JP2008509402A - 多数の異なる種の検出方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】ポリジアセチレン主鎖などの二次元及び/又は三次元の高分子又は拡張固体配列を使用し、サンプルに接触させてこの配列の蛍光又はリン光の変化を観察し、これらを公知の蛍光又はリン光の変化とそれぞれ比較することによって、異なる種を含む多数のサンプルをスクリーニングする。
【選択図】なし
Description
異なる種を含む多数のサンプルをスクリーニングする方法であって、
ポリジアセチレン主鎖の三次元配列若しくはポリジアセチレン主鎖の二次元配列のいずれか、又は、その両方を、評価するサンプルに接触させること(上記配列は別々の検出が可能である):
上記配列の蛍光又はリン光の変化を検出すること:並びに、
あらかじめ調べておいた配列の蛍光又はリン光の変化と上記変化とを比較して、サンプル中に存在する種を決定すること:を含む
ことを特徴とする方法が提供される。
更なる改良形態において、検量線との比較によって、上記種の濃度を決定することができる。
(1) 配列の蛍光を吸収するフルオロフォアによる方法、又は、フルオロフォアの蛍光を吸収する配列による方法。
(2) 励起光を吸収して励起され、その後エネルギーを励起状態からポリジアセチレン配列に移して、蛍光を発させるフルオロフォアによる方法。この方法は、共鳴エネルギー移動(RET)として、かつ、蛍光共鳴エネルギー移動(FRET)として知られている。このRET法は、ポリジアセチレン蛍光に、フルオロフォアの時間減衰特性を付与することができる。
(3) 励起光を吸収して、エネルギーを励起状態からフルオロフォアに移してフルオロフォアに蛍光を発させる蛍光型のポリジアセチレン配列による方法。このRET法により、系の有効ストークスシフトが増大し得、かつ、全体的な量子収量が増加し得る。
(4) 電子を配列に移すフルオロフォアの励起状態による方法、又は、電子をフルオロフォアに移す配列の励起状態による方法。この方法は光誘起電子移動(PET)として知られている。
(5) フルオロフォアの蛍光に必要な励起光を吸収する配列による方法、又は、配列の蛍光に必要な励起光を吸収するフルオロフォアによる方法。
(6) 配列の蛍光を消光させるフルオロフォアによる方法。
(7) フルオロフォアの蛍光を消光する配列による方法。
2. 適切な時間インキュベートした後、2つのプレート段を分け、標準マイクロタイタープレートリーダ内の配列の蛍光発光を測定して、かつ、標準液に接触させた配列の発光、又は、アッセイ開始前に測定した配列の発光とこの発光とを比較することによって、下段の化合物の量を定量する。検量線を使用して化合物の濃度を決定することができる。
2. 適切な時間インキュベートした後、マイクロタイタープレートを短時間遠心分離して、(上部チャンバー内に入っている)HSAに結合した化合物を遊離の化合物から分け、三次元又は二次元ポリジアセチレンアレイを入れた下部チャンバーに集める。この例の変形形態において、アレイは遠心分離工程の後に添加されてもよい。2つのプレート段を分け、標準マイクロタイタープレートリーダ内の配列の発光を測定し、標準液に接触させた配列の発光、又は、アッセイ開始前に測定した配列の発光とこの発光とを比較することによって、下段の化合物の量を定量する。検量線を使用して化合物の濃度を決定することができる。
2. 配列の発光を測定して、かつ、標準液に接触させた配列の発光、又は、アッセイ開始前に測定した配列の発光とこの発光とを比較することによって、溶解した化合物の量を定量する。検量線を使用して化合物の濃度を決定することができる。
Claims (23)
- 異なる種を含む多数のサンプルをスクリーニングする方法であって、
ポリジアセチレン主鎖の三次元配列若しくはポリジアセチレン主鎖の二次元配列のいずれか、又は、その両方を、評価するサンプルに接触させること(前記配列は別々の検出が可能である):
前記配列の蛍光又はリン光の変化を検出すること:並びに、
あらかじめ調べておいた配列の蛍光又はリン光の変化と前記変化とを比較すること:を含む
ことを特徴とする方法。 - 前記スクリーニングは、サンプル中の種の吸収、分布、代謝又は排出特性の少なくとも1つの評価を含む
ことを特徴とする請求項1に記載の方法。 - 前記スクリーニングは、サンプル中の種の膜透過性の検出を含む
ことを特徴とする請求項1に記載の方法。 - 前記スクリーニングは、溶解度の測定を含む
ことを特徴とする請求項1に記載の方法。 - 前記スクリーニングは、タンパク質への化合物の結合を含む
ことを特徴とする請求項1に記載の方法。 - 前記タンパク質は、ヒト血清アルブミンを含む
ことを特徴とする請求項5に記載の方法。 - 少なくとも約5つの異なるサンプルをスクリーニングする
ことを特徴とする請求項1に記載の方法。 - 少なくとも約20の異なるサンプルをスクリーニングする
ことを特徴とする請求項1に記載の方法。 - 少なくとも約100の異なるサンプルをスクリーニングする
ことを特徴とする請求項1に記載の方法。 - 少なくとも約1000の異なるサンプルをスクリーニングする
ことを特徴とする請求項1に記載の方法。 - 前記配列は、リポソーム溶液、チューブ、細管、繊維又はリボンの形式での三次元配列を含む
ことを特徴とする請求項1に記載の方法。 - ポリジアセチレンの蛍光の減少を測定する
ことを特徴とする請求項1に記載の方法。 - ポリジアセチレンの蛍光の増加を測定する
ことを特徴とする請求項1に記載の方法。 - 三次元又は二次元ポリジアセチレン配列はフルオロフォアをさらに含み、ポリジアセチレン配列の蛍光の変化を観察する
ことを特徴とする請求項1、11、12又は13のいずれか1項に記載の方法。 - 三次元又は二次元ポリジアセチレン配列はフルオロフォアをさらに含み、フルオロフォアの蛍光の変化を観察する
ことを特徴とする請求項1、11、12又は13のいずれか1項に記載の方法。 - 前記配列は、更なるフルオロフォアを含まない
ことを特徴とする請求項1に記載の方法。 - 蛍光の変化は、波長が550nmより短い光に接触させて発光を測定することによって検出される
ことを特徴とする請求項1に記載の方法。 - 蛍光の変化は、波長が450〜500nmの光に接触させて発光を測定することによって検出される
ことを特徴とする請求項1に記載の方法。 - 前記配列は固体支持体の上に位置する
ことを特徴とする請求項1に記載の方法。 - 前記固体支持体は多孔質膜である
ことを特徴とする請求項19に記載の方法。 - 前記配列は支持されていない
ことを特徴とする請求項1に記載の方法。 - サンプルに透過膜を通過させ、膜を通過した材料の量を測定することを含む
ことを特徴とする請求項1に記載の方法。 - 前記配列は非多孔質支持体の上に位置する
ことを特徴とする請求項1に記載の方法。
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2007161717A (ja) * | 2005-12-16 | 2007-06-28 | Sungkyunkwan Univ Foundation For Corporate Collaboration | ポリジアセチレン超分子体とリガンド検出方法。 |
Families Citing this family (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP1546715A4 (en) * | 2002-04-23 | 2007-01-10 | Analytical Biolog Services Inc | METHOD FOR THE ASSESSMENT OF MEDICINAL CANDIDATES |
US20070172813A1 (en) * | 2002-04-23 | 2007-07-26 | Analytical Biological Services, Inc. | Method for Evaluating Drug Candidates |
WO2006020498A2 (en) * | 2004-08-11 | 2006-02-23 | The Cleveland Clinic Foundation | Therapeutic agents and methods for cardiovascular disease |
US7485267B2 (en) * | 2005-07-29 | 2009-02-03 | Chevron U.S.A. Inc. | Process for metals recovery from spent catalyst |
SG178773A1 (en) * | 2006-11-13 | 2012-03-29 | Ateris Technologies Llc | Pesticide biomarker |
US7674369B2 (en) | 2006-12-29 | 2010-03-09 | Chevron U.S.A. Inc. | Process for recovering ultrafine solids from a hydrocarbon liquid |
CN101939339A (zh) * | 2007-11-14 | 2011-01-05 | 阿特瑞斯技术有限公司 | 生物标记的检测 |
US7658895B2 (en) * | 2007-11-28 | 2010-02-09 | Chevron U.S.A. Inc | Process for recovering base metals from spent hydroprocessing catalyst |
US8221710B2 (en) * | 2007-11-28 | 2012-07-17 | Sherritt International Corporation | Recovering metals from complex metal sulfides |
US7846404B2 (en) * | 2007-11-28 | 2010-12-07 | Chevron U.S.A. Inc. | Process for separating and recovering base metals from used hydroprocessing catalyst |
US7837960B2 (en) * | 2007-11-28 | 2010-11-23 | Chevron U.S.A. Inc. | Process for separating and recovering base metals from used hydroprocessing catalyst |
CN102361994B (zh) * | 2009-03-25 | 2015-04-01 | 雪佛龙美国公司 | 从含废催化剂的煤液化残余物中回收金属的方法 |
US8815184B2 (en) | 2010-08-16 | 2014-08-26 | Chevron U.S.A. Inc. | Process for separating and recovering metals |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2003528309A (ja) * | 2000-03-20 | 2003-09-24 | アナリティカル バイオロジカル サービシーズ インク | 蛍光を用いた検体の検出方法 |
US20040023303A1 (en) * | 2002-04-23 | 2004-02-05 | Analytical Biological Services, Inc. | Method for evaluating drug candidates |
JP2006510907A (ja) * | 2002-12-19 | 2006-03-30 | スリーエム イノベイティブ プロパティズ カンパニー | ジアセチレン物質から構築される比色分析センサー |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5415999A (en) * | 1993-07-09 | 1995-05-16 | Biocircuits Corporation | Fluorescent lipid polymer-macromolecular ligand compositions as detection element in ligand assays |
US6080423A (en) * | 1994-08-11 | 2000-06-27 | Regents Of The University Of California | Three dimensional colorimetric assay assemblies |
-
2005
- 2005-08-08 EP EP05784910A patent/EP1792163A4/en not_active Withdrawn
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2007
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Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2003528309A (ja) * | 2000-03-20 | 2003-09-24 | アナリティカル バイオロジカル サービシーズ インク | 蛍光を用いた検体の検出方法 |
US20040023303A1 (en) * | 2002-04-23 | 2004-02-05 | Analytical Biological Services, Inc. | Method for evaluating drug candidates |
JP2006510907A (ja) * | 2002-12-19 | 2006-03-30 | スリーエム イノベイティブ プロパティズ カンパニー | ジアセチレン物質から構築される比色分析センサー |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
HEE YONG SHIM ET AL.: "Micropatterning of diacetylenic liposomes on glass surfaces", MATERIALS SCIENCE AND ENGINEERING: C, vol. Vol.24 No.1-2, JPN6011036102, January 2004 (2004-01-01), pages 157 - 161, ISSN: 0001964527 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2007161717A (ja) * | 2005-12-16 | 2007-06-28 | Sungkyunkwan Univ Foundation For Corporate Collaboration | ポリジアセチレン超分子体とリガンド検出方法。 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2006017821A3 (en) | 2007-03-01 |
US20060051875A1 (en) | 2006-03-09 |
WO2006017821A2 (en) | 2006-02-16 |
EP1792163A2 (en) | 2007-06-06 |
EP1792163A4 (en) | 2008-08-27 |
CA2576822A1 (en) | 2006-02-16 |
IL181177A0 (en) | 2007-07-04 |
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