JP2017507943A5 - - Google Patents
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Description
一実施形態では、本明細書に提供される発明はＨＥＲ２／ｎｅｕを発現する腫瘍増殖またはガンを患う被験者内の転移性疾患を遅延する方法に関し、この方法は融合ポリペプチドをコードする核酸を含む組み換え型弱毒化リステリアを投与する工程を含み、前記融合ポリペプチドが追加的なポリペプチドに融合したＨＥＲ２／ｎｅｕキメラ抗原を含み、前記核酸分子が前記融合ポリペプチドをコードする第１のオープンリーディングフレームを含み、前記核酸分子が代謝酵素をコードする第２のオープンリーディングフレームをさらに含み、かつ前記代謝酵素が前記組み換え型リステリアワクチン株の染色体内で欠いている内因性遺伝子を相補する。別の実施形態では、被験者はヒトである。別の実施形態では、ヒトの被験者は大人であってもよく、または子どもであってもよい。別の実施形態では、被験者はイヌである。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
（項目１）
被験者内のＨＥＲ２／ｎｅｕを発現する腫瘍増殖またはガンを治療する方法であって、前記方法が組み換え型ポリペプチドをコードする核酸を含む組み換え型弱毒化リステリアを含む組成物を投与する工程を含み、前記組み換え型ポリペプチドが追加的なポリペプチドに融合したＨＥＲ２／ｎｅｕキメラ抗原を含み、前記核酸分子が前記組み換え型ポリペプチドをコードする第１のオープンリーディングフレームを含み、前記核酸分子が代謝酵素をコードする第２のオープンリーディングフレームをさらに含み、かつ前記代謝酵素が前記組み換え型リステリア株の前記染色体内の突然変異した内因性遺伝子を相補する、方法。
（項目２）
前記組成物がリステリア約３．３×１０ ９ 個のリステリア投与量を含む、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記被験者がヒトまたはイヌの被験者である、項目１に記載の方法。
（項目４）
前記ヒトの被験者が子ども、青年、または大人である、項目３に記載の方法。
（項目５）
前記融合ポリペプチドを前記被験者に投与することが前記腫瘍の中のエスケープ変異を防止する、項目１に記載の方法。
（項目６）
前記ＨＥＲ２／ｎｅｕキメラ抗原が前記マッピングしたヒトＭＨＣクラスＩエピトープのうちの少なくとも５、９、１３、１４、または１７を含むヒトキメラ型ＨＥＲ２／ｎｅｕである、項目１に記載の方法。
（項目７）
前記キメラ型ＨＥＲ２／ｎｅｕがキメラ型イヌＨＥＲ２／ｎｅｕである、項目１に記載の方法。
（項目８）
前記核酸分子が前記リステリアゲノムに組み込まれる、項目１に記載の方法。
（項目９）
前記核酸分子が前記組み換え型リステリアワクチン株の中のプラスミドの中にあり、かつ抗生物質選択がないとき、前記プラスミドは前記組み換え型リステリアワクチン株の中に安定して維持される、項目１に記載の方法。
（項目１０）
前記組み換え型リステリアが前記ａｃｔＡ病毒性遺伝子内に突然変異を含む、項目１に記載の方法。
（項目１１）
前記追加的なポリペプチドが、ａ）非溶血性ＬＬＯタンパク質もしくはＮ末端断片、ｂ）ＰＥＳＴ配列、またはｃ）ＡｃｔＡ断片からなる群から選択される、項目１に記載の方法。
（項目１２）
前記第２のオープンリーディングフレームによってコードされた前記代謝酵素がアラニン・ラセマーゼ酵素またはＤ−アミノ酸トランスフェラーゼ酵素である、項目１に記載の方法。
（項目１３）
独立したアジュバントをさらに含む、項目１に記載の方法。
（項目１４）
前記アジュバントが、顆粒球性／マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）タンパク質、ＧＭ−ＣＳＦタンパク質をコードするヌクレオチド分子、サポニンＱＳ２１、モノホスホリルリピドＡ、またはメチル化されていないＣｐＧ含有オリゴヌクレオチドを含む、項目１２に記載の方法。
（項目１５）
前記腫瘍がＨＥＲ２／ｎｅｕ陽性腫瘍であり、かつ前記ガンがＨＥＲ２／ｎｅｕを発現するガンである、項目１に記載の方法。
（項目１６）
前記ガンが骨肉腫、卵巣ガン、胃ガン、中枢神経系（ＣＮＳ）のガン、またはユーイング肉腫（ＥＳ）である、項目１に記載の方法。
（項目１７）
前記骨肉腫ガンがイヌの骨肉腫である、項目１６に記載の方法。
（項目１８）
前記骨肉腫が小児骨肉腫である、項目１６に記載の方法。
（項目１９）
被験者内のＨＥＲ２／ｎｅｕを発現する腫瘍増殖またはガンに対する強化した免疫応答を引き出す方法であって、前記方法が組み換え型ポリペプチドをコードする核酸を含む組み換え型弱毒化リステリア株を含む組成物を投与する工程を含み、前記融合ポリペプチドが追加的なポリペプチドに融合したＨＥＲ２／ｎｅｕキメラ抗原を含み、前記核酸分子が前記組み換え型ポリペプチドをコードする第１のオープンリーディングフレームを含み、前記核酸分子が代謝酵素をコードする第２のオープンリーディングフレームをさらに含み、かつ前記代謝酵素が前記組み換え型リステリア株の前記染色体内の突然変異した内因性遺伝子を相補する、方法。
（項目２０）
前記組成物がリステリア約３．３×１０ ９ 個のリステリア投与量を含む、項目１に記載の方法。
（項目２１）
前記被験者がヒトまたはイヌの被験者である、項目１９に記載の方法。
（項目２２）
前記ヒトの被験者が子ども、青年、または大人である、項目２１に記載の方法。
（項目２３）
前記融合ポリペプチドをＨＥＲ２／ｎｅｕを発現する腫瘍を有する前記被験者に投与することが前記腫瘍の中のエスケープ変異を防止する、項目１９に記載の方法。
（項目２４）
前記ＨＥＲ２／ｎｅｕキメラ抗原が前記マッピングしたヒトＭＨＣクラスＩエピトープのうちの少なくとも５、９、１３、１４、または１７を含むヒトキメラ型ＨＥＲ２／ｎｅｕである、項目１９に記載の方法。
（項目２５）
前記キメラ型ＨＥＲ２／ｎｅｕがキメラ型イヌＨＥＲ２／ｎｅｕである、項目１９に記載の方法。
（項目２６）
前記核酸分子が前記リステリアゲノムに組み込まれる、項目１９に記載の方法。
（項目２７）
核酸分子が、前記組み換え型リステリアワクチン株の中のプラスミド内にある、項目１９に記載の方法。
（項目２８）
抗生物質選択が無いときに前記プラスミドが前記組み換え型リステリアワクチン株内で安定して維持される、項目１９に記載の方法。
（項目２９）
前記組み換え型リステリアが前記ａｃｔＡ病毒性遺伝子内に突然変異を含む、項目１９に記載の方法。
（項目３０）
前記追加的なポリペプチドが、ａ）非溶血性ＬＬＯタンパク質もしくはＮ末端断片、ｂ）ＰＥＳＴ配列、またはｃ）ＡｃｔＡ断片からなる群から選択される、項目１９に記載の方法。
（項目３１）
前記第２のオープンリーディングフレームによってコードされた前記代謝酵素がアラニン・ラセマーゼ酵素またはＤ−アミノ酸トランスフェラーゼ酵素である、項目１９に記載の方法。
（項目３２）
独立したアジュバントをさらに含む、項目１９に記載の方法。
（項目３３）
前記アジュバントが、顆粒球性／マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）タンパク質、ＧＭ−ＣＳＦタンパク質をコードするヌクレオチド分子、サポニンＱＳ２１、モノホスホリルリピドＡ、またはメチル化されていないＣｐＧ含有オリゴヌクレオチドを含む、項目３２に記載の方法。
（項目３４）
前記腫瘍がＨＥＲ２／ｎｅｕ陽性腫瘍であり、かつ前記ガンがＨＥＲ２／ｎｅｕを発現するガンである、項目１９に記載の方法。
（項目３５）
前記ガンが骨肉腫、卵巣ガン、胃ガン、中枢神経系（ＣＮＳ）のガン、またはユーイング肉腫（ＥＳ）である、項目１９に記載の方法。
（項目３６）
前記骨肉腫ガンがイヌの骨肉腫である、項目３５に記載の方法。
（項目３７）
前記骨肉腫が小児骨肉腫である、項目１９に記載の方法。
（項目３８）
前記ＨＥＲ２／ｎｅｕを発現する腫瘍またはガンに対する前記免疫応答が、前記ＨＥＲ２／ｎｅｕタンパク質の準優占エピトープへの免疫応答を含む、項目１９に記載の方法。
In one embodiment, the invention provided herein relates to a method of delaying metastatic disease in a subject suffering from tumor growth or cancer that expresses HER2 / neu, the method comprising a nucleic acid encoding a fusion polypeptide. Administering a recombinant attenuated Listeria, wherein said fusion polypeptide comprises a HER2 / neu chimeric antigen fused to an additional polypeptide, wherein said nucleic acid molecule encodes said fusion polypeptide The nucleic acid molecule further comprises a second open reading frame encoding a metabolic enzyme, and the metabolic enzyme complements an endogenous gene that is lacking in the chromosome of the recombinant Listeria vaccine strain. In another embodiment, the subject is a human. In another embodiment, the human subject may be an adult or a child. In another embodiment, the subject is a dog.
For example, the present invention provides the following items.
(Item 1)
A method of treating tumor growth or cancer expressing HER2 / neu in a subject comprising administering a composition comprising a recombinant attenuated Listeria comprising a nucleic acid encoding a recombinant polypeptide, The recombinant polypeptide comprises a HER2 / neu chimeric antigen fused to an additional polypeptide, the nucleic acid molecule comprises a first open reading frame encoding the recombinant polypeptide, and the nucleic acid molecule comprises a metabolic enzyme; A method further comprising a second open reading frame encoding, and wherein said metabolic enzyme complements a mutated endogenous gene in said chromosome of said recombinant Listeria strain.
(Item 2)
The method of claim 1, wherein the composition comprises a dose of about 3.3 × 10 9 Listeria.
(Item 3)
Item 2. The method according to Item 1, wherein the subject is a human or dog subject.
(Item 4)
4. The method of item 3, wherein the human subject is a child, adolescent or adult.
(Item 5)
The method of item 1, wherein administering the fusion polypeptide to the subject prevents escape mutations in the tumor.
(Item 6)
The method of item 1, wherein the HER2 / neu chimeric antigen is a human chimeric HER2 / neu comprising at least 5, 9, 13, 14, or 17 of the mapped human MHC class I epitopes.
(Item 7)
Item 2. The method according to Item 1, wherein the chimeric HER2 / neu is a chimeric dog HER2 / neu.
(Item 8)
Item 2. The method according to Item 1, wherein the nucleic acid molecule is integrated into the Listeria genome.
(Item 9)
Item 1. The nucleic acid molecule is in a plasmid in the recombinant Listeria vaccine strain and when there is no antibiotic selection, the plasmid is stably maintained in the recombinant Listeria vaccine strain. the method of.
(Item 10)
The method according to item 1, wherein the recombinant Listeria comprises a mutation in the actA disease virulence gene.
(Item 11)
2. The method of item 1, wherein the additional polypeptide is selected from the group consisting of a) a non-hemolytic LLO protein or N-terminal fragment, b) a PEST sequence, or c) an ActA fragment.
(Item 12)
The method according to item 1, wherein the metabolic enzyme encoded by the second open reading frame is an alanine racemase enzyme or a D-amino acid transferase enzyme.
(Item 13)
The method of item 1, further comprising an independent adjuvant.
(Item 14)
The adjuvant comprises granulocytic / macrophage colony stimulating factor (GM-CSF) protein, nucleotide molecule encoding GM-CSF protein, saponin QS21, monophosphoryl lipid A, or unmethylated CpG-containing oligonucleotide, 13. The method according to item 12.
(Item 15)
Item 2. The method according to Item 1, wherein the tumor is a HER2 / neu positive tumor and the cancer is a cancer that expresses HER2 / neu.
(Item 16)
2. The method of item 1, wherein the cancer is osteosarcoma, ovarian cancer, gastric cancer, central nervous system (CNS) cancer, or Ewing sarcoma (ES).
(Item 17)
The method according to item 16, wherein the osteosarcoma cancer is canine osteosarcoma.
(Item 18)
The method according to item 16, wherein the osteosarcoma is childhood osteosarcoma.
(Item 19)
Administration of a composition comprising a recombinant attenuated Listeria strain comprising a nucleic acid encoding a recombinant polypeptide, wherein the method elicits an enhanced immune response against tumor growth or cancer expressing HER2 / neu in a subject And wherein said fusion polypeptide comprises a HER2 / neu chimeric antigen fused to an additional polypeptide, said nucleic acid molecule comprising a first open reading frame encoding said recombinant polypeptide, and said nucleic acid molecule Further comprising a second open reading frame encoding a metabolic enzyme, and the metabolic enzyme complements a mutated endogenous gene in the chromosome of the recombinant Listeria strain.
(Item 20)
The method of claim 1, wherein the composition comprises a dose of about 3.3 × 10 9 Listeria.
(Item 21)
20. A method according to item 19, wherein the subject is a human or dog subject.
(Item 22)
22. A method according to item 21, wherein the human subject is a child, adolescent or adult.
(Item 23)
20. The method of item 19, wherein administering the fusion polypeptide to the subject having a tumor that expresses HER2 / neu prevents escape mutations in the tumor.
(Item 24)
20. The method of item 19, wherein the HER2 / neu chimeric antigen is a human chimeric HER2 / neu comprising at least 5, 9, 13, 14, or 17 of the mapped human MHC class I epitopes.
(Item 25)
Item 20. The method according to Item 19, wherein the chimeric HER2 / neu is a chimeric dog HER2 / neu.
(Item 26)
20. A method according to item 19, wherein the nucleic acid molecule is integrated into the Listeria genome.
(Item 27)
20. A method according to item 19, wherein the nucleic acid molecule is in a plasmid in the recombinant Listeria vaccine strain.
(Item 28)
20. A method according to item 19, wherein the plasmid is stably maintained in the recombinant Listeria vaccine strain in the absence of antibiotic selection.
(Item 29)
20. The method of item 19, wherein the recombinant Listeria comprises a mutation in the actA disease virulence gene.
(Item 30)
20. The method of item 19, wherein the additional polypeptide is selected from the group consisting of a) a non-hemolytic LLO protein or N-terminal fragment, b) a PEST sequence, or c) an ActA fragment.
(Item 31)
20. A method according to item 19, wherein the metabolic enzyme encoded by the second open reading frame is an alanine racemase enzyme or a D-amino acid transferase enzyme.
(Item 32)
20. A method according to item 19, further comprising an independent adjuvant.
(Item 33)
The adjuvant comprises granulocytic / macrophage colony stimulating factor (GM-CSF) protein, nucleotide molecule encoding GM-CSF protein, saponin QS21, monophosphoryl lipid A, or unmethylated CpG-containing oligonucleotide, 33. A method according to item 32.
(Item 34)
20. The method according to item 19, wherein the tumor is a HER2 / neu positive tumor and the cancer is a cancer that expresses HER2 / neu.
(Item 35)
20. The method of item 19, wherein the cancer is osteosarcoma, ovarian cancer, gastric cancer, central nervous system (CNS) cancer, or Ewing sarcoma (ES).
(Item 36)
36. The method of item 35, wherein the osteosarcoma cancer is canine osteosarcoma.
(Item 37)
20. A method according to item 19, wherein the osteosarcoma is childhood osteosarcoma.
(Item 38)
20. The method of item 19, wherein the immune response to the HER2 / neu expressing tumor or cancer comprises an immune response to a quasi-dominant epitope of the HER2 / neu protein.
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