JP2015083546A - Radioactive labeling agent for inspection/therapy of cancer primary focus/bone metastasis - Google Patents
Radioactive labeling agent for inspection/therapy of cancer primary focus/bone metastasis Download PDFInfo
- Publication number
- JP2015083546A JP2015083546A JP2013221672A JP2013221672A JP2015083546A JP 2015083546 A JP2015083546 A JP 2015083546A JP 2013221672 A JP2013221672 A JP 2013221672A JP 2013221672 A JP2013221672 A JP 2013221672A JP 2015083546 A JP2015083546 A JP 2015083546A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- dota
- rgdfk
- asp
- radiolabeled drug
- radiolabeled
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Abstract
Description
本発明は、癌の原発巣・骨転移の検査・治療用放射性標識薬剤に関する。 The present invention relates to a radiolabeled drug for examining and treating primary cancer lesions and bone metastases.
（放射性標識薬剤）
放射性標識薬剤は、放射性同位元素の核種により標識された化合物を含む薬剤であり、疾患の診断や治療、特に、腫瘍の診断や治療などに利用されている。放射性標識薬剤を特定の組織や細胞に集積させることにより、感度の高い診断や有効な治療を行うことができ、さらには、正常の組織や細胞への副作用を低減することができる。
例えば、腫瘍細胞が臓器や組織に転移し、散在しているような場合でも、正常の組織や細胞に影響を与えることなく、有効な診断や治療が行える。放射性標識薬剤を用いた診断や治療においては、有用な核種の選択や、該薬剤を特定の組織や細胞に集積させるための薬剤設計が行われてきている。
(Radiolabeled drug)
A radiolabeled drug is a drug containing a compound labeled with a radioisotope nuclide, and is used for diagnosis and treatment of diseases, in particular, diagnosis and treatment of tumors. Accumulating a radiolabeled drug in a specific tissue or cell enables highly sensitive diagnosis and effective treatment, and further reduces side effects on normal tissue and cells.
For example, even when tumor cells have spread and scattered in organs or tissues, effective diagnosis and treatment can be performed without affecting normal tissues and cells. In diagnosis and treatment using radiolabeled drugs, selection of useful nuclides and drug design for accumulating the drugs in specific tissues and cells have been performed.
（インテグリン）
腫瘍成長などのいくつかの病理学的過程は、血管形成に関連している。細胞接着用のヘテロ二量体膜貫通糖タンパク質であるインテグリンファミリーにおいて、αvβ3インテグリンは、新生血管のマーカーとなること、並びに、血管形成を調節することが報告されている。さらに、αvβ3インテグリンは、メラノーマ、神経膠芽腫、卵巣癌などの多種にわたる癌の新血管形成中に内皮細胞で高度に発現するが、静止内皮細胞では殆ど発現しないことが知られている。したがって、αvβ3インテグリンは、腫瘍の画像診断及び治療のための重要な標的として関心を集めてきている。αvβ3インテグリンに対して高い親和性のある化合物が多数調査され、開発されてきている。
αvβ3インテグリンの典型的なリガンドとして、αvβ3インテグリンへの親和性が高いことからRGD配列を含む環状ペンタペプチドが研究されている。近年、ポジトロン放出断層撮影（PET）及び単光子放出コンピューター断層撮影（SPECT）画像診断用の放射標識RGDペプチド誘導体が多数報告されている。
(Integrin)
Several pathological processes, such as tumor growth, are associated with angiogenesis. In the integrin family of heterodimeric transmembrane glycoproteins for cell adhesion, α v β 3 integrin has been reported to be a marker for neovascularization and to regulate angiogenesis. In addition, α v β 3 integrin is highly expressed on endothelial cells during neovascularization of a wide variety of cancers such as melanoma, glioblastoma, and ovarian cancer, but is rarely expressed on quiescent endothelial cells. Yes. Thus, α v β 3 integrin has gained interest as an important target for tumor imaging and treatment. Many compounds with high affinity for α v β 3 integrin have been investigated and developed.
As alpha v beta 3 integrin typical ligands, cyclic pentapeptide containing the RGD sequence from the high affinity for alpha v beta 3 integrin have been studied. In recent years, many radiolabeled RGD peptide derivatives for positron emission tomography (PET) and single photon emission computed tomography (SPECT) diagnostic imaging have been reported.
（癌の骨転移）
骨は増殖因子を豊富に含み、よって腫瘍が転移及び増殖しやすい環境である。よって、悪性腫瘍は骨に転移することが多い。悪性腫瘍の初期の骨転移の検査は、治療法及び薬剤の開発と共に、重要である。この数十年間、X線CT 及びMRなど画像診断技術は目覚ましく進歩してきたが、その高感度から核医学骨シンチグラフィが依然として骨転移検出の最適な検査方法である。すなわち、テクネチウム‐ビスフォスフォネート錯体などの骨親和性放射性医薬品は通常、症状やX線画像変化が現れる前に骨格病変に局在化（集積）し、全身の骨病変部位を感度よく検出する。30年にわたり、99mTcとメチレンジホスホン酸塩の錯体（99mTc-MDP）、及び99mTcとヒドロキシメチレンジホスホン酸塩の錯体(99mTc-HMDP)が骨シンチグラフィーの放射性医薬品として広く使用されてきた。
近年、ビスホスホン酸塩分子のみならず酸性アミノ酸もヒドロキシアパタイトへの高い親和性を有し、骨への薬物輸送のキャリアーとして作用することが報告されている。
(Bone metastasis of cancer)
Bone is rich in growth factors and is therefore an environment in which tumors are prone to metastasis and growth. Thus, malignant tumors often metastasize to bone. Examination of early bone metastases of malignant tumors is important along with the development of treatments and drugs. In recent decades, diagnostic imaging techniques such as X-ray CT and MR have made remarkable progress, but because of its high sensitivity, nuclear medicine bone scintigraphy is still the optimal examination method for detecting bone metastases. In other words, osteophilic radiopharmaceuticals such as technetium-bisphosphonate complexes are usually localized (accumulated) to skeletal lesions before symptoms and X-ray image changes appear, and detect bone lesions throughout the body with high sensitivity. . Over 30 years, 99m Tc and methylene diphosphonate complex ( 99m Tc-MDP) and 99m Tc and hydroxymethylene diphosphonate complex ( 99m Tc-HMDP) have been widely used as radiopharmaceuticals for bone scintigraphy. I came.
In recent years, it has been reported that not only bisphosphonate molecules but also acidic amino acids have high affinity for hydroxyapatite and act as carriers for drug transport to bone.
非特許文献１では、「Ga-DOTA-Bn-SCN-HBPを含むシンチグラフィー試薬」を開示している。
しかし、本発明の放射性標識薬剤とは明らかに構成が異なる。
Non-Patent Document 1 discloses “a scintigraphy reagent containing Ga-DOTA-Bn-SCN-HBP”.
However, the configuration is clearly different from the radiolabeled drug of the present invention.
非特許文献２では、「（Asp）6がドラックデリバリーの輸送担体になること」を開示している。
しかし、本発明の放射性標識薬剤とは明らかに構成が異なる。
Non-Patent Document 2 discloses that “(Asp) 6 becomes a transport carrier for drug delivery”.
However, the configuration is clearly different from the radiolabeled drug of the present invention.
特許文献１では、｛標的分子に結合する化合物と結合させたトリサリチルアルジミノメチル エタノール［ｔｒｉ−ｓａｌｉｃｙｌａｌｄｉｍｉｎｏｍｅｔｈｙｌ−ｅｔｈａｎｏｌ、Ｈ３（ｓａｌ）３ＴＡＭＥｏｌ］と、ガリウム６７（ｇａｌｌｉｕｍ−６７、Ｇａ−６７）またはガリウム６８（ｇａｌｌｉｕｍ−６８、Ｇａ−６８）とから形成される錯体構造を有する錯体を含み、標的部位への集積性及び安定性が増加した放射性ガリウム標識薬剤｝を開示している。
しかし、本発明の放射性標識薬剤とは明らかに構成が異なる。
In Patent Document 1, {tri-salicylaldiminomethyl ethanol combined with a compound that binds to a target molecule [tri-salicyldiminomethyl-ethanol, H 3 (sal) 3 TAMEol] and gallium 67 (gallium-67, Ga-67) Alternatively, a radioactive gallium-labeled drug including a complex having a complex structure formed from gallium 68 (gallium-68, Ga-68) and having increased accumulation and stability at a target site is disclosed.
However, the configuration is clearly different from the radiolabeled drug of the present invention.
上記述べたように、多数の放射性標識薬剤が研究、開発されている。しかしながら、癌の原発巣のみならず、骨転移をも同時に検出できる放射性標識薬剤が存在していなかった。 As stated above, many radiolabeled drugs have been researched and developed. However, there has been no radiolabeled drug capable of simultaneously detecting not only the primary cancer focus but also bone metastasis.
本発明は、前記要望に対して、癌の原発巣のみならず、骨転移をも同時に検出できる放射性標識薬剤を提供することを課題とする。 An object of the present invention is to provide a radiolabeled drug capable of simultaneously detecting not only the primary cancer focus but also bone metastasis.
本発明者等は、上記課題を解決すべく鋭意検討した結果、放射性物質を含む配位子−（Asp）n−RGD含有環状ペプチドを含む化合物（参照：図１）が、癌の原発巣のみならず、骨転移をも同時に検出できることを確認して、該化合物を含む放射性標識薬剤を完成した。 As a result of intensive studies to solve the above problems, the present inventors have found that a compound containing a radioactive substance-containing ligand- (Asp) n-RGD-containing cyclic peptide (see FIG. 1) is only the primary lesion of cancer. In addition, it was confirmed that bone metastasis could be detected simultaneously, and a radiolabeled drug containing the compound was completed.
すなわち、本発明は以下からなる。
１．放射性物質を含む配位子−（Asp）n−RGD含有環状ペプチドを含む放射性標識薬剤であって、
n＝5〜25であることを特徴とする放射性標識薬剤。
２．前記放射性物質は、以下のいずれか１から選択される前項１に記載の放射性標識薬剤。
（１）ガリウム
（２）銅
（３）インジウム
（４）イットリウム
（５）テクネチウム
（６）ルテチウム
（７）ビスマス
（８）レ二ウム
３．前記RGD含有環状ペプチドは、以下のいずれか１から選択される前項１又は２に記載の放射性標識薬剤。
（１）c（RGDfK）
（２）c（RGDyK）
（３）c（RGDfV）
（４）c（RGDyV）
４．前記放射性物質はガリウムであることを特徴とする前項１〜３のいずれか１に記載の放射性標識薬剤。
５．前記配位子は、以下のいずれか１から選ばれる前項１〜４のいずれか１に記載の放射性標識薬剤。
（１）1,4,7,10-テトラアザシクロドデカン-1,4,7,10-四酢酸（1,4,7,10-tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid：DOTA）
（２）1,4,7-triazacyclononane-triacetic acid(NOTA)
（３）triazacyclononane-phosphinate(TRAP)
（４）mercaptacetylgycilgycilglycine（MAG3）
（５）tricarbonyl
（６）ジエチレントリアミン五酢酸（DTPA）
６．前記配位子は、DOTAである請求項１〜５のいずれか１に記載の放射性標識薬剤。
７．放射性ガリウムを含むDOTA−（Asp）n−c（RGDfK）を含む放射性標識薬剤であって、
n＝5〜25であることを特徴とする放射性標識薬剤。
８．ガリウムを含むDOTA−（Asp）n−c（RGDfK）を含む標識薬剤であって、
n＝5〜25であることを特徴とする標識薬剤。
That is, this invention consists of the following.
1. A radiolabeled drug comprising a ligand- (Asp) n-RGD containing cyclic peptide containing a radioactive substance,
A radiolabeled drug, wherein n = 5-25.
2. 2. The radiolabeled drug according to item 1, wherein the radioactive substance is selected from any one of the following.
(1) Gallium (2) Copper (3) Indium (4) Yttrium (5) Technetium (6) Lutetium (7) Bismuth (8) Rhenium 3. The radiolabeled drug according to item 1 or 2, wherein the RGD-containing cyclic peptide is selected from any one of the following.
(1) c (RGDfK)
(2) c (RGDyK)
(3) c (RGDfV)
(4) c (RGDyV)
4). 4. The radiolabeled drug according to any one of items 1 to 3, wherein the radioactive substance is gallium.
5. 5. The radiolabeled drug according to any one of items 1 to 4, wherein the ligand is selected from any one of the following.
(1) 1,4,7,10-tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid (1,4,7,10-tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid: DOTA)
(2) 1,4,7-triazacyclononane-triacetic acid (NOTA)
(3) triazacyclononane-phosphinate (TRAP)
(4) mercaptacetylgycilgycilglycine (MAG3)
(5) tricarbonyl
(6) Diethylenetriaminepentaacetic acid (DTPA)
6). The radiolabeled drug according to claim 1, wherein the ligand is DOTA.
7). A radiolabeled drug comprising DOTA- (Asp) n-c (RGDfK) containing radioactive gallium,
A radiolabeled drug, wherein n = 5-25.
8). A labeling agent comprising DOTA- (Asp) n-c (RGDfK) containing gallium,
n = 5 to 25, a labeled drug,
本発明の放射性標識薬剤は、癌の原発巣のみならず、骨転移をも同時に検出できる。 The radiolabeled drug of the present invention can simultaneously detect not only the primary cancerous lesion but also bone metastasis.
本発明の「放射性物質を含む配位子（好ましくは、1,4,7,10-テトラアザシクロドデカン-1,4,7,10-四酢酸（1,4,7,10-tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid：DOTA）−（Asp）n−RGD含有環状ペプチドを含む放射性標識薬剤（以後、「本発明の放射性標識薬剤」と略する場合がある）」は、癌の原発巣のみならず、骨転移をも同時に検出できる。さらに、本発明の放射性標識薬剤は、抗腫瘍効果を有する放射性物質を含むことにより、癌の原発巣・骨転移を同時に治療できる。 “Ligands containing radioactive substances (preferably 1,4,7,10-tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid (1,4,7,10-tetraazacyclododecane-1 , 4,7,10-tetraacetic acid (DOTA)-(Asp) n-RGD-containing cyclic peptide (hereinafter, may be abbreviated as “radiolabeled drug of the present invention”) ” Not only the primary lesion but also bone metastasis can be detected simultaneously, and the radiolabeled drug of the present invention can simultaneously treat the primary lesion and bone metastasis of cancer by containing a radioactive substance having an antitumor effect.
（放射性物質）
本発明の放射性標識薬剤で使用できる放射性物質は、配位子（好ましくは、DOTA）と安定的な錯体を形成できれば特に限定されない。例えば、以下を例示することができる。
(Radioactive material)
The radioactive substance that can be used in the radiolabeled drug of the present invention is not particularly limited as long as it can form a stable complex with a ligand (preferably DOTA). For example, the following can be illustrated.
（癌の原発巣・骨転移を同時に検査・治療するための放射性物質）
（１）ガリウム（Ga）
原子番号３１の元素であり、インジウムと同じ第１３族元素に属する。ガリウムの多種類の核種の中でGa−67（以下、67Gaと略称することがある）とGa−68（以下、68Gaと略称することがある）の二つの放射性核種が核医学診断に適した性質を有している。67Gaはサイクロトロンにより製造される半減期７８時間のγ線放出核種であり、67Gaクエン酸塩（67Ga−ｃｉｔｒａｔｅ）が悪性腫瘍や炎症の診断を目的とした単一光子放射線コンピュータ断層撮影（ｓｉｎｇｌｅ ｐｈｏｔｏｎ ｅｍｉｓｓｉｏｎ ｃｏｍｐｕｔｅｄ ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ、以下ＳＰＥＣＴと略称する場合がある）用薬剤として臨床で使用されている。一方、68Gaは半減期６８分の陽電子放出核種であり、ポジトロン断層撮影（ｐｏｓｉｔｒｏｎ ｅｍｉｓｓｉｏｎ ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ、以下、ＰＥＴと略称する場合がある）診断に用いられる。また近年、半減期２７０日のゲルマニウム−68（68Ge）との過渡平衡を利用したジェネレータシステムの開発により、サイクロトロンを設置しなくても使えるＰＥＴ核種として期待されている。
（２）銅（Cu）
64Cuは、乳癌検出用及び治療用放射性物質として研究されている。
（３）インジウム（In）
111Inは、腫瘍検出用放射性物質として研究されている。
（４）イットリウム(Y)
90Yは、腫瘍治療用放射性物質として研究されている。
（５）テクネチウム（Tc）
99mTcは、腫瘍検出用放射性物質として研究されている。
（６）ルテチウム（Lu）
177Luは、腫瘍治療用放射性物質として研究されている。
（７） ビスマス（Bi）
213Biは、アルファ線放出治療用核種として使用されている。
（８）レ二ウム（Re）
186Re及び188Reは、治療用核種として使用されている。
(Radioactive substance for simultaneously examining and treating cancer primary lesions and bone metastases)
(1) Gallium (Ga)
It is an element of atomic number 31 and belongs to the same group 13 element as indium. Among the many types of gallium nuclides, two radionuclides, Ga-67 (hereinafter sometimes abbreviated as 67 Ga) and Ga-68 (hereinafter sometimes abbreviated as 68 Ga), are used for nuclear medicine diagnosis. It has suitable properties. 67 Ga is a γ-ray emitting nuclide produced by cyclotron with a half-life of 78 hours. 67 Ga citrate ( 67 Ga-citrate) is a single-photon radiation computed tomography for the diagnosis of malignant tumors and inflammation ( single photo emission computed tomography (hereinafter sometimes referred to as SPECT). On the other hand, 68 Ga is a positron emission nuclide with a half-life of 68 minutes, and is used for positron emission tomography (hereinafter sometimes abbreviated as PET) diagnosis. In recent years, the development of a generator system using transient equilibrium with germanium-68 ( 68 Ge) having a half-life of 270 days is expected as a PET nuclide that can be used without installing a cyclotron.
(2) Copper (Cu)
64 Cu has been studied as a radioactive material for breast cancer detection and treatment.
(3) Indium (In)
111 In has been studied as a radioactive substance for tumor detection.
(4) Yttrium (Y)
90 Y has been studied as a radioactive substance for tumor therapy.
(5) Technetium (Tc)
99m Tc has been studied as a radioactive substance for tumor detection.
(6) Lutetium (Lu)
177 Lu has been studied as a radioactive material for tumor therapy.
(7) Bismuth (Bi)
213 Bi has been used as a radionuclide for alpha radiation therapy.
(8) Rhenium (Re)
186 Re and 188 Re are used as therapeutic nuclides.
｛（Asp）n｝
本発明の放射性標識薬剤で使用できるアスパラギン酸リンカー｛（Asp）n｝は、下記の実施例より、癌の骨転移箇所に特異的に結合することができる。
本発明の（Asp）nのnは、5〜25、好ましくは、6〜20、より好ましくは7〜15、最も好ましくは8〜13である。
{(Asp) n}
Aspartate linker {(Asp) n} that can be used in the radiolabeled drug of the present invention can specifically bind to a bone metastasis site of cancer from the following examples.
N of (Asp) n of the present invention is 5 to 25, preferably 6 to 20, more preferably 7 to 15, and most preferably 8 to 13.
（RGD含有環状ペプチド）
本発明の放射性標識薬剤で使用できるRGD含有環状ペプチドは、腫瘍に結合することができれば、特に限定されない。例えば、以下を例示することができる。
（１）c（RGDfK）：シクロ−Arg−Gly−Asp−D−Phe−Lys（配列番号１）
（２）c（RGDyK）：シクロ−Arg−Gly−Asp−D−Tyr−Lys（配列番号２）
（３）c（RGDfV）：シクロ−Arg−Gly−Asp−D−Phe−Val（配列番号３）
（４）c（RGDyV）：シクロ−Arg−Gly−Asp−D−Tyr−Val（配列番号４）
(RGD-containing cyclic peptide)
The RGD-containing cyclic peptide that can be used in the radiolabeled drug of the present invention is not particularly limited as long as it can bind to a tumor. For example, the following can be illustrated.
(1) c (RGDfK): cyclo-Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys (SEQ ID NO: 1)
(2) c (RGDyK): cyclo-Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lys (SEQ ID NO: 2)
(3) c (RGDfV): cyclo-Arg-Gly-Asp-D-Phe-Val (SEQ ID NO: 3)
(4) c (RGDyV): cyclo-Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Val (SEQ ID NO: 4)
（配位子）
本発明の放射性標識薬剤で使用できる配位子は、癌の原発巣のみならず骨転移をも同時に検出できれば、特に限定されないが、以下を例示することができる。
（１）1,4,7,10-テトラアザシクロドデカン-1,4,7,10-四酢酸（1,4,7,10-tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid：DOTA）
（２）1,4,7-triazacyclononane-triacetic acid(NOTA)
（３）triazacyclononane-phosphinate(TRAP)
（４）mercaptacetylgycilgycilglycine（MAG3）
（５）tricarbonyl
（６）ジエチレントリアミン五酢酸（DTPA）
特に、好ましく配位子は、DOTAである。
(Ligand)
The ligand that can be used in the radiolabeled drug of the present invention is not particularly limited as long as it can simultaneously detect not only the primary tumor focus but also bone metastasis, but the following can be exemplified.
(1) 1,4,7,10-tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid (1,4,7,10-tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid: DOTA)
(2) 1,4,7-triazacyclononane-triacetic acid (NOTA)
(3) triazacyclononane-phosphinate (TRAP)
(4) mercaptacetylgycilgycilglycine (MAG3)
(5) tricarbonyl
(6) Diethylenetriaminepentaacetic acid (DTPA)
In particular, the preferred ligand is DOTA.
（本発明の放射性標識薬剤の投与方法）
本発明の放射性標識薬剤の投与方法として、静脈内投与又は動脈内投与を好ましく挙げることができる。投与経路はこれら経路に限定されず、本放射性標識薬剤の投与後、その作用が有効に発現し得る経路であればいずれも利用できる。
(Method of administering the radiolabeled drug of the present invention)
As a method for administering the radiolabeled drug of the present invention, intravenous administration or intraarterial administration can be preferably mentioned. The administration route is not limited to these routes, and any route can be used as long as its action can be effectively expressed after administration of the present radiolabeled drug.
（本発明の放射性標識薬剤の放射活性強度）
本発明の放射性標識薬剤の放射活性強度は、本薬剤を投与したことにより目的を達成し得る強度であり、かつ、被験者の放射線被爆が可能な限り低い臨床投与量である限りにおいて任意である。放射性強度は、放射性標識薬剤を使用する一般的な診断方法や治療方法で使用されている放射活性強度を参考にして決定できる。
(Radioactivity intensity of the radiolabeled drug of the present invention)
The radioactivity intensity of the radiolabeled drug of the present invention is arbitrary as long as the objective can be achieved by administering the drug and the subject is exposed to the lowest possible clinical dose. The radioactive intensity can be determined with reference to the radioactive intensity used in a general diagnostic method or therapeutic method using a radiolabeled drug.
（本発明の放射性標識薬剤の形態）
本発明の放射性標識薬剤の形態は、放射性物質を含む配位子−（Asp）n−RGD含有環状ペプチドを有効成分として含み、必要に応じて、１種類または２種類以上の医薬的に許容される担体（医薬用担体）を含むことができる。医薬用担体として、ｐＨを調整するための酸、塩基、緩衝液、安定化剤、等張化剤、保存剤を例示できる。
(Form of radiolabeled drug of the present invention)
The form of the radiolabeled drug of the present invention includes a ligand- (Asp) n-RGD-containing cyclic peptide containing a radioactive substance as an active ingredient, and optionally one or more pharmaceutically acceptable. Carrier (pharmaceutical carrier). Examples of the pharmaceutical carrier include acids, bases, buffers, stabilizers, isotonic agents, and preservatives for adjusting pH.
（本発明の放射性標識薬剤の効果）
本発明の放射性標識薬剤は、画像診断や、内用放射線治療に使用することができる。本発明の放射性標識薬剤は、癌疾患の診断や治療に好ましく使用されるが、適用疾患は特に限定されず、画像診断や内用放射線治療が適用される疾患であればいずれの疾患にも使用できる。診断や治療の対象となる標的の特性にしたがって、放射性物質を選択することにより、該標的の診断や治療が可能であり、本放射性標識薬剤は診断及び治療の分野で広く使用できる。
(Effect of the radiolabeled drug of the present invention)
The radiolabeled drug of the present invention can be used for diagnostic imaging and internal radiotherapy. The radiolabeled drug of the present invention is preferably used for diagnosis and treatment of cancer diseases, but applicable diseases are not particularly limited, and can be used for any diseases as long as image diagnosis and internal radiotherapy are applied. it can. By selecting a radioactive substance according to the characteristics of the target to be diagnosed or treated, the target can be diagnosed or treated, and the present radiolabeled drug can be widely used in the fields of diagnosis and treatment.
以下に示す実施例によって本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。 The present invention will be specifically described with reference to the following examples, but the present invention is not limited thereto.
（材料及び装置）
本実施例では、下記の材料及び装置を使用した。
プロトン核磁気共鳴（1H-NMR）スペクトルをJEOL JNM-ECS400（JEOL Ltd, Tokyo, Japan）によって測定し、化学シフトは内部標準のテトラメチルシランからダウンフィールドされたppmで表した。
エレクトロスプレーイオン化質量スペクトル（ESI-MS）をJEOL JMS-T100TD（JEOL Ltd）によって測定した。
マトリックス支援レーザー脱離イオン化法飛行時間型質量分析（MALDI-TOF-MS）は、ABI 4800 plus（AB SCIEX, Foster, CA, USA）によって測定した。
1,4,7,10-テトラアザシクロドデカン-1,4,7-tris（t-酢酸ブチル）（DOTA-tris）はMacrocyclics社（Dallas, TX, USA）製を使用した。
67GaCl3はNihon Medi-physics社（Tokyo, Japan）から譲り受けたものである。
放射活性はAuto Gamma System ARC-7010B（Hitachi Aloka Medical, Tokyo, Japan)によって測定した。
U87MG神経膠芽腫細胞はDS Pharma Biomedical社（Osaka, Japan）製を使用した。
他の化学薬品及び溶剤はすべて試薬グレードのものであり、精製を加えずに使用した。
(Materials and equipment)
In this example, the following materials and devices were used.
Proton nuclear magnetic resonance ( 1 H-NMR) spectra were measured by JEOL JNM-ECS400 (JEOL Ltd, Tokyo, Japan), and chemical shifts were expressed in ppm downfield from the internal standard tetramethylsilane.
Electrospray ionization mass spectrum (ESI-MS) was measured by JEOL JMS-T100TD (JEOL Ltd).
Matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF-MS) was measured by ABI 4800 plus (AB SCIEX, Foster, CA, USA).
1,4,7,10-tetraazacyclododecane-1,4,7-tris (t-butyl acetate) (DOTA-tris) manufactured by Macrocyclics (Dallas, TX, USA) was used.
67 GaCl 3 was acquired from Nihon Medi-physics (Tokyo, Japan).
Radioactivity was measured by Auto Gamma System ARC-7010B (Hitachi Aloka Medical, Tokyo, Japan).
U87MG glioblastoma cells were manufactured by DS Pharma Biomedical (Osaka, Japan).
All other chemicals and solvents were reagent grade and were used without further purification.
｛放射性物質を含むDOTA−（Asp）n−c（RGDfK）の合成｝
下記の方法により、放射性物質を含むDOTA−（Asp）n−c（RGDfK）の合成を行った。さらに、併せて、放射性物質を含むDOTA-c(RGDfK)及びc(RGDfK)も合成した。
{Synthesis of DOTA- (Asp) n-c (RGDfK) containing radioactive material}
DOTA- (Asp) n-c (RGDfK) containing a radioactive substance was synthesized by the following method. In addition, DOTA-c (RGDfK) and c (RGDfK) containing radioactive substances were also synthesized.
｛c（RGDfK）の合成｝
c(RGDfK)を下記の方法に従い合成した。
ペプチドを標準Fmoc系固相法によって合成した。詳しくは、Fmoc-Gly-OH（樹脂に対して4モル当量）をジクロロメタンに溶解して、溶解液を得た。次に、塩化2-クロロトリチル樹脂及びN,N-ジイソプロピルエチルアミン（DIEA, 3.5当量）を、該溶解液に添加した。さらに、該添加後の反応混合物を1時間回転させ、1 mLのメタノールを添加して、さらに30分間反応させた。
次に、以下の工程からなるサイクルにしたがってペプチド鎖を作製した。
（a）ジメチルホルムアミド（DMF）中20%のピペリジンを用いて、Fmoc基を15分間脱保護する工程。
（b）DMF中で、Fmoc-Arg(pmc)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-D-Phe-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH（2.5当量）と、1,3-ジイソプロピル-カルボジイミド（DIPCI, 2.5当量）及び1-ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（HoBt, 2.5当量）とを、1.5時間共役させる工程。その共役反応の反復によって、該樹脂がKaiser試験に陽性になり、樹脂-Gly-Arg(pmc)-Lys(Boc)-D-Phe-Asp(Otbu)が得られた。
樹脂結合ペプチドをジクロロメタン中、30%の1,1,1,3,3,3-ヘキサフルオロ-2-プロパノール（HFIP）で5分間処理した。ろ過した後、ろ液中の溶剤を真空除去した。残留物である｛Gly-Arg(pmc)-Lys(Boc)-D-Phe-Asp(OtBu)（4）: ESI-MS: 1044 [M + H]+｝は精製を加えることなく次の反応に使用した。
ペプチド｛Gly-Arg(pmc)-Lys(Boc)-D-Phe-Asp(OtBu)｝をDMF （5 mM）に溶解し、NaHCO3（5当量）及びジフェニルホスホリルアジド（DPPA, 3当量）を添加した。室温で24時間攪拌した後、固体NaHCO3をろ過で除去し、DMFを真空除去した。残留物である｛環状Arg(pmc)-Gly-Asp(OtBu)- D-Phe-Lys(Boc)（5）: ESI-MS: 1026 [M + H]+｝は精製を加えることなく次の反応に使用した。
環状ペプチドを95%のトリフルオロ酢酸（TFA）、2.5%の水及び2.5%のトリイソプロピルシラン（TIS）で室温にて24時間かけて処理した。粗ペプチドをCosmosil 5C18-AR 300カラム（10 × 150 mm）上での逆相（RP）-HPLCによって、4.0 mL/minの流速で、0.1 %TFAを含む10%メタノール水溶液から0.1%TFAを含む50%メタノール水溶液への勾配移動相で20分間精製した。220 nmの波長におけるUV吸収をモニタリングし、クロマトグラムを得た。c(RGDfK)を含む画分を質量分析法によって測定し、回収した。凍結乾燥によって溶剤を除去し、白色粉末のc(RGDfK)（ESI-MS (m/z): 604 [M + H]+、化合物6, 39.8%）を得た。
{Synthesis of c (RGDfK)}
c (RGDfK) was synthesized according to the following method.
Peptides were synthesized by standard Fmoc-based solid phase method. Specifically, Fmoc-Gly-OH (4 molar equivalents relative to the resin) was dissolved in dichloromethane to obtain a solution. Next, 2-chlorotrityl chloride resin and N, N-diisopropylethylamine (DIEA, 3.5 equivalents) were added to the solution. Further, the reaction mixture after the addition was rotated for 1 hour, 1 mL of methanol was added, and the reaction was further performed for 30 minutes.
Next, a peptide chain was prepared according to a cycle comprising the following steps.
(A) Deprotecting the Fmoc group for 15 minutes using 20% piperidine in dimethylformamide (DMF).
(B) In DMF, Fmoc-Arg (pmc) -OH, Fmoc-Lys (Boc) -OH, Fmoc-D-Phe-OH, Fmoc-Asp (OtBu) -OH (2.5 equivalents), 1,3 -Conjugating diisopropyl-carbodiimide (DIPCI, 2.5 equivalents) and 1-hydroxybenzotriazole hydrate (HoBt, 2.5 equivalents) for 1.5 hours. Repeating the conjugation reaction made the resin positive for the Kaiser test, yielding resin-Gly-Arg (pmc) -Lys (Boc) -D-Phe-Asp (Otbu).
The resin bound peptide was treated with 30% 1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-propanol (HFIP) in dichloromethane for 5 minutes. After filtration, the solvent in the filtrate was removed in vacuo. Residue {Gly-Arg (pmc) -Lys (Boc) -D-Phe-Asp (OtBu) (4): ESI-MS: 1044 [M + H] + } is the next reaction without purification. Used for.
The peptide {Gly-Arg (pmc) -Lys (Boc) -D-Phe-Asp (OtBu)} is dissolved in DMF (5 mM), and NaHCO 3 (5 eq) and diphenylphosphoryl azide (DPPA, 3 eq) are added. Added. After stirring at room temperature for 24 hours, solid NaHCO 3 was removed by filtration and DMF was removed in vacuo. The residue {cyclic Arg (pmc) -Gly-Asp (OtBu)-D-Phe-Lys (Boc) (5): ESI-MS: 1026 [M + H] + } Used for reaction.
The cyclic peptide was treated with 95% trifluoroacetic acid (TFA), 2.5% water and 2.5% triisopropylsilane (TIS) at room temperature for 24 hours. The crude peptide was purified by reverse phase (RP) -HPLC on a Cosmosil 5C 18 -AR 300 column (10 x 150 mm) at a flow rate of 4.0 mL / min from 0.1% TFA containing 0.1% TFA. Purified for 20 minutes with gradient mobile phase to 50% aqueous methanol containing. Chromatograms were obtained by monitoring UV absorption at a wavelength of 220 nm. The fraction containing c (RGDfK) was measured by mass spectrometry and collected. The solvent was removed by lyophilization to obtain c (RGDfK) (ESI-MS (m / z): 604 [M + H] + , compound 6, 39.8%) as a white powder.
｛DOTA-c(RGDfK)、DOTA-(Asp)8-c(RGDfK)及び DOTA-(Asp)11-c(RGDfK)の合成｝
環状[Arg(pmc)-Gly-Asp(OtBu)-D-Phe-Lys(Alloc)]を標準Fmoc系固相法によって人為的に合成し、N2雰囲気下、クロロホルム：酢酸：N-メチルモルホリン（37:2:1）中でPd(PPh3)4を2時間処理してAlloc保護基を選択的に脱保護した。
粗ペプチドをCosmosil 5C18-AR 300カラム（10 × 150 mm）上でのRP-HPLCによって、4.0 mL/minの流速で、0.1 %TFAを含む55%メタノール水溶液から0.1%TFAを含む90%メタノール水溶液への勾配移動相で20分間精製した。220 nmの波長におけるUV吸収をモニタリングし、クロマトグラムを得た。
環状Arg(pmc)-Gly-Asp(OtBu)-D-Phe-Lysを含む画分を質量分析法によって測定し、回収した。凍結乾燥によって溶剤を除去し、黄色粉末の環状Arg(pmc)-Gly-Asp(OtBu)-D-Phe-Lys（98.8 mg, 53.3%、ESI-MS (m/z): 926 [M + H]+）を得た。
DOTA-tris及び[Asp(OtBu)]8若しくは[Asp(OtBu)]11を用いて、自体公知のFmoc固相法によって、 [Asp(OtBu)]8-DOTA(tris)及び[Asp(OtBu)]11-DOTA(tris)を合成した。
環状[Arg(pmc)-Gly-Asp(OtBu)-D-Phe-Lys]（9.25 mg, 10.0 μmol）及び[Asp(OtBu)]11-DOTA(tris)（24.6 mg, 10.0 μmol）を500 μLのDMFに溶解して、反応溶液を作成した。HoBt（8当量）及びDIPCI（7当量）を該反応溶液に添加した。さらに、該反応溶液を2時間静かに震盪させ、その後、Cosmosil 5C18-AR-300カラム（10 × 150 mm）上でのRP-HPLCによって、4.0 mL/minの流速で、0.1 %TFAを含む70%メタノール水溶液から0.1%TFAを含む100%メタノール水溶液への勾配移動相で20分間精製した。220 nmの波長におけるUV吸収をモニタリングし、クロマトグラムを得た。
DOTA(tris)-[Asp(OtBu)]11-c[Arg(pmc)-Gly-Asp(OtBu)-D-Phe-Lys]を含む画分を質量分析法によって測定し、回収した。凍結乾燥によって溶剤を除去し、白色粉末（24.0 mg、71.4%、ESI-MS (m/z): 3361 [M + H]+）を得た。
[Asp(OtBu)]11-DOTA(tris)に代わる出発物質として[Asp(OtBu)]8-DOTA(tris)を使用し、上述の方法でDOTA(tris)-[Asp(OtBu)]8-c[Arg(pmc)-Gly-Asp(OtBu)-D-Phe-Lys]（12.4 mg, 43.5%）を得た｛ESI-MS (m/z): 2255 [M + H]+｝。
[Asp(OtBu)]11-DOTA(tris)に代わる出発物質としてDOTA(tris)を使用し、DOTA(tris)-[Asp(OtBu)]11-c[Arg(pmc)-Gly-Asp(OtBu)-D-Phe-Lys]の場合と同じ方法でDOTA(tris)-c[Arg(pmc)-Gly-Asp(OtBu)-D-Phe-Lys]（6.8 mg, 45.9%、ESI-MS (m/z): 1481 [M + H]+）を得た。
{Synthesis of DOTA-c (RGDfK), DOTA- (Asp) 8 -c (RGDfK) and DOTA- (Asp) 11 -c (RGDfK)}
Cyclic [Arg (pmc) -Gly-Asp (OtBu) -D-Phe-Lys (Alloc)] was artificially synthesized by standard Fmoc solid phase method, and chloroform: acetic acid: N-methylmorpholine under N 2 atmosphere Treatment of Pd (PPh 3 ) 4 in (37: 2: 1) for 2 hours selectively deprotected the Alloc protecting group.
The crude peptide was analyzed by RP-HPLC on a Cosmosil 5C 18 -AR 300 column (10 x 150 mm) at a flow rate of 4.0 mL / min from 55% aqueous methanol containing 0.1% TFA to 90% methanol containing 0.1% TFA. Purified for 20 minutes with gradient mobile phase to aqueous solution. Chromatograms were obtained by monitoring UV absorption at a wavelength of 220 nm.
The fraction containing cyclic Arg (pmc) -Gly-Asp (OtBu) -D-Phe-Lys was measured by mass spectrometry and collected. Solvent was removed by lyophilization and the yellow powdered cyclic Arg (pmc) -Gly-Asp (OtBu) -D-Phe-Lys (98.8 mg, 53.3%, ESI-MS (m / z): 926 [M + H ] + )
[Asp (OtBu)] 8 -DOTA (tris) and [Asp (OtBu)] using DOTA-tris and [Asp (OtBu)] 8 or [Asp (OtBu)] 11 by the Fmoc solid phase method known per se. ] 11 -DOTA (tris) was synthesized.
500 μL of cyclic [Arg (pmc) -Gly-Asp (OtBu) -D-Phe-Lys] (9.25 mg, 10.0 μmol) and [Asp (OtBu)] 11 -DOTA (tris) (24.6 mg, 10.0 μmol) Was dissolved in DMF to prepare a reaction solution. HoBt (8 eq) and DIPCI (7 eq) were added to the reaction solution. In addition, the reaction solution was shaken gently for 2 hours and then contained 0.1% TFA at a flow rate of 4.0 mL / min by RP-HPLC on a Cosmosil 5C 18 -AR-300 column (10 × 150 mm). Purification was carried out in a gradient mobile phase from 70% aqueous methanol to 100% aqueous methanol containing 0.1% TFA for 20 minutes. Chromatograms were obtained by monitoring UV absorption at a wavelength of 220 nm.
A fraction containing DOTA (tris)-[Asp (OtBu)] 11 -c [Arg (pmc) -Gly-Asp (OtBu) -D-Phe-Lys] was measured by mass spectrometry and recovered. The solvent was removed by lyophilization to obtain a white powder (24.0 mg, 71.4%, ESI-MS (m / z): 3361 [M + H] + ).
[Asp (OtBu)] 11 as starting material in place of-DOTA (tris) and [Asp (OtBu)] 8 -DOTA (tris), DOTA in the manner described above (tris) - [Asp (OtBu )] 8 - c [Arg (pmc) -Gly-Asp (OtBu) -D-Phe-Lys] (12.4 mg, 43.5%) was obtained {ESI-MS (m / z): 2255 [M + H] + }.
[Asp (OtBu)] 11 -DOTA (tris) is used as an alternative to DOTA (tris), and DOTA (tris)-[Asp (OtBu)] 11 -c [Arg (pmc) -Gly-Asp (OtBu ) -D-Phe-Lys] DOTA (tris) -c [Arg (pmc) -Gly-Asp (OtBu) -D-Phe-Lys] (6.8 mg, 45.9%, ESI-MS ( m / z): 1481 [M + H] + ) was obtained.
DOTA(tris)-[Asp(OtBu)]11-c[Arg(pmc)-Gly-Asp(OtBu)-D-Phe-Lys]を95%のTFA、2.5%の水及び2.5%のTISによって室温で24時間処理した。粗ペプチドをCosmosil 5C18-AR 300カラム（10 × 150 mm）上での逆相RP-HPLCによって、4.0 mL/minの流速で、0.1 %TFAを含む10%メタノール水溶液から0.1%TFAを含む50%メタノール水溶液への勾配移動相で20分間精製した。220 nmの波長におけるUV吸収をモニタリングし、クロマトグラムを得た。凍結乾燥によって溶剤を除去し、白色粉末のDOTA-(Asp)11-c(RGDfK)（1.40 mg, 8.7%）を得た。
DOTA-(Asp)8-c(RGDfK)（1.20 mg, 9.7%）及びDOTA-c(RGDfK)（1.20 mg, 26.4%、ESI-MS (m/z): 990 [M + H]+）を上述の方法で得た。
最後に、DOTA-c(RGDfK)、DOTA-(Asp)8-c(RGDfK)｛MALDI-TOF-MS (m/z): 1911 [M + H]+｝及びDOTA-(Asp)11-c(RGDfK)｛MALDI-TOF-MS (m/z): 2256 [M + H]+｝の全収率はそれぞれ6.5%、2.3%及び3.3%であった。
DOTA (tris)-[Asp (OtBu)] 11 -c [Arg (pmc) -Gly-Asp (OtBu) -D-Phe-Lys] at room temperature with 95% TFA, 2.5% water and 2.5% TIS For 24 hours. The crude peptide was analyzed by reverse phase RP-HPLC on a Cosmosil 5C 18 -AR 300 column (10 x 150 mm) at a flow rate of 4.0 mL / min from a 10% aqueous methanol solution containing 0.1% TFA to 50% containing 0.1% TFA. Purified for 20 minutes with a gradient mobile phase to% methanol aqueous solution. Chromatograms were obtained by monitoring UV absorption at a wavelength of 220 nm. The solvent was removed by lyophilization to obtain white powder DOTA- (Asp) 11 -c (RGDfK) (1.40 mg, 8.7%).
DOTA- (Asp) 8 -c (RGDfK) (1.20 mg, 9.7%) and DOTA-c (RGDfK) (1.20 mg, 26.4%, ESI-MS (m / z): 990 [M + H] + ) Obtained by the method described above.
Finally, DOTA-c (RGDfK), DOTA- (Asp) 8 -c (RGDfK) {MALDI-TOF-MS (m / z): 1911 [M + H] + } and DOTA- (Asp) 11 -c The overall yield of (RGDfK) {MALDI-TOF-MS (m / z): 2256 [M + H] + } was 6.5%, 2.3% and 3.3%, respectively.
（非標識Gaの導入及びその確認）
Ga(NO3)3(3.6mg, 14.1μmol)を360 μLの水に溶解して、Ga(NO3)3水溶液を作成した。前記で合成したDOTA-(Asp)11-c(RGDfK)（1.1mg,0.488μmol）を96 μLの水に溶解し、さらに、48 μLのGa(NO3)3水溶液と混合して、混合液を作製した。該混合液を40℃、2時間で加熱した後、HPLCで精製してGa-DOTA-(Asp)11-c(RGDfK) ｛0.56 mg, 87.5%：図２（f）｝を得た。HPLCは、Cosmosil 5C18-AR-II（4.6 × 150 mm）（flow rate of 1 mL/min with a gradient mobile phase of 15% methanol in water with 0.1% TFA to 40% methanol in water with 0.1% TFA for 30 minutes）を用いて行った。
さらに、DOTA-(Asp)8-c(RGDfK)及びDOTA-c(RGDfK)に上記同様に非標識Gaを導入し、さらに精製して、それぞれ、Ga-DOTA-(Asp)8-c(RGDfK)｛図２（e）｝及びGa-DOTA-c(RGDfK)｛図２d｝を得た。
Ga-DOTA-c(RGDfK)｛ESI-MS (m/z): 1056 [M + H]+｝、Ga-DOTA-(Asp)8-c(RGDfK)｛ MALDI-TOF-MS (m/z): 1977 [M + H]+｝及びGa-DOTA-(Asp)11-c(RGDfK)｛ MALDI-TOF-MS (m/z): 2325 [M + H]+｝の分子量を確認することによって、合成できていることを確認した。
(Introduction of unlabeled Ga and its confirmation)
Ga (NO 3 ) 3 (3.6 mg, 14.1 μmol) was dissolved in 360 μL of water to prepare a Ga (NO 3 ) 3 aqueous solution. DOTA- (Asp) 11 -c (RGDfK) (1.1 mg, 0.488 μmol) synthesized above is dissolved in 96 μL of water and mixed with 48 μL of Ga (NO 3 ) 3 aqueous solution. Was made. The mixture was heated at 40 ° C. for 2 hours and then purified by HPLC to obtain Ga-DOTA- (Asp) 11 -c (RGDfK) {0.56 mg, 87.5%: FIG. 2 (f)}. HPLC is Cosmosil 5C 18 -AR-II (4.6 × 150 mm) (flow rate of 1 mL / min with a gradient mobile phase of 15% methanol in water with 0.1% TFA to 40% methanol in water with 0.1% TFA for 30 minutes).
Further, unlabeled Ga was introduced into DOTA- (Asp) 8 -c (RGDfK) and DOTA-c (RGDfK) in the same manner as described above, and further purified, respectively, Ga-DOTA- (Asp) 8 -c (RGDfK). ) {FIG. 2 (e)} and Ga-DOTA-c (RGDfK) {FIG. 2d}.
Ga-DOTA-c (RGDfK) {ESI-MS (m / z): 1056 [M + H] + }, Ga-DOTA- (Asp) 8 -c (RGDfK) {MALDI-TOF-MS (m / z ): 1977 [M + H] + } and Ga-DOTA- (Asp) 11 -c (RGDfK) {MALDI-TOF-MS (m / z): 2325 [M + H] + } Thus, it was confirmed that the synthesis was possible.
（67Gaの導入及びその確認）
前記で合成したDOTA-(Asp)11-c(RGDfK)（20 μg）を75 μLの0.2 M酢酸アンモニウム緩衝液（pH 5.0）に溶解し、該溶液に25 μLの67GaCl3（74 MBq/mL）溶液を添加した。80°C で8分間加熱した後、溶液をCosmosil 5C18-AR-II（4.6 × 150 mm）上でのRP-HPLCによって、1 mL/minの流速で、0.1 %TFAを含む15%メタノール水溶液から0.1%TFAを含む40%メタノール水溶液への勾配移動相で30分間精製した。
さらに、DOTA-(Asp)8-c(RGDfK)及び DOTA-c(RGDfK)を上記同様に放射標識し、さらに精製した。
(Introduction of 67 Ga and its confirmation)
DOTA- (Asp) 11 -c (RGDfK) (20 μg) synthesized above was dissolved in 75 μL of 0.2 M ammonium acetate buffer (pH 5.0), and 25 μL of 67 GaCl 3 (74 MBq / mL) solution was added. After heating at 80 ° C for 8 min, the solution was analyzed by RP-HPLC on Cosmosil 5C 18 -AR-II (4.6 x 150 mm) at a flow rate of 1 mL / min and 15% aqueous methanol containing 0.1% TFA. And purified with a gradient mobile phase from 40% to 40% aqueous methanol containing 0.1% TFA for 30 minutes.
Furthermore, DOTA- (Asp) 8 -c (RGDfK) and DOTA-c (RGDfK) were radiolabeled as described above and further purified.
67Ga-DOTA-c(RGDfK)、67Ga-DOTA-(Asp)8-c(RGDfK)及び67Ga-DOTA-(Asp)11-c(RGDfK)の放射化学的収率は90%を超えていた。さらに、HPLCによって精製した後、放射化学的純度は97%を超えていたことを確認した（図２）。
HPLC分析では、67Ga-DOTA-c(RGDfK) ｛図２（a）｝、67Ga-DOTA-(Asp)8-c(RGDfK) ｛図２（b）｝及び67Ga-DOTA-(Asp)11-c(RGDfK) ｛図２（c）｝の各保持時間はそれぞれ12.5分、17.0分及び18.5分であった。
以上により、67Ga-DOTA-c(RGDfK)、67Ga-DOTA-(Asp)8-c(RGDfK)及び67Ga-DOTA-(Asp)11-c(RGDfK)は、高い放射性化学的純度を有していることを確認した。
Radiochemical yields of 67 Ga-DOTA-c (RGDfK), 67 Ga-DOTA- (Asp) 8 -c (RGDfK) and 67 Ga-DOTA- (Asp) 11 -c (RGDfK) exceed 90% It was. Furthermore, after purification by HPLC, it was confirmed that the radiochemical purity exceeded 97% (FIG. 2).
In HPLC analysis, 67 Ga-DOTA-c (RGDfK) {Fig. 2 (a)}, 67 Ga-DOTA- (Asp) 8 -c (RGDfK) {Fig. 2 (b)} and 67 Ga-DOTA- (Asp ) 11 -c (RGDfK) The retention times of {FIG. 2 (c)} were 12.5 minutes, 17.0 minutes, and 18.5 minutes, respectively.
From the above, 67 Ga-DOTA-c (RGDfK), 67 Ga-DOTA- (Asp) 8 -c (RGDfK) and 67 Ga-DOTA- (Asp) 11 -c (RGDfK) have high radiochemical purity. I confirmed that I have it.
｛67Ga-DOTA-(Asp)8-c(RGDfK)及び67Ga-DOTA-(Asp)11-c(RGDfK)の安定性確認｝
67Ga-DOTA-c(RGDfK)、67Ga-DOTA-(Asp)8-c(RGDfK)及び67Ga-DOTA-(Asp)11-c(RGDfK)を0.1 MのPBS（pH 7.4）中、37°Cで、それぞれ1、3及び24時間インキュベートした。
サンプル溶液をCosmosil 5C18-AR-II（4.6 × 150 mm）上でのRP-HPLC分析に供し、1 mL/minの流速で、勾配移動相は0.1%TFAを含む10%メタノール水溶液から0.1%TFAを含む50%メタノール水溶液への勾配で、20分間移動させた。
また、67Ga-DOTA-c(RGDfK)、67Ga-DOTA-(Asp)8-c(RGDfK)及び67Ga-DOTA-(Asp)11-c(RGDfK)を、アポトランスフェリン7.5 mg/mLを含む1 M PBS（pH 7.4）溶液で、37°Cで1、3及び24時間インキュベートし、その後、流速0.3 mL/min、0.1 M PBS（pH 6.8）の無勾配移動相で、TSK-GEL Super SW3000カラム（4.6 × 300 mm, TOSOH, Tokyo, Japan）上でのサイズ排除（SE）-HPLC分析によって分析した。
{Stability confirmation of 67 Ga-DOTA- (Asp) 8 -c (RGDfK) and 67 Ga-DOTA- (Asp) 11 -c (RGDfK)}
67 Ga-DOTA-c (RGDfK), 67 Ga-DOTA- (Asp) 8 -c (RGDfK) and 67 Ga-DOTA- (Asp) 11 -c (RGDfK) in 0.1 M PBS (pH 7.4), Incubated at 37 ° C for 1, 3 and 24 hours, respectively.
The sample solution was subjected to RP-HPLC analysis on Cosmosil 5C 18 -AR-II (4.6 x 150 mm) with a flow rate of 1 mL / min and a gradient mobile phase of 0.1% from 10% aqueous methanol containing 0.1% TFA. The gradient was moved to a 50% aqueous methanol solution containing TFA and moved for 20 minutes.
In addition, 67 Ga-DOTA-c (RGDfK), 67 Ga-DOTA- (Asp) 8 -c (RGDfK) and 67 Ga-DOTA- (Asp) 11 -c (RGDfK) were added to apotransferrin 7.5 mg / mL. Incubate with 1 M PBS (pH 7.4) solution at 37 ° C for 1, 3 and 24 hours, then with a gradient mobile phase with a flow rate of 0.3 mL / min and 0.1 M PBS (pH 6.8) in TSK-GEL Super Analysis was by size exclusion (SE) -HPLC analysis on a SW3000 column (4.6 × 300 mm, TOSOH, Tokyo, Japan).
67Ga-DOTA-c(RGDfK)、67Ga-DOTA-(Asp)8-c(RGDfK)及び67Ga-DOTA-(Asp)11-c(RGDfK)のPBS 及びアポトランスフェリン溶液中での安定性を示した結果を図３及び図４に示す。
図３及び図４は、それぞれ、PBS及びアポトランスフェリン溶液中での67Ga-DOTA-c(RGDfK)、67Ga-DOTA-(Asp)8-c(RGDfK)及び67Ga-DOTA-(Asp)11-c(RGDfK)の安定性を示している。
ガリウムとキレートするためのDOTAを共通に有する67Ga-DOTA-c(RGDfK)、67Ga-DOTA-(Asp)8-c(RGDfK)及び67Ga-DOTA-(Asp)11-c(RGDfK)は、PBS及びアポトランスフェリン溶液中での安定度も同じであった。
さらに、PBS中、37°Cで24時間インキュベートした後、約85%の67Ga-DOTA-(Asp)8-c(RGDfK)及び67Ga-DOTA-(Asp)11-c(RGDfK)が未変化のままであった。24時間アポトランスフェリンでインキュベートした結果、アポトランスフェリンによって67Gaが配位交換されることはほとんど確認できなかった。
以上により、67Ga-DOTA-(Asp)8-c(RGDfK)及び67Ga-DOTA-(Asp)11-c(RGDfK)は、インビトロでの分解は緩やかであり、非常に高い割合で放射性物質を保持できることを確認した。
67 Ga-DOTA-c (RGDfK ), 67 Ga-DOTA- (Asp) 8 -c (RGDfK) and 67 Ga-DOTA- (Asp) 11 stability with PBS and apotransferrin solution of -c (RGDfK) The results showing are shown in FIG. 3 and FIG.
3 and 4 show 67 Ga-DOTA-c (RGDfK), 67 Ga-DOTA- (Asp) 8 -c (RGDfK) and 67 Ga-DOTA- (Asp) in PBS and apotransferrin solutions, respectively. It shows the stability of 11 -c (RGDfK).
67 Ga-DOTA-c (RGDfK), 67 Ga-DOTA- (Asp) 8 -c (RGDfK) and 67 Ga-DOTA- (Asp) 11 -c (RGDfK) which have DOTA for chelating gallium in common Also had the same stability in PBS and apotransferrin solution.
Furthermore, after incubation for 24 hours at 37 ° C in PBS, approximately 85% of 67 Ga-DOTA- (Asp) 8 -c (RGDfK) and 67 Ga-DOTA- (Asp) 11 -c (RGDfK) are not present. The change remained. As a result of incubation with apotransferrin for 24 hours, it was hardly confirmed that 67 Ga was exchanged by apotransferrin.
Based on the above, 67 Ga-DOTA- (Asp) 8 -c (RGDfK) and 67 Ga-DOTA- (Asp) 11 -c (RGDfK) have a slow degradation in vitro and a very high proportion of radioactive materials. It was confirmed that can be retained.
（ヒドロキシアパタイト結合アッセイ）
文献｛Biochim Biophys Acta.1991;1075(1):56-60｝に記載の方法を改変して、本発明の放射性標識薬剤のヒドロキシアパタイト結合アッセイを行った。
より詳しくは、ヒドロキシアパタイトビーズ（Bio-Gel; Bio-Rad, Hercules, USA）を1 mg/mL、2.5 mg/mL、10 mg/mL、25 mg/mLの割合でTris/HCl緩衝生理食塩水（50 mM, pH 7.4）に懸濁した。DOTA-RGDfK、DOTA-(Asp)8-RGDfK及びDOTA-(Asp)11-RGDfK を懸濁液に添加して、リガンド濃度を19.5 μMに調整した。67Ga標識ペプチド各200 μLの溶液を200 μLのヒドロキシアパタイト懸濁液に添加した。該混合液を室温で1 時間静かに震盪させて、さらに10,000gで5分間遠心分離した後、上清の放射活性を測定した。コントロール群ではヒドロキシアパタイトビーズを使用せずに同じ手順を行った。
下記式でヒドロキシアパタイトの結合率を求めた。
ヒドロキシアパタイト結合率（%）=（1-[各試料の上清の放射活性]／[コントロールの上清の放射活性]）×100
(Hydroxyapatite binding assay)
A method described in the literature {Biochim Biophys Acta. 1991; 1075 (1): 56-60} was modified to perform a hydroxyapatite binding assay of the radiolabeled drug of the present invention.
More specifically, hydroxyapatite beads (Bio-Gel; Bio-Rad, Hercules, USA) in Tris / HCl buffered saline at rates of 1 mg / mL, 2.5 mg / mL, 10 mg / mL, 25 mg / mL (50 mM, pH 7.4). DOTA-RGDfK, DOTA- (Asp) 8 -RGDfK and DOTA- (Asp) 11 -RGDfK were added to the suspension to adjust the ligand concentration to 19.5 μM. Each 200 μL of 67 Ga-labeled peptide was added to 200 μL of the hydroxyapatite suspension. The mixture was gently shaken at room temperature for 1 hour, and further centrifuged at 10,000 g for 5 minutes, and then the radioactivity of the supernatant was measured. In the control group, the same procedure was performed without using hydroxyapatite beads.
The binding rate of hydroxyapatite was determined by the following formula.
Hydroxyapatite binding rate (%) = (1- [Radioactivity of supernatant of each sample] / [Radioactivity of supernatant of control]) × 100
（ヒドロキシアパタイト結合アッセイの結果）
67Ga-DOTA-c(RGDfK)、67Ga-DOTA-(Asp)8-c(RGDfK)及び67Ga-DOTA-(Asp)11-c(RGDfK)のヒドロキシアパタイト結合アッセイの結果を図５に示す。
ヒドロキシアパタイトの量が増加すると、ヒドロキシアパタイトに結合した67Ga-DOTA-(Asp)8-c(RGDfK)及び67Ga-DOTA-(Asp)11-c(RGDfK)の割合も上昇した。長鎖アスパラギン酸ペプチドリンカー｛(Asp)n｝を有する67Ga-DOTA-(Asp)11-c(RGDfK)は、67Ga-DOTA-(Asp)8-c(RGDfK)と比較して、ヒドロキシアパタイトへの結合率が高かった。
一方、DOTAとc(RGDfK)モチーフ間に長鎖アスパラギン酸ペプチドリンカーを持たない67Ga-DOTA-c(RGDfK)はヒドロキシアパタイトには殆ど結合しなかった。
以上により、DOTAとc(RGDfK)モチーフ間に (Asp)nを挿入することにより、特異的かつ強力にヒドロキシアパタイトに結合できることを確認した。これにより、67Ga-DOTA-(Asp)n-c(RGDfK)は、特異的かつ強力にヒドロキシアパタイトに結合できる。
(Results of hydroxyapatite binding assay)
FIG. 5 shows the results of a hydroxyapatite binding assay of 67 Ga-DOTA-c (RGDfK), 67 Ga-DOTA- (Asp) 8 -c (RGDfK) and 67 Ga-DOTA- (Asp) 11 -c (RGDfK). Show.
As the amount of hydroxyapatite increased, the proportion of 67 Ga-DOTA- (Asp) 8 -c (RGDfK) and 67 Ga-DOTA- (Asp) 11 -c (RGDfK) bound to hydroxyapatite also increased. 67 Ga-DOTA- (Asp) 11 -c (RGDfK) with a long-chain aspartic acid peptide linker {(Asp) n} is compared to 67 Ga-DOTA- (Asp) 8 -c (RGDfK) The binding rate to apatite was high.
On the other hand, 67 Ga-DOTA-c (RGDfK), which does not have a long-chain aspartic acid peptide linker between DOTA and c (RGDfK) motif, hardly bound to hydroxyapatite.
Based on the above, it was confirmed that by inserting (Asp) n between DOTA and c (RGDfK) motif, it was possible to bind specifically and strongly to hydroxyapatite. Thereby, 67 Ga-DOTA- (Asp) nc (RGDfK) can specifically and strongly bind to hydroxyapatite.
（生体内分布の確認）
本発明の放射性標識薬剤の生体内分布の確認を行った。詳細は、以下の通りである。
(Confirm biodistribution)
The biodistribution of the radiolabeled drug of the present invention was confirmed. Details are as follows.
（使用した動物）
金沢大学「動物実験委員会（Committee on Animal Experimentation）」から承認を受けた実験方法を採用した。さらに、金沢大学の「実験動物の管理と使用に関するガイドライン（Guidelines for the Care and Use of Laboratory Animals）」に従って本実施例を行った。
23°C 、12時間毎の照光/遮光周期で、食餌及び水を自由に摂取できるようにヌードマウスを収容した。10%の加熱不活性化ウシ胎仔血清、ペニシリン（100 units/mL）及びストレプトマイシン（100 μg/mL）を含むEagle最小必須培地（EMEM）にて、37°C で5% CO2雰囲気下を維持しながら、U87MG細胞を細胞培養皿中で培養した。腫瘍を生成するため、100 μLのPBS中、約5 × 106個の調製済みU87MG神経膠芽腫細胞を、4週齢の雌BALB/cヌードマウス（15〜19 g, Japan SLC, Inc., Hamamatsu, Japan）の左右の肩に皮下注射した。接種から約14〜21日後（腫瘍が明確に判別できる大きさに達するのに必要な期間）において、下記の生体内分布実験を行った。
(Animal used)
The experimental method approved by Kanazawa University “Committee on Animal Experimentation” was adopted. Furthermore, this example was carried out in accordance with “Guidelines for the Care and Use of Laboratory Animals” from Kanazawa University.
Nude mice were housed so that food and water were freely available at 23 ° C. with an illumination / shading cycle of 12 hours. Maintain 5% CO 2 atmosphere at 37 ° C in Eagle's minimum essential medium (EMEM) containing 10% heat-inactivated fetal bovine serum, penicillin (100 units / mL) and streptomycin (100 μg / mL) However, U87MG cells were cultured in cell culture dishes. To generate tumors, approximately 5 × 10 6 prepared U87MG glioblastoma cells in 100 μL PBS were added to 4 week old female BALB / c nude mice (15-19 g, Japan SLC, Inc. , Hamamatsu, Japan) was injected subcutaneously into the left and right shoulders. About 14 to 21 days after the inoculation (period necessary to reach a size at which the tumor can be clearly discriminated), the following biodistribution experiment was performed.
（生体内分布実験）
前記のU87MG担癌マウス(各4匹のマウス群)に、67Ga-DOTA-c(RGDfK)、67Ga-DOTA-(Asp)8-c(RGDfK)、又は67Ga-DOTA-(Asp)11-c(RGDfK)を含む生理食塩水溶液100 μLを静脈内投与した。注射から1時間後及び3時間後、マウスを屠殺した。そして、各組織を摘出、秤量し、オートウェルガンマカウンターで放射能計数を測定した。
過剰量のRGDペプチドが生体内分布に及ぼす影響を確認するため、3匹のマウス群に67Ga-DOTA-(Asp)11-c(RGDfK)（74 kBq）及びc(RGDfK) の混合溶液100 μLを静脈内投与した（0.2 mg/マウス）。注射から1時間後にマウスを屠殺した。そして、各組織を摘出、秤量し、オートウェルガンマカウンターで放射能計数を測定した。
胃でのパーセント注射量（%用量）、及び他の器官での1グラム当たりのパーセント注射量（%用量/g）でデータを示した。一元配置分散分析（ANOVA）、次いでTukey-Kramer事後試験によって、67Ga-DOTA-c(RGDfK)、67Ga-DOTA-(Asp)8-c(RGDfK)及び67Ga-DOTA- (Asp)11-c(RGDfK)の生体内分布の有意性を判定した。Studentの両側t検定によってブロッキング実験の有意性を判定した。p<0.05で、結果は統計学的に有意であると判定した。
(Biodistribution experiment)
In the U87MG tumor-bearing mice (group of 4 mice each), 67 Ga-DOTA-c (RGDfK), 67 Ga-DOTA- (Asp) 8 -c (RGDfK), or 67 Ga-DOTA- (Asp) 100 μL of physiological saline solution containing 11- c (RGDfK) was intravenously administered. Mice were sacrificed 1 hour and 3 hours after injection. Each tissue was extracted and weighed, and the radioactivity count was measured with an autowell gamma counter.
To confirm the effect of excess amount of RGD peptide on biodistribution, a mixed solution of 67 Ga-DOTA- (Asp) 11 -c (RGDfK) (74 kBq) and c (RGDfK) was added to a group of 3 mice. μL was administered intravenously (0.2 mg / mouse). Mice were sacrificed 1 hour after injection. Each tissue was extracted and weighed, and the radioactivity count was measured with an autowell gamma counter.
Data were presented as percent injection volume in the stomach (% dose) and percent injection volume per gram in other organs (% dose / g). 67 Ga-DOTA-c (RGDfK), 67 Ga-DOTA- (Asp) 8 -c (RGDfK) and 67 Ga-DOTA- (Asp) 11 by one-way analysis of variance (ANOVA) followed by Tukey-Kramer post-test The significance of biodistribution of -c (RGDfK) was determined. The significance of blocking experiments was determined by Student's two-tailed t test. Results were determined to be statistically significant at p <0.05.
（生体内分布実験結果）
67Ga-DOTA-c(RGDfK), 67Ga-DOTA-(Asp)8-c(RGDfK)及び67Ga-DOTA-(Asp)11-c(RGDfK)の生体内分布の結果を図６〜９に示す。
骨中の67Ga-DOTA-(Asp)11-c(RGDfK)の集積は、67Ga-DOTA-(Asp)8-c(RGDfK)と比較して、有意に高かった（参照：図９）。67Ga-DOTA-c(RGDfK)は、骨中では殆ど集積しなかった（参照：図６、９）。
一方、67Ga-DOTA-c(RGDfK)、67Ga-DOTA-(Asp)8-c(RGDfK)及び67Ga-DOTA-(Asp)11-c(RGDfK)は、腫瘍中で多量に集積していた（参照：図９）。
67Ga-DOTA-(Asp)8-c(RGDfK)及び67Ga-DOTA-(Asp)11-c(RGDfK)は、腎臓、肝臓、腸及び脾臓でやや集積し、膵臓、肺、心臓、胃、筋肉及び脳での集積は少ないという類似した生体内分布パターンを示した。
過剰量のRGDペプチドが生体内分布に及ぼす影響の結果を図１０、１１に示す。
c(RGDfK)ペプチドを67Ga-DOTA-(Asp)11-c(RGDfK)と同時に生体内に注射すると、腫瘍内での67Ga-DOTA-(Asp)11-c(RGDfK)の集積が大幅に減少することを確認した。すなわち、67Ga-DOTA-(Asp)11-c(RGDfK)のc(RGDfK)が腫瘍に特異的に結合することを確認した。
さらに、c(RGDfK)ペプチドを67Ga-DOTA-(Asp)11-c(RGDfK)と同時に生体内に注射すると、骨での蓄積が大幅に増加することも確認した。すなわち、67Ga-DOTA-(Asp)11-c(RGDfK)の骨中蓄積がc(RGDfK)に起因するものではなくアスパラギン酸リンカー｛（Asp）n｝に起因することによることを確認した。
以上により、67Ga-DOTA-(Asp)8-c(RGDfK)及び67Ga-DOTA-(Asp)11-c(RGDfK)は、生体内の腫瘍及び骨を選択的に認識して腫瘍内及び骨に蓄積できることを確認した。
これにより、本発明の放射性標識薬剤は、癌の原発巣のみならず、骨転移をも同時に検出できる。
(Biodistribution experiment results)
The biodistribution results of 67 Ga-DOTA-c (RGDfK), 67 Ga-DOTA- (Asp) 8 -c (RGDfK) and 67 Ga-DOTA- (Asp) 11 -c (RGDfK) are shown in FIGS. Shown in
The accumulation of 67 Ga-DOTA- (Asp) 11 -c (RGDfK) in bone was significantly higher compared to 67 Ga-DOTA- (Asp) 8 -c (RGDfK) (see: FIG. 9). . 67 Ga-DOTA-c (RGDfK) hardly accumulated in bone (see: FIGS. 6 and 9).
On the other hand, 67 Ga-DOTA-c (RGDfK), 67 Ga-DOTA- (Asp) 8 -c (RGDfK) and 67 Ga-DOTA- (Asp) 11 -c (RGDfK) accumulate in large amounts in the tumor. (Ref: FIG. 9).
67 Ga-DOTA- (Asp) 8 -c (RGDfK) and 67 Ga-DOTA- (Asp) 11 -c (RGDfK) accumulate somewhat in the kidney, liver, intestine and spleen, and are in the pancreas, lung, heart, stomach It showed a similar biodistribution pattern with less accumulation in muscle and brain.
The results of the effect of excess RGD peptide on biodistribution are shown in FIGS.
c (RGDfK) peptide 67 Ga-DOTA- (Asp) 11 when injected into -c (RGDfK) simultaneously with the body, is integrated in the tumors of 67 Ga-DOTA- (Asp) 11 -c (RGDfK) significantly Confirmed to decrease. That is, it was confirmed that c (RGDfK) of 67 Ga-DOTA- (Asp) 11 -c (RGDfK) specifically binds to the tumor.
Furthermore, when c (RGDfK) peptide was injected into a living body simultaneously with 67 Ga-DOTA- (Asp) 11 -c (RGDfK), it was also confirmed that the accumulation in bone was greatly increased. That is, it was confirmed that the accumulation in bone of 67 Ga-DOTA- (Asp) 11 -c (RGDfK) was caused not by c (RGDfK) but by the aspartate linker {(Asp) n}.
As described above, 67 Ga-DOTA- (Asp) 8 -c (RGDfK) and 67 Ga-DOTA- (Asp) 11 -c (RGDfK) selectively recognize tumors and bones in vivo and It was confirmed that it can accumulate in bone.
Thereby, the radiolabeled drug of the present invention can simultaneously detect not only the primary cancer focus but also bone metastasis.
（総論）
本発明の放射性標識薬剤は、アスパラギン酸リンカー｛（Asp）n｝及びRGD含有環状ペプチドの存在により、癌の原発巣のみならず、骨転移をも同時に検出できる。
また、配位子、特に、DOTAは、ガリウムのみならずインジウム（111In）、イットリウム（90Y）、ルテチウム（177Lu）等と安定的な錯体を形成できるので、配位子（特に、DOTA）-(Asp)11-c(RGDfK)はこのような放射性金属で標識できる。したがって、配位子（特に、DOTA）-(Asp)n-c(RGDfK) と多様な放射性金属、特に抗腫瘍効果を有する放射性物質との錯体は診断薬としてだけでなく、治療薬としても有用である。
また、67Gaの代わりに68Gaを使用した68Ga-配位子（特に、DOTA）-(Asp)n-c(RGDfK)は、癌の初期病変のみならず骨転移を同時に診断するためのPETトレーサーとして有用である。
(General)
The radiolabeled drug of the present invention can simultaneously detect not only the primary cancer focus but also bone metastasis due to the presence of the aspartate linker {(Asp) n} and the RGD-containing cyclic peptide.
Moreover, ligands, in particular, DOTA is indium not Gallium only (111 an In), yttrium (90 Y), since lutetium (177 Lu) or the like and stable complexes can form, ligands (in particular, DOTA )-(Asp) 11 -c (RGDfK) can be labeled with such a radioactive metal. Therefore, complexes of ligands (especially DOTA)-(Asp) nc (RGDfK) with various radioactive metals, especially radioactive substances with antitumor effects are useful not only as diagnostics but also as therapeutics .
Further, 67 Ga 68 Ga- ligands using 68 Ga-instead of (in particular, DOTA) - (Asp) nc (RGDfK) has, PET tracers for simultaneously diagnosing bone metastases not only primary lesion of cancer Useful as.
本発明では、癌の原発巣のみならず骨転移をも同時に検出できる放射性標識薬剤を提供することができる。 The present invention can provide a radiolabeled drug that can simultaneously detect not only the primary cancer focus but also bone metastasis.
Claims (8)
n＝5〜25であることを特徴とする放射性標識薬剤。 A radiolabeled drug comprising a ligand- (Asp) n-RGD containing cyclic peptide containing a radioactive substance,
A radiolabeled drug, wherein n = 5-25.
（１）ガリウム
（２）銅
（３）インジウム
（４）イットリウム
（５）テクネチウム
（６）ルテチウム
（７）ビスマス
（８）レ二ウム The radiolabeled drug according to claim 1, wherein the radioactive substance is selected from any one of the following.
(1) Gallium (2) Copper (3) Indium (4) Yttrium (5) Technetium (6) Lutetium (7) Bismuth (8) Rhenium
（１）c（RGDfK）
（２）c（RGDyK）
（３）c（RGDfV）
（４）c（RGDyV） The radiolabeled drug according to claim 1 or 2, wherein the RGD-containing cyclic peptide is selected from any one of the following.
(1) c (RGDfK)
(2) c (RGDyK)
(3) c (RGDfV)
(4) c (RGDyV)
（１）1,4,7,10-テトラアザシクロドデカン-1,4,7,10-四酢酸（1,4,7,10-tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid：DOTA）
（２）1,4,7-triazacyclononane-triacetic acid(NOTA)
（３）triazacyclononane-phosphinate(TRAP)
（４）mercaptacetylgycilgycilglycine（MAG3）
（５）tricarbonyl
（６）ジエチレントリアミン五酢酸（DTPA） The radiolabeled drug according to any one of claims 1 to 4, wherein the ligand is selected from any one of the following.
(1) 1,4,7,10-tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid (1,4,7,10-tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid: DOTA)
(2) 1,4,7-triazacyclononane-triacetic acid (NOTA)
(3) triazacyclononane-phosphinate (TRAP)
(4) mercaptacetylgycilgycilglycine (MAG3)
(5) tricarbonyl
(6) Diethylenetriaminepentaacetic acid (DTPA)
n＝5〜25であることを特徴とする放射性標識薬剤。 A radiolabeled drug comprising DOTA- (Asp) n-c (RGDfK) containing radioactive gallium,
A radiolabeled drug, wherein n = 5-25.
n＝5〜25であることを特徴とする標識薬剤。 A labeling agent comprising DOTA- (Asp) n-c (RGDfK) containing gallium,
n = 5 to 25, a labeled drug,
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2013221672A JP2015083546A (en) | 2013-10-25 | 2013-10-25 | Radioactive labeling agent for inspection/therapy of cancer primary focus/bone metastasis |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2013221672A JP2015083546A (en) | 2013-10-25 | 2013-10-25 | Radioactive labeling agent for inspection/therapy of cancer primary focus/bone metastasis |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2015083546A true JP2015083546A (en) | 2015-04-30 |
Family
ID=53047379
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2013221672A Pending JP2015083546A (en) | 2013-10-25 | 2013-10-25 | Radioactive labeling agent for inspection/therapy of cancer primary focus/bone metastasis |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2015083546A (en) |
-
2013
- 2013-10-25 JP JP2013221672A patent/JP2015083546A/en active Pending
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP6997135B2 (en) | GRPR antagonists for the detection, diagnosis and treatment of GRPR-positive cancers | |
| US10464985B2 (en) | Compounds with reduced ring size for use in diagnosing and treating melanoma, including metastatic melanoma and methods related to same | |
| CN111065646B (en) | Radiopharmaceuticals | |
| KR101200049B1 (en) | Preparation of Technetium-99m tricarbonyl labeled glycine monomer or oligomer containing probes that have biomolecules and its application as imaging complex-composition | |
| CA3171753A1 (en) | Stable formulations for radionuclide complexes | |
| De et al. | Radiolabeled new somatostatin analogs conjugated to DOMA chelator used as targeted tumor imaging agent: synthesis and radiobiological evaluation | |
| Ballard et al. | In vitro and in vivo evaluation of melanin-binding decapeptide 4B4 radiolabeled with 177Lu, 166Ho, and 153Sm radiolanthanides for the purpose of targeted radionuclide therapy of melanoma | |
| Ishizaki et al. | Fundamental study of radiogallium-labeled aspartic acid peptides introducing octreotate derivatives | |
| JP5604680B2 (en) | Radiolabeled drug | |
| JP2015083546A (en) | Radioactive labeling agent for inspection/therapy of cancer primary focus/bone metastasis | |
| KR101551232B1 (en) | Novel N3S1 chelator-folate derivatives, preparation method thereof and composition for diagnosis or treatment of cancer containing the same as an active ingredient | |
| JP4318985B2 (en) | Somatostatin analog derivatives and uses thereof | |
| Hirata et al. | Synthesis and evaluation of a multifunctional probe with a high affinity for prostate-specific membrane antigen (PSMA) and bone | |
| JP5971867B2 (en) | Gallium labeled drug | |
| CA3203175A1 (en) | Peptide receptor radionuclide therapy | |
| KR101171385B1 (en) | RGD peptides which are linked with labeled chilates, and physiolosically acceptable slats thereof, and the preparation method thereof, and the reagent for diagnosis or treatment of cancer containing the same as an active ingredient | |
| Pinto | Organometallic complexes of Tc I and Re I for radiometalation of biologically active peptides | |
| Janevik-Ivanovska et al. | DETECTION OF DEEP VENOUS THROMBOSIS IN AN EXPERIMENTAL ANIMAL MODEL USING RADIOACTIVE LABELLED TIROFIBAN-GPIIb/IIIa INHIBITOR | |
| La Bella | Pharmacological evaluation of ⁹⁹mTc (I)-labeled bombesin analogues for imaging of gastrin releasing peptide receptor-positive tumors |