JP2006047042A - Implement used in analyzing method using capillary array sheet - Google Patents

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泰夫 廣本
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Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a capillary array sheet holder housing container unnecessary to attach and detach several screws at each time when hybridization treatment is performed and capable of reducing the load of a worker even if the number of treatments is increased. <P>SOLUTION: In the housing container for housing a capillary array sheet holder for housing the capillary array sheet holder constituted so that a capture probe is fixed to a high-molecular gel, at least one capillary array sheet containing a plurality of through-holes which hold the gel can be housed and an opening capable of exposing the high-molecular gel of the sheet is provided, the housing container is divided into a container and a lid and a rivet is used for fixing the container and the lid. <P>COPYRIGHT: (C)2006,JPO&NCIPI

Description

本発明は、DNAマイクロアレイ等を用いた遺伝子発現解析等を実施するに際し、ハイブリダイゼーションなどの反応処理におけるキャピラリーアレイシートの損傷を防止し、マイクロアレイの取り扱いを向上させるための用具に関するものである。   The present invention relates to a tool for preventing damage to a capillary array sheet in reaction processing such as hybridization and improving handling of a microarray when performing gene expression analysis using a DNA microarray or the like.

多数遺伝子の一括発現解析を行う方法としてDNAマイクロアレイ法(DNAチップ法)と呼ばれる分析法がある。この方法は、マイクロアレイと呼ばれる平面基板片上に、多数のDNA断片が高密度に整列固定化されたものを用い、個々の固定化されたDNA断片において、核酸:核酸間ハイブリダイゼーション反応に基づく核酸検出及び定量を行う方法である。   There is an analysis method called a DNA microarray method (DNA chip method) as a method for performing batch expression analysis of a large number of genes. In this method, a large number of DNA fragments are aligned and immobilized on a flat substrate piece called a microarray, and nucleic acid detection based on a nucleic acid: nucleic acid hybridization reaction is performed on each immobilized DNA fragment. And a method for quantitative determination.

マイクロアレイ法の使用法としては、例えば、研究者対象細胞の発現遺伝子を蛍光色素等で標識したサンプルを含有した検体溶液をマイクロアレイに供し、ハイブリダイゼーションを行い、互いに相補的な核酸同士を結合させ、ハイブリットを形成した区画を高解像度解析装置で高速に読み取ることにより、核酸検出及び定量を行う方法が挙げられている。 As a method of using the microarray method, for example, a sample solution containing a sample in which a gene expressed by a researcher's target cell is labeled with a fluorescent dye is applied to the microarray, hybridization is performed, and complementary nucleic acids are bound to each other. There is a method of detecting and quantifying nucleic acid by reading a section where a hybrid is formed at high speed with a high resolution analyzer.

マイクロアレイは上述の平面基板片のもの以外に、例えば、キャプチャープローブが高分子ゲルに固定されており、該ゲルを保持した貫通孔部を複数すくむキャピラリーアレイシートが知られている。その製造方法は、例えば文献1に開示されている。 In addition to the above-described flat substrate piece, for example, a capillary array sheet in which a capture probe is fixed to a polymer gel and a plurality of through-hole portions holding the gel is included is known. The manufacturing method is disclosed in Document 1, for example.

特許文献1には、複数本の中空糸を準備し、それら中空糸を束状とし、その束を樹脂等で固定した中空糸配列体を作成し、その配列体の片端部から、キャプチャープローブを含むアクリルアミド等の重合性モノマー溶液を各中空糸の中空部に導入し、中空部内で重合した後、中空糸配列体の樹脂固定化部を中空糸の長手方向と交差する方向で切断を繰り返すことによりキャピラリーアレイシートを製造する方法が開示されている。 In Patent Document 1, a plurality of hollow fibers are prepared, the hollow fibers are bundled, a hollow fiber array is formed by fixing the bundle with a resin, and a capture probe is attached from one end of the array. After introducing a polymerizable monomer solution such as acrylamide into the hollow part of each hollow fiber and polymerizing in the hollow part, the resin immobilization part of the hollow fiber array is repeatedly cut in the direction intersecting the longitudinal direction of the hollow fiber. Discloses a method for producing a capillary array sheet.

キャピラリーアレイシートは、シート表面にキャプチャープローブが固定化された高分子ゲルが露出しており、その反応処理において表面に露出した繊細なゲル部を損傷しないように十分注意して取り扱う必要がある。よって、適当な容器でキャピラリーアレイシートを保護しなければならない。 The capillary array sheet exposes the polymer gel with the capture probe immobilized on the sheet surface, and it is necessary to handle it with great care so as not to damage the delicate gel part exposed on the surface in the reaction process. Therefore, the capillary array sheet must be protected with a suitable container.

ハイブリダイゼーション処理を行う際の容器としては一般的に、スライドガラスタイプのマイクロアレイのハイブリダイゼーションに用いられる収納容器で、スライドガラスを収納容器に挿入し、その上から蓋をして、該蓋を数本のネジにて固定するものが知られている。 The container used for the hybridization treatment is generally a storage container used for hybridization of a slide glass type microarray. The slide glass is inserted into the storage container, and a lid is applied from above. What is fixed with a screw of a book is known.

このような収納容器ではハイブリダイゼーション処理を行う度に数本のネジを着脱する必要があり、処理回数が増えることによる作業者への負担が大きくなるというデメリットがあった。
特開2001-133453公報
In such a storage container, it is necessary to attach and detach several screws every time the hybridization process is performed, and there is a demerit that an increase in the number of processes increases the burden on the operator.
JP 2001-133453 JP

本発明の目的は、キャプチャープローブが高分子ゲルに固定されており、該ゲルを保持した貫通孔部を複数含むキャピラリーアレイシートを用いた分析を実行するに際し、反応処理におけるキャピラリーアレイシートの損傷を防止し、それらの処理におけるキャピラリーアレイシートの取り扱いを向上させるための用具を提供することである。   The object of the present invention is to prevent damage to the capillary array sheet in a reaction process when an analysis is performed using a capillary array sheet in which a capture probe is fixed to a polymer gel and includes a plurality of through-hole portions holding the gel. It is to provide a tool for preventing and improving the handling of capillary array sheets in their processing.

本発明者らは、上記課題に鑑みて鋭意検討を行った結果、キャピラリーアレイシートホルダを収納する収納容器の容器部と蓋部を固定する際、ネジを使用しない収納容器を用いることにより上記問題点が解決できることを見出した。   As a result of intensive investigations in view of the above problems, the present inventors have found that the above problem can be solved by using a storage container that does not use screws when fixing the container part and the lid part of the storage container that stores the capillary array sheet holder. I found that the problem can be solved.

すなわち、本発明は、キャプチャープローブが高分子ゲルに固定されており、該ゲルを保持した貫通孔部を複数含むキャピラリーアレイシートを1枚以上収納可能で、且つ該シートの高分子ゲルが露出可能な開口部を有するキャピラリーアレイシートホルダを収納する収納容器であって、該収納容器は容器部と蓋部に分かれており、容器部と蓋部の固定に容器部の固定にリベットを用いることを特徴とする、キャビラリーアレイシートホルダ収納容器である。   That is, in the present invention, the capture probe is fixed to the polymer gel, and one or more capillary array sheets including a plurality of through-hole portions holding the gel can be stored, and the polymer gel of the sheet can be exposed. A storage container for storing a capillary array sheet holder having a flexible opening, wherein the storage container is divided into a container part and a lid part, and a rivet is used to fix the container part to fix the container part and the lid part. A feature of this is a cabinet array sheet holder storage container.

また、本発明は、キャプチャープローブが高分子ゲルに固定されており、該ゲルを保持した貫通孔部を複数含むキャピラリーアレイシートを1枚以上収納可能で、且つ該シートの高分子ゲルが露出可能な開口部を有するキャピラリーアレイシートホルダを収納する収納容器であって、該収納容器は容器部と蓋部に分かれており、容器部又は蓋部のどちらか一方に鍵状の爪構造を有し、他方に該爪が噛み合う構造を有するキャピラリーアレイシートホルダ収納容器である。   Further, in the present invention, the capture probe is fixed to the polymer gel, one or more capillary array sheets including a plurality of through-hole portions holding the gel can be stored, and the polymer gel of the sheet can be exposed. A storage container for storing a capillary array sheet holder having a flexible opening, the storage container being divided into a container part and a lid part, and having a key-like claw structure on either the container part or the lid part The capillary array sheet holder storage container has a structure in which the claw meshes with the other.

上記収納容器において、さらに開口部に液体を注入可能な注入口を有することが好ましい。また開口部に外部から観察可能な窓を有することが好ましい。   The storage container preferably further has an inlet through which liquid can be injected into the opening. Moreover, it is preferable to have a window that can be observed from the outside in the opening.

本発明のキャピラリーアレイシートホルダ収納容器を用いることにより、キャピラリーアレイシートを操作する際に誤って繊細なゲル充填部を損傷したりする恐れがなく、取り扱い性も向上し、熟練した作業者でなくとも簡単に連続してキャピラリーアレイシートを用いた多数遺伝子の一括発現解析などを実施することが可能となる。   By using the capillary array sheet holder storage container of the present invention, there is no risk of accidentally damaging the delicate gel filling part when operating the capillary array sheet, the handling is improved, and it is not a skilled worker. In addition, it is possible to carry out batch expression analysis of a large number of genes using a capillary array sheet in a simple and continuous manner.

以下、図面を使用して本発明を詳細に説明する。   Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to the drawings.

図1は、本実施形態のキャピラリーアレイシート(1)(以下、単にアレイと称する)及び該アレイが収納されたキャピラリーアレイシートホルダ(2)(以下、単にホルダと称する)を示す斜視図である。 FIG. 1 is a perspective view showing a capillary array sheet (1) (hereinafter simply referred to as an array) and a capillary array sheet holder (2) (hereinafter simply referred to as a holder) in which the array is stored. .

アレイは、複数の貫通孔を有するシート状物により構成されている。各貫通孔の内部にはゲルが保持されており、ゲルにはキャプチャープローブが固定されている。詳細な製造方法の一例は、特開2001-133453号公報に記載されている。 The array is composed of a sheet-like object having a plurality of through holes. A gel is held inside each through hole, and a capture probe is fixed to the gel. An example of a detailed manufacturing method is described in JP-A-2001-133453.

アレイの収納は、ホルダ本体(2a)にアレイ(1)を挿入し、ホルダ蓋(2b)をホルダ本体にはめ込むことにより実施される。収納された状態は、アレイのゲル露出部が表裏の開口部(2c)から露出されており、表裏の開口部を結ぶ貫通流路(2d)がアレイを挟んで相対する2箇所に溝が形成される構造となっている。 Storage of the array is carried out by inserting the array (1) into the holder body (2a) and fitting the holder lid (2b) into the holder body. In the housed state, the exposed gel portion of the array is exposed from the opening (2c) on the front and back sides, and the through-flow passage (2d) connecting the opening on the front and back surfaces forms grooves at two opposite positions across the array. It has a structure.

ホルダを構成する材料としては、例えば、ハイブリダイゼーション反応、抗原抗体反応等の検出反応を阻害する物質を含むものでなければ特に限定はない。例えばポリプロピレン、ポリエチレン、ポリメチルメタクリレート、ポリカーボネート等の熱可塑性樹脂材料を用い、射出成形等で安価に大量製造することができる。 The material constituting the holder is not particularly limited as long as it does not contain a substance that inhibits a detection reaction such as a hybridization reaction or an antigen-antibody reaction. For example, a thermoplastic resin material such as polypropylene, polyethylene, polymethyl methacrylate, or polycarbonate can be used and mass-produced at low cost by injection molding or the like.

ここで、検出の際、蛍光検出を用いる場合、アレイホルダの自家蛍光が強いとS/N比が低下し、検出精度が低下する。よって、自家蛍光が小さな素材を選択する必要がある。 Here, in the case of using fluorescence detection at the time of detection, if the autofluorescence of the array holder is strong, the S / N ratio is lowered and the detection accuracy is lowered. Therefore, it is necessary to select a material with small autofluorescence.

自家蛍光が大きい素材でも、蛍光を吸収する添加剤、例えばカーボンブラック等を添加すると自家蛍光を大きく低減することができるため、そのような添加剤を添加したさまざまな素材を用いることもできる。 Even if the material has a high autofluorescence, the addition of an additive that absorbs fluorescence, such as carbon black, can greatly reduce the autofluorescence, so various materials to which such an additive is added can also be used.

図2はホルダ収納容器を示した模式図である。ホルダ収納容器(10)は、容器部(11)及び蓋部(12)により構成され、容器部にはホルダを収納するホルダ収納溝(11a)、パッキンを挿入するためのパッキン溝(11b)、樹脂製リベットを挿入するためのリベット孔(11c)がある。蓋部には検体液を注入するための表裏を貫通する注入口(12a)、パッキンを収納するためのパッキン溝(12b)、樹脂製リベットを貫通させるリベット貫通穴(12c)を有している。 FIG. 2 is a schematic view showing the holder storage container. The holder storage container (10) includes a container part (11) and a lid part (12). The container part has a holder storage groove (11a) for storing the holder, a packing groove (11b) for inserting the packing, There is a rivet hole (11c) for inserting a resin rivet. The lid portion has an injection port (12a) that passes through the front and back for injecting the specimen liquid, a packing groove (12b) for storing the packing, and a rivet through hole (12c) through which the resin rivet passes. .

なお、注入口(12a)は図示しない、ねじ込み式の蓋が挿入できる構造となっている。 The inlet (12a) has a structure in which a screw-type lid (not shown) can be inserted.

図3は、図2に示したホルダ収納容器(10)の縦断面図である。樹脂製リベット(15a)及び(15b)をリベット貫通穴(12c)及びリベット孔(11c)を貫通させ押し込むことにより、アレイ上下面が蓋部、容器部のパッキン(14)と接してアレイ周囲を密閉し、開口部に検体溶液を溜める空間を形成することになる。 FIG. 3 is a longitudinal sectional view of the holder storage container (10) shown in FIG. By pushing the resin rivets (15a) and (15b) through the rivet through hole (12c) and the rivet hole (11c), the upper and lower surfaces of the array come into contact with the lid and the packing (14) of the container, and the periphery of the array A space for sealing the specimen solution is formed in the opening.

樹脂製リベットとしては、例えば、光洋ファスナー(株)製の製品名「プッシュリベット」の如く、リベット本体(15b)にピン体(15a)を押し込むことにより、リベット本体下部に設けられた分割した縦溝が外方向に押し広げられ、その作用により、カシメ効果を発生するものを用いることにより、容器部(11)及び蓋部(12)を密着固定できる。 As the resin rivet, for example, a product name “push rivet” manufactured by Koyo Fastener Co., Ltd., the pin body (15a) is pushed into the rivet body (15b), thereby dividing the vertical rivet provided at the lower part of the rivet body. The container part (11) and the cover part (12) can be tightly fixed by using a groove that is pushed outward and generates a caulking effect.

ハイブリダイゼーションなどの反応処理終了後、容器内のアレイを取り出すときは、樹脂製リベットのピン体(15a)を容器部(11)の底側より押し上げることによりカシメ効果が解除され、樹脂リベットを取り除いた後、蓋部(12)を取り外し、容器内のアレイを取り出すことが可能となる。 When removing the array in the container after completion of the reaction process such as hybridization, the caulking effect is canceled by pushing up the pin body (15a) of the resin rivet from the bottom side of the container part (11), and the resin rivet is removed. After that, it is possible to remove the lid (12) and take out the array in the container.

なお、この図では、樹脂製リベット4本で固定する構造となっているが、収納容器が密閉できれば、2本でも構わないし、ひとつの収納容器に複数枚のアレイを収納する際は、収納容器の大きさに合わせて、樹脂製リベットの数量を増やしても構わない。 In this figure, the structure is fixed with four resin rivets. However, if the storage container can be sealed, two containers may be used. When storing a plurality of arrays in one storage container, the storage container The quantity of resin rivets may be increased in accordance with the size of.

図4は、ホルダ収納容器の別の形態を示した模式図である。 FIG. 4 is a schematic view showing another form of the holder storage container.

ホルダ収納容器(20)は、本体(21)及び、蓋部(22)により構成され、蓋部(22)の外周には少なくとも4箇所の爪(22b)が設けてあり、該爪(22b)が噛み合うように本体(21)にも溝(21a)が設けてある。その他の構造はホルダ収納容器(10)と同じである。 The holder storage container (20) includes a main body (21) and a lid portion (22), and at least four claws (22b) are provided on the outer periphery of the lid portion (22). The main body (21) is also provided with a groove (21a) so as to engage with each other. The other structure is the same as that of the holder storage container (10).

また、注入口(22a)は図示しないねじ込み式の蓋が挿入できる構造となっている。 The inlet (22a) has a structure in which a screw-type lid (not shown) can be inserted.

図5は、図4に示したホルダ収納容器(20)の横断面図である。 FIG. 5 is a cross-sectional view of the holder storage container (20) shown in FIG.

本体(21)の溝(21a)と蓋部(22)の爪(22b)が噛み合うことにより、本体と蓋部に設けられたパッキン溝に挿入されているパッキン(31)が、アレイ上下面と密着し、開口部に検体溶液を溜める空間を形成することになる。 When the groove (21a) of the main body (21) and the claw (22b) of the lid portion (22) are engaged with each other, the packing (31) inserted into the packing groove provided in the main body and the lid portion is connected to the upper and lower surfaces of the array. A space for adhering to the specimen solution is formed in the opening.

ハイブリダイゼーションなどの反応処理終了後、容器内のアレイを取り出すときは、蓋部(22)の爪(22b)を外側に向かって折ることにより、蓋部の取り外しが可能となり、容器内のアレイを取り出すことが出来る。 When the array in the container is taken out after completion of the reaction process such as hybridization, the cover part can be removed by folding the claw (22b) of the cover part (22) outward, and the array in the container can be removed. You can take it out.

なお、この図では、爪を4箇所で固定する構造となっているが、収納容器が密閉できれば、2箇所でも構わないし、ひとつの収納容器に複数枚のアレイを収納する際は、収納容器の大きさに合わせて、爪の数量を増やしても構わない In this figure, the claws are fixed at four locations. However, if the storage container can be sealed, it may be provided at two locations. When storing a plurality of arrays in one storage container, You can increase the number of nails according to the size.

キャピラリーアレイシート及び、アレイが収納された状態のキャピラリーアレイシートホルダを示す斜視図である。It is a perspective view which shows a capillary array sheet | seat and the capillary array sheet | seat holder of the state in which the array was accommodated. キャピラリーアレイシートホルダ収納容器を示す模式図である。It is a schematic diagram which shows a capillary array sheet holder storage container. キャピラリーアレイシートを収納したキャピラリーアレイシートホルダを、キャピラリーアレイシートホルダ収納容器に収納した状態の断面図である。It is sectional drawing of the state which accommodated the capillary array sheet holder which accommodated the capillary array sheet in the capillary array sheet holder storage container. キャピラリーアレイシートホルダ収納容器の別の形態を示す模式図である。It is a schematic diagram which shows another form of a capillary array sheet | seat holder storage container. キャピラリーアレイシートを収納したキャピラリーアレイシートホルダを、キャピラリーアレイシートホルダ収納容器に収納した状態の断面図である。It is sectional drawing of the state which accommodated the capillary array sheet holder which accommodated the capillary array sheet in the capillary array sheet holder storage container.

符号の説明Explanation of symbols

1・・・・・・キャピラリーアレイシート
1a・・・・・ゲル保持部
2・・・・・・キャピラリーアレイシートホルダ
2a・・・・・ホルダ本体
2b・・・・・ホルダ蓋
2c・・・・・開口部
2d・・・・・貫通流路
10・・・・・ホルダ収納容器
11・・・・・容器部
11a・・・・ホルダ収納溝
11b・・・・パッキン溝
11c・・・・リベット孔
12・・・・・蓋部
12a・・・・注入口
12b・・・・パッキン溝
12c・・・・リベット貫通孔
13・・・・・窓蓋
14・・・・・パッキン
15a・・・・ピン体
15b・・・・リベット本体
20・・・・・ホルダ収納容器
21・・・・・本体部
21a・・・・溝部
22・・・・・蓋部
22a・・・・注入口
22b・・・・爪

DESCRIPTION OF SYMBOLS 1 .... Capillary array sheet 1a ... Gel holding part 2 .... Capillary array sheet holder 2a ... Holder body 2b ... Holder lid 2c ... ··· Opening portion 2d ··· Through channel 10 ··· Holder holding container 11 ··· Container portion 11a ··· Holder holding groove 11b ··· Packing groove 11c ··· Rivet hole 12 ... Lid 12a ... Injection port 12b ... Packing groove 12c ... Rivet through hole 13 ... Window lid 14 ... Packing 15a ... ··· Pin body 15b ··· Rivet main body 20 ··· Holder holding container 21 ··· Main body portion 21a ··· Groove portion 22 ··· Lid portion 22a ··· Inlet 22b ····claw

Claims (4)

キャプチャープローブが高分子ゲルに固定されており、該ゲルを保持した貫通孔部を複数含むキャピラリーアレイシートを1枚以上収納可能で、且つ該シートの高分子ゲルが露出可能な開口部を有するキャピラリーアレイシートホルダを収納する収納容器であって、該収納容器は容器部と蓋部に分かれており、容器部と蓋部の固定に容器部の固定にリベットを用いることを特徴とする、キャビラリーアレイシートホルダ収納容器。   Capillary having a capture probe fixed to a polymer gel, capable of storing one or more capillary array sheets including a plurality of through-hole portions holding the gel, and having an opening through which the polymer gel of the sheet can be exposed A storage container for storing an array sheet holder, wherein the storage container is divided into a container part and a lid part, and a rivet is used to fix the container part to fix the container part and the lid part. Array sheet holder storage container. キャプチャープローブが高分子ゲルに固定されており、該ゲルを保持した貫通孔部を複数含むキャピラリーアレイシートを1枚以上収納可能で、且つ該シートの高分子ゲルが露出可能な開口部を有するキャピラリーアレイシートホルダを収納する収納容器であって、該収納容器は容器部と蓋部に分かれており、容器部又は蓋部のどちらか一方に鍵状の爪構造を有し、他方に該爪が噛み合う構造を有するキャピラリーアレイシートホルダ収納容器。   Capillary having a capture probe fixed to a polymer gel, capable of storing one or more capillary array sheets including a plurality of through-hole portions holding the gel, and having an opening through which the polymer gel of the sheet can be exposed A storage container for storing the array sheet holder, wherein the storage container is divided into a container part and a lid part, and either the container part or the lid part has a key-like claw structure, and the other part has the claw. A capillary array sheet holder storage container having a meshing structure. 請求項1又は2記載の収納容器において、さらに開口部に液体を注入可能な注入口を有する収納容器。   The storage container according to claim 1, further comprising an inlet through which liquid can be injected into the opening. 請求項3に記載の容器において、さらに開口部に外部から観察可能な窓を有する収納容器。

The container according to claim 3, further comprising a window that can be observed from the outside in the opening.

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