JP2005312387A

JP2005312387A - Cultivation treatment apparatus

Info

Publication number: JP2005312387A
Application number: JP2004135519A
Authority: JP
Inventors: Sadahiro Watanabe; 貞博渡邉
Original assignee: Olympus Corp
Current assignee: Olympus Corp
Priority date: 2004-04-30
Filing date: 2004-04-30
Publication date: 2005-11-10

Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a cultivation treatment apparatus that can prevent the cross contamination in the cultivation treatment apparatus by securing a clean degree (cleanliness degree) in the cultivation treatment apparatus. <P>SOLUTION: This apparatus is equipped with a pipette that has a removable chip on its tip and feeds a culture medium to a culture vessel, a waste liquid opening 75 for discharging the culture medium in the chip as waste liquid 18a before the culture medium is fed to the culture vessel with the pipette, a waste liquid tank 18b for storing the waste liquid 18a, a sucking pipe 73 for connecting the waste liquid opening 75 and the waste liquid tank 18b, an exhausting pipe 73 one end of which is connected to the waste liquid tank 18b and the other end is opened, and a sucking means 71 set on the sucking pipe 73 and sucks the waste liquid 18a discarded through the waste liquid opening 75 in the sucking pipe 72 into the tank 18b, and a collecting means 74 that is attached on the exhausting pipe 73 for collecting dust sucked by the sucking means 71 and a waste collecting vessel for collecting the waste chip removed from the tip of the pipette. The waste collecting vessel is connected to the end of a pipe 72a branched from the sucking pipe 72. <P>COPYRIGHT: (C)2006,JPO&NCIPI

Description

この発明は、培養処理装置に関するものである。 The present invention relates to a culture treatment apparatus.

従来の培養処理装置を備える自動培養装置としては、複数の培養容器を収納可能な固定式の収納棚と、水平・昇降・回転移動可能な搬送手段とを備えたものが知られている（例えば、特許文献１参照。）。
この自動培養装置は、培養室内に配置された収納棚に、鉛直方向に並ぶ複数の小部屋を備え、各小部屋の中に培養容器を１つずつ収容して培養を行い、培養途中あるいは培養終了時に搬送手段を作動させて、小部屋から１つずつ培養容器を取り出し、あるいは、小部屋へ培養容器を収容するよう構成されている。そして、培養室から取り出された培養容器に対しては、培養室の外部に設けられた培養処理装置内において蓋が開けられて内部に培地や薬液等が供給されるようになっている。
特開２００２−２６２８５６号公報（図１等） As an automatic culture apparatus equipped with a conventional culture treatment apparatus, an automatic culture apparatus having a fixed storage shelf that can store a plurality of culture vessels and a transport means that can move horizontally, vertically, and rotationally is known (for example, , See Patent Document 1).
This automatic culture apparatus includes a plurality of small rooms arranged in a vertical direction on a storage shelf arranged in a culture chamber, and accommodates one culture container in each small room for culturing, either in the middle of culture or in culture At the end, the conveying means is operated to take out the culture containers one by one from the small room, or to accommodate the culture containers in the small room. The culture container taken out from the culture chamber is opened in a culture treatment apparatus provided outside the culture chamber, and a medium, a chemical solution, or the like is supplied to the inside.
JP 2002-262856 A (FIG. 1 etc.)

細胞が収容された培養容器内に培地や薬液等を供給する場合には、供給される培地等の勢いによって培養容器内の細胞等の検体が飛散しないように静かに供給することが必要である。また、仮に静かに供給した場合においても、培地とともに気泡が供給される場合には、気泡がダクトの先端から放出される際に、培養容器内に供給される培地が脈動して検体が飛散する可能性がある。そのため、培養容器内に培地や薬液等を供給する前には、ダクト内に存する気泡を取り除く必要がある。ダクト内に存する気泡は、例えば、プライム廃液口を有する上記ダクトとは別のダクトを介して廃液タンクに導かれるようになっており、この際、気泡とともに培地や薬液等がダクトの内壁面に付着することがある。ダクトの内壁面に付着した培地や薬液等、あるいはこの培地や薬液等が乾燥することにより生じた粉塵は培養処理装置内を浮遊するおそれがあり、浮遊した場合には、他の検体を収容する培養容器内に混入してしまうおそれがある。 When supplying a culture medium, a chemical solution, or the like into a culture container in which cells are stored, it is necessary to gently supply the specimen such as cells in the culture container without being scattered by the momentum of the supplied culture medium or the like. . In addition, even when gently supplied, if air bubbles are supplied together with the culture medium, the medium supplied in the culture vessel pulsates and the specimen scatters when the air bubbles are released from the end of the duct. there is a possibility. Therefore, before supplying a culture medium, a chemical solution, or the like into the culture container, it is necessary to remove bubbles existing in the duct. The air bubbles existing in the duct are guided to the waste liquid tank through a duct different from the duct having the prime waste liquid port, for example. May adhere. Medium or chemicals attached to the inner wall surface of the duct, or dust generated by drying of this medium or chemicals, etc., may float in the culture treatment device. If floating, accommodate other specimens There is a risk of mixing into the culture vessel.

この発明は、上記の事情に鑑みてなされたもので、培養処理装置内のクリーン度（清浄度）を確保して、培養処理装置内のクロスコンタミネーションを防止することのできる培養処理装置を提供することを目的とする。 The present invention has been made in view of the above circumstances, and provides a culture treatment apparatus that can ensure cleanliness (cleanliness) in a culture treatment apparatus and prevent cross-contamination in the culture treatment apparatus. The purpose is to do.

上記目的を達成するために、この発明は、以下の手段を提供する。
この発明は、検体および培地を収容した培養容器の蓋を開けて培養容器内部の検体に対して所定の処理を施す培養処理装置であって、先端に取り外し可能なチップを備え、培養容器内部に培地を供給するピペットと、ピペットにより培養容器に培地を供給する前に、チップ内の培地を廃液として排出する廃液口と、廃液がためられる廃液タンクと、廃液口と廃液タンクとを接続する吸引管と、一端が前記廃液タンクに接続されるとともに、他端が開放された排気管と、前記排気管に設けられ、前記廃液口を介して前記吸引管の中に捨てられた廃液を前記廃液タンクに吸引する吸引手段と、前記排気管に設けられ、前記吸引手段により吸引された塵埃を捕集する捕集手段と、前記ピペットの先端から取り外された使用済みのチップを回収する廃棄容器とを備え、前記吸引管から分岐された分岐管の末端に、前記廃棄容器が接続されている培養処理装置を提供する。
この発明によれば、吸引手段により吸引管の内部および分岐管の内部が常に吸引され続けることとなるので、廃液口を通じて捨てられた気泡を含む培地や薬液等の廃液、廃棄容器の内部に付着した培地や薬液等の液体は、吸引管および分岐管を介して廃液タンクに一旦回収されるようになっている。廃液タンクに回収されたもののうち、廃液口を通じて捨てられた気泡を含む培地や薬液等の廃液や、廃棄容器の内部に付着した培地や薬液等の液体が乾燥することにより生じた粉塵は、吸引手段の下流側に位置する捕集手段により回収されるようになっている。 In order to achieve the above object, the present invention provides the following means.
The present invention is a culture processing apparatus that opens a lid of a culture container containing a specimen and a medium and performs a predetermined process on the specimen inside the culture container, and includes a chip that can be removed at the tip, and is provided inside the culture container. Pipette to supply the medium, waste liquid outlet for discharging the medium in the chip as waste liquid before feeding the culture container with the pipette, waste liquid tank for storing the waste liquid, suction connecting the waste liquid port and the waste liquid tank A pipe, one end of which is connected to the waste liquid tank and the other end of which is opened, and the exhaust pipe disposed in the exhaust pipe and disposed in the suction pipe through the waste liquid port. A suction means for sucking into a tank; a collecting means for collecting dust sucked by the suction means provided in the exhaust pipe; and a waste for collecting a used tip removed from the tip of the pipette. And a container, the end of the branch pipe which is branched from the suction pipe to provide a culture apparatus in which the waste container is connected.
According to the present invention, the inside of the suction pipe and the inside of the branch pipe are always sucked by the suction means, so that it adheres to the waste liquid such as the culture medium or the chemical liquid containing bubbles discarded through the waste liquid port, the inside of the waste container. The liquid such as the culture medium and the chemical solution is once collected in the waste liquid tank through the suction pipe and the branch pipe. Of the collected liquid in the waste liquid tank, dust generated by drying of waste liquid such as culture medium and chemical liquid containing bubbles discarded through the waste liquid outlet, and liquid such as culture medium and chemical liquid adhering to the inside of the waste container is aspirated. It is collected by collecting means located downstream of the means.

上記発明においては、培養容器内に供給する試薬等をケース内に収容した試薬等供給装置を備え、前記分岐管の末端に前記試薬等供給装置が接続されていることが望ましい。
この発明によれば、分岐間の末端に試薬等供給装置が接続され、試薬等供給装置の内部が吸引手段により常に吸引され続けることとなるので、試薬等供給装置の内部空間に存する空気は、吸引管および分岐管を介して廃液タンクに一旦回収されるようになっている。そして、試薬等供給装置の内部に保管された複数の試薬や血清等の液体が乾燥することにより生じた粉塵は、吸引手段の下流側に位置する捕集手段により回収されるようになっている。 In the above-described invention, it is desirable that a reagent supply device that contains a reagent supplied into the culture vessel in a case is provided, and the reagent supply device is connected to the end of the branch pipe.
According to this invention, the reagent supply device is connected to the end between the branches, and the inside of the reagent supply device is continuously sucked by the suction means, so the air present in the internal space of the reagent supply device is It is once collected in a waste liquid tank via a suction pipe and a branch pipe. And the dust which arises when liquids, such as a plurality of reagents and serum stored inside a reagent supply device dry, is collected by the collection means located in the downstream of the suction means. .

上記発明においては、培養容器内に供給された試薬等から検体を分離する遠心分離機を備え、前記分岐間の末端に前記遠心分離機が接続されている。
この発明によれば、分岐間の末端に遠心分離機が接続され、遠心分離機の内部が吸引手段により常に吸引され続けることとなるので、遠心分離機の内部空間に存する空気は、吸引管および分岐管を介して廃液タンクに一旦回収されるようになっている。そして、遠心分離機が回転することにより遠心分離機の内部に発生した摩擦による粉塵は、吸引手段の下流側に位置する捕集手段により回収されるようになっている。 In the above invention, a centrifuge for separating the specimen from the reagent or the like supplied in the culture vessel is provided, and the centrifuge is connected to the end between the branches.
According to this invention, the centrifuge is connected to the end between the branches, and the inside of the centrifuge is always sucked by the suction means. It is once collected in the waste liquid tank via the branch pipe. And the dust by the friction which generate | occur | produced inside the centrifuge by rotating a centrifuge is collect | recovered by the collection means located in the downstream of a suction means.

この発明によれば、培養処理装置内のクリーン度（清浄度）を確保することができるとともに、培養処理装置内のクロスコンタミネーションを防止することができるという効果を奏する。 According to the present invention, it is possible to ensure the cleanliness (cleanliness) in the culture treatment apparatus and to prevent cross-contamination in the culture treatment apparatus.

この発明の一実施形態に係る培養処理装置および自動培養装置について、図１〜図８を参照して説明する。
本実施形態に係る自動培養装置１は、図１に示されるように、外部から観察可能な透明な壁材により密閉され、シャッタ２を介して相互に連絡する第１空間Ｓ１と第２空間Ｓ２とを備えている。 A culture treatment apparatus and an automatic culture apparatus according to an embodiment of the present invention will be described with reference to FIGS.
As shown in FIG. 1, the automatic culture apparatus 1 according to the present embodiment is sealed by a transparent wall material that can be observed from the outside, and communicates with each other via a shutter 2. And.

第１空間Ｓ１の両側空間Ｓ１１，Ｓ１３には、培養容器３を収容する培養室４が２個ずつ計４個配置され、中央空間Ｓ１２には、培養容器３を移動するための搬送ロボット（搬送機構）５が備えられている。中央空間Ｓ１２の上部には、中央空間Ｓ１２内の空気を浄化するために清浄な下降気流を送る空気清浄部６が設けられている。
４個の培養室４は、それぞれ中央空間Ｓ１２に向けて扉４ａを配置することにより、横に並んだ２個ずつが相互に扉４ａを対向させて、間隔をあけて配置されている。 A total of four culture chambers 4 each containing two culture vessels 3 are arranged in both side spaces S11 and S13 of the first space S1, and a transfer robot (transfer) for moving the culture vessels 3 is placed in the central space S12. Mechanism) 5 is provided. In the upper part of the central space S12, there is provided an air purifying unit 6 for sending a clean downward air flow in order to purify the air in the central space S12.
Each of the four culture chambers 4 is disposed with a space between the two culture chambers 4 arranged side by side with the doors 4a facing each other by disposing the doors 4a toward the central space S12.

前記各培養室４は、図２および図３に示されるように、一側面に開口部４ｂを有し、該開口部４ｂを開閉可能な扉４ａを備えている。開口部４ｂに向かって左右の側壁には、対応する高さ位置に複数のレール状のトレイ保持部材４ｃが設けられており、左右対となる各トレイ保持部材４ｃに掛け渡すようにして、トレイ７を上下方向に複数段収容できるようになっている。各培養室４内は、所定の培養条件、例えば、温度３７±０．５℃、湿度１００％およびＣＯ_２濃度５％等に維持されている。なお、トレイ保持部材４ｃはレール状に限定されず、トレイ７を出し入れ可能に支持することができれば任意の形態でよい。 As shown in FIGS. 2 and 3, each culture chamber 4 has an opening 4b on one side surface and includes a door 4a that can open and close the opening 4b. A plurality of rail-like tray holding members 4c are provided at corresponding height positions on the left and right side walls toward the opening 4b. 7 can be accommodated in a plurality of stages in the vertical direction. Each culture chamber 4 is maintained at predetermined culture conditions such as a temperature of 37 ± 0.5 ° C., a humidity of 100%, and a CO ₂ concentration of 5%. The tray holding member 4c is not limited to a rail shape, and may be in any form as long as the tray 7 can be supported in a removable manner.

各トレイ７には、複数個、例えば、１０個の培養容器３を並べて載置できるようになっている。各培養容器３は、図４に示されるように、容器本体３ａと、該容器本体３ａの上面に設けられた蓋体３ｂとからなり、容器本体３ａの左右の側面には、後述する第２空間内のハンドにより引っかけられる突起３ｃが設けられている。
各培養室４の下方には、図１に示されるように、未使用の培養容器３をトレイ７に搭載した状態で複数収容するストッカ８が配置されている。ストッカ８は、前記培養室４の扉とは反対側の第１空間Ｓ１の外部に向かう側面に開閉可能なドアを有している。該ドアは、ストッカ８の一側面全体を開放する大きさに形成されている。 A plurality of, for example, ten culture vessels 3 can be placed side by side on each tray 7. As shown in FIG. 4, each culture vessel 3 includes a vessel body 3a and a lid 3b provided on the upper surface of the vessel body 3a. A protrusion 3c that is hooked by a hand in the space is provided.
Below each culture chamber 4, as shown in FIG. 1, a stocker 8 for accommodating a plurality of unused culture containers 3 mounted on a tray 7 is arranged. The stocker 8 has a door that can be opened and closed on the side facing the outside of the first space S1 opposite to the door of the culture chamber 4. The door is formed in a size that opens one entire side surface of the stocker 8.

前記搬送ロボット５は、４個の培養室４の間隔位置のほぼ中央に配置されている。該搬送ロボット５は、水平回転可能な第１アーム５ａと、該第１アーム５ａの先端に鉛直軸回りに回転可能に連結された第２アーム５ｂと、該第２アーム５ｂの先端に鉛直軸回りに回転可能に取り付けられ、それ自身は駆動部、伝導機構などの培養室内の環境を劣化させる機構を持たないハンド５ｃと、これら第１アーム５ａ、第２アーム５ｂおよびハンド５ｃを昇降可能な昇降機構５ｄとを備えている。これにより、搬送ロボット５は、４個の培養室４内の全てのトレイ７にアクセスするとともに、前記シャッタ２を跨いで第１空間Ｓ１と第２空間Ｓ２との間に配置されたコンベア９上にトレイ７を引き渡すことができる水平方向の動作範囲を有している。 The transfer robot 5 is arranged approximately at the center of the interval between the four culture chambers 4. The transfer robot 5 includes a first arm 5a that can rotate horizontally, a second arm 5b that is connected to the tip of the first arm 5a so as to be rotatable about a vertical axis, and a vertical axis that is connected to the tip of the second arm 5b. A hand 5c that is rotatably mounted around itself and does not have a mechanism for deteriorating the environment in the culture chamber such as a drive unit and a conduction mechanism, and the first arm 5a, the second arm 5b, and the hand 5c can be moved up and down. And an elevating mechanism 5d. As a result, the transfer robot 5 accesses all the trays 7 in the four culture chambers 4 and on the conveyor 9 disposed between the first space S1 and the second space S2 across the shutter 2. It has a horizontal operating range in which the tray 7 can be delivered.

前記コンベア９は、搬送ロボット５のハンド５ｃの幅寸法より大きな間隔をあけて左右に配置された２本の無端ベルト９ａを備え、これら無端ベルト９ａに掛け渡してトレイ７を載置できるようになっている。また、搬送ロボット５は、培養室４内の全てのトレイ７にアクセスするとともに、前記ストッカ８内の少なくとも最上段のトレイ７にアクセスできる垂直方向の動作範囲を有している。
なお、ベルト９ａは無端ベルトに限られない。 The conveyor 9 includes two endless belts 9a arranged on the left and right sides with a gap larger than the width dimension of the hand 5c of the transport robot 5, so that the tray 7 can be placed over the endless belts 9a. It has become. Further, the transfer robot 5 has access to all trays 7 in the culture chamber 4 and has a vertical operation range in which at least the uppermost tray 7 in the stocker 8 can be accessed.
The belt 9a is not limited to an endless belt.

前記ハンド５ｃは、トレイ７を載置可能に水平方向に延びる平坦な形状に形成されており、培養室４に収容されているトレイ７間の隙間に挿入可能な厚さ寸法に形成されている。そして、ハンド５ｃは、トレイ７間の隙間に挿入された状態から上昇させられることにより、２本の腕によってトレイ７を下方から押し上げてトレイ保持部材４ｃから取り上げるとともに、トレイ７を安定して保持できるようになっている。 The hand 5c is formed in a flat shape extending in the horizontal direction so that the tray 7 can be placed, and is formed in a thickness dimension that can be inserted into a gap between the trays 7 accommodated in the culture chamber 4. . The hand 5c is lifted from the state inserted in the gap between the trays 7, so that the tray 7 is pushed up from below by the two arms and taken up from the tray holding member 4c, and the tray 7 is stably held. It can be done.

培養処理装置３０は、図１に示されるように、検体抽出装置５０、給排ロボット１０、遠心分離機１１、分注ロボット１３、チップ供給装置１５、チップ回収部３１、試薬等供給装置１６、顕微鏡１７、貯留タンク１８、水平移動機構１９および載置台２１を備えているとともに、図８に示す吸引装置７０を備えている。
検体抽出装置５０は、例えば、医療機関等で患者から採取された骨髄液を導入され、供給された骨髄液から間葉系幹細胞を多く含む検体を抽出する装置であって、導入された骨髄液を貯留する容器内に溶血剤を注入する溶血剤注入装置５４と、溶血剤が注入された骨髄液を攪拌する給排ロボット１０と、攪拌された骨髄液から間葉系幹細胞を多く含む検体を分離する遠心分離機１１とにより構成されている。 As shown in FIG. 1, the culture processing apparatus 30 includes a specimen extraction apparatus 50, a supply / discharge robot 10, a centrifuge 11, a dispensing robot 13, a chip supply apparatus 15, a chip collection unit 31, a reagent supply apparatus 16, and the like. A microscope 17, a storage tank 18, a horizontal movement mechanism 19 and a mounting table 21 are provided, and a suction device 70 shown in FIG. 8 is provided.
The sample extraction device 50 is a device that introduces bone marrow fluid collected from a patient at a medical institution or the like and extracts a sample containing a lot of mesenchymal stem cells from the supplied bone marrow fluid. A hemolytic agent injecting device 54 for injecting a hemolytic agent into a container for storing blood, a supply / discharge robot 10 for stirring the bone marrow fluid into which the hemolytic agent has been injected, and a specimen containing a lot of mesenchymal stem cells from the stirred bone marrow fluid. And a centrifuge 11 for separation.

給排ロボット１０は、シャッタ２が開かれた状態で第１空間Ｓ１からコンベア９によって搬送されてきたトレイ７上の培養容器３に対し、上記検体抽出装置５０において抽出された細胞を供給し、あるいは、培地を供給、回収するようになっている。遠心分離機１１は、培養容器３内の培地から細胞を分離するように構成されている。分注ロボット１３は、血清や試薬等の種々の液体を分注するための電動ピペット１２を備えた水平回転および昇降移動可能なロボットであって、第２空間Ｓ２内に４台設置されている。 The supply / discharge robot 10 supplies the cells extracted in the sample extraction device 50 to the culture container 3 on the tray 7 that has been transported from the first space S1 by the conveyor 9 with the shutter 2 opened. Alternatively, the culture medium is supplied and recovered. The centrifuge 11 is configured to separate cells from the culture medium in the culture vessel 3. The dispensing robot 13 is a robot that can be horizontally rotated and moved up and down with an electric pipette 12 for dispensing various liquids such as serum and reagents, and four robots are installed in the second space S2. .

前記チップ供給装置１５は、これら給排ロボット１０および分注ロボット１３の電動ピペット１２先端に取り付ける使い捨て可能なチップ１４を複数収容していて給排ロボット１０および分注ロボット１３の動作範囲内に提供するようになっている。前記チップ回収部３１は、使用済みのチップ１４を廃棄回収するようになっている。前記試薬等供給装置１６は、血清や試薬等の種々の液体を複数の容器に貯留している。顕微鏡１７は培養容器３内における細胞の様子を観察できるようになっている。貯留タンク１８は、各試薬および培地交換等により廃棄される廃液をそれぞれ貯留するように複数設けられている。水平移動機構１９は、前記コンベア９と各ロボット１０，１３との間で培養容器３を受け渡し可能とするように培養容器３を移動させるようになっている。前記載置台２１は、水平移動機構１９のスライダ２０に取り付けられ、受け取った培養容器３を載置するように構成されている。 The tip supply device 15 accommodates a plurality of disposable tips 14 attached to the tips of the electric pipettes 12 of the supply / discharge robot 10 and the dispensing robot 13 and provides them within the operation range of the supply / discharge robot 10 and the dispensing robot 13. It is supposed to be. The chip collection unit 31 is configured to discard and collect used chips 14. The reagent supply device 16 stores various liquids such as serum and reagents in a plurality of containers. The microscope 17 can observe the state of cells in the culture vessel 3. A plurality of storage tanks 18 are provided so as to store each reagent and waste liquid discarded by medium exchange or the like. The horizontal movement mechanism 19 moves the culture vessel 3 so that the culture vessel 3 can be transferred between the conveyor 9 and the robots 10 and 13. The mounting table 21 is attached to the slider 20 of the horizontal movement mechanism 19 and is configured to place the received culture vessel 3 thereon.

また、第２空間Ｓ２には、該第２空間Ｓ２内の空気を清浄化するために清浄な下降気流を形成する空気清浄機３２が設けられている。
前記第２空間Ｓ２に構成された培養処理装置３０は、その高さ方向の中間位置に配され第２空間Ｓ２内を上部空間Ｓ２１と下部空間Ｓ２２とに上下に区画する第１の区画壁３３と、該第１の区画壁３３により形成された下部空間Ｓ２２内をさらに上下に区画する第２の区隔壁３４とにより、上下方向に並ぶ３つの空間Ｓ２１，Ｓ２２１，Ｓ２２２に区画されている。第１の区画壁３３は、前記コンベア９の高さに配置され、その上方の上部空間Ｓ２１内に、載置台２１、給排ロボット１０、分注ロボット１３のアーム１３ａ、顕微鏡１７のＸＹテーブル１７ａ以上の機構部等を配置している。これらの装置は、培養容器３の移動に必要な装置、および培養容器３の上部開口からアクセスすることが必要な装置だからである。なお、試薬等供給装置１６の上面も第１の区画壁３３の上面に露出しているが、これはチップ１４の挿入口１６ｃを上部空間Ｓ２１に開口させるためである。 The second space S2 is provided with an air purifier 32 that forms a clean downward airflow in order to clean the air in the second space S2.
The culture treatment apparatus 30 configured in the second space S2 is arranged at an intermediate position in the height direction, and a first partition wall 33 that vertically partitions the second space S2 into an upper space S21 and a lower space S22. Are divided into three spaces S21, S221, and S222 arranged in the vertical direction by a second partition wall 34 that further partitions the lower space S22 formed by the first partition wall 33 vertically. The first partition wall 33 is disposed at the height of the conveyor 9, and in the upper space S21 above the first partition wall 33, the loading table 21, the supply / discharge robot 10, the arm 13a of the dispensing robot 13, and the XY table 17a of the microscope 17 are provided. The above mechanism part etc. are arranged. This is because these apparatuses are necessary for moving the culture container 3 and need to be accessed from the upper opening of the culture container 3. Note that the upper surface of the reagent supply device 16 is also exposed on the upper surface of the first partition wall 33 in order to open the insertion port 16c of the chip 14 in the upper space S21.

また、第１の区画壁３３には、載置台２１を上部空間Ｓ２１において移動させるために、載置台２１を下部空間Ｓ２２内の水平移動機構１９に連結するための長孔３５、第１の区画壁３３の下方の空間Ｓ２２１に配置されたチップ供給装置１５からチップ１４を取り出すための貫通孔３６、使用済みのチップ１４を廃棄するための廃棄口３７が貫通形成されている。
さらに、第１の区画壁３３には、その側壁３０ａ，３０ｂに沿って、上下に貫通する通気口３８（図において斜線部で示す）が設けられている。 The first partition wall 33 has a long hole 35 for connecting the mounting table 21 to the horizontal movement mechanism 19 in the lower space S22 in order to move the mounting table 21 in the upper space S21. A through hole 36 for taking out the chip 14 from the chip supply device 15 arranged in the space S221 below the wall 33 and a disposal port 37 for discarding the used chip 14 are formed therethrough.
Further, the first partition wall 33 is provided with vent holes 38 (indicated by hatching in the drawing) penetrating vertically along the side walls 30a, 30b.

第１の区画壁３３と第２の区画壁３４との間の空間Ｓ２２１には、図５に示されるように、分注ロボット１３の本体部分、チップ供給装置１５、試薬等供給装置１６、顕微鏡１７のＸＹテーブル１７ａ以下の部分、水平移動機構１９および、チップ回収部３１の廃棄口３７と廃棄容器３９とを接続するダクト４０が備えられている。前記ダクト４０は廃棄容器３９の一部を構成する部材であり、図７に示されるように、例えば、その上端にフランジ部４０ａを備える構造とされ、第１の区画壁３３の下部に設けたフック４４に引っかけることで、第１の区画壁３３と第２の区画壁３４との間に着脱可能に設ければよい。第２の区画壁３４の側壁３０ａ，３０ｂ近傍には、該側壁３０ａ，３０ｂに沿って、上下に貫通する通気口４３（図において斜線部で示す）が設けられている。 In the space S221 between the first partition wall 33 and the second partition wall 34, as shown in FIG. 5, the main body portion of the dispensing robot 13, the chip supply device 15, the reagent supply device 16, the microscope, and the like. 17 XY table 17 a and lower portions, a horizontal movement mechanism 19, and a duct 40 that connects the waste outlet 37 and the waste container 39 of the chip collection unit 31 are provided. The duct 40 is a member constituting a part of the waste container 39. As shown in FIG. 7, for example, the duct 40 has a structure having a flange portion 40a at the upper end thereof, and is provided at the lower portion of the first partition wall 33. The hook 44 may be detachably provided between the first partition wall 33 and the second partition wall 34. In the vicinity of the side walls 30a and 30b of the second partition wall 34, vent holes 43 (shown by hatched portions in the figure) are provided so as to penetrate vertically along the side walls 30a and 30b.

さらに、第２の区画壁３４の下方の空間Ｓ２２２には、図６に示されるように、遠心分離機１１、貯留タンク１８、廃棄容器３９、および排気ファン４１が配置されている。排気ファン４１の出口にはＨＥＰＡフィルタのようなフィルタ４２が設けられ、排気される空気を清浄にするようになっている。 Furthermore, in the space S222 below the second partition wall 34, as shown in FIG. 6, the centrifuge 11, the storage tank 18, the waste container 39, and the exhaust fan 41 are arranged. A filter 42 such as a HEPA filter is provided at the outlet of the exhaust fan 41 so as to clean the exhausted air.

前記給排ロボット１０は、水平多関節型ロボットであって、例えば、図１に示す例では、２種類の電動ピペット１０ａ，１０ｂを備えるヘッド１０ｃと、水平旋回可能な２つのアーム１０ｄ，１０ｅと、アーム１０ｅの先端に設けられヘッド１０ｃを昇降させる昇降機構１０ｆとを備えている。
電動ピペット１０ａは、貯留タンク１８からダクト１０ｇを介して導かれた培地を培養容器３内に供給し、あるいはピペッティング動作を行うようになっている。また、電動ピペット１０ｂは、吸引ポンプ（吸引手段）７１（図８参照）により培養容器３内あるいは遠心容器内の不要な培地１８ａを吸引し、前述したダクト１０ｇとは別の図示しないダクトを介して廃液タンク１８ｂ（図８参照）へ廃液として排出するようになっている。 The supply / discharge robot 10 is a horizontal articulated robot. For example, in the example shown in FIG. 1, a head 10c including two types of electric pipettes 10a and 10b, and two arms 10d and 10e capable of horizontal turning are provided. And an elevating mechanism 10f that elevates and lowers the head 10c.
The electric pipette 10a supplies the culture medium guided from the storage tank 18 through the duct 10g into the culture vessel 3, or performs a pipetting operation. The electric pipette 10b sucks the unnecessary medium 18a in the culture vessel 3 or the centrifuge vessel by a suction pump (suction means) 71 (see FIG. 8), and passes through a duct (not shown) different from the duct 10g described above. The waste liquid is then discharged as waste liquid to the waste liquid tank 18b (see FIG. 8).

電動ピペット１０ａによるピペッティング動作は、前記溶血剤注入装置５４により溶血剤を注入された骨髄液に対して行われるとともに、遠心分離機１１により分離された細胞に対しても行われるようになっている。ピペッティング動作は、電動ピペット１０ａの先端にチップ供給装置１５から供給されたチップ１４を装着して、骨髄液と溶血剤との混合液、あるいは細胞と培地との混合液に対し、吸引および放出を１０回〜２０回繰り返す。これにより、混合液を均一に攪拌するようになっている。 The pipetting operation by the electric pipette 10a is performed on the bone marrow fluid into which the hemolytic agent is injected by the hemolytic agent injection device 54 and also on the cells separated by the centrifuge 11. Yes. The pipetting operation is performed by attaching the tip 14 supplied from the tip supply device 15 to the tip of the electric pipette 10a, and sucking and releasing the mixed solution of bone marrow fluid and hemolytic agent or the mixed solution of cells and medium. Repeat 10 to 20 times. Thereby, a liquid mixture is stirred uniformly.

また、給排ロボット１０は、ピペッティング動作の後に、電動ピペット１０ａによって、遠心分離機１１により分離された細胞と培地との混合液を吸引し、載置台２１上に搭載された培養容器３内に上部開口から供給するようになっている。 In addition, after the pipetting operation, the supply / discharge robot 10 sucks the mixed solution of the cells and the medium separated by the centrifuge 11 with the electric pipette 10a, and the inside of the culture container 3 mounted on the mounting table 21. Is supplied from the upper opening.

一旦使用された使用済みのチップ１４は、チップ回収部３１において取り外され回収されるようになっている。したがって、給排ロボット１０は、溶血剤注入装置５４、載置台２１、チップ供給装置１５、チップ回収部３１および遠心分離機１１からの細胞供給装置（図示略）等の種々の装置をその動作範囲内に配置している。 The used chip 14 once used is removed and collected by the chip collection unit 31. Therefore, the supply / discharge robot 10 operates in various operating ranges such as the hemolyzing agent injection device 54, the mounting table 21, the chip supply device 15, the chip collection unit 31, and the cell supply device (not shown) from the centrifuge 11. It is placed inside.

前記遠心分離機１１は、ピペッティングにより混合された骨髄液と溶血剤との混合液を貯留した容器を受け取って低速回転させることにより、骨髄液内に含有されている間葉系幹細胞等の白血球をその他の体液から分離して沈下させるようになっている。また、遠心分離機１１は、給排ロボット１０から供給された細胞入り培地を低速回転させることにより培地内に浮遊していた比重の重い細胞を培地から分離して沈下させるようになっている。 The centrifuge 11 receives a container storing a mixed solution of bone marrow fluid and a hemolytic agent mixed by pipetting and rotates them at a low speed so that leukocytes such as mesenchymal stem cells contained in the bone marrow fluid are contained. Is separated from other body fluids to sink. In addition, the centrifuge 11 is configured to separate and sink cells having a high specific gravity floating in the medium by rotating the medium containing cells supplied from the supply / discharge robot 10 at a low speed.

前記分注ロボット１３は、それぞれ、先端にチップ１４を着脱可能に取り付ける電動ピペット１２を備えた水平回転可能なアーム１３ａと、該アーム１３ａを昇降させる昇降機構１３ｂとを備えている。分注ロボット１３は、水平移動機構１９によって搬送されて来た培養容器３内へ、培地や種々の試薬を供給するようになっている。したがって、分注ロボット１３は、水平移動機構１９上の載置台２１、チップ供給装置１５、チップ回収部３１および試薬等供給装置１６等の種々の装置をその動作範囲内に配置している。 Each of the dispensing robots 13 includes a horizontally rotatable arm 13a provided with an electric pipette 12 to which a tip 14 is detachably attached at a tip, and an elevating mechanism 13b for raising and lowering the arm 13a. The dispensing robot 13 supplies a culture medium and various reagents into the culture vessel 3 that has been transported by the horizontal movement mechanism 19. Therefore, the dispensing robot 13 arranges various devices such as the mounting table 21, the chip supply device 15, the chip collection unit 31, and the reagent supply device 16 on the horizontal movement mechanism 19 within the operation range.

前記チップ供給装置１５は、上方に開口した容器１５ａ内に、電動ピペット１０ａ，１０ｂ，１２への取付口を上向きにして複数のチップ１４を配列状態に収容しており、給排ロボット１０や分注ロボット１３が、新たなチップ１４を必要とするときに、電動ピペット１０ａ，１０ｂ，１２を上方から挿入するだけで、電動ピペット１０ａ，１０ｂ，１２の先端にチップ１４を取り付けるように構成されている。容器１５ａは、給排ロボット１０や分注ロボット１３による電動ピペット１０ａ，１０ｂ，１２の移動方向に対して交差する方向に往復移動させられるように移動機構１５ｂに取り付けられている。また、分注ロボット１３にチップ１４を供給するチップ供給装置１５には、移動機構１５ｂによる移動方向とは直交する方向に容器１５ａを移動させる他の移動機構１５ｃが備えられている。これにより、容器１５ａ内の全てのチップ１４に対して電動ピペット１０ａ，１０ｂ，１２がアクセスすることができるようになっている。 The tip supply device 15 accommodates a plurality of tips 14 in an arrayed state in a container 15a opened upward with the attachment ports to the electric pipettes 10a, 10b, 12 facing upward. Note: When the robot 13 needs a new tip 14, the tip 14 is attached to the tip of the electric pipette 10a, 10b, 12 simply by inserting the electric pipette 10a, 10b, 12 from above. Yes. The container 15a is attached to the moving mechanism 15b so as to be reciprocated in a direction intersecting the moving direction of the electric pipettes 10a, 10b, and 12 by the supply / discharge robot 10 and the dispensing robot 13. The tip supply device 15 that supplies the tip 14 to the dispensing robot 13 is provided with another moving mechanism 15c that moves the container 15a in a direction orthogonal to the moving direction of the moving mechanism 15b. Thus, the electric pipettes 10a, 10b, and 12 can access all the tips 14 in the container 15a.

前記チップ回収部３１は、廃棄容器３９の入口に、チップ１４を把持する把持装置（図示略）を備えていて、給排ロボット１０や分注ロボット１３において使用されたチップ１４が把持装置に挿入されると、これを把持するようになっている。そして、この状態で給排ロボット１０や分注ロボット１３が電動ピペット１０ａ，１０ｂ，１２を移動させることにより、電動ピペット１０ａ，１０ｂ，１２先端から使用済みチップ１４が取り外され、廃棄容器３９内にダクト４０を介して回収されるようになっている。廃棄容器３９は、空間Ｓ２２２内に着脱可能に配置されており、必要に応じて交換可能となっている。 The tip collection unit 31 includes a gripping device (not shown) that grips the tip 14 at the entrance of the disposal container 39, and the tip 14 used in the supply / discharge robot 10 and the dispensing robot 13 is inserted into the gripping device. When it is done, it is designed to hold it. In this state, the supply / discharge robot 10 and the dispensing robot 13 move the electric pipettes 10a, 10b, 12 to remove the used tips 14 from the tips of the electric pipettes 10a, 10b, 12 and put them in the disposal container 39. It is collected via the duct 40. The disposal container 39 is detachably disposed in the space S222 and can be replaced as necessary.

前記ダクト４０および廃棄容器３９の交換時には、培養処理装置３０の側壁３０ａ，３０ｂに設けられた図示しないドアを開くことにより、培養処理装置３０の外部からアクセスすることとすればよい。 When exchanging the duct 40 and the waste container 39, the door may be accessed from the outside of the culture treatment apparatus 30 by opening a door (not shown) provided on the side walls 30a and 30b of the culture treatment apparatus 30.

前記試薬等供給装置１６は、例えば、図５に示されるように、円筒状のケーシング内部に、水平回転可能なテーブル１６ａを収容し、該テーブル１６ａ上に、扇型の底面形状を有する筒状の試薬等容器１６ｂを周方向に複数配列して搭載している。ケーシング内部は一定の温度に保冷されている。各試薬等容器１６ｂには、種々の試薬等が貯留されている。例えば、細胞を培養するために必要な培地を構成するＭＥＭ(Minimal Essential Medium：最小必須培地)、ＤＭＥＭ（Dulbecco's Modified Eagle Medium）、ＦＢＳ（Fetal Bovine Serum：ウシ胎児血清）やヒト血清のような血清、培養容器３内の細胞を剥離させるトリプシンのような蛋白質分解酵素や、培養に際して細胞を成長させるサイトカインのような成長因子、細胞を分化させるデキサメタゾンのような分化誘導因子、ペニシリン系抗生物質のような抗生剤、エストロゲン等のホルモン剤や、ビタミン等の栄養剤が貯留されている。 For example, as shown in FIG. 5, the reagent supply device 16 accommodates a horizontally rotatable table 16a inside a cylindrical casing, and a cylindrical shape having a fan-shaped bottom shape on the table 16a. A plurality of the reagent containers 16b are arranged and mounted in the circumferential direction. The inside of the casing is kept cool at a constant temperature. Various reagents etc. are stored in each reagent container 16b. For example, a serum such as MEM (Minimal Essential Medium), DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium), FBS (Fetal Bovine Serum) or human serum that constitutes a medium necessary for culturing cells Proteolytic enzymes such as trypsin that exfoliate cells in the culture vessel 3, growth factors such as cytokines that grow cells during culture, differentiation inducers such as dexamethasone that differentiates cells, and penicillin antibiotics Antibiotics, hormones such as estrogens, and nutrients such as vitamins are stored.

試薬等供給装置１６のケーシングの上面には、分注ロボット１３が電動ピペット１２先端のチップ１４を挿入する挿入口１６ｃが設けられている。この挿入口１６ｃは、前記分注ロボット１３の動作範囲内に配置されている。また、各試薬等容器１６ｂは、その上面に、前記挿入口１６ｃに一致する位置に配置される開口部（図示略）を備えている。これにより、テーブル１６ａを回転させて試薬等容器１６ｂの開口部をケーシングの挿入口１６ｃの鉛直下方に配置することで、分注ロボット１３が、電動ピペット１２先端のチップ１４を上方から試薬等容器１６ｂ内へ挿入して、内部に貯留されている試薬等を吸引することができるようになっている。試薬等供給装置１６を２台設けているのは、検体に共通のトリプシンのような薬液と、検体に固有の血清のような液体とを分離して取り扱うようにしているためである。 An insertion port 16 c through which the dispensing robot 13 inserts the tip 14 at the tip of the electric pipette 12 is provided on the upper surface of the casing of the reagent supply device 16. The insertion port 16 c is disposed within the operation range of the dispensing robot 13. Each reagent container 16b includes an opening (not shown) disposed on the upper surface thereof at a position corresponding to the insertion port 16c. As a result, the dispensing robot 13 displaces the tip 14 at the tip of the electric pipette 12 from above by placing the opening of the reagent container 16b vertically below the insertion port 16c of the casing by rotating the table 16a. The reagent etc. which are inserted in 16b and are stored inside can be aspirated. The two reagent supply devices 16 are provided because a chemical solution such as trypsin common to the sample and a liquid such as serum inherent to the sample are separated and handled.

前記顕微鏡１７は、培養工程の途中、あるいは、培地交換の際に、培養容器３内の細胞の様子や増殖の程度を観察したり、細胞数を計数したりする場合等に使用されるようになっている。顕微鏡１７のＸＹステージ１７ａや作動距離調整、倍率の変更等は全て遠隔操作により行うことができるように構成されている。第２空間Ｓ２の外方に向けて接眼レンズを配置しておくことにより、自動培養装置１の外部から培養容器３内の細胞の状態を観察できるようにしてもよい。 The microscope 17 is used when observing the state of cells in the culture vessel 3 and the degree of proliferation or counting the number of cells in the middle of the culture process or when exchanging the medium. It has become. The XY stage 17a, working distance adjustment, magnification change, and the like of the microscope 17 can all be performed by remote control. It may be possible to observe the state of the cells in the culture vessel 3 from the outside of the automatic culture apparatus 1 by arranging an eyepiece toward the outside of the second space S2.

前記貯留タンク１８は、例えば、全ての検体に共通して使用できるＭＥＭやＰＢＳ（リン酸緩衝化食塩水）等を貯留しておき、必要に応じて試薬等供給装置１６内の試薬等容器１６ｂ内に供給するようになっている。また、貯留タンク１８には、廃液タンクとして、培地交換の際に排出される廃培地等を貯留するものもある。 The storage tank 18 stores, for example, MEM or PBS (phosphate buffered saline) that can be used in common for all specimens, and a reagent container 16b in the reagent supply apparatus 16 as necessary. It is designed to supply inside. In addition, the storage tank 18 may be a waste liquid tank that stores waste medium and the like that are discharged during medium replacement.

前記水平移動機構１９は、直線移動機構により水平方向に移動可能なスライダ２０を備えている。スライダ２０上には前記載置台２１が搭載されており、載置台２１に搭載された培養容器３を、コンベア９から分注ロボット１３の動作範囲まで移動させることができるようになっている。 The horizontal movement mechanism 19 includes a slider 20 that can be moved in the horizontal direction by a linear movement mechanism. The mounting table 21 is mounted on the slider 20, and the culture vessel 3 mounted on the mounting table 21 can be moved from the conveyor 9 to the operating range of the dispensing robot 13.

前記載置台２１は、コンベア９上のトレイ７内から移載された培養容器３を搭載して保持する保持機構（図示略）を備えている。また、該培養容器３に振動を付与する加振装置（図示略）を備えていてもよい。加振装置は、例えば、培養容器３を所定の角度範囲で往復揺動させる装置の他、超音波振動を加える装置や、水平方向の振動を加える装置を採用してもよい。
本実施形態に係る自動培養装置１の各種装置には、図示しない制御装置が接続されている。制御装置は、各工程の順序や動作タイミング等を制御するとともに、動作履歴等を記録保存するようになっている。 The mounting table 21 includes a holding mechanism (not shown) for mounting and holding the culture vessel 3 transferred from the tray 7 on the conveyor 9. Moreover, you may provide the vibration apparatus (illustration omitted) which gives this culture | cultivation container 3 a vibration. For example, in addition to a device that reciprocally swings the culture vessel 3 within a predetermined angle range, a device that applies ultrasonic vibration or a device that applies horizontal vibration may be employed as the vibration device.
A control device (not shown) is connected to various devices of the automatic culture device 1 according to the present embodiment. The control device controls the order of each process, operation timing, and the like, and records and saves operation history and the like.

吸引装置７０は、図８に示すように、廃液タンク１８ｂと、吸引ポンプ７１と、吸引管７２と、分岐管７２ａと、排気管７３と、フィルタ（捕集手段）７４とを主たる要素として構成されたものである。
吸引管７２は、プライム廃液口（廃液口）７５と廃液タンク１８ｂとを連通する配管である。
分岐管７２ａは、吸気管７２の途中位置から分岐されるとともに、チップ回収部３１の廃棄口３７を有するダクト４０の内部および廃棄容器３９の内部、遠心分離機１１の内部、および試薬等供給装置１６の内部のそれぞれと、吸引管７２とを連通する配管である。
排気管７３は、廃液タンク１８ｂと、自動培養装置１の外部あるいは第２の区画壁３４の下方の空間Ｓ２２２内とを連通する配管であり、この排気管７３には吸引ポンプ７１とフィルタ７４とが接続されている。吸引ポンプ７１はフィルタ７４の上流側（廃液タンク１８ｂ側）に接続されており、吸引ポンプ７１を通過した排気がフィルタ７４を通過するようになっている。
また、吸引ポンプ７１が作動することにより、廃液タンク１８ｂ内の空間（廃液１８ａの液面よりも上方の空間）および吸引管７１の内部が負圧となるので、プライム廃液口７５を通じて捨てられた気泡を含む培地や薬液等の液体、ダクト４０および廃棄容器３９の内部に付着した微量の培地や薬液、あるいは廃液等の液体、遠心分離機１１が回転することにより遠心分離機１１の内部に発生した摩擦による粉塵、および試薬等供給装置１６の内部空間に存する空気は、吸引管７２および分岐管７２ａを介して廃液タンク１８ｂに一旦回収されるようになっている。廃液タンク１８ｂに回収されたもののうち、プライム廃液口７５を通じて捨てられた気泡を含む培地や薬液等の液体、ダクト４０および廃棄容器３９の内部に付着した微量の培地や薬液、あるいは廃液等の液体、試薬等供給装置１６の内部に保管された複数の試薬や血清等の液体が乾燥することにより生じた粉塵、および遠心分離機１１が回転することにより遠心分離機１１の内部に発生した摩擦による粉塵は、吸引ポンプ７１の下流側に位置するフィルタ７４により回収されるようになっている。 As shown in FIG. 8, the suction device 70 includes a waste liquid tank 18b, a suction pump 71, a suction pipe 72, a branch pipe 72a, an exhaust pipe 73, and a filter (collecting means) 74 as main elements. It has been done.
The suction pipe 72 is a pipe that communicates the prime waste liquid port (waste liquid port) 75 and the waste liquid tank 18b.
The branch pipe 72a is branched from the midway position of the intake pipe 72, and the inside of the duct 40 and the inside of the waste container 39, the inside of the centrifuge 11, the reagent supply device, etc. 16 is a pipe that communicates each of the inside of 16 and the suction pipe 72.
The exhaust pipe 73 is a pipe that communicates the waste liquid tank 18b with the outside of the automatic culture apparatus 1 or in the space S222 below the second partition wall 34. The exhaust pipe 73 includes a suction pump 71, a filter 74, and the like. Is connected. The suction pump 71 is connected to the upstream side (the waste liquid tank 18 b side) of the filter 74, and the exhaust gas that has passed through the suction pump 71 passes through the filter 74.
Further, when the suction pump 71 is operated, the space in the waste liquid tank 18b (the space above the liquid level of the waste liquid 18a) and the inside of the suction pipe 71 become negative pressure. A medium such as a medium containing air bubbles or a liquid such as a chemical solution, a small amount of medium or a chemical liquid adhering to the inside of the duct 40 and the waste container 39, a liquid such as a waste liquid, or the like generated in the centrifuge 11 when the centrifuge 11 rotates. The dust caused by the friction and the air existing in the internal space of the reagent supply device 16 are temporarily collected in the waste liquid tank 18b through the suction pipe 72 and the branch pipe 72a. Among the liquid collected in the waste liquid tank 18b, a medium such as a medium or chemical liquid containing bubbles discarded through the prime waste liquid port 75, a small amount of medium or chemical liquid adhering to the inside of the duct 40 and the waste container 39, or a liquid such as waste liquid. , Due to dust generated by drying a plurality of reagents and serum liquids stored in the reagent supply device 16 and friction generated in the centrifuge 11 when the centrifuge 11 rotates. The dust is collected by a filter 74 located on the downstream side of the suction pump 71.

このように、吸引管７２および分岐管７２ａの内部が吸引されることにより、吸引管７２の内部、分岐管７２ａの内部、およびダクト４０を備える廃棄容器３９の内部に付着した培地や薬液、あるいは廃液等の液体を廃液タンク１８ｂに回収することができるとともに、これら培地や薬液、あるいは廃液等の液体が乾燥することにより生じた粉塵をフィルタ７４により捕集することができるので、プライム廃液口７５およびダクト４０の廃棄口３７から上部空間Ｓ２１に、培地や薬液、あるいは廃液等の液体、およびこの液体が乾燥することにより生じた粉塵が流入（逆流）することを防止することができて、培養処理装置３０内のクリーン度（清浄度）を確保して、培養処理装置内のクロスコンタミネーション、すなわち、培地や薬液、あるいは廃液等の液体、およびこの液体が乾燥することにより生じた粉塵が他の検体を収容する培養容器内に混入してしまうことを防止することができる。
また、吸引管７２および分岐管７２ａの内部が吸引されることにより、遠心分離機１１が回転することにより遠心分離機１１の内部に発生した摩擦による粉塵を前述した培地や薬液、あるいは廃液等の液体とともに廃液タンク１８ｂに回収したり、あるいはフィルタ７４により捕集することができるので、遠心分離機１１が回転することにより生じた摩耗による粉塵が空間Ｓ２２２内に流出することを防止することができて、培養処理装置３０内のクリーン度（清浄度）を確保することができる。
さらに、吸引管７２および分岐管７２ａの内部が吸引されることにより、試薬等供給装置１６の内部に保管された複数の試薬や血清等の液体が乾燥することにより生じた粉塵を前述した培地や薬液、あるいは廃液等の液体とともに廃液タンク１８ｂに回収したり、あるいはフィルタ７４により捕集することができるので、試薬等供給装置１６の内部に保管された複数の試薬や血清等の液体が乾燥することにより生じた粉塵が試薬等供給装置１６の内部に流入（逆流）することを防止することができて、培養処理装置３０内のクリーン度（清浄度）を確保して、培養処理装置内のクロスコンタミネーション、すなわち、複数の試薬や血清等の液体が乾燥することにより生じた粉塵が他種類の試薬や血清等を収容する試薬等容器１６ｂ内に混入してしまうことを防止することができる。 Thus, by sucking the inside of the suction pipe 72 and the branch pipe 72a, the culture medium or the chemical solution attached to the inside of the suction pipe 72, the inside of the branch pipe 72a, and the inside of the waste container 39 including the duct 40, or The liquid such as the waste liquid can be collected in the waste liquid tank 18b, and the dust generated by the drying of the medium, the chemical liquid, or the liquid such as the waste liquid can be collected by the filter 74. In addition, it is possible to prevent inflow (reverse flow) of the liquid such as the culture medium, the chemical liquid, or the waste liquid and the dust generated by the drying of the liquid from the waste outlet 37 of the duct 40 to the upper space S21. The degree of cleanliness (cleanness) in the processing apparatus 30 is ensured, and cross-contamination in the culture processing apparatus, that is, a culture medium, a chemical solution, There can be prevented from being mixed into the culture vessel in which the liquid, such as waste, and dust generated by the liquid is dried to accommodate the other analytes.
Further, the suction pipe 72 and the branch pipe 72a are sucked so that the dust caused by friction generated in the centrifuge 11 due to the rotation of the centrifuge 11 is removed from the medium, the chemical liquid, the waste liquid, etc. Since it can be collected together with the liquid in the waste liquid tank 18b or collected by the filter 74, it is possible to prevent the dust due to wear caused by the rotation of the centrifuge 11 from flowing into the space S222. Thus, the cleanliness (cleanliness) in the culture treatment apparatus 30 can be ensured.
Furthermore, by sucking the inside of the suction pipe 72 and the branch pipe 72a, the dust generated by drying a plurality of liquids such as a plurality of reagents and serum stored in the reagent supply device 16 can be removed from the medium described above. Since it can be collected in the waste liquid tank 18b together with the liquid such as the chemical liquid or the waste liquid, or collected by the filter 74, a plurality of liquids such as a plurality of reagents and serum stored in the reagent supply device 16 are dried. The dust generated by this can be prevented from flowing into the reagent supply device 16 (reverse flow), and the cleanliness (cleanliness) in the culture treatment apparatus 30 can be ensured, Cross-contamination, that is, dust generated by drying a plurality of liquids such as reagents and sera mixes into the reagent container 16b containing other types of reagents and sera, etc. It is possible to prevent the put away.

このように構成された本実施形態に係る培養処理装置３０および自動培養装置１の作用について、以下に説明する。
本実施形態に係る自動培養装置１を用いて、間葉系幹細胞を培養するには、まず、患者から採取された骨髄液を容器に入れた状態で培養処理装置３０内に導入し、検体抽出装置５０に供給する。この工程は作業者が行ってもよいが、図示しないハンドリングロボットにより行ってもよい。 The operation of the culture treatment apparatus 30 and the automatic culture apparatus 1 according to the present embodiment configured as described above will be described below.
In order to culture mesenchymal stem cells using the automatic culture apparatus 1 according to this embodiment, first, bone marrow fluid collected from a patient is introduced into the culture treatment apparatus 30 in a container, and sample extraction is performed. Supply to device 50. This step may be performed by an operator or may be performed by a handling robot (not shown).

検体抽出装置５０においては、溶血剤注入装置５４の作動により、骨髄液に溶血剤が注入されて、給排ロボット１０の電動ピペット１０ｂに取り付けたチップ１４の先端が、骨髄液と溶血剤とが混合された容器内に挿入され、電動ピペット１０ｂの作動により、容器内の混合液が繰り返し吸引、放出される。これにより、骨髄液と溶血剤とが均一に混合されるので、この状態で、例えば、３〜７ｍｉｎ程度放置することにより溶血処理を行う。 In the sample extraction device 50, the hemolytic agent is injected into the bone marrow fluid by the operation of the hemolytic agent injection device 54, and the tip of the tip 14 attached to the electric pipette 10b of the supply / discharge robot 10 is connected to the bone marrow fluid and the hemolytic agent. It is inserted into the mixed container, and the liquid mixture in the container is repeatedly sucked and discharged by the operation of the electric pipette 10b. As a result, the bone marrow fluid and the hemolytic agent are uniformly mixed. In this state, the hemolysis treatment is performed by leaving the bone marrow fluid and the hemolytic agent, for example, for about 3 to 7 minutes.

溶血処理により、比重の大きな赤血球の細胞膜が破壊され、容器内の赤血球が除去されることになる。
その後、ハンドリングロボットの作動により、容器が遠心分離機１１に投入される。そして、遠心分離機１１が、例えば、８００〜１３００Ｇで３〜５ｍｉｎ間作動させられることにより、骨髄液内の比重の重い間葉系幹細胞を含む細が沈降した状態に集められる。 Due to the hemolysis treatment, the cell membrane of red blood cells having a large specific gravity is destroyed, and the red blood cells in the container are removed.
Thereafter, the container is put into the centrifuge 11 by the operation of the handling robot. Then, when the centrifuge 11 is operated at 800 to 1300 G for 3 to 5 minutes, for example, the fine particles including the mesenchymal stem cells having a high specific gravity in the bone marrow fluid are collected.

この状態で、再度ハンドリングロボットの作動により、容器が遠心分離機１１外に取り出される。そして、給排ロボット１０およびチップ供給装置１５の作動により、電動ピペット１０ｂ先端に未使用のチップ１４が取り付けられる。
すなわち、チップ供給装置１５は移動機構１５ｂを作動させることにより、未使用のチップ１４を給排ロボット１０の動作範囲内に配する。すると、給排ロボット１０は、昇降機構１０ｆを作動させることにより、ヘッド１０ｃを下降させて、第１の区画壁３３下方のチップ供給装置１５から未使用のチップ１４を受け取り、電動ピペット１０ｂの先端に取り付ける。 In this state, the container is taken out of the centrifuge 11 again by the operation of the handling robot. Then, by operating the supply / discharge robot 10 and the tip supply device 15, the unused tip 14 is attached to the tip of the electric pipette 10b.
That is, the tip supply device 15 operates the moving mechanism 15 b to place the unused tip 14 within the operation range of the supply / discharge robot 10. Then, the supply / discharge robot 10 operates the elevating mechanism 10f to lower the head 10c to receive an unused tip 14 from the tip supply device 15 below the first partition wall 33, and the tip of the electric pipette 10b. Attach to.

この状態で、給排ロボット１０を作動させて電動ピペット１０ｂのチップ１４の先端を容器内に挿入して吸引する。これにより、容器内の上澄み液が除去され、赤血球を含まない間葉系幹細胞を多く含む細胞が容器内に残される。 In this state, the supply / discharge robot 10 is operated to insert the tip of the tip 14 of the electric pipette 10b into the container for suction. As a result, the supernatant in the container is removed, and cells containing a lot of mesenchymal stem cells not containing red blood cells are left in the container.

次に、容器内に残った検体は、給排ロボット１０により、培養容器３に投入される。投入に先立って、コンベア９の作動により、トレイ７に載せた１０個の空の培養容器３が、第１空間Ｓ１から第２空間Ｓ２に差し出されている。トレイ７上の培養容器３の内の２個の培養容器３が、図示しない移載装置の作動により、載置台２１上に載置される。そして、図示しない蓋体開閉装置の作動により、載置台２１上の培養容器３の蓋体３ｂが開けられる。 Next, the specimen remaining in the container is put into the culture container 3 by the supply / discharge robot 10. Prior to charging, ten empty culture vessels 3 placed on the tray 7 are pushed out from the first space S1 to the second space S2 by the operation of the conveyor 9. Two of the culture containers 3 on the tray 7 are placed on the mounting table 21 by the operation of a transfer device (not shown). Then, the lid 3b of the culture vessel 3 on the mounting table 21 is opened by the operation of a lid opening / closing device (not shown).

この状態で、給排ロボット１０を作動させて、電動ピペット１０ａから容器内に、貯留タンク１８に貯留されているＤＭＥＭやＰＢＳ（リン酸緩衝化食塩水）等の培地構成液を、所定量供給する。電動ピペット１０ａ先端のチップ１４を容器内に挿入した状態に保持したまま、電動ピペット１０ａを作動させることにより、ピペッティングを行う。これにより、赤血球を含まず、間葉系幹細胞を多く含む細胞と培地構成液とが均一に混合された細胞懸濁液が構成されることになる。 In this state, the supply / discharge robot 10 is operated to supply a predetermined amount of medium constituent liquid such as DMEM or PBS (phosphate buffered saline) stored in the storage tank 18 from the electric pipette 10a into the container. To do. Pipetting is performed by operating the electric pipette 10a while keeping the tip 14 at the tip of the electric pipette 10a inserted in the container. As a result, a cell suspension in which cells that do not contain erythrocytes and contain a large amount of mesenchymal stem cells and the medium constituent liquid are uniformly mixed is formed.

このようにして製造された細胞懸濁液は、電動ピペット１０ａを作動させることにより、チップ１４内に吸引される。吸引された細胞懸濁液は、チップ１４内に保持された状態で、給排ロボット１０を作動させることにより、載置台２１上の培養容器３内に上部開口から投入される。 The cell suspension thus produced is sucked into the chip 14 by operating the electric pipette 10a. The sucked cell suspension is put into the culture vessel 3 on the mounting table 21 from the upper opening by operating the supply / discharge robot 10 while being held in the chip 14.

細胞懸濁液を培養容器３内に投入し終わると、給排ロボット１０は、第１の区画壁３３に形成された廃棄口３７にチップ１４を挿入して取り外し、チップ回収部３１に回収させる。廃棄口３７において取り外されたチップ１４は、ダクト４０を介して、最下位の空間Ｓ２２２に配置されている廃棄容器内に投入される。 When the cell suspension is completely put into the culture vessel 3, the supply / discharge robot 10 inserts and removes the chip 14 into the waste port 37 formed in the first partition wall 33 and causes the chip collection unit 31 to collect it. . The chip 14 removed at the disposal port 37 is put into a disposal container disposed in the lowest space S222 through the duct 40.

次に、細胞懸濁液が投入された培養容器３は、水平移動機構１９を作動させることにより、載置台２１ごと水平移動させられ、各分注ロボット１３の動作範囲内に配置される。分注ロボット１３は、チップ供給装置１５から受け取った未使用のチップ１４を先端に取り付けた電動ピペット１２を作動させることにより、試薬等供給装置１６の試薬等容器１６ｂ内からＤＭＥＭや血清、あるいは各種試薬を適量吸引した後に、培養容器３の上方まで搬送して培養容器３内に注入する。血清や各試薬の吸引は、各試薬等の吸引ごとにチップ供給装置１５から未使用のチップ１４に交換して行われる。これにより、培養容器３内においては、適正な培地内に間葉系幹細胞が混合された状態で存在することになる。なお、培地内において間葉系幹細胞を均一に分布させるために、載置台２１を作動させて、培養容器３ごと加振することにしてもよい。 Next, the culture vessel 3 charged with the cell suspension is moved horizontally along with the mounting table 21 by operating the horizontal movement mechanism 19, and is placed within the operation range of each dispensing robot 13. The dispensing robot 13 operates the electric pipette 12 with the unused tip 14 received from the tip supply device 15 attached to the tip thereof, thereby allowing DMEM, serum, or various kinds of substances from the reagent container 16b of the reagent supply device 16. After a suitable amount of reagent is aspirated, the reagent is conveyed to above the culture vessel 3 and injected into the culture vessel 3. Serum and each reagent are aspirated by exchanging the chip supply device 15 with an unused chip 14 for each aspiration of each reagent and the like. As a result, in the culture vessel 3, the mesenchymal stem cells are present in a mixed state in an appropriate medium. In addition, in order to distribute mesenchymal stem cells uniformly in the medium, the mounting table 21 may be operated to vibrate the entire culture vessel 3.

そして、全ての処理を終えた培養容器３は水平移動機構１９の作動により、コンベア９の近傍まで移動させられ、そこで、再度、蓋体開閉装置および移載装置の作動により、蓋体３ｂにより上部開口を閉じられた状態で、トレイ７に戻される。
トレイ７上の全ての培養容器３に対して所定の処理が行われた後に、コンベア９を作動させることにより、トレイ７に載せられた培養容器３が第２空間Ｓ２から第１空間Ｓ１の中央空間Ｓ１２内に挿入される。 Then, the culture vessel 3 that has completed all the treatments is moved to the vicinity of the conveyor 9 by the operation of the horizontal movement mechanism 19, and there again, the operation is performed by the lid body 3 b by the operation of the lid body opening / closing device and the transfer device. With the opening closed, it is returned to the tray 7.
After predetermined processing is performed on all the culture containers 3 on the tray 7, the culture container 3 placed on the tray 7 is moved from the second space S2 to the center of the first space S1 by operating the conveyor 9. It is inserted into the space S12.

この状態で、搬送ロボット５を作動させることにより、ハンド５ｃによってトレイ７を持ち上げる。そして、トレイ７を収容する培養室４の前まで搬送したところで、当該培養室４の扉４ａを開き、搬送ロボット５によって、空いているトレイ保持部材４ｃ上にトレイ７を挿入する。そして、再度、扉４ａを閉じることにより、培養室４内の培養条件を一定に保持して細胞の培養が行われることになる。なお、細胞懸濁液６１の投入や、ＤＭＥＭ、血清、各種試薬の投入や吸引の順序は適宜変更してもよいのは言うまでもない。 In this state, by operating the transfer robot 5, the tray 7 is lifted by the hand 5c. When the tray 7 is conveyed to the front of the culture chamber 4, the door 4 a of the culture chamber 4 is opened, and the tray 7 is inserted onto the empty tray holding member 4 c by the transport robot 5. Then, by closing the door 4a again, the cells are cultured while maintaining the culture conditions in the culture chamber 4 constant. Needless to say, the order in which the cell suspension 61 is charged, the DMEM, serum, and various reagents are charged and sucked may be changed as appropriate.

また、培地交換や容器交換の際にも、上記と同様にして、培養室４外に配置されている搬送ロボット５の作動により、培養室４内の培養容器３がトレイ７ごと取り出され、第１空間Ｓ１から第２空間Ｓ２へ受け渡される。第２空間Ｓ２では、培養容器３内にトリプシンが注入されて、培養容器３内の細胞が剥離させられた状態で、給排ロボット１０の作動によって遠心分離機１１内に投入され、間葉系幹細胞等の必要なもののみが集められる。その他の処理工程は上記と同様である。 In addition, when exchanging the medium and the container, the culture container 3 in the culture chamber 4 is taken out together with the tray 7 by the operation of the transfer robot 5 arranged outside the culture chamber 4 in the same manner as described above. Passed from the first space S1 to the second space S2. In the second space S2, trypsin is injected into the culture vessel 3 and the cells in the culture vessel 3 are peeled off, and then the centrifuge 11 is introduced into the centrifuge 11 by the operation of the supply / discharge robot 10. Only necessary items such as stem cells are collected. Other processing steps are the same as described above.

そして、複数回の培地交換や容器交換を介した所定期間にわたる培養工程を行うことにより、間葉系幹細胞が十分な細胞数まで増殖させられることになる。十分な細胞数に達したか否かは、給排ロボット１０の作動により、間葉系幹細胞が底面に付着した培養容器３を顕微鏡１７まで搬送することにより、観察あるいは測定され、細胞の増殖の程度が判断される。なお、トレイ７上には、同一検体の培養容器３が載置されていてもよいし、異なる検体の培養容器３が混在していてもよい。また、載置台２１上には同一検体の培養容器３が載置されてもよいし、異なる検体の培養容器３が混在していてもよい。 And a mesenchymal stem cell is proliferated to sufficient cell number by performing the culture | cultivation process over a predetermined period through several times of culture medium exchanges and container exchanges. Whether or not the sufficient number of cells has been reached is observed or measured by transporting the culture vessel 3 with mesenchymal stem cells adhering to the bottom surface to the microscope 17 by the operation of the feeding / extracting robot 10. The degree is judged. In addition, the culture container 3 of the same sample may be mounted on the tray 7, or the culture containers 3 of different samples may be mixed. In addition, the culture container 3 of the same specimen may be placed on the mounting table 21, or the culture containers 3 of different specimens may be mixed.

このようにして、本実施形態に係る自動培養装置１により、患者から採取した骨髄液から十分な細胞数の間葉系幹細胞を自動的に培養することが可能となる。なお、十分な間葉系幹細胞が得られた後には、培養容器３内にリン酸カルシウムのような生体組織補填材およびデキサメタゾンのような分化誘導因子を投入して、再度培養工程を継続することにより、生体の欠損部に補填可能な、生体組織補填体を製造することにしてもよい。 In this manner, the automatic culture apparatus 1 according to the present embodiment can automatically cultivate mesenchymal stem cells having a sufficient number of cells from bone marrow fluid collected from a patient. In addition, after sufficient mesenchymal stem cells are obtained, a biological tissue supplement such as calcium phosphate and a differentiation-inducing factor such as dexamethasone are introduced into the culture vessel 3, and the culture process is continued again. You may decide to manufacture the biological tissue filling body which can be compensated for the defect | deletion part of a biological body.

この場合において、本実施形態に係る自動培養装置１によれば、培養室４内に、培養容器３を取り出すための機構部が存在しない。すなわち、培養室４内には、トレイ７を載置した状態に支持するトレイ保持部材４ｃが設けられているのみであり、培養容器３を取り出すための機構部は全て培養室４外に配置された搬送ロボット５に集約されている。そして、搬送ロボット５は、トレイ７の出し入れ作業が行われた後には、培養室４の扉４ａの外側に完全に退避することができるようになっている。 In this case, according to the automatic culture apparatus 1 according to the present embodiment, there is no mechanism for taking out the culture vessel 3 in the culture chamber 4. That is, only the tray holding member 4c for supporting the tray 7 in a state where the tray 7 is placed is provided in the culture chamber 4, and all the mechanisms for taking out the culture vessel 3 are arranged outside the culture chamber 4. The transport robot 5 is integrated. The transfer robot 5 can be completely retracted to the outside of the door 4a of the culture chamber 4 after the tray 7 is taken in and out.

したがって、扉４ａが閉じられた状態では、培養室４内に機構部が存在せず、機構部の作動によって発生するような塵埃の発生は全く存在しない。また、培養室４内は、温度３７±０．５℃、湿度１００％およびＣＯ_２濃度５％等に維持されるが、機構部が存在しないために、このような環境下においても、腐食等の問題が生ずることがない。また、扉４ａが開かれた状態においても、培養室４内に挿入されるのは搬送ロボット５のハンド５ｃ先端のみであり、実質的に回転機構や摺動機構が培養室４内に入ることはない。その結果、培養室４内への塵埃の侵入が抑制され、培養室４内部の清浄度を高めることができる。
なお、培養室４は、ＣＯ_２インキュベータ、マルチガスインキュベータ、インキュベータ、または保冷庫等のように、培養に利用されるものあるいはその組合せで構成されていてもよい。 Therefore, when the door 4a is closed, there is no mechanism in the culture chamber 4, and no dust is generated as generated by the operation of the mechanism. Further, the inside of the culture chamber 4 is maintained at a temperature of 37 ± 0.5 ° C., a humidity of 100%, a CO ₂ concentration of 5%, etc., but since there is no mechanism part, even in such an environment, corrosion, etc. The problem does not occur. Even when the door 4a is opened, only the tip of the hand 5c of the transfer robot 5 is inserted into the culture chamber 4, so that the rotation mechanism and the sliding mechanism substantially enter the culture chamber 4. There is no. As a result, intrusion of dust into the culture chamber 4 is suppressed, and the cleanliness inside the culture chamber 4 can be increased.
Incidentally, the culture chamber 4, CO ₂ incubator, a multi-gas incubator, incubator or as cool box, etc., may be constituted by one or a combination is used in the culture.

また、本実施形態に係る培養処理装置３０および自動培養装置１によれば、医療機関等において患者から採取された状態の骨髄液に何ら前処理を施すことなく培養処理装置３０に導入するだけで、早期に間葉系幹細胞を必要細胞数まで増殖させることができる。したがって、医療機関や作業者に特別な設備や作業を発生させることがないという利点がある。 Moreover, according to the culture treatment apparatus 30 and the automatic culture apparatus 1 according to the present embodiment, the bone marrow fluid collected from the patient in a medical institution or the like is simply introduced into the culture treatment apparatus 30 without any pretreatment. The mesenchymal stem cells can be proliferated to the required number of cells at an early stage. Therefore, there is an advantage that no special equipment or work is generated in the medical institution or the worker.

特に、細胞懸濁液６１を製造するためのピペッティング作業と、溶血処理を行うためのピペッティング作業とを同一の給排ロボット１０に行わせることができるので、設置スペースを増大させることなくコンパクトに構成することができる。 In particular, the pipetting operation for manufacturing the cell suspension 61 and the pipetting operation for performing the hemolysis treatment can be performed by the same supply / discharge robot 10, so that it is compact without increasing the installation space. Can be configured.

さらに、本実施形態に係る吸引装置７０およびこれを備えた培養処理装置３０によれば、吸引管７２および分岐管７２ａの内部が吸引されることにより、吸引管７２の内部、分岐管７２ａの内部、およびダクト４０を備える廃棄容器３９の内部に付着した培地や薬液、あるいは廃液等の液体を廃液タンク１８ｂに回収することができるとともに、これら培地や薬液、あるいは廃液等の液体が乾燥することにより生じた粉塵をフィルタ７４により捕集することができるので、プライム廃液口７５およびダクト４０の廃棄口３７から上部空間Ｓ２１に、培地や薬液、あるいは廃液等の液体、およびこの液体が乾燥することにより生じた粉塵が流入（逆流）することを防止することができて、培養処理装置３０内のクリーン度（清浄度）を確保して、培養処理装置内のクロスコンタミネーション、すなわち、培地や薬液、あるいは廃液等の液体、およびこの液体が乾燥することにより生じた粉塵が他の検体を収容する培養容器内に混入してしまうことを防止することができる。
また、吸引管７２および分岐管７２ａの内部が吸引されることにより、遠心分離機１１が回転することにより遠心分離機１１の内部に発生した摩擦による粉塵を前述した培地や薬液、あるいは廃液等の液体とともに廃液タンク１８ｂに回収したり、あるいはフィルタ７４により捕集することができるので、遠心分離機１１が回転することにより生じた摩耗による粉塵が空間Ｓ２２２内に流出することを防止することができて、培養処理装置３０内のクリーン度（清浄度）を確保することができる。
さらに、吸引管７２および分岐管７２ａの内部が吸引されることにより、試薬等供給装置１６の内部に保管された複数の試薬や血清等の液体が乾燥することにより生じた粉塵を前述した培地や薬液、あるいは廃液等の液体とともに廃液タンク１８ｂに回収したり、あるいはフィルタ７４により捕集することができるので、試薬等供給装置１６の内部に保管された複数の試薬や血清等の液体が乾燥することにより生じた粉塵が試薬等供給装置１６の内部に流入（逆流）することを防止することができて、培養処理装置３０内のクリーン度（清浄度）を確保して、培養処理装置内のクロスコンタミネーション、すなわち、複数の試薬や血清等の液体が乾燥することにより生じた粉塵が他種類の試薬や血清等を収容する試薬等容器１６ｂ内に混入してしまうことを防止することができる。 Furthermore, according to the suction device 70 and the culture treatment apparatus 30 including the same according to the present embodiment, the insides of the suction tube 72 and the branch tube 72a are sucked into the suction tube 72 and the branch tube 72a. The liquid such as the medium, the chemical liquid, or the waste liquid attached to the inside of the waste container 39 including the duct 40 can be collected in the waste liquid tank 18b, and the liquid such as the medium, the chemical liquid, or the waste liquid is dried. Since the generated dust can be collected by the filter 74, the medium, the chemical liquid, the liquid such as the waste liquid, and the liquid are dried from the prime waste liquid port 75 and the waste port 37 of the duct 40 to the upper space S21. The generated dust can be prevented from flowing in (reverse flow), and the cleanliness (cleanliness) in the culture treatment apparatus 30 can be secured. Prevents cross-contamination in the culture treatment device, that is, liquids such as culture media, chemicals, or waste liquids, and dust generated by drying the liquids from entering the culture container that contains other specimens can do.
Further, the suction pipe 72 and the branch pipe 72a are sucked so that the dust caused by friction generated in the centrifuge 11 due to the rotation of the centrifuge 11 is removed from the medium, the chemical liquid, the waste liquid, etc. Since it can be collected together with the liquid in the waste liquid tank 18b or collected by the filter 74, it is possible to prevent the dust due to wear caused by the rotation of the centrifuge 11 from flowing into the space S222. Thus, the cleanliness (cleanliness) in the culture treatment apparatus 30 can be ensured.
Furthermore, by sucking the inside of the suction pipe 72 and the branch pipe 72a, the dust generated by drying a plurality of liquids such as a plurality of reagents and serum stored in the reagent supply device 16 can be removed from the medium described above. Since it can be collected in the waste liquid tank 18b together with the liquid such as the chemical liquid or the waste liquid, or collected by the filter 74, a plurality of liquids such as a plurality of reagents and serum stored in the reagent supply device 16 are dried. The dust generated by this can be prevented from flowing into the reagent supply device 16 (reverse flow), and the cleanliness (cleanliness) in the culture treatment apparatus 30 can be ensured, Cross-contamination, that is, dust generated by drying a plurality of liquids such as reagents and sera mixes into the reagent container 16b containing other types of reagents and sera, etc. It is possible to prevent the put away.

さらにまた、上部空間Ｓ２１に清浄な下降気流を発生させる空気清浄機３２が設けられているとともに、第１の区画壁３３に、その側壁３０ａ，３０ｂの近傍に通気口３８が設けられ、第２の区画壁３４にも、側壁３０ａ，３０ｂに沿って通気口４３が設けられているので、上部空間Ｓ２１から流入した塵埃を含む気流が、空間Ｓ２２１内に広がることなく、スムーズに空間Ｓ２２２に向けて流通させられることになる。 Furthermore, an air purifier 32 for generating a clean downward airflow is provided in the upper space S21, and a vent 38 is provided in the vicinity of the side walls 30a and 30b in the first partition wall 33, so that the second Since the partition wall 34 is also provided with the vent holes 43 along the side walls 30a and 30b, the air flow including dust flowing in from the upper space S21 does not spread into the space S221 and smoothly flows toward the space S222. Will be distributed.

さらにまた、本実施形態に係る培養処理装置３０および自動培養装置１によれば、蓋体３ｂを開かれた状態の培養容器３が移動させられる上部空間Ｓ２１には、培養容器３の移動に必要な載置台２１、顕微鏡１７のＸＹテーブル１７ａ、培養容器３の上部開口からアクセスすることが必要な給排ロボット１０、分注ロボット１３の電動ピペット１２、顕微鏡１７の光源部分等のみが配置され、その他の機構部は下部空間Ｓ２２に配置されている。したがって、上部空間Ｓ２１における塵埃の発生が最小限に抑えられ、培養容器３内への塵埃の混入の可能性が低減されることになる。 Furthermore, according to the culture treatment apparatus 30 and the automatic culture apparatus 1 according to the present embodiment, the culture container 3 is required to move in the upper space S21 in which the culture container 3 with the lid 3b opened is moved. Only the mounting table 21, the XY table 17a of the microscope 17, the supply / discharge robot 10 that needs to be accessed from the upper opening of the culture vessel 3, the electric pipette 12 of the dispensing robot 13, the light source portion of the microscope 17, and the like are arranged. The other mechanism part is arrange | positioned in lower space S22. Therefore, the generation of dust in the upper space S21 is minimized, and the possibility of dust being mixed into the culture vessel 3 is reduced.

さらにまた、特に、塵埃を発生する可能性の高い装置、例えば、遠心分離機１１、廃棄容器３９、排気ファン４１等は、下部空間Ｓ２２の内、さらに第２の区画壁３４によって区画された最下位の空間Ｓ２２２内に配置されているので、そこで発生した塵埃が上部空間Ｓ２１に流入することはない。さらに、空間Ｓ２２２内の空気は排気ファン４１によって吸引され、ＨＥＰＡフィルタ４２によって塵埃を除去された後に培養処理装置３０の外部に放出される。したがって、上部空間Ｓ２１の清浄度は、極めて高い清浄度に維持されることになる。 Furthermore, in particular, devices that are highly likely to generate dust, such as the centrifuge 11, the waste container 39, the exhaust fan 41, and the like, are the most separated in the lower space S22 by the second partition wall 34. Since it is arranged in the lower space S222, the dust generated there does not flow into the upper space S21. Furthermore, the air in the space S222 is sucked by the exhaust fan 41, and after dust is removed by the HEPA filter 42, it is discharged to the outside of the culture treatment apparatus 30. Therefore, the cleanliness of the upper space S21 is maintained at an extremely high cleanliness.

さらにまた、培地や細胞が付着した使用済みのチップ１４を収容した廃棄容器３９は、着脱可能であり、必要によりまたは定期的に交換することで、下部空間Ｓ２２の清浄度をも高い状態に回復することができる。さらに、廃棄容器３９への廃棄の際に使用済みのチップ１４を通過させるダクト４０も、必要によりまたは定期的に取り外して、交換あるいは清掃することで、清浄度の向上に寄与することができる。 Furthermore, the waste container 39 containing the used chip 14 to which the culture medium and cells are attached is detachable, and the cleanliness of the lower space S22 is restored to a high level by replacing it as necessary or periodically. can do. Further, the duct 40 through which the used chip 14 is passed when being discarded into the disposal container 39 can be removed or replaced or cleaned as necessary or periodically, thereby contributing to improvement in cleanliness.

さらにまた、本実施形態に係る自動培養装置１は、搬送ロボット５の設置されている中央空間Ｓ１２の上部に、空気清浄部６を備えているので、搬送ロボット５の存在する中央空間Ｓ１２内も常に清浄度が維持されている。したがって、培養室４の扉４ａが開かれたときにも、培養室４内に塵埃が流入することを最小限に抑えることが可能となる。
したがって、本実施形態に係る自動培養装置１によれば、培養中の細胞が塵埃等によって汚染される可能性を低減し、健全な細胞を培養することができるという効果がある。 Furthermore, since the automatic culture apparatus 1 according to the present embodiment includes the air cleaning unit 6 above the central space S12 in which the transport robot 5 is installed, the inside of the central space S12 in which the transport robot 5 exists is also provided. Cleanliness is always maintained. Therefore, even when the door 4a of the culture chamber 4 is opened, it is possible to minimize the inflow of dust into the culture chamber 4.
Therefore, according to the automatic culture apparatus 1 according to the present embodiment, it is possible to reduce the possibility that cells in culture are contaminated with dust and the like, and it is possible to culture healthy cells.

なお、この発明は、上記実施形態に示した構成に限定されるものではない。すなわち、培養室４の形状や数、搬送ロボット５、給排ロボット１０および分注ロボット１３の形態や数、各種装置の形態や数等は、何ら限定されることなく、適用条件に合わせて任意に設定することができる。 In addition, this invention is not limited to the structure shown in the said embodiment. That is, the shape and number of the culture chambers 4, the form and number of the transfer robot 5, the supply / discharge robot 10 and the dispensing robot 13, the form and number of various devices, etc. are not limited in any way, and are arbitrary according to the application conditions. Can be set to

また、上述した実施形態では、プライム廃液口７５を有する吸引管７２が、ダクト４０の内部、遠心分離機１１の内部、および試薬等供給装置１６の内部と連通するように設けられている。しかしながら、吸引管７２は、ダクト４０を備える廃棄容器３９の内部、遠心分離機１１の内部、および試薬等供給装置１６の内部のすべてと連通されている必要はなく、適宜必要に応じて選択的に連通させることもできる。すなわち、吸引管７２は、ダクト４０を備える廃棄容器３９の内部、遠心分離機１１の内部、および試薬等供給装置１６の内部のうちのいずれか一つだけと連通させることもできるし、ダクト４０を備える廃棄容器３９の内部、遠心分離機１１の内部、および試薬等供給装置１６の内部のうちのいずれか二つと連通させることもできる。 In the above-described embodiment, the suction pipe 72 having the prime waste liquid port 75 is provided so as to communicate with the inside of the duct 40, the inside of the centrifuge 11, and the inside of the reagent supply device 16. However, the suction pipe 72 does not need to be communicated with all of the inside of the waste container 39 including the duct 40, the inside of the centrifuge 11, and the inside of the reagent supply device 16, and can be selectively selected as necessary. You can also communicate with That is, the suction pipe 72 can be communicated with any one of the inside of the waste container 39 including the duct 40, the inside of the centrifuge 11, and the inside of the reagent supply device 16. It is also possible to communicate with any two of the inside of the waste container 39 including the inside of the centrifuge 11 and the inside of the reagent supply device 16.

さらにまた、成長因子としては、サイトカインの他に、例えば、濃縮血小板、ＢＭＰ、ＥＧＦ、ＦＧＦ、ＴＧＦ−β、ＩＧＦ、ＰＤＧＦ、ＶＥＧＦ、ＨＧＦやこれらを複合させたもの等の成長に寄与する物質を採用することにしてもよい。また、抗生剤としては、ペニシリン系抗生物質の他、セフェム系、マクロライド系、テトラサイクリン系、ホスホマイシン系、アミノグリコシド系、ニューキノロン系等任意の抗生物質を採用することができる。
なお、この発明に係る自動培養装置は、骨髄の間葉系幹細胞の培養に限定されるものではない。生体の種々の組織から採取された細胞や、樹立された細胞ラインを培養してもよい。 In addition to cytokines, growth factors include substances that contribute to growth, such as concentrated platelets, BMP, EGF, FGF, TGF-β, IGF, PDGF, VEGF, HGF, and combinations thereof. You may decide to adopt. In addition to penicillin antibiotics, any antibiotics such as cephem, macrolide, tetracycline, fosfomycin, aminoglycoside, and new quinolone can be employed as the antibiotic.
The automatic culture apparatus according to the present invention is not limited to the culture of bone marrow mesenchymal stem cells. You may culture the cell extract | collected from the various structure | tissue of the biological body, and the established cell line.

さらにまた、生体組織補填材としては、リン酸カルシウムに代えて、生体組織に親和性のある材料であれば任意のものでよく、生体吸収性の材料であればさらに好ましい。特に、生体適合性を有する多孔性のセラミックスや、コラーゲン、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ヒアルロン酸、またはこれらの組合せを用いてもよい。また、チタンの様な金属であってもよい。また、生体組織補填材は、顆粒状でもブロック状でもよい。 Furthermore, the biological tissue filling material may be any material as long as it is compatible with biological tissue, instead of calcium phosphate, and more preferably a bioabsorbable material. In particular, porous ceramics having biocompatibility, collagen, polylactic acid, polyglycolic acid, hyaluronic acid, or a combination thereof may be used. Further, a metal such as titanium may be used. The biological tissue filling material may be granular or block-shaped.

この発明の一実施形態に係る自動培養装置を示す斜視図である。It is a perspective view which shows the automatic culture apparatus which concerns on one Embodiment of this invention. 図１の自動培養装置の第１空間を概略的に示す縦断面図である。It is a longitudinal cross-sectional view which shows roughly the 1st space of the automatic culture apparatus of FIG. 図１の自動培養装置の第１空間を概略的に示す平面図である。It is a top view which shows roughly the 1st space of the automatic culture apparatus of FIG. 図１の自動培養装置において用いられる培養容器の一例を示す斜視図である。It is a perspective view which shows an example of the culture container used in the automatic culture apparatus of FIG. 図１の自動培養装置の培養処理装置の第１の区画壁を除去して第２の区画壁上の装置を示す斜視図である。It is a perspective view which shows the apparatus on a 2nd division wall by removing the 1st division wall of the culture processing apparatus of the automatic culture apparatus of FIG. 図１の自動培養装置の培養処理装置の廃棄容器に接続するダクトの取付構造例を示す縦断面図である。It is a longitudinal cross-sectional view which shows the attachment structural example of the duct connected to the waste container of the culture processing apparatus of the automatic culture apparatus of FIG. 図１の自動培養装置の培養処理装置の第１および第２の区画壁を除去して最下位の空間内に設置された装置を示す斜視図である。It is a perspective view which shows the apparatus which removed the 1st and 2nd division wall of the culture processing apparatus of the automatic culture apparatus of FIG. 1, and was installed in the lowest space. この発明による吸引装置の一実施形態を示す概略構成図である。It is a schematic structure figure showing one embodiment of the suction device by this invention.

Explanation of symbols

３培養容器
３ｂ蓋
１０ａピペット
１０ｂピペット
１１遠心分離機
１２ピペット
１４チップ
１６試薬等供給装置
１８ａ廃液
１８ｂ廃液タンク
３０培養処理装置
３９廃棄容器
７１吸引ポンプ（吸引手段）
７２吸引管
７２ａ分岐管
７３排気管
７４フィルタ（捕集手段）
７５プライム廃液口（廃液口） DESCRIPTION OF SYMBOLS 3 Culture container 3b Lid 10a Pipette 10b Pipette 11 Centrifugal machine 12 Pipette 14 Tip 16 Reagent supply apparatus 18a Waste liquid 18b Waste liquid tank 30 Culture processing apparatus 39 Waste container 71 Suction pump (aspiration means)
72 Suction pipe 72a Branch pipe 73 Exhaust pipe 74 Filter (collecting means)
75 Prime waste outlet

Claims

A culture processing apparatus that opens a lid of a culture container containing a specimen and a medium and performs a predetermined process on the specimen inside the culture container,
A pipette with a removable tip at the tip and supplying the culture medium inside the culture vessel;
Before supplying the culture medium to the culture container with a pipette, a waste liquid outlet for discharging the medium in the chip as waste liquid,
A waste liquid tank in which the waste liquid is stored;
A suction pipe connecting the waste liquid port and the waste liquid tank; an exhaust pipe having one end connected to the waste liquid tank and the other end opened;
A suction means provided in the exhaust pipe, for sucking waste liquid discarded into the suction pipe through the waste liquid port into the waste liquid tank;
A collecting means provided in the exhaust pipe for collecting the dust sucked by the suction means;
A waste container for collecting used tips removed from the tip of the pipette;
A culture treatment apparatus in which the waste container is connected to an end of a branch pipe branched from the suction pipe.

Provided with a reagent supply device that accommodates a reagent or the like to be supplied in a culture vessel in a case,
The culture treatment apparatus according to claim 1, wherein the reagent supply apparatus is connected to an end of the branch pipe.

It is equipped with a centrifuge that separates the specimen from the reagents supplied in the culture vessel,
The culture treatment apparatus according to claim 2, wherein the centrifuge is connected to an end between the branches.