JP2007330193A - Food having new function, and method for producing the same - Google Patents

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瑞夫 矢嶋
Satoshi Iwatsuki
聡 岩附
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佳子 真鍋
Hiroshi Shionoya
博 塩野谷
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Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a food having action remarkably ameliorating intestinal flora, and to provide a method for producing the food. <P>SOLUTION: This food such as a fermented milk product is added with whey protein containing anti-Welch bacillus antibody, and contains 1 μg/g or above of the antibody. A sterilization method for a part containing whey protein to be added comprises cold sterilization or a method of letting ≥70 mass% of the anti-Welch bacillus antibody contained in whey protein remain. <P>COPYRIGHT: (C)2008,JPO&INPIT

Description

本発明は、新規な機能を持つ食品およびその製造方法に関し、さらに詳しくは腸内細菌叢を顕著に改善させる作用を持つ食品およびその製造方法に関する。   The present invention relates to a food having a novel function and a method for producing the same, and more particularly to a food having an effect of remarkably improving intestinal flora and a method for producing the same.

ヒトや動物の腸管内には各種の細菌が定着しており、腸内細菌叢を形成していることが知られている。このような細菌の中には宿主に対して有害な作用をもたらす悪玉菌と、宿主に対して有益な作用をもたらす善玉菌がある。そして、これらの細菌は共生または括抗関係を保っている。悪玉菌としては、アンモニア、硫化水素、アミン等の有害産物を生産し、これにより肝機能に過剰な負担をかけたり、発ガンに関連したりするもの等が挙げられ、具体的な菌種としては例えばウェルシュ菌等のクロストリジウム、腸球菌、連鎖球菌等が挙げられる。また、善玉菌としてはビフィズス菌、ラクトバチルス菌等が挙げられる。   It is known that various bacteria are colonized in the intestinal tract of humans and animals and form an intestinal bacterial flora. Among these bacteria, there are bad bacteria that have a harmful effect on the host, and good bacteria that have a beneficial action on the host. And these bacteria maintain a symbiotic or cohesive relationship. Examples of bad bacteria include those that produce harmful products such as ammonia, hydrogen sulfide, and amines, thereby overburdening liver function and related to carcinogenesis. Examples include Clostridium such as Clostridium perfringens, enterococci, streptococci and the like. Examples of good bacteria include bifidobacteria and lactobacilli.

腸内細菌叢の改善、すなわち、前記善玉菌の生育が活発で、菌数が増加することにより、宿主にもたらされる有益な効果として、下痢、便秘を中心とする消化器症状の改善、免疫賦活を介してのガン予防、感染抵抗力等の向上、有害微生物代謝産物及び有害酵素の抑制等、宿主が健康な生活を維持するために必要な、良好な腸内環境をもたらすことにつながる各種の効果が挙げられる。   Improvement of intestinal bacterial flora, that is, the growth of the good bacteria and the increase in the number of bacteria have beneficial effects on the host such as diarrhea, improvement of gastrointestinal symptoms centered on constipation, immunostimulation Various measures that lead to a good intestinal environment necessary for the host to maintain a healthy life, such as prevention of cancer through infection, improvement of infection resistance, suppression of harmful microbial metabolites and harmful enzymes, etc. There are effects.

特に、ビフィズス菌は高齢になると腸内での菌数が減少していくことが知られており、ビフィズス菌の菌数を増加させることが、良好な腸内環境の維持に特に重要である。   In particular, it is known that the number of bacteria in the intestine decreases as the bifidobacteria grow older, and increasing the number of bacteria of the bifidobacteria is particularly important for maintaining a good intestinal environment.

ビフィズス菌の菌数の増加を妨げているものに、ウェルシュ菌が挙げられる。ウェルシュ菌の菌数が減少すれば、ビフィズス菌の菌数の増加が期待できる。   C. perfringens can be mentioned as an obstacle to the increase in the number of bifidobacteria. If the number of Clostridium perfringens decreases, an increase in the number of bifidobacteria can be expected.

ウェルシュ菌に対する抗体(抗ウェルシュ菌抗体)は、ウェルシュ菌の増殖を阻害すると考えられるが、これまでのところ、食品レベルで用いることのできる、安価で、供給の容易な該抗体は知られていない。   Antibodies against C. perfringens (anti-C. Perfringens antibodies) are thought to inhibit the growth of C. perfringens, but so far there is no known low-cost, easy-to-supply antibody that can be used at the food level. .

腸内細菌叢の改善の役割を担うものとして、プロバイオティクスとプレバイオティクスが挙げられる。プロバイオティクスとはFuller(1989)による定義では、「腸内細菌叢のバランスを改善することによって宿主の健康に好影響を与える生きた菌体」とされている。また、プレバイオティクスとは、「腸内に生息する善玉菌の増殖を助けたり、活性を高めることで腸内環境を改善し、宿主の健康に有利に作用する食品成分」と定義され、オリゴ糖等の難消化性物質やプロピオン酸菌による乳清発酵物等がこれに該当する。
さらに、プロバイオティクスとプレバイオティクスの両者の混合物シンバイオティクスという概念も提唱されている。
Probiotics and prebiotics can be cited as those that play a role in improving the gut microbiota. Probiotics are defined by Fuller (1989) as “living cells that positively affect the health of the host by improving the balance of the gut microbiota”. Prebiotics are defined as “a food ingredient that improves the intestinal environment by helping the growth of good bacteria that live in the intestine or increases its activity, and that has an advantageous effect on the health of the host”. This includes indigestible substances such as sugar and whey fermented products from propionic acid bacteria.
In addition, the concept of a mixture of both probiotics and prebiotics, synbiotics, has been proposed.

プロバイオティクスである微生物のうち、乳酸菌は古くから食品の発酵用に広く利用されていた。例えば、乳をチーズ、ヨーグルト等に加工するために、また、種々の漬物や発酵調味料などに良い味や香りを付けるためにも利用されてきた。これらの乳酸菌類は本来自然界に存在したもので、発酵の原料となる乳類、穀物類、果実類などの自然発酵に関与し、長い間食品として使用されてきた。   Among microorganisms that are probiotics, lactic acid bacteria have been widely used for food fermentation since ancient times. For example, it has been used to process milk into cheese, yogurt and the like, and to add a good taste and aroma to various pickles and fermented seasonings. These lactic acid bacteria originally existed in nature, have been involved in the natural fermentation of milk, cereals, fruits and the like used as fermentation raw materials, and have been used as foods for a long time.

また、プロバイオティクスである微生物のうち、ビフィズス菌、特に人の腸管に由来するビフィドバクテリウム(Bifidobacterium)属の菌が、整腸作用、免疫賦活効果、感染防御効果等さまざまな生理効果を示すことが、近年、数多くの研究によって明らかになっており、乳製品の発酵用に使用されるほか、健康食品のサプリメントとして大きな市場を獲得している。   Among the microorganisms that are probiotics, bifidobacteria, especially those of the genus Bifidobacterium, derived from the human intestinal tract have various physiological effects such as intestinal regulation, immunostimulatory effect, and infection defense effect. This has been shown in recent years by numerous studies and has been used for fermentation of dairy products and has gained a large market as a health food supplement.

特許文献1においては、乳酸菌またはビフィズス菌と抗体を組み合わせることにより、優れた免疫賦活機能を奏する食品が提案されている。抗体の特異性については記載されていないが、免疫賦活機能を奏するということから、主にエンドトキシンやエンテロトキシンに対する抗体が機能していると考えられる。また、特許文献1には腸内細菌叢の変化については記載されていない。
特開2006−14654号公報
In patent document 1, the foodstuff which shows the outstanding immunostimulation function is proposed by combining an antibody with a lactic acid bacterium or a bifidobacteria. Although the specificity of the antibody is not described, it is considered that antibodies against endotoxin and enterotoxin are functioning mainly because they exhibit an immunostimulatory function. Patent Document 1 does not describe changes in the intestinal bacterial flora.
JP 2006-14654 A

本発明においては、腸内細菌叢を顕著に改善する食品およびその製造方法を提供することを課題とする。   An object of the present invention is to provide a food that significantly improves the intestinal flora and a method for producing the same.

本発明者らは前記課題を解決すべく、鋭意検討した結果、乳清タンパク中には抗ウェルシュ菌抗体が含まれていることを初めて見出し、産業上利用可能な抗ウェルシュ菌抗体を初めて獲得することができた。そして、乳清タンパクを食品に添加することで、抗ウェルシュ菌抗体を含有する食品を得、これが、腸内細菌叢を改善させることを見出し、本発明に到達した。食品を発酵乳とすると、発酵乳中の乳酸菌、ビフィズス菌との相乗作用から、腸内細菌叢をさらに顕著に改善させることを見出した。抗ウェルシュ菌抗体を含有する発酵乳製品は、発酵乳原料母液に乳清タンパクを添加し、抗ウェルシュ菌抗体が70質量%以上残存する加熱条件で殺菌した後に発酵させるか、または発酵乳製品に乳清タンパクを添加して、容易に得られることも見出し、本発明に到達した。   As a result of intensive studies to solve the above-mentioned problems, the present inventors have found for the first time that anti-Welsh bacteria antibodies are contained in whey proteins, and for the first time obtain industrially usable anti-Welsh bacteria antibodies. I was able to. And the foodstuff which contains an anti-Welsh bacteria antibody was obtained by adding whey protein to a foodstuff, this discovered improving intestinal microflora, and reached | attained this invention. It has been found that when the food is fermented milk, the intestinal microflora is further remarkably improved due to the synergistic action with lactic acid bacteria and bifidobacteria in the fermented milk. Fermented dairy products containing anti-C. Perfringens antibodies are fermented after adding whey protein to the fermented milk raw material mother liquor and sterilized under heating conditions in which anti-C. Perfringens antibodies remain at 70% by mass or more. The inventors have also found that it can be easily obtained by adding whey protein, and reached the present invention.

すなわち、本発明は下記のとおりである。
1)乳清タンパクを添加してなる、抗ウェルシュ菌抗体を1μg/g以上含有することを特徴とする、腸内細菌叢の改善効果を持つ食品、
2)乳清タンパクが抗ウェルシュ菌抗体を含有する請求項1に記載の食品、
3)食品が発酵乳製品である請求項1または2に記載の食品、
4)乳清タンパクを添加する食品の製造方法において、乳清タンパクを含有する部分については、非加熱または乳清タンパクに含まれる抗ウェルシュ菌抗体が70質量%以上残存する方法で除菌あるいは殺菌した後添加することを特徴とする請求項1〜3のいずれか1項に記載の食品の製造方法、
5)前記食品が発酵乳製品であって、常法により発酵させた発酵乳に、乳清タンパクを添加する請求項4に記載の食品の製造方法、
6)発酵乳製品の製造方法において、発酵乳原料母液に乳清タンパクを添加し、前記母液中の抗ウェルシュ菌抗体が70質量%以上残存する方法で除菌あるいは殺菌した後に、発酵微生物スターターを接種して発酵させることを特徴とする腸内細菌叢改善効果を持つ発酵乳製品の製造方法、および
7)前記発酵微生物スターターが乳酸菌である請求項6に記載の発酵乳製品の製造方法。
That is, the present invention is as follows.
1) A food having an effect of improving intestinal microflora, comprising 1 μg / g or more of an anti-Welsh bacteria antibody comprising whey protein added;
2) The food according to claim 1, wherein the whey protein contains an anti-Welsh antibody.
3) The food according to claim 1 or 2, wherein the food is a fermented milk product,
4) In the method for producing foods to which whey protein is added, the portion containing whey protein is sterilized or sterilized by a method in which 70% by mass or more of anti-Welsh bacteria antibody contained in whey protein remains unheated. The method for producing a food product according to any one of claims 1 to 3, wherein the food product is added after
5) The method for producing a food according to claim 4, wherein the food is a fermented milk product, and whey protein is added to fermented milk fermented by a conventional method.
6) In the method for producing fermented dairy products, after adding whey protein to the fermented milk raw material mother liquor and sterilizing or sterilizing the anti-Welsh bacteria antibody in the mother liquor by 70% by mass or more, The method for producing a fermented dairy product having an intestinal bacterial flora improving effect characterized by inoculating and fermenting, and 7) the method for producing a fermented dairy product according to claim 6, wherein the fermenting microorganism starter is a lactic acid bacterium.

請求項1記載の発明によれば、抗ウェルシュ菌抗体を1μg/g以上含有することにより腸内細菌叢を改善させる機能を持つ食品を提供することができる。請求項2記載の発明によれば、乳清タンパクの含有する前記抗体が特に前記効果を奏することができる。請求項3記載の発明によれば、食品を発酵乳製品とすることで、発酵乳中の乳酸菌、ビフィズス菌と抗ウェルシュ菌抗体の相乗作用により腸内細菌叢の改善を期待することができる。請求項4記載の発明によれば、添加する乳清タンパクを含有する部分について、非加熱または抗ウェルシュ菌抗体が70質量%以上残存する方法で除菌あるいは殺菌することにより、前記食品を容易に製造することができる。請求項5に記載の発明によれば常法により製造された発酵乳製品に本発明の効果を付与することができる。請求項6に記載の発明によれば、抗ウェルシュ菌抗体の残存量が多くて、前記効果に優れる発酵乳製品を製造することができる。   According to invention of Claim 1, the foodstuff which has the function which improves an intestinal microflora can be provided by containing 1 microgram / g or more of anti-C. Perfringens antibodies. According to invention of Claim 2, the said antibody which whey protein contains can have the said effect especially. According to the invention described in claim 3, by making the food a fermented dairy product, improvement of the intestinal microflora can be expected by the synergistic action of lactic acid bacteria, bifidobacteria and anti-Welsh bacteria antibodies in the fermented milk. According to the invention described in claim 4, the portion containing the whey protein to be added can be easily sterilized or sterilized by a method in which 70% by mass or more of the non-heated or anti-Welsh bacteria antibody remains, so that the food can be easily obtained. Can be manufactured. According to invention of Claim 5, the effect of this invention can be provided to the fermented milk product manufactured by the conventional method. According to the sixth aspect of the present invention, a fermented dairy product having a large residual amount of anti-C. Perfringens antibody and excellent in the effects can be produced.

本発明において、食品としては乳清タンパクを添加することのできる全ての加工食品を挙げることができ、原料の由来や形態はいずれでもよい。例えば、ヨーグルトや乳酸菌飲料等の発酵乳製品、加工乳や乳飲料等、発酵乳以外の乳製品類;スポーツ飲料・栄養ドリンク・野菜や果汁飲料等の飲料類;錠菓、キャンディ、チョコレート、シリアル、チューインガム等の菓子類;アイスクリーム、プリン、ゼリー、ババロア等のデザート類;クリームチーズ、マヨネーズ、ピーナッツバター、コンデンスミルク等のスプレッド類;ココア、抹茶粉末、ふりかけ等の粉末食品類等が挙げられるが、これら以外でもよい。   In the present invention, examples of the food include all processed foods to which whey protein can be added, and the origin and form of the raw material may be any. For example, fermented milk products such as yogurt and lactic acid bacteria beverages, processed milk and milk beverages, dairy products other than fermented milk; beverages such as sports drinks, nutrition drinks, vegetables and fruit juice drinks; tablet candy, candy, chocolate, cereal Sweets such as chewing gum; desserts such as ice cream, pudding, jelly, bavaroa; spreads such as cream cheese, mayonnaise, peanut butter, condensed milk; powdered foods such as cocoa, matcha powder, and sprinkles However, other than these may be used.

本発明において、前記食品に添加される乳清タンパクは通常の市販されているもの、すなわち、ホエータンパク濃縮物(WPC)、ホエータンパク単離物(WPI)、脱塩ホエー粉等が使用できるが、抗ウェルシュ菌抗体の含有量の高いものが好ましい。含有量が50μg/g以上であるとより好ましい。また、全抗体の含有量が高いことも好ましい。含有量が20mg/g以上であればより好ましい。乳清からの乳清タンパクの分離法については、各種の方法が採用されているが、ウルトラフィルタレーション法、マイクロフィルタレーション法、クロスフローマイクロフィルタレーション法、イオン交換法、その他いずれの方法によるものでも使用できる。   In the present invention, the whey protein added to the food may be a commercially available product, that is, whey protein concentrate (WPC), whey protein isolate (WPI), desalted whey powder, etc. Those having a high content of anti-C. Perfringens antibodies are preferred. The content is more preferably 50 μg / g or more. It is also preferable that the total antibody content is high. More preferably, the content is 20 mg / g or more. Various methods are used to separate whey protein from whey, but ultrafiltration, microfiltration, cross-flow microfiltration, ion exchange, and other methods are used. But you can use it.

乳清タンパクの原料としての乳は牛、ヤギ、ヒツジ、馬、水牛等いずれの哺乳動物の乳でもよいが、多量の入手が容易な牛の乳由来の乳清タンパクが好ましい。また、その乳はワクチン接種を受けた哺乳動物から採取された乳でも、ワクチン接種を受けていない哺乳動物から採取された乳でもよい。   The milk as the raw material of whey protein may be milk of any mammal such as cow, goat, sheep, horse, buffalo, etc., but whey protein derived from cow milk which is easily available in large quantities is preferred. The milk may be milk collected from a mammal that has been vaccinated or milk collected from a mammal that has not been vaccinated.

本発明において、発酵乳製品としては「乳および乳製品の成分規格等に関する省令」が定める発酵乳および乳酸菌飲料が挙げられる。
すなわち、発酵乳とは、乳等を乳酸菌または酵母で発酵させ、糊状または液状にしたもの、またはこれらを凍結したもので、無脂乳固形分8%以上であり、乳酸菌数または酵母菌数が107/ml以上含まれるものをいう。
乳酸菌飲料とは、乳等を乳酸菌または酵母で発酵させたものを加工し、または主要原料とした飲料で、無脂乳固形分3%以上8%未満のものについては、乳酸菌数または酵母菌数が107/ml以上含まれるものを(ただし、発酵後に加熱殺菌したものはこの限りでない)、無脂乳固形分3%未満のものについては、乳酸菌数または酵母菌数が106/ml以上含まれるものをいう。本発明においては、このほか、ビフィズス菌を接種して発酵させたものも含める。
In the present invention, fermented milk products include fermented milk and lactic acid bacteria beverages defined by “Ministerial Ordinance on Milk and Dairy Product Component Specifications”.
That is, fermented milk is obtained by fermenting milk or the like with lactic acid bacteria or yeast to make a paste or liquid, or by freezing them, and has a non-fat milk solid content of 8% or more, and the number of lactic acid bacteria or yeasts Of 10 7 / ml or more.
A lactic acid bacteria beverage is a beverage obtained by processing or fermenting milk or the like with a lactic acid bacterium or yeast, and a non-fat milk solid content of 3% to less than 8%. There what is included 10 7 / ml or higher (provided that this shall not apply those heat sterilization after fermentation), for those of less than a non-fat milk solid content of 3%, the lactic acid bacteria quantity or yeast is 10 6 / ml or more It means what is included. In addition to this, what inoculated and fermented bifidobacteria is also included in this invention.

本発明の腸内細菌叢を改善させる効果を持つ食品は、抗ウェルシュ菌抗体を1μg/g以上含有する。1μg/g以上含有することにより、人に摂取され、腸内でウェルシュ菌の増殖を抑制し、その結果、腸内細菌叢の顕著な改善が認められる。また、抗ウェルシュ菌抗体以外の抗体も、その摂取により、腸内で胆汁酸の分泌が促進され、胆汁酸に耐性のあるビフィズス菌の増殖が促進され、一方、胆汁酸に感受性のあるウェルシュ菌をはじめとしたクロストリジウム等の悪玉菌は菌数が減少すると考えられるので、全抗体量も多く含有していることが好ましい。抗体の胆汁酸分泌促進作用は便色改善(黄色みが増す)効果からも推定できる。抗ウエルシュ菌抗体量および全抗体量は後記実施例に記載する方法により測定される値である。   The food having the effect of improving the intestinal microflora of the present invention contains 1 μg / g or more of anti-Welsh bacteria antibody. Containing 1 μg / g or more suppresses the growth of Clostridium perfringens in the intestine, and as a result, a remarkable improvement in the intestinal microflora is observed. Ingestion of antibodies other than anti-Welsh bacteria antibodies also promotes the secretion of bile acids in the intestine and promotes the growth of bifidobacteria resistant to bile acids, while the C. perfringens sensitive to bile acids. Since bad bacteria such as Clostridium, etc., are considered to decrease the number of bacteria, it is preferable that they contain a large amount of total antibody. The bile acid secretion promoting action of the antibody can also be estimated from the effect of improving stool color (increased yellowness). The anti-C. Perfringens antibody amount and the total antibody amount are values measured by the method described in Examples below.

本発明の腸内細菌叢改善効果を有する食品は、前記した食品の通常の製造工程における任意の工程において、乳清タンパクを適宜添加することにより製造することができる。食品の製造工程において、食品を殺菌または除菌する必要がある場合、乳清タンパクを含有する部分については、非加熱あるいは抗ウェルシュ菌抗体が70質量%以上残存する条件で行われる方法が採用される。かかる殺菌方法としては、例えば、75℃以下での加熱殺菌や、電子線、ガンマ線、紫外線、高電圧パルス、振動磁場、閃光パルス、超音波、高圧処理等を用いた非加熱殺菌等が挙げられる。好ましくは、63〜75℃で15秒〜30分間の加熱殺菌である。   The food having the gut microbiota-improving effect of the present invention can be produced by appropriately adding whey protein in any step in the normal production process of the food described above. When it is necessary to sterilize or sterilize food in the manufacturing process of food, a method that is carried out under conditions where non-heated or anti-Welsh bacteria antibodies remain at least 70% by mass is adopted for the portion containing whey protein. The Examples of such sterilization methods include heat sterilization at 75 ° C. or lower, non-heat sterilization using electron beam, gamma ray, ultraviolet ray, high voltage pulse, oscillating magnetic field, flash pulse, ultrasonic wave, high pressure treatment, and the like. . Preferably, the heat sterilization is performed at 63 to 75 ° C. for 15 seconds to 30 minutes.

本発明において、食品が発酵乳製品においては、常法により、発酵させて得られた発酵乳に乳清タンパクを添加することも、また、乳清タンパクを発酵乳の原料母液に添加した後、発酵させることもできる。発酵乳に乳清タンパクを添加する場合において、添加する乳清タンパク部には、糖類を添加することもできる。糖類を添加すると、後の加熱殺菌工程での抗体の安定性を高めることができる。添加する糖類としては、後記する糖類を挙げることができる。また、通常の発酵乳を製造するときに用いる食品素材、食品添加物を添加することもできる。   In the present invention, when the food is a fermented dairy product, adding whey protein to fermented milk obtained by fermentation by a conventional method, or adding whey protein to the raw mother liquor of fermented milk, It can also be fermented. In the case of adding whey protein to fermented milk, saccharides can be added to the whey protein portion to be added. Addition of sugars can increase the stability of the antibody in the subsequent heat sterilization step. Examples of the saccharide to be added include saccharides described later. Moreover, the foodstuff material and food additive used when manufacturing normal fermented milk can also be added.

添加する乳清タンパク部は、含まれる抗ウェルシュ菌抗体が70質量%以上残存する方法で除菌または殺菌されることが必要であり、このような殺菌方法としては前記した75℃以下での加熱殺菌や非加熱殺菌方法が挙げられる。好ましくは、63〜75℃で15秒〜30分間の加熱殺菌法である。   The whey protein part to be added needs to be sterilized or sterilized by a method in which the contained anti-Welsh bacteria antibody remains in an amount of 70% by mass or more. As such a sterilization method, heating at 75 ° C. or less is performed. Examples include sterilization and non-heat sterilization methods. Preferably, it is a heat sterilization method at 63 to 75 ° C. for 15 seconds to 30 minutes.

発酵乳への乳清タンパク部の添加方法については、制限はない。例えば、予め発酵乳に乳清タンパク部を添加して容器に充填してもよいし、また、発酵乳部と乳清タンパク部を容器に同時に充填してもよい。   There is no restriction | limiting about the addition method of a whey protein part to fermented milk. For example, the whey protein part may be added to fermented milk in advance and filled in the container, or the fermented milk part and the whey protein part may be filled in the container at the same time.

一方、乳清タンパクを発酵乳の原料母液(以下、発酵母液ということがある)に添加した後、発酵させる方法においては、前記母液中の抗ウェルシュ菌抗体が70質量%以上残存する方法で除菌または殺菌したのちに、発酵微生物スターターを接種して発酵させる。発酵母液としては、通常の発酵乳を製造するときに用いる原料を用いることができる。すなわち、生乳、全粉乳、脱脂粉乳、クリーム等の乳製品;アスパルテーム、ステビアなどの高甘味物質等の甘味料;次項に示すような糖類;クエン酸、リンゴ酸、乳酸などの酸味料;増粘多糖類、ポリデキストロース、ポリグルタミン酸等の安定剤;ビタミンC等のビタミン類;風味向上のための乳化香料及び水性香料等の着香料;カロチノイドやアントシアニン等の着色料;ポリフェノール等の抗酸化剤;その他、嗜好成分、機能性成分等から選ばれる数種を混合して得られる液またはそれらの水溶液が用いられる。   On the other hand, in the method of adding whey protein to the raw mother liquor of fermented milk (hereinafter sometimes referred to as yeast-producing liquid) and then fermenting it, it is removed by a method in which 70% by mass or more of the anti-Welsh bacteria antibody in the mother liquor remains. After sterilization or sterilization, fermented microorganism starter is inoculated and fermented. As a yeast solution, the raw material used when manufacturing normal fermented milk can be used. Milk products such as raw milk, whole milk powder, skim milk powder, cream; sweeteners such as aspartame, stevia, etc .; sugars as shown in the next section; acidulants such as citric acid, malic acid, lactic acid; Stabilizers such as polysaccharides, polydextrose, polyglutamic acid; vitamins such as vitamin C; flavorings such as emulsified flavor and aqueous flavor to improve flavor; colorants such as carotenoids and anthocyanins; antioxidants such as polyphenols; In addition, a liquid obtained by mixing several kinds selected from a preference component, a functional component, or the like, or an aqueous solution thereof is used.

発酵母液に糖類を添加すると、後の加熱殺菌工程での抗体の安定性を高めることができる。添加する糖類としては、ブドウ糖、果糖等の単糖類、ショ糖、乳糖、マルトース等の二糖類、フラクトオリゴ糖、乳果オリゴ糖(ラクトスクロース)、ラクチュロース、イソマルトオリゴ糖、大豆オリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、大豆オリゴ糖、キシロオリゴ糖、ラフィノース、パラチノースオリゴ糖、ニゲロオリゴ糖、ゲンチオオリゴ糖、トレハロース、カップリングシュガー、ペクチンオリゴ、シクロデキストリン等のオリゴ糖類、グリセリン、ソルビトール、マルチトール、エリスリトール、還元パラチノース、ラクチトール、マンニトール、キシリトール等の糖アルコール類等を用いることができる。糖類は単体ないしは複数種を混合して添加してもよいし、その他の原料乳および副原料中に元来含まれる糖類も乳清タンパク中の抗体の安定性に寄与する。   When sugars are added to the yeast solution, the stability of the antibody in the subsequent heat sterilization step can be increased. Examples of sugars to be added include monosaccharides such as glucose and fructose, disaccharides such as sucrose, lactose and maltose, fructo-oligosaccharides, dairy oligosaccharides (lactosucrose), lactulose, isomalt-oligosaccharides, soybean oligosaccharides, galacto-oligosaccharides, Soybean oligosaccharide, xylooligosaccharide, raffinose, palatinose oligosaccharide, nigerooligosaccharide, gentiooligosaccharide, trehalose, coupling sugar, pectin oligo, cyclodextrin and other oligosaccharides, glycerin, sorbitol, maltitol, erythritol, reduced palatinose, lactitol, mannitol Sugar alcohols such as xylitol can be used. Saccharides may be added alone or as a mixture of two or more kinds, and saccharides originally contained in other raw milk and auxiliary raw materials also contribute to the stability of antibodies in whey protein.

発酵母液中の糖濃度は、加熱殺菌時において2質量%以上とすると抗体の熱安定性が高まり、抗体の残存率も高くなるので、好ましい。糖類の濃度の上限は特になく、糖の溶解度の範囲であればよい。   The sugar concentration in the yeast solution is preferably 2% by mass or more at the time of heat sterilization because the thermal stability of the antibody increases and the residual ratio of the antibody also increases. There is no particular upper limit on the concentration of saccharides, and it may be in the range of saccharide solubility.

発酵母液への乳清タンパクの添加方法に制限はない。また、添加順序も制限はない。例えば、生乳に糖類を添加した後に乳清タンパクを添加してもよいし、生乳に乳清タンパクを添加した後に糖類を添加してもよい。他の粉末原料を用いる場合、あらかじめ粉末原料と乳清タンパクを混合し、これを液体原料に加えると、乳清タンパクの溶解性がよくなるため好ましい。例えば、あらかじめ粉末状の糖類と乳清タンパクを混合し、これを生乳に添加する方法が挙げられる。   There is no restriction on the method of adding whey protein to the yeast solution. Further, the order of addition is not limited. For example, whey protein may be added after adding sugar to raw milk, or sugar may be added after adding whey protein to raw milk. When using other powder raw materials, it is preferable to mix the powder raw material and whey protein in advance and add this to the liquid raw material because the solubility of whey protein is improved. For example, there is a method in which powdered saccharide and whey protein are mixed in advance and added to raw milk.

発酵乳の製造方法においては、一般に殺菌された発酵母液に発酵微生物スターターを接種し、発酵させるが、本発明において、乳清タンパクを添加した発酵母液の殺菌方法としては母液中の抗ウェルシュ菌抗体が70質量%以上残存する条件で行われる方法が採用される。かかる殺菌方法としては、例えば、75℃以下での加熱殺菌や、電子線、ガンマ線、紫外線、高電圧パルス、振動磁場、閃光パルス、超音波、高圧処理等を用いた非加熱殺菌等が挙げられる。好ましくは、63〜75℃で15秒〜30分間の加熱殺菌である。   In the method for producing fermented milk, fermented microorganism starter is generally inoculated into fermented yeast solution and fermented, and in the present invention, the antibacterial antibody in mother liquor is used as a method for sterilizing yeast solution added with whey protein. Is used under the condition that 70% by mass or more remains. Examples of such sterilization methods include heat sterilization at 75 ° C. or lower, non-heat sterilization using electron beam, gamma ray, ultraviolet ray, high voltage pulse, oscillating magnetic field, flash pulse, ultrasonic wave, high pressure treatment, and the like. . Preferably, the heat sterilization is performed at 63 to 75 ° C. for 15 seconds to 30 minutes.

乳清タンパクを添加した後、殺菌を行った発酵母液は、通常通り、乳酸菌、ビフィズス菌等の発酵微生物スターターを接種され、20〜50℃で8〜24時間、発酵培養される。また、いわゆるケフィアヨーグルト等のように酵母を添加して複合発酵させることもできる。乳酸菌飲料においては、得られた発酵乳を通常の方法に従い加工して製造される。   After adding whey protein, the sterilized yeast solution is inoculated with a fermentation microorganism starter such as lactic acid bacteria or bifidobacteria as usual, and fermented and cultured at 20 to 50 ° C. for 8 to 24 hours. Alternatively, complex fermentation can be performed by adding yeast, such as so-called kefir yogurt. In a lactic acid bacteria drink, the obtained fermented milk is processed and manufactured according to a normal method.

本発明において、発酵微生物スターターの1つとして使用される乳酸菌は、ラクトバチルス(Lactobacillus)属に属するラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ブルガリクス(Lb.delbrueckii subsp.bulgaricus)、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ラクティス(Lb.delbrueckii subsp.lactis)、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・デルブルッキー(Lb.delbrueckii subsp.delbrueckii)、ラクトバチルス・アシドフィルス(Lb.acidophilus)、ラクトバチルス・カゼイ(Lb.casei)、ラクトバチルス・ロイテリ(Lb.reuteri)、ラクトバチルス・ブレビス(Lb.brevis)、ラクトバチルス・ガッセリ(Lb.gasseri)、ラクトバチルス・ジョンソニー(Lb.johnsonii)、ラクトバチルス・アラビノサス(Lb.arabinosus)、ラクトバチルス・ヘルベチカス(Lb.helveticus)、ストレプトコッカス(Streptococcus)属のストレプトコッカス・サーモフィルス(Stc.thermophilus)、ラクトコッカス(Lactococcus)属のラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシーズ・ラクティス(Lc.lactis subsp.lactis)、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシーズ・クレモリス(Lc.lactis subsp.cremoris)、ラクトコッカス・プランタラム(Lc.plantarum)、ラクトコッカス・ラフィノラクティス(Lc.raffinolactis)、ペディオコッカス(Pediococcus)属のペディオコッカス・ハロフィルス(P.halophilus)、ペディオコッカス・ペントサシウス(P.pentosaceus)、ロイコノストック(Leuconostoc)属のロイコノストック・メセンテロイデス(Leu.mesenteroides)、ロイコノストック・ラクティス(Leu.lactis)、エンテロコッカス(Enterococcus)属のエンテロコッカス・フェカーリス(Ec.faecalis)、エンテロコッカス・フェシウム(Ec.faecium)、プロピオニバクテリウム(Propionibacterium)属の乳酸菌等を挙げることができるが、他の乳酸菌も利用できる。   In the present invention, the lactic acid bacteria used as one of the fermenting microorganism starters are Lactobacillus (Lactobacillus) genus Lactobacillus delbruckii subspices bulgaricus (Lb. delbrueckii subsp. Bulgaricus), Lactobacillus delbrucky Subspecies Lactis (Lb. delbrueckii subsp. Lactis), Lactobacillus delbruecki subspices Delbrueckii (Lb. delbrueckii subsp. Delbrueckii), Lactobacillus acidophilus (Lb. acidophilus), Lactobacillus casei (Lb casei), Lactobacillus reuteri (Lb.reuteri), Lactobacillus brevis (Lb.brevis), Lactobacillus gasseri (Lb.gasseri), Lactobacillus johnsonii (Lb.johnsonii), Lactobacillus arabinosas ( Lb.arabinosus), Lactobacillus helvetis Lb.helveticus, Streptococcus genus Streptococcus thermophilus, Lactococcus genus Lactococcus lactis subsp.lactis, Lactococcus・ Lactococcus subsp.cremoris (Lc.lactis subsp.cremoris), Lactococcus plantarum (Lc.plantarum), Lactococcus raffinolactis (Lc.raffinolactis), Pediococcus (Pediococcus) pediococcus P.halophilus, P. pentosaceus, Leuconostoc, Leu. Mesenteroides, Leu. Lactis, Enterococcus (Leuconostoc) Enterococcus Examples include lactic acid bacteria belonging to the genus Ec.faecalis, Ec.faecium, and Propionibacterium, but other lactic acid bacteria can also be used.

ビフィズス菌としては、ビフィドバクテリウム(Bifidobacterium)属のビフィドバクテリウム・ビフィダム(B.bifidum)、ビフィドバクテリウム・ロンガム(B.longum)、ビフィドバクテリウム・ブレーベ(B.breve)、ビフィドバクテリウム・インファンティス(B.infantis)、ビフィドバクテリウム・アドレッセンティス(B.adolescentis)、ビフィドバクテリウム・カテヌラツム(B.catenulatum)等を挙げることができるが、他のビフィズス菌も利用できる。これらの乳酸菌およびビフィズス菌は2種以上を添加してもよい。   As Bifidobacterium, Bifidobacterium Bifidum (B.bifidum), Bifidobacterium longum (B.longum), Bifidobacterium breve (B.breve), Bifidobacterium infantis (B.infantis), Bifidobacterium adrescentis (B.adolescentis), Bifidobacterium catenulatum (B.catenulatum) can be mentioned, but other bifidos Fungi can also be used. Two or more of these lactic acid bacteria and bifidobacteria may be added.

以下に実施例を挙げて本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はそれらに限定されるものではない。実施例中、抗ウェルシュ菌抗体量の測定および全抗体量の測定は次の方法によった。また、実施例中、組成、糖濃度および抗体含量の%は質量%である。   EXAMPLES The present invention will be described more specifically with reference to examples below, but the present invention is not limited thereto. In the examples, the measurement of the amount of anti-C. Perfringens antibody and the measurement of the total antibody amount were performed by the following methods. Further, in the examples,% of the composition, sugar concentration, and antibody content is mass%.

(抗ウェルシュ菌抗体量の測定法)
抗LPS(大腸菌O−111由来)抗体を精製し、ELISA法により、この抗体と大腸菌O−111の抗原用菌体から検量線を作成した。この検量線から、ウェルシュ菌の抗原用菌体を用いて、試料(乳清タンパク、ヨーグルト等)中の抗ウェルシュ菌抗体量を、求めた。以下、順に記述する。
(Measurement method of anti-C. Perfringens antibody amount)
An anti-LPS (derived from E. coli O-111) antibody was purified, and a calibration curve was prepared from this antibody and cells for E. coli O-111 antigen by ELISA. From this calibration curve, the amount of anti-Welsh bacteria antibody in a sample (whey protein, yogurt, etc.) was determined using the cells for antigen of Clostridium perfringens. The following are described in order.

(抗LPS抗体の精製)
牛の初乳より得られた乳清から、50%飽和硫安の沈殿画分を得、PBSに溶解、透析した。透析内液の遠心上清をLPSアフィニティカラムに流した。PBSで洗浄後、0.1Mグリシン−塩酸緩衝液(pH2.7)で溶出させた。抗体分画は280nmの紫外部吸収で集め、抗体分画をプロテインGセファロース4ファーストフロー(アマシャムバイオサイエンス)5mlを用いて、吸着洗浄溶出により精製した。LPSカラムアフィニティとプロテインGカラムアフィニティを2回繰り返し、精製した抗体標品を標準品とした。抗体タンパク質濃度は280nmにおける1%溶液の紫外部吸収を14として算出した。
(Purification of anti-LPS antibody)
A 50% saturated ammonium sulfate precipitate fraction was obtained from whey obtained from cow colostrum, dissolved in PBS and dialyzed. The centrifugal supernatant of the dialyzed solution was passed through an LPS affinity column. After washing with PBS, elution was performed with 0.1 M glycine-hydrochloric acid buffer (pH 2.7). The antibody fraction was collected by ultraviolet absorption at 280 nm, and the antibody fraction was purified by adsorption washing elution using 5 ml of Protein G Sepharose 4 First Flow (Amersham Bioscience). LPS column affinity and protein G column affinity were repeated twice, and a purified antibody preparation was used as a standard product. The antibody protein concentration was calculated with the ultraviolet absorption of a 1% solution at 280 nm as 14.

(抗原用菌体の調製)
大腸菌O−111およびウェルシュ菌をブレインハートインヒュージョン(BHI)スラント培地で前培養後、BHIプレート5枚に塗抹し、大腸菌O-111は好気的、ウェルシュ菌は嫌気的に、37℃で培養した。菌が増殖したところで、菌体をPBSで回収し、沸騰水中で60分間加熱して、菌を死滅させた。遠心して上清を除去し、菌体ペレットを再度PBSに縣濁することを3回繰り返して、菌体を洗浄し、その後、660nmの吸光度が10となるように容量を調整し、抗原用菌体とした。
(Preparation of cells for antigen)
Escherichia coli O-111 and Clostridium perfringens are pre-cultured in brain heart infusion (BHI) slant medium, and then smeared on 5 BHI plates. Escherichia coli O-111 is aerobic and Welsh bacteria are anaerobically cultured at 37 ° C. did. When the bacteria grew, the cells were collected with PBS and heated in boiling water for 60 minutes to kill the bacteria. The supernatant is removed by centrifugation, and the cell pellet is suspended again in PBS three times to wash the cell, then the volume is adjusted so that the absorbance at 660 nm is 10, and the bacteria for antigen The body.

(ELISA法による定量)
大腸菌O−111の抗原用菌体をELISAプレートにコートし、牛血清アルブミンでブロッキングした後、上記で精製した抗LPS抗体を濃度を0〜40ng/mlに調整して、添加した。洗浄後、HRP標識抗牛IgG抗体(コスモバイオ製)を結合させ、o−Phenylenediamine(SIGMA社)を基質として発色させ、490nmの吸光度を測定して、検量線を求めた。
一方、ウェルシュ菌の抗原用菌体をELISAプレートにコートし、同様にブロッキングした後、PBSに溶解し適宜濃度を調整した試料を添加した。洗浄後、同様に発色させ、490nmの吸光度を測定し、上記検量線を用いて、その測定値から抗ウェルシュ菌抗体量を求めた。
(Quantification by ELISA method)
E. coli O-111 antigen cells were coated on an ELISA plate, blocked with bovine serum albumin, and the anti-LPS antibody purified above was adjusted to a concentration of 0 to 40 ng / ml and added. After washing, an HRP-labeled anti-bovine IgG antibody (manufactured by Cosmo Bio) was bound, color was developed using o-Phenylenediamine (SIGMA) as a substrate, and the absorbance at 490 nm was measured to obtain a calibration curve.
On the other hand, the cells for antigens of C. perfringens were coated on an ELISA plate, blocked in the same manner, and a sample dissolved in PBS and appropriately adjusted in concentration was added. After washing, the color was developed in the same manner, the absorbance at 490 nm was measured, and the amount of anti-Welsh bacteria antibody was determined from the measured value using the calibration curve.

(全抗体量の測定法)
試料を100mg取り、50mlの50mMリン酸緩衝液(pH6.8)に溶解し、2時間以上撹拌してから、その10ml以上を0.45μmメンブランフィルターでろ過した。一方、プロテインGカラム(Amersham、HiTrap Protein G HP 1ml)を50mMリン酸緩衝液(pH6.8)で平衡化し、前記メンブランフィルターでろ過した試料10mlをカラムに流し、同緩衝液(pH6.8)で洗浄後、100mMグリシン塩酸緩衝液(pH2.7)で抗体を溶出させた。
(Measurement method of total antibody amount)
100 mg of a sample was taken, dissolved in 50 ml of 50 mM phosphate buffer (pH 6.8), stirred for 2 hours or longer, and 10 ml or more was filtered through a 0.45 μm membrane filter. On the other hand, protein G column (Amersham, HiTrap Protein G HP 1 ml) was equilibrated with 50 mM phosphate buffer (pH 6.8), 10 ml of the sample filtered through the membrane filter was passed through the column, and the same buffer (pH 6.8). Then, the antibody was eluted with 100 mM glycine hydrochloride buffer (pH 2.7).

溶出液の280nmの吸光度を測定し、抗体濃度1%のときの吸光度を14として試料中の抗体濃度を換算し、試料中に含まれる抗体量を計算した。   The absorbance at 280 nm of the eluate was measured, the antibody concentration in the sample was converted with the absorbance at the antibody concentration of 1% being 14, and the amount of antibody contained in the sample was calculated.

(乳酸菌数の測定法)
BCP加プレートカウント寒天培地(栄研化学(株))を滅菌し、シャーレに分注して、平板とする。希釈した試料をコンラージ棒で塗布し、37℃、72時間培養を行い、算定した。
(Method for measuring the number of lactic acid bacteria)
BCP-added plate count agar medium (Eiken Chemical Co., Ltd.) is sterilized and dispensed into a petri dish to form a flat plate. The diluted sample was applied with a conage rod, cultured at 37 ° C. for 72 hours, and calculated.

(ビフィズス菌数の測定法)
BL寒天培地「ニッスイ」(日水製薬(株))を滅菌後、50℃まで冷却し、BS培地用添加液(プロピオン酸ナトリウム30%、塩化リチウム6%、硫酸パロモマイシン0.1%、硫酸ネオマイシン0.1%)を5%、ウマ脱繊維血液を5%添加し、シャーレに分注して、平板とした。希釈した試料をコンラージ棒で塗布し、37℃、20時間嫌気培養を行い、算定した。
(Method for measuring the number of bifidobacteria)
After sterilizing the BL agar medium “Nissui” (Nissui Pharmaceutical Co., Ltd.), it is cooled to 50 ° C. and added to a BS medium (sodium propionate 30%, lithium chloride 6%, paromomycin sulfate 0.1%, neomycin sulfate) 0.1%) and 5% equine defibrinated blood were added and dispensed into a petri dish to form a flat plate. The diluted sample was applied with a large rod, and anaerobic culture was carried out at 37 ° C. for 20 hours to calculate.

(ウェルシュ菌数の測定法)
カナマイシン含有CW寒天基礎培地「ニッスイ」(日水製薬(株))を滅菌し、シャーレに分注して、平板とする。希釈した試料をコンラージ棒で塗布し、37℃、20時間嫌気培養を行い、算定した。
(Method for measuring the number of Clostridium perfringens)
Kanamycin-containing CW agar basal medium “Nissui” (Nissui Pharmaceutical Co., Ltd.) is sterilized and dispensed into a petri dish to form a flat plate. The diluted sample was applied with a large rod, and anaerobic culture was carried out at 37 ° C. for 20 hours to calculate.

[参考例1](乳清タンパク中の抗ウェルシュ菌抗体量および全抗体含量の測定)
前記測定法に従い、市販の乳清タンパク中の抗ウェルシュ菌抗体量および全抗体含量を測定したところ、ミラクテール80(森永乳業(株)製)は50μg/gおよび28.8mg/g、乳清タンパクLN23((株)アオテアロア製)は142μg/gおよび121mg/gであった。
[Reference Example 1] (Measurement of anti-C. Perfringens antibody content and total antibody content in whey protein)
According to the above measurement method, the amount of anti-Welsh bacteria antibody and the total antibody content in commercially available whey protein were measured, and Miractail 80 (manufactured by Morinaga Milk Industry Co., Ltd.) was 50 μg / g and 28.8 mg / g, whey protein. LN23 (manufactured by Aotearoa Co., Ltd.) was 142 μg / g and 121 mg / g.

[実施例1〜3、比較例1]
実施例1として、下記表1に示す配合(数値は質量比)で乳清タンパクと牛乳を混合し、63℃で30分間加熱殺菌して加工乳とした。実施例2、3および比較例1として、下記表1に示す配合で3種類の発酵母液を作り、63℃で30分間加熱殺菌し、その母液1kgに前培養スターター(ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ブルガリクス、ストレプトコッカス・サーモフィルス、ビフィドバクテリウム・ロンガムを混合)を50g加え、37℃で15時間発酵させてヨーグルトを得た。実施例1において得られた加工乳1g中には1.8μgの抗ウェルシュ菌抗体、1.1mgの全抗体が含まれていた。実施例2において得られたヨーグルト1g中には1.7μgの抗ウェルシュ菌抗体、1.0mgの全抗体と8×109の乳酸菌、6×107のビフィズス菌が含まれていた。実施例3で得られたヨーグルト1g中には5.4μgの抗ウェルシュ菌抗体、4.5mgの全抗体と9×109の乳酸菌、2×108のビフィズス菌が含まれていた。比較例1のヨーグルト1g中には7×109の乳酸菌が含まれており、抗体は検出されなかった。
[Examples 1 to 3, Comparative Example 1]
As Example 1, whey protein and milk were mixed with the composition shown in Table 1 below (numerical values are mass ratios), and heat-sterilized at 63 ° C. for 30 minutes to obtain processed milk. As Examples 2 and 3 and Comparative Example 1, three types of yeast solution were prepared with the composition shown in Table 1 below, pasteurized by heating at 63 ° C. for 30 minutes, and pre-culture starter (Lactobacillus delbruecki sub 50 g of Spices bulgaricus, Streptococcus thermophilus and Bifidobacterium longum were added and fermented at 37 ° C. for 15 hours to obtain yogurt. In 1 g of the processed milk obtained in Example 1, 1.8 μg of anti-Welsh bacteria antibody and 1.1 mg of total antibody were contained. In 1 g of yogurt obtained in Example 2, 1.7 μg of anti-Welsh bacteria antibody, 1.0 mg of total antibody, 8 × 10 9 lactic acid bacteria, and 6 × 10 7 bifidobacteria were contained. 1 g of yogurt obtained in Example 3 contained 5.4 μg of anti-Welsh bacteria antibody, 4.5 mg of total antibody, 9 × 10 9 lactic acid bacteria, and 2 × 10 8 bifidobacteria. 1 g of yogurt of Comparative Example 1 contained 7 × 10 9 lactic acid bacteria, and no antibody was detected.

(表1)
実施例1 実施例2 実施例3 比較例1
牛乳(130℃3秒殺菌) 96 96 96 100
ミラクテール80 4 4 - -
乳清タンパクLN23 - - 4 -
乳酸菌発酵の有無 無 有 有 有
(Table 1)
Example 1 Example 2 Example 3 Comparative Example 1
Milk (sterilized at 130 ° C for 3 seconds) 96 96 96 100
Miracle tail 80 4 4--
Whey protein LN23--4-
Presence or absence of lactic acid bacteria fermentation No Yes Yes Yes

[実施例4](腸内ビフィズス菌数の変化)
被験者4名に、実施例1の加工乳、実施例2、3および比較例1で得られたヨーグルト、を表2に示したような順序で2週間ずつ(計8週間)、それぞれ1日100gを、毎朝食後に飲用してもらった。各2週間のうち、後半の1週間について糞便を採取した。なお、試験開始前の1週間も糞便を採取した。これらの糞便中のビフィズス菌数とウェルシュ菌数を上記の方法で測定し、各試験区の値を平均した。これらの測定結果を図1のグラフに示す。
[Example 4] (Change in intestinal bifidobacteria count)
Four subjects had the processed milk of Example 1 and the yogurts obtained in Examples 2 and 3 and Comparative Example 1 for 2 weeks (total 8 weeks) in the order shown in Table 2 for 100 g per day. Was taken after every breakfast. Of each two weeks, feces were collected for the latter one week. In addition, feces were collected for one week before the start of the test. The number of bifidobacteria and Clostridium perfringens in these feces was measured by the above method, and the values in each test group were averaged. These measurement results are shown in the graph of FIG.

(表2)
飲用順序
被験者A 比較例1→実施例1→実施例2→実施例3
被験者B 実施例1→比較例1→実施例2→実施例3
被験者C 実施例1→実施例2→比較例1→実施例3
被験者D 実施例1→実施例2→実施例3→比較例1
(Table 2)
Drinking order
Subject A Comparative Example 1 → Example 1 → Example 2 → Example 3
Subject B Example 1 → Comparative Example 1 → Example 2 → Example 3
Subject C Example 1 → Example 2 → Comparative Example 1 → Example 3
Subject D Example 1 → Example 2 → Example 3 → Comparative Example 1

図1に示すとおり、善玉菌であるビフィズス菌は、試験開始前は10の9乗台であり、比較例1のヨーグルトを摂取してもほとんど増加しなかったが、実施例1の加工乳を摂取することで菌数は増加した。さらに実施例2、3のヨーグルトを摂取することで、菌数が10の11乗まで約100倍に大きく増加した。一方、悪玉菌であるウェルシュ菌は、比較例1のヨーグルトを摂取してもほとんど減少しなかったのに対し、実施例1の加工乳を摂取することで、大きく減少した。実施例2、3のヨーグルトを摂取することでさらに減少した。これらのことから、実施例1の加工乳を摂取する、すなわち、抗ウェルシュ菌抗体を摂取することで、腸内細菌叢が大きく改善されることがわかった。さらに、実施例2、3のヨーグルトを摂取する、すなわち、抗ウェルシュ菌抗体と乳酸菌を同時に摂取することで相乗効果が見られ、腸内細菌叢が劇的に改善されていることが示された。   As shown in FIG. 1, Bifidobacterium, which is a good fungus, was on the 9th power range before the start of the test and did not increase even when ingesting the yogurt of Comparative Example 1, but the processed milk of Example 1 was used. Ingestion increased the number of bacteria. Furthermore, by ingesting the yogurts of Examples 2 and 3, the number of bacteria increased greatly about 100 times to 10 11. On the other hand, Clostridium perfringens, which is a bad bacterium, did not substantially decrease even when the yogurt of Comparative Example 1 was ingested, but significantly decreased by ingesting the processed milk of Example 1. It decreased further by ingesting the yogurt of Examples 2 and 3. From these facts, it was found that the intestinal bacterial flora was greatly improved by ingesting the processed milk of Example 1, that is, ingesting the anti-Welsh bacteria antibody. Furthermore, it was shown that the synergistic effect was seen by ingesting the yogurt of Examples 2 and 3, that is, ingesting the anti-Welsh bacteria antibody and the lactic acid bacteria at the same time, and the intestinal flora was dramatically improved. .

[実施例5]
牛乳(130℃3秒殺菌)1kgに前培養した乳酸菌(Lactobacillus acidophilus)スターターを50g加え、37℃で15時間発酵させてヨーグルトを得た。一方、乳清タンパクLN23を15質量%となるように脱イオン水に溶解し、63℃で30分間加熱殺菌後冷却したものを作り、乳清タンパク溶液を得た。無菌容器に無菌的にヨーグルト114gと乳清タンパク溶液8gを混合、充填した。実施例5において得られたヨーグルト1g中には1.0μgの抗ウェルシュ菌抗体、0.7mgの全抗体と6×109の乳酸菌が含まれていた。
[Example 5]
50 g of lactic acid bacteria (Lactobacillus acidophilus) starter pre-cultured in 1 kg of milk (130 ° C., 3 seconds sterilization) was added and fermented at 37 ° C. for 15 hours to obtain yogurt. On the other hand, whey protein LN23 was dissolved in deionized water so as to be 15% by mass, sterilized by heating at 63 ° C. for 30 minutes, and cooled to obtain a whey protein solution. A sterile container was aseptically mixed and filled with 114 g of yogurt and 8 g of whey protein solution. In 1 g of yogurt obtained in Example 5, 1.0 μg of anti-Welsh bacteria antibody, 0.7 mg of total antibody and 6 × 10 9 lactic acid bacteria were contained.

実施例1〜3、比較例1で測定した糞便中のビフィズス菌数およびウェルシュ菌数を示すグラフである。It is a graph which shows the number of bifidobacteria in feces measured in Examples 1-3 and the comparative example 1, and the number of Clostridium perfringens.

Claims (7)

乳清タンパクを添加してなる、抗ウェルシュ菌抗体を1μg/g以上含有することを特徴とする、腸内細菌叢改善効果を持つ食品。 A food having an intestinal bacterial flora improving effect, comprising 1 μg / g or more of an anti-Welsh bacteria antibody to which whey protein is added. 乳清タンパクが抗ウェルシュ菌抗体を含有する請求項1に記載の食品。 The food according to claim 1, wherein the whey protein contains an anti-Welsh antibody. 食品が発酵乳製品である請求項1または2に記載の食品。 The food according to claim 1 or 2, wherein the food is a fermented dairy product. 乳清タンパクを添加する食品の製造方法において、添加される乳清タンパクを含有する部分については、非加熱または乳清タンパクに含まれる抗ウェルシュ菌抗体が70質量%以上残存する方法で除菌あるいは殺菌した後添加することを特徴とする請求項1〜3のいずれか1項に記載の食品の製造方法。 In the method for producing foods to which whey protein is added, the portion containing whey protein to be added is sterilized by a method in which 70% by mass or more of the anti-Welsh bacteria antibody contained in the whey protein remains unheated. It adds after sterilizing, The manufacturing method of the foodstuff of any one of Claims 1-3 characterized by the above-mentioned. 前記食品が発酵乳製品であって、常法により発酵させた発酵乳に、乳清タンパクを添加する請求項4に記載の食品の製造方法。 The method for producing food according to claim 4, wherein the food is a fermented milk product, and whey protein is added to fermented milk fermented by a conventional method. 発酵乳製品の製造方法において、発酵乳原料母液に乳清タンパクを添加し、前記母液中の抗ウェルシュ菌抗体が70質量%以上残存する方法で除菌あるいは殺菌した後に、発酵微生物スターターを接種して発酵させることを特徴とする腸内細菌叢改善効果を持つ発酵乳製品の製造方法。 In the method for producing fermented dairy products, whey protein is added to the fermented milk raw material mother liquor, and after sterilization or sterilization by a method in which 70% by mass or more of the anti-Welsh bacteria antibody in the mother liquor remains, the fermented microorganism starter is inoculated. A method for producing a fermented dairy product having an intestinal bacterial flora improving effect, characterized by being fermented. 前記発酵微生物スターターが乳酸菌である請求項6に記載の発酵乳製品の製造方法。
The method for producing a fermented dairy product according to claim 6, wherein the fermenting microorganism starter is a lactic acid bacterium.
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