JP2010085151A - Light source device and photographic apparatus - Google Patents

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Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To attain size reduction and cost reduction in a light source device, while suppressing the occurrence of the speckle of a laser beam which is emitted as an exciting beam. <P>SOLUTION: An upper light source 14 is equipped with laser diodes 30a-30c, an exciting filter 31, diffusion members 32a-32c and a reflecting plate 33. The diffusion members 32a-32c, having a columnar shape have incident edge faces 35a crossing an axial direction at a right angle at their one ends and inclined edge faces 35b, inclined with respect to the incident edge faces 35a at their other ends. Each of the diffusion members 32a-32c is formed, by mixing a non-fluorescent granular member not emitting self-fluorescence with a low self-fluorescent transparent material, capable of neglecting the emission of self-fluorescence so as to disperse the same. The laser beams emitted from the laser diodes 30a-30c transmit through the exciting filter 31 to serve as exciting beams, and the exciting beams are incident on the incident-edge faces 35a of the diffusion members 32a-32c. The exciting beams incident on the inside from the incident-edge faces 35a are emitted from the inclined edge faces 35b or peripheral surfaces 35c in a diffused state. <P>COPYRIGHT: (C)2010,JPO&INPIT

Description

本発明は、生体に標識された蛍光物質を励起させて撮影可能とする光源装置及び撮影装置に関するものである。   The present invention relates to a light source device and an imaging device that can image a fluorescent substance that is labeled on a living body.

筐体内に被写体を配置し、筐体内に備えられた光源で生体を照射して被写体を撮影する装置が、従来より様々な分野で利用されている。生化学、分子生物学の分野においては、化学発光物質や蛍光物質を標識物質として使用し、これらの発光や蛍光を読み取ることによって、遺伝子配列、遺伝子の発現レベル、蛋白質の分離、同定、あるいは分子量、特性の評価などを行う撮影装置が知られている。   2. Description of the Related Art Conventionally, apparatuses that place a subject in a casing and shoot the subject by irradiating a living body with a light source provided in the casing have been used in various fields. In the fields of biochemistry and molecular biology, chemiluminescent substances and fluorescent substances are used as labeling substances, and by reading these luminescence and fluorescence, gene sequences, gene expression levels, protein separation, identification, or molecular weight There are known imaging apparatuses that perform characteristic evaluation and the like.

また、マウスやラット等の生体に上記の標識物質で標識された遺伝子や蛋白質、抗体、薬理物質を与え、生体の体内または体表に分布した標識物質からの光をカメラで撮影し、生体内における遺伝子の発現や薬理作用等を撮影する、いわゆるin vivo イメージング (in vivo imaging)を行う撮影装置が知られている(例えば、特許文献1を参照)。この撮影装置では、例えば蛍光物質で標識を行っている場合には、生体に励起光を照射して蛍光物質を励起させ、生じた蛍光をカメラで受光することによって画像を生成する。   In addition, a gene, protein, antibody, or pharmacological substance labeled with the above-described labeling substance is given to a living body such as a mouse or rat, and light from the labeling substance distributed in the body or body surface of the living body is photographed with a camera. 2. Description of the Related Art An imaging apparatus that performs so-called in vivo imaging for imaging gene expression, pharmacological action, and the like is known (for example, see Patent Document 1). In this photographing apparatus, for example, when labeling is performed with a fluorescent substance, the living body is irradiated with excitation light to excite the fluorescent substance, and the generated fluorescence is received by a camera to generate an image.

生体の撮影を行う場合、生体へ照射した励起光の波長ピークよりも励起で生じた蛍光の波長ピークのほうが長く表れるため、観察時は励起光の波長を遮断し、蛍光の分光領域のみを通す光学フィルタを用いて撮影する。   When imaging a living body, the wavelength peak of the fluorescence generated by excitation appears longer than the wavelength peak of the excitation light irradiated to the living body, so the wavelength of the excitation light is blocked during observation and only the fluorescence spectral region is passed. Shoot using an optical filter.

従来の撮影装置では、生体へ照射する励起光の光源としてハロゲンランプや発光ダイオード(LED)を使用することが多いが、例えば、ハロゲンランプや白色LEDを使用する場合、バンドパスフィルタで白色光の分光幅を狭めて照射し、単色LEDを使用する場合は、長波長成分を専用の光学フィルタでカットする。これらの光学フィルタを透過して照射された励起光は、励起で生じた蛍光の波長と一部重なることがある。蛍光と同じ波長の励起光は、カメラに入射して受光されるため、画像のバックグラウンドノイズとなって微弱な蛍光成分を打ち消してしまう。よって、微弱な蛍光まで読み取る高精度な観察をすることが困難であった。このような問題は、分光波長幅が狭くて強い光源を使用すれば解消されるが、この条件にあう励起光源としてレーザ光源を使用することが考えられている。   Conventional imaging apparatuses often use a halogen lamp or a light emitting diode (LED) as a light source of excitation light that irradiates a living body. For example, when a halogen lamp or a white LED is used, a bandpass filter When using a monochromatic LED with a narrow spectral width, the long wavelength component is cut with a dedicated optical filter. Excitation light irradiated through these optical filters may partially overlap with the wavelength of fluorescence generated by excitation. Since the excitation light having the same wavelength as the fluorescence enters the camera and is received, it becomes background noise of the image and cancels the weak fluorescent component. Therefore, it is difficult to perform high-precision observation that reads even weak fluorescence. Such a problem can be solved by using a strong light source having a narrow spectral wavelength width. However, it is considered to use a laser light source as an excitation light source that meets this condition.

ところが、レーザ光源を使用する場合、レーザ光照明時に発生するスペックルによって画像に不自然な照明ムラが現れることがあるため、励起光源として使用するにはスペックルの発生を抑制することが必要となる。そこで、このスペックル対策として、特許文献2では、レーザ光の光路上に共振体を配し、レーザ光が共振体の表面に当たって反射する第1の部分光と、レーザー光が共振体内に入射し、複数回の全反射をした後に入射位置の領域から共振体の外へ出射する第2の部分光とにレーザ光を分割し、さらに共振体内で第2の部分光を変調させることで共振体から出射するレーザ光のコヒーレンスを低減させるシステムが記載されている。これにより、レーザ光を共振体でコヒーレンスを低減させることでスペックルの発生を抑制することができる。また、特許文献3には、レーザ光の光路上に光拡散板を設置し、この光拡散板を振動・回転させることによりレーザ光を拡散させてスペックルの発生を抑える構成が記載されている。   However, when a laser light source is used, unnatural illumination unevenness may appear in the image due to speckles generated during laser light illumination. Therefore, it is necessary to suppress the generation of speckles for use as an excitation light source. Become. Therefore, as a countermeasure against this speckle, in Patent Document 2, a resonator is disposed on the optical path of the laser beam, and the first partial light that is reflected when the laser beam hits the surface of the resonator and the laser beam enters the resonator. The laser beam is divided into second partial light that is emitted from the region of the incident position after being subjected to total reflection a plurality of times to the outside of the resonator, and the second partial light is further modulated in the resonator, thereby the resonator. A system for reducing the coherence of laser light emitted from a laser is described. Thereby, generation | occurrence | production of a speckle can be suppressed by reducing a laser beam coherence with a resonator. Patent Document 3 describes a configuration in which a light diffusing plate is installed on the optical path of the laser light and the laser light is diffused by vibrating and rotating the light diffusing plate to suppress speckle generation. .

特開2003−287497号公報JP 2003-287497 A 特表2007−528595号公報Special table 2007-528595 gazette 特開2007−233371号公報JP 2007-233371 A

しかしながら、上記特許文献2,3記載のレーザ光源の構成を撮影装置に備える場合、共振体や、光拡散板を振動・回転させるメカ機構などのコストが高く、またこれらを組み込むためのスペースが必要となるため、装置全体のコスト増加、及び装置の小型化を妨げる原因となる。また、上記特許文献1記載の撮影システムでは、励起光源にレーザ光源を使用することは考えられておらず、レーザ光源を使用した場合のスペックル対策も当然考慮されていない。   However, when the imaging apparatus is equipped with the configuration of the laser light source described in Patent Documents 2 and 3, the cost of the resonator and the mechanical mechanism that vibrates and rotates the light diffusing plate is high, and a space for incorporating these is necessary. Therefore, this increases the overall cost of the apparatus and hinders downsizing of the apparatus. Moreover, in the imaging system described in Patent Document 1, it is not considered to use a laser light source as an excitation light source, and naturally no speckle countermeasure is taken into consideration when a laser light source is used.

本発明は、上記課題を鑑みてなされたものであって、励起光として照射するレーザ光のスペックル発生を抑制しつつ、装置の小型化、ローコスト化を図ることが可能な光源装置及び撮影装置を提供することを目的とする。   The present invention has been made in view of the above problems, and a light source device and an imaging device capable of reducing the size and cost of the apparatus while suppressing speckle generation of laser light irradiated as excitation light. The purpose is to provide.

上記課題を達成するために、本発明の光源装置は、生体に励起光を照射して蛍光物質を励起させ、カメラで撮影可能な蛍光を生じさせる光源装置であって、励起光を発するレーザ光源と、自家蛍光発生を無視し得る低自家蛍光性の透明材料に、自家蛍光を発生しない無蛍光性の粒状部材を分散させるように混合して形成され、前記レーザ光源から内部に入射された励起光を拡散して前記生体へ照射する拡散部材とを備えたことを特徴とする。なお、本発明におけるカメラとは、固体撮像素子などのイメージセンサを備えたものや、写真フィルムに画像を形成する写真カメラなど、受光した蛍光から画像を生成するカメラであればよい。   In order to achieve the above object, a light source device of the present invention is a light source device that irradiates a living body with excitation light to excite a fluorescent substance and generates fluorescence that can be photographed with a camera, and a laser light source that emits excitation light And a self-fluorescent transparent material that can ignore the generation of self-fluorescence, and a non-fluorescent granular member that does not generate auto-fluorescence is mixed to form an excitation that is incident on the inside from the laser light source. And a diffusion member that diffuses light and irradiates the living body. The camera in the present invention may be any camera that generates an image from received fluorescence, such as a camera equipped with an image sensor such as a solid-state image sensor or a photographic camera that forms an image on a photographic film.

前記拡散部材は、略円柱形状で、一端に軸方向と直交する入射端面が、他端に前記入射端面に対して傾斜する傾斜端面が形成されており、周面及び前記傾斜端面が前記生体に対面し、且つ前記入射端面から内部に向かって前記励起光が入射されるように配置され、周面及び前記傾斜端面から励起光を拡散して前記生体へ照射させることが好ましい。前記拡散部材を基準にして前記生体と反対側の位置に反射板を設け、前記拡散部材から出射する前記励起光を前記反射板で反射させて前記生体へ照射させることが好ましい。また、前記レーザ光源は、前記軸方向と直交する方向に沿って複数配置されており、前記拡散部材は、前記レーザ光源からの励起光が入射する位置にそれぞれ配置されていることが好ましい。   The diffusing member has a substantially cylindrical shape, an incident end surface orthogonal to the axial direction is formed at one end, and an inclined end surface inclined with respect to the incident end surface is formed at the other end, and the peripheral surface and the inclined end surface are formed on the living body. It is preferable that the excitation light is arranged so as to face and enter the inside from the incident end face, and the living body is irradiated with the excitation light diffused from the peripheral surface and the inclined end face. Preferably, a reflecting plate is provided at a position opposite to the living body with respect to the diffusing member, and the excitation light emitted from the diffusing member is reflected by the reflecting plate to irradiate the living body. In addition, it is preferable that a plurality of the laser light sources are arranged along a direction orthogonal to the axial direction, and the diffusing members are respectively arranged at positions where excitation light from the laser light sources is incident.

前記レーザ光源からの励起光を前記拡散部材を介さずに前記生体に反射させる反射部材を備えており、前記レーザ光源を複数設け、少なくとも1つのレーザダイオードからの励起光が前記反射部材によって前記生体に照射されることが好ましい。   A reflection member configured to reflect the excitation light from the laser light source to the living body without passing through the diffusion member; a plurality of the laser light sources are provided, and excitation light from at least one laser diode is reflected by the reflection member by the reflection member; Is preferably irradiated.

前記レーザ光源からの励起光を前記拡散部材を介さずに前記生体に反射させる反射部材と、一個のレーザダイオードからの励起光が前記拡散部材又は前記反射部材のいずれかに入射するように前記レーザ光源の位置を切り替える切替機構とを備えたことが好ましい。   A reflection member that reflects excitation light from the laser light source to the living body without passing through the diffusion member, and the laser so that excitation light from one laser diode is incident on either the diffusion member or the reflection member. It is preferable to include a switching mechanism that switches the position of the light source.

前記粒状部材は、酸化チタン、または硫酸バリウムであることが好ましい。あるいは、前記粒状部材は、前記透明材料との境界面で光を反射させる透明ビーズであることが好ましい。前記透明材料は、シリコン、又は石英ガラスであることが好ましい。   The granular member is preferably titanium oxide or barium sulfate. Alternatively, the granular member is preferably a transparent bead that reflects light at an interface with the transparent material. The transparent material is preferably silicon or quartz glass.

本発明の撮影装置は、請求項1ないし9いずれか記載の光源装置と、前記励起光で生じた前記生体の蛍光を受光することによって画像を生成するカメラとを備えたことを特徴とする。   An imaging device of the present invention includes the light source device according to any one of claims 1 to 9 and a camera that generates an image by receiving fluorescence of the living body generated by the excitation light.

本発明によれば、低自家蛍光性の透明材料に、無蛍光性の粒状部材を分散させるように混合して形成された拡散部材で、レーザダイオードから拡散部材の内部に入射された励起光を拡散して生体へ照射するので、励起光として生体に照射するレーザ光のスペックルを抑制しつつ、装置の小型化、ローコスト化を図ることができる。   According to the present invention, a diffusion member formed by mixing a low autofluorescent transparent material so as to disperse a non-fluorescent granular member, and the excitation light incident on the inside of the diffusion member from the laser diode. Since it diffuses and irradiates a living body, it is possible to reduce the size and cost of the apparatus while suppressing speckles of laser light irradiated to the living body as excitation light.

本発明を実施した撮影システムの外観を図1に示す。撮影システム2は、撮影対象、例えばマウスやラット等の生体3(図2参照)の体表や体内に分布する標識物質からの光を受光し、生体3に分布する標識物質の画像(以下、分布画像という)を撮影(生成)して表示する。この実施形態では、標識物質として、励起光を照射することにより蛍光を発する蛍光物質を生体3に投与し、その生体3に分布する蛍光物質の分布画像を生成する場合について説明するが、自家蛍光を発する組織、例えば腫瘍組織の分布画像を生成する場合についても同様である。   FIG. 1 shows the appearance of a photographing system embodying the present invention. The imaging system 2 receives light from a labeling substance distributed on the body surface of a living body 3 (see FIG. 2) such as a mouse or a rat (see FIG. 2) or a labeling substance distributed in the body (hereinafter referred to as an image of the labeling substance distributed on the living body 3). (Distributed image) is taken (generated) and displayed. In this embodiment, a case where a fluorescent substance that emits fluorescence by irradiating excitation light as a labeling substance is administered to the living body 3 and a distribution image of the fluorescent substance distributed in the living body 3 is generated will be described. The same applies to the case of generating a distribution image of a tissue that emits, for example, a tumor tissue.

撮影システム2は、分布画像を生成する撮影装置5と、この撮影装置5に対する各種設定や撮影装置5で生成された分布画像に各種画像処理を施してモニタ6aに表示し、また分布画像を記録媒体への記録等を行うPC(パーソナルコンピュータ)6とから構成されている。PC6には、所定のソフトウェアをインストールすることによって、撮影装置5に対する設定機能や画像処理機能等を実現している。   The photographing system 2 generates a distribution image, performs various settings on the photographing device 5 and performs various image processing on the distribution image generated by the photographing device 5 and displays the distribution image on the monitor 6a. It is composed of a PC (Personal Computer) 6 that performs recording on a medium. The PC 6 realizes a setting function, an image processing function, and the like for the photographing apparatus 5 by installing predetermined software.

図2において、撮影装置5は、筐体11と、カメラ部12と、撮影ステージ13と、上部光源14(光源装置)と、底部光源15とからなる。筐体11は、中空の略直方体形状で、前面に開閉自在に取り付けられた蓋16(図1参照)が設けられている。蓋16を開けると、筐体11の内部に設けられた撮影室17が露呈して生体3を収容させることができ、また撮影室17から生体3を取り出すことができる。蓋16を閉じたときには、撮影室17内が遮光され、撮影の際に生体3から発せられる蛍光以外の光がカメラ部12に入射することを防止する。   In FIG. 2, the photographing device 5 includes a housing 11, a camera unit 12, a photographing stage 13, an upper light source 14 (light source device), and a bottom light source 15. The casing 11 has a hollow, substantially rectangular parallelepiped shape, and is provided with a lid 16 (see FIG. 1) attached to the front face so as to be freely opened and closed. When the lid 16 is opened, the imaging room 17 provided inside the housing 11 is exposed so that the living body 3 can be accommodated, and the living body 3 can be taken out from the imaging room 17. When the lid 16 is closed, the inside of the photographing room 17 is shielded, and light other than fluorescence emitted from the living body 3 is prevented from entering the camera unit 12 during photographing.

撮影室17は、上部にカメラ部12が設けられている。カメラ部12は、撮影ステージ13にセットされた生体3の分布画像を生成する。このカメラ部12は、イメージセンサ18,撮影レンズ19,カメラ側フィルタ20,冷却部21等から構成される。イメージセンサ18は、デジタルカメラ等に用いられているものと同様であり、その受光面に多数の受光素子をマトリクス状に配してある。具体的には、イメージセンサ18としてはCCDなどの固体撮像素子が用いられる。   The imaging room 17 is provided with a camera unit 12 at the top. The camera unit 12 generates a distribution image of the living body 3 set on the imaging stage 13. The camera unit 12 includes an image sensor 18, a photographing lens 19, a camera side filter 20, a cooling unit 21, and the like. The image sensor 18 is the same as that used in a digital camera or the like, and a large number of light receiving elements are arranged in a matrix on the light receiving surface thereof. Specifically, a solid-state imaging device such as a CCD is used as the image sensor 18.

分布画像を生成する場合には、後述するように、受光素子で光電変換を行って電荷を蓄積する状態にイメージセンサ18を維持し、その間に蛍光物質から蛍光を受光させ、その光を電荷として蓄積させることによって露出を行う。   In the case of generating a distribution image, as will be described later, the image sensor 18 is maintained in a state where photoelectric conversion is performed by a light receiving element and charges are accumulated, while fluorescence is received from a fluorescent substance, and the light is used as charges. Exposure is performed by accumulating.

撮影レンズ19は、生体3からの蛍光をイメージセンサ18に結像する。カメラ側フィルタ20は、上部光源14や底部光源15からの励起光を遮断し、生体3に分布する蛍光物質からの蛍光を透過するフィルタである。このカメラ側フィルタ20としては、例えば蛍光物質からの蛍光よりも短波長側の光をカットするロングパスフィルタを用い、生体3からの蛍光だけをイメージセンサ18に受光させる。冷却部21は、イメージセンサ18を冷却することにより暗電流を低減して、生成される分布画像のノイズを抑制する。   The taking lens 19 images the fluorescence from the living body 3 on the image sensor 18. The camera-side filter 20 is a filter that blocks excitation light from the upper light source 14 and the bottom light source 15 and transmits fluorescence from the fluorescent material distributed in the living body 3. As the camera-side filter 20, for example, a long-pass filter that cuts light having a shorter wavelength than the fluorescence from the fluorescent material is used, and only the fluorescence from the living body 3 is received by the image sensor 18. The cooling unit 21 reduces the dark current by cooling the image sensor 18 and suppresses noise in the generated distribution image.

イメージセンサ18としては、CCDタイプやCMOSタイプ等の各種のものを用いることができる。また、半導体によって光電変換を行うものの他、有機光電変換膜を使ったイメージセンサを用いてもよい。さらには、単色のみならず、受光する光を複数色に色分解して撮影するようにしてもよい。イメージセンサ18は、タイミング制御部22の制御の下で、ドライバ23によって駆動される。   As the image sensor 18, various types such as a CCD type and a CMOS type can be used. Further, an image sensor using an organic photoelectric conversion film may be used in addition to a semiconductor that performs photoelectric conversion. Further, not only a single color but also a received light may be separated into a plurality of colors and photographed. The image sensor 18 is driven by the driver 23 under the control of the timing control unit 22.

カメラ部12の直下に撮影ステージ13が配されている。この撮影ステージ13は、生体3が置かれるステージ面24とその下側のハウジング25とからなる箱状となっている。この撮影ステージ13の中空な内部に底部光源15を配してある。ステージ面24は、その上に置かれた生体3に底部光源15からの励起光が照射されるように透明な板状となっている。ハウジング25は、底部光源15からの励起光を遮断するように不透明にしてありステージ面24以外から励起光が射出されないようにしている。底部光源15としては、ハロゲンランプ,ストロボ放電管,レーザ、LED等の各種のものを用いることができる。この例では、白色LEDと、蛍光物質からの蛍光の波長域及びそれよりも長波長側の光をカットするショートパスフィルタとを含む構成としてある。   A shooting stage 13 is arranged directly below the camera unit 12. The photographing stage 13 has a box shape including a stage surface 24 on which the living body 3 is placed and a housing 25 below the stage surface 24. A bottom light source 15 is disposed in the hollow interior of the photographing stage 13. The stage surface 24 has a transparent plate shape so that the living body 3 placed thereon is irradiated with the excitation light from the bottom light source 15. The housing 25 is opaque so as to block the excitation light from the bottom light source 15 so that the excitation light is not emitted from other than the stage surface 24. As the bottom light source 15, various types such as a halogen lamp, a strobe discharge tube, a laser, and an LED can be used. In this example, the configuration includes a white LED and a short-pass filter that cuts light in the wavelength range of fluorescence from the fluorescent material and light on the longer wavelength side.

撮影ステージ13の斜め上方、カメラ部12の撮影中心に対して線対称な位置に、上部光源14を配してある。この上部光源14と、底部光源15とは、いずれも生体3に分布する蛍光物質を励起して発光させるための励起光を生体3に向けて照射する励起光源となっている。これらの上部光源14、底部光源15は、タイミング制御部22の制御の下で、それぞれ対応する上部光源ドライバ28、底部光源ドライバ29によって駆動される。   An upper light source 14 is disposed obliquely above the photographing stage 13 and at a position symmetrical with respect to the photographing center of the camera unit 12. The upper light source 14 and the bottom light source 15 are excitation light sources that irradiate the living body 3 with excitation light for exciting and emitting the fluorescent material distributed in the living body 3. The upper light source 14 and the bottom light source 15 are driven by the corresponding upper light source driver 28 and bottom light source driver 29, respectively, under the control of the timing control unit 22.

図3に本発明の光源装置である上部光源14の構成を示す。本実施形態では、上部光源14は、3個のレーザダイオード30a〜30c、励起フィルタ31、3個の拡散部材32a〜32c、及び反射板33とを備える。レーザダイオード30a〜30cは、タイミング制御部22の制御により生体を撮影するタイミングに合わせてオン・オフされる。なお、反射板33は、筐体3内に設けられたステー34(図2参照)に固定されており、レーザダイオード30a〜30c、励起フィルタ31、及び拡散部材32についても図示しない保持部材によって保持され、ステー34に固定されている。レーザダイオード30a〜30cとしては、赤色レーザダイオードを使用する。   FIG. 3 shows the configuration of the upper light source 14 which is the light source device of the present invention. In the present embodiment, the upper light source 14 includes three laser diodes 30 a to 30 c, an excitation filter 31, three diffusion members 32 a to 32 c, and a reflection plate 33. The laser diodes 30a to 30c are turned on / off in accordance with the timing of photographing the living body under the control of the timing control unit 22. The reflecting plate 33 is fixed to a stay 34 (see FIG. 2) provided in the housing 3, and the laser diodes 30a to 30c, the excitation filter 31, and the diffusion member 32 are also held by a holding member (not shown). And is fixed to the stay 34. Red laser diodes are used as the laser diodes 30a to 30c.

励起フィルタ31は、長手方向がレーザダイオード30a〜30cの配列方向に沿って配された板状で、レーザダイオード30a〜30cから発せられたレーザ光のうち、長波長域の光をカットし、短波長域の光のみを透過させて励起光とする。これによって、励起光の波長と、励起で発生した蛍光の波長とが重なることを防止する。レーザダイオード30a〜30cは、拡散部材32a〜32cの軸方向と直交する方向に沿って配置されている。   The excitation filter 31 has a plate shape whose longitudinal direction is arranged along the arrangement direction of the laser diodes 30a to 30c. The excitation filter 31 cuts light in the long wavelength region from the laser light emitted from the laser diodes 30a to 30c. Only the light in the wavelength band is transmitted and used as excitation light. This prevents the wavelength of excitation light and the wavelength of fluorescence generated by excitation from overlapping. The laser diodes 30a to 30c are arranged along a direction orthogonal to the axial direction of the diffusion members 32a to 32c.

拡散部材32a〜32cは、円柱形状で、一端に軸方向と直交する入射端面35aが、他端に入射端面35aに対して傾斜する傾斜端面35bが形成されており、生体3に向かう方向と、軸方向とが直交し、さらに傾斜端面35b及び周面35cが生体3に対面し、入射端面35aから内部に向かってレーザダイオード30a〜30cからの励起光が入射される位置にそれぞれ配置されている。   Each of the diffusing members 32a to 32c has a columnar shape, an incident end surface 35a orthogonal to the axial direction is formed at one end, and an inclined end surface 35b that is inclined with respect to the incident end surface 35a is formed at the other end. The inclined end surface 35b and the peripheral surface 35c face the living body 3, and are arranged at positions where excitation light from the laser diodes 30a to 30c is incident from the incident end surface 35a toward the inside. .

これら拡散部材32a〜32cは、自家蛍光の発生を無視し得る低自家蛍光性の透明材料に、自家蛍光を発生しない無蛍光性の粒状部材を分散させるように混合して形成されている。本実施形態では、この拡散部材を形成する低自家蛍光性の透明材料としてはシリコンが使用され、無蛍光性の粒状部材としては、白色粉末である酸化チタンが使用される。なお、拡散部材を形成する透明材料としては、シリコンに限らず低自家蛍光性の透明材料であればよく、例えば石英ガラスを用いることができる。このような材料から拡散部材32a〜32cが形成されるときには、溶融した状態の透明材料に粒状部材が分散するように混合してから型に流し込み、硬化させることによって、上述した拡散部材32a〜32cの形状に形成する。このような拡散部材32a〜32cを使用することで、入射端面35aから内部へ入射した励起光が、透明材料を通過するとともに粒状部材で反射して拡散し、傾斜端面35bまたは周面35cから出射する。   These diffusing members 32a to 32c are formed by mixing non-fluorescent granular members that do not generate autofluorescence in a low autofluorescent transparent material that can ignore the generation of autofluorescence. In this embodiment, silicon is used as the low autofluorescent transparent material forming the diffusion member, and titanium oxide, which is a white powder, is used as the non-fluorescent granular member. The transparent material for forming the diffusing member is not limited to silicon, and any transparent material having low autofluorescence can be used. For example, quartz glass can be used. When the diffusing members 32a to 32c are formed from such a material, the above-mentioned diffusing members 32a to 32c are mixed by mixing the molten transparent material so as to disperse the granular member, and then pouring into a mold and curing. The shape is formed. By using such diffusing members 32a to 32c, the excitation light incident from the incident end surface 35a passes through the transparent material and is reflected and diffused by the granular member, and is emitted from the inclined end surface 35b or the peripheral surface 35c. To do.

反射板33は、拡散部材32a〜32cを基準にして生体3と反対側に位置している。この反射板33は、拡散部材32a〜32cと平行に位置する底面部33aと両側の側面部33b,33cとからなる略コの字断面状に形成された板材であり、拡散部材32a〜32cから出射する励起光を反射させて生体3へ照射させる。   The reflector 33 is located on the opposite side of the living body 3 with respect to the diffusing members 32a to 32c. The reflecting plate 33 is a plate formed in a substantially U-shaped cross section composed of a bottom surface portion 33a positioned in parallel with the diffusing members 32a to 32c and side surface portions 33b and 33c on both sides, and from the diffusing members 32a to 32c. The emitted excitation light is reflected and irradiated on the living body 3.

上部光源ドライバ28及び底部光源ドライバ29は、タイミング制御部22からパルス状のタイミング信号が入力されている間、光源をオンとする。励起光源から励起光を生体3に照射して蛍光物質からの蛍光を発生させる。なお、光源をオン(点灯状態)としたまま、シャッタの開閉等によりタイミング信号に基づく生体への励起光の照射を行ってもよい。   The upper light source driver 28 and the bottom light source driver 29 turn on the light source while the pulse timing signal is input from the timing control unit 22. The living body 3 is irradiated with excitation light from an excitation light source to generate fluorescence from the fluorescent material. The living body may be irradiated with excitation light based on the timing signal by opening and closing the shutter or the like while the light source is turned on (lit state).

次に、上記構成の作用について説明する。まず、ユーザーが蓋16を開いて、蛍光物質を予め投与した生体3が撮影ステージ13に置かれる。ユーザーが蓋16を閉めて撮影室17が遮光状態とされた後、PC6を操作して、上部光源14と底部光源15とのいずれを使用するかを選択設定し、撮影開始を指示する。以下では、本発明に関わる上部光源14が選択された場合について詳細に説明する。撮影開始が指示されると、タイミング制御部22は、露出開始信号をドライバ23に送る。   Next, the operation of the above configuration will be described. First, the user opens the lid 16, and the living body 3 to which the fluorescent substance has been administered is placed on the imaging stage 13. After the user closes the lid 16 and the photographing room 17 is in a light-shielded state, the user operates the PC 6 to select and set which of the upper light source 14 and the bottom light source 15 is used, and instructs to start photographing. Hereinafter, a case where the upper light source 14 according to the present invention is selected will be described in detail. When an instruction to start photographing is given, the timing control unit 22 sends an exposure start signal to the driver 23.

ドライバ23が露出開始信号を受けることにより、イメージセンサ18が作動を開始して、各受光素子で受光する光を電荷に光電変換し蓄積する状態となる。一方、タイミング制御部22では、タイミング信号を生成する処理が開始される。そして、この処理で発生する各タイミング信号が選択されている光源のドライバに順次に送出される。例えば、選択されている光源が上部光源14であった場合には、上部光源ドライバ28に各タイミング信号が順次に送られる。   When the driver 23 receives the exposure start signal, the image sensor 18 starts to operate, and the light received by each light receiving element is photoelectrically converted into electric charge and accumulated. On the other hand, the timing control unit 22 starts processing for generating a timing signal. Each timing signal generated in this process is sequentially sent to the driver of the selected light source. For example, when the selected light source is the upper light source 14, each timing signal is sequentially sent to the upper light source driver 28.

タイミング信号が上部光源ドライバ28に入力されると、このタイミング信号の入力に応じて上部光源14がオンとなって生体3に向けて励起光が照射される。そして、その照射で蛍光物質から発せられる蛍光がカメラ側フィルタ20、撮影レンズ19を通してイメージセンサ18に受光され、その受光による電荷が徐々に蓄積される。イメージセンサ18に蓄積された電荷が光電変換されて画像が生成され、PC6に送られる。   When the timing signal is input to the upper light source driver 28, the upper light source 14 is turned on in response to the input of the timing signal, and excitation light is irradiated toward the living body 3. Then, the fluorescence emitted from the fluorescent material by the irradiation is received by the image sensor 18 through the camera-side filter 20 and the photographic lens 19, and the charge due to the received light is gradually accumulated. The charge accumulated in the image sensor 18 is photoelectrically converted to generate an image, which is sent to the PC 6.

上述したように、レーザダイオード30a〜30cから発せられたレーザ光を励起光として照射し、この励起光が拡散部材32a〜32cによって拡散された状態で生体3に照射されるので、蛍光の波長と励起光の波長とが重なることを防ぎ、且つスペックルの発生を防ぐことが可能となる。これにより、イメージセンサ18で蓄積された電荷から生成された画像は、微弱な蛍光まで読み取り可能であるとともに、スペックルに起因する照明ムラが無くなるので、高画質な画像で生体3を観察することができる。さらに、上部光源14は、共振体やメカ機構などの複雑な構成を使用することなく、簡単な構成で励起光を拡散して照射し、スペックルの発生を防ぐことができるので、撮影装置の小型化、ローコスト化を図ることができる。   As described above, the laser light emitted from the laser diodes 30a to 30c is irradiated as excitation light, and the excitation light is irradiated to the living body 3 in a state of being diffused by the diffusion members 32a to 32c. It is possible to prevent the excitation light from overlapping the wavelength and to prevent speckle from occurring. As a result, the image generated from the charges accumulated in the image sensor 18 can read even weak fluorescence, and illumination unevenness due to speckle is eliminated, so that the living body 3 can be observed with a high-quality image. Can do. Furthermore, the upper light source 14 can diffuse and irradiate the excitation light with a simple configuration without using a complicated configuration such as a resonator or a mechanical mechanism, thereby preventing speckles from being generated. Miniaturization and low cost can be achieved.

なお、上記実施形態では、レーザダイオード30a〜30cとして単色の赤色レーザダイオードのみを使用しているが、これに限らず、赤、緑、青の各色に対応したレーザダイオードを使用する構成としてもよい。   In the above embodiment, only the single-color red laser diodes are used as the laser diodes 30a to 30c. However, the present invention is not limited to this, and a laser diode corresponding to each color of red, green, and blue may be used. .

また、上記実施形態では、上部光源14(光源装置)に、レーザダイオード30a〜30cにそれぞれ対応する拡散部材32a〜32cを備える構成としているがこれに限らず、図4に示すように、レーザダイオード30a〜30cから照射される励起光が入射される1つの拡散部材36を備えた構成としてもよい。この場合、拡散部材36は、レーザダイオード30a〜30cの配置に合わせた横幅の広い直方体形状で、一端に軸方向と直交する入射端面37aが、他端に入射端面37aに対して傾斜する傾斜端面37bが形成され、傾斜端面37b及び上面37cが生体3に対面するように配置されている。この拡散部材36は、上記実施形態の拡散部材32a〜32cと同様に低自家蛍光性の透明材料に、無蛍光性の粒状部材を分散させるように混合して形成されており、レーザダイオード30a〜30cからの励起光が入射端面37aから拡散部材36の内部に入射して粒状部材で反射し、拡散した状態で傾斜端面37b及び上面37cから生体へ照射される。   In the above embodiment, the upper light source 14 (light source device) includes the diffusing members 32a to 32c respectively corresponding to the laser diodes 30a to 30c. However, the present invention is not limited to this, and as shown in FIG. It is good also as a structure provided with the one diffusion member 36 into which the excitation light irradiated from 30a-30c injects. In this case, the diffusing member 36 has a wide rectangular parallelepiped shape that matches the arrangement of the laser diodes 30a to 30c, and has an incident end surface 37a orthogonal to the axial direction at one end and an inclined end surface that is inclined with respect to the incident end surface 37a at the other end. 37 b is formed, and the inclined end surface 37 b and the upper surface 37 c are arranged so as to face the living body 3. Similar to the diffusion members 32a to 32c of the above-described embodiment, the diffusion member 36 is formed by mixing a low autofluorescent transparent material so as to disperse a non-fluorescent granular member, and the laser diodes 30a to 30a. The excitation light from 30c enters the inside of the diffusing member 36 from the incident end surface 37a, is reflected by the granular member, and is irradiated to the living body from the inclined end surface 37b and the upper surface 37c in a diffused state.

上記実施形態においては、上部光源14(光源装置)に、レーザダイオードを複数配置し、レーザダイオードからの励起光が入射する位置に拡散部材をそれぞれ配置しているが、本発明はこれに限らず、複数のレーザダイオードのうち、少なくとも1つのレーザダイオードからの励起光が拡散部材を介さずに生体に照射させる構成としてもよい。この構成を適用した上部光源を図5に示す。なお、図5において、上記実施形態と同じ部品、部材を用いるものは同符号を付して説明を省略する。この場合、上部光源40(光源装置)は、レーザダイオード41a〜41cと、2つの拡散部材32a,32bと並列に配置された反射鏡42と、コリメータレンズ43とを備えている。また、レーザダイオード41a〜41cとしては、例えば、IR(赤外線)レーザダイオードを使用する。2個のレーザダイオード41a,41bから照射される励起光は、それぞれ拡散部材32a,32bに入射し、1個のレーザダイオード41cから照射される励起光はコリメータレンズ43により平行光線化されて反射鏡42へ入射する。反射鏡42は、励起光を反射することが可能な反射部材であり、励起光の光路を90°屈曲させて生体3へ照射させるように配置されている。このような構成とすることで、レーザダイオード41cから照射された励起光については、拡散部材を介さずに生体3へ照射されるので、より強い光量のスポットライトとして使用することができる。そして、通常時はレーザダイオード41a,41bをオンして励起光を拡散部材32a,32bを介して生体3へ照射させ、より強い光量が要求されるときは、PC6からの指示によってレーザダイオード41cをオンして励起光を直接的に生体3へ照射させるように切り替え制御を行う。   In the above embodiment, a plurality of laser diodes are arranged in the upper light source 14 (light source device), and the diffusing members are arranged at positions where excitation light from the laser diode is incident, but the present invention is not limited to this. A configuration may be adopted in which excitation light from at least one laser diode among a plurality of laser diodes is irradiated on a living body without passing through a diffusion member. An upper light source to which this configuration is applied is shown in FIG. In FIG. 5, the same components and members as those in the above embodiment are denoted by the same reference numerals and description thereof is omitted. In this case, the upper light source 40 (light source device) includes laser diodes 41a to 41c, a reflecting mirror 42 arranged in parallel with the two diffusion members 32a and 32b, and a collimator lens 43. Further, as the laser diodes 41a to 41c, for example, IR (infrared) laser diodes are used. Excitation light emitted from the two laser diodes 41a and 41b enters the diffusing members 32a and 32b, respectively. The excitation light emitted from the one laser diode 41c is collimated by the collimator lens 43 and reflected by the reflecting mirror. 42 is incident. The reflecting mirror 42 is a reflecting member that can reflect the excitation light, and is arranged so that the optical path of the excitation light is bent by 90 ° and irradiated to the living body 3. With such a configuration, the excitation light emitted from the laser diode 41c is emitted to the living body 3 without going through the diffusing member, so that it can be used as a spotlight with a higher light quantity. In normal times, the laser diodes 41a and 41b are turned on to irradiate the living body 3 with excitation light via the diffusing members 32a and 32b. When a higher light quantity is required, the laser diode 41c is turned on by an instruction from the PC 6. Switching control is performed so that the living body 3 is directly irradiated with excitation light.

上記実施形態では、複数のレーザダイオードを設け、それぞれのレーザダイオードに対応した拡散部材、又は反射部材を備えた構成としているが、本発明はこれに限らず、一個のレーザダイオードからの励起光が拡散部材又は反射部材のいずれかに入射するように切り替える構成としてもよい。この構成を適用した上部光源を図6に示す。この場合、上部光源50(光源装置)は、拡散部材32aと、反射鏡42と、1個のレーザダイオード51と、励起フィルタ52と、レーザダイオード51及び励起フィルタ52を保持するハウジング53と、ハウジング53の位置を切り替える切替機構54とを備える。切替機構54は、例えば駆動モータ、ベルト、プーリなどからなり、レーザダイオード51から照射される励起光が拡散部材32aに入射する間接照射位置と、反射鏡42に入射する直接照射位置との間でハウジング53の位置を切り替える。そして、通常時はハウジング53を間接照射位置に移動させてレーザダイオード51からの励起光を拡散部材32aを介して生体3へ照射させ、より強い光量が要求されるときは、PC6からの指示によってハウジング53を直接照射位置に切り替えて励起光を直接的に生体3へ照射させるように切替機構54の切り替え制御を行う。   In the above-described embodiment, a plurality of laser diodes are provided, and a diffusing member or a reflecting member corresponding to each laser diode is provided. However, the present invention is not limited to this, and excitation light from one laser diode is emitted. It is good also as a structure switched so that it may inject into either a diffusion member or a reflection member. An upper light source to which this configuration is applied is shown in FIG. In this case, the upper light source 50 (light source device) includes a diffusing member 32a, a reflecting mirror 42, a single laser diode 51, an excitation filter 52, a housing 53 that holds the laser diode 51 and the excitation filter 52, and a housing. And a switching mechanism 54 for switching the position of 53. The switching mechanism 54 includes, for example, a drive motor, a belt, a pulley, and the like, and is between an indirect irradiation position where excitation light irradiated from the laser diode 51 enters the diffusing member 32a and a direct irradiation position where the reflection light enters the reflecting mirror 42. The position of the housing 53 is switched. In normal times, the housing 53 is moved to the indirect irradiation position to irradiate the living body 3 with the excitation light from the laser diode 51 via the diffusing member 32a. When a stronger light quantity is required, an instruction from the PC 6 is used. Switching control of the switching mechanism 54 is performed so that the housing 53 is directly switched to the irradiation position and the living body 3 is directly irradiated with the excitation light.

なお、上記実施形態においては、上部光源に本発明を適用した構成を列挙しているがこれに限らず、底部光源に適用してもよい。また、レーザ光源としてレーザダイオードを使用する構成を列挙しているが、本発明はこれに限らず、レーザダイオード以外の固体レーザやガスレーザなど他のレーザ光源からなる構成にも適用することができる。   In addition, in the said embodiment, although the structure which applied this invention to the upper light source is enumerated, you may apply not only to this but to a bottom light source. Moreover, although the structure which uses a laser diode as a laser light source is enumerated, this invention is not restricted to this, It can apply also to the structure which consists of other laser light sources, such as solid lasers and gas lasers other than a laser diode.

さらにまた、粒状部材としては、酸化チタンに限らず、無蛍光性の白色粉末であればよく、例えば硫酸バリウムを用いてもよい。あるいは、これらの白色粉末に代えて、特開2003−107217号公報、または特開平6−347616号公報に記載された透明ビーズ(拡散体)を粒状部材として使用してもよい。これらの透明ビーズは、透明材料との境界面で光を反射して拡散させるので、上記実施形態と同様の効果を得ることができる。   Furthermore, the granular member is not limited to titanium oxide, and may be any non-fluorescent white powder. For example, barium sulfate may be used. Alternatively, instead of these white powders, transparent beads (diffusion bodies) described in JP-A-2003-107217 or JP-A-6-347616 may be used as the granular member. Since these transparent beads reflect and diffuse light at the boundary surface with the transparent material, it is possible to obtain the same effect as in the above embodiment.

なお、上記実施形態では、撮影装置に用いられるカメラとして、イメージセンサを備えたカメラの構成を例示しているが、本発明はこれに限らず、受光した蛍光から写真フィルムに画像を生成する写真カメラを用いてもよい。   In the above embodiment, the configuration of a camera provided with an image sensor is exemplified as a camera used in the photographing apparatus. However, the present invention is not limited to this, and a photograph that generates an image on a photographic film from received fluorescence. A camera may be used.

本発明を実施した撮影システムの構成を示す斜視図である。It is a perspective view which shows the structure of the imaging | photography system which implemented this invention. 撮影装置の構成の概略を示すブロック図である。It is a block diagram which shows the outline of a structure of an imaging device. 光源装置の構成を示す斜視図である。It is a perspective view which shows the structure of a light source device. 第1実施形態の変形例の構成を示す斜視図である。It is a perspective view which shows the structure of the modification of 1st Embodiment. 第2実施形態の光源の構成を示す斜視図である。It is a perspective view which shows the structure of the light source of 2nd Embodiment. 第3実施形態の光源の構成を示す斜視図である。It is a perspective view which shows the structure of the light source of 3rd Embodiment.

符号の説明Explanation of symbols

2 撮影システム
3 生体
5 撮影装置
12 カメラ部
14,40,50 上部光源(光源装置)
15 底部光源
30a〜30c,41,51 レーザダイオード(レーザ光源)
32a〜32c 拡散部材
35a,37a 入射端面
35b,37b 傾斜端面
42 反射鏡(反射部材)
2 Imaging System 3 Living Body 5 Imaging Device 12 Camera Unit 14, 40, 50 Upper Light Source (Light Source Device)
15 Bottom light source 30a-30c, 41, 51 Laser diode (laser light source)
32a-32c Diffusing member 35a, 37a Incident end face 35b, 37b Inclined end face 42 Reflecting mirror (reflecting member)

Claims (10)

生体に励起光を照射して蛍光物質を励起させ、カメラで撮影可能な蛍光を生じさせる光源装置であって、
励起光を発するレーザ光源と、自家蛍光発生を無視し得る低自家蛍光性の透明材料に、自家蛍光を発生しない無蛍光性の粒状部材を分散させるように混合して形成され、前記レーザ光源から内部に入射された励起光を拡散して前記生体へ照射する拡散部材とを備えたことを特徴とする光源装置。
A light source device that irradiates a living body with excitation light to excite a fluorescent material and generates fluorescence that can be photographed with a camera,
Formed by mixing a laser light source that emits excitation light and a low autofluorescent transparent material that can ignore the generation of autofluorescence so as to disperse non-fluorescent granular members that do not generate autofluorescence. A light source device comprising: a diffusion member that diffuses excitation light incident on the inside and irradiates the living body.
前記拡散部材は、略円柱形状で、一端に軸方向と直交する入射端面が、他端に前記入射端面に対して傾斜する傾斜端面が形成されており、周面及び前記傾斜端面が前記生体に対面し、且つ前記入射端面から内部に向かって前記励起光が入射されるように配置され、周面及び前記傾斜端面から励起光を拡散して前記生体へ照射させることを特徴とする請求項1記載の光源装置。   The diffusing member has a substantially cylindrical shape, an incident end surface orthogonal to the axial direction is formed at one end, and an inclined end surface inclined with respect to the incident end surface is formed at the other end, and the peripheral surface and the inclined end surface are formed on the living body. The pumping light is disposed so as to face and enter from the incident end surface toward the inside, and the living body is irradiated with the excitation light diffused from a peripheral surface and the inclined end surface. The light source device described. 前記拡散部材を基準にして前記生体と反対側の位置に反射板を設け、前記拡散部材から出射する前記励起光を前記反射板で反射させて前記生体へ照射させることを特徴とする請求項1又は2記載の光源装置。   2. The reflection plate is provided at a position opposite to the living body with respect to the diffusion member, and the excitation light emitted from the diffusion member is reflected by the reflection plate to irradiate the living body. Or the light source device of 2. 前記レーザ光源は、前記軸方向と直交する方向に沿って複数配置されており、前記拡散部材は、前記レーザ光源からの励起光が入射する位置にそれぞれ配置されていることを特徴とする請求項1ないし3いずれか記載の光源装置。   The plurality of laser light sources are arranged along a direction orthogonal to the axial direction, and the diffusing members are respectively arranged at positions where excitation light from the laser light sources is incident. The light source device according to any one of 1 to 3. 前記レーザ光源からの励起光を前記拡散部材を介さずに前記生体に反射させる反射部材を備えており、前記レーザ光源を複数設け、少なくとも1つのレーザダイオードからの励起光が前記反射部材によって前記生体に照射されることを特徴とする請求項1ないし3いずれか記載の光源装置。   A reflection member configured to reflect the excitation light from the laser light source to the living body without passing through the diffusion member; a plurality of the laser light sources are provided, and excitation light from at least one laser diode is reflected by the reflection member by the reflection member; The light source device according to claim 1, wherein the light source device is irradiated with a light source. 前記レーザ光源からの励起光を前記拡散部材を介さずに前記生体に反射させる反射部材と、一個のレーザダイオードからの励起光が前記拡散部材又は前記反射部材のいずれかに入射するように前記レーザ光源の位置を切り替える切替機構とを備えたことを特徴とする請求項1ないし3いずれか記載の光源装置。   A reflection member that reflects excitation light from the laser light source to the living body without passing through the diffusion member, and the laser so that excitation light from one laser diode is incident on either the diffusion member or the reflection member. The light source device according to claim 1, further comprising a switching mechanism that switches a position of the light source. 前記粒状部材は、酸化チタン、または硫酸バリウムであることを特徴とする請求項1ないし6いずれか記載の光源装置。   The light source device according to claim 1, wherein the granular member is titanium oxide or barium sulfate. 前記粒状部材は、前記透明材料との境界面で光を反射させる透明ビーズであることを特徴とする請求項1ないし6いずれか記載の光源装置。   The light source device according to claim 1, wherein the granular member is a transparent bead that reflects light at an interface with the transparent material. 前記透明材料は、シリコン、又は石英ガラスであることを特徴とする請求項1ないし8いずれか記載の光源装置。   The light source device according to claim 1, wherein the transparent material is silicon or quartz glass. 請求項1ないし9いずれか記載の光源装置と、前記励起光で生じた前記生体の蛍光を受光することによって画像を生成するカメラとを備えたことを特徴とする撮影装置。   An imaging apparatus comprising: the light source device according to claim 1; and a camera that generates an image by receiving fluorescence of the living body generated by the excitation light.
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