JP2017200678A - Separation carrier, method for producing separation carrier, column, and device for liquid chromatography or device for solid phase extraction - Google Patents
Separation carrier, method for producing separation carrier, column, and device for liquid chromatography or device for solid phase extraction Download PDFInfo
- Publication number
- JP2017200678A JP2017200678A JP2016092657A JP2016092657A JP2017200678A JP 2017200678 A JP2017200678 A JP 2017200678A JP 2016092657 A JP2016092657 A JP 2016092657A JP 2016092657 A JP2016092657 A JP 2016092657A JP 2017200678 A JP2017200678 A JP 2017200678A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- calcium carbonate
- separation
- solvent
- carrier
- carbonate particles
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000000926 separation method Methods 0.000 title claims abstract description 114
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 title claims abstract description 31
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 238000002414 normal-phase solid-phase extraction Methods 0.000 title claims abstract description 17
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 253
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims abstract description 124
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 claims abstract description 120
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims abstract description 47
- 229920000208 temperature-responsive polymer Polymers 0.000 claims abstract description 9
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims description 77
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 74
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 27
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 claims description 19
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 17
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 10
- 230000000379 polymerizing effect Effects 0.000 claims description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 22
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N Acrylamide Chemical compound NC(=O)C=C HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 16
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 16
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 229920003213 poly(N-isopropyl acrylamide) Polymers 0.000 description 13
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 12
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M Acrylate Chemical compound [O-]C(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical group ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 8
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 7
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 7
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 7
- SOGAXMICEFXMKE-UHFFFAOYSA-N Butylmethacrylate Chemical compound CCCCOC(=O)C(C)=C SOGAXMICEFXMKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 6
- 229920000172 poly(styrenesulfonic acid) Polymers 0.000 description 6
- 229940005642 polystyrene sulfonic acid Drugs 0.000 description 6
- 238000001878 scanning electron micrograph Methods 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 5
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 description 5
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 5
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N Pentane Chemical compound CCCCC OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N Testostosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 4
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 4
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 4
- 239000003999 initiator Substances 0.000 description 4
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- DFENKTCEEGOWLB-UHFFFAOYSA-N n,n-bis(methylamino)-2-methylidenepentanamide Chemical compound CCCC(=C)C(=O)N(NC)NC DFENKTCEEGOWLB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HMZGPNHSPWNGEP-UHFFFAOYSA-N octadecyl 2-methylprop-2-enoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCOC(=O)C(C)=C HMZGPNHSPWNGEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 3
- MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 1,2-Divinylbenzene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1C=C MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WHNPOQXWAMXPTA-UHFFFAOYSA-N 3-methylbut-2-enamide Chemical compound CC(C)=CC(N)=O WHNPOQXWAMXPTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004438 BET method Methods 0.000 description 2
- 229910021532 Calcite Inorganic materials 0.000 description 2
- CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-N Methacrylic acid Chemical compound CC(=C)C(O)=O CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910004298 SiO 2 Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000003926 acrylamides Chemical class 0.000 description 2
- KRMDCWKBEZIMAB-UHFFFAOYSA-N amitriptyline Chemical compound C1CC2=CC=CC=C2C(=CCCN(C)C)C2=CC=CC=C21 KRMDCWKBEZIMAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000836 amitriptyline Drugs 0.000 description 2
- 229920006318 anionic polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 229920006317 cationic polymer Polymers 0.000 description 2
- 238000007334 copolymerization reaction Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- LNCPIMCVTKXXOY-UHFFFAOYSA-N hexyl 2-methylprop-2-enoate Chemical compound CCCCCCOC(=O)C(C)=C LNCPIMCVTKXXOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 229920001519 homopolymer Polymers 0.000 description 2
- 229920001600 hydrophobic polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000000155 melt Substances 0.000 description 2
- ZIUHHBKFKCYYJD-UHFFFAOYSA-N n,n'-methylenebisacrylamide Chemical compound C=CC(=O)NCNC(=O)C=C ZIUHHBKFKCYYJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LQNUZADURLCDLV-UHFFFAOYSA-N nitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=CC=C1 LQNUZADURLCDLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005416 organic matter Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 2
- 239000013076 target substance Substances 0.000 description 2
- 229960003604 testosterone Drugs 0.000 description 2
- VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N tetrachloromethane Chemical compound ClC(Cl)(Cl)Cl VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 description 2
- 229910052724 xenon Inorganic materials 0.000 description 2
- FHNFHKCVQCLJFQ-UHFFFAOYSA-N xenon atom Chemical compound [Xe] FHNFHKCVQCLJFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NAWXUBYGYWOOIX-SFHVURJKSA-N (2s)-2-[[4-[2-(2,4-diaminoquinazolin-6-yl)ethyl]benzoyl]amino]-4-methylidenepentanedioic acid Chemical compound C1=CC2=NC(N)=NC(N)=C2C=C1CCC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CC(=C)C(O)=O)C(O)=O)C=C1 NAWXUBYGYWOOIX-SFHVURJKSA-N 0.000 description 1
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- RVHSTXJKKZWWDQ-UHFFFAOYSA-N 1,1,1,2-tetrabromoethane Chemical compound BrCC(Br)(Br)Br RVHSTXJKKZWWDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZSZRUEAFVQITHH-UHFFFAOYSA-N 2-(2-methylprop-2-enoyloxy)ethyl 2-(trimethylazaniumyl)ethyl phosphate Chemical compound CC(=C)C(=O)OCCOP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C ZSZRUEAFVQITHH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKTWWGYCVXCKOJ-UHFFFAOYSA-N 2-methoxy-1-(2-methoxyphenyl)-2-phenylethanone Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(OC)C(=O)C1=CC=CC=C1OC QKTWWGYCVXCKOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GAWIXWVDTYZWAW-UHFFFAOYSA-N C[CH]O Chemical group C[CH]O GAWIXWVDTYZWAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IMROMDMJAWUWLK-UHFFFAOYSA-N Ethenol Chemical compound OC=C IMROMDMJAWUWLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 1
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-M Methacrylate Chemical compound CC(=C)C([O-])=O CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N N-Vinyl-2-pyrrolidone Chemical compound C=CN1CCCC1=O WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N Styrene Chemical group C=CC1=CC=CC=C1 PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QYKIQEUNHZKYBP-UHFFFAOYSA-N Vinyl ether Chemical class C=COC=C QYKIQEUNHZKYBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXRNWUYCCQFHIH-UHFFFAOYSA-N [2-(hydroxymethyl)-3-prop-2-enoyloxy-2-(prop-2-enoyloxymethyl)propyl] octadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(CO)(COC(=O)C=C)COC(=O)C=C UXRNWUYCCQFHIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 150000007514 bases Chemical class 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 239000011246 composite particle Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- -1 dimethylaminopropyl Chemical group 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000010559 graft polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical group 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- FQPSGWSUVKBHSU-UHFFFAOYSA-N methacrylamide Chemical compound CC(=C)C(N)=O FQPSGWSUVKBHSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QNILTEGFHQSKFF-UHFFFAOYSA-N n-propan-2-ylprop-2-enamide Chemical compound CC(C)NC(=O)C=C QNILTEGFHQSKFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052762 osmium Inorganic materials 0.000 description 1
- SYQBFIAQOQZEGI-UHFFFAOYSA-N osmium atom Chemical compound [Os] SYQBFIAQOQZEGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- NXGWSWBWEQYMND-UHFFFAOYSA-N piperazine;prop-2-enamide Chemical compound NC(=O)C=C.NC(=O)C=C.C1CNCCN1 NXGWSWBWEQYMND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920006254 polymer film Polymers 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical compound [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000967 suction filtration Methods 0.000 description 1
- 238000001771 vacuum deposition Methods 0.000 description 1
- 229920001567 vinyl ester resin Polymers 0.000 description 1
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 1
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
- Polymerisation Methods In General (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
Abstract
Description
本発明は、分離用担体、分離用担体の製造方法、カラム、及び、液体クロマトグラフィー用装置又は固相抽出用装置に関する。 The present invention relates to a separation carrier, a method for producing the separation carrier, a column, and an apparatus for liquid chromatography or an apparatus for solid phase extraction.
従来より、液体クロマトグラフィー等に用いられる分離用担体としては、シリカや、表面が修飾されたシリカが使用されている（例えば、非特許文献１を参照）。 Conventionally, silica or silica whose surface is modified has been used as a separation carrier used in liquid chromatography or the like (see, for example, Non-Patent Document 1).
しかしながら、シリカは、塩基条件下での耐久性が低いため、塩基性条件下における使用には適していないという問題があった。 However, since silica has low durability under basic conditions, there is a problem that it is not suitable for use under basic conditions.
本発明は、以上の実情に鑑みてなされたものであり、塩基性条件下における使用に適した分離用担体、分離用担体の製造方法、並びにこのような分離用担体を備えるカラム、及び装置を提供することを目的とする。 The present invention has been made in view of the above circumstances, and provides a separation carrier suitable for use under basic conditions, a method for producing the separation carrier, and a column and apparatus including such a separation carrier. The purpose is to provide.
本発明者らは、所定の平均粒径の炭酸カルシウムが、分離用担体として使用できることを見出し、本発明を完成するに至った。より具体的には、本発明は以下のようなものを提供することを目的とする。 The present inventors have found that calcium carbonate having a predetermined average particle diameter can be used as a carrier for separation, and have completed the present invention. More specifically, the present invention aims to provide the following.
（１） 平均粒径が０．１５μｍ以上９５μｍ以下である炭酸カルシウム粒子を含有する、分離用担体。 (1) A carrier for separation containing calcium carbonate particles having an average particle size of 0.15 μm or more and 95 μm or less.
（２） 前記炭酸カルシウム粒子の表面に形成されたポリマーからなる膜をさらに含有する、（１）に記載の分離用担体。 (2) The separation carrier according to (1), further comprising a membrane made of a polymer formed on the surface of the calcium carbonate particles.
（３） 前記ポリマーが温度応答性ポリマーである、（２）に記載の分離用担体。 (3) The carrier for separation according to (2), wherein the polymer is a temperature-responsive polymer.
（４） 前記炭酸カルシウム粒子と前記ポリマーとの質量比が１：０．０１〜１：０．３である、（２）又は（３）に記載の分離用担体。 (4) The separation carrier according to (2) or (3), wherein a mass ratio of the calcium carbonate particles to the polymer is 1: 0.01 to 1: 0.3.
（５） 前記炭酸カルシウム粒子の比表面積が、２５ｍ２／ｇ以上６００ｍ２／ｇ以下である（１）から（４）のいずれかに記載の分離用担体。 (5) The separation carrier according to any one of (1) to (4), wherein the calcium carbonate particles have a specific surface area of 25 m 2 / g or more and 600 m 2 / g or less.
（６） 液体クロマトグラフィー用又は固相抽出用である、（１）から（５）のいずれかに記載の分離用担体。 (6) The separation carrier according to any one of (1) to (5), which is for liquid chromatography or solid phase extraction.
（７） 塩基性条件下における分離に用いられる、（１）から（６）のいずれかに記載の分離用担体。 (7) The separation carrier according to any one of (1) to (6), which is used for separation under basic conditions.
（８） （１）から（７）のいずれかに記載の分離用担体を備える、液体クロマトグラフィー用又は固相抽出用カラム。 (8) A column for liquid chromatography or a solid phase extraction, comprising the separation carrier according to any one of (1) to (7).
（９） （８）に記載のカラムを備える、液体クロマトグラフィー用又は固相抽出用装置。 (9) An apparatus for liquid chromatography or a solid phase extraction comprising the column according to (8).
（１０） 平均粒径が０．１５μｍ以上９５μｍ以下である炭酸カルシウム粒子と、該炭酸カルシウム粒子の表面に形成されたポリマーからなる膜とを含有する分離用担体の製造方法であって、
重合性モノマーと平均粒径が０．１５μｍ以上９５μｍ以下である炭酸カルシウム粒子とを含有する第１の溶媒を調製する工程と、
前記第１の溶媒を揮発させ、前記炭酸カルシウム粒子と前記重合性モノマーとの混合物の塊を得る工程と、
前記混合物の塊を含有する第２の溶媒を調製する工程と、
前記第２の溶媒中の前記重合性モノマーを重合させる重合工程と、を有し、
前記第１の溶媒は、前記重合性モノマーに対する良溶媒であり、かつ、前記炭酸カルシウム粒子に対する貧溶媒であり、
前記第２の溶媒は、前記重合性モノマー及び前記炭酸カルシウム粒子に対する貧溶媒である、方法。
(10) A method for producing a separation carrier comprising calcium carbonate particles having an average particle size of 0.15 μm or more and 95 μm or less, and a membrane made of a polymer formed on the surface of the calcium carbonate particles,
Preparing a first solvent containing a polymerizable monomer and calcium carbonate particles having an average particle size of 0.15 μm or more and 95 μm or less;
Volatilizing the first solvent to obtain a lump of a mixture of the calcium carbonate particles and the polymerizable monomer;
Preparing a second solvent containing a mass of the mixture;
A polymerization step of polymerizing the polymerizable monomer in the second solvent,
The first solvent is a good solvent for the polymerizable monomer and a poor solvent for the calcium carbonate particles,
The method, wherein the second solvent is a poor solvent for the polymerizable monomer and the calcium carbonate particles.
（１１） 前記重合工程における重合を、光重合により行う、（１０）に記載の方法。 (11) The method according to (10), wherein the polymerization in the polymerization step is performed by photopolymerization.
（１２） 前記第１の溶媒を調製する工程において、前記炭酸カルシウム粒子と前記重合性モノマーとを１：０．０１０〜１：０．３の質量比で前記第１の溶媒に含有させる、（１０）又は（１１）に記載の方法。 (12) In the step of preparing the first solvent, the calcium carbonate particles and the polymerizable monomer are contained in the first solvent at a mass ratio of 1: 0.010 to 1: 0.3. The method according to 10) or (11).
本発明によれば、塩基性条件下における使用に適した分離用担体、分離用担体の製造方法、並びにこのような分離用担体を備えるカラム、及び装置を提供することができる。 According to the present invention, it is possible to provide a separation carrier suitable for use under basic conditions, a method for producing the separation carrier, and a column and apparatus including such a separation carrier.
以下、本発明の実施形態について説明するが、本発明はこれに特に限定されない。 Hereinafter, although embodiment of this invention is described, this invention is not specifically limited to this.
＜分離用担体＞
本発明の分離用担体は、平均粒径が０．１５μｍ以上９５μｍ以下である炭酸カルシウム粒子を含有する。
<Carrier for separation>
The separation carrier of the present invention contains calcium carbonate particles having an average particle size of 0.15 μm or more and 95 μm or less.
本発明において、「分離用担体」とは、物質の分離に用いられる担体を意味する。「物質の分離に用いられる」とは、例えば、複数の物質が混在する液体等の系において、１つの物質又は２つ以上の物質を検出、定量又は分取可能な程度にまで分離することを目的として用いられることを意味する。分離対象の物質は、化合物（低分子、高分子、ペプチド、たんぱく質、ＤＮＡ、ＲＮＡ等）のいずれであってもよく、特に限定されない。 In the present invention, the “separation carrier” means a carrier used for separation of substances. “Used for separation of substances” means that, for example, in a system such as a liquid in which a plurality of substances are mixed, one substance or two or more substances are separated to such an extent that they can be detected, quantified or sorted. It means to be used as a purpose. The substance to be separated may be any compound (low molecule, polymer, peptide, protein, DNA, RNA, etc.) and is not particularly limited.
（炭酸カルシウム粒子）
炭酸カルシウムは、その特性上、シリカよりも塩基性条件における耐久性があるため、炭酸カルシウム粒子を分離用担体として使用できれば、シリカよりも塩基性条件における使用に適した分離用担体として使用できることが期待される。ここで、炭酸カルシウムは、液体クロマトグラフィーの歴史の初期段階では分離用担体として使用されていた（例えば、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｗａｋａｙａｍａ−ｅｄｃ．ｂｉｇ−ｕ．ｊｐ／ｋａｎｋｙｏ／ｅｋｉｋｕｒｏ／ｅｋｉｋｕｒｏ．ｐｄｆの「１（１）クロマトグラフィーの歴史」）という経緯がある。しかしながら、炭酸カルシウム粒子は、液体クロマトグラフィー等の精密な分離解析の分離用担体としては使用できないと考えられており（例えば、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｇｅｌｉｆｅｓｃｉｅｎｃｅｓ．ｃｏ．ｊｐ／ｎｅｗｓｌｅｔｔｅｒ／ｂｉｏｄｉｒｅｃｔ＿ｍａｉｌ／ｔｅｃｈｎｉｃａｌ＿ｔｉｐｓ／ｔｉｐｓ４８．ｈｔｍｌを参照）、現在は、炭酸カルシウムは分離用担体としては使用されておらず、もっぱらシリカが使用されている。
(Calcium carbonate particles)
Since calcium carbonate is more durable in basic conditions than silica due to its characteristics, if calcium carbonate particles can be used as a separation carrier, it can be used as a separation carrier more suitable for use in basic conditions than silica. Be expected. Here, calcium carbonate was used as a carrier for separation in the early stage of the history of liquid chromatography (for example, http://www.wakayama-edc.big-u.jp/kankyo/ekikuro/ekikuro.pdf) “1 (1) History of Chromatography”). However, it is considered that calcium carbonate particles cannot be used as a carrier for separation in precise separation analysis such as liquid chromatography (for example, http://www.gelsciences.co.jp/newletter/biodirect_mail/technical_tips/ tip 48.html), at present, calcium carbonate is not used as a carrier for separation, but exclusively silica.
このように、炭酸カルシウムは、長年にわたって、分離用担体として使用できないとされていたが、本発明者らは、平均粒径が０．１５μｍ以上９５μｍ以下の炭酸カルシウム粒子が、液体クロマトグラフィー等における分離用担体として機能することを見出した。さらには、上述のとおり、炭酸カルシウム粒子は、シリカよりも塩基性条件における耐久性があるため、本発明は、塩基性条件下における使用に適した分離用担体を提供する。 Thus, although calcium carbonate has been said to be unusable as a carrier for separation for many years, the present inventors have found that calcium carbonate particles having an average particle size of 0.15 μm to 95 μm are used in liquid chromatography and the like. It has been found that it functions as a carrier for separation. Furthermore, as described above, since the calcium carbonate particles are more durable in basic conditions than silica, the present invention provides a separation carrier suitable for use under basic conditions.
本発明の炭酸カルシウム粒子は、平均粒径が０．１５μｍ以上９５μｍ以下である粒子であれば特に限定されず、上記範囲において、目的に応じて、適宜平均粒径を調整することができる。例えば、本発明の分離用担体を、精製等の分取を目的として使用する場合は、炭酸カルシウム粒子の平均粒径は１５μｍ以上８５μｍ以下であることが好ましく、２０μｍ以上８２μｍ以下であることがより好ましく、３０μｍ以上８０μｍ以下であることがより一層好ましく、３８μｍ以上７５μｍ以下であることさらに好ましい。また、本発明の分離用担体を分析に用いる場合は、炭酸カルシウム粒子の平均粒径は０．２０μｍ以上２５μｍ以下であることが好ましく、０．３５μｍ以上２０μｍ以下であることがより好ましく、０．５０μｍ以上１５μｍ以下であることがより一層好ましく、１．０μｍ以上１０μｍ以下であることがさらに好ましく、２．５μｍ以上７．０μｍ以下であることが特に好ましい。なお、炭酸カルシウム粒子の平均粒径は、ＳＥＭ像より測定する。 The calcium carbonate particles of the present invention are not particularly limited as long as the average particle diameter is 0.15 μm or more and 95 μm or less, and the average particle diameter can be adjusted as appropriate according to the purpose within the above range. For example, when the separation carrier of the present invention is used for the purpose of fractionation such as purification, the average particle size of the calcium carbonate particles is preferably 15 μm or more and 85 μm or less, and more preferably 20 μm or more and 82 μm or less. Preferably, it is 30 μm or more and 80 μm or less, and more preferably 38 μm or more and 75 μm or less. When the separation carrier of the present invention is used for analysis, the average particle size of the calcium carbonate particles is preferably 0.20 μm or more and 25 μm or less, more preferably 0.35 μm or more and 20 μm or less. More preferably, it is 50 μm or more and 15 μm or less, further preferably 1.0 μm or more and 10 μm or less, and particularly preferably 2.5 μm or more and 7.0 μm or less. In addition, the average particle diameter of a calcium carbonate particle is measured from a SEM image.
炭酸カルシウムの結晶構造は、カルサイト、アラゴナイト、バテライト、アモルファスの４つの形態のものが知られているが、炭酸カルシウム粒子の平均粒径を上記範囲内に制御しやすく、分離能の高い分離用担体が得られやすく、さらには塩基性下での耐久性がより優れるという観点から、本発明の炭酸カルシウム粒子はバテライトの結晶形であることが好ましい。本発明の炭酸カルシウム粒子は、単一の結晶構造から構成されていてもよいが、複数種の結晶構造が混在してもよい。複数種の結晶構造が混在する場合、全炭酸カルシウムのうち、８０質量％以上がバテライトであることが好ましく、８５質量％以上がバテライトであることがより好ましく、９０質量％以上がバテライトであることがより一層好ましく、９５質量％以上がバテライトであることがさらに好ましく、９９％以上がバテライトであることが特に好ましい。 The crystal structure of calcium carbonate is known to have four forms: calcite, aragonite, vaterite, and amorphous. The calcium carbonate particles of the present invention are preferably in the form of a vaterite from the viewpoint that a carrier is easily obtained and that the durability under basicity is more excellent. The calcium carbonate particles of the present invention may be composed of a single crystal structure, but a plurality of types of crystal structures may be mixed. When plural types of crystal structures are mixed, 80% by mass or more of the total calcium carbonate is preferably vaterite, more preferably 85% by mass or more is vaterite, and 90% by mass or more is vaterite. Is more preferable, 95% by mass or more is more preferably vaterite, and 99% or more is particularly preferable.
バテライトの結晶形であって、平均粒径が０．１５μｍ以上９５μｍ以下の範囲に制御された炭酸カルシウム粒子は、以下のような方法で製造することができる。 Calcium carbonate particles having a crystal form of vatelite and having an average particle diameter controlled in the range of 0.15 μm or more and 95 μm or less can be produced by the following method.
まず、炭酸源（Ｎａ２Ｃｏ３等）を含む水溶液と、カルシウム源（ＣａＣｌ２等）を含む水溶液と、ポリスチレンスルホン酸等の親水性ポリマーとを溶解させた水溶液とを混合し、（例えば、５００ｒｐｍで）撹拌して混合液を得る。この混合液を、２４時間程度静置した後、濾過（吸引濾過等）してから、乾燥することで（乾燥条件は、例えば、１０〜６０℃、３０分〜３時間である。）、得ることができる。なお、０．１５μｍ以上９５μｍ以下の範囲内での平均粒径の制御は、平均粒径を小さくする場合は、攪拌速度を速くすることにより行うことができ、平均粒径を大きくする場合は、攪拌子を小さくすることにより行うことができる。また、炭酸カルシウムのバテライトの結晶形は、安定性が低く、カルサイトに転移しやすいので、安定性を高く保つために、後述する膜形成ポリマーにより表面を膜で覆うことが好ましい。膜形成ポリマーとして親水性ポリマーを用いることで、炭酸カルシウム粒子の表面が親水性ポリマーにより覆われ、平均粒径を制御しやすくなる。 First, an aqueous solution containing a carbonate source (Na 2 Co 3 or the like), an aqueous solution containing a calcium source (CaCl 2 or the like), and an aqueous solution in which a hydrophilic polymer such as polystyrene sulfonic acid is dissolved are mixed (for example, Stir to obtain a mixture (at 500 rpm). The mixture is allowed to stand for about 24 hours, filtered (suction filtration, etc.) and then dried (drying conditions are, for example, 10 to 60 ° C. and 30 minutes to 3 hours). be able to. In addition, the control of the average particle diameter within the range of 0.15 μm or more and 95 μm or less can be performed by increasing the stirring speed when reducing the average particle diameter, and when increasing the average particle diameter, This can be done by reducing the stirring bar. The crystal form of the calcium carbonate vaterite is low in stability and easily transferred to calcite. Therefore, in order to maintain high stability, it is preferable to cover the surface with a film-forming polymer described later. By using a hydrophilic polymer as the film-forming polymer, the surface of the calcium carbonate particles is covered with the hydrophilic polymer, and the average particle diameter can be easily controlled.
本発明における炭酸カルシウムの比表面積は、特に限定されないが、大きいほど分離能が高くなる傾向にあることから、その下限は５ｍ２／ｇ以上であることが好ましく、１０ｍ２／ｇ以上であることがより好ましく、１５ｍ２／ｇ以上であることがより一層好ましく、２０ｍ２／ｇ以上であることがさらに一層好ましく、２５ｍ２／ｇ以上であることが特に好ましい。本発明における炭酸カルシウムの比表面積の上限は１３００ｍ２／ｇ以下であることが好ましく、１１００ｍ２／ｇ以下であることがより好ましく、９００ｍ２／ｇ以下であることがより一層好ましく、７００ｍ２／ｇ以下であることがさらに一層好ましく、６００ｍ２／ｇ以下であることが特に好ましい。なお、本発明における炭酸カルシウムの比表面積は、ＢＥＴ法により測定する。 The specific surface area of calcium carbonate in the present invention is not particularly limited, but the larger the value, the higher the separation ability. Therefore, the lower limit is preferably 5 m 2 / g or more, and preferably 10 m 2 / g or more. Is more preferably 15 m 2 / g or more, still more preferably 20 m 2 / g or more, and particularly preferably 25 m 2 / g or more. The upper limit of the specific surface area of the calcium carbonate in the present invention is preferably at most 1300 m 2 / g, more preferably 1100 m 2 / g or less, even more preferably at most 900m 2 / g, 700m 2 / even more preferably g or less, particularly preferably 600 meters 2 / g or less. The specific surface area of calcium carbonate in the present invention is measured by the BET method.
（膜形成ポリマー）
本発明の分離用担体は、炭酸カルシウム粒子の表面に形成されたポリマー（以下、本明細書において「膜形成ポリマー」と略称する場合がある。）からなる膜をさらに含有することが好ましい。これにより、膜形成ポリマーの種類に応じて分離用担体に様々な特性を与えることができ、また、炭酸カルシウム中のバテライトをより安定させることができる。
(Film-forming polymer)
The separation carrier of the present invention preferably further contains a membrane made of a polymer formed on the surface of the calcium carbonate particles (hereinafter sometimes abbreviated as “film-forming polymer” in the present specification). Thereby, various characteristics can be given to the separation carrier according to the type of the film-forming polymer, and the vaterite in the calcium carbonate can be further stabilized.
本発明の膜形成ポリマーとしては、従来の分離用担体として使用されているようなポリマーを使用でき、分離対象の物性等に応じて、適宜選択できる。具体的には、温度応答性ポリマー、親水性ポリマー、疎水性ポリマー、カチオン性ポリマー、アニオン性ポリマー等のポリマーを使用できる。膜形成ポリマーは、重合性モノマーの重合により得られ、例えば、以下の式（１）、式（２）で表されるようなモノマーの重合体であってもよい。 As the film-forming polymer of the present invention, a polymer used as a conventional separation carrier can be used, and can be appropriately selected according to the physical properties of the separation target. Specifically, polymers such as a temperature responsive polymer, a hydrophilic polymer, a hydrophobic polymer, a cationic polymer, and an anionic polymer can be used. The film-forming polymer is obtained by polymerization of a polymerizable monomer, and may be, for example, a monomer polymer represented by the following formulas (1) and (2).
式（１）、（２）中、Ｒ１は、置換基を表すが、式（１）、（２）で表されるモノマーは、例えば、以下の、式（３）で表されるアクリルアミド系モノマー、式（４）で表されるメタクリルアミド系モノマー、式（５）で表されるメタアクリレート系モノマー、式（６）で表されるアクリレート系モノマー、式（７）で表されるビニルエステル系モノマー、式（８）で表されるビニルアミド系モノマー、式（９）で表されるスチレン系モノマーが挙げられる。式（３）〜（９）中のＲ２としては、炭化水素基、水素原子、アミノ基（脂肪族基を置換基として有してもよい）等が挙げられる。 In the formulas (1) and (2), R 1 represents a substituent, and the monomers represented by the formulas (1) and (2) are, for example, the following acrylamide type represented by the formula (3) Monomer, methacrylamide monomer represented by formula (4), methacrylate monomer represented by formula (5), acrylate monomer represented by formula (6), vinyl ester represented by formula (7) Examples thereof include a vinyl monomer, a vinylamide monomer represented by formula (8), and a styrene monomer represented by formula (9). Examples of R 2 in formulas (3) to (9) include a hydrocarbon group, a hydrogen atom, and an amino group (which may have an aliphatic group as a substituent).
温度応答性ポリマーとしては、例えば、（メタ）アクリルアミド化合物、Ｎ−（又はＮ，Ｎ−ジ）アルキル置換（メタ）アクリルアミド誘導体、ビニルエーテル誘導体等を構成モノマーとして構成されたポリマーや、これらのうちの２種類以上のモノマーの共重合体であってもよい。また、これらのモノマー以外のモノマーとの共重合、ポリマー同士のグラフト重合又は共重合を行ったものを用いてもよく、あるいはこれらモノマーの単独重合体と共重合体の混合物を用いてもよい。 Examples of the temperature-responsive polymer include polymers composed of (meth) acrylamide compounds, N- (or N, N-di) alkyl-substituted (meth) acrylamide derivatives, vinyl ether derivatives and the like as constituent monomers, It may be a copolymer of two or more types of monomers. In addition, those obtained by copolymerization with monomers other than these monomers, graft polymerization or copolymerization of polymers may be used, or a mixture of a homopolymer and a copolymer of these monomers may be used.
具体的な温度応答性ポリマーを構成するモノマーとしては、例えば、Ｎ−イソプロピル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−ｎ−プロピル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−シクロプロピル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−エトキシエチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−テトラヒドロフルフリル（メタ）アクリルアミド、Ｎ，Ｎ−エチルメチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ，Ｎ−ジエチル（メタ）アクリルアミド等が挙げられる。温度応答性ポリマーは、これらのモノマーの単独重合体であってもよく、２種以上の共重合体であってもよい。また、これらのモノマーとさらに共重合してもよいモノマーとしては、ジメチルアミノプロピル（メタ）アクリルアミド、（メタ）アクリルアミド、Ｎ、Ｎ−ジエチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ、Ｎ−ジメチル（メタ）アクリルアミド、エチレンオキシド、（メタ）アクリル酸及びその塩、ヒドロキシエチル（メタ）アクリレート、ポリヒドロキシエチル（メタ）アクリレート、ビニルアルコール、ビニルピロリドン、セルロース、カルボキシメチルセルロース等が挙げられる。これらのうち、温度応答性ポリマーとしては、特に、Ｎ−イソプロピル（メタ）アクリルアミド（ＮＩＰＡＡｍ）の重合体、又は、Ｎ−イソプロピル（メタ）アクリルアミド（ＮＩＰＡＡｍ）と他の重合性モノマーの共重合体であることが好ましい。 Specific monomers constituting the temperature-responsive polymer include, for example, N-isopropyl (meth) acrylamide, Nn-propyl (meth) acrylamide, N-cyclopropyl (meth) acrylamide, and N-ethoxyethyl (meth). Examples include acrylamide, N-tetrahydrofurfuryl (meth) acrylamide, N, N-ethylmethyl (meth) acrylamide, N, N-diethyl (meth) acrylamide and the like. The temperature-responsive polymer may be a homopolymer of these monomers or two or more types of copolymers. Examples of monomers that may be further copolymerized with these monomers include dimethylaminopropyl (meth) acrylamide, (meth) acrylamide, N, N-diethyl (meth) acrylamide, N, N-dimethyl (meth) acrylamide, Examples include ethylene oxide, (meth) acrylic acid and salts thereof, hydroxyethyl (meth) acrylate, polyhydroxyethyl (meth) acrylate, vinyl alcohol, vinyl pyrrolidone, cellulose, carboxymethyl cellulose and the like. Among these, as the temperature-responsive polymer, in particular, a polymer of N-isopropyl (meth) acrylamide (NIPAAm) or a copolymer of N-isopropyl (meth) acrylamide (NIPAAm) and other polymerizable monomers. Preferably there is.
疎水性ポリマーを構成するモノマーとしては、例えば、以下の式（１０）で示されるブチルメタクリレート、式（１１）で表されるオクタデシルメタクリレート等が挙げられる。 Examples of the monomer constituting the hydrophobic polymer include butyl methacrylate represented by the following formula (10), octadecyl methacrylate represented by the formula (11), and the like.
カチオン性ポリマーを構成するモノマーとしては、例えば、以下の式（１２）で示されるＮ，Ｎ−ジメチルアミノプロピルアクリルアミド等が挙げられる。 Examples of the monomer constituting the cationic polymer include N, N-dimethylaminopropylacrylamide represented by the following formula (12).
親水性ポリマーを構成するモノマーとしては、例えば、以下の式（１３）で示される２−（メタクリロイルオキシ）エチル２−（トリメチルアンモニオ）エチルリン酸等が挙げられる。 Examples of the monomer constituting the hydrophilic polymer include 2- (methacryloyloxy) ethyl 2- (trimethylammonio) ethyl phosphate represented by the following formula (13).
アニオン性ポリマーを構成するモノマーとしては、例えば、以下の式（１４）で示されるメタクリル酸等が挙げられる。 Examples of the monomer constituting the anionic polymer include methacrylic acid represented by the following formula (14).
上記ポリマーは、安定して膜を形成するためには、架橋されていることが好ましい。架橋剤は、二重結合を２つ以上有する公知の架橋剤であれば特に限定されないが、Ｎ，Ｎ’−メチレンビスアクリルアミド、プロピレングリコールジ（メタ）アクリレート、ポリプロピレングリコールジ（メタ）アクリレート、エチレングリコールジ（メタ）アクリレート、ポリエチレングリコールジ（メタ）アクリレート、エチレンジ（メタ）アクリレート、ペンタエリトリトールジアクリレートモノステアレート、ジビニルベンゼン、Ｎ，Ｎ’−ジアリル−Ｌ−酒石酸ジアミド、Ｎ，Ｎ’−ジアリル−酒石酸ジアミド、ピペラジンジアクリルアミド等が挙げられる。架橋剤の添加量は、膜形成ポリマーを構成する重合性モノマーの量に応じて、適宜設定することができ、例えば、重合性モノマーと架橋剤との質量比が、１：０．００１〜１：１であることが好ましく、１：０．０１〜１：０．５であることがより好ましく、１：０．０４〜１：０．２であることがさらに好ましい。 The polymer is preferably cross-linked in order to stably form a film. The crosslinking agent is not particularly limited as long as it is a known crosslinking agent having two or more double bonds, but N, N′-methylenebisacrylamide, propylene glycol di (meth) acrylate, polypropylene glycol di (meth) acrylate, ethylene Glycol di (meth) acrylate, polyethylene glycol di (meth) acrylate, ethylene di (meth) acrylate, pentaerythritol diacrylate monostearate, divinylbenzene, N, N'-diallyl-L-tartaric acid diamide, N, N'-diallyl -Tartaric acid diamide, piperazine diacrylamide and the like. The addition amount of the crosslinking agent can be appropriately set according to the amount of the polymerizable monomer constituting the film-forming polymer. For example, the mass ratio of the polymerizable monomer to the crosslinking agent is 1: 0.001-1. Is preferably 1: 1, more preferably 1: 0.01 to 1: 0.5, and still more preferably 1: 0.04 to 1: 0.2.
本発明の分離用担体が膜形成ポリマーを含有する場合、膜形成ポリマーの含有量が過大であると、膜が厚くなりすぎて、均一な膜が得られにくくなり、分離能が低下する恐れがある。他方、膜形成ポリマーの含有量が少なすぎると、膜で炭酸カルシウム粒子の表面全体を覆いにくくなり、炭酸カルシウム粒子中のバテライトが安定せず、分離能が低下する恐れがある。このことから、炭酸カルシウム粒子と膜形成ポリマーとの質量比は、１：０．０００１〜１：１であることが好ましく、１：０００５〜１：０．５であることがより好ましく、１：０．０１０〜１：０．３０であることがさらに好ましく、０．０１５〜１：０．０４０であることが特に好ましい。 When the separation carrier of the present invention contains a film-forming polymer, if the content of the film-forming polymer is excessive, the film becomes too thick and it becomes difficult to obtain a uniform film, which may reduce the separation ability. is there. On the other hand, if the content of the film-forming polymer is too small, it becomes difficult to cover the entire surface of the calcium carbonate particles with the film, the vaterite in the calcium carbonate particles is not stable, and the separation ability may be lowered. From this, the mass ratio between the calcium carbonate particles and the film-forming polymer is preferably 1: 0.0001 to 1: 1, more preferably 1: 0005 to 1: 0.5, and 1: It is more preferably 0.010 to 1: 0.30, and particularly preferably 0.015 to 1: 0.040.
本発明の分離用担体が、炭酸カルシウム粒子と上記膜形成ポリマーとから構成される場合、その平均粒径は、目的に応じて適宜決定されてもよい。例えば、本発明の分離用担体を、精製等の分取を目的として使用する場合は、炭酸カルシウムの分離用担体の平均粒径は１５μｍ以上８５μｍ以下であることが好ましく、２０μｍ以上８２μｍ以下であることがより好ましく、３０μｍ以上８０μｍ以下であることがより一層好ましく、３８μｍ以上７５μｍ以下であることさらに好ましい。また、本発明の分離用担体を分析に用いる場合は、本発明の分離用担体の平均粒径は０．２０μｍ以上２５μｍ以下であることが好ましく、０．３５μｍ以上２０μｍ以下であることがより好ましく、０．５０μｍ以上１５μｍ以下であることがより一層好ましく、１．０μｍ以上１０μｍ以下であることがさらに好ましく、２．５μｍ以上７μｍ以下であることが特に好ましい。なお、膜形成ポリマーを含有する態様の本発明の分離用担体の平均粒径は、炭酸カルシウム粒子の測定と同様の方法で測定される。 When the separation carrier of the present invention is composed of calcium carbonate particles and the film-forming polymer, the average particle size may be appropriately determined according to the purpose. For example, when the separation carrier of the present invention is used for fractionation such as purification, the average particle size of the calcium carbonate separation carrier is preferably 15 μm or more and 85 μm or less, and 20 μm or more and 82 μm or less. More preferably, the thickness is 30 μm or more and 80 μm or less, and further preferably 38 μm or more and 75 μm or less. When the separation carrier of the present invention is used for analysis, the average particle size of the separation carrier of the present invention is preferably 0.20 μm to 25 μm, more preferably 0.35 μm to 20 μm. The thickness is more preferably 0.50 μm or more and 15 μm or less, further preferably 1.0 μm or more and 10 μm or less, and particularly preferably 2.5 μm or more and 7 μm or less. In addition, the average particle diameter of the separation carrier of the present invention containing the film-forming polymer is measured by the same method as that for measuring calcium carbonate particles.
本発明の炭酸カルシウムの表面において、上記の膜形成ポリマーからなる膜の平均膜厚は、１０．０ｎｍ以上５００ｎｍ以下であることが好ましく、２０．０ｎｍ以上４００ｎｍ以下であることがより好ましく、３０．０ｎｍ以上３００ｎｍ以下であることがさらに好ましく、５０．０ｎｍ以上２５０ｎｍ以下であることが特に好ましい。また、炭酸カルシウムの表面の略全面（好ましくは、表面の９０％以上の面積、より好ましくは表面の９９％以上の面積）が覆われていることが好ましい。 On the surface of the calcium carbonate of the present invention, the average film thickness of the film made of the film-forming polymer is preferably 10.0 nm or more and 500 nm or less, more preferably 20.0 nm or more and 400 nm or less, and 30. It is more preferably 0 nm or more and 300 nm or less, and particularly preferably 50.0 nm or more and 250 nm or less. Moreover, it is preferable that substantially the entire surface of calcium carbonate (preferably an area of 90% or more of the surface, more preferably an area of 99% or more of the surface) is covered.
本発明における膜形成ポリマーの分子量は、膜形成ポリマーによる所望の性質を得られるように、適宜設定してもよい。 The molecular weight of the film-forming polymer in the present invention may be appropriately set so as to obtain a desired property by the film-forming polymer.
本発明の炭酸カルシウム粒子の表面に膜形成ポリマーが形成された分離用担体の製造方法の詳細は後述する。 Details of the method for producing a separation carrier having a film-forming polymer formed on the surface of the calcium carbonate particles of the present invention will be described later.
（用途）
本発明の分離用担体の用途としては、分離対象物質と接触させて用いられる、従来の、検出、測定、分取等を目的とした用途であれば、特に限定されないが、液体クロマトグラフィー用又は固相抽出用であることが好ましく、液体クロマトグラフィー用であることが特に好ましい。また、上述のとおり、本発明の分離用担体は、炭酸カルシウムを用いることから、塩基性条件下における分離に適している。このことから、塩基性条件下における分離に用いられることが好ましい。
(Use)
The use of the separation carrier of the present invention is not particularly limited as long as it is a conventional use for the purpose of detection, measurement, fractionation, etc. used in contact with the substance to be separated, but for liquid chromatography or It is preferably for solid phase extraction, particularly preferably for liquid chromatography. Further, as described above, the separation carrier of the present invention uses calcium carbonate and is therefore suitable for separation under basic conditions. Therefore, it is preferably used for separation under basic conditions.
また、本発明の分離用担体が分取を目的として用いられる場合において、分離対象物質を最終的に回収する方法は、目的や膜形成ポリマーの種類等に応じて、適宜選択できる。例えば、分離対象物質と本発明の分離用担体とを混合した後に、遠心分離を行い、沈殿した分離用担体を回収することで分取が可能である。あるいは、低温で親水性となり、かつ、高温で疎水性となる温度応答性ポリマーを膜形成ポリマーとして用いる場合は、疎水性の有機溶媒（トルエン、ニトロベンゼン等）と、分離対象物質を吸着した分離用担体を含む水と、を低温で混合した後、加温することで、分離用担体を疎水性の有機溶媒の層に移動させることができ、この有機溶媒に含まれる分離用担体を回収することで分取が可能である。 Further, when the separation carrier of the present invention is used for the purpose of fractionation, the method for finally collecting the substance to be separated can be appropriately selected depending on the purpose, the type of the film-forming polymer, and the like. For example, separation can be performed by mixing the substance to be separated and the separation carrier of the present invention, followed by centrifugation and collecting the precipitated separation carrier. Alternatively, when a temperature-responsive polymer that becomes hydrophilic at low temperatures and hydrophobic at high temperatures is used as a film-forming polymer, it is used for separation by adsorbing a hydrophobic organic solvent (toluene, nitrobenzene, etc.) and the substance to be separated. By mixing the water containing the carrier at a low temperature and then heating, the separation carrier can be transferred to the hydrophobic organic solvent layer, and the separation carrier contained in the organic solvent can be recovered. Sorting is possible.
＜カラム＞
本発明は、上述の分離用担体を備える、液体クロマトグラフィー用又は固相抽出用カラムを包含する。上述のとおり、液体クロマトグラフィー、固相抽出に適しているため、上述の分離用担体をカラムに充填することで、液体クロマトグラフィー用カラム、固相抽出用カラムとして使用できる。
<Column>
The present invention includes a column for liquid chromatography or solid phase extraction comprising the above-described separation carrier. Since it is suitable for liquid chromatography and solid phase extraction as described above, it can be used as a column for liquid chromatography and a column for solid phase extraction by filling the column with the above-described separation carrier.
カラムの種類は、従来の液体クロマトグラフィーや、固相抽出に用いられるものであれば、特に限定されない。 The type of column is not particularly limited as long as it is used for conventional liquid chromatography or solid phase extraction.
＜装置＞
本発明は、さらに、上記のカラムを備える、液体クロマトグラフィー用又は固相抽出用装置を包含する。
<Device>
The present invention further includes an apparatus for liquid chromatography or solid phase extraction comprising the above-described column.
液体クロマトグラフィー用装置、固相抽出用装置の種類は、従来の液体クロマトグラフィー用装置、固相抽出用装置に用いられるものであれば、特に限定されない。 The type of the liquid chromatography device and the solid phase extraction device is not particularly limited as long as it is used for the conventional liquid chromatography device and the solid phase extraction device.
＜分離用担体の製造方法＞
本発明の上述の分離用担体のうち、平均粒径が０．１５μｍ以上９５μｍ以下である炭酸カルシウム粒子と、該炭酸カルシウム粒子の表面に形成されたポリマー（上述の膜形成ポリマーからなる膜）とを含有する分離用担体は、例えば、重合性モノマーと、平均粒径が０．１５μｍ以上９５μｍ以下である炭酸カルシウム粒子とを含有する第１の溶媒を調製する工程と、該第１の溶媒を揮発させ、炭酸カルシウム粒子と重合性モノマーとの混合物の塊を得る工程と、該混合物の塊を含有する第２の溶媒を調製する工程と、該第２の溶媒中の重合性モノマーを重合させる重合工程と、を有する方法で製造できる。以下に、かかる本発明の好ましい製造方法（以下、「本発明の製造方法」と略称する。）について、詳細に説明する。
<Method for producing carrier for separation>
Among the above-mentioned separation carriers of the present invention, calcium carbonate particles having an average particle size of 0.15 μm or more and 95 μm or less, and a polymer formed on the surface of the calcium carbonate particles (a membrane comprising the above-mentioned film-forming polymer) For example, a step of preparing a first solvent containing a polymerizable monomer and calcium carbonate particles having an average particle size of 0.15 μm or more and 95 μm or less; and Volatilizing to obtain a mass of a mixture of calcium carbonate particles and a polymerizable monomer, preparing a second solvent containing the mass of the mixture, and polymerizing the polymerizable monomer in the second solvent And a polymerization step. The preferred production method of the present invention (hereinafter abbreviated as “the production method of the present invention”) will be described in detail below.
本発明の製造方法における重合性モノマー、炭酸カルシウム粒子は、上述のものと同様のものを例示できる。 Examples of the polymerizable monomer and calcium carbonate particles in the production method of the present invention are the same as those described above.
第１の溶媒は、重合性モノマーに対する良溶媒であり、かつ、炭酸カルシウム粒子に対する貧溶媒である。このような溶媒であれば、特に限定されず、重合性モノマーの種類に応じて適宜変更することができる。例えば、重合性モノマーがＮ−イソプロピル（メタ）アクリルアミド（ＮＩＰＡＡｍ）、ジメチルアクリルアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノプロピルアクリルアミドである場合、第１の溶媒としては、クロロホルム、酢酸エチル、ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）、メタノール、エタノール等を用いることができる。あるいは、重合性モノマーがオクタデシルメタクリレート、ブチルメタクリレート、ヘキシルメタクリレートである場合、第１の溶媒としては、ヘキサン、ペンタン、ヘプタンを用いることができる。また、本発明において、「良溶媒」とは、２０℃における溶媒１ｍＬに対する対象物質（第１の溶媒においては重合性モノマー）の溶解量が０．０１ｇ以上である溶媒のことを意味する。また、「貧溶媒」とは、２０℃における溶媒１ｍＬに対する対象物質（第１の溶媒においては炭酸カルシウム粒子、第２の溶媒においては炭酸カルシウム粒子及び重合性モノマー）の溶解量が０．００１ｇ以下である溶媒のことを意味する。 The first solvent is a good solvent for the polymerizable monomer and a poor solvent for the calcium carbonate particles. If it is such a solvent, it will not specifically limit, According to the kind of polymerizable monomer, it can change suitably. For example, when the polymerizable monomer is N-isopropyl (meth) acrylamide (NIPAAm), dimethylacrylamide, N, N-dimethylaminopropylacrylamide, the first solvent is chloroform, ethyl acetate, THF (tetrahydrofuran), methanol. Ethanol or the like can be used. Alternatively, when the polymerizable monomer is octadecyl methacrylate, butyl methacrylate, or hexyl methacrylate, hexane, pentane, or heptane can be used as the first solvent. In the present invention, “good solvent” means a solvent in which the amount of the target substance (polymerizable monomer in the first solvent) dissolved in 1 mL of solvent at 20 ° C. is 0.01 g or more. Further, the “poor solvent” means that the dissolution amount of the target substance (calcium carbonate particles in the first solvent, calcium carbonate particles and polymerizable monomer in the second solvent) with respect to 1 mL of the solvent at 20 ° C. is 0.001 g or less. Means the solvent.
第２の溶媒は、炭酸カルシウム粒子及び重合性モノマーに対する貧溶媒である。このような溶媒であれば、特に限定されず、重合性モノマーの種類に応じて適宜変更することができる。例えば、重合性モノマーがＮ−イソプロピル（メタ）アクリルアミド（ＮＩＰＡＡｍ）、ジメチルアクリルアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノプロピルアクリルアミドである場合、第２の溶媒としてはヘキサン、ペンタン、ヘプタンを用いることができる。あるいは、重合性モノマーがオクタデシルメタクリレート、ブチルメタクリレート、ヘキシルメタクリレートである場合、第２の溶媒としては、メタノール、エタノール、水を用いることができる。 The second solvent is a poor solvent for the calcium carbonate particles and the polymerizable monomer. If it is such a solvent, it will not specifically limit, According to the kind of polymerizable monomer, it can change suitably. For example, when the polymerizable monomer is N-isopropyl (meth) acrylamide (NIPAAm), dimethylacrylamide, or N, N-dimethylaminopropylacrylamide, hexane, pentane, or heptane can be used as the second solvent. Alternatively, when the polymerizable monomer is octadecyl methacrylate, butyl methacrylate, or hexyl methacrylate, methanol, ethanol, or water can be used as the second solvent.
本発明において、重合性モノマーと平均粒径が０．１５μｍ以上９５μｍ以下である炭酸カルシウム粒子とを含有する第１の溶媒を調製する工程は、第１の溶媒に、重合性モノマーと平均粒径が０．１５μｍ以上９５μｍ以下である炭酸カルシウム粒子とを含有させることにより行う。このように、第１の溶媒に、重合性モノマーと炭酸カルシウム粒子とが含有させることで、重合性モノマーは第１の溶媒に溶解するが、炭酸カルシウムは、溶解しない。このような状態にすることで、炭酸カルシウム粒子の隙間に、重合性モノマーが入り込みやすくなり、均一な膜を得やすい。第１の溶媒に、重合性モノマーと炭酸カルシウム粒子とを含有させる手段であれば、どのような手段であってもよいが、まず、重合性モノマーを第１の溶媒に含有させて溶解させた後に、炭酸カルシウムを第１の溶媒に含有させることが好ましい。これにより、重合性モノマーが溶解した状態の第１の溶媒が、炭酸カルシウム粒子の隙間に浸透させやすくなり、均一な重合工程後に均一な膜を炭酸カルシウム粒子の表面に形成しやすくなる。 In the present invention, the step of preparing a first solvent containing a polymerizable monomer and calcium carbonate particles having an average particle size of 0.15 μm or more and 95 μm or less includes the polymerizable monomer and the average particle size in the first solvent. Is carried out by containing calcium carbonate particles having a particle size of 0.15 μm or more and 95 μm or less. As described above, when the polymerizable monomer and the calcium carbonate particles are contained in the first solvent, the polymerizable monomer is dissolved in the first solvent, but the calcium carbonate is not dissolved. By setting it as such a state, it becomes easy for a polymerizable monomer to enter a gap between calcium carbonate particles, and a uniform film is easily obtained. Any means may be used as long as it contains the polymerizable monomer and the calcium carbonate particles in the first solvent. First, the polymerizable monomer was dissolved in the first solvent. Later, it is preferable to contain calcium carbonate in the first solvent. Thus, the first solvent in which the polymerizable monomer is dissolved is likely to penetrate into the gaps between the calcium carbonate particles, and a uniform film is easily formed on the surface of the calcium carbonate particles after the uniform polymerization step.
本発明の製造方法において、使用する重合性モノマーの量が過大であると、重合工程後の膜が厚くなりすぎて、均一な膜が得られにくなり、製造される分離用担体の分離能が低下する恐れがある。他方、重合性モノマーの量が少なすぎると、膜で炭酸カルシウム粒子の表面全体を覆いにくくなり、分離能が低下する恐れがある。このことから、第１の溶媒に含有させる炭酸カルシウム粒子と重合性モノマーとの質量比は、１：０．０００１〜１：１であることが好ましく、１：０００５〜１：０．５であることがより好ましく、１：０．０１０〜１：０．３０であることがさらに好ましく、０．０１５〜１：０．０４０であることが特に好ましい。 In the production method of the present invention, if the amount of the polymerizable monomer to be used is excessive, the membrane after the polymerization process becomes too thick, making it difficult to obtain a uniform membrane, and the separation ability of the produced separation carrier. May decrease. On the other hand, if the amount of the polymerizable monomer is too small, it becomes difficult to cover the entire surface of the calcium carbonate particles with a membrane, and the separation ability may be lowered. From this, the mass ratio of the calcium carbonate particles to be contained in the first solvent and the polymerizable monomer is preferably 1: 0.0001 to 1: 1, and 1: 0005 to 1: 0.5. More preferably, it is more preferably 1: 0.010 to 1: 0.30, and particularly preferably 0.015 to 1: 0.040.
また、第１の溶媒には、必要に応じて添加剤（架橋剤）を加えてもよい。また、重合性モノマーを第１の溶媒に溶解させ、炭酸カルシウム粒子をこの第１の溶媒とは異なる別の液体に分散させておき、該液体と第１の溶媒とを混合してもよい。また、第１の溶媒中に、炭酸カルシウム粒子と重合性モノマーとを含有させた後、後述の揮発を行う前に、撹拌を行ってもよい。 Moreover, you may add an additive (crosslinking agent) to a 1st solvent as needed. Alternatively, the polymerizable monomer may be dissolved in the first solvent, and the calcium carbonate particles may be dispersed in another liquid different from the first solvent, and the liquid and the first solvent may be mixed. In addition, after the calcium carbonate particles and the polymerizable monomer are contained in the first solvent, stirring may be performed before volatilization described later.
本発明の製造方法は、第１の溶媒中に、炭酸カルシウム粒子と重合性モノマーとを含有させた後、第１の溶媒を揮発させ、炭酸カルシウム粒子と重合性モノマーとの混合物の塊を得る工程を有する。 In the production method of the present invention, the calcium carbonate particles and the polymerizable monomer are contained in the first solvent, and then the first solvent is volatilized to obtain a lump of a mixture of the calcium carbonate particles and the polymerizable monomer. Process.
揮発は、従来の公知のいずれの方法に行ってよく、第１の溶媒の揮発性に応じて適宜選択することができる。 Volatilization may be carried out by any conventionally known method, and can be appropriately selected according to the volatility of the first solvent.
本発明の製造方法は、上記混合物の塊を得た後、混合物の塊を含有する第２の溶媒を調製する工程を有する。この混合物の塊は炭酸カルシウム粒子と重合性モノマーからなるものである。第２の溶媒中に含有させた状態であれば、炭酸カルシウム粒子も重合性モノマーも溶解しないため、後述の重合を行った際に、そのまま炭酸カルシウム粒子の表面で重合性モノマーが重合するため、その表面に膜を形成可能となる。 The production method of the present invention includes a step of preparing a second solvent containing the mixture lump after obtaining the mixture lump. The lump of this mixture consists of calcium carbonate particles and a polymerizable monomer. If it is in a state of being contained in the second solvent, neither the calcium carbonate particles nor the polymerizable monomer is dissolved. Therefore, when the polymerization described later is performed, the polymerizable monomer is polymerized directly on the surface of the calcium carbonate particles. A film can be formed on the surface.
本発明の製造方法は、第２の溶媒中に上記混合物の塊を含有させた後、第２の溶媒中の重合性モノマーを重合させる重合工程を有する。上述のとおり、かかる工程で炭酸カルシウム粒子の表面に重合性モノマーの重合体からなるポリマーにより膜を形成できる。重合性モノマーの重合は、重合性モノマーの種類に応じて、公知の重合方法で行うことができるが、加熱により重合を加えると、均一な膜を形成しにくくなることから、光重合であることが好ましい。この場合、光重合開始剤を、第２の溶媒に含有させて、光重合を行うことが好ましい。あるいは、第１の溶媒に光重合開始剤を予め含有させておき、その後、上述の混合物の塊を得ることで、光重合開始剤と重合性モノマーを共存させて、光重合を行ってもよい。 The production method of the present invention includes a polymerization step of polymerizing the polymerizable monomer in the second solvent after containing the lump of the mixture in the second solvent. As described above, in this process, a film can be formed on the surface of the calcium carbonate particles with a polymer composed of a polymer of a polymerizable monomer. Polymerization of the polymerizable monomer can be carried out by a known polymerization method depending on the type of the polymerizable monomer, but it is difficult to form a uniform film by heating, so that it is photopolymerization. Is preferred. In this case, it is preferable to carry out photopolymerization by adding a photopolymerization initiator to the second solvent. Alternatively, the photopolymerization initiator may be preliminarily contained in the first solvent, and then the photopolymerization may be performed in the coexistence of the photopolymerization initiator and the polymerizable monomer by obtaining the above-mentioned mixture lump. .
上記の第２の溶媒に、混合物の塊を含有させている間や、重合を行っているときに、超音波処理、及び／又は撹拌を行うことが好ましい。これにより、より均一な膜を形成しやすくなる。 It is preferable to perform ultrasonic treatment and / or agitation while the second solvent contains a lump of the mixture or during polymerization. This makes it easier to form a more uniform film.
重合後、得られた分離用単体は、平均粒径が０．１５μｍ以上９５μｍ以下である炭酸カルシウム粒子と、該炭酸カルシウム粒子の表面に形成されたポリマー（上述の膜形成ポリマーからなる膜）とを含有する分離用担体である。 After polymerization, the obtained single unit for separation comprises calcium carbonate particles having an average particle size of 0.15 μm or more and 95 μm or less, and a polymer formed on the surface of the calcium carbonate particles (a membrane comprising the above-mentioned film-forming polymer). A carrier for separation containing
重合後の分離用単体は、遠心分離、乾燥を行うことで回収できる。 The single substance for separation after polymerization can be recovered by centrifugation and drying.
なお、上記で述べた方法は、好ましい製造方法であって、他の方法（融液法）によっても、本発明の分離用単体は製造可能である。 Note that the method described above is a preferable production method, and the separation simple substance of the present invention can be produced by other methods (melt method).
＜炭酸カルシウム粒子の作製＞
（実施例１）
１６ｍＭのＮａ２ＣＯ３水溶液０．５ｄｍ３に終濃度１．０ｇ／ｄｍ３となるようにＰＳＳ（ポリスチレンスルホン酸）を溶解させ５００ｒｐｍで１分間撹拌しながら（撹拌子サイズ：２００ｍｍ ｘ ７ｍｍ）１ＭのＣａＣｌ２水溶液１６ｍＬを混合し、混合後に２５℃で２４時間静置した。その後、６０℃で３時間乾燥することで平均粒径５．０μｍのバテライト型炭酸カルシウム／ＰＳＳの複合粒子を得た。ＰＳＳの除去得られた粒子を５％ＮａＣｌＯ水溶液（５０ｍＬ）に浸漬し、１分間超音波処理を行った後、２５℃で４８時間静置し、その後４００℃で２時間焼成することで、ＰＳＳを除去し、平均粒径５．０μｍのバテライト型炭酸カルシウムを作製し、このバテライト型炭酸カルシウムを実施例１に係る分離用担体とした。
<Preparation of calcium carbonate particles>
Example 1
PSS (polystyrene sulfonic acid) was dissolved in 0.5 mM 3 of 16 mM Na 2 CO 3 aqueous solution to a final concentration of 1.0 g / dm 3 and stirred at 500 rpm for 1 minute (stirring bar size: 200 mm × 7 mm) 1M 16 mL of an aqueous CaCl 2 solution was mixed and allowed to stand at 25 ° C. for 24 hours after mixing. Then, the composite particle of vaterite type calcium carbonate / PSS with an average particle diameter of 5.0 micrometers was obtained by drying at 60 degreeC for 3 hours. Removal of PSS The obtained particles were immersed in 5% NaClO aqueous solution (50 mL), subjected to ultrasonic treatment for 1 minute, allowed to stand at 25 ° C. for 48 hours, and then calcined at 400 ° C. for 2 hours. Was removed to prepare vaterite-type calcium carbonate having an average particle diameter of 5.0 μm, and this vaterite-type calcium carbonate was used as the separation carrier according to Example 1.
（実施例２）
炭酸カルシウム粒子の平均粒径が２．５μｍとなるように制御した点以外は、実施例１と同様の手順で実施例２に係る分離用担体を作製した。
(Example 2)
A separation carrier according to Example 2 was produced in the same procedure as in Example 1 except that the average particle size of the calcium carbonate particles was controlled to be 2.5 μm.
＜炭酸カルシウムの表面におけるポリマーからなる膜の形成＞
（実施例３：融液法による膜の形成）
ポリマーを形成する重合性モノマーとして、Ｎ−イソプロピルアクリルアミド（ＮＩＰＡＡｍ）（０．５０ｇ）を、架橋剤としてＮ，Ｎ’−メチレンビスアクリルアミド（ＢＩＳ）（０．０４４ｇ）を２０ｃｍ３のスクリュー管に入れホットスターラーで６０℃に加熱した。ＮＩＰＡＡｍ、ＢＩＳが完全に溶解した後に、ナノスペースの拡張をした、実施例１の分離用担体である平均粒径２．５μｍの炭酸カルシウムを１．０ｇ加え、６時間撹拌した。その後放冷し、光重合開始剤である２，２’−ジメトキシ−２−フェニルアセトフェノン（ＢＤＫ）（０．０１ｇ）が溶解したヘキサン１５ｃｍ３を加え、撹拌しながらキセノンランプを３時間照射し、光重合を行った。重合後、４０００ｒｐｍで遠心分離を３回行い洗浄し、凍結乾燥により回収し、炭酸カルシウムの表面にＮＩＰＡＡｍのポリマー（以下、「ＰＮＩＰＡＡｍ」と略称する。）からなる膜が形成された、実施例３に係る分離用担体を作製した。
<Formation of polymer film on the surface of calcium carbonate>
(Example 3: Film formation by melt method)
N-isopropylacrylamide (NIPAAm) (0.50 g) as a polymerizable monomer for forming a polymer and N, N′-methylenebisacrylamide (BIS) (0.044 g) as a crosslinking agent are placed in a 20 cm 3 screw tube. Heated to 60 ° C. with a hot stirrer. After NIPAAm and BIS were completely dissolved, 1.0 g of calcium carbonate having an average particle size of 2.5 μm, which was a separation carrier of Example 1 and expanded nanospace, was added and stirred for 6 hours. Thereafter, the mixture was allowed to cool, 15 cm 3 of hexane in which 2,2′-dimethoxy-2-phenylacetophenone (BDK) (0.01 g), which is a photopolymerization initiator, was dissolved, and irradiated with a xenon lamp for 3 hours while stirring. Photopolymerization was performed. Example 3 After the polymerization, centrifugation was performed at 4000 rpm three times, washing was performed, freeze-drying was performed, and a film made of NIPAAm polymer (hereinafter abbreviated as “PNIPAAm”) was formed on the surface of calcium carbonate. A separation carrier according to the above was prepared.
（実施例４：溶媒揮発法による膜の形成）
ＮＩＰＡＡｍ０．０５ｇ、ＢＩＳ０．０４４１ｇをクロロホルムに溶かした溶液に、実施例１のバテライト型の炭酸カルシウムの粒子を浸漬させた。クロロホルムが全て揮発した後、０．０１ｇのＢＤＫが溶解したヘキサン１５ｃｍ３を加え、撹拌しながらキセノンランプを３時間照射し、光重合を行った。重合後、４０００ｒｐｍで３回遠心分離を行い洗浄し、凍結乾燥により回収し、実施例４に係る分離用担体を作製した。
(Example 4: Film formation by solvent volatilization method)
The particles of the vaterite-type calcium carbonate of Example 1 were immersed in a solution obtained by dissolving 0.05 g of NIPAAm and 0.0441 g of BIS in chloroform. After all the chloroform was volatilized, 15 cm 3 of hexane in which 0.01 g of BDK was dissolved was added, and a xenon lamp was irradiated for 3 hours while stirring to carry out photopolymerization. After the polymerization, the resultant was centrifuged at 4000 rpm for 3 times, washed, and recovered by lyophilization to produce a separation carrier according to Example 4.
（実施例５：溶媒揮発法による膜の形成）
ＮＩＰＡＡｍの量を、０．０２５ｇに変更した点以外は、実施例４と同様の手順で、実施例５に係る分離用担体を作製した。
(Example 5: Formation of film by solvent volatilization method)
A separation carrier according to Example 5 was produced in the same procedure as in Example 4 except that the amount of NIPAAm was changed to 0.025 g.
＜比表面積、積算細孔容積、平均細孔直径の測定＞
実施例１の平均粒径５μｍの炭酸カルシウム粒子、実施例２の平均粒径２．５μｍの炭酸カルシウム粒子、実施例３の炭酸カルシウム／ＰＮＩＰＡＡｍ粒子について、比表面積、細孔容積、平均細孔直径の測定を測定した。また、参考例１として、シリカ粒子を、参考例２として、ＳｉＯ２／ＰＮＩＰＡＡｍ粒子（ＳｉＯ２粒子の表面にＰＮＩＰＡＡｍの膜が形成）を準備し、これらについても、比表面積、細孔容積、平均細孔直径の測定を測定した。
<Measurement of specific surface area, integrated pore volume, average pore diameter>
Specific surface area, pore volume, average pore diameter for calcium carbonate particles having an average particle diameter of 5 μm in Example 1, calcium carbonate particles having an average particle diameter of 2.5 μm in Example 2, and calcium carbonate / PNIPAAm particles in Example 3. Measured. Further, as Reference Example 1, silica particles were prepared, and as Reference Example 2, SiO 2 / PNIPAAm particles (a PNIPAAm film was formed on the surface of the SiO 2 particles) were prepared. Measurement of pore diameter was measured.
比表面積は、ＢＥＴ法により測定し、積算細孔容積は、平均細孔直径（ポアサイズ）ＢＪＨ法により測定した。その結果を以下の表１に示す。 The specific surface area was measured by the BET method, and the cumulative pore volume was measured by the average pore diameter (pore size) BJH method. The results are shown in Table 1 below.
表１に示す結果から、実施例１〜３の分離用担体は、カラムとしての分離能を発揮できるための十分な多孔性を有することがわかった。 From the results shown in Table 1, it was found that the separation carriers of Examples 1 to 3 have sufficient porosity to exhibit the separation ability as a column.
＜カラムの作製＞
（実施例６）
ＰＳＳ除去後の実施例１のバテライト型炭酸カルシウムを、カーボンテトラクロライド／テトラブロモエタン（１：１）（１３ｍＬ）に懸濁させ、ＨＰＬＣポンプ（日立ハイテクノロジーズ社製：Ｌ−６２００ Ｉｎｔｅｌｌｉｇｅｎｔ Ｐｕｍｐ）を用いてクロロホルム（グラジエント条件：６０ｍｉｎ）、メタノール（グラジエント条件：２０ｍｉｎ）、５０％メタノール．ａｑ（グラジエント条件：２０ｍｉｎ）、メタノール（グラジエント条件：５ｍｉｎ）を移動相としてカラム（φ２．１ｍｍ×１００ｍｍ）に充填（２５ＭＰａ、１０５ｍｉｎ）させることで、実施例１の分離用担体が充填された実施例６に係る順相カラムを作製した。
<Production of column>
(Example 6)
The vaterite-type calcium carbonate of Example 1 after removing PSS was suspended in carbon tetrachloride / tetrabromoethane (1: 1) (13 mL), and an HPLC pump (manufactured by Hitachi High-Technologies Corporation: L-6200 Intelligent Pump) was used. Chloroform (gradient conditions: 60 min), methanol (gradient conditions: 20 min), 50% methanol. Implementation in which the separation carrier of Example 1 was packed by filling a column (φ2.1 mm × 100 mm) with aq (gradient condition: 20 min) and methanol (gradient condition: 5 min) as a mobile phase (φ2.1 mm × 100 mm). A normal phase column according to Example 6 was prepared.
（実施例７）
ＰＮＩＰＡＡｍによる膜形成後の実施例３のバテライト型炭酸カルシウムをメタノール／水（１：１）（１０ｍＬ）に懸濁させ、ＨＰＬＣポンプ（日立ハイテクノロジーズ社製：Ｌ−６２００ Ｉｎｔｅｌｌｉｇｅｎｔ Ｐｕｍｐ）を用いてメタノール／水（１：１）を移動相としてカラム（φ２．１ｍｍ×１００ｍｍ）に充填（２５ＭＰａ，９０ｍｉｎ）させることで、実施例３の分離用担体が充填された実施例７に係るカラムを作製した。
(Example 7)
The vaterite-type calcium carbonate of Example 3 after film formation with PNIPAAm was suspended in methanol / water (1: 1) (10 mL), and methanol was used with an HPLC pump (manufactured by Hitachi High-Technologies Corporation: L-6200 Intelligent Pump). The column according to Example 7 filled with the separation carrier of Example 3 was prepared by packing (25 MPa, 90 min) into the column (φ2.1 mm × 100 mm) using / water (1: 1) as a mobile phase. .
（実施例８）
実施例３のバテライト型炭酸カルシウムの代わりに実施例４のバテライト型炭酸カルシウムを用いた点以外は、実施例７と同様の手順により実施例８に係るカラムを作製した。
(Example 8)
A column according to Example 8 was prepared by the same procedure as Example 7 except that the vaterite type calcium carbonate of Example 4 was used instead of the vaterite type calcium carbonate of Example 3.
（実施例９）
実施例４のバテライト型炭酸カルシウムの代わりに実施例５のバテライト型炭酸カルシウムを用いた点以外は、実施例８と同様の手順により実施例９に係るカラムを作製した。
Example 9
A column according to Example 9 was produced in the same procedure as in Example 8, except that the vaterite-type calcium carbonate of Example 5 was used instead of the vaterite-type calcium carbonate of Example 4.
＜試験１＞
実施例６の順相カラムを用いて、液体クロマトグラフィーのカラムとして機能するかを試験するために、以下の測定試料・分析条件で、液体クロマトグラフィーによる測定試験を行った。
<Test 1>
In order to test whether the normal phase column of Example 6 functions as a column for liquid chromatography, a measurement test by liquid chromatography was performed under the following measurement sample and analysis conditions.
（測定試料）
テストステロンの０．１ｍｇ／ｍＬ酢酸エチル／ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）（９／１）溶液をフィルター（０．２μｍ）に通したものを測定試料とした。
(Measurement sample)
A test sample was prepared by passing a 0.1 mg / mL ethyl acetate / THF (tetrahydrofuran) (9/1) solution of testosterone through a filter (0.2 μm).
（分析条件）
移動相；ヘキサン、酢酸エチル
流速；０．５ｍＬ／ｍｉｎ
温度；２５℃
検出波長；２５４ｎｍ
カラム；炭酸カルシウム・カラム（実施例６のカラム）（φ２．１ ｍｍ×１００ ｍｍ）
(Analysis conditions)
Mobile phase: hexane, ethyl acetate flow rate: 0.5 mL / min
Temperature: 25 ° C
Detection wavelength: 254 nm
Column: Calcium carbonate column (column of Example 6) (φ2.1 mm × 100 mm)
移動相であるヘキサンと酢酸エチルの溶媒比については、５０：５０、６０：４０、７０：３０と変化させて分析を行った。その結果を、図１に示す。図１に示すように、移動相の極性が高くなること（酢酸エチルの量の割合が多いほど）で保持時間が短くなった。このことから、バテライト型炭酸カルシウム粒子を充填したカラムは、順相カラムとして機能することがわかった。また、シャープなピーク形状が得られたことから、実施例１の平均粒径５μmのバテライト型炭酸カルシウムからなる分離用担体は、液体クロマトグラフィー用のカラムに充填される分離用担体として十分に使用可能なことがわかった。 About the solvent ratio of hexane and ethyl acetate which are mobile phases, it analyzed by changing with 50:50, 60:40, and 70:30. The result is shown in FIG. As shown in FIG. 1, the retention time was shortened as the polarity of the mobile phase increased (the higher the proportion of ethyl acetate). From this, it was found that the column packed with the vaterite-type calcium carbonate particles functions as a normal phase column. In addition, since a sharp peak shape was obtained, the separation carrier composed of vaterite-type calcium carbonate having an average particle diameter of 5 μm in Example 1 was sufficiently used as a separation carrier packed in a column for liquid chromatography. I found it possible.
＜試験２＞
カラムの耐久性を試験するために、実施例６の順相カラムを用いて、作製後の初回の測定から、５か月後に２５回の測定試験を行い、保持時間の変化を評価した。測定試料・分析条件は、上記の試験１と同様のものを用いた。ただし、移動相のヘキサン、酢酸エチルは、ヘキサン：酢酸エチル＝６０：４０の比とした。その結果を、図２に示す。
<Test 2>
In order to test the durability of the column, the normal phase column of Example 6 was used, 25 measurement tests were performed after 5 months from the first measurement after fabrication, and the change in retention time was evaluated. The measurement sample and analysis conditions were the same as those in Test 1 above. However, hexane and ethyl acetate in the mobile phase were in a ratio of hexane: ethyl acetate = 60: 40. The result is shown in FIG.
図２に示すように、５か月後も使用可能であり繰り返し使用しても保持時間が変化しなかったことから、２５回の測定でほぼ一定の保持時間であることから、カラムの耐久性が十分であることがわかった。 As shown in FIG. 2, the column can be used after 5 months, and the retention time did not change even after repeated use. Was found to be sufficient.
＜ＳＥＭ画像観察＞
実施例３及び４に係る分離用担体（炭酸カルシウム／ＰＮＩＰＡＡｍ）について、ＳＥＭ（走査型電子顕微鏡）を用いて画像観察を行った。まず、それぞれの分離用担体を導電性テープでアルミニウムの試料台に貼り付け、オスミウム真空蒸着を１０秒行いコーティングをした。その後、ＳＥＭを用いて結晶形態の観察を行った。実施例３の分離用担体についてのＳＥＭ画像を図３に、実施例４の分離用担体についてのＳＥＭ画像を図４に示す。
<SEM image observation>
The separation carrier (calcium carbonate / PNIPAAm) according to Examples 3 and 4 was subjected to image observation using a SEM (scanning electron microscope). First, each carrier for separation was attached to an aluminum sample stage with a conductive tape, and coating was performed by osmium vacuum deposition for 10 seconds. Then, the crystal form was observed using SEM. An SEM image of the separation carrier of Example 3 is shown in FIG. 3, and an SEM image of the separation carrier of Example 4 is shown in FIG.
図３に示すように、融液法により作製した実施例３の分離用担体は、粒子周辺に余分な有機物が存在することがわかった。一方、所定の溶媒揮発法により作製した実施例４の分離用担体は、粒子周辺に余分な有機物が存在していなかった。この結果から、実施例４の所定の溶媒分離法により作製した分離用担体の方が、実施例３の融液法により作製された分離用担体より分散性が非常に良く、粒子表面に均一にＰＮＩＰＡＡｍの膜が形成されることがわかった。 As shown in FIG. 3, it was found that the separation carrier of Example 3 produced by the melt method has excess organic matter around the particles. On the other hand, in the separation carrier of Example 4 produced by a predetermined solvent volatilization method, no extra organic matter was present around the particles. From this result, the separation carrier produced by the predetermined solvent separation method of Example 4 is much more dispersible than the separation carrier produced by the melt method of Example 3 and is uniformly distributed on the particle surface. It was found that a PNIPAAm film was formed.
＜試験３＞
実施例８、実施例９のカラムを用いて、液体クロマトグラフィーによる測定試験を行った。それぞれ、以下の測定試料・分析条件で、条件を行った。
<Test 3>
Using the columns of Example 8 and Example 9, a measurement test by liquid chromatography was performed. Each condition was performed under the following measurement sample and analysis conditions.
（実施例８についての測定試料）
テストステロンの０．１ｍｇ／ｍＬ Ｈ２Ｏ／ＴＨＦ（９／１）溶液をフィルター（０．２μｍ）に通したものを測定試料とした。
(Measurement sample for Example 8)
A test sample was prepared by passing a 0.1 mg / mL H 2 O / THF (9/1) solution of testosterone through a filter (0.2 μm).
（実施例８についての分析条件）
移動相；水
流速；０．５ｍＬ／ｍｉｎ
温度；２５℃、３５℃、４０℃
検出波長；２５４ｎｍ
カラム；炭酸カルシウム／ＰＮＩＰＡＡｍ・カラム（実施例８のカラム）（φ２．１ｍｍ×１００ｍｍ）
(Analysis conditions for Example 8)
Mobile phase; water flow rate; 0.5 mL / min
Temperature: 25 ° C, 35 ° C, 40 ° C
Detection wavelength: 254 nm
Column: Calcium carbonate / PNIPAAm column (Example 8 column) (φ2.1 mm × 100 mm)
（実施例９についての測定試料）
実施例８と同様の測定試料を用いた。
(Measurement sample for Example 9)
A measurement sample similar to that in Example 8 was used.
（実施例９についての分析条件）
移動相；水／メタノール（９５：５）
流速；０．２ｍＬ／ｍｉｎ
温度；３０℃、４０℃
検出波長；２５４ｎｍ
カラム；炭酸カルシウム／ＰＮＩＰＡＡｍ・カラム（実施例９のカラム）（φ２．１ｍｍ×１００ｍｍ）
(Analysis conditions for Example 9)
Mobile phase: water / methanol (95: 5)
Flow rate: 0.2 mL / min
Temperature: 30 ° C, 40 ° C
Detection wavelength: 254 nm
Column: Calcium carbonate / PNIPAAm column (Example 9 column) (φ2.1 mm × 100 mm)
実施例８についての分析結果を、図５に示す。実施例９についての分析結果を、図６に示す。 The analysis results for Example 8 are shown in FIG. The analysis results for Example 9 are shown in FIG.
ＮＩＰＡＡｍのモノマー量が０．０２５ｇ（炭酸カルシウムの質量に対して０．００２５）の実施例９のクロマトグラムはピークは、ＮＩＰＡＡｍのモノマー量が０．０５ｇ（炭酸カルシウムの質量に対して０．０５）である実施例８のものよりもシャープなピーク形状が得られた。このことは、ＮＩＰＡＡｍの量を減らすことで、炭酸カルシウム粒子の表面に薄いＰＮＩＰＡＡｍの膜を形成でき、サンプルの膜の奥への潜り込みが抑えられたためだと考えられる。この結果から、ＰＮＩＰＡＡｍの膜が薄い方が、シャープなピーク形状を得られやすいことがわかった。 The chromatogram of Example 9 in which the amount of NIPAAm monomer is 0.025 g (0.0025 with respect to the mass of calcium carbonate) shows a peak, and the amount of NIPAAm monomer amount is 0.05 g (0.05 with respect to the mass of calcium carbonate). A sharper peak shape than that of Example 8 is obtained. This is considered to be because by reducing the amount of NIPAAm, a thin PNIPAAm film could be formed on the surface of the calcium carbonate particles, and the penetration of the sample into the back of the film was suppressed. From this result, it was found that a sharper peak shape is more easily obtained when the PNIPAAm film is thinner.
＜試験４＞
作製した炭酸カルシウム／ＰＮＩＰＡＡｍのカラム（実施例４）について、塩基性条件下での溶出挙動を確認するために、移動相をｐＨ８に設定し、塩基性化合物であるアミトリプチリンを測定試料として、以下の条件で分析を行った。
<Test 4>
For the prepared calcium carbonate / PNIPAAm column (Example 4), in order to confirm the elution behavior under basic conditions, the mobile phase was set to pH 8, and the basic compound amitriptyline was used as a measurement sample. Analysis was performed under conditions.
（測定試料）
アミトリプチリンの０．１ｍｇ／ｍＬＨ２Ｏ／ＴＨＦ（９／１）溶液をフィルター（０．２μｍ）に通したものを測定試料とした。
(Measurement sample)
A sample obtained by passing a 0.1 mg / mL H 2 O / THF (9/1) solution of amitriptyline through a filter (0.2 μm) was used as a measurement sample.
（分析条件）
移動相；１０ｍＭ酢酸緩衝液 ｐＨ８．０
流速；０．２ｍＬ／ｍｉｎ
温度；３０℃
検出波長；２５４ｎｍ
カラム；炭酸カルシウム／ＰＮＩＰＡＡｍ・カラム（実施例４のカラム）（φ２．１ｍｍ×１００ｍｍ）
(Analysis conditions)
Mobile phase: 10 mM acetate buffer pH 8.0
Flow rate: 0.2 mL / min
Temperature: 30 ° C
Detection wavelength: 254 nm
Column: Calcium carbonate / PNIPAAm column (Example 4 column) (φ2.1 mm × 100 mm)
分析結果を、図７に示す。 The analysis results are shown in FIG.
図７に示すように、塩基性条件下においてピークが確認されたことから、塩基性条件下における分析に使用できることが確認された。また、図には示さないが、温度を４０℃に変更した以外は上記と同じ条件で分析を行ったところ、ピークの保持時間が長くなったことが確認された。 As shown in FIG. 7, since the peak was confirmed under basic conditions, it was confirmed that it could be used for analysis under basic conditions. Although not shown in the figure, when the analysis was performed under the same conditions as described above except that the temperature was changed to 40 ° C., it was confirmed that the peak retention time was increased.
Claims (12)
重合性モノマーと平均粒径が０．１５μｍ以上９５μｍ以下である炭酸カルシウム粒子とを含有する第１の溶媒を調製する工程と、
前記第１の溶媒を揮発させ、前記炭酸カルシウム粒子と前記重合性モノマーとの混合物の塊を得る工程と、
前記混合物の塊を含有する第２の溶媒を調製する工程と、
前記第２の溶媒中の前記重合性モノマーを重合させる重合工程と、を有し、
前記第１の溶媒は、前記重合性モノマーに対する良溶媒であり、かつ、前記炭酸カルシウム粒子に対する貧溶媒であり、
前記第２の溶媒は、前記重合性モノマー及び前記炭酸カルシウム粒子に対する貧溶媒である、方法。 A method for producing a separation carrier comprising calcium carbonate particles having an average particle diameter of 0.15 μm or more and 95 μm or less, and a membrane made of a polymer formed on the surface of the calcium carbonate particles,
Preparing a first solvent containing a polymerizable monomer and calcium carbonate particles having an average particle size of 0.15 μm or more and 95 μm or less;
Volatilizing the first solvent to obtain a lump of a mixture of the calcium carbonate particles and the polymerizable monomer;
Preparing a second solvent containing a mass of the mixture;
A polymerization step of polymerizing the polymerizable monomer in the second solvent,
The first solvent is a good solvent for the polymerizable monomer and a poor solvent for the calcium carbonate particles,
The method, wherein the second solvent is a poor solvent for the polymerizable monomer and the calcium carbonate particles.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2016092657A JP6733900B2 (en) | 2016-05-02 | 2016-05-02 | Separation carrier, method for producing separation carrier, column, and device for liquid chromatography or solid phase extraction |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2016092657A JP6733900B2 (en) | 2016-05-02 | 2016-05-02 | Separation carrier, method for producing separation carrier, column, and device for liquid chromatography or solid phase extraction |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2017200678A true JP2017200678A (en) | 2017-11-09 |
| JP6733900B2 JP6733900B2 (en) | 2020-08-05 |
Family
ID=60264551
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2016092657A Expired - Fee Related JP6733900B2 (en) | 2016-05-02 | 2016-05-02 | Separation carrier, method for producing separation carrier, column, and device for liquid chromatography or solid phase extraction |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP6733900B2 (en) |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2019072210A (en) * | 2017-10-16 | 2019-05-16 | 株式会社三洋物産 | Game machine |
| JP2019072203A (en) * | 2017-10-16 | 2019-05-16 | 株式会社三洋物産 | Game machine |
| JP2019072205A (en) * | 2017-10-16 | 2019-05-16 | 株式会社三洋物産 | Game machine |
| JP2019072208A (en) * | 2017-10-16 | 2019-05-16 | 株式会社三洋物産 | Game machine |
| JP2019072209A (en) * | 2017-10-16 | 2019-05-16 | 株式会社三洋物産 | Game machine |
| JP2019072206A (en) * | 2017-10-16 | 2019-05-16 | 株式会社三洋物産 | Game machine |
| JP2019072207A (en) * | 2017-10-16 | 2019-05-16 | 株式会社三洋物産 | Game machine |
| JP2019072212A (en) * | 2017-10-16 | 2019-05-16 | 株式会社三洋物産 | Game machine |
| JP2019072204A (en) * | 2017-10-16 | 2019-05-16 | 株式会社三洋物産 | Game machine |
-
2016
- 2016-05-02 JP JP2016092657A patent/JP6733900B2/en not_active Expired - Fee Related
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2019072210A (en) * | 2017-10-16 | 2019-05-16 | 株式会社三洋物産 | Game machine |
| JP2019072203A (en) * | 2017-10-16 | 2019-05-16 | 株式会社三洋物産 | Game machine |
| JP2019072205A (en) * | 2017-10-16 | 2019-05-16 | 株式会社三洋物産 | Game machine |
| JP2019072208A (en) * | 2017-10-16 | 2019-05-16 | 株式会社三洋物産 | Game machine |
| JP2019072209A (en) * | 2017-10-16 | 2019-05-16 | 株式会社三洋物産 | Game machine |
| JP2019072206A (en) * | 2017-10-16 | 2019-05-16 | 株式会社三洋物産 | Game machine |
| JP2019072207A (en) * | 2017-10-16 | 2019-05-16 | 株式会社三洋物産 | Game machine |
| JP2019072212A (en) * | 2017-10-16 | 2019-05-16 | 株式会社三洋物産 | Game machine |
| JP2019072204A (en) * | 2017-10-16 | 2019-05-16 | 株式会社三洋物産 | Game machine |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP6733900B2 (en) | 2020-08-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP6733900B2 (en) | Separation carrier, method for producing separation carrier, column, and device for liquid chromatography or solid phase extraction | |
| Rutkowska et al. | Application of molecularly imprinted polymers in analytical chiral separations and analysis | |
| Suedee et al. | Development of a pH-responsive drug delivery system for enantioselective-controlled delivery of racemic drugs | |
| Cheong et al. | Recent applications of molecular imprinted polymers for enantio-selective recognition | |
| Amut et al. | In situ polymerization preparation of chiral molecular imprinting polymers monolithic column for amlodipine and its recognition properties study | |
| Abdouss et al. | Development and characterization of molecularly imprinted polymers for controlled release of citalopram | |
| JP5147052B2 (en) | Polymer porous body and method for producing the same | |
| Qiu et al. | Fabrication of a molecularly imprinted polymer immobilized membrane with nanopores and its application in determination of β2-agonists in pork samples | |
| JP2020509746A (en) | Microgel particles and related compositions, systems, and methods for use in 3D printing and 3D cell culture media | |
| Jiang et al. | Novel molecularly imprinted microsphere using a single chiral monomer and chirality-matching (S)-ketoprofen template | |
| Ban et al. | Carprofen-imprinted monolith prepared by reversible addition–fragmentation chain transfer polymerization in room temperature ionic liquids | |
| Luo et al. | Preparation of water‐compatible molecularly imprinted polymers for caffeine with a novel ionic liquid as a functional monomer | |
| Biffis et al. | Physical forms of MIPs | |
| Vlakh et al. | Molecular imprinting: A tool of modern chemistry for the preparation of highly selective monolithic sorbents | |
| JP5292571B2 (en) | Method for producing organic porous body, organic porous column and organic porous body | |
| Li et al. | Thermoresponsive oligo (ethylene glycol)-based polymer brushes on polymer monoliths for all-aqueous chromatography | |
| Beiler et al. | Poly (2-hydroxyethyl acrylate-co-ethyleneglycol dimethacrylate) monoliths synthesized by radiation polymerization in a mold | |
| JP2010529210A (en) | New polymeric materials containing cross-linked spherical particles, methods of making the materials, and uses thereof | |
| Tonglairoum et al. | Development and characterization of propranolol selective molecular imprinted polymer composite electrospun nanofiber membrane | |
| CN106565908A (en) | A method of preparing monodisperse large-particle-size polymer microspheres | |
| Hradil et al. | Characterization of pore structure of PHEMA-based slabs | |
| Sáfrány et al. | Radiation polymerization and crosslinking: A viable alternative for synthesis of porous functional polymers | |
| JP2009530629A (en) | Abuse drug binding | |
| CN110117341A (en) | A kind of preparation method of porous functionalized polymer microsphere | |
| JPH03701A (en) | Preparation of polymer gel, polymer gel and actuator |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20160524 |
|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20190416 |
|
| A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20200217 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20200317 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20200413 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20200609 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20200702 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6733900 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |