JP2012180347A - Muscle atrophy inhibitor and muscle growth promoter - Google Patents

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Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a muscle atrophy inhibitor that can control disuse muscle atrophy.SOLUTION: The muscle atrophy inhibitor includes aspartic acid zinc or aspartic acid magnesium as an effective component. The muscle atrophy is controlled and the growth of muscle is urged by continuously ingesting the muscle atrophy inhibitor even under the environment that can cause the decrease of a muscle weight by the fixation or nonuse by a cast or the like, aging, bedridden state, the exposure to the weightlessness cosmic space or the like.

Description

本発明は、筋肉の萎縮を抑制する作用のある筋萎縮抑制剤と、筋肉の成長を促進させる作用のある筋成長促進剤に関する発明である。   The present invention relates to a muscle atrophy inhibitor having an action of suppressing muscle atrophy and a muscle growth promoter having an action of promoting muscle growth.

厚生労働省によると、現在、日本には500万人近くの要支援・要介護認定者がおり、その中には寝たきり状態や、下肢の障害で歩行が困難な状態の患者がいる。このような患者では、骨格筋萎縮が進み、筋量が減少し、如いては機能低下を招く。また高齢者社会を迎え、老化によってサルコペニアを引き起こし骨格筋量が減少して、行動力の低下とともに、生活の質低下を招いている。このような骨格筋萎縮にともなう行動力の低下・変容は社会的に深刻な問題であり、そのメカニズムの解明と治療法の開発が求められている。   According to the Ministry of Health, Labor and Welfare, there are currently nearly 5 million people in need of assistance and nursing care in Japan. Among them, there are patients who are bedridden or have difficulty in walking due to lower limb disorders. In such patients, skeletal muscle atrophy progresses and muscle mass decreases, thus leading to functional decline. In addition, the aging of society has caused sarcopenia and skeletal muscle mass has decreased due to aging. Such a decline and transformation of behavioral force associated with skeletal muscle atrophy is a serious social problem, and elucidation of the mechanism and development of a treatment method are required.

また、無重力の宇宙空間では骨格筋、特に抗重力筋である遅筋線維の萎縮とそれに伴う筋力の低下など、生体に有害な変化が起こるが、有効な対処法は未だ開発されていない。しかしながら、長期間宇宙に滞在する宇宙飛行士の筋萎縮の抑制は、今後人類が宇宙開発を進める上において解決しなければならない重要な課題である。   In addition, although there are harmful changes in the body such as atrophy of skeletal muscles, especially slow muscle fibers, which are antigravity muscles, and a decrease in muscular strength associated with them, in the zero-gravity space, effective countermeasures have not yet been developed. However, the suppression of muscular atrophy of astronauts who stay in space for a long period of time is an important issue that human beings must solve in the future in space development.

怪我をした際のギプス固定や寝たきりの生活、無重力の宇宙空間での活動など、骨格筋が張力を発揮できない状況下では骨格筋タンパク質合成と分解のインバランスがおこり、筋力の低下を招く。この症状は一般的に廃用性筋萎縮と呼ばれる。ところがこの萎縮に関する機構に関しては十分に解明されていない。   In situations where the skeletal muscle cannot exert its tension, such as fixing a cast when injured, bedridden life, and activities in a zero-gravity space, an imbalance between skeletal muscle protein synthesis and degradation occurs, leading to a decrease in muscle strength. This condition is commonly referred to as disuse muscle atrophy. However, the mechanism for this atrophy has not been fully elucidated.

本発明の目的は、廃用性筋萎縮の抑制に効果的な栄養素を見出すことにある。さらに本発明の目的は、筋萎縮を抑制すると同時に筋肉の成長を促進させるのに効果的な栄養素を見出すことにある。   An object of the present invention is to find a nutrient that is effective in suppressing disuse muscle atrophy. A further object of the present invention is to find nutrients that are effective in inhibiting muscle atrophy and at the same time promoting muscle growth.

本発明者は、鋭意研究を進めた結果、アスパラギン酸亜鉛(D-Zn)及びアスパラギン酸マグネシウム(D-Mg)に、廃用性筋萎縮の抑制作用と筋肉の肥大作用があることを見出した。すなわち本発明は、アスパラギン酸亜鉛又はアスパラギン酸マグネシウムを有効成分として含有する筋萎縮抑制剤及び筋成長促進剤である。なお本発明において、所望の形態の製剤を調製するために、本発明の効果を損なわない範囲で、その用途や形態に応じて、様々な成分や添加物を適宜選択し、一種またはそれ以上を併用して配合させてもよい。   As a result of diligent research, the present inventor has found that zinc aspartate (D-Zn) and magnesium aspartate (D-Mg) have an inhibitory effect on disuse muscle atrophy and a muscle hypertrophy effect. . That is, the present invention is a muscle atrophy inhibitor and a muscle growth promoter containing zinc aspartate or magnesium aspartate as an active ingredient. In the present invention, in order to prepare a preparation of a desired form, various components and additives are appropriately selected according to the use and form within a range not impairing the effects of the present invention, and one or more of them are selected. You may make it mix | blend together.

ギブスなどによる固定や不使用、老化、寝たきり、無重力の宇宙空間への暴露などによって筋重量の低下を起こし得る環境下であっても、本発明の筋萎縮抑制剤を継続して摂取することにより、筋萎縮を効果的に抑制できる。また、本発明の筋成長促進剤を継続して摂取することにより、筋萎縮を効果的に抑制できると同時に、筋肉の成長を促進させることができる。   By continuously ingesting the muscle atrophy inhibitor of the present invention even in an environment where muscle weight can be reduced by fixation or non-use with casts, aging, bedridden, exposure to weightless space, etc. , Muscle atrophy can be effectively suppressed. Moreover, by continuously ingesting the muscle growth promoter of the present invention, muscle atrophy can be effectively suppressed and muscle growth can be promoted.

したがって、本発明の筋萎縮抑制剤及び筋成長促進剤は、例えば、加齢に伴う筋力低下の予防、こどもの体力低下の予防、病後体力回復(骨折などによる筋萎縮の回復)、閉経後の筋力低下予防、カヘキシーによる筋萎縮の予防、宇宙飛行士の筋萎縮の予防などに有用である。さらに、本発明の筋成長促進剤は、スポーツ選手の筋力アップ、発育期の筋力アップ、労働者の筋力アップなどにも有用である。   Therefore, the muscle atrophy inhibitor and the muscle growth promoter of the present invention are, for example, prevention of muscular weakness associated with aging, prevention of physical strength decline of children, recovery of physical strength after illness (recovery of muscular atrophy due to fractures, etc.), postmenopausal It is useful for preventing muscle weakness, preventing muscular atrophy due to cachex, and preventing astronaut muscle atrophy. Furthermore, the muscle growth promoting agent of the present invention is also useful for increasing the strength of athletes, increasing the strength of the growing season, increasing the strength of workers, and the like.

マウスに対する筋萎縮誘導方法である尾部懸垂法を示す図である。It is a figure which shows the tail suspension method which is a muscle atrophy induction method with respect to a mouse | mouth. 尾部懸垂がヒラメ筋重量に及ぼす影響を示すグラフである。It is a graph which shows the influence which tail part suspension has on the soleus weight. 尾部懸垂が足底筋重量に及ぼす影響を示すグラフである。It is a graph which shows the influence which tail part suspension has on a plantar muscle weight. アスパラギン酸亜鉛摂取の影響を示すグラフである。It is a graph which shows the influence of zinc aspartate intake. アスパラギン酸亜鉛摂取の影響を示すグラフである。It is a graph which shows the influence of zinc aspartate intake. アスパラギン酸マグネシウム摂取の影響を示すグラフである。It is a graph which shows the influence of magnesium aspartate intake. アスパラギン酸マグネシウム摂取の影響を示すグラフである。It is a graph which shows the influence of magnesium aspartate intake. アスパラギン酸カリウム摂取の影響を示すグラフである。It is a graph which shows the influence of potassium aspartate intake. アスパラギン酸カリウム摂取の影響を示すグラフである。It is a graph which shows the influence of potassium aspartate intake. ヒラメ筋平均細胞面積を比較するグラフである。It is a graph which compares a soleus muscle average cell area. 足底筋平均細胞面積を比較するグラフである。It is a graph which compares a plantar muscle average cell area. ヒラメ筋細胞面積のヒストグラムである。It is a histogram of a soleus muscle cell area. 足底筋細胞面積のヒストグラムである。It is a histogram of a plantar muscle cell area. ヒラメ筋平均細胞面積を比較するグラフである。It is a graph which compares a soleus muscle average cell area. 足底筋平均細胞面積を比較するグラフである。It is a graph which compares a plantar muscle average cell area. マウスに与えた飲料水および飼料の組成を示す図である。It is a figure which shows the composition of the drinking water and feed which were given to the mouse | mouth. マウスの体重変化を示す図である。It is a figure which shows the weight change of a mouse | mouth. 各群のマウスの摂食量および飲水量の平均値を示す図である。It is a figure which shows the average value of the amount of food intake and water consumption of the mouse | mouth of each group. アスパラギン酸マグネシウム摂取の筋萎縮抑制効果を示す図である。It is a figure which shows the muscular atrophy inhibitory effect of magnesium aspartate intake. アスパラギン酸亜鉛摂取の筋萎縮抑制効果を示す図である。It is a figure which shows the muscular atrophy inhibitory effect of zinc aspartate intake. アスパラギン酸マグネシウムが筋細胞面積に与える効果を示す図である。It is a figure which shows the effect which magnesium aspartate has on a myocyte area. アスパラギン酸亜鉛が筋細胞面積に与える効果を示す図である。It is a figure which shows the effect which zinc aspartate has on a myocyte area. 各群のマウスの筋タンパク質の定量結果を示す図である。It is a figure which shows the fixed_quantity | quantitative_assay result of the mouse | mouth muscle protein of each group. 各種飲料水を摂取した場合のヒラメ筋萎縮抑制効果を示す図である。It is a figure which shows the soleus atrophy suppression effect at the time of ingesting various drinking water. 各種飲料水を摂取した場合の足底筋萎縮抑制効果を示す図である。It is a figure which shows the plantar muscle atrophy inhibitory effect at the time of ingesting various drinking water. 筋組織中のCa,Mg,Zn濃度を示す図である。It is a figure which shows Ca, Mg, Zn density | concentration in muscle tissue.

尾部懸垂がマウスの骨格筋に及ぼす影響を確認するとともに、アスパラギン酸亜鉛(D-Zn)の摂取が筋萎縮に及ぼす影響と、アスパラギン酸マグネシウム(D-Mg)の摂取が筋萎縮に及ぼす影響について調べた。   The effect of tail suspension on the skeletal muscles of mice was confirmed, the effect of zinc aspartate (D-Zn) intake on muscle atrophy, and the effect of magnesium aspartate (D-Mg) intake on muscle atrophy Examined.

実験方法
<1> 動物
ICRマウス(リタイアマウス、日本クレア株式会社)雄性マウス50匹(30.1g〜56.3g)を用意し、これらマウスを表1に示す5群に区分した。各群10匹とした。
experimental method
<1> animals
Fifty male mice (30.1 g to 56.3 g) of ICR mice (Retire mouse, Claire Japan) were prepared, and these mice were divided into 5 groups shown in Table 1. There were 10 animals in each group.

<2> 飲料水の作成
各群のマウスに与える飲料水として、表2に示すものを用意した。
<2> Preparation of drinking water Table 2 shows the drinking water to be given to each group of mice.

<3> 飼育条件
マウスは室温22℃の環境下で個別にケージで飼育した。食餌(MFオリエンタル酵母)と飲料水は自由摂取とした。なお、D-ZnTS群、D-MgTS群及びD-KTS群のマウスは、上記表2に示した物質を純水の中に溶かしたものを飲料水とし、W群及びWTS群のマウスは純水を飲料水とした。
<3> Rearing conditions Mice were individually housed in cages at room temperature of 22 ° C. Dietary (MF Oriental yeast) and drinking water were ad libitum. The mice in the D-ZnTS group, D-MgTS group, and D-KTS group were prepared by dissolving the substances shown in Table 2 in pure water, and the mice in the W group and WTS group were pure water. Water was used as drinking water.

<4> 実験
筋萎縮誘導方法として、モーレーが開発した尾部懸垂法(Tail Suspension/TS)を用いた(図1参照)。実験は7日間行った。
<4> Experiment As a method for inducing muscle atrophy, the tail suspension method (Tail Suspension / TS) developed by Morley was used (see Fig. 1). The experiment was conducted for 7 days.

<5> 骨格筋の採取
7日後、麻酔下で屠殺してヒラメ筋と足底筋をそれぞれ摘出し、重量を電磁式はかり(研精工業株式会社)にて計測した。
<5> Collection of skeletal muscle Seven days later, the mice were sacrificed under anesthesia, and the soleus and plantar muscles were respectively removed and weighed with an electromagnetic balance (Kensei Kogyo Co., Ltd.).

実験結果
図2は、尾部懸垂が遅筋であるヒラメ筋重量に及ぼす影響について示したものである。筋重量は体重で除した値である。
W群ではヒラメ筋が0.28mg/g、WTS群では0.25mg/gであった。両群の平均値には統計的に1%で有意差がみられた。
Experimental Results FIG. 2 shows the effect of tail suspension on the weight of the soleus, the slow muscle. Muscle weight is the value divided by body weight.
The soleus muscle was 0.28 mg / g in the W group and 0.25 mg / g in the WTS group. There was a statistically significant difference of 1% between the two groups.

図3は、尾部懸垂が速筋である足底筋重量に及ぼす影響について示したものである。筋重量は体重で除した値である。
W群では足底筋が0.56mg/g、WTS群では0.52mg/gであった。両群の平均値には統計的に有意差がみられなかった。従ってこのモデルにおいては速筋に対する萎縮誘導は小さいものと考えられる。
FIG. 3 shows the effect of tail suspension on the weight of the plantar muscle, which is the fast muscle. Muscle weight is the value divided by body weight.
The plantar muscle was 0.56 mg / g in the W group and 0.52 mg / g in the WTS group. There was no statistically significant difference between the mean values of both groups. Therefore, in this model, the induction of atrophy for fast muscles is considered to be small.

図4は、尾部懸垂時、D-Zn摂取が遅筋であるヒラメ筋重量に及ぼす影響について示したものである。筋重量は体重で除した値である。
W群ではヒラメ筋が0.28mg/g、WTS群では0.25mg/g、D-ZnTS群では0.29mg/gであった。WTS群とD-ZnTS群、両群の平均値には統計的に1%で有意差がみられた。
FIG. 4 shows the effect of D-Zn intake on the weight of the soleus, the slow muscle, during tail suspension. Muscle weight is the value divided by body weight.
The soleus muscle was 0.28 mg / g in the W group, 0.25 mg / g in the WTS group, and 0.29 mg / g in the D-ZnTS group. There was a statistically significant difference of 1% in the mean value between the WTS group and the D-ZnTS group.

図5は、尾部懸垂時、D-Zn摂取が速筋である足底筋重量に及ぼす影響について示したものである。筋重量は体重で除した値である。
W群では足底筋が0.56mg/g、WTS群では0.52mg/g、D-ZnTS群では0.54mg/gであった。WTS群とD-ZnTS群の平均値間には統計的に1%で有意差がみられた。
FIG. 5 shows the effect of D-Zn intake on the weight of the plantar muscle, which is the fast muscle, when the tail is suspended. Muscle weight is the value divided by body weight.
The plantar muscle was 0.56 mg / g in the W group, 0.52 mg / g in the WTS group, and 0.54 mg / g in the D-ZnTS group. There was a statistically significant difference of 1% between the mean values of the WTS group and the D-ZnTS group.

図6は、尾部懸垂時、D-Mg摂取が遅筋であるヒラメ筋重量に及ぼす影響について示したものである。筋重量は体重で除した値である。
W群ではヒラメ筋が0.28mg/g、WTS群では0.25mg/g、D-MgTS群では0.27mg/gであった。WTS群とD-MgTS群の平均値間には統計的に1%で有意差がみられた。
FIG. 6 shows the effect of D-Mg intake on the weight of the soleus, the slow muscle, during tail suspension. Muscle weight is the value divided by body weight.
The soleus muscle was 0.28 mg / g in the W group, 0.25 mg / g in the WTS group, and 0.27 mg / g in the D-MgTS group. There was a statistically significant difference of 1% between the mean values of the WTS group and the D-MgTS group.

図7は、尾部懸垂時、D-Mg摂取が速筋である足底筋重量に及ぼす影響について示したものである。筋重量は体重で除した値である。
W群では足底筋が0.56mg/g、WTS群では0.52mg/g、D-MgTS群では0.54mg/gであった。WTS群とD-MgTS群の平均値間には統計的に1%で有意差がみられた。
FIG. 7 shows the effect of D-Mg intake on the weight of the plantar muscle, which is the fast muscle, when the tail is suspended. Muscle weight is the value divided by body weight.
The plantar muscle was 0.56 mg / g in the W group, 0.52 mg / g in the WTS group, and 0.54 mg / g in the D-MgTS group. There was a statistically significant difference of 1% between the mean values of the WTS group and the D-MgTS group.

図8は、尾部懸垂時、アスパラギン酸カリウム(D-K)摂取が遅筋であるヒラメ筋重量に及ぼす影響について示したものである。筋重量は体重で除した値である。
W群ではヒラメ筋が0.28mg/g、WTS群では0.25mg/g、D-KTS群では0.26mg/gであった。W群とD-KTS群の平均値間には統計的に1%で有意差がみられた。従ってD-K摂取の萎縮抑制に対する効果は観察されなかった。
FIG. 8 shows the effect of potassium aspartate (DK) intake on the weight of the soleus, the slow muscle, during tail suspension. Muscle weight is the value divided by body weight.
The soleus muscle was 0.28 mg / g in the W group, 0.25 mg / g in the WTS group, and 0.26 mg / g in the D-KTS group. There was a statistically significant difference of 1% between the mean values of the W group and the D-KTS group. Therefore, the effect of DK intake on the suppression of atrophy was not observed.

図9は、尾部懸垂時、D-K摂取が速筋である足底筋重量に及ぼす影響について示したものである。筋重量は体重で除した値である。
W群では足底筋が0.56mg/g、WTS群では0.52mg/g、D-KTS群では0.54mg/gであった。すべての群の平均値間で統計的な有意差は観察されなかった。従ってD-K摂取の萎縮抑制に対する効果は観察されなかった。
FIG. 9 shows the effect of DK intake on the weight of the plantar muscle, which is the fast muscle, when the tail is suspended. Muscle weight is the value divided by body weight.
The plantar muscle in the W group was 0.56 mg / g, the WTS group was 0.52 mg / g, and the D-KTS group was 0.54 mg / g. No statistically significant difference was observed between the mean values of all groups. Therefore, the effect of DK intake on the suppression of atrophy was not observed.

W群、WTS群、D-ZnTS群の各マウスについて、筋細胞面積を比較し、D-Zn摂取による筋萎縮抑制効果を確認した。   About each mouse | mouth of W group, WTS group, and D-ZnTS group, the myocyte area was compared and the muscular atrophy suppression effect by D-Zn intake was confirmed.

実験方法
<1> 動物
ICRマウス(リタイアマウス、日本クレア株式会社)雄性マウス30匹を用意し、これらマウスを表3に示す3群に区分した。各群10匹とした。
experimental method
<1> animals
Thirty male mice were prepared from ICR mice (Retired mice, CLEA Japan, Inc.), and these mice were divided into three groups as shown in Table 3. There were 10 animals in each group.

<2> 飲料水の作成
各群のマウスに与える飲料水として、前記表2に示すものを用意した。
<2> Creation of Drinking Water As shown in Table 2, the drinking water to be given to each group of mice was prepared.

<3> 飼育条件
マウスは室温22℃の環境下で個別にケージで飼育した。食餌(MFオリエンタル酵母)と飲料水は自由摂取とした。なお、D-ZnTS群のマウスは、前記表2に示したD-Znを純水の中に溶かしたものを飲料水とし、W群、WTS群のマウスは純水を飲料水とした。
<3> Rearing conditions Mice were individually housed in cages at room temperature of 22 ° C. Dietary (MF Oriental yeast) and drinking water were ad libitum. The mice in the D-ZnTS group were prepared by dissolving D-Zn shown in Table 2 in pure water as drinking water, and the mice in the W group and WTS group were using pure water as drinking water.

<4> 実験
筋萎縮誘導方法として、モーレーが開発した尾部懸垂法を用いた(図1参照)。実験は7日間行った。
<4> Experiment As a method for inducing muscle atrophy, the tail suspension method developed by Morley was used (see Fig. 1). The experiment was conducted for 7 days.

<5> 骨格筋の採取
7日後、麻酔下で屠殺してヒラメ筋と足底筋をそれぞれ摘出し、筋細胞の面積を計測した。
<5> Collection of skeletal muscle Seven days later, the mice were sacrificed under anesthesia and the soleus and plantar muscles were removed, and the area of myocytes was measured.

実験結果
1.ヒラメ筋に関する実験結果
図10(A)は、W群とWTS群のヒラメ筋平均細胞面積を比較したものである。
W群の平均面積値は369μm2で、WTS群の平均面積値は242μm2であった。両群の平均面積値には統計的に1%で有意差がみられた。
Experimental results Experimental Results for Soleus Muscle FIG. 10 (A) compares the mean cell area of the soleus muscle between the W group and the WTS group.
The average area value of the W group was 369 μm 2 , and the average area value of the WTS group was 242 μm 2 . There was a statistically significant difference of 1% in the average area value of both groups.

図10(B)は、WTS群とD-ZnTS群のヒラメ筋平均細胞面積を比較したものである。
WTS群の平均面積値は242μm2で、D-ZnTS群の平均面積値は392μm2であった。両群の平均面積値には統計的に1%で有意差がみられた。
FIG. 10 (B) compares the soleus muscle average cell areas of the WTS group and the D-ZnTS group.
The average area value of the WTS group was 242 μm 2 , and the average area value of the D-ZnTS group was 392 μm 2 . There was a statistically significant difference of 1% in the average area value of both groups.

以上の実験結果より、筋萎縮を惹起させる条件下であっても、遅筋の一種であるヒラメ筋細胞の萎縮がD-Zn摂取により抑制されることが確認された。
また、W群とD-ZnTS群の細胞面積を比較すると分かるように、D-Zn摂取によって、ヒラメ筋に対する萎縮抑制効果と同時に肥大効果も得られることが確認された。
From the above experimental results, it was confirmed that atrophy of soleus muscle cells, which are a kind of slow muscle, is suppressed by D-Zn intake even under conditions that induce muscle atrophy.
In addition, as can be seen by comparing the cell areas of the W group and the D-ZnTS group, it was confirmed that the intake of D-Zn provided an effect of suppressing atrophy on the soleus muscle as well as a hypertrophy effect.

2.足底筋に関する実験結果
図11(A)は、W群とWTS群の足底筋平均細胞面積を比較したものである。
W群の平均面積値は482μm2で、WTS群の平均面積値は361μm2であった。両群の平均面積値には統計的に1%で有意差がみられた。
2. Experimental Results on Plantar Muscle FIG. 11 (A) compares plantar muscle average cell areas of the W group and the WTS group.
The average area value of the W group was 482 μm 2 , and the average area value of the WTS group was 361 μm 2 . There was a statistically significant difference of 1% in the average area value of both groups.

図11(B)は、WTS群とD-ZnTS群の足底筋平均細胞面積を比較したものである。
WTS群の平均面積値は361μm2で、D-ZnTS群の平均面積値は519μm2であった。両群の平均面積値には統計的に1%で有意差がみられた。
FIG. 11 (B) compares the plantar muscle average cell areas of the WTS group and the D-ZnTS group.
The average area value of the WTS group was 361 μm 2 , and the average area value of the D-ZnTS group was 519 μm 2 . There was a statistically significant difference of 1% in the average area value of both groups.

以上の実験結果より、筋萎縮を惹起させる条件下であっても、速筋の一種である足底筋細胞の萎縮がD-Zn摂取により抑制されることが確認された。
また、W群とD-ZnTS群の細胞面積を比較すると分かるように、D-Zn摂取によって、足底筋に対する萎縮抑制効果と同時に肥大効果も得られることが確認された。
From the above experimental results, it was confirmed that the atrophy of plantar muscle cells, which are a type of fast muscle, is suppressed by D-Zn intake even under conditions that induce muscle atrophy.
In addition, as can be seen by comparing the cell areas of the W group and the D-ZnTS group, it was confirmed that D-Zn ingestion has a hypertrophy effect as well as an atrophy suppression effect on the plantar muscle.

マウスの個体数を各群98匹に増やして、上記[実施例2]と同様の実験を行い、ヒラメ筋と足底筋のそれぞれについて筋細胞の面積を計測した。
筋細胞面積の測定結果に基づきヒストグラムを作成し、D-Zn摂取による筋萎縮抑制効果を確認した。
The number of mice was increased to 98 per group, and the same experiment as in [Example 2] was performed, and the area of myocytes was measured for each of the soleus and plantar muscles.
A histogram was created based on the measurement results of the muscle cell area, and the effect of D-Zn intake on muscle atrophy was confirmed.

1.ヒラメ筋に関する結果
図12にヒラメ筋細胞面積のヒストグラムを示す。
1. Results Regarding Soleus Muscle FIG. 12 shows a histogram of soleus muscle cell area.

図12(A)と図12(B)のヒストグラムを比較すると、尾部懸垂に伴いヒラメ筋細胞が萎縮し、左側にシフトしているのがわかる。
図12(B)と図12(C)のヒストグラムを比較すると、尾部懸垂に伴うヒラメ筋細胞の萎縮がD-Zn摂取により抑制されているのが明らかであり、右側にシフトしているのがわかる。
図12(A)と図12(C)のヒストグラムを比較すると、僅かであるがW群のヒラメ筋細胞面積に比較してD-ZnTS群のヒラメ筋細胞面積は右側にシフトしているのがわかる。
Comparing the histograms of FIG. 12 (A) and FIG. 12 (B), it can be seen that the soleus muscle cells are atrophied and shifted to the left side with tail suspension.
Comparing the histograms of Fig. 12 (B) and Fig. 12 (C), it is clear that the atrophy of soleus muscle cells due to tail suspension is suppressed by D-Zn intake, and it is shifted to the right side Recognize.
Comparing the histograms of FIG. 12 (A) and FIG. 12 (C), the soleus cell area of the D-ZnTS group is slightly shifted to the right as compared with the soleus cell area of the W group. Recognize.

2.足底筋に関する結果
図13に足底筋細胞面積のヒストグラムを示す。
2. Results concerning plantar muscles FIG. 13 shows a histogram of plantar muscle cell area.

図13(A)と図13(B)のヒストグラムを比較すると、尾部懸垂に伴い筋細胞が萎縮し、左側にシフトしているのがわかる。
図13(B)と図13(C)のヒストグラムを比較すると、尾部懸垂に伴う足底筋細胞の萎縮がD-Zn摂取により抑制されているのが明らかであり、右側にシフトしているのがわかる。
図13(A)と図13(C)のヒストグラムを比較すると、僅かではあるがW群の足底筋細胞面積に比較してD-ZnTS群の足底筋細胞面積は右側にシフトしているのがわかる。
Comparing the histograms of FIG. 13 (A) and FIG. 13 (B), it can be seen that the muscle cells are atrophic and shifted to the left side with tail suspension.
Comparing the histograms of Fig. 13 (B) and Fig. 13 (C), it is clear that the atrophy of plantar muscle cells due to tail suspension is suppressed by D-Zn intake, and it is shifted to the right I understand.
Comparing the histograms in Fig. 13 (A) and Fig. 13 (C), the plantar muscle cell area in the D-ZnTS group is shifted to the right, although slightly, compared to the plantar muscle cell area in the W group. I understand.

W群、WTS群、D-MgTS群、D-ZnTS群のマウスについて筋細胞面積を測定し、D-Zn摂取による筋萎縮抑制効果と、D-Mg摂取による筋萎縮抑制効果とを比較した。   The muscle cell area was measured for the mice in the W group, the WTS group, the D-MgTS group, and the D-ZnTS group, and the muscle atrophy inhibitory effect by D-Zn intake was compared with the muscle atrophy inhibitory effect by D-Mg intake.

実験方法
<1> 動物
ICRマウス(リタイアマウス、日本クレア株式会社)雄性マウス40匹を用意し、これらマウスを表4に示す4群に区分した。各群10匹とした。
experimental method
<1> animals
Forty ICR mice (Retire mouse, Claire Japan) male mice were prepared, and these mice were divided into four groups shown in Table 4. There were 10 animals in each group.

<2> 飲料水の作成
各群のマウスに与える飲料水として、前記表2に示すものを用意した。
<2> Creation of Drinking Water As shown in Table 2, the drinking water to be given to each group of mice was prepared.

<3> 飼育条件
マウスは室温22℃の環境下で個別にケージで飼育した。食餌(MFオリエンタル酵母)と飲料水は自由摂取とした。なお、D-ZnTS群、D-MgTS群及びD-KTS群のマウスは、前記表2に示した物質を純水の中に溶かしたものを飲料水とし、W群、WTS群のマウスは純水を飲料水とした。
<3> Rearing conditions Mice were individually housed in cages at room temperature of 22 ° C. Dietary (MF Oriental yeast) and drinking water were ad libitum. The mice in the D-ZnTS group, the D-MgTS group, and the D-KTS group were prepared by dissolving the substances shown in Table 2 in pure water, and the mice in the W group and the WTS group were pure water. Water was used as drinking water.

<4> 実験
筋萎縮誘導方法として、モーレーが開発した尾部懸垂法を用いた(図1参照)。実験は7日間行った。
<4> Experiment As a method for inducing muscle atrophy, the tail suspension method developed by Morley was used (see Fig. 1). The experiment was conducted for 7 days.

<5> 骨格筋の採取
7日後、麻酔下で屠殺してヒラメ筋と足底筋をそれぞれ摘出し、筋細胞の面積を計測した。
<5> Collection of skeletal muscle Seven days later, the mice were sacrificed under anesthesia and the soleus and plantar muscles were removed, and the area of myocytes was measured.

実験結果
1.ヒラメ筋に関する実験結果
図14は、本実験における各群のヒラメ筋平均細胞面積を比較したものである。
W群の平均面積値は482μm2、WTS群の平均面積値は361μm2、D-ZnTS群の平均面積値は519μm2、D-MgTS群の平均面積値は575μm2であった。
Experimental results Experimental Results for Soleus Muscle FIG. 14 compares the average cell area of the soleus muscle of each group in this experiment.
Average area value of W group average area value of 482μm 2, WTS group average area value of 361μm 2, D-ZnTS group average area value of 519μm 2, D-MgTS group was 575 2.

以上の実験結果より、D-Zn,D-Mgのいずれを摂取した場合でも、筋萎縮を惹起させる条件下で、遅筋の一種であるヒラメ筋細胞の萎縮が抑制されることが確認された。
また、W群、D-ZnTS群、D-MgTS群の細胞面積を比較すると分かるように、D-Zn,D-Mgのいずれを摂取した場合でも、ヒラメ筋に対する萎縮抑制効果と同時に肥大効果が得られることが確認された。
From the above experimental results, it was confirmed that atrophy of soleus muscle cells, which is a kind of slow muscle, is suppressed under conditions that cause muscle atrophy even when either D-Zn or D-Mg is ingested. .
In addition, as can be seen by comparing the cell areas of the W group, D-ZnTS group, and D-MgTS group, both D-Zn and D-Mg have a hypertrophic effect as well as atrophy suppression effect on the soleus muscle. It was confirmed that it was obtained.

2.足底筋に関する実験結果
図15は、本実験における各群の足底筋平均細胞面積を比較したものである。
W群の平均面積値は369μm2、WTS群の平均面積値は242μm2、D-ZnTS群の平均面積値は392μm2、D-MgTS群の平均面積値は603μm2であった。
2. Experimental Results for Plantar Muscle FIG. 15 compares the plantar muscle average cell area of each group in this experiment.
Average area value of W group average area value of 369μm 2, WTS group average area value of 242μm 2, D-ZnTS group average area value of 392μm 2, D-MgTS group was 603μm 2.

以上の実験結果より、D-Zn,D-Mgのいずれを摂取した場合でも、筋萎縮を惹起させる条件下で、速筋の一種である足底筋細胞の萎縮が抑制されることが確認された。
また、W群、D-ZnTS群、D-MgTS群の細胞面積を比較すると分かるように、D-Zn,D-Mgのいずれを摂取した場合でも、足底筋に対する萎縮抑制効果と同時に肥大効果が得られることが確認された。
From the above experimental results, it was confirmed that even when either D-Zn or D-Mg was ingested, atrophy of plantar muscle cells, which are a type of fast muscle, was suppressed under conditions that caused muscle atrophy. It was.
In addition, as can be seen by comparing the cell area of the W group, D-ZnTS group, and D-MgTS group, even if both D-Zn and D-Mg were ingested, the atrophy suppression effect on the plantar muscles as well as the hypertrophy effect It was confirmed that

アスパラギン酸マグネシウム(D-Mg)またはアスパラギン酸亜鉛(D-Zn)摂取による筋萎縮抑制効果を確認した。   The muscle atrophy suppression effect by intake of magnesium aspartate (D-Mg) or zinc aspartate (D-Zn) was confirmed.

実験方法
<1> 実験動物
マウスは日本エスエルシー株式会社より購入し、ICR系オスマウスのリタイヤマウスを用いた。
experimental method
<1> Experimental animals Mice were purchased from Japan SLC Co., Ltd., and ICR male mice were used as retired mice.

<2> 飼育条件
各群5匹とし、7日間個別ケージにて飼育をした。筋萎縮誘導方法は尾部懸垂法を用いた(図1)。
すべての群において室温24.0±1.0℃、12時間昼夜逆転明暗サイクルを維持した環境下で、飼育を行った。
また食餌と飲料水は自由摂取とした。餌はオリエンタル酵母工業株式会社より購入したマウス飼育用飼料MF(図16)を用いた。飲料水は正起薬品工業株式会社のイオン交換水(図16)を用いた。
<2> Breeding conditions Five animals were bred in individual cages for 7 days. The tail suspension method was used as a method for inducing muscle atrophy (FIG. 1).
All groups were reared in an environment maintained at a room temperature of 24.0 ± 1.0 ° C. and a 12 hour day / night reverse light / dark cycle.
Food and drinking water were ad libitum. The feed used was a mouse breeding feed MF (Fig. 16) purchased from Oriental Yeast Co., Ltd. Drinking water used was ion-exchanged water (see FIG. 16) from Seiki Pharmaceutical Co., Ltd.

<3> マウスの群分け
飲料水として水・D-Mg水・D-Zn水の3通りに分類し、TSの有無により6群に分けた。
群の名称はW、WTS、D-Mg、D-MgTS、D-Zn、D-ZnTSとした(表5)。
<3> Grouping of mice Drinking water was classified into three groups: water, D-Mg water, and D-Zn water, and divided into 6 groups according to the presence or absence of TS.
The names of the groups were W, WTS, D-Mg, D-MgTS, D-Zn, and D-ZnTS (Table 5).

<4> D-MgとD-Zn飲料水の作製
下記の通りに飲料水を作製した。
1.D-Mg(MP Biomedicals.LLC) 72mg/L
2.D-Zn(Nutra Bio com) 1.1mg/L
<4> Preparation of D-Mg and D-Zn drinking water Drinking water was prepared as follows.
1. D-Mg (MP Biomedicals.LLC) 72mg / L
2. D-Zn (Nutra Bio com) 1.1mg / L

<5> 骨格筋の採取
飼育期間終了後、麻酔下(ソムノペンチル(ペントバルビタールナトリウム):共立製薬株式会社)で屠殺し、心肺停止を確認後、下肢骨格筋よりヒラメ筋(遅筋)と足底筋(速筋)をそれぞれ採取しサンプルとして用いた。
<5> Collection of skeletal muscle After completion of the breeding period, slaughtered under anesthesia (Somnopentyl (Pentobarbital sodium): Kyoritsu Pharmaceutical Co., Ltd.), confirmed cardiopulmonary arrest, and then the soleus muscle (slow muscle) and sole from the lower limb skeletal muscle Each muscle (fast muscle) was collected and used as a sample.

<6> 体重の変化、摂食量と飲水量
体重の計測は、実験開始時および飼育7日後に行った。
食餌量は実験開始時に50gセットし、飼育7日後に残量の計量を行い、摂取量を算出した。
また飲料水においては実験開始時に100mLセットし、飼育7日後に計量を行い、飲水量を算出した。
<6> Changes in body weight, food intake and water consumption Body weight was measured at the start of the experiment and 7 days after breeding.
The amount of food was set at 50 g at the start of the experiment, the remaining amount was measured 7 days after breeding, and the amount of intake was calculated.
In the case of drinking water, 100 mL was set at the start of the experiment and weighed 7 days after breeding to calculate the amount of drinking water.

<7> 筋萎縮抑制効果の判定
萎縮の判定は動物実験において骨格筋の湿重量によるものが一般的であることから、電子天秤 (Mettler -Toledo International Inc.)を用いて骨格筋湿重量を計測し、判定を行った。
<7> Determining the effect of suppressing muscle atrophy Since the determination of atrophy is generally based on the wet weight of skeletal muscle in animal experiments, the skeletal muscle wet weight was measured using an electronic balance (Mettler-Toledo International Inc.). The determination was made.

<8> 筋細胞面積の計測
a. プレパラートの作製
10%ホルマリン固定した骨格筋を脱水後、パラフィン包埋を行った。パラフィン切片は筋腹部横断面となるようにミクロトーム(Reichert-Jung 2050 supercut:株式会社ファインテック)にて作製した。
次に切片をスライドガラス上で伸展および乾燥させた後、HE染色を行った。
HE染色にはヘマトキシリン(マイヤーヘマトキシリン溶液:和光純薬株式会社)とエオジン(エオジンY1%:武藤化学薬品株式会社)を用いた。
<8> Measurement of muscle cell area
a. Preparation of preparation
The skeletal muscle fixed with 10% formalin was dehydrated and embedded in paraffin. The paraffin section was prepared with a microtome (Reichert-Jung 2050 supercut: Finetech Co., Ltd.) so as to have a cross section of the muscle abdomen.
Next, the sections were stretched and dried on a glass slide, and then stained with HE.
Hematoxylin (Meyer's hematoxylin solution: Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) and eosin (eosin Y 1%: Muto Chemical Co., Ltd.) were used for HE staining.

b. 筋細胞面積の計測
作製したプレパラートを用いて、デジタルマイクロスコープ(KH‐7700:株式会社HYROX)で、筋細胞面積の計測を行った。
b. Measurement of myocyte area The myocyte area was measured with a digital microscope (KH-7700: HYROX Co., Ltd.) using the prepared preparation.

<9> 筋タンパク質の定量
a. サンプルの調整
液体窒素で凍結保存した骨格筋を乳鉢で粉末状に破砕し、1000μLのPBSに溶解した。
<9> Muscle protein quantification
a. Preparation of sample Skeletal muscle frozen and stored in liquid nitrogen was crushed into powder with a mortar and dissolved in 1000 μL of PBS.

b. 定量方法
Bradford法により筋タンパク質を定量した。試薬はQuick startプロテインアッセイ スタンダードBSA(Bio-Rad Laboratories, Inc.)を用いた。
操作方法は96wellプレートに、各レーンあたり20μLの調整したサンプル(またはスタンダード)、30μLのPBSと50μLの試薬をアプライした。振とうさせてから10分放置し、吸光度を測定した。吸光度はOdyssey(LI-COR,Inc)を用い、波長700nmで測定した。
また検量線は7点で作成した。
b. Quantification method
Muscle protein was quantified by the Bradford method. As a reagent, Quick start protein assay standard BSA (Bio-Rad Laboratories, Inc.) was used.
For the operation method, 20 μL of a prepared sample (or standard), 30 μL of PBS and 50 μL of a reagent were applied to a 96 well plate. After shaking, it was left for 10 minutes and the absorbance was measured. Absorbance was measured at a wavelength of 700 nm using Odyssey (LI-COR, Inc).
A calibration curve was prepared with 7 points.

<10> 統計処理
得られたデータはmeans±SDで示した。統計学的分析はTukey法を用いた。有意水準は、危険率5%未満とした。
<10> Statistical processing The obtained data are expressed as means ± SD. The Tukey method was used for statistical analysis. The significance level was set at a risk rate of less than 5%.

実験結果
1.体重の変化、摂食量および飲水量
図17に体重の変化を示した。実験開始時の体重の平均は、W群40.64±1.34g、WTS群41.20±2.95g、D-Mg群36.20±1.52g、D-MgTS群39.08±4.94g、D-Zn群37.32±2.27g、D-ZnTS群38.84±1.41gであった。各群の体重の平均値間に有意差はなかった。
飼育7日後の体重の平均は、W群42.52±0.75g、WTS群40.26±1.99g、D-Mg群39.02±2.31g、D-MgTS群37.50±5.66g、D-Zn群39.54±1.63g、D-ZnTS群38.66±1.47gであった。各群の体重の平均値間に有意差はなかった。
実験開始前と飼育7日後の体重の変化は、W群1.88±0.73g、WTS群−0.94±3.34g、D-Mg群2.82±0.91g、D-MgTS群−1.58±0.86g、D-Zn群2.22±0.95g、D-ZnTS群−0.18±1.74gであった。各群の体重の変化に有意差はなかったが、TSなし群では実験前に比べて実験後に体重が増加傾向を示したのに対し、TSあり群では実験前に比べて実験後に体重が減少傾向を示した。
図18に各群摂食量および飲水量の平均値を示した。各群摂食量および飲水量の平均値に有意差はなかった。
Experimental results Changes in body weight, food consumption and water consumption Figure 17 shows changes in body weight. The average body weight at the start of the experiment was W. 40.64 ± 1.34 g, WTS group 41.20 ± 2.95 g, D-Mg group 36.20 ± 1.52 g, D-MgTS group 39.08 ± 4.94 g, D-Zn group 37.32 ± 2.27 g, The D-ZnTS group was 38.84 ± 1.41 g. There was no significant difference between the mean weights of each group.
The average body weight after 7 days of breeding was W group 42.52 ± 0.75 g, WTS group 40.26 ± 1.99 g, D-Mg group 39.02 ± 2.31 g, D-MgTS group 37.50 ± 5.66 g, D-Zn group 39.54 ± 1.63 g, The D-ZnTS group was 38.66 ± 1.47 g. There was no significant difference between the mean weights of each group.
The changes in body weight before the start of the experiment and after 7 days of breeding were 1.88 ± 0.73 g in W group, −0.94 ± 3.34 g in WTS group, 2.82 ± 0.91 g in D-Mg group, 1.58 ± 0.86 g in D-MgTS group, D-Zn The group was 2.22 ± 0.95 g and the D-ZnTS group was −0.18 ± 1.74 g. Although there was no significant difference in the weight of each group, the group without TS showed a tendency to increase in weight after the experiment compared to before the experiment, whereas the group with TS decreased in weight after the experiment compared to before the experiment. Showed a trend.
FIG. 18 shows the average values of food intake and water consumption for each group. There was no significant difference in the average value of food intake and water consumption in each group.

2.尾部懸垂におけるD-Mgの筋萎縮抑制効果
図19に各群における体重あたりのヒラメ筋と足底筋の骨格筋湿重量の平均値を示した。
ヒラメ筋においてはW群0.28±0.06mg/g、WTS群0.25±0.04mg/g、D-Mg群0.28±0.03mg/g、D-MgTS群0.28±0.04mg/gであった。W群とWTS群の平均値間、WTS群とD-MgTS群の平均値間では5%の有意差があった。
したがって、W群とWTS群を比較するとWTS群では有意に筋重量が低下しているが、D-Mg群とD-MgTS群を比較するとD-MgTS群では筋重量の低下は生じなかった。またW群とD-Mg群を比較するとD-Mg群では筋の肥大も生じていないことからD-Mgはヒラメ筋において筋萎縮抑制効果があることが判明した。
足底筋においてはW群0.56±0.09mg/g、WTS群0.52±0.02mg/g、D-Mg群0.55±0.04mg/g、D-MgTS群0.54±0.05mg/gであった。どの群間においても統計的に有意差はなかった。
2. Effect of D-Mg on muscle atrophy in tail suspension FIG. 19 shows the average value of the skeletal muscle wet weight of soleus and plantar muscles per body weight in each group.
In the soleus muscle, they were 0.28 ± 0.06 mg / g in the W group, 0.25 ± 0.04 mg / g in the WTS group, 0.28 ± 0.03 mg / g in the D-Mg group, and 0.28 ± 0.04 mg / g in the D-MgTS group. There was a significant difference of 5% between the mean values of W group and WTS group, and between the mean values of WTS group and D-MgTS group.
Therefore, when the W group and the WTS group were compared, the muscle weight was significantly decreased in the WTS group, but when the D-Mg group and the D-MgTS group were compared, the muscle weight did not decrease in the D-MgTS group. In addition, comparing the W group with the D-Mg group, it was found that D-Mg had an effect of suppressing muscle atrophy in the soleus muscle because no hypertrophy of the D-Mg group occurred.
The plantar muscles were 0.56 ± 0.09 mg / g in W group, 0.52 ± 0.02 mg / g in WTS group, 0.55 ± 0.04 mg / g in D-Mg group, and 0.54 ± 0.05 mg / g in D-MgTS group. There was no statistically significant difference between any groups.

3.尾部懸垂におけるD-Znの筋萎縮抑制効果
図20に各群における体重あたりのヒラメ筋と足底筋の骨格筋重量の平均値を示した。
ヒラメ筋においてはW群0.28±0.06mg/g、WTS群0.25±0.04mg/g、D-Zn群0.27±0.04mg/g、D-ZnTS群0.29±0.04mg/gであった。W群とWTS群の平均値間には5%の有意差があった。WTS群とD-ZnTS群の平均値間では1%の有意差があった。
したがって、W群とWTS群を比較するとWTS群では有意に筋重量が低下しているが、D-Zn群とD-ZnTS群を比較するとD-ZnTS群では筋重量の低下は生じなかった。またW群とD-Zn群を比較するとD-Zn群では筋の肥大も生じていないことからD-Znはヒラメ筋において筋萎縮抑制効果があることが判明した。
足底筋においてはW群0.56±0.09mg/g、WTS群0.52±0.02mg/g、D-Zn群0.56±0.05mg/g、D-ZnTS群0.55±0.04mg/gであった。どの群の平均値間においても統計的な有意差はなかった。
3. Effect of D-Zn on muscle atrophy in tail suspension FIG. 20 shows the average value of skeletal muscle weight of soleus and plantar muscles per body weight in each group.
In the soleus muscle, the values were 0.28 ± 0.06 mg / g in the W group, 0.25 ± 0.04 mg / g in the WTS group, 0.27 ± 0.04 mg / g in the D-Zn group, and 0.29 ± 0.04 mg / g in the D-ZnTS group. There was a significant difference of 5% between the mean values of W group and WTS group. There was a significant difference of 1% between the mean values of WTS group and D-ZnTS group.
Therefore, when W group was compared with WTS group, muscle weight was significantly decreased in WTS group, but when D-Zn group and D-ZnTS group were compared, there was no decrease in muscle weight in D-ZnTS group. In addition, comparing the W group and the D-Zn group, it was found that D-Zn has a muscle atrophy-suppressing effect in the soleus muscle because no hypertrophy of the D-Zn group occurred.
The plantar muscles were 0.56 ± 0.09 mg / g in W group, 0.52 ± 0.02 mg / g in WTS group, 0.56 ± 0.05 mg / g in D-Zn group, and 0.55 ± 0.04 mg / g in D-ZnTS group. There was no statistically significant difference between the mean values in any group.

4.D-Mgの筋細胞面積における効果
図21に各群における細胞面積の平均値を示した。
ヒラメ筋においてはW群448.5±94.6μm2、WTS群344.9±87.3μm2、D-Mg群458.4±37.9μm2、D-MgTS群469.9±79.8μm2であった。W群とWTS群の平均値間、WTS群とD-MgTS群の平均値間では1%の有意差があった。W群とWTS群を比較するとWTS群では有意に筋細胞が縮小しているが、D-Mg群とD-MgTS群を比較するとD-MgTS群では筋細胞の縮小は生じなかった。またW群とD-Mg群を比較するとD-Mg群では筋細胞の肥大も生じていないことからD-Mgによりヒラメ筋の筋細胞面積が維持されていることがわかった。
足底筋においてはW群533.0±142.6μm2、WTS群523.0±139.4μm2、D-Mg群527.9±87.1μm2、D-MgTS群554.3±185.2μm2であった。どの群間においても統計的な有意差はなかった。
4). Effect of D-Mg on muscle cell area FIG. 21 shows the average cell area in each group.
In the soleus muscle, the W group was 448.5 ± 94.6 μm 2 , the WTS group was 344.9 ± 87.3 μm 2 , the D-Mg group was 458.4 ± 37.9 μm 2 , and the D-MgTS group was 469.9 ± 79.8 μm 2 . There was a significant difference of 1% between the mean values of the W group and the WTS group, and between the mean values of the WTS group and the D-MgTS group. When W group and WTS group were compared, muscle cells were significantly reduced in WTS group, but when D-Mg group and D-MgTS group were compared, there was no reduction of muscle cells in D-MgTS group. In addition, comparing the W group and the D-Mg group, it was found that the muscle cell area of the soleus muscle was maintained by D-Mg because the hypertrophy of the muscle cells did not occur in the D-Mg group.
In plantaris muscles were W group 533.0 ± 142.6μm 2, WTS group 523.0 ± 139.4μm 2, D-Mg group 527.9 ± 87.1μm 2, D-MgTS group 554.3 ± 185.2μm 2. There was no statistically significant difference between any groups.

5.D-Znの筋細胞面積における効果
図22に各群における細胞面積の平均値を示した。
ヒラメ筋においてはW群448.5±94.6μm2、WTS群344.9±87.3μm2、D-Zn群457.2±28.4μm2、D-ZnTS群466.4±93.8μm2であった。W群とWTS群の平均値間、WTS群とD-ZnTS群の平均値間では1%の有意差があった。W群とWTS群を比較するとWTS群では有意に筋細胞が縮小しているが、D-Zn群とD-ZnTS群を比較するとD-ZnTS群では筋細胞の縮小は生じなかった。またW群とD-Zn群を比較するとD-Zn群では筋細胞の肥大も生じていないことからD-Znによりヒラメ筋の筋細胞面積が維持されていることがわかった。
足底筋においてはW群533.0±142.6μm2、WTS群523.0±139.4μm2、D-Zn群524.6±107.8μm2、D-ZnTS群563.7±160.3μm2であった。どの群間においても統計的な有意差はなかった。
5. Effect of D-Zn on muscle cell area FIG. 22 shows the average cell area in each group.
In the soleus, the W group was 448.5 ± 94.6 μm 2 , the WTS group was 344.9 ± 87.3 μm 2 , the D-Zn group was 457.2 ± 28.4 μm 2 , and the D-ZnTS group was 466.4 ± 93.8 μm 2 . There was a significant difference of 1% between the mean values of W group and WTS group, and between the mean values of WTS group and D-ZnTS group. When W group and WTS group were compared, muscle cells were significantly reduced in WTS group, but when D-Zn group and D-ZnTS group were compared, there was no reduction of muscle cells in D-ZnTS group. In addition, comparing the W group with the D-Zn group, it was found that the muscle cell area of the soleus muscle was maintained by D-Zn because the hypertrophy of the muscle cells did not occur in the D-Zn group.
In plantaris muscles were W group 533.0 ± 142.6μm 2, WTS group 523.0 ± 139.4μm 2, D-Zn group 524.6 ± 107.8μm 2, D-ZnTS group 563.7 ± 160.3μm 2. There was no statistically significant difference between any groups.

6.筋タンパク質の定量結果
図23に各群の筋タンパク質の定量結果を示した。絶対量(mg)の平均値および筋重量当たりのタンパク量の平均値(mg/g)を示した。絶対量においてヒラメ筋ではW群とD-Mg群の平均値間、W群とD-Zn群の平均値間、D-Mg群とD-MgTS群の平均値間、D-Zn群とD-ZnTSの平均値間に有意な差はなかったが、W群とWTS群の平均値間、WTS群とD-MgTS群、WTS群とD-ZnTS群の平均値間では1%の有意差があった。また筋重量当たりのタンパク量の平均値間にはどの群間でも有意差はなかった。
したがって、ヒラメ筋における筋萎縮は絶対的なタンパク質含有量は減少するものの、筋重量当たりのタンパク質濃度はほとんど変化しないということがわかった。またD-MgまたはD-Znを摂取することにより筋タンパク質量は維持されていることがわかった。
足底筋において、タンパク量および体重当たりのタンパク量の平均値はどの群間でも有意差はなかった。
6). Results of quantification of muscle protein FIG. 23 shows the results of quantification of muscle protein in each group. The average value of absolute amount (mg) and the average value of protein amount per muscle weight (mg / g) are shown. In terms of absolute amount, in the soleus, between the mean values of the W group and the D-Mg group, between the mean values of the W group and the D-Zn group, between the mean values of the D-Mg group and the D-MgTS group, and between the D-Zn group and D There was no significant difference between the mean values of -ZnTS, but a significant difference of 1% between the mean values of W group and WTS group, between WTS group and D-MgTS group, and between WTS group and D-ZnTS group was there. There was no significant difference between the average values of the amount of protein per muscle weight among any groups.
Therefore, it was found that muscle atrophy in the soleus muscle has almost no change in protein concentration per muscle weight, although the absolute protein content decreases. It was also found that the amount of muscle protein was maintained by ingesting D-Mg or D-Zn.
In plantar muscle, the average amount of protein and the amount of protein per body weight were not significantly different between the groups.

要約
足底筋では7日間で萎縮は生じなかったにもかかわらずヒラメ筋は萎縮したことから、ヒラメ筋は不活動による影響を強く受けることが明らかとなった。
またヒラメ筋の筋重量減少とともに筋細胞面積の縮小およびタンパク質量が減少していたことから、筋重量の減少は筋細胞自体の萎縮を反映していることが明らかとなった。
さらにD-MgまたはD-Zn摂取により筋萎縮の抑制ができたのは、筋細胞の面積を維持および筋タンパク質量減少を抑制していたからであるということが示唆された。
Summary In the soleus muscle, the soleus muscle was atrophic even though it did not atrophy in 7 days, which revealed that the soleus muscle was strongly affected by inactivity.
In addition, as the muscle weight of the soleus muscle decreased, the muscle cell area decreased and the amount of protein decreased. Therefore, it became clear that the decrease in muscle weight reflected the atrophy of the muscle cells themselves.
Furthermore, it was suggested that muscle atrophy was suppressed by ingesting D-Mg or D-Zn because it maintained the area of muscle cells and suppressed the decrease in muscle protein.

各種ミネラルを含む飲料水摂取による筋萎縮抑制効果を確認した。   The muscle atrophy inhibitory effect by drinking water containing various minerals was confirmed.

実験方法
実験動物、飼育条件、骨格筋の採取方法は上記[実施例5]と同様である。
Experimental Method Experimental animals, breeding conditions, and skeletal muscle collection methods are the same as in [Example 5] above.

<1> 飲料水の作製
表6に飲料水9種類を示した。
<1> Preparation of drinking water Table 6 shows nine types of drinking water.

<2> マウスの群分け
9種類の飲料水で群分けをおこない、各群にTSを負荷した。また対照群を水TS群とし、計10群とした。群の名称は、表7に示すとおり飲料水名とした。TS負荷を行った群には飲料水名の後ろにTSと記した。
<2> Grouping of mice
The group was divided into 9 types of drinking water and each group was loaded with TS. The control group was the water TS group, for a total of 10 groups. The names of the groups were the names of drinking water as shown in Table 7. In the group subjected to TS loading, TS was written after the drinking water name.

<3> 萎縮の判定
萎縮の判定は動物実験において骨格筋の湿重量によるものが一般的であることから、骨格筋湿重量を計測し萎縮の判定を行った。計測は電子天秤 (Mettler-Toledo International Inc.)を用いた。
<3> Determination of atrophy Since the determination of atrophy is generally based on the wet weight of skeletal muscle in animal experiments, the wet weight of skeletal muscle was measured to determine atrophy. An electronic balance (Mettler-Toledo International Inc.) was used for the measurement.

<4> 統計処理
得られたデータはmeans±SDで示した。統計学的分析はT検定法を用いた。有意水準は、危険率5%未満とした。
<4> Statistical processing The obtained data were expressed as means ± SD. Statistical analysis used the T test. The significance level was set at a risk rate of less than 5%.

実験結果
1.体重あたりのヒラメ筋湿重量の比較
図24にヒラメ筋湿重量の平均値を示した。
対照群である水TS群(0.25±0.04mg/g)と比較し、1%の有意差があったのはアスパラギン酸亜鉛TS群(0.29±0.04mg/g)、5%で有意差があったのは水群(0.28±0.06mg/g)とアスパラギン酸マグネシウムTS群(0.27±0.02mg/g)であった。
またアスパラギン酸カリウムTS群(0.26±0.03mg/g)、グルコン酸マグネシウムTS群(0.25±0.05mg/g)、グルコン酸亜鉛TS群(0.24±0.04mg/g)、グルコン酸カルシウムTS群(0.24±0.03mg/g)、クエン酸鉄アンモニウムTS群(0.22±0.04mg/g)、アスパラギン酸TS群(0.26±0.04mg/g)において有意差はなかった。
Experimental results Comparison of soleus muscle wet weight per body weight FIG. 24 shows the average value of soleus muscle wet weight.
Compared with the water TS group (0.25 ± 0.04mg / g), the control group was significantly different by 1% aspartate zinc TS group (0.29 ± 0.04mg / g) and 5%. The water group (0.28 ± 0.06 mg / g) and the magnesium aspartate TS group (0.27 ± 0.02 mg / g) were used.
In addition, potassium aspartate TS group (0.26 ± 0.03mg / g), magnesium gluconate TS group (0.25 ± 0.05mg / g), zinc gluconate TS group (0.24 ± 0.04mg / g), calcium gluconate TS group (0.24 ± 0.03 mg / g), ammonium iron citrate TS group (0.22 ± 0.04 mg / g), and aspartic acid TS group (0.26 ± 0.04 mg / g) were not significantly different.

2.体重あたりの足底筋湿重量の比較
図25に足底筋湿重量の平均値を示した。
対照群である水TS群(0.52±0.02mg/g)と比較し、5%で有意差があったのはクエン酸鉄アンモニウムTS群(0.45±0.09mg/g)であった。
また水群(0.56±0.08mg/g)、アスパラギン酸マグネシウムTS群(0.54±0.06mg/g)、アスパラギン酸亜鉛TS群(0.55±0.03mg/g)、アスパラギン酸カリウムTS群(0.54±0.06mg/g)、グルコン酸マグネシウムTS群(0.52±0.05mg/g)、グルコン酸亜鉛TS群(0.48±0.06mg/g)、グルコン酸カルシウムTS群(0.52±0.05mg/g)、アスパラギン酸TS群(0.52±0.03mg/g)においては有意差がなかった。
2. Comparison of plantar muscle wet weight per body weight FIG. 25 shows the average value of plantar muscle wet weight.
Compared with the control water TS group (0.52 ± 0.02 mg / g), the iron iron citrate TS group (0.45 ± 0.09 mg / g) showed a significant difference at 5%.
In addition, water group (0.56 ± 0.08mg / g), magnesium aspartate TS group (0.54 ± 0.06mg / g), zinc aspartate TS group (0.55 ± 0.03mg / g), potassium aspartate TS group (0.54 ± 0.06mg) / g), magnesium gluconate TS group (0.52 ± 0.05mg / g), zinc gluconate TS group (0.48 ± 0.06mg / g), calcium gluconate TS group (0.52 ± 0.05mg / g), aspartic acid TS group There was no significant difference at (0.52 ± 0.03mg / g).

3.各種ミネラルを含む飲料水による筋萎縮抑制効果の判定
D-MgまたはD-Znで筋萎縮抑制効果があったのに対し、グルコン酸マグネシウム、グルコン酸亜鉛、またアスパラギン酸では筋萎縮の抑制効果がみられなかった。
また本実験結果よりアスパラギン酸のみでも筋萎縮抑制効果はなく、D-MgまたはD-Znという形でとくに筋萎縮抑制効果があることがわかった。
3. Judgment of muscle atrophy suppression effect by drinking water containing various minerals
While D-Mg or D-Zn had an effect of suppressing muscle atrophy, magnesium gluconate, zinc gluconate and aspartic acid did not show an effect of suppressing muscle atrophy.
The results of this experiment also showed that aspartic acid alone had no muscle atrophy-inhibiting effect, and was particularly effective in inhibiting muscle atrophy in the form of D-Mg or D-Zn.

要約
D-MgまたはD-Znを摂取することにより筋重量減少の抑制、すなわち筋萎縮抑制効果があることがわかった。またアスパラギン酸のみでは筋萎縮抑制効果がなかった。
wrap up
It was found that taking D-Mg or D-Zn has the effect of suppressing muscle weight loss, ie, muscle atrophy. In addition, aspartic acid alone had no inhibitory effect on muscle atrophy.

萎縮した筋ではMgが減少し、CaおよびZnが増加するという報告がある。
そこで本実験においては、必ず筋が萎縮するTSモデルのマウスにD-MgまたはD-Zn摂取させることにより、骨格筋中のミネラルがどのように変動するのかを分析するため、誘導結合プラズマ発光分析法によりCa、Mg、Znの定量分析を行った。
It has been reported that Mg is decreased and Ca and Zn are increased in atrophic muscles.
Therefore, in this experiment, in order to analyze how minerals in skeletal muscles fluctuate by ingesting D-Mg or D-Zn in TS model mice that always have muscle atrophy, inductively coupled plasma emission spectrometry is performed. Quantitative analysis of Ca, Mg and Zn was performed by the method.

実験動物には、前記[実施例5]で用いたものを使った。   The experimental animals used were those used in the above [Example 5].

実験方法
<1> 誘導結合プラズマ発光分析によるCa、Mg、Znの定量
a. 採取した骨格筋の前処理
採取した骨格筋を液体窒素で凍結保存し、サンプルとして用いた。
このサンプルをジーエルサイエンス株式会社のデジチューブに移し、10mLの60%硝酸(有害金属測定用:和光純薬株式会社)を加えて1晩浸漬を行い、翌日に湿式加熱酸分解を行った。加熱にはジーエルサイエンス株式会社のDigiPREP Jrを用いた。
加熱のプロトコルは表8の通りである。110℃ホールド60分経過後、0.2mLの過酸化水素水を15分おきに計3回滴下した。
加熱終了後、自然冷却を行い室温まで下げてから、純水で1N硝酸になるように調整後、10mLをフィルター処理した。フィルターはGEヘルスケア・ジャパン株式会社の25mmGD/X PVDF 0.45 μmを用いた。
experimental method
<1> Determination of Ca, Mg and Zn by inductively coupled plasma optical emission spectrometry
a. Pretreatment of the collected skeletal muscle The collected skeletal muscle was stored frozen in liquid nitrogen and used as a sample.
This sample was transferred to a Digitube manufactured by GL Sciences Inc., 10 mL of 60% nitric acid (for toxic metal measurement: Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was added and immersed overnight, and wet heat acid decomposition was performed the next day. DigiPREP Jr from GL Sciences Inc. was used for heating.
The heating protocol is as shown in Table 8. After 60 minutes at 110 ° C. hold, 0.2 mL of hydrogen peroxide was added dropwise every 15 minutes for a total of 3 times.
After completion of heating, the mixture was naturally cooled to room temperature, adjusted to 1N nitric acid with pure water, and 10 mL was filtered. The filter used was 25 mm GD / X PVDF 0.45 μm manufactured by GE Healthcare Japan.

b. 元素定量分析
元素定量分析は誘導結合プラズマ発光分析法により行った。測定装置は株式会社島津製作所のICPE-9000を用いた。ICP条件は高周波パワー:1.20、プラズマガス流量:10.0、補助ガス0.60、キャリアガス0.7、露光時間:15秒、感度:ワイドレンジ、観測:軸、ソルベントリンス時間:30秒、サンプルリンス時間:45秒、ペリスタルティックポンプ回転数:20rpmとした。
b. Elemental quantitative analysis Elemental quantitative analysis was performed by inductively coupled plasma emission spectrometry. The measuring device used was ICPE-9000 from Shimadzu Corporation. ICP conditions are: high frequency power: 1.20, plasma gas flow rate: 10.0, auxiliary gas 0.60, carrier gas 0.7, exposure time: 15 seconds, sensitivity: wide range, observation: axis, solvent rinse time: 30 seconds, sample rinse time: 45 seconds The rotational speed of the peristaltic pump was 20 rpm.

<2> 統計処理
得られたデータはmeans±SDで示した。統計学的分析はT検定法を用いた。対象群はW群とし、有意水準は危険率5%未満とした。
<2> Statistical processing The obtained data are expressed as means ± SD. Statistical analysis used the T test. The target group was W group, and the significance level was less than 5%.

実験結果
1.筋萎縮におけるCa、MgおよびZnの動態
図26にW群とWTS群の骨格筋組織あたりのCa、MgおよびZn量の平均値を示した。
ヒラメ筋におけるCa量はW群238.8±18.7μg/g、WTS群319.0±58.3μg/gであった。WTS群で有意にCa量は増加した(p<0.05)。またMg量はW群247.1±8.5μg/g、WTS群200.2±56.8μg/gであった。平均値間には統計的な有意差はなかったが、WTS群でMg量は減少傾向であった。そしてZn量はW群623.1±80.8μg/g、WTS群706.8±53.0μg/gであった。平均値間には統計的な有意差はなかったが、WTS群で増加傾向を示した。
次に足底筋におけるCa量はW群133.0±5.3μg/g、WTS群134.6±8.9μg/gであった。平均値間には統計的な有意差はなかった。またMg量はW群221.9±23.1μg/g、WTS群220.8±7.4μg/gであった。平均値間には統計的な有意差はなかった。そしてZn量はW群279.0±11.4μg/g、WTS群280.0±27.8μg/gであった。平均値間には統計的な有意差はなかった。
したがって、筋萎縮に伴いヒラメ筋においてCa、MgおよびZn量は変化することがわかった。
Experimental results Dynamics of Ca, Mg and Zn in muscle atrophy FIG. 26 shows the average values of Ca, Mg and Zn amounts per skeletal muscle tissue in the W group and the WTS group.
The amount of Ca in the soleus muscle was 238.8 ± 18.7 μg / g in the W group and 319.0 ± 58.3 μg / g in the WTS group. Ca content increased significantly in the WTS group (p <0.05). The Mg amount was 247.1 ± 8.5 μg / g in the W group and 200.2 ± 56.8 μg / g in the WTS group. There was no statistically significant difference between the mean values, but the Mg amount tended to decrease in the WTS group. The Zn content was 623.1 ± 80.8 μg / g in the W group and 706.8 ± 53.0 μg / g in the WTS group. There was no statistically significant difference between the mean values, but there was an increasing trend in the WTS group.
Next, the Ca content in the plantar muscle was 133.0 ± 5.3 μg / g in the W group and 134.6 ± 8.9 μg / g in the WTS group. There was no statistically significant difference between the mean values. The Mg amount was 221.9 ± 23.1 μg / g in the W group and 220.8 ± 7.4 μg / g in the WTS group. There was no statistically significant difference between the mean values. The Zn content was 279.0 ± 11.4 μg / g in the W group and 280.0 ± 27.8 μg / g in the WTS group. There was no statistically significant difference between the mean values.
Therefore, it was found that Ca, Mg and Zn contents change in the soleus muscle with muscle atrophy.

2.D-Mg摂取におけるCa、MgおよびZnの動態
図26にD-Mg群とD-MgTS群の骨格筋組織あたりのCa、MgおよびZn量の平均値を示した。
ヒラメ筋におけるCa量はD-Mg群222.7±44.0μg/g、D-MgTS群267.7±35.9μg/gであった。D-Mg群およびD-MgTS群におけるCa量は、W群と比較して統計的な有意差はなかった。またMg量はD-Mg群224.1±13.9μg/g、D-MgTS群260.7±27.3μg/gであった。D-Mg群およびD-MgTS群におけるMg量は、W群と比較して統計的な有意差はなかった。そしてZn量はD-Mg群584.8±67.5μg/g、D-MgTS群701.6±80.4μg/gであった。D-Mg群およびD-MgTS群におけるMg量は、平均値間に統計的な有意差はなかったが、D-MgTS群で増加傾向を示した。
次に足底筋におけるCa量はD-Mg群134.2±25.2μg/g、D-MgTS群131.0±18.3μg/gであった。D-Mg群およびD-MgTS群におけるCa量は平均値間には統計的な有意差はなかった。またMg量はD-Mg群224.0±15.1μg/g、D-MgTS群206.4±32.7μg/gであった。D-Mg群およびD-MgTS群におけるMg量は、平均値間には統計的な有意差はなかった。そしてZn量はD-Mg群275.1±33.4μg/g、D-MgTS群289.1±30.8μg/gあった。D-Mg群およびD-MgTS群におけるZn量は、平均値間に統計的な有意差はなかった。
したがって、ヒラメ筋においてD-Mg摂取により筋組織内のCaおよびMg量は維持されたことがわかった。
2. Dynamics of Ca, Mg, and Zn in D-Mg intake FIG. 26 shows the average values of Ca, Mg, and Zn amounts per skeletal muscle tissue in the D-Mg group and D-MgTS group.
The Ca content in the soleus muscle was 222.7 ± 44.0 μg / g in the D-Mg group and 267.7 ± 35.9 μg / g in the D-MgTS group. The Ca content in the D-Mg group and the D-MgTS group was not statistically significant compared to the W group. The Mg amount was 224.1 ± 13.9 μg / g in the D-Mg group and 260.7 ± 27.3 μg / g in the D-MgTS group. There was no statistically significant difference in the amount of Mg in the D-Mg group and the D-MgTS group compared to the W group. The Zn content was 584.8 ± 67.5 μg / g in the D-Mg group and 701.6 ± 80.4 μg / g in the D-MgTS group. The amount of Mg in the D-Mg group and the D-MgTS group did not have a statistically significant difference between the mean values, but showed an increasing tendency in the D-MgTS group.
Next, the Ca content in the plantar muscle was 134.2 ± 25.2 μg / g in the D-Mg group and 131.0 ± 18.3 μg / g in the D-MgTS group. The Ca content in the D-Mg group and D-MgTS group was not statistically significant between the mean values. The Mg amount was 224.0 ± 15.1 μg / g in the D-Mg group and 206.4 ± 32.7 μg / g in the D-MgTS group. The amount of Mg in the D-Mg group and the D-MgTS group did not have a statistically significant difference between the mean values. The Zn content was 275.1 ± 33.4 μg / g in the D-Mg group and 289.1 ± 30.8 μg / g in the D-MgTS group. The amount of Zn in the D-Mg group and the D-MgTS group did not have a statistically significant difference between the mean values.
Therefore, it was found that Ca and Mg levels in muscle tissue were maintained by ingestion of D-Mg in soleus muscle.

3.D-Zn摂取におけるCa、MgおよびZnの動態
図26にD-Zn群とD-ZnTS群の骨格筋組織あたりのCa、MgおよびZn量の平均値を示した。
ヒラメ筋におけるCa量はD-Zn群254.7±55.4μg/g、D-ZnTS群280.3±23.2μg/gであった。D-Zn群およびD-ZnTS群におけるCa量は、D-ZnTS群で有意に増加した(p<0.05)。またMg量はD-Zn群239.9±19.9μg/g、D-ZnTS群273.4±26.6μg/gであった。D-Zn群およびD-ZNTS群におけるCa量は、W群と比較して統計的な有意差はなかった。そしてZn量はD-Zn群610.7±85.5μg/g、D-ZnTS群801.6±120.4μg/gであった。D-Zn群およびD-ZnTS群におけるZn量は、D-ZnTS群で有意に増加した(p<0.05)。
次に足底筋におけるCa量はD-Zn群139.7±10.9μg/g、D-ZnTS群167.4±19.4μg/gであった。D-Zn群およびD-ZnTS群におけるCa量は、平均値間には統計的な有意差はなかった。またMg量はD-Zn群229.5±5.8μg/g、D-ZnTS群230.0±10.4μg/gであった。D-Zn群およびD-ZnTS群におけるMg量は、平均値間には統計的な有意差はなかった。そしてZn量はD-Zn群297.7±31.9μg/g、D-ZnTS群342.6±53.7μg/gであった。D-Zn群およびD-ZnTS群におけるZn量は、平均値間に統計的な有意差はなかった。
したがって、ヒラメ筋においてD-Zn摂取により、D-ZnTS群で筋組織内のZn量は増加することがわかった。
3. Dynamics of Ca, Mg, and Zn in D-Zn intake FIG. 26 shows the average values of Ca, Mg, and Zn amounts per skeletal muscle tissue in the D-Zn group and D-ZnTS group.
The Ca content in the soleus muscle was 254.7 ± 55.4 μg / g in the D-Zn group and 280.3 ± 23.2 μg / g in the D-ZnTS group. The Ca content in the D-Zn group and D-ZnTS group was significantly increased in the D-ZnTS group (p <0.05). The Mg content was 239.9 ± 19.9 μg / g in the D-Zn group and 273.4 ± 26.6 μg / g in the D-ZnTS group. The Ca content in the D-Zn group and the D-ZNTS group was not statistically significant compared to the W group. The Zn content was 610.7 ± 85.5 μg / g in the D-Zn group and 801.6 ± 120.4 μg / g in the D-ZnTS group. The amount of Zn in the D-Zn group and the D-ZnTS group was significantly increased in the D-ZnTS group (p <0.05).
Next, the Ca content in the plantar muscle was 139.7 ± 10.9 μg / g in the D-Zn group and 167.4 ± 19.4 μg / g in the D-ZnTS group. The amount of Ca in the D-Zn group and the D-ZnTS group was not statistically significant between the mean values. The Mg content was 229.5 ± 5.8 μg / g in the D-Zn group and 230.0 ± 10.4 μg / g in the D-ZnTS group. The Mg amount in the D-Zn group and the D-ZnTS group had no statistically significant difference between the mean values. The Zn content was 297.7 ± 31.9 μg / g in the D-Zn group and 342.6 ± 53.7 μg / g in the D-ZnTS group. The amount of Zn in the D-Zn group and the D-ZnTS group was not statistically significant between the mean values.
Therefore, it was found that the amount of Zn in the muscle tissue increased in the D-ZnTS group by ingesting D-Zn in the soleus muscle.

考察
1.D-Mg摂取によるヒラメ筋の萎縮抑制効果
WTS群における骨格筋中のCaとMgの動態結果では、W群と比較してCa量は有意に増加し、Mg量は減少傾向を示している。また前述した実験結果よりWTS群では筋が萎縮していることから、WTS群では組織中のCa量が増加することによりタンパク質分解系の酵素であるカルパインが活性していると考えられる。さらにカルパインの活性化はROSの産生にもかかわることがわかっている。したがってWTS群ではタンパク質分解系の亢進と、ROSの産生により、筋萎縮が亢進していると考えられた。またD-MgTS群においては骨格筋中のCa量の増加もMg量の減少も生じていない。
したがってD-Mgを摂取することにより組織中のMg量が維持されたことから、Caの過度な流入が起こらなかったと考えられる。またCaが組織中に増加しなかったことからカルパインが活性化せず、筋の萎縮も亢進しなかったと考えられた。
Discussion 1. Inhibitory effect of D-Mg intake on soleus atrophy
In the kinetic results of Ca and Mg in skeletal muscle in the WTS group, the Ca amount increased significantly and the Mg amount tended to decrease compared to the W group. In addition, from the above experimental results, muscles are atrophied in the WTS group, and it is considered that calpain, a proteolytic enzyme, is activated by increasing the amount of Ca in the tissue in the WTS group. Furthermore, it has been found that calpain activation is also involved in ROS production. Therefore, in the WTS group, it was considered that muscle atrophy was enhanced by the enhancement of the proteolytic system and the production of ROS. In the D-MgTS group, neither Ca content nor Mg content in skeletal muscle increased.
Therefore, it is considered that excessive influx of Ca did not occur because the amount of Mg in the tissue was maintained by ingesting D-Mg. Moreover, since Ca did not increase in the tissues, calpain was not activated and muscle atrophy was not enhanced.

2.D-Zn摂取によるヒラメ筋の萎縮抑制効果
WTS群における骨格筋中のCaの動態結果では、W群と比較してCa量は有意に増加し、D-ZnTS群でもCa量は有意に増加している。したがってD-ZnTS群でもROSが産生されているものと考えられる。ところがWTS群では筋が萎縮しているが、D-ZnTS群では筋の萎縮は生じなかった。
またD-ZnTS群における骨格筋中のZnの動態結果では、有意にZn量が増加している。したがって、増加したZnが筋の萎縮抑制に関係があるものと考えられた。
2. Inhibitory effect of D-Zn intake on soleus atrophy
In the kinetic results of Ca in skeletal muscle in the WTS group, the Ca content increased significantly compared to the W group, and the Ca content also increased significantly in the D-ZnTS group. Therefore, it is considered that ROS is also produced in the D-ZnTS group. However, in the WTS group, the muscle was atrophied, but in the D-ZnTS group, the muscle was not atrophy.
In addition, the Zn content in the D-ZnTS group showed a significant increase in Zn content in the skeletal muscle. Therefore, increased Zn was considered to be related to the suppression of muscle atrophy.

要約
不活動の状態では、ヒラメ筋の組織中ではCa量が増加し、Mgが減少傾向にあり、Zn量増加傾向を示すといった変化が生じた。
ところが不活動の状態であってもD-Mgを摂取すると、筋組織中のCa、Mg量は維持されることがわかった。また不活動の状態であってもD-Znを摂取することにより、筋組織中のZn量は増加することがわかった。
Summary In the inactive state, the amount of Ca in the soleus muscle tissue increased, Mg decreased, and Zn content increased.
However, it was found that Ca and Mg levels in muscle tissue were maintained when D-Mg was ingested even in an inactive state. It was also found that the amount of Zn in muscle tissue increased by ingesting D-Zn even in an inactive state.

[実験結果まとめ]
上述した各実施例の実験結果より、尾部懸垂に起因する廃用性筋萎縮が確認された。また、廃用性筋萎縮を惹起する条件下であっても、アスパラギン酸亜鉛又はアスパラギン酸マグネシウムを継続して与えることで、筋萎縮が効果的に抑制されると同時に、筋肉の成長が促進されることが確認された。
[Summary of experimental results]
From the experimental result of each Example mentioned above, the disuse muscular atrophy resulting from tail suspension was confirmed. Even under conditions that cause disuse muscular atrophy, continuous supply of zinc aspartate or magnesium aspartate effectively suppresses muscle atrophy and promotes muscle growth. It was confirmed that

したがって、ギブスなどによる固定や不使用、老化、寝たきり、無重力の宇宙空間への暴露などによって筋重量の低下を起こし得る環境下であっても、本発明の筋萎縮抑制剤を継続して摂取することにより、筋萎縮を効果的に抑制できる。また、本発明の筋成長促進剤を継続して摂取することにより、筋萎縮を効果的に抑制できると同時に、筋肉の成長を促進させることができる。   Therefore, the muscle atrophy inhibitor of the present invention is continuously ingested even in an environment where muscle weight can be reduced by fixation or non-use with casts, aging, bedridden, exposure to weightless space, etc. Thus, muscle atrophy can be effectively suppressed. Moreover, by continuously ingesting the muscle growth promoter of the present invention, muscle atrophy can be effectively suppressed and muscle growth can be promoted.

Claims (2)

アスパラギン酸亜鉛又はアスパラギン酸マグネシウムを有効成分とする筋萎縮抑制剤。   A muscle atrophy inhibitor comprising zinc aspartate or magnesium aspartate as an active ingredient. アスパラギン酸亜鉛又はアスパラギン酸マグネシウムを有効成分とする筋成長促進剤。   A muscle growth promoter comprising zinc aspartate or magnesium aspartate as an active ingredient.
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