JP2008093483A - System of hysteroscopic insemination of mares - Google Patents

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Lee H A Morris
エイチ. エイ. モリス リー
William R Allen
アール. アレン ウィリアム
Allison C Lindsey
シー. リンジー アリソン
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Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a method of producing a mammal through artificial insemination and to attain low spermatozoa numbers for insemination and the production of a mammal through the use of hysteroscopic insemination techniques. <P>SOLUTION: The method provides fresh or preserved sperm, treated or processed sperm, sperm inserted under a surface in the vicinity of the uterotubal junction, hysteroscopic compatible media for the establishment of the insemination sample, hysteroscopic compatible volume for insemination, epididymal use of the hysteroscopic technique, bubble or froth insemination utilized in hysteroscopic insemination, and for sorted and frozen sperm utilized in hysteroscopic insemination. The method produces a mammal species, particularly equids, bovids and swine. <P>COPYRIGHT: (C)2008,JPO&INPIT

Description

本願は、米国仮出願番号60/238,294(本明細書中に参考として援用される)の利益および適用可能な任意の優先権を主張する。   This application claims the benefit of US Provisional Application No. 60 / 238,294 (incorporated herein by reference) and any applicable priority.

(技術分野)
本発明は、一般に、哺乳動物の授精の分野に関する。具体的には、本発明は、一旦精子が何らかの様式(例えば、フローサイトメトリーを介する精子の選別)で処理または加工されると特に適用可能であり得る、授精を達成するためのシステムに関する。より具体的には、本発明は、子宮鏡授精技術を介する、従来の人工授精と比較して低い数の精子を用いて授精を達成するためのシステムに関し得る。本発明は、特に、ウマ、ウシおよびブタに授精するためのシステムに、適用可能であり得る。さらに、本発明は、特に、哺乳動物の子孫の雌雄選択に適用可能であり得る。
(Technical field)
The present invention relates generally to the field of mammalian insemination. Specifically, the present invention relates to a system for achieving insemination that may be particularly applicable once sperm are processed or processed in some manner (eg, sperm sorting via flow cytometry). More specifically, the present invention may relate to a system for achieving insemination using a lower number of sperm compared to conventional artificial insemination via hysteroscopic insemination techniques. The present invention may be particularly applicable to systems for insemination of horses, cows and pigs. Furthermore, the present invention may be particularly applicable to sex selection of mammalian offspring.

(背景)
種々の形態の人工授精(AI)が、哺乳動物において妊娠の首尾よい割合を達成し、そして子孫哺乳動物を生じるために、使用されてきた。AIの伝統的な形態としては、種々のインビボ技術(例えば、従来の子宮内人工授精技術、またはより具体的には、大腿骨頸部(trans cervical)人工授精)が挙げられる。天然授精の用量は、代表的に大きくあり得る。例えば、いくつかの種において、天然授精は、2〜20×10精子のオーダーの精子数を含み得る。対照的に、同じ種における従来のAI技術は、200〜500×10精子のオーダーの精子数を必要とし得る。このことはまた、多数の精子であると考察され得る(特に、精子が何らかの様式で加工されている場合)。認容可能な数の妊娠を達成するための、高い数の精子に対する伝統的な要件を考慮して、引き続く授精のためにより低い精子計数を生じ得る交配技術の開発に取り組むために、他の授精技術が求められた。低用量の授精は、発明の名称「Sex−Specific Insemination of Mammals With Low Number of Sperm Cells」の、PCT公開WO99/33956に具体的に議論されている。子宮鏡による授精が提唱されており、そしてある程度まで、Morrisら、2000(本明細書中に参考として援用される)において議論されている。
(background)
Various forms of artificial insemination (AI) have been used to achieve successful rates of pregnancy in mammals and produce offspring mammals. Traditional forms of AI include various in vivo techniques, such as conventional in utero artificial insemination techniques, or more specifically, femoral neck insemination. The dose of natural insemination can typically be large. For example, in some species, natural insemination may include a sperm count on the order of 2-20 × 10 9 sperm. In contrast, conventional AI techniques in the same species may require sperm counts on the order of 200-500 × 10 6 sperm. This can also be considered to be a large number of sperm (especially if the sperm are processed in some manner). Other insemination techniques to address the development of mating techniques that can yield lower sperm counts for subsequent insemination, taking into account the traditional requirements for high numbers of sperm to achieve an acceptable number of pregnancies Was requested. Low-dose insemination is specifically discussed in PCT publication WO 99/33956, entitled “Sex-Specific Insulation of Mammas With Low Number of Sperm Cells”. Hysteroscopic insemination has been proposed and, to some extent, discussed in Morris et al., 2000 (incorporated herein by reference).

本願において言及される全ての参考文献、および言及されないさらなる参考文献を含めて、この記載される議論の最後に列挙されており、これらの全ては、参考として援用されるとみなされるべきであることに予め注目するべきである。   All references mentioned in this application, including additional references not mentioned, are listed at the end of this discussion, all of which should be considered incorporated by reference. Should be noted in advance.

フローサイトメトリーを使用する、高速精子選別は、哺乳動物(例えば、ウマ、ウシ、ヒツジ、ウサギ、ブタおよびヒト)において子孫哺乳動物を産生するための交配技術として首尾よく使用されてきた。これは、いくつかの他の種に対してもまた、潜在的に使用され得る。哺乳動物の妊娠および得られる子孫哺乳動物を増強または改変するための技術(特に、精子の加工および授精技術に関して)が開発された。   Fast sperm sorting using flow cytometry has been successfully used as a mating technique to produce offspring mammals in mammals (eg, horses, cows, sheep, rabbits, pigs and humans). This can also potentially be used for some other species. Techniques have been developed to enhance or modify mammalian pregnancy and the resulting offspring mammals, particularly with respect to sperm processing and insemination techniques.

人工授精の成功を最適化する際の1つの潜在的な限定的な要因は、Pickettら、1989において認識されるように、低い数の精子での授精であり得る。Pickettらは、雌性ウマにおける従来の人工授精のための潜在的な最小の推奨用量は、500×10程度に高い生殖可能に運動性の精子であり得ることを認識した。いくつかの精子選別技術において、1秒間あたり約700の精子の低い選別速度を用いると、人工授精のために推奨される用量の精子を得るために、数日かかり得る。このことは、実用的でないだけでなく、精子の生存可能性もまた、有意に低下し得る。従って、認容可能な受精率のために必要とされる精子の数を潜在的に減少させるために、低用量の授精技術が、当業者に対して望ましいものであり得る。 One potential limiting factor in optimizing the success of artificial insemination may be insemination with a low number of sperm, as recognized in Pickett et al., 1989. Pickett et al. Recognized that the potential minimum recommended dose for conventional artificial insemination in female horses could be fertile and motile spermatozoa as high as 500 × 10 6 . In some sperm sorting techniques, using a low sorting rate of about 700 sperm per second, it can take several days to obtain a recommended dose of sperm for artificial insemination. This is not only impractical, but sperm viability can also be significantly reduced. Therefore, low dose insemination techniques may be desirable to those skilled in the art to potentially reduce the number of sperm required for acceptable fertilization rates.

さらに、授精のためには低い用量であると考えられ得る用量は、代表的に、認容可能な受精率を生じないかもしれない。受精率は、例えば、サンプルのサイズ、従来のAIから得られる受精率の高い範囲または百分率を超えて達成可能である場合に、認容可能または統計学的に比較可能であるとみなされ得る。従って、受精を最大にするために必要とされる精子の数を潜在的に減少させるために、低用量の授精技術は、当業者に対して望ましいものであり得る。   Moreover, doses that may be considered low doses for insemination typically may not produce an acceptable fertilization rate. Fertilization rate can be considered acceptable or statistically comparable, for example, if it can be achieved beyond the sample size, a high range or percentage of fertilization rate obtained from conventional AI. Thus, low dose insemination techniques may be desirable to those skilled in the art to potentially reduce the number of sperm required to maximize fertilization.

低用量の授精の考慮においてか、IA受精率を一般的に改善するためかにかかわらず、人工授精に関するさらなる懸念は、妊娠の得られる数に関する全体としての、その手順の効率である。多数の手順工程が、従来のAI手順において使用され得、この手順は例えば、雌性ウマを交配させる際の発情期の同期;授精用量の調製、より具体的には、精子の希釈(Kennyら、1975)および再懸濁のためのエキステンダーの使用(例えば、TALPまたはHEPESで緩衝化されたタイロード媒体を使用する)、密度勾配または粘度勾配を通しての、サンプルの遠心分離(PERCOLLなどを使用する);生存可能性または運動性の評価;ならびに授精手順の詳細である。授精手順は、歴史的に、超音波および直腸により導かれる技術を含んだ。雌性ウマの子宮鏡授精もまた、Vasquezら、1998およびManningら、1998の参考文献に記載されるように、実施されてきている。しかし、制限された成功のみが、従来のAIにおける上記手順ならびにVasquezらおよびManningらの手順の利用において、実証された。特に、いずれの参考文献も、従来のAIに対して統計学的に比較可能な受胎率を生じ得るとはいえない。特に、VasquezらおよびManningらの参考文献は、それぞれ3.8×10の精子のうちの33%、および1.0×10の精子のうちの22%の受胎率を実証し得、これらは、関与する種についての従来のAIに対して比較不可能な受胎率であるとみなされ得る。AIのための効率的な手順を生じる、以前のかなりの試みにもかかわらず、現在まで、哺乳動物の子宮鏡授精のための効率的な手順に対する、長いこと感じられているが満たされていない必要性が、交配技術において存在する。さらに、上記のような、生存可能な精子の認容可能な数を達成するための、高い数の精子についての伝統的な要求を考慮すると、効率的な、低用量の子宮鏡授精に対する必要性が、現行の交配技術において、現在まで存在した。 A further concern with artificial insemination, whether considering low dose insemination or to generally improve IA fertilization rates, is the efficiency of the procedure as a whole with respect to the number of pregnancies obtained. A number of procedural steps can be used in a conventional AI procedure, which includes, for example, synchronization of the estrous phase when mating female horses; preparation of insemination doses, more specifically dilution of sperm (Kenny et al., 1975) and use of extenders for resuspension (eg, using Tyrode media buffered with TALP or HEPES), centrifuge the sample through a density gradient or viscosity gradient (such as using PERCOLL) ); Assessment of viability or motility; and details of the insemination procedure. Insemination procedures have historically included techniques guided by ultrasound and rectum. Hysteroscopic insemination of female horses has also been performed as described in the references of Vasquez et al., 1998 and Manning et al., 1998. However, only limited success has been demonstrated in the use of the above procedure in conventional AI and the procedure of Vasquez et al. And Manning et al. In particular, none of the references can produce a fertility rate that is statistically comparable to conventional AI. In particular, the references of Vasquez et al. And Manning et al. Can demonstrate a conception rate of 33% of 3.8 × 10 6 sperm and 22% of 1.0 × 10 6 sperm, respectively. Can be considered a conception rate that is incomparable to conventional AI for the species involved. Despite considerable previous attempts to produce an efficient procedure for AI, to date, it has long been felt but unsatisfied with an efficient procedure for mammalian hysteroscopic insemination There is a need in mating technology. Furthermore, given the traditional requirement for high numbers of sperm to achieve an acceptable number of viable sperm as described above, there is a need for efficient, low-dose hysteroscopic insemination. In the current mating technology, existed to date.

さらに、ブタの子宮内深部への授精が、Vasquezら、2000の参考文献に記載されるように、実施されている。しかし、授精は、20×10の精子のオーダーの、高い数の精子であるとみなされ得る数で実施された。しかし、Vasquezら、2000は、授精のためにより低い精子数を利用する交配技術に取り組むための授精手順に対する、長いこと感じられているが満たされていない必要性(例えば、現行の精子選別技術から生じ得るもの)を確認し得る。 In addition, insemination into the deep uterus of pigs has been performed as described in Vasquez et al., 2000 reference. However, insemination was performed with numbers that could be considered high numbers of sperm, on the order of 20 × 10 7 spermatozoa. However, Vasquez et al., 2000, have long felt but unmet need for insemination procedures to address mating techniques that utilize lower sperm numbers for insemination (eg, from current sperm sorting techniques Can be confirmed).

従って、Vasquezら、1998、Vasquezら、2000、およびManningら、1998の参考文献から実証され得るように、当業者は、哺乳動物における高い受精率、および得られる哺乳動物の高い産生、低い授精投与量に対する高い受精率を潜在的に生じる授精技術、ならびに特に子宮鏡授精技術に関する有効性の問題に取り組むための授精技術を提供することの確認された必要性に取り組まなかったかもしれない。   Thus, as can be demonstrated from the references of Vasquez et al., 1998, Vasquez et al., 2000, and Manning et al., 1998, one skilled in the art will appreciate that high fertilization rates in mammals and high production of mammals resulting in low insemination administration It may not have addressed the identified need to provide insemination techniques that potentially result in high fertility rates in volume, as well as insemination techniques to address efficacy issues, particularly with respect to hysteroscopic insemination techniques.

授精手順に関する1つの重要な手順工程は、一般に、より高い受精率を潜在的に提供するために望ましい数の、生存可能な運動性の精子を含む授精用量の確立である。運動性精子の選択のための手順は、例えば、参考文献Groendahlら、1996における従来のAIに関して、そして一般に、子宮鏡授精において、例えば、PERCOLL(Sigma Chemical Co.,St.Louis,MO)を単独でかもしくは他の物質と組み合わせて利用して、密度勾配または粘度勾配を確立することによって、実施され得る。しかし、現在まで、生存可能かまたは運動性の精子を分画するためのかなりの努力は、高い受精率、低い授精用量に対する高い受精率を潜在的に提供する授精技術、および特に子宮鏡授精技術に関する有効性の問題に取り組む授精技術の、確認された必要性に特に取り組まなかった。   One important procedural step for an insemination procedure is generally the establishment of an insemination dose containing the desired number of viable motile sperm to potentially provide a higher fertilization rate. Procedures for the selection of motile spermatozoa, for example with respect to conventional AI in the reference Groendahl et al., 1996, and generally in hysteroscopic insemination, eg PERCOLL (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO) alone. It can be carried out by establishing density gradients or viscosity gradients, either in combination or in combination with other substances. However, to date, considerable efforts to fractionate viable or motile sperm have been focused on insemination techniques that potentially provide high fertilization rates, high fertility rates for low insemination doses, and in particular hysteroscopic insemination techniques. In particular, it did not address the identified need for insemination techniques to address effectiveness issues.

授精手順に関する第2の潜在的な問題は、一般に、上記のような特別な運動性試験なしで、より高い受精率を潜在的に提供するために望ましい数の生存可能な運動性の精子を含む授精用量の確立である。密度勾配または粘度勾配の導入は、精子にストレスを導入し得、これは、特定のサンプルから入手可能な、生存可能な運動性の精子の実際の数を、実際に減少させ得る。現在まで、生存可能かまたは運動性の精子を分画するためのかなりの努力は、高い受精率、低い授精用量に対する高い受精率を提供する授精技術、および特に子宮鏡授精技術に関する有効性の問題に取り組む授精技術の、確認された必要性に特に取り組まなかった。実際に、特定の授精サンプルから生存可能かまたは運動性の精子の総数を減少させる可能性に起因して、密度勾配または粘度勾配を組み込む、以前の試みは、実際に、授精技術を提供する本発明の手順(これは、生存可能な低用量の授精サンプルを得るために要し得る努力が少ない)とは反対の教示をし得る。   A second potential problem with insemination procedures generally includes the desired number of viable motility sperm to potentially provide a higher fertilization rate without special motility testing as described above. Establish insemination dose. The introduction of a density gradient or viscosity gradient can introduce stress into the sperm, which can actually reduce the actual number of viable motile sperm available from a particular sample. To date, considerable efforts to fractionate viable or motile spermatozoa have been a matter of effectiveness with high fertilization rates, fertilization techniques that provide high fertilization rates for low insemination doses, and especially hysteroscopic insemination techniques. We did not specifically address the identified need for insemination techniques. In fact, previous attempts to incorporate density gradients or viscosity gradients due to the possibility of reducing the total number of viable or motile spermatozoa from a particular insemination sample actually book that provides insemination techniques The teachings of the invention (which may require less effort to obtain a viable low dose insemination sample) may teach the opposite.

授精手順に関する第3の潜在的な問題は、一般に、特定の授精技術に適合性の容量の確立である。上記のように、1つの認識された必要性は、より高い受精率を潜在的に提供することの願望である。第2の認識された必要性(これもまた上記)は、高い受精率を潜在的に達成するために、低い数の精子を使用する能力である。授精用量は、特定の授精技術によって決定され得る。しかし、この用量は、より高い率の受精を潜在的に提供するために望ましい数の精子を含み得る。適切な数の精子(授精技術の潜在的な容量要件を考慮して)が、認容可能な受精率を潜在的に提供することを可能にする、適切な授精技術を確立するために、かなりの努力がなされてきた。しかし、VasquezらおよびManningらにおいて報告された受精率が実証し得るように、特定の授精技術に適合性の授精用量を決定して、より高い率の受精を潜在的にさらに提供することは、子宮鏡授精については潜在的に確立されていない。   A third potential problem with insemination procedures is generally the establishment of a capacity that is compatible with a particular insemination technique. As noted above, one recognized need is the desire to potentially provide higher fertilization rates. A second recognized need (also above) is the ability to use a low number of sperm to potentially achieve a high fertilization rate. The insemination dose can be determined by the specific insemination technique. However, this dose may contain the desired number of sperm to potentially provide a higher rate of fertilization. To establish an appropriate fertilization technique that allows an appropriate number of spermatozoa (considering the potential capacity requirements of the fertilization technique) to potentially provide an acceptable fertilization rate, Efforts have been made. However, as the fertilization rates reported in Vasquez et al. And Manning et al. Can demonstrate, determining the fertilization dose compatible with a particular insemination technique to potentially further provide a higher rate of fertilization is Hysteroscopic insemination is not potentially established.

さらに、以前に言及されたように、精子サンプルは、授精手順の前に加工され得る。例えば、従来のAIは、精子の希釈(Kennyら、1975)および再懸濁のためのエキステンダーの使用を提供し得る。しかし、使用される特定の媒体は、授精手順自体と適合性ではないかもしれない。サンプル媒体の非適合性は、精子または用量のより低い沈着数、あるいはより低い受精率を生じ得る。さらに、沈着した授精用量の様式または形態、あるいはAIの間の沈着の特定の方法は、受胎のために利用可能な沈着した精子の数にさらに影響を与え得る。しかし、現在まで、授精媒体に対するかなりの努力は、高い受精率、低い授精用量に対する高い受精率を潜在的に生じる授精技術、および特に子宮鏡授精技術に関する有効性の問題に取り組む授精技術を提供する必要性に特に取り組まなかったかもしれない。   Moreover, as previously mentioned, sperm samples can be processed prior to the insemination procedure. For example, conventional AI may provide for the use of extenders for sperm dilution (Kenny et al., 1975) and resuspension. However, the particular medium used may not be compatible with the insemination procedure itself. Incompatibility of the sample medium can result in lower sperm or dose deposits, or lower fertilization rates. Furthermore, the mode or form of deposited fertilization dose, or the particular method of deposition during AI, can further affect the number of deposited sperm available for conception. However, to date, considerable effort on insemination media provides insemination techniques that address high efficiency fertilization rates, insemination techniques that potentially result in high insemination rates for low insemination doses, and in particular the effectiveness of hysteroscopic insemination techniques You may not have specifically addressed the need.

懸念のさらなる要因は、授精のタイミングである。授精のタイミングは、例えば、精子の生存可能性および寿命、ならびに哺乳動物の発情周期のタイミングのために、重要な要因であり得る。特に、精子サンプルの獲得の遠隔位置(すなわち、雄性哺乳動物の位置)、およびAIの最終的な位置が、問題であり得る。従来のAIにおいて、授精前に精子サンプルを貯蔵して授精を発情周期と調和させるための、以前の努力がなされた。しかし、現在まで、授精のタイミングに関するかなりの努力は、高い受精率、低い授精投与量に対する高い受精率を潜在的に提供する授精技術、および特に子宮鏡授精技術に関する有効性の問題に取り組む授精技術を提供することの、確認された必要性に特に取り組まなかったかもしれず、そしてその問題を理解さえしなかったかもしれない。   A further factor of concern is the timing of insemination. The timing of insemination can be an important factor, for example, due to the viability and longevity of the sperm and the timing of the estrous cycle of the mammal. In particular, the remote location of sperm sample acquisition (ie, the location of the male mammal) and the final location of the AI can be problematic. In conventional AI, previous efforts have been made to store sperm samples prior to insemination and to coordinate insemination with the estrous cycle. However, to date, considerable effort on the timing of insemination has focused on insemination techniques that address high efficiency, infertility techniques that potentially provide high insemination rates for low insemination doses, and in particular the effectiveness of hysteroscopic insemination techniques. May not have specifically addressed the identified need to provide and did not even understand the problem.

精子サンプルの供給源もまた、得られる授精のために重要であり得る。精巣上体での精子サンプルの獲得(精子サンプルを精巣の精巣上体から得ること;成熟の間精子を保持し、そして精管と連続的な単一のコイル状ダクトに統合される前に絡まった塊を形成する、精巣から後方に出る小管)は、授精のタイミングおよび精子の生存可能性に関する、いくつかの固有の利点を提供し得る。しかし、現在まで、精子の供給源、生存可能性および授精のタイミングに関するかなりの努力は、高い受精率、低い授精投与量に対する高い受精率を潜在的に生じる授精技術、および特に子宮鏡授精技術に関する有効性の問題に取り組む授精技術を提供することの、確認された必要性に完全には取り組まなかったかもしれず、そしてその問題を理解さえしなかったかもしれない。   The source of the sperm sample may also be important for the resulting insemination. Obtaining sperm samples in the epididymis (obtaining the sperm samples from the epididymis of the testis; holding the sperm during maturation and entangled before being integrated into a single coiled duct continuous with the vas deferens (Tubules that posteriorly exit the testis), which form a lumpy mass, may provide several inherent advantages with respect to insemination timing and sperm viability. However, to date, considerable efforts regarding sperm source, viability and timing of insemination have been directed to insemination techniques that potentially produce high fertilization rates, high fertilization rates for low insemination doses, and especially hysteroscopic insemination techniques. It may not have fully addressed the identified need to provide insemination techniques to address the effectiveness issue, and may not even understand the issue.

(発明の開示)
本発明者らは、従来の人工授精の方法に付随する潜在的な問題を認識した。従って、本発明の実施形態は、以前の人工授精の技術およびシステムの不備な点に取り組み得る、人工授精の使用による哺乳動物の産生を提供し得る。本発明は、特定の実施形態によれば、潜在的に高い受精率、従来のAIの結果と統計学的に適合性であり得る受精率、および低い授精用量を使用しての潜在的に高い受精率が達成され得る、哺乳動物の産生の方法を包含し得る。より具体的には、本発明の実施形態は、子宮鏡授精技術の使用による、哺乳動物の産生を提供し得る。さらに、本発明は、哺乳動物のうちでとりわけ、ウマ、ウシ、およびブタのような哺乳動物に特に関する実施形態を含み得る。従って、本発明の実施形態は、人工授精の以前の努力にはなかった開発とさえ考えられ得る。
(Disclosure of the Invention)
The inventors have recognized potential problems associated with conventional methods of artificial insemination. Thus, embodiments of the present invention may provide for the production of mammals through the use of artificial insemination that may address the deficiencies of previous artificial insemination techniques and systems. The present invention, according to certain embodiments, has a potentially high fertilization rate, a fertilization rate that may be statistically compatible with conventional AI results, and potentially high using low insemination doses Methods of mammalian production can be included where fertilization rates can be achieved. More specifically, embodiments of the present invention may provide mammalian production through the use of hysteroscopic insemination techniques. Furthermore, the present invention may include embodiments that relate specifically to mammals such as horses, cows, and pigs, among other mammals. Thus, embodiments of the present invention may even be considered a development that was not in previous efforts of artificial insemination.

従って、本発明の1つの課題は、効率的な手順を利用する、哺乳動物の産生を提供することである。従って、本発明の目的は、従来のAIおよび他の授精技術と比較してより低い数の精子が授精用量において使用され得、一方で、本発明の特定の実施形態において、受胎の少なくとも統計学的に比較可能な成功率が維持されるように、哺乳動物産生のための人工授精の技術を提供することである。   Accordingly, one object of the present invention is to provide mammalian production utilizing an efficient procedure. Accordingly, it is an object of the present invention that a lower number of sperm can be used at an insemination dose compared to conventional AI and other insemination techniques, while in certain embodiments of the present invention at least statistics of conception. To provide artificial insemination techniques for mammalian production so that comparable success rates can be maintained.

本発明の別の課題は、人工授精手順を利用する哺乳動物の産生を提供することであり、これは、精子選別のような交配技術からのより低い精子産生と一致する、高い受精率を潜在的に達成し得る。従って、本発明の目的は、従来のAIおよび他の授精技術と比較して、より低い数の精子を用いて、受精の統計学的に比較可能な成功率を達成する、哺乳動物の産生のための人工授精の技術を提供することである。   Another problem of the present invention is to provide mammalian production utilizing an artificial insemination procedure, which potentially has a high fertilization rate, consistent with lower sperm production from mating techniques such as sperm sorting. Can be achieved. Accordingly, the object of the present invention is to produce a mammalian product that uses a lower number of sperm and achieves a statistically comparable success rate of fertilization compared to conventional AI and other fertilization techniques. Is to provide artificial insemination technology.

さらに、本発明の課題は、人工授精に関与する工程を増強し得る、人工授精手順を利用する哺乳動物の産生を提供することである。この結果のために、本発明の目的は、発情周期のタイミングの工程、精子の供給源、生存可能性、寿命および加工、授精用量の媒体および容量、ならびに授精のタイミングが、特に、低用量の授精および潜在的に高い受精のために最適化され得るような、哺乳動物産生のための人工授精の技術を提供することである。   Furthermore, it is an object of the present invention to provide the production of mammals using artificial insemination procedures that can enhance the processes involved in artificial insemination. Because of this result, the object of the present invention is that the process of estrous cycle timing, sperm source, viability, longevity and processing, insemination dose medium and capacity, and insemination timing, especially at low doses, It is to provide artificial insemination techniques for mammalian production that can be optimized for insemination and potentially high fertilization.

本発明のさらなる課題は、好ましい実施形態によれば、子宮鏡授精による哺乳動物の産生を提供することである。従って、本発明の目的は、授精用量の挿入、沈着部位への授精用量の導き、適切な位置での授精用量の沈着が、適切な様式または形態で、先に言及されたような他の課題および目的を達成するために達成され得るように、哺乳動物産生のための人工授精の技術を提供することである。本発明の特定の実施液体によれば、ブリスター授精およびバブル(bubble)もしくは泡(froth)の授精が、好ましい実施形態として導入されて、受精率を最適化する。本発明の特定の目的は、授精用量を導きそして沈着するための、ビデオ内視鏡を備えるカテーテルを利用する、哺乳動物産生のための人工授精の技術を提供することである。   It is a further object of the present invention, according to a preferred embodiment, to provide mammalian production by hysteroscopic insemination. Therefore, the object of the present invention is to insert the insemination dose, to guide the insemination dose at the site of deposition, and to deposit the insemination dose at the appropriate location in other manners as mentioned above in an appropriate manner or form. And to provide techniques of artificial insemination for the production of mammals, as can be achieved to achieve the purpose. According to certain implementation liquids of the present invention, blister insemination and bubble or froth insemination are introduced as preferred embodiments to optimize fertilization rate. A particular object of the present invention is to provide an artificial insemination technique for mammalian production that utilizes a catheter with a video endoscope to guide and deposit an insemination dose.

さらに、本発明の課題は、特定の実施形態によれば、人工授精手順を利用して、種々の哺乳動物種の産生を提供することである。従って、本発明の目的は、他の種のうちでもとりわけ、ウマ、ウシおよびブタのような哺乳動物のための、人工授精の技術を提供することである。さらなる目的は、授精用量中の低い数の精子、および潜在的に高い受精率、特に、従来のAIと統計学的に比較可能であり得る率をさらに提供する、種々の哺乳動物種のための人工授精の技術を提供することである。   Furthermore, it is an object of the present invention to provide production of various mammalian species using an artificial insemination procedure, according to certain embodiments. Accordingly, it is an object of the present invention to provide artificial insemination techniques for mammals such as horses, cows and pigs, among other species. A further object is for various mammalian species to further provide a low number of sperm in insemination doses and a potentially high fertilization rate, particularly a rate that may be statistically comparable to conventional AI. It is to provide artificial insemination technology.

本発明の他の課題は、本明細書の他の箇所および特許請求の範囲にわたって、開示される。さらに、目的および課題は、従属の様式または独立の様式のいずれかで、種々の実施形態において、種々の他の目的および課題に対して適用され得る。   Other objects of the invention are disclosed elsewhere in this specification and throughout the claims. Furthermore, the objects and issues may be applied to various other objects and tasks in various embodiments, either in a dependent manner or in an independent manner.

従って、本発明は、以下を提供する:
(項目1) 哺乳動物を産生する方法であって:
a.哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程;
b.授精に望ましい精子を選択する工程;
c.人工授精のための子宮鏡授精に適合する量を決定する工程;
d.該子宮鏡授精に適合する量の授精標本を確立する工程であって、該授精標本において該授精に望ましい精子および子宮鏡に適合する媒体を用いる、工程;
e.該授精標本において該精子細胞の特徴を一時的に実質的に保持する工程;
f.該哺乳動物種の雌の発情時期を決定する工程;
g.およそ該発情時期に人工授精サンプルを確立するために、該授精標本の特性を変更する工程;
h.該人工授精サンプルをカテーテルに置く工程;
i.該哺乳動物種の雌が適切に受精する時期を決定する工程;
j.該哺乳動物種の雌に光学要素を膣内挿入する工程;
k.該哺乳動物種の雌に該カテーテルを膣内挿入する工程;
l.該哺乳動物種の雌の膣を通して該光学要素および該カテーテルを導く工程;
m.該哺乳動物種の雌内に子宮卵管接合部を光学的に位置確認する工程;
n.該哺乳動物種の雌内の該子宮卵管接合部の近傍に該カテーテルを位置づける工程;
o.該哺乳動物種の雌内の該子宮卵管接合部の近傍の表面下で該カテーテルから該人工授精サンプルの少なくとも一部を押し出す工程;
p.該哺乳動物種の雌内の該子宮卵管接合部の近傍に該人工授精サンプルの少なくとも一部を置く工程;
q.該哺乳動物種の雌から該光学要素および該カテーテルを引き出す工程;
r.該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程;および
s.該受精卵から子孫の哺乳動物を産生する工程、
を包含する、方法。
Accordingly, the present invention provides the following:
(Item 1) A method for producing a mammal comprising:
a. Collecting sperm cells from a male of a mammalian species;
b. Selecting a desired sperm for insemination;
c. Determining an amount suitable for hysteroscopic insemination for artificial insemination;
d. Establishing an amount of an insemination specimen compatible with the hysteroscopic insemination, wherein a sperm desired for the insemination and a medium compatible with the hysteroscope are used in the insemination specimen;
e. Temporarily holding substantially the characteristics of the sperm cells in the insemination specimen;
f. Determining the time of estrus in the female of the mammalian species;
g. Altering the characteristics of the insemination specimen to establish an artificial insemination sample at about the time of estrus;
h. Placing the artificial insemination sample on a catheter;
i. Determining when the female of the mammalian species is properly fertilized;
j. Inserting an optical element into the vagina into the female of the mammalian species;
k. Inserting the catheter into the vagina into the female of the mammalian species;
l. Directing the optical element and the catheter through the female vagina of the mammalian species;
m. Optically locating a uterine fallopian junction in a female of the mammalian species;
n. Positioning the catheter in the vicinity of the uterine fallopian junction in the female of the mammalian species;
o. Extruding at least a portion of the artificial insemination sample from the catheter under a surface near the uterotubal junction in the female of the mammalian species;
p. Placing at least a portion of the artificial insemination sample in the vicinity of the uterine fallopian junction in a female of the mammalian species;
q. Withdrawing the optical element and the catheter from a female of the mammalian species;
r. Fertilizing female eggs of the mammalian species; and
s. Producing a progeny mammal from the fertilized egg;
Including the method.

(項目2) 前記哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程が、従来の子宮体人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程を包含する、項目1に記載の哺乳動物を産生する方法。    (Item 2) Fertilizing said mammalian species of female eggs comprises fertilizing said mammalian species of female eggs at a success level that is statistically comparable to conventional endometrial artificial insemination processes. A method for producing the mammal according to item 1.

(項目3) カテーテルに前記人工授精サンプルを配置する工程が、該カテーテルに少数の精子を配置する工程を包含する、項目2に記載の哺乳動物を産生する方法。    (Item 3) The method for producing a mammal according to item 2, wherein the step of placing the artificial insemination sample on a catheter includes the step of placing a small number of sperm on the catheter.

(項目4) 前記カテーテルに少数の精子を配置する工程が、以下:約10,000,000未満の精子、約5,000,000個未満の精子、約2,000,000個未満の精子、約1,000,000個未満の精子、約500,000個未満の精子、および約100,000個未満の精子からなる群より選択される数の精子を配置する工程を包含する、項目3に記載の哺乳動物を産生する方法。    (Item 4) Placing a small number of sperm on the catheter comprises the following: less than about 10,000,000 sperm, less than about 5,000,000 sperm, less than about 2,000,000 sperm, In item 3, comprising placing a number of sperm selected from the group consisting of less than about 1,000,000 sperm, less than about 500,000 sperm, and less than about 100,000 sperm. A method of producing the described mammal.

(項目5) 前記受精させる工程が、従来の子宮体人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで前記哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程を包含し、該成功レベルは、以下:    5. The fertilizing step includes fertilizing a female egg of the mammalian species with a success level that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process, the success level comprising:
少なくとも約0.05以上の統計的P値を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで該哺乳動物種の雌の卵を受精させること、  Fertilizing a female egg of the mammalian species with a success level statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a statistical P value of at least about 0.05 or greater;
少なくとも約0.05以上の統計的P値を有する500,000,000個のウマ精子サンプルを用いる従来の子宮体人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで該哺乳動物種の雌の卵を受精させること、  The female egg of the mammalian species is used at a level of success that is statistically comparable to a conventional endometrial insemination process using 500,000,000 horse sperm samples having a statistical P value of at least about 0.05 or more. Fertilizing,
少なくとも約80%以上の統計的β値を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで該哺乳動物種の雌の卵を受精させること、  Fertilizing a female egg of the mammalian species with a success level statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a statistical β value of at least about 80% or greater;
少なくとも約0.05以上の統計的P値および少なくとも約80%以上の統計的β値を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで該哺乳動物種の雌の卵を受精させること、  Fertilize female eggs of the mammalian species with a success level statistically comparable to conventional endometrial insemination processes having a statistical P value of at least about 0.05 or higher and a statistical β value of at least about 80% or higher Letting
からなる群より決定される、項目4に記載の哺乳動物を産生する方法。The method for producing a mammal according to item 4, which is determined from the group consisting of:

(項目6) 従来の子宮体人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで前記哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程が、以下:少なくとも約75%の成功率、少なくとも約65%の成功率、少なくとも約60%の成功率、少なくとも約50%の成功率、少なくとも約45%の成功率、およびその種についての従来の人工授精の少なくとも約90%、からなる群より選択される成功レベルで該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程を包含する、項目4に記載の哺乳動物を産生する方法。    (Item 6) The step of fertilizing a female egg of the mammalian species with a success level that is statistically comparable to the conventional endometrial artificial insemination process is as follows: success rate of at least about 75%, success of at least about 65% Success level selected from the group consisting of: a rate, a success rate of at least about 60%, a success rate of at least about 50%, a success rate of at least about 45%, and at least about 90% of conventional artificial insemination for the species 5. A method for producing a mammal according to item 4, comprising fertilizing a female egg of said mammalian species.

(項目7) 前記受精させる工程が、従来の子宮体人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで前記哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程を包含し、該成功レベルは、以下:    7. The fertilizing step includes fertilizing a female egg of the mammalian species with a success level that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process, the success level comprising:
少なくとも約0.05以上の統計的P値を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで該哺乳動物種の雌の卵を受精させること、  Fertilizing a female egg of the mammalian species with a success level statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a statistical P value of at least about 0.05 or greater;
少なくとも約0.05以上の統計的P値を有する500,000,000個のウマ精子サンプルを用いる従来の子宮体人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで該哺乳動物種の雌の卵を受精させること、  The female egg of the mammalian species is used at a level of success that is statistically comparable to a conventional endometrial insemination process using 500,000,000 horse sperm samples having a statistical P value of at least about 0.05 or more. Fertilizing,
少なくとも約80%以上の統計的β値を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで該哺乳動物種の雌の卵を受精させること、  Fertilizing a female egg of the mammalian species with a success level statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a statistical β value of at least about 80% or greater;
少なくとも約0.05以上の統計的P値および少なくとも約80%以上の統計的β値を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで該哺乳動物種の雌の卵を受精させること、  Fertilize female eggs of the mammalian species with a success level statistically comparable to conventional endometrial insemination processes having a statistical P value of at least about 0.05 or higher and a statistical β value of at least about 80% or higher Letting
からなる群より決定される、項目6に記載の哺乳動物を産生する方法。The method for producing a mammal according to item 6, which is determined from the group consisting of:

(項目8) 前記哺乳動物種の雄から精子サンプルを収集する工程が、ウシ、ウマ、またはブタからなる群より選択される哺乳動物種の雄から精子サンプルを収集する工程を包含する、項目6に記載の哺乳動物を産生する方法。    8. Collecting a sperm sample from the male of the mammalian species comprises collecting a sperm sample from a male of the mammalian species selected from the group consisting of cattle, horses, or pigs. A method for producing the mammal described in 1.

(項目9) 前記哺乳動物種の雌内の前記子宮卵管接合部の近傍に前記カテーテルを位置づける工程が、該哺乳動物種の雌内の子宮卵管接合部の近傍の表面下に該カテーテルを挿入する工程を包含し、該哺乳動物種の雌内の子宮卵管接合部の近傍の表面下で該カテーテルから前記人工授精サンプルの少なくとも一部を押し出す工程が、該哺乳動物種の雌内の子宮卵管接合部の近傍の表面下で該カテーテルから該人工授精サンプルの少なくとも一部を押し出す工程を包含し、そして該哺乳動物種の雌内の該子宮卵管接合部の近傍に該人工授精サンプルの少なくとも一部を置く工程が、該哺乳動物種の雌内の該子宮卵管接合部の近傍の該表面下に該人工授精サンプルの少なくとも一部を置く工程を包含する、項目8に記載の哺乳動物を産生する方法。    (Item 9) The step of positioning the catheter in the vicinity of the uterine fallopian junction in a female of the mammalian species comprises placing the catheter under a surface in the vicinity of the uterine fallopian junction in the female of the mammalian species. Extruding at least a portion of the artificial insemination sample from the catheter under a surface in the vicinity of the uterine fallopian junction in the female of the mammalian species, Extruding at least a portion of the artificial insemination sample from the catheter under the surface in the vicinity of the uterine fallopian junction, and in the vicinity of the uterine fallopian junction in a female of the mammalian species 9. The item 8, wherein placing at least a portion of the sample comprises placing at least a portion of the artificial insemination sample under the surface near the uterine fallopian junction in a female of the mammalian species. To produce mammals .

(項目10) 前記授精標本において前記授精に望ましい精子および前記子宮鏡に適合する媒体を用いて前記子宮鏡授精に適合する量の該授精標本を確立する工程が、新鮮な精子を用いて人工授精サンプルを確立する工程を包含する、項目8に記載の哺乳動物を産生する方法。    (Item 10) Establishing an amount of the insemination specimen suitable for the hysteroscopic insemination using a sperm desirable for the insemination in the insemination specimen and a medium suitable for the hysteroscope, artificial insemination using the fresh sperm 9. A method for producing a mammal according to item 8, comprising the step of establishing a sample.

(項目11) 前記哺乳動物種の雌内の前記子宮卵管接合部の近傍に前記人工授精サンプルの少なくとも一部を置く工程が、該哺乳動物種の雌内の該子宮卵管接合部の陰窩内に該人工授精サンプルの少なくとも一部を置く工程を包含する、項目6に記載の哺乳動物を産生する方法。    (Item 11) The step of placing at least a part of the artificial insemination sample in the vicinity of the uterine fallopian tube junction in a female of the mammalian species comprises the shadow of the uterine fallopian tube junction in the female of the mammalian species. The method for producing a mammal according to item 6, comprising placing at least a part of the artificial insemination sample in a fovea.

(項目12) 前記授精標本において前記授精に望ましい精子および前記子宮鏡に適合する媒体を用いて前記子宮鏡授精に適合する量の該授精標本を確立する工程が、前記精子細胞を希釈する工程を包含する、項目6に記載の哺乳動物を産生する方法。    (Item 12) Establishing an insemination sample in an amount suitable for hysteroscopic insemination using a sperm desirable for insemination in the insemination sample and a medium compatible with the hysteroscope, diluting the sperm cell A method for producing a mammal according to item 6, comprising.

(項目13) 前記精子細胞を希釈する工程が、2:1未満の比への該精子細胞の希釈、5:1未満の比への該精子細胞の希釈、10:1未満の比への該精子細胞の希釈、スキムミルク媒体を用いた希釈、TALP媒体を用いた希釈、HEPES緩衝タイロード媒体を用いた希釈、およびアンドロヘップ媒体を用いた希釈からなる群より選択される、該精子細胞を希釈する工程を包含する、項目12に記載の哺乳動物を産生する方法。    13. The step of diluting the sperm cells comprises diluting the sperm cells to a ratio of less than 2: 1, diluting the sperm cells to a ratio of less than 5: 1, and to a ratio of less than 10: 1. Dilute the sperm cells selected from the group consisting of dilution of sperm cells, dilution with skim milk medium, dilution with TALP medium, dilution with HEPES buffered tyrode medium, and dilution with androhep medium 13. A method for producing a mammal according to item 12, comprising the step of:

(項目14) 前記授精標本において前記授精に望ましい精子および前記子宮鏡に適合する媒体を用いて前記子宮鏡授精に適合する量の該授精標本を確立する工程が、ほぼ室温に該授精標本を冷却する工程をさらに包含する、項目13に記載の哺乳動物を産生する方法。    (Item 14) Establishing an amount of the insemination specimen suitable for the hysteroscopic insemination using a sperm desirable for the insemination in the insemination specimen and a medium suitable for the hysteroscope, and cooling the insemination specimen to about room temperature. 14. A method for producing a mammal according to item 13, further comprising the step of:

(項目15) 前記授精に望ましい精子を選択する工程が、前記雄哺乳動物種から収集されたより運動性の精子を濃縮する工程を包含する、項目6に記載の哺乳動物を産生する方法。    (Item 15) The method for producing a mammal according to item 6, wherein the step of selecting a sperm desirable for insemination includes the step of concentrating more motile sperm collected from the male mammal species.

(項目16) 前記雄哺乳動物種から収集されたより運動性の精子を濃縮する工程が、Percoll勾配を通じて該精子を遠心分離する工程を包含する、項目15に記載の哺乳動物を産生する方法。    16. The method of producing a mammal according to claim 15, wherein the step of concentrating more motile sperm collected from the male mammalian species comprises centrifuging the sperm through a Percoll gradient.

(項目17) 前記Percoll勾配を通じて前記精子を遠心分離する工程が、90:45%のPercoll勾配を用いる工程を包含する、項目16に記載の哺乳動物を産生する方法。    17. The method of producing a mammal of claim 16, wherein centrifuging the sperm through the Percoll gradient comprises using a 90: 45% Percoll gradient.

(項目18) 前記Percoll勾配を通じて前記精子を遠心分離する工程が、以下:    (Item 18) The step of centrifuging the sperm through the Percoll gradient comprises the following:
a.約200gで約5分間、該Percoll勾配を通じて該精子を遠心分離する工程;および  a. Centrifuging the sperm through the Percoll gradient at about 200 g for about 5 minutes; and
b.約800gで約10分間、該Percoll勾配を通じて該精子を遠心分離する工程、  b. Centrifuging the sperm through the Percoll gradient at about 800 g for about 10 minutes;
をさらに包含する、項目17に記載の哺乳動物を産生する方法。18. A method for producing a mammal according to item 17, further comprising:

(項目19) 前記雄哺乳動物種から収集されたより運動性の精子を濃縮する工程が、該精子の濃度を出発濃度の約2倍未満に限定する工程を包含する、項目17に記載の哺乳動物を産生する方法。    19. The mammal of claim 17, wherein the step of concentrating more motile sperm collected from the male mammalian species comprises limiting the concentration of the sperm to less than about twice the starting concentration. How to produce.

(項目20) 前記確立する工程が、約30μlと約150μlとの間、約500μl未満、約230μl未満、および約100μlからなる群より選択される量の授精標本を確立する工程を包含する、項目6に記載の哺乳動物を産生する方法。    20. The item of establishing, comprising establishing an insemination sample in an amount selected from the group consisting of between about 30 μl and about 150 μl, less than about 500 μl, less than about 230 μl, and about 100 μl. A method for producing the mammal according to 6.

(項目21) 前記哺乳動物種の雌の発情時期を決定する工程が、該哺乳動物種の雌における発情を誘導する工程を包含する、項目6に記載の哺乳動物を産生する方法。    (Item 21) The method for producing a mammal according to item 6, wherein the step of determining the estrus time of the female of the mammalian species includes the step of inducing estrus in the female of the mammalian species.

(項目22) 前記哺乳動物種の雌における発情を誘導する工程が、該哺乳動物種の複数の雌における発情を同時に誘導する工程を包含する、項目21に記載の哺乳動物を産生する方法。    (Item 22) The method for producing a mammal according to item 21, wherein the step of inducing estrus in females of the mammalian species includes the step of simultaneously inducing estrus in a plurality of females of the mammalian species.

(項目23) 前記哺乳動物種の雌における発情を誘導する工程が、以下:    (Item 23) The step of inducing estrus in females of the above-mentioned mammalian species is as follows:
a.該哺乳動物種の雌を、プロゲスタゲンの処置に約10日間毎日供する工程;および  a. Subjecting said mammalian species of females to progestagen treatment daily for about 10 days; and
b.該哺乳動物種の雌を、プロゲスタゲンの処置に約10日間毎日供する工程を達成するほぼ10日目に、該哺乳動物種の雌を、クロプロステノールの処置に少なくとも1回供する工程、  b. Subjecting the female of the mammalian species at least once to the treatment of cloprostenol on about ten days of achieving the step of subjecting the female of the mammalian species daily to progestagen treatment for about 10 days;
を包含する、項目21または22に記載の哺乳動物を産生する方法。23. A method for producing a mammal according to item 21 or 22, comprising

(項目24) 項目6に記載の哺乳動物の産生する方法であって、前記授精標本の特性を変更する工程を開始して、前記哺乳動物種の雌について適切に受精することが決定された時期付近で、発情期付近にある人工授精サンプルを確立する工程をさらに包含する、方法。    (Item 24) A method for production by a mammal according to item 6, wherein the step of changing the characteristics of the fertilized specimen is started and it is determined that fertilization is appropriately performed on females of the mammal species A method further comprising establishing an artificial insemination sample in the vicinity and near the estrus period.

(項目25) 項目24に記載の哺乳動物の産生する方法であって、前記授精標本の特性を変更する工程を開始して、前記哺乳動物種の雌について適切に受精することが決定された時期付近で、発情期付近にある人工授精サンプルを確立する工程が、以下:該哺乳動物種の雌について適切に受精すること決定された該時期の約24時間以内、該哺乳動物種の雌について適切に受精すること決定された該時期の約12時間以内、該哺乳動物種の雌について適切に受精すること決定された該時期の約8時間以内、該哺乳動物種の雌について適切に受精すること決定された該時期の約3時間以内、該哺乳動物種の雌について適切に受精すること決定された該時期の約1時間以内、からなる群から選択される時間内で、該授精標本の特性を変更する工程を開始する工程を包含する、方法。    (Item 25) A method for production by a mammal according to item 24, wherein the step of changing the characteristics of the fertilized specimen is started and it is determined that fertilization is appropriately performed on females of the mammal species The step of establishing an artificial insemination sample in the vicinity of the estrus stage is as follows: within about 24 hours of the time determined to fertilize properly for the female of the mammalian species, suitable for the female of the mammalian species Properly fertilize females of the mammalian species within approximately 12 hours of the time determined to fertilize, within approximately 8 hours of the time determined to fertilize appropriately for females of the mammalian species The characteristics of the insemination specimen within a time selected from the group consisting of within about 3 hours of the determined period and within about 1 hour of the determined period to properly fertilize females of the mammalian species To change Comprising the step of starting the process.

(項目26) 項目6に記載の哺乳動物の産生する方法であって、前記光学要素およびカテーテルを哺乳動物種の雌の膣を通して導く工程が、以下:    26. The method of producing a mammal according to item 6, wherein the optical element and the catheter are guided through the female vagina of the mammalian species as follows:
a.該光学要素および該カテーテルを、該哺乳動物種の雌の頸部を通して導く工程;  a. Directing the optical element and the catheter through the female neck of the mammal species;
b.該光学要素および該カテーテルを、該哺乳動物種の雌の管腔を通して導く工程;および  b. Directing the optical element and the catheter through the female lumen of the mammalian species; and
c.該光学要素および該カテーテルを、該哺乳動物種の雌の子宮角を通して導く工程、  c. Directing the optical element and the catheter through the uterine horn of a female of the mammalian species;
を包含する、方法。Including the method.

(項目27) 項目26に記載の哺乳動物の産生する方法であって、前記光学要素およびカテーテルを哺乳動物種の雌の頸部を通して導く工程が、該光学要素および該カテーテルを、該哺乳動物種の雌の頸部を通して手動で導く工程を包含し、前記光学要素およびカテーテルを哺乳動物種の雌の管腔を通して導く前記工程が、該光学要素および該カテーテルを、該哺乳動物種の雌の管腔を通して手動で導く工程を包含する、方法。    27. The method of producing a mammal according to claim 26, wherein the step of directing the optical element and catheter through the female neck of the mammalian species includes the optical element and the catheter as the mammalian species. Manually guiding the optical element and catheter through a female lumen of a mammalian species, wherein the step of guiding the optical element and the catheter through the female species female tube A method comprising manually guiding through the cavity.

(項目28) 項目26に記載の哺乳動物の産生する方法であって、照射要素を前記光学要素の付近に挿入する工程をさらに包含する、方法。    28. The method of claim 26, further comprising the step of inserting an illumination element in the vicinity of the optical element.

(項目29) 項目28に記載の哺乳動物の産生する方法であって、前記照射要素をストロボする工程をさらに包含する、方法。    29. The method of producing a mammal according to item 28, further comprising the step of strobing the irradiation element.

(項目30) 項目29に記載の哺乳動物の産生する方法であって、前記光学要素およびカテーテルを哺乳動物種の雌の子宮角を通して導く工程が、該光学要素および該カテーテルを、該哺乳動物種の雌の子宮角を通して、光学的に導く工程を包含する、方法。    30. The method of producing a mammal according to item 29, wherein the step of directing the optical element and catheter through the female uterine horn of a mammalian species comprises the optical element and the catheter as the mammalian species. Optically guiding through the female uterine horn.

(項目31) 項目6に記載の哺乳動物の産生する方法であって、前記哺乳動物種の雌における優性な卵胞を決定する工程をさらに包含する、方法。    (Item 31) The method according to item 6, wherein the method further comprises the step of determining a dominant follicle in the female of the mammal species.

(項目32) 項目6に記載の哺乳動物の産生する方法であって、少なくとも約35mmのサイズの排卵前の卵胞を観察する工程をさらに包含する、方法。    32. A method produced by the mammal of claim 6, further comprising observing a pre-ovulatory follicle with a size of at least about 35 mm.

(項目33) 項目6に記載の哺乳動物の産生する方法であって、ここで、前記カテーテルを哺乳動物種の雌内の子宮卵管接合部の近傍に位置づけする工程が、以下:    (Item 33) The method for producing a mammal according to item 6, wherein the step of positioning the catheter in the vicinity of the uterine fallopian junction in a female of the mammal species is as follows:
a.該子宮卵管接合部の約3〜5cm以内に該カテーテルを配置する工程;次いで  a. Positioning the catheter within about 3-5 cm of the uterine fallopian tube junction;
b.該カテーテルを該子宮卵管接合部に接触させる工程、を包含する、方法。  b. Contacting the catheter with the uterine fallopian tube junction.

(項目34) 項目6に記載の哺乳動物の産生する方法であって、前記哺乳動物種の雌の子宮に濾過空気を導く工程をさらに包含する、方法。    34. The method of producing a mammal according to item 6, further comprising the step of directing filtered air to a female uterus of said mammalian species.

(項目35) 項目34に記載の哺乳動物の産生する方法であって、前記哺乳動物種の雌の子宮から空気を抜く工程をさらに包含する、方法。    (Item 35) The method for producing a mammal according to item 34, further comprising the step of venting air from a female uterus of the mammal species.

(項目36) 項目6に記載の哺乳動物の産生する方法であって、前記カテーテルから押し出された前記人工授精サンプルの少なくとも一部を吸引して、吸引された授精サンプルを作製する工程をさらに包含する、方法。    (Item 36) The method for producing a mammal according to item 6, further comprising the step of aspirating at least a part of the artificial insemination sample pushed out from the catheter to produce an aspirated insemination sample. how to.

(項目37) 哺乳動物の産生する方法であって、該方法は、以下:    (Item 37) A method produced by a mammal, the method comprising:
a.哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程;  a. Collecting sperm cells from a male of a mammalian species;
b.該哺乳動物について天然の授精用量と比較して少数の精子を有する人工授精サンプルを確立する工程;  b. Establishing an artificial insemination sample having a small number of sperm compared to a natural insemination dose for said mammal;
c.該人工授精サンプルをカテーテルに置く工程;  c. Placing the artificial insemination sample on a catheter;
d.該哺乳動物種の雌が適切に授精する時期を決定する工程;  d. Determining when the female of the mammalian species is properly inseminated;
e.光学要素を、該哺乳動物種の雌に膣内挿入する工程;  e. Inserting an optical element into the vagina into the female of the mammalian species;
f.該カテーテルを、該哺乳動物種の雌に膣内挿入する工程;  f. Inserting the catheter intravaginally into the female of the mammalian species;
g.該光学要素および該カテーテルを、該哺乳動物種の雌の膣を介して導く工程;  g. Directing the optical element and the catheter through the female vagina of the mammalian species;
h.子宮卵管接合部を、該哺乳動物種の雌内で光学的に位置確認する工程;  h. Optically locating a uterine fallopian tube junction in a female of the mammalian species;
i.該カテーテルを、該哺乳動物種の雌内の該子宮卵管接合部の近傍に位置づけする工程;  i. Positioning the catheter in the vicinity of the uterine fallopian junction in a female of the mammalian species;
j.該人工授精サンプルの少なくとも一部を、該カテーテルから押し出す工程;  j. Extruding at least a portion of the artificial insemination sample from the catheter;
k.少数の精子を、該哺乳動物種の雌内の該子宮卵管接合部の近傍に位置づけ工程;  k. Positioning a small number of sperm in the vicinity of the uterotubal junction in the female of the mammalian species;
l.該光学要素および該カテーテルを、該哺乳動物種の雌から引き出す工程;  l. Withdrawing the optical element and the catheter from the female of the mammalian species;
m.該哺乳動物種の雌の卵を、従来の子宮体の人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで受精させる工程;  m. Fertilizing said mammalian species of female eggs at a level of success that is statistically comparable to the conventional insemination process of the endometrium;
n.該受精した卵から子孫哺乳動物を産生する工程、  n. Producing a progeny mammal from the fertilized egg;
を包含する、方法。Including the method.

(項目38) 項目37に記載の哺乳動物の産生する方法であって、ここで、前記少数の精子をカテーテルに置く工程が、約1000万未満の精子、約500万未満の精子、約200万未満の精子、約100万未満の精子、約50万未満の精子、および約10万未満の精子からなる群から選択される数の精子を置く工程を包含する、方法。    38. The method of producing a mammal according to item 37, wherein the step of placing the small number of sperm on a catheter comprises less than about 10 million sperm, less than about 5 million sperm, about 2 million. Placing a number of sperm selected from the group consisting of less than sperm, less than about 1 million sperm, less than about 500,000 sperm, and less than about 100,000 sperm.

(項目39) 項目38に記載の哺乳動物の産生する方法であって、前記受精させる工程が、前記哺乳動物種の雌の卵を、従来の子宮体の人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで受精させる工程を包含し、該成功レベルは、以下:    39. The method of producing a mammal according to item 38, wherein the fertilizing step statistically compares the female egg of the mammalian species with a conventional artificial insemination process of a uterine body. Including the step of fertilizing at a level, the success level being:
該哺乳動物種の雌の卵を、少なくとも約0.05以上の統計的なP値で、従来の子宮体の人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで受精させる工程、  Fertilizing a female egg of said mammalian species with a statistical P value of at least about 0.05 or more and at a level of success that is statistically comparable to a conventional uterine artificial insemination process;
該哺乳動物種の雌の卵を、少なくとも0.05以上の統計的なP値で、5億のウマ精子サンプルを使用する従来の子宮体の人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで受精させる工程、  Fertilize a female egg of the mammalian species with a statistical P value of at least 0.05 or more at a level of success that is statistically comparable to the conventional insemination process using a 500 million equine sperm sample The process of
該哺乳動物種の雌の卵を、少なくとも約80%以上の統計的なβ値で、従来の子宮体の人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで受精させる工程、  Fertilizing a female egg of the mammalian species with a statistical β value of at least about 80% or more, at a level of success that is statistically comparable to a conventional uterine artificial insemination process;
該哺乳動物種の雌の卵を、少なくとも約0.05以上の統計的なP値、および少なくとも80%以上の統計的なβ値の両方で、従来の子宮体の人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで受精させる工程、  The mammalian eggs of the mammal are statistically applied to a conventional uterine insemination process with both a statistical P value of at least about 0.05 and a statistical β value of at least 80%. Fertilizing at a comparable success level,
からなる群から決定される、方法。A method determined from the group consisting of:

(項目40) 項目38に記載の哺乳動物の産生する方法であって、前記哺乳動物種の雌の卵を従来の子宮体の人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで受精させる工程が、該哺乳動物種の雌の卵を、少なくとも約75%の成功率、少なくとも約65%の成功率、少なくとも約60%の成功率、少なくとも約50%の成功率、少なくとも約45%の成功率、および該種の従来の人工授精の少なくとも約90%の成功率からなる群から選択される成功レベルで受精させる工程を包含する、方法。    40. The method of producing a mammal of claim 38, comprising fertilizing a female egg of said mammalian species at a success level that is statistically comparable to a conventional uterine artificial insemination process. A female egg of the mammalian species having a success rate of at least about 75%, a success rate of at least about 65%, a success rate of at least about 60%, a success rate of at least about 50%, a success rate of at least about 45%; And fertilizing at a success level selected from the group consisting of at least about 90% success rate of conventional artificial insemination of the species.

(項目41) 項目40に記載の哺乳動物の産生する方法であって、前記受精させる工程が、前記哺乳動物種の雌の卵を、従来の子宮体の人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで受精させる工程を包含し、該成功レベルは、以下:    41. The method of producing a mammal according to item 40, wherein the fertilizing step statistically compares the female egg of the mammalian species statistically with a conventional artificial insemination process of a uterine body. Including the step of fertilizing at a level, the success level being:
該哺乳動物種の雌の卵を、少なくとも約0.05以上の統計的なP値で、従来の子宮体の人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで受精させる工程、  Fertilizing a female egg of said mammalian species with a statistical P value of at least about 0.05 or more and at a level of success that is statistically comparable to a conventional uterine artificial insemination process;
該哺乳動物種の雌の卵を、少なくとも0.05以上の統計的なP値で、5億のウマ精子サンプルを使用する従来の子宮体の人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで受精させる工程、  Fertilize a female egg of the mammalian species with a statistical P value of at least 0.05 or more at a level of success that is statistically comparable to the conventional insemination process using a 500 million equine sperm sample The process of
該哺乳動物種の雌の卵を、少なくとも約80%以上の統計的なβ値で、従来の子宮体の人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで受精させる工程、  Fertilizing a female egg of the mammalian species with a statistical β value of at least about 80% or more, at a level of success that is statistically comparable to a conventional uterine artificial insemination process;
該哺乳動物種の雌の卵を、少なくとも約0.05以上の統計的なP値、および少なくとも80%以上の統計的なβ値の両方で、従来の子宮体の人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで受精させる工程、  The mammalian eggs of the mammal are statistically applied to a conventional uterine insemination process with both a statistical P value of at least about 0.05 and a statistical β value of at least 80%. Fertilizing at a comparable success level,
からなる群から決定される、方法。A method determined from the group consisting of:

(項目42) 項目40に記載の哺乳動物の産生する方法であって、前記哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程が、ウシ、ウマまたはブタからなる群から選択される哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程を包含する、方法。    (Item 42) The method for producing a mammal according to item 40, wherein the step of collecting sperm cells from a male of the mammal species is selected from the group consisting of a cow, a horse or a pig. Collecting sperm cells from the male.

(項目43) 項目42の哺乳動物の産生する方法であって、前記カテーテルを哺乳動物種の雌内の子宮卵管接合部の近傍に位置づけする工程が、該カテーテルを該哺乳動物種の雌内の子宮卵管接合部の近傍の表面の下に挿入する工程を包含し、前記人工授精サンプルの少なくとも一部を哺乳動物種の雌内の子宮卵管接合部の近傍の表面の下の該カテーテルから押し出す工程が、該人工授精サンプルの少なくとも一部を、該哺乳動物種の雌内の子宮卵管接合部の近傍の表面の下の該カテーテルから押し出す工程を包含し、前記吸引された授精サンプルの少なくとも一部を哺乳動物種の雌内の子宮卵管接合部の近傍に位置づけ工程が、該人工授精サンプルの少なくとも一部を、該哺乳動物種の雌内の子宮卵管接合部の近傍の表面の下に置く工程を包含する、方法。    (Item 43) The method for producing a mammal according to item 42, wherein the step of positioning the catheter in the vicinity of the uterine fallopian tube junction in the female of the mammalian species includes the catheter in the female of the mammalian species. Inserting the catheter under the surface in the vicinity of the uterine fallopian junction in a female of a mammalian species, comprising Extruding from the catheter under the surface near the uterine fallopian junction in a female of the mammalian species, wherein the step of extruding from the artificial insemination sample comprises the aspirated insemination sample Positioning at least a portion of the artificial insemination sample in the vicinity of the uterine fallopian junction in the female of the mammalian species. The process of placing under the surface It encompasses methods.

(項目44) 項目42に記載の哺乳動物の産生する方法であって、授精に望ましい精子および授精標本において子宮鏡に適合性の媒体を使用して、子宮鏡を用いる受精に適合性の容量で該授精標本を確立する前記工程が、新鮮な精子を使用して人工授精サンプルを確立する工程を包含する、方法。    (Item 44) A method for the production of a mammal according to item 42, wherein a medium compatible with a hysteroscope is used in a sperm desired for insemination and an insemination sample, and in a capacity compatible with fertilization using a hysteroscope. A method wherein the step of establishing the insemination specimen comprises establishing an artificial insemination sample using fresh sperm.

(項目45) 項目40に記載の哺乳動物の産生する方法であって、前記収集された精子細胞から、授精する可能性の高そうな精子を選択する工程をさらに包含する、方法。    (Item 45) A method for production by a mammal according to item 40, further comprising the step of selecting a sperm likely to be fertilized from the collected sperm cells.

(項目46) 項目45に記載の哺乳動物の産生する方法であって、前記受精に望ましい精子を選択する工程が、前記哺乳動物種の雄から収集されたより運動性の精子を濃縮する工程を包含する、方法。    (Item 46) The method for producing a mammal according to item 45, wherein the step of selecting a sperm desired for fertilization includes a step of concentrating more motile sperm collected from a male of the mammal species. how to.

(項目47) 項目46に記載の哺乳動物の産生する方法であって、前記哺乳動物種の雄から収集されたより運動性の精子を濃縮する工程が、該精子をPercoll勾配で遠心分離する工程を包含する、方法。    (Item 47) The method for producing a mammal according to item 46, wherein the step of concentrating the more motile sperm collected from the male of the mammal species comprises the step of centrifuging the sperm with a Percoll gradient. The method of inclusion.

(項目48) 項目47に記載の哺乳動物の産生する方法であって、前記精子をPercoll勾配で遠心分離する工程が、90:45%のPercoll勾配を使用する工程を包含する、方法。    48. The method of claim 47, wherein the step of centrifuging the sperm with a Percoll gradient comprises using a 90: 45% Percoll gradient.

(項目49) 項目46に記載の哺乳動物の産生する方法であって、前記哺乳動物種の雄から収集されたより運動性の精子を濃縮する工程が、該精子の濃度を最初の濃度の約2倍未満に制限する工程を包含する、方法。    49. The method of claim 46, wherein the step of concentrating more motile sperm collected from the male male species is reduced to a sperm concentration of about 2 of the initial concentration. A method comprising the step of limiting to less than twice.

(項目50) 項目40に記載の哺乳動物の産生する方法であって、前記哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程が、ウシ、ウマまたはブタからなる群から選択される哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程を包含する、方法。    (Item 50) The method for producing a mammal according to item 40, wherein the step of collecting sperm cells from a male of the mammal species is selected from the group consisting of cattle, horses or pigs. Collecting sperm cells from the male.

(項目51) 項目42に記載の哺乳動物の産生する方法であって、前記確立する工程が、約30μlと150μlとの間、約500μl未満、約230μl、および約100μlからなる群から選択される容量で、授精標本を確立する工程を包含する、方法。    51. The method of producing a mammal according to item 42, wherein the establishing step is selected from the group consisting of between about 30 μl and 150 μl, less than about 500 μl, about 230 μl, and about 100 μl. Establishing a fertilized specimen by volume.

(項目52) 項目40に記載の哺乳動物の産生する方法であって、前記哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程が、哺乳動物種の雄から精巣上体精子細胞を収集する工程を包含する、方法。    (Item 52) The method for producing a mammal according to item 40, wherein the step of collecting sperm cells from the male of the mammalian species comprises the step of collecting epididymal sperm cells from the male of the mammalian species. The method of inclusion.

(項目53) 項目42に記載の哺乳動物の産生する方法であって、前記哺乳動物の天然の授精用量と比較して少数の精子を有する人工授精サンプルを確立する工程が、子宮鏡検査に適合性の媒体を使用して人工授精サンプルを確立する工程を包含する、方法。    (Item 53) The method for producing a mammal according to item 42, wherein the step of establishing an artificial insemination sample having a small number of sperm compared to a natural insemination dose of the mammal is adapted for hysteroscopy A method comprising establishing an artificial insemination sample using a sex medium.

(項目54) 項目53に記載の哺乳動物の産生する方法であって、前記子宮鏡検査に適合性の媒体を使用して人工授精サンプルを確立する工程が、脱脂乳媒体を使用する工程を包含する、方法。    (Item 54) The method for producing a mammal according to item 53, wherein the step of establishing an artificial insemination sample using a medium compatible with hysteroscopy includes a step of using a skim milk medium how to.

(項目55) 項目53に記載の哺乳動物の産生する方法であって、前記子宮鏡検査に適合性の媒体を使用して人工授精サンプルを確立する工程が、TALP媒体、HEPES緩衝化タイロード媒体、およびアンドロヘップ媒体からなる群から選択される媒体を使用する工程を包含する、方法。    (Item 55) The method for producing a mammal according to item 53, wherein the step of establishing an artificial insemination sample using a medium compatible with hysteroscopy includes a TALP medium, a HEPES buffered tyrode medium And using a medium selected from the group consisting of androhep medium.

(項目56) 項目53に記載の哺乳動物の産生方法であって、ここで、子宮鏡に適合性の培地を利用して人工授精サンプルを確立する前記工程が、カテーテルで調整した粘性を有する培地を利用する工程を包含する、方法。    (Item 56) The method for producing a mammal according to item 53, wherein the step of establishing an artificial insemination sample using a medium compatible with a hysteroscope has a viscosity adjusted with a catheter. A method comprising the step of utilizing

(項目57) 項目40に記載の哺乳動物の産生方法であって、該方法は、前記カテーテルから押出される前記人工授精サンプルの少なくとも一部を吸引して、吸引受精サンプルを作製する工程をさらに包含する、方法。    (Item 57) The method for producing a mammal according to item 40, wherein the method further comprises a step of aspirating at least a part of the artificial insemination sample extruded from the catheter to produce an aspiration fertilization sample. The method of inclusion.

(項目58) 項目40、97、134、147、155、180、194、212、225に記載の哺乳動物の産生方法であって、該方法は、性別特徴によって前記精子細胞を分類する工程をさらに包含し、ここで、該哺乳動物の自然な授精量と比較して少ない数の精子を有する人工授精サンプルを確立する前記工程が、該哺乳動物の自然な授精量と比較して少ない数の精子を有する性別選択した人工授精サンプルを確立する工程を包含する、方法。    (Item 58) The method for producing a mammal according to item 40, 97, 134, 147, 155, 180, 194, 212, 225, wherein the method further comprises the step of classifying the sperm cells according to sex characteristics. Wherein the step of establishing an artificial insemination sample having a low number of spermatozoa relative to the mammal's natural insemination amount comprises a low number of spermatozoa relative to the mammal's natural insemination amount Establishing a sex-selected artificial insemination sample having:

(項目59) 項目58に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記ある1種の哺乳動物の雄から精子細胞を収集する工程が、ウシ科動物、ウマ科動物、またはブタからなる群より選択される1種の哺乳動物の雄から精子細胞を収集する工程を包含する、方法。    (Item 59) The method for producing a mammal according to item 58, wherein the step of collecting sperm cells from the male of one kind of mammal is selected from the group consisting of bovines, equines, or pigs. Collecting sperm cells from one selected mammalian male.

(項目60) 項目58に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記精子細胞を凍結する工程をさらに包含する、方法。    (Item 60) The method for producing a mammal according to Item 58, further comprising the step of freezing the sperm cells.

(項目61) 項目60に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記ある1種の哺乳動物の雄から精子細胞を収集する工程が、ウシ科動物、ウマ科動物、またはブタからなる群より選択される1種の哺乳動物の雄から精子細胞を収集する工程を包含する、方法。    (Item 61) The method for producing a mammal according to item 60, wherein the step of collecting sperm cells from the male of one kind of mammal is from the group consisting of bovine, equine, or swine. Collecting sperm cells from one selected mammalian male.

(項目62) 前記精子細胞を凍結する工程をさらに包含する、項目40、97、134、147、155、180、194、212、225に記載の哺乳動物の産生方法。    (Item 62) The method for producing a mammal according to items 40, 97, 134, 147, 155, 180, 194, 212, 225, further comprising a step of freezing the sperm cells.

(項目63) 項目62に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記ある1種の哺乳動物の雄から精子細胞を収集する工程が、ウシ科動物、ウマ科動物、またはブタからなる群より選択される1種の哺乳動物の雄から精子細胞を収集する工程を包含する、方法。    (Item 63) The method for producing a mammal according to item 62, wherein the step of collecting sperm cells from the male of one kind of mammal is selected from the group consisting of bovines, equines, or pigs. Collecting sperm cells from one selected mammalian male.

(項目64) 項目40、294、235、225、212、204、194、180、155、147、134に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記吸引された授精サンプルの少なくとも一部を、前記種の哺乳動物の雌内の子宮卵管接合部の近位に置く工程が、該吸引された授精サンプルの少なくとも一部を、該種の哺乳動物の雌内の子宮卵管接合部の陰窩に置く工程を包含する、方法。    (Item 64) The method for producing a mammal according to item 40, 294, 235, 225, 212, 204, 194, 180, 155, 147, 134, wherein at least a part of the aspirated insemination sample is Placing the proximate uterine fallopian junction in a female mammal of the species comprises at least a portion of the aspirated insemination sample in the shadow of the uterine fallopian junction in the female mammal of the species. A method comprising the step of placing in a fossa.

(項目65) 項目40、294、235、225、212、204、194、180、155、147、134に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記種の哺乳動物の雌内の子宮卵管接合部の近位の表面に対する前記精子の付着を促進させる工程をさらに包含する、方法。    (Item 65) The method for producing a mammal according to item 40, 294, 235, 225, 212, 204, 194, 180, 155, 147, 134, wherein the uterine fallopian tube in a female of said species The method further comprises promoting adhesion of the sperm to the proximal surface of the junction.

(項目66) 項目65に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記種の哺乳動物の雌内の子宮卵管接合部の近位の表面に対する前記精子の付着を促進させる工程が、前記人工授精サンプルの少なくとも一部からフロスを作製する工程を包含する、方法。    66. The method of producing a mammal according to item 65, wherein the step of promoting adhesion of the sperm to a proximal surface of a uterine fallopian junction in a female mammal of the species comprises the artificial Making a floss from at least a portion of an insemination sample.

(項目67) 項目40、294、235、225、212、204、194、180、155、147、134に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記人工授精サンプルの少なくとも一部からフロスを作製する工程をさらに包含する、方法。    (Item 67) The method for producing a mammal according to item 40, 294, 235, 225, 212, 204, 194, 180, 155, 147, 134, wherein floss is prepared from at least a part of the artificial insemination sample The method further comprising the step of:

(項目68) 項目40、294、235、225、212、204、194、180、155、147、134、97に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記授精に望ましい精子および授精標本において子宮鏡に適合性の媒体を使用して、子宮鏡を用いる授精に適合性の容量で授精標本を確立する前記工程が、該精子細胞を希釈する工程を包含する、方法。    (Item 68) The method for producing a mammal according to item 40, 294, 235, 225, 212, 204, 194, 180, 155, 147, 134, 97, wherein the uterus is used in a sperm and an insemination specimen desirable for the insemination A method wherein the step of establishing an insemination specimen in a volume compatible for insemination using a hysteroscope using a mirror compatible medium comprises diluting the sperm cells.

(項目69) 項目68に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記精子細胞を希釈する工程が、2:1以下の比、5:1以下の比、10:1以下の比からなる群より選択される該精子細胞の比に、脱脂乳培地を用いて、TALP培地を用いて、HEPES緩衝化Tyrode培地を用いて、およびAndrohep培地を用いて希釈する工程を包含する、方法。    (Item 69) The method for producing a mammal according to item 68, wherein the step of diluting the sperm cells comprises a ratio of 2: 1 or less, a ratio of 5: 1 or less, or a ratio of 10: 1 or less. Diluting with skim milk medium, with TALP medium, with HEPES-buffered Tyrode medium and with Androhep medium to a ratio of said sperm cells more selected.

(項目70) 項目69に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記授精に望ましい精子および授精標本において子宮鏡に適合性の媒体を使用して、子宮鏡を用いる授精に適合性の容量で授精標本を確立する前記工程が、おおよそ室温にて該授精標本を冷却する工程をさらに包含する、方法。    (Item 70) The method for producing a mammal according to item 69, wherein a medium compatible with a hysteroscope is used in a sperm and an insemination specimen that are desirable for insemination, and a volume compatible with insemination using a hysteroscope The method wherein the step of establishing the insemination specimen further comprises the step of cooling the insemination specimen at about room temperature.

(項目71) 項目40、294、235、225、212、204、194、180、155、147、134、97に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記収集された精子細胞から、授精する可能性の高そうな精子細胞を選択する工程をさらに包含する、方法。    (Item 71) The method for producing a mammal according to item 40, 294, 235, 225, 212, 204, 194, 180, 155, 147, 134, 97, wherein fertilization is performed from the collected sperm cells. A method further comprising selecting sperm cells that are likely.

(項目72) 項目71に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記授精に望ましい精子を選択する工程が、前記種の哺乳動物の雄から収集されたより運動性の精子を濃縮する工程を包含する、方法。    (Item 72) The method for producing a mammal according to item 71, wherein the step of selecting sperm desirable for insemination includes the step of concentrating more motile sperm collected from a male mammal of the species. how to.

(項目73) 項目72に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記種の哺乳動物の雄から収集されたより運動性の精子を濃縮する工程が、該精子をPercoll勾配で遠心分離する工程を包含する、方法。    73. The method of producing a mammal according to item 72, wherein the step of concentrating the more motile sperm collected from the male mammal of the species comprises the step of centrifuging the sperm with a Percoll gradient. The method of inclusion.

(項目74) 項目73に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記精子をPercoll勾配で遠心分離する工程が、90:45%のPercoll勾配を使用する工程を包含する、方法。    74. The method of producing a mammal of claim 73, wherein centrifuging the sperm with a Percoll gradient comprises using a 90: 45% Percoll gradient.

(項目75) 項目72、74に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記精子をPercoll勾配で遠心分離する工程が、以下:    (Item 75) The method for producing a mammal according to items 72 and 74, wherein the step of centrifuging the sperm with a Percoll gradient is as follows:
a.約5分間約200gにて該Percoll勾配で該精子を遠心分離する工程;および  a. Centrifuging the sperm with the Percoll gradient at about 200 g for about 5 minutes; and
b.約10分間約800gにて該Percoll勾配で該精子を遠心分離する工程  b. Centrifuging the sperm with the Percoll gradient at about 800 g for about 10 minutes
をさらに包含する、方法。Further comprising a method.

(項目76) 項目72に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記種の哺乳動物の雄から収集されたより運動性の精子を濃縮する工程が、該精子の濃度を最初の濃度の約2倍未満に制限する工程を包含する、方法。    76. The method of producing a mammal according to item 72, wherein the step of concentrating more motile sperm collected from a male mammal of said species reduces the sperm concentration to about 2 of the initial concentration. A method comprising the step of limiting to less than twice.

(項目77) 項目72に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記確立する工程が、約30μlと150μlとの間、約500μl未満、約230μl、および約100μlからなる群から選択される容量で、授精標本を確立する工程を包含する、方法。    77. The method of producing a mammal according to item 72, wherein the establishing step is a volume selected from the group consisting of between about 30 μl and 150 μl, less than about 500 μl, about 230 μl, and about 100 μl. A method comprising establishing an insemination specimen.

(項目78) 項目40、294、235、225、212、204、194、180、155、147、134、97に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記種の哺乳動物の雌の発情期を決定する工程が、該種の哺乳動物の雌において発情を誘導する工程を包含する、方法。    (Item 78) The method for producing a mammal according to item 40, 294, 235, 225, 212, 204, 194, 180, 155, 147, 134, 97, wherein the female is in estrus. Determining the estrus in a mammalian female of said species.

(項目79) 項目78に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記種の哺乳動物の雌において発情を誘導する工程が、以下:    (Item 79) The method for producing a mammal according to item 78, wherein the step of inducing estrus in a female mammal of the above species is as follows:
a.該種の哺乳動物の雌に、約10日間毎日、プロゲストゲン処理を与える工程;および  a. Providing said female mammal a progestogen treatment daily for about 10 days; and
b.該種の哺乳動物の雌に、約10日間毎日、プロゲストゲン処理を与える工程を達成するおおよそ10日目に、少なくとも1回クロプロステノール処理を与える工程、  b. Providing cloprostenol treatment at least once on approximately day 10 to achieve the step of providing progestogen treatment to a mammal female of this kind daily for about 10 days;
を包含する、方法。Including the method.

(項目80) 項目40、294、235、225、212、204、194、180、155、147、134、97に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記授精標本の特性を変更する工程を開始して、該種の哺乳動物の雌が適切に受精することが決定された時期付近で、発情期付近にある人工授精サンプルを確立する工程をさらに包含する、方法。    (Item 80) The method for producing a mammal according to item 40, 294, 235, 225, 212, 204, 194, 180, 155, 147, 134, 97, the step of changing the characteristics of the insemination specimen Starting and establishing an artificial insemination sample near the estrus period, near the time when it has been determined that the female mammal of this species is properly fertilized.

(項目81) 項目80に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記授精標本の特性を変更する工程を開始して、前記種の哺乳動物の雌が適切にすることが決定された時間付近で、発情期付近にある人工授精サンプルを確立する工程が、以下:該種の哺乳動物の雌が適切に受精すること決定された該時期の約24時間以内、該種の哺乳動物の雌が適切に受精すること決定された該時期の約12時間以内、該種の哺乳動物の雌が適切に受精すること決定された該時期の約8時間以内、該種の哺乳動物の雌が適切に受精すること決定された該時期の約3時間以内、および該種の哺乳動物の雌が適切に受精すること決定された該時期の約1時間以内、からなる群から選択される時間内で、該授精標本の特性を変更する工程を開始する工程を包含する、方法。    (Item 81) The method for producing a mammal according to item 80, wherein the step of changing the characteristics of the insemination specimen is started, and around the time when the mammal female of the species is determined to be suitable. The step of establishing an artificial insemination sample in the vicinity of the estrus period is as follows: within about 24 hours of the time when the mammal female of the species has been determined to fertilize properly, the mammal female of the species Within about 12 hours of the time determined to fertilize properly, within about 8 hours of the time when the female mammal of the species is determined to fertilize properly, the female mammal of the species Within a time period selected from the group consisting of within about 3 hours of the time period determined to fertilize and within about 1 hour of the time period when the female female of the species has been determined to fertilize properly, Including the step of initiating a step of changing the characteristics of the insemination specimen Method.

(項目82) 項目40、294、235、225、212、204、194、180、155、147、134、97に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記光学要素およびカテーテルを前記種の哺乳動物の雌の膣を通して導入する工程が、以下:    (Item 82) The method for producing a mammal according to item 40, 294, 235, 225, 212, 204, 194, 180, 155, 147, 134, 97, wherein the optical element and the catheter are of the kind of mammal The steps of introducing through the female vagina of the animal are as follows:
a.該光学要素および該カテーテルを、該種の哺乳動物の雌の頸部を通して導入する工程;  a. Introducing the optical element and the catheter through the neck of a female mammal of the species;
b.該光学要素および該カテーテルを、該種の哺乳動物の雌の管腔を通して導入する工程;および  b. Introducing the optical element and the catheter through the lumen of a female mammal of the species; and
c.該光学要素および該カテーテルを、該種の哺乳動物の雌の子宮角を通して導入する工程、  c. Introducing the optical element and the catheter through the female uterine horn of the species;
を包含する、方法。Including the method.

(項目83) 項目82に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記光学要素およびカテーテルを前記種の哺乳動物の雌の頸部を通して導入する工程が、該光学要素および該カテーテルを、該種の哺乳動物の雌の頸部を通して手動で導入する工程を包含し、前記光学要素およびカテーテルを該種の哺乳動物の雌の管腔を通して導入する前記工程が、該光学要素および該カテーテルを、該種の哺乳動物の雌の管腔を通して手動で導入する工程を包含する、方法。    83. The method of producing a mammal according to item 82, wherein the step of introducing the optical element and the catheter through the female neck of the mammal of the species includes the optical element and the catheter. Manually introducing the optical element and catheter through the lumen of a female mammal of the species, the step of introducing the optical element and catheter through the lumen of the female mammal of the species Manual introduction through the lumen of a female mammal of the species.

(項目84) 項目82に記載の哺乳動物の産生方法であって、照射要素を前記光学要素の付近に挿入する工程をさらに包含する、方法。    84. The method of producing a mammal according to item 82, further comprising the step of inserting an illumination element in the vicinity of the optical element.

(項目85) 項目84に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記照射要素をストロボする工程をさらに包含する、方法。    85. The method of producing a mammal according to item 84, further comprising the step of strobing the irradiation element.

(項目86) 項目85に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記光学要素およびカテーテルを前記種の哺乳動物の雌の子宮角を通して導入する工程が、該光学要素および該カテーテルを、該種の哺乳動物の雌の子宮角を通して、光学的に導く工程を包含する、方法。    86. The method of producing a mammal according to item 85, wherein the step of introducing the optical element and the catheter through the uterine horn of a female mammal of the species includes the optical element and the catheter as the species. Optically guiding through the uterine horn of a female mammal.

(項目87) 項目40、294、235、225、212、204、194、180、155、147、134、97に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記種の哺乳動物の雌における優性な卵胞を決定する工程をさらに包含する、方法。    (Item 87) The method for producing a mammal according to item 40, 294, 235, 225, 212, 204, 194, 180, 155, 147, 134, 97, wherein the method is dominant in a female mammal of the species. A method further comprising determining a follicle.

(項目88) 項目40、294、235、225、212、204、194、180、155、147、134、97に記載の哺乳動物の産生方法であって、少なくとも約35mmのサイズの排卵前の卵胞を観察する工程をさらに包含する、方法。    88. A method of producing a mammal according to item 40, 294, 235, 225, 212, 204, 194, 180, 155, 147, 134, 97, wherein the follicular follicle is at least about 35 mm in size before ovulation. Further comprising the step of observing.

(項目89) 項目40、294、235、225、212、204、194、180、155、147、134、97に記載の哺乳動物の産生方法であって、ここで、前記カテーテルを前記種の哺乳動物の雌内の子宮卵管接合部の付近に位置決めする工程が、以下:    89. The method of producing a mammal according to item 40, 294, 235, 225, 212, 204, 194, 180, 155, 147, 134, 97, wherein the catheter is a mammal of the species Positioning in the vicinity of the uterine fallopian tube junction in the female of the animal includes the following:
a.該子宮卵管接合部の約3〜5cm以内に該カテーテルを位置決めする工程;次いで  a. Positioning the catheter within about 3-5 cm of the uterine fallopian junction;
b.該カテーテルを該子宮卵管接合部に接触させる工程、を包含する、方法。  b. Contacting the catheter with the uterine fallopian tube junction.

(項目90) 項目40、294、235、225、212、204、194、180、155、147、134、97に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記種の哺乳動物の雌の子宮に濾過空気を導入する工程をさらに包含する、方法。    (Item 90) The method for producing a mammal according to item 40, 294, 235, 225, 212, 204, 194, 180, 155, 147, 134, 97, wherein the mammal is a female uterus of the species The method further comprising introducing filtered air.

(項目91) 項目90に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記種の哺乳動物の雌の子宮から空気を抜く工程をさらに包含する、方法。    91. The method of producing a mammal according to item 90, further comprising the step of venting air from a female uterus of said species of mammal.

(項目92) 項目40、294、235、225、212、204、194、180、155、147、134、97に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記カテーテルから押出された前記人工授精サンプルの少なくとも一部を吸引して、吸引された授精サンプルを作製する工程をさらに包含する、方法。    (Item 92) The method for producing a mammal according to item 40, 294, 235, 225, 212, 204, 194, 180, 155, 147, 134, 97, wherein the artificial insemination sample is extruded from the catheter The method further comprises the step of aspirating at least a portion of the sample to produce a sucked insemination sample.

(項目93) 哺乳動物を生成する方法であって、    93. A method for producing a mammal, comprising:
a.ある1種の哺乳動物の雄から精子細胞を収集する工程;  a. Collecting sperm cells from one mammalian male;
b.該精子細胞の少なくともいくらかを利用して、人工授精サンプルを確立する工程;  b. Establishing an artificial insemination sample utilizing at least some of the sperm cells;
c.カテーテル中に該人工授精サンプルを配置する工程;  c. Placing the artificial insemination sample in a catheter;
d.該種の該哺乳動物の雌が適切に受精する時期を決定する工程;  d. Determining when the mammal female of the species is properly fertilized;
e.該種の該哺乳動物の該雌中に光学要素を膣内挿入する工程;  e. Inserting an optical element into the vagina of the mammal of the species;
f.該種の該哺乳動物の該雌中に該カテーテルを膣内挿入する工程;  f. Inserting the catheter intravaginally into the female of the mammal of the species;
g.該種の該哺乳動物の該雌の該膣を通して、該光学要素および該カテーテルを導く工程;  g. Directing the optical element and the catheter through the vagina of the female of the mammal of the species;
h.該種の該哺乳動物の該雌内にて、子宮卵管接合部を光学的に位置付ける工程;  h. Optically positioning a uterine fallopian tube junction within the female of the mammal of the species;
i.該種の該哺乳動物の該雌内の該子宮卵管接合部の近傍の表面の下に、該カテーテルを挿入する工程;  i. Inserting the catheter under the surface near the uterine fallopian junction in the female of the mammal of the species;
j.該種の該哺乳動物の該雌内の該子宮卵管接合部の近傍にある該表面の下に、該カテーテルから、該人口授精サンプルの少なくとも一部を押出す工程;  j. Extruding at least a portion of the insemination sample from the catheter under the surface in the vicinity of the uterine fallopian junction in the female of the mammal of the species;
k.該種の該哺乳動物の該雌内の該子宮卵管接合部の近傍の該表面の下に、該人口授精サンプルの少なくとも一部を置く工程;  k. Placing at least a portion of the artificial insemination sample under the surface near the uterine fallopian junction in the female of the mammal of the species;
l.該種の該哺乳動物の該雌から、該光学要素および該カテーテルを引き出す工程;  l. Withdrawing the optical element and the catheter from the female of the mammal of the species;
m.該種の該哺乳動物の該雌の卵を受精させる工程;ならびに  m. Fertilizing the female egg of the mammal of the species; and
n.該受精卵から、子孫の哺乳動物を生成する工程;  n. Generating offspring mammals from the fertilized eggs;
を包含する、方法。Including the method.

(項目94) 項目93に記載の哺乳動物を生成する方法であって、前記カテーテル中に前記人工授精サンプルを配置する工程が、該カテーテル中に少ない数の精子を配置する工程を包含する、方法。    94. A method of generating a mammal according to item 93, wherein the step of placing the artificial insemination sample in the catheter comprises the step of placing a small number of sperm in the catheter. .

(項目95) 項目94に記載の哺乳動物を生成する方法であって、前記カテーテル中に少ない数の精子を配置する工程が、約1000万個未満の精子、約500万個未満の精子、約200万個未満の精子、約100万個未満の精子、約50万個未満の精子、および約10万個未満の精子からなる群より選択される数の精子を配置する工程を包含する、方法。    95. The method of generating a mammal of item 94, wherein the step of placing a small number of sperm in the catheter comprises less than about 10 million sperm, less than about 5 million sperm, Placing a number of sperm selected from the group consisting of less than 2 million sperm, less than about 1 million sperm, less than about 500,000 sperm, and less than about 100,000 sperm. .

(項目96) 項目95に記載の哺乳動物を生成する方法であって、従来の子宮体人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルでの前記種の哺乳動物の雌の卵を受精させる工程が、該種の該哺乳動物の該雌の卵を受精させる工程を包含し、該成功レベルが、    96. A method for producing a mammal according to item 95, comprising fertilizing a female egg of said species with a success level statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process. Fertilizing the female egg of the mammal of the species, wherein the success level comprises:
少なくとも約0.05より大きいかまたは少なくとも約0.05に等しい統計的P値で、従来の子宮体人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで、該種の該哺乳動物の該雌の卵を受精させる工程、  The female egg of the mammal of the species at a level of success that is statistically comparable to a conventional endometrial insemination process with a statistical P value greater than or equal to at least about 0.05. Fertilization process,
少なくとも約0.05より大きいかまたは少なくとも約0.05に等しい統計的P値で、5億個のウマ精子サンプルを使用する従来の子宮体人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで、該種の該哺乳動物の該雌の卵を受精させる工程、  At a level of success that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process using 500 million horse sperm samples with a statistical P value greater than or equal to at least about 0.05, Fertilizing the female egg of the mammal of the species;
少なくとも約80%より大きいかまたは少なくとも約80%に等しい統計的β値で、従来の子宮体人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで、該種の該哺乳動物の該雌の卵を受精させる工程、  Fertilize the female egg of the mammal of the species with a statistical β value greater than or equal to at least about 80% and a statistically comparable level to the traditional endometrial artificial insemination process The process of
少なくとも約0.05より大きいかまたは少なくとも約0.05に等しい統計的P値および少なくとも約80%より大きいかまたは少なくとも約80%に等しい統計的β値の両方で、従来の子宮体人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで、該種の該哺乳動物の該雌の卵を受精させる工程、  Conventional endometrial insemination process with both a statistical P value greater than or equal to at least about 0.05 and a statistical β value greater than at least about 80% or equal to at least about 80% Fertilizing the female egg of the mammal of the species with a success level statistically comparable to
からなる群より選択される、方法。A method selected from the group consisting of:

(項目97) 項目95に記載の哺乳動物を生成する方法であって、前記受精させる工程が、従来の子宮体人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで、前記種の前記哺乳動物の前記雌の卵を受精させる工程を包含し、該成功レベルが、少なくとも約75%の成功率、少なくとも約65%の成功率、少なくとも約60%の成功率、少なくとも約50%の成功率、少なくとも約45%の成功率、および前記種についての従来の人工授精の少なくとも約90%からなる群より選択される、方法。    97. A method of generating a mammal according to item 95, wherein the fertilization step is performed at a success level statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process, and the mammal of the species Fertilizing a female egg, the success level being at least about 75% success rate, at least about 65% success rate, at least about 60% success rate, at least about 50% success rate, at least about A method selected from the group consisting of a success rate of 45% and at least about 90% of conventional artificial insemination for said species.

(項目98) 項目97に記載の哺乳動物を生成する方法であって、前記受精させる工程が、従来の子宮体人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで、前記種の前記哺乳動物の前記雌の卵を受精させる工程を包含し、該成功レベルが、    98. A method of generating a mammal according to item 97, wherein the fertilizing step is performed at a success level statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process, wherein the mammal of the species Including fertilizing a female egg, wherein the success level is
少なくとも約0.05より大きいかまたは少なくとも約0.05に等しい統計的P値で、従来の子宮体人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで、該種の該哺乳動物の該雌の卵を受精させる工程、  The female egg of the mammal of the species at a level of success that is statistically comparable to a conventional endometrial insemination process with a statistical P value greater than or equal to at least about 0.05. Fertilization process,
少なくとも約0.05より大きいかまたは少なくとも約0.05に等しい統計的P値で、5億個のウマ精子サンプルを使用する従来の子宮体人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで、該種の該哺乳動物の該雌の卵を受精させる工程、  At a level of success that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process using 500 million horse sperm samples with a statistical P value greater than or equal to at least about 0.05, Fertilizing the female egg of the mammal of the species;
少なくとも約80%より大きいかまたは少なくとも約80%に等しい統計的β値で、従来の子宮体人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで、該種の該哺乳動物の該雌の卵を受精させる工程、  Fertilize the female egg of the mammal of the species with a statistical β value greater than or equal to at least about 80% and a statistically comparable level to the traditional endometrial artificial insemination process The process of
少なくとも約0.05より大きいかまたは少なくとも約0.05に等しい統計的P値および少なくとも約80%より大きいかまたは少なくとも約80%に等しい統計的β値の両方で、従来の子宮体人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで、該種の該哺乳動物の該雌の卵を受精させる工程、  Conventional endometrial insemination process with both a statistical P value greater than or equal to at least about 0.05 and a statistical β value greater than at least about 80% or equal to at least about 80% Fertilizing the female egg of the mammal of the species with a success level statistically comparable to
からなる群より決定される、方法。A method determined from the group consisting of:

(項目99) 項目97に記載の哺乳動物を生成する方法であって、前記ある1種の哺乳動物の雄から精子細胞を収集する工程が、ウシ科動物、ウマ科動物、またはブタからなる群より選択される1種の哺乳動物の雄から精子細胞を収集する工程を包含する、方法。    (Item 99) The method for producing a mammal according to item 97, wherein the step of collecting sperm cells from the male of one kind of mammal is a group consisting of a bovine animal, an equine animal, or a pig. Collecting sperm cells from one more selected male male.

(項目100) 項目93に記載の哺乳動物を生成する方法であって、前記収集された精子細胞から、授精をより達成しそうな精子を選択する工程をさらに包含する、方法。    (Item 100) A method for producing the mammal according to item 93, further comprising the step of selecting spermatozoa more likely to achieve insemination from the collected sperm cells.

(項目101) 項目100に記載の哺乳動物を生成する方法であって、前記授精に望ましい精子を選択する工程が、前記哺乳動物の雄の種から収集されたより運動性の精子を濃縮する工程を包含する、方法。    101. The method of generating a mammal of item 100, wherein the step of selecting sperm desired for insemination comprises the step of concentrating more motile sperm collected from the male species of the mammal. The method of inclusion.

(項目102) 項目101に記載の哺乳動物を生成する方法であって、前記哺乳動物の雄の種から収集されたより運動性の精子を濃縮する工程が、Percoll勾配によって該精子を遠心分離する工程を包含する、方法。    102. A method of generating a mammal according to item 101, wherein the step of concentrating more motile sperm collected from the male species of the mammal is a step of centrifuging the sperm with a Percoll gradient. Including the method.

(項目103) 項目102に記載の哺乳動物を生成する方法であって、前記Percoll勾配によって該精子を遠心分離する工程が、90:45%Percoll勾配を利用する工程を包含する、方法。    103. The method of generating a mammal of claim 102, wherein the step of centrifuging the sperm with a Percoll gradient comprises utilizing a 90: 45% Percoll gradient.

(項目104) 項目101に記載の哺乳動物を生成する方法であって、前記哺乳動物の雄の種から収集されたより運動性の精子を濃縮する工程が、該精子の濃度を、開始濃度の約2倍未満に制限する工程を包含する、方法。    104. A method of producing a mammal according to item 101, wherein the step of concentrating more motile sperm collected from the male species of said mammal comprises reducing the concentration of said sperm to about the starting concentration. A method comprising the step of limiting to less than 2 times.

(項目105) 項目93に記載の哺乳動物を生成する方法であって、前記ある1種の哺乳動物の雄から精子細胞を収集する工程が、ウシ科動物、ウマ科動物、またはブタからなる群より選択される1種の哺乳動物の雄から精子細胞を収集する工程を包含する、方法。    (Item 105) The method for producing a mammal according to item 93, wherein the step of collecting sperm cells from the male of one kind of mammal comprises a group consisting of a bovine animal, an equine animal, or a pig. Collecting sperm cells from one more selected male male.

(項目106) 項目93に記載の哺乳動物を生成する方法であって、前記確立する工程が、約30μlと150μlとの間、約500μl未満、約230μl、および約100μlからなる群より選択される容積で、授精標本を確立する工程を包含する、方法。    106. The method of producing a mammal of claim 93, wherein the establishing step is selected from the group consisting of between about 30 μl and 150 μl, less than about 500 μl, about 230 μl, and about 100 μl. Establishing a fertilized specimen by volume.

(項目107) 項目93に記載の哺乳動物を生成する方法であって、前記ある1種の哺乳動物の雄から精子細胞を収集する工程が、ある1種の哺乳動物の雄から精巣上体精子細胞を収集する工程を包含する、方法。    (Item 107) The method for producing a mammal according to item 93, wherein the step of collecting sperm cells from a male of one kind of mammal comprises epididymis sperm from the male of one kind of mammal. Collecting the cells.

(項目108) 項目93に記載の哺乳動物を生成する方法であって、前記種の哺乳動物の雌内の子宮卵管接合部の近傍の表面の下にカテーテルを挿入する工程が、該種の該哺乳動物の該雌内の子宮の子宮内膜表面に貫入する工程を包含する、方法。    108. A method of producing a mammal according to item 93, wherein the step of inserting a catheter under the surface in the vicinity of the uterine fallopian junction in a female of said species comprises the species. Penetrating the endometrial surface of the uterus in the female of the mammal.

(項目109) 項目108に記載の哺乳動物を生成する方法であって、前記種の哺乳動物の雌内の子宮卵管接合部の近傍の表面の下にカテーテルを挿入する工程が、該種の該動物の該雌の該子宮の血管新生化部分に貫入することを避ける工程をさらに包含する、方法。    109. A method of producing a mammal according to item 108, wherein the step of inserting a catheter under the surface in the vicinity of the uterine fallopian junction in a female of said species is of said species. The method further comprises the step of avoiding penetrating the angiogenic portion of the uterus of the female of the animal.

(項目110) 項目93に記載の哺乳動物を生成する方法であって、前記種の哺乳動物の雌の子宮内の子宮内膜表面に貫入する工程が、前記カテーテルを利用する工程を包含する、方法。    110. The method of generating a mammal of claim 93, wherein the step of penetrating the endometrial surface in the female uterus of said species of mammal comprises utilizing the catheter. Method.

(項目111) 項目110に記載の哺乳動物を生成する方法であって、前記種の哺乳動物の雌内の子宮の子宮内膜表面に前記カテーテルが貫入する深さを制御する工程をさらに包含する、方法。    111. A method of generating a mammal according to item 110, further comprising the step of controlling the depth of penetration of the catheter into the endometrial surface of the uterus in a female mammal of the species. ,Method.

(項目112) 項目111に記載の哺乳動物を生成する方法であって、種の哺乳動物の雌内の子宮の子宮内膜表面に前記カテーテルが貫入する深さを制御する工程が、該カテーテルを利用する工程を包含する、方法。    112. A method of producing a mammal according to item 111, wherein the step of controlling the depth of penetration of the catheter into the endometrial surface of the uterus in the female of the species mammal comprises the catheter. A method comprising the step of utilizing.

(項目113) 授精用閉じ込め要素であって、以下:    (Item 113) A confinement element for insemination, wherein:
a.セル状基部表面;  a. Cellular base surface;
b.該セル状基部表面に隣接する、セル状カバー表面;  b. A cellular cover surface adjacent to the cellular base surface;
c.該セル状基部表面と該セル状被覆表面との間の、実質的に覆い隠された容積;  c. A substantially obscured volume between the cellular base surface and the cellular coating surface;
d.該実質的に覆い隠された容積内に位置付けられた、ある1種の哺乳動物の雄由来の精子細胞;および  d. A sperm cell from one mammalian male positioned within the substantially obscured volume; and
e.該実質的に覆い隠された容積に隣接し、そして該精子細胞が通過し得る、精子放出要素、  e. A sperm releasing element adjacent to the substantially obscured volume and through which the sperm cells can pass;
を備える、授精抑制要素。An insemination suppressing element.

(項目114) 項目113に記載の授精抑制要素であって、前記実質的に覆い隠された容積内に位置付けられたある1種の哺乳動物の雄由来の精子細胞が、自然な授精において代表的に見出される精子細胞の数と比較して少ない数の精子細胞を含む、授精抑制要素。    (Item 114) The insemination suppressing element according to item 113, wherein a sperm cell derived from one mammalian male positioned in the substantially obscured volume is representative in natural insemination. An insemination-inhibiting element that contains a small number of sperm cells compared to the number of sperm cells found in.

(項目115) 項目114に記載の授精抑制要素であって、前記自然な授精において代表的に見出される精子細胞の数と比較して少ない数の精子細胞が、約1000万個未満の精子、約500万個未満の精子、約200万個未満の精子、約100万個未満の精子、約50万個未満の精子、および約10万個未満の精子からなる群より選択される数の精子細胞を含む、授精抑制要素。    (Item 115) The insemination suppressing element according to item 114, wherein the number of sperm cells is smaller than the number of sperm cells typically found in the natural insemination, and less than about 10 million sperm, A number of sperm cells selected from the group consisting of less than 5 million sperm, less than about 2 million sperm, less than about 1 million sperm, less than about 500,000 sperm, and less than about 100,000 sperm. Insemination control elements, including

(項目116) 項目115に記載の授精抑制要素であって、前記精子細胞が、ウシ科動物、ウマ科動物、またはブタからなる群より選択される1種の哺乳動物の雄由来の精子細胞を含む、授精抑制要素。    (Item 116) The insemination suppressing element according to item 115, wherein the sperm cell is a sperm cell derived from a mammal male selected from the group consisting of a bovine animal, an equine animal, or a pig. Including fertility suppression elements.

(項目117) 項目113に記載の授精抑制要素であって、前記実質的に覆い隠された容積内に位置付けられたある1種の哺乳動物の雄由来の精子細胞が、収集された精子細胞から選択された、より授精を達成しそうである精子細胞を含む、授精抑制要素。    (Item 117) The insemination suppressing element according to item 113, wherein a sperm cell derived from one mammalian male positioned in the substantially concealed volume is collected from the collected sperm cell. Insemination suppression elements, including selected sperm cells that are more likely to achieve insemination.

(項目118) 項目117に記載の授精抑制要素であって、前記収集された精子細胞から選択された、より授精を達成しそうである精子細胞が、前記種の哺乳動物から収集された、より運動性の精子であるように選択された精子細胞を含む、授精抑制要素。    (Item 118) The insemination suppressing element according to item 117, wherein the sperm cells selected from the collected sperm cells and more likely to achieve insemination are collected from a mammal of the species. An insemination-inhibiting element comprising sperm cells selected to be sex sperm.

(項目119) 項目113に記載の授精抑制要素であって、前記実質的に覆い隠された容積内に位置付けられたある1種の哺乳動物の雄由来の精子細胞が、新鮮な精子細胞を含む、授精抑制要素。    (Item 119) The insemination suppressing element according to item 113, wherein the sperm cell derived from one mammalian male positioned in the substantially obscured volume includes a fresh sperm cell. Insemination suppression element.

(項目120) 項目113に記載の授精抑制要素であって、前記実質的に覆い隠された容積内に位置付けられたある1種の哺乳動物の雄由来の精子細胞が、授精容積を有し、そして該授精容積が、約30μlと150μlとの間、約500μl未満、約230μl、および約100μlからなる群より選択される容積を含む、授精抑制要素。    (Item 120) The insemination suppressing element according to item 113, wherein a sperm cell derived from one mammalian mammal positioned in the substantially obscured volume has an insemination volume, And an insemination inhibiting element, wherein the insemination volume comprises a volume selected from the group consisting of between about 30 μl and 150 μl, less than about 500 μl, about 230 μl, and about 100 μl.

(項目121) 項目113に記載の授精抑制要素であって、前記実質的に覆い隠された容積内に位置付けられたある1種の哺乳動物の雄由来の精子細胞が、ある1種の哺乳動物の雄由来の精巣上体精子細胞を含む、授精抑制要素。    (Item 121) The insemination suppressing element according to item 113, wherein a sperm cell derived from a male of one kind of mammal positioned in the substantially covered volume is one kind of mammal. Insemination-inhibiting elements, including epididymal sperm cells derived from males.

(項目122) 項目115に記載の授精抑制要素であって、前記実質的に覆い隠された容積内に位置付けられたある1種の哺乳動物の雄由来の精子細胞が、ある1種の哺乳動物の雄由来の性選択された精子細胞を含む、授精抑制要素。    (Item 122) The insemination suppressing element according to item 115, wherein a sperm cell derived from a male of one kind of mammal positioned in the substantially covered volume is one kind of mammal. An insemination-inhibiting element comprising sex-selected sperm cells of male origin.

(項目123) 項目122に記載の授精抑制要素であって、前記ある1種の哺乳動物の雄由来の性選択された精子細胞が、ウシ科動物、ウマ科動物、またはブタからなる群より選択される1種の哺乳動物の雄由来の精子細胞を含む、授精抑制要素。    (Item 123) The insemination suppressing element according to item 122, wherein the sex-selected sperm cell derived from a male of one kind of mammal is selected from the group consisting of bovine, equine, or swine A fertilization-inhibiting element comprising sperm cells derived from one mammalian male.

(項目124) 項目115に記載の授精抑制要素であって、前記細胞基部表面と細胞被覆表面との間の実質的に覆い隠された容積が、前記種の哺乳動物の雌内の子宮卵管接合部の近傍に位置付けられている、授精抑制要素。    124. The insemination element of claim 115, wherein the substantially obscured volume between the cell base surface and the cell coating surface is a uterine fallopian tube in a female mammal of the species. An insemination suppression element positioned in the vicinity of the joint.

(項目125) 項目124に記載の授精抑制要素であって、前記細胞基部表面に隣接する細胞被覆表面が、前記種の哺乳動物の雌内の子宮の子宮内膜表面を含む、授精抑制要素。    (Item 125) The insemination suppressing element according to item 124, wherein the cell coating surface adjacent to the cell base surface includes the endometrial surface of the uterus in the female of the species.

(項目126) 項目125に記載の授精抑制要素であって、前記細胞基部表面が、前記種の哺乳動物の雌の子宮の血管新生化部分を含む、授精抑制要素。    (Item 126) The insemination suppressing element according to item 125, wherein the cell base surface includes an angiogenic part of a female uterus of the mammal of the species.

(項目127) 項目115に記載の授精抑制要素であって、前記実質的に覆い隠された容積に隣接しそして該精子細胞が通過し得る精子放出要素が、前記種の哺乳動物の雌内の子宮の子宮内膜表面内の裂け目を含む、授精抑制要素。    127. An insemination-suppressing element according to item 115, wherein a sperm-releasing element adjacent to the substantially obscured volume and through which the sperm cells can pass is in a female female of said species. Insemination-inhibiting element, including a tear in the endometrial surface of the uterus.

(項目128) 授精カテーテルであって、以下:    (Item 128) An insemination catheter, wherein:
a.ガイド要素;  a. Guide elements;
b.該ガイド要素に応答性のレザバ要素;  b. A reservoir element responsive to the guide element;
c.該レザバ要素が応答性である押出し要素;  c. An extruded element in which the reservoir element is responsive;
d.該レザバ要素の前面に位置決めされた、細胞貫入先端、  d. A cell penetrating tip positioned in front of the reservoir element;
を備える、授精カテーテル。An insemination catheter comprising:

(項目129) 項目128に記載される授精カテーテルであって、前記細胞貫入端の付近に位置する貫入深さ制御要素をさらに備える、授精カテーテル。    (Item 129) The insemination catheter according to item 128, further comprising a penetration depth control element located in the vicinity of the cell penetration end.

(項目130) 哺乳動物を産生する方法であって、    (Item 130) A method for producing a mammal, comprising:
a.哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程;  a. Collecting sperm cells from a male of a mammalian species;
b.該収集した精子細胞から、授精を達成する可能性がより高い精子細胞を選択する工程;  b. Selecting a sperm cell that is more likely to achieve insemination from the collected sperm cells;
c.該授精に望ましい精子を使用して、人工授精サンプルを確立する工程;  c. Establishing an artificial insemination sample using the sperm desired for the insemination;
d.カテーテル中に該人工授精サンプルを配置する工程;  d. Placing the artificial insemination sample in a catheter;
e.該哺乳動物種の雌が適切に受精する時期を決定する工程;  e. Determining when the female of the mammalian species is properly fertilized;
f.該哺乳動物種の雌中に光学要素を膣内挿入する工程;  f. Inserting an optical element into the vagina into the female of the mammalian species;
g.該哺乳動物種の雌中に該カテーテルを膣内挿入する工程;  g. Inserting the catheter into the vagina into the female of the mammalian species;
h.該哺乳動物種の雌の該膣を通して、該光学要素および該カテーテルを導く工程;  h. Directing the optical element and the catheter through the vagina of the female of the mammalian species;
i.該哺乳動物種の雌内にて、子宮卵管接合部を光学的に位置確認する工程;  i. Optically locating a uterine fallopian tube junction in a female of the mammalian species;
j.該哺乳動物種の雌内の該子宮卵管接合部の近傍に、該カテーテルを位置づける工程;  j. Positioning the catheter in the vicinity of the uterine fallopian junction in the female of the mammalian species;
k.該哺乳動物種の雌内の該子宮卵管接合部の近傍にある表面の下に、該カテーテルから、該人工授精サンプルの少なくとも一部を押し出す工程;  k. Extruding at least a portion of the artificial insemination sample from the catheter under a surface in the female of the mammalian species near the uterotubal junction;
l.該哺乳動物種の雌内の該子宮卵管接合部の近傍に、該人工授精サンプルの少なくとも一部を置く工程;  l. Placing at least a portion of the artificial insemination sample in the vicinity of the uterine fallopian junction in a female of the mammalian species;
m.該哺乳動物種の雌から、該光学要素および該カテーテルを引き出す工程;  m. Withdrawing the optical element and the catheter from the female of the mammalian species;
n.該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程;ならびに  n. Fertilizing a female egg of the mammalian species; and
o.該受精した卵から、子孫哺乳動物を産生する工程;  o. Producing offspring mammals from the fertilized eggs;
を包含する、方法。Including the method.

(項目131) 項目130に記載される哺乳動物を産生する方法であって、前記カテーテル中に前記人工授精サンプルを配置する工程が、該カテーテル中に小さい数の精子を配置する工程を包含する、方法。    131. The method of producing a mammal according to item 130, wherein placing the artificial insemination sample in the catheter includes placing a small number of sperm in the catheter. Method.

(項目132) 項目131に記載される哺乳動物を産生する方法であって、前記カテーテル中に小さい数の精子を配置する工程が、約1,000万個未満の精子、約500万個未満の精子、約200万個未満の精子、約100万個未満の精子、約50万個未満の精子、および約10万個未満の精子からなる群より選択される数の精子を配置する工程を包含する、方法。    132. The method of producing a mammal according to item 131, wherein the step of placing a small number of sperm in the catheter comprises less than about 10 million sperm, less than about 5 million. Including placing a number of sperm selected from the group consisting of sperm, less than about 2 million sperm, less than about 1 million sperm, less than about 500,000 sperm, and less than about 100,000 sperm. how to.

(項目133) 項目132に記載される哺乳動物を産生する方法であって、前記受精させる工程が、従来の子宮体人工授精プロセスに対して、統計学的に匹敵する成功レベルで、前記種の前記哺乳動物の前記雌の卵を受精させる工程を包含し、該成功レベルが、以下:    133. A method of producing a mammal according to item 132, wherein the fertilization step is performed at a level of success that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process. Fertilizing said female egg of said mammal, said success level being:
少なくとも約0.05以上である統計学的P値で、従来の子宮体人工授精プロセスと統計学的に匹敵する成功レベルで、前記種の前記哺乳動物の前記雌の卵を受精させる工程;  Fertilizing the female egg of the mammal of the species with a statistical P value that is at least about 0.05 or more, and at a level of success that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process;
少なくとも約0.05以上である統計学的P値で、5億個のウマ精子サンプルを使用する従来の子宮体人工授精プロセスと統計学的に匹敵する成功レベルで、前記種の前記哺乳動物の前記雌の卵を受精させる工程;  With a statistical P value that is at least about 0.05 or higher, a level of success that is statistically comparable to the conventional endometrial insemination process using 500 million horse sperm samples, Fertilizing said female egg;
少なくとも約80%以上である統計学的β値で、従来の子宮体人工授精プロセスと統計学的に匹敵する成功レベルで、前記種の前記哺乳動物の前記雌の卵を受精させる工程;  Fertilizing the female egg of the mammal of the species with a statistical β value of at least about 80% or more and a success level that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process;
少なくとも約0.05以上である統計学的P値かつ少なくとも約80%以上である統計学的β値で、従来の子宮体人工授精プロセスと統計学的に匹敵する成功レベルで、前記種の前記哺乳動物の前記雌の卵を受精させる工程;  A level of success that is statistically comparable to a conventional endometrial insemination process, with a statistical P value that is at least about 0.05 or higher and a statistical β value that is at least about 80% or higher. Fertilizing said female egg of a mammal;
からなる群より決定される、方法。A method determined from the group consisting of:

(項目134) 項目132に記載される哺乳動物を産生する方法であって、前記受精させる工程が、従来の子宮体人工授精プロセスに対して、統計学的に匹敵する成功レベルで、前記種の前記哺乳動物の前記雌の卵を受精させる工程を包含し、該成功レベルが、以下:少なくとも約75%の成功率、少なくとも約65%の成功率、少なくとも約60%の成功率、少なくとも約50%の成功率、少なくとも約45%の成功率、および前記種についての従来の人工授精の少なくとも約90%からなる群より選択される、方法。    134. A method of producing a mammal according to item 132, wherein the fertilizing step is performed at a level of success that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process. Fertilizing the female egg of the mammal, the success level being: at least about 75% success rate, at least about 65% success rate, at least about 60% success rate, at least about 50 % Success rate, at least about 45% success rate, and at least about 90% of conventional artificial insemination for said species.

(項目135) 項目134に記載される哺乳動物を産生する方法であって、前記受精させる工程が、従来の子宮体人工授精プロセスに対して、統計学的に匹敵する成功レベルで、前記種の前記哺乳動物の前記雌の卵を受精させる工程を包含し、該成功レベルが、以下:    135. A method of producing a mammal according to item 134, wherein the fertilizing step is performed at a level of success that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process. Fertilizing said female egg of said mammal, said success level being:
少なくとも約0.05以上である統計学的P値で、従来の子宮体人工授精プロセスと統計学的に匹敵する成功レベルで、前記種の前記哺乳動物の前記雌の卵を受精させる工程;  Fertilizing the female egg of the mammal of the species with a statistical P value that is at least about 0.05 or more, and at a level of success that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process;
少なくとも約0.05以上である統計学的P値で、5億個のウマ精子サンプルを使用する従来の子宮体人工授精プロセスと統計学的に匹敵する成功レベルで、前記種の前記哺乳動物の前記雌の卵を受精させる工程;  With a statistical P value that is at least about 0.05 or higher, a level of success that is statistically comparable to the conventional endometrial insemination process using 500 million horse sperm samples, Fertilizing said female egg;
少なくとも約80%以上である統計学的β値で、従来の子宮体人工授精プロセスと統計学的に匹敵する成功レベルで、前記種の前記哺乳動物の前記雌の卵を受精させる工程;  Fertilizing the female egg of the mammal of the species with a statistical β value of at least about 80% or more and a success level that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process;
少なくとも約0.05以上である統計学的P値かつ少なくとも約80%以上である統計学的β値で、従来の子宮体人工授精プロセスと統計学的に匹敵する成功レベルで、前記種の前記哺乳動物の前記雌の卵を受精させる工程;  A level of success that is statistically comparable to a conventional endometrial insemination process, with a statistical P value that is at least about 0.05 or higher and a statistical β value that is at least about 80% or higher. Fertilizing said female egg of a mammal;
からなる群より決定される、方法。A method determined from the group consisting of:

(項目136) 項目134に記載される哺乳動物を産生する方法であって、前記哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程が、ウシ科動物、ウマ科動物、またはブタからなる群より選択される哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程を包含する、方法。    (Item 136) The method for producing a mammal according to item 134, wherein the step of collecting sperm cells from a male of the mammal species is selected from the group consisting of a bovine, equine, or swine Collecting sperm cells from a male of the mammalian species being treated.

(項目137) 項目134に記載される哺乳動物を産生する方法であって、前記授精に望ましい精子を選択する工程が、前記種の前記哺乳動物の前記雄から収集した、より運動性が高い精子を濃縮する工程を包含する、方法。    (Item 137) The method for producing a mammal according to item 134, wherein the step of selecting a sperm desirable for insemination is collected from the male of the mammal of the species, and has a higher motility. Concentrating the method.

(項目138) 項目137に記載される哺乳動物を産生する方法であって、前記種の前記哺乳動物の前記雄から収集した、より運動性が高い精子を濃縮する工程が、パーコール勾配を介して該精子を遠心分離する工程を包含する、方法。    138. A method of producing a mammal according to item 137, wherein the step of concentrating the more motile sperm collected from the male of the mammal of the species is via a Percoll gradient. Centrifuge the sperm.

(項目139) 項目138に記載される哺乳動物を産生する方法であって、前記パーコール勾配を介して前記精子を遠心分離する工程が、90:45%パーコール勾配を使用する工程を包含する、方法。    139. A method of producing a mammal according to item 138, wherein centrifuging the sperm through the Percoll gradient comprises using a 90: 45% Percoll gradient. .

(項目140) 項目137、139に記載される哺乳動物を産生する方法であって、前記パーコール勾配を介して前記精子を遠心分離する工程が、    (Item 140) A method for producing a mammal according to items 137, 139, wherein the step of centrifuging the sperm through the Percoll gradient comprises:
a.約200gで約5分間、該パーコール勾配を介して該精子を遠心分離する工程;および  a. Centrifuging the sperm through the Percoll gradient at about 200 g for about 5 minutes; and
b.約800gで約10分間、該パーコール勾配を介して該精子を遠心分離する工程;  b. Centrifuging the sperm through the Percoll gradient at about 800 g for about 10 minutes;
をさらに包含する、方法。Further comprising a method.

(項目141) 項目137に記載される哺乳動物を産生する方法であって、前記種の前記哺乳動物の前記雄から収集された前記より運動性が高い精子を濃縮する工程が、該精子の濃度を開始濃度の約2倍未満まで制限する工程を包含する、方法。    (Item 141) A method for producing a mammal according to item 137, wherein the step of concentrating the more motile sperm collected from the male of the mammal of the species comprises the concentration of the sperm. Limiting the concentration to less than about twice the starting concentration.

(項目142) 項目137に記載される哺乳動物を産生する方法であって、前記確立する工程が、約30μlと約150μlとの間、約500μl未満、約230μl未満、および約100μl未満からなる群より選択される体積で、授精標本を確立する工程を包含する、方法。    142. The method of producing a mammal of claim 137, wherein the establishing step comprises between about 30 μl and about 150 μl, less than about 500 μl, less than about 230 μl, and less than about 100 μl. Establishing a fertilized specimen in a more selected volume.

(項目143) 哺乳動物を産生する方法であって、    (Item 143) A method for producing a mammal, comprising:
a.哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程;  a. Collecting sperm cells from a male of a mammalian species;
b.新鮮な精子を使用して、人工授精サンプルを確立する工程;  b. Establishing an artificial insemination sample using fresh sperm;
c.カテーテル中に該人工授精サンプルを配置する工程;  c. Placing the artificial insemination sample in a catheter;
d.該哺乳動物種の雌が適切に受精する時期を決定する工程;  d. Determining when the female of the mammalian species is properly fertilized;
e.該哺乳動物種の雌中に光学要素を膣内挿入する工程;  e. Inserting an optical element into the vagina into the female of the mammalian species;
f.該哺乳動物種の雌中に該カテーテルを膣内挿入する工程;  f. Inserting the catheter into the vagina into the female of the mammalian species;
g.該哺乳動物種の雌の該膣を通して、該光学要素および該カテーテルを導く工程;  g. Directing the optical element and the catheter through the vagina of the female of the mammalian species;
h.該哺乳動物種の雌内にて、子宮卵管接合部を光学的に位置確認する工程;  h. Optically locating a uterine fallopian tube junction in a female of the mammalian species;
i.該哺乳動物種の雌内の該子宮卵管接合部の近傍に、該カテーテルを位置づける工程;  i. Positioning the catheter in the vicinity of the uterine fallopian junction in the female of the mammalian species;
j.該カテーテルから、該人工授精サンプルの少なくとも一部を押し出す工程;  j. Extruding at least a portion of the artificial insemination sample from the catheter;
k.該哺乳動物種の雌内の該子宮卵管接合部の近傍に、該人工授精サンプルの少なくとも一部を沈着させる工程;  k. Depositing at least a portion of the artificial insemination sample in the vicinity of the uterine fallopian tube junction in a female of the mammalian species;
l.該哺乳動物種の雌から、該光学要素および該カテーテルを引き出す工程;  l. Withdrawing the optical element and the catheter from the female of the mammalian species;
m.該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程;ならびに  m. Fertilizing a female egg of the mammalian species; and
n.該受精した卵から、子孫哺乳動物を産生する工程;  n. Producing offspring mammals from the fertilized eggs;
を包含する、方法。Including the method.

(項目144) 項目143に記載される哺乳動物を産生する方法であって、前記カテーテル中に前記人工授精サンプルを配置する工程が、該カテーテル中に小さい数の精子を配置する工程を包含する、方法。    144. The method of producing a mammal of claim 143, wherein placing the artificial insemination sample in the catheter comprises placing a small number of sperm in the catheter. Method.

(項目145) 項目144に記載される哺乳動物を産生する方法であって、前記カテーテル中に小さい数の精子を配置する工程が、約1,000万個未満の精子、約500万個未満の精子、約200万個未満の精子、約100万個未満の精子、約50万個未満の精子、および約10万個未満の精子からなる群より選択される数の精子を配置する工程を包含する、方法。    145. A method of producing a mammal according to item 144, wherein the step of placing a small number of sperm in the catheter comprises less than about 10 million sperm, less than about 5 million. Including placing a number of sperm selected from the group consisting of sperm, less than about 2 million sperm, less than about 1 million sperm, less than about 500,000 sperm, and less than about 100,000 sperm. how to.

(項目146) 項目145に記載される哺乳動物を産生する方法であって、前記受精させる工程が、従来の子宮体人工授精プロセスに対して、統計学的に匹敵する成功レベルで、前記種の前記哺乳動物の前記雌の卵を受精させる工程を包含し、該成功レベルが、以下:    146. A method of producing a mammal according to item 145, wherein the fertilizing step is performed at a level of success that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process. Fertilizing the female egg of the mammal, the success level being:
少なくとも約0.05以上である統計学的P値で、従来の子宮体人工授精プロセスと統計学的に匹敵する成功レベルで、前記種の前記哺乳動物の前記雌の卵を受精させる工程;  Fertilizing the female egg of the mammal of the species with a statistical P value that is at least about 0.05 or more, and at a level of success that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process;
少なくとも約0.05以上である統計学的P値で、5億個のウマ精子サンプルを使用する従来の子宮体人工授精プロセスと統計学的に匹敵する成功レベルで、前記種の前記哺乳動物の前記雌の卵を受精させる工程;  With a statistical P value that is at least about 0.05 or higher, a level of success that is statistically comparable to the conventional endometrial insemination process using 500 million horse sperm samples, Fertilizing said female egg;
少なくとも約80%以上である統計学的β値で、従来の子宮体人工授精プロセスと統計学的に匹敵する成功レベルで、前記種の前記哺乳動物の前記雌の卵を受精させる工程;  Fertilizing the female egg of the mammal of the species with a statistical β value of at least about 80% or more and a success level that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process;
少なくとも約0.05以上である統計学的P値かつ少なくとも約80%以上である統計学的β値で、従来の子宮体人工授精プロセスと統計学的に匹敵する成功レベルで、前記種の前記哺乳動物の前記雌の卵を受精させる工程;  A level of success that is statistically comparable to a conventional endometrial insemination process, with a statistical P value that is at least about 0.05 or higher and a statistical β value that is at least about 80% or higher. Fertilizing said female egg of a mammal;
からなる群より決定される、方法。A method determined from the group consisting of:

(項目147) 項目145に記載される哺乳動物を産生する方法であって、前記受精させる工程が、従来の子宮体人工授精プロセスに対して、統計学的に匹敵する成功レベルで、前記種の前記哺乳動物の前記雌の卵を受精させる工程を包含し、該成功レベルが、以下:少なくとも約75%の成功率、少なくとも約65%の成功率、少なくとも約60%の成功率、少なくとも約50%の成功率、少なくとも約45%の成功率、および前記種についての従来の人工授精の少なくとも約90%からなる群より選択される、方法。    147. A method for producing a mammal according to item 145, wherein the fertilizing step is performed at a level of success that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process. Fertilizing the female egg of the mammal, the success level being: at least about 75% success rate, at least about 65% success rate, at least about 60% success rate, at least about 50 % Success rate, at least about 45% success rate, and at least about 90% of conventional artificial insemination for said species.

(項目148) 項目147に記載される哺乳動物を産生する方法であって、前記受精させる工程が、従来の子宮体人工授精プロセスに対して、統計学的に匹敵する成功レベルで、前記種の前記哺乳動物の前記雌の卵を受精させる工程を包含し、該成功レベルが、以下:    148. A method of producing a mammal according to item 147, wherein the fertilizing step is performed at a level of success that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process. Fertilizing the female egg of the mammal, the success level being:
少なくとも約0.05以上である統計学的P値で、従来の子宮体人工授精プロセスと統計学的に匹敵する成功レベルで、前記種の前記哺乳動物の前記雌の卵を受精させる工程;  Fertilizing the female egg of the mammal of the species with a statistical P value that is at least about 0.05 or more, and at a level of success that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process;
少なくとも約0.05以上である統計学的P値で、5億個のウマ精子サンプルを使用する従来の子宮体人工授精プロセスと統計学的に匹敵する成功レベルで、前記種の前記哺乳動物の前記雌の卵を受精させる工程;  With a statistical P value that is at least about 0.05 or higher, a level of success that is statistically comparable to the conventional endometrial insemination process using 500 million horse sperm samples, Fertilizing said female egg;
少なくとも約80%以上である統計学的β値で、従来の子宮体人工授精プロセスと統計学的に匹敵する成功レベルで、前記種の前記哺乳動物の前記雌の卵を受精させる工程;  Fertilizing the female egg of the mammal of the species with a statistical β value of at least about 80% or more and a success level that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process;
少なくとも約0.05以上である統計学的P値かつ少なくとも約80%以上である統計学的β値で、従来の子宮体人工授精プロセスと統計学的に匹敵する成功レベルで、前記種の前記哺乳動物の前記雌の卵を受精させる工程;  A level of success that is statistically comparable to a conventional endometrial insemination process, with a statistical P value that is at least about 0.05 or higher and a statistical β value that is at least about 80% or higher. Fertilizing said female egg of a mammal;
からなる群より決定される、方法。A method determined from the group consisting of:

(項目149) 項目147に記載される哺乳動物を産生する方法であって、前記哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程が、ウシ科動物、ウマ科動物、またはブタからなる群より選択される哺乳動物種の雄から精子を収集する工程を包含する、方法。    (Item 149) The method for producing a mammal according to item 147, wherein the step of collecting sperm cells from the male of the mammal species is selected from the group consisting of bovine animals, horse animals, or pigs Collecting sperm from a male of the mammalian species being treated.

(項目150) 項目143に記載される哺乳動物を産生する方法であって、前記哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程が、ある一哺乳動物種の雄から精巣上体精子細胞を収集する工程を包含する、方法。    (Item 150) The method for producing a mammal according to item 143, wherein the step of collecting sperm cells from a male of the mammalian species collects epididymal sperm cells from a male of one mammalian species A method comprising the steps of:

(項目151) 哺乳動物を産生する方法であって、    (Item 151) A method for producing a mammal,
a.哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程;  a. Collecting sperm cells from a male of a mammalian species;
b.子宮鏡適合性媒体を使用して、人工授精サンプルを確立する工程;  b. Establishing an artificial insemination sample using a hysteroscopic compatible medium;
c.カテーテル中に該人工授精サンプルを配置する工程;  c. Placing the artificial insemination sample in a catheter;
d.該哺乳動物種の雌が適切に受精する時期を決定する工程;  d. Determining when the female of the mammalian species is properly fertilized;
e.該哺乳動物種の雌中に光学要素を膣内挿入する工程;  e. Inserting an optical element into the vagina into the female of the mammalian species;
f.該哺乳動物種の雌中に該カテーテルを膣内挿入する工程;  f. Inserting the catheter into the vagina into the female of the mammalian species;
g.該哺乳動物種の雌の該膣を通して、該光学要素および該カテーテルを導く工程;  g. Directing the optical element and the catheter through the vagina of the female of the mammalian species;
h.該哺乳動物種の雌内にて、子宮卵管接合部を光学的に位置確認する工程;  h. Optically locating a uterine fallopian tube junction in a female of the mammalian species;
i.該哺乳動物種の雌内の該子宮卵管接合部の近傍に、該カテーテルを位置づける工程;  i. Positioning the catheter in the vicinity of the uterine fallopian junction in the female of the mammalian species;
j.該カテーテルから、該人工授精サンプルの少なくとも一部を押し出す工程;  j. Extruding at least a portion of the artificial insemination sample from the catheter;
k.該哺乳動物種の雌内の該子宮卵管接合部の近傍に、該人工授精サンプルの少なくとも一部を置く工程;  k. Placing at least a portion of the artificial insemination sample in the vicinity of the uterine fallopian junction in a female of the mammalian species;
l.該哺乳動物種の雌から、該光学要素および該カテーテルを引き出す工程;  l. Withdrawing the optical element and the catheter from the female of the mammalian species;
m.該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程;ならびに  m. Fertilizing a female egg of the mammalian species; and
n.該受精した卵から、子孫哺乳動物を産生する工程;  n. Producing offspring mammals from the fertilized eggs;
を包含する、方法。Including the method.

(項目152) 項目151に記載される哺乳動物を産生する方法であって、前記カテーテル中に前記人工授精サンプルを配置する工程が、該カテーテル中に小さい数の精子を配置する工程を包含する、方法。    (Item 152) The method for producing a mammal according to item 151, wherein the step of placing the artificial insemination sample in the catheter includes the step of placing a small number of sperm in the catheter. Method.

(項目153) 項目152に記載の哺乳動物の産生方法であって、ここで、前記少数の精子を前記カテーテルに置く工程が、約1000万未満の精子、約500万未満の精子、約200万未満の精子、約100万未満の精子、約50万未満の精子、および約10万未満の精子からなる群から選択される複数の精子を配置する工程を包含する、方法。    153. The method of producing a mammal of item 152, wherein the step of placing the small number of sperm on the catheter comprises less than about 10 million sperm, less than about 5 million sperm, about 2 million. Placing a plurality of sperm selected from the group consisting of less than sperm, less than about 1 million sperm, less than about 500,000 sperm, and less than about 100,000 sperm.

(項目154) 項目153に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記受精させる工程が、前記哺乳動物種の雌の卵を、従来の子宮体の人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで受精させる工程を包含し、該成功レベルは、以下:    (Item 154) The method for producing a mammal according to item 153, wherein the fertilizing step statistically compares a female egg of the mammal species with a conventional artificial insemination process of a uterine body. The success level is as follows:
該哺乳動物種の雌の卵を、少なくとも約0.05以上の統計的なP値で、従来の子宮体の人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで受精させる工程、  Fertilizing a female egg of said mammalian species with a statistical P value of at least about 0.05 or more and at a level of success that is statistically comparable to a conventional uterine artificial insemination process;
該哺乳動物種の雌の卵を、少なくとも約0.05以上の統計的なP値で、5億のウマ精子サンプルを使用する従来の子宮体の人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで受精させる工程、  The mammalian species of female eggs, with a statistical P value of at least about 0.05 or more, at a level of success that is statistically comparable to a conventional uterine artificial insemination process using 500 million horse sperm samples. Fertilization process,
該哺乳動物種の雌の卵を、少なくとも約80%以上の統計的なβ値で、従来の子宮体の人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで受精させる工程、  Fertilizing a female egg of the mammalian species with a statistical β value of at least about 80% or more, at a level of success that is statistically comparable to a conventional uterine artificial insemination process;
該哺乳動物種の雌の卵を、少なくとも約0.05以上の統計的なP値、および少なくとも80%以上の統計的なβ値の両方で、従来の子宮体の人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで受精させる工程、  The mammalian eggs of the mammal are statistically applied to a conventional uterine insemination process with both a statistical P value of at least about 0.05 and a statistical β value of at least 80%. Fertilizing at a comparable success level,
からなる群から決定される、方法。A method determined from the group consisting of:

(項目155) 項目153に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記受精させる工程が、前記哺乳動物種の雌の卵を従来の子宮体の人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで受精させる工程を包含し、該成功レベルが、該種の従来の人工授精の少なくとも約75%の成功率、少なくとも約65%の成功率、少なくとも約60%の成功率、少なくとも約50%の成功率、少なくとも約45%の成功率、および少なくとも約90%の成功率からなる群から選択される、方法。    (Item 155) The method for producing a mammal according to Item 153, wherein the fertilization step is performed at a success level that statistically compares the female egg of the mammal species with the conventional insemination process of the uterine body. Fertilizing, wherein the success level is at least about 75% success rate, at least about 65% success rate, at least about 60% success rate, at least about 50% success rate of conventional artificial insemination of the species A method selected from the group consisting of a rate, a success rate of at least about 45%, and a success rate of at least about 90%.

(項目156) 項目155に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記受精させる工程が、前記哺乳動物種の雌の卵を、従来の子宮体の人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで受精させる工程を包含し、該成功レベルは、以下:    (Item 156) The method for producing a mammal according to item 155, wherein the fertilizing step statistically compares the female egg of the mammal species with a conventional artificial insemination process of a uterine body. The success level is as follows:
該哺乳動物種の雌の卵を、少なくとも約0.05以上の統計的なP値で、従来の子宮体の人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで受精させる工程、  Fertilizing a female egg of said mammalian species with a statistical P value of at least about 0.05 or more and at a level of success that is statistically comparable to a conventional uterine artificial insemination process;
該哺乳動物種の雌の卵を、少なくとも約0.05以上の統計的なP値で、5億のウマ精子サンプルを使用する従来の子宮体の人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで受精させる工程、  The mammalian species of female eggs, with a statistical P value of at least about 0.05 or more, at a level of success that is statistically comparable to a conventional uterine artificial insemination process using 500 million horse sperm samples. Fertilization process,
該哺乳動物種の雌の卵を、少なくとも約80%以上の統計的なβ値で、従来の子宮体の人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで受精させる工程、  Fertilizing a female egg of the mammalian species with a statistical β value of at least about 80% or more, at a level of success that is statistically comparable to a conventional uterine artificial insemination process;
該哺乳動物種の雌の卵を、少なくとも約0.05以上の統計的なP値、および少なくとも80%以上の統計的なβ値の両方で、従来の子宮体の人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで受精させる工程、  The mammalian eggs of the mammal are statistically applied to a conventional uterine insemination process with both a statistical P value of at least about 0.05 and a statistical β value of at least 80%. Fertilizing at a comparable success level,
からなる群から決定される、方法。A method determined from the group consisting of:

(項目157) 前記哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程が、ウシ、ウマまたはブタからなる群から選択されるある哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程を包含する、項目155に記載の哺乳動物の産生方法。    157. Collecting sperm cells from a male of the mammalian species comprises collecting sperm cells from a male of a certain mammalian species selected from the group consisting of cattle, horses or pigs. The method for producing a mammal according to 1.

(項目158) 子宮鏡検査に適合性の媒体を使用して人工授精サンプルを確立する工程が、脱脂乳媒体を使用する工程を包含する、項目151に記載の哺乳動物の産生方法。    (Item 158) The method for producing a mammal according to item 151, wherein the step of establishing an artificial insemination sample using a medium compatible with hysteroscopy includes the step of using a skim milk medium.

(項目159) 前記子宮鏡検査に適合性の媒体を使用して人工授精サンプルを確立する工程が、TALP培地、HEPES緩衝化タイロード培地、およびアンドロヘップ培地からなる群から選択される媒体を使用する工程を包含する、項目151に記載の哺乳動物の産生方法。    159. The step of establishing an artificial insemination sample using a medium compatible with hysteroscopy uses a medium selected from the group consisting of TALP medium, HEPES buffered Tyrode medium, and Androhep medium 151. The method for producing a mammal according to item 151, comprising the step of:

(項目160) 前記子宮鏡検査に適合性の媒体を使用して人工授精サンプルを確立する工程が、カテーテルで調整した粘性を有する媒体を利用する工程を包含する、項目151に記載の哺乳動物の産生方法。    160. The mammalian of claim 151, wherein the step of establishing an artificial insemination sample using a medium compatible with hysteroscopy comprises utilizing a medium having a viscosity adjusted with a catheter. Production method.

(項目161) 前記カテーテルで調整した粘性を有する媒体を利用する工程が、前記哺乳動物の血液よりも高い粘性を有する人工受精サンプルを作製する媒体を利用する工程を包含する、項目160に記載の哺乳動物の産生方法。    (Item 161) The method according to item 160, wherein the step of using the medium having viscosity adjusted by the catheter includes the step of using a medium for producing an artificial fertilization sample having a higher viscosity than the blood of the mammal. Mammal production method.

(項目162) 前記カテーテルで調整した粘性を有する媒体を利用する工程が、生理食塩水よりも高い粘性を有する人工受精サンプルを作製する媒体を利用する工程をさらに包含する、項目161に記載の哺乳動物の産生方法。    (Item 162) The feeding according to item 161, wherein the step of using the medium having viscosity adjusted by the catheter further includes the step of using a medium for producing an artificial fertilization sample having a viscosity higher than that of physiological saline. Animal production methods.

(項目163) 項目161に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記カテーテルで調整した粘性を有する媒体を利用する工程が、哺乳動物のほぼ平均体温において、それぞれ、約100cpより高い粘性を有する媒体;約300cpより高い粘性を有する媒体;約1000cpより高い粘性を有する媒体;約3000cpより高い粘性を有する媒体;および約6000cpより高い粘性を有する媒体からなる群から選択される媒体を利用する工程を包含する、方法。    (Item 163) The method for producing a mammal according to item 161, wherein the step of using the medium having the viscosity adjusted by the catheter has a viscosity higher than about 100 cp at approximately the average body temperature of the mammal. Utilizing a medium selected from the group consisting of: a medium; a medium having a viscosity greater than about 300 cp; a medium having a viscosity greater than about 1000 cp; a medium having a viscosity greater than about 3000 cp; and a medium having a viscosity greater than about 6000 cp. Including the method.

(項目164) 子宮鏡検査受精サンプルであって、以下:    (Item 164) Hysteroscopy fertilized sample, the following:
a.レザバ要素;  a. Reservoir element;
b.該レザバ要素が応答性であるカテーテルシステム;  b. A catheter system in which the reservoir element is responsive;
c.該レザバ要素内に含まれる複数の精子細胞;および  c. A plurality of sperm cells contained within the reservoir element; and
d.該レザバ要素内に含まれ、かつ該精子細胞が応答性である、子宮鏡検査に適合性の媒体、  d. A medium compatible with hysteroscopy, contained within the reservoir element and in which the sperm cells are responsive;
を備える、子宮鏡検査受精サンプル。Comprising a hysteroscopy fertilized sample.

(項目165) 前記レザバ要素内に含まれる複数の精子細胞が、天然の受精において典型的に見出される精子細胞の数と比較した場合に、少ない数の精子細胞を含む、項目164に記載の受精封じ込め要素。    165. A fertilization according to claim 164, wherein the plurality of sperm cells contained within the reservoir element comprises a low number of sperm cells when compared to the number of sperm cells typically found in natural fertilization. Containment element.

(項目166) 項目165に記載の受精封じ込め要素であって、天然の受精において典型的に見出される精子細胞の数と比較した場合に、少ない数の前記精子細胞が、約1000万未満の精子、約500万未満の精子、約200万未満の精子、約100万未満の精子、約50万未満の精子、および約10万未満の精子からなる群から選択される複数の精子を含む、受精封じ込め要素。    166. A fertilization containment element according to claim 165, wherein a small number of said sperm cells, when compared to the number of sperm cells typically found in natural fertilization, comprises less than about 10 million sperm, Fertilization containment comprising a plurality of sperm selected from the group consisting of less than about 5 million sperm, less than about 2 million sperm, less than about 1 million sperm, less than about 500,000 sperm, and less than about 100,000 sperm element.

(項目167) 前記精子細胞が、ウシ、ウマまたはブタからなる群から選択されるある哺乳動物種の雄由来の精子細胞を含む、項目166に記載の受精封じ込め要素。    167. A fertilization containment element according to claim 166, wherein said sperm cells comprise sperm cells from a male of a certain mammalian species selected from the group consisting of cattle, horses or pigs.

(項目168) 前記レザバ要素内に含まれる複数の精子細胞が、ある哺乳動物種の雄由来の性が選択された精子細胞を含む、項目166に記載の受精封じ込め要素。    168. A fertilization containment element according to claim 166, wherein the plurality of sperm cells contained within the reservoir element comprise sperm cells from which a male species of a mammalian species has been selected.

(項目169) 前記哺乳動物種の雄由来の性別が選択された前記精子細胞が、ウシ、ウマまたはブタからなる群から選択される哺乳動物種の雄由来の精子細胞を含む、項目168に記載の受精封じ込め要素。    169. The sperm cell from which the male sex of the mammalian species is selected comprises a male sperm cell of a mammalian species selected from the group consisting of cattle, horses or pigs. Fertilization containment element.

(項目170) 前記レザバ要素内に含まれ、かつ前記精子が応答性である、前記子宮鏡検査に適合性の媒体が、脱脂乳媒体を含む、項目164に記載の子宮鏡検査受精サンプル。    170. The hysteroscopy fertilized sample of claim 164, wherein the hysteroscopy compatible medium contained within the reservoir element and the sperm is responsive comprises skim milk medium.

(項目171) 前記レザバ要素内に含まれ、かつ前記精子が応答性である、前記子宮鏡検査に適合性の媒体が、TALP培地、HEPES緩衝化タイロード培地、およびアンドロヘップ培地からなる群から選択される媒体を含む、項目164に記載の子宮鏡検査受精サンプル。    171. The hysteroscopy compatible medium contained within the reservoir element and responsive to the sperm is from the group consisting of TALP medium, HEPES buffered Tyrode medium, and Androhep medium. 165. Hysteroscopy fertilized sample according to item 164, comprising a selected medium.

(項目172) 前記レザバ要素内に含まれ、かつ前記精子が応答性である、前記子宮鏡検査に適合性の媒体が、カテーテルで調整した粘性媒体を含む、項目164に記載の子宮鏡検査受精サンプル。    172. The hysteroscopy insemination according to item 164, wherein said hysteroscopy compatible medium contained within said reservoir element and said sperm is responsive comprises a catheter conditioned viscous medium. sample.

(項目173) 前記カテーテルで調整した粘性媒体が、前記哺乳動物の血液よりも高い粘性を有する人工受精サンプルを作製する媒体を含む、項目172に記載の子宮鏡検査受精サンプル。    (Item 173) The hysteroscopy fertilization sample according to item 172, wherein the viscous medium adjusted by the catheter includes a medium for producing an artificial fertilization sample having higher viscosity than the blood of the mammal.

(項目174) 前記カテーテルで調整した粘性媒体が、生理食塩水よりも高い粘性を有する人工受精サンプルを作製する媒体をさらに含む、項目173に記載の子宮鏡検査受精サンプル。    (Item 174) The hysteroscopy fertilization sample according to item 173, wherein the viscous medium adjusted by the catheter further includes a medium for producing an artificial fertilization sample having a viscosity higher than that of physiological saline.

(項目175) 前記カテーテルで調整した粘性媒体が、哺乳動物のほぼ平均体温において、それぞれ、約100cpより高い粘性を有する媒体;約300cpより高い粘性を有する媒体;約1000cpより高い粘性を有する媒体;約3000cpより高い粘性を有する媒体;および約6000cpより高い粘性を有する媒体からなる群から選択される媒体をさらに含む、項目172に記載の子宮鏡検査受精サンプル。    175. The catheter-adjusted viscous medium, each having a viscosity of greater than about 100 cp; a medium having a viscosity greater than about 300 cp; a medium having a viscosity greater than about 1000 cp; 173. A hysteroscopy fertilized sample according to item 172, further comprising a medium having a viscosity higher than about 3000 cp; and a medium selected from the group consisting of a medium having a viscosity higher than about 6000 cp.

(項目176) 哺乳動物の産生方法であって、該方法は、以下:    (Item 176) A method for producing a mammal, the method comprising:
a.ある哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程;  a. Collecting sperm cells from a male of a mammalian species;
b.人工受精のために子宮鏡受精に適合可能な容積を決定する工程;  b. Determining a volume compatible with hysteroscopic fertilization for artificial insemination;
c.該子宮鏡受精に適合可能な容積で人工受精サンプルを確立する工程;  c. Establishing an artificial fertilization sample in a volume compatible with the hysteroscopic fertilization;
d.カテーテル中に該人工授精サンプルを配置する工程;  d. Placing the artificial insemination sample in a catheter;
e.該哺乳動物種の雌が適切に受精する時期を決定する工程;  e. Determining when the female of the mammalian species is properly fertilized;
f.該哺乳動物種の雌中に光学要素を膣内挿入する工程;  f. Inserting an optical element into the vagina into the female of the mammalian species;
g.該哺乳動物種の雌中に該カテーテルを膣内挿入する工程;  g. Inserting the catheter into the vagina into the female of the mammalian species;
h.該哺乳動物種の雌の膣を通して、該光学要素および該カテーテルを導く工程;  h. Directing the optical element and the catheter through the female vagina of the mammalian species;
i.該哺乳動物種の雌内にて、子宮卵管接合部を光学的に位置確認する工程;  i. Optically locating a uterine fallopian tube junction in a female of the mammalian species;
j.該哺乳動物種の雌内の子宮卵管接合部の近傍に、該カテーテルを位置づける工程;  j. Positioning the catheter proximate a uterine fallopian tube junction in a female of the mammalian species;
k.該カテーテルから、該人口授精サンプルの少なくとも一部を押出す工程;  k. Extruding at least a portion of the artificial insemination sample from the catheter;
l.該哺乳動物種の雌内の該子宮卵管接合部の近傍に、該人口授精サンプルの少なくとも一部を置く工程;  l. Placing at least a portion of the artificial insemination sample in the vicinity of the uterine fallopian junction in a female of the mammalian species;
m.該哺乳動物種の雌から、該光学要素および該カテーテルを引き出す工程;  m. Withdrawing the optical element and the catheter from the female of the mammalian species;
n.該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程;ならびに  n. Fertilizing a female egg of the mammalian species; and
o.該受精卵から、子孫の哺乳動物を産生する工程;  o. Producing offspring mammals from the fertilized eggs;
を包含する、方法。Including the method.

(項目177) 前記カテーテル中に人工授精サンプルを配置する工程が、該カテーテル中に少ない数の精子を配置する工程を包含する、項目176に記載の哺乳動物の産生方法。    (Item 177) The method for producing a mammal according to item 176, wherein the step of placing the artificial insemination sample in the catheter includes the step of placing a small number of sperm in the catheter.

(項目178) 項目177に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記カテーテル中に少ない数の精子を配置する工程が、約1000万個未満の精子、約500万個未満の精子、約200万個未満の精子、約100万個未満の精子、約50万個未満の精子、および約10万個未満の精子からなる群より選択される複数の精子を配置する工程を包含する、方法。    178. The method of producing a mammal of claim 177, wherein the step of placing a small number of sperm in the catheter comprises less than about 10 million sperm, less than about 5 million sperm, about 200 Placing a plurality of sperm selected from the group consisting of less than 10,000 sperm, less than about 1 million sperm, less than about 500,000 sperm, and less than about 100,000 sperm.

(項目179) 項目178に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記受精させる工程が、従来の子宮体人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルでの前記哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程を包含し、該成功レベルは、以下:    179. The method of producing a mammal of claim 178, wherein the fertilizing step comprises the step of fertilizing a female egg of the mammalian species at a success level statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process. Including the step of fertilization, the level of success being:
該哺乳動物種の雌の卵を、少なくとも約0.05以上の統計的なP値で、従来の子宮体の人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで受精させる工程、  Fertilizing a female egg of said mammalian species with a statistical P value of at least about 0.05 or more and at a level of success that is statistically comparable to a conventional uterine artificial insemination process;
該哺乳動物種の雌の卵を、少なくとも約0.05以上の統計的なP値で、5億のウマ精子サンプルを使用する従来の子宮体の人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで受精させる工程、  The mammalian species of female eggs, with a statistical P value of at least about 0.05 or more, at a level of success that is statistically comparable to a conventional uterine artificial insemination process using 500 million horse sperm samples. Fertilization process,
該哺乳動物種の雌の卵を、少なくとも約80%以上の統計的なβ値で、従来の子宮体の人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで受精させる工程、  Fertilizing a female egg of the mammalian species with a statistical β value of at least about 80% or more, at a level of success that is statistically comparable to a conventional uterine artificial insemination process;
該哺乳動物種の雌の卵を、少なくとも約0.05以上の統計的なP値、および少なくとも80%以上の統計的なβ値の両方で、従来の子宮体の人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで受精させる工程、  The mammalian eggs of the mammal are statistically applied to a conventional uterine insemination process with both a statistical P value of at least about 0.05 and a statistical β value of at least 80%. Fertilizing at a comparable success level,
からなる群から決定される、方法。A method determined from the group consisting of:

(項目180) 項目178に記載の哺乳動物の産生方法であって、前記受精させる工程が、前記哺乳動物種の雌の卵を従来の子宮体の人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで受精させる工程を包含し、該成功レベルが、該種の従来の人工授精の少なくとも約75%の成功率、少なくとも約65%の成功率、少なくとも約60%の成功率、少なくとも約50%の成功率、少なくとも約45%の成功率、および少なくとも約90%の成功率からなる群から選択される、方法。    180. The method of producing a mammal of claim 178, wherein the fertilizing step is performed at a success level that statistically compares the female egg of the mammalian species with a conventional artificial insemination process of the uterine body. Fertilizing, wherein the success level is at least about 75% success rate, at least about 65% success rate, at least about 60% success rate, at least about 50% success rate of conventional artificial insemination of the species A method selected from the group consisting of a rate, a success rate of at least about 45%, and a success rate of at least about 90%.

(項目181) 前記哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程が、ウシ、ウマ、またはブタからなる群より選択されるある哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程を包含する、項目180に記載の哺乳動物の産生方法。    181. Collecting sperm cells from the male of the mammalian species includes collecting sperm cells from a male of a certain mammalian species selected from the group consisting of cattle, horses, or pigs. 180. A method for producing a mammal according to 180.

(項目182) 前記確立する工程が、約30μlと150μlとの間、約500μl未満、約230μl、および約100μlからなる群より選択される容積で、授精試料を確立する工程を包含する、項目180に記載の哺乳動物の産生方法。    182. The step of establishing includes the step of establishing an insemination sample in a volume selected from the group consisting of between about 30 μl and 150 μl, less than about 500 μl, about 230 μl, and about 100 μl. The method for producing a mammal according to 1.

(項目183) 子宮鏡検査用授精サンプルであって、以下:    (Item 183) Insemination sample for hysteroscopy, the following:
a.レザバ要素;  a. Reservoir element;
b.該レザバ要素が応答性である、カテーテルシステム;および  b. A catheter system in which the reservoir element is responsive; and
c.該レザバ要素内に含まれる、子宮鏡検査に適合する量の精子、  c. An amount of sperm compatible with hysteroscopy contained within the reservoir element,
を備える、授精サンプル。An insemination sample.

(項目184) 前記レザバ要素内に含まれる、前記子宮鏡検査に適合する量の精子が、自然な授精において代表的に見出される精子細胞の数と比較して、少数の精子細胞を含む、項目183に記載の授精封じ込め要素。    184. The item, wherein the amount of sperm that is compatible with the hysteroscopy contained within the reservoir element comprises a small number of sperm cells compared to the number of sperm cells typically found in natural insemination. 183, an insemination containment element.

(項目185) 前記自然な授精において代表的に見出される精子細胞の数と比較して、少数の精子細胞が、以下:    (Item 185) Compared to the number of sperm cells typically found in said natural insemination, a small number of sperm cells:
約1000万個未満の精子、約500万個未満の精子、約200万個未満の精子、約100万個未満の精子、約50万個未満の精子、および約10万個未満の精子、Less than about 10 million sperm, less than about 5 million sperm, less than about 2 million sperm, less than about 1 million sperm, less than about 500,000 sperm, and less than about 100,000 sperm,
からなる群より選択される多数の精子細胞を含む、項目184に記載の授精封じ込め要素。187. Insemination containment element according to item 184, comprising a large number of sperm cells selected from the group consisting of.

(項目186) 前記精子細胞が、ウシ、ウマ、またはブタから選択される、哺乳動物種の雄由来の精子細胞を含む、項目185に記載の授精封じ込め要素。    186. The insemination containment element of claim 185, wherein the sperm cells comprise sperm cells from a male of a mammalian species selected from cattle, horses, or pigs.

(項目187) 前記レザバ要素内に含まれる、前記子宮鏡検査に適合する量の精子が、以下:    (Item 187) An amount of sperm that is contained within the reservoir element and that is compatible with the hysteroscopy is:
約30μlと150μlとの間、約500μl未満、約230μl未満、および約100μl未満、Between about 30 μl and 150 μl, less than about 500 μl, less than about 230 μl, and less than about 100 μl;
からなる群より選択される量を含む、項目183に記載の授精封じ込め要素。184. An insemination containment element according to item 183, comprising an amount selected from the group consisting of.

(項目188) 前記レザバ要素内に含まれる、前記子宮鏡検査に適合する量の精子が、哺乳動物種の雄由来の性選択された精子細胞を含む、項目183または187に記載の授精封じ込め要素。    188. An insemination containment element according to claim 183 or 187, wherein the amount of sperm that is compatible with the hysteroscopy included in the reservoir element comprises sex-selected sperm cells from a male of the mammalian species. .

(項目189) 前記哺乳動物種の雄由来の性選択された精子細胞が、ウシ、ウマ、またはブタからなる群より選択される、哺乳動物種の雄由来の精子細胞を含む、項目188に記載の授精封じ込め要素。    189. The male-selected sex-selected sperm cell of the mammalian species comprises a sperm cell derived from a male of the mammalian species selected from the group consisting of cattle, horses, or pigs. Insemination containment element.

(項目190) 哺乳動物の産生する方法であって、該方法は、以下:    190. A method of producing a mammal, the method comprising:
a.哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程;  a. Collecting sperm cells from a male of a mammalian species;
b.授精標本中の該精子細胞の特性を一時的に実質的に保持する工程;  b. Temporarily maintaining substantially the properties of the sperm cells in the insemination specimen;
c.該哺乳動物種の雄について発情の時期を決定する工程;  c. Determining the time of estrus for males of the mammalian species;
d.該発情の時期の頃に人工授精サンプルを確立するように、該授精標本の属性を変更する工程;  d. Changing the attributes of the insemination specimen so as to establish an artificial insemination sample at the time of the estrus;
e.カテーテル内に該人工授精サンプルを配置する工程;  e. Placing the artificial insemination sample in a catheter;
f.該哺乳動物種の雌に光学要素を膣内挿入する工程;  f. Inserting an optical element into the vagina into the female of the mammalian species;
g.該哺乳動物種の雌に該カテーテルを膣内挿入する工程;  g. Inserting the catheter into the vagina into the female of the mammalian species;
h.該哺乳動物種の雌の膣を通じて該光学要素および該カテーテルを導く工程;  h. Directing the optical element and the catheter through the female vagina of the mammalian species;
i.該哺乳動物種の雌内の子宮卵管接合部を光学的に位置確認する工程;  i. Optically locating a uterine fallopian tube junction in a female of the mammalian species;
j.該哺乳動物種の雌内の該子宮卵管接合部の近傍に該カテーテルを位置づける工程;  j. Positioning the catheter in the vicinity of the uterine fallopian junction in the female of the mammalian species;
k.該カテーテルから、該人工授精サンプルの少なくとも一部を押し出す工程;  k. Extruding at least a portion of the artificial insemination sample from the catheter;
l.該哺乳動物種の雌内の該子宮卵管接合部の近傍に、該人工授精サンプルの少なくとも一部を配置する工程;  l. Placing at least a portion of the artificial insemination sample in the vicinity of the uterine fallopian junction in a female of the mammalian species;
m.該哺乳動物種の雌から、該光学要素および該カテーテルを取り出す工程;  m. Removing the optical element and the catheter from the female of the mammalian species;
n.該哺乳動物種のメスの卵を授精させる工程;および  n. Fertilizing female eggs of the mammalian species; and
o.授精卵から子の哺乳動物を産生する工程、  o. Producing a baby mammal from a fertilized egg;
を包含する、方法。Including the method.

(項目191) 前記カテーテル内に前記人工授精サンプルを配置する工程が、該カテーテル内に少数の精子を配置する工程を含む、項目190に記載の哺乳動物を産生する方法。    191. The method of producing a mammal according to item 190, wherein placing the artificial insemination sample in the catheter comprises placing a small number of sperm in the catheter.

(項目192) 前記カテーテル内に少数の精子を配置する工程が、以下:    (Item 192) The step of placing a small number of sperm in the catheter comprises the following:
約1000万個未満の精子、約500万個未満の精子、約200万個未満の精子、約100万個未満の精子、約50万個未満の精子、および約10万個未満の精子、Less than about 10 million sperm, less than about 5 million sperm, less than about 2 million sperm, less than about 1 million sperm, less than about 500,000 sperm, and less than about 100,000 sperm,
からなる群より選択される、多数の精子を配置する工程を包含する、項目191に記載の哺乳動物を産生する方法。191. A method for producing a mammal according to item 191, comprising placing a large number of spermatozoa selected from the group consisting of:

(項目193) 前記授精させる工程が、成功したレベルを有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功したレベルで、前記哺乳動物種の雌の卵を授精させる工程を包含し、該成功したレベルは、以下:    193. The insemination step comprises inseminating a female egg of the mammalian species at a successful level that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a successful level. The successful levels are:
少なくとも約0.05以上の統計学的P値を有する、従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功したレベルで、該哺乳動物種の雌の卵を授精させる工程、  Fertilizing a female egg of the mammalian species at a successful level that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a statistical P value of at least about 0.05,
少なくとも約0.05以上の統計学的P値を有する、5億個のウマ精子サンプルを用いる従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功したレベルで、該哺乳動物種の雌の卵を授精させる工程、  At a successful level that is statistically comparable to a conventional endometrial insemination process using 500 million horse sperm samples having a statistical P value of at least about 0.05 or more, females of the mammalian species Fertilizing the eggs,
少なくとも約80%以上の統計学的β値を有する、従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功したレベルで、該哺乳動物種の雌の卵を授精させる工程、  Fertilizing a female egg of the mammalian species at a successful level statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a statistical β value of at least about 80% or greater;
少なくとも約0.05以上の統計学的P値、および少なくとも約80%以上の統計学的β値の両方を有する、従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功したレベルで、該哺乳動物種の雌の卵を授精させる工程、  At a successful level statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having both a statistical P value of at least about 0.05 or higher and a statistical β value of at least about 80% or higher, Fertilizing female eggs of mammalian species,
からなる群より決定される、項目192に記載の哺乳動物を産生する方法。193. A method of producing a mammal according to item 192, which is determined from the group consisting of:

(項目194) 前記授精させる工程が、成功したレベルを有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功したレベルで、前記哺乳動物種の雌の卵を授精させる工程を包含し、該成功したレベルは、以下:    194. The insemination step comprises inseminating a female egg of the mammalian species at a successful level that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a successful level. The successful levels are:
この種についての従来の人口授精の、少なくとも約75%の成功率、少なくとも約65%の成功率、少なくとも約60%の成功率、少なくとも約50%の成功率、少なくとも約45%の成功率、および少なくとも約90%の成功率、  Conventional population insemination for this species, at least about 75% success rate, at least about 65% success rate, at least about 60% success rate, at least about 50% success rate, at least about 45% success rate, And a success rate of at least about 90%,
からなる群より選択される、項目192に記載の哺乳動物を産生する方法。193. A method of producing a mammal according to item 192, selected from the group consisting of:

(項目195) 前記授精させる工程が、成功したレベルを有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功したレベルで、前記哺乳動物種の雌の卵を授精させる工程を包含し、該成功したレベルは、以下:    195. The insemination step comprises inseminating a female egg of said mammalian species at a successful level that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a successful level. The successful levels are:
少なくとも約0.05以上の統計学的P値を有する、従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功したレベルで、該哺乳動物種の雌の卵を授精させる工程、  Fertilizing a female egg of the mammalian species at a successful level that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a statistical P value of at least about 0.05,
少なくとも約0.05以上の統計学的P値を有する、5億個のウマ精子サンプルを用いる従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功したレベルで、該哺乳動物種の雌の卵を授精させる工程、  At a successful level that is statistically comparable to a conventional endometrial insemination process using 500 million horse sperm samples having a statistical P value of at least about 0.05 or more, females of the mammalian species Fertilizing the eggs,
少なくとも約80%以上の統計学的β値を有する、従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功したレベルで、該哺乳動物種の雌の卵を授精させる工程、  Fertilizing a female egg of the mammalian species at a successful level statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a statistical β value of at least about 80% or greater;
少なくとも約0.05以上の統計学的P値、および少なくとも約80%以上の統計学的β値の両方を有する、従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功したレベルで、該哺乳動物種の雌の卵を授精させる工程、  At a successful level statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having both a statistical P value of at least about 0.05 or higher and a statistical β value of at least about 80% or higher, Fertilizing female eggs of mammalian species,
からなる群より決定される、項目194に記載の哺乳動物を産生する方法。195. A method of producing a mammal according to item 194, wherein the mammal is determined from the group consisting of:

(項目196) 前記哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程が、ウシ、ウマ、またはブタからなる群より選択される哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程を包含する、項目194に記載の哺乳動物を産生する方法。    196. Collecting sperm cells from a male of the mammalian species comprises collecting sperm cells from a male of a mammalian species selected from the group consisting of cattle, horses, or pigs. A method for producing the mammal described in 1.

(項目197) 前記発情の時期の頃に人工授精サンプルを確立するように前記授精標本の属性を変更する工程を、前記哺乳動物種の雌について決定した適切に授精する時期の頃に開始する工程、    (Item 197) The step of starting the step of changing the attributes of the insemination specimen so as to establish an artificial insemination sample at the time of the estrus at the time of the appropriate insemination determined for the female of the mammalian species ,
を、さらに包含する、項目190,194または196に記載の哺乳動物を産生する方法。197. A method of producing a mammal according to item 190, 194 or 196, further comprising:

(項目198) 前記発情の時期の頃に人工授精サンプルを確立するように前記授精精標本の属性を変更する工程を、前記哺乳動物種の雌について決定した適切に授精する時期の頃に開始する工程が、以下:    (Item 198) The step of changing the attributes of the insemination specimen so as to establish an artificial insemination sample at the time of the estrus starts at the time of the appropriate insemination determined for the female of the mammalian species. The process is as follows:
該哺乳動物種の雌について決定した適切に授精する該時期の約24時間以内、  Within about 24 hours of the appropriate fertilization period determined for females of the mammalian species,
該哺乳動物種の雌について決定した適切に授精する該時期の約24時間以内、  Within about 24 hours of the appropriate fertilization period determined for females of the mammalian species,
該哺乳動物種の雌について決定した適切に授精する該時期の約12時間以内、  Within about 12 hours of the appropriate fertilization period determined for females of the mammalian species,
該哺乳動物種の雌について決定した適切に授精する該時期の約8時間以内、  Within about 8 hours of the appropriate fertilization period determined for females of the mammalian species,
該哺乳動物種の雌について決定した適切に授精する該時期の約3時間以内、および  Within about 3 hours of the appropriate insemination determined for females of the mammalian species, and
該哺乳動物種の雌について決定した適切に授精する該時期の約1時間以内、  Within about one hour of the appropriate fertilization period determined for females of the mammalian species,
からなる群より選択される時期内で、該授精標本の属性を変更する工程を開始する工程を包含する、項目197に記載の哺乳動物を産生する方法。197. A method for producing a mammal according to item 197, comprising a step of starting a step of changing an attribute of the insemination specimen within a period selected from the group consisting of:

(項目199) 前記授精標本中の前記精子細胞の特性を一時的に実質的に保持する工程が、該精子細胞を凍結する工程を包含し、そしてここで、前記発情の時期の頃に人工授精サンプルを確立するように、該授精標本の属性を変更する工程が、該発情期の頃に該授精標本を解凍する工程を包含する、項目190または194に記載の哺乳動物を産生する方法。    (Item 199) The step of temporarily substantially retaining the characteristics of the sperm cells in the insemination specimen includes a step of freezing the sperm cells, and here, artificial insemination at the time of the estrus. 195. A method of producing a mammal according to item 190 or 194, wherein the step of changing the attributes of the insemination specimen to establish a sample comprises thawing the insemination specimen at the time of the estrus.

(項目200) 哺乳動物を産生する方法であって、以下:    (Item 200) A method for producing a mammal, comprising:
a.哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程;  a. Collecting sperm cells from a male of a mammalian species;
b.性特異的特徴に従って、該精子を選別する工程;  b. Sorting the sperm according to sex-specific characteristics;
c.選別された性特異的人工授精サンプルを確立する工程;  c. Establishing a selected sex-specific artificial insemination sample;
d.カテーテル内に該選別された性特異的人工授精サンプルを配置する工程;  d. Placing the selected sex-specific artificial insemination sample in a catheter;
e.該哺乳動物種の雌が、適切に授精する時期を決定する工程;  e. Determining when the female of the mammalian species is properly fertilized;
f.該哺乳動物種の雌に光学的要素を膣内挿入する工程;  f. Inserting an optical element into the vagina into the female of the mammalian species;
g.該哺乳動物種の雌に該カテーテルを膣内挿入する工程;  g. Inserting the catheter into the vagina into the female of the mammalian species;
h.該哺乳動物種の雌の膣を通じて該光学要素および該カテーテルを導く工程;  h. Directing the optical element and the catheter through the female vagina of the mammalian species;
i.該哺乳動物種の雌内の子宮卵管接合部を光学的に位置確認する工程;  i. Optically locating a uterine fallopian tube junction in a female of the mammalian species;
j.該哺乳動物種の雌内の子宮卵管接合部の近傍に該カテーテルを位置づける工程;  j. Positioning the catheter near a uterine fallopian tube junction in a female of the mammalian species;
k.該カテーテルから、該選別された性特異的人工授精サンプルの少なくとも一部を押し出す工程;  k. Extruding at least a portion of the selected sex-specific artificial insemination sample from the catheter;
l.該哺乳動物種の雌の子宮卵管接合部の近傍に、該選別された性特異的人工授精サンプルの少なくとも一部を置く工程;  l. Placing at least a portion of the selected sex-specific artificial insemination sample in the vicinity of the female uterine fallopian tube junction of the mammalian species;
m.該哺乳動物種の雌から、該光学要素および該カテーテルを取り出す工程;  m. Removing the optical element and the catheter from the female of the mammalian species;
n.該哺乳動物種のメスの卵を授精させる工程;および  n. Fertilizing female eggs of the mammalian species; and
o.授精卵から所望の性の子孫哺乳動物を産生する工程、  o. Producing a progeny mammal of the desired sex from the fertilized egg;
を包含する、方法。Including the method.

(項目201) 前記カテーテル内に前記人工授精サンプルを配置する工程が、該カテーテル内に少数の精子を配置する工程を包含する、項目200に記載の哺乳動物を産生する方法。    201. The method of producing a mammal according to item 200, wherein placing the artificial insemination sample in the catheter comprises placing a small number of sperm in the catheter.

(項目202) 前記カテーテル内に少数の精子を配置する工程が、以下:    (Item 202) The step of placing a small number of sperm in the catheter comprises the following:
約1000万個未満の精子、約500万個未満の精子、約200万個未満の精子、約100万個未満の精子、約50万個未満の精子、および約10万個未満の精子、Less than about 10 million sperm, less than about 5 million sperm, less than about 2 million sperm, less than about 1 million sperm, less than about 500,000 sperm, and less than about 100,000 sperm,
からなる群より選択される、多数の精子を配置する工程を包含する、項目201に記載の哺乳動物を産生する方法。202. A method for producing a mammal according to item 201, comprising the step of placing a large number of spermatozoa selected from the group consisting of.

(項目203) 前記授精させる工程が、成功したレベルを有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功したレベルで、前記哺乳動物種の雌の卵を授精させる工程を包含し、該成功したレベルは、以下:    203. The insemination step comprises inseminating a female egg of the mammalian species at a successful level that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a successful level. The successful levels are:
少なくとも約0.05以上の統計学的P値を有する、従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功したレベルで、該哺乳動物種の雌の卵を授精させる工程、  Fertilizing a female egg of the mammalian species at a successful level that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a statistical P value of at least about 0.05,
少なくとも約0.05以上の統計学的P値を有する、5億個のウマ精子サンプルを用いる従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功したレベルで、該哺乳動物種の雌の卵を授精させる工程、  At a successful level that is statistically comparable to a conventional endometrial insemination process using 500 million horse sperm samples having a statistical P value of at least about 0.05 or more, females of the mammalian species Fertilizing the eggs,
少なくとも約80%以上の統計学的β値を有する、従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功したレベルで、該哺乳動物種の雌の卵を授精させる工程、  Fertilizing a female egg of the mammalian species at a successful level statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a statistical β value of at least about 80% or greater;
少なくとも約0.05以上の統計学的P値、および少なくとも約80%以上の統計学的β値の両方を有する、従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功したレベルで、該哺乳動物種の雌の卵を授精させる工程、  At a successful level statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having both a statistical P value of at least about 0.05 or higher and a statistical β value of at least about 80% or higher, Fertilizing female eggs of mammalian species,
からなる群より決定される、項目202に記載の哺乳動物を産生する方法。203. A method of producing a mammal according to item 202, which is determined from the group consisting of:

(項目204) 前記授精させる工程が、成功したレベルを有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功したレベルで、前記哺乳動物種の雌の卵を授精させる工程を包含し、該成功したレベルは、以下:    204. The insemination step comprises inseminating a female egg of said mammalian species at a successful level that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a successful level. The successful levels are:
この種についての従来の人口授精の、少なくとも約75%の成功率、少なくとも約65%の成功率、少なくとも約60%の成功率、少なくとも約50%の成功率、少なくとも約45%の成功率、および少なくとも約90%の成功率、  Conventional population insemination for this species, at least about 75% success rate, at least about 65% success rate, at least about 60% success rate, at least about 50% success rate, at least about 45% success rate, And a success rate of at least about 90%,
からなる群より選択される、項目202に記載の哺乳動物を産生する方法。The method of producing a mammal according to item 202, selected from the group consisting of:

(項目205) 前記哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程が、ウシ、ウマ、またはブタからなる群より選択される哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程を包含する、項目204に記載の哺乳動物を産生する方法。    205. Collecting sperm cells from the male of the mammalian species comprises collecting sperm cells from a male of the mammalian species selected from the group consisting of cattle, horses, or pigs. A method for producing the mammal described in 1.

(項目206) 前記精子細胞を凍結する工程をさらに包含する、項目204に記載の哺乳動物を産生する方法。    (Item 206) The method for producing a mammal according to item 204, further comprising the step of freezing the sperm cells.

(項目207) 前記哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程が、ウシ、ウマ、またはブタからなる群より選択される哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程を包含する、項目206に記載の哺乳動物を産生する方法。    207. Collecting sperm cells from the male of the mammalian species comprises collecting sperm cells from a male of the mammalian species selected from the group consisting of cattle, horses, or pigs. A method for producing the mammal described in 1.

(項目208) 哺乳動物を産生する方法であって、以下の工程:    (Item 208) A method for producing a mammal, comprising the following steps:
a.哺乳動物種の雄から精巣上体の精子細胞を収集する工程;a. Collecting epididymal sperm cells from males of mammalian species;
b.人工授精サンプルを確立する工程;b. Establishing an artificial insemination sample;
c.該人工授精サンプルをカテーテル中に置く工程;c. Placing the artificial insemination sample in a catheter;
d.該哺乳動物種の雌について適切に受精する時期を決定する工程;d. Determining the appropriate fertilization time for said mammalian female;
e.光学要素を該哺乳動物種の雌に膣内挿入する工程;e. Inserting an optical element into the vagina of the mammalian species of female;
f.該カテーテルを該哺乳動物種の雌に膣内挿入する工程;f. Inserting the catheter into the vaginal female into the vagina;
g.該光学要素および該カテーテルを、該哺乳動物種の雌の該腟を介して導く工程;g. Directing the optical element and the catheter through the fold of a female of the mammalian species;
h.該哺乳動物種の雌の子宮卵管接合部を光学的に位置確認する工程;h. Optically locating the female uterine fallopian tube junction of the mammalian species;
i.該哺乳動物種の雌の該子宮卵管接合部の近傍に該カテーテルを位置づける工程;i. Positioning the catheter in the vicinity of the uterotubal junction of the female of the mammalian species;
j.該人工授精サンプルの少なくとも一部を該カテーテルから押し出す工程;j. Extruding at least a portion of the artificial insemination sample from the catheter;
k.該哺乳動物種の雌の該子宮卵管接合部の近傍に、該人工授精サンプルの少なくとも一部を沈着させる工程;k. Depositing at least a portion of the artificial insemination sample in the vicinity of the uterine fallopian junction of a female of the mammalian species;
l.該光学要素および該カテーテルを、該哺乳動物種の雌から引き出す工程;l. Withdrawing the optical element and the catheter from the female of the mammalian species;
m.従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程;ならびにm. Fertilizing a female egg of the mammalian species with a success level statistically comparable to a conventional uterine artificial insemination process; and
n.該受精した卵から子孫哺乳動物を産生する工程、n. Producing a progeny mammal from the fertilized egg;
を包含する、方法。Including the method.

(項目209) 項目208に記載の哺乳動物を産生する方法であって、人工授精サンプルをカテーテル中に配置する前記工程が、該カテーテル中に少数の精子を配置する工程を包含する、方法。    209. The method of producing a mammal of item 208, wherein the step of placing an artificial insemination sample in a catheter comprises placing a small number of sperm in the catheter.

(項目210) 項目209に記載の哺乳動物を産生する方法であって、前記カテーテル中に少数の精子を配置する前記工程が、約10,000,000個未満の精子、約5,000,000個未満の精子、約2,000,000個未満の精子、約1,000,000個未満の精子、約500,000個未満の精子、および約100,000個未満の精子からなる群より選択される多数の精子を配置する工程を包含する、方法。    210. The method of producing a mammal of item 209, wherein the step of placing a small number of sperm in the catheter comprises less than about 10,000,000 sperm, about 5,000,000. Selected from the group consisting of less than sperm, less than about 2,000,000 sperm, less than about 1,000,000 sperm, less than about 500,000 sperm, and less than about 100,000 sperm Placing a large number of spermatozoa to be treated.

(項目211) 項目210に記載の哺乳動物を産生する方法であって、前記受精させる工程が、以下:    (Item 211) The method for producing a mammal according to item 210, wherein the fertilization step is performed as follows:
少なくとも約0.05以上の統計的P値を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで、前記哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程、  Fertilizing a female egg of said mammalian species with a success level statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a statistical P value of at least about 0.05 or more;
500,000,000個のウマ精子サンプルを使用する、少なくとも約0.05以上の統計的P値を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで、該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程、  Using a 500,000,000 equine sperm sample, at a success level that is statistically comparable to a conventional endometrial insemination process having a statistical P value of at least about 0.05 or greater, Fertilizing female eggs,
少なくとも約80%以上の統計的β値を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで、該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程、  Fertilizing a female egg of the mammalian species with a success level that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a statistical β value of at least about 80% or greater;
少なくとも約0.05以上の統計的P値および少なくとも約80%以上の統計的β値の両方を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで、該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程、  Females of the mammalian species at a level of success that is statistically comparable to conventional endometrial insemination processes having both a statistical P value of at least about 0.05 or higher and a statistical β value of at least about 80% or higher. Fertilizing the eggs of
からなる群より選択される成功レベルを有する、従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程を包含する、方法。Fertilizing a female egg of the mammalian species with a success level statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a success level selected from the group consisting of:

(項目212) 項目210に記載の哺乳動物を産生する方法であって、前記受精させる工程が、前記哺乳動物種についての従来の人工授精の少なくとも約75%の成功率、少なくとも約65%の成功率、少なくとも約60%の成功率、少なくとも約50%の成功率、少なくとも約45%の成功率、および少なくとも約90%からなる群より選択される成功レベルを有する、従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程を包含する、方法。    212. The method of producing a mammal according to item 210, wherein the fertilizing step comprises at least about 75% success rate, at least about 65% success rate of conventional artificial insemination for the mammalian species. A conventional endometrial insemination process having a success level selected from the group consisting of a rate, a success rate of at least about 60%, a success rate of at least about 50%, a success rate of at least about 45%, and at least about 90% Fertilizing female eggs of the mammalian species with a level of success that is statistically comparable to

(項目213) 項目212に記載の哺乳動物を産生する方法であって、前記受精させる工程が、以下:    (Item 213) The method for producing a mammal according to item 212, wherein the fertilizing step is performed as follows:
少なくとも約0.05以上の統計的P値を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで、該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程、  Fertilizing a female egg of the mammalian species with a success level statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a statistical P value of at least about 0.05 or more;
500,000,000個のウマ精子サンプルを使用する、少なくとも約0.05以上の統計的P値を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで、該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程、  Using a 500,000,000 equine sperm sample, at a success level that is statistically comparable to a conventional endometrial insemination process having a statistical P value of at least about 0.05 or greater, Fertilizing female eggs,
少なくとも約80%以上の統計的β値を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで、該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程、  Fertilizing a female egg of the mammalian species with a success level that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a statistical β value of at least about 80% or greater;
少なくとも約0.05以上の統計的P値および少なくとも約80%以上の統計的β値の両方を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで、該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程、  Females of the mammalian species at a level of success that is statistically comparable to conventional endometrial insemination processes having both a statistical P value of at least about 0.05 or higher and a statistical β value of at least about 80% or higher. Fertilizing the eggs of
からなる群より選択される成功レベルを有する、従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程を包含する、方法。Fertilizing a female egg of the mammalian species with a success level statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a success level selected from the group consisting of:

(項目214) 項目212に記載される哺乳動物を産生する方法であって、哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する前記工程が、ウシ、ウマまたはブタからなる群より選択される哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程を包含する、方法。    (Item 214) A method for producing a mammal according to item 212, wherein the step of collecting sperm cells from a male of the mammalian species is selected from the group consisting of cattle, horses or pigs. Collecting sperm cells from males.

(項目215) 子宮鏡授精サンプルであって、以下:    (Item 215) Hysteroscopic insemination sample, the following:
a.レザバ要素;a. Reservoir element;
b.該レザバ要素が応答性である、カテーテルシステム;およびb. A catheter system in which the reservoir element is responsive; and
c.該レザバ要素内に含まれる、複数の精巣上体精子細胞、c. A plurality of epididymal sperm cells contained within the reservoir element;
を含む、サンプル。Including a sample.

(項目216) 項目215に記載される授精封じ込め要素であって、前記レザバ要素内に含まれる前記複数の精巣上体精子細胞が、天然の授精において典型的に見られる精子細胞の数と比較して少数の精子細胞を含む、要素。    216. An insemination containment element as described in item 215, wherein the plurality of epididymal sperm cells contained within the reservoir element are compared to the number of sperm cells typically found in natural insemination. Elements that contain a small number of sperm cells.

(項目217) 項目216に記載される授精封じ込め要素であって、前記天然の授精において典型的に見られる精子細胞の数と比較して少数の精子細胞が、約10,000,000個未満の精子、約5,000,000個未満の精子、約2,000,000個未満の精子、約1,000,000個未満の精子、約500,000個未満の精子、および約100,000個未満の精子からなる群より選択される多数の精子を配置する工程を包含する、要素。    217. An insemination containment element as described in item 216, wherein the number of sperm cells is less than about 10,000,000 compared to the number of sperm cells typically found in said natural insemination. Sperm, less than about 5,000,000 sperm, less than about 2,000,000 sperm, less than about 1,000,000 sperm, less than about 500,000 sperm, and about 100,000 An element comprising placing a large number of sperm selected from the group consisting of less than sperm.

(項目218) 項目217に記載される授精封じ込め要素であって、前記精子細胞が、ウシ、ウマまたはブタからなる群より選択される哺乳動物種の雄由来の精子細胞を含む、要素。    (Item 218) The insemination containment element according to item 217, wherein the sperm cell comprises a sperm cell derived from a male of a mammalian species selected from the group consisting of bovine, horse or pig.

(項目219) 項目217に記載される授精封じ込め要素であって、前記レザバ要素内に含まれる前記複数の精巣上体精子細胞が、哺乳動物種の雄由来の性選択された精子細胞を含む、要素。    (Item 219) The insemination containment element according to item 217, wherein the plurality of epididymal sperm cells contained within the reservoir element comprise sex-selected sperm cells derived from a male of a mammalian species, element.

(項目220) 項目219に記載される授精封じ込め要素であって、哺乳動物種の雄由来の性選択された前記精子細胞が、ウシ、ウマまたはブタからなる群より選択される哺乳動物種の雄由来の精子細胞を含む、要素。    (Item 220) The fertilization containment element according to item 219, wherein the sex-selected sperm cell derived from a male of the mammalian species is selected from the group consisting of cattle, horses or pigs. Elements, including sperm cells of origin.

(項目221) 哺乳動物を産生する方法であって、以下の工程:    (Item 221) A method for producing a mammal, comprising the following steps:
a.哺乳動物種の雄から精巣上体の精子細胞を収集する工程;a. Collecting epididymal sperm cells from males of mammalian species;
b.人工授精サンプルを確立する工程;b. Establishing an artificial insemination sample;
c.該人工授精サンプルをカテーテル中に置く工程;c. Placing the artificial insemination sample in a catheter;
d.該哺乳動物種の雌について適切に受精する時期を決定する工程;d. Determining the appropriate fertilization time for said mammalian female;
e.光学要素を該哺乳動物種の雌に膣内挿入する工程;e. Inserting an optical element into the vagina of the mammalian species of female;
f.該カテーテルを該哺乳動物種の雌に膣内挿入する工程;f. Inserting the catheter into the vaginal female into the vagina;
g.該光学要素および該カテーテルを、該哺乳動物種の雌の該腟を介して導く工程;g. Directing the optical element and the catheter through the fold of a female of the mammalian species;
h.該哺乳動物種の雌の子宮卵管接合部を光学的に位置確認する工程;h. Optically locating the female uterine fallopian tube junction of the mammalian species;
i.該哺乳動物種の雌の該子宮卵管接合部の近傍に該カテーテルを位置づける工程;i. Positioning the catheter in the vicinity of the uterotubal junction of the female of the mammalian species;
j.該人工授精サンプルの少なくとも一部を該カテーテルから押し出す工程;j. Extruding at least a portion of the artificial insemination sample from the catheter;
k.該カテーテルから押し出し形成された該人工授精サンプルの少なくとも一部を吸引して、吸引された授精サンプルを作製する工程;k. Sucking at least a part of the artificial insemination sample extruded from the catheter to produce a sucked insemination sample;
l.該哺乳動物種の雌の該子宮卵管接合部の近傍に、該吸引された授精サンプルの少なくとも一部を沈着させる工程;l. Depositing at least a portion of the aspirated insemination sample in the vicinity of the uterine fallopian junction of the female of the mammalian species;
m.該光学要素および該カテーテルを、該哺乳動物種の雌から引き出す工程;m. Withdrawing the optical element and the catheter from the female of the mammalian species;
n.該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程;ならびにn. Fertilizing a female egg of the mammalian species; and
o.該受精した卵から子孫哺乳動物を産生する工程、o. Producing a progeny mammal from the fertilized egg;
を包含する、方法。Including the method.

(項目222) 項目221に記載の哺乳動物を産生する方法であって、カテーテル中に前記人工授精サンプルを配置する前記工程が、該カテーテル中に少数の精子を配置する工程を包含する、方法。    222. The method of producing a mammal of claim 221, wherein the step of placing the artificial insemination sample in a catheter comprises the step of placing a small number of sperm in the catheter.

(項目223) 項目222に記載の哺乳動物を産生する方法であって、前記カテーテル中に少数の精子を配置する前記工程が、約10,000,000個未満の精子、約5,000,000個未満の精子、約2,000,000個未満の精子、約1,000,000個未満の精子、約500,000個未満の精子、および約100,000個未満の精子からなる群より選択される多数の精子を配置する工程を包含する、方法。    223. The method of producing a mammal of item 222, wherein the step of placing a small number of sperm in the catheter comprises less than about 10,000,000 sperm, about 5,000,000. Selected from the group consisting of less than sperm, less than about 2,000,000 sperm, less than about 1,000,000 sperm, less than about 500,000 sperm, and less than about 100,000 sperm Placing a large number of spermatozoa to be treated.

(項目224) 項目223に記載の哺乳動物を産生する方法であって、前記受精させる工程が、以下:    (Item 224) The method for producing a mammal according to item 223, wherein the fertilizing step is performed as follows:
少なくとも約0.05以上の統計的P値を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで、前記哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程、  Fertilizing a female egg of said mammalian species with a success level statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a statistical P value of at least about 0.05 or more;
500,000,000個のウマ精子サンプルを使用する、少なくとも約0.05以上の統計的P値を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで、該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程、  Using a 500,000,000 equine sperm sample, at a success level that is statistically comparable to a conventional endometrial insemination process having a statistical P value of at least about 0.05 or greater, Fertilizing female eggs,
少なくとも約80%以上の統計的β値を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで、該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程、  Fertilizing a female egg of the mammalian species with a success level that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a statistical β value of at least about 80% or greater;
少なくとも約0.05以上の統計的P値および少なくとも約80%以上の統計的β値の両方を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで、該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程、  Females of the mammalian species at a level of success that is statistically comparable to conventional endometrial insemination processes having both a statistical P value of at least about 0.05 or higher and a statistical β value of at least about 80% or higher. Fertilizing the eggs of
からなる群より選択される成功レベルを有する、従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程を包含する、方法。Fertilizing a female egg of the mammalian species with a success level statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a success level selected from the group consisting of:

(項目225) 項目223に記載の哺乳動物を産生する方法であって、前記受精させる工程が、前記哺乳動物種についての従来の人工授精の少なくとも約75%の成功率、少なくとも約65%の成功率、少なくとも約60%の成功率、少なくとも約50%の成功率、少なくとも約45%の成功率、および少なくとも約90%からなる群より選択される成功レベルを有する、従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程を包含する、方法。    225. The method of producing a mammal of item 223, wherein the fertilizing step comprises at least about 75% success rate, at least about 65% success rate of conventional artificial insemination for the mammalian species. A conventional endometrial insemination process having a success level selected from the group consisting of a rate, a success rate of at least about 60%, a success rate of at least about 50%, a success rate of at least about 45%, and at least about 90% Fertilizing female eggs of the mammalian species with a level of success that is statistically comparable to

(項目226) 項目225に記載の哺乳動物を産生する方法であって、前記受精させる工程が、以下:    (Item 226) The method for producing a mammal according to item 225, wherein the fertilizing step is performed as follows:
少なくとも約0.05以上の統計的P値を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで、前記哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程、  Fertilizing a female egg of said mammalian species with a success level statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a statistical P value of at least about 0.05 or more;
500,000,000個のウマ精子サンプルを使用する、少なくとも約0.05以上の統計的P値を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで、該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程、  Using a 500,000,000 equine sperm sample, at a success level that is statistically comparable to a conventional endometrial insemination process having a statistical P value of at least about 0.05 or greater, Fertilizing female eggs,
少なくとも約80%以上の統計的β値を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで、該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程、  Fertilizing a female egg of the mammalian species with a success level that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a statistical β value of at least about 80% or greater;
少なくとも約0.05以上の統計的P値および少なくとも約80%以上の統計的β値の両方を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで、該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程、  Females of the mammalian species at a level of success that is statistically comparable to conventional endometrial insemination processes having both a statistical P value of at least about 0.05 or higher and a statistical β value of at least about 80% or higher. Fertilizing the eggs of
からなる群より選択される成功レベルを有する、従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程を包含する、方法。Fertilizing a female egg of the mammalian species with a success level statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a success level selected from the group consisting of:

(項目227) 項目225に記載される哺乳動物を産生する方法であって、哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する前記工程が、ウシ、ウマまたはブタからなる群より選択される哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程を包含する、方法。    (Item 227) A method for producing a mammal according to item 225, wherein the step of collecting sperm cells from a male species of mammal is selected from the group consisting of cattle, horses or pigs Collecting sperm cells from males.

(項目228) 子宮鏡授精要素であって、以下:    (Item 228) Hysteroscopic insemination elements, which are as follows:
a.哺乳動物種の雌の子宮;a. Female uterus of mammalian species;
b.該子宮内に含まれる複数の精子細胞;およびb. A plurality of sperm cells contained within the uterus; and
c.該精子細胞を取り囲みかつ該精子細胞が応答性である、吸引された量の媒体、c. An aspirated amount of medium that surrounds and is responsive to the sperm cells;
を含む、要素。Elements, including

(項目229) 項目228に記載される授精封じ込め要素であって、前記子宮内に含まれる前記複数の精子細胞が、天然の授精において典型的に見られる精子細胞の数と比較して少数の精子細胞を含む、要素。    229. The insemination containment element of claim 228, wherein the plurality of sperm cells contained in the uterus are fewer sperm compared to the number of sperm cells typically found in natural insemination. Elements, including cells.

(項目230) 項目229に記載される授精封じ込め要素であって、前記天然の授精において典型的に見られる精子細胞の数と比較して少数の精子細胞が、約10,000,000個未満の精子、約5,000,000個未満の精子、約2,000,000個未満の精子、約1,000,000個未満の精子、約500,000個未満の精子、および約100,000個未満の精子からなる群より選択される多数の精子を含む、要素。    230. The insemination containment element of item 229, wherein the number of sperm cells is less than about 10,000,000 compared to the number of sperm cells typically found in said natural insemination. Sperm, less than about 5,000,000 sperm, less than about 2,000,000 sperm, less than about 1,000,000 sperm, less than about 500,000 sperm, and about 100,000 An element comprising a large number of sperm selected from the group consisting of less than sperm.

(項目231) 前記精子細胞が、ウシ、ウマまたはブタからなる群より選択される哺乳動物種の雄由来の精子細胞を含む、項目230に記載の授精封じ込め要素。    (Item 231) The insemination containment element according to item 230, wherein the sperm cell comprises a sperm cell derived from a male of a mammalian species selected from the group consisting of bovine, horse or pig.

(項目232) 前記子宮内に含まれる前記複数の精子細胞が、哺乳動物種の雄由来の性選択された精子細胞を含む、項目230に記載の授精封じ込め要素。    232. The insemination containment element of claim 230, wherein the plurality of sperm cells contained in the uterus comprise sex-selected sperm cells derived from a male of a mammalian species.

(項目233) 哺乳動物種の雄由来の前記性選択された精子細胞が、ウシ、ウマまたはブタからなる群より選択される哺乳動物種の雄由来の精子細胞を含む、項目232に記載の授精封じ込め要素。    233. Insemination according to item 232, wherein said sex-selected sperm cells derived from a male of a mammalian species comprise sperm cells derived from a male of a mammalian species selected from the group consisting of cattle, horses or pigs. Containment element.

(項目234) 哺乳動物を産生する方法であって、該方法は、以下の工程:    (Item 234) A method for producing a mammal, the method comprising the following steps:
a.ブタの雄から精子細胞を収集する工程;  a. Collecting sperm cells from pig males;
b.該ブタについての天然の授精投与量と比較して、少数の精子を有する人工授精サンプルを確立する工程;  b. Establishing an artificial insemination sample having a small number of sperm compared to the natural insemination dose for said pig;
c.カテーテル中に該人工授精サンプルを配置する工程;  c. Placing the artificial insemination sample in a catheter;
d.雌ブタが適切に妊娠する時期を決定する工程;  d. Determining when a sow will properly become pregnant;
e.光学要素を、該雌ブタに膣内挿入する工程;  e. Inserting an optical element into the vagina into the sow;
f.該カテーテルを、該雌ブタに膣内挿入する工程;  f. Inserting the catheter into the vagina into the sow;
g.該雌ブタの該膣を通して、該光学要素および該カテーテルを導く工程;  g. Directing the optical element and the catheter through the vagina of the sow;
h.該雌ブタ内の子宮卵管接合部を光学的に位置確認する工程;  h. Optically locating the uterine fallopian tube junction in the sow;
i.該雌ブタ内の該子宮卵管接合部の近傍に、該カテーテルを位置づける工程;  i. Positioning the catheter proximate the uterine fallopian tube junction in the sow;
j.該人工授精サンプルの少なくとも一部を、該カテーテルから押し出す工程;  j. Extruding at least a portion of the artificial insemination sample from the catheter;
k.該雌ブタ内の該子宮卵管接合部の近傍に、少数の精子細胞を置く工程;  k. Placing a small number of sperm cells in the sow near the uterotubal junction;
l.該雌ブタから、該光学要素および該カテーテルを引き出す工程;  l. Withdrawing the optical element and the catheter from the sow;
m.該雌ブタの卵を受精させる工程;ならびに  m. Fertilizing the sow egg; and
n.該受精した卵から、子孫のブタを産生する工程、  n. Producing progeny pigs from the fertilized eggs;
を包含する、方法。Including the method.

(項目235) 項目234に記載の哺乳動物を産生する方法であって、前記哺乳動物種の雌の卵を受精させる前記工程が、従来の子宮体人工授精に統計的に匹敵する成功レベルで、該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程を包含する、方法。    235. The method of producing a mammal of item 234, wherein the step of fertilizing a female egg of the mammalian species is at a success level statistically comparable to conventional endometrial artificial insemination, Fertilizing a female egg of said mammalian species.

(項目236) 項目235に記載の哺乳動物を産生する方法であって、該方法は、性特徴によって前記精子細胞を分類する工程をさらに包含し、ここで、該哺乳動物について天然の授精投与量と比較して少数の精子細胞を有する人工授精サンプルを確立する前記工程は、該哺乳動物について天然の授精投与量と比較して少数の精子細胞を有する性選択された人工授精サンプルを確立する工程を包含する、方法。    236. A method of producing a mammal according to item 235, further comprising the step of classifying said sperm cells by sexual characteristics, wherein a natural insemination dose for said mammal Establishing an artificial insemination sample having a small number of sperm cells compared to the step of establishing a sex-selected artificial insemination sample having a small number of sperm cells compared to a natural insemination dose for said mammal Including the method.

(項目237) 前記精子細胞を凍結する工程をさらに包含する、項目236に記載の哺乳動物を産生する方法。    (Item 237) The method for producing a mammal according to item 236, further comprising the step of freezing the sperm cells.

(項目238) 前記精子細胞を凍結する工程をさらに包含する、項目235に記載の哺乳動物を産生する方法。    (Item 238) The method for producing a mammal according to Item 235, further comprising the step of freezing the sperm cells.

(項目239) 哺乳動物を産生する方法であって、該方法は、以下の工程:    239. A method for producing a mammal, the method comprising the following steps:
a.哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程;  a. Collecting sperm cells from a male of a mammalian species;
b.該精子細胞の少なくともいくつかを凍結して、凍結授精サンプルを作製する工程;  b. Freezing at least some of the sperm cells to produce a frozen insemination sample;
c.該凍結授精サンプルの少なくともいくつかを解凍して、人工授精サンプルを作製する工程;  c. Thawing at least some of the frozen insemination samples to produce artificial insemination samples;
d.該人工授精サンプルを、カテーテル中に置く工程;  d. Placing the artificial insemination sample in a catheter;
e.該哺乳動物種の雌が、適切に妊娠する時期を決定する工程;  e. Determining when the female of the mammalian species is properly pregnant;
f.該哺乳動物種の雌に、光学要素を膣内挿入する工程;  f. Inserting an optical element into the vagina into the female of the mammalian species;
g.該哺乳動物種の雌に、該カテーテルを膣内挿入する工程;  g. Inserting the catheter into the vagina into the female of the mammalian species;
h.該哺乳動物種の雌の該膣を介して該光学要素および該カテーテルを導く工程;  h. Directing the optical element and the catheter through the vagina of the female of the mammalian species;
i.該哺乳動物種の雌の子宮卵管接合部を光学的に位置確認する工程;  i. Optically locating the female uterine fallopian tube junction of the mammalian species;
j.該哺乳動物種の雌の該子宮卵管接合部の近傍に、該カテーテルを位置づける工程;  j. Positioning the catheter in the vicinity of the uterotubal junction of the female of the mammalian species;
k.該カテーテルから該人工授精サンプルの少なくとも一部を引き出す工程;  k. Withdrawing at least a portion of the artificial insemination sample from the catheter;
l.該哺乳動物種の雌の該子宮卵管接合部の近傍に、該人工授精サンプルの少なくとも一部を沈着させる工程;  l. Depositing at least a portion of the artificial insemination sample in the vicinity of the uterine fallopian junction of a female of the mammalian species;
m.該哺乳動物種の雌から該光学要素および該カテーテルを引き出す工程;  m. Withdrawing the optical element and the catheter from a female of the mammalian species;
n.該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程;および  n. Fertilizing female eggs of the mammalian species; and
o.該受精させた卵から子孫哺乳動物を産生する工程、  o. Producing offspring mammals from the fertilized eggs;
を包含する、方法。Including the method.

(項目240) 項目239に記載の哺乳動物を産生する方法であって、前記哺乳動物種の雌の卵を受精させる前記工程が、従来の子宮体人工授精プロセスに統計的に匹敵する成功レベルで、該哺乳動物種の雌の卵を受精させる工程を包含する、方法。    240. The method of producing a mammal of item 239, wherein the step of fertilizing a female egg of the mammalian species is at a level of success that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process. Fertilizing a female egg of the mammalian species.

(項目241) 項目239または240に記載の哺乳動物を産生する方法であって、カテーテル中に前記人工授精サンプルを配置する前記工程が、該カテーテル中に少数の精子を配置する工程を包含する、方法。    241. A method of producing a mammal according to item 239 or 240, wherein the step of placing the artificial insemination sample in a catheter comprises the step of placing a small number of sperm in the catheter. Method.

(項目242) 項目241に記載の哺乳動物を産生する方法であって、前記カテーテル中に少数の精子を配置する前記工程が、約10,000,000未満の精子、約5,000,000未満の精子、約2,000,000未満の精子、約1,000,000未満の精子、約500,000未満の精子、および約100,000未満の精子からなる群より選択される数の精子を配置する工程を包含する、方法。    242. The method of producing a mammal of claim 241, wherein the step of placing a small number of sperm in the catheter comprises less than about 10,000,000 sperm, less than about 5,000,000. A number of sperm selected from the group consisting of less than about 2,000,000 sperm, less than about 1,000,000 sperm, less than about 500,000 sperm, and less than about 100,000 sperm. A method comprising the step of arranging.

(項目243) 項目242に記載の哺乳動物を産生する方法であって、前記授精させる工程が、以下:    (Item 243) A method for producing the mammal according to item 242, wherein the step of insemination is as follows:
少なくとも約0.05以上の統計的P値を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで、前記哺乳動物種の雌の卵を授精させる工程、  Fertilizing a female egg of said mammalian species at a success level statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a statistical P value of at least about 0.05 or greater;
500,000,000のウマ精子サンプルを使用する、少なくとも約0.05以上の統計的P値を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで、該哺乳動物種の雌の卵を授精させる工程、  Females of the mammalian species using a 500,000,000 equine sperm sample at a level of success that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a statistical P value of at least about 0.05 or greater. The process of insemination of eggs,
少なくとも約80%以上の統計的β値を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで、該哺乳動物種の雌の卵を授精させる工程、  Fertilizing a female egg of the mammalian species with a success level statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a statistical beta value of at least about 80% or greater;
少なくとも約0.05以上の統計的P値および少なくとも約80%以上の統計的β値の両方を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで、該哺乳動物種の雌の卵を授精させる工程、  Females of the mammalian species at a level of success that is statistically comparable to conventional endometrial insemination processes having both a statistical P value of at least about 0.05 or higher and a statistical β value of at least about 80% or higher. The process of insemination of eggs,
からなる群より決定される成功レベルで従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで該哺乳動物種の雌の卵を授精させる工程を包含する、方法。Fertilizing a female egg of the mammalian species with a success level determined statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process with a success level determined from the group consisting of:

(項目244) 項目242に記載の哺乳動物を産生する方法であって、前記授精させる工程が、前記哺乳動物種についての従来の人工授精の少なくとも約75%の成功率、少なくとも約65%の成功率、少なくとも約60%の成功率、少なくとも約50%の成功率、少なくとも約45%の成功率、および少なくとも約90%からなる群より選択される成功レベルで従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで該哺乳動物種の雌の卵を授精させる工程を包含する、方法。    244. A method of producing a mammal according to item 242, wherein the step of insemination is at least about 75% successful, at least about 65% successful for conventional artificial insemination for the mammalian species. Statistics on a conventional endometrial artificial insemination process with a success level selected from the group consisting of a rate, a success rate of at least about 60%, a success rate of at least about 50%, a success rate of at least about 45%, and at least about 90% Fertilizing female eggs of said mammalian species with a scientifically comparable level of success.

(項目245) 項目244に記載の哺乳動物を産生する方法であって、前記授精させる工程が、以下:    (Item 245) The method for producing a mammal according to item 244, wherein the step of insemination is as follows:
少なくとも約0.05以上の統計的P値を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで、前記哺乳動物種の雌の卵を授精させる工程、  Fertilizing a female egg of said mammalian species at a success level statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a statistical P value of at least about 0.05 or greater;
500,000,000のウマ精子サンプルを使用する、少なくとも約0.05以上の統計的P値を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで、該哺乳動物種の雌の卵を授精させる工程、  Females of the mammalian species using a 500,000,000 equine sperm sample at a level of success that is statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a statistical P value of at least about 0.05 or greater. The process of insemination of eggs,
少なくとも約80%以上の統計的β値を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで、該哺乳動物種の雌の卵を授精させる工程、  Fertilizing a female egg of the mammalian species with a success level statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process having a statistical beta value of at least about 80% or greater;
少なくとも約0.05以上の統計的P値および少なくとも約80%以上の統計的β値の両方を有する従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで、該哺乳動物種の雌の卵を授精させる工程、  Females of the mammalian species at a level of success that is statistically comparable to conventional endometrial insemination processes having both a statistical P value of at least about 0.05 or higher and a statistical β value of at least about 80% or higher. The process of insemination of eggs,
からなる群より決定される成功レベルで従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵する成功レベルで該哺乳動物種の雌の卵を授精させる工程を包含する、方法。Fertilizing a female egg of the mammalian species with a success level determined statistically comparable to a conventional endometrial artificial insemination process with a success level determined from the group consisting of:

(項目246) 項目244に記載される哺乳動物を産生する方法であって、哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する前記工程が、ウシ、ウマまたはブタからなる群より選択される哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程を包含する、方法。    246. A method of producing a mammal according to item 244, wherein the step of collecting sperm cells from a male of the mammalian species is selected from the group consisting of cattle, horses or pigs. Collecting sperm cells from males.

(項目247) 項目244に記載の哺乳動物を産生する方法であって、該方法は、性特徴によって前記精子細胞を分類する工程をさらに包含する、該哺乳動物についての天然の授精投与量と比較して少数の精子を有する人工授精サンプルを確立する工程が、該哺乳動物についての天然の授精投与量と比較して小数の精子を有する性選択された人工授精サンプルを確立する工程を包含する、方法。    247. A method of producing a mammal according to item 244, wherein the method further comprises the step of classifying the sperm cells by sexual characteristics and comparing to a natural insemination dose for the mammal. Establishing an artificial insemination sample having a small number of sperm comprises establishing a sex-selected artificial insemination sample having a small number of sperm compared to a natural insemination dose for the mammal, Method.

(項目248) 項目247に記載の哺乳動物を産生する方法であって、哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する前記工程が、ウシ、ウマまたはブタからなる群より選択される哺乳動物種の雄から精子細胞を収集する工程を包含する、方法。    248. A method of producing a mammal according to item 247, wherein the step of collecting sperm cells from a male of the mammalian species comprises a mammalian species selected from the group consisting of cattle, horses or pigs. Collecting sperm cells from the male.

(項目249) 項目1〜248に記載のプロセスを利用して産生される動物。    (Item 249) An animal produced using the process according to items 1 to 248.

(本発明を実施するための形態)
本発明の基本的な概念は、多くの異なる様式で実施され得る。本発明の概念は、人工授精を介する哺乳動物の産生のための、材料、要素、装置、デバイスおよび方法を含み得る。さらに、本発明の1つの好ましい実施形態は、人工授精を介するウマの産生に特に関し得るが、本発明の広範な概念は、一般に、そして示されるように、ウシおよびブタのような他の哺乳動物種のための、哺乳動物の産生の開示と解釈されるべきである。
(Mode for carrying out the present invention)
The basic concept of the invention can be implemented in many different ways. The concepts of the present invention can include materials, elements, apparatus, devices and methods for the production of mammals via artificial insemination. Furthermore, although one preferred embodiment of the present invention may be particularly concerned with the production of horses via artificial insemination, the broad concept of the present invention is generally and, as indicated, other mammals such as cattle and pigs. It should be construed as disclosure of mammalian production for animal species.

理解されるように、本発明は、適用の必要性に依存して種々の組合せで使用され得る、種々の局面を含む。本発明は、哺乳動物の産生の種々の実施形態およびそれらの組み合わせを包含することが意図される。本発明は、説明される種々の局面を達成するための、方法とデバイスとの両方を包含する。さらに、いくつかの方法およびデバイスが開示されるが、これらは変化し得ることが理解されるべきである。重要なことには、上述の全てのことに関して、全ての局面が、現在または後に発行される特許請求の範囲に記載されるように独立してと組み合わせとの両方で、本特許によって包含されることが理解されるべきである。   As will be appreciated, the invention includes various aspects that can be used in various combinations depending on the needs of the application. The present invention is intended to encompass various embodiments of mammalian production and combinations thereof. The present invention encompasses both methods and devices for achieving the various aspects described. Moreover, although several methods and devices are disclosed, it should be understood that these can vary. Importantly, for all the above, all aspects are encompassed by this patent, both independently and in combination, as set forth in the claims issued now or later. It should be understood.

従って、本発明の1つの実施形態は、目的の種の雄性からの精子細胞の収集を提供し得る。1つの実施形態によれば、精子細胞は、ウマ種の1頭以上の種馬から収集される。この実施形態に従って、精子が収集され得、そして好ましい実施形態において、精子は、市販の人工膣を用いて、既知の認容可能な繁殖可能性の、恐らく少なくとも1頭の種馬から収集され得る。Animal Reproduction Systemsによって利用可能にされるもののような人工膣は、インラインゲルフィルタと共に使用され得、そして好ましい実施形態において、収集の間にわたって1日おきに使用される。収集後、精子は、ゲルのない容量、運動性、および精子濃度を評価され得る。別の好ましい実施形態によれば、精子細胞は、哺乳動物の他の雄性種(特に、ウシ、ウマまたはブタの種)から収集され得る。本発明の代替の実施形態は、哺乳動物の雄性種の精巣の精巣上体から得られる、精巣上体の精子細胞の収集を提供し得る。精巣上体精子の使用を提供する代替の実施形態は、本明細書中に開示される他の実施形態の全てに、単一または組み合わせのいずれかで、組み込まれ得る。さらに、本発明は、レザバ要素、このレザバ要素が応答するカテーテルシステム、およびこのレザバ要素内に含まれる複数の精巣上体精子細胞を備える、子宮鏡授精サンプルの特定の実施形態を提供する。   Thus, one embodiment of the present invention may provide for collection of sperm cells from males of the species of interest. According to one embodiment, sperm cells are collected from one or more stallions of equine breed. According to this embodiment, sperm can be collected, and in a preferred embodiment, sperm can be collected from a known acceptable fertility, perhaps at least one stallion, using a commercially available artificial vagina. Artificial vaginas such as those made available by Animal Production Systems can be used with in-line gel filters and in preferred embodiments are used every other day during collection. After collection, sperm can be evaluated for gel-free volume, motility, and sperm concentration. According to another preferred embodiment, sperm cells can be collected from other male species of mammals, in particular bovine, horse or pig species. Alternative embodiments of the present invention may provide for the collection of epididymal sperm cells obtained from the epididymis of a male male species testis. Alternative embodiments that provide for the use of epididymal sperm can be incorporated into all of the other embodiments disclosed herein, either singly or in combination. In addition, the present invention provides specific embodiments of a hysteroscopic insemination sample comprising a reservoir element, a catheter system to which the reservoir element responds, and a plurality of epididymal sperm cells contained within the reservoir element.

精子収集後、人工授精サンプルは、雌性種の授精のために確立され得る。本発明の1つの実施形態によれば、このサンプルは、哺乳動物に対する天然の授精用量と比較して低い数の精子を有するように、調製され得る。このサンプルは、特定の交配技術のための低い数の精子を有し得、そして好ましい実施形態によれば、このサンプルは、特に雌雄選択するために精子を選別する結果として、低い数の精子を有し得る。本発明の好ましい実施形態によれば、精子は、ヘキスト33342で染色され得、そして市販のSX MoFlo(登録商標)精子ソーターを使用して、DNA含有量に基づいて、X染色体保有集団およびY染色体保有集団に選別され得る。   After sperm collection, an artificial insemination sample can be established for insemination of female species. According to one embodiment of the invention, the sample can be prepared to have a low number of sperm compared to the natural insemination dose for a mammal. This sample may have a low number of sperm for a particular mating technique, and according to a preferred embodiment, this sample will have a low number of sperm, particularly as a result of screening sperm for sex selection. Can have. According to a preferred embodiment of the present invention, sperm can be stained with Hoechst 33342 and using a commercially available SX MoFlo® sperm sorter, based on DNA content, X chromosome population and Y chromosome Can be sorted into holding population.

さらに、人工授精サンプルは、複数の容量で、好ましい実施形態によって、約30μlと150μlとの間、約500μl未満、約230μl、および約100μlの容量で、確立され得る。本発明の1つの実施形態は、子宮鏡授精に適合性の容量、好ましくは、約30μlと150μlとの間、約500μl未満、約230μl、および約100μlからなる群より選択される容量の授精サンプルを確立することに関する。さらに、本発明は、レザバ要素、このレザバ要素が応答するカテーテルシステム、およびこのレザバ要素内に含まれる、子宮鏡適合性の容量の精子を備える、子宮鏡授精サンプルに関する。このレザバ要素内に含まれる精子の、子宮鏡適合性の容量は、約30μlと150μlとの間、約500μl未満、約230μl、および約100μlからなる群より選択される容量を含み得る。   Further, artificial insemination samples can be established in multiple volumes, depending on the preferred embodiment, in volumes between about 30 μl and 150 μl, less than about 500 μl, about 230 μl, and about 100 μl. One embodiment of the present invention is a fertilization sample in a volume compatible with hysteroscopic insemination, preferably a volume selected from the group consisting of between about 30 μl and 150 μl, less than about 500 μl, about 230 μl, and about 100 μl. Related to establishing. The invention further relates to a hysteroscopic insemination sample comprising a reservoir element, a catheter system to which the reservoir element responds, and a hysteroscopic compatible volume of sperm contained within the reservoir element. The hysteroscopic compatible volume of sperm contained within the reservoir element may comprise a volume selected from the group consisting of between about 30 μl and 150 μl, less than about 500 μl, about 230 μl, and about 100 μl.

次に、本発明の好ましい実施形態によれば、人工授精サンプルは、カテーテルまたはカテーテルシステム内に配置され得る。代替の実施形態によれば、このサンプルは、このカテーテルまたはカテーテルシステムに応答する、レザバ要素または他のサンプル保持要素内に配置され得る。カテーテルまたはカテーテルシステムは、挿入の任意のデバイス、システムまたは方法を、管、脈管、通路、または体腔内に規定して、流体の注入または引出しを可能すると理解されるべきであり、そして好ましい実施形態において、このような注入または引き出しは、レザバ要素またはサンプル保持要素の応答を提供し得るか、あるいは通路を開いて維持する。   Next, according to a preferred embodiment of the present invention, the artificial insemination sample can be placed in a catheter or catheter system. According to alternative embodiments, the sample may be placed in a reservoir element or other sample holding element that is responsive to the catheter or catheter system. A catheter or catheter system should be understood to allow any device, system, or method of insertion to be defined within a tube, vessel, passage, or body cavity to allow infusion or withdrawal of fluids, and preferred implementations. In form, such injection or withdrawal may provide a response of the reservoir element or sample holding element or keep the passage open.

好ましくは、カテーテルまたはカテーテルシステムは、ガイド要素と組み合わせて使用され、そして好ましい実施形態において、光学要素またはデバイスと組み合わせて使用され、そして好ましい実施形態において、照射要素と組み合わせて使用されて、以下により具体的に記載されるように、人工授精手順においてガイダンスを提供し得る。好ましい実施形態は、照射要素のストロービングを提供し得る。しかし、手動のガイダンスもまた実施され得る。本発明の好ましい実施形態によれば、図1に示されるように、授精サンプルは、ウマGIFTカテーテル(2)(Cook Veterinary Products,Brisbane,Australia)に、好ましくは、このカテーテルの遠位端(8)の注入ポート(6)に取り付けられた6mLの使い捨てシリンジ(4)を使用して、吸引され得る。装填されたカテーテルは、チューブ内、または好ましくは、外側のポリプロピレンカニューレ(10)(これは、光学要素(12)に応答し得る)内に引き出され得、そして好ましい実施形態によれば、Pentax EPM3000ビデオ内視鏡(Pentax UK Ltd,Slough,Bucks UK)の作業チャネルに沿って通される。   Preferably, the catheter or catheter system is used in combination with a guide element, and in a preferred embodiment is used in combination with an optical element or device, and in a preferred embodiment, is used in combination with an illumination element, according to the following: As specifically described, guidance may be provided in an artificial insemination procedure. Preferred embodiments may provide strobing of the illumination element. However, manual guidance can also be implemented. According to a preferred embodiment of the present invention, as shown in FIG. 1, the insemination sample is transferred to the equine GIFT catheter (2) (Cook Veterinary Products, Brisbane, Australia), preferably at the distal end (8 ) Can be aspirated using a 6 mL disposable syringe (4) attached to the injection port (6). The loaded catheter can be withdrawn into the tube, or preferably into the outer polypropylene cannula (10), which can respond to the optical element (12), and according to a preferred embodiment, the Pentax EPM 3000 Threaded along the working channel of a video endoscope (Pentax UK Ltd, Slowh, Bucks UK).

従って、人工授精が適切であり得る時期、時点または持続時間が、決定され得る。本発明の好ましい実施形態によれば、決定は、雌性哺乳動物に対する発情時点に関してなされ得る。本発明の1つの実施形態によれば、発情期は、発情時点を決定するために誘導され得、そして複数の雌性ウマに対して、同期さえされ得る。発情期は、雌性哺乳動物が妊娠し得る状態と定義され得、そして発情周期は、雌性哺乳動物の内分泌系および生殖系の、相関する現象と定義され得、潜在的に、発情期の1つの期間の開始から、次の期間の開始までである。好ましい実施形態によれば、発情期は、プロゲスタゲン(progestagen)のような物質を、好ましくは雌性ウマアルトレノゲストを、そして好ましくは10mlを経口で、潜在的には連続した10日間投与し、続いて250μgのクロプロステノールを筋肉内に、潜在的には11日目に投与することによって、複数の雌性哺乳動物に対して誘導され得、そして同期され得る。さらに、雌性哺乳動物は、授精の時点で、排卵を誘導され得る。排卵は誘導され得、そして好ましい実施形態において、3000iuのヒト絨毛性ゴナドトロピン(hCG、Chorulon,Intervet,Inc.,Millsboro,Holland)を投与することによって(好ましくは、授精の時点または約8時間前までで静脈内に投与されて)、誘導され得る。排卵は、好ましい実施形態において、約2000〜約5000iuのヒト絨毛性ゴナドトロピンの投与によってさえ、誘導され得る。   Thus, the time, time point or duration at which artificial insemination may be appropriate can be determined. According to a preferred embodiment of the invention, the determination can be made with respect to the time of estrus for the female mammal. According to one embodiment of the invention, the estrus period can be induced to determine the estrus time point and can even be synchronized for multiple female horses. Estrus can be defined as a state in which a female mammal can become pregnant, and the estrous cycle can be defined as a correlated phenomenon of the female mammal's endocrine and reproductive systems, potentially one of the estrous phases. From the start of a period to the start of the next period. According to a preferred embodiment, the estrus phase is administered a substance such as progestagen, preferably female equine altrenogest, and preferably 10 ml orally, potentially for 10 consecutive days, followed by Can be induced and synchronized to multiple female mammals by administering 250 μg of cloprostenol intramuscularly, potentially on day 11. Furthermore, female mammals can be induced to ovulate at the time of insemination. Ovulation can be induced and, in a preferred embodiment, by administering 3000 iu human chorionic gonadotropin (hCG, Chorulon, Intervet, Inc., Millsboro, Holland), preferably up to the time of insemination or about 8 hours before And administered intravenously). Ovulation can be induced even in preferred embodiments by administration of about 2000 to about 5000 iu of human chorionic gonadotropin.

好ましい実施形態において、発情周期は、合成プロゲスタゲンアルトレノゲスト(0.044mg/kg経口、Regumate;Hoechst Roussel Vet,Warren,New Jersey,USA)を、連続した10日間にわたって毎日投与することによって、同期され得る。黄体融解が、好ましい実施形態において、プロスタグランジンアナログのクロプロステノール(250μg Estrumate,筋肉内;Bayer Corporation,Agriculture Division,Shawnee Mission、Kansas,USA)を11日目に投与して、誘導され得る。   In a preferred embodiment, the estrous cycle is achieved by daily administration of synthetic progestagenaltrenogest (0.044 mg / kg oral, Regumate; Hoechst Roussel Vet, Warren, New Jersey, USA) for 10 consecutive days, Can be synchronized. Luteus melting can be induced in preferred embodiments by administering the prostaglandin analog cloprostenol (250 μg Estrumate, intramuscular; Bayer Corporation, Agricultural Division, Shawnee Mission, Kansas, USA) on day 11.

雌性哺乳動物が適切に受精する時点が、決定され得る。卵巣が試験され得、そして好ましい実施形態において、超音波検査によって試験され、そして好ましくは、小胞が検出されるまで試験され得、そして好ましい実施形態によれば、優勢な小胞(好ましくは、直径30mm以上)が検出されるまで、2日おきに試験され得る。この雌性は、好ましくは排卵前に、好ましくは35mm以上の小胞が検出されるまで、試験され得る。1つの実施形態において、この雌性は、発情期の誘導または同期と同じ日の間、排卵の誘導または同期と同じ日の間、あるいは発情期および授精の誘導または同期と同じ日の間、授精され得る。   The point at which a female mammal is properly fertilized can be determined. The ovary can be tested, and in a preferred embodiment is examined by ultrasonography, and is preferably tested until a vesicle is detected, and according to a preferred embodiment, a dominant vesicle (preferably Can be tested every two days until a diameter of 30 mm or more) is detected. This female can be tested, preferably before ovulation, until vesicles of preferably 35 mm or more are detected. In one embodiment, the female is inseminated during the same day as induction or synchronization of estrus, during the same day as induction or synchronization of ovulation, or during the same day as induction or synchronization of estrus and insemination. obtain.

次に、本発明の特定の実施形態によれば、ガイド要素、および好ましい実施形態においては光学要素(12)が、雌性へと膣内挿入され得る。さらに、カテーテル(2)、および好ましい実施形態においてはレザバ要素が、雌性に挿入され得る。光学要素(12)およびカテーテル(2)の挿入の順序は、連続的であっても同時であってもよい。   Next, according to certain embodiments of the present invention, the guide element, and in a preferred embodiment, the optical element (12) may be inserted intravaginally into the female. Furthermore, the catheter (2), and in the preferred embodiment a reservoir element, can be inserted female. The order of insertion of the optical element (12) and the catheter (2) may be sequential or simultaneous.

次いで、ガイド要素または光学要素(12)およびカテーテル(2)は、図2に示されるように、雌性の膣(20)を通して導かれ得る。1つの実施形態によれば、光学要素(12)およびカテーテル(2)は、手動で導かれ得る。実際に、カテーテル(2)は、光学要素(12)なしで手動で導かれ得る。しかし、UTJを見出す正確さ、ならびに低い数の精子および手順の全体的な潜在的効力に対して特に、増加した受胎率を生じる可能性は、より正確なガイダンス手順を必要とし得る。好ましい実施形態において、光学要素または内視鏡(好ましくは、可撓性内視鏡)(好ましい実施形態においては、外径12mmで1.6mの長さの寸法を有する)が、頸部(22)を通して導かれ得、そして子宮腔(24)を通して、またはさらなる実施形態において、その種の雌性の子宮角を通して、推進される。ビデオ内視鏡の使用のさらなる利点は、当業者による過去の努力において必要とされ得るように、授精プロセスを直腸で導く必要がないことであり得る。   The guide or optical element (12) and catheter (2) can then be guided through the female vagina (20), as shown in FIG. According to one embodiment, the optical element (12) and the catheter (2) can be guided manually. Indeed, the catheter (2) can be manually guided without the optical element (12). However, the possibility of producing increased conception rates, particularly for the accuracy of finding UTJs and the overall potential efficacy of low numbers of sperm and procedures, may require more accurate guidance procedures. In a preferred embodiment, an optical element or endoscope (preferably a flexible endoscope) (in a preferred embodiment having an outer diameter of 12 mm and a length of 1.6 m) is placed in the neck (22 ) And propelled through the uterine cavity (24) or, in further embodiments, through such female uterine horns. A further advantage of using video endoscopes may be that the insemination process need not be guided rectally, as may be required in past efforts by those skilled in the art.

次いで、雌性哺乳動物の子宮卵管接合部(UJT)(30)が、好ましくは光学要素(12)を用いて光学的に、位置確認され得る。次いで、カテーテル(2)が、子宮卵管接合部の近傍または近くに位置決めされ得る。好ましい実施形態によれば、内視鏡は、視覚による制御下で、子宮角(26)に沿って同側に、排卵前の小胞(28)を含む卵巣へと位置づけられ得る。好ましくは、内視鏡のチップは、上記子宮卵管接合部の近位に位置づけられ、そして好ましい実施形態において、上記子宮卵管接合部の約3〜5cm以内に位置づけられ、そして好ましい実施形態において、子宮卵管接合部の乳頭(32)の約3〜5cm以内に位置づけられ得る。   The female uterine fallopian tube junction (UJT) (30) can then be localized, preferably optically using the optical element (12). The catheter (2) can then be positioned near or near the uterine fallopian junction. According to a preferred embodiment, the endoscope can be positioned under visual control, ipsilaterally along the uterine horn (26), into the ovary containing pre-ovulatory vesicles (28). Preferably, the endoscope tip is positioned proximal to the uterine fallopian junction and in preferred embodiments is located within about 3-5 cm of the uterine fallopian junction and in preferred embodiments. Can be located within about 3-5 cm of the nipple (32) of the uterine fallopian junction.

次いで、人工授精サンプルの少なくとも一部が、カテーテル(2)から押出され得る。好ましい実施形態によれば、外側カニューレ(10)(次に精子懸濁物を含む内側GIFTカテーテル(2)がある)が、GIFTカテーテルのチップが子宮卵管接合部に接するまで、そして好ましい実施形態において、乳頭に接するまで、内視鏡の作業チャネルから押出され得る。本発明の代替の実施形態によれば、人工授精サンプルの一部または少なくとも一部は、カテーテルからの押し出しの間に吸引され得、これによって、吸引されたサンプルを潜在的に作製する。このような吸引されたサンプルは、バブル状サンプルおよび泡状サンプルを含むことが、理解されるべきである。吸引されたサンプルは、UTJの付近の表面へのより良好な接着を提供し得るのみでなく、改善された受胎率をさらに可能にし得る。さらに、本発明の実施形態は、子宮鏡授精要素を提供し、この要素は、哺乳動物の種の雌性の子宮、この子宮内に含まれる複数の精子細胞、および精子細胞を囲むかまたは散在させ、そして精子細胞が応答する、吸引された容量の媒体を含む。このような代替の実施形態は、単一でまたは組み合わせてのいずれかで、本発明の全ての実施形態に関して開示されると解釈されるべきであり、そしてそれ自体が開示されると解釈されるべきである。   Then, at least a portion of the artificial insemination sample can be extruded from the catheter (2). According to a preferred embodiment, the outer cannula (10) (there is an inner GIFT catheter (2) containing sperm suspension) until the tip of the GIFT catheter touches the uterine fallopian junction and the preferred embodiment At the working channel of the endoscope until it touches the teat. According to an alternative embodiment of the present invention, a portion or at least a portion of the artificial insemination sample may be aspirated during extrusion from the catheter, thereby potentially creating an aspirated sample. It should be understood that such aspirated samples include bubble samples and foam samples. The aspirated sample may not only provide better adhesion to the surface near the UTJ, but may further allow improved conception rates. In addition, embodiments of the present invention provide a hysteroscopic insemination element that surrounds or intersperses a female uterus of a mammalian species, a plurality of sperm cells contained within the uterus, and sperm cells. And an aspirated volume of medium to which the sperm cells respond. Such alternative embodiments are to be construed as disclosed for all embodiments of the invention, either singly or in combination, and are construed as disclosed per se. Should.

低い数の精子が、子宮卵管接合部の近傍に置かれ得る。好ましい実施形態によれば、シリンジ(4)のプランジャーが、サンプルを置くために押下され得、そして特定の実施形態において、小容量(好ましくは、恐らく約100μl)のサンプルを、好ましくは乳頭の表面に置く。ガイド要素、および好ましい実施形態においては光学要素(12)、ならびにカテーテル(2)は、雌性哺乳動物の子宮から引き出され得る。好ましい実施形態によれば、濾過された空気が、雌性の子宮に導入されて、子宮腔を通る器具の通過を容易にし得る。さらに、好ましい実施形態によれば、濾過された空気は、好ましくは、光学要素(12)およびカテーテル(2)の引き抜きと同時に、子宮から抜かれ得る。   A low number of sperm may be placed near the uterine fallopian junction. According to a preferred embodiment, the plunger of the syringe (4) can be depressed to place the sample, and in certain embodiments, a small volume (preferably about 100 μl) of the sample, preferably the nipple Put on the surface. The guide element, and in a preferred embodiment the optical element (12), and the catheter (2) can be withdrawn from the uterus of a female mammal. According to a preferred embodiment, filtered air can be introduced into the female uterus to facilitate passage of the instrument through the uterine cavity. Furthermore, according to a preferred embodiment, the filtered air can be withdrawn from the uterus, preferably simultaneously with the withdrawal of the optical element (12) and the catheter (2).

低い数の精子を配置することは、本発明の1つの好ましい実施形態において、カテーテル(2)を用いて多数の精子(好ましくは、約1000万の精子未満、約500万の精子未満、約200万の精子未満、約100万の精子未満、約50万の精子未満、および約10万の精子未満からなる群より選択される数)を配置することによって、達成され得る。   Placing a low number of spermatozoa, in one preferred embodiment of the present invention, uses a catheter (2) to create a large number of sperm (preferably less than about 10 million sperm, less than about 5 million sperm, about 200 A number selected from the group consisting of less than 10,000 sperm, less than about 1 million sperm, less than about 500,000 sperm, and less than about 100,000 sperm.

続いて、雌性の卵の受精が起こり得、そして受精した卵からの子孫哺乳動物の産生が起こり得る。本発明の好ましい実施形態によれば、受精の成功レベルは、従来の子宮本体人工授精プロセスに統計学的に比較可能であり得る。統計学的に比較可能な成功レベルは、任意の特定の種に対して従来のAIを用いて実際に経験された成功率の、少なくとも約75%の成功率、少なくとも約65%の成功率、少なくとも約60%の成功率、少なくとも約50%の成功率、少なくとも約45%の成功率、および少なくとも約90%の成功率での受胎率と定義され得る。さらに、本発明の成功レベルは、約100より多い、約500より多い、そして約1000より多い、累積受精のサンプルにわたって、従来の子宮本体人工授精プロセスに統計学的に比較可能であり得る。成功率はさらに、少なくとも約95%の信頼度(潜在的に、Pは、約0.05より大きいかまたは等しいと表される)の信頼レベルを統計学的に少なくとも提供し得、従って、従来のAIと、潜在的に統計学的に比較可能である。さらに、本発明の成功率は、異なる精子数の範囲(潜在的に、例えば、ウマについては1×10精子、5×10精子、または10×10精子)にわたって同じP値を潜在的に有し得る。さらに、成功のレベルまたは率は、サンプルのサイズに換算して表現され得、これによって、本発明は、好ましい実施形態において、少なくとも約80%の累乗計算(β)にわたって、上述の成功率のいずれかを提供し得る。さらに、成功率は、好ましい実施形態において、雌雄選別された種馬精子についての特定の授精用量を考慮して、低い数の精子に対してさえ適用され得、そして慣用的に、ある種に対して従来の人工授精から生じた率の少なくとも約90%の受胎率を生じ得る。さらに、本発明の特定の実施形態によれば、以前の成功率は、ウシ、ウマ、およびブタのような哺乳動物の種に対してさえ達成され得る。 Subsequently, fertilization of female eggs can occur and production of progeny mammals from the fertilized eggs can occur. According to a preferred embodiment of the present invention, the success level of fertilization may be statistically comparable to a conventional uterine body artificial insemination process. A statistically comparable success level is a success rate of at least about 75%, a success rate of at least about 65% of the success rate actually experienced using conventional AI for any particular species, A conception rate with a success rate of at least about 60%, a success rate of at least about 50%, a success rate of at least about 45%, and a success rate of at least about 90% can be defined. Further, the success level of the present invention may be statistically comparable to the traditional uterine body artificial insemination process over samples of cumulative fertilization greater than about 100, greater than about 500, and greater than about 1000. The success rate may further provide a statistically at least statistical level of confidence of at least about 95% confidence (potentially, P is expressed as greater than or equal to about 0.05), thus Is potentially statistically comparable to that of AI. Furthermore, the success rate of the present invention is potentially the same P value over a range of different sperm counts (potentially, for example, 1 × 10 6 sperm, 5 × 10 6 sperm, or 10 × 10 6 sperm for horses). Can have. In addition, the level or rate of success may be expressed in terms of sample size, whereby the present invention, in a preferred embodiment, over any of the above success rates over a power calculation (β) of at least about 80%. Can provide. Furthermore, success rates can be applied to even low numbers of sperm, and, routinely, for certain species, taking into account specific insemination doses for male and female screened stallion sperm in preferred embodiments. A conception rate of at least about 90% of the rate resulting from conventional artificial insemination can occur. Furthermore, according to certain embodiments of the present invention, previous success rates can be achieved even for mammalian species such as cattle, horses, and pigs.

精子の生存可能性、寿命および運動性に関して、例えば、本発明は、新鮮な精子を利用する人工授精サンプルの確立を提供し得る。用語「新鮮な精子」とは、精子の生存可能性、寿命および/または運動性が損なわれ得るようないずれの様式でも、処理も、加工も、または保存もされていない精子であると、広義に定義され得る。このような処理、加工または保存としては、例えば、精子の選別、精子の凍結および引き続く解凍、精子の希釈および再懸濁、ならびに運動性および生存可能性の試験または分離(一般に、特に、Percoll勾配加工)が挙げられ得る。本明細書中の本発明の実施形態による新鮮な精子の使用は、例えば、使用される収集された精子の質が乏しい場合にさえ、授精のための低い数の精子の使用を可能にし得る。   With regard to sperm viability, longevity and motility, for example, the present invention may provide for the establishment of an artificial insemination sample that utilizes fresh sperm. The term “fresh sperm” is broadly defined as sperm that has not been treated, processed, or stored in any manner that may impair the viability, longevity and / or motility of the sperm. Can be defined. Such processing, processing or storage may include, for example, sperm sorting, sperm freezing and subsequent thawing, sperm dilution and resuspension, and motility and viability testing or separation (in particular, the Percoll gradient). Processing). The use of fresh sperm according to embodiments of the invention herein may allow the use of a low number of sperm for insemination, for example, even when the quality of the collected sperm used is poor.

本発明の代替の実施形態は、授精精子の処理、加工および保存を、広範に提供し得る。本発明の代替の実施形態は、例えば、授精をより達成しやすい収集された精子細胞の選択を提供し得る。本発明の1つの実施形態によれば、所望の精子細胞または授精をより達成しやすい精子細胞の選択は、収集された、より運動性の精子を濃縮する工程を包含し得る。さらなる実施形態は、密度勾配にわたって、そして好ましい実施形態においては、Percoll勾配で、精子を遠心分離する工程を提供し得る。潜在的に好ましい実施形態は、90:45%のPercoll勾配を使用し得る。さらなる実施形態は、濃度を、出発濃度の約2倍未満に制限することを包含し得る。Percoll勾配の実施は、精子の加工前または加工後の、そして特に、潜在的に選別前または選別後の、Percollの使用を包含することが理解されるべきである。従って、本明細書中の実施形態によれば、Percoll勾配手順は、「新鮮な精子」と共に使用され得る。所望の精子細胞または選択された精子細胞から確立されるサンプルは、人工授精サンプルを確立するために使用され得、これは潜在的に、サンプルの生存可能性が潜在的により高い率であることに少なくとも部分的に起因して、受胎率を増加させる。本発明によるPercoll勾配手順は、上により具体的に記載されるように、沈着カテーテル内に配置された、より低い数の精子の使用と組み合わせて実施され得る。   Alternative embodiments of the present invention may provide a wide range of insemination sperm processing, processing and storage. Alternative embodiments of the invention may provide for selection of collected sperm cells that are more likely to achieve insemination, for example. According to one embodiment of the present invention, the selection of the desired sperm cell or sperm cell that is more likely to achieve insemination may include the step of concentrating the collected more motile sperm. Further embodiments may provide for centrifuging sperm over a density gradient and, in a preferred embodiment, a Percoll gradient. A potentially preferred embodiment may use a 90: 45% Percoll gradient. Further embodiments may include limiting the concentration to less than about twice the starting concentration. It should be understood that performing a Percoll gradient involves the use of Percoll before or after sperm processing, and in particular potentially before or after sorting. Thus, according to embodiments herein, the Percoll gradient procedure can be used with “fresh sperm”. Samples established from the desired sperm cells or selected sperm cells can be used to establish artificial insemination samples, which potentially means a higher rate of sample viability. Increase conception rate, at least in part. The Percoll gradient procedure according to the present invention can be performed in combination with the use of a lower number of sperm placed in a deposition catheter, as described more specifically above.

さらに、人工授精サンプルの確立は、子宮鏡に適合性の媒体を有するサンプルを確立することによって提供され得、それによって、受精率の潜在的増加および効果的な授精手順を提供する。より詳細には、本発明の実施形態は、人工授精サンプル(好ましい実施形態において、自然の授精用量と比較して少数の精子を有する)を確立すること、そして潜在的にさらなる処理の前に、好ましくは希釈媒体として、人工授精サンプル適合性媒体(例えば、エキステンダー、および好ましい実施形態において、スキムミルク媒体(例えば、EZ−Mixin CST(登録商標)(Animal Reproduction Systems,Chino,CA))の確立を提供すること、を提供する。本発明の好ましい実施形態に従って、希釈は、多くとも2:1の比、多くとも5:1の比、そして多くとも10:1の比までで行い、適切な濃度を有する、少なくとも子宮鏡に適合性の容量および媒体を潜在的に達成し得る。さらに、本発明の実施形態は、上述のように、子宮鏡に適合性の媒体を利用してサンプルを確立するために、エキステンダーの使用(潜在的には、精子の処理後に、潜在的には第1のエキステンダーと組み合わせて提供される、第2のエキステンダー)を提供し得る。第2のエキステンダーは、処理後の精子サンプルを再懸濁するために使用され得、そしてより詳細には、子宮鏡に適合性の媒体を使用してサンプルを提供し得る。好ましい実施形態に従って、媒体または第2のエキステンダーは、TALP媒体、HEPES緩衝化タイロード媒体、Androhep媒体を含み得る。本発明の好ましい実施形態に従って、希釈は、スキムミルク媒体(例えば、EZ−Mixin CST(登録商標))、TALP媒体、HEPES緩衝化タイロード媒体、およびAndrohep媒体を、単独または組み合わせのいずれかで用いて行い、適切な濃度を有する、少なくとも子宮鏡に適合性の容量および媒体を潜在的に達成し得る。   Furthermore, the establishment of an artificial insemination sample can be provided by establishing a sample with a medium that is compatible with the hysteroscope, thereby providing a potential increase in fertilization rate and an effective insemination procedure. More particularly, embodiments of the present invention establish an artificial insemination sample (in a preferred embodiment, having a small number of sperm compared to the natural insemination dose), and potentially prior to further processing, Establishing artificial insemination sample compatible media (eg, extenders, and in preferred embodiments, skim milk media (eg, EZ-Mixin CST® (Animal Production Systems, Chino, Calif.)), Preferably as dilution media. According to a preferred embodiment of the present invention, the dilution is carried out at a ratio of at most 2: 1, a ratio of at most 5: 1 and up to a ratio of at most 10: 1 A volume and medium compatible with at least a hysteroscope can potentially be achieved. The described embodiment uses an extender (potentially first after the sperm processing, potentially first to establish a sample utilizing a hysteroscopic-compatible medium, as described above. A second extender provided in combination with the extender of the second extender, which can be used to resuspend the sperm sample after treatment, and more particularly, Samples can be provided using media compatible with the hysteroscope According to a preferred embodiment, the media or second extender can comprise TALP media, HEPES buffered tyrode media, Androhep media. According to a preferred embodiment, the dilution is performed with skimmed milk media (eg EZ-Mixin CST®), TALP media, HEPES buffered Tyrode media, And Androhep media can be used either alone or in combination to potentially achieve at least a hysteroscopic compatible volume and media with appropriate concentrations.

本発明のさらなる実施形態はまた、カテーテルに協調性の粘性を有する、子宮鏡に適合性の媒体(単数または複数)を利用して、人工授精サンプルを提供し得る。この粘性は、例えば、サンプルを押し出す工程および沈着させる工程を潜在的に容易にし得る。さらに、本発明の潜在的に好ましい実施形態に従って、適合性の媒体(単数または複数)の使用は、好ましくは、哺乳動物の血液のおよその粘性より高いかまたは生理食塩水のおよその粘性より高い粘性を有する、人工授精サンプルを作製し得る。さらに、さらなる実施形態は、各々、哺乳動物の平均体温にて、約100cpより高い粘性を有する適合性の媒体、約300cpより高い粘性を有する媒体、約1000cpより高い粘性を有する媒体、約3000cpより高い粘性を有する媒体、および約6000cpより高い粘性を有する媒体、を提供し得る。   Further embodiments of the invention may also utilize hysteroscopic compatible medium (s) having coordinated viscosity on the catheter to provide artificial insemination samples. This viscosity can potentially facilitate, for example, the process of extruding and depositing the sample. Further, in accordance with a potentially preferred embodiment of the present invention, the use of the compatible medium (s) is preferably higher than the approximate viscosity of mammalian blood or higher than the approximate viscosity of saline. Viscous artificial insemination samples can be made. In addition, further embodiments each include a compatible medium having a viscosity greater than about 100 cp, a medium having a viscosity greater than about 300 cp, a medium having a viscosity greater than about 1000 cp, about 3000 cp, each at an average body temperature of the mammal. A medium having a high viscosity and a medium having a viscosity higher than about 6000 cp may be provided.

さらに、本発明の実施形態は、子宮鏡受精サンプルを提供し得、これは、レザバ要素、このレザバ要素に応答性であるカテーテルシステム、このレザバ要素内に含まれる複数の精子細胞、およびこのレザバ要素に含まれ、かつこれらの精子細胞に応答性である、子宮鏡に適合性の媒体、を含む。さらなる実施形態に従って、これらの複数の精子細胞がこのレザバ要素内に含まれている、授精封じ込め状態(containment)は、自然の授精に代表的に見られる精子細胞数と比較して、少ない数の精子細胞を含み得る。   Furthermore, embodiments of the present invention may provide a hysteroscopic fertilization sample, which comprises a reservoir element, a catheter system responsive to the reservoir element, a plurality of sperm cells contained within the reservoir element, and the reservoir A hysteroscopic-compatible medium that is contained in the element and is responsive to these sperm cells. According to a further embodiment, these multiple sperm cells are contained within this reservoir element, the insemination containment is a small number compared to the number of sperm cells typically found in natural insemination. Sperm cells can be included.

授精の精液サンプルまたは精子細胞サンプルの特性の変更は、本発明に従って実施され得、そして好ましい実施形態に従って、その哺乳動物種の雌の発情時を決定し、次いで、ほぼその発情時に人工授精サンプルを確立するように人工授精精液の特性を変更することによって、実施され得る。代替的な実施形態は、先に定義されたように、その種の雌について適切に受精能があると決定したおよその時点にて、サンプルの特性を変更することを提供し得る。本発明はまた、以下から選択される時間内に受精精液の特性の変更を開始することを提供し得る:その哺乳動物種の雌について適切に受精能があると決定された時点の約24時間以内;その哺乳動物種の雌について適切に受精能があると決定された時点の約12時間以内;その哺乳動物種の雌について適切に受精能があると決定された時点の約8時間以内;その哺乳動物種の雌について適切に受精能があると決定された時点の約3時間以内;およびその哺乳動物種の雌について適切に受精能があると決定された時点の約1時間以内。この変更は、サンプルの調製、精子の選別、精子の解凍などからなり得る。   Alteration of the characteristics of a fertilized semen sample or sperm cell sample can be performed in accordance with the present invention and, according to a preferred embodiment, determines the time of estrus of a female of that mammalian species and then the artificial insemination sample approximately at that time of estrus. This can be done by changing the characteristics of the artificial insemination semen to establish. Alternative embodiments may provide for changing the characteristics of the sample at approximately the time that it has been determined to be adequately fertile for that species of female, as defined above. The present invention may also provide for initiating a change in the properties of fertilized semen within a time selected from: about 24 hours after it has been determined to be properly fertile for a female of that mammalian species Within about 12 hours from the time when it was determined to be properly fertile for females of that mammalian species; within about 8 hours of the time when it was determined to be properly fertile for females of that mammalian species; Within about 3 hours of time determined to be properly fertile for females of that mammalian species; and within about 1 hour of time determined to be properly fertile for females of that mammalian species. This change may consist of sample preparation, sperm sorting, sperm thawing and the like.

本発明の1つの特定の実施形態は、子宮鏡に適合性の媒体の確立およびより授精を達成する可能性のある精子を選択するための精子の濃縮を提供し得る。詳細には、本発明の1つの潜在的に好ましい実施形態は、遠心分離による精液の調製を提供し得る。精液は、好ましくは、市販のスキムミルクエキステンダー(例えば、EZ−Mixin CST(登録商標)(Animal Reproduction Systems,Chino,CA))において、例えば、100×10精子/mlを提供するよう希釈され得る。所望の場合、この精子懸濁物は、精子の選別に必要とされる潜在時間をシュミレートするよう、好ましくは、室温(20℃〜25℃)で6時間、光から保護され、そして維持され得る。次いで、この精子懸濁物を、90:45% Percoll(Sigma Chemical Co.,St.Louis,MO,USA)の不連続性密度勾配によって遠心分離して、これらの細胞を再濃縮し、そして精子の高度に移動性の画分を潜在的に選択し得る。90% Percollを、HEPES緩衝化タイロード媒体(Grondahlら、1996)で1:1(v/v)の比で希釈して、45%溶液を作製し得る。好ましくは15mLの遠心管において、好ましくは1mLの45% Percollを、好ましくは1mLの90% Percollの頂部に注意深く重層し得る。好ましくは1mLの精子懸濁物(EZ−Mixin,CST中100×10精子/mL)を、Percoll層の頂部に重層し得、そして遠心管を、12分の好ましい期間にわたって800×gで遠心し得る。遠心分離後、上清を完全に除去し得、そしてペレットを、好ましくは600μlのHEPES緩衝化タイロード媒体中に再懸濁し得る。1つの実施形態に従って、精子濃度を、比重計(534B MOD−1,Animal Reproduction Systems,Chino,CA)を用いて決定し、そして、500万個の精子を送達するための潜在的容量(潜在的には、好ましくは、約100μl)を計算し、そして授精のために調製し得る。 One particular embodiment of the present invention may provide for establishment of a hysteroscopic-compatible medium and sperm enrichment to select sperm that may achieve more insemination. In particular, one potentially preferred embodiment of the present invention may provide for the preparation of semen by centrifugation. Semen can preferably be diluted in a commercially available skim milk extender (eg, EZ-Mixin CST® (Animal Production Systems, Chino, Calif.)) To provide, for example, 100 × 10 6 sperm / ml. . If desired, the sperm suspension can be protected and maintained from light, preferably at room temperature (20 ° C. to 25 ° C.) for 6 hours to simulate the latency required for sperm sorting. . The sperm suspension is then centrifuged through a discontinuous density gradient of 90: 45% Percoll (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO, USA) to reconcentrate the cells and sperm A highly mobile fraction can be potentially selected. 90% Percoll can be diluted in a 1: 1 (v / v) ratio with HEPES buffered tyrode medium (Glondahl et al., 1996) to make a 45% solution. In a preferably 15 mL centrifuge tube, preferably 1 mL of 45% Percoll can be carefully overlaid, preferably on top of 1 mL of 90% Percoll. Preferably 1 mL of sperm suspension (100 × 10 6 sperm / mL in EZ-Mixin, CST) can be layered on top of the Percoll layer and the centrifuge tube centrifuged at 800 × g for a preferred period of 12 minutes. Can do. After centrifugation, the supernatant can be completely removed and the pellet can be resuspended in preferably 600 μl of HEPES buffered tyrode medium. According to one embodiment, sperm concentration is determined using a hydrometer (534B MOD-1, Animal Production Systems, Chino, CA) and the potential capacity to deliver 5 million sperm (potential Can preferably be calculated and prepared for insemination.

本発明の広範な局面に従って、本発明の1つの実施形態は、哺乳動物種の雌のUTJの近くにカテーテルを配置することを提供し、それによって、カテーテルが、子宮卵管接合部の近傍の表面下に挿入される。サンプルの少なくとも一部が、表面下のUTJの近傍にて押し出されるかまたは沈着され得る。   In accordance with a broad aspect of the present invention, one embodiment of the present invention provides for placing a catheter near a female UTJ of a mammalian species, whereby the catheter is proximate to the uterine fallopian junction. Inserted under the surface. At least a portion of the sample can be extruded or deposited in the vicinity of the subsurface UTJ.

本発明の1つの実施形態は、哺乳動物種の雄からの精子細胞の収集、収集された精子細胞の少なくともいくらかを利用する人工授精サンプルの確立、およびカテーテルへの人工授精サンプルの配置を提供する。雌が適切に受精能を有する時点は、上記のように決定され得る。光学要素(12)およびカテーテル(2)は、図2に示されるように、膣に挿入され、そして膣を通してガイドされ得る。UTJは、光学要素(12)によって光学的に位置決めされ得る。   One embodiment of the present invention provides for the collection of sperm cells from a male of a mammalian species, establishment of an artificial insemination sample that utilizes at least some of the collected sperm cells, and placement of the artificial insemination sample on a catheter. . The point at which the female is properly fertile can be determined as described above. The optical element (12) and catheter (2) can be inserted into the vagina and guided through the vagina, as shown in FIG. The UTJ can be optically positioned by the optical element (12).

カテーテルは、図3に示されるように、UTJ(30)の近傍の表面(34)の下に挿入され得る。人工授精サンプルの少なくとも一部は、UTJの近傍内の表面下に押し出され得、従って、層間に包み込まれたサンプルによって「膨れ」を形成する。人工授精サンプルの少なくとも一部の沈着が、UTJの近傍中の表面(34)下に提供され得る。表面(34)は、子宮内膜または子宮の他の部分あるいは子宮内層を含み得る。1つの好ましい実施形態において、カテーテルは、子宮の特定部分が穿刺されないように挿入され得、そして1つの実施形態に従って、子宮の血管形成された部分が穿刺されないように挿入され得る。1つの特定の実施形態に従って、穿孔されなくてもよい子宮の血管形成された部分としては、例えば、子宮の子宮間膜または子宮筋層の部分、あるいは他の血管形成された部分が挙げられ得る。その後、光学要素およびカテーテルは、その雌から引き抜かれ得、そしてその雌の卵子の受精が生じ得、その後、子孫哺乳動物の産生が、その受精卵から期待され得る。   The catheter can be inserted under the surface (34) in the vicinity of the UTJ (30), as shown in FIG. At least a portion of the artificial insemination sample can be extruded below the surface in the vicinity of the UTJ, thus forming a “bulge” with the sample encased between the layers. A deposit of at least a portion of the artificial insemination sample may be provided below the surface (34) in the vicinity of the UTJ. The surface (34) may include the endometrium or other part of the uterus or the uterine lining. In one preferred embodiment, the catheter can be inserted so that certain parts of the uterus are not punctured, and according to one embodiment, the angioplasty part of the uterus can be inserted so that it is not pierced. According to one particular embodiment, the vascularized portion of the uterus that may not be perforated may include, for example, the uterine uterine uterine or myometrial portion, or other vascularized portion. . The optical element and catheter can then be withdrawn from the female and fertilization of the female egg can occur, after which production of the offspring mammal can be expected from the fertilized egg.

本発明の実施形態はまた、ガイド要素(または、好ましい実施形態において、ビデオ内視鏡またはカニューレ)、ガイド要素に応答性のレザバ要素、レザバ要素に応答性である押し出し要素(または、好ましい実施形態において、注射器)、およびレザバ要素の前部に配置される細胞穿刺チップ(36)を有する、潜在的に対応する授精カテーテルを提供し得る。このカテーテルはさらに、穿孔深度制御要素(例えば、穿孔チップ(36)の近傍に配置される、チップ上の調整要素または止め)を提供し得る。本発明の授精カテーテルの1つの実施形態を、図3に示す。   Embodiments of the present invention may also include a guide element (or video endoscope or cannula in a preferred embodiment), a reservoir element responsive to the guide element, and an extrusion element responsive to the reservoir element (or preferred embodiment). And a potentially corresponding insemination catheter having a cell puncture tip (36) placed in front of the reservoir element. The catheter may further provide a piercing depth control element (eg, an adjustment element or stop on the tip that is located proximate to the piercing tip (36)). One embodiment of the insemination catheter of the present invention is shown in FIG.

上記のように、そして上記のUTJの近傍の表面下への押し出しおよび沈着の受精システムに従って、哺乳動物を産生する多くの工程が実施され得る。少数の精子が、カテーテル(2)に配置され得、そして、好ましい実施形態において、好ましくは、その数は、以下から選択され得る:1000万個未満の精子、500万個未満の精子、200万個未満の精子、100万個未満の精子、50万個未満の精子、および10万個未満の精子。さらに、卵子の受精が、本発明の好ましい実施形態に従って実施され得、ここで、受精の成功レベルは、従来の子宮体人工授精プロセスに統計学的に匹敵し得る。統計学的に匹敵する成功レベルは、上記のように定義され得る。   As described above and according to the subsurface extrusion and deposition fertilization system in the vicinity of the UTJ described above, a number of steps to produce a mammal can be performed. A small number of sperm can be placed in the catheter (2), and in a preferred embodiment, preferably the number can be selected from: less than 10 million sperm, less than 5 million sperm, 2 million Less than 1 sperm, less than 1 million sperm, less than 500,000 sperm, and less than 100,000 sperm. Furthermore, egg fertilization can be performed in accordance with a preferred embodiment of the present invention, where the success level of fertilization can be statistically comparable to conventional endometrial artificial insemination processes. A statistically comparable success level can be defined as above.

さらに、精子細胞は、哺乳動物種(本発明の代替的な実施形態において、ウシ、ウマまたはブタを含む)の雄から収集され得る。本発明の代替的な実施形態に従って、精子細胞は、上記のような、より受精を達成する可能性のあり得る細胞について、収集された細胞から選択され得る。   In addition, sperm cells can be collected from males of mammalian species, including, in alternative embodiments of the invention, cattle, horses or pigs. In accordance with an alternative embodiment of the present invention, sperm cells may be selected from the collected cells for cells that are likely to achieve more fertilization, as described above.

従って、本発明の実施形態に従って、受精封じ込め要素(insemination containment element)が提供され、これは、好ましくは、細胞基底表面(特定の実施形態において、子宮内層、または好ましい実施形態に従って、子宮の血管形成されていない部分(例えば、子宮間膜または子宮筋層))、細胞基底表面に隣接する細胞被覆表面(特定の実施形態において、子宮内膜また子宮内層)、細胞基底表面と細胞被覆表面との間の実質的に包み込まれた領域(好ましい実施形態に従って、UTJの近傍に位置決めされる)、およびその種の雄由来の精子細胞、を含む。好ましい実施形態はまた、自然の受精と比較して少数の精子(その容量内に配置される)および精子が通過し得る精子放出要素(その容量に隣接する)を利用する。精子は、受精容量について、(おそらく)精巣上体起源について(でさえ)、または先に議論した任意の他の制限について、収集、選択され得る。精子放出要素は、図3に示されるように、子宮の子宮内膜表面に裂け目(breach)を含み得るか、または単に拡散などによって生じ得る。   Thus, in accordance with an embodiment of the present invention, an insemination containment element is provided, which is preferably a cell basal surface (in certain embodiments, the uterine lining, or according to a preferred embodiment, uterine angiogenesis). Between the cell base surface and the cell coat surface (in certain embodiments, the endometrium or the endometrium), the cell base surface adjacent to the cell base surface (eg, the endometrium or myometrium) A substantially encapsulated region between (positioned in the vicinity of the UTJ, according to a preferred embodiment), and sperm cells from that type of male. Preferred embodiments also utilize a small number of sperm (located within that volume) and a sperm releasing element (adjacent to that volume) through which sperm can pass as compared to natural fertilization. Sperm can be collected and selected for fertilization capacity, (possibly) for epididymal origin (or even), or for any other restriction discussed above. The sperm-releasing element can include a break in the endometrial surface of the uterus, as shown in FIG. 3, or can simply be caused by diffusion or the like.

さらに、他の潜在的に独立した手順が、本発明に組み込まれ得、そしてなお、本発明の範囲内にあるとみなされ得る。このような手順としては、性徴によって精子細胞を選別することが挙げられ得、それによって、性選別人工受精サンプルを確立し、そして好ましい実施形態において、その哺乳動物についての自然の授精用量と比較して少ない精子数を使用して、低用量の性選択人工授精サンプルを確立することが挙げられ得る。さらに、精子細胞の保存または凍結、およびその後の解凍が、特定の実施形態(特に、ウマ、ウシおよびブタのような種々の哺乳動物に関して)において達成され得る。受精サンプルの沈着は、任意の様式で処理または吸引され得、UTJの陰窩またはひだに沈着され得、そしてその後の受精のための精子のいくつかの型の保存を提供し得る。子宮鏡に適合性の容量で適合性の媒体を利用する授精精子または授精サンプルの確立は、室温での精子またはサンプルの冷却をさらに提供し得る。遠心分離は、好ましくは、200×gで約5分間および800×gで約10分間、Percoll勾配によって実施され得る。好ましい実施形態に従って、より移動性の精子の濃縮は、開始濃度の約2倍未満への濃縮に制限され得る。詳細には、本発明において具体化される広範な概念および詳細な概念は、他の哺乳動物種(ウマ、ウシおよびブタを含む)に適用されることが理解される。最後に、子孫哺乳動物の産生に部分的に関する、本発明は、上記の方法クレームのいずれかに記載されるようなプロセスを利用して産生された動物の実施形態を開示するとみなされ得る。   In addition, other potentially independent procedures can be incorporated into the present invention and still be considered within the scope of the present invention. Such a procedure may include sorting sperm cells by sexual characteristics, thereby establishing a sex-sorted artificial insemination sample, and in a preferred embodiment compared to the natural insemination dose for that mammal. It may be mentioned to establish a low-dose sex-selective artificial insemination sample using a low sperm count. Furthermore, storage or freezing of sperm cells and subsequent thawing can be achieved in certain embodiments, particularly with respect to various mammals such as horses, cows and pigs. The deposition of the fertilized sample can be processed or aspirated in any manner, can be deposited in the crypt or fold of the UTJ, and can provide preservation of some type of sperm for subsequent fertilization. Establishing a fertilized sperm or fertilized sample that utilizes a compatible medium in a volume compatible with the hysteroscope may further provide cooling of the sperm or sample at room temperature. Centrifugation can preferably be performed with a Percoll gradient at 200 × g for about 5 minutes and 800 × g for about 10 minutes. According to a preferred embodiment, the concentration of more mobile sperm can be limited to concentration to less than about twice the starting concentration. In particular, it is understood that the broad concepts and detailed concepts embodied in the present invention apply to other mammalian species, including horses, cows and pigs. Finally, the present invention, which is partly related to the production of progeny mammals, can be considered to disclose embodiments of animals produced utilizing a process as described in any of the above method claims.

本発明の実施形態に従って、選別は、詳細には、哺乳動物種の雄からの精子細胞の収集、性特異的特徴に従う精子細胞の選別、選別された性特異的人工授精サンプルの確立、カテーテルへの選別された性特異的人工授精サンプルの配置を提供し、これらは、本明細書中に開示される本発明の種々の他の局面において、哺乳動物を産生する方法に組み込まれ得る。   According to an embodiment of the present invention, the sorting is specifically the collection of sperm cells from males of mammalian species, the selection of sperm cells according to sex-specific characteristics, the establishment of a sorted sex-specific artificial insemination sample, to the catheter Of selected sex-specific artificial insemination samples, which can be incorporated into methods of producing mammals in various other aspects of the invention disclosed herein.

前述から容易に理解され得るように、本発明の基本概念は、種々の様式で具体化され得る。これは、適切な授精を達成するための授精技術および装置の両方を包含する。本出願において、授精技術は、記載される種々のデバイスによって達成されることが示された結果の一部として、および利用に特有の工程として、開示される。これらは、意図および記載されるように、これらのデバイスを利用した単なる自然の結果である。さらに、いくつかのデバイスが開示されるが、これらは、特定の方法を達成するのみならず、多くの様式で変更され得ることが理解されるべきである。重要なことに、前述の全てについて、これらの局面の全ては、本開示によって包含されることが理解されるべきである。   As can be readily appreciated from the foregoing, the basic concepts of the present invention can be embodied in various ways. This includes both insemination techniques and devices to achieve proper insemination. In this application, insemination techniques are disclosed as part of the results shown to be achieved by the various devices described and as a process specific to utilization. These are merely natural results utilizing these devices, as intended and described. In addition, although several devices are disclosed, it should be understood that these not only accomplish specific methods, but can be varied in many ways. Significantly, for all of the foregoing, it should be understood that all of these aspects are encompassed by the present disclosure.

本出願に含まれる議論は、基本的な説明として役立つことが意図される。読者は、特定の議論が明らかに全ての可能な実施形態を記載していないかもしれず;多くの代替物が暗示されていることを認識するべきである。この議論はまた、本発明の一般的な性質について十分に説明していないかもしれず、そして各々の特徴または要素が、実際に、より広い機能またはより多くの種々の代替的または等価的な要素をどのように表し得るか明示していないかもしれない。また、これらも、本明細書中に暗に含まれる。本発明は、デバイスに関する専門用語で記載されており、デバイスの各要素は、暗に機能を果たし得る。装置クレームが、これらの記載されたデバイスについて含まれるだけでなく、方法クレームおよびプロセスクレームもまた、本発明および各要素が果たし得る機能に関して含まれ得る。これらの説明も専門用語も、本特許出願に含まれる特許請求の範囲を限定することを意図されない。   The discussion contained in this application is intended to serve as a basic explanation. The reader should be aware that specific discussions may not clearly describe all possible embodiments; many alternatives are implied. This discussion may also not fully describe the general nature of the invention, and each feature or element actually represents a wider function or more various alternative or equivalent elements. It may not be clear how it can be represented. These are also implicitly included in the present specification. The present invention has been described in device-related terminology, where each element of the device can implicitly function. Not only are device claims included for these described devices, but also method claims and process claims can be included for the invention and the functions each element can perform. Neither these descriptions nor the terminology are intended to limit the scope of the claims contained in this patent application.

種々の変更が、本発明の本質から逸脱することなくなされ得ることもまた、理解されるべきである。このような変更もまた、説明中に暗に含まれている。これらもなお、本発明の範囲内にある。   It should also be understood that various changes can be made without departing from the essence of the invention. Such changes are also implicitly included in the description. These are still within the scope of the present invention.

さらに、本発明および特許請求の範囲の種々の要素の各々もまた、種々の様式で達成され得る。本開示は、各々のこのようなバリエーション(任意の装置の実施形態、方法またはプロセスの実施形態の実施形態のバリエーション、またはこれらの任意の要素の単なるバリエーションでさえ)を包含することが理解されるべきである。特に、本発明の要素に関する開示に関して、各要素についての単語は、等価な装置用語または方法用語によって表わされ得る(たとえ、その機能または結果のみが同一であったとしても)ことが理解されるべきである。このような等価な用語、より広範な用語、またはより一般的な用語は、各々の要素または作用の説明に包含されるとみなされるべきである。このような用語は、本発明が権利付与される暗に広い範囲を明確にすることが所望される場合に、置換され得る。   In addition, each of the various elements of the invention and the claims can also be accomplished in various ways. It is understood that the present disclosure encompasses each such variation (any device embodiment, method or process embodiment variation, or even just a variation of any of these elements). Should. In particular, with respect to disclosure relating to elements of the present invention, it is understood that the words for each element may be represented by equivalent device or method terms (even if only their function or result is the same). Should. Such equivalent terms, broader terms, or more general terms should be considered to be included in the description of each element or action. Such terms may be substituted where it is desired to clarify the implicitly broad scope to which this invention is entitled.

1つの例にすぎないが、全ての作用は、その作用を得るための手段としてか、またはその作用を生じる要素として表わされ得ることが理解されるべきである。同様に、開示される各々の物理的要素は、その物理的要素が促進する作用の開示を包含することが理解されるべきである。この最後の局面に関して、1つの例にすぎないが、「押し出し器(extruder)」との開示は、明確に議論されているか否かに関わらず、「押し出す」作用の開示を包含することが理解されるべきであり、そして逆に、「押し出す」作用の開示のみが存在する場合、このような開示は、「押し出し器」の開示および「押し出すための手段」の開示さえも包含することが理解されるべきである。このような変更および代替的な用語は、本明細書中に明確に含まれることが理解されるべきである。   It should be understood that, but only one example, all actions can be expressed as a means for obtaining that action or as an element that produces that action. Similarly, each physical element disclosed should be understood to encompass a disclosure of the action that the physical element facilitates. With respect to this last aspect, it is only an example, but it is understood that the disclosure of “extruder” includes disclosure of the “push” action, whether or not explicitly discussed. It should be done, and conversely, where there is only a disclosure of the action of “extruding”, it is understood that such disclosure encompasses the disclosure of “extruder” and even the disclosure of “means for extruding” It should be. It should be understood that such changes and alternative terms are expressly included herein.

本特許出願において言及された法律、法令、規定または規則の任意の効果、または本特許出願において言及された特許、刊行物または他の引用文献は、参考として本明細書によって援用される。さらに、使用される各用語に関して、本出願におけるその利用が、このような解釈と矛盾しない限り、一般的な辞書の定義が、各用語および全ての定義について包含されることが理解され、ランダムハウスウェブスター大辞典(第2版)に含まれるような代替的な用語および同義語が、参考として本明細書中に援用されることが、理解される。しかし、上記の各々に関して、このような参考として援用される情報および記載が、この/これらの発明の特許化と矛盾するとみなされうる程度にまで、このような記載が、本出願人によってなされたものとして明らかにみなされるべきではない。   Any effects of laws, statutes, regulations or rules mentioned in this patent application, or patents, publications or other cited references mentioned in this patent application are hereby incorporated by reference. Further, for each term used, it is understood that a general dictionary definition is included for each term and all definitions, so long as its use in this application is consistent with such an interpretation. It is understood that alternative terms and synonyms such as those included in the Webster Dictionary (2nd edition) are hereby incorporated by reference. However, for each of the above, such description has been made by the applicant to the extent that the information and description incorporated by reference may be deemed to be inconsistent with this / patenting of these inventions. It should not be clearly regarded as a thing.

従って、本出願人らは、少なくとも、i)本明細書中で開示および記載されている各々の授精デバイス、ii)開示および記載されている関連の方法、iii)これらのデバイスおよび方法の各々の、類似のバリエーション、等価なバリエーション、および暗黙のバリエーションさえも、iv)開示および記載される、示される各々の機能を達成するそれらの代替の設計、v)開示および記載されることを達成するために含まれる、示される各々の機能を達成するそれらの代替の設計および方法、vi)別個の独立した発明として示される各々の特徴、構成成分、および工程、vii)開示される種々のシステムまたは構成成分により増強される適用、viii)このようなシステムまたは構成成分により産生される得られる産生物、ならびにix)本明細書上記に実質的に記載される方法および装置ならびに付属の実施例のいずれかに関する方法および装置、ならびにx)開示される要素の各々の種々の組み合わせおよび変形、を権利請求するための支持を有することが理解されるべきである。   Accordingly, Applicants have at least i) each insemination device disclosed and described herein, ii) related methods disclosed and described, and iii) each of these devices and methods. Iv) similar variations, equivalent variations, and even implicit variations, iv) those alternative designs that achieve each function shown, disclosed and described, and v) what is disclosed and described Vi) alternative features and components shown as separate independent inventions, vii) the various systems or configurations disclosed, Components-enhanced applications, viii) resulting products produced by such systems or components, and ix) to claim the methods and apparatus substantially as hereinbefore described and any of the appended examples and apparatus and x) various combinations and variations of each of the disclosed elements. It should be understood that it has the support of

さらに、使用される場合、一時的な句「〜を含む(包含する)」は、本明細書中で、従来の請求項の解釈に従って、「制限のない(オープンエンドの)」請求項を維持するために使用される。従って、文脈がそうでないことを要求しない限り、用語「〜を含む(包含する)(comprise)」またはそのバリエーション(comprisesまたはcomprising)は、記載される要素または工程あるいは要素または工程のグループの含有を含むことを意図するが、任意の他の要素または工程あるいは要素または工程のグループの排除を含むことを意図しない。このような用語は、出願人に最も広範な法的な許容を与えるように、それらの最も広範な形態で解釈されるべきである。   Further, when used, the temporary phrase “includes (includes)” maintains the “unlimited (open-ended)” claims herein, in accordance with the interpretation of the prior claims. Used to do. Thus, unless the context requires otherwise, the term “comprises” or variations thereof (comprises or comprising) includes the inclusion of the described element or step or group of elements or steps. It is intended to include, but is not intended to include the exclusion of any other element or step or group of elements or steps. Such terms should be construed in their broadest form so as to give the applicant the broadest legal acceptance.

以下の説明および請求項において使用される場合、用語「少なくとも1つ」は、この開示において、「少なくとも1つ」の語を含まない他の請求項または説明が、1つ以上の類似の要素をさらに含み得ないということを意味することを意図しないし、そのように使用されないこともまた注意すべきである。より具体的には、語「少なくとも1つ」は、請求される要素または工程とは別のさらなる要素または工程を有するデバイスまたは方法を本来含む「制限のない(オープンエンドの)」請求項を、さらなる要素を有するデバイスまたは方法がこのような請求項により網羅されない「限定的な(クローズドエンドの)」請求項に変更することを意図しないし、そのように使用されない。従って、使用される場合、一時的な句「含む(包含する)」の使用は、本明細書中で、従来の請求項の解釈に従って、「制限のない(オープンエンドの)」請求項を維持するために使用される。   As used in the following description and claims, the term “at least one” means in this disclosure that other claims or explanations that do not include the term “at least one” refer to one or more similar elements. It should also be noted that it is not intended to imply that it cannot be included, nor is it used as such. More specifically, the term “at least one” refers to an “unlimited (open-ended)” claim that inherently includes a device or method having additional elements or steps separate from the claimed elements or steps, Devices or methods having additional elements are not intended to be used and are not used as such to “restricted (closed end)” claims not covered by such claims. Thus, when used, the use of the temporary phrase “includes” maintains the “unlimited (open-ended)” claims herein, in accordance with the interpretation of the prior claims. Used to do.

(I.特許文献)   (I. Patent Literature)

Figure 2008093483
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(II.他の文献(著者、表題、日付、関連頁等を含む))   (II. Other documents (including author, title, date, related pages, etc.))

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図1は、本発明の1つの実施形態に従う、光学要素、カニューレ、カテーテルおよびシリンジの、部分的に分解した斜視図式図である。FIG. 1 is a partially exploded perspective view of an optical element, cannula, catheter, and syringe, according to one embodiment of the present invention. 図2は、哺乳動物種の雌性の生殖器官の図式表現および特に、本発明の1つの実施形態に従う人工授精の表現である。FIG. 2 is a schematic representation of the female reproductive organs of a mammalian species and in particular an artificial insemination representation according to one embodiment of the present invention. 図3は、本発明の包まれた人工授精の実施形態の拡大図式図である。FIG. 3 is an enlarged schematic diagram of an embodiment of the wrapped artificial insemination of the present invention.

Claims (1)

明細書に記載される哺乳動物の雌の子宮鏡授精システム。A mammalian female hysteroscopic insemination system as described in the specification.
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