JP2007189919A - イヌアレルギーに対する予防又は治療作用を有するポリペプチド - Google Patents
イヌアレルギーに対する予防又は治療作用を有するポリペプチド Download PDFInfo
- Publication number
- JP2007189919A JP2007189919A JP2006009091A JP2006009091A JP2007189919A JP 2007189919 A JP2007189919 A JP 2007189919A JP 2006009091 A JP2006009091 A JP 2006009091A JP 2006009091 A JP2006009091 A JP 2006009091A JP 2007189919 A JP2007189919 A JP 2007189919A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- polypeptide
- allergy
- canine
- amino acid
- protein
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 235
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims abstract description 225
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 title claims abstract description 221
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 title claims abstract description 92
- 230000007815 allergy Effects 0.000 title claims abstract description 88
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 title claims abstract description 77
- 230000000694 effects Effects 0.000 title abstract description 17
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title abstract description 15
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 title abstract 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims abstract 9
- 241000282465 Canis Species 0.000 claims description 62
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 39
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 27
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 25
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 23
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 23
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 23
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims description 23
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 21
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 17
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 claims description 17
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 12
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 8
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 claims description 8
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 claims description 7
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 claims description 7
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 claims description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 3
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 3
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 3
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 claims description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 66
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 abstract description 63
- 239000013566 allergen Substances 0.000 abstract description 54
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 abstract description 8
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 abstract description 8
- 208000003455 anaphylaxis Diseases 0.000 description 54
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 52
- 238000000034 method Methods 0.000 description 46
- 206010002198 Anaphylactic reaction Diseases 0.000 description 44
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 42
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 39
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 38
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 27
- 108010070675 Glutathione transferase Proteins 0.000 description 25
- 102000005720 Glutathione transferase Human genes 0.000 description 25
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 23
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 19
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 19
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 19
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 19
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 16
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 15
- 238000000586 desensitisation Methods 0.000 description 14
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 14
- 230000036783 anaphylactic response Effects 0.000 description 13
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 12
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 12
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 12
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 12
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 11
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 11
- 206010002199 Anaphylactic shock Diseases 0.000 description 10
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 10
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 9
- 108010073443 Ribi adjuvant Proteins 0.000 description 9
- 229940024546 aluminum hydroxide gel Drugs 0.000 description 9
- SMYKVLBUSSNXMV-UHFFFAOYSA-K aluminum;trihydroxide;hydrate Chemical compound O.[OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] SMYKVLBUSSNXMV-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 9
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 9
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 9
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 9
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 8
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 8
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 8
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 8
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 8
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 8
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 8
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 7
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 7
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 7
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 7
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 7
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 7
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 7
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 7
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 6
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 6
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 6
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 6
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 6
- 210000003651 basophil Anatomy 0.000 description 6
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 6
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 description 6
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 6
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 5
- 101000702488 Rattus norvegicus High affinity cationic amino acid transporter 1 Proteins 0.000 description 5
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 5
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 5
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 5
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 4
- 241000759568 Corixa Species 0.000 description 4
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000009438 IgE Receptors Human genes 0.000 description 4
- 108010073816 IgE Receptors Proteins 0.000 description 4
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 4
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 4
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 238000012869 ethanol precipitation Methods 0.000 description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 4
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 4
- XETCRXVKJHBPMK-MJSODCSWSA-N trehalose 6,6'-dimycolate Chemical compound C([C@@H]1[C@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](COC(=O)C(CCCCCCCCCCC3C(C3)CCCCCCCCCCCCCCCCCC)C(O)CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC)O2)O)O1)O)OC(=O)C(C(O)CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC)CCCCCCCCCCC1CC1CCCCCCCCCCCCCCCCCC XETCRXVKJHBPMK-MJSODCSWSA-N 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 3
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 3
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 3
- 108091081021 Sense strand Proteins 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 229940024545 aluminum hydroxide Drugs 0.000 description 3
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 3
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 3
- 230000002052 anaphylactic effect Effects 0.000 description 3
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 3
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 239000000428 dust Substances 0.000 description 3
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 3
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 3
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 3
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 3
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 3
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 3
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 3
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 1,2-phenylenediamine Chemical compound NC1=CC=CC=C1N GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- -1 10 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 2-amino-4,6-dichloropyrimidine-5-carbaldehyde Chemical group NC1=NC(Cl)=C(C=O)C(Cl)=N1 GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 2
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 2
- 208000033399 Anaphylactic responses Diseases 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 2
- 241000218645 Cedrus Species 0.000 description 2
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 2
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 2
- HRNLUBSXIHFDHP-UHFFFAOYSA-N N-(2-aminophenyl)-4-[[[4-(3-pyridinyl)-2-pyrimidinyl]amino]methyl]benzamide Chemical compound NC1=CC=CC=C1NC(=O)C(C=C1)=CC=C1CNC1=NC=CC(C=2C=NC=CC=2)=N1 HRNLUBSXIHFDHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 2
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 description 2
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 description 2
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 2
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 2
- 208000030961 allergic reaction Diseases 0.000 description 2
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 235000013861 fat-free Nutrition 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 238000003505 heat denaturation Methods 0.000 description 2
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N isopropyl beta-D-thiogalactopyranoside Chemical compound CC(C)S[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N 0.000 description 2
- 108010045069 keyhole-limpet hemocyanin Proteins 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 2
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 2
- 239000013573 pollen allergen Substances 0.000 description 2
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 2
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 2
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 2
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 2
- QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N serotonin Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CCN)=CNC2=C1 QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- SBKVPJHMSUXZTA-MEJXFZFPSA-N (2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-1-[(2S)-5-amino-2-[[2-[[(2S)-1-[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-4-yl)propanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]acetyl]amino]-5-oxopentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoic acid Chemical group C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C1=CNC=N1 SBKVPJHMSUXZTA-MEJXFZFPSA-N 0.000 description 1
- ASWBNKHCZGQVJV-UHFFFAOYSA-N (3-hexadecanoyloxy-2-hydroxypropyl) 2-(trimethylazaniumyl)ethyl phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C ASWBNKHCZGQVJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NOIIUHRQUVNIDD-UHFFFAOYSA-N 3-[[oxo(pyridin-4-yl)methyl]hydrazo]-N-(phenylmethyl)propanamide Chemical compound C=1C=CC=CC=1CNC(=O)CCNNC(=O)C1=CC=NC=C1 NOIIUHRQUVNIDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N Acrylamide Chemical compound NC(=O)C=C HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010027654 Allergic conditions Diseases 0.000 description 1
- 206010001742 Allergy to animal Diseases 0.000 description 1
- 108010032595 Antibody Binding Sites Proteins 0.000 description 1
- 102100026189 Beta-galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 102000000119 Beta-lactoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 101100098985 Caenorhabditis elegans cct-3 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100275473 Caenorhabditis elegans ctc-3 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100116570 Caenorhabditis elegans cup-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- 206010008631 Cholera Diseases 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 108010054576 Deoxyribonuclease EcoRI Proteins 0.000 description 1
- 108010061608 Dermatophagoides pteronyssinus antigen p 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000968532 Dictyocaulus viviparus DVA-1 polyprotein Proteins 0.000 description 1
- 101100116572 Drosophila melanogaster Der-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 1
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 241001198387 Escherichia coli BL21(DE3) Species 0.000 description 1
- 208000010201 Exanthema Diseases 0.000 description 1
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 1
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 1
- 241001123946 Gaga Species 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 208000001953 Hypotension Diseases 0.000 description 1
- 108010060630 Lactoglobulins Proteins 0.000 description 1
- 239000006142 Luria-Bertani Agar Substances 0.000 description 1
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N Maleimide Chemical compound O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 108010038049 Mating Factor Proteins 0.000 description 1
- 201000005505 Measles Diseases 0.000 description 1
- 101100005280 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) cat-3 gene Proteins 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 101710143509 Pre-histone-like nucleoprotein Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 208000036071 Rhinorrhea Diseases 0.000 description 1
- 206010039101 Rhinorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 101800001707 Spacer peptide Proteins 0.000 description 1
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 1
- 230000006052 T cell proliferation Effects 0.000 description 1
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710120037 Toxin CcdB Proteins 0.000 description 1
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 1
- UZQJVUCHXGYFLQ-AYDHOLPZSA-N [(2s,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-4-[(2r,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-4-[(2s,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-6-(hy Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O)O[C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3CC=C4[C@@]([C@@]3(CC[C@H]2[C@@]1(C=O)C)C)(C)CC(O)[C@]1(CCC(CC14)(C)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O[C@H]5[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O UZQJVUCHXGYFLQ-AYDHOLPZSA-N 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 1
- 238000001261 affinity purification Methods 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 1
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000043 antiallergic agent Substances 0.000 description 1
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000436 anus Anatomy 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108010058966 bacteriophage T7 induced DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N carbonyldiimidazole Chemical compound C1=CN=CN1C(=O)N1C=CN=C1 PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000010485 coping Effects 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 230000000994 depressogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- VIAVRLZATFJYHI-UHFFFAOYSA-L dialuminum oxygen(2-) sulfate Chemical compound [O-2].[Al+3].S(=O)(=O)([O-])[O-].[Al+3] VIAVRLZATFJYHI-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- MKRTXPORKIRPDG-UHFFFAOYSA-N diphenylphosphoryl azide Chemical compound C=1C=CC=CC=1P(=O)(N=[N+]=[N-])C1=CC=CC=C1 MKRTXPORKIRPDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000002845 discoloration Methods 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N dodecahydrosqualene Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 239000006196 drop Substances 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 201000005884 exanthem Diseases 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 description 1
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 230000036543 hypotension Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000006054 immunological memory Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 239000007923 nasal drop Substances 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003681 parotid gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N periodic acid Chemical compound OI(=O)(=O)=O KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 238000001050 pharmacotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 1
- 229920000724 poly(L-arginine) polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920000447 polyanionic polymer Polymers 0.000 description 1
- 108010011110 polyarginine Proteins 0.000 description 1
- 108010077051 polycysteine Proteins 0.000 description 1
- 229920002704 polyhistidine Polymers 0.000 description 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 108010039177 polyphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000002250 progressing effect Effects 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 238000000751 protein extraction Methods 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Chemical class 0.000 description 1
- 206010037844 rash Diseases 0.000 description 1
- 239000011535 reaction buffer Substances 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 210000003079 salivary gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000001235 sensitizing effect Effects 0.000 description 1
- 229940076279 serotonin Drugs 0.000 description 1
- 230000016160 smooth muscle contraction Effects 0.000 description 1
- 206010041232 sneezing Diseases 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 description 1
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000006190 sub-lingual tablet Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 229940098466 sublingual tablet Drugs 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000002636 symptomatic treatment Methods 0.000 description 1
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 229960000814 tetanus toxoid Drugs 0.000 description 1
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 238000009281 ultraviolet germicidal irradiation Methods 0.000 description 1
- 230000008728 vascular permeability Effects 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
【解決手段】イヌアレルギーに対する予防又は治療作用を有するアミノ酸配列GluGlyGluProHisGlyArgGlnIleArgMetAlaLysLeuLeuGlyArgAspProGluGlnArgからなるポリペプチド。
【選択図】なし
Description
このように、日常生活において、Can f1による曝露は避け難く、イヌの公の場への進出の機会の増加に伴い、イヌアレルギーは公衆衛生上大きな問題になり得る。
しかし、特許文献1は、ヒトT細胞増殖分析によりT細胞刺激活性を有する(すなわちT細胞エピトープを含む)ペプチドフラグメントをいくつか同定しているに過ぎず、肝心のイヌアレルギーに対する治療有効性を実証する実験データを示していない。
Lindgrenら(1988) J. Allergy Clin. Immunol. 82: 196-204 Fordら(1989) Clin. Exp. Allergy 19: 183-190 Schouら(1991) Clin. Exp. Allergy 21: 321-328 Spitzauerら(1993) Int. Arch. Allergy Immunol. 100: 60-67 de Grootら(1991) J. Allergy Clin. Immunol. 87: 1056-1065 Custovicら(1997) Am. J. Respir. Care Med. 155: 94-98 Arbesら(2004) J. Allergy Clin. Immunol. 114: 111-117 Custovicら(1996) Clin. Exp. Allerty 26: 1246-4252 坂口(2002) アレルギーの臨床 22(9): 670-674 駒瀬(2002) アレルギーの臨床 22(9): 686-691
本発明によれば、イヌアレルギーに対する予防又は治療において、イヌアレルゲンCan f1タンパク質全体を使用する場合に比べて高用量を投与できるので、比較的短期間で治療効果が得られる。
本発明のポリペプチドは、Can f1タンパク質のアナフィラキシー誘発能を中和するIgG抗体産生誘導能を有し、かつアナフィラキシー反応を誘導しないことによって特徴付けられる、Can f1タンパク質関連のポリペプチドである。
上記特徴により本発明のポリペプチドは、イヌアレルギーに対する予防又は治療作用を有する。
このとき、試験ポリペプチドは、単独で投与してもよいし、アジュバント(例えば水酸化アルミニウム、RIBIアジュバント系など)と共に投与してもよい。
アナフィラキシー反応試験としては、当該分野において公知である任意の試験を用いることができるが、例えばインビボでの負荷試験、インビトロ試験が挙げられる。
皮膚試験は、哺乳動物(ヒト、サル、ウサギ、ラット、ネズミ、マウス、モルモット)の皮下又は皮内に試験物質を投与(注射)して、投与部位に局所アナフィラキシー反応(発赤、腫脹又は膨疹、局所の熱感)が生じるか否かを観察する。
この場合、例えば、試験物質により生じる発赤又は腫脹のサイズが、アナフィラキシー反応非誘導物質と同程度若しくはそれ以下の反応を示すか、又はCan f1タンパク質により生じるサイズの10%以下、好ましくは5%以下、より好ましくは1%以下であれば、当該試験物質は、アナフィラキシー反応を誘導しないといえる。
ケミカルメディエータ遊離アッセイは、試験物質を、当該試験物質で予め感作したマスト細胞又は好塩基球に接触させて、ケミカルメディエータ(例えばヒスタミンなど)の遊離が誘導されるか否か、及び遊離が誘導される場合にはその量を観察するアッセイである。
この場合、例えば、試験物質により遊離されるヒスタミンの量が、アナフィラキシー反応非誘導物質と同程度若しくはそれ以下の反応を示すか、又はCan f1タンパク質により遊離されるヒスタミンの量の10%以下、好ましくは5%以下、より好ましくは1%以下検出限界以下であれば、当該試験物質は、アナフィラキシー反応を誘導しないといえる。
このストリンジェントな条件下でハイブリダイズするイヌ由来の核酸分子によりコードされるアミノ酸配列は、更に、そのアミノ酸からなるポリペプチドがイヌアレルギーに対する予防又は治療作用を有する限り、1又は数個のアミノ酸が置換、挿入、付加及び/又は欠失されていてもよい。このアミノ酸配列はまた、そのアミノ酸からなるポリペプチドがイヌアレルギーに対する予防又は治療作用を有する限り、そのN末端及び/又はC末端を短縮されていてもよく、更に、1又は数個のアミノ酸が置換、挿入、付加及び/又は欠失されていてもよい。
キャリアタンパク質は、本発明のポリペプチドのIgG抗体及び/又はIgE抗体産生誘導能を増大させ得、及び/又は、本発明のポリペプチドの安定性を増大させ得る。
タグタンパク質又はポリペプチドと結合された本発明のポリペプチドは、アフィニティー精製により容易に回収できるので有用である。タグポリペプチドは、適切なプロテアーゼにより切断可能であるように結合されていてもよい。
リンカー又はスペーサーがオリゴペプチドである場合、その長さは、代表的には1〜30アミノ酸であり、例えば10アミノ酸、9アミノ酸、8アミノ酸、7アミノ酸、6アミノ酸5アミノ酸、4アミノ酸、3アミノ酸、2アミノ酸、1アミノ酸である。
本発明のポリペプチドを含むイヌアレルギー予防又は治療用医薬組成物は、イヌアレルギーに対するワクチンとしての使用に有用である。
本発明の医薬組成物は、例えば生分解性のリポソーム、マイクロカプセル又はマイクロスフェア内に封入されていてもよい。本発明の医薬組成物はまた、凍結乾燥形態で製剤化されていてもよい。
本発明の医薬組成物は、イヌアレルギーの発症前に予め投与してイヌアレルギーの発症を予防するため(罹患予防)に使用されてもよいし、イヌアレルギーを発症後にイヌアレルゲン暴露に対するアレルギー症状を抑制又は緩和するため(症状発現の予防)に使用されてもよい。
使用し得るアジュバントは、当該分野において公知であるが、例えば、アジュバントとしては、油中水エマルジョン(例えば、完全フロイントアジュバント、不完全フロイントアジュバント);サポニン及びサポニンの誘導体(例えばQuil A(Superfos Biosector A/S社,デンマーク);ミョウバン;水酸化アルミニウム、リン酸アルミニウム、硫酸アルミニウム酸化アルミニウムのようなミネラルゲル;リソレシチンのような表面活性物質;プルロニックポリオール;ポリアニオン;ペプチド;油または炭化水素エマルジョン;ジニトロフェノール;およびBCG(bacille Calmette−Guerin)、RIBIアジュバント系(Corixa Corp., Seattle, WA,米国)、MPL(商標)(3-Q-デスアシル-4'-モノホスホリル脂質A)(Corixa, 同)が挙げられる。
RIBIアジュバント系は、2%スクアレン/Tween 80(商標)中の、モノホスホリル脂質A(MPL)+トレハロースジミコレート(TDM)+細胞壁骨格(CWS)、MPL+TDM又はTDMの水中油型エマルジョンである。
本発明のポリペプチドの組換え発現は、本明細書中に記載されるアミノ酸配列情報又は塩基配列情報を利用して当該分野において公知の組換え発現法により容易に行い得る。簡潔には、本発明のポリペプチドのアミノ酸配列をコードする塩基配列を有する核酸分子を発現ベクターに組込み、この発現ベクターで宿主細胞を形質転換し、この形質転換細胞を該ポリペプチドの発現に適切な条件下で培養して、当該ポリペプチドを発現させ、発現ポリペプチドを細胞から又は培養液中から回収することによって製造できる。
宿主細胞としては、ポリペプチドの発現に適切な宿主細胞を用いることができ、例えば、大腸菌(Escherichia coli)細胞のような原核細胞、酵母(例えばSaccharomyces cerevisiae)、昆虫、植物細胞及び動物細胞のような真核細胞が挙げられる。
発現した本発明のポリペプチドの宿主細胞から細胞外への分泌を促進するために、本発明のポリペプチドが、シグナル配列(シグナルペプチド)、例えばα−接合因子シグナル配列を有するように、発現ベクターに組み込む塩基配列を設計してもよい。
本発明の核酸分子は、上記のイヌアレルギーに対する予防又は治療作用を有するポリペプチドのいずれかのアミノ酸配列をコードする塩基配列からなる核酸分子である。本発明において、核酸分子はDNA分子であってもRNA分子であってもよい。
本発明の核酸分子は、配列番号5の塩基配列からなってもよい。
本発明において、ストリンジェントな条件とは、例えば、5×又は6×SSC(50%ホルムアミドを含んでもよい)中での少なくとも60℃(例えば63℃、65℃、68℃、70℃)でのハイブリダイゼーションをいう。このストリンジェントなハイブリダイゼーション条件は、0.1〜1×SSC中での約40℃〜60℃での洗浄処理を伴ってもよい。1×SSCは、0.15M NaCl、0.015Mクエン酸ナトリウムを含有する溶液を意味する。
なお、以下の実施例では、統計処理は、F検定の後t検定を用いて行い、p<0.05を有意とした。
ビーグル犬の耳下腺から標準的方法によりRNAを抽出し、これを鋳型として逆転写によりcDNAを合成した。cDNAを、イヌ唾液由来の主要アレルゲンタンパク質Can f1の塩基配列(Koniecznyら、Immunology, 92(4): 577-586, 1997)に基づいて設計したプライマーを用いたポリメラーゼ連鎖反応(PCR)により増幅した。
センス鎖(5'側にSma I制限部位を含む)
5'ACG ACC CGG GGA CAC TGT GGC TGT GTC AGG GAA 3'(配列番号17)
アンチセンス鎖(5'側にXho I制限部位を含む)
5'GAA CCT CGA GCC TAC TGT CCT CCT GGA GAG CAG G 3'(配列番号18)
増幅cDNAを発現ベクターpGEX4T-2(Amersham)中にクローニングした。ジデオキシ法での配列決定及びKoniecznyらのCan f1塩基配列との比較により、このcDNAがCan f1タンパク質をコードしていることが確認できた(配列番号1)。このcDNAの塩基配列に基づく推定アミノ酸配列(配列番号2)は、KoniecznyらのCan f1アミノ酸配列と2アミノ酸(96位及び114位)で異なっていた。このベクターを「Can f1/pGEX4T-2」と命名した。
Can f1タンパク質のポリペプチド断片として、それぞれのアミノ酸配列がCan f1タンパク質のアミノ酸1〜27位(AspThrValAlaValSerGlyLysTrpTyrLeuLysAlaMetThrAlaAspGlnGluValProGluLysProAspSerVal:配列番号4)、93〜114位(GluGlyGluProHisGlyArgGlnIleArgMetAlaLysLeuLeuGlyArgAspProGluGlnArg:配列番号6)及び126〜148位(ArgAlaLysGlyLeuAsnGlnGluIleLeuGluLeuAlaGlnSerGluThrCysSerProGlyGlyGln:配列番号8)からなる3つのポリペプチド(それぞれCan f1-1、Can f1-2及びCan f1-3ポリペプチドと呼ぶ)を設計した。
Can f1-2ポリペプチド発現用のインサートのために、上記Can f1/pGEX4T-2を鋳型にして、以下の一対のプライマー
センス鎖(5'側にEcoR I制限部位を含む)
Can f1(93-114)S 5'GGA ATT CCC GAG GGC GAG CCC CAT 3'(配列番号11)
アンチセンス鎖(5'側にXho I制限部位を含む)
Can f1(93-114)AS 5'CCG CTC GAG CCT CTG CTC AGG ATC CCT 3'(配列番号12)
を用いたPCRにより、DNA断片を増幅した。
PCRでは、94℃にて2分間熱変性させた後、94℃にて30秒間、50℃にて30秒間及び72℃にて1分間の反応サイクルを計35サイクル行い、その後72℃にて5分間の伸長反応を行った。
センス鎖(5'側にEcoR I制限部位を含む)
Can f1(1-27)S 5'GGA ATT CCC GAC ACT GTG GCT GTG TCA 3'(配列番号9)
アンチセンス鎖(5'側にXho I制限部位を含む)
Can f1(1-27)AS 5'CCG CTC GAG CAC TGA GTC AGG CTT CTC 3'(配列番号10)
及び
センス鎖(5'側にEco RI制限部位を含む)
Can f1(126-149)S 5'GGA ATT CCC AGA GCC AAA GGA TTG AAC CAG 3'(配列番号13)
アンチセンス鎖(5'側にXho I制限部位を含む)
Can f1(126-149)AS 5'CCG CTC GAG CTA CTG TCC TCC TG GAGA GCA 3'(配列番号14)
を用いて同様の手順を行った。
発現ベクターとしてpGEX 4T-2(Amersham)を用いた。pGEX 4T-2ベクター中のGlutathione S-transferase(GST)遺伝子の下流に上記cDNAを挿入するため(すなわち、目的のポリペプチドをGSTとの融合タンパク質として発現させるため)に、ベクターpGEX 4T-2を制限酵素処理した。簡潔には、pGEX 4T-2ベクター10μgに10UのXho I(Takara)、10×K Buffer(Takara)を加えて30μlの反応溶液を調製し、30℃にて一晩反応させた。次いで、エタノール沈殿させた後、沈殿物に10UのEcoR I(New England Biolabs)、10×EcoR I Buffer(New England biolabs)を加えて30μlの反応溶液を調製し、37℃にて1時間反応させた。この反応溶液からエタノール沈殿により制限酵素処理ベクターを回収した。その後、回収したベクター9μgにCalf Alkaline Phosphatase(以下「CIAP」、TOYOBO) 30Uを加え、10×Reaction Buffer for CIAP(TOYOBO)で200μlになるよう調整し、37℃にて15分間、50℃にて15分間反応させて、ベクターを脱リン酸化した。再び、エタノール沈殿により、ベクターを回収した。回収したベクターを上記の各インサートとのライゲーションに使用した。
Ligation-Convenience Kit(Nippon gene)をマニュアルに従って用い、上記の各インサート70ngとベクター250ngとのライゲーションを行った。
ライゲーション後、サイクルシーケンス法によって各インサート部分の塩基配列の決定を行った。簡潔に述べると、ライゲーション後のベクターを鋳型にして、pGEX-5(配列:5'GGG CTG GCA AGC CAC GTT TGG TG 3'(配列番号15))とpGEX-3(配列:5'CCG GGA GCT GCA TGT GTC AGA GG 3'(配列番号16))をプライマーとして用いてPCRを行った。PCR産物の塩基配列を、Thermo Sequenase Cy5 Dye Terminator Cycle sequencing Kit (Amersham)及びLong-Read Tower DNAシーケンサー(Amersham)をマニュアルに従って用いて決定した。
gacactgtgg ctgtgtcagg gaaatggtat ctgaaggcca tgacagcaga ccaggaggtg cctgagaagc ctgactcagt g (配列番号3)
gagggcgagc cccatgggag gcagatccga atggccaagc ttctaggaag ggatcctgag cagagg (配列番号5)
agagccaaag gattgaacca ggagattttg gaactcgcgc agagcgaaac ctgctctcca ggaggacagt ag (配列番号7)
を有するインサートが各ベクター中に正確に挿入されていることが検証された。
Can f1-1/pGEX、Can f1-2/pGEX及びCan f1-3/pGEXをそれぞれ、LB液体培地(アンピシリン含有)5ml中で37℃にて一晩振盪培養した後に、250mlのLB液体培地(アンピシリン含有)に接種し、OD600が0.4になるまで約2時間37℃にて振盪培養した。Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside(IPTG)を最終濃度が0.1mMになるように加えてインサートDNA由来タンパク質の発現を誘導し、さらに3時間培養を続けた。各ポリペプチドは、GSTタグとの融合タンパク質として発現される。
各GSTタグ融合ポリペプチドを、タンパク質抽出画分より、Glutathione Sepharose 4B(Pharmacia Biotech)を用いて以下のように精製した。マニュアルに従ってGlutathioneゲルにGSTタグ融合ポリペプチドを吸着させた。これに、還元型Glutathione 10mMを加え、GSTタグ融合ポリペプチドを溶出させた。このようにして得られたGSTタグ融合ポリペプチドをそれぞれGST-Can f1-1、GST-Can f1-2及びGST-Can f1-3とした。
各ポリペプチドにCan f1タンパク質の抗原決定基が存在するか否かを確認するため、ELISAにより、各GSTタグ融合ポリペプチドと組換え発現Can f1(rCan f1)タンパク質に対するウサギポリクローナル抗体との間の反応性を決定した。
1.手順
各ポリペプチドのIgE抗体結合能を、イヌアレルギー患者血清を用いた結合阻害実験により決定した。結合阻害実験には、各ポリペプチドのほか、rCan f1タンパク質及びGSTタグポリペプチド(単独)も含めた。イヌアレルギー患者血清は、独立行政法人 国立病院機構 南京都病院の宮野前健医師より分与を受けた。いずれの血清もRAST強陽性であった。RAST(radio allergosorbent test)は、現在最も信頼性の高いアレルギー診断法である。RASTにおいて、血清中のアレルゲン特異的IgE抗体価は、強陽性、弱陽性及び陰性で表される。
1)イヌアレルギー患者由来血清中のrCan f1タンパク質に対するIgE抗体の存在
いずれの患者血清についても、予め血清と混合したrCan f1量の増加に応じて吸光値が低下した(図4)。吸光値の低下は、患者血清中のIgE抗体と予め混合したrCan f1とが結合し、IgE抗体のELISAプレート上のrCan f1への結合が阻害されたことを表す。このことから、イヌアレルギー患者血清中にCan f1特異的IgE抗体が存在することが明らかとなった。
GST-Can f1-1、GST-Can f1-2、GST-Can f1-3の各融合ポリペプチド(Can f1-1、Can f1-2、Can f1-3ポリペプチドとしての量200μg/ml)の吸光値(■)を、GST(それぞれの融合ポリペプチド中のGSTに対応する量)の吸光値(□)と比較して有意差(「*」により示す:p<0.05)を検討した(図5)。Can f1-1については5血清中4つで、Can f1-3については5血清中2血清において吸光値の有意な低下が観察され、IgE抗体の結合阻害作用が確認された。Can f1-2については、全ての血清においてIgE結合阻害は観察されなかった。
このことから、Can f1-1及びCan f1-3ポリペプチドは、抗Can f1タンパク質IgE抗体結合能を有し、Can f1-2ポリペプチドはIgE抗体結合能を有しないことが示された。
1.手順
1)各ポリペプチドによるマウスの感作
各ポリペプチド及びGSTを抗原として、アジュバントとして水酸化アルミニウムゲル(WAKO)を用いて雄性マウス(BALB/c、8週齢)を感作させた。各抗原について2匹の動物を使用した。抗原10μgと水酸化アルミニウムゲル1mgとの混合液(PBS中)0.1mlをマウス背部に皮下注射した。コントロールとして、PBSと水酸化アルミニウムゲルの混合物を用いた。1回目の投与から14日目に、抗原25μgと水酸化アルミニウムゲル2.5mgの混合液(PBS中)0.1mlを腹腔内に投与した。25日目にマウスを安楽死させ、直後に全採血を行った。採取した全血から血清を得た。
96ウェルELISAプレート(IWAKI)にPBSで10μg/mlに希釈したrCan f1を100μl/ウェルにて加え、37℃にて1時間、4℃にて一晩固相化した。PBS-Tで洗浄後、PBS-10%脱脂乳を200μl/ウェル加えて室温にて1時間ブロッキングを行った。PBS-Tで洗浄後、PBS-1%脱脂乳で10倍希釈したマウス血清を100μl/ウェルにて加え(各血清について3ウェルを使用)、室温にて1時間インキュベートした。PBSで洗浄後、ビオチンを標識したGoat Anti-Mouse IgE(BETHYL)をPBS-1%脱脂乳で1μg/mlに希釈して100μl/ウェル加え、室温にて1時間インキュベートした。PBSで洗浄後、PBS-1%脱脂乳で1,000倍希釈したStreptavidin-HRPを100μl/ウェル加えて室温にて1時間インキュベートした。PBSで洗浄後、ELISA POD基質TMBキット(nacalai tesque)を用いて30分間発色させた後、1M硫酸を加えて発色を停止させた。各ウェルについて450nmでの吸光度を測定した。
Goat Anti-Mouse IgEに代えてGoat Anti-Mouse IgG(BETHYL)を用いた以外は、上記と同じ血清及び試薬並びに手順を用いた。
Goat Anti-Mouse IgGは、ビオチンで標識した後、PBS-1%脱脂乳で1μg/mlに希釈し、さらに10、30、100、300、1000及び3000倍に希釈して用いた。
1)IgE抗体産生誘導能
GST-Can f1-1で感作したマウス血清において顕著に高い吸光値を示した(図6)。この血清について、希釈率を更に10、20、40及び80倍と高くしてELISAを行ったところ、希釈率の増大に伴って吸光値が低下した(図7において「◇」で示される)。コントロールとして用いたGST又はPBSで感作したマウスの血清は、希釈率の増大に伴う吸光値の変動は観察されなかった(図7において「△」及び「×」で示される)。このことから、GST-Can f1-1で感作したマウス血清中にのみ特異的IgE抗体が存在することが示された。換言すると、Can f1-1は、IgE抗体産生を誘導する能力を有することが確認された。
GST-Can f1-1、GST-Can f1-2又はGST-Can f1-3のポリペプチドで感作したマウスの血清はいずれも、希釈率の増大に伴って吸光値が低下した(図8)。各ポリペプチドは、Can f1-1(■)>Can f1-3(○)>Can f1-2(△)の順で、IgG抗体産生を誘導する能力を有することが確認された。
1.イヌアレルギーモデルマウスの作製
rCan f1タンパク質で雄性マウス(BALB/c、8週齢)を感作させてイヌアレルギーモデルを作製した。簡潔には、まず、rCan f1タンパク質10μgと水酸化アルミニウムゲル1mgとの混合液(PBS中)0.1mlをマウス背部に皮下注射した。1回目の投与から21日後、rCan f1タンパク質20μgと水酸化アルミニウムゲル2mgの混合液(PBS中)0.1mlを腹腔内に注射した(図9を参照)。水酸化アルミニウムゲルは、IgE抗体産生の誘導に適したアジュバントとして用いた。
2回のrCan f1タンパク質投与によりアレルギー状態が確立したマウスに、2回目の投与から7日後(1回目の投与から28日後)、rCan f1タンパク質50μg(0.1mlのPBS中に溶解)を静脈内注射した(図9を参照)。
マウス体温は、rCan f1タンパク質の静脈内投与直後から急激に低下し(2分後に約−5℃、5分後には約−6.5℃)、その後も徐々に低下を続けた(15分後には−7.5℃)(図11)。体温の低下は、ほとんどのマウスにおいて、約60分間〜約2時間持続し、その後徐々に回復し、翌日には正常に回復した。
以上の観察の結果から、本モデルマウスにおいて、rCan f1タンパク質の静脈内投与によりアナフィラキシーショックが誘導されることが示された。
1.手順
無処置マウス(雄性BALB/c、8週齢、各ポリペプチドについてN=2)にGST−Can f1-1又はGST−Can f1-2(50μg)を静脈内注射した。上記と同様に、投与直後からマウス体温を測定すると同時にマウスの状態を観察した。
いずれの融合ポリペプチドについても、マウス体温に変化は観察されなかった(図12及び図13)。また、マウスの運動量に変化はなく、注射部位その他にうっ血や変色は観察されなかった。
この結果は、Can f1-1及びCan f1-2ポリペプチドが、アナフィラキシーショックを誘導しないことを明確に示している。
1.Can f1-1ポリペプチドの減感作療法剤としての有効性−イヌアレルギー治療作用
1)手順
上記と同様に、rCan f1タンパク質と水酸化アルミニウム(アジュバントとして)で雄性マウス(BALB/c、8週齢、N=3)を感作して、イヌアレルギーモデルマウスを作製した。1回目の投与から28、31、35及び38日後に、0.1mlのPBS中に溶解したGST-Can f1-1ポリペプチド(Can f1-1ポリペプチドの量として10μg)をマウス背部に皮下注射した。続いて、1回目の投与から42、45、49、52、60、63、67、71、74、77、80及び84日後に、0.1mlのPBS中に溶解したGST-Can f1-1ポリペプチド(Can f1-1ポリペプチドの量として20μg)をマウス背部に皮下注射した。注射後、注射部位での局所アナフィラキシー反応の有無を観察した。
減感作実験スケジュールの概略を図14に示す。
i)マウス1
第1回検定では、静脈内投与の直後の急激な体温低下は観察されなかった。体温は、静脈内投与の数分後から徐々に低下し始め、10分後には約−3.5℃となったが、その後の更なる低下は観察されなかった(図15)。
第2回検定では、体温の低下は観察されなかった(図16)。
第1回検定では、体温は、5分後から徐々に低下し始め、8分後に約−2℃に達した後は、ほとんど低下せず15分後には約−2.5℃であった(図17)。
第2回検定では、体温の低下は観察されなかった(図18)。
iii)マウス3
第1回及び第2回の検定で、体温の低下は観察されなかった(図19及び図20)。
理論によって本発明は限定されないが、Can f1-1ポリペプチドの有効性は、当該ポリペプチドのa)IgE抗体産生誘導能に基づく刺激による、T細胞のイヌアレルゲンに対するIgE抗体産生応答の感受性の低下、及び/又はb)IgG抗体産生能に基づく刺激による、循環IgG抗体量の増加(後述するように、Can f1-1ポリペプチドにより産生されるIgG抗体はイヌアレルゲンCan f1タンパク質のアナフィラキシー反応誘導を中和する)、及び/又はc)IgE抗体結合能による、イヌアレルゲンCan f1タンパク質によるマスト細胞又は好塩基球上でのIgE抗体を介するFcεRIの架橋阻害に基づくと考えられる。
1)手順
上記の感作手順の前に2回(0日目及び21日目、それぞれ1回目の感作の35日前及び14日前)、0.1mlのPBSに溶解したGST-Can f1-1ポリペプチド(Can f1-1ポリペプチドの量として10μg)を、雄性マウス(BALB/c、8週齢、N=2)の背部に皮下注射した。この際、アジュバントとしては、IgG抗体を産生誘導しやすいRIBIアジュバント系(Corixa Corp.)を用いた。注射後、注射部位での局所アナフィラキシー反応の有無を観察した。
ワクチン実験スケジュールの概略を図21に示す。
i)マウス11
体温は、静脈内投与の直後から徐々に低下し始めたが、10分後に約−4℃に達した後は、更なる低下は観察されず、むしろ回復傾向が見られた(図22)。
ii)マウス12
静脈内投与の直後からの急激な低下は観察されず、数分後から低下し始めて8分後に約−2℃に達し、その後は更なる低下は観察されなかった(図23)。
1)手順
事前に投与するポリペプチドを、GST-Can f1-1に代えてGST-Can f1-2を用いた以外は、上記2の手順と同様であった(図24)。
i)マウス21
体温の低下は、静脈投与の直後から観察されたが、その低下速度は緩やかであり、15分後で約−4℃であった(図25)。
ii)マウス22
体温低下は、観察されなかった(図26)。
1)手順
雄性マウス(BALB/c、8週齢、N=2)を、上記の手順に従って、rCan f1タンパク質(10μg s.c.及び20μg i.p.)で感作させた。
1回目の感作から35日後及び56日後に、0.1mlのPBSに溶解したGST-Can f1-2ポリペプチド(Can f1-2ポリペプチドの量として10μg)及びRIBIアジュバント系(Corixa Corporation)を、マウス背部に皮下注射した。次いで、1回目の感作から63日後に、rCan f1タンパク質50μg(0.1mlのPBS中に溶解)をマウス静脈内に注射し、体温を測定した(図27)。同時に、注射部位での局所アナフィラキシー反応の有無を観察した。
i)マウス31
静脈内投与の直後からの急激な低下は観察されず、5分後から低下し始めて15分後に約−4℃に達した(図28)。
ii)マウス32
静脈内投与の直後からの急激な低下は観察されず、数分後から低下し始めて7分後に約−4℃に達し、その後は更なる低下は観察されなかった(図29)。
Claims (17)
- イヌアレルギーに対する予防又は治療作用を有する、配列番号6のアミノ酸配列からなるポリペプチド。
- 配列番号6のアミノ酸配列において1又は数個のアミノ酸が置換、挿入、付加及び/又は欠失されたアミノ酸配列からなる、イヌアレルギーに対する予防又は治療作用を有するポリペプチド。
- 配列番号6のアミノ酸配列のN末端及び/又はC末端短縮型のアミノ酸配列からなる、イヌアレルギーに対する予防又は治療作用を有するポリペプチド。
- 請求項3に記載のポリペプチドのアミノ酸配列において1又は数個のアミノ酸配列が置換、挿入、付加及び/又は欠失されたアミノ酸配列からなる、イヌアレルギーに対する予防又は治療作用を有するポリペプチド。
- 配列番号5の塩基配列からなる核酸分子とストリンジェントな条件下でハイブリダイズするイヌ由来の核酸分子によりコードされる、イヌアレルギーに対する予防又は治療作用を有するポリペプチド。
- 請求項1〜5のいずれか1項に記載のポリペプチド及びそのN末端又はC末端に直接又はリンカー若しくはスペーサーを介して結合されたタグポリペプチド又はキャリアタンパク質からなる、イヌアレルギーに対する予防又は治療作用を有するポリペプチド。
- 請求項1〜6のいずれか1項に記載のポリペプチドを含むイヌアレルギー予防又は治療用医薬組成物。
- 更にアジュバントを含む請求項7に記載のイヌアレルギー予防又は治療用医薬組成物。
- イヌアレルギーに対するワクチンに使用する請求項7又は8に記載の医薬組成物。
- イヌアレルギー発症後に投与される請求項9に記載の医薬組成物。
- イヌアレルギー発症前に投与される請求項9に記載の医薬組成物。
- 請求項1〜6のいずれか1項に記載のポリペプチドをコードする塩基配列からなる核酸分子。
- 塩基配列が配列番号5の塩基配列からなる請求項12に記載の核酸分子。
- 配列番号5の塩基配列を有する核酸分子とストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、かつイヌアレルギーに対する予防又は治療作用を有するポリペプチドをコードするイヌ由来の核酸分子。
- 請求項12〜14のいずれか1項に記載の核酸分子を含むベクター。
- 請求項15に記載のベクターで形質転換された宿主細胞。
- 請求項16に記載の宿主細胞を適切な条件下で培養することを含む請求項1〜6のいずれか1項に記載のポリペプチドを製造する方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2006009091A JP2007189919A (ja) | 2006-01-17 | 2006-01-17 | イヌアレルギーに対する予防又は治療作用を有するポリペプチド |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2006009091A JP2007189919A (ja) | 2006-01-17 | 2006-01-17 | イヌアレルギーに対する予防又は治療作用を有するポリペプチド |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2007189919A true JP2007189919A (ja) | 2007-08-02 |
Family
ID=38446081
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2006009091A Pending JP2007189919A (ja) | 2006-01-17 | 2006-01-17 | イヌアレルギーに対する予防又は治療作用を有するポリペプチド |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP2007189919A (ja) |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2005518367A (ja) * | 2001-12-05 | 2005-06-23 | サーカッシア リミテッド | 免疫療法および系 |
-
2006
- 2006-01-17 JP JP2006009091A patent/JP2007189919A/ja active Pending
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2005518367A (ja) * | 2001-12-05 | 2005-06-23 | サーカッシア リミテッド | 免疫療法および系 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2696566C2 (ru) | Пептидная вакцина для предупреждения и иммунотерапии деменции альцгеймеровского типа | |
TWI252233B (en) | Immunogenic peptide composition for the prevention and treatment of Alzheimer's disease | |
EP2924047B1 (en) | Vaccine carrier | |
Purswani et al. | Development of a highly immunogenic recombinant candidate vaccine against human chorionic gonadotropin | |
JP2015521467A (ja) | アレルギー治療のための核酸 | |
JP2009136300A (ja) | Porphorymonasgingivalisポリペプチドおよびヌクレオチド | |
JP2017513849A (ja) | A群レンサ球菌ワクチン | |
Smith et al. | Aspartyl proteases from the intestinal brush border of Haemonchus contortus as protective antigens for sheep | |
US20060263391A1 (en) | Process for the preparation of hypoallergenic mosaic antigens | |
EP1908776A1 (en) | Mite fusion proteins | |
Ferreirinha et al. | Mucosal immunization confers long-term protection against intragastrically established Neospora caninum infection | |
Yu et al. | Development and evaluation of candidate vaccine and antitoxin against botulinum neurotoxin serotype F | |
JP4733022B2 (ja) | 新規ダニアレルゲン | |
EP0846176A1 (en) | Hybrid protein comprising t-helper cell stimulating epitopes and b-cell epitopes from the major outer membrane protein of chlamydia trachomatis and its use as a vaccine | |
MÉVÉLEC et al. | Mapping of B epitopes in GRA4, a dense granule antigen of Toxoplasma gondii and protection studies using recombinant proteins administered by the oral route. | |
JP2007189920A (ja) | イヌアレルギーに対する予防又は治療作用を有するポリペプチド | |
Wild et al. | A recombinant allergen chimer as novel mucosal vaccine candidate for prevention of multi‐sensitivities | |
CA2649057A1 (en) | Phl p 1 allergen derivative | |
JP2007189919A (ja) | イヌアレルギーに対する予防又は治療作用を有するポリペプチド | |
CN109310747B (zh) | 恰加斯抗原及其抗体和组合物、方法和用途 | |
JPH08511508A (ja) | ボツリヌス毒素ポリペプチドおよびワクチン増強剤としてのその使用 | |
Xu et al. | Immunization with a recombinant GnRH vaccine conjugated to heat shock protein 65 inhibits tumor growth in orthotopic prostate cancer mouse model | |
CN111344007A (zh) | 抗a组链球菌的免疫原性肽 | |
EP1908777A1 (en) | Mite fusion proteins | |
SURI et al. | Evaluation of recombinant protein r140, a polypeptide segment of tegumental glycoprotein Sm25, as a defined antigen vaccine against Schistosoma mansoni |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20090106 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20110705 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20110905 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20120228 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20120821 |