JP2017112892A - Method for screening skin aging inhibiting material - Google Patents

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Takamasa Gomi
貴優 五味
啓貴 竹内
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啓貴 竹内
貴矢 大石
Takaya Oishi
貴矢 大石
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Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a new method for screening skin aging inhibiting materials using the development level of LOC100292680 as an index.SOLUTION: There is provided a method for screening skin aging inhibiting materials which comprises a step of selecting a test substance having an increased expression level of LOC100292680 which decreases with age by comparing the expression level of LOC100292680 in a cell to which no test substance is added with the expression level of LOC100292680 in a cell to which a test substance is added.SELECTED DRAWING: Figure 1

Description

本発明は、皮膚老化抑制素材をスクリーニングする方法に関する。   The present invention relates to a method for screening a material for inhibiting skin aging.

生物を構成する細胞は加齢により老化する。細胞は、生体反応を担っており、生命活動を担う組織・器官を形成・維持しており、細胞の老化は個体の老化にも繋がる。
また、老化した細胞は周囲の細胞に対しても老化細胞様の反応を惹起させる因子を放出し、組織・器官の老化を加速させる。このため、老化細胞を取り除くと個体や組織の老化を遅らすことができ、既に生じた老化症状を改善できることが示唆されている(例えば、非特許文献1参照)。
The cells that make up an organism age with age. Cells are responsible for biological reactions, and form and maintain tissues and organs responsible for life activities, and aging of cells also leads to aging of individuals.
Aged cells also release factors that induce senescent cell-like responses to surrounding cells, accelerating the aging of tissues and organs. For this reason, it has been suggested that when senescent cells are removed, aging of individuals and tissues can be delayed, and aging symptoms that have already occurred can be improved (see, for example, Non-Patent Document 1).

従って、老化細胞は抗老化のターゲットとして期待されている(例えば、非特許文献2参照)。しかしながら、非侵襲的に老化細胞を取り除くことは実施が難しいという課題があった。   Therefore, senescent cells are expected as anti-aging targets (see, for example, Non-Patent Document 2). However, it has been difficult to remove senescent cells non-invasively.

一方、近年、細胞老化をコントロールする生体成分として、タンパク質をコードしていないRNAであるノンコーディングRNA(ncRNA)が報告されている(例えば、非特許文献3参照)。このncRNAの中には塩基数200nt以上のRNAであるLncRNAが知られており、LncRNAは8200種ほど存在すると推測されている(例えば、非特許文献4参照)。LncRNAに関して、近年、若齢および老齢ドナーから皮膚を採取し、発現量が比較され、いくつかのLncRNAの量が加齢により変化していることが報告されている(例えば、非特許文献5参照)。   On the other hand, in recent years, non-coding RNA (ncRNA), which is RNA that does not encode a protein, has been reported as a biological component that controls cell aging (see, for example, Non-Patent Document 3). Among these ncRNAs, LncRNA that is RNA having a base number of 200 nt or more is known, and it is estimated that there are about 8200 types of LncRNA (see, for example, Non-Patent Document 4). Regarding LncRNA, recently, skin is collected from young and old donors, expression levels are compared, and it has been reported that the amount of some LncRNAs changes with aging (for example, see Non-Patent Document 5). ).

加齢により発現が増加するNESPAS、FLJ46906、HOTAIRのLncRNAと、加齢により発現が減少するSNHG5、LOC100292680、IPWのLncRNAが、特に細胞老化の抑制効果を判断するのに有力な指標であり、該LncRNAを指標として皮膚老化を抑制する効果を有する素材を選別できることが報告されている(例えば、特許文献1参照)。   NESPAS, FLJ46906, HOTAIR LncRNA whose expression increases with aging, and SNHG5, LOC100292680, IPW LncRNA whose expression decreases with aging, are particularly useful indicators for determining the inhibitory effect of cell aging, It has been reported that a material having an effect of suppressing skin aging can be selected using LncRNA as an index (see, for example, Patent Document 1).

特開2015−130857号公報JP 2015-130857 A

Baker DJ. et al., Nature. (2011), 479, 232-236Baker DJ. Et al., Nature. (2011), 479, 232-236 Naylor RM. et al., Clin Pharmacol Ther. (2013) 93, 105-116Naylor RM. Et al., Clin Pharmacol Ther. (2013) 93, 105-116 Abdelmohsen K. et al., Wiley Interdiscip Rev RNA. (2015) 6, 615-629Abdelmohsen K. et al., Wiley Interdiscip Rev RNA. (2015) 6, 615-629 Cabili MN. et al., Genes Dev. (2011), 25, 1915-1927Cabili MN. Et al., Genes Dev. (2011), 25, 1915-1927 Chang ALS. et al., J Invest Dermatol. (2012), 133, 394-402Chang ALS. Et al., J Invest Dermatol. (2012), 133, 394-402

本発明では、LncRNAの一つであるLOC100292680を用いて、皮膚老化抑制素材をスクリーニングする新たな方法を提供することを課題とする。   It is an object of the present invention to provide a new method for screening a skin aging inhibitor using LOC1002680 which is one of LncRNAs.

本発明者らはLncRNAについて研究を進め、加齢に伴い発現量が減少するLncRNAの一つであるLOC100292680が特に細胞老化の抑制効果を判断するのに有力な指標となることを見出し、LOC100292680の亢進を指標に老化を抑制する効果を有する素材をスクリーニングできることに想到した。   The present inventors have conducted research on LncRNA, and found that LOC100226880, which is one of LncRNAs whose expression level decreases with aging, is a particularly useful indicator for judging the effect of suppressing cell senescence. It was thought that the material which has the effect which suppresses aging can be screened by using an increase as an index.

本発明により、LOC100292680を指標とした、新たな皮膚老化抑制素材のスクリーニング法が提供できる。   INDUSTRIAL APPLICABILITY According to the present invention, a new screening method for a skin aging inhibiting material using LOC1002680 as an index can be provided.

LOC100292680が老化を抑制するLncRNAであることを示す図The figure which shows that LOC100292680 is LncRNA which suppresses aging. LOC100292680の減少が細胞の老化を引き起こすことを示す図Diagram showing that a decrease in LOC100292680 causes cellular senescence

以下、本発明について、具体的に行った実験を示して説明するが、本発明が具体的な実施態様にのみ限定されないことはいうまでもない。   Hereinafter, the present invention will be described with reference to specific experiments, but it is needless to say that the present invention is not limited to specific embodiments.

<実験1:LOC100292680の老化メカニズム抑制効果の確認> <Experiment 1: Confirmation of aging mechanism inhibition effect of LOC1002680>

老化していない細胞として18歳のドナー由来の真皮線維芽細胞を用い、老化状態の指標として、老化のメカニズムとして有名なp21をコードする遺伝子(CDKN1A)を評価した。加齢により発現が減少するが機能は解明されていないLncRNAである、SNHG5、LOC100292680、IPWの3種を比較した。SNHG5、LOC100292680、IPWの量を減少させた細胞のCDKN1A発現量が、SNHG5、LOC100292680、IPWのいずれの量も減少させなかった細胞におけるCDKN1Aの発現量と比較して増加を示した場合には、そのLncRNAが老化を抑制していたと判断できる。   A dermal fibroblast derived from an 18-year-old donor was used as a non-senescent cell, and a gene (CDKN1A) encoding p21, which is well-known as an aging mechanism, was evaluated as an indicator of the aging state. Three types of LncRNA, SNHG5, LOC100268080, and IPW, whose expression was decreased by aging but whose function was not elucidated, were compared. When the CDKN1A expression level of the cells in which the amount of SNHG5, LOC1002680, IPW was decreased showed an increase compared to the expression level of CDKN1A in the cells in which none of the SNHG5, LOC100292680, IPW was decreased, It can be judged that the LncRNA suppressed aging.

細胞を24ウェルプレートに30,000個/ウェルになる様に播種し、10%FBS含有DMEM培地で培養した。細胞がプレートに接着した後、SNHG5に対するsiRNA(キアゲン社 SI02824766)、LOC100292680に対するsiRNA(キアゲン社 SI05395502)、IPWに対するsiRNA(キアゲン社 SI04915547)をそれぞれ細胞に導入してそれぞれのRNA量を減少させ、さらに72時間培養した。培養終了時に、RNeasy Mini Kit(キアゲン社)を用いて総RNAを回収し、Superscript VILO DNA Synthesis Kit(キアゲン社)による逆転写を行った。CDKN1Aの特異的プライマー(Forwardプライマー; 5’‐AGAGGAGGCGCCATGTCA‐3’、Reverseプライマー; 5’‐TGGTGTCTCGGTGACAAAGT‐3’、インヴィトロジェン社)を用いた定量的リアルタイムPCR法によりCDKN1Aの発現量を解析し、RNA発現に影響の無いNegative control siRNA(キアゲン社 1027280)を用いて同じ作業を行ったコントロールにおける発現量を100%としたときの割合を求め、CDKN1Aが増加を示すかどうかを解析することで、細胞老化を評価した。   Cells were seeded in a 24-well plate at 30,000 cells / well and cultured in DMEM medium containing 10% FBS. After the cells adhere to the plate, siRNA against SNHG5 (Qiagen SI02824766), siRNA against LOC100292680 (Qiagen SI05395502), siRNA against IPW (Qiagen SI04915547) are introduced into the cells, respectively, and the amount of each RNA is reduced. Cultured for 72 hours. At the end of the culture, total RNA was collected using RNeasy Mini Kit (Qiagen), and reverse transcription was performed using Superscript VILO DNA Synthesis Kit (Qiagen). The expression level of CDKN1A was analyzed by a quantitative real-time PCR method using CDKN1A specific primers (Forward primer; 5′-AGAGGAGGGCCATCATCA-3 ′, Reverse primer; 5′-TGGTGTCTCGGTGACAAAGT-3 ′, Invitrogen) By calculating the ratio when the expression level in the control that performed the same operation using Negative control siRNA (Qiagen 1027280) that does not affect RNA expression was 100%, and analyzing whether CDKN1A shows an increase, Cell aging was evaluated.

SNHG5、LOC100292680、IPWの評価結果を図1に示す。LOC100292680を減少させた細胞で、細胞老化のメカニズム指標であるCDKN1Aが有意に増加した(図1)。
従って、図1の結果からLOC100292680が細胞老化を抑制していたと判断できる。
The evaluation results of SNHG5, LOC1002680, and IPW are shown in FIG. CDKN1A, which is a mechanism index of cell senescence, was significantly increased in cells in which LOC100292680 was decreased (FIG. 1).
Therefore, it can be determined from the results of FIG. 1 that LOC100268080 suppressed cell senescence.

<実験2:LOC100292680の減少による老化状態の確認> <Experiment 2: Confirmation of aging state due to reduction of LOC1002680>

実験1と同様にLOC100292680を減少させた真皮線維芽細胞に対して、1週間毎に細胞の継代を繰り返し、1継代後、2継代後及び7継代後の細胞について、Senescence Detection Kit(BioVision社 K320−250)を用いて、細胞の老化表現形であるSenescence−Associated Beta−Galactosidase(SA−β−Gal)陽性細胞を染色し、全細胞数に対するSA−β−Gal陽性細胞数の割合(SA−β−Gal陽性細胞率)を算出した。
Negative control siRNA(キアゲン社 1027280)を用いて、LOC100292680の量を減少させずに同じ評価を行った真皮線維芽細胞をコントロールとし、コントロールにおけるSA−β−Gal陽性細胞率を1としたときの、LOC100292680を減少させた細胞におけるSA−β−Gal陽性細胞率相対倍率を求め、細胞老化の状態を評価した。
Similar to Experiment 1, for dermal fibroblasts with reduced LOC1002680, cell passage was repeated every week, and after 1 passage, 2 passages and 7 passages, the Detection Detection Kit. (BioVision K320-250) was used to stain Senescence-Associated Beta-Galactosidase (SA-β-Gal) positive cells, which are the aging phenotype of the cells, and the number of SA-β-Gal positive cells relative to the total number of cells. The ratio (SA-β-Gal positive cell rate) was calculated.
Using negative control siRNA (Qiagen 1027280), the dermal fibroblasts that were evaluated in the same manner without reducing the amount of LOC100226880 were used as controls, and the SA-β-Gal positive cell rate in the control was taken as 1. The relative fold ratio of SA-β-Gal positive cells in cells in which LOC100292680 was decreased was determined to evaluate the state of cell senescence.

継代を繰り返した細胞における細胞老化表現形の評価による検証結果を図2に示す。LOC100292680を減少させた細胞では、1継代後、2継代後及び7継代後のいずれも細胞老化の表現形であるSA−β−Gal陽性細胞が増加した。
従って、LOC100292680を減少させた細胞で認められる老化表現形は一時的な反応ではなく、LOC100292680の減少が細胞の老化を引き起こしていることが明らかとなった。
FIG. 2 shows the result of verification based on the evaluation of the cellular senescence phenotype in cells that have been repeatedly passaged. In cells in which LOC100292680 was decreased, SA-β-Gal positive cells, which are phenotypes of cell senescence, increased after passage 1, passage 2, and passage 7.
Therefore, it became clear that the senescence phenotype observed in cells with reduced LOC100292680 is not a transient response, but the decrease in LOC100292680 causes cellular senescence.

実験1及び実験2の両方の評価により細胞のLOC100292680が減少することで細胞が老化することが明らかとなった。従って、LOC100292680を増加させることで細胞老化を防ぐことができることがわかる。   Evaluation of both Experiment 1 and Experiment 2 revealed that the cells senescent due to a decrease in LOC1002680 of the cells. Therefore, it can be seen that cell aging can be prevented by increasing LOC100268080.

本実施態様に係るスクリーニング法は、被験物質を添加した細胞でのLOC100292680の発現量が、被験物質を添加しなかった細胞におけるLOC100292680の発現量と比較して亢進した被験物質を選択するステップを有する。
当業者は、上記実験1、2の結果、及び実験1に準じた実験の結果に基づき、発現量の変化がLOC100292680の発現亢進効果を有するか判断できる。
具体的に例示すると、LOC100292680の発現量が被検物質を添加しなかった細胞に対して増加する場合には、上記ステップにおける老化抑制効果を有する物質と判断できる。
The screening method according to the present embodiment includes a step of selecting a test substance in which the expression level of LOC100292680 in the cell to which the test substance is added is enhanced as compared with the expression level of LOC100292680 in the cell to which the test substance is not added. .
Those skilled in the art can determine whether the change in the expression level has the effect of enhancing the expression of LOC1002680 based on the results of Experiments 1 and 2 and the results of the experiment according to Experiment 1.
Specifically, in the case where the expression level of LOC1002680 increases with respect to the cells to which the test substance is not added, it can be determined that the substance has an antiaging effect in the above step.

本発明のスクリーニング方法が対象とする被験物質は、純物質、動植物由来の抽出物、又はそれらの混合物等のいずれであってもよい。
動植物由来の抽出物は、動物又は植物由来の抽出物自体のみならず、抽出物の画分、精製した画分、抽出物乃至は画分、精製物の溶媒除去物の総称を意味するものとし、植物由来の抽出物は、自生若しくは生育された植物、漢方生薬原料等として販売されるものを用いた抽出物、市販されている抽出物等が挙げられる。
抽出操作は、植物部位の全草を用いるほか、植物体、地上部、根茎部、木幹部、葉部、茎部、花穂、花蕾等の部位を使用することできるが、予めこれらを粉砕あるいは細切して抽出効率を向上させることが好ましい。抽出溶媒としては、水、エタノール、イソプロピルアルコール、ブタノールなどのアルコール類、1,3−ブタンジオール、ポリプロピレングリコールなどの多価アルコール類、アセトン、メチルエチルケトンなどのケトン類、ジエチルエーテル、テトラヒドロフランなどのエーテル類等の極性溶媒から選択される1種乃至は2種以上が好適なものとして例示することができる。具体的な抽出方法としては、例えば、植物体等の抽出に用いる部位乃至はその乾燥物1質量に対して、溶媒を1〜30質量部加え、室温であれば数日間、沸点付近の温度であれば数時間浸漬し、室温まで冷却し後、所望により不溶物及び/又は溶媒除去し、カラムクロマトグラフィー等で分画精製する方法が挙げられる。
The test substance targeted by the screening method of the present invention may be any of a pure substance, an extract derived from animals and plants, or a mixture thereof.
The extracts derived from animals and plants mean not only animal or plant-derived extracts themselves, but also generic names of extract fractions, purified fractions, extracts or fractions, and solvent-removed products of purified products. Examples of plant-derived extracts include native or grown plants, extracts using products sold as herbal medicine ingredients, and commercially available extracts.
For the extraction operation, the whole plant part can be used, and other parts such as the plant body, the above-ground part, the rhizome part, the tree trunk part, the leaf part, the stem part, the flower ear, and the flower bud can be used. It is preferable to improve the extraction efficiency by cutting. Extraction solvents include water, alcohols such as ethanol, isopropyl alcohol and butanol, polyhydric alcohols such as 1,3-butanediol and polypropylene glycol, ketones such as acetone and methyl ethyl ketone, ethers such as diethyl ether and tetrahydrofuran. 1 type or 2 types or more selected from polar solvents, such as these, can be illustrated as a suitable thing. As a specific extraction method, for example, 1 to 30 parts by mass of a solvent is added to 1 part by mass of a plant or the like used for extraction of a plant or the like. If so, there may be mentioned a method of immersing for several hours, cooling to room temperature, removing insoluble matters and / or solvents if desired, and fractionating and purifying by column chromatography or the like.

本発明のスクリーニング方法によりスクリーニングした皮膚老化抑制素材は、シワ防止効果、たるみ防止効果、ハリの低下防止効果、弾力性の低下防止効果、きめの喪失の防止効果、くすみ防止効果から選択される1種以上の効果を奏し、後述するように皮膚外用剤、化粧料、医薬部外品、食品などに配合されることで、アンチエージング効果を奏する。   The skin aging inhibitory material screened by the screening method of the present invention is selected from a wrinkle prevention effect, a sagging prevention effect, a reduction effect of elasticity, a reduction effect of elasticity, an effect of preventing loss of texture, and a dullness prevention effect 1 It has more than a seed effect, and has an anti-aging effect by being blended in a skin external preparation, cosmetics, quasi drugs, foods and the like as described later.

皮膚老化抑制素材の含有量(配合量)は、通常、0.00001質量%以上、好ましくは0.0001質量%以上、より好ましくは0.001質量%以上であり、通常80質量%以下、好ましくは30質量%以下、より好ましくは10質量%である。上記範囲とすることで、好適にアンチエージング効果を奏する皮膚老化防止組成物とすることができる。
また、皮膚老化防止組成物に含有させる皮膚老化抑制素材の種類は、1種類のみでなく2種類以上であってもよい。
The content (blending amount) of the skin aging inhibitor is usually 0.00001% by mass or more, preferably 0.0001% by mass or more, more preferably 0.001% by mass or more, and usually 80% by mass or less, preferably Is 30% by mass or less, more preferably 10% by mass. By setting it as the said range, it can be set as the skin aging prevention composition which show | plays an anti-aging effect suitably.
Moreover, the kind of skin aging suppression material contained in the skin aging preventing composition may be not only one but also two or more kinds.

皮膚老化抑制素材を化粧料に配合し適用する場合、通常化粧料に使用される成分を広く配合することが可能であり、また、その剤形や用途についても、何ら限定されない。以下、化粧料に適用される場合、化粧料中に含有させることができる成分について説明する。   When blending and applying a skin aging inhibiting material to cosmetics, it is possible to broadly blend the components normally used in cosmetics, and the dosage form and use are not limited at all. Hereinafter, the components that can be contained in the cosmetic when applied to the cosmetic will be described.

有効成分としては、美白成分、シワ改善成分、抗炎症成分、動植物由来の抽出物等が挙げられる。なお、上記説明した本発明の実施態様に係る皮膚老化抑制素材と重複して配合してもよい。
美白成分としては、一般的に化粧料に用いられているものであれば特に限定はない。例えば、4−n−ブチルレゾルシノール、アスコルビン酸グルコシド、3−О−エチルアスコルビン酸、トラネキサム酸、アルブチン、1−トリフェニルメチルピペリジン、1−トリフェニルメチルピロリジン、2−(トリフェニルメチルオキシ)エタノール、2−(トリフェニルメチルアミノ)エタノール、2−(トリフェニルメチルオキシ)エチルアミン、トリフェニルメチルアミン、トリフェニルメタノール、トリフェニルメタン及びアミノジフェニルメタン、N−(o−トルイル)システイン酸、N−(m−トルイル)システイン酸、N−(p−トルイル)システイン酸、N−(p−メトキシベンゾイル)システイン酸等が挙げられる。更にその他の美白成分として、N−ベンゾイル−セリン、N−(p−メチルベンゾイル)セリン、N−(p−エチルベンゾイル)セリン、N−(p−メトキシベンゾイル)セリン、N−(p−フルオロベンゾイル)セリン、N−(p−トリフルオロメチルベンゾイル)セリン、N−(2−ナフトイル)セリン、N−(4−フェニルベンゾイル)セリン、N−(p−メチルベンゾイル)セリン メチルエステル、N−(p−メチルベンゾイル)セリン エチルエステル、N−(2−ナフトイル)セリン メチルエステル、N−ベンゾイル−O−メチルセリン、N−(p−メチルベンゾイル)−O−メチルセリン、N−(p−メチルベンゾイル)−O−アセチルセリン、N−(2−ナフトイル)−O−メチルセリン等があげられる。
これらの美白成分は、既に市販されているものもあれば、合成により入手することもできる。例えば、3−О−エチルアスコルビン酸は、特開平8−134055号公報に記載の公知の方法で合成することが出来る。市販品(日本精化製「VCエチル」)もあるので、これらを入手して使用することが可能である。1−トリフェニルメチルピペリジン、1−トリフェニルメチルピロリジン、2−(トリフェニルメチルオキシ)エタノール、2−(トリフェニルメチルアミノ)エタノール、2−(トリフェニルメチルオキシ)エチルアミン、トリフェニルメチルアミン、トリフェニルメタノール、トリフェニルメタン、アミノジフェニルメタンは特許文献WO2010―074052号パンフレットに、N−(o−トルイル)システイン酸、N−(m−トルイル)システイン酸、N−(p−トルイル)システイン酸、N−(p−メトキシベンゾイル)システイン酸、N−(4−フェニルベンゾイル)システイン酸、N−(p−トルオイル)ホモシステイン酸、はWO2011−058730号パンフレットに、N−ベンゾイル−セリン、N−(p−メチルベンゾイル)セリン、N−(p−エチルベンゾイル)セリン、N−(p−メトキシベンゾイル)セリン、N−(p−フルオロベンゾイル)セリン、N−(p−トリフルオロメチルベンゾイル)セリン、N−(2−ナフトイル)セリン、N−(4−フェニルベンゾイル)セリン、N−(p−メチルベンゾイル)セリン メチルエステル、N−(p−メチルベンゾイル)セリン エチルエステル、N−(2−ナフトイル)セリン メチルエステル、N−ベンゾイル−O−メチルセリン、N−(p−メチルベンゾイル)−O−メチルセリン、N−(p−メチルベンゾイル)−O−アセチルセリン、N−(2−ナフトイル)−O−メチルセリン等はWO2011/074643号パンフレットに、それぞれその合成方法が公開されているので、該開示に従い合成することができる。
化粧料における美白成分の含有量は、通常0.0001〜30質量%であり、0.001〜10質量%が好ましく、0.01〜5質量%がより好ましい。
Examples of active ingredients include whitening ingredients, wrinkle-improving ingredients, anti-inflammatory ingredients, animal and plant extracts. In addition, you may mix | blend with the skin aging suppression raw material which concerns on the embodiment of this invention demonstrated above.
The whitening component is not particularly limited as long as it is generally used in cosmetics. For example, 4-n-butylresorcinol, ascorbic acid glucoside, 3-O-ethylascorbic acid, tranexamic acid, arbutin, 1-triphenylmethylpiperidine, 1-triphenylmethylpyrrolidine, 2- (triphenylmethyloxy) ethanol, 2- (triphenylmethylamino) ethanol, 2- (triphenylmethyloxy) ethylamine, triphenylmethylamine, triphenylmethanol, triphenylmethane and aminodiphenylmethane, N- (o-toluyl) cysteic acid, N- (m -Toluyl) cysteic acid, N- (p-toluyl) cysteic acid, N- (p-methoxybenzoyl) cysteic acid and the like. Furthermore, as other whitening components, N-benzoyl-serine, N- (p-methylbenzoyl) serine, N- (p-ethylbenzoyl) serine, N- (p-methoxybenzoyl) serine, N- (p-fluorobenzoyl) ) Serine, N- (p-trifluoromethylbenzoyl) serine, N- (2-naphthoyl) serine, N- (4-phenylbenzoyl) serine, N- (p-methylbenzoyl) serine methyl ester, N- (p -Methylbenzoyl) serine ethyl ester, N- (2-naphthoyl) serine methyl ester, N-benzoyl-O-methylserine, N- (p-methylbenzoyl) -O-methylserine, N- (p-methylbenzoyl) -O -Acetylserine, N- (2-naphthoyl) -O-methylserine and the like.
Some of these whitening components are already on the market, or they can be obtained by synthesis. For example, 3-O-ethylascorbic acid can be synthesized by a known method described in JP-A-8-134055. There are also commercially available products (“VC ethyl” manufactured by Nippon Seika Co., Ltd.), and these can be obtained and used. 1-triphenylmethylpiperidine, 1-triphenylmethylpyrrolidine, 2- (triphenylmethyloxy) ethanol, 2- (triphenylmethylamino) ethanol, 2- (triphenylmethyloxy) ethylamine, triphenylmethylamine, triphenyl Phenylmethanol, triphenylmethane, and aminodiphenylmethane are disclosed in pamphlet of WO2010-074052 as N- (o-toluyl) cysteic acid, N- (m-toluyl) cysteic acid, N- (p-toluyl) cysteic acid, N -(P-methoxybenzoyl) cysteic acid, N- (4-phenylbenzoyl) cysteic acid and N- (p-toluoyl) homocysteic acid are disclosed in WO 2011-058730, N-benzoyl-serine, N- (p -Methylbe Zoyl) serine, N- (p-ethylbenzoyl) serine, N- (p-methoxybenzoyl) serine, N- (p-fluorobenzoyl) serine, N- (p-trifluoromethylbenzoyl) serine, N- (2 -Naphthoyl) serine, N- (4-phenylbenzoyl) serine, N- (p-methylbenzoyl) serine methyl ester, N- (p-methylbenzoyl) serine ethyl ester, N- (2-naphthoyl) serine methyl ester, N-benzoyl-O-methylserine, N- (p-methylbenzoyl) -O-methylserine, N- (p-methylbenzoyl) -O-acetylserine, N- (2-naphthoyl) -O-methylserine and the like are disclosed in WO2011 / In the pamphlet of No. 074643, the synthesis method is disclosed, respectively. It can be formed.
Content of the whitening component in cosmetics is 0.0001-30 mass% normally, 0.001-10 mass% is preferable and 0.01-5 mass% is more preferable.

シワ改善成分としては、一般的に化粧料に用いられているものであれば特に限定はない。例えば、ビタミンA又はその誘導体が、レチノール、レチナール、レチノイン酸、トレチノイン、イソトレチノイン、レチノイン酸トコフェロール、パルミチン酸レチノール、酢酸レチノールやウルソール酸ベンジルエステル、ウルソール酸リン酸エステル、ベツリン酸ベンジルエステル、ベンジル酸リン酸エステルが挙げられる。化粧料におけるシワ改善成分の含有量は、通常通常0.0001〜30質量%であり、0.001〜10質量%が好ましく、0.01〜5質量%がより好ましい。   The wrinkle improving component is not particularly limited as long as it is generally used in cosmetics. For example, vitamin A or a derivative thereof is retinol, retinal, retinoic acid, tretinoin, isotretinoin, retinoic acid tocopherol, retinol palmitate, retinol acetate, ursolic acid benzyl ester, ursolic acid phosphate ester, betulinic acid benzyl ester, benzylic acid A phosphate ester is mentioned. The content of the wrinkle improving component in the cosmetic is usually 0.0001 to 30% by mass, preferably 0.001 to 10% by mass, and more preferably 0.01 to 5% by mass.

動植物由来の抽出物としては、一般的に医薬品、化粧料、食品等に用いられているものであれば特に限定はない。例えば、アケビエキス、アスナロエキス、アスパラガスエキス、アボガドエキス、アマチャエキス、アーモンドエキス、アルニカエキス、アロニアエキス、アンズエキス、イチョウエキス、インドキノエキス、ウイキョウエキス、ウドエキス、エゾウコギエキス、エンメイソウエキス、オウバクエキス、オタネニンジンエキス、オトギリソウエキス、オドリコソウエキス、オレンジエキス、カキョクエキス、カッコンエキス、カモミラエキス、カロットエキス、カワラヨモギエキス、カンゾウエキス、キウイエキス、キューカンバーエキス、グアバエキス、クジンエキス、クチナシエキス、クマザサエキス、クララエキス、クルミエキス、グレープフルーツエキス、黒米エキス、クロレラエキス、クワエキス、ケイケットウエキス、ゲットウヨウエキス、ゲンチアナエキス、紅茶エキス、ゴボウエキス、コメエキス、コメ発酵エキス、コメヌカ発酵エキス、コメ胚芽油、コケモモエキス、サルビアエキス、サボンソウエキス、ササエキス、サンザシエキス、サンシャエキス、サンショウエキス、シイタケエキス、ジオウエキス、シコンエキス、シソエキス、シナノキエキス、シモツケソウエキス、シャクヤクエキス、ショウキョウエキス、ショウブ根エキス、スギナエキス、ステビアエキス、ステビア発酵物、セイヨウサンザシエキス、セイヨウニワトコエキス、セイヨウノコギリソウエキス、セイヨウハッカエキス、セージエキス、ゼニアオイエキス、センキュウエキス、センブリエキス、ソウハクヒエキス、ダイオウエキス、ダイズエキス、タイソウエキス、タイムエキス、タンポポエキス、茶エキス、チョウジエキス、チンピエキス、甜茶エキス、トウガラシエキス、トウキエキス、トウキンセンカエキス、トウニンエキス、ドクダミエキス、トマトエキス、納豆エキス、ニンジンエキス、ニンニクエキス、ノバラエキス、ハイビスカスエキス、バクモンドウエキス、ハスエキス、パセリエキス、バーチエキス、ハマメリスエキス、ヒキオコシエキス、ヒノキエキス、ビワエキス、フキタンポポエキス、フキノトウエキス、ブクリョウエキス、ブドウエキス、ブドウ種子エキス、ヘチマエキス、ペパーミントエキス、ボダイジュエキス、ホップエキス、マツエキス、ミズバショウエキス、メリッサエキス、モズクエキス、モモエキス、ヤグルマギクエキス、ユーカリエキス、ユズエキス、ユリエキス、ヨクイニンエキス、ヨモギエキス、ラベンダーエキス、緑茶エキス、リンゴエキス、ルイボス茶エキス、レイシエキス、レタスエキス、レモンエキス、レンギョウエキス、レンゲソウエキス、ローズエキス、ローズマリーエキス、ローマカミツレエキス、ローヤルゼリーエキス、ワレモコウエキス等のエキスが好ましいものとして挙げられる。
化粧料中における動植物由来抽出物の含有量は、通常0.01〜30質量%であり、0.1〜10質量%が好ましく、0.3〜3質量%がより好ましい。
食品中における動植物抽出物の含有量は、通常0.01〜80質量%であり、0.1〜50質量%が好ましく、1〜30質量%がより好ましい。
The extracts derived from animals and plants are not particularly limited as long as they are generally used for pharmaceuticals, cosmetics, foods and the like. For example, akebi extract, asunalo extract, asparagus extract, avocado extract, achacha extract, almond extract, arnica extract, aronia extract, apricot extract, ginkgo biloba extract, Indian mushroom extract, fennel extract, udo extract, sorghum extract, enmiso essence extract, buckwheat Extract, ginseng extract, hypericum extract, nettle extract, orange extract, oyster extract, cuckoo extract, chamomile extract, carrot extract, kawara mugi extract, licorice extract, kiwi extract, cucumber extract, guava extract, cucumber extract, gardenia extract, kumazasa extract, clara Extract, walnut extract, grapefruit extract, black rice extract, chlorella extract, mulberry extract, caquette extract, ghetto Extract, gentian extract, black tea extract, burdock extract, rice extract, fermented rice extract, fermented rice bran extract, rice germ oil, bilberry extract, salvia extract, bonito extract, sasa extract, hawthorn extract, sacha extract, sanctuary extract, shiitake extract, Giant extract, lion extract, perilla extract, linden extract, cypress extract, peonies extract, ginger extract, ginger root extract, cedar extract, stevia extract, stevia fermented product, hawthorn extract, elderberry extract, yarrow extract, mint extract, sage Extract, mallow extract, nematode extract, assembly extract, Sakuhakuhi extract, daiou extract, soybean extract, lysam extract, thyme extract, tasty extract Popo extract, tea extract, clove extract, chimpi extract, green tea extract, red pepper extract, toki extract, citrus extract, tonin extract, dokudami extract, tomato extract, natto extract, carrot extract, garlic extract, Novara extract, hibiscus extract, bacmond extract, Lotus extract, parsley extract, birch extract, hammame extract, cypress extract, hinoki extract, loquat extract, Japanese dandelion extract, Japanese cypress extract, grape extract, grape extract, grape seed extract, loofah extract, peppermint extract, body extract, hop extract, pine extract, mizubasho Extract, Melissa Extract, Mozuku Extract, Peach Extract, Cornflower Extract, Eucalyptus Extract, Yuzu Extract, Lily Extract, Yokuinin Eki , Mugwort extract, lavender extract, green tea extract, apple extract, rooibos tea extract, litchi extract, lettuce extract, lemon extract, forsythia extract, forsythia extract, rose extract, rosemary extract, roman chamomile extract, royal jelly extract, bitumen extract, etc. Is preferable.
The content of the animal or plant-derived extract in the cosmetic is usually 0.01 to 30% by mass, preferably 0.1 to 10% by mass, and more preferably 0.3 to 3% by mass.
Content of the animal and plant extract in foodstuffs is 0.01-80 mass% normally, 0.1-50 mass% is preferable and 1-30 mass% is more preferable.

抗炎症成分としては、クラリノン、グラブリジン、グリチルリチン酸、グリチルレチン酸、パントテニルアルコール等が挙げられ、好ましくは、グリチルリチン酸及びその塩、グリチルレチン酸アルキル及びその塩、並びに、グリチルレチン酸及びその塩である。
化粧料中における抗炎症成分の含有量は、通常0.01〜30質量%であり、0.1〜10質量%が好ましく、1〜5質量%がより好ましい。
Examples of the anti-inflammatory component include clarinone, glabrizine, glycyrrhizic acid, glycyrrhetinic acid, pantothenyl alcohol, and the like, and preferably glycyrrhizic acid and its salt, glycyrrhetinic acid alkyl and its salt, and glycyrrhetic acid and its salt.
Content of the anti-inflammatory component in cosmetics is 0.01-30 mass% normally, 0.1-10 mass% is preferable and 1-5 mass% is more preferable.

油性成分としては、極性油、揮発性炭化水素油等が挙げられる。
極性油としては、合成エステル油として、ミリスチン酸イソプロピル、オクタン酸セチル、ミリスチン酸オクチルドデシル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、ラウリン酸ヘキシル、ミリスチン酸ミリスチル、オレイン酸デシル、ジメチルオクタン酸ヘキシルデシル、乳酸セチル、乳酸ミリスチル、酢酸ラノリン、ステアリン酸イソセチル、イソステアリン酸イソセチル、12−ヒドロキシステアリル酸コレステリル、ジ−2−エチルヘキシル酸エチレングリコール、ジペンタエリスリトール脂肪酸エステル、モノイソステアリン酸N−アルキルグリコール、ジカプリン酸ネオペンチルグリコール、リンゴ酸ジイソステアリル、ジ−2−ヘプチルウンデカン酸グリセリン、トリ−2−エチルヘキシル酸トリメチロールプロパン、トリイソステアリン酸トリメチロールプロパン、テトラ−2−エチルヘキシル酸ペンタンエリスリトール、トリ−2−エチルヘキシル酸グリセリン、トリイソステアリン酸トリメチロールプロパンを挙げることができる。
Examples of the oil component include polar oil and volatile hydrocarbon oil.
Polar oils include synthetic ester oils such as isopropyl myristate, cetyl octanoate, octyldodecyl myristate, isopropyl palmitate, butyl stearate, hexyl laurate, myristyl myristate, decyl oleate, hexyldecyl dimethyloctanoate, lactic acid Cetyl, myristyl lactate, lanolin acetate, isocetyl stearate, isocetyl isostearate, cholesteryl 12-hydroxystearylate, ethylene glycol di-2-ethylhexylate, dipentaerythritol fatty acid ester, N-alkylglycol monoisostearate, neopentyl dicaprate Glycol, diisostearyl malate, glycerin di-2-heptylundecanoate, trimethylolpropane tri-2-ethylhexylate May be mentioned trimethylolpropane triisostearate, tetra-2-ethylhexyl acid pentane erythritol, tri-2-ethylhexyl acid glycerin, trimethylolpropane triisostearate.

さらに、セチル2−エチルヘキサノエート、2−エチルヘキシルパルミテート、トリミリスチン酸グリセリン、トリ−2−ヘプチルウンデカン酸グリセライド、ヒマシ油脂肪酸メチルエステル、オレイン酸オイル、セトステアリルアルコール、アセトグリセライド、パルミチン酸2−ヘプチルウンデシル、アジピン酸ジイソブチル、N−ラウロイル−L−グルタミン酸−2−オクチルドデシルエステル、アジピン酸ジ−2−ヘプチルウンデシル、エチルラウレート、セバチン酸ジ−2−エチルヘキシル、ミリスチン酸2−ヘキシルデシル、パルミチン酸2−ヘキシルデシル、アジピン酸2−ヘキシルデシル、セバチン酸ジイソプロピル、コハク酸2−エチルヘキシル、酢酸エチル、酢酸ブチル、酢酸アミル、クエン酸トリエチル、オクチル メトキシシンナメート等も挙げられる。   Furthermore, cetyl 2-ethylhexanoate, 2-ethylhexyl palmitate, glyceryl trimyristate, glyceride tri-2-heptylundecanoate, castor oil fatty acid methyl ester, oleic acid oil, cetostearyl alcohol, acetoglyceride, palmitic acid 2 -Heptylundecyl, diisobutyl adipate, N-lauroyl-L-glutamic acid-2-octyldodecyl ester, di-2-heptylundecyl adipate, ethyl laurate, di-2-ethylhexyl sebacate, 2-hexyl myristate Decyl, 2-hexyldecyl palmitate, 2-hexyldecyl adipate, diisopropyl sebacate, 2-ethylhexyl succinate, ethyl acetate, butyl acetate, amyl acetate, triethyl citrate, octyl Toki Shishi runner formate may also be mentioned.

また、天然油として、アボガド油、ツバキ油、タートル油、マカデミアナッツ油、トウモロコシ油、ミンク油、オリーブ油、ナタネ油、卵黄油、ゴマ油、パーシック油、小麦胚芽油、サザンカ油、ヒマシ油、アマニ油、サフラワー油、綿実油、エノ油、大豆油、落花生油、茶実油、カヤ油、コメヌカ油、シナギリ油、日本キリ油、ホホバ油、胚芽油、トリグリセリン、トリオクタン酸グリセリン、トリイソパルミチン酸グリセリン等が挙げられる。   Natural oils include avocado oil, camellia oil, turtle oil, macadamia nut oil, corn oil, mink oil, olive oil, rapeseed oil, egg yolk oil, sesame oil, persic oil, wheat germ oil, sasanca oil, castor oil, flaxseed oil, Safflower oil, cottonseed oil, eno oil, soybean oil, peanut oil, tea seed oil, kaya oil, rice bran oil, cinnagar oil, Japanese kiri oil, jojoba oil, germ oil, triglycerin, trioctanoic acid glycerin, triisopalmitic acid glycerin Etc.

揮発性炭化水素油としては、イソドデカン、イソヘキサデカン等が挙げられる。   Examples of the volatile hydrocarbon oil include isododecane and isohexadecane.

界面活性剤としては、脂肪酸セッケン(ラウリン酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム等)、ラウリル硫酸カリウム、アルキル硫酸トリエタノールアミンエーテル等のアニオン界面活性剤類、塩化ステアリルトリメチルアンモニウム、塩化ベンザルコニウム、ラウリルアミンオキサイド等のカチオン界面活性剤類、ベタイン系界面活性剤(アルキルベタイン、アミドベタイン、スルホベタイン等)、イミダゾリン系両性界面活性剤(2−ココイル−2−イミダゾリニウムヒドロキサイド−1−カルボキシエチロキシ2ナトリウム塩等)、アシルメチルタウリン等の両性界面活性剤類、ソルビタン脂肪酸エステル類(ソルビタンモノステアレート、セスキオレイン酸ソルビタン等) 、グリセリン脂肪酸類(モノステアリン酸グリセリン等)、プロピレングリコール脂肪酸エステル類(モノステアリン酸プロピレングリコール等)、硬化ヒマシ油誘導体、グリセリンアルキルエーテル、POEソルビタン脂肪酸エステル類(POEソルビタンモノオレエート、モノステアリン酸ポリオキシエチレンソルビタン等)、POEソルビット脂肪酸エステル類(POE−ソルビットモノラウレート等)、POEグリセリン脂肪酸エステル類(POE−グリセリンモノイソステアレート等)、POE脂肪酸エステル類(ポリエチレングリコールモノオレート、POEジステアレート等) 、POEアルキルエーテル類(POE2−オクチルドデシルエーテル等)、POEアルキルフェニルエーテル類(POEノニルフェニルエーテル等)、プルロニック型類、POE・POPアルキルエーテル類(POE・POP2−デシルテトラデシルエーテル等)、テトロニック類、POEヒマシ油・硬化ヒマシ油誘導体(POEヒマシ油、POE硬化ヒマシ油等)、ショ糖脂肪酸エステル、アルキルグルコシド等の非イオン界面活性剤類、等が挙げられる。   As surfactants, fatty acid soap (sodium laurate, sodium palmitate, etc.), anionic surfactants such as potassium lauryl sulfate, alkylsulfuric triethanolamine ether, stearyltrimethylammonium chloride, benzalkonium chloride, laurylamine oxide Cationic surfactants such as, betaine surfactants (alkyl betaines, amide betaines, sulfobetaines, etc.), imidazoline amphoteric surfactants (2-cocoyl-2-imidazolinium hydroxide-1-carboxyethyloxy 2) Sodium salts, etc.), amphoteric surfactants such as acylmethyl taurine, sorbitan fatty acid esters (sorbitan monostearate, sorbitan sesquioleate, etc.), glycerin fatty acids (glyceryl monostearate, etc.), Propylene glycol fatty acid esters (such as propylene glycol monostearate), hydrogenated castor oil derivatives, glycerin alkyl ethers, POE sorbitan fatty acid esters (POE sorbitan monooleate, polyoxyethylene sorbitan monostearate, etc.), POE sorbite fatty acid esters (POE-sorbitol monolaurate, etc.), POE glycerol fatty acid esters (POE-glycerol monoisostearate, etc.), POE fatty acid esters (polyethylene glycol monooleate, POE distearate, etc.), POE alkyl ethers (POE2-octyldodecyl) Ethers, etc.), POE alkylphenyl ethers (POE nonylphenyl ether, etc.), Pluronic types, POE / POP alkyl ethers ( Nonionic surfactants such as POE / POP2-decyltetradecyl ether), tetronics, POE castor oil / hardened castor oil derivatives (POE castor oil, POE hardened castor oil, etc.), sucrose fatty acid esters, alkyl glucosides, etc. , Etc.

アルコールとしては、エタノール、ポリエチレングリコール、グリセリン、1,3−ブチレングリコール、エリスリトール、ソルビトール、キシリトール、マルチトール、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、ジグリセリン、イソプレングリコール、1,2−ペンタンジオール、2,4−ヘキシレングリコール、1,2−ヘキサンジオール、1,2−オクタンジオール等が挙げられる。   Examples of the alcohol include ethanol, polyethylene glycol, glycerin, 1,3-butylene glycol, erythritol, sorbitol, xylitol, maltitol, propylene glycol, dipropylene glycol, diglycerin, isoprene glycol, 1,2-pentanediol, 2,4 -Hexylene glycol, 1,2-hexanediol, 1,2-octanediol and the like.

増粘剤としては、グアガム、クインスシード、カラギーナン、ガラクタン、アラビアガム、ペクチン、マンナン、デンプン、キサンタンガム、カードラン、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、メチルヒドロキシプロピルセルロース、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸、グリコーゲン、ヘパラン硫酸、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸ナトリウム、トラガントガム、ケラタン硫酸、コンドロイチン、ムコイチン硫酸、ヒドロキシエチルグアガム、カルボキシメチルグアガム、デキストラン、ケラト硫酸、ローカストビーンガム、サクシノグルカン、カロニン酸,キチン、キトサン、カルボキシメチルキチン、寒天、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、アルキル変性カルボキシビニルポリマー、ポリアクリル酸ナトリウム、ポリエチレングリコール、ベントナイト等が挙げられる。   Thickeners include guar gum, quince seed, carrageenan, galactan, gum arabic, pectin, mannan, starch, xanthan gum, curdlan, methylcellulose, hydroxyethylcellulose, carboxymethylcellulose, methylhydroxypropylcellulose, chondroitin sulfate, dermatan sulfate, glycogen, Heparan sulfate, hyaluronic acid, sodium hyaluronate, tragacanth gum, keratan sulfate, chondroitin, mucoitin sulfate, hydroxyethyl guar gum, carboxymethyl guar gum, dextran, kerato sulfate, locust bean gum, succinoglucan, caronic acid, chitin, chitosan, carboxymethyl Chitin, agar, polyvinyl alcohol, polyvinylpyrrolidone, carboxyvinyl polymer, al Le-modified carboxyvinyl polymers, sodium polyacrylate, polyethylene glycol, and bentonite.

粉体類としては、表面を処理されていても良い、マイカ、タルク、カオリン、合成雲母、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、無水ケイ酸(シリカ)、酸化アルミニウム、硫酸バリウム等の粉体類、表面を処理されていても良い、ベンガラ、黄酸化鉄、黒酸化鉄、酸化コバルト、群青、紺青、酸化チタン、酸化亜鉛の無機顔料類、表面を処理されていても良い、雲母チタン、魚燐箔、オキシ塩化ビスマス等のパール剤類、レーキ化されていても良い赤色202号、赤色228号、赤色226号、黄色4号、青色404号、黄色5号、赤色505号、赤色230号、赤色223号、橙色201号、赤色213号、黄色204号、黄色203号、青色1号、緑色201号、紫色201号、赤色204号等の有機色素類、ポリエチレン末、ポリメタクリル酸メチル、ナイロン粉末、オルガノポリシロキサンエラストマー等の有機粉体類、が挙げられる。   As powders, the surface may be treated, mica, talc, kaolin, synthetic mica, calcium carbonate, magnesium carbonate, silicic anhydride (silica), aluminum oxide, barium sulfate, etc. May be treated, bengara, yellow iron oxide, black iron oxide, cobalt oxide, ultramarine, bitumen, titanium oxide, zinc oxide inorganic pigments, surface may be treated, titanium mica, fish phosphorus foil, Pearl agent such as bismuth oxychloride, red 202, red 228, red 226, yellow 4, blue 404, yellow 5, red 505, red 230, red 223 which may be raked No., Orange No. 201, Red No. 213, Yellow No. 204, Yellow No. 203, Blue No. 1, Green No. 201, Purple No. 201, Red No. 204, organic dyes, polyethylene powder, polymeta Methyl acrylic acid, nylon powder, organic powders such as organopolysiloxane elastomers, and the like.

紫外線吸収剤としては、パラアミノ安息香酸系紫外線吸収剤、アントラニル酸系紫外線吸収剤、サリチル酸系紫外線吸収剤、桂皮酸系紫外線吸収剤、ベンゾフェノン系紫外線吸収剤、糖系紫外線吸収剤、2−(2'−ヒドロキシ−5'−t−オクチルフェニル)ベンゾトリアゾール、4−メトキシ−4'−t−ブチルジベンゾイルメタン等の紫外線吸収剤類等が挙げられる。   Examples of the UV absorber include paraaminobenzoic acid UV absorbers, anthranilic acid UV absorbers, salicylic acid UV absorbers, cinnamic acid UV absorbers, benzophenone UV absorbers, sugar UV absorbers, 2- (2 UV absorbers such as' -hydroxy-5'-t-octylphenyl) benzotriazole and 4-methoxy-4'-t-butyldibenzoylmethane.

また、化粧料として適用される場合の剤型は、通常知られているローション剤形、乳液剤形、エッセンス剤形、クリーム剤形、粉体含有剤形の何れをも取ることが出来る。   Moreover, the dosage form in the case of applying as cosmetics can take any of the conventionally known lotion dosage forms, emulsion dosage forms, essence dosage forms, cream dosage forms, and powder-containing dosage forms.

また、食品として適用される場合の剤型は、通常知られている錠剤、カプセル剤、粉末剤の何れをも取ることが出来る。   Moreover, the dosage form in the case of applying as a foodstuff can take all the tablets, capsules, and powders which are generally known.

以下、本発明を実施例により具体的に説明するが、本発明は、その要旨を超えない限り、以下の実施例に限定されるものではない。   EXAMPLES Hereinafter, although an Example demonstrates this invention concretely, this invention is not limited to a following example, unless the summary is exceeded.

<実施例1:LOC100292680を増加する植物抽出物のスクリーニング> <Example 1: Screening of plant extracts that increase LOC1002680>

本技術分野における市場の製品にて、当該業者が老化改善を期待して配合していると推測された植物抽出物を被験物質として、老化した線維芽細胞のLOC100292680に対する作用を評価した。   The effect of aging fibroblasts on LOC100292680 was evaluated using a plant extract presumed to be formulated by the manufacturer in the hope of improving aging in products on the market in this technical field.

老化した細胞として68歳白人由来の真皮線維芽細胞を用いた。10%FBS含有DMEM培地でPDL24以上になるまで継代培養した線維芽細胞を、96ウェルプレートに7000個/ウェルになる様に播種し、24時間培養した。その後、植物抽出物を0.5%含む培地に交換し、さらに24時間培養した。また、対照として各抽出物の溶媒を0.5%含む培地で同様に培養した。培養終了時に、FastLane Cell SYBR Green Kit(キアゲン社 216213)とLOC100292680特異的プライマー(キアゲン社 Hs_LINC00942_1_SG)を用いた定量的リアルタイムPCR法によりLOC100292680の発現量を解析し、対照での発現量を1として相対量を求めた。   Dermal fibroblasts from a 68-year-old Caucasian were used as senescent cells. Fibroblasts subcultured with 10% FBS-containing DMEM medium until PDL24 or higher were seeded in a 96-well plate at 7000 cells / well and cultured for 24 hours. Thereafter, the medium was replaced with a medium containing 0.5% of the plant extract and further cultured for 24 hours. Moreover, it culture | cultivated similarly in the culture medium which contains the solvent of each extract as a control 0.5%. At the end of the culture, the expression level of LOC10000292680 was analyzed by quantitative real-time PCR using FastLane Cell SYBR Green Kit (Qiagen 216213) and LOC10000292680 specific primer (Qiagen Hs_LINC00942_1_SG). The amount was determined.

被験物質添加前のLOC100292680発現量を上回った抽出物の結果を表1に示す。
表1より、アロエ、エイジツ、オウゴン、オウレン、キイチゴ、ゲンノショウコ、シラカバ、セイヨウキズタ、ツボクサ、トウヒ、ブッチャーブルーム、ボタン、マンダリンオレンジ果実、ユキノシタの14種の植物の抽出物をそれぞれ添加することによって、LOC100292680をコントロールに対し10%以上増加させることが明らかとなった。
特に、アロエ、エイジツ、オウゴン、オウレン、キイチゴ、セイヨウキズタ、ツボクサ、トウヒ、ブッチャーブルーム、ボタン、マンダリンオレンジ果実、ユキノシタの12種では有意なLOC100292680の増加が認められ、細胞老化の改善効果が期待された。
この12種のうち、最もLOC100292680増加効果の弱かったマンダリンオレンジ果実は、LOC100292680の発現量を17%増加させ、LOC100292680の平均値を増加させたものの、有意な増加が認められなかったゲンノショウコでは13%の増加であったことから、この13%を超えるLOC100292680増加が認められる場合、老化改善可能な被験物質を選択することができる。
Table 1 shows the results of the extract exceeding the expression level of LOC1002680 before addition of the test substance.
From Table 1, by adding extracts of 14 kinds of plants such as aloe, age, oxon, auren, raspberry, gennoshouko, birch, squirrel, camellia, spruce, butcher bloom, button, mandarin orange fruit, and yukinoshita, respectively. It was found that LOC1002680 increased by more than 10% over control.
In particular, 12 types of aloe, age, orange, orange, raspberry, squirrel, camellia, spruce, butcher bloom, buttons, mandarin orange fruit, and yukinoshita have a significant increase in LOC100292680, which is expected to improve cell aging. It was.
Among these 12 species, Mandarin orange fruit, which had the weakest effect of increasing LOC1002680, increased LOC100292680 expression by 17% and increased the average value of LOC100292680, but 13% in Genokosho, where no significant increase was observed Therefore, if an increase in LOC100226880 exceeding 13% is observed, a test substance capable of improving aging can be selected.

従って、本発明のLOC100292680を指標としたスクリーニングにより、新たな皮膚老化抑制素材を探索することが出来る。   Therefore, a new skin aging inhibiting material can be searched for by screening using LOC1002680 of the present invention as an index.

本発明により、LOC100292680を指標として、新たな皮膚老化抑制素材のスクリーニング方法を提供できる。   INDUSTRIAL APPLICABILITY According to the present invention, a new screening method for a skin aging inhibiting material can be provided using LOC1002680 as an index.

Claims (3)

LOC100292680の発現量が、被験物質を添加しなかった細胞におけるLOC100292680の発現量と、被験物質を添加した細胞におけるLOC100292680の発現量を比較して、発現量が増加した被験物質を選択するステップ、を含む、皮膚老化抑制素材のスクリーニング方法。   Comparing the expression level of LOC100292680 in a cell to which the test substance is not added with the expression level of LOC100292680 in the cell to which the test substance is added, and selecting the test substance having an increased expression level. A screening method for a material for inhibiting skin aging. 被験物質を添加することにより添加しない場合に比べ、LOC100292680の発現量が13%を超えた場合、老化改善効果を有すると判断することを特徴とする、皮膚老化抑制素材のスクリーニング方法。   A screening method for a skin aging-suppressing material, characterized in that, when the expression level of LOC100226880 exceeds 13% as compared with the case where it is not added by adding a test substance, it is judged to have an aging improving effect. 前記皮膚老化抑制素材が、シワ防止、たるみ防止、ハリの低下防止、弾力性の低下防止、きめの喪失の防止及び、くすみ防止からなる群から選択される1種以上の効果を有することを特徴とする、請求項1又は請求項2に記載のスクリーニング方法。   The skin aging inhibiting material has one or more effects selected from the group consisting of prevention of wrinkles, sagging, prevention of reduction of elasticity, prevention of reduction of elasticity, prevention of loss of texture, and prevention of dullness. The screening method according to claim 1 or 2.
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