JP2004070702A

JP2004070702A - Cell image photographing device, cell image photographing method, its program, and storage medium

Info

Publication number: JP2004070702A
Application number: JP2002229778A
Authority: JP
Inventors: Koshi Yamaguchi; 山口　幸志
Original assignee: Matsushita Electric Industrial Co Ltd
Current assignee: Panasonic Holdings Corp
Priority date: 2002-08-07
Filing date: 2002-08-07
Publication date: 2004-03-04

Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a cell image photographing device capable of automatically photographing a cell image optimal to cell image analysis. <P>SOLUTION: This cell image photographing device is provided with an image photographing part for photographing the image of a cell with a fixed interval in a Z axial direction and a central arithmetic part for controlling the whole part. The central arithmetic part is provided with a frequency converting means 21 for acquiring frequency conversion data by frequency-converting an image photographed by the image photographing part, an optimal image selection featured value calculating means 23 for calculating featured values for optimal image selection based on the frequency change data, and an optimal image selecting means 25 for selecting an image which is optimal to analysis based on the calculated featured value for optimal image selection. <P>COPYRIGHT: (C)2004,JPO

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、明視野観察での動植物の細胞画像解析に最適な細胞画像の撮影を行う細胞画像撮影装置および細胞画像撮影方法ならびにその細胞画像撮影方法を実行するためのプログラムおよび記録媒体に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
生化学分野における各種の試験では、動植物の細胞や微生物などを種々の条件下で培養し、時間経過に伴う変化や成長の度合いを観察することが行われる。神経細胞など突起の逐次成長する部分を観察対象とする場合には、これらを経時的に追跡して観察・記録し、データ化する作業が必要となる。従来は、このような作業は専ら人手に依存しており、実験担当者が顕微鏡視野内で細胞を目視によって観察または画像撮影して、神経突起などの観察対象部位に注目して必要項目をデータ化し、記録するという作業を行っていた。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
このような作業の中で、目視、画像撮影の時間は煩瑣な作業であり、これによって実験作業全体の効率の低下を招くとともに、実験担当者に過大の作業負荷を強いることになるという問題点を有していた。また、解析するための細胞画像を撮影する場合も、細胞が透明体であるため、細胞の焦点位置では細胞画像のコントラストが低くなり、細胞画像解析に適した画像が得られないという問題点を有していた。
【０００４】
この細胞画像撮影装置、細胞画像撮影方法、プログラムおよび記録媒体では、細胞画像解析に最適な細胞画像を自動的に撮影することが要求されている。
【０００５】
本発明は、この要求を満たすため、細胞画像解析に最適な細胞画像を自動的に撮影することができる細胞画像撮影装置および細胞画像解析に最適な細胞画像を自動的に撮影するための細胞画像撮影方法ならびにその細胞画像撮影方法を実行するためのプログラムおよび記録媒体を提供することを目的とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
上記課題を解決するために本発明の細胞画像撮影装置は、Ｚ軸方向に一定の間隔で細胞の画像を撮影する画像撮影部と、全体を制御する中央演算部とを有する細胞画像撮影装置であって、中央演算部は、画像撮影部で撮影した画像を周波数変換して周波数変換データを得る周波数変換手段と、周波数変化データに基づいて最適画像選択用特徴量を計算する最適画像選択用特徴量計算手段と、計算した最適画像選択用特徴量をもとに解析に最適な画像を選択する最適画像選択手段とを有する構成を備えている。
【０００７】
これにより、細胞画像解析に最適な細胞画像を自動的に撮影することができる細胞画像撮影装置が得られる。
【０００８】
上記課題を解決するために本発明の細胞画像撮影方法は、Ｚ軸方向に一定の間隔で細胞の画像を撮影する画像撮影工程と、撮影した画像を周波数変換して周波数変換データを得る周波数変換工程と、周波数変換データに基づいて最適画像選択用特徴量を計算する最適画像選択用特徴量計算工程と、計算した最適画像選択用特徴量をもとに解析に最適な画像を選択する最適画像選択工程とを含む構成を備えている。
【０００９】
これにより、細胞画像解析に最適な細胞画像を自動的に撮影するための細胞画像撮影方法が得られる。
【００１０】
上記課題を解決するために本発明のプログラムは、上記細胞画像撮影方法の各工程を実行させるためのプログラムである構成を備えている。
【００１１】
これにより、上記細胞画像撮影方法を実行するためのプログラムが得られる。
【００１２】
上記課題を解決するために本発明の記録媒体は、コンピュータに上記細胞画像撮影方法の各工程を実行させるためのプログラムを記録したコンピュータ読み取り可能な記録媒体である構成を備えている。
【００１３】
これにより、上記細胞画像撮影方法を実行するための記録媒体が得られる。
【００１４】
【発明の実施の形態】
本発明の請求項１に記載の細胞画像撮影装置は、Ｚ軸方向に一定の間隔で細胞の画像を撮影する画像撮影部と、全体を制御する中央演算部とを有する細胞画像撮影装置であって、中央演算部は、画像撮影部で撮影した画像を周波数変換して周波数変換データを得る周波数変換手段と、周波数変換データに基づいて最適画像選択用特徴量を計算する最適画像選択用特徴量計算手段と、計算した最適画像選択用特徴量をもとに解析に最適な画像を選択する最適画像選択手段とを有することとしたものである。
【００１５】
この構成により、計算した最適画像選択用特徴量をもとに細胞画像解析に最適な細胞画像を選択することができるので、細胞画像解析に最適な細胞画像を自動的に撮影することができるという作用を有する。
【００１６】
請求項２に記載の細胞画像撮影装置は、請求項１に記載の細胞画像撮影装置において、画像撮影部は、対物レンズもしくはステージをＺ軸方向に動かして、対物レンズと細胞との距離を変化させ、距離の変化に応じてカメラの外部シャッタ信号を出力し、Ｚ軸方向に一定の間隔で細胞の画像を撮影することとしたものである。
【００１７】
この構成により、Ｚ軸方向に一定の間隔で撮影した細胞画像を周波数変換した周波数変換データに基づいて最適画像選択用特徴量を計算することができるという作用を有する。
【００１８】
請求項３に記載の細胞画像撮影装置は、請求項１またはに記載の細胞画像撮影装置において、最適画像選択用特徴量計算手段は、撮影画像を周波数変換して周波数成分を高周波側の周波数成分と直流成分を含む低周波側の周波数成分とに帯域分割し、少なくとも高周波側の周波数成分を用いて画像選択用特徴量を計算することとしたものである。
【００１９】
この構成により、少なくとも高周波側の周波数成分を用いて画像選択用特徴量を簡易に計算して細胞画像解析に最適な細胞画像を選択することができるという作用を有する。
【００２０】
請求項４に記載の細胞画像撮影装置は、請求項１乃至３のいずれか１に記載の細胞画像撮影装置において、最適画像選択手段は、特徴量の変化における一つ以上のピークのうち、細胞部分が背景部分より暗く写るピーク位置の画像を最適画像として選択することとしたものである。
【００２１】
この構成により、特徴量の変化における一つ以上のピークのうち、細胞部分が背景部分より暗く写るピーク位置の画像を最適画像として選択するので、透明体である細胞に対して画像解析に最適なコントラストの高い明視野画像を撮影することができるという作用を有する。
【００２２】
請求項５に記載の細胞画像撮影方法は、Ｚ軸方向に一定の間隔で細胞の画像を撮影する画像撮影工程と、撮影した画像を周波数変換して周波数変換データを得る周波数変換工程と、周波数変換データに基づいて最適画像選択用特徴量を計算する最適画像選択用特徴量計算工程と、計算した最適画像選択用特徴量をもとに解析に最適な画像を選択する最適画像選択工程とを含むこととしたものである。
【００２３】
この構成により、計算した最適画像選択用特徴量をもとに細胞画像解析に最適な細胞画像を選択することができるので、細胞画像解析に最適な細胞画像を自動的に撮影することができるという作用を有する。
【００２４】
請求項６に記載の細胞画像撮影方法は、請求項５に記載の細胞画像撮影方法において、画像撮影工程においては、対物レンズもしくはステージをＺ軸方向に動かして、対物レンズと細胞との距離を変化させ、距離の変化に応じてカメラの外部シャッタ信号を出力し、Ｚ軸方向に一定の間隔で細胞の画像を撮影することとしたものである。
【００２５】
この構成により、Ｚ軸方向に一定の間隔で撮影した細胞画像を周波数変換した周波数変換データに基づいて最適画像選択用特徴量を計算することができるという作用を有する。
【００２６】
請求項７に記載の細胞画像撮影方法は、請求項５または６に記載の細胞画像撮影方法において、最適画像選択用特徴量計算工程においては、撮影画像を周波数変換して周波数成分を高周波側の周波数成分と直流成分を含む低周波側の周波数成分とに帯域分割し、少なくとも高周波側の周波数成分を用いて画像選択用特徴量を計算することとしたものである。
【００２７】
この構成により、少なくとも高周波側の周波数成分を用いて画像選択用特徴量を簡易に計算して細胞画像解析に最適な細胞画像を選択することができるという作用を有する。
【００２８】
請求項８に記載の細胞画像撮影方法は、請求項５乃至７のいずれか１に記載の細胞画像撮影方法において、最適画像選択工程においては、特徴量の変化における一つ以上のピークのうち、細胞部分が背景部分より暗く写るピーク位置の画像を最適画像として選択することとしたものである。
【００２９】
この構成により、特徴量の変化における一つ以上のピークのうち、細胞部分が背景部分より暗く写るピーク位置の画像を最適画像として選択するので、透明体である細胞に対して画像解析に最適なコントラストの高い明視野画像を撮影することができるという作用を有する。
【００３０】
請求項９に記載のプログラムは、請求項５乃至８のいずれか１に記載の各工程を実行させるためのプログラムであることとしたものである。
【００３１】
この構成により、プログラムに基づいて汎用コンピュータを動作させることにより、請求項５乃至８のいずれか１に記載の各工程を任意の場所で任意の時間に実行させることができるという作用を有する。
【００３２】
請求項１０に記載の記録媒体は、コンピュータに請求項５乃至８のいずれか１に記載の各工程を実行させるためのプログラムを記録したコンピュータ読み取り可能な記録媒体であることとしたものである。
【００３３】
この構成により、汎用コンピュータは、記録したプログラムを読み取って、請求項５乃至８のいずれか１に記載の各工程を任意の場所で任意の時間に実行することができるという作用を有する。
【００３４】
以下、本発明の実施の形態について、図１〜図４を用いて説明する。
【００３５】
（実施の形態１）
図１は、本発明の実施の形態１による細胞画像撮影装置を示すブロック図である。
【００３６】
図１において、ステージ１上には、観察対象の細胞を収容する担体である容器２が載置されている。容器２は外部から視認可能な透明体であり、内部には撮影対象の動植物の細胞を含む試料３が収容されている。ステージ１の下方には対物レンズ４が配設されており、対物レンズ４の下方にはカメラ５が配置されている。ステージ１の上方に配設された照明装置６を点灯して容器２を照明した状態で、対物レンズ４を介してカメラ５によって、容器２内の試料３中の細胞を撮像することにより、カメラ５は細胞画像のデジタル画像データを取得する。ステージ１および対物レンズ４は機構制御部１０と接続されており、機構制御部１０によってステージ１もしくは対物レンズ４を制御することにより、容器２内の所望の位置をカメラ５によって撮像することができる。カメラ５は画像記憶部１１と接続されており、カメラ５によって取得されたデジタル画像データは画像記憶部１１に記憶される。第１の記憶部１２はプログラム記憶部であり、周波数変換処理を行うプログラムや、変換されたデータに基づいて最適画像を選択するプログラムなど、各種の演算、動作制御の処理を行うプログラムを記憶する。中央演算部１５はＣＰＵであり、第１の記憶部１２に記憶されたプログラムに従って各種の演算や動作制御を実行する。表示部１６はモニタ装置であり、カメラ５によって取得した画像を表示するほか、操作・入力時の案内画面を表示する。第２の記憶部１７はデータ記憶部であり、撮影画像データを記憶する。操作・入力部１８はキーボードやマウスなどの入力手段であり、操作コマンド入力やデータ入力を行う。通信部１９は有線や無線の通信ネットワークを介して外部装置とのデータの授受を行う。記憶媒体ドライブ１３は、フロッピーディスクなどの磁気ディスクやメモリーカードなど、携行可能な記憶媒体１４からのデータの読み取りを行うドライブ装置である。記憶媒体１４には、撮影画像データが記憶されており、当該細胞画像撮影装置によって取得された画像の持ち出しができる。
【００３７】
このように構成された細胞画像撮影装置について、その概略動作を図２を用いて説明する。図２は、図１の細胞画像撮影装置の主要部を示す機能ブロック図である。
【００３８】
図２に示す周波数変換手段２１、最適画像選択用特徴量計算手段２３、最適画像選択手段２５は、図１において中央演算部１５が第１の記憶部１２に記憶されたプログラムに従って動作することにより実現される機能実現手段である。また撮影画像記憶部２０、周波数変換データ記憶部２２、最適画像選択用特徴量記憶部２４、最適画像記憶部２６は、図１に示す第２の記憶部１７に設定される記憶領域を示すものである。
【００３９】
図２において、撮影画像記憶部２０には、カメラ５によってＺ軸方向に一定間隔で撮影されたデータが記憶される。記憶されたデータはまず周波数変換手段２１によって周波数変換され、周波数変換データ記憶部２２に格納される。最適画像選択用特徴量計算手段２３は、周波数変換データ記憶部２２に記憶された周波数変換データのうち、少なくとも高周波数成分を用いて最適画像選択用特徴量を計算し、最適画像選択用特徴量記憶部２４に格納する。最適画像選択手段２５は、最適画像選択用特徴量記憶部２４に格納された特徴量データから、最適画像位置を決定し、撮影画像記憶部２０から最適画像位置の画像を選択し、最適画像記憶部２６によって画像を保存する。
【００４０】
図３は、本発明の実施の形態１による細胞画像撮影方法を示すフローチャートである。
【００４１】
図３において、まず撮影対象の細胞を含む試料３を収容した容器２をステージ１上に載置し、Ｚ軸方向に対物レンズ４とステージ１間の距離を変化させながらカメラ５によって試料３を撮像してＺ軸上の一定間隔の画像データを取得し、撮影画像記憶部２０に記憶する（Ｓ１）。次いで、この画像データに対して周波数変換手段２１によって周波数変換を実行する（Ｓ２）。これにより画像データは周波数帯域毎に周波数変換データ記憶部２２に記憶される。この周波数変換は所定回数反復される。すなわち周波数変換処理後に周波数変換データ記憶部２２に記憶されたデータのうち低周波数空間のデータ（ＤＣ成分）は再び周波数変換手段２１に読み込まれ、再び周波数変換が実行される。次に、最適画像選択用特徴量計算手段２３は、周波数変換によって求められた高周波成分のうち、特定閾値以上の高周波成分の絶対値の平均値を最適画像選択用特徴量として計算する（Ｓ３）。ここでは、特定閾値以上の高周波成分の絶対値の和を最適画像選択用特徴量として計算する場合もある。これらの特徴量は、画像の高周波成分が強いときに大きくなる値であり、フォーカスが合う点で大きくなるという特徴をもつ。次に、この特徴量に基づいて最適画像選択手段２５は最適画像選択を行う（Ｓ４）。ここでは、後述の図４に示すように、細胞体が透明なため、細胞が背景より暗く写ってフォーカスが合う場所と、細胞が白く写ってフォーカスが合う場所の２個所に特徴量のピークが生じるため、解析に最適なコントラストの高い細胞が背景より暗く写ってフォーカスが合う点を最適画像として選択する。最後に、最適画像選択手段２５は最適画像を最適画像記憶部２６に格納する（Ｓ５）。
【００４２】
次に、図４を用いて最適画像選択方法について説明する。図４は、本発明の実施の形態１による細胞画像撮影方法における最適画像選択方法を説明する説明図である。
【００４３】
細胞と対物レンズ間の距離が変化した時の、特徴量変化には１つ以上のピークが生じる。細胞が透明体の場合は２つのピークが生じ、細胞とレンズ間の距離が短い位置のピークでは細胞が背景よりも暗く写ってフォーカスが合い（点Ｐ１）、細胞とレンズ間の距離が長い側のピークでは細胞が背景よりも明るく写る（点Ｐ２）。この時、細胞と対物レンズ間の距離が短い位置のピークを最適画像として選択することにより、画像解析に最適なコントラストの高いフォーカスが合った画像を選択することができる。
【００４４】
以上のように本実施の形態によれば、中央演算部１５は、画像撮影部５、１０で撮影した画像を周波数変換して周波数変換データを得る周波数変換手段２１と、周波数変換データに基づいて最適画像選択用特徴量を計算する最適画像選択用特徴量計算手段２３と、計算した最適画像選択用特徴量をもとに解析に最適な画像を選択する最適画像選択手段２５とを有することにより、計算した最適画像選択用特徴量をもとに細胞画像解析に最適な細胞画像を選択することができるので、細胞画像解析に最適な細胞画像を自動的に撮影することができる。
【００４５】
また、画像撮影部５、１０は、対物レンズ４もしくはステージ１をＺ軸方向に動かして、対物レンズ４と細胞との距離を変化させ、距離の変化に応じてカメラ５の外部シャッタ信号を出力し、Ｚ軸方向に一定の間隔で細胞の画像を撮影することにより、Ｚ軸方向に一定の間隔で撮影した細胞画像を周波数変換した周波数変換データに基づいて最適画像選択用特徴量を計算することができる。
【００４６】
さらに、最適画像選択用特徴量計算手段２３は、撮影画像を周波数変換して周波数成分を高周波側の周波数成分と直流成分を含む低周波側の周波数成分とに帯域分割し、少なくとも高周波側の周波数成分を用いて画像選択用特徴量を計算することにより、少なくとも高周波側の周波数成分を用いて画像選択用特徴量を簡易に計算して細胞画像解析に最適な細胞画像を選択することができる。
【００４７】
さらに、最適画像選択手段２５は、特徴量の変化における一つ以上のピークのうち、細胞部分が背景部分より暗く写るピーク位置の画像を最適画像として選択することにより、特徴量の変化における一つ以上のピークのうち、細胞部分が背景部分より暗く写るピーク位置の画像を最適画像として選択するので、透明体である細胞に対して画像解析に最適なコントラストの高い明視野画像を撮影することができる。
【００４８】
さらに、図３に記載の各工程を実行させるためのプログラムを用いれば、そのプログラムに基づいて汎用コンピュータを動作させて、図３に記載の各工程を任意の場所で任意の時間に実行させることができる。
【００４９】
さらに、コンピュータに図３に記載の各工程を実行させるためのプログラムを記録したコンピュータ読み取り可能な記録媒体を用いれば、汎用コンピュータは記録したプログラムを読み取って、図３に記載の各工程を任意の場所で任意の時間に実行することができる。
【００５０】
【発明の効果】
以上説明したように本発明の請求項１に記載の細胞画像撮影装置によれば、Ｚ軸方向に一定の間隔で細胞の画像を撮影する画像撮影部と、全体を制御する中央演算部とを有する細胞画像撮影装置であって、中央演算部は、画像撮影部で撮影した画像を周波数変換して周波数変換データを得る周波数変換手段と、周波数変換データに基づいて最適画像選択用特徴量を計算する最適画像選択用特徴量計算手段と、計算した最適画像選択用特徴量をもとに解析に最適な画像を選択する最適画像選択手段とを有することにより、計算した最適画像選択用特徴量をもとに細胞画像解析に最適な細胞画像を選択することができるので、細胞画像解析に最適な細胞画像を自動的に撮影することができるという有利な効果が得られる。
【００５１】
請求項２に記載の細胞画像撮影装置によれば、請求項１に記載の細胞画像撮影装置において、画像撮影部は、対物レンズもしくはステージをＺ軸方向に動かして、対物レンズと細胞との距離を変化させ、距離の変化に応じてカメラの外部シャッタ信号を出力し、Ｚ軸方向に一定の間隔で細胞の画像を撮影することにより、Ｚ軸方向に一定の間隔で撮影した細胞画像を周波数変換した周波数変換データに基づいて最適画像選択用特徴量を計算することができるという有利な効果が得られる。
【００５２】
請求項３に記載の細胞画像撮影装置によれば、請求項１またはに記載の細胞画像撮影装置において、最適画像選択用特徴量計算手段は、撮影画像を周波数変換して周波数成分を高周波側の周波数成分と直流成分を含む低周波側の周波数成分とに帯域分割し、少なくとも高周波側の周波数成分を用いて画像選択用特徴量を計算することにより、少なくとも高周波側の周波数成分を用いて画像選択用特徴量を簡易に計算して細胞画像解析に最適な細胞画像を選択することができるという有利な効果が得られる。
【００５３】
請求項４に記載の細胞画像撮影装置によれば、請求項１乃至３のいずれか１に記載の細胞画像撮影装置において、最適画像選択手段は、特徴量の変化における一つ以上のピークのうち、細胞部分が背景部分より暗く写るピーク位置の画像を最適画像として選択することにより、特徴量の変化における一つ以上のピークのうち、細胞部分が背景部分より暗く写るピーク位置の画像を最適画像として選択するので、透明体である細胞に対して画像解析に最適なコントラストの高い明視野画像を撮影することができるという有利な効果が得られる。
【００５４】
請求項５に記載の細胞画像撮影方法によれば、Ｚ軸方向に一定の間隔で細胞の画像を撮影する画像撮影工程と、撮影した画像を周波数変換して周波数変換データを得る周波数変換工程と、周波数変換データに基づいて最適画像選択用特徴量を計算する最適画像選択用特徴量計算工程と、計算した最適画像選択用特徴量をもとに解析に最適な画像を選択する最適画像選択工程とを含むことにより、計算した最適画像選択用特徴量をもとに細胞画像解析に最適な細胞画像を選択することができるので、細胞画像解析に最適な細胞画像を自動的に撮影することができるという有利な効果が得られる。
【００５５】
請求項６に記載の細胞画像撮影方法によれば、請求項５に記載の細胞画像撮影方法において、画像撮影工程においては、対物レンズもしくはステージをＺ軸方向に動かして、対物レンズと細胞との距離を変化させ、距離の変化に応じてカメラの外部シャッタ信号を出力し、Ｚ軸方向に一定の間隔で細胞の画像を撮影することにより、Ｚ軸方向に一定の間隔で撮影した細胞画像を周波数変換した周波数変換データに基づいて最適画像選択用特徴量を計算することができるという有利な効果が得られる。
【００５６】
請求項７に記載の細胞画像撮影方法によれば、請求項５または６に記載の細胞画像撮影方法において、最適画像選択用特徴量計算工程においては、撮影画像を周波数変換して周波数成分を高周波側の周波数成分と直流成分を含む低周波側の周波数成分とに帯域分割し、少なくとも高周波側の周波数成分を用いて画像選択用特徴量を計算することにより、少なくとも高周波側の周波数成分を用いて画像選択用特徴量を簡易に計算して細胞画像解析に最適な細胞画像を選択することができるという有利な効果が得られる。
【００５７】
請求項８に記載の細胞画像撮影方法によれば、請求項５乃至７のいずれか１に記載の細胞画像撮影方法において、最適画像選択工程においては、特徴量の変化における一つ以上のピークのうち、細胞部分が背景部分より暗く写るピーク位置の画像を最適画像として選択することにより、特徴量の変化における一つ以上のピークのうち、細胞部分が背景部分より暗く写るピーク位置の画像を最適画像として選択するので、透明体である細胞に対して画像解析に最適なコントラストの高い明視野画像を撮影することができるという有利な効果が得られる。
【００５８】
請求項９に記載のプログラムによれば、請求項５乃至８のいずれか１に記載の各工程を実行させるためのプログラムであることにより、プログラムに基づいて汎用コンピュータを動作させることにより、請求項５乃至８のいずれか１に記載の各工程を任意の場所で任意の時間に実行させることができるという有利な効果が得られる。
【００５９】
請求項１０に記載の記録媒体によれば、コンピュータに請求項５乃至８のいずれか１に記載の各工程を実行させるためのプログラムを記録したコンピュータ読み取り可能な記録媒体であることにより、汎用コンピュータは、記録したプログラムを読み取って、請求項５乃至８のいずれか１に記載の各工程を任意の場所で任意の時間に実行することができるという有利な効果が得られる。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の実施の形態１による細胞画像撮影装置を示すブロック図
【図２】図１の細胞画像撮影装置の主要部を示す機能ブロック図
【図３】本発明の実施の形態１による細胞画像撮影方法を示すフローチャート
【図４】本発明の実施の形態１による細胞画像撮影方法における最適画像選択方法を説明する説明図
【符号の説明】
１　ステージ
２　容器
３　試料
４　対物レンズ
５　カメラ
６　照明
１０　機構制御部
１１　画像記憶部
１２　第１の記憶部
１３　記憶媒体ドライブ
１４　記憶媒体
１５　中央演算部
１６　表示部
１７　第２の記憶部
１８　操作・入力部
１９　通信部
２０　撮影画像記憶部
２１　周波数変換手段
２２　周波数変換データ記憶部
２３　最適画像選択用特徴量計算手段
２４　最適画像選択用特徴量記憶部
２５　最適画像選択手段
２６　最適画像記憶部[0001]
TECHNICAL FIELD OF THE INVENTION
The present invention relates to a cell image photographing apparatus and a cell image photographing method for photographing a cell image optimal for analyzing animal and plant cell images in bright field observation, and a program and a recording medium for executing the cell image photographing method. is there.
[0002]
[Prior art]
In various tests in the field of biochemistry, cells and microorganisms of animals and plants are cultured under various conditions, and changes over time and the degree of growth are observed. When sequentially growing portions of projections, such as nerve cells, are to be observed, it is necessary to track them over time, observe and record them, and convert them into data. In the past, such work relied exclusively on humans, and the experimenter visually observed or imaged the cells within the field of view of the microscope, and focused on the observation target site such as neurites to determine the required data. Had to work to record it.
[0003]
[Problems to be solved by the invention]
In such work, the time required for visual observation and image capturing is a complicated work, which causes a reduction in the efficiency of the entire experimental work and also imposes an excessive workload on the experimenter. Had. Also, when taking a cell image for analysis, since the cells are transparent, the contrast of the cell image is low at the focal position of the cell, and an image suitable for cell image analysis cannot be obtained. Had.
[0004]
The cell image photographing apparatus, the cell image photographing method, the program and the recording medium are required to automatically photograph a cell image optimal for cell image analysis.
[0005]
The present invention satisfies this requirement by providing a cell image photographing apparatus capable of automatically photographing a cell image optimal for cell image analysis and a cell image for automatically photographing a cell image optimal for cell image analysis. An object of the present invention is to provide an imaging method, a program for executing the cell image imaging method, and a recording medium.
[0006]
[Means for Solving the Problems]
In order to solve the above problems, a cell image photographing apparatus of the present invention is a cell image photographing apparatus having an image photographing section for photographing cells at regular intervals in the Z-axis direction and a central processing section for controlling the whole. The central processing unit includes a frequency conversion unit that frequency-converts an image captured by the image capturing unit to obtain frequency conversion data, and an optimal image selection feature that calculates an optimal image selection feature based on the frequency change data. There is provided a configuration having an amount calculating means and an optimum image selecting means for selecting an image optimum for analysis based on the calculated optimum image selecting feature amount.
[0007]
Thus, a cell image photographing apparatus capable of automatically photographing a cell image optimal for cell image analysis is obtained.
[0008]
In order to solve the above-mentioned problem, a cell image photographing method of the present invention comprises: an image photographing step of photographing a cell image at a constant interval in a Z-axis direction; An optimal image selecting feature amount calculating step of calculating an optimal image selecting feature amount based on the frequency conversion data, and an optimal image selecting an optimal image for analysis based on the calculated optimal image selecting feature amount And a selecting step.
[0009]
Thereby, a cell image photographing method for automatically photographing a cell image optimal for cell image analysis is obtained.
[0010]
In order to solve the above problems, a program according to the present invention has a configuration that is a program for executing each step of the above-described cell image capturing method.
[0011]
As a result, a program for executing the above-described cell image capturing method is obtained.
[0012]
In order to solve the above-described problems, a recording medium of the present invention has a configuration that is a computer-readable recording medium in which a program for causing a computer to execute each step of the above-described cell image capturing method is recorded.
[0013]
Thereby, a recording medium for executing the above-described cell image photographing method is obtained.
[0014]
BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION
A cell image photographing apparatus according to claim 1 of the present invention is a cell image photographing apparatus having an image photographing section for photographing cells at regular intervals in the Z-axis direction, and a central processing section for controlling the whole. A central processing unit configured to perform frequency conversion on an image captured by the image capturing unit to obtain frequency conversion data; and an optimal image selection characteristic amount for calculating an optimal image selection characteristic amount based on the frequency conversion data. The present invention has a calculating means and an optimum image selecting means for selecting an optimum image for analysis based on the calculated optimum image selecting feature amount.
[0015]
With this configuration, it is possible to select the optimal cell image for the cell image analysis based on the calculated optimal image selection feature amount, so that the optimal cell image for the cell image analysis can be automatically taken. Has an action.
[0016]
According to a second aspect of the present invention, in the cell image capturing apparatus according to the first aspect, the image capturing unit changes a distance between the objective lens and the cell by moving the objective lens or the stage in the Z-axis direction. Then, an external shutter signal of the camera is output according to the change in distance, and images of cells are taken at regular intervals in the Z-axis direction.
[0017]
This configuration has an effect that the optimal image selection feature amount can be calculated based on frequency conversion data obtained by frequency-converting a cell image photographed at a constant interval in the Z-axis direction.
[0018]
A cell image photographing apparatus according to claim 3 is the cell image photographing apparatus according to claim 1 or 2, wherein the optimal image selecting feature amount calculating means performs frequency conversion on the photographed image to convert a frequency component into a frequency component on a high frequency side. And a frequency component on the low frequency side including a DC component is divided into bands, and the feature amount for image selection is calculated using at least the frequency component on the high frequency side.
[0019]
This configuration has an effect that the feature amount for image selection can be easily calculated using at least the frequency component on the high frequency side, and an optimal cell image for cell image analysis can be selected.
[0020]
The cell image photographing device according to claim 4 is the cell image photographing device according to any one of claims 1 to 3, wherein the optimal image selecting means is configured to select one or more peaks in the change in the characteristic amount. The image at the peak position where the portion appears darker than the background portion is selected as the optimum image.
[0021]
With this configuration, among the one or more peaks in the change in the feature amount, the image at the peak position where the cell portion is darker than the background portion is selected as the optimal image, so that the optimal image analysis is performed on the transparent cells. This has the effect that a bright field image with high contrast can be taken.
[0022]
A cell image photographing method according to claim 5, wherein an image photographing step of photographing a cell image at regular intervals in the Z-axis direction, a frequency transforming step of transforming the photographed image into frequency to obtain frequency transformed data, An optimal image selecting feature amount calculating step of calculating an optimal image selecting feature amount based on the converted data; and an optimal image selecting step of selecting an optimal image for analysis based on the calculated optimal image selecting feature amount. It is to be included.
[0023]
With this configuration, it is possible to select the optimal cell image for the cell image analysis based on the calculated optimal image selection feature amount, so that the optimal cell image for the cell image analysis can be automatically taken. Has an action.
[0024]
According to a sixth aspect of the present invention, in the cell image capturing method according to the fifth aspect, in the image capturing step, the distance between the objective lens and the cell is increased by moving the objective lens or the stage in the Z-axis direction. In this case, the external shutter signal of the camera is output in accordance with the change in the distance, and images of the cells are taken at regular intervals in the Z-axis direction.
[0025]
This configuration has an effect that the optimal image selection feature amount can be calculated based on frequency conversion data obtained by frequency-converting a cell image photographed at a constant interval in the Z-axis direction.
[0026]
A cell image photographing method according to claim 7 is the cell image photographing method according to claim 5 or 6, wherein in the optimal image selection feature amount calculating step, the photographed image is frequency-converted to change the frequency component on the high frequency side. The band is divided into a frequency component and a frequency component on the low frequency side including a DC component, and the feature quantity for image selection is calculated using at least the frequency component on the high frequency side.
[0027]
This configuration has an effect that the feature amount for image selection can be easily calculated using at least the frequency component on the high frequency side, and an optimal cell image for cell image analysis can be selected.
[0028]
The cell image photographing method according to claim 8 is the cell image photographing method according to any one of claims 5 to 7, wherein in the optimal image selecting step, one or more peaks in a change in the feature amount are selected. The image at the peak position where the cell portion appears darker than the background portion is selected as the optimal image.
[0029]
With this configuration, among the one or more peaks in the change in the feature amount, the image at the peak position where the cell portion is darker than the background portion is selected as the optimal image, so that the optimal image analysis is performed on the transparent cells. This has the effect that a bright field image with high contrast can be taken.
[0030]
According to a ninth aspect of the present invention, there is provided a program for executing each step of the fifth aspect.
[0031]
According to this configuration, by operating the general-purpose computer based on the program, there is an effect that each step according to any one of claims 5 to 8 can be executed at an arbitrary place and at an arbitrary time.
[0032]
A recording medium according to a tenth aspect is a computer-readable recording medium that records a program for causing a computer to execute the steps according to any one of the fifth to eighth aspects.
[0033]
With this configuration, the general-purpose computer reads the recorded program, and has an effect that each step described in any one of claims 5 to 8 can be executed at an arbitrary place and at an arbitrary time.
[0034]
Hereinafter, an embodiment of the present invention will be described with reference to FIGS.
[0035]
(Embodiment 1)
FIG. 1 is a block diagram showing a cell image photographing apparatus according to Embodiment 1 of the present invention.
[0036]
In FIG. 1, a container 2 which is a carrier for accommodating cells to be observed is placed on a stage 1. The container 2 is a transparent body that is visible from the outside, and contains a sample 3 containing cells of animals and plants to be photographed. An objective lens 4 is disposed below the stage 1, and a camera 5 is disposed below the objective lens 4. By illuminating the illumination device 6 disposed above the stage 1 and illuminating the container 2, the camera 5 captures an image of cells in the sample 3 in the container 2 by the camera 5 via the objective lens 4. 5 acquires digital image data of a cell image. The stage 1 and the objective lens 4 are connected to a mechanism control unit 10, and a desired position in the container 2 can be imaged by the camera 5 by controlling the stage 1 or the objective lens 4 by the mechanism control unit 10. . The camera 5 is connected to the image storage unit 11, and digital image data acquired by the camera 5 is stored in the image storage unit 11. The first storage unit 12 is a program storage unit, and stores programs for performing various arithmetic and operation control processes, such as a program for performing frequency conversion processing and a program for selecting an optimal image based on converted data. . The central processing unit 15 is a CPU, and performs various calculations and operation control according to a program stored in the first storage unit 12. The display unit 16 is a monitor device that displays an image acquired by the camera 5 and also displays a guidance screen for operation and input. The second storage unit 17 is a data storage unit that stores captured image data. The operation / input unit 18 is an input means such as a keyboard and a mouse, and performs operation command input and data input. The communication unit 19 exchanges data with an external device via a wired or wireless communication network. The storage medium drive 13 is a drive device that reads data from a portable storage medium 14 such as a magnetic disk such as a floppy disk or a memory card. The storage medium 14 stores captured image data, and can take out an image acquired by the cell image capturing apparatus.
[0037]
The schematic operation of the cell image photographing apparatus thus configured will be described with reference to FIG. FIG. 2 is a functional block diagram showing a main part of the cell image photographing apparatus of FIG.
[0038]
The central processing unit 15 in FIG. 1 operates according to the program stored in the first storage unit 12 to operate the frequency conversion unit 21, the optimal image selection feature amount calculation unit 23, and the optimal image selection unit 25 shown in FIG. This is a function realizing means to be realized. The photographed image storage unit 20, frequency conversion data storage unit 22, optimum image selection feature amount storage unit 24, and optimum image storage unit 26 indicate storage areas set in the second storage unit 17 shown in FIG. It is.
[0039]
In FIG. 2, a photographed image storage unit 20 stores data photographed by the camera 5 at regular intervals in the Z-axis direction. The stored data is first frequency-converted by the frequency conversion means 21 and stored in the frequency conversion data storage unit 22. The optimal image selecting feature amount calculating means 23 calculates an optimal image selecting feature amount using at least a high frequency component of the frequency conversion data stored in the frequency conversion data storage unit 22, and calculates the optimal image selecting feature amount. It is stored in the storage unit 24. The optimal image selecting means 25 determines an optimal image position from the characteristic amount data stored in the optimal image selecting characteristic amount storage unit 24, selects an image at the optimal image position from the captured image storage unit 20, and stores the optimal image position. The image is stored by the unit 26.
[0040]
FIG. 3 is a flowchart illustrating a cell image capturing method according to the first embodiment of the present invention.
[0041]
In FIG. 3, first, a container 2 containing a sample 3 containing cells to be photographed is placed on a stage 1, and the sample 3 is moved by a camera 5 while changing the distance between the objective lens 4 and the stage 1 in the Z-axis direction. An image is taken and image data at a constant interval on the Z axis is acquired and stored in the photographed image storage unit 20 (S1). Next, frequency conversion is performed on the image data by the frequency conversion unit 21 (S2). Thus, the image data is stored in the frequency conversion data storage unit 22 for each frequency band. This frequency conversion is repeated a predetermined number of times. That is, the data (DC component) in the low frequency space among the data stored in the frequency conversion data storage unit 22 after the frequency conversion processing is read by the frequency conversion unit 21 again, and the frequency conversion is performed again. Next, the optimal image selection feature amount calculation means 23 calculates an average value of absolute values of high frequency components equal to or more than a specific threshold among the high frequency components obtained by the frequency conversion as the optimal image selection feature amount (S3). . Here, the sum of the absolute values of the high-frequency components equal to or greater than the specific threshold may be calculated as the optimal image selection feature amount. These feature values are values that increase when the high-frequency components of the image are strong, and have a feature that they increase at the point where focus is achieved. Next, the optimal image selecting means 25 performs the optimal image selection based on the feature amount (S4). Here, as shown in FIG. 4 to be described later, since the cell body is transparent, the peaks of the feature amount appear at two places: a place where the cell is darker than the background and focused, and a place where the cell is white and focused. Therefore, a point at which a cell having a high contrast that is optimal for analysis appears darker than the background and is in focus is selected as an optimal image. Finally, the optimal image selecting unit 25 stores the optimal image in the optimal image storage unit 26 (S5).
[0042]
Next, an optimal image selecting method will be described with reference to FIG. FIG. 4 is an explanatory diagram illustrating an optimal image selecting method in the cell image capturing method according to the first embodiment of the present invention.
[0043]
When the distance between the cell and the objective lens changes, one or more peaks occur in the change in the feature value. When the cell is transparent, two peaks occur. At the peak where the distance between the cell and the lens is short, the cell is darker than the background and focused (point P1), and the distance between the cell and the lens is longer. At the peak, the cell appears brighter than the background (point P2). At this time, by selecting the peak at a position where the distance between the cell and the objective lens is short as the optimum image, it is possible to select an image that is in focus and has high contrast and is optimal for image analysis.
[0044]
As described above, according to the present embodiment, the central processing unit 15 performs the frequency conversion on the images captured by the image capturing units 5 and 10 to obtain frequency conversion data, and the frequency conversion unit 21 based on the frequency conversion data. By having an optimal image selecting feature amount calculating means 23 for calculating an optimal image selecting feature amount and an optimal image selecting means 25 for selecting an optimal image for analysis based on the calculated optimal image selecting feature amount. Since the optimal cell image for cell image analysis can be selected based on the calculated optimal image selection feature amount, the optimal cell image for cell image analysis can be automatically taken.
[0045]
The image photographing units 5 and 10 move the objective lens 4 or the stage 1 in the Z-axis direction to change the distance between the objective lens 4 and the cells, and output an external shutter signal of the camera 5 according to the change in the distance. Then, by photographing cell images at regular intervals in the Z-axis direction, the optimal image selection feature amount is calculated based on frequency conversion data obtained by frequency-transforming cell images photographed at regular intervals in the Z-axis direction. be able to.
[0046]
Further, the optimal image selection feature quantity calculating means 23 frequency-converts the photographed image and divides the frequency component into a high-frequency side frequency component and a low-frequency side frequency component including a DC component. By calculating the image selection feature using the components, it is possible to easily calculate the image selection feature using at least the high frequency side frequency component, and to select the optimal cell image for cell image analysis.
[0047]
Further, the optimal image selecting unit 25 selects, as the optimal image, an image at a peak position where the cell portion appears darker than the background portion among the one or more peaks in the change in the characteristic amount, thereby obtaining one of the peaks in the characteristic amount. Of the above peaks, the image at the peak position where the cell part is darker than the background part is selected as the optimal image, so it is possible to capture a high-contrast bright-field image that is optimal for image analysis for transparent cells. it can.
[0048]
Further, if a program for executing each step shown in FIG. 3 is used, a general-purpose computer is operated based on the program to execute each step shown in FIG. 3 at an arbitrary place and at an arbitrary time. Can be.
[0049]
Further, if a computer-readable recording medium on which a program for causing a computer to execute each step shown in FIG. 3 is recorded is used, a general-purpose computer reads the recorded program and executes each step shown in FIG. Can be run at any time in place.
[0050]
【The invention's effect】
As described above, according to the cell image photographing apparatus according to claim 1 of the present invention, an image photographing unit that photographs cells at regular intervals in the Z-axis direction and a central processing unit that controls the whole are A central processing unit, wherein the central processing unit frequency-converts the image captured by the image capturing unit to obtain frequency-converted data, and calculates an optimal image selection feature amount based on the frequency-converted data. The optimal image selecting feature amount calculating means, and the optimal image selecting means for selecting the optimal image for analysis based on the calculated optimal image selecting feature amount. Since an optimal cell image for cell image analysis can be originally selected, an advantageous effect that an optimal cell image for cell image analysis can be automatically taken can be obtained.
[0051]
According to the cell image photographing device according to claim 2, in the cell image photographing device according to claim 1, the image photographing unit moves the objective lens or the stage in the Z-axis direction to move a distance between the objective lens and the cell. And outputs an external shutter signal of the camera in accordance with the change in the distance, and images the cells at regular intervals in the Z-axis direction. The advantageous effect that the optimal image selection feature amount can be calculated based on the converted frequency conversion data is obtained.
[0052]
According to the cell image photographing apparatus of the third aspect, in the cell image photographing apparatus of the first or the second aspect, the optimal image selecting feature amount calculating means converts the frequency of the photographed image to the frequency component on the high frequency side. By dividing the frequency component into frequency components and frequency components on the low frequency side including a DC component, and calculating the image selection feature using at least the frequency components on the high frequency side, image selection using at least the frequency components on the high frequency side is performed. An advantageous effect is obtained in that it is possible to easily calculate a feature value for use and to select a cell image optimal for cell image analysis.
[0053]
According to the cell image photographing device according to claim 4, in the cell image photographing device according to any one of claims 1 to 3, the optimal image selecting means is configured to select one or more peaks in the change of the feature amount. By selecting the image at the peak position where the cell portion appears darker than the background portion as the optimal image, the image at the peak position where the cell portion appears darker than the background portion among the one or more peaks in the change in the feature amount is selected as the optimal image. As a result, an advantageous effect that a bright field image with high contrast that is optimal for image analysis can be captured for cells that are transparent bodies can be obtained.
[0054]
According to the cell image photographing method according to claim 5, an image photographing step of photographing a cell image at regular intervals in the Z-axis direction, and a frequency transforming step of transforming the photographed image into frequency to obtain frequency transformed data. An optimal image selecting feature amount calculating step of calculating an optimal image selecting feature amount based on the frequency conversion data, and an optimal image selecting step of selecting an optimal image for analysis based on the calculated optimal image selecting feature amount By including the above, the optimal cell image for cell image analysis can be selected based on the calculated optimal image selection feature amount, so that the optimal cell image for cell image analysis can be automatically taken. The advantageous effect that it can be obtained is obtained.
[0055]
According to the cell image photographing method of the sixth aspect, in the cell image photographing method of the fifth aspect, in the image photographing step, the objective lens or the stage is moved in the Z-axis direction to move the objective lens and the cell. By changing the distance, outputting an external shutter signal of the camera according to the change in the distance, and photographing the cell images at regular intervals in the Z-axis direction, the cell images photographed at regular intervals in the Z-axis direction can be obtained. The advantageous effect that the optimal image selection feature amount can be calculated based on the frequency-converted frequency conversion data is obtained.
[0056]
According to the cell image photographing method of the seventh aspect, in the cell image photographing method of the fifth or sixth aspect, in the optimal image selecting feature amount calculating step, the photographed image is frequency-converted to change the frequency component to a high frequency. By dividing the frequency band into low-frequency components including the direct-frequency component and the low-frequency component, and calculating the image selection feature using at least the high-frequency component, at least using the high-frequency component An advantageous effect is obtained in that the feature amount for image selection can be easily calculated and a cell image optimal for cell image analysis can be selected.
[0057]
According to the cell image photographing method according to the eighth aspect, in the cell image photographing method according to any one of the fifth to seventh aspects, in the optimal image selecting step, one or more peaks in a change in the feature amount are selected. By selecting the image at the peak position where the cell part appears darker than the background part as the optimal image, the image at the peak position where the cell part appears darker than the background part among the one or more peaks in the change in the feature amount is optimized. Since it is selected as an image, an advantageous effect that a bright field image with high contrast, which is optimal for image analysis, can be obtained for a transparent cell can be obtained.
[0058]
According to a ninth aspect of the present invention, a program for executing each of the steps according to any one of the fifth to eighth aspects is provided, so that a general-purpose computer is operated based on the program. There is an advantageous effect that each step described in any one of 5 to 8 can be executed at an arbitrary place and at an arbitrary time.
[0059]
According to the recording medium described in claim 10, a general-purpose computer is a computer-readable recording medium that records a program for causing a computer to execute each of the steps described in claim 5. Has an advantageous effect that the recorded program can be read and each step described in any one of claims 5 to 8 can be executed at an arbitrary place and at an arbitrary time.
[Brief description of the drawings]
FIG. 1 is a block diagram showing a cell image photographing apparatus according to a first embodiment of the present invention; FIG. 2 is a functional block diagram showing a main part of the cell image photographing apparatus of FIG. 1; FIG. FIG. 4 is a flowchart illustrating a cell image capturing method according to the present invention. FIG. 4 is an explanatory diagram illustrating an optimal image selecting method in the cell image capturing method according to the first embodiment of the present invention.
Reference Signs List 1 Stage 2 Container 3 Sample 4 Objective lens 5 Camera 6 Lighting 10 Mechanism control unit 11 Image storage unit 12 First storage unit 13 Storage medium drive 14 Storage medium 15 Central processing unit 16 Display unit 17 Second storage unit 18 Input unit 19 Communication unit 20 Captured image storage unit 21 Frequency conversion unit 22 Frequency conversion data storage unit 23 Optimum image selection feature amount calculation unit 24 Optimum image selection feature amount storage unit 25 Optimum image selection unit 26 Optimum image storage unit

Claims

A cell image capturing apparatus having an image capturing unit that captures images of cells at regular intervals in the Z-axis direction, and a central processing unit that controls the entire apparatus,
The central processing unit is a frequency conversion unit that frequency-converts an image captured by the image capturing unit to obtain frequency conversion data, and an optimal image selection feature that calculates an optimal image selection feature based on the frequency conversion data. A cell image photographing apparatus comprising: an amount calculating unit; and an optimal image selecting unit that selects an image optimal for analysis based on the calculated optimal image selecting feature amount.

The image photographing unit moves the objective lens or the stage in the Z-axis direction to change the distance between the objective lens and the cells, outputs an external shutter signal of the camera according to the change in the distance, and outputs a constant signal in the Z-axis direction. 2. The cell image photographing apparatus according to claim 1, wherein cells are photographed at intervals.

The feature amount calculating means for selecting an optimal image, frequency-converts the captured image and frequency-divides a frequency component into a high-frequency component and a low-frequency component including a DC component, and at least the high-frequency component. The cell image photographing apparatus according to claim 1, wherein the image selection feature amount is calculated using the following.

4. The image processing apparatus according to claim 1, wherein the optimal image selecting unit selects, as an optimal image, an image at a peak position where a cell portion is darker than a background portion, among one or more peaks in the change in the feature amount. 5. 2. The cell image photographing device according to item 1.

An image photographing step of photographing an image of a cell at regular intervals in the Z-axis direction, a frequency transforming step of transforming the photographed image into frequency to obtain frequency transform data, and a feature for selecting an optimal image based on the frequency transform data. A cell image photographing method, comprising: an optimal image selecting feature amount calculating step of calculating an amount; and an optimal image selecting step of selecting an optimal image for analysis based on the calculated optimal image selecting feature amount. Method.

In the image photographing step, the objective lens or the stage is moved in the Z-axis direction to change the distance between the objective lens and the cell, and an external shutter signal of the camera is output in accordance with the change in the distance, and is fixed in the Z-axis direction. The cell image photographing method according to claim 5, wherein the cell image is photographed at intervals of:

In the optimal image selection feature amount calculating step, the captured image is frequency-converted to divide frequency components into a high-frequency side frequency component and a low-frequency side frequency component including a DC component, and at least the high-frequency side frequency The cell image photographing method according to claim 5, wherein the image selection feature amount is calculated using the components.

8. The method according to claim 5, wherein, in the optimal image selecting step, an image at a peak position where a cell part is darker than a background part is selected as an optimal image among one or more peaks in a change in a feature amount. The cell image capturing method according to any one of claims 1 to 7.

A program for executing each of the steps according to claim 5.

A computer-readable recording medium on which a program for causing a computer to execute each of the steps according to claim 5 is recorded.