JP2004517889A - Synthesis and antibacterial activity of a novel dicationic "reverse amidine" - Google Patents

Abstract

［式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３ および Ｒ_４ はＨ、アルキル、アルコキシ、ハライド、および アルキルハライド基からなる群からそれぞれ独立して選択され、 Ｒ_５ はＨ、アルキル またはアリールであり、Ｒ_６ は Ｈ、アルキル、アリール、または ＮＲ_７Ｒ_８であり、ここで、Ｒ_７ および Ｒ_８ はＨ、アルキル および アリールからなる群からそれぞれ独立して選択され、 Ｘ は Ｏ、Ｓ または ＮＲ_９であり、ここで、Ｒ_９ は Ｈ または アルキルである］
の新規２，５−ビス｛［アルキル（またはアリール）イミノ］アミノフェニル｝フラン および チオフェン、ならびにその化合物の使用に関する。The present invention provides a compound represented by the general formula (I):
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Wherein R ₁ , R ₂ , R ₃ and R ₄ are each independently selected from the group consisting of H, alkyl, alkoxy, halide and alkyl halide groups; R ₅ is H, alkyl or aryl; R ₆ is H, alkyl, aryl, or NR ₇ R ₈ , wherein R ₇ and R ₈ are each independently selected from the group consisting of H, alkyl and aryl, and X is O, S or NR ₉ Wherein R ₉ is H or alkyl.
New 2,5-bis {[alkyl (or aryl) imino] aminophenyl} furans and thiophenes, and the use of such compounds.

Description

［式中、
Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３ および Ｒ_４ は、Ｈ、アルキル、アルコキシ、ハライド、および アルキルハライド基からなる群からそれぞれ独立して選択され、
Ｒ_５ は、Ｈ、アルキル またはアリールであり、
Ｒ_６ は、 Ｈ、アルキル、アリール、または ＮＲ_７Ｒ_８であり、ここで、 Ｒ_７ および Ｒ_８ は、Ｈ、アルキル および アリールからなる群からそれぞれ独立して選択され、Ｘ は、Ｏ、Ｓ または ＮＲ_９であり、ここで、Ｒ_９ は、Ｈ または アルキルである］
の構造を有する。
【００１４】
本発明の更なる態様には、医薬的に許容される担体中に、式 Ｉまたはその医薬的塩の構造を有する化合物（すなわち、「活性化合物」）を含む医薬組成物を含む。本発明の医薬組成物は、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｓｐｐ．、Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｓｐｐ．、Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ ｐａｒｖｕｍ、Ｇｉａｒｄｉａ ｌａｍｂｌｉａ、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｓｐｐ．、Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ ｃａｒｉｎｉｉ、Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｇｏｎｄｉｉ、 Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｏｌａｎｉ、および Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓにより生ずる微生物感染症の処置に有用である。
【００１５】
本発明の特定の態様は、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｓｐｐ．、Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｓｐｐ．、Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ ｐａｒｖｕｍ、Ｇｉａｒｄｉａ ｌａｍｂｌｉａ、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｓｐｐ．、Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ ｃａｒｉｎｉｉ、Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｇｏｎｄｉｉ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｏｌａｎｉ、および Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓにより生ずる微生物感染症の処置であって、その処置を必要とする対象における当該処置方法に関する。当該方法は、微生物感染症の処置に有効な量の式 （Ｉ）または医薬的に許容されるその塩の化合物を当該対象に投与することを含む。
【００１６】
本発明の更なる態様は、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｓｐｐ．、Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｓｐｐ．、Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ ｐａｒｖｕｍ、Ｇｉａｒｄｉａ ｌａｍｂｌｉａ、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｓｐｐ．、Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ ｃａｒｉｎｉｉ、Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｇｏｎｄｉｉ、 Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｏｌａｎｉ、および Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓにより生ずる微生物感染症の処置であって、その処置を必要とする対象に行う処置のための医薬の製造のための、本明細書で述べた活性化合物の使用である。
【００１７】
前述および本発明の他の態様は、以下に示す明細書中で詳細に解説する。
【００１８】
図面の簡単な説明
図１は、本発明の化合物の合成に有用となり得る種々の化学スキームを示している。
【００１９】
本発明の詳細な説明
本発明は、添付の明細書および図面（本発明の好ましい実施態様を示す）の引用により以下でより十分に述べる。しかし、本発明は、多くの種々の形態で具体化され得、本明細書で開示の実施態様に限定して構成されるものではない。むしろ、これらの実施態様は、開示を完全（ｔｈｏｒｏｕｇｈ ａｎｄ ｃｏｍｐｌｅｔｅ）なものとし、当業者に対し本発明の範囲を完全に示すために、提供している。
【００２０】
本明細書の本発明の詳細な説明で使用した専門用語は、特定の態様のみを述べることを目的とし、本発明を制限することを目的とするものではない。本発明の詳細な説明および添付の特許請求の範囲で使用する、単数形は、明細書中で明確に否定しない限り、更に複数形を含めることを意図している。
【００２１】
他に定義しない限り、本明細書で使用するすべての技術的および科学的用語は、本発明が属する分野の当業者が通常理解する意味と同じ意味を有する。すべての刊行物、特許出願、特許および本明細書で述べる他の引用文献は、すべて引用により本明細書に含める。
【００２２】
本明細書で使用する式の化合物に関し、用語「アルキル」は、Ｃ１−１０を含む、直鎖状、分枝状、または環状、飽和または不飽和（すなわち、アルケニル および アルキニル）炭化水素鎖を意味し、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、オクチル、エテニル、プロペニル、ブテニル、ペンテニル、ヘキセニル、オクテニル、ブタジエニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、ヘキシニル、ヘプチニル、および アレニル基である。用語「アルキル」は、本明細書で、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、および シクロヘキシルのようなＣ３からＣ６の環状アルキルをいう場合に用いるシクロアルキル炭化水素鎖を特に含む。本発明において、好ましいアルキルは低級アルキルである。用語「低級アルキル」は、メチル、エチル、プロピル、ブチル、イソプロピル、ｓｅｃ−ブチル、および ｔｅｒｔ−ブチルのような、Ｃ１からＣ４の直鎖状または分枝状アルキルを意味する。
【００２３】
用語「アルキル」はまた、アミノアルキル、ヒドロアルキル、酸素−置換アルキル（すなわち、アルコキシ基）、およびハロゲン−置換アルキル（すなわち、アルキルハライド、ポリハロアルキル）を含む置換アルキルを含む。本明細書で使用するとき用語「アミノアルキル」は、Ｃ１からＣ４の直鎖状または分枝状アミノ−置換アルキルを意味し、ここで、用語「アミノ」は、ＮＲ’Ｒ’’基を意味し、そしてＲ’およびＲ’’は上記のようにＨまたは低級アルキルから独立して選択され、すなわち、−ＮＨ_２、−ＮＨＣＨ_３、−Ｎ（ＣＨ_３）２などである。本明細書で使用するとき用語「ヒドロキシアルキル」は、Ｃ１からＣ４の直鎖状または分枝状ヒドロキシ−置換アルキルを意味し、すなわち、−ＣＨ_２ＯＨ、−（ＣＨ_２）_２ＯＨなどである。本明細書で使用するとき用語「アルコキシ」は、Ｃ１からＣ４の酸素−置換アルキルを意味し、すなわち、−ＯＣＨ_３などである。本明細書で使用するとき用語「低級アルコキシ」は、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、ブチルオキシ、イソプロピルオキシ、および ｔ−ブチルオキシのような、Ｃ１からＣ４の直鎖状または分枝状アルコキシを意味する。
【００２４】
用語「ハライド」は、通常の意味を有しており、フルオロ、クロロ、ブロモ、およびヨード基を意味する。好ましいハライド基には、クロロ基が含まれ、本発明の好ましいアルキルハライドには、ＣＦ_３が含まれる。
【００２５】
本明細書で使用するとき用語「アリール」は、フェニル、ナフチルなどのようなＣ３からＣ１０の環状芳香族基を意味し、特に、以下のものに限らないが、トリル、置換フェニル、および 置換ナフチルを含む置換アリール基を含む。アリール基は、ハライド、アミノ、ニトロなどで置換され得る。ヘテロ環状芳香族環およびポリ環状芳香族基もまた、「アリール」の定義に含まれる。本発明に含まれるアリール基の具体例には、以下のものに限らないが、置換および非置換ピリジン、キノリン、シクロペンタジエニル、フェニル、フラン、チオフェン、ピロール、ピラン、イミダゾール、イソチアゾール、イソオキサゾール、ピラゾール、ピラジン、ピリミジンなどが含まれる。好ましいアリール基には、ピリジン、置換ピリジン（例えば、５−メチルピリジン）、およびキノリンが含まれる。
【００２６】
本発明の化合物はまた、医薬的に許容される塩形の形態で有用となる。その塩には、当該化合物の、以下のものに限らないが、グルコネート、ラクテート、アセテート、タータレート（ｔａｒｔａｒａｔｅ）、シトレート、ホスフェート、ボレート（ｂｏｒａｔｅ）、ニトレート（ｎｉｔｒａｔｅ）、サルフェート、ヒドロブロミドおよび塩化水素（ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｃ）の塩が含まれる。式 （Ｉ）の化合物およびその医薬的に許容される塩は、本明細書では、「作用化合物」または「作用剤」と称する。
【００２７】
式 （Ｉ）により示される化合物は、以下の実施例で記載する合成手順により、および当分野に既知の特定方法により、製造され得る。これら既知の方法の幾つかは、実施例において、記載によりまたは引用により、以下に開示する（その開示は、すべて引用により本明細書に加える）。
【００２８】
上記のように、本発明の当該化合物、方法および組成物は、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｓｐｐ．、Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｓｐｐ．、Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ ｐａｒｖｕｍ、Ｇｉａｒｄｉａ ｌａｍｂｌｉａ、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｓｐｐ．、Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ ｃａｒｉｎｉｉ、Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｇｏｎｄｉｉ、 Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｏｌａｎｉ、および Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓにより生ずる感染症の処置に有用である。好ましい実施態様では、本発明の当該方法および組成物を、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ感染症の処置に用いる。他の好ましい実施態様では、本発明の当該方法および組成物を、Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ感染症の処置に用いる。他の好ましい実施態様では、本発明の当該方法および組成物を、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｓｐｐ．により生ずる感染症の処置に用いる。他の好ましい実施態様では、本発明の当該方法および組成物を、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｓｐｐ．により生ずる感染症の処置に用いる。本発明は、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｂｒｕｃｅｉ ｒｈｏｄｅｓｉｅｎｓｅを伴うＴｒｙｐａｎｏｓｏｍａのすべての既知の種族の処置に有用であり、特にＴｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｃｒｕｚｉが好ましい。
【００２９】
表１．本発明の化合物の例
【化５】

【表１】

【００３０】
本発明の化合物の例を表１に開示する。ここで、Ｐｙｒはピリジンを意味し、ｃ−ヘキサンはシクロヘキサンを意味し、Ｐｈはフェニルを意味し、Ａｍはアミジンを意味し、そしてＱｕはキノリンを意味する。
【００３１】
本発明のある実施態様では、本明細書で述べた微生物感染症で苦しむ対象に、治療上有効量の式 （Ｉ）の化合物または医薬的に許容されるその塩を投与する。本明細書で使用するとき「治療上有効量」の量とは、微生物感染症に付随する少なくとも１つの症状を緩和（例えば、鎮静（ｍｉｔｉｇａｔｅ）、減少（ｄｅｃｒｅａｓｅ）、減少（ｒｅｄｕｃｅ））するのに十分な式 （Ｉ）の化合物の量をいう。化合物の投与の利点が害を勝る限り、化合物の投与による感染症の症状の除去は必須ではない。同様に、本明細書で使用するとき用語「処置」および「処置する」とは、対象が微生物感染症の治療を必要とすること、またはそのすべての臨床的症状が除去されることを意味することを意図するものではなく、当該対象の症状の幾らかの緩和または改善が式 （Ｉ）の化合物の投与により達成されることこそが意図する。
【００３２】
本発明の適当な対象には、ヒトおよび動物が含まれる。当該対象が動物であるとき、哺乳類が好ましく、家畜および霊長類が特に好ましい。ヒトは最も好ましい対象である。対象は、大人、青年、子供、幼児または新生児であり得る。
【００３３】
対象は、任意の適当な手段により、本発明の当該化合物および組成物を投与され得る。典型的な手段は、経口投与（例えば、液体または固体型）、筋内注射、皮下注射、および 静脈注射である。本発明の医薬製剤には、医薬的に許容される担体中の本発明の作用化合物が含まれる。適当な医薬製剤には、吸入、経口、直腸、局所（頬、舌下、皮膚、膣および眼球を含む）、非経腸（皮膚、皮内、筋内、静脈および関節を含む）および経皮的な投与に適当なものが含まれる。任意の所定の場合の最も適当な投与経路は、対象で処置される病状の解剖学的位置、処置する症状の性質および重篤度、および使用する特定作用化合物に依存し得る。当該製剤は、通常、単位用量型で存在し得、当分野に既知の任意の方法で製造され得る。
【００３４】
本発明の医薬（当該「製剤」）の製造において、作用化合物またはその医薬的に許容される塩（当該「作用化合物」）は、とりわけ、許容される担体と典型的に混合する。もちろん、当該担体は、製剤における任意の他の成分と適合するという意味では許容されなければならず、患者に有害であってはならない。当該担体は、固体または液体、またはその両方であり得、好ましくは、当該化合物を用い単位−用量製剤として製剤され、例えば、作用化合物を０．５重量％から９９重量％を含み得る錠剤である。１つまたはそれより多い作用化合物は、本発明の製剤中に組み込まれ得、その製剤は、本質的に成分を混合すること、所望により１つまたはそれより多い補助的治療成分を含むことからなる薬学の任意の既知技術により製造され得る。
【００３５】
経口投与に適当な製剤は、カプセル剤、カシェ剤、トローチ剤、または錠剤のような個別の単位で存在し得、粉末または顆粒のような、水性または非水性液体の溶液または懸濁液のような、または水中油または油中水形エマルジョンのような、それぞれ、有意な量の作用化合物を含む。その製剤は、作用化合物および適当な担体を付随させるステップを含む薬学の任意の適当な方法により製造され得る（上記のような１つまたはそれより多い補助的治療成分を含み得る）。一般的に、本発明の製剤は、作用化合物を、液体担体または微細に分割した固体担体、またはその両方と一様におよび完全に混合し、必要ならば生じた混合物を形作ることにより製造する。例えば、錠剤は、作用化合物を含む粉末または顆粒を所望により１つまたはそれより多い補助成分と共に圧縮またはモールドすることにより、製造し得る。圧縮した錠剤は、粉末または顆粒のようなフリーフロー型の化合物を所望により結合剤、滑沢剤、不活性希釈剤、および／または表面活性／分散剤と混合し適当な機械で圧縮することにより製造され得る。モールドした錠剤は、不活性液体結合剤で湿らせた粉末化合物を適当な機械でモールドすることにより製造し得る。経口投与用の製剤は、所望により、胃での製剤の崩壊を防止する当分野に既知の腸溶性被覆を含み得、小腸で薬物を放出し得る。
【００３６】
非経腸投与に適当な本発明の製剤は、作用化合物の滅菌水性および非水性注射溶液を含み得、その製剤は、好ましくは、目的とするレシピエントの血液と等張である。これらの製剤は、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤および目的とするレシピエントの血液と等張性の製剤を溶かす（ｒｅｎｄｅｒ）溶質を含み得る。水性および非水性滅菌懸濁液は、懸濁剤および濃化剤を含み得る。製剤は、単位／用量またはマルチ用量コンテナー中に、例えば、シールしたアンプルおよびバイアル中に存在し得、使用直前に、滅菌液体担体、例えば、生理食塩水または注射用水（ｗａｔｅｒ−ｆｏｒ−ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）の添加のみを必要とするフリーズドライ（凍結乾燥）状態で保存し得る。即席注射溶液および懸濁液は、従前に述べられている種類の無菌の粉末、顆粒および錠剤から製造され得る。例えば、本発明の１つの態様では、シールしたコンテナー中の単位用量型の式 （Ｉ）の化合物、またはその塩を含む、注射可能、安定、滅菌組成物を提供する。当該化合物またはその塩は、対象への注射が適当な液体組成物を形成するための適当な医薬的に許容される担体で再構成され得る凍結乾燥型で提供される。単位用量型は、典型的に、当該化合物または塩を約１０ ｍｇから約１０ ｇ含む。当該化合物または塩が実質的に水に不溶性であるとき、生理学的に許容される十分量の乳化剤を十分量用い、水性担体中に当該化合物または塩を乳化させ得る。
【００３７】
更に、本発明は、本明細書に開示の化合物およびその塩のリポソーム製剤を提供する。リポソーム懸濁液を形成する技術は当分野に既知である。当該化合物またはその塩が水溶性塩であるとき、通常のリポソーム技術を用い、同一物が脂質ベシクル中に組み込まれ得る。その場合、当該化合物または塩の水溶解度により、当該化合物または塩は、リポソームの親水性中心またはコア内で実質的に取り込まれる（ｅｎｔｒａｉｎ）。用いる脂質層は、任意の通常の組成物であり得、コレステロールを含み得るかまたはコレステロールフリーの何れかである。目的の化合物または塩は水不溶性であり、再び通常のリポソーム形成技術を用い、当該塩は、リポソームの構造を形成する疎水性脂質二重層内に実質的に取り込まれ得る。何れかの場合、生じたリポソームは、標準的な超音波および均質化技術または当分野に既知の他の技術の使用によりサイズが小さくなり得る。
【００３８】
もちろん、本明細書に記載した方法で同定した医薬作用化合物を含むリポソーム製剤を凍結乾燥し得、水のような医薬的に許容される担体で再構成しリポソーム懸濁液を再生成し得る凍結乾燥剤（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚａｔｅ）を製造し得る。
【００３９】
作用化合物に加え、当該医薬製剤は、ｐＨ−調節添加剤のような他の添加剤を含み得る。特に、有用なｐＨ−調節剤には、塩酸のような酸、塩基、または乳酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、ホウ酸ナトリウムまたはグルコン酸ナトリウムのような緩衝物が含まれる。更に、当該組成物は、微生物性保存剤（ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅｓ）を含み得る。有用な微生物性保存剤には、メチルパラベン、プロピルパラベンおよびベンジルアルコールが含まれる。微生物性保存剤は、当該製剤をマルチ用量使用用にデザインしたバイアル中にいれるときに典型的に用いる。
【００４０】
本発明の医薬製剤は、凍結乾燥型の本発明の化合物を含み得る。ほかに、本発明の医薬製剤は、医薬的に許容される担体中に本発明の化合物を含み得る。その医薬製剤は、本明細書に記載の当該化合物を医薬的に許容される担体と混合することにより一般的に製造される。医薬的に許容される担体は、好ましくは液体であり、特に水性の担体であり、その選択は、当分野に既知である。その製剤の製造の目的のため、当該化合物は、緩衝性生理食塩水（例えば、ｐＨ６から８）または通常の培養培地（ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉａ）中で混合し得る。その製剤は、シリンジで液体が注入され製剤が引き抜かれるラバーストッパーでシールした滅菌ガラスコンテナー中で保存し得る。
【００４１】
本明細書に記載した全ての方法に関し、治療上有効用量の任意の特定化合物、本発明の範囲内のその使用は、化合物から化合物へおよび対象から対象へと幾分変わり、それは、対象の症状および送達経路に依存する。約０．５ｍｇ／対象の体重ｋｇから約１５ｍｇ／対象の体重ｋｇ、または約２０ｍｇ／対象の体重ｋｇ、または約２５ｍｇ／対象の体重ｋｇの用量を、静脈注射または経口投与に用い得る。
【００４２】
本発明の製剤中の本発明の化合物または医薬的に許容されるその塩の濃度は、当業者により決定され得、処置する対象の特徴（例えば、種族、年齢、体重）、対象がワクチン注射を受けた感染ウイルスまたは株の型またはその重篤度、使用する用量型などを含む条件により変化する。
【００４３】
本発明の化合物は、当業者によって決定され得るように、他の抗ウイルス化合物と共に投与され得る。
【００４４】
本発明は、以下の実施例により詳細に解説する。これらの実施例は、本発明の解説を目的としており、本発明を限定することを目的とするものではない。
【００４５】
実施例１
一般的方法：化学合成および分析
融点を、ＭＥＬ−ＴＥＭＰ（登録商標） ３．０キャピラリーメルティングポイント装置で測定した。それは、修正されない。^１Ｈ 核磁気共鳴スペクトルを、Ｖａｒｉａｎ Ｕｎｉｔｙ＋３００ または Ｖａｒｉａｎ ＶＲＸ ４００ 装置で、残留ＤＭＳＯ （２．４９ｐｐｍ） または ＣＨＣｌ_３ （７．２４ｐｐｍ）に相対的なピークアサインメント（ｐｅａｋ ａｓｓｉｇｎｍｅｎｔ）と共に記録した。質量スペクトルは、ｔｈｅ Ｇｅｏｒｇｉａ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ａｔｌａｎｔａ， ＧＡのＶＧ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ ７０−ＳＥスペクトロメーターで記録した。元素分析は、Ａｔｌａｎｔｉｃ Ｍｉｃｒｏｌａｂ， Ｎｏｒｃｒｏｓｓ， ＧＡで行った。すべての最終化合物は、元素分析の前に、５０−６０℃で真空（オイルポンプ）で、少なくとも３６時間乾燥させた。特記しなければ、すべての試薬の化学物質および溶媒（無水溶媒を含む）は、Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．， Ｆｉｓｈｅｒ ＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃまたはＬａｎｃａｓｔｅｒ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓから購入し、そのまま使用した。アセトニトリル （ＣａＨ_２）、トリエチルアミン（ＣａＨ_２）、および エタノール（Ｍｇ／Ｉ_２）を、示した乾燥試薬から蒸留した。２，６−ジメチル−４−ニトロブロモベンゼンおよびＳ−（２−ナフチルメチル）チオアセチミデート（ｔｈｉｏａｃｅｔｉｍｉｄａｔｅ）を文献に従い製造した。Ｂ．Ｍ． Ｗｅｐｓｔｅｒ， Ｒｅｃ． Ｔｒａｖ． Ｃｈｉｍ． ７３， ８０９−８１８ （１９５４）； Ｄ．Ｎ． Ｋｒａｖｔｓｏｖ， Ｊ． Ｏｒｇａｎｏｍｅｔａｌ． Ｃｈｅｍ． ３６， ２２７−２３７ （１９７２）； Ｂ．Ｇ． Ｓｈｅａｒｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ． ３８， １７９−１８２ （１９９７）参照。
【００４６】
図１は、本発明の化合物の合成の典型的図式を示す。当該図に示す図式は、フラン化合物に関するが、当該開示の方法は、チオフェン化合物のような類似化合物でも行い得る。図１について言及すると、標的化合物の合成は、相当するジアミノ化合物を必要とした（図式１）。ジアミノ化合物の合成は、相当する２，５−ビス［ニトロフェニル］フランおよびチオフェンを形成する、２，５−ジスタンニルフランまたはチオフェンと置換ブロモニトロアレーンとのＳｔｉｌｌｅ結合で始まる。接触還元によるか、または塩化第一スズによるか、何れかによる、２，５−ビス−ニトロフェニルヘテロ環の還元により、望ましいジアミノ化合物が生成される（図式１）。必要なジアミノ類似体は、相当するアリールイミノ化合物を形成する、ベンゾフェノンイミンと結合するＰｄ（０）を含むアミンへの、２，５−ビス［ニトロフェニル］フランおよびチオフェンの２ステップ変換により、得られた。ジグアニジニウム類似体は、塩化第二水銀の存在下、Ｂｏｃ−保護Ｓ−メチルチオ尿素とアリールジアミンを反応させることにより製造した（図式２）。Ｓ−（２−ナフチルメチル）チオベンズイミデート（ｔｈｉｏｂｅｎｚｉｍｉｄａｔｅ）の２つの等価物とアリールジアミンとの反応により、良好な収量で、「逆」アミジンが生成された（図式４）。
【００４７】
２，５−ビス（４−アミノフェニル）フランおよび−チオフェン（図式１）を、接触還元（Ｐｄ／Ｃ）、塩化第一スズ、または鉄／ＡｃＯＨの何れかを用い、相当するビス−ニトロ誘導体の還元により、良好な収量で製造した。次に、ビス−ニトロ誘導体を、２，５−ビス（トリ−ｎ−ブチルスタンニル）フランまたは２，５−ビス（トリメチルスタンニル）チオフェンと適当なハロニトロベンゼンとの結合を触媒するパラジウムにより製造した。
【００４８】
以下の実施例における化合物番号は、図１の相当する化合物を指す。
【００４９】
実施例２
２，５−ビス（４−ニトロフェニル）フランの製造
以下の典型的な手順は、従前にＡ． Ｋｕｍａｒ ｅｔ ａｌ．， Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ Ｃｏｍｍ． ５， ３０１−３０４ （１９９９）に記載された一般的手順の変形である。
【００５０】
２，５−ビス（４−ニトロフェニル）フラン （化合物２ａ）． 収率： ８８％； 橙色のけばだった（ｆｌｕｆｆｙ）固体； ｍｐ ２６９−２７０ ℃ （再結晶せず）， ｌｉｔ． ｍｐ ２７０−２７２ ℃， Ｌｉｎｇ， Ｃ． ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ａｍ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． １９９４， １１６， ８７８４−８７９２．
【００５１】
２，５−ビス（２−メチル−４−ニトロフェニル）フラン （化合物 ２ｂ）
無水 １，４−ジオキサン （５０ ｍｌ）中の２−ブロモ−５−ニトロトルエン （４．３２ ｇ、２０ ｍｍｏｌ） および テトラキス （トリフェニルホスフィン（ｐｈｏｓｐｉｎｅ））パラジウム （０） （０．４０ ｇ）溶液に２，５−ビス（トリ−ｎ−ブチルスタンニル） フラン （６．４６ ｇ、１０ ｍｍｏｌ）を加え、当該混合物を９５−１００ ℃の窒素の下、一夜加熱した。その生じた橙色の懸濁液をヘキサン（１５ ｍｌ）で希釈し、室温に冷却し、濾過し、ヘキサンでリンス後、橙色の固体を得た（３．１０ ｇ）， ｍｐ ２４１−２４３ ℃。当該生成物をＤＭＦ （１００ ｍｌ）から再結晶し、明るい橙色けばだった固体を得た（２．８７ ｇ、８５％）， ｍｐ ２４２−２４３ ℃。^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ２．６９ （ｓ， ６Ｈ）， ７．３１ （ｓ， ２Ｈ）， ８．１２ （ｍ， ４Ｈ）， ８．２３ （ｓ， ２Ｈ）． 分析計算値 Ｃ_１８Ｈ_１４Ｎ_２Ｏ_５ （３３８．３１）： Ｃ， Ｈ， Ｎ．
【００５２】
２，５−ビス（２−メトキシ−４−ニトロフェニル）フラン （化合物 ２ｃ）． 収率： ７７％； 明るい橙色の顆粒状固体； ｍｐ ３０８−３１０ ℃ （ＤＭＦ）． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ４．１０ （ｓ， ６Ｈ）， ７．３７ （ｓ， ２Ｈ）， ７．９０ （ｓ， ２Ｈ）， ７．９４ （ｄ， ２Ｈ）， ８．２２ （ｄ， ２Ｈ）． 分析計算値 Ｃ_１８Ｈ_１４Ｎ_２Ｏ_７・０．１Ｈ_２Ｏ （３７２．１１）： Ｃ， Ｈ， Ｎ．
【００５３】
２，５−Ｂｉｓ（２−クロロ−４−ニトロフェニル）フラン （化合物 ２ｄ）． 収率： ７１％； けばだった橙色の固体； ｍｐ ２４７−２４７．５ ℃ （ＤＭＦ／ＭｅＯＨ）． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ７．７０ （ｓ， ２Ｈ）， ８．２９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．８， ２．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ８．３６ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ８．４３ （ｄ， Ｊ ＝ ２．２ Ｈｚ， ２Ｈ）． 分析計算値 Ｃ_１６Ｈ_８Ｃｌ_２Ｎ_２Ｏ_５ （３７９．１５）： Ｃ， Ｈ， Ｎ．
【００５４】
２，５−ビス（４−ニトロ−２−ｔｒｉフルオロメチルフェニル）フラン （化合物 ２ｅ）． 収率： ７４％； けばだった金色の針； ｍｐ １５８．５−１５９ ℃ （ＥｔＯＨ）． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ７．３８ （ｓ， ２Ｈ）， ８．２４ （ｄ， Ｊ ＝ ８．７ Ｈｚ， ２Ｈ）， ８．５７ （ｄ， Ｊ ＝ ２．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ８．６２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．６， ２．４ Ｈｚ， ２Ｈ）． 分析計算値 Ｃ_１８Ｈ_８Ｆ_６Ｎ_２Ｏ_５ （４４６．２６）： Ｃ， Ｈ， Ｎ．
【００５５】
２，５−ビス（２，６−ジメチル−４−ニトロフェニル）フラン （化合物 ２ｆ）． 収率： ６５％； 黄色の針； ｍｐ １５６．５−１５７．５ ℃ （ＤＭＦ／ＥｔＯＨ／Ｈ_２Ｏ）． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ２．３４ （ｓ， １２Ｈ）， ６．８５ （ｓ， ２Ｈ）， ８．０４ （ｓ， ４Ｈ）． 分析計算値 Ｃ_２０Ｈ_１８Ｎ_２Ｏ_５ （３６６．３６）： Ｃ， Ｈ， Ｎ．
【００５６】
実施例３
２，５−ビス（４−アミノフェニル）フランの製造
（以下の手順が典型例である）
２，５−ビス（４−アミノフェニル）フラン （化合物 ３ａ）． 収率： ９４％；淡緑色／褐色固体； ｍｐ ２１８−２２１ ℃， ｌｉｔ^４６ ｍｐ ２１３−２１６ ℃． ＭＳ （ＥＩ）： ｍ／ｚ ２５０ （Ｍ^＋）．
【００５７】
２，５−ビス（４−アミノ−２−メチルフェニル）フラン （化合物 ３ｂ）
ＥｔＯＡｃ （９０ ｍｌ） および乾燥ＥｔＯＨ （１０ ｍｌ）中のビス−ニトロ誘導体 ２ｂ （２．８７ ｇ）の懸濁液にＰｄ／Ｃ （１０％） （０．４０ ｇ）を添加し、当該混合物を、〜５０ｐｓｉの初期圧力のＰａｒｒ装置で水素化した。水素の取り込みが停止した後（一般的に３−６時間）、生じた溶液をＣｅｌｉｔｅで濾過し、淡黄色から無色の濾液を乾燥近くまで真空で濃縮し、ヘキサンで希釈後、淡緑色／緑色固体として純粋のジアミンを得（２．１７ ｇ、９１％）， ｍｐ １７４−１７６ ℃、これは精製の必要はなかった。^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ２．３３ （ｓ， ６Ｈ）， ５．１５ （ｂｒ ｓ， ４Ｈ）， ６．４２ （ｓ， ２Ｈ）， ６．４６ （ｍ， ４Ｈ）， ７．３５ （ｄ， ２Ｈ）． ＭＳ （ＥＩ）： ｍ／ｚ ２７８ （Ｍ^＋）．
【００５８】
２，５−ビス（４−アミノ−２−メトキシフェニル）フラン （化合物 ３ｃ）
もとの油状物をベンゼンで再濃縮し、黄色／褐色固体を得、それは、エーテルで破砕した。 収率： ７９％； ｍｐ ２０１−２０２．５ ℃． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ３．８０ （ｓ， ６Ｈ）， ５．２５ （ｂｒ ｓ， ４Ｈ）， ６．２４ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．３， ２．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．３０ （ｄ， Ｊ ＝ １．９ Ｈｚ ２Ｈ）， ６．５６ （ｓ， ２Ｈ）， ７．４８ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ２Ｈ）． ＭＳ （ＥＩ）： ｍ／ｚ ３１０ （Ｍ^＋）．
【００５９】
２，５−ビス（４−アミノ−２−クロロフェニル）フラン （化合物 ３ｄ）
乾燥ＥｔＯＨ （１００ ｍｌ） および ＤＭＳＯ （２０ ｍｌ）中の相当するビス−ニトロ誘導体 ２ｄ （１．２２ ｇ、３．２ ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ＳｎＣｌ_２・２Ｈ_２０ （５．８０ ｇ、２５．７ ｍｍｏｌ）を加え、当該混合物を８０ ℃の窒素の下で加熱した。４−５時間後、ＴＬＣにより、出発物質が消費されることが判り、そのため、当該混合物を冷却し、ＮａＯＨ （ａｑ）で中性化し、ＥｔＯＡｃで抽出した。当該抽出物を水、塩水で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮した。生じた油状物を、ベンゼン／ヘキサン混液から結晶化し、明褐色固体を得た（０．７４ ｇ、７１％）， ｍｐ １９１．５−１９３ ℃． 接触還元は検討しなかった。^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ５．６０ （ｂｒ ｓ， ４Ｈ）， ６．６１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．６， ２．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．６８ （ｄ， Ｊ ＝ ２．２ Ｈｚ ２Ｈ）， ６．８２ （ｓ， ２Ｈ）， ７．５６ （ｄ， Ｊ ＝ ８．６ Ｈｚ， ２Ｈ）． ＭＳ （ＥＩ）： ｍ／ｚ ３１８ （Ｍ^＋）．
【００６０】
２，５−ビス（４−アミノ−２−ｔｒｉフルオロメチルフェニル）フラン （化合物 ３ｅ）
もとの赤色の油状物を、２つのクロップ中のＥｔＯＡｃ／ヘキサンから、赤色／橙色固体として結晶化した。 合計収率： ８１％； ｍｐ （第一／主なクロップ） ８９．５−９１ ℃； ｍｐ （第二クロップ） ９１．５−９２ ℃． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ５．７９ （ｂｒ ｓ， ４Ｈ）， ６．５２ （ｓ， ２Ｈ）， ６．８２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．４， ２．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．９８ （ｄ， Ｊ ＝ ２．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．４３ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ２Ｈ）． ＭＳ （ＥＩ）： ｍ／ｚ ３８６ （Ｍ^＋）．
【００６１】
２，５−ビス（４−アミノ−２，６−ｄｉメチルフェニル）フラン （化合物 ３ｆ）
収率： ９９％； 白色のけばだった固体； ｍｐ １４４．５−１４６ ℃． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ２．０１ （ｓ， ６Ｈ）， ５．０６ （ｂｒ ｓ， ４Ｈ）， ６．２４ （ｓ， ２Ｈ）， ６．２９ （ｓ， ４Ｈ）． ＭＳ （ＥＩ）： ｍ／ｚ ３０６ （Ｍ^＋）．
【００６２】
実施例４
２，５−ビス（４−Ｎ，Ｎ’−ジ−ＢＯＣ−グアニジノフェニル）フラン誘導体の製造
（以下の手順が典型例である）（図式２参照）
２，５−ビス（４−Ｎ，Ｎ’−ジ−ＢＯＣグアニジノフェニル）フラン （化合物 ４ａ）
無水ＤＭＦ中の２，５−ビス（４−アミノフェニル）フラン （０．６２６ ｇ、２．５ ｍｍｏｌ） および １，３−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２−メチル−２−チオイソ尿素（ｔｈｉｏｐｓｅｕｄｏｕｒｅａ）（１．５６ ｇ、５．３ ｍｍｏｌ）の室温の溶液に、トリエチルアミン（１．５９ ｇ、１５．７ ｍｍｏｌ）を加え、その後、塩化第二水銀（１．５７ ｇ、５．８ ｍｍｏｌ）を加え、生じた懸濁液を室温で２２時間攪拌した。ＣＨ_２Ｃｌ_２ および 炭酸ナトリウム溶液で希釈した後、当該懸濁液をＣｅｌｉｔｅで濾過し、当該濾液を水（３Ｘ）で十分に洗浄し、最終的には塩水で洗浄した。乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）の後、当該溶媒を真空で除去し、残渣をＭｅＯＨで希釈し、淡黄色固体としてＢＯＣ−保護ビス−グアニジンが得られた。当該回収精製物を、ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨから再沈殿することにより精製し、けばだった黄色固体を得た（１．２５ ｇ、６８％）， ｍｐ ＞４００ ℃ ｄｅｃ． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３）： １．５０ および １．５３ （２ｓ， ３６Ｈ）， ６．６５ （ｓ， ２Ｈ）， ７．６６ （ｓ， ８Ｈ）， １０．３８ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， １１．６１ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）．
【００６３】
２，５−ビス（２−メチル−４−Ｎ，Ｎ’−ジ−ＢＯＣグアニジノフェニル）フラン （化合物 ４ｂ）
黄色固体， ｍｐ ＞２５０ ℃ ｄｅｃ． 収率： ６２％． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３）： １．５１ および １．５２ （２ｓ， ３６Ｈ）， ２．５３ （ｓ， ６Ｈ）， ６．６０ （ｓ， ２Ｈ）， ７．４０ （ｓ， ２Ｈ）， ７．６２ （ｄ， ２Ｈ）， ７．７４ （ｄ， ２Ｈ）， １０．３４ （ｓ， ２Ｈ）， １１．６２ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）．
【００６４】
２，５−ビス（２−メトキシ−４−Ｎ，Ｎ’−ジ−ＢＯＣグアニジノフェニル）フラン （化合物 ４ｃ）
黄色 固体， ｍｐ ＞３００ ℃ ｄｅｃ． 収率： ７９％． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３）： １．５０ および １．５３ （２ｓ， ３６Ｈ）， ３．９５ （ｓ， ６Ｈ）， ６．９５ （ｓ， ２Ｈ）， ７．１３ （ｄ， ２Ｈ）， ７．５９ （ｓ， ２Ｈ）， ７．８６ （ｄ， ２Ｈ）， １０．３６ （ｓ， ２Ｈ）， １１．５５ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）．
【００６５】
２，５−ビス（２−クロロ−４−Ｎ，Ｎ’−ジ−ＢＯＣグアニジノフェニル）フラン （化合物 ４ｄ）
淡黄色／褐色固体， ｍｐ ＞４００ ℃ ｄｅｃ． 収率： ６３％． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３）： １．５２ （ｓ， ３６Ｈ）， ７．１７ （ｓ， ２Ｈ）， ７．６３ （ｄｄ， ２Ｈ）， ７．７９ （ｄ， ２Ｈ）， ７．８８ （ｄ， ２Ｈ）， １０．４３ （ｓ， ２Ｈ）， １１．５９ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）．
【００６６】
２，５−ビス（２−ｔｒｉフルオロメチル−４−Ｎ，Ｎ’−ジ−ＢＯＣ グアニジノフェニル）フラン （化合物 ４ｅ）
明橙色固体． 収率： ８８％． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３）： １．５１ および １．５３ （２ｓ， ３６Ｈ）， ６．７７ （ｓ， ２Ｈ）， ７．８２ （ｄ， ２Ｈ）， ７．９４ （ｓ， ２Ｈ）， ８．００ （ｄ， ２Ｈ）， １０．５２ （ｓ， ２Ｈ）， １１．５９ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）．
【００６７】
２，５−ビス（２，６−ｄｉメチル−４−Ｎ，Ｎ’−ジ−ＢＯＣ グアニジノフェニル）フラン （化合物 ４ｆ）．
淡黄色／オフホワイト色固体， ｍｐ ＞３００ ℃ ｄｅｃ． 収率： ８９％． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３）： １．５１ および １．５３ （２ｓ， ３６Ｈ）， ２．２３ （ｓ， １２Ｈ）， ６．３１ （ｓ， ２Ｈ）， ７．３３ （ｓ， ４Ｈ）， １０．２７ （ｓ， ２Ｈ）， １１．６３ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）．
【００６８】
実施例５
Ｎ，Ｎ’−ジ−ＢＯＣグアニジンの脱保護
（以下の手順が典型例である）．
２，５−ビス（４−グアニジノフェニル）フランジヒドロクロライド （化合物 ５ａ）
ＣＨ_２Ｃｌ_２ （１５ ｍｌ）中の相当するＮ，Ｎ’−ジ−ＢＯＣグアニジン （１．１９ ｇ、１．６２ ｍｍｏｌ）溶液を乾燥ＥｔＯＨ （１０ ｍｌ）で希釈し、氷水バスの温度で無水ＨＣｌで飽和させた。次いで、当該溶液を室温で２−３日間攪拌（乾燥試験管）すると、生成物がゆっくりと沈殿した（より短い反応時間では、一般的に不完全な脱保護が生じた）。生じた懸濁液を乾燥近くまで濃縮し、次いで当該固体を温ＥｔＯＨ中に取り込んだ。濾過し透明にした後、当該溶液を乾燥近くまで濃縮し懸濁液を得、それをエーテルで希釈し回収すると、２日間、５０−６０℃真空で乾燥した後、オフホワイト色／褐色固体として、ビス−グアニジンジヒドロクロライドを得た（０．６６ ｇ、定量的）， ｍｐ ＞３００ ℃ ｄｅｃ． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ７．１２ （ｓ， ２Ｈ）， ７．３１ （ｄ， ４Ｈ）， ７．５８ （ｂｒ ｓ， ８Ｈ）， ７．８６ （ｄ， ４Ｈ）， １０．０９ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）． ＭＳ （ＦＡＢ， チオグリセロール）： ｍ／ｚ ３３５．３ （ＭＨ^＋， １００）． 分析計算値 Ｃ_１８Ｈ_１８Ｎ_６Ｏ・２ＨＣｌ・０．２５ＥｔＯＨ （４０７．３０）： Ｃ， Ｈ， Ｎ．
【００６９】
２，５−ビス（４−グアニジノ−２−メチルフェニル）フランジヒドロクロライド（化合物 ５ｂ）
褐色固体， ｍｐ ２６５−２７１ ℃ ｄｅｃ． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ２．５３ （ｓ， ６Ｈ）， ６．９３ （ｓ， ２Ｈ）， ７．１７ （ｍ， ４Ｈ）， ７．５６ （ｂｒ ｓ， ８Ｈ）， ７．８２ （ｄ， ２Ｈ）， １０．０６ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）． ＭＳ （ＦＡＢ， チオグリセロール）： ｍ／ｚ ３６３．３ （ＭＨ^＋， １００）． 分析計算値 Ｃ_２０Ｈ_２２Ｎ_６Ｏ・２ＨＣｌ・１．５Ｈ_２Ｏ・０．６６ＥｔＯＨ （４９６．９３）： Ｃ， Ｈ， Ｎ．
【００７０】
２，５−ビス（４−グアニジノ−２−メトキシフェニル）フラン ｄｉヒドロクロライド （化合物 ５ｃ）
明褐色固体． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ３．９５ （ｓ， ６Ｈ）， ６．９２ （ｄｄ， ２Ｈ）， ６．９９ （ｄ， ２Ｈ）， ７．０２ （ｓ， ２Ｈ）， ７．５８ （ｂｒ ｓ， ８Ｈ）， ７．９５ （ｄ， ２Ｈ）， １０．０８ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）． ＭＳ （ＥＩ）： ｍ／ｚ ３５２ （Ｍ^＋ − ＮＨ_２ＣＮ， ３８．０）， ３１０ （１００）， ２６７ （３８．９）， ２５１ （８．８）， １５５ （１８．７）． 分析計算値 Ｃ_２０Ｈ_２２Ｎ_６Ｏ_３・２ＨＣｌ・１．０Ｈ_２Ｏ・０．３３ＥｔＯＨ （５００．５７）： Ｃ， Ｈ， Ｎ．
【００７１】
２，５−ビス（２−クロロ−４−グアニジノフェニル）フランジヒドロクロライド （化合物 ５ｄ）
褐色 固体， ｍｐ ３００−３０４ ℃ ｄｅｃ． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ７．３１ （ｓ， ２Ｈ）， ７．３３ （ｄ， ２Ｈ）， ７．４７ （ｓ， ２Ｈ）， ７．７２ （ｂｒ ｓ， ８Ｈ）， ８．０４ （ｄ， ２Ｈ）． ＭＳ （ＤＣＩ， アンモニア）： ｍ／ｚ ３６５， ３６３， ３６１ （ＭＨ^＋ − ＮＨ_２ＣＮ， ８， ５２， ７８）， ３２３， ３２１， ３１９ （１１， ６６， １００）． 分析計算値 Ｃ_１８Ｈ_１６Ｃｌ_２Ｎ_６Ｏ・２ＨＣｌ・０．５Ｈ_２Ｏ （４８５．２１）： Ｃ， Ｈ， Ｎ， Ｃｌ．
【００７２】
２，５ −ビス（４−グアニジノ−２−ｔｒｉフルオロメチルフェニル）フランジヒドロクロライド（化合物 ５ｅ）
橙色／赤色固体． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ６．９９ （ｓ， ２Ｈ）， ７．６３ （ｄ， ２Ｈ）， ７．６９ （ｓ， ２Ｈ）， ７．７９ （ｂｒ ｓ， ８Ｈ）， ７．９１ （ｄ， ２Ｈ）， １０．３７ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）． ＭＳ （ＣＩ， イソブタン）： ｍ／ｚ ４７１ （ＭＨ^＋， １４）， ４２９ （１００）， ３８７ （１９）． 分析計算値 Ｃ_２０Ｈ_１６Ｆ_６Ｎ_６Ｏ ・２ＨＣｌ・０．６７Ｈ_２Ｏ・０．６７ＥｔＯＨ （５８６．２４）： Ｃ， Ｈ， Ｎ．
【００７３】
２，５−ビス（４−グアニジノ−２，６−ジメチルフェニル）フランジヒドロクロライド（化合物 ５ｆ）
オフホワイト色固体． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ２．２０ （ｓ， １２Ｈ）， ６．５６ （ｓ， ２Ｈ）， ７．０１ （ｓ， ４Ｈ）， ７．５７ （ｂｒ ｓ， ８Ｈ）， １０．０９ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）． ＭＳ （ＦＡＢ， チオグリセロール）： ｍ／ｚ ３９１．２ （ＭＨ^＋， １００）． 分析計算値 Ｃ_２２Ｈ_２６Ｎ_６Ｏ・２ＨＣｌ・０．５Ｈ_２Ｏ （４７２．４１）： Ｃ， Ｈ， Ｎ．
【００７４】
２，５−ビス［４−（ベンズイミドイル）アミノフェニル］チオフェン 遊離塩基： 黄色結晶固体， ｍｐ ２８４−２８６ ℃ ｄｅｃ （ＤＭＦ／ＭｅＯＨ／Ｈ_２Ｏ）． 収率： ３５％． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ６．４１ （ｂｒ ｓ， ４ＮＨ）， ６．９１ （ｄ， ４Ｈ）， ７．４０ （ｓ， ２Ｈ）， ７．４４ （ｄ， ６Ｈ）， ７．６２ （ｄ， ４Ｈ）， ７．９７ （ｄ， ４Ｈ）． ヒドロクロライド： 黄色／橙色 固体， ｍｐ ３０４−３０６ ℃ ｄｅｃ． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ７．５６ （ｄ， ４Ｈ）， ７．６７ （ｔ， ４Ｈ）， ７．７０ （ｓ， ２Ｈ）， ７．７７ （ｔ， ２Ｈ）， ７．９０ （ｄ， ４Ｈ）， ７．９５ （ｄ， ４Ｈ）， ９．１３ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， ９．９４ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， １１．７１ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）． ＭＳ （ＥＩ）： ｍ／ｚ ４７２ （Ｍ^＋， ３５．１）， ３６９ （７６．８）， ２６６ （１００）， １０３ （４９．５）， ７６ （１４．８）． 分析計算値 Ｃ_３０Ｈ_２４Ｎ_４Ｓ・２ＨＣｌ・０．５Ｈ_２０ （５５４．５２）： Ｃ， ６４．９７； Ｈ， ４．９１； Ｎ， １０．１０． 実測値： Ｃ， ６４．９５； Ｈ， ４．８９； Ｎ， １０．１４．
【００７５】
２，５−ビス［２−メチル−４−（２−ピリジルイミノ）アミノフェニル］チオフェン 遊離塩基： 黄色結晶， ｍｐ １５２−１５３ ℃ （ＥｔＯＨ／Ｈ_２Ｏ）． 収率： ２０％． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ２．４６ （ｓ， ６Ｈ）， ６．６０ （ｂｒ ｓ， ４ＮＨ）， ６．８２ （ｄ， ２Ｈ）， ６．９０ （ｓ， ２Ｈ）， ７．１６ （ｓ， ２Ｈ）， ７．４２ （ｄ， ２Ｈ）， ７．５５ （ｍ， ２Ｈ）， ７．９５ （ｔ， ２Ｈ）， ８．３０ （ｄ， ２Ｈ）， ８．６３ （ｄｄ， ２Ｈ）． ヒドロクロライド： 黄色 粉末， ｍｐ ｘｘｘ ℃ ｄｅｃ． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ２．５４ （ｓ， ６Ｈ）， ７．３６ （ｓ， ２Ｈ）， ７．３９ （ｄ， ２Ｈ）， ７．４８ （ｓ， ２Ｈ）， ７．６６ （ｄ， ２Ｈ）， ７．８５ （ｍ， ２Ｈ）， ８．２２ （ｔ， ２Ｈ）， ８．４７ （ｄ， ２Ｈ）， ８．８９ （ｄ， ２Ｈ）， ９．３７ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， １０．１２ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， １１．８７ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）． ＭＳ （ＥＩ）：． 分析計算値 Ｃ_３０Ｈ_２６Ｎ_６Ｓ・２．５ＨＣｌ・１．２５Ｈ_２Ｏ （６１６．３０）： Ｃ， ５８．４６； Ｈ， ５．０７； Ｎ， １３．６４； Ｃｌ， １４．３８． 実測値： Ｃ， ５８．８３； Ｈ， ４．９２； Ｎ， １３．６８； Ｃｌ， １４．０２．
【００７６】
実施例６
化合物 ６ｂ−６ｃの製造 （図式 ３）
逆アミジン（６ｂ−ｃを製造するために用いる）へのもとの経路は以下の通りである。
【００７７】
２，５−ビス［４−（ベンズイミドイルアミノ）フェニル］フランジヒドロクロライド（化合物 ６ｂ）
乾燥アセトニトリル （１０ ｍｌ）中の２，５−ビス（４−アミノフェニル）フラン （０．２５ ｇ、１．０ ｍｍｏｌ）の冷蔵溶液に、トリエチルアミン （０．２２ ｇ、２．１ ｍｍｏｌ）を加え、その後、ベンゾイルクロライド （０．３０ ｇ、２．１ ｍｍｏｌ）を滴下し、生じた懸濁液を室温で３時間攪拌した。次いで、水を加え、当該沈殿を回収し、水で洗浄し、その後、ＭｅＯＨで洗浄し、最終的に真空で乾燥するまで乾燥させ、褐色固体として２，５−ビス（４−ベンズアミドフェニル）フランを得た（０．４４ ｇ、９６％）， ｍｐ ３１２−３１４．５ ℃． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ６．９８ （ｓ， ２Ｈ）， ７．５２−７．６２ （ｍ， ６Ｈ）， ７．８０ （ｄ， ４Ｈ）， ７．８９ （ｄ， ４Ｈ）， ７．９７ （ｄ， ４Ｈ）， １０．３３ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）．
【００７８】
中間体ビス（ベンズアミド）（０．４４ ｇ、０．９６ ｍｍｏｌ）を無水ジクロロメタン （４０ ｍｌ）に懸濁し、２滴のＤＭＦと共に新しい蒸留チオニルクロライド （０．６８ ｇ、５．７ ｍｍｏｌ）で処理し、当該混合物を、溶液が得られるまで（２０時間）、激しく攪拌しつつ還流した。次いで、当該溶液を真空で濃縮し、黄色固体を得、それを乾燥ベンゼンと共蒸発させた。得られたイミドイルクロライドを無水ジクロロメタン （４０ ｍｌ）中に溶解し、その溶液を氷／水−バス温度で無水アンモニアで飽和させ、シールした。室温での一夜の攪拌の後、濁った混合物を濃縮し、黄色固体を得、それは、０．５Ｎ ＮａＯＨで粉砕し、回収し、そして風乾した。この遊離塩基（０．４４ ｇ、１００％）を煮沸ＥｔＯＨ （５０ ｍｌ）中に溶解し、濾過し、そして氷−バス温度で、乾燥ＨＣｌで処理した。エーテルの添加による沈殿の誘発の試みが失敗した後、当該溶液を濃縮し（高真空）、橙色吸湿性固体としてジヒドロクロライドを得た， ｍｐ ２４２−２４８ ℃． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ７．２６ （ｓ， ２Ｈ）， ７．５８ （ｄ， ４Ｈ）， ７．６７ （ｔ， ４Ｈ）， ７．７８ （ｔ， ２Ｈ）， ７．９５ （ｄ， ４Ｈ）， ８．０３ （ｄ， ４Ｈ）， ９．１２ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， ９．９４ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， １１．６６ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）． ＭＳ （ＥＩ）： ｍ／ｚ ４５６ （Ｍ^＋， １００）， ３５３ （６３）， ２５０ （６２）， ２２１ （１６）， １３０ （１５）， １０３ （４１）， ７６ （１４）， ４４ （２２）． 分析計算値 Ｃ_３０Ｈ_２４Ｎ_４Ｏ・２ＨＣｌ・０．Ｈ・０．１（Ｃ_２Ｈ_５）（５４５．８７）：Ｃ， Ｈ， Ｎ．
【００７９】
２，５−ビス［４−［（４−メチルベンズイミドイル）アミノ］フェニル］フランジヒドロクロライド（化合物 ６ｃ）
上記手順の後、２，５−ビス［（４−メチルベンズアミド）フェニル］フランを、２，５−ビス（４−アミノフェニル）フラン （０．５０ ｇ、２．０ ｍｍｏｌ）を４−メチルベンゾイル クロライド （０．６５ ｇ、４．２ ｍｍｏｌ）と反応させることにより、淡黄色固体として最初に得た。 収率： ０．９６ ｇ， ９９％； ｍｐ ３４８−３５０．５ ℃． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ２．３９ （ｓ， ６Ｈ）， ６．９８ （ｓ， ２Ｈ）， ７．３４ （ｄ， ４Ｈ）， ７．７９ （ｄ， ４Ｈ）， ７．８９ （ｄｄ， ８Ｈ）， １０．２５ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）．
【００８０】
その後の、アミジンへのビス（ベンズアミド）の変換は上記のように行ったが、アンモニアとの反応後の沈殿産物を濾過により回収し、ＥｔＯＨでリンスし、直接遊離塩基を得る点が異なる。（収率： ３４％）． ジヒドロクロライドは橙色油状固体として得、それは、真空で結晶化した， ｍｐ ２２７−２４０ ℃ （吸湿性）． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ２．４４ （ｓ， ６Ｈ）， ７．２４ （ｓ， ２Ｈ）， ７．４６ （ｄ， ４Ｈ）， ７．５６ （ｄ， ４Ｈ）， ７．８７ （ｄ， ４Ｈ）， ８．０１ （ｄ， ４Ｈ）， ９．０２ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， ９．８９ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， １１．６６ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）． ＭＳ （ＥＩ）： ｍ／ｚ ４８４ （Ｍ^＋， ５９）， ３６７ （８６）， ２５０ （１００）， ２２１ （２１）， １３０ （２０）， １１７ （６９）， ９０ （１９）， ４４ （３６）． 分析計算値 Ｃ_３２Ｈ_２８Ｎ_４Ｏ・２ＨＣｌ・０．５Ｈ_２Ｏ （５６６．５１）： Ｃ， Ｈ， Ｎ．
【００８１】
実施例７
ビス−｛［アルキル（またはアリール）イミノ］アミノフェニル｝フラン誘導体の他の製造 （図式４）
以下の実験が典型例である。幾つかの場合、当該生成物は、再結晶により精製した。
【００８２】
２，５−ビス［２−メチル−４−（２−ピリジルイミノ）アミノフェニル］フラン （（化合物 ６ｈ）
乾燥ＭｅＣＮ （５ ｍｌ）中の２，５−ビス（４−アミノ−２−メチルフェニル）フラン （０．３０ ｇ、１．０８ ｍｍｏｌ）溶液に、乾燥ＥｔＯＨ （１５ ｍｌ）を加え、当該溶液を氷／水バスに一時的に冷蔵した。次いで、Ｓ−（２−ナフチルメチル）チオベンズイミデートヒドロブロミド （０．８１５ ｇ、２．２７ ｍｍｏｌ）を加え、当該混合物を室温で一夜攪拌した。生じた溶液を濃縮し、油状物とし、それをエーテルで粉砕し、黄色固体を得た。当該固体を回収し、ＥｔＯＨに溶解し、ＮａＯＨ （１Ｎ）で塩基性化し、当該遊離塩基をＥｔＯＡｃで抽出した。乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）および殆どの溶媒の除去後、生じた懸濁液を過剰のエーテルで希釈し、けばだった黄色固体を得た（０．３６ ｇ、６９％）， ｍｐ １８８−１８９ ℃， それは精製する必要がない。 ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ２．５１ （ｓ， ６Ｈ）， ６．６０ （ｂｒ ｓ， ４ＮＨ）， ６．７７ （ｓ， ２Ｈ）， ６．８７ （ｍ， ４Ｈ）， ７．５５ （ｄｄ， ２Ｈ）， ７．７４ （ｄ， ２Ｈ）， ７．９５ （ｍ， ２Ｈ）， ８．３１ （ｄ， ２Ｈ）， ８．６３ （ｄ， ２Ｈ）．
【００８３】
ヒドロクロライド塩を製造するため、遊離塩基を、ＥｔＯＨ （４０ｍｌ）に懸濁し、氷−バス温度で５−１０分間、乾燥ＨＣｌガスで処理した。生じた溶液の、１５−２０分間の連続攪拌により、橙色懸濁液が得られ、それをエーテル （４０ ｍｌ）で希釈し、濾過すると、橙色粉末 （０．４０ ｇ）を得た， ｍｐ ＞１８０ ℃ ｄｅｃ． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ２．６２ （ｓ， ６Ｈ）， ７．０８ （ｓ， ２Ｈ）， ７．４４ （ｄ， ２Ｈ）， ７．４７ （ｓ， ２Ｈ）， ７．８５ （ｄｄ， ２Ｈ）， ７．９９ （ｄ， ２Ｈ）， ８．２２ （ｔ， ２Ｈ）， ８．４９ （ｄ， ２Ｈ）， ８．８９ （ｄ， ２Ｈ）， ９．３６ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， １０．１３ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， １１．８８ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）． ＭＳ （ＥＩ）： ｍ／ｚ ４８６ （Ｍ^＋， １００）， ３８２ （７７．９）， ２７８ （１２．８）， １０４ （２０．０）， ７８ （８．８）， ４３ （２８．９）． 分析計算値 Ｃ_３０Ｈ_２６Ｎ_６Ｏ・３．５ＨＣｌ・０．５Ｈ_２Ｏ （６２３．２０）： Ｃ， Ｈ， Ｎ， Ｃｌ．
【００８４】
２，５−ビス［４−（２−ピリジルイミノ）アミノフェニル］フラン （化合物 ６ａ） 遊離塩基： 黄色結晶固体， ｍｐ ２２１−２２３ ℃ （ＤＭＦ／ＥｔＯＨ／Ｈ_２Ｏ）． 収率： ６５％ ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ６．８０ （ｂｒ ｓ， ４ＮＨ）， ６．９４ （ｓ， ２Ｈ）， ７．０３ （ｄ， ４Ｈ）， ７．５６ （ｍ， ２Ｈ）， ７．７７ （ｄ， ４Ｈ）， ７．９６ （ｍ， ２Ｈ）， ８．３２ （ｄ， ２Ｈ）， ８．６４ （ｍ， ２Ｈ）． ヒドロクロライド： 橙色／赤色粉末， ｍｐ ＞１７５ ℃ ｄｅｃ． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ７．２６ （ｓ， ２Ｈ）， ７．５８ （ｄ， ４Ｈ）， ７．８５ （ｄｄ， ２Ｈ）， ８．０３ （ｄ， ４Ｈ）， ８．２２ （ｔ， ２Ｈ）， ８．５２ （ｄ， ２Ｈ）， ８．８９ （ｄ， ２Ｈ）， ９．３９ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， １０．１６ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， １１．９１ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）． ＭＳ （ＥＩ）： ｍ／ｚ ４５８ （Ｍ^＋， １００）， ３５４ （４９．１）， ２５０ （２７．６）， ２２１ （８．９）， １３０ （９．４）， １０５ （１３．６）， ７８ （８．６）． 分析計算値 Ｃ_２８Ｈ_２２Ｎ_６Ｏ・３．５ＨＣｌ （５８６．１２）： Ｃ， Ｈ， Ｎ， Ｃｌ．
【００８５】
２，５−ビス［４−（シクロヘキシルイミノ）アミノフェニル］フラン（化合物 ６ｄ） 遊離塩基： 淡黄色針， ｍｐ ２４２−２４３ ℃ ｄｅｃ （ＥｔＯＡｃ）． 収率： １７％． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： １．１８−１．９０ （ｍ， ２０Ｈ）， ２．１４ （ｍ， ２Ｈ）， ５．７１ （ｂｒ ｓ， ４ＮＨ）， ６．８２ （ｓ， ２Ｈ）， ７．６３ （ｄ， ４Ｈ）． ［４１％収率のモノ−アミジン／モノ−アミン（遊離塩基、黄色固体、ｍｐ １９５−１９６ ℃）をシリカのクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ−ＭｅＯＨ、９：１）で単離した。不溶性の反応媒体は、不完全反応の原因のようである］ ジヒドロクロライド： 褐色／桃色固体 ｍｐ ２４４−２４８ ℃ ｄｅｃ． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： １．２７ （ｍ， ６Ｈ）， １．６３−１．９６ （ｍ， １４Ｈ）， ２．７２ （ｍ， ２Ｈ）， ７．２２ （ｓ， ２Ｈ）， ７．４０ （ｄ， ４Ｈ）， ７．９６ （ｄ， ２Ｈ）， ８．６０ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， ９．３４ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， １１．３９ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）． ＭＳ （ＦＡＢ， チオグリセロール）： ｍ／ｚ ４６９．４ （ＭＨ^＋， １００）． 分析計算値 Ｃ_３０Ｈ_３８Ｎ_４Ｏ・２ＨＣｌ・０．７５ＥｔＯＨ・０．２５Ｈ_２Ｏ （５８０．６０）： Ｃ， Ｈ， Ｎ．
【００８６】
２，５−ビス［４−（ベンズイミドイル）アミノ−２−メチルフェニル］フラン（化合物 ６ｇ） 遊離塩基： 黄色結晶固体． 収率： ６０％． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ２．４８ （ｓ， ６Ｈ）， ６．５０ （ｂｒ ｓ， ４ＮＨ）， ６．７５ （ｓ， ２Ｈ）， ６．８４ （ｓ， ４Ｈ）， ７．４４ （ｍ， ６Ｈ）， ７．７１ （ｄ， ２Ｈ）， ７．９５ （ｄ， ４Ｈ）． ヒドロクロライド： 橙色／黄色吸湿性固体． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ２．６１ （ｓ， ６Ｈ）， ７．０３ （ｓ， ２Ｈ）， ７．３８−７．４４ （ｍ， ４Ｈ）， ７．６３−７．６８ （ｍ， ４Ｈ）， ７．７５−７．８０ （ｍ， ２Ｈ）， ７．９４ （ｄ， ６Ｈ）． ＭＳ （ＥＩ）： ｍ／ｚ ４８４ （Ｍ^＋， １００）， ３８１ （８７．２）， ２７８ （３７．９）， ２３５ （５．４）， ２１８ （３．１）， １９０ （５．５）， １４４ （１１．１）， １０３ （３２．８）， ７６ （９．３）． 分析計算値 Ｃ_３２Ｈ_２８Ｎ_４Ｏ・２ＨＣｌ・０．５Ｈ_２０・５６９．３９）： Ｃ， Ｈ， Ｎ．
【００８７】
２，５−ビス［２−メチル−４−（２−キノリルイミノ）アミノフェニル］フラン （化合物 ６ｉ）． 遊離塩基： 橙色粉末状結晶， ｍｐ １６８−１６９ ℃ （ＥｔＯＨ）． 収率： ５２％． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ２．５４ （ｓ， ６Ｈ）， ６．８０ （ｓ， ２Ｈ）， ６．９５ （ｍ， ４Ｈ）， ７．６９ （ｍ， ２Ｈ）， ７．７８ （ｄ， ２Ｈ）， ７．８４ （ｍ， ２Ｈ）， ８．０７ （ｄ， ２Ｈ）， ８．１２ （ｄ， ２Ｈ）， ８．４４ （ｄ， ２Ｈ）， ８．５０ （ｄ， ２Ｈ）． Ｄｉヒドロクロライド： 橙色固体， ｍｐ ＞１８５ ℃ ｄｅｃ． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ２．６５ （ｓ， ６Ｈ）， ７．１０ （ｓ， ２Ｈ）， ７．５０ （ｍ， ４Ｈ）， ７．８５ （ｍ， ２Ｈ）， ８．０１ （ｍ， ２Ｈ）， ８．２０ （ｄ， ２Ｈ）， ８．２６ （ｄ， ２Ｈ）， ８．４６ （ｄ， ２Ｈ）， ８．８０ （ｄ， ２Ｈ）， ９．４４ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， １０．２１ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， １１．９８ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）． ＭＳ （ＦＡＢ， チオグリセロール）： ｍ／ｚ ５８７．２ （ＭＨ^＋， １００）． 分析計算値 Ｃ_３８Ｈ_３０Ｎ_６Ｏ・２．０ＨＣｌ・１．７５Ｈ_２Ｏ （６９１．１３）： Ｃ， Ｈ， Ｎ， Ｃｌ．
【００８８】
２，５−ビス［２−メチル−４−（５−メチル−２−ピリジルイミノ）アミノフェニル］フラン（化合物 ６ｊ）． 遊離塩基： 黄色結晶固体， ｍｐ １５６−１５８ ℃ （Ｅｔ_２Ｏ／ヘキサン）． 収率： ７４％． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ２．３７ （ｓ， ６Ｈ）， ２．５０ （ｓ， ６Ｈ）， ６．５５ （ｂｒ ｓ， ４ＮＨ）， ６．７５ （ｓ， ２Ｈ）， ６．８５ （ｍ， ４Ｈ）， ７．７０−７．７６ （ｍ， ４Ｈ）， ８．１８ （ｄ， ２Ｈ）， ８．４５ （ｓ， ２Ｈ）． ヒドロクロライド： 橙色 固体， ｍｐ ＞１７５ ℃ ｄｅｃ． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ２．４９ （ｓ， ６Ｈ）， ２．６２ （ｓ， ６Ｈ）， ７．０８ （ｓ， ２Ｈ）， ７．４３ （ｄ， ２Ｈ）， ７．４７ （ｓ， ２Ｈ）， ７．８５ （ｄｄ， ２Ｈ）， ７．９８ （ｄ， ２Ｈ）， ８．０３ （ｄ， ２Ｈ）， ８．４２ （ｄ， ２Ｈ）， ８．７４ （ｓ， ２Ｈ）， ９．２９ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， １０．０７ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， １１．８３ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）． ＭＳ （ＥＩ）： ｍ／ｚ ５１４ （Ｍ^＋， １９．２）， ３９６ （１００）， ２７８ （３４．５）， １４４ （８．０）， １１８ （３３．６）， ９１ （１３．６）， ４３ （２２．８）． 分析計算値 Ｃ_３２Ｈ_３０Ｎ_６Ｏ・３．２５ＨＣｌ・０．７５Ｈ_２Ｏ （６４６．６２）： Ｃ， Ｈ， Ｎ， Ｃｌ．
【００８９】
２，５−ビス［２−メトキシ−４−（２−ピリジルイミノ）アミノフェニル］フラン（化合物 ６ｋ）． 遊離塩基： 明黄色結晶固体， ｍｐ １９６−１９７ ℃ （ＥｔＯＡｃ／Ｅｔ_２Ｏ）． 収率： ７５％． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ３．９２ （ｓ， ６Ｈ）， ６．６４ および ６．６７ （ｄ， ２Ｈ および ｓ， ２Ｈ， 広範のＮＨシグナルをオーバーラップする）， ６．８９ （ｓ， ２Ｈ）， ７．５５ （ｄｄ， ２Ｈ）， ７．８６ （ｄ， ２Ｈ）， ７．９５ （ｍ， ２Ｈ）， ８．３２ （ｄ， ２Ｈ）， ８．６３ （ｄ， ２Ｈ）． ジヒドロクロライド： ブリックオレンジ色固体， ｍｐ ＞１８０ ℃ ｄｅｃ． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ４．００ （ｓ， ６Ｈ）， ７．１６ （ｓ， ２Ｈ）， ７．１８ （ｄ， ２Ｈ）， ７．３４ （ｓ， ２Ｈ）， ７．８５ （ｄｄ， ２Ｈ）， ８．１３ （ｄ， ２Ｈ）， ８．２２ （ｔ， ２Ｈ）， ８．４９ （ｄ， ２Ｈ）， ８．８９ （ｄ， ２Ｈ）， ９．３９ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， １０．１５ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， １１．８９ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）． ＭＳ （ＥＩ）： ｍ／ｚ ５１８ （Ｍ^＋， １００）， ４１４ （９０．０）， ３７１ （１３．３）， ３１０ （１２．７）， ２６７ （９．７）， １５５ （６．０２）， １０４ （２５．９）， ７７ （９．６）， ４３ （１３．６）． 分析計算値 Ｃ_３０Ｈ_２６Ｎ_６Ｏ・２．０ＨＣｌ・２．０Ｈ_２Ｏ （６２７．５１）： Ｃ， Ｈ， Ｎ， Ｃｌ．
【００９０】
２，５−ビス［２−クロロ−４−（２−ピリジルイミノ）アミノフェニル］フラン （化合物 ６ｌ）． 遊離塩基： 橙色結晶固体， ｍｐ １８９−１９０ ℃ （ＥｔＯＨ）． 収率： ２５％． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ６．８５ （ｂｒ ｓ， ４ＮＨ）， ７．０２ （ｄｄ， ２Ｈ）， ７．０８ （ｄ， ２Ｈ）， ７．１７ （ｓ， ２Ｈ）， ７．５６ （ｍ， ２Ｈ）， ７．９３−７．９８ （ｍ， ４Ｈ）， ８．２９ （ｄ， ２Ｈ）， ８．６４ （ｍ， ２Ｈ）． ジヒドロクロライド： 黄色／橙色固体， ｍｐ ＞１８０ ℃ ｄｅｃ． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ７．４５ （ｓ， ２Ｈ）， ７．６０ （ｄ， ２Ｈ）， ７．８０ （ｓ， ２Ｈ）， ７．８６ （ｄｄ， ２Ｈ）， ８．２３ （ｍ， ４Ｈ）， ８．５０ （ｄ， ２Ｈ）， ８．９０ （ｄ， ２Ｈ）， ９．５４ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， １０．２３ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， １１．９８ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）． ＭＳ （ＥＩ）： ｍ／ｚ ５３０， ５２８， ５２６ （Ｍ^＋， １３．２， ６９．８， １００）， ４２６， ４２４， ４２２ （７．９， ４８， ７２．４）， ３２２， ３２０， ３１８ （２．６， １７．４， ２６．６）． 分析計算値 Ｃ_２８Ｈ_２０Ｃｌ_２Ｎ_６Ｏ・２．０ＨＣｌ・１．５Ｈ_２Ｏ （６２７．３５）： Ｃ， Ｈ， Ｎ， Ｃｌ．
【００９１】
２，５−ビス［２，６−ｄｉメチル−４−（２−ピリジルイミノ）アミノフェニル］フラン （化合物 ６ｍ）． 遊離塩基： 淡黄色結晶， ｍｐ ２０６−２０７ ℃ （ＥｔＯＨ）． 収率： ８０％． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ２．１９ （ｓ， １２Ｈ）， ６．４７ （ｓ， ２Ｈ）， ６．５５ （ｂｒ ｓ， ４ＮＨ）， ６．６９ （ｓ， ４Ｈ）， ７．５４ （ｍ， ２Ｈ）， ７．９４ （ｍ， ２Ｈ）， ８．２９ （ｄ， ２Ｈ）， ８．６２ （ｄ， ２Ｈ）． ヒドロクロライド： けばだった黄色固体， ｍｐ ＞ｘｘｘ ℃ ｄｅｃ． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ２．２８ （ｓ， １２Ｈ）， ６．６８ （ｓ， ２Ｈ）， ７．２８ （ｓ， ４Ｈ）， ７．８４ （ｍ， ２Ｈ）， ８．２１ （ｔ， ２Ｈ）， ８．４８ （ｄ， ２Ｈ）， ８．８８ （ｄ， ２Ｈ）， ９．３７ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， １０．１２ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， １１．８７ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）． ＭＳ （ＥＩ）： ｍ／ｚ ５１４ （Ｍ^＋， ８．５）， ４１０ （３８．７）， ３０６ （１００）， ２９１ （１６．０）， １４８ （４５．４）， １０４ （５６．３）， ７７ （３１．０）． 分析計算値 Ｃ_３２Ｈ_３０Ｎ_６Ｏ・３．７５ＨＣｌ・０．５Ｈ_２Ｏ （６６０．３５）： Ｃ， Ｈ， Ｎ， Ｃｌ．
【００９２】
実施例８
アセトアミジンの製造
以下のアセトアミジンを精製し、遊離塩基への変換なしにＨＢｒ塩として解析した。
【００９３】
２，５−ビス［４−（アセトイミドイル）アミノフェニル］フランジヒドロブロミド （化合物 ６ｅ）． けばだった褐色／橙色固体， ｍｐ ３０７−３０９．５ ℃ ｄｅｃ （ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ）． 収率： ５７％． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６， ７０ ℃）： ２．３７ （ｓ， ６Ｈ）， ７．１７ （ｓ， ２Ｈ）， ７．４０ （ｄ， ４Ｈ）， ７．９４ （ｄ， ４Ｈ）， ８．５２ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， ９．４３ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， １１．１３ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）． ＭＳ （ＦＡＢ， チオグリセロール）： ｍ／ｚ ３３３．２ （ＭＨ^＋， １００）． 分析計算値 Ｃ_２０Ｈ_２０Ｎ_４Ｏ・２．０ＨＢｒ （４９４．２３）： Ｃ， Ｈ， Ｎ．
【００９４】
２，５−ビス［４ （アセトイミドイル） アミノ−２−メチルフェニル］フランジヒドロブロミド（化合物 ６ｆ）． けばだった褐色／黄色固体， ｍｐ ２８２．５−２８４ ℃ ｄｅｃ （ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ）． 収率： ６４％． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６， ７０ ℃）： ２．３７ （ｓ， ６Ｈ）， ２．５７ （ｓ， ６Ｈ）， ６．９９ （ｓ， ２Ｈ）， ７．２７ （ｄ， ２Ｈ）， ７．２８ （ｓ， ２Ｈ）， ７．８８ （ｄ， ２Ｈ）， ８．５２ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， ９．４２ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， １１．１２ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）． ＭＳ （ＦＡＢ， チオグリセロール）： ｍ／ｚ ３６１．２ （ＭＨ^＋， １００）． 分析計算値 Ｃ_２０Ｈ_２０Ｎ_４Ｏ・２．０ＨＢｒ・０．３ＭｅＯＨ （５３１．８９）： Ｃ， Ｈ， Ｎ．
【００９５】
実施例９
ピリジン−２−チオカルボキシアミドの製造
Ｔａｙｌｏｒの一般的方法を適用し、２−シアノピリジン（７．２８ ｇ、７．０ ｍｍｏｌ）およびチオアセトアミド （１０．５２ ｇ、１４．０ ｍｍｏｌ）の混合物をＨＣｌ−飽和ＤＭＦ ６０ ｍｌで処理し、当該溶液を、最初は８０ ℃（その温度は反応の間、９５℃まで徐々に上昇させる）でセットしたオイルバス上のオープンフラスコ中で激しく攪拌した。Ｔａｙｌｏｒ， Ｅ． Ｃ． ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ａｍ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． １９６０， ８２， ２６５６−２６５７． ８０分後（ＴＬＣモニタリング）、生じた橙色懸濁液を冷却し、濃ＮａＯＨ／氷で中性化し、ＥｔＯＡｃで抽出した。当該抽出物を水（３ｘ）で洗浄し、次いで明褐色固体（温水で粉砕した）に濃縮し、回収した。乾燥した生成物をシリカゲルカラムに通過させ、ＥｔＯＡｃ：ヘキサン（２：１）で溶出させ、殆どの溶媒を除去およびヘキサンによる希釈後、黄色結晶固体を得た（６．３６ ｇ、６６％）， ｍｐ １３６−１３７ ℃； ｌｉｔ ｍｐ １３７ ℃．
【００９６】
５−メチルピリジン−２−チオカルボキシアミド． ３０分の反応時間で、上記のように、２−シアノ−５−メチルピリジンから製造した。Ｍｏｙｎｅｈａｎ， Ｔ． Ｍ． ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． １９６２， ２６３７−２６５８参照。収率： ５９％． 金色結晶， ｍｐ １７２．５−１７３ ℃． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３）： ２．３９ （ｓ， ３Ｈ）， ７．６０ （ｂｒ ｓ， ＮＨ）， ７．６１ （ｄｄ， １Ｈ）， ８．３１ （ｄ， １Ｈ）， ８．５７ （ｄ， １Ｈ）， ９．４２ （ｂｒ ｓ， ＮＨ）．
【００９７】
実施例１０
Ｓ−（２−ナフチルメチル）チオイミデートの製造
以下の新規Ｓ−（２−ナフチルメチル）チオイミデートを、文献に従い、１．５時間のＣＨＣｌ_３（ＥｔＯＨ−フリー）において適当なチオアミドを（２−ブロモメチル）ナフタレンと反応させることにより製造した。Ｓｈｅａｒｅｒ， Ｂ． Ｇ．； ｅｔ ａｌ．， Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ． １９９７， ３８， １７９−１８２参照。エーテルによる希釈後、沈殿生成物を回収し、エーテルでリンスし、真空で乾燥させた。
【００９８】
Ｓ−（２−ナフチルメチル）シクロヘキサンチオイミデート・ＨＢｒ． 収率： ９１％． 白色固体， ｍｐ １９２−１９２．５ ℃． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： １．１４−１．３２ （ｍ， ３Ｈ）， １．４５−１．５３ （ｍ， ２Ｈ）， １．６３ （ｄ， １Ｈ）， １．７６ （ｄ， ２Ｈ）， １．８７ （ｄ， ２Ｈ）， ２．８４ （ｔ， １Ｈ）， ４．７３ （ｓ， ２Ｈ）， ７．５３−７．５６ （ｍ， ３Ｈ）， ７．８９−７．９７ （ｍ， ３Ｈ）， ８．０１ （ｓ， １Ｈ）．
【００９９】
Ｓ−（２−ナフチルメチル）チオベンズイミデート・ＨＢｒ． 収率： ９４％． 白色固体， ｍｐ ２１０−２１２ ℃ ｄｅｃ． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ４．９０ （ｓ， ２Ｈ）， ７．５４−７．６２ （ｍ， ２Ｈ）， ７．６２−７．６６ （ｍ， ３Ｈ）， ７．７８−７．８２ （ｍ， １Ｈ）， ７．８８−７．９９ （ｍ， ５Ｈ）， ８．０６ （ｓ， １Ｈ）．
【０１００】
Ｓ−（２−ナフチルメチル）−２−ピリジルチオイミデート・ＨＢｒ． 収率： ５８％． 白色のけばだった固体， ｍｐ １９２ ℃ ｄｅｃ． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ４．８０ （ｓ， ２Ｈ）， ７．５３−７．５７ （ｍ， ２Ｈ）， ７．５９−７．６２ （ｄｄ， １Ｈ）， ７．７６−７．７９ （ｍ， １Ｈ）， ７．９０−７．９７ （ｍ， ３Ｈ）， ８．０５ （ｓ， １Ｈ）， ８．１０−８．１４ （ｍ， １Ｈ）， ８．２６ （ｄ， １Ｈ）， ８．７８−８．８０ （ｍ， １Ｈ）．
【０１０１】
Ｓ−（２−ナフチルメチル）−５−メチル−２−ピリジルチオイミデート・ＨＢｒ． 収率： ６５％． 白色のけばだった固体， ｍｐ １９０−１９１ ℃ ｄｅｃ． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ２．４２ （ｓ， ３Ｈ）， ４．７９ （ｓ， ２Ｈ）， ７．５３−７．５７ （ｍ， ２Ｈ）， ７．５９−７．６２ （ｄｄ， １Ｈ）， ７．９０−７．９７ （ｍ， ４Ｈ）， ８．０５ （ｓ， １Ｈ）， ８．１７ （ｄ， １Ｈ）， ８．６４ （ｓ， １Ｈ）．
【０１０２】
Ｓ−（２−ナフチルメチル）−２−キノリルチオイミデート・ＨＢｒ． 収率： ２３％． 明褐色のけばだった固体， ｍｐ １８４−１８６ ℃ ｄｅｃ． ^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ_６）： ４．７３ （ｓ， ２Ｈ）， ７．５３−７．５５ （ｍ， ２Ｈ）， ７．６２−７．６４ （ｄｄ， １Ｈ）， ７．７８ （ｔ， １Ｈ）， ７．８７−７．９７ （ｍ， ４Ｈ）， ８．０７ （ｓ， １Ｈ）， ８．１２ （ｄ， ２Ｈ）， ８．２８ （ｄ， １Ｈ）， ８．６６ （ｄ， １Ｈ）．
【０１０３】
実施例１１
本発明の化合物の生物学的試験： 材料および方法
熱融解値（ΔＴｍ）の相違を測定し、ＤＮＡサンプルを、従前のＢｏｙｋｉｎ， Ｄ． Ｗ． ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． １９９８， ４１， １２４−１２９ および Ｆｒａｎｃｅｓｃｏｎｉ， Ｉ． ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． １９９９， ４２， ２２６０−２２６５に記載されているように製造した。
【０１０４】
Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ感受性試験
本発明の化合物を、Ｃｏｌｌｉｎｓ， Ｌ． ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ． １９９７， ４１， １００４−１００９によるｆｌｕｏｒｏｍｅｔｒｉｃ ｂｒｏｔｈ ｍｉｃｒｏｄｉｌｕｔｉｏｎ ａｓｓａｙ， ｔｈｅ Ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ Ａｓｓａｙ （ＭＡＢＡ）を用い、ＢＡＣＴＥＣ １２Ｂ培地中でＭ． ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ Ｈ３７Ｒｖに対し試験した。化合物は、最初、６．２５ ｕｇ／ｍｌで評価し、非処理培養物に対し少なくとも９０％の蛍光が減少したものを、より低い濃度で試験することによりＭＩＣを評価した。当該ＭＩＣは、対照培養物と比較すると相対的蛍光単位（ｒｅｌａｔｉｖｅ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｕｎｉｔｓ）が９０％以上減少する化合物の最も低い濃度と定義した。アンチマイコバクテリウムデータは、Ｕ．Ｓ． Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ａｌｌｅｒｇｙ ａｎｄ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅｓと契約した研究および開発を通じ、Ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ Ｃｏｏｒｄｉｎａｔｉｎｇ Ｆａｃｉｌｉｔｙ（ＴＡＡＣＦ））により提供された。
【０１０５】
抗真菌類試験生物体
この研究において、表１のすべての化合物に使用した真菌類には、２つの引用株Ｃ． ａｌｂｉｃａｎｓ Ａ３９ および Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｕｍｉｇａｔｕｓ （株１６８．９５）が含まれる。真菌類を用いた６ｊの拡大した研究を表３に列挙する。
【０１０６】
培地
抗真菌類感受性試験は、グルタミンを有するが重炭酸ナトリウムは有さないＲＰＭＩ １６４０培地（Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．， Ｓｔ． Ｌｏｕｉｓ， Ｍｏ．）であって、０．１６５ Ｍ モルホリノプロパンスルホン酸でｐＨ ７．０に緩衝化される当該培地で行った。
【０１０７】
抗真菌類インビトロ感受性試験
酵母のＭＩＣを決定する実験は、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓの推奨によるブロスマクロダイリューション法（ｂｒｏｔｈ ｍａｃｒｏｄｉｌｕｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ）により行った。Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ． Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｂｒｏｔｈ ｄｉｌｕｔｉｏｎ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ ｔｅｓｔｉｎｇ ｏｆ ｙｅａｓｔｓ Ｄｏｃｕｍｅｎｔ Ｍ２７−Ｔ参照。試験的標準、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ， Ｗａｙｎｅ， Ｐａ．， １９９５）。標準化法と比較した相違は、１００から０．０９μｇ／ｍｌの範囲の薬物希釈の選択であった。端的に、この方法は、３５℃で増殖し０．５ ｘ １０^３ から ２．５ ｘ １０^３ ＣＦＵ／ｍｌの濃度になるように調節した接種量の使用、３５℃での当該培養物の培養およびＣ． ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓを除くすべての酵母の４８時間での測定（Ｃ． ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓのときは７２時間での測定）からなる。対照増殖試験管の温度のものと比べて、目視濁度が８０％未満に阻害されるかまたはそれと同等である、培養物の最も低い薬物濃度としてＭＩＣを定義した。
【０１０８】
最小殺真菌濃度（ＭＦＣ）は、Ｓａｂｏｕｒａｕｄ寒天プレートでの増殖を完全に阻害する試験管から１００ μｌアリコートをプレートすることにより決定した。３またはそれより少ないコロニーを生ずる最も低い薬物濃度をＭＦＣとして記録した。
【０１０９】
モールドは同じ方法で試験したが、以下の修飾を行った。単離体は、適当な胞子形成が生じた後（４から１４日）、３０℃のＳａｂｏｕｒａｕｄデキストロース寒天上で増殖させた；分生子は、滅菌蒸留水中の０．８５％ ＮａＣｌ および ０．０５％ Ｔｗｅｅｎ ８０の滅菌溶液にコロニーを浸すことにより、回収した。接種体を、カウンティングのための血球計数器で調製し、ＲＰＭ１ １６４０培地で希釈し、おおよそ０．５ ｘ １０^３ から ２．５ ｘ １０^３ ＣＦＵ／ｍｌの最終接種体サイズ（ｉｎｏｃｕｌｕｍ ｓｉｚｅ）を得た。当該接種体サイズは、当該接種体のアリコートをプレーティングすることにより変わった。当該培養物は、４８時間から７２時間、または対照試験管の増殖を見ることができるようになるまで、３０℃でインキュベーションした。
【０１１０】
実施例１２
生物学的試験の結果
融解温度を、ポリｄＡ・ｄＴに結合する化合物５ および ６について測定し、これらの薬物候補のＤＮＡ結合親和性の定量的評価を得た（表２）。溶液中の薬物−ＤＮＡ複合体および遊離ＤＮＡの間のＴｍ値の相違（ΔＴｍ）は、ＤＮＡと分子との相互作用強度を評価する有用なツールとなる。幾つかの化合物がポリｄＡ・ｄＴに非常に強く結合するため（表２）、これら化合物と、Ｄｉｃｋｅｒｓｏｎ−Ｄｒｅｗ十二量体ｄ（ＣＧＣＧＡＡＴＴＣＧＣＧ）_２ （配列番号１）、相違し短いＡＴ配列および異なるグローブ特性を有するＤＮＡと、の相互作用をもまた研究した。薬物−十二量体複合体（表２）のより低いΔＴｍにより影響を受ける、十二量体に対する薬物の結合の減少により、これら推定マイナー−グローブ結合化合物のＤＮＡ結合親和性のよりよい相対比較を行い得る。
【０１１１】
表２． 本発明化合物のインビトロ抗菌活性およびＤＮＡ結合結果
【表２】

【０１１２】
（ａ） ６．２５ μｇ／ｍｌでの阻害％
（ｂ） ＡＴ ＝ ポリｄＡ・ｄＴ； オリゴ ＝ ｄ（ＣＧＣＧＡＡＴＴＣＧＣＧ）_２
（ｃ） ｎｔ ＝ 試験せず
（ｄ） ｎｄ ＝ 測定せず
【０１１３】
親ジグアニジノ化合物５ａは、ポリｄＡ・ｄＴ（２１．６）および当該十二量体（１０．８）の両方のΔＴｍ値により判断されるようなＤＮＡに対する強力な親和性を示した。これらの値を、アミジンおよびグアニジンカチオン性中心のコアフラン構造における親和性の僅かな相違が示唆される親アミジン２，５−ビス［４−アミジノフェニル］フランの値（２５ および １１．７）と十分に比較する。親ジグアニジノ５ａと幾つかの逆アミジンコンジナー６ａ−６ｅとの、当該十二量体に対する結合のΔＴｍの比較に基づき、末端基の構造的変化から生ずる幾つかの興味のひく効果を記載する。第一に、逆アミジンを生ずるフェニル、置換フェニルまたはシクロヘキシル末端基（６ｂ、６ｃ および ６ｄ）は、親ジグアニジノ５ａを超えて親和性が増加した。関連の一連のジアミジンでは、末端基のバルクの増加と共に親和性が増加し、それにより、当該末端基とマイナー−グローブの壁とのｖａｎ ｄｅｒ Ｗａａｌｓ相互作用が増加し、それは、このシステムにおける場合のようである。興味がひかれることに、当該化合物と末端２−ピリジル基６ａとのΔＴｍ値は、そのフェニル対応物６ｂのものよりも有意に低い。６ａのより低い親和性は、異なる結合モード、または２つの構造的に極めて関連するジカチオン性類似体に対する異なる塩基対選択性を示唆し得る。しかし、末端フェニル基、６ｇを有する２，５−ジアリールフラン系の２つのフェニル環のそれぞれへのメチル基の導入により、ピリジル対応物、６ｈに類似するまで、ΔＴｍはより低くなる。６ｅ および ６ｆで見られるような小アルキル末端基、メチル基の使用によってもまた、結合親和性の有意な低下が起こる。
【０１１４】
２，５−ジアリールフランフレームワークの２つのフェニル環のそれぞれにおける単一置換基の配置により、ジグアニジンと逆アミジンシリーズの両方のΔＴｍ値に顕著な相違が生じた。ジグアニジンシリーズの十二量体に結合するためのΔＴｍ値の比較に基づき、おおよそ同じサイズであるが、フェニル環の電気的性質の相違する単一置換基の配置によって、ΔＴｍ値がより低くなる； ５ａの値を５ｂ−５ｅと比較する。最も劇的な効果が、ΔＴｍ値を零に減少する、最も強力な電子求引性基、５ｅのＣＦ_３で観察された。
【０１１５】
末端２−ピリジル基（６ａ、６ｈ−６ｍ）を有する一連の化合物のΔＴｍ値により、置換基に対する異なる感受性が見られた。この場合、２，５−ジアリールフランフレームワークの２つのフェニル環のそれぞれへの単一置換基の導入により、当該置換基がメチル（６ｈ）またはメトキシ（６ｋ）であるとき、ΔＴｍ値の効果は小さくなる。しかし、塩素基（６ｌ）の導入により、当該値の有意な減少が生じ、恐らく部分的にｐＫ効果の要因となる。ΔＴｍにおける塩素基の有害な効果は、類似体グアニジン５ｄの場合よりもピリジル誘導体６ｌの場合のほうが大きく、恐らくグアニジンと比べると逆アミジンのより低い塩基性の要因となる。ジグアニジンシリーズからの結果と一致して、コアフェニル環（６ｍ）のそれぞれにおける２つのメチル基の導入はまた、ＤＮＡ親和性を劇的に減少させる。興味がひかれることに、末端２−ピリジルの２−キノイル基（６Ｉ）との置換もまた、末端基の大きさにおける一定の限界を示唆するΔＴｍの有意な減少を生ずる。他方、末端ピリジル環（６ｊ）におけるメチル基の導入は、結合親和性を僅かに促進した。
【０１１６】
これらの化合物の抗菌性データもまた、表２に要約する。ジグアニジノ化合物間の最も大きい活性は、５ａおよび５ｂで見られ、Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓおよびＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓの両方に対し良好なインビトロ活性が見られた。これらの化合物は、両生体に対し１ から ３ μｇ／ｍｌのＭＩＣ値となった。両化合物は、Ｃ． ａｌｂｉｃａｎｓに対し殺真菌性があった。２，５−ビス［アルキルイミノ］アミノフェニル］フラン（６ｄ、６ｅ、６ｆ）は、一般的に有意な殺真菌活性を示さないが、より大きいシクロヘキシル基を有する化合物６ｄは、Ｍ． ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓに対し幾らかの活性を示した。
【０１１７】
２，５−ビス［アリールイミノ］アミノフェニル］フランを２つのグループに分けることができる： 末端基がフェニルまたは置換フェニルであるもの、およびそれが２−ピリジルまたは置換２−ピリジルであるもの。末端フェニル基クラスの化合物は、高い抗真菌活性を示さないが、６ｂおよび６ｇの両方は、Ｍ． ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓに対し、それぞれＭＩＣ値０．７８および１．５６ μｇ／ｍｌの有意な活性を示した。末端ピリジル基クラス中の４つの化合物（６ａ、６ｈ、６ｊ および ６ｋ）は、Ｍ． ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓに対し、１．０から２．０ μｇ／ｍｌの範囲のＭＩＣ値の、見込みのある活性を示した。殆どの２−ピリジル化合物は、適度の抗真菌活性のみを示した。例外として、６ｊおよび６ｋは、Ｃ． ａｌｂｉｃａｎｓに対し、１．０ μｇ／ｍｌ以下のＭＩＣレベルの活性を示し、６ｋは、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｕｍｉｇａｔｕｓに対する同レベルの活性を示した。
【０１１８】
これら化合物の抗真菌活性のスペクトルを評価するため、ピリジル−置換アミジン６ｊおよび６ｋを、他の病原性真菌類に対する研究のため選択した（表３）。化合物６ｊは、Ｃ． ａｌｂｉｃａｎｓに対しかなり有効であり、数種の株に対し殺真菌活性を示した。化合物６ｊは、両方のＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ種に対しあまり効果がなかった。化合物６ｊは、Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ａｒｒｈｉｚｕｓに対し良好な殺真菌活性を示したが、モールドＦｕｓａｒｉｕｍ ｓｏｌａｎｉに対してはあまり効果的でなかった。化合物６ｋは、広範の真菌パネル（Ｅｘｐａｎｄｅｄ Ｆｕｎｇｕｓ Ｐａｎｅｌ）で有意な活性は見られなかった。
【０１１９】
要約すると、ジカチオン性２，５−ビス（４−グアニジノフェニル）フラン５ａ−５ｆ、２，５−ビス［４−（アリールイミノ）アミノフェニル］フラン６ａ−６ｃ、６ｇ−６ｍ、および２，５−ビス［４−（アルキルイミノ）アミノフェニル］フラン６ｄ−６ｆは、２，５−ビス［トリ−ｎ−ブチルスタンニル］フランから出発して合成された。ポリｄＡ・ｄＴ および二重オリゴマーｄ（ＣＧＣＧＡＡＴＴＣＧＣＧ）_２ （配列番号１）を用いる熱融解研究により、多数の化合物の高いＤＮＡ結合親和性が説明される。２，５−ジアリールフランシリーズ中のグアニジンおよび逆アミジンの両方は、強力なＤＮＡ結合特性を有する。
【０１２０】
これら両方のクラス中の化合物は、抗真菌および抗マイコバクテリウム活性の両方を示す。加えて、それらは、広範のスペクトルの抗真菌剤であり得る。合成された１９の新規のジカチオン性化合物のうち、６つ（６ａ、６ｂ、５ｂ、６ｈ、６ｊ、６ｋ）が、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓに対し２ μｇ／ｍｌまたはそれ未満のＭＩＣを示した。静真菌性の標準的抗真菌薬物フルコナゾール（Ｆｌｕｃｏｎａｚｏｌｅ）とは異なり、Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓに対しスクリーニングした１９のうち、４つ（５ａ、５ｂ、６ｊ、６ｋ）が２ μｇ／ｍｌまたはそれ未満のＭＩＣとなり、２つ（５ａ、６ｋ）が殺真菌性を示した。試験化合物の１つ（６ｋ）は、１ μｇ／ｍｌのＭＩＣを示し、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｕｍｉｇａｔｕｓに対し殺真菌性があった。幾つかの化合物は、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓに対し阻害活性を有しているが、それらすべては、Ｃ． ａｌｂｉｃａｎｓおよびＡ． ｆｕｍｉｇａｔｕｓと比べてこの病原性酵母に対しあまり効果がないように思われた。
【０１２１】
Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｂｒｕｃｅｉ ｒｈｏｄｅｓｉｅｎｓｅに対する評価により、（アリールイミノ）アミノフェニルフランは、特にアリールが２−ピリジルのとき、０．０２ から ０．１ μｇ／ｍＬの範囲で有効であることがインビトロで示された； ペンタミジンおよびフラミジンの効果のおおよそ１／１０。対照的に、これら新規化合物は、ペンタミジンおよびフラミジンよりも１０倍効果があり、Ｔ． ｃｒｕｚｉに対しベンズニダゾールの活性に匹敵する。
【表３】

【０１２２】
ＭＩＣおよびＭＦＣ値は、μｇ／ｍｌである。ＭＩＣ ８０％ ＝ 接種量の８０％が阻害される。ＭＩＣ １００％ ＝ 接種量の１００％が阻害される。ＭＦＣ ＝ 最小殺真菌濃度
【０１２３】
本明細書および実施例では、本発明の典型的な好ましい実施態様を開示するが、特定の語句を用い、それらは、一般的および記述的意味においてのみ使用し、特許請求の範囲で開示する本発明の範囲を制限することを目的とするものではない。
【図面の簡単な説明】
【図１】図１は、本発明の化合物の合成に有用となり得る種々の化学スキームを示している。[0001]
Related application citations
This application claims priority of US Provisional Application No. 60 / 246,244, filed November 6, 2000, the disclosure of which is incorporated herein by reference in its entirety.
[0002]
Statement of Government Support
This invention was made with government support under Grant Nos. RO1AI 46365-01A2 and RO1GN61587 by the National Institutes of Health. The United States Government has certain rights in the invention.
[0003]
Field of the invention
The present invention relates to Mycobacterium tuberculosis, Trypanosoma spp. , Candida albicans, Aspergillus spp. , Cryptosporidium parvum, Giardia lamblia, Plasmodium spp. , Pneumocystis carinii, Toxoplasma gondii, Fusarium solani, and Cryptococcus neoformans.
[0004]
Background of the invention
The causes of microbial infections (eg, mycobacterium, fungal and protozoal infections) in immunocompromised populations have increased significantly over the past few years. In particular, Candida species, especially Candida albicans, are often an important pathogen in patients infected with the human immunodeficiency virus (HIV). Another pathogen, Pneumocystis carinii, produces pneumonia (PCP), which is believed to be one cause of death in patients with AIDS.
[0005]
Human African trypanosomiasis (HAT) has once again shook more than 60 million people. Currently, it is estimated that 350,000 to 450,000 people are infected.
[0006]
Other serious and life-threatening microbial infections include Mycobacterium tuberculosis, Aspergillus spp. , Cryptosporidium parvum, Giardia lamblia, Plasmodium spp. , Toxoplasma gondii, Fusarium solani, and Cryptococcus neoformans.
[0007]
The antibacterial properties of dicationic molecules have been studied since the 1930s. Compounds of this type typically use an amidine group as the cationic moiety and are available from Cryptosporidium parvum, Giardia lamblia, Leishmania spp. , Plasmodium spp. , Pneumocystis carinii, Toxoplasma gondii, Trypanosoma spp. , Candida albicans, Aspergillus spp. , And activity against a number of pathogens, including Cryptococcus neoformans. For example, King, H .; et al. , Ann. Trop. Med. Parasitol. 1938, 32, 177-192; Blagburn, B .; L. et al. , Antimicrob. Agents Chemother. 1991, 35, 1520-1523; Bell, C.I. A. et al. , Antimicrob. Agents Chemother. 1991, 35, 1099-1107; Bell, et al. , Antimicrob. Agents Chemother. 1990, 34, 1381-1386; Kirk, R .; et al. , Ann. Trop. Med. Parastiol. 1940, 34, 181-197; Fulton, J. et al. D. Ann. Trop. Med. Parasitol. 1940, 34, 53-66; Ivady, V .; G. FIG. et al. , Monatschr. Kinderheilkd. 1958, 106, 10-14; Boykin, D .; W. et al. , J. et al. Med. Chem. 1995, 38, 912-916; Boykin, D .; W. et al. , J. et al. Med. Chem. 1998, 41, 124-129; Francesconi et al. , J. et al. Med. Chem. 1999, 42, 2260-2265; Lindsay, D .; S. et al. , Antimicrob. Agents Chemother. 1991, 35, 1914-1916; Lourie, E .; M; et al. , Ann. Trop. Med. Parasitol. 1939, 33, 289-304; Lourie, E .; M. et al. , Ann. Trop. Med. Parasitol. 1939, 33, 305-312; Das, B .; P. et al. , J Med. Chem. 1976, 20, 531-536; Del Poeta, M .; et al. , J. et al. Antimicrob. Chemother. 1999, 44, 223-228; Del Poeta, M .; et al. , Antimicrob. Agents Chemother. 1998, 42, 2495-2502; Del Poeta, M .; et al. , Antimicrob. Agents Chemother. 1998, 42, 2503-2510.
[0008]
Despite the broad activity of diamidine, only compounds of this chemical type, pentamidine, were found to be significant for clinical use. Pentamidine is used in African trypanosomiasis, antimony-resistant leishmaniasis and P. carinii is used clinically for pneumonia. See, for example, Apted, F.R. I. C. , Pharmacol. Ther. 1980, 11, 391-413; Bryceson, A .; D. M. et al. , Trans. Roy. Soc. Trop. Med. Hyg. 1985, 79, 705-714; Hughes, W.C. T. Et al. , Antimicrob. Agents Chemother. 1974, 5, 289-293.
[0009]
Many compounds belonging to the dicationic molecule exhibit binding of the AT-rich site to the DNA of the minor globe, and the details of the interaction with the minor globe were elucidated from biophysical studies and some crystal structures. . These types of molecules bind by first binding to DNA, then by inhibiting one or more of several DNA-dependent enzymes (ie, topoisomerases, nucleases, etc.), or possibly by direct inhibition of transcription. It is hypothesized to exert biological activity. Tanius, F.S. A. et al. , J. et al. Biomol. Struct. & Dyn. 1994, 11, 1063-1083. Wilson, W .; D. et al. , J. et al. Am. Chem. Soc. 1998, 120, 10310-10321; et al. , Anti-Cancer Drug Design, 1999, 14, 47-60; Mazur, et al. , J. et al. Molecular Biology 2000, 300, 321-337; Trent, J. et al. O. Et al. , J. et al. Med. Chem. 1996, 36, 4554-4562; Guerri, A .; et al. , Nucleic Acids Res. 1998, 26, 2873-2878; Laughton, C .; A. et al. Berman, T., Biochemistry 1996, 35, 5655-5661; A. et al. , Biochim. Biophys. Acta 1992, 1131, 52-61; Bell, C .; A. Et al. , Antimicrob. Agents Chemother. 1993, 37, 2668-2673; Dykstra, C.I. C. et al. , Antimicrob. Agents Chemother. 1994, 38, 1890-1898; Hildebrandt, E. et al. et al. , J. et al. Euk. Microbial. 1998, 45, 112-121; Henderson, D .; et al. Fitzgerald, D., Nature Medicine 1995, 1, 525-527; J. Et al. , J. et al. Biol. Chem 1999, 274, 27128-27138.
[0010]
2,5-diphenylfuran and 2,4-diphenylfuramidine have been found to be very effective treatments in animal models of Pneumocystis carinii and Cryptosporidium parvum. Flagburn, B .; L. et al. , Antimicrob. Agents Chemother. 1991, 35, 1520-1523; Boykin, D .; W. et al. , J. et al. Med. Chem. 1995, 38, 912-916; Boykin, D .; W. et al. , J. et al. Med. Chem. 1998, 41, 124-129; Francesconi, I .; et al. , J. et al. Med. Chem. 1999, 42, 2260-2265; Tidwell, R .; R. J. Parasitol. 1998, 84, 851-856. In addition, these molecules have shown antifungal activity against Candida albicans and Cryptococcus neoformans in vitro. Del Poeta, M .; et al. , J. et al. Antimicrob. Chemother. 1999, 44, 223-228; Del Poeta, M .; et al. , Antimicrob. Agents Chemother. 1998, 42, 2495-2502; Del Poeta, M .; et al. , Antimicrob. Agents Chemother. 1998, 42, 2503-2510.
[0011]
Although there are reports of the antibacterial activity of guanidino compounds, this class of cationic compounds has not been studied as extensively as amidino analogs. Lourie et al. , Ann. Trop. Med. Parasitol. See 1937, 31, 435-445.
[0012]
SUMMARY OF THE INVENTION
It describes the synthesis, DNA-binding affinity and antibacterial properties of 2,5-bis {[alkyl (or aryl) imino] aminophenyl} furans and thiophenes. These compounds have the amino imino group attached to the "anilino" nitrogen (as opposed to the known amidinofuran, where the imino group is attached directly to the aryl ring). Hereinafter, these compounds are referred to as "reverse" amidines. The various effects of substituting the central phenyl ring of the 2,5-diphenylfuran framework of this class of compounds are also described.
[0013]
One embodiment of the present invention relates to Mycobacterium tuberculosis, Trypanosoma spp. , Candida albicans, Aspergillus spp. , Cryptosporidium parvum, Giardia lamblia, Plasmodium spp. , Pneumocystis carinii, Toxoplasma gondii, Fusarium solani, and Cryptococcus neoformans. The compounds of the present invention have the formula I:
Embedded image

[Where,
R₁, R₂, R₃ And R₄ Is independently selected from the group consisting of H, alkyl, alkoxy, halide, and alkyl halide groups;
R₅ Is H, alkyl or aryl;
R₆ Is H, alkyl, aryl, or NR₇R₈Where R₇ And R₈ Is independently selected from the group consisting of H, alkyl and aryl; X is O, S or NR₉Where R₉ Is H or alkyl.
It has the structure of
[0014]
A further aspect of the invention includes a pharmaceutical composition comprising a compound having the structure of Formula I or a pharmaceutically salt thereof (ie, an "active compound") in a pharmaceutically acceptable carrier. The pharmaceutical composition of the present invention comprises Mycobacterium tuberculosis, Trypanosoma spp. , Candida albicans, Aspergillus spp. , Cryptosporidium parvum, Giardia lamblia, Plasmodium spp. , Pneumocystis carinii, Toxoplasma gondii, Fusarium solani, and Cryptococcus neoformans.
[0015]
Certain aspects of the invention are directed to Mycobacterium tuberculosis, Trypanosoma spp. , Candida albicans, Aspergillus spp. , Cryptosporidium parvum, Giardia lamblia, Plasmodium spp. , Pneumocystis carinii, Toxoplasma gondii, Fusarium solani, and Cryptococcus neoformans, the method of treating a microbial infection in a subject in need thereof. The method comprises administering to the subject an effective amount of a compound of Formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof, for treating a microbial infection.
[0016]
Further aspects of the present invention include Mycobacterium tuberculosis, Trypanosoma spp. , Candida albicans, Aspergillus spp. , Cryptosporidium parvum, Giardia lamblia, Plasmodium spp. , Pneumocystis carinii, Toxoplasma gondii, Fusarium solani, and Cryptococcus neoformans for the manufacture of a medicament for the treatment of a subject in need thereof, as described herein. The use of active compounds.
[0017]
The foregoing and other aspects of the invention are described in detail in the specification set forth below.
[0018]
BRIEF DESCRIPTION OF THE FIGURES
FIG. 1 shows various chemical schemes that may be useful for the synthesis of the compounds of the present invention.
[0019]
Detailed description of the invention
The present invention is more fully described below by reference to the accompanying specification and drawings, which show preferred embodiments of the invention. However, the present invention may be embodied in many different forms and is not limited to the embodiments disclosed herein. Rather, these embodiments are provided so that this disclosure will be thorough and complete, and will fully convey the scope of the invention to those skilled in the art.
[0020]
The terminology used in the detailed description of the invention herein is for the purpose of describing particular embodiments only and is not intended to limit the invention. As used in the detailed description of the invention and the appended claims, the singular forms are intended to include the plural forms unless the context clearly dictates otherwise.
[0021]
Unless defined otherwise, all technical and scientific terms used herein have the same meaning as commonly understood by one of ordinary skill in the art to which this invention belongs. All publications, patent applications, patents, and other references mentioned herein are all incorporated by reference.
[0022]
As used herein, for the compounds of the formula, the term "alkyl" means a straight, branched, or cyclic, saturated or unsaturated (ie, alkenyl and alkynyl) hydrocarbon chain, including C1-10. For example, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, tert-butyl, pentyl, hexyl, octyl, ethenyl, propenyl, butenyl, pentenyl, hexenyl, octenyl, butadienyl, propynyl, butynyl, pentynyl, hexynyl, heptynyl, And an allenyl group. The term "alkyl" as used herein specifically includes cycloalkyl hydrocarbon chains as used to refer to C3-C6 cyclic alkyls such as cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, and cyclohexyl. In the present invention, preferred alkyl is lower alkyl. The term "lower alkyl" means a C1-C4 straight or branched alkyl, such as methyl, ethyl, propyl, butyl, isopropyl, sec-butyl, and tert-butyl.
[0023]
The term “alkyl” also includes substituted alkyls, including aminoalkyl, hydroalkyl, oxygen-substituted alkyl (ie, alkoxy groups), and halogen-substituted alkyl (ie, alkyl halides, polyhaloalkyls). As used herein, the term "aminoalkyl" means a C1 to C4 linear or branched amino-substituted alkyl, wherein the term "amino" means an NR'R "group. And R ′ and R ″ are independently selected from H or lower alkyl as described above, ie, —NH₂, -NHCH₃, -N (CH₃2) and so on. As used herein, the term "hydroxyalkyl" means a C1 to C4 straight or branched hydroxy-substituted alkyl, i.e., -CH₂OH,-(CH₂)₂OH and the like. As used herein, the term “alkoxy” means a C1 to C4 oxygen-substituted alkyl, ie, —OCH₃And so on. As used herein, the term "lower alkoxy" refers to C1 to C4 straight or branched alkoxy, such as methoxy, ethoxy, propyloxy, butyloxy, isopropyloxy, and t-butyloxy.
[0024]
The term "halide" has its ordinary meaning and refers to fluoro, chloro, bromo, and iodo groups. Preferred halide groups include chloro groups, and preferred alkyl halides of the invention include CF₃Is included.
[0025]
As used herein, the term "aryl" means a C3 to C10 cyclic aromatic group such as phenyl, naphthyl, and the like, and in particular, but not limited to, tolyl, substituted phenyl, and substituted naphthyl And substituted aryl groups containing Aryl groups can be substituted with halides, amino, nitro, and the like. Heterocyclic aromatic rings and polycyclic aromatic groups are also included in the definition of "aryl". Specific examples of aryl groups included in the present invention include, but are not limited to, substituted and unsubstituted pyridine, quinoline, cyclopentadienyl, phenyl, furan, thiophene, pyrrole, pyran, imidazole, isothiazole, isothiazole, Oxazole, pyrazole, pyrazine, pyrimidine and the like are included. Preferred aryl groups include pyridine, substituted pyridine (eg, 5-methylpyridine), and quinoline.
[0026]
The compounds of the present invention will also be useful in pharmaceutically acceptable salt form. The salts include, but are not limited to, gluconate, lactate, acetate, tartrate, citrate, phosphate, borate, nitrate, sulfate, hydrobromide and hydrogen chloride of the compound. hydrochloric). Compounds of formula (I) and pharmaceutically acceptable salts thereof are referred to herein as "active compounds" or "active agents."
[0027]
Compounds of formula (I) may be prepared by the synthetic procedures described in the following examples, and by specific methods known in the art. Some of these known methods are disclosed below in the examples, either by writing or by reference, the disclosures of which are all incorporated herein by reference.
[0028]
As noted above, the compounds, methods, and compositions of the present invention include Mycobacterium tuberculosis, Trypanosoma spp. , Candida albicans, Aspergillus spp. , Cryptosporidium parvum, Giardia lamblia, Plasmodium spp. , Pneumocystis carinii, Toxoplasma gondii, Fusarium solani, and Cryptococcus neoformans. In a preferred embodiment, the methods and compositions of the invention are used to treat Mycobacterium tuberculosis infection. In another preferred embodiment, the methods and compositions of the present invention are used for treating Candida albicans infection. In another preferred embodiment, the methods and compositions of the present invention are applied to Aspergillus spp. Used for the treatment of infections caused by In another preferred embodiment, the methods and compositions of the present invention comprise Trypanosoma spp. Used for the treatment of infections caused by The present invention is useful for the treatment of all known species of Trypanosoma with Trypanosoma brucei rhodesense, with Trypanosoma cruzi preferred.
[0029]
Table 1. Examples of compounds of the present invention
Embedded image

[Table 1]

[0030]
Examples of compounds of the present invention are disclosed in Table 1. Here, Pyr means pyridine, c-hexane means cyclohexane, Ph means phenyl, Am means amidine, and Qu means quinoline.
[0031]
In certain embodiments of the invention, a subject suffering from a microbial infection as described herein is administered a therapeutically effective amount of a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof. As used herein, an amount of "therapeutically effective amount" refers to alleviating (e.g., mitigating, decreasing, reducing) at least one symptom associated with a microbial infection. Refers to the amount of the compound of formula (I) sufficient to It is not essential that the compound be administered to eliminate the symptoms of the infection, as long as the benefit of administering the compound outweighs the harm. Similarly, the terms "treatment" and "treat" as used herein mean that the subject requires treatment for a microbial infection, or that all clinical symptoms thereof are eliminated. It is not intended that any amelioration or amelioration of the symptoms of the subject be achieved by the administration of the compound of formula (I).
[0032]
Suitable subjects of the present invention include humans and animals. When the subject is an animal, mammals are preferred, and livestock and primates are particularly preferred. Humans are the most preferred subjects. The subject can be an adult, adolescent, child, infant or newborn.
[0033]
A subject can be administered the compounds and compositions of the present invention by any suitable means. Typical means are oral administration (eg, in liquid or solid form), intramuscular injection, subcutaneous injection, and intravenous injection. Pharmaceutical formulations of the present invention include an active compound of the present invention in a pharmaceutically acceptable carrier. Suitable pharmaceutical formulations include inhalation, oral, rectal, topical (including buccal, sublingual, dermal, vaginal and ocular), parenteral (including skin, intradermal, intramuscular, intravenous and articular) and transdermal And those suitable for effective administration. The most suitable route of administration in any given case may depend on the anatomical location of the condition being treated in the subject, the nature and severity of the condition being treated, and the particular agonist compound used. The formulations will usually be presented in unit dosage form and may be prepared by any of the methods known in the art.
[0034]
In the manufacture of the medicament of the invention (the "formulation"), the active compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof (the "active compound") is, inter alia, typically mixed with an acceptable carrier. Of course, the carrier must be acceptable in the sense of being compatible with any other component in the formulation and must not be harmful to the patient. The carrier may be a solid or a liquid, or both, and is preferably formulated with the compound as a unit-dose formulation, for example a tablet which may contain from 0.5% to 99% by weight of active compound. . One or more active compounds can be incorporated into a formulation of the invention, the formulation consisting essentially of mixing the components and, optionally, including one or more auxiliary therapeutic ingredients. It can be manufactured by any of the known techniques of pharmacy.
[0035]
Formulations suitable for oral administration may be presented in discrete units, such as capsules, cachets, troches, or tablets, such as aqueous or non-aqueous liquid solutions or suspensions, such as powders or granules. Each contains a significant amount of the active compound, such as an oil-in-water or water-in-oil emulsion. The formulations may be prepared by any suitable method of pharmacy, including the step of bringing into association the active compound and the appropriate carrier (which may include one or more accessory therapeutic ingredients as described above). In general, the formulations of the present invention are prepared by uniformly and intimately admixing the active compound with liquid carriers or finely divided solid carriers, or both, and if necessary, shaping the resulting mixture. For example, a tablet may be prepared by compressing or molding a powder or granules containing the active compound, optionally with one or more accessory ingredients. Compressed tablets are prepared by mixing a free-flowing compound, such as a powder or granules, with a binder, lubricant, inert diluent, and / or surface active / dispersing agent, if desired, and pressing with a suitable machine. Can be manufactured. Molded tablets may be made by molding in a suitable machine, the powdered compound moistened with an inert liquid binder. Formulations for oral administration may optionally include enteric coatings known in the art to prevent disintegration of the formulation in the stomach and may release the drug in the small intestine.
[0036]
Formulations of the present invention suitable for parenteral administration may include sterile aqueous and non-aqueous injection solutions of the active compound, the formulation preferably being isotonic with the blood of the intended recipient. These formulations may include antioxidants, buffers, bacteriostats and solutes that render the formulation isotonic with the blood of the intended recipient. Aqueous and non-aqueous sterile suspensions may include suspending agents and thickening agents. The formulations may be presented in unit / dose or multi-dose containers, for example, in sealed ampules and vials, immediately before use with a sterile liquid carrier, for example, saline or water-for-injection. It can be stored in a freeze-dried (lyophilized) state that requires only addition. Extemporaneous injection solutions and suspensions can be prepared from sterile powders, granules and tablets of the kind previously described. For example, one aspect of the present invention provides an injectable, stable, sterile composition comprising a compound of formula (I), or a salt thereof, in unit dose form in a sealed container. The compound or a salt thereof is provided in a lyophilized form that can be reconstituted with a suitable pharmaceutically acceptable carrier to form a suitable liquid composition for injection into a subject. Unit dose forms typically contain from about 10 mg to about 10 g of the compound or salt. When the compound or salt is substantially insoluble in water, the compound or salt can be emulsified in an aqueous carrier using a sufficient amount of a physiologically acceptable emulsifier.
[0037]
Further, the present invention provides liposome formulations of the compounds disclosed herein and salts thereof. Techniques for forming liposome suspensions are known in the art. When the compound or its salt is a water-soluble salt, the same can be incorporated into lipid vesicles using conventional liposome techniques. In that case, due to the water solubility of the compound or salt, the compound or salt is substantially entrained within the hydrophilic center or core of the liposome. The lipid layer used can be of any conventional composition and can either contain cholesterol or be cholesterol free. The compound or salt of interest is water-insoluble and again using conventional liposome formation techniques, the salt can be substantially incorporated into the hydrophobic lipid bilayer forming the structure of the liposome. In any case, the resulting liposomes can be reduced in size by use of standard ultrasound and homogenization techniques or other techniques known in the art.
[0038]
Of course, liposome formulations containing the pharmaceutically active compound identified by the methods described herein can be lyophilized and reconstituted with a pharmaceutically acceptable carrier such as water to regenerate a liposome suspension. A lyophilizate may be manufactured.
[0039]
In addition to the active compound, the pharmaceutical preparation may contain other additives, such as pH-adjusting additives. In particular, useful pH-modulating agents include acids such as hydrochloric acid, bases or buffers such as sodium lactate, sodium acetate, sodium phosphate, sodium citrate, sodium borate or sodium gluconate. Further, the compositions can include microbiological preservatives. Useful microbial preservatives include methyl paraben, propyl paraben and benzyl alcohol. Microbial preservatives are typically used when the formulation is placed in a vial designed for multi-dose use.
[0040]
Pharmaceutical formulations of the present invention may include a compound of the present invention in lyophilized form. Additionally, the pharmaceutical formulations of the present invention may include a compound of the present invention in a pharmaceutically acceptable carrier. The pharmaceutical preparations generally are prepared by mixing the compound described herein with a pharmaceutically acceptable carrier. The pharmaceutically acceptable carrier is preferably a liquid, especially an aqueous carrier, the choice of which is known in the art. For the purpose of preparing the preparation, the compound can be mixed in buffered saline (eg, pH 6 to 8) or normal culture media. The formulation can be stored in a sterile glass container sealed with a rubber stopper to inject the liquid with a syringe and withdraw the formulation.
[0041]
For all of the methods described herein, a therapeutically effective dose of any particular compound, its use within the scope of the invention, will vary somewhat from compound to compound and from subject to subject, depending on the condition of the subject. And the route of delivery. A dose of about 0.5 mg / kg of subject body to about 15 mg / kg of subject body weight, or about 20 mg / kg of subject body weight, or about 25 mg / kg of subject body weight may be used for intravenous or oral administration.
[0042]
The concentration of a compound of the invention or a pharmaceutically acceptable salt thereof in a formulation of the invention can be determined by those skilled in the art, and the characteristics (eg, race, age, body weight) of the subject to be treated, It varies depending on conditions including the type of infectious virus or strain received or its severity, the type of dose used, and the like.
[0043]
The compounds of the present invention may be administered with other antiviral compounds, as can be determined by one skilled in the art.
[0044]
The present invention is described in more detail by the following examples. These examples are intended to illustrate the invention, but not to limit it.
[0045]
Example 1
General method: chemical synthesis and analysis
Melting points were measured on a MEL-TEMP® 3.0 capillary melting point apparatus. It is not modified.¹H Nuclear magnetic resonance spectra were analyzed on a Varian Unity + 300 or Varian VRX 400 instrument with residual DMSO (2.49 ppm) or CHCl.₃ (7.24 ppm) was recorded with the relative peak assignment. Mass spectra were recorded on a VG Instruments 70-SE spectrometer from the Georgia Institute of Technology, Atlanta, GA. Elemental analysis was performed on an Atlantic Microlab, Norcross, GA. All final compounds were dried at 50-60 ° C. in vacuum (oil pump) for at least 36 hours before elemental analysis. Unless otherwise specified, all reagent chemistries and solvents (including anhydrous solvents) are from Aldrich Chemical Co. , Fisher Scientific or Lancaster Synthesis and used as received. Acetonitrile (CaH₂), Triethylamine (CaH₂), And ethanol (Mg / I₂) Was distilled from the indicated dry reagent. 2,6-Dimethyl-4-nitrobromobenzene and S- (2-naphthylmethyl) thioacetimidate were prepared according to the literature. B. M. Wepster, Rec. Trav. Chim. 73, 809-818 (1954); N. Kravtsov, J .; Organometal. Chem. 36, 227-237 (1972); G. FIG. Shearer et al. , Tetrahedron Lett. 38, 179-182 (1997).
[0046]
FIG. 1 shows a typical scheme for the synthesis of the compounds of the present invention. Although the schemes shown in the figures relate to furan compounds, the disclosed methods can be performed with analogous compounds such as thiophene compounds. Referring to FIG. 1, the synthesis of the target compound required the corresponding diamino compound (Scheme 1). The synthesis of diamino compounds begins with a Stille bond between 2,5-distannylfuran or thiophene and a substituted bromonitroarene to form the corresponding 2,5-bis [nitrophenyl] furan and thiophene. Reduction of the 2,5-bis-nitrophenyl heterocycle, either by catalytic reduction or by stannous chloride, produces the desired diamino compound (Scheme 1). The requisite diamino analog is obtained by a two-step conversion of 2,5-bis [nitrophenyl] furan and thiophene to an amine containing Pd (0) that binds benzophenone imine to form the corresponding arylimino compound. Was done. The diguanidinium analog was prepared by reacting a Boc-protected S-methylthiourea with an aryl diamine in the presence of mercuric chloride (Scheme 2). The reaction of two equivalents of S- (2-naphthylmethyl) thiobenzimidate with aryl diamines produced "reverse" amidines in good yields (Scheme 4).
[0047]
2,5-bis (4-aminophenyl) furan and -thiophene (Scheme 1) can be converted to the corresponding bis-nitro derivative using either catalytic reduction (Pd / C), stannous chloride, or iron / AcOH Produced in good yield by reduction. The bis-nitro derivative is then prepared with palladium catalyzing the coupling of 2,5-bis (tri-n-butylstannyl) furan or 2,5-bis (trimethylstannyl) thiophene with a suitable halonitrobenzene. did.
[0048]
The compound numbers in the following examples refer to the corresponding compounds in FIG.
[0049]
Example 2
Production of 2,5-bis (4-nitrophenyl) furan
The following exemplary procedure was previously described by A. Kumar et al. , Heterocyclic Comm. 5, 301-304 (1999).
[0050]
2,5-bis (4-nitrophenyl) furan (Compound 2a). Yield: 88%; orange fluffy solid; mp 269-270 ° C (no recrystallization), lit. 270-272 ° C, Ling, C.I. et al. , J. et al. Am. Chem. Soc. 1994, 116, 8784-8792.
[0051]
2,5-bis (2-methyl-4-nitrophenyl) furan (compound 2b)
To a solution of 2-bromo-5-nitrotoluene (4.32 g, 20 mmol) and tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (0.40 g) in anhydrous 1,4-dioxane (50 ml) 2,5-Bis (tri-n-butylstannyl) furan (6.46 g, 10 mmol) was added and the mixture was heated under nitrogen at 95-100 <0> C overnight. The resulting orange suspension was diluted with hexane (15 ml), cooled to room temperature, filtered and rinsed with hexane to give an orange solid (3.10 g), mp 241-243 ° C. The product was recrystallized from DMF (100 ml) to give a light orange fuzzy solid (2.87 g, 85%), mp 242-243 ° C.¹H NMR (DMSO-d₆): 2.69 (s, 6H), 7.31 (s, 2H), 8.12 (m, 4H), 8.23 (s, 2H). Analysis calculated value C₁₈H₁₄N₂O₅ (338.31): C, H, N.P.
[0052]
2,5-bis (2-methoxy-4-nitrophenyl) furan (compound 2c). Yield: 77%; light orange granular solid; mp 308-310 ° C (DMF).¹H NMR (DMSO-d₆): 4.10 (s, 6H), 7.37 (s, 2H), 7.90 (s, 2H), 7.94 (d, 2H), 8.22 (d, 2H). Analysis calculated value C₁₈H₁₄N₂O₇・ 0.1H₂O (372.11): C, H, N.P.
[0053]
2,5-Bis (2-chloro-4-nitrophenyl) furan (Compound 2d). Yield: 71%; fuzzy orange solid; mp 247-247.5 ° C (DMF / MeOH).¹H NMR (DMSO-d₆): 7.70 (s, 2H), 8.29 (dd, J = 8.8, 2.2 Hz, 2H), 8.36 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 8.43 (D, J = 2.2 Hz, 2H). Analysis calculated value C₁₆H₈Cl₂N₂O₅ (379.15): C, H, N.I.
[0054]
2,5-bis (4-nitro-2-trifluoromethylphenyl) furan (compound 2e). Yield: 74%; fuzzy golden needle; mp 158.5-159 ° C (EtOH).¹H NMR (DMSO-d₆): 7.38 (s, 2H), 8.24 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 8.57 (d, J = 2.4 Hz, 2H), 8.62 (dd, J) = 8.6, 2.4 Hz, 2H). Analysis calculated value C₁₈H₈F₆N₂O₅ (446.26): C, H, N.P.
[0055]
2,5-bis (2,6-dimethyl-4-nitrophenyl) furan (Compound 2f). Yield: 65%; yellow needle; mp 156.5-157.5 ° C (DMF / EtOH / H₂O).¹H NMR (DMSO-d₆): 2.34 (s, 12H), 6.85 (s, 2H), 8.04 (s, 4H). Analysis calculated value C₂₀H₁₈N₂O₅ (366.36): C, H, N.I.
[0056]
Example 3
Production of 2,5-bis (4-aminophenyl) furan
(The following procedure is a typical example)
2,5-bis (4-aminophenyl) furan (compound 3a). Yield: 94%; pale green / brown solid; mp 218-221 ° C, lit⁴⁶ mp 213-216 ° C. MS (EI): m / z 250 (M⁺).
[0057]
2,5-bis (4-amino-2-methylphenyl) furan (compound 3b)
To a suspension of bis-nitro derivative 2b (2.87 g) in EtOAc (90 ml) and dry EtOH (10 ml) was added Pd / C (10%) (0.40 g) and the mixture was added. Hydrogenated on a Parr apparatus at an initial pressure of ５０50 psi. After the uptake of hydrogen ceased (generally 3-6 hours), the resulting solution was filtered through Celite, the pale yellow to colorless filtrate was concentrated in vacuo to near dryness, diluted with hexane, and then pale green / green The pure diamine was obtained as a solid (2.17 g, 91%), mp 174-176 ° C., which did not require purification.¹H NMR (DMSO-d₆): 2.33 (s, 6H), 5.15 (brs, 4H), 6.42 (s, 2H), 6.46 (m, 4H), 7.35 (d, 2H). MS (EI): m / z 278 (M⁺).
[0058]
2,5-bis (4-amino-2-methoxyphenyl) furan (compound 3c)
The original oil was re-concentrated with benzene to give a yellow / brown solid, which was triturated with ether. Yield: 79%; mp 201-202.5 <0> C.¹H NMR (DMSO-d₆): 3.80 (s, 6H), 5.25 (brs, 4H), 6.24 (dd, J = 8.3, 2.0 Hz, 2H), 6.30 (d, J = 1) 9.9 Hz 2H), 6.56 (s, 2H), 7.48 (d, J = 8.4 Hz, 2H). MS (EI): m / z 310 (M⁺).
[0059]
2,5-bis (4-amino-2-chlorophenyl) furan (compound 3d)
To a suspension of the corresponding bis-nitro derivative 2d (1.22 g, 3.2 mmol) in dry EtOH (100 ml) and DMSO (20 ml) was added SnCl₂・ 2H₂0 (5.80 g, 25.7 mmol) was added and the mixture was heated at 80 ° C. under nitrogen. After 4-5 hours, TLC indicated that the starting material had been consumed, so the mixture was cooled, neutralized with NaOH (aq) and extracted with EtOAc. The extract is washed with water, brine, dried (Na₂SO₄) And concentrated. The resulting oil was crystallized from a benzene / hexane mixture to give a light brown solid (0.74 g, 71%), mp 191.5-193 ° C. Catalytic reduction was not considered.¹H NMR (DMSO-d₆): 5.60 (brs, 4H), 6.61 (dd, J = 8.6, 2.2 Hz, 2H), 6.68 (d, J = 2.2 Hz 2H), 6.82 (S, 2H), 7.56 (d, J = 8.6 Hz, 2H). MS (EI): m / z 318 (M⁺).
[0060]
2,5-bis (4-amino-2-trifluoromethylphenyl) furan (compound 3e)
The original red oil crystallized as a red / orange solid from EtOAc / hexane in two crops. Total yield: 81%; mp (first / main crop) 89.5-91 ° C; mp (second crop) 91.5-92 ° C.¹H NMR (DMSO-d₆): 5.79 (brs, 4H), 6.52 (s, 2H), 6.82 (dd, J = 8.4, 2.4 Hz, 2H), 6.98 (d, J = 2) .2 Hz, 2H), 7.43 (d, J = 8.4 Hz, 2H). MS (EI): m / z 386 (M⁺).
[0061]
2,5-bis (4-amino-2,6-dimethylphenyl) furan (Compound 3f)
Yield: 99%; white fuzzy solid; mp 144.5-146 ° C.¹H NMR (DMSO-d₆): 2.01 (s, 6H), 5.06 (brs, 4H), 6.24 (s, 2H), 6.29 (s, 4H). MS (EI): m / z 306 (M⁺).
[0062]
Example 4
Production of 2,5-bis (4-N, N'-di-BOC-guanidinophenyl) furan derivative
(The following procedure is a typical example) (see scheme 2)
2,5-bis (4-N, N'-di-BOCguanidinophenyl) furan (compound 4a)
2,5-bis (4-aminophenyl) furan (0.626 g, 2.5 mmol) and 1,3-bis (tert-butoxycarbonyl) -2-methyl-2-thioisourea in anhydrous DMF ) (1.56 g, 5.3 mmol) at room temperature was added with triethylamine (1.59 g, 15.7 mmol) followed by mercuric chloride (1.57 g, 5.8 mmol). Was added and the resulting suspension was stirred at room temperature for 22 hours. CH₂Cl₂ And after dilution with sodium carbonate solution, the suspension was filtered through Celite, and the filtrate was washed well with water (3X) and finally with brine. Dry (Na₂SO₄)), The solvent was removed in vacuo and the residue was diluted with MeOH to give the BOC-protected bis-guanidine as a pale yellow solid. The recovered and purified product is₂Cl₂/ MeOH to give a fuzzy yellow solid (1.25 g, 68%), mp> 400 ° C dec.¹H NMR (CDCl₃): 1.50 and 1.53 (2s, 36H), 6.65 (s, 2H), 7.66 (s, 8H), 10.38 (brs, 2H), 11.61 (brs, 2H).
[0063]
2,5-bis (2-methyl-4-N, N'-di-BOC guanidinophenyl) furan (compound 4b)
Yellow solid, mp> 250 ° C dec. Yield: 62%.¹H NMR (CDCl₃): 1.51 and 1.52 (2s, 36H), 2.53 (s, 6H), 6.60 (s, 2H), 7.40 (s, 2H), 7.62 (d, 2H). , 7.74 (d, 2H), 10.34 (s, 2H), 11.62 (brs, 2H).
[0064]
2,5-bis (2-methoxy-4-N, N'-di-BOCguanidinophenyl) furan (compound 4c)
Yellow solid, mp> 300 ° C dec. Yield: 79%.¹H NMR (CDCl₃): 1.50 and 1.53 (2s, 36H), 3.95 (s, 6H), 6.95 (s, 2H), 7.13 (d, 2H), 7.59 (s, 2H). , 7.86 (d, 2H), 10.36 (s, 2H), 11.55 (brs, 2H).
[0065]
2,5-bis (2-chloro-4-N, N'-di-BOCguanidinophenyl) furan (compound 4d)
Pale yellow / brown solid, mp> 400 ° C dec. Yield: 63%.¹H NMR (CDCl₃): 1.52 (s, 36H), 7.17 (s, 2H), 7.63 (dd, 2H), 7.79 (d, 2H), 7.88 (d, 2H), 10.43 (S, 2H), 11.59 (brs, 2H).
[0066]
2,5-bis (2-trifluoromethyl-4-N, N'-di-BOC guanidinophenyl) furan (compound 4e)
Light orange solid. Yield: 88%.¹H NMR (CDCl₃): 1.51 and 1.53 (2s, 36H), 6.77 (s, 2H), 7.82 (d, 2H), 7.94 (s, 2H), 8.00 (d, 2H). , 10.52 (s, 2H), 11.59 (brs, 2H).
[0067]
2,5-bis (2,6-dimethyl-4-N, N'-di-BOC guanidinophenyl) furan (Compound 4f).
Pale yellow / off-white solid, mp> 300 ° C. dec. Yield: 89%.¹H NMR (CDCl₃): 1.51 and 1.53 (2s, 36H), 2.23 (s, 12H), 6.31 (s, 2H), 7.33 (s, 4H), 10.27 (s, 2H) , 11.63 (br s, 2H).
[0068]
Example 5
Deprotection of N, N'-di-BOC guanidine
(The following procedure is a typical example).
2,5-bis (4-guanidinophenyl) furan hydrochloride (compound 5a)
CH₂Cl₂ A solution of the corresponding N, N'-di-BOC guanidine (1.19 g, 1.62 mmol) in (15 ml) was diluted with dry EtOH (10 ml) and saturated with anhydrous HCl at an ice-water bath temperature. Was. The solution was then allowed to stir (dry test tube) at room temperature for 2-3 days, whereupon the product precipitated slowly (shorter reaction times generally resulted in incomplete deprotection). The resulting suspension was concentrated to near dryness, then the solid was taken up in warm EtOH. After filtration and clarification, the solution was concentrated to near dryness to give a suspension, which was diluted with ether and collected, dried for 2 days at 50-60 ° C. under vacuum, as an off-white / brown solid. , Bis-guanidine dihydrochloride (0.66 g, quantitative), mp> 300 ° C dec.¹H NMR (DMSO-d₆): 7.12 (s, 2H), 7.31 (d, 4H), 7.58 (brs, 8H), 7.86 (d, 4H), 10.09 (brs, 2H). MS (FAB, thioglycerol): m / z 335.3 (MH⁺, 100). Analysis calculated value C₁₈H₁₈N₆O.2HCl.0.25EtOH (407.30): C, H, N.O.
[0069]
2,5-bis (4-guanidino-2-methylphenyl) furan hydrochloride (compound 5b)
Brown solid, mp 265-271 ° C dec.¹H NMR (DMSO-d₆): 2.53 (s, 6H), 6.93 (s, 2H), 7.17 (m, 4H), 7.56 (brs, 8H), 7.82 (d, 2H), 10. 06 (br s, 2H). MS (FAB, thioglycerol): m / z 363.3 (MH⁺, 100). Analysis calculated value C₂₀H₂₂N₆O ・ 2HCl ・ 1.5H₂O.0.66 EtOH (496.93): C, H, N.I.
[0070]
2,5-bis (4-guanidino-2-methoxyphenyl) furan dihydrochloride (compound 5c)
Light brown solid.¹H NMR (DMSO-d₆): 3.95 (s, 6H), 6.92 (dd, 2H), 6.99 (d, 2H), 7.02 (s, 2H), 7.58 (brs, 8H), 7. 95 (d, 2H), 10.08 (br s, 2H). MS (EI): m / z 352 (M⁺ − NH₂CN, 38.0), 310 (100), 267 (38.9), 251 (8.8), 155 (18.7). Analysis calculated value C₂₀H₂₂N₆O₃・ 2HCl ・ 1.0H₂O.0.33EtOH (500.57): C, H, N.P.
[0071]
2,5-bis (2-chloro-4-guanidinophenyl) furanhydrochloride (compound 5d)
Brown solid, mp 300-304 ° C dec.¹H NMR (DMSO-d₆): 7.31 (s, 2H), 7.33 (d, 2H), 7.47 (s, 2H), 7.72 (brs, 8H), 8.04 (d, 2H). MS (DCI, ammonia): m / z 365, 363, 361 (MH⁺ − NH₂CN, 8, 52, 78), 323, 321, 319 (11, 66, 100). Analysis calculated value C₁₈H₁₆Cl₂N₆O.2HCl.0.5H₂O (485.21): C, H, N, Cl.
[0072]
2,5-bis (4-guanidino-2-trifluoromethylphenyl) furan hydrochloride (compound 5e)
Orange / red solid.¹H NMR (DMSO-d₆): 6.99 (s, 2H), 7.63 (d, 2H), 7.69 (s, 2H), 7.79 (brs, 8H), 7.91 (d, 2H), 10. 37 (br s, 2H). MS (CI, isobutane): m / z 471 (MH⁺, 14), 429 (100), 387 (19). Analysis calculated value C₂₀H₁₆F₆N₆O 2HCl 0.67H₂O.0.67EtOH (586.24): C, H, N.O.
[0073]
2,5-bis (4-guanidino-2,6-dimethylphenyl) furan hydrochloride (compound 5f)
Off-white solid.¹H NMR (DMSO-d₆): 2.20 (s, 12H), 6.56 (s, 2H), 7.01 (s, 4H), 7.57 (brs, 8H), 10.09 (brs, 2H). MS (FAB, thioglycerol): m / z 391.2 (MH⁺, 100). Analysis calculated value C₂₂H₂₆N₆O.2HCl.0.5H₂O (472.41): C, H, N.P.
[0074]
2,5-bis [4- (benzimidyl) aminophenyl] thiophene Free base: yellow crystalline solid, mp 284-286 ° C dec (DMF / MeOH / H₂O). Yield: 35%.¹H NMR (DMSO-d₆): 6.41 (brs, 4NH), 6.91 (d, 4H), 7.40 (s, 2H), 7.44 (d, 6H), 7.62 (d, 4H), 7. 97 (d, 4H). Hydrochloride: yellow / orange solid, mp 304-306 ° C dec.¹H NMR (DMSO-d₆): 7.56 (d, 4H), 7.67 (t, 4H), 7.70 (s, 2H), 7.77 (t, 2H), 7.90 (d, 4H), 7.95 (D, 4H), 9.13 (brs, 2H), 9.94 (brs, 2H), 11.71 (brs, 2H). MS (EI): m / z 472 (M⁺, 35.1), 369 (76.8), 266 (100), 103 (49.5), 76 (14.8). Analysis calculated value C₃₀H₂₄N₄S ・ 2HCl ・ 0.5H₂0 (554.52): C, 64.97; H, 4.91; N, 10.10. Found: C, 64.95; H, 4.89; N, 10.14.
[0075]
2,5-bis [2-methyl-4- (2-pyridylimino) aminophenyl] thiophene free base: yellow crystal, mp 152-153 ° C (EtOH / H₂O). Yield: 20%.¹H NMR (DMSO-d₆): 2.46 (s, 6H), 6.60 (brs, 4NH), 6.82 (d, 2H), 6.90 (s, 2H), 7.16 (s, 2H), 7. 42 (d, 2H), 7.55 (m, 2H), 7.95 (t, 2H), 8.30 (d, 2H), 8.63 (dd, 2H). Hydrochloride: yellow powder, mpxxx ° C dec.¹H NMR (DMSO-d₆): 2.54 (s, 6H), 7.36 (s, 2H), 7.39 (d, 2H), 7.48 (s, 2H), 7.66 (d, 2H), 7.85 (M, 2H), 8.22 (t, 2H), 8.47 (d, 2H), 8.89 (d, 2H), 9.37 (brs, 2H), 10.12 (brs, 2H), 11.87 (brs, 2H). MS (EI):. Analysis calculated value C₃₀H₂₆N₆S ・ 2.5HCl ・ 1.25H₂O (616.30): C, 58.46; H, 5.07; N, 13.64; Cl, 14.38. Found: C, 58.83; H, 4.92; N, 13.68; Cl, 14.02.
[0076]
Example 6
Preparation of Compounds 6b-6c (Scheme 3)
The original route to reverse amidine (used to produce 6b-c) is as follows.
[0077]
2,5-bis [4- (benzimidoylamino) phenyl] furandhydrochloride (compound 6b)
To a chilled solution of 2,5-bis (4-aminophenyl) furan (0.25 g, 1.0 mmol) in dry acetonitrile (10 ml) was added triethylamine (0.22 g, 2.1 mmol). Then, benzoyl chloride (0.30 g, 2.1 mmol) was added dropwise, and the resulting suspension was stirred at room temperature for 3 hours. Water is then added and the precipitate is collected, washed with water, then with MeOH and finally dried in vacuo to give 2,5-bis (4-benzamidophenyl) furan as a brown solid. (0.44 g, 96%), mp 312-314.5 ° C.¹H NMR (DMSO-d₆): 6.98 (s, 2H), 7.52-7.62 (m, 6H), 7.80 (d, 4H), 7.89 (d, 4H), 7.97 (d, 4H). , 10.33 (brs, 2H).
[0078]
The intermediate bis (benzamide) (0.44 g, 0.96 mmol) was suspended in anhydrous dichloromethane (40 ml) and treated with fresh distilled thionyl chloride (0.68 g, 5.7 mmol) with two drops of DMF. The mixture was then refluxed with vigorous stirring until a solution was obtained (20 hours). The solution was then concentrated in vacuo to give a yellow solid, which was co-evaporated with dry benzene. The resulting imidoyl chloride was dissolved in anhydrous dichloromethane (40 ml) and the solution was saturated with anhydrous ammonia at ice / water-bath temperature and sealed. After stirring at room temperature overnight, the cloudy mixture was concentrated to give a yellow solid, which was triturated with 0.5N NaOH, collected and air dried. The free base (0.44 g, 100%) was dissolved in boiling EtOH (50 ml), filtered and treated with dry HCl at ice-bath temperature. After an unsuccessful attempt to induce precipitation by the addition of ether, the solution was concentrated (high vacuum) to give dihydrochloride as an orange hygroscopic solid, mp 242-248 ° C.¹H NMR (DMSO-d₆): 7.26 (s, 2H), 7.58 (d, 4H), 7.67 (t, 4H), 7.78 (t, 2H), 7.95 (d, 4H), 8.03 (D, 4H), 9.12 (brs, 2H), 9.94 (brs, 2H), 11.66 (brs, 2H). MS (EI): m / z 456 (M⁺, 100), 353 (63), 250 (62), 221 (16), 130 (15), 103 (41), 76 (14), 44 (22). Analysis calculated value C₃₀H₂₄N₄O · 2HCl · 0. H · 0.1 (C₂H₅) (545.87): C, H, N.C.
[0079]
2,5-bis [4-[(4-methylbenzimidyl) amino] phenyl] furandhydrochloride (compound 6c)
After the above procedure, 2,5-bis [(4-methylbenzamido) phenyl] furan was replaced with 2,5-bis (4-aminophenyl) furan (0.50 g, 2.0 mmol) and 4-methylbenzoyl. First obtained as pale yellow solid by reacting with chloride (0.65 g, 4.2 mmol). Yield: 0.96 g, 99%; mp 348-350.5 ° C.¹H NMR (DMSO-d₆): 2.39 (s, 6H), 6.98 (s, 2H), 7.34 (d, 4H), 7.79 (d, 4H), 7.89 (dd, 8H), 10.25 (Br s, 2H).
[0080]
Subsequent conversion of bis (benzamide) to amidine was performed as described above, except that the precipitated product after reaction with ammonia was collected by filtration, rinsed with EtOH, and the free base obtained directly. (Yield: 34%). The dihydrochloride was obtained as an orange oily solid, which crystallized in vacuo, mp 227-240 ° C (hygroscopic).¹H NMR (DMSO-d₆): 2.44 (s, 6H), 7.24 (s, 2H), 7.46 (d, 4H), 7.56 (d, 4H), 7.87 (d, 4H), 8.01. (D, 4H), 9.02 (brs, 2H), 9.89 (brs, 2H), 11.66 (brs, 2H). MS (EI): m / z 484 (M⁺, 59), 367 (86), 250 (100), 221 (21), 130 (20), 117 (69), 90 (19), 44 (36). Analysis calculated value C₃₂H₂₈N₄O.2HCl.0.5H₂O (566.51): C, H, N.O.
[0081]
Example 7
Other Preparations of Bis-{[alkyl (or aryl) imino] aminophenyl} furan Derivatives (Scheme 4)
The following experiment is a typical example. In some cases, the product was purified by recrystallization.
[0082]
2,5-bis [2-methyl-4- (2-pyridylimino) aminophenyl] furan ((compound 6h)
To a solution of 2,5-bis (4-amino-2-methylphenyl) furan (0.30 g, 1.08 mmol) in dry MeCN (5 ml) was added dry EtOH (15 ml) and the solution was added. Temporarily refrigerated in ice / water bath. Then, S- (2-naphthylmethyl) thiobenzimidate hydrobromide (0.815 g, 2.27 mmol) was added and the mixture was stirred at room temperature overnight. The resulting solution was concentrated to an oil, which was triturated with ether to give a yellow solid. The solid was collected, dissolved in EtOH, basified with NaOH (1N) and the free base was extracted with EtOAc. Dry (Na₂SO₄) And after removal of most of the solvent, the resulting suspension was diluted with excess ether to give a fuzzy yellow solid (0.36 g, 69%), mp 188-189 ° C, which was purified. No need.¹H NMR (DMSO-d₆): 2.51 (s, 6H), 6.60 (brs, 4NH), 6.77 (s, 2H), 6.87 (m, 4H), 7.55 (dd, 2H), 7. 74 (d, 2H), 7.95 (m, 2H), 8.31 (d, 2H), 8.63 (d, 2H).
[0083]
To make the hydrochloride salt, the free base was suspended in EtOH (40 ml) and treated with dry HCl gas at ice-bath temperature for 5-10 minutes. Continuous stirring of the resulting solution for 15-20 minutes gave an orange suspension, which was diluted with ether (40 ml) and filtered to give an orange powder (0.40 g), mp> 180 ° C dec.¹H NMR (DMSO-d₆): 2.62 (s, 6H), 7.08 (s, 2H), 7.44 (d, 2H), 7.47 (s, 2H), 7.85 (dd, 2H), 7.99 (D, 2H), 8.22 (t, 2H), 8.49 (d, 2H), 8.89 (d, 2H), 9.36 (brs, 2H), 10.13 (brs, 2H), 11.88 (brs, 2H). MS (EI): m / z 486 (M⁺, 100), 382 (77.9), 278 (12.8), 104 (20.0), 78 (8.8), 43 (28.9). Analysis calculated value C₃₀H₂₆N₆O ・ 3.5HCl ・ 0.5H₂O (623.20): C, H, N, Cl.
[0084]
2,5-bis [4- (2-pyridylimino) aminophenyl] furan (compound 6a) free base: yellow crystalline solid, mp 221-223 ° C. (DMF / EtOH / H₂O). Yield: 65%¹H NMR (DMSO-d₆): 6.80 (brs, 4NH), 6.94 (s, 2H), 7.03 (d, 4H), 7.56 (m, 2H), 7.77 (d, 4H), 7. 96 (m, 2H), 8.32 (d, 2H), 8.64 (m, 2H). Hydrochloride: orange / red powder, mp> 175 ° C dec.¹H NMR (DMSO-d₆): 7.26 (s, 2H), 7.58 (d, 4H), 7.85 (dd, 2H), 8.03 (d, 4H), 8.22 (t, 2H), 8.52. (D, 2H), 8.89 (d, 2H), 9.39 (brs, 2H), 10.16 (brs, 2H), 11.91 (brs, 2H). MS (EI): m / z 458 (M⁺, 100), 354 (49.1), 250 (27.6), 221 (8.9), 130 (9.4), 105 (13.6), 78 (8.6). Analysis calculated value C₂₈H₂₂N₆O.3.5 HCl (586.12): C, H, N, Cl.
[0085]
2,5-bis [4- (cyclohexylimino) aminophenyl] furan (compound 6d) Free base: pale yellow needle, mp 242-243 ° C dec (EtOAc). Yield: 17%.¹H NMR (DMSO-d₆): 1.18-1.90 (m, 20H), 2.14 (m, 2H), 5.71 (brs, 4NH), 6.82 (s, 2H), 7.63 (d, 4H). ). [41% yield of mono-amidine / mono-amine (free base, yellow solid, mp 195-196 ° C) was isolated by chromatography on silica (EtOAc-MeOH, 9: 1). The insoluble reaction medium appears to be the cause of the incomplete reaction.] Dihydrochloride: brown / pink solid mp 244-248 ° C dec.¹H NMR (DMSO-d₆): 1.27 (m, 6H), 1.63-1.96 (m, 14H), 2.72 (m, 2H), 7.22 (s, 2H), 7.40 (d, 4H). , 7.96 (d, 2H), 8.60 (brs, 2H), 9.34 (brs, 2H), 11.39 (brs, 2H). MS (FAB, thioglycerol): m / z 469.4 (MH⁺, 100). Analysis calculated value C₃₀H₃₈N₄O ・ 2HCl ・ 0.75EtOH ・ 0.25H₂O (580.60): C, H, N.P.
[0086]
2,5-bis [4- (benzimidyl) amino-2-methylphenyl] furan (compound 6 g) Free base: yellow crystalline solid. Yield: 60%.¹H NMR (DMSO-d₆): 2.48 (s, 6H), 6.50 (brs, 4NH), 6.75 (s, 2H), 6.84 (s, 4H), 7.44 (m, 6H), 7. 71 (d, 2H), 7.95 (d, 4H). Hydrochloride: orange / yellow hygroscopic solid.¹H NMR (DMSO-d₆): 2.61 (s, 6H), 7.03 (s, 2H), 7.38-7.44 (m, 4H), 7.63-7.68 (m, 4H), 7.75- 7.80 (m, 2H), 7.94 (d, 6H). MS (EI): m / z 484 (M⁺, 100), 381 (87.2), 278 (37.9), 235 (5.4), 218 (3.1), 190 (5.5), 144 (11.1), 103 (32. 8), 76 (9.3). Analysis calculated value C₃₂H₂₈N₄O.2HCl.0.5H₂0.569.39): C, H, N.P.
[0087]
2,5-bis [2-methyl-4- (2-quinolylimino) aminophenyl] furan (Compound 6i). Free base: orange powdery crystals, mp 168-169 ° C (EtOH). Yield: 52%.¹H NMR (DMSO-d₆): 2.54 (s, 6H), 6.80 (s, 2H), 6.95 (m, 4H), 7.69 (m, 2H), 7.78 (d, 2H), 7.84 (M, 2H), 8.07 (d, 2H), 8.12 (d, 2H), 8.44 (d, 2H), 8.50 (d, 2H). Di hydrochloride: orange solid, mp> 185 ° C dec.¹H NMR (DMSO-d₆): 2.65 (s, 6H), 7.10 (s, 2H), 7.50 (m, 4H), 7.85 (m, 2H), 8.01 (m, 2H), 8.20 (D, 2H), 8.26 (d, 2H), 8.46 (d, 2H), 8.80 (d, 2H), 9.44 (brs, 2H), 10.21 (brs, 2H), 11.98 (brs, 2H). MS (FAB, thioglycerol): m / z 587.2 (MH⁺, 100). Analysis calculated value C₃₈H₃₀N₆O ・ 2.0HCl ・ 1.75H₂O (691.13): C, H, N, Cl.
[0088]
2,5-bis [2-methyl-4- (5-methyl-2-pyridylimino) aminophenyl] furan (compound 6j). Free base: yellow crystalline solid, mp 156-158 ° C (Et.₂O / hexane). Yield: 74%.¹H NMR (DMSO-d₆): 2.37 (s, 6H), 2.50 (s, 6H), 6.55 (brs, 4NH), 6.75 (s, 2H), 6.85 (m, 4H), 7. 70-7.76 (m, 4H), 8.18 (d, 2H), 8.45 (s, 2H). Hydrochloride: orange solid, mp> 175 ° C dec.¹H NMR (DMSO-d₆): 2.49 (s, 6H), 2.62 (s, 6H), 7.08 (s, 2H), 7.43 (d, 2H), 7.47 (s, 2H), 7.85 (Dd, 2H), 7.98 (d, 2H), 8.03 (d, 2H), 8.42 (d, 2H), 8.74 (s, 2H), 9.29 (br s, 2H) ), 10.07 (brs, 2H), 11.83 (brs, 2H). MS (EI): m / z 514 (M⁺, 19.2), 396 (100), 278 (34.5), 144 (8.0), 118 (33.6), 91 (13.6), 43 (22.8). Analysis calculated value C₃₂H₃₀N₆O ・ 3.25HCl ・ 0.75H₂O (646.62): C, H, N, Cl.
[0089]
2,5-bis [2-methoxy-4- (2-pyridylimino) aminophenyl] furan (compound 6k). Free base: light yellow crystalline solid, mp 196-197 ° C (EtOAc / Et)₂O). Yield: 75%.¹H NMR (DMSO-d₆): 3.92 (s, 6H), 6.64 and 6.67 (d, 2H and s, 2H, overlap a wide range of NH signals), 6.89 (s, 2H), 7.55 ( dd, 2H), 7.86 (d, 2H), 7.95 (m, 2H), 8.32 (d, 2H), 8.63 (d, 2H). Dihydrochloride: brick orange solid, mp> 180 ° C dec.¹H NMR (DMSO-d₆): 4.00 (s, 6H), 7.16 (s, 2H), 7.18 (d, 2H), 7.34 (s, 2H), 7.85 (dd, 2H), 8.13 (D, 2H), 8.22 (t, 2H), 8.49 (d, 2H), 8.89 (d, 2H), 9.39 (brs, 2H), 10.15 (brs, 2H), 11.89 (brs, 2H). MS (EI): m / z 518 (M⁺, 100), 414 (90.0), 371 (13.3), 310 (12.7), 267 (9.7), 155 (6.02), 104 (25.9), 77 (9. 6), 43 (13.6). Analysis calculated value C₃₀H₂₆N₆O ・ 2.0HCl ・ 2.0H₂O (627.51): C, H, N, Cl.
[0090]
2,5-bis [2-chloro-4- (2-pyridylimino) aminophenyl] furan (Compound 61). Free base: orange crystalline solid, mp 189-190 ° C (EtOH). Yield: 25%.¹H NMR (DMSO-d₆): 6.85 (brs, 4NH), 7.02 (dd, 2H), 7.08 (d, 2H), 7.17 (s, 2H), 7.56 (m, 2H), 7. 93-7.98 (m, 4H), 8.29 (d, 2H), 8.64 (m, 2H). Dihydrochloride: yellow / orange solid, mp> 180 ° C dec.¹H NMR (DMSO-d₆): 7.45 (s, 2H), 7.60 (d, 2H), 7.80 (s, 2H), 7.86 (dd, 2H), 8.23 (m, 4H), 8.50 (D, 2H), 8.90 (d, 2H), 9.54 (brs, 2H), 10.23 (brs, 2H), 11.98 (brs, 2H). MS (EI): m / z 530, 528, 526 (M⁺, 13.2, 69.8, 100), 426, 424, 422 (7.9, 48, 72.4), 322, 320, 318 (2.6, 17.4, 26.6). Analysis calculated value C₂₈H₂₀Cl₂N₆O ・ 2.0HCl ・ 1.5H₂O (627.35): C, H, N, Cl.
[0091]
2,5-bis [2,6-dimethyl-4- (2-pyridylimino) aminophenyl] furan (compound 6m). Free base: pale yellow crystals, mp 206-207 ° C (EtOH). Yield: 80%.¹H NMR (DMSO-d₆): 2.19 (s, 12H), 6.47 (s, 2H), 6.55 (brs, 4NH), 6.69 (s, 4H), 7.54 (m, 2H), 7.5. 94 (m, 2H), 8.29 (d, 2H), 8.62 (d, 2H). Hydrochloride: fuzzy yellow solid, mp> xxx ° C dec.¹H NMR (DMSO-d₆): 2.28 (s, 12H), 6.68 (s, 2H), 7.28 (s, 4H), 7.84 (m, 2H), 8.21 (t, 2H), 8.48 (D, 2H), 8.88 (d, 2H), 9.37 (brs, 2H), 10.12 (brs, 2H), 11.87 (brs, 2H). MS (EI): m / z 514 (M⁺, 8.5), 410 (38.7), 306 (100), 291 (16.0), 148 (45.4), 104 (56.3), 77 (31.0). Analysis calculated value C₃₂H₃₀N₆O ・ 3.75HCl ・ 0.5H₂O (660.35): C, H, N, Cl.
[0092]
Example 8
Production of acetamidine
The following acetamidine was purified and analyzed as an HBr salt without conversion to the free base.
[0093]
2,5-bis [4- (acetimidoyl) aminophenyl] furanhydrobromide (Compound 6e). Fuzzy brown / orange solid, mp 307-309.5 ° C dec (MeOH / EtOAc). Yield: 57%.¹H NMR (DMSO-d₆, 70 ° C): 2.37 (s, 6H), 7.17 (s, 2H), 7.40 (d, 4H), 7.94 (d, 4H), 8.52 (br s, 2H). , 9.43 (brs, 2H), 11.13 (brs, 2H). MS (FAB, thioglycerol): m / z 333.2 (MH⁺, 100). Analysis calculated value C₂₀H₂₀N₄O.2.0HBr (494.23): C, H, N.P.
[0094]
2,5-bis [4 (acetimidoyl) amino-2-methylphenyl] furanhydrobromide (compound 6f). Fuzzy brown / yellow solid, mp 282.5-284 ° C dec (MeOH / EtOAc). Yield: 64%.¹H NMR (DMSO-d₆, 70 ° C): 2.37 (s, 6H), 2.57 (s, 6H), 6.99 (s, 2H), 7.27 (d, 2H), 7.28 (s, 2H), 7.88 (d, 2H), 8.52 (brs, 2H), 9.42 (brs, 2H), 11.12 (brs, 2H). MS (FAB, thioglycerol): m / z 361.2 (MH⁺, 100). Analysis calculated value C₂₀H₂₀N₄O.2.0HBr.0.3MeOH (531.89): C, H, N.
[0095]
Example 9
Preparation of pyridine-2-thiocarboxamide
Applying Taylor's general method, a mixture of 2-cyanopyridine (7.28 g, 7.0 mmol) and thioacetamide (10.52 g, 14.0 mmol) was treated with 60 ml of HCl-saturated DMF. The solution was stirred vigorously in an open flask on an oil bath initially set at 80 ° C. (the temperature gradually increased to 95 ° C. during the reaction). Taylor, E.A. C. et al. , J. et al. Am. Chem. Soc. 1960, 82, 2656-2657. After 80 minutes (TLC monitoring), the resulting orange suspension was cooled, neutralized with concentrated NaOH / ice and extracted with EtOAc. The extract was washed with water (3x) and then concentrated to a light brown solid (crushed with warm water) and collected. The dried product was passed through a silica gel column and eluted with EtOAc: hexane (2: 1) to give, after removal of most of the solvent and dilution with hexane, a yellow crystalline solid (6.36 g, 66%), mp 136-137 ° C; lit mp 137 ° C.
[0096]
5-methylpyridine-2-thiocarboxamide. Prepared from 2-cyano-5-methylpyridine as described above with a reaction time of 30 minutes. Moynehan, T.M. M. et al. , J. et al. Chem. Soc. 1962, 2637-2658. Yield: 59%. Golden crystal, mp 172.5-173 ° C.¹H NMR (CDCl₃): 2.39 (s, 3H), 7.60 (brs, NH), 7.61 (dd, 1H), 8.31 (d, 1H), 8.57 (d, 1H), 9. 42 (br s, NH).
[0097]
Example 10
Production of S- (2-naphthylmethyl) thioimidate
The following new S- (2-naphthylmethyl) thioimidate was prepared according to the literature for 1.5 hours in CHCl.₃Prepared by reacting the appropriate thioamide with (2-bromomethyl) naphthalene in (EtOH-free). Shearer, B.S. G. FIG. Et al. , Tetrahedron Lett. 1997, 38, 179-182. After dilution with ether, the precipitated product was collected, rinsed with ether and dried in vacuo.
[0098]
S- (2-naphthylmethyl) cyclohexanethioimidate HBr. Yield: 91%. White solid, mp 192-12.5 ° C.¹H NMR (DMSO-d₆): 1.14-1.32 (m, 3H), 1.45-1.53 (m, 2H), 1.63 (d, 1H), 1.76 (d, 2H), 1.87 ( d, 2H), 2.84 (t, 1H), 4.73 (s, 2H), 7.53-7.56 (m, 3H), 7.89-7.97 (m, 3H), 8 .01 (s, 1H).
[0099]
S- (2-Naphthylmethyl) thiobenzimidate HBr. Yield: 94%. White solid, mp 210-212 ° C dec.¹H NMR (DMSO-d₆): 4.90 (s, 2H), 7.54-7.62 (m, 2H), 7.62-7.66 (m, 3H), 7.78-7.82 (m, 1H), 7.88-7.99 (m, 5H), 8.06 (s, 1H).
[0100]
S- (2-Naphthylmethyl) -2-pyridylthioimidate HBr. Yield: 58%. White fuzzy solid, mp 192 ° C dec.¹H NMR (DMSO-d₆): 4.80 (s, 2H), 7.53-7.57 (m, 2H), 7.59-7.62 (dd, 1H), 7.76-7.79 (m, 1H), 7.90-7.97 (m, 3H), 8.05 (s, 1H), 8.10-8.14 (m, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.78-8. 80 (m, 1H).
[0101]
S- (2-Naphthylmethyl) -5-methyl-2-pyridylthioimidate HBr. Yield: 65%. White fuzzy solid, mp 190-191 ° C dec.¹H NMR (DMSO-d₆): 2.42 (s, 3H), 4.79 (s, 2H), 7.53-7.57 (m, 2H), 7.59-7.62 (dd, 1H), 7.90- 7.97 (m, 4H), 8.05 (s, 1H), 8.17 (d, 1H), 8.64 (s, 1H).
[0102]
S- (2-Naphthylmethyl) -2-quinolylthioimidate HBr. Yield: 23%. Light brown fuzzy solid, mp 184-186 ° C dec.¹H NMR (DMSO-d₆): 4.73 (s, 2H), 7.53-7.55 (m, 2H), 7.62-7.64 (dd, 1H), 7.78 (t, 1H), 7.87- 7.97 (m, 4H), 8.07 (s, 1H), 8.12 (d, 2H), 8.28 (d, 1H), 8.66 (d, 1H).
[0103]
Example 11
Biological Testing of Compounds of the Invention: Materials and Methods
The difference in the thermal melting value (ΔTm) was measured and the DNA sample was analyzed according to the previous method of Boykin, D.M. W. et al. , J. et al. Med. Chem. 1998, 41, 124-129 and Francesconi, I .; et al. , J. et al. Med. Chem. Manufactured as described in 1999, 42, 2260-2265.
[0104]
Mycobacterium tuberculosis susceptibility test
Compounds of the present invention are described in Collins, L .; et al. , Antimicrob. Agents Chemother. 1997, 41, 1004-1099, using a fluorometric broth microdilution assay, the Microplate Alamar Blue Assay (MABA) in BACTEC 12B medium. tested against tuberculosis H37Rv. Compounds were initially evaluated at 6.25 ug / ml and the MIC was evaluated by testing at a lower concentration those that had at least a 90% decrease in fluorescence relative to untreated cultures. The MIC was defined as the lowest concentration of a compound that reduced relative fluorescence units by more than 90% when compared to a control culture. Anti-Mycobacterium data are available from U.S.A. S. Through research and development contracted with the National Institute of Allergy and Infectious Diseases, provided by Tuberculosis Antimicrobial Acquisition and Coordinating Facility (TAACF).
[0105]
Antifungal test organism
In this study, the fungi used for all compounds in Table 1 included two cited strains, C. albicans A39 and Aspergillus fumigatus (strain 168.95). An expanded 6j study with fungi is listed in Table 3.
[0106]
Culture medium
The antifungal susceptibility test was performed on RPMI 1640 medium with glutamine but without sodium bicarbonate (Sigma Chemical Co., St. Louis, Mo.) at pH 6.5 with 0.165 M morpholinopropanesulfonic acid. Performed in the medium buffered to zero.
[0107]
Antifungal in vitro susceptibility test
The experiment for determining the MIC of the yeast was performed by a broth macrodilution method recommended by the National Committee for Clinical Laboratory Standards. National Committee for Clinical Laboratory Standards. See Reference method for broth dilution suspension of testing of Documents M27-T. Experimental Standard, National Committee for Clinical Laboratory Standards, Wayne, Pa. , 1995). The difference compared to the standardization method was the choice of drug dilution ranging from 100 to 0.09 μg / ml. Briefly, this method grows at 35 ° C. and 0.5 × 10³ From 2.5 x 10³ Use of an inoculum adjusted to a concentration of CFU / ml, cultivation of the culture at 35 ° C. and C.I. It consists of a measurement at 48 hours for all yeasts except neoformans (measured at 72 hours for C. neoformans). The MIC was defined as the lowest drug concentration in the culture where visual turbidity was inhibited to less than 80% or equal to that of the control growth tube temperature.
[0108]
Minimum fungicidal concentration (MFC) was determined by plating 100 μl aliquots from tubes that completely inhibited growth on Sabouuraud agar plates. The lowest drug concentration that resulted in 3 or fewer colonies was recorded as the MFC.
[0109]
The mold was tested in the same way, but with the following modifications. Isolates were grown on Sabouraud dextrose agar at 30 ° C. after appropriate sporulation had occurred (4 to 14 days); conidia were 0.85% NaCl and 0.05% in sterile distilled water. The colonies were recovered by immersing the colonies in a sterile solution of Tween 80. The inoculum was prepared on a hemocytometer for counting, diluted in RPMI 1640 medium, to approximately 0.5 x 10³ From 2.5 x 10³ A final inoculum size of CFU / ml was obtained. The inoculum size was varied by plating an aliquot of the inoculum. The cultures were incubated at 30 ° C. for 48 to 72 hours or until growth of control tubes became visible.
[0110]
Example 12
Biological test results
Melting temperatures were measured for compounds 5 and 6, which bind to poly dA.dT, to give a quantitative assessment of the DNA binding affinity of these drug candidates (Table 2). The difference in Tm values between drug-DNA complex and free DNA in solution (ΔTm) is a useful tool for assessing the strength of the interaction between DNA and molecules. Because some compounds bind very strongly to poly dA.dT (Table 2), these compounds and Dickerson-Drew dodecameric d (CGCGGAATTCGCG)₂ (SEQ ID NO: 1), interaction with DNA having different short AT sequences and different glove properties was also studied. Better relative comparison of the DNA binding affinities of these putative minor-grove binding compounds due to reduced binding of the drug to the dodecamer, affected by the lower ΔTm of the drug-decameric complex (Table 2) Can be performed.
[0111]
Table 2. In vitro antibacterial activity and DNA binding results of the compound of the present invention
[Table 2]

[0112]
(A)% inhibition at 6.25 μg / ml
(B) AT = poly dA · dT; oligo = d (CGCGATATTCGCG)₂
(C) nt = not tested
(D) nd = not measured
[0113]
The parent diguanidino compound 5a showed strong affinity for DNA as judged by the ΔTm values of both poly dA.dT (21.6) and the dodecamer (10.8). These values compare well with those of the parent amidine 2,5-bis [4-amidinophenyl] furan (25 and 11.7), which suggests a slight difference in affinity in the core furan structure of the amidine and guanidine cationic centers. Compare to Based on a comparison of the ΔTm of the binding of the parent diguanidino 5a with some of the inverse amidine congeners 6a-6e to the dodecamer, some interesting effects resulting from structural changes in the end groups are described. First, the phenyl, substituted phenyl or cyclohexyl end groups (6b, 6c and 6d) that give rise to the inverse amidine have increased affinity over the parent diguanidino 5a. In a related series of diamidines, the affinity increases with increasing bulk of the end groups, thereby increasing the van der Waals interaction between the end groups and the wall of the minor-grove, which is the case in this system. It seems. Interestingly, the ΔTm value of the compound and the terminal 2-pyridyl group 6a is significantly lower than that of its phenyl counterpart 6b. The lower affinity of 6a may indicate a different binding mode or different base pair selectivity for two structurally related dicationic analogs. However, the introduction of a methyl group into each of the two phenyl rings of the 2,5-diarylfuran system having a terminal phenyl group, 6 g, results in a lower ΔTm until it resembles the pyridyl counterpart, 6h. The use of small alkyl end groups, methyl groups, as seen in 6e and 6f, also results in a significant decrease in binding affinity.
[0114]
The placement of a single substituent on each of the two phenyl rings of the 2,5-diarylfuran framework resulted in significant differences in the ΔTm values of both the diguanidine and inverse amidine series. Based on a comparison of the ΔTm values for binding to the diguanidine series dodecimer, the placement of a single substituent of approximately the same size but with different electrical properties of the phenyl ring results in a lower ΔTm value. Comparing the value of 5a with 5b-5e. The most dramatic effect is the strongest electron withdrawing group that reduces the ΔTm value to zero, 5e CF₃Was observed.
[0115]
Different sensitivities to substituents were seen by the ΔTm values of a series of compounds with terminal 2-pyridyl groups (6a, 6h-6m). In this case, the introduction of a single substituent into each of the two phenyl rings of the 2,5-diarylfuran framework results in a ΔTm value effect when the substituent is methyl (6h) or methoxy (6k). Become smaller. However, the introduction of the chlorine group (61) caused a significant decrease in the value, possibly partially responsible for the pK effect. The detrimental effect of the chlorine group on ΔTm is greater with the pyridyl derivative 61 than with the analog guanidine 5d, possibly causing a lower basicity of the inverse amidine compared to guanidine. Consistent with the results from the diguanidine series, the introduction of two methyl groups on each of the core phenyl rings (6m) also dramatically reduces DNA affinity. Interestingly, replacement of the terminal 2-pyridyl with a 2-quinoyl group (6I) also results in a significant decrease in ΔTm, suggesting certain limitations in the size of the terminal groups. On the other hand, the introduction of a methyl group at the terminal pyridyl ring (6j) slightly enhanced the binding affinity.
[0116]
The antimicrobial data for these compounds are also summarized in Table 2. The greatest activity among the diguanidino compounds was seen at 5a and 5b, with good in vitro activity against both Candida albicans and Mycobacterium tuberculosis. These compounds had MIC values of 1-3 μg / ml for both organisms. Both compounds are C.I. albicans was fungicidal. 2,5-Bis [alkylimino] aminophenyl] furans (6d, 6e, 6f) generally do not show significant fungicidal activity, but compound 6d, which has a larger cyclohexyl group, is described in M.P. It showed some activity against tuberculosis.
[0117]
2,5-bis [arylimino] aminophenyl] furan can be divided into two groups: those whose terminal groups are phenyl or substituted phenyl, and those in which they are 2-pyridyl or substituted 2-pyridyl. Compounds of the terminal phenyl group class do not show high antifungal activity, but both 6b and 6g Tuberculosis showed significant activity with MIC values of 0.78 and 1.56 μg / ml, respectively. Four compounds (6a, 6h, 6j and 6k) in the terminal pyridyl group class are described in M.E. For tuberculosis, MIC values ranging from 1.0 to 2.0 μg / ml showed promising activity. Most 2-pyridyl compounds showed only moderate antifungal activity. With the exception of 6j and 6k, C.I. Albicans showed an activity of MIC level of 1.0 μg / ml or less, and 6k showed the same level of activity against Aspergillus fumigatus.
[0118]
To evaluate the spectrum of antifungal activity of these compounds, pyridyl-substituted amidines 6j and 6k were selected for studies against other pathogenic fungi (Table 3). Compound 6j is C.I. albicans was quite effective and showed fungicidal activity against several strains. Compound 6j had little effect on both Aspergillus species. Compound 6j showed good fungicidal activity against Rhizopus arrhizus, but was less effective against mold Fusarium solani. Compound 6k did not show significant activity in an expanded fungus panel.
[0119]
In summary, dicationic 2,5-bis (4-guanidinophenyl) furans 5a-5f, 2,5-bis [4- (arylimino) aminophenyl] furans 6a-6c, 6g-6m, and 2,5- Bis [4- (alkylimino) aminophenyl] furan 6d-6f was synthesized starting from 2,5-bis [tri-n-butylstannyl] furan. Poly dA.dT and double oligomer d (CGCGATATTCGCG)₂ Thermal melting studies using (SEQ ID NO: 1) explain the high DNA binding affinities of many compounds. Both guanidine and reverse amidine in the 2,5-diarylfuran series have strong DNA binding properties.
[0120]
Compounds in both these classes exhibit both antifungal and antimycobacterial activity. In addition, they can be a broad spectrum of antifungal agents. Of the 19 new dicationic compounds synthesized, 6 (6a, 6b, 5b, 6h, 6j, 6k) showed a MIC of 2 μg / ml or less for Mycobacterium tuberculosis. Unlike the fungicidal standard antifungal drug Fluconazole, of 19 screened against Candida albicans, four (5a, 5b, 6j, 6k) had an MIC of 2 μg / ml or less, Two (5a, 6k) showed fungicidal activity. One of the test compounds (6k) showed a MIC of 1 μg / ml and was fungicidal against Aspergillus fumigatus. Some compounds have inhibitory activity against Cryptococcus neoformans, but all of them have C. albicans and A.C. It appeared to be less effective against this pathogenic yeast than fumigatus.
[0121]
Evaluation on Trypanosoma brucei rhodesense showed in vitro that (arylimino) aminophenylfuran is effective in the range of 0.02 to 0.1 μg / mL, especially when the aryl is 2-pyridyl; pentamidine And approximately 1/10 of the effect of furamidine. In contrast, these new compounds are 10 times more effective than pentamidine and furamidine, cruzi is comparable to the activity of benznidazole.
[Table 3]

[0122]
MIC and MFC values are in μg / ml. MIC 80% = 80% of the inoculated dose is inhibited. MIC 100% = 100% of the inoculated dose is inhibited. MFC = minimum fungicidal concentration
[0123]
Although the specification and examples disclose typical and preferred embodiments of the invention, they use certain phrases, which are used only in a generic and descriptive sense, and which are defined in the appended claims. It is not intended to limit the scope of the invention.
[Brief description of the drawings]
FIG. 1 shows various chemical schemes that may be useful in synthesizing compounds of the present invention.

Claims (19)

Compounds of Formula I:

[Where,
R ₁ , R ₂ , R ₃ and R ₄ are each independently selected from the group consisting of H, alkyl, alkoxy, halide, and alkyl halide groups;
R ₅ is H, alkyl or aryl;
R ₆ is H, alkyl, aryl, or NR ₇ R ₈ , wherein R ₇ and R ₈ are each independently selected from the group consisting of H, alkyl and aryl, and X is O, S Or NR ₉ , wherein R ₉ is H or alkyl. The compound of claim 1, wherein R ₁ and R ₂ are each H. The compound of claim 1, wherein R ₁ and R ₂ are each H and R ₃ and R ₄ are each lower alkyl. R ₃ and R ₄ is a halide, respectively, a compound of claim 1. R ₃ and R ₄ are each alkoxy, compounds of claim 1. R ₃ and R ₄ are each an alkyl halide, a compound of claim 1. R ₅ is H, _{R 6} is _NR 7 _{R 8,} and _{R 7} and R ₈ are each H, compounds of claim 1. R ₆ is pyridyl, the compounds of claim 1. The compound of claim 1, wherein R ₆ is substituted pyridyl. The compound of claim 1, wherein R ₆ is quinolinyl. Pharmaceutical composition comprising a compound of formula I in a pharmaceutically acceptable carrier:

[Where,
R ₁ , R ₂ , R ₃ and R ₄ are each independently selected from the group consisting of H, alkyl, alkoxy, halide, and alkyl halide groups;
R ₅ is H, alkyl or aryl;
R ₆ is H, alkyl, aryl, or NR ₇ R ₈ , wherein R ₇ and R ₈ are each independently selected from the group consisting of H, alkyl and aryl;
X is O, S or NR _9, where, _{R 9} is H or alkyl. 12. The pharmaceutical composition of claim 11, wherein said composition is formulated for parenteral administration. 12. The pharmaceutical composition according to claim 11, wherein said composition is formulated for oral administration. 12. The pharmaceutical composition according to claim 11, wherein said composition is formulated for topical administration. A process for preparing a pharmaceutical composition, comprising formulating the compound of formula (I) of claim 1 and optionally a pharmaceutically acceptable carrier. A method of treating a microbial infection in a subject in need thereof, wherein the microbial infection is Mycobacterium tuberculosis, Trypanosoma spp. , Candida albicans, Aspergillus spp. , Cryptosporidium parvum, Giardia lamblia, Plasmodium spp. , Pneumocystis carinii, Toxoplasma gondii, Fusarium solani, and Cryptococcus neoformans, produced by a microorganism selected from the group consisting
Formula I:

[Where,
R ₁ , R ₂ , R ₃ and R ₄ are each independently selected from the group consisting of H, alkyl, alkoxy, halide, and alkyl halide groups;
R ₅ is H, alkyl or aryl;
R ₆ is H, alkyl, aryl, or NR ₇ R ₈ , wherein R ₇ and R ₈ are each independently selected from the group consisting of H, alkyl and aryl, and X is O, S Or NR ₉ , wherein R ₉ is H or alkyl.
Or administering a pharmaceutically acceptable salt compound to the subject.
The method. 17. The method of claim 16, wherein said compound is administered parenterally. 17. The method of claim 16, wherein said compound is administered orally. 17. The method of claim 16, wherein said compound is administered topically.

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