JP2005187401A - Protein-chitosan complex and method for producing the same - Google Patents

Protein-chitosan complex and method for producing the same Download PDF

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Akio Kato
昭夫 加藤
Shin Shikanuma
伸 鹿沼
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Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a functional protein having antimicrobial properties, excellent emulsifiability, and masked antigen structure in the protein; and to provide a method for producing the functional protein. <P>SOLUTION: The protein-chitosan complex is obtained by bonding an animal or vegetable protein such as albumen, fish protein, soybean protein, separated soybean protein, concentrated soybean protein, degradation product of the soybean protein and wheat protein (gluten) to the chitosan by a Maillard reaction. The composition for antimicrobe, the composition for emulsification, the food and drink and the cosmetic contain the protein-chitosan complex. <P>COPYRIGHT: (C)2005,JPO&NCIPI

Description

本発明は、蛋白質と多糖類を含有する蛋白質複合体に関するものであり、さらに詳しくはメイラード反応を用いて結合させた蛋白質複合体に関するものである。   The present invention relates to a protein complex containing a protein and a polysaccharide, and more particularly to a protein complex bound using a Maillard reaction.

これまで、オボアルブミン、リゾチーム、大豆蛋白質といった蛋白質を、デキストラン、ガラクトマンナン、キシログリカンといった多糖類で修飾することにより得られる複合体が、優れた乳化性を示すことが報告されている(非特許文献1、2、3、4参照)。   So far, it has been reported that complexes obtained by modifying proteins such as ovalbumin, lysozyme, and soybean protein with polysaccharides such as dextran, galactomannan, and xyloglican exhibit excellent emulsifying properties (non-patented). References 1, 2, 3, 4).

また、リゾチーム−デキストリン複合体及びリゾチーム−ガラクトマンナン複合体が、抗酸化性を有していることや抗菌スペクトラムを拡大させることが報告されている(非特許文献3、4参照)。さらに、多糖化又はグリコシル化させたリゾチームが、蛋白質中の抗原構造をマスクするのに有効であることが示唆されている(非特許文献4参照)。 Moreover, it has been reported that a lysozyme-dextrin complex and a lysozyme-galactomannan complex have antioxidant properties and expand the antibacterial spectrum (see Non-Patent Documents 3 and 4). Furthermore, it has been suggested that lysozyme that has been glycated or glycosylated is effective in masking antigen structures in proteins (see Non-Patent Document 4).

しかしながら、非特許文献1〜4では、多糖類としてキトサンを使用した蛋白質複合体については検討されておらず、非特許文献1〜3では、蛋白質の複合化により蛋白質中の抗原構造をマスクすることについては検討されていない。また、非特許文献4では、蛋白質としてリゾチーム、多糖類としてガラクトマンナンを使用したリゾチーム−ガラクトマンナン複合体について抗原構造のマスクが報告されているが、今回の検討では、リゾチームの代わりに大豆蛋白質を使用した大豆蛋白質−ガラクトマンナン複合体では、蛋白質中の抗原構造がほとんどマスクされないことがわかった。 However, Non-Patent Documents 1 to 4 do not discuss protein complexes using chitosan as a polysaccharide, and Non-Patent Documents 1 to 3 mask the antigen structure in proteins by protein complexation. Has not been studied. In Non-Patent Document 4, a mask of antigen structure is reported for a lysozyme-galactomannan complex using lysozyme as a protein and galactomannan as a polysaccharide. In this study, soy protein was used instead of lysozyme. The soy protein-galactomannan complex used was found to hardly mask the antigen structure in the protein.

そして、非特許文献5には、リゾチーム単体よりもリゾチーム−ガラクトマンナン複合体の方が免疫グロブリン(IgE)レベルを60%に減少させることが報告されている(非特許文献5、Figure.6)。また、大豆蛋白質(P34)−ガラクトマンナン複合体も大豆蛋白質(P34)単体よりも免疫グロブリン(IgE)レベルを70%に減少させることが報告されている(非特許文献5、Figure.7)。しかしながら、免疫グロブリン(IgE)レベルは半分以上残存している。 Non-patent document 5 reports that the lysozyme-galactomannan complex reduces the immunoglobulin (IgE) level to 60% compared to lysozyme alone (non-patent document 5, FIG. 6). . In addition, it has been reported that soy protein (P34) -galactomannan complex also reduces the immunoglobulin (IgE) level to 70% as compared with soy protein (P34) alone (Non-patent Document 5, FIG. 7). However, more than half of the immunoglobulin (IgE) levels remain.

さらに、特許文献1では、蛋白質−キシログルカン複合体が、安全で優れた乳化特性を有し、耐熱性、耐酸性、耐塩性に優れていることが報告されている。しかしながら、蛋白質−キシログルカン複合体の質中の抗原構造をマスクすることに関しては何ら検討されていない。 Furthermore, Patent Document 1 reports that a protein-xyloglucan complex has safe and excellent emulsification characteristics and is excellent in heat resistance, acid resistance, and salt resistance. However, no investigation has been made on masking the antigen structure in the protein-xyloglucan complex.

以上のように、これまでは、蛋白質、特に植物性蛋白質を原料とした機能性蛋白質で、抗菌性を有し、乳化機能性に優れ、かつ蛋白質中の抗原構造をマスクし、さらに免疫グロブリン(IgE)レベルをかなり減少又は0にさせるものについては開発されていなかった。   As described above, heretofore, it is a functional protein made from protein, particularly plant protein, having antibacterial properties, excellent emulsifying functionality, masking the antigen structure in the protein, and further immunoglobulin ( Nothing has been developed that significantly reduces or reduces IgE) levels.

Akio Kato,外3名「Functional Polysaccharide Conjugate Prepared by Controlled Dry-heating of Ovalbumin-Dextran Mixtures」,Agric.Biol.Chem.,1990年,54(1),p.107−112Akio Kato, et al., “Functional Polysaccharide Conjugate Prepared by Controlled Dry-heating of Ovalbumin-Dextran Mixtures”, Agric. Biol. Chem., 1990, 54 (1), p. 107-112 小林邦彦,外2名,「大豆たん白質とガラクトマンナン型多糖類とのハイブリッド化による新規食品素材の開発」,大豆たん白質栄養研究会会誌,1992年,第13巻,p.15−21Kunihiko Kobayashi and two others, “Development of novel food materials by hybridizing soybean protein and galactomannan-type polysaccharide”, Journal of Soy Protein Nutrition Research Society, 1992, Vol. 13, p. 15-21 加藤昭夫,「多糖類修飾による蛋白質の機能変換と新規食品素材の開発」,Nippon Shokuhin Kogyo Gakkaishi,1994年,第41巻,第4号,p.304−310Akio Kato, “Functional conversion of proteins by polysaccharide modification and development of new food materials”, Nippon Shokuhin Kogyo Gakkaishi, 1994, Vol. 41, No. 4, p. 304-310 加藤昭夫,「タンパク質の多糖類修飾による高機能化」,化学と生物,1996年,第34巻,第10号,p.695−701Akio Kato, “High functionalization of protein by polysaccharide modification”, Chemistry and Biology, 1996, Vol. 34, No. 10, p. 695-701 Kayo Arita,外3名,「Effect of Chemical and Genetic Attachment of Polysaccharides to Proteins on the Production of IgG and IgE」,J.Agric.Food Chem.,2001年,49,p.2030−2036Kayo Arita, 3 others, “Effect of Chemical and Genetic Attachment of Polysaccharides to Proteins on the Production of IgG and IgE”, J. Agric. Food Chem., 2001, 49, p. 2030-2036 特開平7−258292号公報JP 7-258292 A

本発明の目的は、抗菌性を有し、乳化機能性に優れ、かつ蛋白質中の抗原構造がマスクされた機能性蛋白質を提供することである。   An object of the present invention is to provide a functional protein having antibacterial properties, excellent emulsification functionality, and masking an antigen structure in the protein.

本発明者は、鋭意検討した結果、蛋白質とキトサンを、メイラード反応により結合させて得られる機能性蛋白質である、蛋白質−キトサン複合体を開発することにより上記目的を達成した。
すなわち、本発明者は、蛋白質とキトサンを複合化させることにより得られた蛋白質−キトサン複合体が、抗菌性を有し、乳化機能性に優れ、かつ蛋白質中の抗原構造がマスクされたものであることを見出した。
As a result of intensive studies, the present inventor has achieved the above object by developing a protein-chitosan complex, which is a functional protein obtained by binding a protein and chitosan by Maillard reaction.
That is, the present inventor has shown that the protein-chitosan complex obtained by complexing the protein and chitosan has antibacterial properties, excellent emulsification functionality, and the antigen structure in the protein is masked. I found out.

本発明の第1の発明は、蛋白質とキトサンを結合させた蛋白質−キトサン複合体である。   The first invention of the present invention is a protein-chitosan complex in which a protein and chitosan are bound.

本発明の第2の発明は、蛋白質とキトサンを、メイラード反応により結合させた蛋白質−キトサン複合体である。 The second invention of the present invention is a protein-chitosan complex in which a protein and chitosan are bound by Maillard reaction.

本発明の第3の発明は、前記蛋白質が、植物性蛋白質であることを特徴とする第1の発明又は第2の発明のいずれか1つの発明に記載の蛋白質−キトサン複合体である。 A third invention of the present invention is the protein-chitosan complex according to any one of the first invention and the second invention, wherein the protein is a vegetable protein.

本発明の第4の発明は、前記植物性蛋白質が、大豆蛋白質であることを特徴とする第3の発明に記載の蛋白質−キトサン複合体である。 A fourth invention of the present invention is the protein-chitosan complex according to the third invention, wherein the vegetable protein is soybean protein.

本発明の第5の発明は、前記植物性大豆蛋白質が、分離大豆蛋白質であることを特徴とする第4の発明に記載の蛋白質−キトサン複合体である。 A fifth invention of the present invention is the protein-chitosan complex according to the fourth invention, wherein the vegetable soybean protein is a separated soybean protein.

本発明の第6の発明は、前記植物性大豆蛋白質が、大豆蛋白質分解物であることを特徴とする第4の発明に記載の蛋白質−キトサン複合体である。 A sixth invention of the present invention is the protein-chitosan complex according to the fourth invention, wherein the vegetable soybean protein is a soybean protein degradation product.

本発明の第7の発明は、前記蛋白質中の抗原構造がマスクされていることを特徴とする第1〜第6の発明のいずれか1つの発明に記載の蛋白質−キトサン複合体である。 A seventh invention of the present invention is the protein-chitosan complex according to any one of the first to sixth inventions, wherein the antigen structure in the protein is masked.

本発明の第8の発明は、前記蛋白質中の抗原が、34kDa蛋白質(Gly m Bd 30K)であることを特徴とする第7の発明に記載の蛋白質−キトサン複合体である。 The eighth invention of the present invention is the protein-chitosan complex according to the seventh invention, characterized in that the antigen in the protein is a 34 kDa protein (Gly m Bd 30K).

本発明の第9の発明は、第1〜第8の発明のいずれか1つの発明に記載の蛋白質−キトサン複合体を含有する抗菌用組成物である。 A ninth invention of the present invention is an antibacterial composition containing the protein-chitosan complex described in any one of the first to eighth inventions.

本発明の第10の発明は、第1〜第8の発明のいずれか1つの発明に記載の蛋白質−キトサン複合体を含有する乳化用組成物である。 A tenth invention of the present invention is an emulsifying composition containing the protein-chitosan complex described in any one of the first to eighth inventions.

本発明の第11の発明は、第1〜第8の発明のいずれか1つの発明に記載の蛋白質−キトサン複合体を含有する飲食物である。 An eleventh invention of the present invention is a food or drink containing the protein-chitosan complex described in any one of the first to eighth inventions.

本発明の第12の発明は、第1〜第8の発明のいずれか1つの発明に記載の蛋白質−キトサン複合体を含有する化粧料である。 A twelfth invention of the present invention is a cosmetic containing the protein-chitosan complex described in any one of the first to eighth inventions.

本発明の第13の発明は、蛋白質とキトサンを、メイラード反応により結合させることを特徴する蛋白質−キトサン複合体の製造方法である。 A thirteenth aspect of the present invention is a method for producing a protein-chitosan complex, characterized in that a protein and chitosan are bound by a Maillard reaction.

本発明の第14の発明は、前記蛋白質が、分離大豆蛋白質であることを特徴とする第13の発明に記載の蛋白質−キトサン複合体の製造方法である。 A fourteenth invention of the present invention is the method for producing a protein-chitosan complex according to the thirteenth invention, wherein the protein is a separated soybean protein.

本発明の第15の発明は、前記蛋白質が、大豆蛋白質分解物であることを特徴とする第14の発明に記載の蛋白質−キトサン複合体の製造方法である。 A fifteenth invention of the present invention is the method for producing a protein-chitosan complex according to the fourteenth invention, wherein the protein is a soybean protein degradation product.

本発明の第16の発明は、蛋白質とキトサンを、メイラード反応により結合させる処理を行うことにより、蛋白質中の抗原構造をマスクする方法である。 A sixteenth aspect of the present invention is a method for masking an antigen structure in a protein by performing a treatment for binding the protein and chitosan by Maillard reaction.

本発明の第17の発明は、前記蛋白質が、分離大豆蛋白質であることを特徴とする第16の発明に記載の蛋白質中の抗原構造をマスクする方法である。 A seventeenth invention of the present invention is the method for masking an antigen structure in a protein according to the sixteenth invention, wherein the protein is a separated soybean protein.

本発明の第18の発明は、前記蛋白質が、大豆蛋白質分解物であることを特徴とする第17の発明に記載の蛋白質中の抗原構造をマスクする方法である。 An eighteenth aspect of the present invention is the method for masking an antigen structure in a protein according to the seventeenth aspect, wherein the protein is a soybean protein degradation product.

本発明の第19の発明は、全脂大豆及び/又は脱脂大豆と、キトサンとを原料として、蛋白質とキトサンをメイラード反応により結合させることを特徴する蛋白質−キトサン複合体の製造方法である。 A nineteenth aspect of the present invention is a method for producing a protein-chitosan complex characterized in that protein and chitosan are combined by Maillard reaction using full-fat soybean and / or defatted soybean and chitosan as raw materials.

本発明の蛋白質−キトサン複合体は、抗菌性を有し、優れた乳化性を有するものである。さらに本発明の蛋白質−キトサン複合体は、蛋白質中の抗原構造がマスクされているため、本発明の蛋白質−キトサン複合体を摂取してもアレルギーを起こしにくい。   The protein-chitosan complex of the present invention has antibacterial properties and has excellent emulsifying properties. Furthermore, since the protein-chitosan complex of the present invention has a masked antigen structure in the protein, even if the protein-chitosan complex of the present invention is ingested, it is difficult to cause allergies.

まず、蛋白質−キトサン複合体について説明する。
蛋白質−キトサン複合体は、蛋白質とキトサンが結合してできた複合体である。蛋白質−キトサン複合体を構成する蛋白質としては、植物性又は動物性の蛋白質が使用できるが、消費者の植物性指向及び入手の容易さという理由で植物性蛋白質が好ましい。植物性蛋白質として、例えば、大豆蛋白質、小麦蛋白質(グルテン)等が挙げられ、動物性蛋白質としては、卵白、魚肉蛋白質、畜肉蛋白質等が挙げられ、これらの1種又は2種以上を使用することができる。これらの蛋白質は、市販品を使用することができる。
また、蛋白質−キトサン複合体の蛋白質原料として、全脂大豆や脱脂大豆等の大豆蛋白質を含有するものも使用することができ、これらの1種又は2種以上を使用することができる。さらに、大豆蛋白質を含有するものと、先に説明した蛋白質とを併用することもできる。
First, the protein-chitosan complex will be described.
The protein-chitosan complex is a complex formed by combining protein and chitosan. As the protein constituting the protein-chitosan complex, a vegetable or animal protein can be used, but a vegetable protein is preferable because it is oriented to the plant and is easily available to consumers. Examples of plant proteins include soy protein and wheat protein (gluten), and examples of animal proteins include egg white, fish protein, and livestock protein. Use one or more of these. Can do. Commercially available products can be used for these proteins.
Moreover, what contains soybean protein, such as full fat soybean and defatted soybean, can also be used as a protein raw material of a protein-chitosan complex, These 1 type (s) or 2 or more types can be used. Furthermore, what contains soybean protein and the protein demonstrated previously can also be used together.

特に、食用用途として使用する場合には、大豆蛋白質の原料である大豆は、IPハンドリング品であることが望ましい。ここで、IPとはIdentity Preservedの略であり、IPハンドリング品とは分別生産流通管理された大豆のことをいう。 In particular, when used as an edible application, it is desirable that soybean, which is a raw material for soybean protein, be an IP handling product. Here, “IP” is an abbreviation for “Identity Preserved”, and “IP handling products” refers to soybeans that are separately produced and distributed.

大豆蛋白質とは、大豆の子葉および胚軸に含有される蛋白質のことを意味し、乾燥種子の35〜50質量%を占め、分子量、分子形の差異により2S、7S、11S、15Sに分けられる。大豆蛋白質としては、分離大豆蛋白質、抽出大豆蛋白質、濃縮大豆蛋白質、大豆蛋白質分解物等が挙げられる。さらに、蛋白質−キトサン複合体の蛋白質原料として、全脂大豆や脱脂大豆等の大豆蛋白質を含有するものも使用することができる。 The soy protein means a protein contained in soybean cotyledons and hypocotyls, occupies 35 to 50% by mass of the dried seed, and is divided into 2S, 7S, 11S, and 15S depending on the molecular weight and molecular shape. . Examples of soy protein include isolated soy protein, extracted soy protein, concentrated soy protein, and soy protein degradation product. Furthermore, what contains soybean protein, such as full-fat soybean and defatted soybean, can also be used as a protein raw material of a protein-chitosan complex.

脱脂大豆としては、例えば日清オイリオ(株)社製の商品:ソーヤフラワーA等が挙げられる。分離大豆蛋白質とは、脱脂大豆から中性から弱アルカリ水で抽出した溶液を酸沈澱させて得られる蛋白質のことであって、市販品として、例えば日清オイリオ(株)社製の商品:ソルピー5000等が挙げられる。また、大豆蛋白質分解物とは、大豆蛋白質を原料としてプロテアーゼ等の酵素で分解したものや、酸又はアルカリにより化学的に分解することにより得られるもののことであって、市販品として、例えば日清オイリオ(株)社製の商品:ソルピー1500等が挙げられる。 Examples of defatted soybeans include Nisshin Oilio Co., Ltd. product: Soya Flower A. Isolated soy protein is a protein obtained by acid precipitation of a solution extracted from defatted soybeans with neutral to weak alkaline water. As a commercial product, for example, a product manufactured by Nisshin Oilio Co., Ltd .: Solpy 5000 etc. are mentioned. The soy protein decomposed product is a product obtained by degrading soy protein as a raw material with an enzyme such as protease, or a product obtained by chemically decomposing with acid or alkali. Products manufactured by Eulio Co., Ltd .: Solpy 1500 and the like.

本発明の蛋白質−キトサン複合体を調製すると、蛋白質中の抗原構造のほとんど又はすべてがマスクされるため、蛋白質−キトサン複合体を摂取してもアレルギーを引き起こしにくい。
蛋白質中の抗原構造をマスクすることによる蛋白質−キトサン複合体の免疫グロブリン(IgE)の活性レベルは、蛋白質とキトサンを混合しただけの混合物の活性レベル100に対して、0〜5に減少させているものが好ましく、0〜1に減少させているものがより好ましく、0に減少させているものが最も好ましい。
複合化によりマスクされる抗原としては、34kDa蛋白質(Gly m Bd 30K)が挙げられる。
When the protein-chitosan complex of the present invention is prepared, most or all of the antigen structure in the protein is masked. Therefore, even if the protein-chitosan complex is ingested, it is difficult to cause allergies.
The protein-chitosan complex immunoglobulin (IgE) activity level by masking the antigen structure in the protein is reduced to 0-5 with respect to the activity level 100 of the mixture of protein and chitosan only. Those that are reduced to 0 to 1 are more preferable, and those that are decreased to 0 are most preferable.
An antigen masked by conjugation includes a 34 kDa protein (Gly m Bd 30K).

本発明の蛋白質−キトサン複合体の蛋白質中の抗原構造がマスクされていることを確認する方法として、例えばWestern blotting法で得られるパターン図によるスポットの確認が挙げられる。この方法により、アレルギー物質である34kDa蛋白質(Gly m Bd 30K)の構造がマスクされていることが確認できる。 As a method for confirming that the antigen structure in the protein of the protein-chitosan complex of the present invention is masked, for example, spot confirmation by a pattern diagram obtained by Western blotting method can be mentioned. By this method, it can be confirmed that the structure of the 34 kDa protein (Gly m Bd 30K), which is an allergic substance, is masked.

本発明の蛋白質−キトサン複合体の蛋白質−キトサン複合体の免疫グロブリン(IgE)の活性レベルは、例えばIgE抗体産生の抑制を測定することで確認することができる。 The activity level of immunoglobulin (IgE) in the protein-chitosan complex of the protein-chitosan complex of the present invention can be confirmed, for example, by measuring suppression of IgE antibody production.

蛋白質−キトサン複合体の蛋白質含量は特に限定しないが、蛋白質−キトサン複合体中、好ましくは5〜95質量%、より好ましくは10〜90質量%、最も好ましくは30〜70質量%である。 The protein content of the protein-chitosan complex is not particularly limited, but is preferably 5 to 95% by mass, more preferably 10 to 90% by mass, and most preferably 30 to 70% by mass in the protein-chitosan complex.

蛋白質−キトサン複合体を構成するキトサンとしては、市販品及び試薬のいずれも使用することができるが、食用の観点で風味が良好で、かつ、着色が少ないものが好ましい。キトサンの市販品として、例えば和光純薬(株)社製の試薬:キトサン(分子量30kDa)等が挙げられる。 As the chitosan constituting the protein-chitosan complex, both commercially available products and reagents can be used, but those having a good flavor and little coloring are preferred from the viewpoint of edibleness. As a commercially available product of chitosan, for example, a reagent manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd .: chitosan (molecular weight 30 kDa) and the like can be mentioned.

蛋白質−キトサン複合体のキトサン含量は特に限定しないが、蛋白質−キトサン複合体中、好ましくは5〜95質量%、より好ましくは10〜90質量%、最も好ましくは30〜70質量%である。 The chitosan content of the protein-chitosan complex is not particularly limited, but is preferably 5 to 95% by mass, more preferably 10 to 90% by mass, and most preferably 30 to 70% by mass in the protein-chitosan complex.

蛋白質−キトサン複合体中の蛋白質とキトサンの質量比(蛋白質/キトサン)は、特に限定しないが、蛋白質中の抗原構造を効率的にマスクするために、好ましくは90/10〜40/60であり、より好ましくは60/40〜40/60であり、最も好ましくは50/50である。 The mass ratio of protein to chitosan in the protein-chitosan complex (protein / chitosan) is not particularly limited, but is preferably 90/10 to 40/60 in order to efficiently mask the antigen structure in the protein. More preferably, it is 60/40 to 40/60, and most preferably 50/50.

本発明の蛋白質−キトサン複合体の抗菌力は、大腸菌K−12に対する殺菌力を測定することにより確認することができる。大腸菌K−12の繁殖阻止率が高いほど、抗菌力が高いということが確認できる。
また、本発明の蛋白質−キトサン複合体の乳化力は、コーン油と水を、蛋白質−キトサン複合体で乳化することにより得られた乳化液を0.1%SDS溶液で希釈し、得られた希釈液の500nmにおける透過率の経時変化(透過率の低下の緩慢)により確認することができる。透過率の低下が緩慢であるほど、乳化機能が高い。
The antibacterial activity of the protein-chitosan complex of the present invention can be confirmed by measuring the bactericidal activity against Escherichia coli K-12. It can be confirmed that the higher the growth inhibition rate of E. coli K-12, the higher the antibacterial activity.
The emulsifying power of the protein-chitosan complex of the present invention was obtained by diluting an emulsion obtained by emulsifying corn oil and water with the protein-chitosan complex with a 0.1% SDS solution. This can be confirmed by the change over time in the transmittance of the diluted solution at 500 nm (slow decrease in transmittance). The slower the decrease in transmittance, the higher the emulsifying function.

次に、本発明の蛋白質−キトサン複合体の製造方法について説明する。
本発明の蛋白質−キトサン複合体は、蛋白質とキトサンをメイラード反応により結合させることにより製造することができる。このメイラード反応とは、アミノカルボニル反応とも言う。蛋白質及びキトサンとしては、先に説明したものが使用できる。さらに、全脂大豆や脱脂大豆等の大豆蛋白質を含有するものとキトサンとを原料にして、蛋白質とキトサンをメイラード反応により結合させることによっても製造することができる。
Next, a method for producing the protein-chitosan complex of the present invention will be described.
The protein-chitosan complex of the present invention can be produced by binding a protein and chitosan by Maillard reaction. This Maillard reaction is also called an aminocarbonyl reaction. As the protein and chitosan, those described above can be used. Furthermore, it can also manufacture by combining the protein and chitosan by Maillard reaction, using as raw materials what contains soybean protein such as full-fat soybean and defatted soybean.

まず、蛋白質/キトサンの質量比が、より好ましくは60/40〜40/60となる量の蛋白質及びキトサンを、水に混合溶解し、水溶液中の蛋白質及びキトサンの合計含量が5〜30質量%となるように調製する。得られた水溶液を凍結乾燥することにより粉末化する。得られた粉末を温度50〜80℃、より好ましくは55〜65℃、相対湿度50〜80%、より好ましくは60〜70%の条件下で、2〜20日、より好ましくは7〜14日、メイラード反応させることにより本発明の蛋白質−キトサン複合体を製造することができる。   First, protein and chitosan in an amount such that the mass ratio of protein / chitosan is more preferably 60/40 to 40/60 is mixed and dissolved in water, and the total content of protein and chitosan in the aqueous solution is 5 to 30% by mass. Prepare so that. The obtained aqueous solution is lyophilized to be powdered. The obtained powder is subjected to a temperature of 50 to 80 ° C., more preferably 55 to 65 ° C., a relative humidity of 50 to 80%, more preferably 60 to 70%, for 2 to 20 days, more preferably 7 to 14 days. The protein-chitosan complex of the present invention can be produced by a Maillard reaction.

本発明の蛋白質−キトサン複合体の生成は、SDS(Sodium dodecyl sulfate−polyacrylamide)電気泳動により得られるプレートを、染色処理したものにより、蛋白質−キトサン複合体である高分子物質の生成を確認することができる。   Production of the protein-chitosan complex of the present invention is confirmed by confirming the production of a high-molecular substance that is a protein-chitosan complex by staining a plate obtained by SDS (Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide) electrophoresis. Can do.

次に、本発明の抗菌用組成物について説明する。
本発明の抗菌用組成物は、先に説明した蛋白質−キトサン複合体を、抗菌力をより保持させるために、好ましくは10〜100質量%、より好ましくは30〜100質量%、最も好ましくは50〜100質量%含有するものである。
抗菌用組成物中の蛋白質−キトサン複合体以外の成分としては、デキストリン、レシチン等を使用することができる。
抗菌用組成物中の蛋白質−キトサン複合体以外の成分含量は、好ましくは0〜90質量%、より好ましくは0〜70質量%、最も好ましくは0〜50質量%である。
Next, the antibacterial composition of the present invention will be described.
The antibacterial composition of the present invention is preferably 10 to 100% by mass, more preferably 30 to 100% by mass, and most preferably 50, in order to further retain the antibacterial activity of the protein-chitosan complex described above. ˜100% by mass.
As components other than the protein-chitosan complex in the antibacterial composition, dextrin, lecithin and the like can be used.
The content of components other than the protein-chitosan complex in the antibacterial composition is preferably 0 to 90% by mass, more preferably 0 to 70% by mass, and most preferably 0 to 50% by mass.

本発明の抗菌用組成物の製造は、例えば、蛋白質−キトサン複合体を70質量%含有する抗菌用組成物の場合、蛋白質−キトサン複合体70質量%とデキストリン等の賦形剤30質量%をV型混合機で混合することにより製造することができる。 For example, in the case of an antibacterial composition containing 70% by mass of a protein-chitosan complex, 70% by mass of the protein-chitosan complex and 30% by mass of an excipient such as dextrin can be produced. It can be manufactured by mixing with a V-type mixer.

本発明の抗菌用組成物は、飲食物及び化粧料に使用することができる。
本発明の抗菌用組成物は、大腸菌、カビ・酵母に対して、抗菌力を有する。したがって飲食物及び化粧料に抗菌の目的で使用することができる。
本発明の抗菌用組成物の飲食物への添加量は、添加後の飲食物中の蛋白質−キトサン複合体含量が、好ましくは0.01〜10質量%、より好ましくは0.01〜5質量%、最も好ましくは0.01〜1質量%である。
The antibacterial composition of the present invention can be used for food and drink and cosmetics.
The antibacterial composition of the present invention has antibacterial activity against Escherichia coli and mold / yeast. Therefore, it can be used for food and drink and cosmetics for antibacterial purposes.
The amount of the antibacterial composition of the present invention added to food or drink is such that the protein-chitosan complex content in the food or drink after addition is preferably 0.01 to 10% by mass, more preferably 0.01 to 5% by mass. %, Most preferably 0.01 to 1% by mass.

飲食物として、例えば、クッキー、スナック菓子、ケーキ、パン、麺等の小麦粉製品、ドレッシング、マヨネーズ等の調味料、ちくわ、かまぼこ等の魚肉練り製品、ハム、ソーセージ、ハンバーグ等の畜肉製品、おにぎり、べんとう、乳酸発酵飲料、栄養ドリンク、ジュース、コーヒー、お茶、デザート類等が挙げられる。   As food and drink, for example, flour products such as cookies, snacks, cakes, bread and noodles, seasonings such as dressing and mayonnaise, fish paste products such as chikuwa and kamaboko, livestock products such as ham, sausage and hamburger, rice balls and rice Examples include lactic acid fermented beverages, energy drinks, juices, coffee, tea, and desserts.

また、本発明の抗菌用組成物の化粧料への添加量は、添加後の化粧料中の蛋白質−キトサン複合体含量が、好ましくは0.01〜10質量%、より好ましくは0.01〜5質量%、最も好ましくは0.01〜1質量%である。   The amount of the antibacterial composition of the present invention added to the cosmetic is such that the protein-chitosan complex content in the cosmetic after the addition is preferably 0.01 to 10% by mass, more preferably 0.01 to 5 mass%, most preferably 0.01-1 mass%.

化粧料として、例えば、ファンデーション、ローション、乳液、口紅、頭髪料、養毛剤、シャンプー、リンス等が挙げられる。   Examples of cosmetics include foundations, lotions, emulsions, lipsticks, hair preparations, hair nourishing agents, shampoos, rinses, and the like.

次に、本発明の乳化用組成物について説明する。
本発明の乳化用組成物は、先に説明した蛋白質−キトサン複合体を、より高い乳化機能を保持させるために、好ましくは10〜100質量%、より好ましくは30〜100質量%、最も好ましくは50〜100質量%含有するものである。
乳化用組成物中の蛋白質−キトサン複合体以外の成分としては、グリセリン脂肪酸モノエステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、レシチン等の乳化剤や、デキストリン、澱粉等の賦形剤を使用することができる。
乳化用組成物中の蛋白質−キトサン複合体以外の成分含量は、好ましくは0〜90質量%、より好ましくは0〜70質量%、最も好ましくは0〜50質量%である。
Next, the emulsifying composition of the present invention will be described.
The emulsifying composition of the present invention is preferably 10 to 100% by mass, more preferably 30 to 100% by mass, most preferably the protein-chitosan complex described above in order to maintain a higher emulsifying function. It contains 50 to 100% by mass.
As components other than the protein-chitosan complex in the emulsifying composition, emulsifiers such as glycerin fatty acid monoester, polyglycerin fatty acid ester, sucrose fatty acid ester, and lecithin, and excipients such as dextrin and starch are used. Can do.
The content of components other than the protein-chitosan complex in the emulsifying composition is preferably 0 to 90% by mass, more preferably 0 to 70% by mass, and most preferably 0 to 50% by mass.

本発明の乳化用組成物の製造は、例えば、蛋白質−キトサン複合体を70質量%含有する乳化用組成物の場合、蛋白質−キトサン複合体70質量%とデキストリン30質量%を水に分散して、固形分10質量%の水溶液とし、得られた水溶液をスプレードライ(温度80℃)で乾燥することにより製造することができる。 For example, in the case of an emulsifying composition containing 70% by mass of a protein-chitosan complex, 70% by mass of the protein-chitosan complex and 30% by mass of dextrin are dispersed in water. It can be produced by preparing an aqueous solution with a solid content of 10% by mass and drying the resulting aqueous solution by spray drying (temperature 80 ° C.).

本発明の乳化用組成物は、飲食物及び化粧料に使用することができる。
本発明の乳化用組成物の飲食物への添加量は、添加後の飲食物中の蛋白質−キトサン複合体含量が、好ましくは0.01〜10質量%、より好ましくは0.01〜5質量%、最も好ましくは0.01〜1質量%である。
The composition for emulsification of the present invention can be used for food and drink and cosmetics.
The amount of the emulsifying composition of the present invention added to food or drink is such that the protein-chitosan complex content in the food or drink after addition is preferably 0.01 to 10% by mass, more preferably 0.01 to 5% by mass. %, Most preferably 0.01 to 1% by mass.

飲食物として、例えば、クッキー、スナック菓子、ケーキ、パン、麺等の小麦粉製品、ドレッシング、マヨネーズ等の調味料、ちくわ、かまぼこ等の魚肉練り製品、ハム、ソーセージ、ハンバーグ等の畜肉製品、おにぎり、べんとう、乳酸発酵飲料、栄養ドリンク、ジュース、コーヒー、お茶、デザート類等が挙げられる。   As food and drink, for example, flour products such as cookies, snacks, cakes, bread and noodles, seasonings such as dressing and mayonnaise, fish paste products such as chikuwa and kamaboko, livestock products such as ham, sausage and hamburger, rice balls and rice Examples include lactic acid fermented beverages, energy drinks, juices, coffee, tea, and desserts.

また、本発明の乳化用組成物の化粧料への添加量は、添加後の化粧料中の蛋白質−キトサン複合体含量が、好ましくは0.01〜10質量%、より好ましくは0.01〜5質量%、最も好ましくは0.01〜1質量%である。   The amount of the emulsifying composition of the present invention added to the cosmetic is such that the protein-chitosan complex content in the cosmetic after the addition is preferably 0.01 to 10% by mass, more preferably 0.01 to 5 mass%, most preferably 0.01-1 mass%.

化粧料として、例えば、ファンデーション、ローション、乳液、口紅、頭髪料、養毛剤、シャンプー、リンス等が挙げられる。   Examples of cosmetics include foundations, lotions, emulsions, lipsticks, hair preparations, hair nourishing agents, shampoos, rinses, and the like.

以下、実施例により本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。   EXAMPLES Hereinafter, although an Example demonstrates this invention further in detail, this invention is not limited to these.

製造例1〔蛋白質−キトサン複合体に用いる分離大豆蛋白質の調製〕
丸大豆から油分を除去した脱脂大豆(IPハンドリング品)100gを0.03MTris塩酸バッファー(pH8)2Lに1時間浸漬した後、遠心分離で沈殿物を除去して上清液を回収した。回収した上清液を、2N塩酸を用いてpH4.8にした後、遠心分離処理(条件1,000rpm)をして、沈殿物を回収した。得られた沈殿物50gを蒸留水500gに溶解させて、1N水酸化ナトリウムを用いてpH8に調整した後凍結乾燥処理することにより、粉末状の分離大豆蛋白質15gを得た。
Production Example 1 [Preparation of Isolated Soy Protein Used for Protein-Chitosan Complex]
After 100 g of defatted soybean (IP handling product) from which oil was removed from the whole soybean was immersed in 2 L of 0.03 M Tris hydrochloric acid buffer (pH 8) for 1 hour, the precipitate was removed by centrifugation and the supernatant was recovered. The collected supernatant was adjusted to pH 4.8 using 2N hydrochloric acid, and then centrifuged (condition: 1,000 rpm) to collect a precipitate. 50 g of the resulting precipitate was dissolved in 500 g of distilled water, adjusted to pH 8 using 1N sodium hydroxide, and then freeze-dried to obtain 15 g of powdered isolated soybean protein.

製造実施例1〔蛋白質−キトサン複合体の製造〕
製造例1で得られた分離大豆蛋白質5gとキトサン(和光純薬(株)製、試薬、分子量:30kDa)5gを混合(混合質量比1:1)した後、水溶液中の分離大豆蛋白質及びキトサンの含有量が10質量%になるように蒸留水に溶解させた後、凍結乾燥処理により粉末を得た。この粉末を相対湿度65%(飽和ヨウ化カリウムで調整)の条件下、60℃で3日間、7日間又は14日間加熱を行い、蛋白質−キトサン複合体をそれぞれ3.3gずつ(3日間反応品、7日間反応品、14日間反応品)得た。
Production Example 1 [Production of protein-chitosan complex]
5 g of the separated soy protein obtained in Production Example 1 and 5 g of chitosan (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd., reagent, molecular weight: 30 kDa) were mixed (mixing mass ratio 1: 1), and then the separated soy protein and chitosan in an aqueous solution were mixed. After being dissolved in distilled water so that the content of was 10% by mass, powder was obtained by freeze-drying treatment. This powder was heated at 60 ° C. for 3 days, 7 days or 14 days under conditions of relative humidity of 65% (adjusted with saturated potassium iodide), and 3.3 g each of protein-chitosan complex (reacted product for 3 days). , Reaction product for 7 days, reaction product for 14 days).

製造比較例1〔蛋白質−ガラクトマンナン複合体の製造〕
製造例1で得られた分離大豆蛋白質5gとガラクトマンナン(グアガム酵素分解物で平均分子量15kDa)5gを混合(混合質量比1:1)した後、水溶液中の分離大豆蛋白質及びガラクトマンナンの含有量が10質量%になるように蒸留水に溶解させた後、凍結乾燥処理により粉末を得た。この粉末を相対湿度65%(飽和ヨウ化カリウムで調整)の条件条件下、60℃で7日間又は14日間加熱を行い、蛋白質−ガラクトマンナン複合体をそれぞれ5gずつ(7日間反応品、14日間反応品)得た。
Production Comparative Example 1 [Production of protein-galactomannan complex]
5 g of the separated soy protein obtained in Production Example 1 and 5 g of galactomannan (guar gum enzymatic degradation product with an average molecular weight of 15 kDa) are mixed (mixing mass ratio 1: 1), and then the content of the separated soy protein and galactomannan in the aqueous solution Was dissolved in distilled water so as to be 10% by mass, and then a powder was obtained by freeze-drying. This powder was heated at 60 ° C. for 7 days or 14 days under the condition of relative humidity 65% (adjusted with saturated potassium iodide), and 5 g each of protein-galactomannan complex (7-day reaction product, 14 days) Reaction product).

〔蛋白質−ガラクトマンナン複合体、又は蛋白質−キトサン複合体の生成確認試験〕
蛋白質−ガラクトマンナン複合体、又は蛋白質−キトサン複合体を、1%SDS(Sodium dodecyl sulfate−polyacrylamide)を含有するトリグリシンバッファー(pH8.8)に溶解させ、複合体を0.2質量%に調製したサンプルを、Laemmliの方法に基づきSDS電気泳動で分子量分布を測定した。SDS電気泳動は、10mAの電流で1時間行い、その後20mAで2時間行った。その後、泳動させたプレートを、0.2%Coomassie brilliant blue-R250溶液を噴霧することにより染色した。高分子物質のスポットが出現したことにより蛋白質−ガラクトマンナン複合体、又は蛋白質−キトサン複合体の生成を確認した。
[Production confirmation test of protein-galactomannan complex or protein-chitosan complex]
A protein-galactomannan complex or protein-chitosan complex is dissolved in a triglycine buffer (pH 8.8) containing 1% SDS (Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide) to prepare a complex at 0.2% by mass. The molecular weight distribution of the prepared samples was measured by SDS electrophoresis based on the Laemmli method. SDS electrophoresis was performed at a current of 10 mA for 1 hour and then at 20 mA for 2 hours. Thereafter, the electrophoretic plate was stained by spraying with a 0.2% Coomassie brilliant blue-R250 solution. Formation of a protein-galactomannan complex or a protein-chitosan complex was confirmed by the appearance of a spot of a polymer substance.

実施例1〔蛋白質−キトサン複合体の生成確認〕
製造実施例1で得られた蛋白質−キトサン複合体の生成をSDS電気泳動法により確認した。染色させたスポットのパターン図を図1に示す。図1のAPP−CTのパターン図から、反応前のスポットと比較して、1週間及び2週間反応後のスポットが高分子側に移行していることが示されていることから、7日間及び14日間反応させたものについて、蛋白質−キトサン複合体が生成されていることが確認できた。
Example 1 [Confirmation of production of protein-chitosan complex]
Production of the protein-chitosan complex obtained in Production Example 1 was confirmed by SDS electrophoresis. A pattern diagram of the stained spots is shown in FIG. The pattern diagram of APP-CT in FIG. 1 shows that the spots after the reaction for 1 week and 2 weeks have shifted to the polymer side compared to the spots before the reaction. About what was made to react for 14 days, it has confirmed that the protein-chitosan complex was produced | generated.

比較例1〔蛋白質−ガラクトマンナン複合体の生成確認〕
製造比較例1で得られた蛋白質−ガラクトマンナン複合体の生成をSDS電気泳動により確認した。染色させたスポットのパターン図を図1に示す。図1のAPP−CTのパターン図から、反応前のスポットと比較して、1週間及び2週間反応後のスポットが高分子側に移行していることが示されていることから、7日間及び14日間反応させたものについて、蛋白質−ガラクトマンナン複合体が生成されていることが確認できた。
Comparative Example 1 [Confirmation of production of protein-galactomannan complex]
Production of the protein-galactomannan complex obtained in Production Comparative Example 1 was confirmed by SDS electrophoresis. A pattern diagram of the stained spots is shown in FIG. The pattern diagram of APP-CT in FIG. 1 shows that the spots after the reaction for 1 week and 2 weeks have shifted to the polymer side compared to the spots before the reaction. It was confirmed that a protein-galactomannan complex was produced from the reaction for 14 days.

〔蛋白質−キトサン複合体、及び蛋白質−ガラクトマンナン複合体の評価方法〕
以下に示す抗菌性評価、乳化性評価、及び抗原構造のマスク評価により、蛋白質−キトサン複合体、及び蛋白質−ガラクトマンナン複合体を評価した。
[Method for evaluating protein-chitosan complex and protein-galactomannan complex]
The protein-chitosan complex and the protein-galactomannan complex were evaluated by antibacterial property evaluation, emulsification property evaluation, and antigen structure mask evaluation described below.

1.抗菌性評価
抗菌性の測定には大腸菌K−12株を用いる。これをLB(Luria−Bertani)培地で10時間培養した後に20mMのリン酸バッファー(pH7)で1,000倍希釈した。蛋白質−キトサン複合体を20mMのリン酸バッファー(pH7)に50μg/mlとなるように溶解し、蛋白質−キトサン複合体のサンプル溶液を調製した。その後、大腸菌K−12株の1,000倍希釈液4.5mlに対し抗菌性を測定する蛋白質−キトサン複合体のサンプル溶液(濃度50μg/ml)0.5mlを混合し20℃又は37℃で30分間培養した。そして、この培養液100μlを分取して寒天培地上に広げた。さらに、この寒天培地を37℃で一晩培養後、コロニー数を数え、コロニー数が少なかったものほど大腸菌K−12株の繁殖阻止率が高く、抗菌力があると評価した。
1. Evaluation of antibacterial properties E. coli K-12 is used for the measurement of antibacterial properties. This was cultured in LB (Luria-Bertani) medium for 10 hours, and then diluted 1,000 times with 20 mM phosphate buffer (pH 7). The protein-chitosan complex was dissolved in 20 mM phosphate buffer (pH 7) to a concentration of 50 μg / ml to prepare a sample solution of the protein-chitosan complex. Thereafter, 0.5 ml of a protein-chitosan complex sample solution (concentration 50 μg / ml) for measuring antibacterial activity is mixed with 4.5 ml of a 1,000-fold diluted solution of Escherichia coli K-12 strain at 20 ° C. or 37 ° C. Incubated for 30 minutes. And 100 microliters of this culture solution was fractionated and spread on the agar medium. Furthermore, after this agar medium was cultured at 37 ° C. overnight, the number of colonies was counted, and the smaller the number of colonies, the higher the inhibition rate of the Escherichia coli K-12 strain and the antibacterial activity.

2.乳化性評価
まず、1.0mlのコーン油と蛋白質−キトサン複合体を0.1Mリン酸バッファーに溶解して0.2質量%とした溶液3.0mlを、混合し12,000rpmで1分間ホモジェナイズした。その後、この乳化液50μlを0.1%SDS溶液で希釈して5mlとした。この希釈液の500nmの混合直後(0分後)、1分後、2分後、5分後、10分後における透過率を測定した。透過率の低下が緩慢であるほど、乳化機能が高いと評価した。
2. Evaluation of emulsification First, 3.0 ml of a solution prepared by dissolving 1.0 ml of corn oil and protein-chitosan complex in 0.1 M phosphate buffer to make 0.2% by mass was mixed and homogenized at 12,000 rpm for 1 minute. did. Thereafter, 50 μl of this emulsion was diluted with 0.1% SDS solution to make 5 ml. The transmittance of this diluted solution was measured immediately after mixing at 500 nm (after 0 minute), 1 minute, 2 minutes, 5 minutes, and 10 minutes. The slower the decrease in transmittance, the higher the emulsifying function.

3.抗原構造のマスク評価
Western blotting法により蛋白質中の34kDa蛋白質のマスク評価を行った。
3. Mask evaluation of antigen structure
Mask evaluation of 34 kDa protein in protein was performed by Western blotting method.

実施例2〔蛋白質−キトサン複合体の抗菌性評価〕
製造実施例1で14日間反応により得られた蛋白質−キトサン複合体の抗菌性評価結果を図2に示す。その結果、蛋白質−キトサン複合体は、複合化前の蛋白質とキトサン混合物に比べて、20℃及び37℃の両方において、抗菌性が2〜3倍増加することが確認された。
Example 2 [Antimicrobial evaluation of protein-chitosan complex]
The antibacterial evaluation results of the protein-chitosan complex obtained by the reaction in Production Example 1 for 14 days are shown in FIG. As a result, it was confirmed that the antibacterial activity of the protein-chitosan complex was increased by 2-3 times at both 20 ° C. and 37 ° C., compared to the protein and chitosan mixture before complexation.

実施例3〔蛋白質−キトサン複合体の乳化性評価〕
製造実施例1で3日間、7日間又は14日間反応により得られた蛋白質−キトサン複合体の乳化性評価結果を図3に示す。この結果より蛋白質−キトサン複合体は、複合化前の蛋白質とキトサン混合物に比べて乳化性が向上していることがわかった。
Example 3 [Emulsification evaluation of protein-chitosan complex]
FIG. 3 shows the results of evaluating the emulsifiability of the protein-chitosan complex obtained by the reaction in Production Example 1 for 3 days, 7 days, or 14 days. From this result, it was found that the protein-chitosan complex has improved emulsifying properties as compared with the protein-chitosan mixture before complexing.

実施例4〔蛋白質−キトサン複合体中の抗原構造のマスク確認〕
製造実施例1で14日間反応により得られた蛋白質−キトサン複合体中の抗原構造のマスクについて、Western blotting法により調べた。得られたパターン図を図4に示す。パターン図には、大豆蛋白質−キトサン複合体(7、8)では、(Gly m Bd 30K)に該当するスポットが現れていないことから、大豆蛋白質中のアレルギー物質である34kDa蛋白質(Gly m Bd 30K)構造のほとんどがマスクされていることが確認された。
Example 4 [Mask confirmation of antigen structure in protein-chitosan complex]
The mask of the antigen structure in the protein-chitosan complex obtained by the reaction in Production Example 1 for 14 days was examined by Western blotting. The resulting pattern diagram is shown in FIG. In the pattern diagram, in the soy protein-chitosan complex (7, 8), a spot corresponding to (Gly m Bd 30K) does not appear. ) It was confirmed that most of the structure was masked.

比較例2〔蛋白質−ガラクトマンナン複合体中の抗原構造のマスク確認〕
製造比較例1で7日間又は14日間の反応により得られた蛋白質−ガラクトマンナン複合体中の抗原構造のマスクについて、Western blotting法により調べた。得られたパターン図を図4に示す。パターン図からは、大豆蛋白質−ガラクトマンナン複合体(3、4、5、6)では、(Gly m Bd 30K)に該当するスポットが現れていることから、34kDa蛋白質(Gly m Bd 30K)構造がほとんどマスクされていないことが確認された。
Comparative Example 2 [Confirmation of antigen structure mask in protein-galactomannan complex]
The mask of the antigen structure in the protein-galactomannan complex obtained by the reaction in Production Comparative Example 1 for 7 days or 14 days was examined by Western blotting method. The resulting pattern diagram is shown in FIG. From the pattern diagram, in the soy protein-galactomannan complex (3, 4, 5, 6), spots corresponding to (Gly m Bd 30K) appear, so the structure of 34 kDa protein (Gly m Bd 30K) is It was confirmed that there was almost no mask.

本発明の蛋白質−キトサン複合体は、抗菌性を有し、乳化機能性に優れ、かつ蛋白質中の抗原構造がマスクされたものであるため、広く食品及び化粧料の分野に使用することができる。   The protein-chitosan complex of the present invention has antibacterial properties, is excellent in emulsifying functionality, and has a masked antigen structure in the protein, so that it can be widely used in the fields of food and cosmetics. .

大豆蛋白質、大豆蛋白質−ガラクトマンナン複合体、及び大豆蛋白質−キトサン複合体(未反応、7日間反応、14日間反応)の生成をSDS電気泳動法により確認した染色スポットのパターン図である。縦軸は、分子量を示す。(実施例1、比較例1)It is the pattern figure of the staining spot which confirmed the production | generation of the soybean protein, the soybean protein-galactomannan complex, and the soybean protein-chitosan complex (unreacted, 7-day reaction, 14-day reaction) by SDS electrophoresis. The vertical axis represents the molecular weight. (Example 1, Comparative Example 1) 大豆蛋白質とキトサンの混合物、及び大豆蛋白質−キトサン複合体(14日間反応)の抗菌性評価結果のグラフ図である。縦軸は、大腸菌K12の繁殖阻止率(%)を示す。(実施例2)It is a graph of the antibacterial evaluation result of a mixture of soy protein and chitosan, and a soy protein-chitosan complex (reaction for 14 days). The vertical axis represents the growth inhibition rate (%) of E. coli K12. (Example 2) 大豆蛋白質とキトサンの混合物、及び大豆蛋白質とキトサンを反応させることにより得られた大豆蛋白質−キトサン複合体(3日間反応、7日間反応、14日間反応)の乳化評価結果のグラフ図である。縦軸は、乳化懸濁液の0.1%SDS溶液希釈液の500nmにおける透過率(%)を示す。(実施例3)It is a graph of the emulsification evaluation result of the mixture of soy protein and chitosan, and the soy protein-chitosan complex (3 day reaction, 7 day reaction, 14 day reaction) obtained by reacting soy protein and chitosan. The vertical axis represents the transmittance (%) at 500 nm of the 0.1% SDS solution dilution of the emulsion suspension. Example 3 大豆蛋白質、大豆蛋白質−ガラクトマンナン複合体(7日間反応、14日間反応)、及び大豆蛋白質−キトサン複合体(14日間反応)の生成を確認したWestern blotting法によるパターン図である。縦軸は、分子量を示す。(実施例4、比較例2)It is a pattern figure by Western blotting method which confirmed the production | generation of a soybean protein, a soybean protein-galactomannan complex (7-day reaction, 14-day reaction), and a soybean protein-chitosan complex (14-day reaction). The vertical axis represents the molecular weight. (Example 4, Comparative Example 2)

Claims (19)

蛋白質とキトサンを結合させた蛋白質−キトサン複合体。 A protein-chitosan complex in which a protein and chitosan are combined. 蛋白質とキトサンを、メイラード反応により結合させた蛋白質−キトサン複合体。 A protein-chitosan complex in which a protein and chitosan are combined by Maillard reaction. 前記蛋白質が、植物性蛋白質であることを特徴とする請求項1又は2に記載の蛋白質−キトサン複合体。 The protein-chitosan complex according to claim 1 or 2, wherein the protein is a vegetable protein. 前記植物性蛋白質が、大豆蛋白質であることを特徴とする請求項3に記載の蛋白質−キトサン複合体。 The protein-chitosan complex according to claim 3, wherein the vegetable protein is soybean protein. 前記植物性大豆蛋白質が、分離大豆蛋白質であることを特徴とする請求項4に記載の蛋白質−キトサン複合体。 The protein-chitosan complex according to claim 4, wherein the vegetable soybean protein is a separated soybean protein. 前記植物性大豆蛋白質が、大豆蛋白質分解物であることを特徴とする請求項4に記載の蛋白質−キトサン複合体。 The protein-chitosan complex according to claim 4, wherein the vegetable soybean protein is a soybean protein degradation product. 蛋白質中の抗原構造がマスクされていることを特徴とする請求項1〜6のいずれか1項に記載の蛋白質−キトサン複合体。 The protein-chitosan complex according to any one of claims 1 to 6, wherein an antigen structure in the protein is masked. 前記蛋白質中の抗原が、34kDa蛋白質(Gly m Bd 30K)であることを特徴とする請求項7に記載の蛋白質−キトサン複合体。 The protein-chitosan complex according to claim 7, wherein an antigen in the protein is a 34 kDa protein (Gly m Bd 30K). 請求項1〜8のいずれか1項に記載の蛋白質−キトサン複合体を含有する抗菌用組成物。 The antibacterial composition containing the protein-chitosan complex of any one of Claims 1-8. 請求項1〜8のいずれか1項に記載の蛋白質−キトサン複合体を含有する乳化用組成物。 The composition for emulsification containing the protein-chitosan complex of any one of Claims 1-8. 請求項1〜8のいずれか1項に記載の蛋白質−キトサン複合体を含有する飲食物。 A food or drink containing the protein-chitosan complex according to any one of claims 1 to 8. 請求項1〜8のいずれか1項に記載の蛋白質−キトサン複合体を含有する化粧料。 Cosmetics containing the protein-chitosan complex of any one of Claims 1-8. 蛋白質とキトサンを、メイラード反応により結合させることを特徴する蛋白質−キトサン複合体の製造方法。 A method for producing a protein-chitosan complex, which comprises binding a protein and chitosan by Maillard reaction. 前記蛋白質が、分離大豆蛋白質であることを特徴とする請求項13に記載の蛋白質−キトサン複合体の製造方法。 The method for producing a protein-chitosan complex according to claim 13, wherein the protein is isolated soybean protein. 前記蛋白質が、大豆蛋白質分解物であることを特徴とする請求項14に記載の蛋白質−キトサン複合体の製造方法。 The method for producing a protein-chitosan complex according to claim 14, wherein the protein is a soybean protein degradation product. 蛋白質とキトサンを、メイラード反応により結合させる処理を行うことにより、蛋白質中の抗原構造をマスクする方法。 A method of masking the antigen structure in a protein by performing a treatment for binding the protein and chitosan by Maillard reaction. 前記蛋白質が、分離大豆蛋白質であることを特徴とする請求項16に記載の蛋白質中の抗原構造をマスクする方法。 The method for masking an antigen structure in a protein according to claim 16, wherein the protein is a separated soybean protein. 前記蛋白質が、大豆蛋白質分解物であることを特徴とする請求項17に記載の蛋白質中の抗原構造をマスクする方法。 The method for masking an antigen structure in a protein according to claim 17, wherein the protein is a soybean protein degradation product. 全脂大豆及び/又は脱脂大豆と、キトサンとを原料として、蛋白質とキトサンをメイラード反応により結合させることを特徴する蛋白質−キトサン複合体の製造方法。
A method for producing a protein-chitosan complex characterized in that protein and chitosan are combined by Maillard reaction using full-fat soybean and / or defatted soybean and chitosan as raw materials.
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Cited By (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005120541A1 (en) * 2004-06-11 2005-12-22 Hiroki Saeki Process for producing protein having its antihypertensive activity enhanced
JP2009507514A (en) * 2005-09-14 2009-02-26 キム,ジン−マン Supplementary food composition for reducing body odor
WO2009084529A1 (en) 2007-12-27 2009-07-09 Fuji Oil Company, Limited Novel soybean protein material and method for producing the same
WO2010110269A1 (en) * 2009-03-26 2010-09-30 キッコーマン株式会社 Browning reaction product and fat-based food
US8370750B2 (en) 2007-04-06 2013-02-05 International Business Machines Corporation Technology for generating service program
KR101433362B1 (en) 2013-02-04 2014-08-26 한국식품연구원 Composition for immunological enhancement comprising glycoprotein produced by Maillard reaction between alpha-lactalbumin and dextran
CN107410825A (en) * 2017-04-25 2017-12-01 温州科技职业学院 A kind of composite natral bacteriostatic agent and its preparation method and application
CN109770333A (en) * 2019-03-18 2019-05-21 青岛农业大学 A kind of alcohol soluble protein zymolyte nanoparticle and its preparation method and application of modification of chitosan modification
US10729779B2 (en) 2015-08-31 2020-08-04 Wako Filter Technology Co., Ltd. Composition having antifungal activity
CN112514945A (en) * 2019-09-18 2021-03-19 南京农业大学 Production technology of wheat bran-based polysaccharide-protein composite emulsifier for improving quality of fermented wheaten food
CN114716710A (en) * 2022-03-21 2022-07-08 江南大学 Method for improving physical property and oxidation resistance of chitosan film
CN116114789A (en) * 2023-03-06 2023-05-16 佛山科学技术学院 Preparation method of polysaccharide type ternary natural eutectic solvent protein with high emulsifying property

Cited By (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005120541A1 (en) * 2004-06-11 2005-12-22 Hiroki Saeki Process for producing protein having its antihypertensive activity enhanced
JP2009507514A (en) * 2005-09-14 2009-02-26 キム,ジン−マン Supplementary food composition for reducing body odor
US8370750B2 (en) 2007-04-06 2013-02-05 International Business Machines Corporation Technology for generating service program
WO2009084529A1 (en) 2007-12-27 2009-07-09 Fuji Oil Company, Limited Novel soybean protein material and method for producing the same
WO2010110269A1 (en) * 2009-03-26 2010-09-30 キッコーマン株式会社 Browning reaction product and fat-based food
JPWO2010110269A1 (en) * 2009-03-26 2012-09-27 キッコーマン株式会社 Browning reaction product and oil and fat food
JP5734839B2 (en) * 2009-03-26 2015-06-17 キッコーマン株式会社 Emulsifier, oil and fat food and method for producing oil and fat food
KR101433362B1 (en) 2013-02-04 2014-08-26 한국식품연구원 Composition for immunological enhancement comprising glycoprotein produced by Maillard reaction between alpha-lactalbumin and dextran
US11344625B2 (en) 2015-08-31 2022-05-31 Wako Filter Technology Co., Ltd. Compositions having antifungal activity
US10729779B2 (en) 2015-08-31 2020-08-04 Wako Filter Technology Co., Ltd. Composition having antifungal activity
CN107410825A (en) * 2017-04-25 2017-12-01 温州科技职业学院 A kind of composite natral bacteriostatic agent and its preparation method and application
CN109770333A (en) * 2019-03-18 2019-05-21 青岛农业大学 A kind of alcohol soluble protein zymolyte nanoparticle and its preparation method and application of modification of chitosan modification
CN109770333B (en) * 2019-03-18 2022-10-14 青岛农业大学 Modified chitosan modified alcohol soluble protein zymolyte nano particle and preparation method and application thereof
CN112514945A (en) * 2019-09-18 2021-03-19 南京农业大学 Production technology of wheat bran-based polysaccharide-protein composite emulsifier for improving quality of fermented wheaten food
CN114716710A (en) * 2022-03-21 2022-07-08 江南大学 Method for improving physical property and oxidation resistance of chitosan film
CN116114789A (en) * 2023-03-06 2023-05-16 佛山科学技术学院 Preparation method of polysaccharide type ternary natural eutectic solvent protein with high emulsifying property

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