JP2009261335A

JP2009261335A - Food composition

Info

Publication number: JP2009261335A
Application number: JP2008116069A
Authority: JP
Inventors: Saori Yamada; さおり山田
Original assignee: Tsujido Chemical Co Ltd
Current assignee: Tsujido Chemical Co Ltd
Priority date: 2008-04-25
Filing date: 2008-04-25
Publication date: 2009-11-12

Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a food composition showing effects excluding such effects of carnosine and anserine which are dipeptide highly contained in animal meat of fish and shellfish, livestock, poultry or the like and are well known as having anti-fatigue action, and at the same time, of citruline which plays a part in biosynthesis of urea, is one of an intermediate of the urea cycle, and is known as having effect of an active oxygen eraser. <P>SOLUTION: This food composition includes citruline, carnosine, and anserine. The food composition can be used as a hyperuricemia preventing or ameliorating agent, an anti-osteoporosis drug, an antidepressant and anti-stress drug, an adiponectine production accelerating agent, and a cholesterol decreasing agent. <P>COPYRIGHT: (C)2010,JPO&INPIT

Description

本発明は、食品組成物に関する。 The present invention relates to a food composition.

カルノシンおよびアンセリンは、魚介類、家畜、家禽類等の動物の肉に多く含まれているジペプチドである。カルノシンおよびアンセリンが抗疲労作用を有することは、特許文献１によって公知である。
一方、シトルリンは、尿素の生合成に関与し、尿素回路の中間体の一つであり、また、活性酸素消去剤等の効果があることが知られている（特許文献２参照）。
しかしながら、カルノシンとアンセリンとシトルリンとを組み合わせた食品組成物が、下記で説明する本発明で適用される種々の疾病に、相乗的な効果を発現するとの見地はない。
特開２００２−１７３４４２号公報特許第３８４３２９８号公報 Carnosine and anserine are dipeptides that are abundant in meat of animals such as seafood, livestock, and poultry. It is known from Patent Document 1 that carnosine and anserine have anti-fatigue action.
On the other hand, citrulline is involved in urea biosynthesis, is one of the intermediates of the urea cycle, and is known to have effects such as an active oxygen scavenger (see Patent Document 2).
However, there is no viewpoint that a food composition combining carnosine, anserine, and citrulline exhibits a synergistic effect on various diseases applied in the present invention described below.
JP 2002-173442 A Japanese Patent No. 3844298

本発明の目的は、下記で説明する種々の疾病に顕著な治療効果を有する食品組成物を提供することにある。 An object of the present invention is to provide a food composition having a remarkable therapeutic effect on various diseases described below.

本発明は、シトルリン、カルノシンおよびアンセリンを含有してなる食品組成物を提供するものである。 The present invention provides a food composition comprising citrulline, carnosine and anserine.

本発明によれば、下記で説明する種々の疾病に顕著な治療効果を有する食品組成物を提供することができる。 ADVANTAGE OF THE INVENTION According to this invention, the food composition which has a remarkable therapeutic effect with respect to the various diseases demonstrated below can be provided.

以下、本発明をさらに詳しく説明する。 Hereinafter, the present invention will be described in more detail.

本発明で用いられるシトルリンは、Ｌ−シトルリンが好適であって、１日に５０〜５０００ｍｇ程度、好ましくは、３００〜３０００ｍｇ程度、より好ましくは５００〜２５００ｍｇ程度、特に８００〜１５００ｍｇ程度を摂取すればよい。 The citrulline used in the present invention is preferably L-citrulline, and if it is ingested about 50 to 5000 mg, preferably about 300 to 3000 mg, more preferably about 500 to 2500 mg, particularly about 800 to 1500 mg per day. Good.

本発明で用いられるカルノシンおよびアンセリンは、魚肉、鶏肉、畜肉等に含まれており、それらから水抽出、熱水抽出、アルコール抽出、超臨界抽出等の方法により抽出することができ、詳細な方法は例えば上記特許文献１に開示されている。 Carnosine and anserine used in the present invention are contained in fish meat, chicken meat, livestock meat, etc., and can be extracted from these by methods such as water extraction, hot water extraction, alcohol extraction, supercritical extraction, etc. Is disclosed, for example, in Patent Document 1 above.

カルノシンおよびアンセリンは、１日に５０〜５０００ｍｇ程度、好ましくは、３００〜３０００ｍｇ程度、より好ましくは５００〜２５００ｍｇ程度、特に８００〜１５００ｍｇ程度を摂取すればよい。 Carnosine and anserine may be taken in an amount of about 50 to 5000 mg, preferably about 300 to 3000 mg, more preferably about 500 to 2500 mg, and particularly about 800 to 1500 mg per day.

また、上記各成分は、無機酸または有機酸の塩類であってもよい。 Each of the above components may be a salt of an inorganic acid or an organic acid.

また本発明の食品組成物には、その効果を損なわない限り、任意の所望成分を配合することができる。例えば、ビタミンＣ等のビタミン類やソフトカプセルを調製する時に通常配合される乳化剤、緊張化剤（等張化剤）、緩衝剤、溶解補助剤、防腐剤、安定化剤、抗酸化剤等を適宜配合することができる。 Moreover, unless the effect is impaired, arbitrary desired components can be mix | blended with the food composition of this invention. For example, emulsifiers, tonicity agents (isotonizing agents), buffers, solubilizers, preservatives, stabilizers, antioxidants, etc. that are usually added when preparing vitamins such as vitamin C and soft capsules Can be blended.

本発明の食品組成物は、様々な飲食品の形態をとることができる。例えば、果汁入り清涼飲料、炭酸飲料、茶飲料、イオン飲料、スポーツ飲料、栄養補給用飲料等の飲料；洋菓子、和菓子、麺類、魚肉練り製品、畜肉製品、調味類、乳製品、粉末飲食品類等の各種食品等を挙げることができる。
また、本発明の組成物は、公知の方法によりマイクロカプセル、ソフトカプセル又はハードカプセルに封入してカプセル化することもできる。 The food composition of the present invention can take various forms of food and drink. For example, soft drinks with fruit juice, carbonated drinks, tea drinks, ionic drinks, sports drinks, drinks for nutritional supplements, etc .; Various foods can be mentioned.
Further, the composition of the present invention can be encapsulated by being encapsulated in microcapsules, soft capsules or hard capsules by a known method.

以下、本発明を実施例によりさらに説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。本発明の食品組成物は、高尿酸血症の予防または改善剤、抗骨粗鬆症剤、抗鬱・抗ストレス剤、アディポネクチン産生促進剤、コレステロール低下剤として利用することができる。 EXAMPLES Hereinafter, although an Example demonstrates this invention further, this invention is not limited to these. The food composition of the present invention can be used as an agent for preventing or improving hyperuricemia, an anti-osteoporosis agent, an antidepressant / anti-stress agent, an adiponectin production promoter, and a cholesterol lowering agent.

実施例１（高尿酸血症の改善効果）
実験方法
供試動物はWistar系ラット雌（８週令、体重約180g）を１群６匹で用いた。
試験飼料に0.75％の濃度でアデニンを加えてラットに給与し、腎臓からの尿中への尿酸排泄阻害を起こさせて高尿酸血症のモデル動物とした。
対照群は、上記の0.75％アデニン飼料のみ、薬剤投与群は、０．７５％アデニンとＬ−シトルリン、カルノシンおよびアンセリン含有飼料とした。飼料は自由摂取としたが、薬剤投与群の試験飼料中のＬ−シトルリン、カルノシンおよびアンセリンの濃度を、摂取量がそれぞれ１０ｍｇ／ｋｇ体重となるように調整した。試験開始日及び24日目に血中の尿酸値を測定した。
その結果、対照群の試験開始日の血中尿酸濃度は、０．５７ｍｇ／ｍｌであり、２４日目が２．３３ｍｇ／ｍｌであったのに対し、薬剤投与群の２４日目の血中尿酸濃度は０．７０ｍｇ／ｍｌであった。なお、上記例において、薬剤投与群として、シトルリンのみを使用した場合の２４日目の血中尿酸濃度は、２．０９ｍｇ／ｍｌ、カルノシンのみを使用した場合は、１．５５ｍｇ／ｍｌ、アンセリンのみを使用した場合は、１．７８ｍｇ／ｍｌ、シトルリンおよびカルノシンのみを使用した場合は、１．４９ｍｇ／ｍｌ、シトルリンおよびアンセリンのみを使用した場合は、１．６７ｍｇ／ｍｌ、カルノシンおよびアンセリンのみを使用した場合は、１．３５ｍｇ／ｍｌであり、それぞれ３成分使用の相乗効果が認められた。 Example 1 (improvement effect of hyperuricemia)
Experimental Method As test animals, Wistar rats (8 weeks old, body weight of about 180 g) were used in groups of 6 animals.
Adenine was added to the test feed at a concentration of 0.75% and fed to rats to cause inhibition of uric acid excretion into the urine from the kidney, thereby giving a model animal of hyperuricemia.
The control group was the above 0.75% adenine diet alone, and the drug administration group was a diet containing 0.75% adenine, L-citrulline, carnosine and anserine. The feed was freely consumed, but the concentrations of L-citrulline, carnosine and anserine in the test diet of the drug administration group were adjusted so that the intake amount was 10 mg / kg body weight, respectively. The uric acid level in the blood was measured on the test start day and 24th day.
As a result, the blood uric acid concentration on the test start day of the control group was 0.57 mg / ml, and it was 2.33 mg / ml on the 24th day, whereas the blood uric acid concentration on the 24th day of the drug administration group was The uric acid concentration was 0.70 mg / ml. In the above example, as the drug administration group, the blood uric acid concentration on the 24th day when citrulline alone was used was 2.09 mg / ml, and when carnosine alone was used, 1.55 mg / ml, only anserine 1.78 mg / ml when citrulline and carnosine are used only, 1.49 mg / ml when citrulline and anserine are used only, 1.67 mg / ml, only carnosine and anserine are used In this case, it was 1.35 mg / ml, and a synergistic effect using the three components was recognized.

実施例２（抗骨粗鬆症効果）
骨粗鬆症改善効果試験
ＳＤ系ラット（２２週齢）メスの卵巣を外科的に取り除き、骨粗鬆症のモデルラットを作成した。卵巣摘出ラットを７匹ずつ６群に分け、３５日間の試験期間中、１日置きに（計１７回）、Ｌ−シトルリン、カルノシンおよびアンセリンの濃度を、摂取量がそれぞれ１０ｍｇ／ｋｇ体重となるように、生理食塩水溶解した液体を２ｍｌ経口投与した。飼料はオリエンタル酵母株式会社のマウス・ラット・ハムスター用固形飼料ＣＲＦ−１を用い、給餌および給水方法は自由摂取とした。試験期間中、各群間で、餌の摂取量に差は認められなかった。試験開始後３５日目にラットの体重を測定した後、大腿骨を取り出した。大腿骨は、接着組織および筋肉を取り除いて分析に使用した。大腿骨の体積を測定した後、エタノールで３回洗浄し、次にアセトンで３回洗浄したのち、一晩乾燥し、その後、重量を測定して大腿骨の乾燥重量を求めた。体積および乾燥重量から、骨密度（乾燥重量ｇ／体積ｍｍ³ ）を測定した。その結果、骨密度は平均値で１．１００ｍｇ／ｍｍ^３であった。
なお対照実験として、生理食塩水のみをラットに投与したの骨密度は平均値で、１．００９ｍｇ／ｍｍ^３、シトルリンのみを使用した場合は、１．０１１ｍｇ／ｍｍ^３、カルノシンのみを使用した場合は、１．０１３ｍｇ／ｍｍ^３、アンセリンのみを使用した場合は、１．０１２ｍｇ／ｍｍ^３、シトルリンおよびカルノシンのみを使用した場合は、１．０１１ｍｇ／ｍｍ^３、シトルリンおよびアンセリンのみを使用した場合は、１．０１３ｍｇ／ｍｍ^３、カルノシンおよびアンセリンのみを使用した場合は、１．０１４ｍｇ／ｍｍ^３であり、３成分使用の相乗効果が認められた。 Example 2 (Anti-osteoporosis effect)
Osteoporosis Improvement Effect Test SD rat (22 weeks old) Female ovaries were surgically removed to create osteoporosis model rats. The ovariectomized rats were divided into 6 groups of 7 animals, and during the 35-day test period, every other day (total 17 times), the concentrations of L-citrulline, carnosine and anserine were 10 mg / kg body weight each. Thus, 2 ml of the physiological saline-dissolved liquid was orally administered. The feed was the solid feed CRF-1 for mice, rats and hamsters from Oriental Yeast Co., Ltd. There was no difference in food intake between groups during the study period. On the 35th day after the start of the test, the weight of the rat was measured, and then the femur was removed. The femur was used for analysis with the adhesive tissue and muscle removed. After measuring the volume of the femur, it was washed three times with ethanol, then washed three times with acetone, dried overnight, and then weighed to determine the dry weight of the femur. From the volume and dry weight, the bone density (dry weight g / volume mm ³ ) was measured. As a result, the average bone density was 1.100 mg / mm ³ .
Note As a control experiment, the mean value bone density of only physiological saline was administered to rats, 1.009mg / mm ^3, the case of using a citrulline alone, 1.011mg / mm ^3, when using carnosine only is, 1.013mg / mm ^3, the case of using anserine only, 1.012mg / mm ^3, the case of using only citrulline and carnosine, 1.011mg / mm ^3, the case of using only citrulline and anserine 1.013 mg / mm ³ , when using only carnosine and anserine, it was 1.014 mg / mm ³ , and a synergistic effect using the three components was observed.

実施例３（抗鬱・抗ストレス効果）
マウス強制水泳試験による精神安定作用の評価
当該評価は、１９７７年にPorsoltにより開発されたマウス強制水泳試験を採用した。本試験は鬱病の動物モデル実験として最も多用される方法のひとつである。本試験では、マウスをある限られたスペースの中で強制的に泳がせて「無動状態」を惹起させる。この無動状態は、ストレスを負荷された動物が水からの逃避を放棄した一種の「絶望状態」を反映するものと考えられ、ヒトにおける鬱状態、ストレス状態と関連づけられている。事実、抗鬱薬は特異的にこの状況下における無動状態の持続時間を短縮させることがわかっており、この短縮作用は臨床力価との間に有意な相関を有することが認められている。 Example 3 (Antidepressant / Anti-stress effect)
Evaluation of the tranquilizing effect by the mouse forced swimming test The evaluation used the mouse forced swimming test developed by Porsolt in 1977. This is one of the most frequently used animal model experiments for depression. In this test, the mouse is forced to swim in a limited space to cause “immobility”. This immobility state is thought to reflect a kind of “despair state” in which stressed animals abandon their escape from water, and is associated with depression and stress in humans. In fact, antidepressants have been found to specifically reduce the duration of immobility in this situation, and this shortening has been found to have a significant correlation with clinical titer.

本試験方法は次のとおりである。
２５℃の水を深さ１５ｃｍまで入れたプラスチック円筒中でマウスを強制水泳させる。５分間の強制水泳後、３０℃の乾燥機中で１５分間乾燥し、ホームケージに戻す。翌日マウスに試験試料を腹腔内投与して、その１時間後に再び５分間の強制水泳を課し、現れた無動状態の持続時間をストップウォッチを用いて測定する。マウスが水に浮かんで静止している状態を無動状態と判定する。無動状態持続時間については有意差検定を行い、統計学的に有意差を検定する。実験には雄のｄｄYマウスを使用し、１群６匹とする。なお、試験は全て午後１時から午後６時の間に行う。また、ポジティブコントロールとして抗鬱薬であるイミプラミンを用いた試験も行う。 The test method is as follows.
Mice are forced to swim in a plastic cylinder containing 25 ° C. water to a depth of 15 cm. After forced swimming for 5 minutes, dry in a dryer at 30 ° C. for 15 minutes and return to the home cage. On the next day, the test sample is intraperitoneally administered to the mouse, one hour later, forced swimming for 5 minutes is imposed again, and the duration of the immobility that appears is measured using a stopwatch. A state in which the mouse floats on the water and is stationary is determined as an immobile state. For the duration of stationary state, a significant difference test is performed, and a statistically significant difference is tested. For the experiment, male ddY mice are used, and there are 6 mice per group. All tests are conducted between 1pm and 6pm. A test using imipramine, an antidepressant, as a positive control will also be conducted.

その結果、Ｌ−シトルリン、カルノシンおよびアンセリンの摂取量をそれぞれ３０ｍｇ／ｋｇとして投与したマウスの無動状態持続時間は、平均１８０．０秒であった。コントロール（生理食塩水のみ）は平均２２０．０秒であった。ポジティブコントロール（３０ｍｇ／ｋｇ投与）のマウスの無動状態持続時間は、平均１７６．５秒であった。本実施例およびポジティブコントロールの無動状態持続時間は、危険率１％で有意差を有する。
なお、上記例において、シトルリンのみを使用した場合のマウスの無動状態持続時間は、平均２１８．４秒、カルノシンのみを使用した場合は、２０１．５秒、アンセリンのみを使用した場合は、２０２．９秒、シトルリンおよびカルノシンのみを使用した場合は、２００．８秒、シトルリンおよびアンセリンのみを使用した場合は、２０２．２秒、カルノシンおよびアンセリンのみを使用した場合は、１９７．２秒であり、３成分使用の相乗効果が認められた。 As a result, the duration of immobility in mice administered with L-citrulline, carnosine and anserine intakes of 30 mg / kg was an average of 180.0 seconds. Control (saline only) averaged 220.0 seconds. The average duration of immobility in positive control (30 mg / kg dose) mice was 176.5 seconds. The duration of immobility in this example and the positive control is significantly different at a risk rate of 1%.
In the above example, the duration of immobility of mice when citrulline alone was used was 218.4 seconds on average, 201.5 seconds when only carnosine was used, and 202 when anserine alone was used. .9 seconds, 200.8 seconds when only citrulline and carnosine are used, 202.2 seconds when only citrulline and anserine are used, and 197.2 seconds when only carnosine and anserine are used. A synergistic effect using the three components was observed.

実施例４
アディポネクチン産生上昇確認試験
正常ヒト前駆脂肪細胞を使用し、１．０×１０^４個となるように９６ウェルマイクロプレートに播種した。播種培地にはヒト前駆脂肪細胞基礎培地を用いた。２４時間後に分化誘導添加剤とＬ−シトルリン、カルノシンおよびアンセリンを加えた増殖培地に交換し、さらに１週間培養した。その後、培養上清中に産生されたアディポネクチン量をＥＬＩＳＡ法により定量した。各試料の評価結果を、ブランク（試料未添加）のアディポネクチン量を１００とした場合の相対値にて下記に示す。なお、添加したＬ−シトルリン、カルノシンおよびアンセリン濃度は、それぞれ１０μｇ／ｍｌであった。 Example 4
Adiponectin production increase confirmation test Normal human preadipocytes were used and seeded in a 96-well microplate at 1.0 × 10 ⁴ cells. Human preadipocyte basal medium was used as the seeding medium. After 24 hours, the medium was replaced with a growth medium supplemented with a differentiation-inducing additive and L-citrulline, carnosine and anserine, and further cultured for 1 week. Thereafter, the amount of adiponectin produced in the culture supernatant was quantified by ELISA. The evaluation results of each sample are shown below as relative values when the amount of adiponectin in the blank (sample not added) is 100. The added L-citrulline, carnosine and anserine concentrations were 10 μg / ml, respectively.

上記試験結果：相対値＝３６９。この数値は、危険率１％で有意差を有する。なお、上記例において、シトルリンのみを使用した場合の上記相対値は、１８８、カルノシンのみを使用した場合は、２０９、アンセリンのみを使用した場合は、２１１、シトルリンおよびカルノシンのみを使用した場合は、２００、シトルリンおよびアンセリンのみを使用した場合は、２１２、カルノシンおよびアンセリンのみを使用した場合は、２２８であり、３成分使用の相乗効果が認められた。 Test result: relative value = 369. This value has a significant difference at a risk rate of 1%. In the above example, the relative value when only citrulline is used is 188, when only carnosine is used, 209, when only anserine is used, 211, when only citrulline and carnosine are used, When only 200, citrulline and anserine were used, 212, when only carnosine and anserine were used, it was 228, and a synergistic effect using the three components was recognized.

実施例５（コレステロール低下作用）
体重２０ｇ前後のＩＣＲ系雄性マウス（１群５匹）に、高コレステロール−コール酸食餌（７１．９％標準餌、１５％ショ糖、２％食塩、１０％ココナッツオイル、０．６％コレステロール、０．２％コール酸、０．３％塩化コリン）を試験第１日目から第７日目まで給餌（自由摂取）した。試験第６日目と第７日目に、Ｌ−シトルリン、カルノシンおよびアンセリンのそれぞれ５ｍｇを蒸留水に溶解し、経口投与した。その後、２４時間の絶食を行い、試験第８日目にマウスから血液を採取し、血清を分離した。 Example 5 (cholesterol lowering action)
ICR male mice weighing about 20 g (5 per group) were given a high cholesterol-cholate diet (71.9% standard diet, 15% sucrose, 2% salt, 10% coconut oil, 0.6% cholesterol, 0.2% cholic acid, 0.3% choline chloride) was fed (free intake) from the first day to the seventh day of the test. On the 6th and 7th days of the test, 5 mg each of L-citrulline, carnosine and anserine was dissolved in distilled water and orally administered. Thereafter, fasting was performed for 24 hours, and blood was collected from the mice on the 8th day of the test, and the serum was separated.

また、採取した血清の一部にヘパリンを添加し沈降させ、低比重リポタンパク（ＬＤＬ）としてヘパリン沈降リポタンパクを得た。血清中の総コレステロール値及びＬＤＬ中のコレステロール値を、シー・シー・アライン（Ｃ．Ｃ．Ａｌｌａｉｎｅｔａｌ．）らの報告（クリニカルケミストリイ（ＣｌｉｎｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ）、１９７４年、２０巻、４７０−４７５頁）に従って、測定した。 In addition, heparin was added to a portion of the collected serum and precipitated to obtain heparin-precipitated lipoprotein as low density lipoprotein (LDL). The total cholesterol level in serum and the cholesterol level in LDL were reported by C. C. Allain et al. (Clinical Chemistry, 1974, 20, 470-475). ) And measured.

血清中の総コレステロール値からＬＤＬコレステロール値を引いた値を、高比重リポタンパク（ＨＤＬ）コレステロール値として算出した。なお対照群は、Ｌ−シトルリン、カルノシンおよびアンセリンを投与していない群である。 The value obtained by subtracting the LDL cholesterol value from the total cholesterol value in the serum was calculated as a high density lipoprotein (HDL) cholesterol value. The control group is a group not administered with L-citrulline, carnosine and anserine.

その結果を表１に示した。表１から明らかなように、血清中総コレステロールを低下させる明らかな作用が認められた。 The results are shown in Table 1. As is clear from Table 1, an obvious effect of lowering serum total cholesterol was observed.

なお、上記例において、シトルリンのみを使用した場合の上記血清総コレステロール値（ｍｇ／ｄｌ）の平均は、２９３、カルノシンのみを使用した場合は、２９１、アンセリンのみを使用した場合は、２８８、シトルリンおよびカルノシンのみを使用した場合は、２９０、シトルリンおよびアンセリンのみを使用した場合は、２８７、カルノシンおよびアンセリンのみを使用した場合は、２８６であり、３成分使用の相乗効果が認められた。 In the above example, the mean serum cholesterol level (mg / dl) when citrulline alone was used was 293, when carnosine alone was used, 291; when only anserine was used, 288, citrulline When only carnosine was used, 290, when citrulline and anserine alone were used, 287, when only carnosine and anserine were used, 286, and a synergistic effect using the three components was observed.

なお、上記各例において、Ｌ−シトルリン、カルノシンおよびアンセリンの投与量を１／２あるいは２〜３倍に変更した場合についても、上記と同様の結果を得た。 In each of the above examples, the same results as above were obtained when the doses of L-citrulline, carnosine and anserine were changed to 1/2 or 2-3 times.

Claims

A food composition comprising citrulline, carnosine and anserine.