JP2007526919A5 - - Google Patents

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[0010] 一の好ましい実施態様では、ペプチドは配列番号1のアミノ酸配列を有し、キャリアはカルボキシル化された磁性マイクロスフィアであり、リンカーは4-(マレイミドメチル)-1-シクロヘキサンカルボン酸(SMCC)及びGGCK(配列番号2)のアミノ酸配列を有する異種ペプチドを含み、そして当該異種ペプチドは上記ペプチドのC末端において当該ペプチドに結合されている。別の好ましい実施態様では、リンカーは、キャリアに直接結合された異種タンパク質BSAを含み、そしてSMCCはBSAに結合され、そして異種ペプチドを介して当該ペプチドに結合される。 [0010] In one preferred embodiment, the peptide has the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, the carrier is a carboxylated magnetic microsphere, and the linker is 4- (maleimidomethyl) -1-cyclohexanecarboxylic acid (SMCC) ) And GGCK (SEQ ID NO: 2) , and the heterologous peptide is linked to the peptide at the C-terminus of the peptide. In another preferred embodiment, the linker comprises a heterologous protein BSA directly attached to a carrier, and SMCC is attached to the BSA and attached to the peptide via the heterologous peptide.

[0011] 別の好ましい実施態様では、ペプチドは、配列番号1のアミノ酸5〜32からなるアミノ酸配列を有し、キャリアはカルボキシル化された磁性マイクロスフィアであり、リンカーはSMCC及びGGGGCK(配列番号3)のアミノ酸配列を有する異種ペプチドを含み、そして当該異種ペプチドは上記ペプチドのC末端において当該ペプチドに結合されている。別の好ましい実施態様では、当該リンカーは、さらに、キャリアに直接結合された異種タンパク質BSAを含み、そしてSMCCはBSAに結合され、そして異種ペプチドを介して当該ペプチドに結合される。 [0011] In another preferred embodiment, the peptide has an amino acid sequence consisting of amino acids 5-32 of SEQ ID NO: 1, the carrier is a carboxylated magnetic microsphere, and the linker is SMCC and GGGGCK (SEQ ID NO: 3 containing a heterologous peptide having an amino acid sequence of), and the heterologous peptide is coupled to the peptide at the C-terminus of the peptide. In another preferred embodiment, the linker further comprises a heterologous protein BSA directly attached to a carrier, and SMCC is attached to BSA and attached to the peptide via a heterologous peptide.

[0012] さらに別の好ましい実施態様では、ペプチドは配列番号1のアミノ酸9〜32からなるアミノ酸配列を有し、キャリアはカルボキシル化された磁性マイクロスフィアであり、リンカーはSMCC及びGGGGCK(配列番号3)のアミノ酸配列を有する異種ペプチドを含み、そして当該異種ペプチドは、上記ペプチドのC末端において当該ペプチドに結合されている。別の好ましい実施態様では、リンカーはさらにキャリアに直接結合された異種タンパク質BSAを含み、そしてSMCCはBSAに結合され、そして異種ペプチドを介して当該ペプチドに結合される。 [0012] In yet another preferred embodiment, the peptide has an amino acid sequence consisting of amino acids 9-32 of SEQ ID NO: 1, the carrier is a carboxylated magnetic microsphere, and the linker is SMCC and GGGGCK (SEQ ID NO: 3 containing a heterologous peptide having an amino acid sequence of), and the heterologous peptide is coupled to the peptide at the C-terminus of the peptide. In another preferred embodiment, the linker further comprises a heterologous protein BSA directly attached to the carrier, and the SMCC is attached to the BSA and attached to the peptide via the heterologous peptide.

[0013] さらに別の好ましい実施態様では、ペプチドは配列番号1のアミノ酸9〜32からなるアミノ酸配列を有し、キャリアはカルボキシル化された磁性マイクロスフィアであり、リンカーはSMCC及びKCGGGG(配列番号4)のアミノ酸配列を有する異種ペプチドを含み、そして当該異種ペプチドは上記ペプチドのN末端において当該ペプチドに結合される。別の好ましい実施態様では、リンカーはさらにキャリアに直接結合された異種タンパク質BSAを含み、そしてSMCCはBSAに結合され、そして異種ペプチドを介して当該ペプチドに結合される。 [0013] In yet another preferred embodiment, the peptide has an amino acid sequence consisting of amino acids 9-32 of SEQ ID NO: 1, the carrier is a carboxylated magnetic microsphere, and the linker is SMCC and KCGGGGG (SEQ ID NO: 4 containing a heterologous peptide having an amino acid sequence of), and the heterologous peptide is coupled to the peptide at the N-terminus of the peptide. In another preferred embodiment, the linker further comprises a heterologous protein BSA directly attached to the carrier, and the SMCC is attached to the BSA and attached to the peptide via the heterologous peptide.

[0019] 一の好ましい実施態様では、ペプチドは配列番号1のアミノ酸配列を有し、キャリアはカルボキシル化された磁性マイクロスフィアであり、リンカーはSMCC及びGGCK(配列番号2)のアミノ酸配列を有する異種ペプチドを含み、当該異種ペプチドは上記ペプチドのC末端において当該ペプチドに結合され、そしてそして抗原-抗体結合の検出はフローサイトメトリーにより行われる。他の好ましい実施態様では、リンカーはさらに、キャリアに直接結合されている異種タンパク質BSAを含み、SMCCはBSAに結合され、そして当該異種ペプチドを介して当該ペプチドに結合されている。 [0019] In one preferred embodiment, the peptide has the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, the carrier is a carboxylated magnetic microsphere, and the linker is heterologous having the amino acid sequences of SMCC and GGCK (SEQ ID NO: 2). The heterologous peptide is bound to the peptide at the C-terminus of the peptide, and detection of antigen-antibody binding is performed by flow cytometry. In another preferred embodiment, the linker further comprises a heterologous protein BSA that is directly attached to the carrier, and the SMCC is attached to the BSA and to the peptide via the heterologous peptide.

[0020] 別の好ましい実施態様では、ペプチドは配列番号1のアミノ酸5〜32からなるアミノ酸配列を有し、キャリアはカルボキシル化された磁性マイクロスフィアであり、リンカーはSMCC、及びGGGGCK(配列番号3)のアミノ酸配列を有する異種ペプチドを含み、当該異種ペプチドは上記ペプチドのC末端において当該ペプチドに結合され、そして抗原-抗体結合の検出は、フローサイトメトリーにより達成される。別の好ましい実施態様では、リンカーはさらに、キャリアに直接結合される異種タンパク質BSAを含み、そしてSMCCはBSAに結合され、そして異種ペプチドを介してペプチドに結合される。 [0020] In another preferred embodiment, the peptide has an amino acid sequence consisting of amino acids 5 to 32 of SEQ ID NO: 1, the carrier is a carboxylated magnetic microsphere, and the linker is SMCC and GGGGCK (SEQ ID NO: 3 The heterologous peptide is bound to the peptide at the C-terminus of the peptide, and detection of antigen-antibody binding is accomplished by flow cytometry. In another preferred embodiment, the linker further comprises a heterologous protein BSA directly attached to the carrier, and the SMCC is attached to the BSA and attached to the peptide via the heterologous peptide.

[0021] さらに別の好ましい実施態様では、ペプチドは配列番号1のアミノ酸9〜32からなるアミノ酸配列を有し、キャリアはカルボキシル化された磁性マイクロスフィアであり、リンカーはSMCC、及びGGGGCK(配列番号3)のアミノ酸配列を有する異種ペプチドを含み、当該異種ペプチドは上記ペプチドのC末端において当該ペプチドに結合され、そして抗原-抗体結合の検出がフローサイトメトリーにより達成される。別の好ましい実施態様では、リンカーはさらに、キャリアに直接結合された異種タンパク質BSAを含み、そしてSMCCはBSAに結合され、そして異種ペプチドを介してペプチドに結合される。 [0021] In yet another preferred embodiment, the peptide has an amino acid sequence consisting of amino acids 9-32 of SEQ ID NO: 1, the carrier is a carboxylated magnetic microsphere, and the linker is SMCC and GGGGCK (SEQ ID NO: 3) comprising a heterologous peptide having the amino acid sequence of 3), the heterologous peptide being bound to the peptide at the C-terminus of the peptide, and detection of antigen-antibody binding being achieved by flow cytometry. In another preferred embodiment, the linker further comprises a heterologous protein BSA directly attached to the carrier, and the SMCC is attached to the BSA and attached to the peptide via the heterologous peptide.

[0022] さらに別の好ましい実施態様では、ペプチドは配列番号1のアミノ酸9〜32からなるアミノ酸配列を有し、キャリアはカルボキシル化された磁性マイクロスフィアであり、リンカーはSMCC、及びKCGGGG(配列番号4)のアミノ酸配列を有する異種ペプチドを含み、そして当該異種ペプチドは、上記ペプチドのN-末端において当該ペプチドに結合される。別の好ましい実施態様では、リンカーはさらに、キャリアに直接結合された異種タンパク質BSAを含み、そしてSMCCはBSAに結合され、そして異種タンパク質を介してペプチドに結合される。 [0022] In still another preferred embodiment, the peptide has an amino acid sequence consisting of amino acids 9 to 32 of SEQ ID NO: 1, the carrier is a carboxylated magnetic microsphere, the linker is SMCC, and KCGGGGG (SEQ ID NO: 4) comprising a heterologous peptide having the amino acid sequence of 4) , and the heterologous peptide is linked to the peptide at the N-terminus of the peptide. In another preferred embodiment, the linker further comprises a heterologous protein BSA directly attached to the carrier, and the SMCC is attached to the BSA and attached to the peptide via the heterologous protein.

[0036] 本明細書中に使用される「リンカー」は、本発明のペプチドをキャリアに結合する任意の手段を指す。リンケージは、ペプチドのN末端又はC末端のいずれかに位置しうる。幾つかの実施態様では、リンケージは、ペプチドの内部アミノ酸残基の側鎖、例えばペプチドのN又はC末端に存在しないアスパラギン酸の第二カルボキシル基を通して達成されうる。リンカーは、本発明のペプチドとは異種性であるペプチド(例えば、GGGGCK(配列番号3)又はGGCK(配列番号2)といった短いアミノ酸配列)又はタンパク質(例えば、BSA又はKLH)を含みうる。異種ペプチドに加えて、リンカーは、さらに異種タンパク質、例えばBSA又はKLHをさらに含んでもよい。非ポリペプチドリンカー、例えば直鎖又は分枝鎖炭素リンカー、複素環炭素リンカー、又はポリエチレンリンカーは、本発明のペプチドをキャリアに結合する目的のために適しているか、複数の構成要素リンカーの一部として適切でありうる。一の好ましい非ポリペプチド・リンカーはSMCCである。さらに、リンカーは、1超の本発明のペプチドをキャリアに結合できる分枝状のアミノ酸ポリマーを含みうる。異種二機能性及び同一二機能性リンカーは、本発明の実行の際に適している。リンカーは、本発明のペプチドがキャリアに直接結合される場合、共有結合、例えばペプチド結合又はジスルフィド結合、又は非共有結合、例えばイオン結合又は疎水結合を含みうる。非共有結合の例は、抗原-抗体間、又はビオチン-アビジン間の相互作用である。 [0036] As used herein, "linker" refers to any means for attaching a peptide of the invention to a carrier. The linkage can be located at either the N-terminus or C-terminus of the peptide. In some embodiments, linkage can be achieved through the side chain of an internal amino acid residue of the peptide, such as the second carboxyl group of aspartic acid that is not present at the N or C terminus of the peptide. The linker may comprise a peptide (eg, a short amino acid sequence such as GGGGCK (SEQ ID NO: 3) or GGCK (SEQ ID NO: 2) ) or a protein (eg, BSA or KLH) that is heterologous to the peptide of the invention. In addition to the heterologous peptide, the linker may further comprise a heterologous protein, such as BSA or KLH. Non-polypeptide linkers, such as linear or branched carbon linkers, heterocyclic carbon linkers, or polyethylene linkers are suitable for the purpose of attaching the peptides of the invention to a carrier or as part of multiple component linkers. May be appropriate. One preferred non-polypeptide linker is SMCC. In addition, the linker may comprise a branched amino acid polymer capable of attaching more than one peptide of the invention to the carrier. Heterogeneous bifunctional and identical bifunctional linkers are suitable in the practice of the invention. The linker may comprise a covalent bond, such as a peptide bond or disulfide bond, or a non-covalent bond, such as an ionic bond or a hydrophobic bond, when the peptide of the invention is directly attached to the carrier. Examples of non-covalent bonds are antigen-antibody or biotin-avidin interactions.

I.ペプチド合成
[0089] 表1に記載されるペプチドを、N-α-保護基であるBoc又はFmocを用いてモノマーとして合成した。

Figure 2007526919
I. Peptide synthesis
[0089] Peptides listed in Table 1 were synthesized as monomers using the N-α-protecting group Boc or Fmoc.
Figure 2007526919

図1は、配列番号1:

Figure 2007526919
を示す。
図2は、市販のHSV-2型特異的酵素結合免疫学的検定を用いたHSV-2特異的抗体の検出と、ペプチド1-SMCC-BSA複合体:
Figure 2007526919
をHSV-2特異的抗原として用いる本発明の方法を使用したHSV-2特異的抗体の検出との間の相関を示す。
図3は、市販のHSV-2型特異的酵素結合免疫学的検定を用いたHSV-2特異的抗体の検出と、ペプチド2-SMCC-BSA複合体:
Figure 2007526919
をHSV-2特異的抗原として用いる本発明の方法を使用したHSV-2特異的抗体の検出との間の相関を示す。
図4は、市販のHSV-2型特異的酵素結合免疫学的検定を用いたHSV-2特異的抗体検出と、BSA-SMCC-ペプチド5複合:
Figure 2007526919
をHSV-2特異的抗原として用いる本発明の方法を使用したHSV-2特異的抗体の検出との間の相関を示す。
図5は、市販のHSV-2型特異的酵素結合免疫学的検定を用いたHSV-2特異的抗体検出と、ペプチド5:
Figure 2007526919
をHSV-2特異的抗原として用いる本発明の方法を使用したHSV-2特異的抗体の検出との間の相関を示す。 FIG. 1 shows SEQ ID NO: 1:
Figure 2007526919
Indicates.
FIG. 2 shows the detection of HSV-2 specific antibodies using a commercially available HSV-2 specific enzyme-linked immunoassay and the peptide 1-SMCC-BSA complex:
Figure 2007526919
Figure 2 shows the correlation between detection of HSV-2 specific antibodies using the method of the invention using as the HSV-2 specific antigen.
FIG. 3 shows the detection of HSV-2 specific antibodies using a commercially available HSV-2 type specific enzyme-linked immunoassay and peptide 2-SMCC-BSA conjugate:
Figure 2007526919
Figure 2 shows the correlation between detection of HSV-2 specific antibodies using the method of the invention using as the HSV-2 specific antigen.
FIG. 4 shows HSV-2 specific antibody detection using a commercially available HSV-2 specific enzyme-linked immunoassay and BSA-SMCC-peptide 5 conjugate:
Figure 2007526919
Figure 2 shows the correlation between detection of HSV-2 specific antibodies using the method of the invention using as the HSV-2 specific antigen.
FIG. 5 shows HSV-2 specific antibody detection using a commercially available HSV-2 specific enzyme-linked immunoassay and peptide 5:
Figure 2007526919
Figure 2 shows the correlation between detection of HSV-2 specific antibodies using the method of the invention using as the HSV-2 specific antigen.

Claims (59)

配列番号1の24〜36個の連続アミノ酸からなるHSV-2ペプチドを含む組成物。   A composition comprising an HSV-2 peptide consisting of 24-36 contiguous amino acids of SEQ ID NO: 1. 前記ペプチドが、配列番号1のアミノ酸5〜32からなる配列を有する、請求項1に記載の組成物。   The composition according to claim 1, wherein the peptide has a sequence consisting of amino acids 5 to 32 of SEQ ID NO: 1. 前記ペプチドが、配列番号1のアミノ酸9〜32からなる配列を有する、請求項1に記載の組成物。   The composition according to claim 1, wherein the peptide has a sequence consisting of amino acids 9 to 32 of SEQ ID NO: 1. 前記ペプチドが、配列番号1の配列を有する、請求項1に記載の組成物。   The composition of claim 1, wherein the peptide has the sequence of SEQ ID NO: 1. 前記ペプチドが、二量化される、請求項1に記載の組成物。   The composition of claim 1, wherein the peptide is dimerized. 前記ペプチドが、ジスルフィド結合を介して二量化される、請求項5に記載の組成物。   6. The composition of claim 5, wherein the peptide is dimerized via a disulfide bond. 前記ペプチドが、キャリアに結合される、請求項1に記載の組成物。   The composition of claim 1, wherein the peptide is bound to a carrier. 前記キャリアが、カルボキシル化されたマイクロスフィアである、請求項7に記載の組成物。   8. The composition of claim 7, wherein the carrier is a carboxylated microsphere. 前記キャリアが、カルボキシル化されたラテックス又は磁性マイクロスフィアである、請求項8に記載の組成物。   9. A composition according to claim 8, wherein the carrier is a carboxylated latex or magnetic microsphere. 前記ペプチドが、当該ペプチドのN末端又はC末端において、リンカーを介してキャリアに結合される、請求項7に記載の組成物。   The composition according to claim 7, wherein the peptide is bound to a carrier via a linker at the N-terminus or C-terminus of the peptide. 前記ペプチドが、当該ペプチドの内部アミノ酸残基においてリンカーを介してキャリアに結合される、請求項7に記載の組成物。   8. The composition of claim 7, wherein the peptide is bound to a carrier via a linker at an internal amino acid residue of the peptide. 前記リンカーが、異種ペプチドを含む、請求項10に記載の組成物。   The composition of claim 10, wherein the linker comprises a heterologous peptide. 前記リンカーが、異種タンパク質からなる、請求項10に記載の組成物。   The composition of claim 10, wherein the linker consists of a heterologous protein. 前記リンカーが、異種タンパク質をさらに含む、請求項12に記載の組成物。   13. The composition of claim 12, wherein the linker further comprises a heterologous protein. 前記異種タンパク質が、ウシ血清アルブミン(BSA)である、請求項14に記載の組成物。   15. The composition of claim 14, wherein the heterologous protein is bovine serum albumin (BSA). 前記異種タンパク質が、キーホール・リンペット・ヘモシアニンである、請求項14に記載の組成物。   The composition according to claim 14, wherein the heterologous protein is keyhole limpet hemocyanin. 前記リンカーが、異種ペプチドからなる、請求項12に記載の組成物。   The composition of claim 12, wherein the linker consists of a heterologous peptide. 前記異種ペプチドが、1のシステイン残基、1のリジン残基、及び少なくとも2個のグリシン残基を含む、請求項12に記載の組成物。   13. The composition of claim 12, wherein the heterologous peptide comprises one cysteine residue, one lysine residue, and at least two glycine residues. 前記リンカーが、分枝状アミノ酸ポリマーを含む、請求項10に記載の組成物。   12. The composition of claim 10, wherein the linker comprises a branched amino acid polymer. 前記分枝状アミノ酸ポリマーが、以下の:
Figure 2007526919
で表される構造を含む、請求項19に記載の組成物。
Said branched amino acid polymer is:
Figure 2007526919
The composition of Claim 19 containing the structure represented by these.
(1) 前記ペプチドが、配列番号1のアミノ酸配列を有し;
(2) 前記キャリアが、カルボキシル化された磁性マイクロスフィアであり;
(3) 前記リンカーが、4-(マレイミドメチル)-1-シクロヘキサンカルボン酸(SMCC)及び異種ペプチドであって、GGCK(配列番号2)のアミノ酸配列を有する当該異種ペプチドを含み;並びに
(4) 上記異種ペプチドが、上記ペプチドのC-末端において当該ペプチドに結合する、請求項12に記載の組成物。
(1) the peptide has the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1;
(2) the carrier is a carboxylated magnetic microsphere;
(3) the linker comprises 4- (maleimidomethyl) -1-cyclohexanecarboxylic acid (SMCC) and a heterologous peptide, the heterologous peptide having the amino acid sequence of GGCK (SEQ ID NO: 2) ;
(4) The composition of claim 12, wherein the heterologous peptide binds to the peptide at the C-terminus of the peptide.
前記リンカーが、前記キャリアに直接結合される異種タンパク質BSAをさらに含み、ここでSMCCがBSAに結合され、そして異種ペプチドを介して前記ペプチドに結合される、請求項21に記載の組成物。   23. The composition of claim 21, wherein the linker further comprises a heterologous protein BSA that is directly attached to the carrier, wherein SMCC is attached to BSA and to the peptide via a heterologous peptide. (1) 前記ペプチドが、配列番号1のアミノ酸5〜32からなるアミノ酸配列を有し;
(2) 前記キャリアが、カルボキシル化された磁性マイクロスフィアであり;
(3) 前記リンカーが、SMCC及び異種ペプチドであって、GGGGCK(配列番号3)のアミノ酸配列を有する当該異種ペプチドを含み;そして
(4) 上記異種ペプチドが、上記ペプチドのC末端において当該ペプチドに結合する、
請求項12に記載の組成物。
(1) The peptide has an amino acid sequence consisting of amino acids 5 to 32 of SEQ ID NO: 1;
(2) the carrier is a carboxylated magnetic microsphere;
(3) the linker comprises SMCC and a heterologous peptide comprising the heterologous peptide having the amino acid sequence of GGGGCK (SEQ ID NO: 3) ;
(4) the heterologous peptide binds to the peptide at the C-terminus of the peptide;
The composition according to claim 12.
前記リンカーがさらに、前記キャリアに直接結合される異種タンパク質BSAを含み、ここで、SMCCがBSAに結合され、そして前記異種ペプチドを介して前記ペプチドに結合される、請求項23に記載の組成物。   24. The composition of claim 23, wherein the linker further comprises a heterologous protein BSA that is directly attached to the carrier, wherein SMCC is attached to the BSA and to the peptide via the heterologous peptide. . (1) 前記ペプチドが、配列番号1のアミノ酸9〜32からなるアミノ酸配列を有し;
(2) 前記キャリアが、カルボキシル化された磁性マイクロスフィアであり;
(3) 前記リンカーが、SMCC及び異種ペプチドであって、GGGGCK(配列番号3)のアミノ酸配列を有する当該異種ペプチドを含み;そして
(4) 上記異種ペプチドが、上記ペプチドのC末端で当該ペプチドに結合される;
請求項12に記載の組成物。
(1) The peptide has an amino acid sequence consisting of amino acids 9 to 32 of SEQ ID NO: 1;
(2) the carrier is a carboxylated magnetic microsphere;
(3) the linker comprises SMCC and a heterologous peptide comprising the heterologous peptide having the amino acid sequence of GGGGCK (SEQ ID NO: 3) ;
(4) the heterologous peptide is bound to the peptide at the C-terminus of the peptide;
The composition according to claim 12.
前記リンカーがさらに、前記キャリアに直接結合される異種タンパク質BSAを含み、ここで、SMCCがBSAに結合され、そして前記異種ペプチドを介して前記ペプチドに結合される、請求項25に記載の組成物。   26. The composition of claim 25, wherein the linker further comprises a heterologous protein BSA that is directly attached to the carrier, wherein SMCC is attached to the BSA and to the peptide via the heterologous peptide. . (1) 前記ペプチドが、配列番号1のアミノ酸9〜32からなるアミノ酸配列を有し;
(2) 前記キャリアがカルボキシル化された磁性マイクロスフィアであり;
(3) 前記リンカーが、SMCC及び異種ペプチドであって、KCGGGG(配列番号4)のアミノ酸配列を有する当該異種ペプチドを含み;そして
(4) 上記異種ペプチドが、上記ペプチドのN末端において当該ペプチドに結合される、
請求項12に記載の組成物。
(1) The peptide has an amino acid sequence consisting of amino acids 9 to 32 of SEQ ID NO: 1;
(2) the carrier is a carboxylated magnetic microsphere;
(3) the linker comprises SMCC and a heterologous peptide comprising the heterologous peptide having an amino acid sequence of KCGGGGG (SEQ ID NO: 4) ;
(4) the heterologous peptide is bound to the peptide at the N-terminus of the peptide;
The composition according to claim 12.
前記リンカーが、前記キャリアに直接結合される異種タンパク質BSAを含み、ここでSMCCがBSAに結合され、そして前記異種ペプチドを介して前記ペプチドに結合される、請求項27に記載の組成物。   28. The composition of claim 27, wherein the linker comprises a heterologous protein BSA that is directly attached to the carrier, wherein SMCC is attached to BSA and to the peptide via the heterologous peptide. (1) 前記ペプチドが、配列番号1のアミノ酸9〜32からなるアミノ酸配列を有し;
(2) 前記キャリアがカルボキシル化されたマイクロスフィアであり;そして
(3) 前記分枝状アミノ酸ポリマーがさらに、CKという短いペプチドを含み、ここで当該短いペプチドは、そのC残基を介して、前記分枝状アミノ酸ポリマーの末端K残基に直接結合される、
請求項20に記載の組成物。
(1) The peptide has an amino acid sequence consisting of amino acids 9 to 32 of SEQ ID NO: 1;
(2) the carrier is a carboxylated microsphere; and
(3) The branched amino acid polymer further comprises a short peptide called CK, wherein the short peptide is directly linked to the terminal K residue of the branched amino acid polymer via its C residue. ,
21. The composition of claim 20.
生物学的サンプルにおけるHSV-2抗体の特異的検出方法であって、以下のステップ:
(a) 配列番号1の24〜36個の連続アミノ酸からなるペプチドであって、キャリアに結合される上記ペプチドを含む組成物と、生物学的サンプルを接触させ、
(b) 抗原-抗体結合が、上記ペプチドと上記生物学的サンプルの抗体構成要素との間で生じるかを検出し、ここで当該抗原-抗体結合の検出が、上記生物学的サンプル中におけるHSV-2抗体の存在を指す、
を含む、前記検出方法。
A method for the specific detection of HSV-2 antibody in a biological sample comprising the following steps:
(a) contacting a biological sample with a composition comprising 24 to 36 contiguous amino acids of SEQ ID NO: 1 comprising the peptide bound to a carrier;
(b) detecting whether antigen-antibody binding occurs between the peptide and the antibody component of the biological sample, wherein detection of the antigen-antibody binding is performed in the HSV in the biological sample. -2 indicates the presence of antibody,
The detection method comprising:
前記ステップ(b)が、フローサイトメトリーにより行われる、請求項30に記載の方法。   32. The method of claim 30, wherein step (b) is performed by flow cytometry. 前記生物学的サンプルが全血、血清、血漿、脳脊髄液、精嚢液、又は粘液である、請求項30に記載の方法。   32. The method of claim 30, wherein the biological sample is whole blood, serum, plasma, cerebrospinal fluid, seminal vesicle fluid, or mucus. 前記ペプチドが、配列番号1のアミノ酸5〜32からなる配列を有する、請求項30に記載の方法。   32. The method of claim 30, wherein the peptide has a sequence consisting of amino acids 5 to 32 of SEQ ID NO: 1. 前記ペプチドが、配列番号1のアミノ酸9〜32からなる配列を有する、請求項30に記載の方法。   32. The method of claim 30, wherein the peptide has a sequence consisting of amino acids 9-32 of SEQ ID NO: 1. 前記ペプチドが、配列番号1の配列を有する、請求項30に記載の方法。   32. The method of claim 30, wherein the peptide has the sequence of SEQ ID NO: 1. 前記キャリアが、カルボキシル化されたマイクロスフィアである、請求項30に記載の方法。   32. The method of claim 30, wherein the carrier is a carboxylated microsphere. 前記キャリアが、カルボキシル化されたラテックス又は磁性マイクロスフィアである、請求項36に記載の方法。   37. The method of claim 36, wherein the carrier is a carboxylated latex or magnetic microsphere. 前記ペプチドが、二量化される、請求項30に記載の方法。   32. The method of claim 30, wherein the peptide is dimerized. 前記ペプチドが、ジスルフィド結合を介して二量化される、請求項38に記載の方法。   40. The method of claim 38, wherein the peptide is dimerized via a disulfide bond. 前記ペプチドが、当該ペプチドのN-末端又はC-末端でリンカーを介して前記キャリアに結合される、請求項30に記載の方法。   31. The method of claim 30, wherein the peptide is attached to the carrier via a linker at the N-terminus or C-terminus of the peptide. 前記ペプチドが、当該ペプチドの内部アミノ酸残基においてリンカーを介して前記キャリアに結合される、請求項30に記載の方法。   32. The method of claim 30, wherein the peptide is attached to the carrier via a linker at an internal amino acid residue of the peptide. 前記リンカーが、異種ペプチドを含む、請求項40に記載の方法。   41. The method of claim 40, wherein the linker comprises a heterologous peptide. 前記リンカーが、異種タンパク質からなる、請求項40に記載の方法。   41. The method of claim 40, wherein the linker consists of a heterologous protein. 前記リンカーがさらに異種タンパク質を含む、請求項42に記載の方法。   43. The method of claim 42, wherein the linker further comprises a heterologous protein. 前記異種タンパク質が、BSAである、請求項44に記載の方法。   45. The method of claim 44, wherein the heterologous protein is BSA. 前記異種タンパク質が、KLHである、請求項44に記載の方法。   45. The method of claim 44, wherein the heterologous protein is KLH. 前記リンカーが、異種ペプチドからなる、請求項42に記載の方法。   43. The method of claim 42, wherein the linker consists of a heterologous peptide. 前記異種ペプチドが、1のシステイン残基、1のリジン残基、及び少なくとも2のグリシン残基を含む、請求項42に記載の方法。   43. The method of claim 42, wherein the heterologous peptide comprises 1 cysteine residue, 1 lysine residue, and at least 2 glycine residues. 前記リンカーが、分枝状アミノ酸ポリマーを含む、請求項40に記載の方法。   41. The method of claim 40, wherein the linker comprises a branched amino acid polymer. 前記リンカーが、以下の:
Figure 2007526919
で表される構造を含む、請求項49に記載の方法。
Said linker is:
Figure 2007526919
50. The method of claim 49, comprising a structure represented by:
(1) 前記ペプチドが、配列番号1のアミノ酸配列を有し;
(2) 前記キャリアが、カルボキシル化された磁性マイクロスフィアであり;
(3) 前記リンカーが、SMCC及び異種ペプチドであって、GGCK(配列番号2)のアミノ酸配列を有する当該異種ペプチドであり;
(4) 上記異種ペプチドが、上記ペプチドのC末端において当該ペプチドに結合され;そして
(5) 前記ステップ(b)がフローサイトメトリーにより行われる、
請求項42に記載の方法。
(1) the peptide has the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1;
(2) the carrier is a carboxylated magnetic microsphere;
(3) the linker is SMCC and a heterologous peptide, the heterologous peptide having the amino acid sequence of GGCK (SEQ ID NO: 2) ;
(4) the heterologous peptide is attached to the peptide at the C-terminus of the peptide; and
(5) The step (b) is performed by flow cytometry.
43. The method of claim 42.
前記リンカーが、前記キャリアに直接結合される異種タンパク質BSAをさらに含み、ここでSMCCがBSAに結合され、そして当該異種ペプチドを介して、前記ペプチドに結合される、請求項51に記載の方法。   52. The method of claim 51, wherein the linker further comprises a heterologous protein BSA directly attached to the carrier, wherein SMCC is attached to BSA and to the peptide via the heterologous peptide. (1) 前記ペプチドが、配列番号1のアミノ酸5〜32からなるアミノ酸配列を有し;
(2) 前記キャリアが、カルボキシル化された磁性マイクロスフィアであり:
(3) 前記リンカーが、SMCC及び異種ペプチドであって、GGGGCK(配列番号3)のアミノ酸配列を有する当該異種ペプチドを含み、
(4) 上記異種ペプチドが、上記ペプチドのC末端において当該ペプチドに結合され;そして
(5) 前記ステップ(b)がフローサイトメトリーにより行われる、
請求項42に記載の方法。
(1) The peptide has an amino acid sequence consisting of amino acids 5 to 32 of SEQ ID NO: 1;
(2) The carrier is a carboxylated magnetic microsphere:
(3) The linker includes SMCC and a heterologous peptide, the heterologous peptide having an amino acid sequence of GGGGCK (SEQ ID NO: 3) ,
(4) the heterologous peptide is attached to the peptide at the C-terminus of the peptide; and
(5) The step (b) is performed by flow cytometry.
43. The method of claim 42.
前記リンカーが、前記キャリアに直接結合される異種タンパク質BSAをさらに含み、ここでSMCCがBSAに結合し、そして前記異種ペプチドを介して前記ペプチドに結合される、請求項53に記載の方法。   54. The method of claim 53, wherein the linker further comprises a heterologous protein BSA that is directly attached to the carrier, wherein SMCC is attached to BSA and to the peptide via the heterologous peptide. (1) 前記ペプチドが、配列番号1のアミノ酸9〜32からなるアミノ酸配列を有し;
(2) 前記キャリアが、カルボキシル化された磁性マイクロスフィアであり;
(3) 前記リンカーが、SMCC及び異種ペプチドであって、GGGGCK(配列番号3)のアミノ酸配列を有する当該異種ペプチドを含み;
(4) 上記異種ペプチドが、上記ペプチドのC末端において当該ペプチドに結合され;
(5) 前記ステップ(b)が、フローサイトメトリーにより行われる、
請求項42に記載の方法。
(1) The peptide has an amino acid sequence consisting of amino acids 9 to 32 of SEQ ID NO: 1;
(2) the carrier is a carboxylated magnetic microsphere;
(3) The linker includes SMCC and a heterologous peptide, the heterologous peptide having an amino acid sequence of GGGGCK (SEQ ID NO: 3) ;
(4) the heterologous peptide is bound to the peptide at the C-terminus of the peptide;
(5) The step (b) is performed by flow cytometry.
43. The method of claim 42.
前記リンカーがさらに、前記キャリアに直接結合される異種タンパク質BSAを含み、ここでSMCCがBSAに結合され、そして前記異種ペプチドを介して前記ペプチドに結合される、請求項55に記載の方法。   56. The method of claim 55, wherein the linker further comprises a heterologous protein BSA that is directly attached to the carrier, wherein SMCC is attached to BSA and to the peptide via the heterologous peptide. (1) 前記ペプチドが、配列番号1のアミノ酸9〜32からなるアミノ酸配列を有し;
(2) 前記キャリアが、カルボキシル化された磁性マイクロスフィアであり;
(3) 前記リンカーが、SMCC及び異種ペプチドであって、KCGGGG(配列番号4)のアミノ酸配列を有する当該異種ペプチドを含み;
(4) 上記異種ペプチドが、上記ペプチドのN末端において当該ペプチドに結合され;そして
(5) 前記ステップ(b)が、フローサイトメトリーにより行われる、
請求項42に記載の方法。
(1) The peptide has an amino acid sequence consisting of amino acids 9 to 32 of SEQ ID NO: 1;
(2) the carrier is a carboxylated magnetic microsphere;
(3) The linker includes SMCC and a heterologous peptide, the heterologous peptide having an amino acid sequence of KCGGGGG (SEQ ID NO: 4) ;
(4) the heterologous peptide is attached to the peptide at the N-terminus of the peptide; and
(5) The step (b) is performed by flow cytometry.
43. The method of claim 42.
前記リンカーがさらに、前記キャリアに直接結合される異種タンパク質BSAを含み、ここで、SMCCがBSAに結合され、そして前記異種ペプチドを介して前記ペプチドに結合される、請求項57に記載の方法。   58. The method of claim 57, wherein the linker further comprises a heterologous protein BSA that is directly attached to the carrier, wherein SMCC is attached to BSA and to the peptide via the heterologous peptide. (1) 前記ペプチドが、配列番号1のアミノ酸9〜32からなるアミノ酸配列を有し;
(2) 前記キャリアがカルボキシル化されたマイクロスフィアであり;
(3) 前記分枝状アミノ酸ポリマーが、CKの短いペプチドをさらに含み、ここで、短いペプチドは、そのC残基を介して、当該分枝状アミノ酸ポリマーの末端K残基に直接結合され;そして
(4) 前記ステップ(b)がフローサイトメトリーにより行われる、
請求項50に記載の方法。
(1) The peptide has an amino acid sequence consisting of amino acids 9 to 32 of SEQ ID NO: 1;
(2) the carrier is a carboxylated microsphere;
(3) the branched amino acid polymer further comprises a short peptide of CK, wherein the short peptide is directly linked to the terminal K residue of the branched amino acid polymer via its C residue; And
(4) Step (b) is performed by flow cytometry.
51. The method of claim 50.
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