JP2012179030A - Method for designing and producing package for vegetable and fruit, and package for vegetable and fruit - Google Patents
Method for designing and producing package for vegetable and fruit, and package for vegetable and fruit Download PDFInfo
- Publication number
- JP2012179030A JP2012179030A JP2011045663A JP2011045663A JP2012179030A JP 2012179030 A JP2012179030 A JP 2012179030A JP 2011045663 A JP2011045663 A JP 2011045663A JP 2011045663 A JP2011045663 A JP 2011045663A JP 2012179030 A JP2012179030 A JP 2012179030A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- vegetables
- fruits
- enzyme
- package
- change
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Packging For Living Organisms, Food Or Medicinal Products That Are Sensitive To Environmental Conditiond (AREA)
- Storage Of Fruits Or Vegetables (AREA)
Abstract
Description
本発明は、青果物用包装体の設計方法、その製造方法、青果物用包装体、これを用いた青果物の保存方法、青果物の品質管理方法、及び、この青果物用包装体の検査方法に関する。 The present invention relates to a method for designing a package for fruits and vegetables, a method for producing the same, a package for fruits and vegetables, a method for storing fruits and vegetables using the package, a quality control method for fruits and vegetables, and a method for inspecting the package for fruits and vegetables.
青果物用包装体として、例えば、特許文献１に記載のものがある。特許文献１の青果物用包装体は、開孔面積比率が１×１０-5〜１×１０-4％であり、枝豆１００ｇあたりの袋内表面積が２００〜６００ｃｍ2の有孔合成樹脂フィルムである。特許文献１では、この包装体を使用することによって、枝豆の嫌気呼吸のため発生する臭気を防ぎ、しかも嫌気呼吸による糖分の消化を防止し、一方、過剰の酸素による褐変および黄化を防ぎ、枝豆の鮮度を保った状態で永く保存することができるとされている。 As a package for fruits and vegetables, there exists a thing of patent document 1, for example. The package for fruits and vegetables of Patent Document 1 is a perforated synthetic resin film having an open area ratio of 1 × 10 −5 to 1 × 10 −4 % and a surface area in the bag per 100 g of green soybeans of 200 to 600 cm 2. . In Patent Document 1, by using this package, odor generated due to anaerobic respiration of green soybeans is prevented, and digestion of sugars due to anaerobic respiration is prevented, while browning and yellowing due to excessive oxygen are prevented, It is said that it can be preserved for a long time while maintaining the freshness of green soybeans.
特許文献２、及び非特許文献１にもまた、青果物の鮮度を保持する包装体が記載されている。 Patent Document 2 and Non-Patent Document 1 also describe a package that maintains the freshness of fruits and vegetables.
しかしながら、上記文献記載の従来技術は、以下の点で改善の余地を有していた。特許文献１、２及び非特許文献１に記載される包装体は、中に入れる青果物の種類、重量、及び保存条件等に応じて、包装体の酸素透過量を調整する仕様になっている。このとき、透過量の異なる複数の包装体を用意し、臭気発生状況、褐変および黄化状況、食味・香りの劣化等を外観や嗅覚・味覚により定性的に評価し、仕様を決定する。そのため、評価結果が得られるまでに時間がかかり、仕様の決定に長時間を要してしまう。また、評価試験の精度を向上させるため、定量的に評価できる技術が求められる。 However, the prior art described in the above literature has room for improvement in the following points. The packages described in Patent Documents 1 and 2 and Non-Patent Document 1 have specifications that adjust the oxygen permeation amount of the package according to the type, weight, storage conditions, and the like of the fruits and vegetables to be put therein. At this time, a plurality of packaging bodies having different permeation amounts are prepared, and the specification is determined by qualitatively evaluating the odor generation status, browning and yellowing status, taste / fragrance deterioration, etc. based on the appearance, smell and taste. For this reason, it takes time until an evaluation result is obtained, and it takes a long time to determine specifications. In addition, in order to improve the accuracy of the evaluation test, a technique capable of quantitative evaluation is required.
本発明は上記事情に鑑みてなされたものであり、その目的とするところは、短時間で、かつ、精度よく、青果物用包装体を設計できる技術を提供することにある。 This invention is made | formed in view of the said situation, The place made into the objective is providing the technique which can design the package for fruits and vegetables in a short time and with sufficient precision.
本発明によれば、
青果物の品質に関係する酵素を特定するステップと、
酸素を透過する孔を有する包装体で包装された前記青果物を保存し、前記孔の設計仕様と、前記青果物の保存前後における前記酵素の変化量との関係を把握するステップと、
把握した前記関係に基づき、前記包装体を用いて所定期間前記青果物を保存したときの前記酵素の変化量を所定の閾値以下にする前記設計仕様を決定するステップと、
を含む、青果物用包装体の設計方法が提供される。
According to the present invention,
Identifying the enzymes involved in the quality of the fruits and vegetables;
Preserving the fruits and vegetables packaged in a package having pores that allow oxygen to pass through, and grasping the relationship between the design specifications of the pores and the amount of change in the enzyme before and after storage of the fruits and vegetables;
Based on the grasped relationship, determining the design specifications to make the amount of change of the enzyme less than a predetermined threshold when the fruits and vegetables are stored for a predetermined period using the package;
A method for designing a package for fruits and vegetables is provided.
また、本発明によれば、
酸素を透過する孔を有する包装体を設計する設計工程と、
包装材料に前記孔を形成する穿孔工程と、
を含み、
前記設計工程は、
青果物の品質に関係する酵素を特定するステップと、
前記包装体で包装された前記青果物を保存し、前記孔の設計仕様と、前記青果物の保存前後における前記酵素の変化量との関係を把握するステップと、
把握した前記関係に基づき、前記包装体を用いて所定期間前記青果物を保存したときの前記酵素の変化量を所定の閾値以下にする前記設計仕様を決定するステップと、
を含み、
前記穿孔工程において、決定した前記設計仕様に対応する前記孔を前記包装材料に形成する、青果物用包装体の製造方法が提供される。
Moreover, according to the present invention,
A design process for designing a package having holes through which oxygen passes;
A perforating step for forming the holes in the packaging material;
Including
The design process includes
Identifying the enzymes involved in the quality of the fruits and vegetables;
Preserving the fruits and vegetables packed in the package, grasping the relationship between the design specifications of the holes and the amount of change in the enzyme before and after the preservation of the fruits and vegetables;
Based on the grasped relationship, determining the design specifications to make the amount of change of the enzyme less than a predetermined threshold when the fruits and vegetables are stored for a predetermined period using the package;
Including
In the punching step, there is provided a method for manufacturing a package for fruits and vegetables, wherein the hole corresponding to the determined design specification is formed in the packaging material.
また、本発明によれば、上記の製造方法により得られた、青果物用包装体が提供される。 Moreover, according to this invention, the package for fruits and vegetables obtained by said manufacturing method is provided.
また、本発明によれば、上記の青果物用包装体により青果物を包装して前記青果物を保存する青果物の保存方法が提供される。 Moreover, according to this invention, the preservation method of the fruits and vegetables which packages fruits and vegetables with said fruit and vegetable packaging body and preserve | saves the said fruits and vegetables is provided.
また、本発明によれば、
青果物の品質に関係する酵素を特定するステップと、
上記の保存方法を用いて前記青果物を保存するステップと、
前記青果物の保存前後における前記酵素の変化量を把握するステップと、
前記酵素の変化量が所定の閾値を超えるか否かを判断し、前記酵素の変化量が前記閾値以下と判断されたとき、前記青果物の保存を継続するステップと、
を含む、青果物の品質管理方法が提供される。
Moreover, according to the present invention,
Identifying the enzymes involved in the quality of the fruits and vegetables;
Storing the fruits and vegetables using the storage method described above;
Grasping the amount of change of the enzyme before and after storage of the fruits and vegetables;
Determining whether or not the amount of change in the enzyme exceeds a predetermined threshold, and when the amount of change in the enzyme is determined to be less than or equal to the threshold, continuing the preservation of the fruit and vegetables;
A method for quality control of fruits and vegetables is provided.
さらに、本発明によれば、
青果物の品質に関係する酵素を特定するステップと、
酸素を透過する孔を有する包装体で包装された前記青果物を保存し、前記孔の設計仕様と、保存前後における前記酵素の変化量との関係を把握するステップと、
把握した前記関係に基づき、前記包装体を用いて所定期間前記青果物を保存したときの前記酵素の変化量を所定の閾値以下にする前記包装体を選別するステップと、
を含む、青果物用包装体の検査方法が提供される。
Furthermore, according to the present invention,
Identifying the enzymes involved in the quality of the fruits and vegetables;
Preserving the fruits and vegetables packaged in a package having holes that allow oxygen to pass through, and grasping the relationship between the design specifications of the holes and the amount of change in the enzyme before and after storage;
Based on the grasped relationship, the step of selecting the package to make the amount of change in the enzyme below a predetermined threshold when the fruits and vegetables are stored for a predetermined period using the package;
A method for inspecting a package for fruits and vegetables is provided.
この発明によれば、青果物の品質に関係する酵素を特定し、孔の設計仕様と、青果物の保存前後における酵素の変化量との関係を把握し、包装体を用いて所定期間青果物を保存したときの酵素の変化量を所定の閾値以下にする設計仕様を決定する。これにより、青果物の品質の劣化と孔の設計仕様の関係とを定量的に把握できるため、任意の保存期間で保存したときの品質の劣化の程度を見積もって孔の設計仕様を決定することができる。したがって、設計仕様の決定時間を短縮し、かつ、精度の高い設計が可能になる。 According to this invention, the enzyme related to the quality of the fruits and vegetables is identified, the relationship between the design specifications of the hole and the amount of change in the enzyme before and after the preservation of the fruits and vegetables is grasped, and the fruits and vegetables are preserved for a predetermined period using the package. The design specification is set so that the amount of change in the enzyme is less than a predetermined threshold value. As a result, it is possible to quantitatively grasp the relationship between the deterioration of the quality of fruits and vegetables and the design specifications of the holes, so that it is possible to determine the design specifications of the holes by estimating the degree of quality deterioration when stored for an arbitrary storage period. it can. Therefore, the design specification determination time can be shortened and a highly accurate design can be achieved.
本発明によれば、短時間で、かつ、精度よく、青果物用包装体を設計することができる。 According to the present invention, a package for fruits and vegetables can be designed in a short time and with high accuracy.
以下、本発明の実施の形態について、図面を用いて説明する。尚、すべての図面において、同様な構成要素には同様の符号を付し、適宜説明を省略する。 Hereinafter, embodiments of the present invention will be described with reference to the drawings. In all the drawings, the same reference numerals are given to the same components, and the description will be omitted as appropriate.
図１は、本発明の青果物用包装体の設計方法を示すフローチャートである。この青果物用包装体の設計方法は、青果物の品質に関係する酵素を特定するステップ（Ｓ１０１）と、酸素を透過する孔を有する包装体で包装された青果物を保存し、孔の設計仕様と、青果物の保存前後における酵素の変化量との関係を把握するステップ（Ｓ１０６）と、把握した関係に基づき、包装体を用いて所定期間青果物を保存したときの酵素の変化量を所定の閾値以下にする設計仕様を決定するステップ（Ｓ１０８）とを含む。 FIG. 1 is a flowchart showing a method for designing a package for fruits and vegetables according to the present invention. The method for designing a package for fruits and vegetables includes a step of identifying an enzyme related to the quality of the fruits and vegetables (S101), storing the fruits and vegetables packaged in a package having oxygen-permeable holes, design specifications for the holes, The step (S106) of grasping the relationship between the amount of change in the enzyme before and after storage of fruits and vegetables, and the amount of change in the enzyme when the fruits and vegetables are stored for a predetermined period of time using the package based on the grasped relationship. Determining a design specification to be performed (S108).
以下、具体的に各ステップを説明する。まず、青果物の品質に関係する酵素を特定する（Ｓ１０１）。青果物は、野菜、又は、果物であればよいが、具体的には、ナス、トマト、ピーマン、キュウリ、オクラ等の果菜類、トウモロコシ等の穀物類、インゲン、エンドウ、枝豆、ソラマメ、キヌサヤ等の豆類、もやし等の発芽野菜、キャベツ、コマツナ、ニラ、菜花、ホウレンソウ、ミズナ、レタス、オオバ、ハーブ、ルッコラ等の葉菜類、アスパラガス、ニンニク、ネギ、タマネギ等の茎菜類、ブロッコリー等の花菜類、ショウガ、ナガイモ等の根菜類、エノキ、エリンギ、シイタケ、シメジ等の菌茸類、レモン、甘夏、スダチ等の柑橘類、梅、柿、バナナ等のその他果実類が挙げられる。青果物は、収穫された状態であってもよいし、収穫後カット、洗浄等の処理がされていてもよい。 Hereinafter, each step will be specifically described. First, an enzyme related to the quality of fruits and vegetables is specified (S101). The fruits and vegetables may be vegetables or fruits. Specifically, fruits and vegetables such as eggplant, tomatoes, peppers, cucumbers, okra, cereals such as corn, green beans, peas, green soybeans, broad beans, Kinusaya, etc. Sprouted vegetables such as beans, sprouts, cabbage, komatsuna, leek, rape blossoms, spinach, Mizuna, lettuce, barley, herbs, leafy vegetables such as arugula, stem vegetables such as asparagus, garlic, leeks, onions, etc. Root vegetables such as ginger and Chinese yam, fungi such as enoki, eringi, shiitake and shimeji, citrus such as lemon, sweet summer and sudachi, and other fruits such as plum, persimmon and banana. The fruits and vegetables may be in a harvested state, or may be subjected to processing such as cutting and washing after harvesting.
青果物の品質に関係する酵素には、青果物の好気呼吸に関する酵素（第一の酵素）、嫌気呼吸に関する酵素（第二の酵素）が挙げられる。また、青果物の好気呼吸に関する酵素としては、例えば、青果物の甘みに関する酵素（第三の酵素）、青果物の旨みに関する酵素（第四の酵素）等が挙げられる。青果物の甘みに関する酵素としては、インベルターゼ等のショ糖分解酵素がある。また、青果物の旨みに関する酵素としては、グルタミン酸アンモニアリガーゼ等のグルタミン合成酵素、アスパラギン合成酵素及びアスパラギン酸アミノ基転移酵素が挙げられる。その他、青果物の好気呼吸に関する酵素には、クエン酸回路関連酵素（ピルビン酸脱水素酵素、クエン酸合成酵素、アコニット酸ヒドラターゼ、イソクエン酸デヒドロゲナーゼ、α−ケトグルタル酸デヒドロゲナーゼ、コハク酸デヒドロゲナーゼ、フマル酸ヒドラターゼ、リンゴ酸デヒドロゲナーゼ、ホスホノエノールピルビン酸カルボキシラーゼ、イソクエン酸デヒドロゲナーゼ）、ＣｏＱ（補酵素Ｑ、ユビキノン）、シトクロムｃ（チトクロームｃ）が挙げられる。また、青果物の嫌気呼吸に関する酵素には、アルコールデヒドロゲナーゼ、ピルビン酸デカルボキシラーゼ、解糖系関連酵素（ヘキソキナーゼ、グルコキナーゼ、ホスホヘキソースイソメラーゼ、ホスホフルクトキナーゼ、アルドラーゼ、トリオースリン酸イソメラーゼ、グリセルアルデヒド３−リン酸デヒドロゲナーゼ、ホスホグリセリン酸キナーゼ、ホスホグリセリン酸ムターゼ、エノラーゼ、ピルビン酸キナーゼ、乳酸デヒドロゲナーゼ）が挙げられる。その他、ＧＡＢＡ転換酵素、スクロース合成酵素、スクロースリン酸合成酵素、葉緑素異化酵素、テトラヒドロ葉酸合成酵素、ＡＴＰクエン酸リアーゼ、リボヌクレアーゼ、アスパラギナーゼ、グルタミン依存性アスパラギン合成酵素、等が挙げられる。Ｓ１０１では、これらの酵素の一つを特定してもよいし、複数特定してもよい。複数特定する場合は、甘み、旨み、みずみずしさ等、品質のタイプごとに酵素を特定することが好ましく、例えば、甘みに関する酵素及び旨みに関する酵素をそれぞれ一つ又は複数選択することができる。また、青果物が枝豆の場合は、さらに、莢の老化酵素、組織の老化酵素、リポキシゲナーゼ、種成熟たんぱく質等の老化酵素を特定してもよい。 Enzymes related to the quality of fruits and vegetables include enzymes related to aerobic respiration (first enzyme) and enzymes related to anaerobic respiration (second enzyme). Examples of enzymes relating to aerobic respiration of fruits and vegetables include enzymes relating to the sweetness of fruits and vegetables (third enzyme), enzymes relating to the taste of fruits and vegetables (fourth enzyme), and the like. Enzymes relating to the sweetness of fruits and vegetables include sucrose-degrading enzymes such as invertase. Examples of the enzymes related to the taste of fruits and vegetables include glutamine synthetase such as ammonia glutamate ligase, asparagine synthetase and aspartate aminotransferase. Other enzymes related to aerobic respiration of fruits and vegetables include citrate cycle-related enzymes (pyruvate dehydrogenase, citrate synthase, aconite hydratase, isocitrate dehydrogenase, α-ketoglutarate dehydrogenase, succinate dehydrogenase, fumarate hydratase. , Malate dehydrogenase, phosphonoenol pyruvate carboxylase, isocitrate dehydrogenase), CoQ (coenzyme Q, ubiquinone), cytochrome c (cytochrome c). Enzymes related to anaerobic respiration of fruits and vegetables include alcohol dehydrogenase, pyruvate decarboxylase, glycolysis-related enzymes (hexokinase, glucokinase, phosphohexose isomerase, phosphofructokinase, aldolase, triose phosphate isomerase, glyceraldehyde 3- Phosphate dehydrogenase, phosphoglycerate kinase, phosphoglycerate mutase, enolase, pyruvate kinase, lactate dehydrogenase). In addition, GABA converting enzyme, sucrose synthase, sucrose phosphate synthase, chlorophyll catabolizing enzyme, tetrahydrofolate synthase, ATP citrate lyase, ribonuclease, asparaginase, glutamine-dependent asparagine synthase and the like can be mentioned. In S101, one or more of these enzymes may be specified. In the case of specifying a plurality, it is preferable to specify an enzyme for each type of quality such as sweetness, umami, and freshness. For example, one or a plurality of enzymes related to sweetness and enzymes related to umami can be selected. In addition, when the fruits and vegetables are green soybeans, aging enzymes such as koji aging enzyme, tissue aging enzyme, lipoxygenase, and seed mature protein may be specified.
酵素を特定する手法としては、特に限定されず、青果物の品質に関係することが既知の酵素を任意に選択することができる。また、保存対象の青果物を既知の包装体（例えば、住友ベークライト（株）製、Ｐ−プラス）に保存し、所定の条件下に保存して、発現量が増加する酵素をスクリーニングにより特定してもよい。このとき、所定の条件には、任意の温度、湿度、及び、保存時間等があるが、既知の青果物の保存手法を採用すればよい。酵素の発現は、酵素をコードする遺伝子の発現量をみればよく、遺伝子の発現量の測定方法としては、ＤＮＡマイクロアレイ法、あるいはリアルタイムＰＣＲ法などの定量ＲＴ−ＰＣＲ法、アガロースゲル電気泳動法などの半定量ＲＴ−ＰＣＲ法、ノーザンブロッティング法、あるいは次世代シーケンサーによる転写産物の網羅的解析が例示できる。特定される酵素は、青果物が販売不可あるいは食用不可になるまで保存したとき、保存前の発現量に対して、２倍以上発現するものが好ましく、３倍以上発現するものが好ましく、４倍以上発現するものがより好ましい。青果物は複数の品種を用いると、より精度よく酵素が特定できるため好ましい。なお、既知の酵素についてはこの工程を省略することも可能である。 The method for specifying the enzyme is not particularly limited, and an enzyme known to be related to the quality of fruits and vegetables can be arbitrarily selected. In addition, the fruits and vegetables to be stored are stored in a known package (for example, P-Plus, manufactured by Sumitomo Bakelite Co., Ltd.), stored under predetermined conditions, and an enzyme whose expression level increases is specified by screening. Also good. At this time, the predetermined conditions include an arbitrary temperature, humidity, storage time, and the like, but a known method for storing fruits and vegetables may be adopted. Enzyme expression can be determined by checking the expression level of the gene encoding the enzyme. Methods for measuring the gene expression level include DNA microarray method, quantitative RT-PCR method such as real-time PCR method, agarose gel electrophoresis method, etc. Exhaustive analysis of transcripts by semi-quantitative RT-PCR method, Northern blotting method, or next-generation sequencer. The specified enzyme, when stored until the fruits and vegetables are unsellable or edible, is preferably expressed twice or more of the expression level before storage, preferably expressed three times or more, preferably four times or more What expresses is more preferable. It is preferable to use a plurality of varieties for fruits and vegetables because the enzyme can be identified with higher accuracy. Note that this step can be omitted for known enzymes.
次に、保存前の青果物中の酵素の発現量を測定する（Ｓ１０２）。具体的には、Ｓ１０１で特定した酵素をコードする遺伝子の発現量を分析することにより、Ｓ１０１で特定した青果物の酵素の発現量を測定することができる。測定用試料は、消費者に出荷する直前の青果物の食用部分を一部又は全部用いて調製することができ、枝豆の場合は、収穫日から０〜１日以内に莢または豆の全部又は一部を液体窒素で凍結したものを測定試料とすることができ、柑橘類の場合は、予措終了日から０〜１日以内に果実の皮または果肉の全部又は一部を液体窒素で凍結したものを測定試料とすることができる。収穫又は予措終了後、測定試料を調製するまで（液体窒素で凍結させるまで）の青果物の保存条件は、３〜４０℃が好ましく、３〜２０℃がより好ましく、低温障害により変色する青果物例えばバナナなどを除けば３〜１０℃がさらに好ましい。遺伝子の発現量の測定方法としては、Ｓ１０１において説明したものと同様のものを用いることができるが、ＤＮＡマイクロアレイ法、あるいはリアルタイムＰＣＲ法などの定量ＲＴ−ＰＣＲ法がより好ましい。 Next, the expression level of the enzyme in the fruits and vegetables before storage is measured (S102). Specifically, by analyzing the expression level of the gene encoding the enzyme specified in S101, the expression level of the fruit and vegetable enzyme specified in S101 can be measured. The sample for measurement can be prepared using part or all of the edible portion of the fruits and vegetables immediately before shipment to the consumer. In the case of green soybeans, all or one of the strawberries or beans within one to one day from the date of harvest. The part frozen in liquid nitrogen can be used as a measurement sample. In the case of citrus fruits, all or part of the fruit skin or flesh is frozen in liquid nitrogen within 0 to 1 day from the end of the precautions. Can be used as a measurement sample. After harvesting or pre-treatment, the storage condition of the fruits and vegetables until the measurement sample is prepared (until frozen with liquid nitrogen) is preferably 3 to 40 ° C., more preferably 3 to 20 ° C. Except for bananas, 3 to 10 ° C. is more preferable. As a method for measuring the expression level of a gene, the same method as described in S101 can be used, but a quantitative RT-PCR method such as a DNA microarray method or a real-time PCR method is more preferable.
青果物が枝豆等のダイズである場合、分析される遺伝子としては、ｇｅｎｅ ＩＤ：ＢＷ６６３１０２．１、ＡＩ９８８３２７．１、ＡＷ７５９７７８．１、ＡＷ７６１４５４．１、ＢＷ６５８７０１．１、ＡＷ５６７６０７．１、ＡＷ３５０７５９．１、ＣＦ８０６７２６．１、ＡＷ１０２２６２．１、ＣＦ８０７４５４．１、ＢＥ０２０７６０．１、ＢＥ８０６１４９．１、ＢＥ４４０８６３．１、ＣＸ７０５２７４．１、ＣＯ９８４０１９．１、ＢＷ６７４６１４．１、ＣＸ７０２８０４．１、ＢＥ６５９８７５．１、ＢＵ７６１０６１．１、ＢＥ６５８４２３．１、ＢＥ６５８５５０．１、ＢＭ３０８２８６．１、ＢＵ５７７０３５．１、ＢＩ９４２０１８．１、ＣＸ７０２９１６．１、ＢＦ３２４０９８．１、ＢＷ６５４２５９．１、ＢＩ９４３５３６．１、ＢＩ９４５５４７．１、ＢＷ６６３９５４．１、ＢＩ９７２６５５．１、ＣＸ７０３３５３．１、ＢＵ９２７２４５．１、ＢＵ９６４９６８．１、ＣＯ９７９６９３．１、ＣＸ７０５２１８．１、ＣＸ７１０３７１．１、ＢＱ６２９３３３．１、ＣＡ７８４０６３．１、ＡＷ３１１０１０．１、ＢＷ６６２４７８．１、ＣＸ７０５９１４．１、ＢＷ６５３４９８．１、ＢＷ６５９０１９．１、ＣＤ４８７６４５．１、ＣＸ７０６４６６．１、ＣＤ３９１１７７．１、ＢＧ６５２２９５．１、ＢＷ６５８７７４．１、ＡＷ７０４１６１．１、ＡＩ４６０５１９．１、ＡＩ８５５６２６．１、ＢＷ６７７２９７．１、ＢＥ６６０２０２．１、ＡＷ２３４７０１．１、ＢＵ５４８７２８．１、ＣＦ８０７７９９．１、ＢＷ６６９３６３．１、ＡＷ７８１４２１．１、ＣＯ９８３４１１．１、ＢＥ６５９９２５．１、ＢＷ６７８８９４．１、ＡＷ４３３０３０．１、ＢＷ６８０３１７．１、ＢＩ８９２８４９．１、ＣＤ３９４５３３．１、ＢＭ１２１５９４．１、ＢＭ５２３０８９．１、ＡＷ１３２５９４．１、ＢＷ６６３５９０．１、ＢＷ６７７７９６．１、ＢＩ９６９５３０．１、ＢＷ６５９７１０．１、ＢＷ６５９１７３．１、ＢＭ８９１１４２．１、ＡＷ４３２６４５．１、ＢＵ５４４３２１．１、ＢＭ１８８９５０．１、ＢＱ６１２９１３．１、ＣＸ７０２７５１．１、ＣＡ７８３１４０．１、ＡＩ９３９１０５．１、ＣＸ７０３０９７．１、ＡＷ１３３０２２．１、ＢＥ０２０７２２．１、ＢＷ６５５９０７．１、ＢＷ６５８６９９．１、ＢＷ６７６７４０．１、ＣＦ８０９３１６．１、ＢＵ５４９８０３．１、ＢＷ６６０４２８．１、ＣＡ８５２６７６．１、ＡＷ４５８３１１．１、ＡＷ５０７８１４．１、ＢＷ６５８６８１．１、ＢＥ８２０９５０．１、ＢＥ６５８１２８．１、ＢＩ９４６１０７．１、ＢＷ６５７８０５．１、ＢＷ６５８７０６．１、ＢＷ６５９１７５．１、ＢＷ６５９４６６．１、ＢＷ６８３７６９．１、ＢＥ６６０９９５．１、ＢＷ６６９２０９．１、ＣＸ５４７３８１．１、ＢＷ６７８６９２．１、ＢＱ５７６５９４．１、ＡＩ４９６６２７．１、ＢＷ６７９０３０．１、ＢＷ６５５６１９．１、ＢＷ６７３６４５．１、ＣＦ８０６７７２．１が挙げられる。 When the fruits and vegetables are soybeans such as green soybeans, the genes to be analyzed include gene ID: BW6633102.1, AI988327.1, AW7597788.1, AW761454.1, BW6588701.1, AW5676077.1, AW350759.1, CF806726. 1, AW102262.1, CF80744.1, BE020760.1, BE806614.1, BE440863.1, CX7055274.1, CO984019.1, BW674614.1, CX7028044.1, BE6599875.1, BU761061.1, BE6588423.1, BE658550.1, BM308286.1, BU570335.1, BI942018.1, CX702916.1, BF34098.1, BW654259. , BI943536.1, BI945547.1, BW6633954.1, BI972655.1, CX7033353.1, BU927245.1, BU9646968.1, CO979693.1, CX7055218.1, CX710371.1, BQ629333.1, CA784063.1 .1, BW662478.1, CX705914.1, BW6535498.1, BW659019.1, CD487645.1, CX706646.1, CD3911177.1, BG652295.1, BW6587874.1, AW704161.1, AI4605516.1, AI8555621. , BW 6777.17.1, BE660202.1, AW234701.1, BU548878.1, CF807799.1, BW 6693633.1, AW781421.1, CO983411.1, BE659995.1, BW678894.1, AW433030.1, BW68037.1, BI892849.1, CD3944533.1, BM1215094.1, BM523089.1, AW132594.1, BW663590. 1, BW6777.16.1, BI969530.1, BW659971.1, BW659173.1, BM891142.1, AW432645.1, BU5444321.1, BM188950.1, BQ6129310.1, CX702751.1, CA783140.1, AI9391055.1, CX703097.1, AW133022.1, BE020722.1, BW6555907.1, BW6588699.1, BW676 40.1, CF809316.1, BU549803.1, BW66048.1, CA852676.1, AW458311.1, AW507814.1, BW6588681.1, BE8820850.1, BE658128.1, BI946107.1, BW6577805.1, BW658706.6. 1, BW659175.1, BW65946.1, BW683769.1, BE660995.1, BW669209.1, CX547381.1, BW6788692.1, BQ576694.1, AI469627.1, BW669030.1, BW6555619.1, BW673645.1 CF806772.1 may be mentioned.
Ｓ１０１において、インべルターゼが特定された場合は、ｇｅｎｅ ＩＤ：ＢＵ７６１０６１．１の発現量を測定することが好ましい。
また、Ｓ１０１において、グルタミン合成酵素が特定された場合は、ＡＷ７６１４５４．１を測定することが好ましい。このとき、枝豆の中でもより高い精度でうま味を評価することができる。
また、Ｓ１０１において、アルコールデヒドロゲナーゼが特定された場合は、ＢＷ６７９０３０．１を測定することが好ましい。このとき枝豆でより高い精度で、エタノールなどの嫌気臭を評価することができる。
When invertase is identified in S101, it is preferable to measure the expression level of gene ID: BU761061.1.
Moreover, when glutamine synthetase is specified in S101, it is preferable to measure AW761454.1. At this time, umami can be evaluated with higher accuracy among green soybeans.
Moreover, when alcohol dehydrogenase is specified in S101, it is preferable to measure BW6799030.1. At this time, anaerobic odors such as ethanol can be evaluated with higher accuracy with green soybeans.
次に、酸素を透過する孔を有する包装体を用意し、青果物を包装する（Ｓ１０３）。包装体の材料は、青果物の包装に用いることのできるものであればどのようなものであっても差し支えはないが、例えば、樹脂フィルムを用いることができ、具体的には、無延伸ポリプロピレン、延伸ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリ塩化ビニル、生分解性フィルム、ポリアミド、ポリエステル、ポリカーボネート、ポリ乳酸等のフィルム、これらのフィルムの中から選ばれた複合フィルムが挙げられる。また、樹脂フィルム表面にシーラント層を設けたものでも、防曇処理したフィルムであってもよい。さらに、これらのフィルムは透明であっても、不透明であっても良く、また表面に印刷を付したものであっても何等差し支えはない。樹脂フィルムの厚さは、例えば、２０〜６０μｍとすることができる。 Next, a package having holes that allow oxygen to pass through is prepared, and fruits and vegetables are packaged (S103). The material of the package may be any material as long as it can be used for packaging fruits and vegetables. For example, a resin film can be used, specifically, unstretched polypropylene, Examples thereof include stretched polypropylene, polyethylene, polyvinyl chloride, biodegradable films, films of polyamide, polyester, polycarbonate, polylactic acid, and composite films selected from these films. Moreover, what provided the sealant layer on the resin film surface may be sufficient, and the film which carried out the anti-fog process may be sufficient. Furthermore, these films may be transparent or opaque, and there is no problem even if the surface is printed. The thickness of the resin film can be set to 20 to 60 μm, for example.
ここで、孔の設計仕様とは、包装体の表面積に対する包装体に形成させる孔の総面積の比率（以下、「開孔面積比率」ともいう）を考慮するものであり、具体的には、孔１個あたりの面積、平均孔径、包装体ごとの孔の個数、及び、個々の包装体ごとに形成される孔の間隔からなる群から選択されるものであることが好ましい。Ｓ１０３で用意される包装体の孔の設計仕様は任意のものでよいが、青果物の鮮度を保持できる包装体として一般的に知られているもの（例えば、Ｐ−プラス（登録商標）、住友ベークライト社製）と同様にすることにより、短期間でかつ精度よく設計できるため好ましい。例えば、開孔面積比率は１×１０-5〜１×１０-１％、好ましくは１×１０-5〜１×１０-２％、平均孔径は２０〜５００μｍ程度とすると好ましい。孔の形状は、樹脂フィルムを貫通する貫通孔とするが、開口形は、円形や四角または三角形など、どのような形状であってもよく、円形とすると穿孔作業等の面から好ましい。包装体１袋当たりの孔の個数は、開孔面積比率及び平均孔径より算出することができるが、複数個とすることが望ましい。 Here, the design specification of the hole is to consider the ratio of the total area of the holes to be formed in the package relative to the surface area of the package (hereinafter also referred to as “open hole area ratio”). Specifically, It is preferably selected from the group consisting of the area per hole, the average hole diameter, the number of holes for each package, and the interval between the holes formed for each package. The design specifications of the holes of the package prepared in S103 may be arbitrary, but are generally known as packages that can maintain the freshness of fruits and vegetables (for example, P-Plus (registered trademark), Sumitomo Bakelite) It is preferable to use the same method as that manufactured by the company because it can be designed with high accuracy in a short period of time. For example, the pore area ratio is 1 × 10 −5 to 1 × 10 −1 %, preferably 1 × 10 −5 to 1 × 10 −2 %, and the average pore diameter is preferably about 20 to 500 μm. The shape of the hole is a through-hole penetrating the resin film, but the opening shape may be any shape such as a circle, a square, or a triangle. The number of holes per bag can be calculated from the ratio of the area of the openings and the average hole diameter, but it is desirable to use a plurality of holes.
包装体は、三方シール袋、四方シール袋、チャック付きの袋またはガゼット袋などの形態の袋であっても差し支えなく、さらには、トレー、カップ等に青果物を充填し、これをフィルムで蓋をして包装する形態や包装袋で包装する形態のものであってもよい。また、このような包装袋に青果物を入れ、包装袋の口を閉じることにより青果物を包装する。包装袋の口を閉じる方法は特に規定されず、公知の方法を用いることができる。包装体が袋の場合、青果物１００ｇあたりの袋内表面積は、設計しようとする包装体と同様にし、例えば、２００〜１０００ｃｍ2とすることができる。 The package may be a three-sided seal bag, a four-side seal bag, a bag with a zipper or a gusset bag, etc.Furthermore, a tray, a cup, etc. are filled with fruits and vegetables, and this is covered with a film. Then, it may be in the form of packaging and the form of packaging in a packaging bag. Moreover, fruits and vegetables are packaged by putting the fruits and vegetables in such a packaging bag and closing the mouth of the packaging bag. A method for closing the mouth of the packaging bag is not particularly defined, and a known method can be used. When the package is a bag, the surface area in the bag per 100 g of fruits and vegetables can be set to 200 to 1000 cm 2 , for example, in the same manner as the package to be designed.
なお、Ｓ１０２において測定試料を液体窒素で凍結した日と、Ｓ１０３の包装の日とは同日であることが好ましく、Ｓ１０２、Ｓ１０３の順で行うことが好ましいが、収穫又は予措終了日に、Ｓ１０３の包装を行い、その後０〜１日以内に青果物の一部又は全部を液体窒素で凍結してＳ１０２の測定試料としてもよい。 Note that the day when the measurement sample is frozen in liquid nitrogen in S102 and the day of packaging in S103 are preferably the same day, and are preferably performed in the order of S102 and S103. After that, it is possible to freeze part or all of the fruits and vegetables with liquid nitrogen within 0 to 1 day and use it as the measurement sample of S102.
つづいて、包装された青果物を所定の保存条件で保存する（Ｓ１０４）。保存条件は、設計しようとする包装袋の用途に合わせることが望ましく、一般的な青果物の保存温度としては、３〜４０℃である。保存期間は、任意の保存期間とすることができ、必ずしも、目標とする保存期間に限られず、より短い期間を設定することもできる。例えば、１日〜１年とすることができる。 Subsequently, the packaged fruits and vegetables are stored under predetermined storage conditions (S104). The storage conditions are desirably matched to the intended use of the packaging bag to be designed, and the storage temperature of general fruits and vegetables is 3 to 40 ° C. The storage period can be any storage period, and is not necessarily limited to the target storage period, and a shorter period can be set. For example, it may be 1 day to 1 year.
次に、保存後の青果物の酵素の発現量を測定する（Ｓ１０５）。測定試料は、所定の保存経過の日の青果物の一部又は全部を液体窒素で凍結させて調製する。このときの測定方法、及び、測定対象は、Ｓ１０２における保存前の青果物の酵素の発現量の測定条件と同じにする。 Next, the expression level of the fruit and vegetable enzyme after storage is measured (S105). The measurement sample is prepared by freezing part or all of the fruits and vegetables on the predetermined storage course with liquid nitrogen. The measurement method and measurement target at this time are the same as the measurement conditions for the expression level of the fruit and vegetable enzyme before storage in S102.
その後、再び青果物を保存し（Ｓ１０４）、保存後の青果物の酵素の発現量を測定してもよい（Ｓ１０５）。Ｓ１０４とＳ１０５とを繰り返すことで、保存期間中の青果物の酵素の発現量の経時変化を調べることができる。 Thereafter, the fruits and vegetables may be stored again (S104), and the expression level of the enzymes of the fruits and vegetables after storage may be measured (S105). By repeating S104 and S105, it is possible to examine the change over time in the expression level of the fruit and vegetable enzyme during the storage period.
つづいて、Ｓ１０２において測定した保存前の青果物の酵素の発現量と、Ｓ１０５において測定した保存後の青果物の酵素の発現量とを対比して、Ｓ１０４の保存期間中の酵素の変化量を算出する。ここでいう変化量は、絶対値であってもよいし、相対値であってもよい。そして、Ｓ１０４で使用した包装体の孔の設計仕様と算出された酵素の変化量との関係を把握する。孔の設計仕様の異なる複数の包装体を用いて酵素の変化量を調べることにより、より精度よく孔の設計仕様と算出された酵素の変化量との関係を把握することができる（Ｓ１０６）。 Subsequently, the amount of enzyme change during the storage period of S104 is calculated by comparing the expression level of the enzyme of the fruit and vegetable before storage measured in S102 with the expression level of the enzyme of the fruit and vegetable after storage measured in S105. . The amount of change here may be an absolute value or a relative value. And the relationship between the design specification of the hole of the packaging body used by S104, and the calculated variation | change_quantity of the enzyme is grasped | ascertained. By investigating the amount of change in the enzyme using a plurality of packages having different hole design specifications, the relationship between the hole design specification and the calculated amount of enzyme change can be grasped more accurately (S106).
その後、Ｓ１０６で把握した関係に基づき、包装体を用いて所定期間青果物を保存したときの酵素の変化量を所定の閾値以下にする孔の設計仕様を選別する（Ｓ１０７）。ここでは、例えば、Ｓ１０６で把握した酵素の変化量が所定の閾値以下であるか否かを判断し、所定の閾値以下であった場合に、Ｓ１０４で使用した孔の設計仕様を抽出してもよい。こうすることで、Ｓ１０４における保存期間と同じ期間青果物を保存したとき酵素の変化量を所定の閾値以下にする設計仕様を選別することができる。
また、Ｓ１０６で把握した関係から、任意の保存期間における酵素の変化量を予測する。そして、予測した変化量が所定の閾値以下となるか否かを判断し、所定の閾値以下であった場合に、Ｓ１０４で使用した孔の設計仕様を抽出してもよい。こうすることで、所望の期間、青果物を保存したときの酵素の変化量を所定の閾値以下にする設計仕様を選別することができる。
Thereafter, based on the relationship grasped in S106, the design specifications of the holes are selected so that the amount of change in the enzyme when the fruits and vegetables are stored for a predetermined period using the package is not more than a predetermined threshold (S107). Here, for example, it is determined whether or not the change amount of the enzyme grasped in S106 is equal to or less than a predetermined threshold value, and if it is equal to or less than the predetermined threshold value, the design specification of the hole used in S104 is extracted. Good. By doing so, it is possible to select a design specification that makes the amount of change in enzyme equal to or less than a predetermined threshold when fruits and vegetables are stored for the same period as the storage period in S104.
In addition, the amount of enzyme change in an arbitrary storage period is predicted from the relationship grasped in S106. Then, it is determined whether or not the predicted change amount is equal to or less than a predetermined threshold value. If the predicted change amount is equal to or less than the predetermined threshold value, the design specifications of the hole used in S104 may be extracted. By doing so, it is possible to select design specifications that make the amount of change in enzyme when the fruits and vegetables are stored for a desired period of time or less to a predetermined threshold value or less.
また、Ｓ１０１において、複数の酵素を特定した場合においては、特定した酵素のいずれか１つの変化量を閾値以下にする設計仕様を選別してもよいし、特定したすべての酵素の変化量を閾値以下にする設計仕様を選別してもよい。例えば、Ｓ１０１において、青果物の甘みに関する酵素と、青果物の旨みに関する酵素とをそれぞれ特定した場合、青果物の保存前後における酵素の変化量がいずれも閾値以下になる設計仕様を選別することができる。こうすることで、甘み及び旨みの両方の低下を抑制しうる包装体を設計することができる。 In S101, when a plurality of enzymes are specified, a design specification that makes any one change amount of the specified enzymes less than or equal to the threshold value may be selected, or the change amounts of all the specified enzymes are set as threshold values. The following design specifications may be selected. For example, in S101, when the enzyme relating to the sweetness of fruits and vegetables and the enzyme relating to the taste of fruits and vegetables are respectively specified, design specifications in which the amount of change in the enzyme before and after storage of fruits and vegetables are both equal to or less than the threshold can be selected. By carrying out like this, the package which can suppress the reduction | decrease of both sweetness and taste can be designed.
また、既知の包装体を対照とし、既知の包装体における保存限界時の酵素の発現量を閾値としてもよい。保存限界時とは、青果物が販売不能になった時、生食不能になった時、食用不能になった時などである。こうすることで、既知の包装体よりも長く保存可能な包装体を設計することもできる。 Alternatively, a known package may be used as a control, and the expression level of the enzyme at the storage limit in the known package may be used as a threshold. The storage limit is when the fruits or vegetables become unsaleable, become uneatable, become unedible. By carrying out like this, the package which can be preserve | saved longer than a known package can also be designed.
設計仕様を選別するとき、Ｓ１０４で採用した保存条件と同一の保存条件で使用する包装体を抽出することが精度の向上の点で好ましいが、必ずしも同一の保存条件で使用される必要はなく、一定の誤差も許容されるように閾値を設定することが実用的である。また、Ｓ１０６で把握した関係から、Ｓ１０４で使用した保存条件とは異なる条件にも適合するように設計変更した仕様を決定してもよい。 When selecting design specifications, it is preferable in terms of improving accuracy to extract a package to be used under the same storage conditions as those employed in S104, but it is not always necessary to use the same storage conditions. It is practical to set the threshold value so that a certain error is allowed. In addition, based on the relationship grasped in S106, a specification whose design has been changed so as to conform to a condition different from the storage condition used in S104 may be determined.
ただし、Ｓ１０１〜Ｓ１０６の全ステップにおいて、青果物の種は同一又は類似とすることが好ましく、同一種の青果物を用いることがより好ましい。例えば、枝豆用の包装体を設計する場合、Ｓ１０１においては青果物として枝豆の品質に関係する酵素を特定し、Ｓ１０４においては枝豆を保存する。枝豆の場合は保存期間が短いため、Ｓ１０６において、包装体を用いて５日間２０℃で保存したとき、保存後における酵素の発現量が保存前における酵素の発現量の１０倍以下にする設計仕様を決定すればよい。こうすることで、３〜４０℃の範囲で枝豆の品質を維持できる包装体を設計することができる。 However, in all steps of S101 to S106, it is preferable that the types of fruits and vegetables are the same or similar, and it is more preferable to use the same types of fruits and vegetables. For example, when designing a package for green soybeans, an enzyme related to the quality of green soybeans is specified as fruit and vegetables in S101, and green beans are stored in S104. In the case of green soybeans, the storage period is short, so in S106, when stored at 20 ° C. for 5 days using a package, the expression level of the enzyme after storage is 10 times less than the expression level of the enzyme before storage. Can be determined. By carrying out like this, the package which can maintain the quality of green soybeans in the range of 3-40 degreeC can be designed.
次いで、選別された設計仕様を設計仕様として決定するか否かを判断する（Ｓ１０８）。決定できない場合（Ｓ１０８Ｎ）は、Ｓ１０１に戻り、さらに、同じ又は異なる酵素を特定して、Ｓ１０２〜Ｓ１０７の各ステップを繰り返しても良い。選別された設計仕様を設計仕様として決定できる場合は（Ｓ１０８Ｙ）、設計を終了する。 Next, it is determined whether or not the selected design specification is determined as the design specification (S108). When it cannot be determined (S108N), the process returns to S101, and the same or different enzyme may be specified and each step of S102 to S107 may be repeated. If the selected design specification can be determined as the design specification (S108Y), the design is terminated.
このようにして、決定した設計仕様に対応する孔を樹脂フィルム等の包装材料に形成させる（穿孔工程）。孔以外の包装体の設計は、Ｓ１０４の保存に用いた包装体と同じにする。例えば、包装体が樹脂フィルムの場合は、材料、厚み、袋内表面積は同じにする。 In this way, holes corresponding to the determined design specifications are formed in a packaging material such as a resin film (perforation process). The design of the package other than the holes is the same as the package used for storage in S104. For example, when the package is a resin film, the material, thickness, and bag surface area are the same.
上記のように設計及び作製した包装体を用いて青果物を保存することにより、保存中の青果物における特定の酵素の発現を所望の量に制御することができる。図２には、この包装体を用いて、青果物を保存する方法を説明するフローチャートを示す。まず、包装体の設計時に使用した青果物と同種の青果物を用意し、設計時に特定した酵素と同じ酵素の発現量を測定する（Ｓ２０１）。その後、包装体に包装して（Ｓ２０２）、包装体の設計に適合する保存条件で、青果物を保存する（Ｓ２０３）。一定期間経過後、Ｓ２０１と同様にして、保存した青果物における酵素の発現量を測定する（Ｓ２０４）。そして、保存前後の酵素の変化量を把握する（Ｓ２０５）。あらかじめ、品質の低下の限界を示す閾値を設定し、把握した変化量の結果が閾値以下か否かを判断する（Ｓ２０６）。閾値以下であれば（Ｓ２０６Ｙ）、Ｓ２０３に戻り、保存を継続する。一方、閾値を超えた場合は（Ｓ２０６Ｎ）、保存を停止し、廃棄する。また、保存により青果物を熟成させる場合は、食べ頃にある酵素の発現量を閾値としてもよい。この場合、閾値以下であれば（Ｓ２０６Ｙ）、Ｓ２０３に戻り、保存を継続する一方、閾値を超えた場合は（Ｓ２０６Ｎ）、保存を停止し、出荷、消費する。こうすることで、青果物の品質を管理することができる。なお、Ｓ２０２における測定試料は、Ｓ１０２で説明したように調製することができ、Ｓ２０４における測定試料は、Ｓ１０５で説明したように調製することができる。Ｓ２０２、Ｓ２０３の順で行うことが好ましいが、Ｓ２０３、Ｓ２０２の順で行っても構わない。 By storing fruits and vegetables using the package designed and produced as described above, the expression of a specific enzyme in the fruits and vegetables being stored can be controlled to a desired amount. In FIG. 2, the flowchart explaining the method to preserve | save fruits and vegetables using this package is shown. First, fruits and vegetables of the same type as the fruits and vegetables used at the time of designing the package are prepared, and the expression level of the same enzymes as those specified at the time of designing is measured (S201). After that, the product is packaged in a package (S202), and the fruits and vegetables are stored under storage conditions suitable for the design of the package (S203). After a certain period of time, the expression level of the enzyme in the stored fruits and vegetables is measured in the same manner as S201 (S204). Then, the change amount of the enzyme before and after storage is grasped (S205). A threshold value indicating the limit of quality degradation is set in advance, and it is determined whether the grasped change amount result is equal to or less than the threshold value (S206). If it is less than or equal to the threshold value (S206Y), the process returns to S203 and the storage is continued. On the other hand, if the threshold value is exceeded (S206N), the storage is stopped and discarded. Moreover, when ripening fruit and vegetables by preservation | save, it is good also considering the expression level of the enzyme existing at the time of eating as a threshold value. In this case, if it is equal to or less than the threshold value (S206Y), the process returns to S203, and the storage is continued. If the threshold value is exceeded (S206N), the storage is stopped, shipped, and consumed. In this way, the quality of the fruits and vegetables can be controlled. Note that the measurement sample in S202 can be prepared as described in S102, and the measurement sample in S204 can be prepared as described in S105. Although it is preferable to perform in order of S202 and S203, it may be performed in order of S203 and S202.
また、設計した包装体を複数用意して、酵素の発現を制御できる青果物用包装体の検査をしてもよい。図３は、この検査方法を示すフローチャートである。まず、保存しようとする青果物の品質に関係する酵素を特定し（Ｓ３０１）、保存前の青果物の酵素の発現量を測定する（Ｓ３０２）。そして、青果物を包装体に包装して（Ｓ３０３）、保存する（Ｓ３０４）。一定期間保存した青果物における酵素の発現量をＳ３０２の測定条件と同じ条件で測定し（Ｓ３０５）、保存前後における酵素の変化量を把握する（Ｓ３０６）。把握した変化量が所定の閾値以下となるか否かを判断し（Ｓ３０７）、所定の閾値以下となる包装体を合格とし（Ｓ３０７Ｙ、Ｓ３０８）、所定の閾値を超えた包装体を不合格とする（Ｓ３０７Ｎ、Ｓ３０９）。こうすることで、特定の酵素の発現量が所望の量に制御されている包装体を選別する。このような検査方法を包装体の製造工程の一部に取り込むことにより、製造工程における包装体の検査時間を短縮し、かつ、包装体の信頼性を向上させることができる。また上記の検査方法は、包装体の設計工程の一部に取り込むこともできる。こうすることで、迅速かつ精度良く包装体の設計を行うことができる。なお、Ｓ３０２における測定試料は、Ｓ１０２で説明したように調製することができ、Ｓ３０５における測定試料は、Ｓ１０５で説明したように調製することができる。Ｓ３０２、Ｓ３０３の順で行うことが好ましいが、Ｓ３０３、Ｓ３０２の順で行っても構わない。 Alternatively, a plurality of designed packages may be prepared, and the fruits and vegetables package capable of controlling the expression of enzymes may be inspected. FIG. 3 is a flowchart showing this inspection method. First, an enzyme related to the quality of the fruit or vegetable to be stored is specified (S301), and the expression level of the enzyme of the fruit or vegetable before storage is measured (S302). Then, the fruits and vegetables are packaged in a package (S303) and stored (S304). The expression level of the enzyme in the fruits and vegetables stored for a certain period of time is measured under the same conditions as those in S302 (S305), and the amount of enzyme change before and after storage is determined (S306). It is determined whether or not the grasped change amount is equal to or less than a predetermined threshold (S307), a package that is equal to or less than the predetermined threshold is accepted (S307Y, S308), and a package that exceeds the predetermined threshold is rejected. (S307N, S309). By doing this, a package in which the expression level of a specific enzyme is controlled to a desired level is selected. By incorporating such an inspection method into a part of the manufacturing process of the package, the inspection time of the package in the manufacturing process can be shortened and the reliability of the package can be improved. Moreover, said inspection method can also be taken in in a part of design process of a package. By doing so, the package can be designed quickly and accurately. The measurement sample in S302 can be prepared as described in S102, and the measurement sample in S305 can be prepared as described in S105. Although it is preferable to perform in order of S302 and S303, it may be performed in order of S303 and S302.
つづいて、本発明の効果について説明する。この発明によれば、酵素の発現量を測定することにより、青果物の劣化の程度を評価できるため、短期間で、かつ、定量的に包装体の仕様を決定することができる。例えば、柑橘類の場合、長期間（３〜４ヶ月）の鮮度を維持する必要があり、また、収穫時期のシーズン性のため、従来の外観試験や嗅覚・味覚による評価では１年に１回の評価しかできていなかった。一方、本発明では、酵素の発現量から定量的に孔の設計仕様を評価できるため、１ヶ月で大凡の目安がつき、１年に複数回の評価が可能になる。また、保存期間が短い青果物でも同じことがいえ、１〜２日の時間短縮にもなる。さらに、定量的に結果を把握できるため、評価の精度が向上する。このように、本発明によれば、短時間で、かつ、定量的に、青果物の種類や保存条件等に応じた所望の包装体を設計することが可能になる。 Next, the effect of the present invention will be described. According to this invention, since the degree of deterioration of fruits and vegetables can be evaluated by measuring the expression level of the enzyme, the specifications of the package can be determined quantitatively in a short period of time. For example, in the case of citrus fruits, it is necessary to maintain the freshness for a long period (3 to 4 months), and due to the seasonal nature of the harvesting season, the conventional appearance test and evaluation by smell and taste once a year Only evaluation was possible. On the other hand, in the present invention, since the pore design specifications can be quantitatively evaluated from the expression level of the enzyme, a rough standard is obtained in one month, and multiple evaluations are possible in one year. In addition, the same can be said for fruits and vegetables with a short storage period. Furthermore, since the result can be grasped quantitatively, the accuracy of evaluation is improved. As described above, according to the present invention, it is possible to design a desired package according to the type and storage conditions of fruits and vegetables in a short time and quantitatively.
以上、図面を参照して本発明の実施形態について述べたが、これらは本発明の例示であり、上記以外の様々な構成を採用することもできる。 As mentioned above, although embodiment of this invention was described with reference to drawings, these are the illustrations of this invention, Various structures other than the above are also employable.
図１のフローチャートに従い、包装体を設計した。
［Ｓ１０１：酵素の特定］
１．供試材料
埼玉県さいたま市で収穫された枝豆「おいしいエダマメ」（サンプル１）を用いた。収穫直後の枝豆を３００ｇずつ、酸素を透過する孔を有する包装区としてＰ−プラス（登録商標、住友ベークライト（株）社製、袋サイズ：１６０×２１０ｍｍ）包装、対照包装区としてパンチ穴（直径５ｍｍの有孔を８個あけた、袋サイズ：１６０×２１０ｍｍ）包装で密封包装した。遺伝子発現解析には莢を外した子実を用いるため、収穫直後、２０℃保存１，２，５日後の枝豆を莢を外して子実を液体窒素で凍結保存した。品種の異なる枝豆として、山形県鶴岡市で収穫されただだちゃ豆「白山」（サンプル２）を上記と同様の袋で包装したものを用いた。
The package was designed according to the flowchart of FIG.
[S101: Enzyme identification]
1. Test material Edamame “delicious edamame” (sample 1) harvested in Saitama City, Saitama Prefecture was used. 300g of green soybeans immediately after harvesting, P-plus (registered trademark, manufactured by Sumitomo Bakelite Co., Ltd., bag size: 160 × 210 mm) packaging as a packaging section having holes that allow oxygen to pass through, punch holes (diameter as control packaging sections) The package was hermetically packaged by packaging with 8 pieces of 5 mm holes (bag size: 160 × 210 mm). Since the seeds with the culms removed were used for the gene expression analysis, the soybeans were removed from the pods after 1, 2 and 5 days of storage at 20 ° C. immediately after harvesting, and the seeds were stored frozen in liquid nitrogen. As edamame of different varieties, the one produced by packing the dachacha beans “Hakusan” (sample 2) harvested in Tsuruoka City, Yamagata Prefecture in the same bag as above was used.
２．保存条件
枝豆の保存は、２０℃、４０ＲＨ％の恒温庫で行い、保存期間は５日間であった。枝豆の袋が重ならないように庫内の棚に平置きした。
2. Storage conditions Green soybeans were stored in a constant temperature chamber at 20 ° C. and 40 RH%, and the storage period was 5 days. The edamame bags were placed flat on the shelf so that they would not overlap.
３．測定項目
枝豆について、保存中の袋の酸素濃度、及び、二酸化炭素濃度、並びに重量保持率を測定した。また、外観検査を行った。
3. Measurement Items For green soybeans, the oxygen concentration, carbon dioxide concentration, and weight retention rate of the bag during storage were measured. In addition, an appearance inspection was performed.
４．測定方法
（１）保存中の評価（酸素濃度、二酸化炭素濃度、重量保持率、外観検査）
ガスタイトシリンジで袋内ガスを１ｍｌ採取し、ガス濃度の測定を行った。酸素および二酸化炭素の分析にはガスクロマトグラフ（島津製作所社製、ＧＣ−６Ａ、カラムは島津製作所社製、ＺＹ−１）を用い、キャリアガスはヘリウム、検出器はＴＣＤとした。濃度の単位は、体積百分率であるが、以下、単に％と示す。重量保持率は、ＡＮＤ社製ＥＬＥＣＴＲＯＮＩＣ ＢＡＬＡＮＣＥ ＦＸ−３２００で測定し、試験開始時を１００とした重量百分率であるが、以下、単に％と示す。外観は目視で行い、黄化、褐変、萎れ、軟腐について、４：新鮮である、３：僅かに変化（販売可能）、２：一部変化（販売不可）、１：かなり変化（廃棄妥当）で点数化した。
（２）ＲＮＡ抽出
−８０℃にて凍結保存したサンプルをサンプルミル（協立理工社製、ＳＫ−Ｍ２）で粉砕し、その一部を液体窒素を注いだ乳鉢で破砕した。その粉末からＲＮＡをＱＩＡＧＥＮ，ＲＮｅａｓｙ Ｐｌｕｓ ｍｉｎｉを用いて抽出した。
得られたＲＮＡからｃＤＮＡをＴａＫａＲａ、ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔ II １ｓｔ ｓｔｒａｎｄ ｃＤＮＡ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ Ｋｉｔを用いて合成した。
（３）ＤＮＡマイクロアレイ
上記方法で抽出したＲＮＡを用いて、Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社製の４４ｋダイズ用のＤＮＡマイクロアレイを北海道システム・サイエンス（株）に依頼分析した。サンプル条件は、サンプル１の初期値、Ｐ−プラス包装及びパンチ穴包装のそれぞれの２０℃１日目、２日目、５日目の７条件と、反復データとして初期値、Ｐ−プラス包装及びパンチ包装のそれぞれの２０℃１日目、５日目の５条件の計１２条件で実施した。
結果については、バックグラウンドと有意差のあるシグナルフィーチャーを選択し、鮮度低下に関係する酵素を特定するため保存直前の発現量に対してＰ−プラス包装、パンチ穴包装ともに２倍以上で、保存日数毎にパンチ穴包装／Ｐ−プラス包装の発現比が４倍以上の遺伝子を抽出した。ＮＣＢＩ ＢｌａｓｔＸにてシロイヌナズナとＥｖａｌｕｅ＝０．０１以下で相同性を確認し、ＴＡＩＲからアノテーションを付けた。
4). Measurement method (1) Evaluation during storage (oxygen concentration, carbon dioxide concentration, weight retention, appearance inspection)
1 ml of the gas in the bag was sampled with a gas tight syringe, and the gas concentration was measured. For analysis of oxygen and carbon dioxide, a gas chromatograph (manufactured by Shimadzu Corp., GC-6A, column manufactured by Shimadzu Corp., ZY-1) was used, the carrier gas was helium, and the detector was TCD. The unit of concentration is a volume percentage, but is simply indicated as% hereinafter. The weight retention rate is a weight percentage measured with an ELECTRONIC BALANCE FX-3200 manufactured by AND, and the test start time is 100. Hereinafter, it is simply indicated as%. Appearance is visually observed, yellowing, browning, wilting, soft rot, 4: fresh, 3: slight change (available for sale), 2: partial change (not available for sale), 1: considerable change (proper disposal) It was scored with.
(2) RNA extraction A sample cryopreserved at -80 ° C was pulverized with a sample mill (SK-M2 manufactured by Kyoritsu Riko Co., Ltd.), and a part thereof was crushed with a mortar filled with liquid nitrogen. RNA was extracted from the powder using QIAGEN, RNeasy Plus mini.
CDNA was synthesized from the obtained RNA using TaKaRa, PrimeScript II 1st strand cDNA synthesis kit.
(3) DNA microarray Using the RNA extracted by the above method, a 44 k soybean DNA microarray manufactured by Agilent Technologies was requested and analyzed by Hokkaido System Science Co., Ltd. The sample conditions are the initial value of sample 1, the 7 conditions at 20 ° C. on the 1st, 2nd and 5th days of P-plus packaging and punched hole packaging respectively, and the initial value, P-plus packaging and The punch packaging was performed under a total of 12 conditions of 5 conditions on the first day and the fifth day of 20 ° C.
For the results, select signal features that are significantly different from the background, and identify the enzymes related to the decrease in freshness. Store the P-plus packaging and punch hole packaging more than twice the expression level just before storage. Genes having an expression ratio of punch hole packaging / P-plus packaging of 4 times or more were extracted every day. NCBI BlastX confirmed homology with Arabidopsis and Evalue = 0.01 or less, and annotated from TAIR.
５．結果
（１）保存中の結果
図４（ａ）は、サンプル１について、２０℃保存中の酸素濃度の変化を示す。図４（ｂ）は、サンプル１について、２０℃保存中の二酸化炭素濃度の変化を示す。Ｐ−プラス包装内、及び、パンチ穴包装内のガス濃度は、どちらも１日目からほぼ一定で推移し、Ｐ−プラス包装内の酸素濃度が１０．６％であり、パンチ穴包装内の酸素濃度が２０．７％であった（図４（ａ））。また、Ｐ−プラス包装内の二酸化炭素濃度が１０．７％であり、パンチ穴包装内の二酸化炭素濃度が０．２％であった（図４（ｂ））。保存５日目の重量保持率は、Ｐ−プラス包装で１００％、パンチ穴包装で８５．７％であった（図４（ｃ））。また、外観評価を評価した結果を図５に示した。図５（ａ）が莢の黄化、図５（ｂ）が莢の褐変、図５（ｃ）が莢の萎れ、図５（ｄ）が莢の軟腐を示す。Ｐ−プラス包装は５日間ほぼ良好であったが、パンチ穴包装は萎れ、黄化、褐変の順に変化が進み鮮度が低下していた。
図６（ａ）は、サンプル２について、２０℃保存中の酸素濃度の変化を示す。図６（ｂ）は、サンプル２について、２０℃保存中の二酸化炭素濃度の変化を示す。Ｐ−プラス包装内、及び、パンチ穴包装内のガス濃度は、どちらも１日目からほぼ一定で推移し、Ｐ−プラス包装内の酸素濃度が８．０％であり、パンチ穴包装内の酸素濃度が２０．７％であった（図６（ａ））。また、Ｐ−プラス包装内の二酸化炭素濃度が１６．３％であり、パンチ穴包装内の二酸化炭素濃度が０．２％であった（図６（ｂ））。保存５日目の重量保持率は、Ｐ−プラス包装で１００％、パンチ穴包装で８６．５％であった（図６（ｃ））。また、サンプル２の外観評価を評価した結果を図７に示した。図７（ａ）が莢の黄化、図７（ｂ）が莢の褐変、図７（ｃ）が莢の萎れ、図７（ｄ）が莢の軟腐を示す。Ｐ−プラス包装は５日間ほぼ良好であったが、パンチ穴包装は萎れ、黄化、褐変の順に変化が進み鮮度が２日目から低下していた。
5). Results (1) Results during Storage FIG. 4 (a) shows the change in oxygen concentration during storage at 20 ° C. for sample 1. FIG. 4 (b) shows the change in carbon dioxide concentration during storage at 20 ° C. for sample 1. The gas concentration in the P-plus packaging and in the punch-hole packaging both remained almost constant from the first day, and the oxygen concentration in the P-plus packaging was 10.6%. The oxygen concentration was 20.7% (FIG. 4 (a)). Further, the carbon dioxide concentration in the P-plus packaging was 10.7%, and the carbon dioxide concentration in the punched hole packaging was 0.2% (FIG. 4B). The weight retention on the fifth day of storage was 100% for P-plus packaging and 85.7% for punch-hole packaging (FIG. 4 (c)). Moreover, the result of having evaluated external appearance evaluation was shown in FIG. FIG. 5A shows yellowing of the cocoon, FIG. 5B shows browning of the cocoon, FIG. 5C shows wilting of the cocoon, and FIG. 5D shows soft rot of the cocoon. The P-plus packaging was almost good for 5 days, but the punch hole packaging was deflated, the change progressed in the order of yellowing and browning, and the freshness decreased.
FIG. 6A shows the change in oxygen concentration during storage at 20 ° C. for sample 2. FIG. FIG. 6 (b) shows the change in the carbon dioxide concentration during storage at 20 ° C. for Sample 2. The gas concentration in the P-plus packaging and the punch-hole packaging both remained almost constant from the first day, and the oxygen concentration in the P-plus packaging was 8.0%. The oxygen concentration was 20.7% (FIG. 6 (a)). Further, the carbon dioxide concentration in the P-plus packaging was 16.3%, and the carbon dioxide concentration in the punched hole packaging was 0.2% (FIG. 6B). The weight retention on the fifth day of storage was 100% for P-plus packaging and 86.5% for punch hole packaging (FIG. 6 (c)). Moreover, the result of having evaluated the external appearance evaluation of the sample 2 was shown in FIG. FIG. 7 (a) shows yellowing of the cocoon, FIG. 7 (b) shows browning of the cocoon, FIG. 7 (c) shows wilting of the cocoon, and FIG. 7 (d) shows soft rot of the cocoon. The P-plus packaging was almost good for 5 days, but the punch hole packaging was deflated, the change progressed in the order of yellowing and browning, and the freshness decreased from the second day.
（２）ＤＮＡマイクロアレイの結果
４４０００個の遺伝子中、ＤＮＡマイクロアレイによる保存日数毎でパンチ穴／Ｐ−プラスの発現比を比較した場合、発現比が４倍以上の遺伝子数を図８に示す。４４０００個の遺伝子の中から、保存日数毎にパンチ穴包装／Ｐ−プラス包装の発現比が４倍以上の遺伝子の中から抽出した遺伝子、これに対応する酵素、及び、Ｃｌｕｓｔａｌ Ｗで絞り込んだシロイヌナズナとの相同性を表１に示す。
(2) Results of DNA microarray FIG. 8 shows the number of genes having an expression ratio of 4 times or more when the expression ratio of punch holes / P-plus is compared for each storage day by DNA microarray among 44000 genes. Among 44,000 genes, genes extracted from genes having an expression ratio of punched hole packaging / P-plus packaging of 4 times or more every storage day, corresponding enzymes, and Arabidopsis thawed with Clustal W Are shown in Table 1.
リポキシゲナーゼ（lipoxygenase）は、α-リノレン酸から老化・成熟に関与するホルモンであるジャスモン酸を生合成する酵素である。インベルターゼ（invertase、β-fructofranosidase)は、スクロースからグルコースとフルクトースを合成する酵素である。アスパラギン合成酵素(asparagine synthase)は、アスパラギン酸からアスパラギンを合成する酵素である。グルタミン合成酵素(glutamine synthase)は、グルタミン酸からグルタミンを合成する酵素で可逆反応である。種成熟たんぱく質(seed maturation protein)は、種子が成熟する際に産出されるたんぱく質である。アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ(asparate:2-oxoglutarate aminotransferase, asparate aminotransferase)は、アスパラギン酸と２-オキソグルタル酸から、グルタミン酸とオキサロ酢酸を合成する酵素で可逆反応である。 Lipoxygenase is an enzyme that biosynthesizes jasmonic acid, a hormone involved in aging and maturation, from α-linolenic acid. Invertase (invertase, β-fructofranosidase) is an enzyme that synthesizes glucose and fructose from sucrose. Asparagine synthase is an enzyme that synthesizes asparagine from aspartic acid. Glutamine synthase is an enzyme that synthesizes glutamine from glutamic acid and is reversible. A seed maturation protein is a protein produced when seeds mature. Aspartate aminotransferase (asparate: 2-oxoglutarate aminotransferase, asparate aminotransferase) is an enzyme that synthesizes glutamate and oxaloacetate from aspartate and 2-oxoglutarate.
（３）リアルタイムＰＣＲの結果
ＤＮＡマイクロアレイから選ばれた表１に示す酵素をコードする遺伝子について、上記方法で合成したｃＤＮＡを１／１０ＴＥ溶液で２０倍希釈して、リアルタイムＰＣＲを実施した。装置はＡｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社製、７３００ Ｆａｓｔ リアルタイムＰＣＲシステムを用いた。遺伝子は、ＦＡＳＴＡファイルをＤＤＢＪのＣｌｕｓｔａｌ Ｗにて遺伝子配列を確認し、配列が異なるものを選んだ。なお、プライマーの設計は、Ｐｒｉｍｅｒ３Ｐｌｕｓを用いて生成物が１００ｂｐ前後になる２０ｂｐのプライマーを設計した。プライマーの配列を表２に示す。蛍光試薬はＰｏｗｅｒ ＳＹＢＲ Ｇｒｅｅｎ ＰＣＲ Ｍａｓｔｅｒ ｍｉｘを用いた。内部標準としてアクチンを用い、比較Ｃｔ法（ΔΔＣｔ法）により、発現比を算出した。ｎ＝３で測定した。数値は、収穫直後を基準（分母）として算出した。
(3) Results of real-time PCR For the genes encoding the enzymes shown in Table 1 selected from the DNA microarray, cDNA synthesized by the above method was diluted 20-fold with 1/10 TE solution, and real-time PCR was performed. The apparatus was a 7300 Fast real-time PCR system manufactured by Applied Biosystems. As for the gene, the FASTA file was confirmed by DDBJ Clustal W, and the gene sequence was selected. The primer was designed by using Primer 3 Plus and a 20 bp primer with a product of about 100 bp. The primer sequences are shown in Table 2. As a fluorescent reagent, Power SYBR Green PCR Master mix was used. Using actin as an internal standard, the expression ratio was calculated by the comparative Ct method (ΔΔCt method). Measurement was performed at n = 3. The numerical value was calculated using the immediately after harvest as the standard (denominator).
図９−１１に、サンプル１の２０℃保存中の各酵素をコードする遺伝子の発現比の経時変化を示す。図９（ａ）は、インベルターゼをコードする遺伝子（ｇｅｎｅ ＩＤ：ＢＵ７６１０６１．１。「インベルターゼ遺伝子」ともいう）の発現比の変化、図９（ｂ）は、グルタミン合成酵素をコードする遺伝子（ｇｅｎｅ ＩＤ：ＡＷ７６１４５４．１。「グルタミン合成酵素遺伝子」ともいう）の発現比の変化を示す。実線にリアルタイムＰＣＲの結果を示し、点線にＤＮＡマイクロアレイの結果を示す。インベルターゼ遺伝子、及び、グルタミン合成酵素遺伝子のいずれも、リアルタイムＰＣＲの結果は、ＤＮＡマイクロアレイと同じ傾向を示した。パンチ穴包装による保存では、１日目からインベルターゼ遺伝子の発現比が大きくなっており保存初期に差が見られた。グルタミン合成酵素遺伝子の発現比は、１日目では、Ｐ−プラス包装における保存とパンチ穴包装における保存との間に差が見られないが、５日目に大きく差が見られた。 9-11 shows the change over time in the expression ratio of the gene encoding each enzyme of Sample 1 during storage at 20 ° C. FIG. 9A shows changes in the expression ratio of a gene encoding invertase (gene ID: BU761061.1, also referred to as “invertase gene”), and FIG. 9B shows a gene encoding gene for glutamine synthase (gene ID). : AW761454.1, also referred to as “glutamine synthase gene”). The solid line shows the result of real-time PCR, and the dotted line shows the result of DNA microarray. Both the invertase gene and the glutamine synthetase gene showed the same tendency as the DNA microarray in the results of real-time PCR. In the preservation by punch hole packaging, the expression ratio of the invertase gene was increased from the first day, and a difference was observed in the early stage of preservation. The expression ratio of the glutamine synthetase gene did not show a difference between storage in P-plus packaging and storage in punched hole packaging on the first day, but a large difference was observed on the fifth day.
図１０（ａ）は、アスパラギン合成酵素をコードする遺伝子（ｇｅｎｅ ＩＤ：ＢＷ６５９４６６．１。「アスパラギン合成酵素遺伝子」ともいう。）の発現比の変化、図１０（ｂ）は、リポキシゲナーゼをコードする遺伝子（ｇｅｎｅ ＩＤ：ＢＷ６５８６９９．１。「リポキシゲナーゼ遺伝子」ともいう。）の発現比の変化を示す。アスパラギン合成酵素遺伝子、及び、リポキシゲナーゼ遺伝子のいずれも、リアルタイムＰＣＲの結果は、ＤＮＡマイクロアレイと同じ傾向を示した。アスパラギン合成酵素は、パンチ穴包装の１、５日目の発現比が収穫日より若干高いものの、Ｐ−プラス包装は徐々に低下した。リポキシゲナーゼ遺伝子の発現比は、パンチ穴包装では、１日目が高くなったが５日目はどちらも低下した。 FIG. 10 (a) shows a change in the expression ratio of a gene encoding asparagine synthase (gene ID: BW659946.1, also referred to as “asparagine synthase gene”). FIG. 10 (b) shows a gene encoding lipoxygenase. (Gene ID: BW6588699.1. Also referred to as “lipoxygenase gene”) changes in expression ratio. As for the asparagine synthase gene and the lipoxygenase gene, the results of real-time PCR showed the same tendency as the DNA microarray. Asparagine synthase was slightly higher in the P-plus packaging, although the expression ratio on the first and fifth days of punch hole packaging was slightly higher than the harvest date. The expression ratio of the lipoxygenase gene was higher on the first day but decreased on the fifth day in punch hole packaging.
図１１（ａ）は、種成熟タンパク質をコードする遺伝子（ｇｅｎｅ ＩＤ：ＢＷ６６０４２８．１。「種成熟タンパク質遺伝子」ともいう）の発現比の変化、図１１（ｂ）は、アスパラギン酸：オキソグルタル酸アミノトランスフェラーゼをコードする遺伝子（ｇｅｎｅ ＩＤ：ＢＷ６６９２０９．１。「アミノ基転移酵素遺伝子」ともいう）の発現比の変化を示す。種成熟タンパク質遺伝子、及び、アミノ基転移酵素遺伝子のいずれも、リアルタイムＰＣＲの結果は、ＤＮＡマイクロアレイと同じ傾向を示した。種成熟タンパク質遺伝子は、Ｐ−プラス包装、パンチ穴包装ともに経時変化で発現が高くなっているが、パンチ穴包装の５日目はかなり高くなっていた。アミノ基転位酵素遺伝子では、どちらも収穫日よりも発現が低下していたが、Ｐ−プラス包装の方が低かった。 FIG. 11 (a) shows a change in the expression ratio of a gene encoding a seed mature protein (gene ID: BW66048.1, also referred to as “seed mature protein gene”), and FIG. 11 (b) shows an aspartic acid: oxoglutarate amino acid. It shows a change in the expression ratio of a gene encoding transferase (gene ID: BW669209.1, also referred to as “aminotransferase gene”). For both the seed mature protein gene and the aminotransferase gene, the results of real-time PCR showed the same tendency as the DNA microarray. The expression of the seed mature protein gene increased with time in both P-plus packaging and punch hole packaging, but was significantly higher on the fifth day of punch hole packaging. In both aminotransferase genes, the expression was lower than the harvest date, but the P-plus packaging was lower.
図１２〜１４に、サンプル２の２０℃保存中の各酵素の発現比の経時変化を示す。図１２（ａ）は、インベルターゼ遺伝子の発現比の変化、図１２（ｂ）は、グルタミン合成酵素遺伝子の発現比の変化を示す。インベルターゼ、グルタミン合成酵素遺伝子の発現比の変化は、図９と同じ傾向を示した。 12 to 14 show changes with time in the expression ratios of the respective enzymes during the storage of Sample 2 at 20 ° C. FIG. 12 (a) shows the change in the expression ratio of the invertase gene, and FIG. 12 (b) shows the change in the expression ratio of the glutamine synthetase gene. The change in the expression ratio of the invertase and glutamine synthetase genes showed the same tendency as in FIG.
図１３（ａ）は、アスパラギン合成酵素遺伝子の発現比の変化、図１３（ｂ）は、リポキシゲナーゼ遺伝子の発現比の変化を示す。アスパラギン合成酵素遺伝子、リポキシゲナーゼ遺伝子の変化は、図１０で示す結果と同様に、パンチ穴包装の方が、発現比が高かったが、パンチ穴包装の発現比は、図１０と比べると高かった。 FIG. 13 (a) shows the change in the expression ratio of the asparagine synthase gene, and FIG. 13 (b) shows the change in the expression ratio of the lipoxygenase gene. As for the changes of the asparagine synthase gene and the lipoxygenase gene, the expression ratio of punch hole packaging was higher than that of FIG. 10, but the expression ratio of punch hole packaging was higher than that of FIG.
図１４（ａ）は、種成熟タンパク質遺伝子の発現比の変化、図１４（ｂ）は、アミノ基転移酵素遺伝子の発現比の変化を示す。種成熟タンパク質遺伝子、アミノ基転移酵素遺伝子の発現比の変化は、図１１と同じ傾向を示した。 FIG. 14 (a) shows the change in the expression ratio of the seed mature protein gene, and FIG. 14 (b) shows the change in the expression ratio of the aminotransferase gene. The change in the expression ratio of the seed mature protein gene and the aminotransferase gene showed the same tendency as in FIG.
ＤＮＡマイクロアレイ、リアルタイムＰＣＲ、異なる品種での実験結果から、枝豆の鮮度保持には表１で示すアクチン以外の酵素６種が関わっていると思われた。その中でも酸素の透過を制御する孔を有する包装体による美味しさ保持には、インベルターゼ及びグルタミン合成酵素が関係していると思われたため、この酵素を包装体の設計に用いることにした。また、臭気（エタノール）に関係していることが既知であるアルコールデヒドロゲナーゼも用いることにした。 From the results of DNA microarrays, real-time PCR, and experimental results using different varieties, it was considered that 6 types of enzymes other than actin shown in Table 1 were involved in maintaining the freshness of green soybeans. Among them, invertase and glutamine synthase seemed to be related to maintaining the taste by the package having pores that control the permeation of oxygen, so this enzyme was used for the design of the package. We also decided to use alcohol dehydrogenase, which is known to be related to odor (ethanol).
［Ｓ１０２：保存前の青果物中の酵素の発現量の測定］
群馬県沼田市で収穫された枝豆「錦秋」（サンプル３）を収穫直後（収穫後０日）に莢を外して子実を取り出し、液体窒素で凍結した。そして、上記Ｓ１０１で説明した方法でＲＮＡ抽出を行い、リアルタイムＰＣＲ法により、インベルターゼ遺伝子、グルタミン合成酵素遺伝子、及び、アルコールデヒドロゲナーゼをコートする遺伝子（ｇｅｎｅ ＩＤ：ＢＷ６７９０３０．１。「アルコール脱水素酵素遺伝子」ともいう。）の発現量をそれぞれ測定した。具体的には、上記ＲＮＡ抽出で合成したｃＤＮＡを用い、装置はＴａｋａｒａ社製、Ｔｈｅｒａｍａｌ Ｃｙｃｌｅｒ Ｄｉｃｅ Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ Ｓｙｓｔｅｍ Ｓｉｎｇｌｅ ＴＰ８５０を用いた。遺伝子は、ＦＡＳＴＡファイルをＤＤＢＪのＣｌｕｓｔａｌ Ｗにて遺伝子配列を確認し、配列が異なるものを選んだ。なお、インベルターゼ遺伝子、及び、グルタミン合成酵素遺伝子のプライマーの配列は、表１に示すものを用いた。また、アルコール脱水素酵素遺伝子のプライマーとしては、フォワードプライマーとして５’−ＣＧＡＣＧＧＴＧＣＴＡＡＧＧＡＧＡＧＡＣ−３’（配列番号１３）、及び、リバースプライマーとして５’−ＧＴＧＡＡＡＣＡＣＴＧＣＡＴＧＧＣＡＡＣ−３’（配列番号１４）を用いた。蛍光試薬はＴａｋａｒａ社製 ＳＹＢＲ Ｐｒｅｍｉｘ Ｅｘ Ｔａｑ ＩＩ（Ｐｅｒｆｅｃｔ Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ）を用いた。内部標準としてアクチン（ｇｅｎｅ ＩＤ：ＣＤ４０５８３８．１）を用いて測定し、比較Ｃｔ法（ΔΔＣｔ法）により発現比を算出した。ｎ＝３で測定した。
[S102: Measurement of expression level of enzyme in fruits and vegetables before storage]
The green soybean “Kinkiaki” (sample 3) harvested in Numata City, Gunma Prefecture was removed immediately after harvesting (0 days after harvesting), and the fruit was taken out and frozen in liquid nitrogen. Then, RNA extraction is performed by the method described in S101, and a gene that coats the invertase gene, the glutamine synthetase gene, and the alcohol dehydrogenase (gene ID: BW679903. 1. “Alcohol dehydrogenase gene”) by the real-time PCR method. The expression level of each was also measured. Specifically, cDNA synthesized by the above RNA extraction was used, and the apparatus used was a Thermal Cycler Dice Real Time System Single TP850 manufactured by Takara. As for the gene, the FASTA file was confirmed by DDBJ Clustal W, and the gene sequence was selected. The invertase gene and the glutamine synthetase gene primer sequences shown in Table 1 were used. In addition, as a primer for the alcohol dehydrogenase gene, 5′-CGACGGTGCTCAAGGAGAGC-3 ′ (SEQ ID NO: 13) was used as a forward primer, and 5′-GTGAAACACTGCCATGGCAAC-3 ′ (SEQ ID NO: 14) was used as a reverse primer. The fluorescent reagent used was SYBR Premix Ex Taq II (Perfect Real Time) manufactured by Takara. Measurement was performed using actin (gene ID: CD405838.1) as an internal standard, and the expression ratio was calculated by the comparative Ct method (ΔΔCt method). Measurement was performed at n = 3.
［Ｓ１０３：包装体で青果物を包装］
表面積が６７２００ｍｍ２、袋サイズ（内寸）が１６０ｍｍ×２１０ｍｍ、厚さ２５μｍの二軸延伸ポリプロピレンからなる三方シール袋を用意し、それぞれ表３に示す設計仕様で孔を開け、Ｐ０〜５、及び、対照包装区となる包装体（ＲＥ）（「対照包装体」ともいう。）を作製した。Ｐ０〜５、及び、対照包装体を用いて収穫直後（０日）のサンプル３をそれぞれ２７０ｇずつ包装した。孔の形状は、平面視でほぼ円形にした。
[S103: Packaging fruits and vegetables in a package]
Prepare three-sided sealed bags made of biaxially oriented polypropylene with a surface area of 67200 mm 2 , a bag size (inner dimensions) of 160 mm × 210 mm, and a thickness of 25 μm. Then, a package (RE) (also referred to as “control package”) serving as a control package was prepared. 270 g of each sample 3 immediately after harvesting (day 0) was packaged using P0-5 and the control package. The shape of the hole was almost circular in plan view.
［Ｓ１０４：青果物を保存］
２０℃のインキュベーターで行い、平均湿度は７６．８％ＲＨ、保存期間は１１日間であった。エダマメの袋が重ならないように庫内の棚に平置きした。
[S104: Save fruits and vegetables]
It was carried out in an incubator at 20 ° C., the average humidity was 76.8% RH, and the storage period was 11 days. It was placed flat on the shelf in the cabinet so that the shrimp bags would not overlap.
［Ｓ１０５：保存後の青果物中の酵素の発現量を測定］
保存１、３、５、８、１１日後の枝豆をそれぞれ莢を外して子実を液体窒素で凍結保存した後、Ｓ１０２と同じ条件でＲＮＡ抽出を行った後、リアルタイムＰＣＲ法で、特定した酵素に対応する遺伝子の発現量を測定した。なお、Ｐ０は袋が膨張して３日目には破裂したため、試験を１日目のみで中止した。
[S105: Measure the expression level of the enzyme in the fruits and vegetables after storage]
After removing the pods after 1, 3, 5, 8, 11 days of storage and freezing the seeds in liquid nitrogen, RNA extraction was performed under the same conditions as in S102, and then the enzyme identified by the real-time PCR method The expression level of the gene corresponding to was measured. In P0, since the bag expanded and burst on the third day, the test was stopped only on the first day.
［Ｓ１０６：孔の設計仕様と酵素の変化量との関係の把握］
測定された発現量から、Ｓ１０２で得られた収穫直後を基準（分母）として発現比を算出した。算出された発現比を表４〜６に示す。
[S106: Understanding the relationship between the design specifications of the hole and the amount of change in the enzyme]
From the measured expression level, the expression ratio was calculated using the immediately after harvesting obtained in S102 as a reference (denominator). The calculated expression ratios are shown in Tables 4-6.
また、Ｐ１〜５の包装体について、対照包装体との発現比との対比を行った。具体的には、後述する外観検査において、平均が２点以下になる８日目のＲＥの結果を基準として、発現比の対比をした。表７〜９には、８日目の対照包装体の発現比に対するＰ１〜５の各包装体の発現比の対比結果を示す。表７がインベルターゼの発現比の対比結果であり、表８がグルタミン合成酵素の発現比の対比結果であり、表９がアルコール脱水素酵素の発現比の対比結果である。 Moreover, about the packaging body of P1-5, contrast with the expression ratio with a control packaging body was performed. Specifically, in the appearance inspection described later, expression ratios were compared based on the result of RE on the 8th day when the average was 2 or less. Tables 7 to 9 show the comparison results of the expression ratios of the P1 to 5 packagings with respect to the expression ratio of the control packaging on the 8th day. Table 7 shows the comparison result of the expression ratio of invertase, Table 8 shows the comparison result of the expression ratio of glutamine synthase, and Table 9 shows the comparison result of the expression ratio of alcohol dehydrogenase.
［外観検査］
Ｐ０〜５、及び、対照包装体で保存した枝豆について外観試験を行った。外観は目視で行い、黄化、褐変、萎れについて、４：新鮮である、３：僅かに変化（販売可能）、２：一部変化（販売不可）、１：かなり変化（廃棄妥当）で点数化した。臭気について、４：異臭がしない、３：僅かに異臭がする、２：異臭がする（販売不可）、１：強い異臭がする（販売不可）で点数化した。食味は、５人で行い、４：美味しい、３：やや低下、２：かなり低下、１：まずいで点数化した。結果を図１５、１６に示す。
[Visual inspection]
An appearance test was performed on green soybeans stored in P0 to 5 and the control package. Appearance is visually observed, yellowing, browning, wilting 4: fresh, 3: slight change (sellable), 2: partial change (not sellable), 1: considerable change (disposal appropriate) Turned into. The odor was scored as follows: 4: No odor, 3: Slight odor, 2: Smelly odor (not for sale), 1: Strong odor (not for sale). The taste was 5 people, 4: delicious, 3: slightly reduced, 2: considerably reduced, 1: poorly scored. The results are shown in FIGS.
［Ｓ１０７、Ｓ１０８：孔の設計仕様の選別・決定］
選別は、種々の方法により行った。
（選別方法１）表４〜６から、５日間枝豆を保存したときのインベルターゼ遺伝子、グルタミン合成酵素遺伝子、及び、アルコール脱水素酵素遺伝子の全ての発現比が１０以下になるものを選別した。この方法では、Ｐ２、３が選別された。さらに、発現比が５以下になるものを選別すると、Ｐ２が抽出された。
（選別方法２）表９の結果から、Ｐ１は、対照包装体よりも発現比の増加が見られたことから、好ましい設計ではないと決定した。また、表９において、閾値を５００％以下として、Ｐ１が、好ましい設計ではないと決定した。また、表７において、Ｐ５は、対照包装体よりも発現比の増加が見られたことから、好ましい設計ではないと判断した。表７〜９において、Ｐ２、３、４は、対照包装体の各酵素遺伝子の発現比と同等又は小さくできるため、仕様を満たすものとして選別された。また、表７において閾値を１０％以下とし、表８において閾値を１５％以下とすると、Ｐ２、３が仕様を満たすものとして選別された。また、表７において閾値を５％以下とし、表８において閾値を１０％以下とすると、Ｐ２が仕様を満たすものとして選別された。
選別方法１、２の結果から、Ｐ２が最も長期間、鮮度良く枝豆を保存できる包装体であると決定された。また、選別方法２から、Ｐ３、４も対照包装体より長期間保存できる包装体となり得ることが明らかとなった。
[S107, S108: Selection / determination of design specifications for holes]
Sorting was performed by various methods.
(Selection Method 1) From Tables 4 to 6, the ones in which the expression ratios of the invertase gene, glutamine synthase gene, and alcohol dehydrogenase gene when the green soybeans were stored for 5 days were selected to be 10 or less. In this method, P2 and 3 were selected. Furthermore, P2 was extracted when the expression ratio of 5 or less was selected.
(Selection method 2) From the results of Table 9, it was determined that P1 was not a preferred design because an increase in the expression ratio was seen over the control package. Further, in Table 9, it was determined that P1 was not a preferable design with the threshold set to 500% or less. Moreover, in Table 7, since the increase in the expression ratio was seen compared with the control packaging body, P5 was judged not to be a preferable design. In Tables 7 to 9, P2, 3, and 4 were selected to satisfy the specifications because they can be equal to or smaller than the expression ratio of each enzyme gene in the control package. Further, when the threshold value was 10% or less in Table 7 and the threshold value was 15% or less in Table 8, P2 and 3 were selected as satisfying the specifications. Further, when the threshold value was set to 5% or less in Table 7 and the threshold value was set to 10% or less in Table 8, P2 was selected as satisfying the specifications.
From the results of the selection methods 1 and 2, it was determined that P2 is a package that can store green soybeans for the longest period with good freshness. Moreover, it became clear from the selection method 2 that P3 and 4 can also become a package which can be preserve | saved for a long time rather than a control package.
Claims (16)
酸素を透過する孔を有する包装体で包装された前記青果物を保存し、前記孔の設計仕様と、前記青果物の保存前後における前記酵素の変化量との関係を把握するステップと、
把握した前記関係に基づき、前記包装体を用いて所定期間前記青果物を保存したときの前記酵素の変化量を所定の閾値以下にする前記設計仕様を決定するステップと、
を含む、青果物用包装体の設計方法。 Identifying the enzymes involved in the quality of the fruits and vegetables;
Preserving the fruits and vegetables packaged in a package having pores that allow oxygen to pass through, and grasping the relationship between the design specifications of the pores and the amount of change in the enzyme before and after storage of the fruits and vegetables;
Based on the grasped relationship, determining the design specifications to make the amount of change of the enzyme less than a predetermined threshold when the fruits and vegetables are stored for a predetermined period using the package;
A method for designing a package for fruits and vegetables.
前記設計仕様を決定する前記ステップにおいて、前記青果物の保存前後における前記第一の酵素、及び、前記第二の酵素のいずれか一方又は両方の変化量が前記酵素ごとに定められた閾値以下になる前記設計仕様を決定する、請求項１又は２に記載の青果物用包装体の設計方法。 In the step of specifying the enzyme, at least one first enzyme related to aerobic respiration of the fruits and vegetables and at least one second enzyme related to anaerobic respiration of the fruits and vegetables are specified, respectively.
In the step of determining the design specifications, the amount of change in one or both of the first enzyme and the second enzyme before and after storage of the fruits and vegetables is equal to or less than a threshold value determined for each enzyme. The method for designing a package for fruits and vegetables according to claim 1 or 2, wherein the design specifications are determined.
前記設計仕様を決定する前記ステップにおいて、前記青果物の保存前後における前記第三の酵素、及び、前記第四の酵素のいずれか一方又は両方の変化量が前記酵素ごとに定められた閾値以下になる前記設計仕様を決定する、請求項３に記載の青果物用包装体の設計方法。 In the step of specifying the enzyme, the first enzyme further specifies at least one third enzyme relating to sweetness of the fruits and vegetables and at least one fourth enzyme relating to the taste of the fruits and vegetables, respectively.
In the step of determining the design specifications, the amount of change in one or both of the third enzyme and the fourth enzyme before and after storage of the fruits and vegetables is equal to or less than a threshold value determined for each enzyme. The method for designing a package for fruits and vegetables according to claim 3, wherein the design specifications are determined.
前記関係を把握する前記ステップにおいて、枝豆を前記包装体で包装して保存して、前記関係を把握し、
前記設計仕様を決定する前記ステップにおいて、前記包装体を用いて５日間枝豆を保存したとき、保存後における前記酵素の発現量を保存前における前記酵素の発現量の１０倍以下にする前記設計仕様を決定する、請求項１乃至７いずれか１項に記載の青果物用包装体の設計方法。 In the step of identifying the enzyme, the enzyme related to green soybean quality is identified,
In the step of grasping the relationship, edamame is packed and stored in the package, grasping the relationship,
In the step of determining the design specification, when the green soybeans are stored for 5 days using the package, the design specification of the enzyme after storage is 10 times or less the expression level of the enzyme before storage. The method for designing a package for fruits and vegetables according to any one of claims 1 to 7, wherein:
包装材料に前記孔を形成する穿孔工程と、
を含み、
前記設計工程は、
青果物の品質に関係する酵素を特定するステップと、
前記包装体で包装された前記青果物を保存し、前記孔の設計仕様と、前記青果物の保存前後における前記酵素の変化量との関係を把握するステップと、
把握した前記関係に基づき、前記包装体を用いて所定期間前記青果物を保存したときの前記酵素の変化量を所定の閾値以下にする前記設計仕様を決定するステップと、
を含み、
前記穿孔工程において、決定した前記設計仕様に対応する前記孔を前記包装材料に形成する、青果物用包装体の製造方法。 A design process for designing a package having holes through which oxygen passes;
A perforating step for forming the holes in the packaging material;
Including
The design process includes
Identifying the enzymes involved in the quality of the fruits and vegetables;
Preserving the fruits and vegetables packed in the package, grasping the relationship between the design specifications of the holes and the amount of change in the enzyme before and after the preservation of the fruits and vegetables;
Based on the grasped relationship, determining the design specifications to make the amount of change of the enzyme less than a predetermined threshold when the fruits and vegetables are stored for a predetermined period using the package;
Including
The manufacturing method of the fruit and vegetable packaging body which forms the said hole corresponding to the determined said design specification in the said packaging material in the said perforation process.
請求項１４に記載の保存方法を用いて前記青果物を保存するステップと、
前記青果物の保存前後における前記酵素の変化量を把握するステップと、
前記酵素の変化量が所定の閾値を超えるか否かを判断し、前記酵素の変化量が前記閾値以下と判断されたとき、前記青果物の保存を継続するステップと、
を含む、青果物の品質管理方法。 Identifying the enzymes involved in the quality of the fruits and vegetables;
Storing the fruits and vegetables using the storage method according to claim 14;
Grasping the amount of change of the enzyme before and after storage of the fruits and vegetables;
Determining whether or not the amount of change in the enzyme exceeds a predetermined threshold, and when the amount of change in the enzyme is determined to be less than or equal to the threshold, continuing the preservation of the fruit and vegetables;
Including quality control methods for fruits and vegetables.
酸素を透過する孔を有する包装体で包装された前記青果物を保存し、前記孔の設計仕様と、保存前後における前記酵素の変化量との関係を把握するステップと、
把握した前記関係に基づき、前記包装体を用いて所定期間前記青果物を保存したときの前記酵素の変化量を所定の閾値以下にする前記包装体を選別するステップと、
を含む、青果物用包装体の検査方法。 Identifying the enzymes involved in the quality of the fruits and vegetables;
Preserving the fruits and vegetables packaged in a package having holes that allow oxygen to pass through, and grasping the relationship between the design specifications of the holes and the amount of change in the enzyme before and after storage;
Based on the grasped relationship, the step of selecting the package to make the amount of change in the enzyme below a predetermined threshold when the fruits and vegetables are stored for a predetermined period using the package;
A method for inspecting a package for fruits and vegetables.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2011045663A JP2012179030A (en) | 2011-03-02 | 2011-03-02 | Method for designing and producing package for vegetable and fruit, and package for vegetable and fruit |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2011045663A JP2012179030A (en) | 2011-03-02 | 2011-03-02 | Method for designing and producing package for vegetable and fruit, and package for vegetable and fruit |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2012179030A true JP2012179030A (en) | 2012-09-20 |
Family
ID=47010868
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2011045663A Pending JP2012179030A (en) | 2011-03-02 | 2011-03-02 | Method for designing and producing package for vegetable and fruit, and package for vegetable and fruit |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2012179030A (en) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2014103920A1 (en) * | 2012-12-28 | 2014-07-03 | 住友ベークライト株式会社 | Produce freshness-retaining packaging bag, produce-containing packaging body using same, and produce freshness-retaining method |
| JP2014140349A (en) * | 2012-12-28 | 2014-08-07 | Sumitomo Bakelite Co Ltd | Packaging bag for retaining freshness of vegetable and fruit, package containing vegetable and fruit using the same, and method for retaining freshness of vegetable and fruit |
| JP2014208544A (en) * | 2012-12-28 | 2014-11-06 | 住友ベークライト株式会社 | Method of manufacturing packaging bag for keeping freshness of garden stuff |
| JP2015037967A (en) * | 2013-07-19 | 2015-02-26 | 住友ベークライト株式会社 | Vegetables and fruits freshness keeping packaging bag for green soybeans or broccoli, green soybeans or broccoli-containing package prepared using the same, and green soybeans or broccoli freshness keeping method |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2010228806A (en) * | 2009-03-30 | 2010-10-14 | Sumitomo Bakelite Co Ltd | Fruit and vegetable freshness maintaining packaging bag, and method for maintaining freshness of fruit and vegetable using the same |
-
2011
- 2011-03-02 JP JP2011045663A patent/JP2012179030A/en active Pending
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2010228806A (en) * | 2009-03-30 | 2010-10-14 | Sumitomo Bakelite Co Ltd | Fruit and vegetable freshness maintaining packaging bag, and method for maintaining freshness of fruit and vegetable using the same |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| JPN6015009280; Ｅｕｒ．Ｆｏｏｄ．Ｒｅｓ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．， ２００８， Ｖｏｌ． ２２７， Ｎｏ． ３， ｐｐ． ７２１-７２６ * |
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2014103920A1 (en) * | 2012-12-28 | 2014-07-03 | 住友ベークライト株式会社 | Produce freshness-retaining packaging bag, produce-containing packaging body using same, and produce freshness-retaining method |
| JP2014140349A (en) * | 2012-12-28 | 2014-08-07 | Sumitomo Bakelite Co Ltd | Packaging bag for retaining freshness of vegetable and fruit, package containing vegetable and fruit using the same, and method for retaining freshness of vegetable and fruit |
| JP2014141299A (en) * | 2012-12-28 | 2014-08-07 | Sumitomo Bakelite Co Ltd | Packaging bag for keeping freshness of garden stuff, packaging of garden stuff using the same, and method for keeping freshness of garden stuff |
| JP2014198604A (en) * | 2012-12-28 | 2014-10-23 | 住友ベークライト株式会社 | Packaging bag for retaining freshness of vegetable and fruit, package containing vegetable and fruit using the same, and method for retaining freshness of vegetable and fruit |
| JP2014208544A (en) * | 2012-12-28 | 2014-11-06 | 住友ベークライト株式会社 | Method of manufacturing packaging bag for keeping freshness of garden stuff |
| CN104869833A (en) * | 2012-12-28 | 2015-08-26 | 住友电木株式会社 | Produce freshness-retaining packaging bag, produce-containing packaging body using same, and produce freshness-retaining method |
| JP2017186096A (en) * | 2012-12-28 | 2017-10-12 | 住友ベークライト株式会社 | Packaging bag for retaining freshness of vegetable and fruit, package containing vegetable and fruit using the same, and method for retaining freshness of vegetable and fruit |
| JP2017197293A (en) * | 2012-12-28 | 2017-11-02 | 住友ベークライト株式会社 | Packaging bag for retaining freshness of vegetable and fruit, package containing vegetable and fruit using the same, and method for retaining freshness of vegetable and fruit |
| JP2017206311A (en) * | 2012-12-28 | 2017-11-24 | 住友ベークライト株式会社 | Packaging bag for retaining freshness of vegetable and fruit, package containing vegetable and fruit using the same, and method for retaining freshness of vegetable and fruit |
| JP2015037967A (en) * | 2013-07-19 | 2015-02-26 | 住友ベークライト株式会社 | Vegetables and fruits freshness keeping packaging bag for green soybeans or broccoli, green soybeans or broccoli-containing package prepared using the same, and green soybeans or broccoli freshness keeping method |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Petracek et al. | Modified atmosphere packaging of sweet cherry (Prunus avium L., ev.‘Sams’) fruit: metabolic responses to oxygen, carbon dioxide, and temperature | |
| JP2012179030A (en) | Method for designing and producing package for vegetable and fruit, and package for vegetable and fruit | |
| Elwan et al. | Storability, shelf-life and quality assurance of sugar snap peas (cv. super sugar snap) using modified atmosphere packaging | |
| Gil | Preharvest factors and fresh-cut quality of leafy vegetables | |
| Nyanjage et al. | Extending post-harvest life of sweet pepper (Capsicum annum L.‘California Wonder’) with modified atmosphere packaging and storage temperature | |
| Koutsimanis et al. | Freshness maintenance of cherries ready for consumption using convenient, microperforated, bio‐based packaging | |
| Beaulieu | Factors affecting sensory quality of fresh-cut produce | |
| Kandasamy | Respiration rate of fruits and vegetables for modified atmosphere packaging: a mathematical approach | |
| Dhalsamant et al. | Modified atmosphere packaging for mango and tomato: An appraisal to improve shelf life | |
| Juhnevica-Radenkova et al. | Impact of the degree of maturity on apple quality during the shelf life. | |
| Zhang et al. | Effect of initial headspace oxygen level on growth and volatile metabolite production by the specific spoilage microorganisms of fresh-cut pineapple | |
| Noutfia et al. | Assessment of physico‐chemical and sensory properties of two date (Phoenix dactylifera L.) cultivars under commercial cold storage conditions | |
| Cantwell et al. | Using tissue ammonia and fermentative volatile concentrations as indicators of beneficial and stressful modified atmospheres for leafy and floral vegetables | |
| Koutsimanis et al. | Development and evaluation of a new packaging system for fresh produce: a case study on fresh cherries under global supply chain conditions | |
| Mastrandrea et al. | Modeling ammonia accumulation and color changes of arugula (Diplotaxis tenuifolia) leaves in relation to temperature, storage time and cultivar | |
| Mwendwa et al. | Characterization of postharvest physiology attributes of six commercially grown tomato varieties in Kenya | |
| Oms‐Oliu et al. | Effect of ripeness at processing on fresh‐cut ‘Flor de Invierno’pears packaged under modified atmosphere conditions | |
| Spadafora et al. | Physiological, metabolite and volatile analysis of cut size in melon during postharvest storage | |
| Dronachari et al. | Effect of pretreatments and packaging on shelf-life of peeled garlic cloves | |
| Tejedor-Calvo et al. | Potential of a smart gelatine hydrogel-based package to extend fresh black truffle (Tuber melanosporum) shelf-life preserving its aroma profile | |
| Belay et al. | Pomegranate arils ('Wonderful') tolerance to low O2 stress during active modified atmosphere storage: based on real time respiration rate | |
| Gouble et al. | Impact of storage time and temperature of salad heads on the quality of fresh-cut Cichorium endivia | |
| Thivya | Effect of chemical preservatives and packaging treatment on storage quality of peeled shallot onion | |
| Kapusta-Duch et al. | Influence of packages on nutritional quality of pickled chilled stored cucumbers | |
| Grewal et al. | Quality changes in fresh green chillies (Capsicum annuum L) under modified atmospheres |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20140108 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20150310 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20150630 |