JP2007000140A - Processing method of coffee raw bean using lactic acid bacterium - Google Patents

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JP2007000140A
JP2007000140A JP2006143030A JP2006143030A JP2007000140A JP 2007000140 A JP2007000140 A JP 2007000140A JP 2006143030 A JP2006143030 A JP 2006143030A JP 2006143030 A JP2006143030 A JP 2006143030A JP 2007000140 A JP2007000140 A JP 2007000140A
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Toshiharu Nakajima
俊治 中島
Hideko Yomo
秀子 四方
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Suntory Ltd
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Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a processing method of coffee raw beans preventing contamination by various germs and giving new good-quality flavor to coffee beverage when achieving fermentation process with microorganism. <P>SOLUTION: This processing method of coffee raw beans comprises a fermentation process of performing fermentation treatment based on contact of assimilation components with microorganisms, and giving coffee raw beans fermentation component produced by the fermentation treatment. The fermentation treatment is performed through letting at least two kinds of microorganisms as the microorganisms including lactic acid bacteria coexist in the fermentation process. <P>COPYRIGHT: (C)2007,JPO&INPIT

Description

本発明は、資化成分と微生物との接触に基づく発酵処理を行うと共に、その発酵処理により生じる発酵成分をコーヒー生豆に付与させる発酵工程を包含するコーヒー生豆の処理方法に関する。   The present invention relates to a method for treating green coffee beans that includes a fermentation process in which fermented components produced by the fermentation treatment are imparted to green coffee beans while performing fermentation treatment based on contact between an assimilation component and microorganisms.

コーヒー飲料の製造工程を簡単に説明すると、まず、コーヒー果実(コーヒーノキと呼ばれるアカネ科の植物の果実)からその外皮及び果肉部分を取り除いて、コーヒー生豆を得る(精製工程)。得られたそのコーヒー生豆について焙煎処理(ロースト)を施すことによりコーヒー焙煎豆が得られる(焙煎工程)。尚、コーヒー特有の味覚や香りの素となる成分(以下、コーヒー香味成分と称する)はこの焙煎工程において生成される。あとはそのコーヒー焙煎豆を粉砕し、熱湯等によりコーヒー香味成分を抽出した抽出液をコーヒー飲料として提供する。
現在、コーヒー飲料は、嗜好飲料としてその需要が増大するなかで、コーヒー飲料に対する消費者の嗜好もまた多様化しており、コーヒー香味についての様々な改善が求められている。
そうした消費者のニーズに対応すべく、コーヒー香味を改善する方法の一つとして、コーヒー生豆と、微生物(酵母など)と、及びその微生物により資化される資化成分とを接触させて発酵処理を実施した後、微生物の発酵により産生されたアルコール類やエステル類等を吸収したコーヒー生豆を分離回収して焙煎し、その焙煎豆を原料としてコーヒー飲料を製造する方法がある(特許文献1参照)。
The production process of a coffee beverage will be briefly described. First, the outer skin and pulp parts are removed from the coffee fruit (the fruit of the Rubiaceae plant called coffee tree) to obtain green coffee beans (refining process). The obtained green coffee beans are roasted (roasted) to obtain roasted coffee beans (roasting step). In addition, a component (hereinafter referred to as a coffee flavor component) that is a source of taste and aroma unique to coffee is generated in this roasting process. After that, the coffee roasted beans are crushed, and an extract obtained by extracting coffee flavor components with hot water or the like is provided as a coffee beverage.
Currently, as the demand for coffee beverages increases as a preference beverage, consumer preferences for coffee beverages are also diversified, and various improvements in coffee flavor are required.
In order to meet the needs of such consumers, as a method of improving the coffee flavor, fermentation is performed by bringing green coffee beans, microorganisms (such as yeast), and assimilated components utilized by the microorganisms into contact with each other. After carrying out the treatment, there is a method of separating and recovering and roasting coffee beans that have absorbed alcohols, esters, etc. produced by fermentation of microorganisms, and producing coffee beverages using the roasted beans as raw materials ( Patent Document 1).

国際公開番号WO2005/029969A1International Publication Number WO2005 / 029969A1

上述した特許文献1に開示される方法においては、発酵処理後のコーヒー生豆に、アルコール類やエステル類等に起因する醸造香といった独特の香りが付与され得る。さらに、そのコーヒー生豆の焙煎豆から得られるコーヒー飲料については、前述の醸造香に加えてボディー感(コクや飲み応え、風味の膨らみを示す)が増しており、新たな良質の香味を有するコーヒー飲料を製造することができる。
しかしながら、この方法においては、微生物による発酵処理を実施する際、コーヒー果実の棲み付き菌等による雑菌汚染が問題となる場合が生じていた。特に酢酸産生能を有する雑菌(例えば、酢酸菌等)により汚染された場合、コーヒー生豆が雑菌によって産生された酢酸を吸収してしまい、その焙煎豆から得られるコーヒー飲料の官能品質を著しく低下させる虞がある。
In the method disclosed in Patent Document 1 described above, a unique aroma such as a brewed aroma caused by alcohols or esters can be imparted to the green coffee beans after the fermentation treatment. In addition to the above-mentioned brewed incense, the coffee beverage obtained from the roasted coffee beans has an increased body feeling (shows richness and response to drink, shows a bulge of flavor), and has a new high-quality flavor. A coffee beverage can be produced.
However, in this method, when carrying out the fermentation treatment with microorganisms, contamination with germs such as stubborn bacteria of coffee fruit has become a problem. In particular, when contaminated with various bacteria having acetic acid production ability (for example, acetic acid bacteria, etc.), the raw coffee beans absorb the acetic acid produced by the various bacteria, and the sensory quality of the coffee beverage obtained from the roasted beans is remarkably increased. There is a risk of lowering.

本発明は、上記実情に鑑みてなされたものであって、微生物による発酵処理を実施する際、雑菌による汚染を防止して、コーヒー飲料に新たに良質な香味を付与することのできるコーヒー生豆の処理方法を提供するものである。   The present invention has been made in view of the above circumstances, and when carrying out a fermentation treatment with microorganisms, it is possible to prevent contamination by various germs and to newly impart a high-quality flavor to a coffee beverage. The processing method is provided.

本発明の第1特徴構成は、資化成分と微生物との接触に基づく発酵処理を行うと共に、その発酵処理により生じる発酵成分をコーヒー生豆に付与させる発酵工程を包含するコーヒー生豆の処理方法であって、前記発酵工程において、前記微生物として、少なくとも乳酸菌を含む2種類以上の微生物を共存させて発酵処理するコーヒー生豆の処理方法である点にある。   The 1st characteristic structure of this invention is the processing method of the green coffee beans which includes the fermentation process which gives the fermented component produced by the fermentation process to the green coffee beans while performing the fermentation process based on the contact of an assimilation component and microorganisms And in the said fermentation process, it exists in the point which is a processing method of the green coffee beans which ferment-processes by making two or more types of microorganisms containing at least lactic acid bacteria coexist as said microorganisms.

〔作用及び効果〕
コーヒー生豆(種子)は、コーヒー果実の最も内側に存在しており、発芽に備えて吸水する性質がある。また、酵母等に代表されるある種の微生物は、有機化合物(資化成分)を分解(発酵)してアルコール類、有機酸類、エステル類等(以下、発酵成分と称する)を産生し得ることが知られている。
従って、例えば、コーヒー生豆と資化成分との存在下においてある種の微生物による発酵を行うと、産生された発酵成分は、水分と共にコーヒー生豆に吸収され得る(即ち、発酵成分がコーヒー生豆に付与される)。その結果、このようにして得られたコーヒー生豆を焙煎することにより、焙煎工程にて生成される従来のコーヒー香味成分に加えて、発酵により産生された発酵成分に由来する新たな香味成分を含むコーヒー焙煎豆を得ることが可能であり、そのコーヒー焙煎豆から抽出されたコーヒー飲料には新たな良質の香味が付与され得る。
[Action and effect]
Green coffee beans (seed) are present on the innermost side of the coffee fruit and have the property of absorbing water in preparation for germination. In addition, certain microorganisms represented by yeast and the like can decompose (ferment) organic compounds (assimilation components) to produce alcohols, organic acids, esters and the like (hereinafter referred to as fermentation components). It has been known.
Thus, for example, when fermentation with certain microorganisms is performed in the presence of green coffee beans and an assimilation component, the produced fermentation components can be absorbed by the green coffee beans together with moisture (ie, the fermentation component is the raw coffee component). To bean). As a result, by roasting the coffee beans thus obtained, in addition to the conventional coffee flavor components produced in the roasting process, a new flavor derived from the fermentation components produced by fermentation It is possible to obtain roasted coffee beans containing ingredients, and a new high quality flavor can be imparted to the coffee beverage extracted from the roasted coffee beans.

また、本発明の特徴として、発酵工程において、前記微生物として、少なくとも乳酸菌を含む2種類以上の微生物を共存させて発酵処理させるので、乳酸菌による乳酸発酵が同時に進むこととなり、産生された乳酸により発酵液のpHが低下することによって発酵液が酸性化し、雑菌汚染を防止することが可能になる。またさらに、乳酸菌は、株によってはバクテリオシン(例えば、食品保存剤として広く使用されているナイシン(nisin)等)と呼ばれる広い抗菌スペクトルを持つ種々の抗菌活性物質を産生し得るので、産生されたバクテリオシンによって、より効果的に雑菌汚染を防止することが可能となる。
また例えば、乳酸菌以外の微生物(酵母等)によるアルコール発酵が進むと、糖がアルコールと二酸化炭素に転化されるので、発酵液内は著しい嫌気(酸欠)状態となり得る。そのため、乳酸菌や酵母等の通性嫌気性細菌は生存することが可能であるが、酢酸菌などの絶対好気性細菌にとっては生存が困難な環境となるので、酢酸菌による汚染を防止することも可能となる。
In addition, as a feature of the present invention, in the fermentation process, two or more kinds of microorganisms including at least lactic acid bacteria are coexisting as the microorganisms, so that the lactic acid fermentation by the lactic acid bacteria proceeds at the same time. When the pH of the liquid is lowered, the fermentation liquid is acidified, and contamination with various bacteria can be prevented. Furthermore, lactic acid bacteria were produced because some strains can produce various antibacterial active substances with a broad antibacterial spectrum called bacteriocin (eg, nisin, which is widely used as a food preservative). Bacteriocin makes it possible to more effectively prevent contamination by various bacteria.
For example, when alcoholic fermentation by microorganisms other than lactic acid bacteria (yeast, etc.) proceeds, sugar is converted into alcohol and carbon dioxide, so that the inside of the fermentation solution can be in a significantly anaerobic (acid-deficient) state. Therefore, facultative anaerobic bacteria such as lactic acid bacteria and yeast can survive, but since it is difficult to survive for absolute aerobic bacteria such as acetic acid bacteria, contamination by acetic acid bacteria can also be prevented. It becomes possible.

本発明の第2特徴構成は、前記コーヒー生豆が、コーヒー果実から単離された状態、又はコーヒー果実内に存在する状態の少なくとも何れか一方にある点にある。
〔作用及び効果〕
後述する実施例1及び2に記載されているように、コーヒー生豆が精製処理を受ける等してコーヒー果実から単離された状態で存在しているときに前記発酵工程をおこなうと、例えば、資化成分として他種の果実や果汁を用いたり、資化成分と発酵処理用微生物とコーヒー生豆とを接触させる際の順序を適宜変更したりする等、他種の設定を選択できる。或いは、実施例3及び4に記載されているように、前記コーヒー生豆がコーヒー果実内に存在する状態で存在しているときに前記発酵工程を行うと、資化成分となるコーヒー果肉と、コーヒー生豆とが近接した状態で微生物による発酵がおこる。従って、発酵によって生じたアルコール類やエステル類などの発酵成分が前記生豆に移行しやすくなる。
The 2nd characteristic structure of this invention exists in the point which exists in the state from which the said green coffee beans were isolated from coffee fruit, or the state which exists in coffee fruit.
[Action and effect]
As described in Examples 1 and 2 to be described later, when the green coffee beans are present in a state isolated from the coffee fruit, for example, after undergoing a purification treatment, Other types of settings can be selected, such as using other types of fruit or fruit juice as an assimilation component, or appropriately changing the order in contacting the assimilation component, fermentation microorganisms and green coffee beans. Alternatively, as described in Examples 3 and 4, when the fermentation step is performed when the green coffee beans are present in the state of coffee fruits, coffee pulp that becomes an assimilated component, Fermentation by microorganisms occurs in close proximity to green coffee beans. Therefore, fermentation components such as alcohols and esters produced by fermentation are easily transferred to the green beans.

本発明の第3特徴構成は、前記乳酸菌が、ホモ型乳酸菌である点にある。
〔作用及び効果〕
乳酸菌は、その発酵様式から、乳酸のみを最終産物として産生するホモ型乳酸菌(例えば、ラクトバシラス属(Lactobacillus)、ペディオコッカス属(Pediococcus)、オエノコッカス属(Oenococcus)等)と、アルコールや酢酸など乳酸以外のものを同時に産生するヘテロ型乳酸菌(例えば、ビフィドバクテリウム属(Bifidobacterium)、リューコノストック属(Leuconostoc)等)に分類される。
本発明において、ホモ型乳酸菌を使用した場合、発酵液中にコーヒー飲料の官能品質を著しく低下させる虞がある酢酸などが同時に産生されることがないので、より品質の高いコーヒー生豆を得ることができる。
A third characteristic configuration of the present invention is that the lactic acid bacterium is a homo-type lactic acid bacterium.
[Action and effect]
Lactic acid bacteria are homozygous lactic acid bacteria (for example, Lactobacillus, Pediococcus, Oenococcus, etc.) that produce only lactic acid as a final product, and lactic acid such as alcohol and acetic acid. It is classified into hetero-type lactic acid bacteria (for example, Bifidobacterium, Leuconostoc, etc.) that produce other than those at the same time.
In the present invention, when homo-type lactic acid bacteria are used, acetic acid or the like that may significantly reduce the sensory quality of the coffee beverage is not produced at the same time in the fermented liquid. Can do.

本発明の第4特徴構成は、前記乳酸菌と共存させる微生物が、酵母又は不完全菌類である点にある。
〔作用及び効果〕
これらの微生物は、入手も容易で、尚且つ培養や保存等に関しても一般的な方法で対応することができるので扱い易い。
The 4th characteristic structure of this invention exists in the point whose microorganisms made to coexist with the said lactic acid bacteria are yeast or incomplete fungi.
[Action and effect]
These microorganisms are easily available and easy to handle because they can be handled by common methods for culture, storage, and the like.

本発明の第5特徴構成は、前記酵母がワイン発酵用酵母である点にある。
〔作用及び効果〕
ワイン発酵用酵母を使用した場合、醸造香といった特徴ある香味をコーヒー生豆に付与することが可能であり、そのコーヒー生豆を原料として用いることにより、焙煎工程にて生成される従来のコーヒー香味に加えて、フルーティーな醸造香を有し、且つボディ感のある味わいを与えるコーヒー飲料を得ることができる。
A fifth characteristic configuration of the present invention is that the yeast is a yeast for wine fermentation.
[Action and effect]
When yeast for wine fermentation is used, it is possible to impart a characteristic flavor such as brewing aroma to green coffee beans, and conventional coffee produced in the roasting process by using the green coffee beans as a raw material In addition to flavor, it is possible to obtain a coffee beverage having a fruity brewing fragrance and giving a taste with a body feeling.

本発明の第6特徴構成は、前記不完全菌類がゲオトリクム(Geotrichum)属に属する不完全菌類である点にある。
〔作用及び効果〕
ゲオトリクム(Geotrichum)属に属する不完全菌類として、例えば、ゲオトリクム キャンディダム(Geotrichum candidum)、ゲオトリクム レクタングラタム(Geotrichum rectangulatum)、又はゲオトリクム クレバニ(Geotrichum klebahnii)を使用して発酵処理させた場合、いずれの微生物を使用しても、新たな香味成分(発酵成分)をコーヒー生豆に付与することが可能である。特に上記微生物を使用して得られたコーヒー生豆を原料として用いることにより、焙煎工程にて生成される従来のコーヒー香味とバランスのとれた(アルコール臭の抑えられた)華やかでリッチなエステリー香を有し、且つボディ感のある味わいを与えるコーヒー飲料を得ることができる。
A sixth characteristic configuration of the present invention is that the incomplete fungus is an incomplete fungus belonging to the genus Geotrichum.
[Action and effect]
As an incomplete fungus belonging to the genus Geotrichum, for example, Geotrichum candidum, Geotrichum rectangulatum, or any of the microorganisms treated with Geotrichum crebanium Even if it uses, it is possible to give a new flavor component (fermentation component) to green coffee beans. In particular, by using raw coffee beans obtained using the above microorganisms as raw materials, a gorgeous and rich esthetic that is balanced with the conventional coffee flavor produced in the roasting process (with reduced alcohol odor) It is possible to obtain a coffee beverage that has an incense and gives a bodily taste.

本発明の第7特徴構成は、前記ゲオトリクム(Geotrichum)属に属する不完全菌類が、ゲオトリクム スピーシーズ(Geotrichum sp.)SAM2421(国際寄託番号FERM BP−10300)もしくはその変異体、又はそれらの形質転換体である点にある。
〔作用及び効果〕
ゲオトリクム スピーシーズ(Geotrichum sp.)SAM2421(国際寄託番号FERM BP−10300)(以下、SAM2421と称する)は、本発明者らによってコーヒー果実から分離された新規微生物である。この微生物は、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター(日本国茨城県つくば市東1丁目1番地1 中央第6)に、2005年3月22日付で受託された。SAM2421を使用することによって、コーヒー生豆に新たな香味成分(発酵成分)が付与されて、より華やかでリッチなエステリー香を有し、且つボディ感のある味わいを与えるコーヒー飲料を得ることができる。尚、本発明においては、SAM2421もしくはその変異体、又はそれらの形質転換体を適宜使用することが可能である。例えば、変異体としては、自然突然変異によるものや人為的に突然変異を誘発(放射線や突然変異物質による処理)したもの、また形質転換体としては、SAM2421若しくはその変異体に、外来の遺伝子を導入したものなどから、より発酵能の優れた(あるいは、取扱いが容易である等の特徴を持つ)株を分離して使用することが可能である。
According to a seventh characteristic configuration of the present invention, the incomplete fungus belonging to the genus Geotrichum is Geotrichum sp. SAM2421, international deposit number FERM BP-10300, or a variant thereof, or a transformant thereof. In that point.
[Action and effect]
Geotrichum sp. SAM2421 (International Deposit No. FERM BP-10300) (hereinafter referred to as SAM2421) is a novel microorganism isolated from coffee fruit by the present inventors. This microorganism was entrusted on March 22, 2005 to the National Institute of Advanced Industrial Science and Technology, Patent Biological Deposit Center (1st, 1st, 1st, 1st East, Tsukuba City, Ibaraki, Japan). By using SAM2421, a new flavor component (fermentation component) is imparted to green coffee beans, and a coffee beverage having a more gorgeous and rich esthetic fragrance and giving a taste with a body feeling can be obtained. . In the present invention, SAM2421 or a variant thereof, or a transformant thereof can be used as appropriate. For example, mutants may be spontaneous mutations or artificially induced mutations (treatment with radiation or mutant substances), and transformants may be SAM2421 or its mutants with foreign genes. It is possible to isolate and use a strain having superior fermentability (or having a feature such as easy handling) from the introduced one.

本発明の第8特徴構成は、前記資化成分が、果汁又はコーヒー果肉である点にある。
〔作用及び効果〕
資化成分として果汁を用いる場合は、例えば、ぶどう果汁、桃果汁、りんご果汁などを適用することができる。また、コーヒー果肉(糖分やその他の栄養分を含む部分)は、コーヒー果実からコーヒー生豆を得るための精製工程で得られる副産物であり、通常は破棄されるものであるが、本発明において資化成分として有効利用することが可能であるため、外来の資化成分を用意する必要がなく、原料コストが増大する虞もない。
The eighth characteristic configuration of the present invention is that the assimilation component is fruit juice or coffee pulp.
[Action and effect]
When using fruit juice as an assimilation component, for example, grape juice, peach juice, apple juice, and the like can be applied. In addition, coffee pulp (portion containing sugar and other nutrients) is a by-product obtained in the refining process for obtaining green coffee beans from coffee fruits and is normally discarded, but is assimilated in the present invention. Since it can be effectively used as a component, it is not necessary to prepare an external assimilation component, and there is no possibility that the raw material cost increases.

本発明の第9特徴構成は、発酵液1mL中に存在する前記乳酸菌数が105cells以上である点にある。
〔作用及び効果〕
発酵液1mL中に存在する前記乳酸菌数が105cells以上、より好ましくは106cells以上になるような条件下において、発酵処理を実施すれば、より確実に雑菌汚染を防止することができる。
A ninth characteristic configuration of the present invention is that the number of lactic acid bacteria present in 1 mL of a fermentation broth is 10 5 cells or more.
[Action and effect]
If the fermentation treatment is carried out under such conditions that the number of lactic acid bacteria present in 1 mL of the fermentation broth is 10 5 cells or more, more preferably 10 6 cells or more, contamination with various bacteria can be prevented more reliably.

本発明の第10特徴構成は、請求項1〜9のいずれか1項に記載される処理方法により得られたコーヒー生豆である点にある。
〔作用及び効果〕
コーヒー飲料に新たな良質の香味を付与し得る発酵成分を含むコーヒー生豆を得ることができる。
The 10th characteristic structure of this invention exists in the point which is the coffee beans obtained by the processing method as described in any one of Claims 1-9.
[Action and effect]
A green coffee bean containing a fermented ingredient that can impart a new high-quality flavor to the coffee beverage can be obtained.

本発明の第11特徴構成は、請求項10に記載されるコーヒー生豆を焙煎処理したコーヒー焙煎豆である点にある。
〔作用及び効果〕
焙煎工程にて生成される従来のコーヒー香味成分に加えて、発酵により産生された発酵成分に由来する新たな香味成分を含むコーヒー焙煎豆を得ることができる。
The eleventh characteristic configuration of the present invention is roasted coffee beans obtained by roasting green coffee beans as claimed in claim 10.
[Action and effect]
In addition to the conventional coffee flavor components produced in the roasting process, roasted coffee beans containing new flavor components derived from the fermentation components produced by fermentation can be obtained.

本発明の第12特徴構成は、請求項11に記載されるコーヒー焙煎豆を原料として用いて得られたコーヒー飲料である点にある。
〔作用及び効果〕
従来のコーヒー香味に加えて、発酵により産生された発酵成分に由来する新たな良質の香味を有するコーヒー飲料を得ることができる。
A twelfth characteristic configuration of the present invention is a coffee beverage obtained using the roasted coffee beans as claimed in claim 11 as a raw material.
[Action and effect]
In addition to the conventional coffee flavor, a coffee beverage having a new high-quality flavor derived from the fermentation components produced by fermentation can be obtained.

以下に本発明の実施の形態について説明する。
〔実施形態〕
(コーヒー果実)
コーヒー果実とはコーヒーノキの果実を意味し、その構造を概していえば、コーヒー生豆(種子)、果肉(糖分やその他の栄養分を含む部分)及び外皮からなるものである。より詳細には、最も内側にコーヒー生豆(種子)が存在し、その周りが順に、銀皮(シルバースキン)、内果皮(パーチメント)、果肉、外皮で覆われている。品種としては、アラビカ種、ロブスタ種、リベリカ種などが適用可能であり、また、産地についても、ブラジル産、エチオピア産、ベトナム産、グアテマラ産などが適用可能であるが、特に限定されるものではない。尚、本実施形態で使用し得るコーヒー果実には、未乾燥及び乾燥状態のものがあり、コーヒー生豆を1とした場合の重量比は、それぞれ1粒あたり、「コーヒー果実(未乾燥):乾燥コーヒー果実:コーヒー生豆=6:4:1」である。
Embodiments of the present invention will be described below.
Embodiment
(Coffee berries)
Coffee fruit means the fruit of coffee tree, and its structure is generally composed of raw coffee beans (seed), pulp (part containing sugar and other nutrients), and hull. More specifically, green coffee beans (seed) are present on the innermost side, and the surroundings are sequentially covered with silver skin (silver skin), inner skin (parchment), pulp, and outer skin. As the varieties, Arabica, Robusta, Reberica, etc. can be applied, and Brazil, Ethiopia, Vietnam, Guatemala, etc. are applicable as production areas, but there are no particular restrictions. Absent. In addition, the coffee fruit that can be used in this embodiment includes those in an undried and dried state, and the weight ratio when the raw coffee beans are 1 is “coffee berries (undried): Dry coffee fruit: green coffee beans = 6: 4: 1 ”.

(コーヒー生豆)
本発明におけるコーヒー生豆とは、コーヒー果実内に種子として存在する状態で存在するものであっても良いし、あるいはコーヒー果実から下記の精製工程を経て単離された状態で存在するものであっても良い。
尚、コーヒー果実からコーヒー生豆を単離するための精製工程には、非水洗式と水洗式の二種類が知られている。
非水洗式とは、コーヒー果実を収穫後、そのまま乾燥させたものを脱穀して外皮、果肉、内果皮、銀皮等を除去し、コーヒー生豆を得る方法である。
水洗式とは、コーヒー果実を収穫後、水槽に沈めて不純物を除去し、果肉除去機で外皮及び果肉を除去してから、水中に沈めて粘着物を溶かして除去し、さらに、水洗した後に乾燥させたものを脱穀して内果皮、銀皮を除去してコーヒー生豆を得る方法である。
非水洗式の精製工程は操作が容易であるが、主に気候が乾燥している地域で適用される。一方、水洗式の精製工程は、主に多雨の地域で適用される。尚、1粒のコーヒー果実からコーヒー生豆は1粒或いは2粒採取される。
(Raw coffee beans)
The green coffee beans in the present invention may be present as seeds in the coffee fruit, or exist in a state isolated from the coffee fruit through the following purification process. May be.
There are two known purification processes for isolating green coffee beans from non-water-washing and water-washing types.
The non-washing type is a method of harvesting coffee berries and then drying them as they are to thresh to remove husks, pulp, inner skins, silver skins, etc. to obtain green coffee beans.
After washing the coffee berries, they are submerged in a water tank to remove impurities, and after removing the outer skin and pulp with a pulp remover, submerged in water to dissolve and remove the sticky material, and then washed with water. In this method, the dried product is threshed to remove the inner skin and the silver skin to obtain green coffee beans.
Non-washing purification processes are easy to operate, but are mainly applied in areas where the climate is dry. On the other hand, the washing-type refining process is mainly applied in rainy areas. One or two green coffee beans are collected from one coffee fruit.

(資化成分)
本発明における資化成分とは、例えば、果肉、果汁、糖類、穀物類、培地などが挙げられるが、好ましくは果汁又はコーヒー果肉である。但し、本発明でいうコーヒー果肉とは、便宜的に、コーヒー果実(未乾燥又は乾燥状態を問わない)において、そのコーヒー生豆と外皮以外の全ての部分を意味する。
コーヒー果肉は、精製工程を経ていないコーヒー果実の状態のもの(必要に応じて、ナイフ等で表面に傷を付けて、果肉を一部露出させても良い)を使用しても良く、あるいは、精製工程にてコーヒー生豆と分離されたときに得られる果肉の状態で使用することも可能である。また、コーヒー果肉は、未乾燥のものであってもよいし、乾燥させたものであってもよい。尚、コーヒー果肉に限らず、必要に応じて、ぶどう果肉、サクランボ果肉、桃果肉などの他の果肉を使用することも可能であり、コーヒー果肉を含めたこれらの果肉を単独か、あるいは任意に組み合わせて使用しても良い。
上述した果肉以外の資化成分としては、果汁(例えば、ぶどう、桃、リンゴ等)、糖類(例えば、サトウキビや甘藷等の植物からとれる単糖、二糖、多糖等)、穀物類(例えば、麦芽を糖化させた麦汁など)、培地等が挙げられるが、微生物が資化可能な成分であれば特に限定されず、果肉を含めたこれらの資化成分を単独か、あるいは任意に組み合わせて使用しても良い。
(Assimilation component)
The assimilation component in the present invention includes, for example, fruit pulp, fruit juice, saccharides, cereals, culture medium and the like, preferably fruit juice or coffee pulp. However, the coffee pulp in the present invention means, for convenience, all parts of the coffee fruit (whether undried or dried) other than the green coffee beans and the outer skin.
The coffee pulp may be in the state of coffee fruit that has not undergone a refining process (if necessary, the surface may be scratched with a knife or the like to partially expose the pulp), or It can also be used in the state of pulp obtained when separated from green coffee beans in the refining process. The coffee pulp may be undried or dried. In addition, it is possible to use other pulps such as grape pulp, cherries pulp, peach pulp, etc. as needed, and these pulps including coffee pulp can be used alone or arbitrarily. You may use it in combination.
Assimilation components other than the above-described pulp are fruit juice (eg, grapes, peaches, apples, etc.), sugars (eg, monosaccharides, disaccharides, polysaccharides, etc. taken from plants such as sugarcane and sweet potatoes), grains (eg, Wort obtained by saccharification of malt), medium, and the like, but are not particularly limited as long as the microorganism can assimilate, and these assimilation components including pulp are used alone or in any combination. May be used.

(コーヒー果肉の露出方法)
コーヒー果実をそのまま用いて、中のコーヒー果肉を資化成分として使用する場合には、発酵速度を増加させるために、コーヒー果実表面の少なくとも一部にコーヒー果肉を露出させる方法が好適である。
コーヒー果肉を露出させる方法としては、収穫したコーヒー果実に鋭利な刃物等で傷を付けても良いし、脱穀装置等を用いて外皮に切れ目が入るようにコーヒー果実に圧力をかけるようにしても良いが、このとき中のコーヒー生豆にまで傷をつけないようにする。また、皮むき機等を使用して、コーヒー果実の外皮のみを剥いて果肉を露出するようにしても良い。尚、コーヒー果実を収穫する際、偶然に傷がついてその果肉の少なくとも一部が露出してしまったものについては、特に上述の果肉の露出操作を行う必要はない。また、精製工程にてコーヒー生豆と分離されたときに得られるコーヒー果肉を使用する場合にも、特に上述の果肉の露出操作を行う必要はなく、別途コーヒー生豆を加えて発酵を行う。
(How to expose coffee pulp)
When using the coffee fruit as it is and using the coffee pulp in it as an assimilation component, a method of exposing the coffee pulp to at least a part of the coffee fruit surface is preferable in order to increase the fermentation rate.
As a method of exposing the coffee pulp, the harvested coffee fruit may be scratched with a sharp blade or the like, or the threshing device may be used to apply pressure to the coffee fruit so that the outer skin is cut. Good, but do not damage the coffee beans inside. Alternatively, a peeler or the like may be used to peel only the outer skin of the coffee fruit to expose the pulp. It should be noted that when the coffee fruit is harvested, it is not necessary to perform the above-described pulp exposing operation for those that have been accidentally scratched and at least part of the pulp has been exposed. Moreover, also when using the coffee pulp obtained when it isolate | separates from a green coffee bean in a refinement | purification process, it is not necessary to perform especially the exposure operation of the above-mentioned fruit meat, and it ferments by adding a green coffee bean separately.

(微生物)
1.乳酸菌
本発明に適用可能な乳酸菌としては、乳酸のみを最終産物として産生するホモ型乳酸菌(例えば、ラクトバシラス属(Lactobacillus)、ペディオコッカス属(Pediococcus)、オエノコッカス属(Oenococcus)等)が好ましい。尚、乳酸菌の添加量としては、発酵液(微生物と資化成分とを共存させて、微生物による発酵を実施し得る液体であって、例えば、水等が挙げられる)1mL中に存在する乳酸菌数が105cells以上、より好ましくは106cells以上となるような添加量であることが好ましい。
(Microorganism)
1. Lactic acid bacteria Lactic acid bacteria applicable to the present invention are preferably homo-type lactic acid bacteria that produce only lactic acid as a final product (eg, Lactobacillus, Pediococcus, Oenococcus, etc.). The amount of lactic acid bacteria added is the number of lactic acid bacteria present in 1 mL of a fermentation liquid (a liquid that can be fermented by microorganisms in the presence of microorganisms and assimilation components, such as water). Is preferably 10 5 cells or more, more preferably 10 6 cells or more.

2.乳酸菌以外の微生物
本発明に適用可能な上記乳酸菌以外の微生物としては、少なくとも、上記乳酸菌の共存下において、上記資化成分を資化(発酵)して、コーヒー焙煎豆やコーヒー飲料に付与される香味成分の元となる発酵成分を産生することが可能である微生物であれば、特に限定されない。
具体的な微生物としては、酵母、不完全菌類などが挙げられる。これらの微生物は、入手が容易であり、取り扱い性の容易さから好適に用いることができる。
尚、乳酸菌以外の微生物の添加量は、香味の添加の効果が得られれば特に限定されないが、培養時間やコストを考え、適宜設定できる。例えば、コーヒー生豆重量あたりでは、酵母の場合では1.0×108cells/g〜1.0×1010cells/gが適当であり、不完全菌類の場合は、1.0mg/g〜10mg/gが適当である。
また、発酵液への添加量としては、酵母の場合には、発酵液1mL中に存在する菌数が106cells以上となるような添加量であることが好ましく、不完全菌類の場合には、発酵液1mL中に存在する菌数が106cells以上となるような添加量であることが好ましい。
2. Microorganisms other than lactic acid bacteria As microorganisms other than the above lactic acid bacteria applicable to the present invention, at least in the presence of the lactic acid bacteria, the assimilating component is assimilated (fermented) and given to roasted coffee beans and coffee beverages. There is no particular limitation as long as it is a microorganism that can produce a fermentation component that is a source of the flavor component.
Specific microorganisms include yeast, incomplete fungi and the like. These microorganisms can be suitably used because they are easily available and easy to handle.
In addition, the addition amount of microorganisms other than lactic acid bacteria will not be specifically limited if the effect of addition of a flavor is acquired, but it can set suitably considering culture | cultivation time and cost. For example, the per green coffee bean weight, is suitably 1.0 × 10 8 cells / g~1.0 × 10 10 cells / g in the case of yeast, in the case of imperfect fungi, 1.0 mg / g to 10 mg / g is appropriate.
In addition, in the case of yeast, the amount added to the fermentation broth is preferably such that the number of bacteria present in 1 mL of the fermentation broth is 10 6 cells or more. The addition amount is preferably such that the number of bacteria present in 1 mL of the fermentation broth is 10 6 cells or more.

酵母は、食品としての安全性の面から、食品での使用実績のあるワイン発酵用酵母やビール発酵用酵母といった醸造用酵母を好適に用いることができる。ワイン発酵用酵母としては、例えば、市販の乾燥酵母である、サッカロマイッセス(Saccharomyces)属のセレビシアエ(cerevisiae)種のLalvin L2323株(セティカンパニー社製)(以下、L2323と称する)や、CK S102株(Bio Springer社製)(以下、S102と称する)等、又はサッカロマイッセス(Saccharomyces)属のバイヤヌス(bayanus)種の酵母を用いることができる。通常は、L2323は赤ワイン醸造用、S102はロゼワイン醸造用に用いられる。このように酵母を用いた場合、醸造香といった特徴のある香味を添加することができる。   From the viewpoint of safety as food, yeast for brewing such as yeast for wine fermentation and yeast for beer fermentation that have been used in foods can be preferably used. Examples of yeast for wine fermentation include, for example, commercially available dry yeasts, S. cerevisiae cerevisiae cerevisiae strain Lalvin L2323 (setty company) (hereinafter referred to as L2323), and CK. S102 strain (manufactured by Bio Springer) (hereinafter referred to as S102) or the like, or Saccharomyces genus Bayanus species yeast can be used. Usually, L2323 is used for red wine brewing and S102 is used for rosé wine brewing. When yeast is used in this way, a characteristic flavor such as brewing aroma can be added.

不完全菌類としては、例えば、ゲオトリクム(Geotrichum)属のゲオトリクム キャンディダム(Geotrichum candidum)、ゲオトリクム レクタングラタム(Geotrichum rectangulatum)、及びゲオトリクム クレバニ(Geotrichum klebahnii)等であり、より好ましくは、ゲオトリクム スピーシーズ(Geotrichum sp.)SAM2421(国際寄託番号FERM BP−10300)若しくはその変異体、又はそれらの形質転換体である。   Examples of imperfect fungi include, for example, Geotricum candidum, Geotricum rectangulatum, Getricrich pea, and Geotricum crebanium. ) SAM2421 (International deposit number FERM BP-10300) or a variant thereof, or a transformant thereof.

ゲオトリクム(Geotrichum)属に属する微生物を単離し得る単離源としては、土壌、植物、空中、繊維、木材、ハウスダスト、飼料、河川、サイレージ、食品、果実、穀類、肥料、工場排水、堆肥、排泄物、消化管などが挙げられるが、好ましくは、果実(コーヒー果実)である。単離方法としては、例えば、コーヒー果実を滅菌水中で攪拌し、その上澄み液を、適当な抗生物質を含有する寒天培地に塗末して培養し、発生したコロニーを単離する等の方法が挙げられるが、適当な菌体保存施設等から直接購入することも可能である。   Isolation sources that can isolate microorganisms belonging to the genus Geotrichum include soil, plants, aerial, fiber, wood, house dust, feed, rivers, silage, food, fruits, cereals, fertilizer, industrial wastewater, compost, Examples include excrement and gastrointestinal tract, but fruit (coffee fruit) is preferable. As an isolation method, for example, the coffee fruit is stirred in sterilized water, the supernatant is smeared on an agar medium containing an appropriate antibiotic and cultured, and the generated colonies are isolated. Although it is mentioned, it is also possible to purchase directly from an appropriate cell storage facility.

尚、本発明でいう変異体とは、自然突然変異によるもの、もしくは人為的に突然変異を誘発(放射線や突然変異物質による処理等)させることにより得られたものを含み、DNAの塩基配列が野生株(ゲオトリクム スピーシーズ(Geotrichum sp.)SAM2421(国際寄託番号FERM BP−10300))と比べて変化したものをいう。   The mutants referred to in the present invention include those obtained by spontaneous mutation or those obtained by artificially inducing mutation (treatment with radiation, mutant substances, etc.), and the DNA base sequence is This refers to a change in comparison with the wild type strain (Geotricum sp.) SAM2421 (international deposit number FERM BP-10300).

(1)自然突然変異(spontaneous mutation)
微生物が通常の環境下で正常に生育しているときに発生する突然変異を、自然突然変異という。自然突然変異の主な原因は、DNA複製時の誤りと、内在性の突然変異原物質(ヌクレオチドアナログ)であると考えられている(真木,「自然突然変異と修復機構」,細胞工学 Vol.13 No.8, pp.663−672,1994)。
(1) Spontaneous mutation
Mutations that occur when microorganisms are growing normally under normal circumstances are called spontaneous mutations. The main causes of spontaneous mutations are considered to be errors during DNA replication and endogenous mutagens (nucleotide analogs) (Maki, “Natural Mutation and Repair Mechanism”, Cell Engineering Vol. 13 No. 8, pp. 663-672, 1994).

(2)人為的な突然変異
2−1.放射線や突然変異原物質(mutagen)による処理
紫外線やX線などの放射線処理、あるいはアルキル化剤のような人工的な突然変異原物質処理によって、DNAに損傷が生じる。その損傷は、DNA複製の過程で突然変異に固定される。
2−2.PCR(polymerase chain reaction )法の利用
PCR法は、試験管内でDNAを増幅するため、細胞内の突然変異抑制機構の一部が欠けており、高頻度に突然変異の誘発が可能である。また、遺伝子シャフリング法(Stemmer,“Rapid evolution of a protein in vi
tro by DNA shuffling”, Nature Vol.370, p
p.389−391, Aug. 1994 )と組み合わせることで、有害突然変異の蓄積を避け、複数の有益突然変異を遺伝子に蓄積することができる。
2−3.ミューテーター(mutator)の利用
ほとんどすべての生物では、突然変異抑制機構によって、自然突然変異の発生率が非常に低いレベルに保たれている。この突然変異抑制機構には、10種類以上の遺伝子が関与した複数の段階が存在する。これらの遺伝子の1つあるいは複数が破壊された個体は、高い頻度で突然変異を発生するので、ミューテーターと呼ばれている。また、これらの遺伝子は、ミューテーター遺伝子と呼ばれている(真木,「自然突然変異と修復機構」,細胞工学 Vol.13 No.8, pp.663−672, 1994; Horst et. al.,“Escherichia coli mutator genes”
, Trends in Microbiology Vol.7 No.1, pp.29−36, Jan. 1999)。
(2) Artificial mutation 2-1. Treatment with radiation or mutagens Radiation treatment such as ultraviolet rays or X-rays, or treatment with artificial mutagens such as alkylating agents, damages DNA. The damage is fixed to the mutation during the process of DNA replication.
2-2. Use of PCR (polymerase chain reaction) method Since PCR amplifies DNA in a test tube, a part of intracellular mutation suppression mechanism is lacking, and mutation can be induced at a high frequency. In addition, the gene shuffling method (Stemer, “Rapid evolution of a protein in vii
"tro by DNA shuffling", Nature Vol. 370, p.
p. 389-391, Aug. 1994), it is possible to avoid accumulation of harmful mutations and to accumulate a plurality of beneficial mutations in the gene.
2-3. Use of mutators In almost all organisms, the mutation suppression mechanism keeps the rate of spontaneous mutations at a very low level. This mutation suppression mechanism has multiple stages involving more than 10 genes. Individuals in which one or more of these genes are disrupted are referred to as mutators because they frequently mutate. These genes are also called mutator genes (Maki, “Spontaneous Mutation and Repair Mechanism”, Cell Engineering Vol. 13 No. 8, pp. 663-672, 1994; Horst et. Al., “Escherichia coli mutator genes”
, Trends in Microbiology Vol. 7 No. 1, pp. 29-36, Jan. 1999).

また、本発明でいう形質転換体とは、他種の生物の持つ遺伝子(外来遺伝子)を新規微生物(ゲオトリクム スピーシーズ(Geotrichum sp.)SAM2421(国際寄託番号FERM BP−10300))若しくはその変異体に人工的に導入したものを意味する。製法としては、例えば、外来遺伝子を適当な発現ベクター内に組み込み、その発現ベクターを、電気穿孔法、リン酸カルシウム法、リポソーム法、DEAEデキストラン法など公知の方法で導入する。   The transformant as used in the present invention refers to a gene (foreign gene) possessed by another species of organism as a novel microorganism (Geotrichum sp. SAM2421 (International Deposit No. FERM BP-10300)) or a mutant thereof. It means something artificially introduced. As the production method, for example, a foreign gene is incorporated into an appropriate expression vector, and the expression vector is introduced by a known method such as electroporation, calcium phosphate method, liposome method, DEAE dextran method.

尚、微生物が乾燥したものである場合は、それぞれの適した方法にそって覆水を行うことができる。例えば、乾燥酵母を用いる場合、37〜41℃に加温した水に20〜30分懸濁してから用いることができる。   In addition, when microorganisms are dried, water covering can be performed according to each suitable method. For example, when dry yeast is used, it can be used after being suspended in water heated to 37 to 41 ° C. for 20 to 30 minutes.

(発酵工程)
1.微生物と資化成分との接触方法
本発明における発酵工程において、微生物と資化成分とを接触させる方法としては、例えば、適当な発酵槽を用意し、その発酵槽に、資化成分、上記乳酸菌を含む2種以上の微生物、ならびに適当な発酵液を添加し、発酵液中で微生物と資化成分とを接触させる方法が挙げられる。
尚、資化成分としてコーヒー果肉を使用する場合、ナイフ等で表面に傷を付けてコーヒー果肉を一部露出させたコーヒー果実や、精製工程にてコーヒー生豆と分離されたときに得られるコーヒー果肉を使用すると、果肉が露出した状態にあるので発酵液中に果肉中の糖分等が溶出し易くなっており、微生物による発酵がより促進され得る。
また、発酵工程を実施する際、発酵液中にコーヒー生豆、資化成分、及び微生物が共存し得るようにして発酵工程を行うようにしても良いし、あるいは、初めに資化成分と微生物のみを発酵液中に添加して発酵工程を実施した後、産生された発酵成分を含むその発酵液にコーヒー生豆を添加するようにしても良い。
(Fermentation process)
1. Method for contacting microorganism and assimilation component In the fermentation process of the present invention, for example, a suitable fermenter is prepared as a method for bringing a microorganism and an assimilation component into contact. And a method of adding two or more types of microorganisms and an appropriate fermentation broth, and bringing the microorganisms into contact with the assimilation component in the fermentation broth.
In addition, when using coffee pulp as an assimilation component, coffee fruit obtained by scratching the surface with a knife or the like to partially expose the coffee pulp, or coffee obtained when separated from green coffee beans in the refining process When the pulp is used, since the pulp is in an exposed state, sugars and the like in the pulp are easily eluted in the fermentation liquid, and fermentation by microorganisms can be further promoted.
In addition, when the fermentation process is performed, the fermentation process may be performed so that green coffee beans, assimilation components, and microorganisms can coexist in the fermentation liquid, or the assimilation component and the microorganisms may be used first. After adding only in a fermented liquid and implementing a fermentation process, you may make it add green coffee beans to the fermented liquid containing the produced fermentation component.

2.発酵条件
微生物の発酵条件については、発酵が実施され得る条件であれば特に限定されず、必要に応じて発酵に適した条件(例えば、使用する微生物の種類やその菌量(初期菌数)、資化成分の種類や量(濃度)、温度、湿度、pH、酸素又は二酸化炭素濃度、発酵時間等)を適宜設定することができる。また他にも例えば、上記の資化成分以外にも、必要に応じてpH調整剤などの添加剤や窒素源や炭素源を補うための市販の栄養培地などを補助的に添加することもできる。
特に本発明における発酵工程においては、雑菌汚染防止のため、雑菌の増殖を抑えるように温度、pH、二酸化炭素濃度等といった条件をそれぞれ単独か、又は適宜任意に組み合わせて制御して発酵させてもよい。例えば、15〜30℃といった低温環境下にて発酵をさせたり、必要に応じてpH調整剤等(クエン酸、リンゴ酸、乳酸等)を添加してより厳しい酸性条件下で発酵を行わせたり、あるいは二酸化炭素濃度(又は酸素濃度)を上げて、より嫌気的(又は好気的)な条件下で発酵を実施するなどしても良い。
また、本発明における発酵工程においては、上記の発酵条件(例えば、使用する微生物の種類やその菌量(初期菌数)、資化成分の種類や量(濃度)、温度、湿度、pH、酸素又は二酸化炭素濃度、発酵時間等)を自動及び/又は手動で制御可能な設備・装置(例えば、恒温槽、タンク、貯蔵庫等)にて発酵工程を行うこともできる。
尚、発酵工程に要する時間は限定されず、添加される香味の質・強さによって、あるいは、微生物や資化成分によって、適宜、選択すればよい。また、資化成分の枯渇を目安に、発酵工程を終了してもよい。
発酵工程を終了するには、微生物を加熱滅菌する処理、コーヒー生豆やコーヒー果実を水洗いして付着している微生物を除去する処理、コーヒー生豆やコーヒー果実を乾燥器や天日干しによって乾燥させる処理、資化成分とコーヒー生豆とを分離させる処理、又はコーヒー生豆の焙煎処理といった処理を単独で実施するか、あるいは任意に組み合わせて実施して終了させることができる。例えば、乾燥器を使用してコーヒー果実を乾燥させる場合、50〜60℃で1〜3日程度乾燥させることにより、発酵工程を終了させることができる。
尚、本発明においては、上述した乳酸菌と、乳酸菌以外の微生物(1種類以上)とをそれぞれ適宜選択し、種々の発酵条件と組み合わせることによって、コーヒー生豆に様々な香味を添加することも可能である。
2. Fermentation conditions The conditions for fermentation of microorganisms are not particularly limited as long as fermentation can be carried out. Conditions suitable for fermentation (for example, the type of microorganism to be used and the amount of bacteria (initial number of bacteria), The type and amount (concentration), temperature, humidity, pH, oxygen or carbon dioxide concentration, fermentation time, etc.) of the assimilation component can be appropriately set. In addition, for example, in addition to the above assimilation component, an additive such as a pH adjuster, a commercially available nutrient medium for supplementing a nitrogen source or a carbon source, and the like can be supplementarily added as necessary. .
In particular, in the fermentation process of the present invention, in order to prevent contamination with various germs, conditions such as temperature, pH, carbon dioxide concentration, etc. may be controlled individually or in any appropriate combination so as to suppress the growth of germs. Good. For example, fermentation can be performed in a low temperature environment such as 15 to 30 ° C., or a pH adjuster or the like (citric acid, malic acid, lactic acid, etc.) can be added as necessary to perform fermentation under more severe acidic conditions. Alternatively, the carbon dioxide concentration (or oxygen concentration) may be increased and fermentation may be performed under more anaerobic (or aerobic) conditions.
In the fermentation process of the present invention, the above fermentation conditions (for example, the type of microorganism to be used and its amount (initial number of bacteria), the type and amount (concentration) of the assimilation component, temperature, humidity, pH, oxygen Alternatively, the fermentation process can be performed by equipment / device (for example, a thermostatic bath, a tank, a storage, etc.) capable of automatically and / or manually controlling carbon dioxide concentration, fermentation time, and the like.
The time required for the fermentation process is not limited, and may be appropriately selected depending on the quality and strength of the added flavor, or depending on the microorganism and the assimilating component. Moreover, you may complete | finish a fermentation process on the basis of exhaustion of an utilization component.
To finish the fermentation process, heat and sterilize the microorganisms, wash the green coffee beans and coffee berries with water and remove the adhering microorganisms, and dry the coffee beans and coffee berries with a dryer or sun-dried. Processing such as processing, separation of assimilation components and green coffee beans, or roasting of green coffee beans can be carried out alone or in any combination and terminated. For example, when drying coffee fruits using a dryer, the fermentation process can be completed by drying at 50 to 60 ° C. for about 1 to 3 days.
In the present invention, it is possible to add various flavors to green coffee beans by appropriately selecting the lactic acid bacteria described above and microorganisms (one or more types) other than lactic acid bacteria and combining them with various fermentation conditions. It is.

3.発酵工程の一例
ここでは、コーヒー果実を用いて発酵を行う例を説明する。
本発明は、例えば、コーヒー生豆の精製工程(水洗式)中に発酵工程を行うことができる。
水洗式の精製工程では、例えば、コーヒー果実を収穫し、水槽に沈めて不純物を除去する際、その水槽(発酵槽)にさらに微生物を添加して発酵させることができる。
発酵工程を終了したコーヒー果実は、その後、水等で微生物を洗い流して分離してからか、あるいは微生物を付着させたままで、通常の精製工程に沿って果肉が除去され、脱穀されてコーヒー生豆が分離される。
このようにして分離されたコーヒー生豆は、通常の方法で焙煎処理することが可能であり、焙煎度合の異なる種々のコーヒー焙煎豆(ライトロースト〜イタリアンロースト)を得ることができる。
得られたコーヒー焙煎豆は、粉砕して加水し、濾材により濾過抽出することによってレギュラーコーヒーとして飲用に供することができるほか、工業用原料としてインスタントコーヒー、コーヒーエキス、缶コーヒーなどに使用することが可能である。
3. An example of a fermentation process Here, the example which ferments using a coffee fruit is demonstrated.
In the present invention, for example, a fermentation step can be performed during a green coffee bean refining step (water washing type).
In the washing-type purification process, for example, when coffee fruits are harvested and submerged in a water tank to remove impurities, microorganisms can be added to the water tank (fermenter) and fermented.
After the fermentation process, the coffee berries are washed away with microorganisms with water, etc., or separated, or the microorganisms are left attached and the pulp is removed and threshed according to the normal refining process. Are separated.
The green coffee beans thus separated can be roasted by an ordinary method, and various roasted coffee beans (light roast to Italian roast) with different degrees of roasting can be obtained.
The obtained roasted coffee beans can be used for drinking as regular coffee by pulverizing, adding water, filtering and extracting with a filter medium, and instant coffee, coffee extract, canned coffee, etc. as industrial raw materials Is possible.

以下、本発明について、実施例により具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。   EXAMPLES Hereinafter, although an Example demonstrates this invention concretely, this invention is not limited to these.

(実施例1)マストを用いた例
資化成分としてマスト(ワインの醸造原料液)を用い、乳酸菌の添加の影響を検討した。2000mL容の三角フラスコに、チリ産赤ブドウ濃縮液を水で希釈して、比重1.084(15℃)とした赤マスト(資化成分を含む発酵液)を1000g添加した。
次いで、その赤マストに、微生物として、ゲオトリクム スピーシーズ(Geotrichum sp.)SAM2421(国際寄託番号FERM BP−10300)(以下、SAM2421と称する)を添加し(菌体濃度:赤マスト1mLあたり1×106cells)、さらに乳酸菌として、ワインマロラティック発酵用として用いられているホモ型の市販の乾燥乳酸菌ラクトバシラス プランタラム(Lactobacillus plantarum)(Christian Hansen社製)を定法によって復水して添加して(菌体濃度:赤マスト1mLあたり1×106cells)、試料1を調製した。一方、乳酸菌(ラクトバシラス プランタラム(Lactobacillus plantarum))を添加しないこと以外は試料1と同様の方法で調製したものを比較例1(コントロール)とした。
上記試料1及び比較例1に、300gのコーヒー生豆(ブラジル産サントスNo.2)を添加し、23℃で72時間静置して発酵させた(発酵工程)。72時間後の試料1及び比較例1の各発酵液を観察した結果、試料1では、乳酸菌(ラクトバシラス プランタラム(Lactobacillus plantarum))とSAM2421以外の菌の繁殖は認められず、また、発酵液に良好な香味を呈した。
一方、比較例1では、発酵の終盤で、雑菌と思われる微生物の繁殖が認められ、良好な醸造香のほかに、若干の酸臭が認められた。
(Example 1) Example using a mast Mast (wine brewing raw material liquid) was used as an assimilation component, and the effect of addition of lactic acid bacteria was examined. To a 2000 mL Erlenmeyer flask, 1000 g of red mast (fermented liquid containing an assimilating component) having a specific gravity of 1.084 (15 ° C.) was added by diluting a Chilean red grape concentrate with water.
Next, as a microorganism, Geotricum sp. SAM2421 (International Deposit No. FERM BP-10300) (hereinafter referred to as SAM2421) is added to the red mast (cell density: 1 × 10 6 per mL of red mast). cells), and further, as a lactic acid bacterium, homozygous commercially available dry lactic acid bacterium Lactobacillus plantarum (manufactured by Christian Hansen), which is used for wine malolactic fermentation, is reconstituted by a conventional method and added (bacteria). Body concentration: 1 × 10 6 cells per mL of red mast), sample 1 was prepared. On the other hand, Comparative Example 1 (Control) was prepared by the same method as Sample 1 except that lactic acid bacteria (Lactobacillus plantarum) were not added.
300 g of green coffee beans (Brazil Santos No. 2) were added to Sample 1 and Comparative Example 1 and allowed to stand at 23 ° C. for 72 hours for fermentation (fermentation step). As a result of observing each fermented liquid of Sample 1 and Comparative Example 1 after 72 hours, in Sample 1, no bacteria other than lactic acid bacteria (Lactobacillus plantarum) and SAM2421 were observed, and It had a good flavor.
On the other hand, in Comparative Example 1, the propagation of microorganisms considered to be miscellaneous bacteria was observed at the end of fermentation, and a slight acid odor was recognized in addition to a good brewing aroma.

次に、試料1及び比較例1の各発酵液の上澄み液をサンプリングして成分分析を行った。コーヒー豆の品質に悪影響を与える代表的な雑菌として酢酸産生菌があることから、上澄み液中の酢酸濃度を液体クロマトグラフィーで分析して酢酸産生菌の増殖の有無を判断した(即ち、酢酸産生菌が増殖すると、酢酸産生量が増加して、酢酸濃度が高くなるとものと判断する)。   Next, the supernatant of each fermentation solution of Sample 1 and Comparative Example 1 was sampled for component analysis. Since acetic acid producing bacteria are representative bacteria that adversely affect the quality of coffee beans, the acetic acid concentration in the supernatant was analyzed by liquid chromatography to determine whether the acetic acid producing bacteria had grown (ie, acetic acid production). If the bacteria grow, the acetic acid production increases and the acetic acid concentration increases.)

液体クロマトグラフィー分析の装置は、島津製作所のHPLC一式を用いた。カラムとしてはShim−pack SCR−102Hを用い、電気伝導度検出器 CDD−6Aで検出した。カラムオーブンの温度は40℃とし、p−トルエンスルホン酸を含むTrisバッファーで反応と溶出を行った。絶対検量線で定量した。
液体クロマトグラフィーの結果を表1に示す。乳酸菌を添加した試料1では、比較例1よりも酢酸の濃度は低かった。すなわち、発酵液に乳酸菌を添加することによって、雑菌の繁殖を抑えることがわかった。
As an apparatus for liquid chromatography analysis, a Shimadzu HPLC set was used. As a column, Shim-pack SCR-102H was used and detected by an electric conductivity detector CDD-6A. The temperature of the column oven was 40 ° C., and the reaction and elution were performed with a Tris buffer containing p-toluenesulfonic acid. Quantified with an absolute calibration curve.
The results of liquid chromatography are shown in Table 1. In Sample 1 to which lactic acid bacteria were added, the concentration of acetic acid was lower than that in Comparative Example 1. That is, it was found that by adding lactic acid bacteria to the fermentation broth, the propagation of miscellaneous bacteria was suppressed.

Figure 2007000140
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次に、コーヒー焙煎豆の評価を行った。試料1および比較例1について、発酵後の発酵液からコーヒー生豆を取り出し、水切りしたのち、当量の脱イオン水で洗浄して固形分を除去し、コーヒー生豆約300gを得た。得られたコーヒー生豆のうち100gを家庭用全自動珈琲豆焙煎機(CRPA−100 トータス株式会社)で深煎りボタン操作により焙煎した(焙煎時間は約25分程度)。次いで、コーヒー官能専門のパネラー5名によって、コーヒー焙煎豆の官能評価を行った。
試料1及び比較例1の各コーヒー焙煎豆30gを粉砕せずにそのままの形状で専用の官能グラスに入れ、ガラスの蓋をした。官能時に蓋をずらし、エステリー香、酢酸臭の2種類を評価した。弱い(1点)、やや弱い(2点)、中程度(3点)、やや強い(4点)、強い(5点)の5段階で、0.5点きざみで評価した。5名の評価点の平均値で表した。結果を表2に示す。試料1のコーヒー焙煎豆は、比較例1のコーヒー焙煎豆に比べて、良好な香りを有していた。
Next, the roasted coffee beans were evaluated. For Sample 1 and Comparative Example 1, green coffee beans were taken out of the fermented liquid after fermentation, drained, washed with an equivalent amount of deionized water to remove solids, and about 300 g of green coffee beans were obtained. Of the obtained green coffee beans, 100 g was roasted by a deep roast button operation using a fully automatic coffee beans roaster (CRPA-100 Tortoise Co., Ltd.) (roasting time is about 25 minutes). Next, sensory evaluation of roasted coffee beans was performed by five panelists specializing in sensory coffee.
30 g of roasted coffee beans of Sample 1 and Comparative Example 1 were put into a dedicated functional glass as they were without being crushed, and the glass was covered. At the time of sensuality, the lid was moved and two types of esthetic odor and acetic acid odor were evaluated. The evaluation was made in 0.5 points in steps of weak (1 point), slightly weak (2 points), moderate (3 points), slightly strong (4 points), and strong (5 points). Expressed as the average of the five evaluation points. The results are shown in Table 2. The roasted coffee beans of Sample 1 had a better scent compared to the roasted coffee beans of Comparative Example 1.

Figure 2007000140
Figure 2007000140

上記試料1及び比較例1のコーヒー焙煎豆を用いてコーヒー抽出液を調製した。各コーヒー焙煎豆を細挽きにし、粉砕豆12gに対して熱湯を100g加えて攪拌した。カップテストの定法に従って、浮き上がったコーヒーを取り除き、上澄み液の官能評価を行った。コーヒー専門パネラー5名により実施した。評価項目は、香り(エステリー香、醸造香)及び味(ボディ感、まろやかさ、雑味)の5種類とした。弱い(1点)、やや弱い(2点)、中程度(3点)、やや強い(4点)、強い(5点)の5段階で、0.5点きざみで評価した。5名の評価点の平均値で表した。結果を表3に示す。試料1のコーヒー抽出液は、比較例1のコーヒー抽出液に比べて、香り、味ともに良好なものであった。   A coffee extract was prepared using the coffee roasted beans of Sample 1 and Comparative Example 1. Each coffee roasted bean was finely ground, and 100 g of hot water was added to 12 g of the ground beans and stirred. According to the usual method of cup test, the floated coffee was removed and the supernatant liquid was subjected to sensory evaluation. Conducted by 5 coffee panelists. The evaluation items were five types: fragrance (esthetic fragrance, brewing fragrance) and taste (body feeling, mellowness, miscellaneous taste). The evaluation was made in 0.5 points in steps of weak (1 point), slightly weak (2 points), moderate (3 points), slightly strong (4 points), and strong (5 points). Expressed as the average of the five evaluation points. The results are shown in Table 3. Compared to the coffee extract of Comparative Example 1, the coffee extract of Sample 1 had better aroma and taste.

Figure 2007000140
Figure 2007000140

(実施例2)乳酸菌の添加量や種類の検討
乳酸菌の添加量や種類が上記試料1と異なる試料2〜5を調製した(尚、その他の条件(資化成分や添加するその他の微生物等)は、上記試料1と同様である)。
試料2は、乳酸菌として、ラクトバシラス プランタラム(Lactobacillus plantarum)(Christian Hansen社製)を添加した(菌体濃度:赤マスト1mLあたり1×108cells(上記試料1の100倍量))。
試料3は、乳酸菌として、ラクトバシラス オエノス(Lactobacillus oenos)(Christian Hansen社製)を添加した(菌体濃度:赤マスト1mLあたり1×106cells)。
試料4は、乳酸菌として、オエノコッカス オエニ(Oenococcus oeni)Viniflora CH35株(Christian Hansen社製)(以下、Viniflora CH35と称する)を添加した(菌体濃度:赤マスト1mLあたり1×106cells)。
試料5は、乳酸菌として、オエノコッカス オエニ(Oenococcus oeni)Lalvin MBR31株(Lallemand社製)(以下、Lalvin MBR31と称する)を添加した(菌体濃度:赤マスト1mLあたり1×106cells)。
尚、上記試料3〜5の乳酸菌(ラクトバシラス オエノス(Lactobacillus oenos)、Viniflora CH35、およびLalvin MBR31)は、いずれもワインマロラティック発酵用として用いられているホモ型の市販品(乾燥乳酸菌)であり、いずれも定法によって復水して添加した。
(Example 2) Examination of addition amount and type of lactic acid bacteria Samples 2 to 5 in which the addition amount and type of lactic acid bacteria were different from the above sample 1 were prepared (in addition, other conditions (assimilation components, other microorganisms to be added, etc.)) Is the same as Sample 1 above).
In sample 2, Lactobacillus plantarum (manufactured by Christian Hansen) was added as a lactic acid bacterium (cell density: 1 × 10 8 cells per mL of red mast (100 times the amount of sample 1)).
In sample 3, Lactobacillus oenos (manufactured by Christian Hansen) was added as a lactic acid bacterium (cell density: 1 × 10 6 cells per mL of red mast).
Sample 4 was supplemented with Oenococcus oeni Viniflora CH35 strain (manufactured by Christian Hansen) (hereinafter referred to as Viniflora CH35) as a lactic acid bacterium (cell concentration: 1 × 10 6 cells per mL of red mast).
Sample 5 was supplemented with Oenococcus oeni Lavin MBR31 strain (manufactured by Lallemand) (hereinafter referred to as Lavin MBR31) as a lactic acid bacterium (cell density: 1 × 10 6 cells per mL of red mast).
Note that the lactic acid bacteria (Lactobacillus enoos, Viniflora CH35, and Lavin MBR31) of the samples 3 to 5 are all commercially available homozygous products (dried lactic acid bacteria) used for wine malolactic fermentation. All were condensed and added by a conventional method.

上記試料2〜5について、上記実施例1と同様に、300gのコーヒー生豆(ブラジル産サントスNo.2)をそれぞれ添加し、23℃で72時間静置し発酵させ、上記実施例1の評価方法に準じて、各発酵液中の酢酸濃度を測定した。次いで、各発酵液からコーヒー生豆を取り出し、上記実施例1と同様に焙煎処理を行い、コーヒー焙煎豆を得た。得られたコーヒー焙煎豆を用いてコーヒー抽出液を調製し、その香味の評価を行った。   About the said samples 2-5, similarly to the said Example 1, 300g green coffee beans (Brazil Santos No. 2) are added, respectively, it is left still at 23 degreeC for 72 hours, is fermented, Evaluation of the said Example 1 According to the method, the acetic acid concentration in each fermentation broth was measured. Next, green coffee beans were taken out from each fermentation broth and roasted in the same manner as in Example 1 to obtain roasted coffee beans. A coffee extract was prepared using the obtained roasted coffee beans, and the flavor was evaluated.

評価結果を、試料1の結果と共に表4に示す。酢酸濃度は乳酸菌の添加量や種類によらず、実施例1の比較例1に比べていずれも低く抑えられた。コーヒー抽出液の香味は、いずれも良い評価であった。また、乳酸菌の種類によって、種類の異なる香りが付与されていた。このように、各種ホモ型乳酸菌を用いることで、香りの調整を行うことができることが判った。   The evaluation results are shown in Table 4 together with the results of Sample 1. The acetic acid concentration was kept low compared to Comparative Example 1 of Example 1 regardless of the amount and type of lactic acid bacteria added. The flavor of the coffee extract was a good evaluation. Moreover, the fragrance from which a kind differs was provided with the kind of lactic acid bacteria. Thus, it was found that the scent can be adjusted by using various homo-type lactic acid bacteria.

Figure 2007000140
Figure 2007000140

(実施例3) コーヒー果実を用いた例
資化成分としてコーヒー果実を用いて、乳酸菌の添加の影響を検討した。
コーヒー果実(沖縄県産)1000gを5000mL容三角フラスコにとり、1000mLの水(発酵液)を添加した。これに微生物として、SAM2421を添加し(菌体濃度:発酵液1mLあたり1×106cells)、さらに乳酸菌として、ワインマロラティック発酵用として用いられているホモ型の市販の乾燥乳酸菌ラクトバシラス プランタラム(Lactobacillus plantarum)(Christian Hansen社製)を定法によって復水して添加して(菌体濃度:発酵液1mLあたり1×106cells)、試料6を調製した。一方、乳酸菌(ラクトバシラス プランタラム(Lactobacillus plantarum))を添加しないこと以外は試料6と同様の方法で調製したものを比較例2(コントロール)とした。
上記試料6及び比較例2について、23℃で72時間静置して発酵させた(発酵工程)。72時間後の発酵液を観察した結果、試料6では、乳酸菌ラクトバシラス プランタラム(Lactobacillus plantarum)及びSAM2421以外の菌の繁殖は認められず、また、発酵液に良好な香味を呈した。
一方、比較例2では、発酵の終盤で、雑菌と思われる微生物の繁殖が認められ、良好な醸造香のほかに、若干の酸臭が認められた。
(Example 3) Example using coffee fruit The effect of addition of lactic acid bacteria was examined using coffee fruit as an assimilation component.
1000 g of coffee fruit (produced in Okinawa Prefecture) was placed in a 5000 mL Erlenmeyer flask, and 1000 mL of water (fermented liquid) was added. SAM2421 is added as a microorganism to this (bacterial cell concentration: 1 × 10 6 cells per 1 mL of fermentation broth), and further, as a lactic acid bacterium, a homo-type commercially available dry lactic acid bacterium Lactobacillus plantarum used for wine malolactic fermentation (Lactobacillus plantarum) (manufactured by Christian Hansen) was condensed and added by a conventional method (cell concentration: 1 × 10 6 cells per 1 mL of fermentation broth) to prepare sample 6. On the other hand, Comparative Example 2 (Control) was prepared by the same method as Sample 6 except that lactic acid bacteria (Lactobacillus plantarum) were not added.
About the said sample 6 and the comparative example 2, it left and fermented at 23 degreeC for 72 hours (fermentation process). As a result of observing the fermentation broth after 72 hours, sample 6 showed no growth of bacteria other than the lactic acid bacteria Lactobacillus plantarum (Lactobacillus plantarum) and SAM2421, and exhibited a good flavor in the fermentation broth.
On the other hand, in Comparative Example 2, the propagation of microorganisms considered to be miscellaneous bacteria was observed at the end of fermentation, and a slight acid odor was observed in addition to a good brewing aroma.

次に、試料6及び比較例2の各発酵液の上澄み液をサンプリングして成分分析を行った。コーヒー豆の品質に悪影響を与える代表的な雑菌として酢酸産生菌があることから、上澄み液中の酢酸濃度を液体クロマトグラフィーで分析して酢酸産生菌の増殖の有無を判断した(即ち、酢酸産生菌が増殖すると、酢酸産生量が増加して、酢酸濃度が高くなるとものと判断する)。
液体クロマトグラフィー分析の装置は、島津製作所のHPLC一式を用いた。カラムとしてはShim−pack SCR−102Hを用い、電気伝導度検出器 CDD−6Aで検出した。カラムオーブンの温度は40℃とし、p−トルエンスルホン酸を含むTrisバッファーで反応と溶出を行った。絶対検量線で定量した。
Next, the supernatant of each fermentation broth of Sample 6 and Comparative Example 2 was sampled for component analysis. Since acetic acid producing bacteria are representative bacteria that adversely affect the quality of coffee beans, the acetic acid concentration in the supernatant was analyzed by liquid chromatography to determine whether the acetic acid producing bacteria had grown (ie, acetic acid production). If the bacteria grow, the acetic acid production increases and the acetic acid concentration increases.)
As an apparatus for liquid chromatography analysis, a Shimadzu HPLC set was used. As a column, Shim-pack SCR-102H was used and detected by an electric conductivity detector CDD-6A. The temperature of the column oven was 40 ° C., and the reaction and elution were performed with a Tris buffer containing p-toluenesulfonic acid. Quantified with an absolute calibration curve.

液体クロマトグラフィーの結果を表5に示す。乳酸菌を添加した試料6では、比較例2よりも酢酸の濃度は低かった。すなわち、発酵液に乳酸菌を添加することによって、雑菌の繁殖を抑え、意図的に添加した微生物の発酵を促進させることがわかった。   The results of liquid chromatography are shown in Table 5. In Sample 6 to which lactic acid bacteria were added, the concentration of acetic acid was lower than that in Comparative Example 2. That is, it was found that by adding lactic acid bacteria to the fermentation broth, the propagation of miscellaneous bacteria was suppressed and the fermentation of intentionally added microorganisms was promoted.

Figure 2007000140
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次に、コーヒー焙煎豆の評価を行った。試料6及び比較例2について、発酵後のコーヒー果実を発酵液から取り出し、水切りしたのち、55℃の乾燥器で48時間乾燥させた後、パルピングマシーンを用いて果肉や果皮を取り除き、コーヒー生豆約250gを得た。得られたコーヒー生豆のうち100gを家庭用全自動珈琲豆焙煎機(CRPA−100 トータス株式会社)で深煎りボタン操作により焙煎した。焙煎時間は約25分程度であった。   Next, the roasted coffee beans were evaluated. For Sample 6 and Comparative Example 2, the fermented coffee fruit was taken out of the fermented liquid, drained, dried in a dryer at 55 ° C. for 48 hours, and then the pulp and skin were removed using a pulping machine, About 250 g of beans were obtained. Of the obtained green coffee beans, 100 g was roasted by a deep roast button operation using a fully automatic coffee beans roaster (CRPA-100 Tortoise Co., Ltd.) for home use. The roasting time was about 25 minutes.

次いで、コーヒー官能専門のパネラー5名によって、コーヒー焙煎豆の官能評価を行った。試料6及び比較例2の各コーヒー焙煎豆30gを粉砕せずにそのままの形状で専用の官能グラスに入れ、ガラスの蓋をした。官能時に蓋をずらし、エステリー香、酢酸臭を評価した。弱い(1点)、やや弱い(2点)、中程度(3点)、やや強い(4点)、強い(5点)の5段階で、0.5点きざみで評価した。5名の評価点の平均値で表した。結果を表6に示す。試料6のコーヒー焙煎豆は、比較例2のコーヒー焙煎豆に比べて、良好な香りを有していた。   Next, sensory evaluation of roasted coffee beans was performed by five panelists specializing in sensory coffee. 30 g of roasted coffee beans of Sample 6 and Comparative Example 2 were put into a dedicated functional glass as they were without being crushed, and the glass was covered. The lid was moved during sensuality to evaluate esthetic odor and acetic acid odor. The evaluation was made in 0.5 points in steps of weak (1 point), slightly weak (2 points), moderate (3 points), slightly strong (4 points), and strong (5 points). Expressed as the average of the five evaluation points. The results are shown in Table 6. The roasted coffee beans of Sample 6 had a better scent compared to the roasted coffee beans of Comparative Example 2.

Figure 2007000140
Figure 2007000140

上記試料6及び比較例2のコーヒー焙煎豆を用いてコーヒー抽出液を調製した。各コーヒー焙煎豆を細挽きにし、粉砕豆12gに対して熱湯を100g加えて攪拌した。カップテストの定法に従って、浮き上がったコーヒーを取り除き、上澄み液の官能評価を行った。コーヒー専門パネラー5名により実施した。評価項目は、香り(エステリー香、醸造香)及び味(ボディ感、まろやかさ、雑味)とした。弱い(1点)、やや弱い(2点)、中程度(3点)、やや強い(4点)、強い(5点)の5段階で、0.5点きざみで評価した。5名の評価点の平均値で表した。結果を表7に示す。試料6のコーヒー抽出液は、比較例2のコーヒー抽出液に比べて、香り、味ともに良好なものであった。   A coffee extract was prepared using the sample 6 and the roasted coffee beans of Comparative Example 2. Each coffee roasted bean was finely ground, and 100 g of hot water was added to 12 g of the ground beans and stirred. According to the usual method of cup test, the floated coffee was removed and the supernatant liquid was subjected to sensory evaluation. Conducted by 5 coffee panelists. Evaluation items were fragrance (esthetic fragrance, brewing fragrance) and taste (body feeling, mellowness, miscellaneous taste). The evaluation was made in 0.5 points in steps of weak (1 point), slightly weak (2 points), moderate (3 points), slightly strong (4 points), and strong (5 points). Expressed as the average of the five evaluation points. The results are shown in Table 7. Compared to the coffee extract of Comparative Example 2, the coffee extract of Sample 6 was better in both aroma and taste.

Figure 2007000140
Figure 2007000140

(実施例4)ワイン酵母の例
資化成分としてコーヒー果実を用いて、乳酸菌の添加の影響を検討した。
コーヒー果実(メキシコ産冷凍果実を解凍したもの)1000gを5000mL容三角フラスコにとり、1000mLの水(発酵液)を添加した。これに微生物として、市販の乾燥ワイン酵母であるサッカロマイッセス セレビシアエ(Saccharomyces cerevisiae)Lalvin L2323株(セティカンパニー社製)0.1gを復水して添加した。さらに乳酸菌として、ワインマロラティック発酵用として用いられているホモ型の市販の乾燥乳酸菌ラクトバシラス プランタラム(Lactobacillus plantarum)(Christian Hansen社製)を定法によって復水して添加して(菌体濃度:発酵液1mLあたり1×105cells)、試料7を調製した。一方、乳酸菌(ラクトバシラス プランタラム(Lactobacillus plantarum))を添加しないこと以外は試料7と同様の方法で調製したものを比較例3(コントロール)とした。
上記試料7及び比較例3について、23℃で72時間発酵させた(発酵工程)。72時間後の発酵液を観察した結果、試料7では、乳酸菌ラクトバシラス プランタラム(Lactobacillus plantarum)及びワイン酵母(Lalvin L2323株)以外の菌の繁殖は認められず、また、発酵液に良好な香味を呈した。
一方、比較例3では、発酵の終盤で、雑菌と思われる微生物の繁殖が認められ、良好な醸造香のほかに、若干の酸臭が認められた。
(Example 4) Example of wine yeast The effect of the addition of lactic acid bacteria was examined using coffee fruit as an assimilation component.
1000 g of coffee fruit (thawed frozen Mexican fruit) was placed in a 5000 mL Erlenmeyer flask, and 1000 mL of water (fermented liquid) was added. To this, 0.1 g of Saccharomyces cerevisiae (Saccharomyces cerevisiae) Lavin L2323 strain (manufactured by Setty Company) was added after condensing as a microorganism. Furthermore, as a lactic acid bacterium, homozygous commercially available dried lactic acid bacterium Lactobacillus plantarum (manufactured by Christian Hansen), which is used for wine malolactic fermentation, is added after condensing by a conventional method (cell density: Sample 1 was prepared by 1 × 10 5 cells per mL of fermentation broth). On the other hand, Comparative Example 3 (Control) was prepared by the same method as Sample 7 except that lactic acid bacteria (Lactobacillus plantarum) were not added.
About the said sample 7 and the comparative example 3, it was made to ferment at 23 degreeC for 72 hours (fermentation process). As a result of observing the fermentation broth after 72 hours, sample 7 showed no growth of bacteria other than the lactic acid bacteria Lactobacillus plantarum (Lactobacillus plantarum) and wine yeast (Lavin L2323 strain), and the fermentation liquid had a good flavor. Presented.
On the other hand, in Comparative Example 3, the propagation of microorganisms considered to be miscellaneous bacteria was observed at the end of fermentation, and a slight acid odor was observed in addition to a good brewing aroma.

次に、試料7及び比較例3の各発酵液の上澄み液をサンプリングして成分分析を行った。コーヒー豆の品質に悪影響を与える代表的な雑菌として酢酸産生菌があることから、上澄み液中の酢酸濃度を液体クロマトグラフィーで分析した酢酸産生菌の増殖の有無を判断した(即ち、酢酸産生菌が増殖すると、酢酸産生量が増加して、酢酸濃度が高くなるとものと判断する)。
液体クロマトグラフィー分析の装置は、島津製作所のHPLC一式を用いた。カラムとしてはShim−pack SCR−102Hを用い、電気伝導度検出器 CDD−6Aで検出した。カラムオーブンの温度は40℃とし、p−トルエンスルホン酸を含むTrisバッファーで反応と溶出を行った。絶対検量線で定量した。
液体クロマトグラフィーの結果を表8に示す。乳酸菌を添加した試料7では、比較例3よりも酢酸の濃度は低かった。すなわち、発酵液に乳酸菌を添加することによって、雑菌の繁殖を抑え、意図的に添加した微生物の発酵を促進させることがわかった。
Next, the supernatant of each fermentation broth of Sample 7 and Comparative Example 3 was sampled for component analysis. Since acetic acid-producing bacteria are representative bacteria that adversely affect the quality of coffee beans, the presence or absence of growth of acetic acid-producing bacteria was determined by analyzing the acetic acid concentration in the supernatant by liquid chromatography (ie, acetic acid-producing bacteria) It is judged that the amount of acetic acid produced increases and the concentration of acetic acid increases as the growth of the
As an apparatus for liquid chromatography analysis, a Shimadzu HPLC set was used. As a column, Shim-pack SCR-102H was used and detected by an electric conductivity detector CDD-6A. The temperature of the column oven was 40 ° C., and the reaction and elution were performed with a Tris buffer containing p-toluenesulfonic acid. Quantified with an absolute calibration curve.
The results of liquid chromatography are shown in Table 8. In Sample 7 to which lactic acid bacteria were added, the concentration of acetic acid was lower than that in Comparative Example 3. That is, it was found that by adding lactic acid bacteria to the fermentation broth, the propagation of miscellaneous bacteria was suppressed and the fermentation of intentionally added microorganisms was promoted.

Figure 2007000140
Figure 2007000140

次に、コーヒー焙煎豆の評価を行った。試料7及び比較例3について、発酵後のコーヒー果実を発酵液から取り出し、水切りしたのち、55℃の乾燥器で48時間乾燥させた後、パルピングマシーンを用いて果肉や果皮を取り除き、コーヒー生豆約250gを得た。得られたコーヒー生豆のうち100gを家庭用全自動珈琲豆焙煎機(CRPA−100 トータス株式会社)で深煎りボタン操作により焙煎した。焙煎時間は約25分程度であった。
次いで、コーヒー官能専門のパネラー5名によって、コーヒー焙煎豆の官能評価を行った。試料7及び比較例3の各コーヒー焙煎豆30gを粉砕せずにそのままの形状で専用の官能グラスに入れ、ガラスの蓋をした。官能時に蓋をずらし、エステリー香、酢酸臭を評価した。弱い(1点)、やや弱い(2点)、中程度(3点)、やや強い(4点)、強い(5点)の5段階で、0.5点きざみで評価した。5名の評価点の平均値で表した。結果を表9に示す。試料7の焙煎豆は比較例3に比べて、良好な香りであった。
Next, the roasted coffee beans were evaluated. For Sample 7 and Comparative Example 3, the fermented coffee fruit was taken out from the fermented liquid, drained, dried in a dryer at 55 ° C. for 48 hours, and then the pulp and skin were removed using a pulping machine, About 250 g of beans were obtained. Of the obtained green coffee beans, 100 g was roasted by a deep roast button operation using a fully automatic coffee beans roaster (CRPA-100 Tortoise Co., Ltd.) for home use. The roasting time was about 25 minutes.
Next, sensory evaluation of roasted coffee beans was performed by five panelists specializing in sensory coffee. 30 g of roasted coffee beans of Sample 7 and Comparative Example 3 were put into a special functional glass as they were without being crushed, and the glass was covered. The lid was moved during sensuality to evaluate esthetic odor and acetic acid odor. The evaluation was made in 0.5 points in steps of weak (1 point), slightly weak (2 points), moderate (3 points), slightly strong (4 points), and strong (5 points). Expressed as the average of the five evaluation points. The results are shown in Table 9. The roasted beans of Sample 7 had a better scent as compared with Comparative Example 3.

Figure 2007000140
Figure 2007000140

上記試料7及び比較例3のコーヒー焙煎豆を用いてコーヒー抽出液を調製した。各コーヒー焙煎豆を細挽きにし、粉砕豆12gに対して熱湯を100g加えて攪拌した。カップテストの定法に従って、浮き上がったコーヒーを取り除き、上澄み液の官能評価を行った。コーヒー専門パネラー5名により実施した。評価項目は、香り(エステリー香、醸造香)及び味(ボディ感、酸味)とした。弱い(1点)、やや弱い(2点)、中程度(3点)、やや強い(4点)、強い(5点)の5段階で、0.5点きざみで評価した。5名の評価点の平均値で表した。結果を表10に示す。試料7のコーヒー抽出液は、比較例3のコーヒー抽出液に比べて、香り、味ともに良好なものであった。   A coffee extract was prepared using the sample 7 and the roasted coffee beans of Comparative Example 3. Each coffee roasted bean was finely ground, and 100 g of hot water was added to 12 g of the ground beans and stirred. According to the usual method of cup test, the floated coffee was removed and the supernatant liquid was subjected to sensory evaluation. Conducted by 5 coffee panelists. The evaluation items were fragrance (esthetic fragrance, brewed fragrance) and taste (body feeling, acidity). The evaluation was made in 0.5 points in steps of weak (1 point), slightly weak (2 points), moderate (3 points), slightly strong (4 points), and strong (5 points). Expressed as the average of the five evaluation points. The results are shown in Table 10. Compared to the coffee extract of Comparative Example 3, the coffee extract of Sample 7 was better in both aroma and taste.

Figure 2007000140
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Claims (12)

資化成分と微生物との接触に基づく発酵処理を行うと共に、その発酵処理により生じる発酵成分をコーヒー生豆に付与させる発酵工程を包含するコーヒー生豆の処理方法であって、
前記発酵工程において、前記微生物として、少なくとも乳酸菌を含む2種類以上の微生物を共存させて発酵処理するコーヒー生豆の処理方法。
A method for treating green coffee beans that includes a fermentation process in which fermented components produced by the fermentation process are imparted to green coffee beans while performing a fermentation process based on contact between an assimilation component and a microorganism,
A method for treating green coffee beans, wherein in the fermentation step, at least two types of microorganisms including at least lactic acid bacteria are present as the microorganisms in a fermentation process.
前記コーヒー生豆が、コーヒー果実から単離された状態、又はコーヒー果実内に存在する状態の少なくとも何れか一方にある請求項1に記載のコーヒー生豆の処理方法。   The method for processing green coffee beans according to claim 1, wherein the green coffee beans are in at least one of a state isolated from coffee fruits and a state existing in coffee fruits. 前記乳酸菌が、ホモ型乳酸菌である請求項1又は2のいずれか1項に記載のコーヒー生豆の処理方法。   The method for treating green coffee beans according to claim 1, wherein the lactic acid bacteria are homo-type lactic acid bacteria. 前記乳酸菌と共存させる微生物が、酵母又は不完全菌類である請求項1〜3のいずれか1項に記載のコーヒー生豆の処理方法。   The method for treating green coffee beans according to any one of claims 1 to 3, wherein the microorganism coexisting with the lactic acid bacteria is yeast or incomplete fungi. 前記酵母がワイン発酵用酵母である請求項4に記載のコーヒー生豆の処理方法。   The method for treating green coffee beans according to claim 4, wherein the yeast is a yeast for wine fermentation. 前記不完全菌類がゲオトリクム(Geotrichum)属に属する不完全菌類である請求項4に記載のコーヒー生豆の処理方法。   The method for treating green coffee beans according to claim 4, wherein the incomplete fungus is an incomplete fungus belonging to the genus Geotrichum. 前記ゲオトリクム(Geotrichum)属に属する不完全菌類が、ゲオトリクム スピーシーズ(Geotrichum sp.)SAM2421(国際寄託番号FERM BP−10300)もしくはその変異体、又はそれらの形質転換体である請求項6に記載のコーヒー生豆の処理方法。   The coffee according to claim 6, wherein the incomplete fungus belonging to the genus Geotrichum is Geotrichum sp. SAM2421, international deposit number FERM BP-10300, or a variant thereof, or a transformant thereof. Raw beans processing method. 前記資化成分が、果汁又はコーヒー果肉である請求項1〜7のいずれか1に記載のコーヒー生豆の処理方法。   The method for treating green coffee beans according to any one of claims 1 to 7, wherein the assimilation component is fruit juice or coffee pulp. 発酵液1mL中に存在する前記乳酸菌数が105cells以上である請求項1〜8のいずれか1項に記載のコーヒー生豆の処理方法。 The method for treating green coffee beans according to any one of claims 1 to 8, wherein the number of lactic acid bacteria present in 1 mL of a fermentation broth is 10 5 cells or more. 請求項1〜9のいずれか1項に記載される処理方法により得られたコーヒー生豆。   Green coffee beans obtained by the processing method according to any one of claims 1 to 9. 請求項10に記載されるコーヒー生豆を焙煎処理したコーヒー焙煎豆。   Roasted coffee beans obtained by roasting green coffee beans according to claim 10. 請求項11に記載されるコーヒー焙煎豆を原料として用いて得られたコーヒー飲料。   A coffee beverage obtained using the roasted coffee beans according to claim 11 as a raw material.
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