JP2016038330A - Treatment device and treatment method - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、処理対象を処理液に浸漬して処理する処理装置、及びそのような処理装置を用いた処理方法に関する。 The present invention relates to a processing apparatus for immersing a processing target in a processing solution and a processing method using such a processing apparatus.
理化学試料分析、生体試料の顕微鏡観察等には、生物の組織片から作成された組織標本が用いられる。例えば、生物の組織片から顕微鏡観察用の組織標本を作成する場合、組織片を薬液に浸漬し、「固定」、「脱脂」、「脱水」、「脱灰」、「置換」、「パラフィン浸透」等の各工程を順次実施する処理を行い、更に「包埋」等の処理を実施する。 Tissue specimens prepared from biological tissue pieces are used for physical and chemical sample analysis, microscopic observation of biological samples, and the like. For example, when preparing a tissue specimen for microscopic observation from a tissue piece of a living organism, immerse the tissue piece in a chemical solution, and then fix, degrease, dehydrate, decalcify, replace, paraffin permeate ”And the like are sequentially performed, and further“ embedding ”and the like are performed.
固定とは、生物から採取した組織片を自己分解、腐敗等の劣化から保護するための化学処理であり、組織片をPFA(パラフォルムアルデヒド)等の薬液に浸漬することにより行われる。 Fixing is a chemical treatment for protecting tissue pieces collected from living organisms from degradation such as autolysis and decay, and is performed by immersing the tissue pieces in a chemical solution such as PFA (paraformaldehyde).
脱脂とは、組織片に含まれる脂肪分を除去するための処理であり、組織片をエタノール等の薬液に浸漬することにより行われる。脱水とは、組織片に含まれる水分を除去するための処理であり、組織片をエタノール等の薬液に浸漬することにより行われる。脱脂及び脱水は、いずれも組織片をエタノールに浸漬する処理であるので、一度の処理で脱脂及び脱水を行うことも可能である。 Degreasing is a process for removing fat contained in a tissue piece, and is performed by immersing the tissue piece in a chemical solution such as ethanol. Dehydration is a process for removing moisture contained in a tissue piece, and is performed by immersing the tissue piece in a chemical solution such as ethanol. Since degreasing and dehydration are both treatments in which a tissue piece is immersed in ethanol, degreasing and dehydration can be performed by a single treatment.
脱灰とは、組織を柔らかくするための処理であり、組織片をEDTA(エチレンジアミン四酢酸)等の薬液に浸漬することにより行われる。 Decalcification is a treatment for softening the tissue, and is performed by immersing the tissue piece in a chemical solution such as EDTA (ethylenediaminetetraacetic acid).
置換とは、組織片に浸透したエタノール等の薬液を、パラフィン及びエタノールの双方と親和性のあるキシレン等の中間剤により置換する処理である。 The replacement is a treatment in which a chemical solution such as ethanol that has permeated into the tissue piece is replaced with an intermediate agent such as xylene that is compatible with both paraffin and ethanol.
パラフィン浸透とは、組織片を液状のパラフィン等の包埋剤に浸漬し、組織内にパラフィンを浸透させる処理である。 Paraffin permeation is a treatment in which a tissue piece is immersed in an embedding agent such as liquid paraffin to allow the paraffin to permeate into the tissue.
包埋とは、組織片を所定の枠に入れて固めたパラフィンブロックを生成する処理である。 Embedding is a process of generating a paraffin block in which a tissue piece is put in a predetermined frame and hardened.
このように組織片を薬液に浸漬させる処理では、効率的に薬液を組織片に浸透させることが重要となる。効率的に薬液を組織片に浸透させる方法としては、処理槽内に収納したマグネットスターラーにより攪拌する方法、処理槽自体を回転させる方法等の攪拌方法を挙げるでき、また、超音波、加減圧、加温等の手段を用いて浸透効率を高める方法を挙げることができる。 Thus, in the process of immersing the tissue piece in the chemical solution, it is important to efficiently infiltrate the chemical solution into the tissue piece. Examples of a method for efficiently infiltrating a chemical solution into a tissue piece include a stirring method such as a method of stirring with a magnetic stirrer housed in a processing tank, a method of rotating the processing tank itself, etc. A method of increasing the permeation efficiency using a means such as heating can be mentioned.
また、特許文献1には、薬液の給排液を繰り返す方法が開示されている。
しかしながら、組織片に薬液を浸透させる各種処理においては、処理時間が長時間に及ぶ場合があるという問題がある。時間短縮のためには、効率的に薬液を組織片に浸透させるべく攪拌が重要となるが、上述したマグネットスターラーを用いた方法では、充分な攪拌ができないため時間短縮効果は低い。また、処理槽自体を回転する方法では、処理槽の中心付近での攪拌が弱く薬液の浸透効果を高めることができないため、時間短縮効果は低い。さらに、特許文献1に開示されている方法は、給排液によって攪拌効果を向上させることができるが、処理時間の大幅な短縮は難しい。
However, in various treatments in which a chemical solution is infiltrated into a tissue piece, there is a problem that the treatment time may take a long time. In order to shorten the time, stirring is important in order to efficiently infiltrate the chemical solution into the tissue piece. However, the method using the magnetic stirrer described above has a low time shortening effect because sufficient stirring cannot be performed. Further, in the method of rotating the treatment tank itself, the stirring effect near the center of the treatment tank is weak and the chemical penetration effect cannot be enhanced, so the time shortening effect is low. Furthermore, the method disclosed in
本発明は斯かる事情に鑑みてなされたものであり、処理槽内に処理対象及び該処理対象に浸透させる処理液を収容した状態で、処理槽の自転及び公転を行うことにより、処理時間を短縮する処理装置の提供を目的とする。 The present invention has been made in view of such circumstances, and the processing time is reduced by performing rotation and revolution of the processing tank in a state where the processing target and the processing liquid that permeates the processing target are contained in the processing tank. An object is to provide a processing apparatus that shortens the time.
また、本発明は、本発明に係る処理装置を用いた処理方法の提供を他の目的とする。 Another object of the present invention is to provide a processing method using the processing apparatus according to the present invention.
上記課題を解決するために、本発明に係る処理装置は、処理対象を処理液で処理する処理装置であって、前記処理対象及び前記処理液を収容可能な処理槽と、前記処理槽を自転軸を中心に自転させる自転駆動部と、前記処理槽を前記自転軸と異なる公転軸を中心に公転させる公転駆動部とを備えることを特徴とする。 In order to solve the above-described problems, a processing apparatus according to the present invention is a processing apparatus that processes a processing target with a processing liquid, the processing tank capable of storing the processing target and the processing liquid, and a rotation of the processing tank. A rotation drive unit that rotates about an axis, and a revolution drive unit that revolves the processing tank around a revolution axis different from the rotation axis are provided.
また、本発明に係る処理装置は、前記処理槽内に、前記処理対象を保持可能な保持部を更に備えることを特徴とする。 The processing apparatus according to the present invention further includes a holding unit capable of holding the processing target in the processing tank.
また、本発明に係る処理装置は、前記処理対象を収容して保持可能な保持具と、前記処理槽の内壁に、前記保持具を固定可能な固定部とを更に備えることを特徴とする。 In addition, the processing apparatus according to the present invention further includes a holder that can accommodate and hold the processing target, and a fixing portion that can fix the holder to an inner wall of the processing tank.
さらに、本発明に係る処理方法は、処理対象を処理液で処理する処理装置を用いた処理方法であって、前述の処理装置を用い、前記処理槽内に収容した前記処理液で、前記処理対象を、前記自転駆動部による前記処理槽の自転及び前記公転駆動部による前記処理槽の公転により、処理する処理手順を行うことを特徴とする。 Furthermore, the processing method according to the present invention is a processing method using a processing apparatus for processing a processing target with a processing liquid, and the processing liquid stored in the processing tank using the processing apparatus described above, A processing procedure for processing a target by the rotation of the processing tank by the rotation driving unit and the revolution of the processing tank by the revolution driving unit is performed.
また、本発明に係る処理方法は、前記処理対象は、生物の組織片であることを特徴とする。 The processing method according to the present invention is characterized in that the processing target is a biological tissue piece.
また、本発明に係る処理方法は、前記処理手順による処理は、前記処理対象内に前記処理液を浸透させることで前記処理対象を処理することを特徴とする。 Moreover, the processing method according to the present invention is characterized in that the processing according to the processing procedure processes the processing target by infiltrating the processing liquid into the processing target.
また、本発明に係る処理方法は、前記処理手順による処理は、前記処理対象を劣化から化学的に保護する処理、前記処理対象内のカルシウム分を除去する処理、前記処理対象内の水分を除去する処理、前記処理対象内の脂肪分を除去する処理、前記処理対象内のアルコール分を他の液体に置換する処理、前記処理対象に包埋剤を浸透させる処理のうちの一又は複数の処理であることを特徴とする。 Further, in the treatment method according to the present invention, the treatment according to the treatment procedure includes a treatment for chemically protecting the treatment object from deterioration, a treatment for removing calcium in the treatment object, and removal of moisture in the treatment object. One or a plurality of processes: a process for removing fat in the process target, a process for replacing the alcohol content in the process target with another liquid, and a process for infiltrating the embedding agent into the process target It is characterized by being.
また、本発明に係る処理方法は、前記処理手順による一又は複数の処理は、組織標本作製工程のうち、薄切工程の前処理として行われることを特徴とする。 The processing method according to the present invention is characterized in that one or a plurality of processes according to the processing procedure is performed as a pre-process of a slicing process in the tissue specimen preparation process.
したがって、本発明では、攪拌効果を高めることができる。 Therefore, in the present invention, the stirring effect can be enhanced.
本発明に係る処理装置及び処理方法は、処理槽内に処理対象及び該処理対象に浸透させる処理液を収容する。そして、処理槽を自転駆動すると共に公転駆動して、攪拌効果を高める。これにより、本発明は、処理に要する時間を短縮することが可能である等、優れた効果を奏する。 The processing apparatus and the processing method according to the present invention contain a processing target and a processing liquid that permeates the processing target in a processing tank. Then, the processing tank is driven to rotate and revolved to enhance the stirring effect. Thereby, this invention has the outstanding effects, such as being able to shorten the time which processing requires.
以下、本発明の実施形態について詳述する。なお、以下の実施形態は、本発明を具現化した一例であって、本発明の技術範囲を限定する性格のものではない。 Hereinafter, embodiments of the present invention will be described in detail. The following embodiment is an example embodying the present invention, and is not intended to limit the technical scope of the present invention.
本発明は、処理対象を処理液に浸漬して処理する技術に関する。本発明において処理対象とは、例えば、ヒト、ブタ等の生物(動植物)の組織片(肝臓等の臓器、骨、歯等の組織等)である。処理とは、組織片を処理液に浸漬して行う様々な工程であり、処理対象を劣化から化学的に保護する固定処理、処理対象内の脂肪分を除去する脱脂処理、処理対象内の水分を除去する脱水処理、処理対象内のカルシウム分を除去する脱灰処理、処理対象内のアルコール分を他の液体に置換する置換処理、処理対象にパラフィン等の包埋剤を浸透させるパラフィン浸透処理等の処理を示す。 The present invention relates to a technique for immersing a processing target in a processing solution. In the present invention, the treatment target is, for example, a tissue piece (an organ such as a liver, a tissue such as a bone or a tooth) of a living organism (animal or plant) such as a human or a pig. Treatment is various processes performed by immersing a tissue piece in a treatment liquid, fixing treatment for chemically protecting the treatment target from deterioration, degreasing treatment for removing fat in the treatment target, moisture in the treatment target Dehydration treatment to remove the calcium, decalcification treatment to remove the calcium content in the treatment object, substitution treatment to replace the alcohol content in the treatment object with other liquid, paraffin infiltration treatment to infiltrate the embedding agent such as paraffin into the treatment object Etc. are shown.
各処理において、処理液には下記のような薬液が用いられる。固定処理には、4%PFA(パラフォルムアルデヒド)、10%ホルマリン、10%中性緩衝ホルマリン、組織用迅速固定液(倉敷紡績株式会社製スーパーフィックス KY−500)等の薬液が用いられる。脱脂処理には、エタノール、キシレン、エタノール/キシレン(1:1)混合溶液、クロロホルム等の薬液が用いられる。脱水処理には、エタノール、メタノール、プロパノール等の薬液が用いられる。脱灰処理には、EDTA(エチレンジアミン四酢酸)、脱灰液(株式会社ファルマ製K−CX)、蟻酸、プランクリュクロ液、その他のキレート剤、塩酸等の薬液が用いられる。置換処理には、キシレン、クロロホルム、アセトン等の薬液が用いられる。パラフィン浸透処理には、液状のパラフィン等の薬液が用いられる。 In each treatment, the following chemical solution is used as the treatment solution. For the fixing treatment, a chemical solution such as 4% PFA (paraformaldehyde), 10% formalin, 10% neutral buffered formalin, tissue quick fix solution (Superfix KY-500 manufactured by Kurashiki Boseki Co., Ltd.) is used. For the degreasing treatment, a chemical solution such as ethanol, xylene, ethanol / xylene (1: 1) mixed solution, or chloroform is used. A chemical solution such as ethanol, methanol, or propanol is used for the dehydration treatment. For the decalcification treatment, chemical solutions such as EDTA (ethylenediaminetetraacetic acid), decalcification liquid (K-CX manufactured by Pharma Co., Ltd.), formic acid, plank crukuro liquid, other chelating agents, and hydrochloric acid are used. For the substitution treatment, a chemical solution such as xylene, chloroform, or acetone is used. A liquid chemical such as liquid paraffin is used for the paraffin infiltration treatment.
組織片は、固定、脱脂、脱水、脱灰、置換、パラフィン浸透等の各工程にて処理された後、包埋処理によりパラフィンブロックに成形され、更に薄切されて、理化学試料分析、顕微鏡観察等に用いられる組織標本となる。 The tissue pieces are processed in each process such as fixation, degreasing, dehydration, decalcification, substitution, paraffin infiltration, etc., then formed into paraffin blocks by embedding, further sliced, physicochemical sample analysis, microscopic observation It becomes the tissue specimen used for etc.
<処理装置>
図1は、本発明に係る処理装置1の要部の一例を示す側断面図である。図1は、本発明に係る処理装置1の要部となる可動部分を例示している。処理装置1は、処理対象及び処理液を収容可能な複数の処理槽10を備えている。各処理槽10は、上部が開口した有底円筒状をなし、開口部は、蓋体10aにより閉じられている。各処理槽10は、処理装置1の中心に配設された軸体11から略水平方向へ放射状に延びる複数のアーム体12の先端部に夫々配設された収納体13に、脱離可能に収納されている。各処理槽10は、収納体13に収納することにより、開口部が上方から軸体11側に向けて傾くように配置される。
<Processing device>
FIG. 1 is a side sectional view showing an example of a main part of a
各収納体13は、モータを用いた自転駆動部14を備えており、自転駆動部14は、収納体13に収納している処理槽10の中心軸を回転軸として、処理槽10を回転駆動することができる。図1に示す例では、自転駆動部14の回転軸及び処理槽10の中心軸が直線上に位置しており、自転駆動部14の駆動により、処理槽10は、その中心軸を自転軸として自転することになる。
Each
アーム体12は、軸体11により回転自在に軸支されており、モータを用いた公転駆動部15により、軸体11を回転軸として回転駆動される。公転駆動部15がアーム体12を回転駆動することにより、各処理槽10は、軸体11を公転軸として公転することになる。
The
即ち、処理槽10は、自転軸を中心に自転させることが可能であり、かつ自転軸と異なる公転軸を中心に公転させることが可能である。処理槽10を自転及び公転させることにより、処理槽10内に収容された処理液の攪拌効率を向上させることが可能となる。処理槽10内に収容された処理液の攪拌効率が向上することにより、処理対象に対する処理液の浸透速度が向上する。
That is, the
また、処理対象は、保持具16に保持され、固定部17により処理槽10の内壁に固定された状態で、処理槽10の自転及び公転が行われる。これにより、例えば、処理対象を固定せずに攪拌した場合と比べ、浸透速度を向上させることができる。
The processing object is held by the
また、図1に示す処理装置1の要部は、密閉可能な筐体内に収納されており、筐体内には冷気を噴出する冷却部18が設けられているため、処理槽10内の温度上昇を抑制することが可能である。なお、収納体13を熱伝導率の高い材料で形成して放熱部を設けることにより、又は収納体13内部に冷媒を通すことにより、収納体13自体を冷却部18とすることも可能である。
Further, the main part of the
次に、処理対象の固定方法について説明する。図2は、本発明に係る処理装置1が備える保持具16の一例を示す外観図である。図2(a)は平面図であり、図2(b)は側面図である。保持具16は、扁平な直方体状の箱体であり、上面及び底面が開閉可能に形成されているため、例えば、上面を開くことにより、内部に組織片等の処理対象を収容することができる。内部に処理対象を収容した保持具16は、上面を閉じることにより、処理対象を保持することができる。保持具16の上面及び底面は、メッシュ状の通液孔が開設されているため、処理槽10内に保持具16及び処理液を収容することにより、処理液は、上面又は底面の通液孔を透過し、処理対象に浸透する。保持具16の前面(図2において右側)は、斜め上方を向くように傾斜がつけられているため、使用者が前面を視認し易くなっており、前面にサンプル名の記入等の情報表示を行うことができる。
Next, a method for fixing the processing target will be described. FIG. 2 is an external view showing an example of the
また、図2に示す例では、保持具16の底面に、保持具16を処理槽10の内壁に固定する固定部17として吸盤が取り付けられており、保持具16は、固定部17により処理槽10の内壁に着脱可能に固定される。なお、図2では、固定部17として吸盤を用いた例を示しているが、保持具16を処理槽10内に係止するように固定しても良く、処理槽10内で把持するように固定しても良い。ここで処理槽10の内壁とは、処理槽10の側面に限らず、処理槽10の底面、蓋体10aの裏側等をも含む内側の部位全体を示す。即ち、保持具16を処理槽10の内壁に着脱可能に固定することができるのであれば、処理槽10の内壁及び保持具16を適宜成形して固定部17を形成することが可能である。例えば、蓋体10aの裏側に処理槽10の内部方向に伸びるアーム状の固定部17を配設し、その先端に係支部を設けて保持具16を係支して固定するようにしても良い。また、複数の保持具16を処理槽10の内側に固定することができるような構造であっても良い。また、保持具16の例としては、処理槽10の内径より若干小さい大きさで、複数の処理対象を収容可能に内部が複数の領域に仕切られた籠状のものを用いても良く、これを処理槽10の内壁に押し当てるように接触させ固定しても良い。また、処理対象を保持可能な保持部を処理槽10の内壁に適宜形成し、この保持部の中に処理対象を収容することで処理対象を保持するようにしても良い。即ち、保持部は、保持具16を処理槽10の内側に一体化させた構成である。このような保持部は、例えば、処理槽10の内壁面に、処置対象を収容するポケットとして形成し、処理対象を挿入する挿入口を開閉する開閉蓋を設け、処理液に接する部位にメッシュ状の通液孔を開設した形状として具現化される。
In the example shown in FIG. 2, a suction cup is attached to the bottom surface of the
<処理方法>
次に本発明に係る処理方法について説明する。ここでは、処理対象として生物の組織片、例えば豚の肝臓組織を様々な処理液に浸漬し、組織標本を作成する場合の例について説明する。
<Processing method>
Next, the processing method according to the present invention will be described. Here, an example in which a tissue specimen is prepared by immersing a biological tissue piece as a processing target, for example, a pig liver tissue in various processing solutions will be described.
図3A乃至図3Eは、本発明に係る処理方法において、処理装置1による処理の前段階となる前処理の一例を概念的に示す説明図である。図3Aは、一次固定と呼ばれる固定処理において、薬瓶内に薬液を収容し、組織片Sを薬液に浸漬した状態を示している。一次固定は、組織片Sを採取後、速やかに、4%PFA、10%ホルマリン、10%中性緩衝ホルマリン、組織用迅速固定液等の薬液に浸漬する処理である。
3A to 3E are explanatory views conceptually showing an example of pre-processing that is a pre-stage of processing by the
図3Bは、組織片Sを切断するトリミングを概念的に示している。トリミングは、一次固定により薬液に浸漬した組織片Sを取り出し、取り出した組織片Sを厚さ5mm以内に薄切し、更に、図3B中実線で示すように保持具16に収納可能な大きさに切断する処理である。
FIG. 3B conceptually shows trimming for cutting the tissue piece S. In the trimming, the tissue piece S immersed in the chemical solution by primary fixation is taken out, the taken tissue piece S is sliced within 5 mm, and the size can be stored in the
トリミングされた組織片Sは、図3Cに示すように保持具16に移され、図3Dに示すように、保持具16内に収容される。そして、二次固定と呼ばれる固定処理を行う。二次固定は、保持具16内に収容された状態で組織片Sを4%PFA、10%ホルマリン、10%中性緩衝ホルマリン、組織用迅速固定液等の薬液に浸漬する処理である。
The trimmed tissue piece S is transferred to the
以上のように一次固定及び二次固定として行われる固定処理は、処理対象である組織片Sを自己分解、腐敗等の劣化から保護するための化学処理である。 As described above, the fixation process performed as the primary fixation and the secondary fixation is a chemical process for protecting the tissue piece S to be processed from deterioration such as self-decomposition and decay.
固定処理後の組織片Sに対しては、組織片Sを保持具16に収容した状態で、EDTA、脱灰液、蟻酸、プランクリュクロ液、その他のキレート剤、塩酸等の薬液に浸漬する脱灰処理が行われる。脱灰処理は、骨、軟骨等のカルシウム分を除去して組織を柔らかくする処理である。脱灰処理は、必要に応じて、薬液を毎日交換しながら数日かけて行われる。脱灰処理終了後の組織片Sは、針等の器具で刺したときに抵抗なく貫くことが可能であり、残存した骨についても曲げることが可能な状態となる。なお、脱灰処理は、気体が発生するため、通気口を設けて密閉しない状態で行われる。また、組織片Sに脂肪分が多い場合、脱灰の前に脱脂処理が行われる。
The tissue piece S after the fixing treatment is immersed in a chemical solution such as EDTA, decalcification liquid, formic acid, plank crukuro liquid, other chelating agents, hydrochloric acid or the like while the tissue piece S is accommodated in the
以上のように、前処理として固定処理及び脱灰処理を行ったのち、図3Eに示すように、組織片Sは保持具16にて保持された状態で、容器内に固定される。組織片Sを保持した保持具16を固定する容器とは、処理槽10として処理装置1に収納可能な容器であり、保持具16は、固定部17により容器(処理槽10)の内壁に固定される。組織片Sを収容した保持具16を固定した容器(処理槽10)内には、処理液として後述する薬液が注入される。そして、容器の開口部は、蓋体10aにて閉じられ、処理装置1内に処理槽10として収納される。
As described above, after performing the fixing process and the decalcification process as the pretreatment, the tissue piece S is fixed in the container while being held by the
処理装置1を用いた処理方法として、先ず、脂肪組織の脱脂処理が行われる。脱脂処理は、処理液として、エタノール、キシレン、エタノール/キシレン(1:1)混合溶液、クロロホルム等の薬液を処理槽10内に注入し、組織片Sに浸透させる処理である。より具体的には、処理槽10内に収容した薬液に浸漬した状態で固定した組織片Sを、処理装置1が備える自転駆動部14による処理槽10の自転及び公転駆動部15による処理槽10の公転により攪拌し、薬液を組織片Sに浸透させ脂肪分を除去する処理である。
As a processing method using the
脱脂処理にて脂肪分を予め取り除くことにより、以降に行うアルコール脱水の効果を向上させることができる。また、脂肪分を予め取り除くことにより、後述するパラフィン浸透等の処理において、脂肪がパラフィンに溶け出して組織片Sの過伸展が発生することを防止し、後述する薄切サンプルを安定化させることができる。 By removing fat in advance by degreasing, the effect of alcohol dehydration performed thereafter can be improved. In addition, by removing the fat in advance, it is possible to prevent the fat from being dissolved into paraffin and causing excessive extension of the tissue piece S in the treatment such as paraffin infiltration described later, and to stabilize the sliced sample described later. Can do.
次に、処理装置1を用いた処理方法として、アルコールによる脱水処理が行われる。アルコール脱水処理は、処理液として、エタノール、メタノール、プロパノール等のアルコールを用いた薬液を処理槽10内に注入し、組織片Sに浸透させる処理である。より具体的には、処理槽10内に収容した薬液に浸漬した状態で固定した組織片Sを、処理装置1が備える自転駆動部14による処理槽10の自転及び公転駆動部15による処理槽10の公転により攪拌し、薬液を組織片Sに浸透させ水分を除去する処理である。
Next, as a treatment method using the
アルコールによる脱水処理は、組織片S内の水分を完全に除去すべく、薬液を新しいものに更新しながら複数回行われる。例えば、1回目の脱水処理を70%濃度の薬液で行い、2〜6回目の処理を100%濃度の薬液で行う。なお、薬液としてエタノールを用いることにより、脱脂処理及び脱水処理を兼ねることも可能である。 The dehydration treatment with alcohol is performed a plurality of times while the chemical solution is updated to a new one in order to completely remove the water in the tissue piece S. For example, the first dehydration process is performed with a chemical solution of 70% concentration, and the second to sixth processes are performed with a chemical solution of 100% concentration. In addition, it is also possible to serve as a degreasing process and a dehydration process by using ethanol as a chemical | medical solution.
次に、処理装置1を用いた処理方法として、中間剤による置換処理が行われる。中間剤置換処理は、処理液として、キシレン、クロロホルム、アセトン等の薬液を処理槽10内に注入し、組織片Sに浸透させる処理である。より具体的には、処理槽10内に収容した薬液に浸漬した状態で固定した組織片Sを、処理装置1が備える自転駆動部14による処理槽10の自転及び公転駆動部15による処理槽10の公転により攪拌し、中間剤としての薬液を組織片Sに浸透させ組織片S内に浸透しているアルコール分を中間剤(薬液)に置換する処理である。
Next, as a processing method using the
中間剤による置換処理は、組織片S内のアルコール分を完全に中間剤に置換すべく、中間剤を新しいものに更新しながら複数回行われる。例えば、都度、中間剤を入れ替え、置換処理を3回行うことにより、アルコール分を中間剤に置換する。 The replacement process with the intermediate agent is performed a plurality of times while the alcohol is replaced with a new one in order to completely replace the alcohol in the tissue piece S with the intermediate agent. For example, the alcohol is replaced with the intermediate agent by replacing the intermediate agent each time and performing the replacement process three times.
次に、処理装置1を用いた処理方法として、パラフィン浸透処理が行われる。パラフィン浸透処理は、処理液として、液状のパラフィン等の包埋剤を用いた薬液を処理槽10内に注入し、組織片Sに浸透させる処理である。より具体的には、処理槽10内に収容した薬液に浸漬した状態で固定した組織片Sを、処理装置1が備える自転駆動部14による処理槽10の自転及び公転駆動部15による処理槽10の公転により攪拌し、薬液を組織片Sに浸透させ組織片S内に浸透している中間剤をパラフィンに置換する処理である。
Next, paraffin infiltration processing is performed as a processing method using the
パラフィン浸透処理は、組織片S内の中間剤を完全にパラフィンに置換すべく、パラフィン(薬液)を新しいものに更新しながら複数回行われる。例えば、都度、パラフィンを入れ替え、パラフィン浸透処理を3回行うことにより、中間剤をパラフィンに置換する。なお、パラフィンは、液体状態を維持する必要があるため、処理装置1に加温機構を適宜設け、70℃等の所定温度に保持して処理が行われる。ただし、組織片Sは熱によるダメージを受けやすいため、浸透処理1回当たりの攪拌時間は抑えることが好ましく、従って処理時間を短くし、処理回数を増やすことが望ましい。
The paraffin infiltration treatment is performed a plurality of times while the paraffin (chemical solution) is updated to a new one in order to completely replace the intermediate agent in the tissue piece S with paraffin. For example, paraffin is replaced each time, and the intermediate agent is replaced with paraffin by performing paraffin permeation treatment three times. In addition, since it is necessary for paraffin to maintain a liquid state, the
以上のように、固定処理及び脱灰処理を含む前処理後、処理装置1を用いて、脱脂処理、脱水処理、置換処理、パラフィン浸透処理等の処理による各種工程を経た組織片Sを、パラフィンに包埋することにより、組織標本用のパラフィンブロックを作成することができる。
As described above, after the pretreatment including the fixing treatment and the deashing treatment, the tissue piece S that has undergone various processes such as the degreasing treatment, the dehydration treatment, the replacement treatment, and the paraffin infiltration treatment using the
<包埋処理>
次に本発明に係る処理方法を経た組織片Sをパラフィンに包埋してパラフィンブロックを作成する包埋処理について説明する。図4は、本発明に係る処理方法を経た組織片Sに対する包埋処理に用いられる包埋トレイの一例を示す外観図である。図4(a)は平面図であり、図4(b)は側面図である。包埋トレイは、平面視長方形状をなし、上側が開放された皿形処理槽である。包埋トレイの下部の長辺及び短辺の長さは一定であり、上部は漸次拡開した形状となっている。また、包埋トレイの上端は、保持具16を嵌め込むことが可能な大きさ及び形状の枠に形成されている。
<Embedding process>
Next, the embedding process in which the tissue piece S that has undergone the processing method according to the present invention is embedded in paraffin to create a paraffin block will be described. FIG. 4 is an external view showing an example of an embedding tray used for embedding a tissue piece S that has undergone the processing method according to the present invention. 4A is a plan view, and FIG. 4B is a side view. The embedding tray is a dish-shaped processing tank having a rectangular shape in plan view and having an open upper side. The length of the long side and the short side of the lower part of the embedding tray is constant, and the upper part has a gradually expanded shape. Further, the upper end of the embedding tray is formed in a frame having a size and a shape in which the
図5A乃至図5Fは、本発明に係る処理方法を経た組織片Sを包埋する包埋処理の一例を示す説明図である。包埋処理は、図5Aに示すように、包埋トレイ内に組織片Sを載置し、図5Bに示すように、組織片Sを載置した包埋トレイに液状のパラフィンを注入する。 5A to 5F are explanatory views showing an example of an embedding process for embedding the tissue piece S that has undergone the processing method according to the present invention. In the embedding process, the tissue piece S is placed in the embedding tray as shown in FIG. 5A, and liquid paraffin is injected into the embedding tray on which the tissue piece S is placed as shown in FIG. 5B.
さらに、図5Cに示すように、包埋トレイの開放部に保持具16を嵌合させる。保持具16は、下面を外した状態で包埋トレイに嵌合し、包埋トレイの上側の開放部を塞ぐ。そして、図5Dに示すように、液状のパラフィンを包埋トレイに注入する。保持具16の上面は、メッシュ状に形成されているため、保持具16を嵌合させた状態でパラフィンを包埋トレイに注入することができる。その後、包埋トレイを冷却し、注入したパラフィンを固化させる。
Furthermore, as shown in FIG. 5C, the holding
パラフィンが固化した後、図5Eに示すように、保持具16を嵌合させた状態で包埋トレイを上下反転させ、図5Fに示すように、包埋トレイを外して、組織片Sが包埋されたパラフィンブロックを取り出す。取り出したパラフィンブロックは、薄切することにより、理化学試料分析、顕微鏡観察等に用いられる組織標本となる。
After the paraffin has solidified, as shown in FIG. 5E, the embedding tray is turned upside down with the
以上のように、本発明に係る処理方法では、組織片Sから組織標本を作製する際に、薄切工程の前処理として、本発明に係る処理装置1を用いて、脱脂処理、脱水処理、置換処理、パラフィン浸透処理等の工程を実施する。本発明の処理装置1を用いた処理方法では、自転及び公転により攪拌効率を高めることができるので、処理時間の短縮等の効果を得ることができるとともに、組織内部まで均一に薬液を浸透させることができるので、薄切工程において良好な薄切結果を得ることができる。
As described above, in the treatment method according to the present invention, when preparing a tissue specimen from the tissue piece S, as a pretreatment of the slicing process, using the
<実施例>
次に、実施例を挙げて本発明に係る処理方法による効果等の実験結果について説明する。表1は、本発明に係る処理装置1を用いた脱水処理の実施例を示している。また、従来の方法で脱水処理を行った場合の比較例を示している。
<Example>
Next, experimental results such as effects by the processing method according to the present invention will be described with examples. Table 1 shows an example of the dehydration process using the
上記実施例及び比較例は、400mL容器を用いた処理槽に200mLの薬液を収容して行ったものである。処理槽として用いる容器のサイズは、φ78×H100mmである。薬液は、特級試薬エタノール99.5%を、超純水で希釈したものを用い、希釈後の濃度を容量%で示している。処理時間は、攪拌開始からの時間であり、処理の終点は、組織の外観及び液相の色に基づいて目視にて判断した。具体的には、組織の外観及び液相の色を目視し、組織が白っぽく変色したり、液相が黄色く変色したりという現象を視認できた場合に終点に到達したと判断した。なお、上記実施例は、本発明に係る処理装置1により、公転速度400(rpm)、自転速度400(rpm)で攪拌したものである。上記実施例及び比較例による結果を比較すると、本発明を適用した実施例は、比較例と比べて大幅に時間を短縮できていることが明らかである。
The said Example and a comparative example accommodated 200 mL of chemical | medical solutions in the processing tank using a 400 mL container. The size of the container used as the treatment tank is φ78 × H100 mm. As the chemical solution, a reagent obtained by diluting 99.5% of the special grade reagent ethanol with ultrapure water is used, and the concentration after dilution is indicated by volume%. The treatment time was the time from the start of stirring, and the end point of the treatment was judged visually based on the appearance of the tissue and the color of the liquid phase. Specifically, the appearance of the tissue and the color of the liquid phase were visually observed, and it was determined that the end point had been reached when the phenomenon that the tissue turned whitish or the liquid phase turned yellow was visually recognized. In addition, the said Example stirred by the revolution speed 400 (rpm) and the autorotation speed 400 (rpm) with the
また、上記実施例において、それぞれの攪拌の前後で液温を測定した結果を表2に示す。 Moreover, in the said Example, the result of having measured the liquid temperature before and behind each stirring is shown in Table 2.
上記実施例は、表1に示した条件で、冷却部18による冷却を行わずに攪拌を行った結果である。攪拌に起因すると推定される液温の上昇がみられるが、いずれも処理に支障を来す程度ではない。なお、冷却部18による冷却を行い、液温の上昇を抑制した状態で攪拌することで、液温の上昇を抑制し、液温を安定化させることができる。これにより、自転速度及び公転速度を高速化し、更なる処理時間の短縮を見込むことができる。
The said Example is the result of having stirred, without performing the cooling by the cooling
本発明は、以上説明した実施の形態に限定されるものではなく、他のいろいろな形態で実施することが可能である。そのため、かかる実施の形態はあらゆる点で単なる例示にすぎず、限定的に解釈してはならない。本発明の範囲は請求の範囲によって示すものであって、明細書本文には、なんら拘束されない。さらに、請求の範囲の均等範囲に属する変形や変更は、全て本発明の範囲内のものである。 The present invention is not limited to the embodiment described above, and can be implemented in various other forms. Therefore, such an embodiment is merely an example in all respects and should not be interpreted in a limited manner. The scope of the present invention is shown by the scope of claims, and is not restricted by the text of the specification. Further, all modifications and changes belonging to the equivalent scope of the claims are within the scope of the present invention.
例えば、上記実施形態では、脱脂処理、脱水処理、置換処理及びパラフィン浸透処理を本発明に係る処理装置1にて行う形態を示したが、本発明はこれに限るものでは無く、本発明に係る処理装置1により、一連の処理のうち、一又は複数の工程を実施することができる。例えば、本発明に係る処理装置1にて、固定処理及び脱灰処理を実施するようにしても良く、また、置換処理及びパラフィン浸透処理を従来の方法にて実施するようにしても良い。
For example, in the said embodiment, although the form which performs a degreasing process, a dehydration process, a substitution process, and a paraffin infiltration process with the
1 処理装置
10 処理槽
10a 蓋体
11 軸体
12 アーム体
13 収納体
14 自転駆動部
15 公転駆動部
16 保持具
17 固定部
18 冷却部
A1 自転軸
A2 公転軸
S 組織片
DESCRIPTION OF
Claims (8)
前記処理対象及び前記処理液を収容可能な処理槽と、
前記処理槽を自転軸を中心に自転させる自転駆動部と、
前記処理槽を前記自転軸と異なる公転軸を中心に公転させる公転駆動部と
を備えることを特徴とする処理装置。 A processing apparatus for processing a processing target with a processing liquid,
A treatment tank capable of accommodating the treatment object and the treatment liquid;
A rotation drive unit that rotates the treatment tank around a rotation axis;
A revolving drive unit for revolving the processing tank around a revolving axis different from the revolving axis.
前記処理槽内に、前記処理対象を保持可能な保持部を更に備える
ことを特徴とする処理装置。 The processing apparatus according to claim 1,
The processing apparatus further comprising a holding unit capable of holding the processing target in the processing tank.
前記処理対象を収容して保持可能な保持具と、
前記処理槽の内壁に、前記保持具を固定可能な固定部と
を更に備える
ことを特徴とする処理装置。 The processing apparatus according to claim 1,
A holder capable of accommodating and holding the processing object;
The processing apparatus further comprising: a fixing portion capable of fixing the holder to the inner wall of the processing tank.
請求項1乃至請求項3のいずれか1項に記載の処理装置を用い、
前記処理槽内に収容した前記処理液で、前記処理対象を、前記自転駆動部による前記処理槽の自転及び前記公転駆動部による前記処理槽の公転により、処理する処理手順を行うことを特徴とする処理方法。 A processing method using a processing apparatus for processing a processing target with a processing liquid,
Using the processing apparatus according to any one of claims 1 to 3,
A processing procedure for processing the processing target with the processing liquid stored in the processing tank by the rotation of the processing tank by the rotation driving unit and the revolution of the processing tank by the revolution driving unit is performed. Processing method.
前記処理対象は、生物の組織片である
ことを特徴とする処理方法。 The processing method according to claim 4, wherein
The treatment target is a biological tissue piece.
前記処理手順による処理は、
前記処理対象内に前記処理液を浸透させることで前記処理対象を処理する
ことを特徴とする処理方法。 The processing method according to claim 4 or 5, wherein
The processing according to the processing procedure is as follows:
The processing method is characterized in that the processing target is processed by allowing the processing liquid to penetrate into the processing target.
前記処理手順による処理は、
前記処理対象を劣化から化学的に保護する処理、前記処理対象内のカルシウム分を除去する処理、前記処理対象内の水分を除去する処理、前記処理対象内の脂肪分を除去する処理、前記処理対象内のアルコール分を他の液体に置換する処理、前記処理対象に包埋剤を浸透させる処理のうちの一又は複数の処理である
ことを特徴とする処理方法。 The processing method according to claim 6, wherein
The processing according to the processing procedure is as follows:
A process for chemically protecting the processing target from deterioration, a process for removing calcium in the processing target, a process for removing moisture in the processing target, a process for removing fat in the processing target, and the process A processing method comprising: one or a plurality of processes among a process of substituting an alcohol content in a target with another liquid and a process of infiltrating an embedding agent into the process target.
前記処理手順による一又は複数の処理は、組織標本作製工程のうち、薄切工程の前処理として行われる
ことを特徴とする処理方法。 A processing method according to any one of claims 4 to 7,
One or a plurality of processes according to the processing procedure is performed as a pre-process of the slicing process in the tissue specimen preparation process.
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CN109115544A (en) * | 2018-08-02 | 2019-01-01 | 安徽科技学院 | A method of it is sliced using decalcification method production bone tissue |
CN113348355A (en) * | 2019-02-20 | 2021-09-03 | 樱花精机株式会社 | Tissue piece processing device |
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- 2014-08-08 JP JP2014162726A patent/JP2016038330A/en active Pending
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