Vol. 37, 1.14 (37C.FR §1.14) and 35 USC 122 (35U.SC §122). On the other hand, this is possible while the present application continues. With permission for any claim of this application, all restrictions on the use of this variety by the public are limited to the National Collection of Industrial, Food and Marine Bacteria Ltd. (NCIMB Ltd)), Ferguson Building, Cravestone Estate, Bucksburn, Aberdeen, AB21 9YA, National Collection of Ferguson Building, Craibstone Estate, Bucksburn, Aberdeen, AB21 9YA, United Kingdom By giving access to a deposit of more than 2,500 seeds of the variety, it is eventually removed.
２５００個以上のレタス品種「E01C10216」の種子が、2016年4月5日に、ブダペスト条約により、工業的、食品及び海洋細菌株式会社（National Collection of Industrial, Food and Marine Bacteria Ltd(NCIMB Ltd)、ファーガソンビルディング、クレイブストーン エステート、バックスバーン、アバディーン、AB21 9YA、連合王国(Ferguson Building, CraibstoneEstate, Bucksburn, Aberdeen, AB21 9YA, United Kingdom)の国立コレクション(National Collection)に寄託された。この寄託にはNCIMB番号42568が割り当てられた。この寄託へのアクセスは、連邦規則集 37巻1.14(37C.F.R. §1.14)及び特許法122条(35U.S.C§122)により特許商標庁の長官により、資格が与えられると決定された者に対して、本願が継続している間に可能である。本願のいずれかの請求項が許可されたときは、公衆がこの品種を利用することについて全ての制限は最終的に除かれる。 More than 2,500 lettuce varieties “E01C10216” seeds were converted to the National Collection of Industrial, Food and Marine Bacteria Ltd (NCIMB Ltd) on April 5, 2016 under the Budapest Treaty. Deposited to the National Collection of Ferguson Building, Craibstone Estate, Bucksburn, Aberdeen, AB21 9YA, United Kingdom, at the NCIMB. No. 42568. Access to this deposit is granted by the Commissioner of the Patent and Trademark Office according to 37 CFR 1.14 (37C.FR §1.14) and 35 USC 122 (35U.SC §122). This is possible for those who have been determined to be able to do so while the application continues, and if any claim of the application is granted, the public will be advised about using this variety. All restrictions are finally removed.
寄託はNCIMB保管所で保管される。これは、公的な寄託であり、30年以上の期間、又は寄託サンプルの最近の請求後５年以上、または特許の有効期間のうち、いずれか長い期間保管されることになり、寄託が上記期間中に行えなくなると、交換される。 Deposits are stored at the NCIMB depository. This is an official deposit and will be stored for a period of 30 years or more, or 5 years after the last request for deposited samples, or the validity period of the patent, whichever is longer, If it can't be done during the period, it will be replaced.
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