JP2015073445A - Baffle plate unit - Google Patents

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泰公 林
Yasuhiro Hayashi
泰公 林
裕 米光
Hiroshi Yonemitsu
裕 米光
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Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a baffle plate unit having the following features: according to the difference in cultivation container, such as size and configuration, any attaching position, number and direction may be designed; having an excellent attaching flexibility; it is easy to attach or remove it; cheap; having an excellent versatility; having an excellent handling; and it is certainly possible to enhance stirring efficiency of culture medium and the like.SOLUTION: A baffle plate unit 1 may be detachable on a cultivation container 10. The baffle plate unit 1 comprises a magnet 2 arranged on an outer surface of the cultivation container 10 and a baffle plate 3 magnetically attached on an inner surface of the cultivation container 10 by the magnet 2.

Description

本発明は邪魔板ユニットに関し、より詳細には、微生物や細胞の培養等において使用する容器に脱着可能な邪魔板ユニットに関する。   The present invention relates to a baffle plate unit, and more particularly to a baffle plate unit that can be attached to and detached from a container used in culture of microorganisms or cells.

微生物や動植物細胞などの好気的条件下での液体培養では、一般的に通気型攪拌槽を用いた通気攪拌培養、フラスコ、試験管、又はマイクロプレート等の培養容器を用いた振とう培養が行われている。これらの通気攪拌培養や振とう培養において、培養液に酸素を効率よく供給するために、邪魔板(バッフルとも言う)が設けられた培養容器が提案されている。   In liquid culture under aerobic conditions such as microorganisms and animal and plant cells, aeration and agitation culture using an aeration type agitation tank, shaking culture using a culture vessel such as a flask, test tube, or microplate are generally used. Has been done. In these aeration and agitation cultures and shaking cultures, a culture vessel provided with a baffle plate (also referred to as a baffle) has been proposed in order to efficiently supply oxygen to the culture solution.

下記の特許文献1には、図11に示した邪魔板ユニットが開示されている。図11(a)は培養容器と邪魔板ユニットの分離状態を示した斜視図であり、図11(b)は邪魔板ユニットが装着された培養容器の斜視図である。   Patent Document 1 below discloses the baffle plate unit shown in FIG. FIG. 11A is a perspective view showing a state where the culture vessel and the baffle plate unit are separated, and FIG. 11B is a perspective view of the culture vessel equipped with the baffle plate unit.

邪魔板ユニット20は、容器に取り外し自在に装着されるものであり、リング状の取付部材21と、取付部材21に等間隔をおいて垂設された複数個(4個)の邪魔板22と、容器31の上縁部に係止させるために取付部材21に配設された止具23とで構成されている。   The baffle plate unit 20 is detachably attached to the container. The baffle plate unit 20 includes a ring-shaped attachment member 21 and a plurality (four) of baffle plates 22 provided at regular intervals on the attachment member 21. The stopper 31 is provided on the attachment member 21 so as to be engaged with the upper edge of the container 31.

邪魔板ユニット20は、図11(b)に示すように、邪魔板22を上方から容器31内に挿入し、取付部材21を容器31の上縁部上に載置し、止具23を上縁部に係止することにより容器31に装着できるようになっている。取付部材21の中央には、攪拌羽根3を備えた回転シャフト34が垂設され、モータ33により回転シャフト34が回転駆動されるように構成されている。このような邪魔板ユニット20と同様な構成の邪魔板ユニットが下記の特許文献2にも開示されている。   As shown in FIG. 11 (b), the baffle plate unit 20 inserts the baffle plate 22 into the container 31 from above, places the mounting member 21 on the upper edge of the container 31, and raises the stopper 23. The container 31 can be attached by being locked to the edge. In the center of the attachment member 21, a rotating shaft 34 having a stirring blade 3 is suspended, and the rotating shaft 34 is rotationally driven by a motor 33. A baffle plate unit having the same configuration as the baffle plate unit 20 is also disclosed in Patent Document 2 below.

下記の特許文献3には、図12に示した邪魔板を有する細胞培養用のマイクロプレートが開示されている。図12(a)は平面図であり、図12(b)は(a)におけるb−b線断面図である。   Patent Document 3 below discloses a microplate for cell culture having the baffle plate shown in FIG. 12A is a plan view, and FIG. 12B is a cross-sectional view taken along line bb in FIG.

マイクロプレート40には、24個の小室41が縦4列横6列に整列されて設けられている。各小室41は上面開放の円筒状に形成され、その内側壁に各々2個の邪魔板42が縦設されている。また各小室41に各々液体培地43が収容されるようになっている。   The microplate 40 is provided with 24 small chambers 41 arranged in four rows and six rows. Each small chamber 41 is formed in a cylindrical shape with an open top surface, and two baffle plates 42 are vertically provided on the inner wall thereof. In addition, the liquid medium 43 is accommodated in each small chamber 41.

また、容器自体の形状を変形させて容器内部にバッフルを形成したバッフル付き三角フラスコが実験器具メーカー(IWAKI社、NALGEN社、THOMSON社など)から既に販売されている。   In addition, baffled Erlenmeyer flasks in which the shape of the container itself is deformed to form a baffle inside the container have already been sold from experimental instrument manufacturers (IWAKI, NALGEN, THOSON, etc.).

このように従来から培養容器に邪魔板を設けて、培養液に酸素を効率よく供給する工夫がなされているが、以下のような課題があった。   As described above, the baffle plate has been conventionally provided in the culture vessel so as to efficiently supply oxygen to the culture solution. However, there are the following problems.

特許文献1、2に開示された邪魔板ユニットは、培養容器の上面開口部の大きさが異なる培養容器には適用することができず、装着できる容器サイズが限定されており、汎用性がなく、また、邪魔板の数、位置及び取付け方向が固定されており、取付け自由度が低いという課題があった。   The baffle plate units disclosed in Patent Documents 1 and 2 cannot be applied to culture containers having different sizes of the upper surface opening of the culture container, the size of the container that can be mounted is limited, and there is no versatility. In addition, the number, position, and mounting direction of the baffle plates are fixed, and there is a problem that the degree of mounting freedom is low.

また、特許文献3記載のマイクロプレートや市販されているバッフル付き三角フラスコは、邪魔板が容器と一体的に形成されているため、邪魔板の数、位置及び取付け方向などを任意に設定することができず、取付け自由度が低いという課題があった。また、製品価格も高く、例えば、バッフル付き三角フラスコの価格は、通常の(バッフルなしの)三角フラスコの約2倍の価格であるという課題があった。   In addition, since the baffle plate is integrally formed with the container in the microplate described in Patent Document 3 and the commercially available conical flask with baffle, the number, position, and mounting direction of the baffle plate can be arbitrarily set. There was a problem that the degree of freedom of attachment was low. In addition, the product price is high. For example, the price of a conical flask with a baffle is about twice that of a normal (non-baffled) conical flask.

特開2012−20267号公報JP 2012-20267 A 特開2011−83692号公報JP 2011-83692 A 実用新案登録第2561830号公報Utility Model Registration No. 25618130

課題を解決するための手段及びその効果Means for solving the problems and their effects

本発明は上記課題に鑑みなされたものであって、培養容器の大きさや形状等の違いに応じて、装着する位置、数及び向きなどを任意に設定することができ、取付け自由度が高く、脱着も容易であり、安価で汎用性が高く、使い勝手に優れ、しかも培養液の通気攪拌効率も確実に高めることができる邪魔板ユニットを提供することを目的としている。   The present invention has been made in view of the above problems, and according to the difference in the size and shape of the culture vessel, it is possible to arbitrarily set the mounting position, number, orientation, etc. An object of the present invention is to provide a baffle plate unit that is easy to detach and attach, is inexpensive, highly versatile, easy to use, and can reliably increase the aeration and stirring efficiency of a culture solution.

上記目的を達成するために本発明に係る邪魔板ユニット(1)は、培養容器に脱着自在な邪魔板ユニットであって、前記培養容器の外面に配設される磁石と、該磁石によって前記培養容器の内面に磁着される邪魔板とを含んで構成されていることを特徴としている。   In order to achieve the above object, a baffle plate unit (1) according to the present invention is a baffle plate unit that can be freely attached to and detached from a culture vessel, and a magnet disposed on the outer surface of the culture vessel, and the culture by the magnet. It is characterized by including a baffle plate magnetically attached to the inner surface of the container.

上記邪魔板ユニット(1)によれば、前記磁石の磁力を利用して前記邪魔板を前記培養容器の内面に磁着させることができる。したがって、前記磁石と前記邪魔板との組み合わせにより、前記培養容器の任意の位置(側面や底面など)に前記邪魔板を必要枚数だけ簡単に設置することができる。また、前記培養容器の大きさや形状に応じて、前記邪魔板の取付け枚数を自由に設定することができ、汎用性が高く、脱着も容易であり、使い勝手の良いものとすることができる。
また、前記邪魔板が装着された培養容器を使用することにより、通気攪拌培養や振とう培養等において、培養液への酸素等の供給効率を高めることができ、培養する微生物や細胞の種類に応じた効率の良い好気培養が可能になる。
According to the baffle plate unit (1), the baffle plate can be magnetically attached to the inner surface of the culture vessel using the magnetic force of the magnet. Therefore, by combining the magnet and the baffle plate, the necessary number of baffle plates can be easily installed at an arbitrary position (side surface, bottom surface, etc.) of the culture vessel. Further, the number of the baffle plates to be attached can be freely set according to the size and shape of the culture vessel, is highly versatile, can be easily detached, and can be easily used.
In addition, by using a culture vessel equipped with the baffle plate, the supply efficiency of oxygen or the like to the culture solution can be increased in aeration and agitation culture or shaking culture, and the type of microorganism or cell to be cultured Efficient aerobic culture can be achieved.

また本発明に係る邪魔板ユニット(2)は、上記邪魔板ユニット(1)において、前記邪魔板が、磁性薄板を折り曲げて形成されたものであることを特徴としている。   The baffle plate unit (2) according to the present invention is characterized in that, in the baffle plate unit (1), the baffle plate is formed by bending a magnetic thin plate.

上記邪魔板ユニット(2)によれば、前記邪魔板が、磁性薄板を折り曲げて形成されたものであるので、安価な邪魔板ユニットとして提供することができる。なお、前記磁性薄板の大きさは、使用する前記磁石の磁力や大きさの他、使用する培養容器の形状や大きさに応じて任意に設定することができ、また、前記磁性薄板の形状も特に限定されるものではなく、例えば、矩形形状、三角形状、又は円、円弧、扇形状など、様々な形状のものが採用され得る。   According to the baffle plate unit (2), since the baffle plate is formed by bending a magnetic thin plate, it can be provided as an inexpensive baffle plate unit. The size of the magnetic thin plate can be arbitrarily set according to the shape and size of the culture vessel used in addition to the magnetic force and size of the magnet used, and the shape of the magnetic thin plate is also There is no particular limitation, and various shapes such as a rectangular shape, a triangular shape, a circle, an arc, a fan shape, and the like can be adopted.

また本発明に係る邪魔板ユニット(3)は、上記邪魔板ユニット(2)において、前記邪魔板の縁部が波形に形成されていることを特徴としている。   The baffle plate unit (3) according to the present invention is characterized in that, in the baffle plate unit (2), an edge portion of the baffle plate is formed in a waveform.

上記邪魔板ユニット(3)によれば、前記邪魔板の縁部が波形に形成されているので、前記邪魔板の縁部が直線形状のものと比べて、振とう培養時に各波形部分で培養液に乱流が生じ易く、培養液の攪拌及び通気効率を高めることができ、微生物や細胞などの培養効率を高めることができる。   According to the baffle plate unit (3), since the edge of the baffle plate is formed in a waveform, the edge of the baffle plate is cultured in each waveform portion at the time of shaking culture compared to a linear shape. Turbulent flow is likely to occur in the liquid, the stirring and aeration efficiency of the culture liquid can be increased, and the culture efficiency of microorganisms and cells can be increased.

また本発明に係る邪魔板ユニット(4)は、上記邪魔板ユニット(2)又は(3)において、前記邪魔板に複数の通孔が形成されていることを特徴としている。   The baffle plate unit (4) according to the present invention is characterized in that, in the baffle plate unit (2) or (3), a plurality of through holes are formed in the baffle plate.

上記邪魔板ユニット(4)によれば、前記邪魔板に複数の通孔が形成されているので、振とう培養時に各通孔部分で培養液に乱流が生じ易くなり、前記邪魔板に複数の通孔が形成されていないものと比較して、培養液の攪拌及び通気効率を高めることができ、微生物や細胞などの培養効率を高めることができる。   According to the baffle plate unit (4), since a plurality of through holes are formed in the baffle plate, turbulence easily occurs in the culture medium at each through hole portion during shaking culture, and a plurality of baffle plates are formed in the baffle plate. Compared with those in which no through-hole is formed, the stirring and aeration efficiency of the culture solution can be increased, and the culture efficiency of microorganisms and cells can be increased.

本発明の実施の形態に係る邪魔板ユニットを示した斜視図である。It is the perspective view which showed the baffle plate unit which concerns on embodiment of this invention. (a)は、実施の形態に係る邪魔板ユニットが三角フラスコに装着された状態を示す斜視図であり、(b)は(a)におけるb−b線断面図である。(A) is a perspective view which shows the state with which the baffle plate unit which concerns on embodiment was mounted | worn with the Erlenmeyer flask, (b) is the bb sectional view taken on the line in (a). (a)〜(d)は、別の実施の形態に係る邪魔板ユニットの邪魔板を示した斜視図である。(A)-(d) is the perspective view which showed the baffle plate of the baffle plate unit which concerns on another embodiment. 実施例に係る邪魔板ユニットが装着されたフラスコを用いて枯草菌をLB培地で、37℃、振とう回数100rpmの条件で振とう培養したときの菌体濃度の経時変化を示した図である。It is the figure which showed the time-dependent change of a cell density | concentration when Bacillus subtilis was shake-cultured on LB culture medium on the conditions of 37 degreeC and the frequency | count of shaking 100 rpm using the flask equipped with the baffle plate unit which concerns on an Example. . 実施例に係る邪魔板ユニットが装着されたフラスコを用いて枯草菌をLB培地で、37℃、振とう回数120rpmの条件で振とう培養したときの菌体濃度の経時変化を示した図である。It is the figure which showed the time-dependent change of a cell density | concentration when Bacillus subtilis was shake-cultured on 37 degreeC and the conditions of the frequency | count of shaking 120 rpm using the flask equipped with the baffle plate unit which concerns on an Example. . 実施例に係る邪魔板ユニットが装着されたフラスコを用いて枯草菌をLB培地で、37℃、振とう回数140rpmの条件で振とう培養したときの菌体濃度の経時変化を示した図である。It is the figure which showed the time-dependent change of a cell density | concentration when Bacillus subtilis was culture | cultivated by shaking on LB culture medium on 37 degreeC and the conditions of the frequency | count of shaking 140 rpm using the flask equipped with the baffle plate unit which concerns on an Example. . 実施例に係る邪魔板ユニットが装着されたフラスコを用いて枯草菌をLB培地で、37℃、振とう回数160rpmの条件で振とう培養したときの菌体濃度の経時変化を示した図である。It is the figure which showed the time-dependent change of a microbial cell density | concentration when Bacillus subtilis was culture | cultivated on LB culture medium on 37 degreeC and the conditions of the frequency | count of shaking of 160 rpm using the flask equipped with the baffle plate unit which concerns on an Example. . 実施例に係る邪魔板ユニットが装着されたフラスコを用いて枯草菌をLB培地で、37℃にて振とう培養した結果であり、邪魔板の設置枚数を変化させたときの影響を調べた結果である。It is a result of culturing Bacillus subtilis in LB medium at 37 ° C. using a flask equipped with a baffle plate unit according to the example, and a result of examining the effect when the number of installed baffle plates is changed It is. 実施例に係る邪魔板ユニットが装着されたフラスコを用いて大腸菌をLB培地で、37℃にて振とう培養したときの菌体濃度の経時変化を示した図である。It is the figure which showed the time-dependent change of a cell density | concentration when colon_bacillus | E._coli is culture | cultivated at 37 degreeC by LB culture medium using the flask with which the baffle plate unit which concerns on an Example was equipped. 実施例に係る邪魔板ユニットが装着されたフラスコを用いて枯草菌をLB培地で、37℃にて振とう培養した結果であり、邪魔板の形状の違いによる影響を調べた結果である。This is a result of shaking culture of Bacillus subtilis in LB medium at 37 ° C. using a flask equipped with a baffle unit according to an example, and is a result of examining the influence of the difference in the shape of the baffle plate. 従来の邪魔板ユニットを説明するための図であり、(a)は培養容器と邪魔板ユニットの分離状態を示した斜視図、(b)は邪魔板ユニットが装着された培養容器の斜視図である。It is a figure for demonstrating the conventional baffle plate unit, (a) is the perspective view which showed the isolation | separation state of the culture container and the baffle plate unit, (b) is the perspective view of the culture container with which the baffle plate unit was mounted | worn. is there. 従来の邪魔板を有する細胞培養用のマイクロプレートを示した図であり、(a)は平面図、(b)は(a)におけるb−b線断面図である。It is the figure which showed the microplate for cell cultures which has the conventional baffle plate, (a) is a top view, (b) is the bb sectional view taken on the line in (a).

以下、本発明に係る邪魔板ユニットの実施の形態を図面に基づいて説明する。図1は、実施の形態に係る邪魔板ユニットを示した斜視図である。
邪魔板ユニット1は、培養容器の外面に配設される磁石2と、この磁石2によって培養容器の内面に磁着される邪魔板3とを一組として構成されている。
Embodiments of a baffle plate unit according to the present invention will be described below with reference to the drawings. FIG. 1 is a perspective view showing a baffle plate unit according to the embodiment.
The baffle plate unit 1 is composed of a magnet 2 disposed on the outer surface of the culture vessel and a baffle plate 3 magnetically attached to the inner surface of the culture vessel by the magnet 2.

磁石2は、その種類が特に限定されるものではなく、合金磁石(アルニコ磁石、鉄−クロム‐コバルト磁石、鉄‐白金磁石など)、フェライト磁石、又は希土類磁石(ネオジウム磁石、サマリウム‐コバルト磁石など)などで構成され、培養液の攪拌時に邪魔板3が培養容器の内面から外れない程度以上の磁力で邪魔板3を培養容器の内面に確実に磁着できるものである。磁石2の表面にはニッケルメッキ等のコーティング処理が施されている。   The type of the magnet 2 is not particularly limited, and an alloy magnet (alnico magnet, iron-chromium-cobalt magnet, iron-platinum magnet, etc.), ferrite magnet, or rare earth magnet (neodymium magnet, samarium-cobalt magnet, etc.) The baffle plate 3 can be reliably magnetically attached to the inner surface of the culture vessel with a magnetic force higher than the degree that the baffle plate 3 does not come off the inner surface of the culture vessel when the culture solution is stirred. The surface of the magnet 2 is subjected to a coating process such as nickel plating.

また、磁石2の形状は、図1に示したボタン型(例えば、直径1〜2cm程度)の他、棒状や板状などの形状をしたものが採用可能であり、その形状が特に限定されるものではない。また、培養容器の外面への密着性を高めるために、磁石の粉にゴムが練り込まれた変形可能なゴム磁石なども採用され得る。   Further, the shape of the magnet 2 can be a button shape (for example, about 1 to 2 cm in diameter) shown in FIG. 1 or a rod shape or a plate shape, and the shape is particularly limited. It is not a thing. Moreover, in order to improve the adhesiveness to the outer surface of a culture container, the deformable rubber magnet etc. which rubber | gum was kneaded into the powder of a magnet may be employ | adopted.

邪魔板3は、磁石にくっ付く性質(強磁性)の各種金属材料からなる磁性薄板で構成され、オートクレーブなどによる繰り返しの高温滅菌処理にも耐える耐久性を持たせるため磁性薄板の表面にテフロン(登録商標)などでコーティング処理されたものが採用され得る。   The baffle plate 3 is composed of a magnetic thin plate made of various metal materials that adhere to magnets (ferromagnetic), and has a Teflon (on the surface of the magnetic thin plate for durability to withstand repeated high-temperature sterilization by an autoclave or the like. Those coated with a registered trademark or the like may be employed.

図1に示した邪魔板3は、二等辺三角形状(例えば、底辺4cm、高さ5cm程度)をした磁性薄板を、二等辺三角形の頂点と底辺の中間点とを結ぶ線を中心にして約90度折り曲げて形成されたものである。折り曲げて形成された一方の片3aが培養容器の内面に磁着される磁着片として機能し、他方の片3bが培養液を攪拌するための攪拌片として機能するようになっている。   The baffle plate 3 shown in FIG. 1 is a magnetic thin plate having an isosceles triangle shape (for example, a base of about 4 cm and a height of about 5 cm) about a line connecting an apex of the isosceles triangle and an intermediate point of the base. It is formed by bending 90 degrees. One piece 3a formed by bending functions as a magnetized piece magnetized on the inner surface of the culture vessel, and the other piece 3b functions as a stirring piece for stirring the culture solution.

図2は、図1に示した邪魔板ユニット1を三角フラスコ10に装着した状態を示した断面図である。三角フラスコ10の外面に磁石2を配設し、この磁石2と対向させて三角フラスコ10の内面に邪魔板3を配置して、磁石2の磁力により邪魔板3が三角フラスコ10の内面に磁着されるようになっている。   FIG. 2 is a cross-sectional view showing a state in which the baffle plate unit 1 shown in FIG. A magnet 2 is disposed on the outer surface of the Erlenmeyer flask 10, a baffle plate 3 is disposed on the inner surface of the Erlenmeyer flask 10 so as to face the magnet 2, and the baffle plate 3 is magnetized on the inner surface of the Erlenmeyer flask 10 by the magnetic force of the magnet 2. It comes to be worn.

なお、三角フラスコ10への邪魔板ユニット1の装着個数は、特に限定されるものではなく、培養容器の大きさや培養する微生物や菌種等に応じて、1組以上装着することが可能である。また、磁石2の位置をずらすことにより、邪魔板3の位置や向きを簡単に調整できるようになっている。   The number of baffle plate units 1 attached to the Erlenmeyer flask 10 is not particularly limited, and one or more sets can be attached depending on the size of the culture container, the microorganisms or fungi to be cultured, and the like. . Further, the position and orientation of the baffle plate 3 can be easily adjusted by shifting the position of the magnet 2.

また、邪魔板3の形状は、図1に示した三角形状のものに限定されるものではなく、例えば、図3(a)〜(d)に示した形状をした邪魔板が採用され得る。
図3(a)に示した邪魔板3Aは、矩形形状(例えば、短辺2cm、長辺5cm程度)をした磁性薄板を、短辺の中間点を結ぶ線を中心として約90度折り曲げて形成されたもの(断面略L字形状)である。折り曲げて形成された一方の片が培養容器の内面に磁着される磁着片として機能し、他方の片が培養液を攪拌するための攪拌片として機能するようになっている。
Further, the shape of the baffle plate 3 is not limited to the triangular shape shown in FIG. 1, and for example, baffle plates having the shapes shown in FIGS. 3A to 3D may be employed.
The baffle plate 3A shown in FIG. 3A is formed by bending a magnetic thin plate having a rectangular shape (for example, a short side of about 2 cm and a long side of about 5 cm) about 90 degrees around a line connecting the midpoints of the short sides. (The cross section is substantially L-shaped). One piece formed by bending functions as a magnetized piece magnetized on the inner surface of the culture vessel, and the other piece functions as a stirring piece for stirring the culture solution.

図3(b)に示した邪魔板3Bは、上記図3(a)に示した邪魔板の長辺が波形に形成されたものである。例えば、波形の波の周期を20mm、波の高さを4mm程度に設定することができる。折り曲げて形成された一方の片が培養容器の内面に磁着される磁着片として機能し、他方の片が培養液を攪拌するための攪拌片として機能するようになっている。   The baffle plate 3B shown in FIG. 3 (b) is formed by corrugating the long side of the baffle plate shown in FIG. 3 (a). For example, the wave period can be set to 20 mm, and the wave height can be set to about 4 mm. One piece formed by bending functions as a magnetized piece magnetized on the inner surface of the culture vessel, and the other piece functions as a stirring piece for stirring the culture solution.

波形形状をした邪魔板3Bを用いた邪魔板ユニットによれば、邪魔板の縁部が直線形状のものと比べて、振とう培養時に各波形部分で培養液に乱流が生じ易く、培養液の攪拌及び通気効率を高めることが可能となり、微生物や細胞などの培養効率を高めることが可能となる。   According to the baffle plate unit using the baffle plate 3B having a corrugated shape, the turbulent flow is easily generated in each corrugated portion at the time of the shaking culture as compared with the case where the edge portion of the baffle plate is a straight shape. The agitation and aeration efficiency can be increased, and the culture efficiency of microorganisms and cells can be increased.

図3(c)に示した邪魔板3Cは、上記図3(a)に示した邪魔板の折り曲げ形成された両片に、通孔4(直径8mm程度)が8mm間隔で3個形成されたものである。また、図3(d)に示した邪魔板3Dは、上記図3(a)に示した邪魔板の折り曲げ形成された両片に、通孔5(直径5mm程度)が3mm間隔で6個形成されたものである。それぞれ、折り曲げて形成された一方の片が培養容器の内面に磁着される磁着片として機能し、他方の片が培養液を攪拌するための攪拌片として機能するようになっている。   In the baffle plate 3C shown in FIG. 3C, three through-holes 4 (diameter of about 8 mm) are formed at intervals of 8 mm in both pieces formed by bending the baffle plate shown in FIG. 3A. Is. Further, in the baffle plate 3D shown in FIG. 3D, six through-holes 5 (diameter of about 5 mm) are formed at intervals of 3 mm in both pieces formed by bending the baffle plate shown in FIG. It has been done. Each of the bent pieces functions as a magnetized piece magnetized on the inner surface of the culture vessel, and the other piece functions as a stirring piece for stirring the culture solution.

図3(c)、(d)に示した邪魔板3C、3Dでは、通孔4、5がそれぞれ円形であるが、通孔の形状は円形に限定されるものではなく、三角形、矩形、多角形などの種々の形状とすることができ、また、通孔の個数や孔サイズは、邪魔板の形状や大きさに応じて適宜設計することができる。   In the baffle plates 3C and 3D shown in FIGS. 3C and 3D, the through holes 4 and 5 are circular, respectively, but the shape of the through holes is not limited to a circular shape, but a triangle, a rectangle, and many Various shapes such as a square shape can be used, and the number and size of the through holes can be appropriately designed according to the shape and size of the baffle plate.

通孔4、5を備えた邪魔板3C、3Dによれば、振とう培養時に各通孔部分で培養液に乱流が生じ易くなり、通孔が形成されていない邪魔板と比較して、培養液の攪拌及び通気効率をより高めることが可能となり、微生物や細胞などの培養効率を高めることが可能となる。   According to the baffle plates 3C and 3D provided with the through-holes 4 and 5, turbulent flow is likely to occur in the culture solution at each through-hole portion during shaking culture, compared with baffle plates in which no through-holes are formed The agitation efficiency and aeration efficiency of the culture solution can be further increased, and the culture efficiency of microorganisms and cells can be increased.

上記した実施の形態に係る邪魔板ユニットによれば、磁石2の磁力を利用して邪魔板3、3A、3B、3C、3Dを三角フラスコ10の内面に簡単に磁着させることができ、磁石2と邪魔板3、3A、3B、3C、3Dとの組み合わせにより、三角フラスコ10の任意の位置(側壁面や底面など)に邪魔板3、3A、3B、3C、3Dを必要枚数だけ簡単に設置することができる。また、三角フラスコの大きさや形状に応じて、邪魔板3、3A、3B、3C、3Dの取付け枚数を自由に設定することができ、汎用性が高く、脱着も容易であり、使い勝手の良いものとすることができる。   According to the baffle plate unit according to the above-described embodiment, the baffle plates 3, 3A, 3B, 3C, and 3D can be easily magnetically attached to the inner surface of the Erlenmeyer flask 10 by using the magnetic force of the magnet 2. 2 and baffle plates 3, 3A, 3B, 3C, 3D can be easily combined with the required number of baffle plates 3, 3A, 3B, 3C, 3D at any position (side wall surface, bottom surface, etc.) of Erlenmeyer flask 10 Can be installed. In addition, the number of baffle plates 3, 3A, 3B, 3C, 3D can be freely set according to the size and shape of the Erlenmeyer flask, is highly versatile, easy to detach, and easy to use It can be.

また、邪魔板ユニットによれば、邪魔板3、3A、3B、3C、3Dが磁性薄板を折り曲げて形成されたものであるので、安価な邪魔板ユニットとして提供することができる。なお、磁性薄板の大きさは、使用する磁石2の磁力や大きさの他、使用する培養容器の形状や大きさに応じて任意に設定することができ、また、磁性薄板の形状も上記説明した形態のものに限定されるものではなく、様々な形状のものが採用できる。   Further, according to the baffle plate unit, the baffle plates 3, 3A, 3B, 3C, and 3D are formed by bending a magnetic thin plate, and therefore can be provided as an inexpensive baffle plate unit. The size of the magnetic thin plate can be arbitrarily set according to the shape and size of the culture vessel used in addition to the magnetic force and size of the magnet 2 to be used, and the shape of the magnetic thin plate is also described above. It is not limited to the thing of the form which was made, The thing of various shapes is employable.

以下、実施例に係る邪魔板ユニットを用いて培養実験を行った結果について説明する。
[実施例1]
図4〜図7は、実施例に係る邪魔板ユニットが装着された三角フラスコを用いて枯草菌(Bacillus subtilis)を振とう培養(LB培地、37℃)をしたときの菌体濃度の経時変化を示した図であり、振とう回数(100、120、140、160rpm)を変化させた場合の影響を調べた結果を示している。なお、比較例として、邪魔板ユニットが装着されていない三角フラスコでの培養結果を示している。また、邪魔板には、図1に示した三角形状のものを使用した。
Hereinafter, the results of the culture experiment using the baffle plate unit according to the example will be described.
[Example 1]
4 to 7 show changes in cell concentration over time when shaking culture (LB medium, 37 ° C.) of Bacillus subtilis using an Erlenmeyer flask equipped with a baffle unit according to an example. And shows the result of examining the effect when the number of shakes (100, 120, 140, 160 rpm) is changed. In addition, the culture result in the Erlenmeyer flask which is not equipped with the baffle plate unit is shown as a comparative example. The baffle plate used was the triangular shape shown in FIG.

まず、培養実験の準備として、500mlの三角フラスコ内に100mlのLB培地と3枚の邪魔板を入れて滅菌(オートクレーブ滅菌)を行い、その後、3枚の邪魔板をそれぞれ磁石で三角フラスコの内側面に(図2に示した取付け態様で)略等間隔となるように配設し固定した。このとき、邪魔板の少なくとも一部がLB培地に浸かるように、邪魔板の取付け位置を調整した。   First, in preparation for a culture experiment, sterilize (autoclave sterilization) by placing 100 ml of LB medium and three baffle plates in a 500 ml Erlenmeyer flask. It was arranged and fixed on the side surface (in the mounting manner shown in FIG. 2) so as to be substantially equidistant. At this time, the mounting position of the baffle plate was adjusted so that at least a part of the baffle plate was immersed in the LB medium.

次に、この三角フラスコ内に予めLB培地で培養してあった枯草菌培養液(LB培地5〜50mlで37℃一晩振とう培養した培養液)を2〜5mlの範囲で一定量加えて、回転式振とう機(37℃設定)に取り付け、培養実験を行った。   Next, a certain amount of Bacillus subtilis culture solution (cultured solution cultured overnight at 37 ° C. in 5 to 50 ml of LB medium) previously added in the LB medium in this Erlenmeyer flask was added in a range of 2 to 5 ml. The sample was attached to a rotary shaker (setting at 37 ° C.) and a culture experiment was conducted.

培養開始後から培養液の一部を一定時間毎(0、1、2、4、6、8時間毎)にサンプリングして、その濁度(波長660nm)を測定した。予め求めてある菌体濃度と濁度との関係式を用いて、振とう培養の経過時間と菌体濃度との関係を求めて、振とう回数と菌体の増殖効果との関係を確認した。   A part of the culture solution was sampled at regular time intervals (every 0, 1, 2, 4, 6, 8 hours) after the start of the culture, and the turbidity (wavelength 660 nm) was measured. Using the relational expression between the bacterial cell concentration and turbidity obtained in advance, the relationship between the elapsed time of shaking culture and the bacterial cell concentration was determined, and the relationship between the number of shaking and the growth effect of the bacterial cell was confirmed. .

培養実験の結果、図4〜図7に示すように、いずれの振とう回数の場合であっても邪魔板ユニットが装着された実施例(●)の方が、邪魔板ユニットが装着されていない比較例(○)よりも菌体の増殖効果が高く、特に2時間目以降の増殖傾向に顕著な差が確認され、邪魔板を設けたことにより通気攪拌効果が高まり、枯草菌の増殖効果が高められることが分かった。また、邪魔板ユニットが装着された実施例では、振とう回数が100rpmの場合よりも、120〜160rpmの場合の方が菌体の増殖効果が高まる傾向が観察されたが、120〜160rpmでの菌体の増殖効果に大きな違いはなく、120rpm程度で通気攪拌効果が十分に高められていることが確認できた。   As a result of the culture experiment, as shown in FIGS. 4 to 7, the embodiment (●) in which the baffle unit is mounted is not mounted in any of the cases where the number of shakings is any. The growth effect of the bacterial cells is higher than that of Comparative Example (◯), and in particular, a remarkable difference is observed in the growth tendency after the second hour, and the aeration stirring effect is enhanced by providing the baffle plate, and the growth effect of Bacillus subtilis is increased. I found that it could be raised. Further, in the example in which the baffle plate unit was mounted, a tendency that the proliferation effect of the bacterial cells was increased in the case of 120 to 160 rpm than in the case where the number of shaking was 100 rpm was observed. It was confirmed that there was no significant difference in the growth effect of the bacterial cells, and the aeration stirring effect was sufficiently enhanced at about 120 rpm.

邪魔板が装着された三角フラスコを使用することにより、振とう培養において、通気攪拌効果を高め、培養液への酸素の供給効率を高めることができ、効率の良い好気培養が可能になることが分かった。また、いずれの実施例に係る邪魔板を使用した場合であっても、振とう培養中に邪魔板が三角フラスコの内面から外れ落ちるようなことはなく、安定した取付け状態を維持することができた。   By using an Erlenmeyer flask equipped with a baffle plate, it is possible to enhance the aeration and stirring effect in shaking culture, increase the efficiency of oxygen supply to the culture solution, and enable efficient aerobic culture I understood. Further, even when the baffle plate according to any of the examples is used, the baffle plate does not fall off from the inner surface of the Erlenmeyer flask during the shaking culture, and a stable mounting state can be maintained. It was.

[実施例2]
図8は、実施例に係る邪魔板ユニットが装着されたフラスコを用いて枯草菌(Bacillus subtilis)を振とう培養(LB培地、37℃)したときの菌体濃度の経時変化を示した図であり、邪魔板の設置枚数(1〜3枚)を変化させた場合の影響を調べた結果を示している。なお、比較例として、邪魔板ユニットを装着していないフラスコでの培養結果を示している。邪魔板には、図1に示した三角形状のものを使用した。また、培養実験の準備等は、実施例1と同様の手順で行った。
[Example 2]
FIG. 8 is a diagram showing the change over time of the cell concentration when Bacillus subtilis is cultured with shaking (LB medium, 37 ° C.) using a flask equipped with a baffle unit according to the example. Yes, it shows the result of examining the effect of changing the number of installed baffle plates (1 to 3). In addition, the culture result in the flask which is not equipped with the baffle plate unit is shown as a comparative example. As the baffle plate, the triangular plate shown in FIG. 1 was used. In addition, preparation for the culture experiment and the like were performed in the same procedure as in Example 1.

培養実験の結果、図8に示すように、いずれの設置枚数の場合であっても実施例の方が、邪魔板ユニットが装着されていない比較例よりも菌体の増殖効果が高まっており、特に2時間目以降の増殖傾向に顕著な差が確認された。また、邪魔板ユニットが装着された実施例では、装着枚数が多いほど菌体増殖率が高くなる傾向が観察されたが、1枚から3枚の範囲では特別顕著な違いまではなく、少なくとも1枚以上の邪魔板を設けることにより、十分に菌体の増殖効果が高められることが分かった。   As a result of the culture experiment, as shown in FIG. 8, the proliferation effect of the bacterial cells is higher in the example than in the comparative example in which the baffle plate unit is not installed, regardless of the number of installed sheets, In particular, a significant difference was observed in the growth tendency after the second hour. Further, in the example in which the baffle unit was installed, a tendency was observed that the bacterial cell growth rate increased as the number of installed units increased. However, in the range of 1 to 3, there was no particular noticeable difference, and at least 1 It was found that by providing at least one baffle plate, the proliferation effect of the bacterial cells was sufficiently enhanced.

[実施例3]
図9は、実施例に係る邪魔板ユニットが装着されたフラスコを用いて大腸菌(Escherichia coli)を振とう培養(LB培地、37℃、振とう回数140rpm)したときの菌体濃度の経時変化を示している。なお、比較例として、邪魔板ユニットが装着されていないフラスコでの培養結果を示している。邪魔板には、図1に示した三角形状をしたものを使用した。また、培養実験の準備等は、実施例1と同様の手順で行った。
[Example 3]
FIG. 9 shows the change over time in the bacterial cell concentration when Escherichia coli is cultured with shaking (LB medium, 37 ° C., shaking frequency 140 rpm) using a flask equipped with a baffle unit according to the example. Show. In addition, as a comparative example, the culture result in a flask not equipped with a baffle plate unit is shown. As the baffle plate, the triangular plate shown in FIG. 1 was used. In addition, preparation for the culture experiment and the like were performed in the same procedure as in Example 1.

実施例1で説明した枯草菌(Bacillus subtilis)の結果と同様、邪魔板ユニットが装着されている実施例の方が、邪魔板が装着されていない比較例よりも大腸菌の増殖効果が高く、特に、2時間以降の増殖傾向に顕著な差が確認され、4時間目においては、比較例と比較して2.5倍程度の増殖を示しており、邪魔板を設けたことにより通気攪拌効果が高まり、大腸菌の増殖効果が高められることが分かった。   Similar to the results of Bacillus subtilis described in Example 1, the example in which the baffle unit is mounted has a higher effect of proliferating E. coli than the comparative example in which the baffle plate is not mounted. A noticeable difference was observed in the growth tendency after 2 hours, and in the 4th hour, the growth was about 2.5 times that of the comparative example. It was found that the growth effect of Escherichia coli was enhanced.

[実施例4]
図10は、実施例に係る邪魔板ユニットが装着されたフラスコを用いて枯草菌(Bacillus subtilis)を振とう培養(LB培地、37℃、振とう回数120rpm)した結果であり、邪魔板の形状の違いが菌体の増殖速度に与える影響を調べた結果である。培養実験の準備等は、実施例1と同様の手順で行った。
[Example 4]
FIG. 10 shows the result of shaking culture of Bacillus subtilis (LB medium, 37 ° C., shaking frequency 120 rpm) using a flask equipped with the baffle unit according to the example. It is the result of investigating the influence which the difference of gives on the growth rate of a microbial cell. Preparation for the culture experiment and the like were performed in the same procedure as in Example 1.

実施例に係る邪魔板ユニットとして、図1及び図3(a)〜(d)に示した5種類の異なる形状(三角形状、矩形形状、波形形状、有孔板状(3個孔、6個孔))をした邪魔板を使用した。比較例として、邪魔板ユニットを装着していないフラスコでの培養結果を示している。   As the baffle plate unit according to the embodiment, five different shapes (triangular shape, rectangular shape, corrugated shape, perforated plate shape (3 holes, 6 pieces) shown in FIG. 1 and FIGS. A baffle plate with holes)) was used. As a comparative example, the culture results in a flask not equipped with a baffle plate unit are shown.

培養実験を行った結果、図10に示すように、いずれの形状の場合であっても邪魔板が装着されている実施例の方が、邪魔板が装着されていない比較例よりも菌体の増殖効果が高く、特に2時間目以降の増殖傾向に顕著な差が確認された。また、5種類の異なる形状をした邪魔板のうち、三角形状、矩形形状、波形形状の邪魔板を用いた実施例では、波形形状の邪魔板を用いたものがわずかに菌体の増殖効果が高かったが、菌体の増殖傾向に大きな差は観察されなかった。一方で有孔板状(3個孔、6個孔)の邪魔板を用いた実施例では、他の3種類(三角形状、矩形形状、波形形状)のものと比較して、4時間以降の増殖曲線に有意な差が確認され、菌体の増殖効果が高くなる傾向が観察された。   As a result of the culture experiment, as shown in FIG. 10, the example in which the baffle plate is mounted in any shape is more fungus than the comparative example in which the baffle plate is not mounted. The proliferation effect was high, and a remarkable difference was observed particularly in the proliferation tendency after 2 hours. Further, among the five different shapes of baffle plates, in the embodiment using the baffle plates having a triangular shape, a rectangular shape, and a corrugated shape, those using the baffle shapes having a corrugated shape have a slight effect on the proliferation of bacterial cells. Although it was high, no significant difference was observed in the growth tendency of the cells. On the other hand, in the example using the perforated plate-like (3 holes, 6 holes) baffle plate, compared to the other three types (triangle shape, rectangular shape, waveform shape), 4 hours or later A significant difference was observed in the growth curve, and a tendency of increasing the growth effect of the bacterial cells was observed.

有孔板状(3個孔、6個孔)の邪魔板の実施例では、邪魔板に複数の通孔が形成されているので、振とう培養時に各通孔部分で培養液に乱流が生じ易くなり、邪魔板に複数の通孔が形成されていないものと比較して、培養液の攪拌及び通気効率を高めることができ、微生物や細胞などの培養効率を高めることができた。また、使用したいずれの実施例に係る邪魔板(5種類)においても、振とう培養中に邪魔板が三角フラスコの内面から外れ落ちるようなことはなく、安定した取付け状態を維持することができた。   In the embodiment of the perforated plate-like (3 holes, 6 holes) baffle plate, a plurality of through holes are formed in the baffle plate, so that turbulent flow is generated in the culture medium at each through hole portion during shaking culture. Compared with the case where a plurality of through holes are not formed in the baffle plate, the agitation and aeration efficiency of the culture solution can be increased, and the culture efficiency of microorganisms and cells can be increased. In addition, in any of the baffle plates (5 types) according to any of the examples used, the baffle plate does not fall off from the inner surface of the Erlenmeyer flask during the shaking culture, and a stable mounting state can be maintained. It was.

1 邪魔板ユニット
2 磁石
3、3A、3B、3C、3D 邪魔板
10 三角フラスコ
1 baffle unit 2 magnets 3, 3A, 3B, 3C, 3D baffle plate 10 Erlenmeyer flask

Claims (4)

培養容器に脱着自在な邪魔板ユニットであって、
前記培養容器の外面に配設される磁石と、
該磁石によって前記培養容器の内面に磁着される邪魔板とを含んで構成されていることを特徴とする邪魔板ユニット。
A baffle plate unit that can be freely attached to and detached from a culture vessel,
A magnet disposed on the outer surface of the culture vessel;
A baffle plate unit comprising a baffle plate magnetically attached to the inner surface of the culture vessel by the magnet.
前記邪魔板が磁性薄板を折り曲げて形成されたものであることを特徴とする請求項1記載の邪魔板ユニット。   The baffle plate unit according to claim 1, wherein the baffle plate is formed by bending a magnetic thin plate. 前記邪魔板の縁部が波形に形成されていることを特徴とする請求項2記載の邪魔板ユニット。   The baffle plate unit according to claim 2, wherein an edge portion of the baffle plate is formed in a corrugated shape. 前記邪魔板に複数の通孔が形成されていることを特徴とする請求項2又は請求項3記載の邪魔板ユニット。   The baffle plate unit according to claim 2, wherein a plurality of through holes are formed in the baffle plate.
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