JP2006241119A - Food composition containing carbohydrate decomposition enzyme inhibitory substance derived from rosa rugosa flower and method for producing the food composition - Google Patents

Food composition containing carbohydrate decomposition enzyme inhibitory substance derived from rosa rugosa flower and method for producing the food composition Download PDF

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Yuji Aoki
裕二 青木
Taiji Matsukawa
泰治 松川
Takeki Matsui
雄毅 松居
Yasumasa Yamada
泰正 山田
Ichiro Yamada
一郎 山田
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Uha Mikakuto Co Ltd
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Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a food composition as food material considered as affording the correction of hyperglycemia after meal through paying attention to highly safe food to prevent diabetes in view of the fact that as for diabetes involving complication progression and difficult to entirely cure, prevention should be considered as top priority rather than treatment. <P>SOLUTION: The food composition contains an inhibitory substance for α-glucosidase and α-amylase obtained by extraction of Rosa rugosa flowers with water or an aqueous solution. This food composition is effective for preventing diabetes. The above inhibitory substance is produced by extraction of Rosa rugosa flowers with water or an aqueous solution. <P>COPYRIGHT: (C)2006,JPO&NCIPI

Description

本発明はハマナス(Rosa rugosa)の花から抽出された糖質分解酵素阻害物質を含有してなる食品組成物及びその製造方法に関する。   The present invention relates to a food composition containing a carbohydrase inhibitor extracted from a flower of Hermanus (Rosa rugosa) and a method for producing the same.

近年、全世界において糖尿病が爆発的に増加しているが、糖尿病では高血糖が続くことによって血管が徐々に障害を受け、さまざまな臓器に異常が生じる。糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、糖尿病性神経症が三大合併症として以前から知られているが、近年では動脈硬化症発症のリスクが高くなることも知られている。また、高血糖そのものによる糖尿病性昏睡(ケトアシドーシス、高浸透圧性昏睡、乳酸アシドーシス)もあり、死に至ることもある。   In recent years, diabetes has increased explosively around the world. In diabetes, blood vessels are gradually damaged by hyperglycemia and abnormalities occur in various organs. Diabetic nephropathy, diabetic retinopathy, and diabetic neuropathy have been known as three major complications for some time, but in recent years it is also known that the risk of developing arteriosclerosis is increased. In addition, there is diabetic coma (ketoacidosis, hyperosmotic coma, lactic acidosis) due to hyperglycemia itself, which may lead to death.

糖尿病には二つのグループが存在し、I型糖尿病とII型糖尿病に分類される。   There are two groups of diabetes, classified as type I diabetes and type II diabetes.

I型糖尿病は「膵β細胞の破壊によってインスリンの欠乏が生じて起こる糖尿病」と定義されている(例えば、非特許文献1、2、3など参照)。その成因としてはヘルパーT細胞の異常による「自己免疫性」と原因不明の「特発性」の二つが存在し、幼児期に発症が多いということが特徴である。   Type I diabetes is defined as “diabetes caused by insulin deficiency due to destruction of pancreatic β cells” (see Non-Patent Documents 1, 2, 3, etc.). There are two possible causes of this, namely "autoimmunity" due to helper T cell abnormalities and "idiopathic" of unknown cause, and it is characterized by many occurrences in early childhood.

一方、II型糖尿病はインスリン非依存型糖尿病といわれていたように、インスリンの絶対的な欠乏は無いが、β細胞の機能異常による「インスリン分泌能低下」と肝、筋、脂肪組織などの標的臓器における「インスリン感受性低下」が併発することによって発症すると考えられている。   On the other hand, type II diabetes does not have an absolute deficiency of insulin, as was said to be non-insulin-dependent diabetes, but it is a target of liver, muscle, adipose tissue, etc. It is thought to develop as a result of the concomitant “decreased insulin sensitivity” in the organ.

昨今激増している糖尿病はII型に由来するものであり、糖尿病の90〜95%を占めていると考えられている。II型糖尿病は「生活習慣病」といわれているように、ストレス、肥満、運動不足による基礎代謝能低下の上での高カロリー食摂取など、現代型社会生活によって引き起こされている。糖尿病による合併症は慢性的な高血糖が原因であり、その後の人生に破壊的な影響をもたらすことを考えると、食生活や運動不足の是正が治療及び予防に必須と考えられる。   Diabetes mellitus, which has been increasing rapidly recently, is derived from type II, and is considered to account for 90 to 95% of diabetes. Type II diabetes is caused by modern social life such as stress, obesity, intake of high-calorie foods due to a decline in basic metabolic capacity due to lack of exercise, and so on. Complications due to diabetes are caused by chronic hyperglycemia, and it is considered essential for treatment and prevention to correct dietary deficits and lack of exercise, given that it has a devastating effect on life later.

血糖のコントロールはインスリンによって行われ、空腹時の基礎分泌と食事後の血糖上昇に対応する即時追加分泌により一定のレベルに保たれる。II型糖尿病において、基礎分泌が不全になることは少ない。しかし、追加分泌が十分になされないため、血糖値が正常になるまでに次の食事の血糖上昇が起こり、常に高値となる。さらに感受性低下も助長し、慢性的な高血糖に至る。高脂血症と共に高血糖は膵β細胞やインスリン標的器官に毒性作用をもち、さらに高血糖を招くといった悪循環に至る。   Blood glucose is controlled by insulin and is kept at a constant level by fasting basal secretion and immediate additional secretion corresponding to postprandial blood glucose rise. In type II diabetes, basal secretion is rarely impaired. However, since the additional secretion is not sufficiently performed, the blood sugar level of the next meal rises until the blood sugar level becomes normal, and always becomes high. It also helps to reduce sensitivity, leading to chronic hyperglycemia. Hyperglycemia together with hyperlipidemia has a toxic effect on pancreatic β cells and insulin target organs, and further leads to a vicious cycle that leads to hyperglycemia.

合併症の予防を主目的とするII型糖尿病の治療は、時にインスリン療法(速攻型、超速攻型)を必要とするが、ほとんどは経口薬療法によるもので、インスリン分泌改善、抵抗性改善及び食後高血糖改善である。   Treatment of type II diabetes, which is primarily aimed at preventing complications, sometimes requires insulin therapy (fast-acting, super-fast-acting), but most is due to oral medication, improving insulin secretion, improving resistance and It is postprandial hyperglycemia improvement.

スルホニルウレア(sulfonylurea)薬は膵β細胞に存在するスルフォニルウレアレセプター(Sulfonylurea Receptor:SUR受容体)タンパク質に結合し、脱分極が生じた結果、電位依存性カルシウムチャネルが開いてインスリン分泌を促進する。1956年にトルブタマイド(tolbutamide)が臨床導入されており、経口薬の中では最も歴史が古い。また、最近では分泌促進作用の強いグリベンクラミド(glibenclamide)も開発されている。副作用としてはインスリン分泌が過剰になったときには低血糖が生じる。また、他の副作用も多数報告されており、肝臓からの酵素流出の上昇、顆粒球減少症、血小板減少症などの造血器障害、消化器症状などがある。また、グリベンクラミドは腎臓の合併症がある場合には原則として禁止されている。   A sulfonylurea drug binds to a sulfonylurea receptor (SUR receptor) protein present in pancreatic β-cells, and as a result of depolarization, voltage-dependent calcium channels are opened to promote insulin secretion. Tolbutamide was clinically introduced in 1956 and has the oldest history of oral medications. Recently, glibenclamide, which has a strong secretion promoting action, has also been developed. As a side effect, hypoglycemia occurs when insulin secretion becomes excessive. Many other side effects have been reported, including increased enzyme efflux from the liver, hematopoietic disorders such as granulocytopenia and thrombocytopenia, and digestive symptoms. In addition, glibenclamide is prohibited in principle when there are renal complications.

スルホニルウレア薬は作用発現時間が遅く、食後高血糖の是正には不十分であった。そこでスルホニルウレア薬のグリベンクラミドを改変することによって、ナテグリニド(nateglinide)、レパグリニド(repaglinide)、ミチグリニド(mitiglinide)などの速攻型インスリン分泌促進薬としてメグリチニド(meglitinide)系薬剤が開発された。現在、日本で用いられているナテグリニドはスルホニルウレア薬同様、受容体に結合後、細胞膜脱分極によって、細胞内カルシウムイオン濃度が上昇し、インスリン分泌を促進する。この薬剤は、SURへの結合が弱く解離が早い上、消化管からの吸収が早く、肝臓で速やかに不活性化されるという特徴をもつ。このように作用時間が早く持続時間が短いため、食後高血糖に有効であり、実際ナテグリニドを用いたII型糖尿病患者に対する臨床試験では食後血糖値のみならず、食後血中インスリン値、糖化ヘモグロビン値、空腹時血糖値に効果を発揮した報告がある(例えば、非特許文献4参照)。食後高血糖は心血管疾病の危険因子として示唆されており(例えば、非特許文献5、6など参照)、合併症の発症抑制及び進展抑制には空腹時血糖だけでなく食後高血糖が重要視されてきている。その意味で、速攻型インスリン分泌促進薬の効果には期待度が高い。しかしながら、副作用としては低血糖や急性肝障害などがあるほか、腎不全患者には適用できないなどの制約がある。   Sulfonylurea drugs have a slow onset of action and are insufficient to correct postprandial hyperglycemia. Thus, meglitinide-based drugs such as nateglinide, repaglinide, and mitiglinide have been developed by modifying the sulfonylurea glibenclamide. Nateglinide currently used in Japan, like sulfonylurea drugs, binds to receptors and then increases intracellular calcium ion concentration and promotes insulin secretion by cell membrane depolarization. This drug is characterized by weak binding to SUR, fast dissociation, fast absorption from the gastrointestinal tract, and rapid inactivation in the liver. In this way, it is effective for postprandial hyperglycemia because of its fast action time and short duration. In clinical trials for type II diabetic patients using nateglinide, not only postprandial blood glucose level, but also postprandial blood insulin level, glycated hemoglobin level There is a report that exerted an effect on fasting blood glucose level (see, for example, Non-Patent Document 4). Postprandial hyperglycemia has been suggested as a risk factor for cardiovascular disease (see, for example, Non-Patent Documents 5 and 6). Postprandial hyperglycemia is important not only for fasting blood glucose but also for suppression of complications. Has been. In that sense, there is high expectation for the effects of haste insulin secretagogues. However, as side effects, there are limitations such as hypoglycemia and acute liver damage, and inability to apply to patients with renal failure.

以上の薬剤はインスリン分泌を誘導するものであり、インスリン感受性低下を補償するものではない。感受性低下改善薬として知られているものがビグアナイド(biguanide)薬とチアゾリジン(thiazolidine)誘導体である。   The above drugs induce insulin secretion and do not compensate for decreased insulin sensitivity. Known as sensitivity-reducing agents are biguanide and thiazolidine derivatives.

ビグアナイド薬は詳細な作用機序は分かっていないが、インスリン感受性の増加が認められている。また、血糖降下作用は肝からのブドウ糖放出抑制と肝糖新生抑制によって主にもたらされる。ビグアナイド薬は1950年後半にフェンホルミン(phenformin)、ブホルミン(buformin)、メトホルミン(metformin)が販売された。しかし、フェンホルミンは1970年代に乳酸アシドーシス発症への関連から、使用が中止になった。そのため、腎障害患者、低酸素血症、代謝性アシドーシスなどの乳酸アシドーシス発症の危険性がある場合には厳禁である。この他の副作用としては、腹痛、下痢、嘔吐などの胃腸障害、肝機能障害、ビタミンB12吸収阻害がある。 Biguanides have no known mechanism of action, but increased insulin sensitivity has been observed. Moreover, the hypoglycemic effect is mainly brought about by suppression of glucose release from the liver and suppression of hepatic gluconeogenesis. Biguanides were marketed in late 1950 in the form of phenformin, buformin, and metformin. However, phenformin was discontinued in the 1970s due to its involvement in the development of lactic acidosis. Therefore, it is strictly prohibited if there is a risk of developing lactic acidosis, such as a patient with renal impairment, hypoxemia, or metabolic acidosis. Other side effects include gastrointestinal disorders such as abdominal pain, diarrhea, and vomiting, liver dysfunction, and vitamin B 12 absorption inhibition.

チアゾリジン誘導体も同様に抵抗性改善のメカニズムは分かっていないが、チアゾリジン誘導体薬剤は筋肉、脂肪組織に作用し、ブドウ糖の取り込みを促進することによって血糖降下作用を示す。副作用としては肝障害、心不全の悪化のほか、現在販売されているチアゾリジン誘導体では報告例は無いものの、最初に販売されたトログリタゾン(troglitazone)で見られた劇症肝炎などがある。   Similarly, the mechanism for improving resistance of thiazolidine derivatives is not known, but thiazolidine derivative drugs act on muscle and adipose tissue, and exhibit glucose lowering action by promoting glucose uptake. Side effects include liver damage and worsening of heart failure, as well as fulminant hepatitis seen in the first troglitazone, although there are no reports of thiazolidine derivatives currently on the market.

これまでに述べてきた薬剤はすべて、II型糖尿病において見られるインスリン分泌不全及び抵抗性改善に作用するものである。軽症の糖尿病患者ではインスリン分泌は緩慢であるが、食後の遅延過大分泌を示すことが多い。そのため、インスリンの分泌時相を食後高血糖にあわせることで、血糖コントロールが可能となる。これには食後高血糖をできるだけ遅延させればよい。食後高血糖は糖質分解酵素(主にα-アミラーゼとα-グルコシダーゼ)が炭水化物をブドウ糖に分解することによってもたらされるため、競合的阻害剤が血糖上昇を遅延させることができる。現在、α-グルコシダーゼ阻害剤としてアカルボース(Acarbose)とボグリボース(Voglibose)が使用されており、II型糖尿病発症が有意に抑制される報告例(例えば、非特許文献7、8など参照)がある。また、この薬剤の長所として、血中インスリン濃度に影響を与えないため、他の血糖降下薬よりも低血糖症への危険性が極めて低いことにある。しかしながら、この薬剤の特徴的な副作用として、放屁増加、腹部膨満感、下痢などがある。また、腸閉塞や肝機能障害も報告されており、使用上の注意は必要である。   All the drugs mentioned so far act on the insulin secretion deficiency and resistance improvement seen in type II diabetes. In mildly diabetic patients, insulin secretion is slow, but often shows delayed hypersecretion after meals. Therefore, blood sugar control becomes possible by adjusting the secretion phase of insulin to postprandial hyperglycemia. This can be achieved by delaying postprandial hyperglycemia as much as possible. Postprandial hyperglycemia is caused by carbohydrases (mainly α-amylase and α-glucosidase) breaking down carbohydrates into glucose, so competitive inhibitors can delay the increase in blood glucose. Currently, Acarbose and Voglibose are used as α-glucosidase inhibitors, and there are reported examples in which the onset of type II diabetes is significantly suppressed (see, for example, Non-Patent Documents 7 and 8). In addition, the merit of this drug is that it does not affect the blood insulin concentration and therefore has a much lower risk of hypoglycemia than other hypoglycemic drugs. However, characteristic side effects of this drug include increased paralysis, abdominal fullness, and diarrhea. Intestinal obstruction and liver dysfunction have also been reported, and caution is required in use.

以上、糖尿病治療に用いられる経口血糖降下薬の作用と副作用について述べてきたが、このほかにインスリン分泌促進薬には肥満度上昇が知られている。肥満はインスリン抵抗性を悪化させるため、II型糖尿病が進展する可能性がある。さらに、肥満は心筋梗塞などの動脈硬化症の危険因子であるため、糖尿病治療をしているにもかかわらず、血管障害へのリスクが向上するといった状況をまねきかねない。   As described above, the action and side effects of oral hypoglycemic drugs used for the treatment of diabetes have been described. In addition to these, insulin secretion promoters are known to have increased obesity. Since obesity worsens insulin resistance, type II diabetes may develop. Furthermore, since obesity is a risk factor for arteriosclerosis such as myocardial infarction, it may lead to a situation in which the risk of vascular injury is increased despite the treatment of diabetes.

総括すると、経口血糖降下薬は時に昏睡状態に陥る低血糖症をはじめ、肝・腎障害、消化器症状といった様々な副作用がある。また、薬剤のほとんどが、臓器障害が認められるときには使用が禁止される。糖尿病は一度発症すると完治することが難しく、インスリン療法も含め対症療法を余儀なくされる。このことは食事の際、常に投薬が義務付けられることになる。それに呼応し、経済的な面においても患者の負担は重い。さらに、今後ますます高齢化社会が進むにつれて、医療費問題は深刻になることが予想されるため、糖尿病をいかにして予防するかが重要である。   In summary, oral hypoglycemic drugs have various side effects such as hypoglycemia that sometimes falls into a coma, liver / kidney disorders, and digestive symptoms. Most drugs are prohibited from use when organ damage is observed. Diabetes is difficult to cure once it develops, requiring symptomatic treatment including insulin therapy. This means that medication is always required during meals. Correspondingly, the burden on the patient is heavy also in the economic aspect. Furthermore, as the aging society continues to advance, the medical cost problem is expected to become serious, so it is important how to prevent diabetes.

II型糖尿病は遺伝因子と環境因子(運動、食事、ストレスなど)によって発症する。しかし、特に環境因子が強く、治療においても適正な運動と食事があって、初めて経口血糖降下薬の意味があるとされている。しかしながら、時間的な制約の上、糖尿病自体にほとんど自覚症状が無いことから、現代人が糖尿病になる前に運動・食事に注意を払うことは難しい。また、薬剤による予防は医師の処方なしで購入できないため不可能である。   Type II diabetes is caused by genetic and environmental factors (exercise, diet, stress, etc.). However, environmental factors are particularly strong, and it is said that oral hypoglycemic drugs are only meaningful when there is proper exercise and diet in treatment. However, due to time constraints, there is almost no subjective symptom in diabetes itself, so it is difficult for modern people to pay attention to exercise and diet before becoming diabetic. Also, drug prevention is not possible because it cannot be purchased without a doctor's prescription.

上述したように、合併症の進展や一度発症すると根治が難しい糖尿病は、治療ではなく予防を第一に考えるべきである。薬剤によるII型糖尿病発症抑制効果が報告されているが(例えば、非特許文献9、10、11など参照)、予防で薬剤を使うことは、数多くの副作用のため不適切であり事実上不可能である。そこで、我々は食品に注目した。食品は生活に欠かすことができないものであり、それゆえに摂取する機会が多い。さらに、食品であるために安全性は高い。つまり予防に際して、食品こそが優れた素材であると考えられる。   As mentioned above, the progression of complications and diabetes that is difficult to cure once onset should be prevented first, not treated. Although it has been reported that type II diabetes is suppressed by drugs (see, for example, Non-Patent Documents 9, 10, and 11), it is inappropriate and practically impossible to use drugs for prevention due to numerous side effects. It is. So we focused on food. Food is an essential part of life and therefore has many opportunities for consumption. Furthermore, since it is a food, safety is high. In other words, food is considered an excellent material for prevention.

食後高血糖改善の手段は、薬剤に見られるように、インスリン分泌促進、インスリン抵抗性改善、糖質分解酵素阻害による消化吸収遅延があるが、予防に関しては糖質分解酵素阻害が最も適切だと思われる。その理由として、総合的に副作用が少ないことが糖質分解酵素阻害剤についていえることにある。経口糖尿病薬剤で最も懸念すべき低血糖症の危険性は、この薬剤では特に低い。また、他の副作用として放屁増加や下痢などが投与初期に見られるが、慢性的ではなく消失する。そしてインスリン分泌促進剤や抵抗性改善薬は対症療法であって、体質改善にはまるで効果はない。しかしながら、糖質分解酵素阻害によって食後高血糖改善が見られれば、人が本来持つインスリン分泌能や感受能につながる可能性が高い。   As seen in drugs, postprandial hyperglycemia can be promoted by insulin secretion, insulin resistance, and delayed digestion / absorption due to inhibition of glycolytic enzymes. Seem. The reason for this is that it can be said that saccharide-degrading enzyme inhibitors have fewer side effects overall. The risk of hypoglycemia that is of most concern with oral diabetes drugs is particularly low with this drug. In addition, as other side effects, increased puerperium and diarrhea are observed at the initial stage of administration, but they disappear rather than chronically. And insulin secretagogues and resistance-improving drugs are symptomatic treatments and have no effect on improving the constitution. However, if improvement in postprandial hyperglycemia is observed by inhibition of saccharide-degrading enzymes, there is a high possibility that it will lead to the ability of humans to secrete insulin and perception.

The expert committee on the diagnosis and classification of diabetes mellitus(1997): Diabetes Care 20,p.1183The expert committee on the diagnosis and classification of diabetes mellitus (1997): Diabetes Care 20, p.1183 Alberti KG, Zimmet PZ for the WHO consultation(1998):Diabet Med 15,p.539Alberti KG, Zimmet PZ for the WHO consultation (1998): Diabet Med 15, p.539 葛谷 健ほか:糖尿病の分類と診断基準に関する委員会報告(1999)、糖尿病42、p.385Ken Katsuraya et al .: Committee report on classification and diagnostic criteria of diabetes (1999), Diabetes 42, p.385 小坂樹徳ほか:1997、薬理と臨床7、p.669Kosaka, J. et al .: 1997, Pharmacology and Clinical 7, p.669 DECODE Study Group:2001,Arch Intern Med 161,p.397-405DECODE Study Group: 2001, Arch Intern Med 161, p.397-405 Tominaga M et al.:1999,Diabetes Care 22,p.920-924Tominaga M et al.:1999,Diabetes Care 22, p.920-924 Chiasson JL et al.:1998,Diabetes Care 21,p.1720-1725Chiasson JL et al .: 1998, Diabetes Care 21, p. 1720-1725 Chiasson JL et al.:2002,Lancet 359,p.2072-2077Chiasson JL et al .: 2002, Lancet 359, p. 2072-2077 Johansen K:1999,Diabetes Care 22,p.33-37Johansen K: 1999, Diabetes Care 22, p.33-37 Chiasson JL et al.:1998,Diabetes Care 21,p.1720-1725Chiasson JL et al .: 1998, Diabetes Care 21, p. 1720-1725 Chiasson JL et al.:2002,Lancet 359,p.2072-2077Chiasson JL et al .: 2002, Lancet 359, p. 2072-2077

合併症の進展や根治が難しい糖尿病は、治療ではなく予防を第一に考えるべきであるが、予防で薬剤を使うことは数多くの副作用のため不適切であり事実上不可能であった。そこで、我々は食品に注目した。食品は生活に欠かすことができないものであり、それ故に摂取する機会が多く、さらに食品であるため、安全性は高い。つまり予防に際して、食品こそが優れた素材であると考えられる。食後高血糖状態を繰り返すことによって、耐糖能異常になり、ひいてはII型糖尿病に進展する。よって、食後高血糖を是正することが、糖尿病の予防に大きな意味を持つので、このような食品素材を提供することこそが糖尿病予防の課題であった。   Diabetes, whose complications are difficult to develop or difficult to cure, should be given priority to prevention rather than treatment, but the use of drugs in prevention has been inappropriate and virtually impossible due to numerous side effects. So we focused on food. Foods are indispensable for daily life, and therefore, there are many opportunities to take them, and since they are foods, they are highly safe. In other words, food is considered an excellent material for prevention. Repeating a postprandial hyperglycemia state leads to abnormal glucose tolerance, which eventually leads to type II diabetes. Therefore, since correcting postprandial hyperglycemia has great significance for the prevention of diabetes, the provision of such food materials was the subject of diabetes prevention.

我々は、鋭意検討を重ねた結果、食用素材を水溶性画分と有機溶媒画分に分け、それぞれについて、in vitroでの系を用いて、α-グルコシダーゼ阻害成分の検索を行った。その結果、メイクイ茶として飲まれてきたハマナス(バラ科、学名:Rosa rugosa)の花の水溶性画分に高い阻害活性があることを見出し、本発明を完成するに至った。   As a result of extensive studies, we divided the edible material into a water-soluble fraction and an organic solvent fraction, and searched for α-glucosidase inhibitory components using an in vitro system. As a result, the present inventors have found that the water-soluble fraction of the flowers of Hermanus (Rosaceae, scientific name: Rosa rugosa) that has been drunk as Mayui tea has high inhibitory activity, and thus completed the present invention.

すなわち、ハマナスの花から水または水溶液により抽出して得られたα-グルコシダーゼ及びα-アミラーゼのいずれか1種または2種の阻害物質を含有してなることを特徴とする食品組成物であって、上記ハマナスの花がメイクイ茶であることが好ましい。   That is, a food composition comprising one or two inhibitors of α-glucosidase and α-amylase obtained by extraction from a flower of Hermanus with water or an aqueous solution. It is preferable that the flower of the genus is a makey tea.

本発明の第二は、ハマナスの花から水または水溶液によって抽出したことを特徴とするα-グルコシダーゼ及びα-アミラーゼのいずれか1種または2種の阻害物質の製造方法である。   The second aspect of the present invention is a method for producing one or two inhibitors of α-glucosidase and α-amylase, which are extracted from flowers of Hermanus with water or an aqueous solution.

本発明の第三は、ハマナスの花から60℃〜100℃の水または水溶液によって5分〜15分間抽出することを特徴とするα-グルコシダーゼ及びα-アミラーゼのいずれか1種または2種の阻害物質の製造方法である。   The third aspect of the present invention is the inhibition of any one or two of α-glucosidase and α-amylase, wherein the flower is extracted from a flower of Hermanus with water or an aqueous solution at 60 to 100 ° C. for 5 to 15 minutes. It is a manufacturing method of a substance.

本発明の第四は、ハマナスの花から水または水溶液によって抽出して得られたα-グルコシダーゼ及びα-アミラーゼのいずれか1種または2種の阻害物質を含有することを特徴とする飲料の製造方法である。   A fourth aspect of the present invention is the production of a beverage characterized in that it contains any one or two inhibitors of α-glucosidase and α-amylase obtained by extraction from flowers of Hermanus with water or an aqueous solution. Is the method.

本発明の第五は、ハマナスの花から水または水溶液によって抽出して得られたα-グルコシダーゼ及びα-アミラーゼのいずれか1種または2種の阻害物質を食品素材に添加することを特徴とする食品組成物の製造方法である。   According to a fifth aspect of the present invention, any one or two inhibitors of α-glucosidase and α-amylase obtained by extraction from a flower of Hermanus with water or an aqueous solution are added to the food material. It is a manufacturing method of a food composition.

上述したように、糖尿病は予防を第一に考えるべきであり、薬剤ではなく食品が格好の素材であると考えられる。本発明のハマナスの花由来の糖質分解酵素阻害物質は安全性が高く、食後高血糖状態の改善に有効である。そして、日常的に食後高血糖改善が果たされれば、二次的な効果としてインスリン分泌能やインスリン抵抗性も改善されていくことになる。   As described above, diabetes should be considered as the first prevention, and food, not drugs, is considered a good material. The saccharide-degrading enzyme inhibitor derived from the flowers of the present invention is highly safe and effective in improving postprandial hyperglycemia. If postprandial hyperglycemia is improved on a daily basis, insulin secretion ability and insulin resistance will be improved as secondary effects.

本発明に至ったハマナスについての報告例には抗炎症作用(たとえば非特許文献12参照)、抗酸化性による脂質酸化抑制作用(例えば、非特許文献13参照)、抗がん作用(例えば、非特許文献14参照)、分化誘導能(例えば、非特許文献15参照)などがあるが、糖質分解酵素阻害効果があるといった報告は今まで無かった。最近、プテロカルプス(Pterocarpus marsupium)、クワ(Morus alba)、クミスクチン(Orthosiphon aristatus)、オピオホゴン ジャポニカス(Opiophogon japonicus)、ハマナス(Rosa rugosa)、ツユクサ(Commelina communis)、キカラスウリ(Trichosanthis kirilowii)及びハナスゲ(Anemarrhena asphodeloides)の抽出物が糖尿病の治療及び予防に有効であるという発明(例えば、特許文献1参照)がある。この発明では糖質分解酵素阻害効果について述べているが、これは抽出物を組み合わせた混合物であり、ハマナスの花からの抽出液によるものではなかった。   Examples of reports on the genus Hermanus that have led to the present invention include anti-inflammatory action (see, for example, Non-patent Document 12), antioxidative lipid oxidation-inhibiting action (for example, see Non-Patent Document 13), and anti-cancer action (for example, non-patent document 12). Patent Document 14) and differentiation-inducing ability (for example, see Non-Patent Document 15) and the like, but there has been no report to date that there is a carbohydrase inhibitory effect. Recently, Pterocarpus (Pterocarpus marsupium), Mulberry (Morus alba), Kumisctin (Orthosiphon aristatus), Opiophogon japonicus, Rosa rugosa, Commelina communis, Trichosan keri (Low) There is an invention (for example, see Patent Document 1) that an extract of asphodeloides) is effective in the treatment and prevention of diabetes. In this invention, the saccharide-degrading enzyme inhibitory effect is described, but this is a mixture of extracts and not an extract from a flower of Hermanus.

現在、食品ではグァバ茶や難消化デキストリンが血糖値降下作用をもっている商品として流通している。しかし、本発明のハマナスの花からの水または水溶液による抽出液は、マルターゼ活性阻害効果及びスクラーゼ活性阻害効果がグァバ茶よりも強かった。従って、本発明のハマナスの花からの水または水溶液による抽出液は同様な作用機序をもつグァバ茶よりも食後高血糖改善効果に有効であることが示唆される。   At present, guava tea and indigestible dextrin are distributed as foods with a blood glucose lowering effect. However, the extract of water or an aqueous solution from the flowers of the present invention of the present invention was stronger in the maltase activity inhibition effect and the sucrase activity inhibition effect than guava tea. Therefore, it is suggested that the extract of water or aqueous solution from the flowers of the present invention is more effective in improving postprandial hyperglycemia than guava tea having the same mechanism of action.

一方、難消化デキストリンによる血糖値上昇抑制効果の詳細は現在も不明である。しかし、難消化デキストリンによってスクロース、マルトース、マルトデキストリン投与後の血糖上昇が抑制されるという報告(例えば、非特許文献16参照)があり、それは二糖類分解酵素特異的輸送体に作用していると考えられている(例えば、非特許文献17参照)。
それ故、本発明のα-グルコシダーゼ及びα-アミラーゼの阻害物質とは、その作用機序が異なり、血糖値降下作用についての有効性を論ずることはできない。しかしながら、難消化デキストリンは一般の方法(例えば、非特許文献18)では収率が低く、温度、反応時間などの製造条件を厳密に管理する必要がある。また、難消化デキストリンは一般にデンプンを高温(100℃〜220℃)で、長時間(3時間〜20時間)分解処理することよって得られる。しかし、この方法によって得られる難消化デキストリンの収率はわずか30%であり、また収率向上のために加熱条件を変更すると60%程度まで増加するが、着色物質や刺激臭も発生するため、精製過程が必要となる。その改良方法として、デンプンを塩酸で加熱処理し、ついでα-アミラーゼ及びグルコアミラーゼによる酵素処理を行うことによって難消化部分の収率向上を果たした製造方法がある(例えば、特許文献2、3など参照)。しかし、この製造方法は酸条件下では酵素が働かないため、中和作用を必要とする。そして、酵素反応後は活性炭による脱色、濾過、イオン交換樹脂による脱塩、脱色を行い、さらに消化性のグルコースなどを除去するために、イオン交換クロマトグラフィーによる精製を行う。このように、難消化デキストリンの製造には、数多くの工程が必要で、かつ温度制御管理も考えると、産業レベルでの安定供給や品質保持は非常に難しいといえる。
On the other hand, details of the effect of suppressing the increase in blood glucose level by indigestible dextrin are still unknown. However, there is a report (for example, see Non-Patent Document 16) that an indigestible dextrin suppresses an increase in blood glucose after administration of sucrose, maltose, and maltodextrin, and it acts on a disaccharide-degrading enzyme-specific transporter. It is considered (for example, refer nonpatent literature 17).
Therefore, the action mechanism is different from the inhibitors of α-glucosidase and α-amylase of the present invention, and the effectiveness of the blood glucose lowering effect cannot be discussed. However, indigestible dextrin has a low yield in a general method (for example, Non-Patent Document 18), and it is necessary to strictly control production conditions such as temperature and reaction time. Indigestible dextrin is generally obtained by subjecting starch to a high temperature (100 ° C. to 220 ° C.) for a long time (3 hours to 20 hours). However, the yield of indigestible dextrin obtained by this method is only 30%, and when heating conditions are changed to improve the yield, it increases to about 60%, but since colored substances and irritating odors are also generated, A purification process is required. As an improvement method thereof, there is a production method in which the yield of an indigestible portion is improved by heat-treating starch with hydrochloric acid and then performing enzyme treatment with α-amylase and glucoamylase (for example, Patent Documents 2 and 3) reference). However, this production method requires a neutralizing action because the enzyme does not work under acid conditions. After the enzyme reaction, decolorization with activated carbon, filtration, desalting and decolorization with an ion exchange resin are performed, and purification by ion exchange chromatography is performed to remove digestible glucose and the like. As described above, the production of indigestible dextrin requires many steps, and considering temperature control management, it can be said that stable supply and quality maintenance at an industrial level are very difficult.

一方、本発明は、ハマナスの花から水または水溶液により抽出して得られたα-グルコシダーゼ及びα-アミラーゼのいずれか1種または2種の阻害物質は、水または水溶液で抽出するという、いうなれば一段階工程の製造方法である。このことは産業レベルに発展させても、社会的に求められる安定供給や品質保証に応じることが可能である。   On the other hand, according to the present invention, one or two inhibitors of α-glucosidase and α-amylase obtained by extraction from a flower of Hermanus with water or an aqueous solution are extracted with water or an aqueous solution. It is a manufacturing method of a step process. Even if this is developed to the industrial level, it is possible to meet the socially required stable supply and quality assurance.

特表2005-500263号公報JP 2005-500263 Publication 特開平5-178902号公報Japanese Patent Laid-Open No. 5-178902 特開平5-148301号公報Japanese Patent Laid-Open No. 5-148301 Hyu-Ju Jung et al.:2005,Biol.Pharm.Bull 28(1),p.101-104Hyu-Ju Jung et al .: 2005, Biol. Pharm. Bull 28 (1), p. 101-104 Cho EJ et al:2003,Am J Chin Med 31(6),p.907-917Cho EJ et al: 2003, Am J Chin Med 31 (6), p.907-917 Yoshizawa Y et al.:2000,Anticancer Res.Nov-Dec 20(6B),p.4285-4289Yoshizawa Y et al.:2000, Anticancer Res. Nov-Dec 20 (6B), p.4285-4289 Yoshizawa Y et al.:2000, J Agric Food Chem Aug 48(8),p.3177-3182Yoshizawa Y et al.:2000, J Agric Food Chem Aug 48 (8), p.3177-3182 Wakabayashi et al.:1995, J Endocrinol. Mar 144(3),p.533-538Wakabayashi et al .: 1995, J Endocrinol. Mar 144 (3), p.533-538 Wakabayashi S.:1992, Nippon Naibunpi Gakkai Zasshi Jun 20(68),p.623-635Wakabayashi S.:1992, Nippon Naibunpi Gakkai Zasshi Jun 20 (68), p.623-635 Tomasik,K.&Wiejak,P.:1990, Advance in Carbohydrate Chemistry (47),p.279-343Tomasik, K. & Wiejak, P .: 1990, Advance in Carbohydrate Chemistry (47), p.279-343

本発明にいうハマナスとは、バラ科植物であり、学名をRosa rugosa という。また、花とは、被子植物において萼片の集まった萼、花弁の集まった花冠、おしべとめしべがついている花托であるが、本発明にいう花には、上記のものに花柄を含んでいても差し支えなく、乾燥状態または未乾燥状態とを問わない。従って、中国におけるメイクイ茶(メイグイファー)と呼ばれるものは、ハマナスの花を乾燥したものであるので本発明のハマナスの花に含まれる。   The Hermanus referred to in the present invention is a Rosaceae plant, and its scientific name is called Rosa rugosa. In addition, a flower is a bud with a collection of sepals, a flower crown with a collection of petals, a flower bud with a stamen and a pistil in an angiosperm, but the flower according to the present invention contains a floral pattern in the above. It does not matter whether it is in a dry state or an undried state. Therefore, what is called “Maigui” in China is included in the flower of the present invention because it is a dried flower of the flower.

本発明の水または水溶液とは、水道水、蒸留水、イオン交換水または水系緩衝液をいい、これらをハマナスの花に加え、静置もしくは撹拌し、得られた抽出液をハマナスの花と分別するためにガーゼなどで濾過することによってα−グルコシダーゼ及びα−アミラーゼのいずれか1種または2種の阻害物質を得ることができる。抽出条件としては、水または水溶液の温度が60℃〜100℃、抽出時間が5分〜15分が抽出効率が高く好ましい。また、ハマナスの花はミキサーなどで粉砕したほうが該阻害物質の抽出効率は高くなり、特に好ましい。   The water or aqueous solution of the present invention refers to tap water, distilled water, ion-exchanged water or an aqueous buffer solution, and these are added to the flowers of the genus flowers, left standing or stirred, and the obtained extract is separated from the flowers of the genus flowers. In order to achieve this, one or two inhibitors of α-glucosidase and α-amylase can be obtained by filtering with gauze or the like. As extraction conditions, the temperature of water or an aqueous solution is preferably 60 ° C. to 100 ° C., and the extraction time is preferably 5 minutes to 15 minutes because of high extraction efficiency. In addition, it is particularly preferable to crush the flowers of the genus flowers with a mixer or the like because the extraction efficiency of the inhibitor increases.

本発明にいうα-グルコシダーゼ活性の阻害効果の程度は、抽出エキス添加及び非添加の条件でのα-グルコシダーゼ(マルターゼ及びスクラーゼ)によるマルトース及びスクラーゼ分解活性を測定することによって得られる。生成するグルコース量をグルコースオキシダーゼ法によって定量することで阻害効果を評価する方法が一般的である。しかし、グルコースオキシダーゼ法では、グルコースを酸化させてグルコン酸と過酸化水素を発生させ、その過酸化水素が発色基質を還元することによって発色させるため、抗酸化性が高い試料には不適切である。そのため、本発明においては示差屈折計にて、生成したグルコースを検出することにより、阻害効果を評価した。   The degree of the inhibitory effect on the α-glucosidase activity referred to in the present invention can be obtained by measuring the maltose and sucrase decomposing activities by α-glucosidase (maltase and sucrase) under the conditions where the extract is added and not added. A general method is to evaluate the inhibitory effect by quantifying the amount of glucose produced by the glucose oxidase method. However, in the glucose oxidase method, glucose is oxidized to generate gluconic acid and hydrogen peroxide, and the hydrogen peroxide generates color by reducing the chromogenic substrate. . Therefore, in this invention, the inhibitory effect was evaluated by detecting produced | generated glucose with a differential refractometer.

本発明にいうα-アミラーゼ活性の阻害効果の程度は、抽出エキス添加及び非添加の条件でのα-アミラーゼによるデンプン分解活性を測定することによって得られる。活性測定はヨウ素デンプン反応により発色させ、反応溶液中に残存するデンプンの量を吸光度で測定する。ただし、試料によってはヨウ素デンプン反応の発色を著しく阻害するため、希釈する必要がある。   The degree of the inhibitory effect of α-amylase activity referred to in the present invention can be obtained by measuring the amylolytic activity by α-amylase under the conditions of adding and not adding the extract. The activity is measured by coloring the iodine starch reaction, and the amount of starch remaining in the reaction solution is measured by absorbance. However, some samples need to be diluted to significantly inhibit the color development of the iodine starch reaction.

本発明にいう食品素材とは、食品の原材料のことをいい、食品組成物とは、各種食品素材からなっており、そのまま或いは加工して食品として食することができるものをいう。従って、飲料も本発明にいう食品組成物に含まれる。   The food material referred to in the present invention refers to a raw material of food, and the food composition refers to a material that is made of various food materials and can be eaten as it is or processed. Therefore, beverages are also included in the food composition referred to in the present invention.

以下、本発明を実施例により具体的に説明するが、本発明の主旨はこれらによって制限されるものではない。   EXAMPLES The present invention will be specifically described below with reference to examples, but the gist of the present invention is not limited by these examples.

(実施例1)
本実施例でもちいたハマナスの花の抽出液(以下、ハマナス抽出液という。)及びグァバの葉の抽出液(以下、グァバ抽出液という。)は10gの乾燥粉砕試料に対し、200mlの蒸留水で抽出を行った。抽出条件は100℃、10分であった。抽出液はガーゼによって分離し、さらに抽出液を15,000×g、5分間の遠心処理によって得られた上清を用いて各々の抽出液とした。
Example 1
The extract of the genus flower used in this example (hereinafter referred to as “the genus extract”) and the extract of guava leaf (hereinafter referred to as the “guava extract”) are 200 ml of distilled water with respect to 10 g of the dry ground sample. The extraction was performed. The extraction conditions were 100 ° C. and 10 minutes. The extract was separated by gauze, and each extract was made into each extract using supernatant obtained by centrifugation at 15,000 × g for 5 minutes.

(試験例1)
α-グルコシダーゼの調製と酵素単位の定義は以下のとおりである。ラット小腸アセトン粉末(シグマ社製)を250mMマレイン酸緩衝液(pH6.0)に懸濁し、5000×g、10分間の遠心処理後、上清を取得した。さらに、その上清を15,000×g、15分間の遠心処理を行い、上清を取得し、これをα-グルコシダーゼ粗酵素液とした。マルターゼ活性は37℃、60分間に1.44μmolのマルトースを分解する酵素量を1Uと定義し、スクラーゼ活性は同条件下にて、0.94μmolのスクロースを分解する酵素量を1Uと定義した。なお、酵素単位の定義はグルコースCIIテストワコー(和光純薬工業社製)を用いて行った。
(Test Example 1)
The preparation of α-glucosidase and the definition of enzyme unit are as follows. Rat small intestine acetone powder (manufactured by Sigma) was suspended in 250 mM maleate buffer (pH 6.0), and centrifuged at 5000 × g for 10 minutes to obtain a supernatant. Further, the supernatant was centrifuged at 15,000 × g for 15 minutes to obtain a supernatant, which was used as an α-glucosidase crude enzyme solution. The amount of enzyme that decomposes 1.44 μmol of maltose for 60 minutes at 37 ° C. was defined as 1 U, and the amount of enzyme that decomposes 0.94 μmol of sucrose under the same conditions was defined as 1 U. The enzyme unit was defined using Glucose CII Test Wako (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.).

(試験例2)
α-グルコシダーゼの一つ、マルターゼに対する活性阻害実験は以下の方法に従った。250mMマレイン酸緩衝液30μl、マレイン酸緩衝液もしくはハマナス抽出液20μl、希釈した粗酵素液(4U)50μlを加え撹拌後、37℃、5分予備加温した。酵素反応開始は250mMマレイン酸緩衝液に溶かした基質、200mMマルトースを100μl添加することによって行った。37℃、30分間反応後、100℃、10分加温することによって反応を停止させた。対照区はあらかじめ100℃、10分予備加熱することによって失活させた粗酵素液を用いて同様に行った。
(Test Example 2)
The activity inhibition experiment for maltase, one of α-glucosidases, was performed according to the following method. After adding 30 μl of 250 mM maleate buffer, 20 μl of maleate buffer or Hermanus extract, and 50 μl of diluted crude enzyme solution (4U), the mixture was stirred and preheated at 37 ° C. for 5 minutes. The enzyme reaction was started by adding 100 μl of a substrate, 200 mM maltose dissolved in 250 mM maleate buffer. After reaction at 37 ° C. for 30 minutes, the reaction was stopped by heating at 100 ° C. for 10 minutes. The control group was similarly prepared using a crude enzyme solution previously inactivated by preheating at 100 ° C. for 10 minutes.

(試験例3)
グルコース生成量はカプセルパックNH2 UG80(資生堂社製)カラム及び示差屈折計(日本分光社製;RI930インテリジェントRIディテクター)を連結した高速液体クロマトグラフィー(日本分光社製、ガリバーシリーズ)によって、グルコースの保持時間で検出されるピークの面積で表した。分析条件は移動相に超純水で希釈した75%アセトニトリルを用い、試料注入量を25μlとし、カラム温度35℃、流速lml/分にて行った。
(Test Example 3)
The amount of glucose produced is maintained by high-performance liquid chromatography (JASCO Corp., Gulliver series) connected with a capsule pack NH2 UG80 (Shiseido Co., Ltd.) column and a differential refractometer (JASCO Corp .; RI930 Intelligent RI Detector). It was expressed as the area of the peak detected over time. The analysis conditions were 75% acetonitrile diluted with ultrapure water as the mobile phase, the sample injection volume was 25 μl, the column temperature was 35 ° C., and the flow rate was 1 ml / min.

阻害率の計算は、ハマナス抽出液を含んでいない場合の活性を100とし、ハマナス抽出液を添加した場合の活性を100から差し引いた分を阻害率(%)とした。その結果、マルターゼ活性に対するハマナス抽出液の阻害率は図1に示したように93.7%であった。   In the calculation of the inhibition rate, the activity when no Hermanus extract was included was defined as 100, and the activity obtained when the Hermanus extract was added was subtracted from 100 as the inhibition rate (%). As a result, the inhibition rate of the Hermanus extract for maltase activity was 93.7% as shown in FIG.

(比較例1)
同様にグァバ抽出液についても活性阻害実験を行った。その結果、マルターゼ活性に対するグァバ抽出液の阻害率は図1に示したように73.2%であった。
(Comparative Example 1)
Similarly, an activity inhibition experiment was performed on the guava extract. As a result, the inhibition rate of guava extract against maltase activity was 73.2% as shown in FIG.

(比較例2)
α−グルコシダーゼ阻害剤としてアカルボース(Acarbose:Toronto Research Chemicals社製)を0.1μg/mlとなるように添加し、マルターゼ活性阻害実験を行った。その結果、マルターゼ活性に対するアカルボースの阻害率は図1に示したように56.8%であった。
(Comparative Example 2)
As an α-glucosidase inhibitor, acarbose (Acarbose: manufactured by Toronto Research Chemicals) was added to a concentration of 0.1 μg / ml, and a maltase activity inhibition experiment was conducted. As a result, the inhibition rate of acarbose on maltase activity was 56.8% as shown in FIG.

(試験例4)
α-グルコシダーゼの一つ、スクラーゼに対する活性阻害実験は、マルターゼ活性阻害実験とほぼ同様にして行った。ただし基質は250mMマレイン酸緩衝液に溶解させた1Mスクロースを用いた。その結果、スクラーゼ活性に対するハマナス抽出液の阻害率は図2に示したように72.6%であった。
(Test Example 4)
The activity inhibition experiment for α-glucosidase, sucrase, was carried out in substantially the same manner as the maltase activity inhibition experiment. However, 1M sucrose dissolved in 250 mM maleate buffer was used as the substrate. As a result, the inhibition rate of the Hermanus extract for sucrase activity was 72.6% as shown in FIG.

(比較例3)
同様にグァバ抽出液についても活性阻害実験を行った。その結果、スクラーゼ活性に対するグァバ抽出液の阻害率は図2に示したように53.7%であった。
(Comparative Example 3)
Similarly, an activity inhibition experiment was performed on the guava extract. As a result, the inhibition rate of guava extract against sucrase activity was 53.7% as shown in FIG.

(比較例4)
α−グルコシダーゼ阻害剤としてアカルボース(Acarbose:Toronto Research Chemicals社製)を10μg/mlとなるように添加し、スクラーゼ活性阻害実験を行った。その結果、スクラーゼ活性に対するアカルボースの阻害率は図2に示したように61.0%であった。
(Comparative Example 4)
Acarbose (manufactured by Toronto Research Chemicals) was added as an α-glucosidase inhibitor to a concentration of 10 μg / ml, and a sucrase activity inhibition experiment was conducted. As a result, the inhibition rate of acarbose on sucrase activity was 61.0% as shown in FIG.

(試験例5)
α-アミラーゼの調製及び酵素単位の定義は以下のとおりである。ブタ膵臓由来のα-アミラーゼ(シグマ社製)10mgに対し、5mMの塩化カルシウムを含む200mMトリス-マレイン酸緩衝液(pH7.0)10mlを加え、撹拌して溶解させた。不溶性の沈殿物は15,000×g、5分間遠心処理することにより除去した。α-アミラーゼ活性は37℃、60分間で4.4mgのデンプンを分解する酵素量を1Uとした。なお、酵素単位の定義は0、0.5、1、2%デンプンに対し、以下に記したヨウ素デンプン反応によって発色させ、吸光度計(バイオラッド社製;スマートスペックTMプラス)により655nmにおける吸光度を測定し、得られた検量線から決定した。
(Test Example 5)
The preparation of α-amylase and the definition of the enzyme unit are as follows. To 10 mg of α-amylase derived from porcine pancreas (manufactured by Sigma), 10 ml of 200 mM Tris-maleic acid buffer (pH 7.0) containing 5 mM calcium chloride was added and dissolved by stirring. Insoluble precipitate was removed by centrifugation at 15,000 xg for 5 minutes. The α-amylase activity was defined as 1 U, which is the amount of enzyme that degrades 4.4 mg of starch at 37 ° C for 60 minutes. The enzyme unit is defined as 0, 0.5, 1, 2% starch, colored by the iodine starch reaction described below, and the absorbance at 655 nm is measured with an absorptiometer (Bio-Rad, Smart Spec TM Plus). And determined from the obtained calibration curve.

(試験例6)
α-アミラーゼ活性阻害実験は以下の方法に従った。200mMトリス-マレイン酸緩衝液(pH7.0)30μl、トリス-マレイン酸緩衝液もしくはハマナス抽出液20μl、希釈した粗酵素液(4U)50μlを加えて、撹拌した後、37℃、5分予備加温した。酵素反応開始は200mMトリス-マレイン酸緩衝液に溶かした基質、4%デンプン溶液を100μl添加することによって行った。37℃、30分間反応後、0.5N塩酸を250μl添加することによって反応を停止させた。対照区はあらかじめ100℃、30分予備加熱することによって失活させたα-アミラーゼ酵素溶液を用いて同様に行った。
(Test Example 6)
The α-amylase activity inhibition experiment was performed according to the following method. Add 30 μl of 200 mM Tris-maleic acid buffer solution (pH 7.0), 20 μl of Tris-maleic acid buffer solution or Hermanus extract, 50 μl of diluted crude enzyme solution (4 U), stir, and preliminarily add at 37 ° C for 5 minutes. Warm. The enzyme reaction was started by adding 100 μl of a substrate, 4% starch solution dissolved in 200 mM Tris-maleic acid buffer. After reacting at 37 ° C. for 30 minutes, the reaction was stopped by adding 250 μl of 0.5N hydrochloric acid. The control group was similarly prepared using an α-amylase enzyme solution which had been inactivated by preheating at 100 ° C. for 30 minutes.

(試験例7)
残存するデンプンの量は、反応液50μlに対しイオン交換水950μl、ルゴール液(0.0016Nヨウ素溶液)500μlを添加することによって発色させた溶液を吸光度計にて、655nmにおける吸光度を測定することによって求めた。
(Test Example 7)
The amount of remaining starch was determined by measuring the absorbance at 655 nm with an absorptiometer for a solution developed by adding 950 μl of ion exchange water and 500 μl of Lugol solution (0.0016N iodine solution) to 50 μl of the reaction solution. .

阻害率の計算は、ハマナス抽出液を含んでいない場合の活性を100とし、ハマナス抽出液を添加した場合の活性を100から差し引いた分を阻害率(%)とした。その結果、α-アミラーゼに対するハマナス抽出液の阻害率は図3に示したように83.7%であった。   In the calculation of the inhibition rate, the activity when no Hermanus extract was included was defined as 100, and the activity obtained when the Hermanus extract was added was subtracted from 100 as the inhibition rate (%). As a result, the inhibition rate of the Hermanus extract for α-amylase was 83.7% as shown in FIG.

(比較例5)
α−グルコシダーゼ阻害剤としてアカルボース(Acarbose:Toronto Research Chemicals社製)を2μg/mlとなるように添加し、α−アミラーゼ活性阻害実験を行った。その結果、α−アミラーゼ活性に対するアカルボースの阻害率は図3に示したように49.3%であった。
(Comparative Example 5)
Acarbose (Acarbose: manufactured by Toronto Research Chemicals) was added as an α-glucosidase inhibitor to 2 μg / ml, and α-amylase activity inhibition experiments were performed. As a result, the inhibition rate of acarbose on α-amylase activity was 49.3% as shown in FIG.

以上の実施例、試験例及び比較例から、ハマナス抽出液はマルターゼ阻害に関して93.7%、スクラーゼ阻害に関して72.6%と、いずれも同様に調製したグァバ抽出液よりも高い阻害率を示した。また、α-アミラーゼ阻害に関しても同希釈率で83.7%と、高い阻害率を示した。食後高血糖状態の引き金は、体内に存在する糖質分解酵素の中で最も消化に寄与するα-アミラーゼ及びα-グルコシダーゼによる炭水化物の分解である。これらに対し、本発明のハマナス抽出液が高い阻害を示すことは、この抽出液が糖尿病予防の可能性がある食品素材であることを示唆している。   From the above Examples, Test Examples and Comparative Examples, the Hermanus extract showed 93.7% for maltase inhibition and 72.6% for sucrase inhibition, both showing higher inhibition rates than the similarly prepared guava extract. In addition, α-amylase inhibition was as high as 83.7% at the same dilution rate. The trigger for postprandial hyperglycemia is the degradation of carbohydrates by α-amylase and α-glucosidase, which contributes most to digestion among the saccharide-degrading enzymes present in the body. On the other hand, the high inhibition of the Hermanus extract of the present invention suggests that this extract is a food material that has the potential to prevent diabetes.

抽出液は飲料の形態で、また乾燥することによって得られる抽出物は炭水化物の多い食品(ご飯など)に添加することによって、食後血糖値上昇を緩和することができる食品に応用することが可能である。また、スクラーゼ活性阻害も高いことからスクロースが主原料の飴などにも応用することができる。   The extract can be applied in the form of beverages, and the extract obtained by drying can be applied to foods that can alleviate postprandial blood glucose levels by adding to carbohydrate-rich foods (such as rice). is there. Moreover, since sucrose activity inhibition is also high, it can be applied to sucrose, which is a main raw material.

α-グルコシダーゼの一つ、マルターゼに対する阻害実験の結果である。Acarboseは糖質分解酵素阻害剤である。Acarboseのバーはこの実験が阻害実験であることを示すものである。阻害率は、ハマナス抽出液が93.7%、グァバ抽出液が73.2%、0.1μg/mlAcarboseが56.8%であった。It is a result of the inhibition experiment with respect to maltase, one of α-glucosidases. Acarbose is a glucolytic enzyme inhibitor. The Acarbose bar indicates that this experiment is an inhibition experiment. The inhibition rate was 93.7% for the Hermanus extract, 73.2% for the guava extract, and 56.8% for 0.1 μg / ml Acarbose. α-グルコシダーゼの一つ、スクラーゼに対する阻害実験の結果である。阻害率は、ハマナス抽出液が72.6%、グァバ抽出液が53.7%、10μg/mlAcarboseが61.0%であった。It is the result of the inhibition experiment with respect to one of α-glucosidase, sucrase. The inhibition rate was 72.6% for the Hermanus extract, 53.7% for the guava extract, and 61.0% for 10 μg / ml Acarbose. α-アミラーゼ阻害実験の結果である。阻害率は、ハマナス抽出液が83.7%、2μg/mlAcarboseが49.3%であった。It is a result of an α-amylase inhibition experiment. Inhibition rates were 83.7% for Hermanus extract and 49.3% for 2 μg / ml Acarbose.

Claims (6)

ハマナスの花から水または水溶液により抽出して得られたα-グルコシダーゼ及びα-アミラーゼのいずれか1種または2種の阻害物質を含有してなることを特徴とする食品組成物。   A food composition comprising one or two inhibitors of α-glucosidase and α-amylase obtained by extraction from a flower of Hermanus with water or an aqueous solution. 上記ハマナスの花がメイクイ茶であることを特徴とする請求項1に記載の食品組成物。   The food composition according to claim 1, wherein the flower of the genus is makey tea. ハマナスの花から水または水溶液によって抽出したことを特徴とするα-グルコシダーゼ及びα-アミラーゼのいずれか1種または2種の阻害物質の製造方法。   A method for producing an inhibitor of any one or two of α-glucosidase and α-amylase, which is extracted from flowers of Hermanus with water or an aqueous solution. ハマナスの花から60℃〜100℃の水または水溶液によって5分〜15分間抽出することを特徴とするα-グルコシダーゼ及びα-アミラーゼのいずれか1種または2種の阻害物質の製造方法。   A method for producing one or two inhibitors of α-glucosidase and α-amylase, characterized in that extraction is performed from flowers of Hermanus with water or an aqueous solution at 60 ° C. to 100 ° C. for 5 to 15 minutes. ハマナスの花から水または水溶液によって抽出して得られたα-グルコシダーゼ及びα-アミラーゼのいずれか1種または2種の阻害物質を含有することを特徴とする飲料の製造方法。   A method for producing a beverage, comprising one or two inhibitors of α-glucosidase and α-amylase obtained by extraction from a flower of Hermanus with water or an aqueous solution. ハマナスの花から水または水溶液によって抽出して得られたα-グルコシダーゼ及びα-アミラーゼのいずれか1種または2種の阻害物質を食品素材に添加することを特徴とする食品組成物の製造方法。

A method for producing a food composition, which comprises adding one or two inhibitors of α-glucosidase and α-amylase obtained by extraction from a flower of Hermanus with water or an aqueous solution to a food material.

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