JP2009270963A - Electrophoretic cassette - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、化学分析などに用いられる電気泳動用カセットに関し、被泳動体を泳動分離する支持体前駆液の注入、支持体の形成が良好に行える電気泳動用カセットに関するものである。 The present invention relates to an electrophoresis cassette used for chemical analysis and the like, and relates to an electrophoresis cassette capable of satisfactorily injecting a support precursor solution for electrophoresis and separation of an object to be electrophoresed and forming a support.
電気泳動用カセット（以下、カセットと略記することがある。）は、一般的に、２枚の基板を対向して組み合わせ、その内部にキャビティを設けて構成されている。キャビティは、一方の基板に凹部を設けることにより形成される。このキャビティ内部に、例えばポリアクリルアミドゲルなどの支持体を形成し、支持体中で被泳動体を電気泳動することにより、目的とする物質を分離・分析することができる。
このようなカセットにあっては、従来ガラス製の基板を用いるものが主流であったが、最近スチレン樹脂、アクリル樹脂などの合成樹脂製の基板を用いたものが使用されるようになってきている（特許文献１参照）。合成樹脂製の基板を用いたカセットでは、射出成型法などによって容易に大量生産ができ、破損しにくいなどの利点がある。
しかし、合成樹脂製の基板を用いたカセットにあっては、基板表面の特性が疎水的で、親水性がガラス製基板に比べて低く、また酸素透過性が高いため、アクリルアミド溶液が重合して支持体を形成する際、基板との界面付近で未重合部分が発生するなどの不都合があった。
この課題に対し、特許文献２では、真空成膜プロセスにより酸素透過性が1 cc-mil/m2-atm-day以下であり、酸素伝達率が2cc-atm-day以下であるSiOx層を基板表面に設けて解決をはかる発明がなされている。
In such cassettes, those using glass substrates have been the mainstream, but recently, those using synthetic resin substrates such as styrene resin and acrylic resin have come to be used. (See Patent Document 1). A cassette using a substrate made of synthetic resin has the advantage that it can be easily mass-produced by an injection molding method or the like and is not easily damaged.
However, in a cassette using a synthetic resin substrate, the properties of the substrate surface are hydrophobic, the hydrophilicity is lower than that of a glass substrate, and the oxygen permeability is high. When forming the support, there is a disadvantage that an unpolymerized portion is generated near the interface with the substrate.
To deal with this problem, in Patent Document 2, an SiOx layer having an oxygen permeability of 1 cc-mil / m 2 -atm-day or less and an oxygen transfer rate of 2 cc-atm-day or less is formed by a vacuum film formation process. Inventions have been made to solve by providing on the surface.
しかしSiOx膜を得るための真空成膜プロセスとしては、例えば蒸着法、スパッタ法、ＣＶＤ法、プラズマＣＶＤなどがあげられるが、これらは装置が大掛りなものとなりコストが高い、あるいは生産性が悪いといった課題があった。
したがって本発明の目的は、合成樹脂製の基板を組み合わせて構成される電気泳動用カセットにおいて、被泳動体を泳動分離する支持体前駆液の注入、支持体の形成が良好に行える電気泳動用カセットを提供することにある。
However, examples of the vacuum film forming process for obtaining the SiOx film include a vapor deposition method, a sputtering method, a CVD method, and a plasma CVD method. However, these devices are large and costly or productivity is low. There was a problem.
Accordingly, an object of the present invention is to provide an electrophoresis cassette that can be injected with a support precursor solution for electrophoretic separation of an object to be electrophoresed and formed with a support in an electrophoresis cassette configured by combining synthetic resin substrates. Is to provide.
請求項１に記載の発明は、合成樹脂からなる基板を組み合わせて構成され、その内部に被泳動体を泳動分離する支持体を形成するためのキャビティを有する電気泳動用カセットであって、
前記支持体に接する基板表面に金属アルコキシドの加水分解物からなる被膜が設けられ、前記被膜の水に対する接触角が３０度以下であることを特徴とする電気泳動用カセットである。
請求項２に記載の発明は、合成樹脂からなる基板を組み合わせて構成され、その内部に被泳動体を泳動分離する支持体を形成するためのキャビティを有する電気泳動用カセットであって、
前記支持体に接する基板表面に金属アルコキシドあるいは金属アルコキシドの加水分解物と、水酸基を有する水溶性樹脂との複合物からなる被膜が設けられ、前記被膜の水に対する接触角が３０度以下であることを特徴とする電気泳動用カセットである。
請求項３に記載の発明は、合成樹脂からなる基板を組み合わせて構成され、その内部に被泳動体を泳動分離する支持体を形成するためのキャビティを有する電気泳動用カセットであって、
前記支持体に接する基板表面にプラスチックフィルムが貼付され、前記プラスチックフィルムの表面に金属アルコキシドの加水分解物からなる被膜が設けられ、前記被膜の水に対する接触角が３０度以下であることを特徴とする電気泳動用カセットである。
請求項４に記載の発明は、合成樹脂からなる基板を組み合わせて構成され、その内部に被泳動体を泳動分離する支持体を形成するためのキャビティを有する電気泳動用カセットであって、
前記支持体に接する基板表面にプラスチックフィルムが貼付され、前記プラスチックフィルムの表面に金属アルコキシドあるいは金属アルコキシドの加水分解物と、水酸基を有する水溶性樹脂との複合物からなる被膜が設けられ、前記被膜の水に対する接触角が３０度以下であることを特徴とする電気泳動用カセットである。
請求項５に記載の発明は、前記水溶性樹脂がポリビニルアルコールであることを特徴とする請求項２または４に記載の電気泳動用カセットである。
請求項６に記載の発明は、前記被膜中の金属アルコキシドあるいは金属アルコキシドの加水分解物を金属酸化物に換算したときの金属酸化物と水溶性樹脂との重量比率が、２０：８０〜９５：５であることを特徴とする請求項２または４に記載の電気泳動用カセットである。
The invention according to claim 1 is an electrophoresis cassette that is configured by combining substrates made of synthetic resin, and has a cavity for forming a support for electrophoretic separation of the analyte in the interior thereof.
The electrophoresis cassette is characterized in that a coating made of a hydrolyzate of metal alkoxide is provided on the surface of the substrate in contact with the support, and the contact angle of the coating with water is 30 degrees or less.
The invention according to claim 2 is an electrophoresis cassette that is configured by combining substrates made of synthetic resin, and has a cavity for forming a support for electrophoretic separation of the analyte in the interior thereof.
A coating made of a metal alkoxide or a composite of a metal alkoxide hydrolyzate and a water-soluble resin having a hydroxyl group is provided on the substrate surface in contact with the support, and the contact angle of the coating with water is 30 degrees or less. An electrophoresis cassette characterized by the following.
The invention according to claim 3 is an electrophoresis cassette which is configured by combining substrates made of synthetic resin, and has a cavity for forming a support for electrophoretic separation of the analyte in its interior,
A plastic film is affixed to the surface of the substrate in contact with the support, a coating made of a hydrolyzate of metal alkoxide is provided on the surface of the plastic film, and the contact angle of the coating with water is 30 degrees or less. This is a cassette for electrophoresis.
The invention according to claim 4 is an electrophoresis cassette which is configured by combining substrates made of synthetic resin, and has a cavity for forming a support for electrophoretic separation of the analyte in its interior,
A plastic film is affixed to the substrate surface in contact with the support, and a coating made of a metal alkoxide or a composite of a metal alkoxide hydrolyzate and a water-soluble resin having a hydroxyl group is provided on the surface of the plastic film. The electrophoresis cassette is characterized in that the contact angle with respect to water is 30 degrees or less.
The invention according to claim 5 is the electrophoresis cassette according to claim 2 or 4, wherein the water-soluble resin is polyvinyl alcohol.
In the invention according to claim 6, when the metal alkoxide or the hydrolyzate of metal alkoxide in the coating is converted into a metal oxide, the weight ratio of the metal oxide to the water-soluble resin is 20:80 to 95: 5. The electrophoresis cassette according to claim 2, wherein the cassette is for electrophoresis.
本発明の電気泳動用カセットは、支持体前駆液を流し込む際にスムースな注入が可能であり、かつ酸素透過性の低い被膜が設けられていることから良好な支持体を形成することができる。また、本発明の電気泳動用カセットは、特殊な装置も必要としないので生産性も高く安価に製造することができる。また、プラスチックフィルムを基板表面に貼付して、この上に被膜を設けることで、カセットより電気泳動を完了したゲルを取り出す際、プラスチックフィルムがゲルのサポート体となり、カセットの破損等によるゲルの割れ等の損傷を回避できることになる。 The cassette for electrophoresis of the present invention can form a good support since it can be smoothly injected when the support precursor solution is poured and a coating with low oxygen permeability is provided. In addition, the electrophoresis cassette of the present invention does not require a special device, so that it is highly productive and can be manufactured at low cost. In addition, by attaching a plastic film to the surface of the substrate and providing a coating on it, the plastic film becomes a support body for the gel when the gel that has been electrophoresed is taken out of the cassette. Such damage can be avoided.
以下、本発明をさらに詳細に説明する。
図１は、本発明のカセットを形成するための合成樹脂からなる基板の断面図の一例である。図１によれば、基板１１上に被膜１２が設けられている。
Hereinafter, the present invention will be described in more detail.
FIG. 1 is an example of a cross-sectional view of a substrate made of a synthetic resin for forming the cassette of the present invention. According to FIG. 1, a coating 12 is provided on a substrate 11.
この基板１１は、スチレン樹脂、スチレン−アクリロニトリル共重合体、アクリル樹脂、ポリエステル樹脂、セルロース樹脂、塩化ビニル樹脂などの合成樹脂からなるもので、射出成形法などの成形方法によって作製することができる。
基板１１は、コロナ処理や大気圧プラズマ処理等の表面処理を施してから被膜の形成に提供しても差し支えない。
The substrate 11 is made of a synthetic resin such as a styrene resin, a styrene-acrylonitrile copolymer, an acrylic resin, a polyester resin, a cellulose resin, or a vinyl chloride resin, and can be produced by a molding method such as an injection molding method.
The substrate 11 may be provided for the formation of a film after being subjected to surface treatment such as corona treatment or atmospheric pressure plasma treatment.
被膜１２は、被泳動体を泳動分離する支持体と接する面を形成している。被膜１２は、金属アルコキシドの加水分解物からなる被膜、もしくは金属アルコキシドあるいは金属アルコキシドの加水分解物と、水酸基を有する水溶性樹脂との複合物からなる。 The coating 12 forms a surface in contact with a support for electrophoretic separation of the object to be electrophoresed. The coating 12 is made of a metal alkoxide hydrolyzate or a composite of a metal alkoxide or metal alkoxide hydrolyzate and a water-soluble resin having a hydroxyl group.
本発明において用いられる金属アルコキシドとは、テトラエチルオルソシリケート（Ｓｉ（ＯＣ2Ｈ5）4）、トリイソプロピルアルミニウム（Ａｌ（ＯＣ3Ｈ7）3）．など一般式Ｍ（ＯＲ）（ＭはＳｉ，Ｔｉ，Ａｌ，Ｚｒなどの金属、ＲはＣＨ3，Ｃ2Ｈ5などのアルキル基）で表せるものである。その中でもＭがＳｉ，Ａｌである金属アルコキシドの特性が優れている。 The metal alkoxide used in the present invention includes tetraethyl orthosilicate (Si (OC 2 H 5 ) 4 ), triisopropyl aluminum (Al (OC 3 H 7 ) 3 ). In general formula M (OR) (M is a metal such as Si, Ti, Al, and Zr, and R is an alkyl group such as CH 3 and C 2 H 5 ). Among them, the characteristics of metal alkoxides in which M is Si or Al are excellent.
水酸基を有する水溶性樹脂とは、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、デンプン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸ナトリウムなどである。その中でもポリビニルアルコールのガスバリア特性が優れている。 Examples of the water-soluble resin having a hydroxyl group include polyvinyl alcohol, polyvinyl pyrrolidone, starch, methyl cellulose, carboxymethyl cellulose, and sodium alginate. Among them, the gas barrier property of polyvinyl alcohol is excellent.
被膜１２はこのような金属アルコキシドを加水分解反応させたものを基板１１にコーティングする、あるいは金属アルコキシドを直接あるいはあらかじめ加水分解反応させたものを水溶性樹脂と混合して複合物溶液を作成し、基板１１にコーティングして形成させるものである。 The coating 12 is prepared by coating the substrate 11 with such a metal alkoxide hydrolyzed, or by mixing a metal alkoxide directly or previously hydrolyzed with a water-soluble resin to form a composite solution, The substrate 11 is formed by coating.
複合物をコーティングする際には、金属アルコキシドあるいはその加水分解物を金属酸化物に換算したときに金属酸化物と水溶性樹脂との重量比率が２０：８０〜９５：５の範囲が酸素バリア性に優れている。 When coating the composite, when the metal alkoxide or its hydrolyzate is converted into a metal oxide, the weight ratio of the metal oxide to the water-soluble resin is in the range of 20:80 to 95: 5. Is excellent.
コーティングの方法は通常用いられるスピンコート法、ディッピング法、スクリーン印刷法、スプレー法、などいずれの方法を用いても良い。 As a coating method, any of the commonly used methods such as spin coating, dipping, screen printing, and spraying may be used.
被膜１２の厚さは、用いる金属アルコキシドや複合物の種類によっても異なるが、約０．０１〜１０００μｍの範囲内であれば良い。しかし、５０μｍを超えると膜にクラックが入り易くなるため、０．０１〜５０μｍの範囲内にあることがより望ましい。 The thickness of the coating 12 varies depending on the type of metal alkoxide and composite used, but may be in the range of about 0.01 to 1000 μm. However, if it exceeds 50 μm, cracks are likely to occur in the film, so that it is more preferably in the range of 0.01 to 50 μm.
また被膜１２は、水に対する接触角が３０度以下、好ましくは１０度以下となっているものである。この接触角が３０度を超えると基板１１の表面の親水性が不足し、支持体前駆液のスムースな注入が行えなくなる。
被膜１２の親水性が、金属アルコキシドを加水分解物をコーティング、もしくは金属アルコキシドあるいは金属アルコキシドの加水分解物と、水酸基を有する水溶性樹脂との複合物をコーティングして十分得られない場合には、適当な表面改質手法を施してもよい。方法は限定されないが、コロナ処理や大気圧プラズマ処理等をあげることができる。
The coating 12 has a water contact angle of 30 degrees or less, preferably 10 degrees or less. If the contact angle exceeds 30 degrees, the hydrophilicity of the surface of the substrate 11 is insufficient, and smooth support liquid injection cannot be performed.
When the hydrophilicity of the film 12 is not sufficiently obtained by coating a hydrolyzate of metal alkoxide, or a metal alkoxide or a hydrolyzate of metal alkoxide and a composite of a water-soluble resin having a hydroxyl group, Appropriate surface modification techniques may be applied. The method is not limited, and examples thereof include corona treatment and atmospheric pressure plasma treatment.
図２は、本発明のカセットの第２の例の要部を示すもので、第１の例と共通する構成部分には同じ符号を付してその説明を省略する。
この例では、基板の支持体と接することになる表面にプラスチックフィルム１３が貼付され、このプラスチックフィルムの表面に符号１２で示される金属アルコキシドの加水分解物からなる被膜、もしくは金属アルコキシドあるいは金属アルコキシドの加水分解物と、水酸基を有する水溶性樹脂との複合物からなる被膜が設けられている。
上記プラスチックフィルム１３としては、ポリスチレン、ポリエチレンテレフタレート、ポリメチルメタクリレート、環状オレフィン、ポリエチレン、セルロースアセテートなどからなる厚さ１０〜３００μｍのフィルムが用いられ、基板１１に対して接着、溶着などの接合手段によって貼付されている。
このプラスチックフィルム１３の表面への金属アルコキシドの加水分解物からなる被膜、もしくは金属アルコキシドあるいは金属アルコキシドの加水分解物と、水酸基を有する水溶性樹脂との複合物からなる被膜の形成は、先の例と同様適当なコーティング方法によって行なうことができる。
FIG. 2 shows a main part of a second example of the cassette of the present invention, and the same reference numerals are given to the same components as those in the first example, and the description thereof will be omitted.
In this example, a plastic film 13 is affixed to the surface to be in contact with the substrate support, and a coating made of a hydrolyzate of metal alkoxide indicated by reference numeral 12 on the surface of the plastic film, or a metal alkoxide or metal alkoxide. A film made of a composite of a hydrolyzate and a water-soluble resin having a hydroxyl group is provided.
As the plastic film 13, a film having a thickness of 10 to 300 μm made of polystyrene, polyethylene terephthalate, polymethyl methacrylate, cyclic olefin, polyethylene, cellulose acetate or the like is used, and is bonded to the substrate 11 by bonding means such as adhesion and welding. It is affixed.
The formation of a film made of a hydrolyzate of metal alkoxide on the surface of this plastic film 13 or a film made of a metal alkoxide or a hydrolyzate of metal alkoxide and a water-soluble resin having a hydroxyl group is the example described above. It can carry out by the suitable coating method similarly to.
このように基板１１の表面にプラスチックフィルム１３を貼付し、このプラスチックフィルム１３の表面に金属アルコキシドの加水分解物からなる被膜、もしくは金属アルコキシドあるいは金属アルコキシドの加水分解物と、水酸基を有する水溶性樹脂との複合物からなる被膜を設けることで、先の例と同様の作用効果が得られる以外に、カセットより電気泳動を完了したゲルを取り出す際、プラスチックフィルムがゲルのサポート体となり、カセットの破損等によるゲルの割れ等の損傷を回避できる効果を新たに得ることができる。 Thus, the plastic film 13 is stuck on the surface of the substrate 11, and the surface of the plastic film 13 is made of a metal alkoxide hydrolyzate, or a metal alkoxide or a metal alkoxide hydrolyzate, and a water-soluble resin having a hydroxyl group. In addition to providing the same effect as the previous example, the plastic film becomes a support for the gel when removing the gel from the cassette, and the cassette is damaged. The effect which can avoid damages, such as a crack of the gel by etc., can be newly acquired.
以下、本発明を実施例によって説明するが、本発明は下記例に制限されるものではない。 EXAMPLES Hereinafter, although an Example demonstrates this invention, this invention is not restrict | limited to the following example.
テトラエチルオルソシリケート（Ｓｉ（ＯＣ2Ｈ5）4）：以下ＴＥＯＳと略記）8.68ｇに、0.1Nに調整した塩酸3.75ｇ、イソプロピルアルコール7.5gを加え３０分撹拌し加水分解溶液を作成した後、水約21ｇを加え、ＳｉＯ2分として固形分濃度が５重量％になるように調整した。 Tetraethyl orthosilicate (Si (OC 2 H 5 ) 4 ): hereinafter abbreviated as TEOS) 8.68 g, 3.75 g of hydrochloric acid adjusted to 0.1 N and 7.5 g of isopropyl alcohol were added and stirred for 30 minutes to prepare a hydrolyzed solution. About 21 g of water was added, and the solid content concentration was adjusted to 5% by weight as SiO 2 .
これを、ポリスチレン製射出成型基板上にスピンコーターで塗工、80℃で30分乾燥させて被膜を形成した。被膜の厚さは５μｍとした（試験番号1）。 This was coated on a polystyrene injection-molded substrate with a spin coater and dried at 80 ° C. for 30 minutes to form a film. The thickness of the coating was 5 μm (test number 1).
さらに被膜を形成した基板に対し、出力10V、処理時間5秒でコロナ処理を行った（試験番号2）。 Further, the substrate on which the coating was formed was subjected to corona treatment at an output of 10 V and a treatment time of 5 seconds (Test No. 2).
また、上記TEOS加水分解溶液にポリビニルアルコール（重合度約２０００，鹸化度98％）（以下ＰＶＡと略記）5%溶液を、ＳｉＯ2分としての固形分とポリビニルアルコールの固形分とが重量比1:1になるように混合した。
これを、ポリスチレン製射出成型基板上にスピンコーターで塗工、80℃で30分乾燥させて被膜を形成した。被膜の厚さは５μｍとした（試験番号3）。
Further, a 5% solution of polyvinyl alcohol (degree of polymerization: about 2000, degree of saponification: 98%) (hereinafter abbreviated as PVA) is added to the above TEOS hydrolysis solution, and the solid content of SiO 2 and the solid content of polyvinyl alcohol are 1 in weight ratio. : 1 to mix.
This was coated on a polystyrene injection-molded substrate with a spin coater and dried at 80 ° C. for 30 minutes to form a film. The thickness of the coating was 5 μm (test number 3).
さらに試験番号３の被膜を形成した基板に対し、出力10V、処理時間5秒でコロナ処理を行った（試験番号4）。 Further, the substrate on which the film of test number 3 was formed was subjected to corona treatment at an output of 10 V and a treatment time of 5 seconds (test number 4).
比較として、試験番号３において、可溶性デンプン、カルボキシメチルセルロース（Ｎａ塩）（以下ＣＭＣと略記）の5%溶液をそれぞれ用意し、 PVAの代わりに試験番号1で作製したTEOS加水分解溶液と重量比1:1（固形分）になるように混合したものも用意した（試験番号5及び6）。 For comparison, a 5% solution of soluble starch and carboxymethylcellulose (Na salt) (hereinafter abbreviated as CMC) was prepared in Test No. 3, and the weight ratio of TEOS hydrolyzed solution prepared in Test No. 1 was 1 instead of PVA. 1 (solid content) was also prepared (test numbers 5 and 6).
ついで、このようにして被膜が形成された基板を使って、カセットを作成し、そのキャビティにアクリルアミド溶液を流し込み、その注入状態およびアクリルアミドゲルの形成状態を観察した。キャビティの寸法は、縦５０ｍｍ、横６０ｍｍ、深さ１ｍｍの矩形である。
まず、分離ゲル用のアクリルアミド溶液を以下のように調製した。
・３０％アクリルアミド溶液（アクリルアミド２８％、Ｎ，Ｎ´−メチレンビスアクリルアミド２％）： ２．１５ｍｌ
・蒸留水： １．５５ｍｌ
・トリス塩酸緩衝液（ｐＨ８．８、１．５Ｍ）： １．２５ｍｌ
・過硫酸アンモニウム： ５０μｌ
・Ｎ，Ｎ，Ｎ´，Ｎ´−テトラメチルエチレンジアミン： ５μｌ
Next, a cassette was prepared using the substrate on which the coating was formed in this manner, an acrylamide solution was poured into the cavity, and the injection state and the acrylamide gel formation state were observed. The size of the cavity is a rectangle having a length of 50 mm, a width of 60 mm, and a depth of 1 mm.
First, an acrylamide solution for a separation gel was prepared as follows.
-30% acrylamide solution (acrylamide 28%, N, N'-methylenebisacrylamide 2%): 2.15 ml
・ Distilled water: 1.55ml
Tris-HCl buffer (pH 8.8, 1.5M): 1.25 ml
-Ammonium persulfate: 50 μl
・ N, N, N ′, N′-tetramethylethylenediamine: 5 μl
このアクリルアミド溶液をカセットのキャビティに注入し、蒸留水を重層してアクリルアミドゲルからなる分離ゲルとした。分離ゲルが形成された後、重層した蒸留水を除き、さらに以下のように調製した濃縮ゲル用アクリルアミド溶液を注入し、蒸留水を重層して濃縮ゲルを形成した。
・３０％アクリルアミド溶液（アクリルアミド２８％、Ｎ，Ｎ´−メチレンビスアクリルアミド２％）： ０．６５ｍｌ
・蒸留水： ３．０５ｍｌ
・トリス塩酸緩衝液（ｐＨ８．８、１．５Ｍ）： １．２５ｍｌ
・過硫酸アンモニウム： ５０μｌ
・Ｎ，Ｎ，Ｎ´，Ｎ´−テトラメチルエチレンジアミン：１０μｌ
This acrylamide solution was poured into the cavity of the cassette, and distilled water was overlaid to obtain a separation gel composed of acrylamide gel. After the separation gel was formed, the overlying distilled water was removed, and an acrylamide solution for concentrated gel prepared as follows was further injected, and distilled water was overlaid to form a concentrated gel.
・ 30% acrylamide solution (acrylamide 28%, N, N′-methylenebisacrylamide 2%): 0.65 ml
・ Distilled water: 3.05ml
Tris-HCl buffer (pH 8.8, 1.5M): 1.25 ml
-Ammonium persulfate: 50 μl
・ N, N, N ′, N′-tetramethylethylenediamine: 10 μl
この２種のアクリルアミド溶液の注入時の状況および注入後のゲルの形成状況を目視により観察した。さらに、被膜形成していないポリスチレン製基板（試験番号7）、ガラス製基板（試験番号8）も比較に用意した。 The situation at the time of injection of these two acrylamide solutions and the formation of the gel after the injection were visually observed. Furthermore, a polystyrene substrate (test number 7) and a glass substrate (test number 8) on which no film was formed were also prepared for comparison.
さらに以上のように用意した各試料のゲルカセットでSDS-電気泳動を行い、サンプルの分離状態を検討した。
SDS-電気泳動に供するサンプルとして、着色分子量マーカーであるＳｅｅＢｌｕｅ Ｐｒｅ−Ｓｔａｉｎｅｄ Ｓｔａｎｄａｒｄ（インビトロジェン社製）を用いた。
調製した電気泳動ゲルカセットのゲルのウエルに、サンプルと等量の１％アガロースとを混合したものをのせてSDS-電気泳動に供した。電気泳動バッファーとして、２５ｍMトリス、１９２ｍＭグリシンおよび０．１％ＳＤＳを含む陰極バッファーと、１５０ｍＭトリス塩酸・ｐＨ８．８を含む陽極バッファーとを用いた。サンプルをのせた電気泳動ゲルカセットを４℃において約５分固め、電気泳動装置に装着した後、装置のバッファー槽に上記バッファーを各５ｍｌ添加し、定電流２０ｍＡにおいて３０分間電気泳動を行った。
その結果を表１および２に示す。
Furthermore, SDS-electrophoresis was performed with the gel cassette of each sample prepared as described above, and the separation state of the sample was examined.
As a sample to be subjected to SDS-electrophoresis, SeeBlue Pre-Stained Standard (manufactured by Invitrogen), which is a colored molecular weight marker, was used.
A sample and a mixture of an equal amount of 1% agarose were put on the gel well of the prepared electrophoresis gel cassette and subjected to SDS-electrophoresis. As the electrophoresis buffer, a cathode buffer containing 25 mM Tris, 192 mM glycine and 0.1% SDS and an anode buffer containing 150 mM Tris-HCl / pH 8.8 were used. The electrophoresis gel cassette on which the sample was placed was solidified at 4 ° C. for about 5 minutes, mounted on the electrophoresis apparatus, 5 ml of the buffer was added to the buffer tank of the apparatus, and electrophoresis was performed at a constant current of 20 mA for 30 minutes.
The results are shown in Tables 1 and 2.
以上の結果から、TEOS加水分解物とPVAが混合された被膜を有し、親水性が高い試験番号４のカセットを用いた場合は、ガラス基板を用いた場合と同等のゲル形成性が得られることがわかる。TEOS加水分解物とPVAが混合された被膜で親水性が30度を超える試料では、ゲルモノマー溶液がはじかれやすく、若干ゲル形成性が劣る。 From the above results, when using the cassette of Test No. 4 having a coating film in which TEOS hydrolyzate and PVA are mixed and having high hydrophilicity, gel formation equivalent to that when using a glass substrate is obtained. I understand that. In a sample in which the TEOS hydrolyzate and PVA are mixed and the hydrophilicity exceeds 30 degrees, the gel monomer solution is easily repelled and the gel forming property is slightly inferior.
なお、射出成形によって得られたスチレン樹脂製基板の表面に、ポリエチレンテレフタレートからなるプラスチックフィルム(厚さ１２０μｍ)をエポキシ接着剤で貼付し、このプラスチックフィルムの表面に、先の実施例と同様に、ＴＥＯＳ加水分解物をコーティング、もしくはＴＥＯＳ加水分解物にポリビニルアルコールを混合した溶液をコーティングしたものについても、表２および表３に示す評価と同様の評価が得られた。 In addition, a plastic film (thickness 120 μm) made of polyethylene terephthalate was attached to the surface of a styrene resin substrate obtained by injection molding with an epoxy adhesive, and the surface of this plastic film was similar to the previous example, Evaluations similar to the evaluations shown in Tables 2 and 3 were obtained for the TEOS hydrolyzate coated or the TEOS hydrolyzate mixed with a solution in which polyvinyl alcohol was mixed.
１１ 基板
１２ 被膜
１３ プラスチックフィルム
11 Substrate 12 Coating 13 Plastic film
Claims (6)
前記支持体に接する基板表面に金属アルコキシドの加水分解物からなる被膜が設けられ、前記被膜の水に対する接触角が３０度以下であることを特徴とする電気泳動用カセット。 An electrophoresis cassette comprising a substrate made of a synthetic resin and having a cavity for forming a support for electrophoretic separation of the analyte in its interior,
An electrophoresis cassette, wherein a film made of a hydrolyzate of metal alkoxide is provided on a substrate surface in contact with the support, and a contact angle of the film with water is 30 degrees or less.
前記支持体に接する基板表面に金属アルコキシドあるいは金属アルコキシドの加水分解物と、水酸基を有する水溶性樹脂との複合物からなる被膜が設けられ、前記被膜の水に対する接触角が３０度以下であることを特徴とする電気泳動用カセット。 An electrophoresis cassette comprising a substrate made of a synthetic resin and having a cavity for forming a support for electrophoretic separation of the analyte in its interior,
A coating made of a metal alkoxide or a composite of a metal alkoxide hydrolyzate and a water-soluble resin having a hydroxyl group is provided on the substrate surface in contact with the support, and the contact angle of the coating with water is 30 degrees or less. Electrophoresis cassette characterized by this.
前記支持体に接する基板表面にプラスチックフィルムが貼付され、前記プラスチックフィルムの表面に金属アルコキシドの加水分解物からなる被膜が設けられ、前記被膜の水に対する接触角が３０度以下であることを特徴とする電気泳動用カセット。 An electrophoresis cassette comprising a substrate made of a synthetic resin and having a cavity for forming a support for electrophoretic separation of the analyte in its interior,
A plastic film is affixed to the surface of the substrate in contact with the support, a coating made of a hydrolyzate of metal alkoxide is provided on the surface of the plastic film, and the contact angle of the coating with water is 30 degrees or less. A cassette for electrophoresis.
前記支持体に接する基板表面にプラスチックフィルムが貼付され、前記プラスチックフィルムの表面に金属アルコキシドあるいは金属アルコキシドの加水分解物と、水酸基を有する水溶性樹脂との複合物からなる被膜が設けられ、前記被膜の水に対する接触角が３０度以下であることを特徴とする電気泳動用カセット。 An electrophoresis cassette comprising a substrate made of a synthetic resin and having a cavity for forming a support for electrophoretic separation of the analyte in its interior,
A plastic film is affixed to the substrate surface in contact with the support, and a coating made of a metal alkoxide or a composite of a metal alkoxide hydrolyzate and a water-soluble resin having a hydroxyl group is provided on the surface of the plastic film. A cassette for electrophoresis, wherein the contact angle of water with respect to water is 30 degrees or less.
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