JP2011523558A - 多能性関連後成的因子 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明を、以下の非制限的な例においてさらに説明する。
5’GATCCCCGATGTGAGTGGATATATCGTTCAAGAGACGATATATCCACTCACATCTTTTTA3’(配列番号12)および
5’AGCTTAAAAAGATGTGAGTGGATATATCGTCTCTTGAACGATATATCCACTCACATCGGG3’(配列番号13)。
例2
例3
例4
例5
例6
例7
例8
Claims (42)
- ESET/SETDB1ポリペプチドまたはその相同体の発現または活性を、細胞内で調節することを含む、細胞の多能性の表現型を制御するための方法。
- ESET/SETDB1ポリペプチドの活性は、細胞を、ESET/SETDB1の触媒活性を調節する化合物または分子にさらすことによって調節される、請求項1の方法。
- 化合物または分子は、小分子、アプタマー、ポリペプチド、およびオリゴペプチド、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチド、ポリアミン、s-アデノシルメチオニンの類似体、s-アデノシルメチオニンの置換された形態、ヌクレオチド類似体、ヌクレオシド類似体、または抗体またはそのフラグメントから選ばれる、請求項2の方法。
- 化合物または分子は、ESET/SETDB1触媒活性のインヒビターである、請求項2または3の方法。
- 化合物または分子は、ESET/SETDB1触媒活性をアゴナイズするか、または促進する、請求項2または3の方法。
- ポリヌクレオチドをコード化するESET/SETDB1は、細胞中に導入され、および異種性発現ベクターを介して発現される、請求項1の方法。
- 異種性発現ベクターはエピソーム性のベクターである、請求項6の方法。
- 異種性発現ベクターは、プロモーター配列に動作可能に連結されるESET/SETDB1ポリペプチドをコード化する核酸配列を含む、請求項7の方法。
- プロモーター配列には、誘導可能なプロモーターが包含される、請求項8の方法。
- プロモーター配列には、構成的プロモーターが包含される、請求項8の方法。
- プロモーター配列は、多能性関連の転写因子を結合することが可能な少なくとも1種の配列要素を含む、請求項8〜10の方法。
- 異種性発現ベクターは相同組換えを介して細胞のゲノム中に統合する、請求項6〜11の方法。
- 目的は細胞の再プログラムをより一層多能性の表現型に誘導することである、請求項5〜12のいずれかの方法。
- 目的は細胞の分化を妨げ、および多能性の表現型の伝播を促進することである、請求項5〜13のいずれかの方法。
- ESET/SETDB1ポリペプチドの発現は、細胞を次の、siRNA、shRNA、アンチセンスオリゴヌクレオチド、またはアンチセンスポリヌクレオチドから選ばれる化合物にさらすことによって調節される、請求項1の方法。
- 化合物には、1またはそれよりも多くの配列番号7-13から選ばれるshRNAが包含される、請求項1の方法。
- ESET/SETDB1ポリペプチド、または相同体または派生体をコード化する異種性発現ベクターを含む、多能性の哺乳類細胞。
- 異種性発現ベクターは相同組換えを介して細胞のゲノムに統合される、請求項17の細胞。
- 異種性発現ベクターはエピソームとして維持される、請求項18の細胞。
- 細胞は次の、体細胞、多分化能幹細胞、単分化能幹細胞、ガン細胞、ガン細胞系細胞、始原生殖細胞、およびヒト胚から得られなかった多能性細胞からなる群の1種から導き出される、請求項17〜19のいずれかの細胞。
- 細胞は、ヒト胚から得られなかったという条件で、ヒト細胞である、請求項17〜20のいずれかの細胞。
- 異種性発現ベクターは、ESET/SETDB1ポリペプチドをコード化する核酸配列との動作可能な組合せにおいてプロモーターを含む、請求項17〜21のいずれかの細胞。
- 請求項17〜22のいずれかに従う多能性の哺乳類幹細胞の培養物、および多能性の幹細胞を維持するのに適する培養基を含む、培養容器。
- ESET/SETDB1ポリペプチド、またはその相同体が、核が1またはそれよりも多くの多能性関連の転写因子と組み合わせて含まれる体細胞において発現されることを含む、体細胞核を再プログラムするための方法。
- 多能性関連の転写因子は、Oct3、Oct4、nanog、sox2、c-myc、Dppa3、Dppa4およびklf4からなる群の1またはそれよりも多くから選ばれる、請求項24の方法。
- 体細胞核は次の、多分化能幹細胞、単分化能幹細胞、生殖細胞および最終分化細胞から選ばれる細胞から得られる、請求項24または25の方法。
- 細胞はヒト細胞である、請求項24〜26のいずれかの方法。
- さらに細胞を、MEK/ERKシグナル経路のインヒビターにさらすことを含む、請求項24〜27のいずれかの方法。
- 部位特異的DNA結合活性をもつ少なくとも第1のドメインおよびタンパク質リジンメチル基転移酵素活性をもつ少なくとも第2のドメインを含み、第1のドメインは多能性関連の転写因子のDNA結合性ドメインを含み、および第2のドメインはヒストンH3の尾部領域に位置付けられるリジン残基をメチル化することが可能である、分離されたポリペプチド複合体。
- 多能性関連の転写因子は次の、Oct3、Oct4、nanog、sox2、c-mycおよびklf4からなる群の1種から選ばれる、請求項29の複合体。
- 第1ドメインはOct4共通配列に結合することが可能な因子を含む、請求項29の複合体。
- リジン残基はヒストンH3(H3K4)のリジン4である、請求項29〜31の複合体。
- 第2ドメインはESET/SETDB1またはその相同分子種または相同体のタンパク質リジンメチル基転移酵素活性を含む、請求項29〜31のいずれかの複合体。
- 第2ドメインはヒストン3リジン9トリメチル化(H3K9me3)を媒介することが可能なタンパク質リジンメチル基転移酵素活性を含む、請求項29〜33のいずれかの複合体。
- 候補多能性調節化合物のライブラリーを、ESET/SETDB1ポリペプチドにさらすこと、何らかの候補多能性調節化合物がESET/SETDB1ポリペプチドに結合するか、またはその活性を抑制するかどうかを識別すこと、および多能性の修飾因子としてESET/SETDB1ポリペプチドに結合するか、またはその活性を抑制する何らかの候補多能性調節化合物を識別することを含む、多能性の修飾因子を識別するための方法。
- 化合物または分子は次の、小分子、アプタマー、ポリペプチド、およびオリゴペプチド、オリゴヌクレオチド、ポリアミン、s-アデノシルメチオニンの類似体、s-アデノシルメチオニンの置換された形態、ヌクレオチド類似体、ヌクレオシド類似体、または抗体またはそのフラグメントから選ばれる、請求項35の方法。
- 化合物または分子はESET/SETDB1触媒活性のインヒビターである、請求項35の方法。
- 化合物または分子はESET/SETDB1触媒活性をアゴナイズするか、または促進する、請求項35の方法。
- 多能性ガン幹細胞の処置における使用のためのESET/SETDB1の活性または発現のインヒビター。
- ガン幹細胞は肺または胸部(乳)のガン幹細胞から選ばれる、請求項39のインヒビター。
- インヒビターは次の、siRNA、shRNA、アンチセンスオリゴヌクレオチド、またはアンチセンスポリヌクレオチドから選ばれる、請求項39または40のインヒビター。
- インヒビターは配列番号7-13の一またはそれよりも多くから選ばれるshRNAを包含する、請求項41のインヒビター。
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