JP2003511087A - ニューロンの活性を調節する化合物を同定する方法 - Google Patents

ニューロンの活性を調節する化合物を同定する方法

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Abstract

(57)【要約】 Ｐ／Ｑ型イオンチャネルのカルボキシ末端に近位の特異的なアミノ酸配列は、ホーマータンパク質との結合を介して、シンタキシン−１Ａをコードする遺伝子の発現を媒介することが示された。Ｐ／Ｑ型カルシウムイオンチャネルのこの領域は、中枢神経系を調節する化合物のスクリーニングアッセイに使用し得るペプチドを提供する。スクリーニングアッセイにおけるこのペプチドの使用は、シナプス前領域において利用可能であるシンタキシン−１Ａのレベルを調節し、このようにして学習、記憶、および疼痛のような機能を調節するために使用され得る化合物の同定を可能にする。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】 （関連の出願の相互参照） 本願は、１９９９年１０月１３日に出願された仮出願６０／１５９，０９５号
（その内容を本明細書中で参照として援用する）から、米国特許法第１１９条（
ｅ）の下において優先権を主張する。
【０００２】 （技術分野） 本発明は、神経伝達および薬物探査の分野に関する。
【０００３】 （背景技術） 本明細書で参照として援用する米国特許第６，０９０，６３１号および同第５
，６２３，０５１号は、シンタキシン（ｓｙｎｔａｘｉｎ）およびＳＮＡＰ−２
５タンパク質と結合するＰ／Ｑ型カルシウムイオンチャネルおよびＮ型カルシウ
ムイオンチャネルの領域を記載する。これらの領域は、これらのチャネルのα1
サブユニットのドメインＩＩとドメインＩＩＩとの間に位置する。シンタキシン
およびＳＮＡＰ−２５は、神経伝達物質の放出に必要なシナプス前小胞のドッキ
ングを媒介するタンパク質である。これらの文書に記載されているように、これ
らのシンタキシン／ＳＮＡＰ−２５結合領域は、これらの領域が、シンタキシン
および／またはＳＮＡＰ−２５と結合するのをブロックし、このようにして神経
伝達を阻害する化合物をスクリーニングするために使用され得る。
【０００４】 神経ネットワークを通してのシグナル伝達を取り巻く条件は、様々な生理的応
答（疼痛の認知、学習、記憶などが挙げられる）にはっきりと影響を及ぼす。神
経伝達レベルの調節およびシナプス前部環境の条件の調節は、主に神経系内で生
理的に深い影響を有する。神経伝達に影響を及ぼす主要なカルシウムイオンチャ
ネルは、これらＮ型チャネルおよびＰ／Ｑ型チャネルである。Ｐ／Ｑ型チャネル
は、中枢神経系（ＣＮＳ）のシナプス前終末に最も影響を及ぼし、一方、Ｎ型チ
ャネルは末梢神経系を支配するようである。従って、Ｐ／Ｑ型チャネルは、記憶
や疼痛のようなＣＮＳ機能に特に重要である。
【０００５】 一般的にカルシウムイオンチャネルは、α1サブユニットで構成されており、
α1サブユニットは、任意でさらなるサブユニットと会合するが、単独で機能し
得る。現在の用語によると、Ｎ型チャネルはα1Bサブユニットを含み、一方、Ｐ
／Ｑチャネルはα1Aサブユニットから構成される。
【０００６】 記憶、学習および疼痛を含む中枢神経系の機能に対してより強力な制御を可能
にするために、シナプス前部環境を制御し得る化合物を提供することは、明らか
に望ましい。本発明は、この制御のための機構を提供する。以下に示されるよう
に、α1Aサブユニットの特異的な領域は、Ｘｉａｏ，Ｂ．ら、Ｃｕｒ．Ｏｐｉｎ
ｉｏｎ ｉｎ Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．（２０００）１０：３７０−３７４、およ
びＴｕ，Ｊ．Ｃ．ら、Ｎｅｕｒｏｎ（１９９８）２１：７１７−７２６の論文に
記載されている、公知のホーマー（Ｈｏｍｅｒ）タンパク質と結合する配列を含
む。これらの論文中の開示は、本明細書中で参照として援用される。これらの論
文中に示されるように、このホーマータンパク質は、シグナル伝達および神経伝
達に重要な多数の標的と結合する。プロリンリッチであるコンセンサス配列もま
た記載されている。
【０００７】 （発明の開示） 本発明は、シンタキシン−１Ａをコードする遺伝子の発現を引き起こす現象の
カスケードを担うＰ／Ｑカルシウムイオンチャネルに特異的なペプチド領域の同
定に属する。従ってスクリーニングアッセイにおけるこのペプチドの使用は、シ
ナプス前領域において利用可能であるシンタキシン−１Ａのレベルを調節し、こ
のようにして学習、記憶、および疼痛のような機能を調節するために使用され得
る化合物の同定を可能にする。
【０００８】 本明細書中において本出願人の発見に従うと、Ｐ／Ｑイオンチャネルを通した
カルシウムの流れは、モデル細胞系で、および神経細胞中それ自身で、特異的に
シンタキシンをコードする遺伝子の発現をもたらす。現在、Ｐ／Ｑカルシウムイ
オンチャネルのＣ末端から約２００アミノ酸の、特異的な４個のアミノ酸配列は
、このチャネルが、細胞内カルシウムイオンの保持に影響を及ぼすことが公知の
タンパク質であるホーマーと相互作用するための部位であることが見出されてい
る。そしてこの相互作用は、Ｐ／Ｑカルシウムイオンチャネルが、シンタキシン
−１Ａをコードする遺伝子の発現をもたらす能力に、必須である。
【０００９】 従って、１つの局面において、本発明は、学習および記憶のような中枢神経系
の機能に影響を及ぼす化合物を同定する方法を指向し、その方法には、候補化合
物を、Ｐ／Ｑカルシウムイオンチャネルのカルボキシ末端に近位して存在するホ
ーマーに対する結合部位を含むペプチドと接触させる工程、およびこの化合物が
前記ペプチドと結合するかどうか決定する工程を包含する。このペプチドと結合
する化合物は中枢神経系（ＣＮＳ）の機能に影響を及ぼす化合物として同定され
る。このスクリーニングアッセイは、単にこの化合物の結合能を評価することに
よる簡単な様式で行い得る。より一般的には、このペプチドと結合することが既
知であるリガンドの結合を阻害するこの候補化合物の能力（ホーマーがそのよう
にして結合する能力を含む）が、この結合を評価するために使用され得る。
【００１０】 別の局面において、本発明は、さらなるアミノ酸に隣接している結合部位の配
列（代表的にはネイティブのイオンチャネル中の結合部位に隣接しているアミノ
酸）を含むペプチド、およびこの領域に免疫特異性である抗体に向けられる。他
の局面において、本発明は、そのように同定された化合物、およびこれらの化合
物を用いてＣＮＳの機能を調節する方法に向けられる。
【００１１】 （発明を実施する様式） 本出願人は、Ｐ／Ｑ型カルシウムイオンチャネルを選択的に通過するカルシウ
ムの流入が、小胞のドッキング、融合および神経伝達物質放出の媒介において中
心的な役割を果たしているシナプス前部のタンパク質であるシンタキシン−１Ａ
の発現を、活性化する要因となることを示す。出願人は、最初のカルシウムイオ
ンシグナルが、細胞内の貯蓄からのカルシウムイオンを通じて増幅され、ＣａＭ
Ｋ ＩＩ／ＩＶ、ＰＫＡ、およびＭＡＰＫＫを含む多くの補因子に依存するリン
酸化を経て作用することを証明している。シンタキシン−１Ａは、Ｐ／Ｑ型カル
シウムイオンチャネルと相互作用し、チャネルの有用性を減少させるので、シン
タキシン−１Ａをコードする遺伝子の発現は、活性依存性フィードバック経路に
より調節される。
【００１２】 出願人は、最初の細胞外カルシウムシグナルと、細胞内の貯蓄から放出される
カルシウムとの相互作用が、公知のタンパク質であるホーマーと、Ｐ／Ｑ型イオ
ンチャネルのＣ末端に近位の特異的なアミノ酸配列との結合により媒介されるこ
と、およびこの相互作用が、他の公知のカルシウムイオンチャネルと正反対にＰ
／Ｑα1Aサブユニットに特異的であることをここに示す。この結合部位の同定に
より、ＣＮＳ活性を調節する重要な化合物に対するスクリーニングツールとして
、この部位を含むペプチドの使用が可能となる。
【００１３】 そのようなスクリーニングアッセイを実施するための方法は、当該分野におい
て周知である。代表的には、標的のペプチドは、適当な宿主細胞中で組換えられ
て産生され、宿主細胞の表面に提示されるか、または固体支持体とカップリング
する。そのようなカップリングは、共有結合であり得るか、または非共有性の吸
着を通じて成され得る（例えば、ヒスチジンタグを提供し、そして生じる融合タ
ンパク質を金属キレートを介して固体支持体に結合することによる）。当該分野
で、このペプチドのアッセイ可能な形式を提供するための、広範な種々の方法が
公知である。実際、所望のペプチドが比較的短い場合、固体支持体上で直接合成
することが、このペプチドを提供する１つの便利な方法である。
【００１４】 結合に必要とされる特異的な部位は、４つのアミノ酸配列ＰＬＭＦである。し
かし、このアッセイを実用的および特異的にするために、このテトラペプチドの
Ｎ末端およびＣ末端の一方または両方に、付加的なアミノ酸配列を含むことが望
ましい。そのような付加的なアミノ酸配列の好ましい実施形態は、このネイティ
ブのイオンチャネルに存在する配列である。代表的には、必要とされるテトラペ
プチドの上流および／または下流の２０アミノ酸に広がる配列、より好ましくは
上流および／または下流の１５アミノ酸に広がる配列、または上流および／また
は下流の１０アミノ酸もしくは５アミノ酸もしくは２アミノ酸に広がる配列でさ
えも、採用される。
【００１５】 このテトラペプチド（テトラペプチド自体は太字かつ下線の活字を有する）を
含む配列は、以下のようである：
【００１６】
【化３】 。
【００１７】 この配列は、ヒトＰ／Ｑ型カルシウムチャネルをコードする対立遺伝子の１つ
に由来する。同様の配列が、他の哺乳動物種の対応するＰ／Ｑチャネルに含まれ
ること、およびこれらの種由来のペプチド、ならびに上記に示される配列の対立
遺伝子の変異体由来のペプチドが本発明の方法に用いられ得ることが、理解され
ている。一般的に、上記に示される配列由来の配列を含むペプチド（上記に示さ
れる配列と少なくとも９０％相同である、好ましくは９５％相同である、より好
ましくは９７％相同である、そしてより好ましくは９９％相同であるペプチド）
、またはその必要とされるテトラペプチドを含む程度の長さのそのフラグメント
を用いることが、好ましい。
【００１８】 一旦このペプチドが利用できるように、好ましくは細胞上または固体支持体上
に提示されれば、このアッセイを実施する方法は、当該分野で周知である。上記
のように、化合物は、それらに標識を提供することによるか、または例えば、ペ
プチド自体が標識されており、その標識によるシグナルの検出可能性が、結合状
態または非結合状態にあるペプチドにより影響を受ける同種のアッセイを用いる
ことにより、直接的に結合が評価され得る。あるいは、およびおそらくより便利
には、この結合は、この化合物がこのＰ／Ｑペプチドと結合することで公知のリ
ガンド、およびこのテトラペプチドのその特異性に必須の部分と結合することで
公知のリガンドの結合を阻害する能力により、評価され得る。このような「リガ
ンド」には、このエピトープに特異的な抗体（単鎖Ｆｖ領域、Ｆａｂフラグメン
トなどのような多様な形態の抗体を含む）、ネイティブのリガンドであるホーマ
ータンパク質、または、実際には、これまでにこの部位に結合することが決定さ
れたいかなる化合物も、含む。このような公知のリガンドの結合の阻害に関する
広範な種々の検出方法が公知である。代表的には、競合する公知のリガンドは標
識され、固体支持体（このペプチドがこのように支持されている場合）に結合し
た標識の減少により、そのような阻害の評価が提供される。標識として、蛍光標
識、色素標識、酵素標識、放射性同位元素標識などが挙げられ得る。繰り返すと
、同種のアッセイは便利であり得る。例えば、ペプチドおよび競合リガンドの両
方が標識を含む蛍光消光アッセイが公知である。本発明は、標的として用いるペ
プチドの性質に帰属し、このスクリーニングアッセイの特定の設計に帰属しない
。
【００１９】 このスクリーニングにより同定される化合物は、これらの化合物を投与された
被検体の神経経路におけるシグナル伝達の状態に、明らかに影響を及ぼす。この
被検体は、ラット、マウスおよびウサギのような、学習および記憶のパターンを
研究するために用いられる実験動物であり得る。この被検体はまた、記憶におけ
る障害を改変することが望まれるヒト被検体、または他のいくつかの生理的な障
害を緩和することが望まれるヒト被検体であり得る。そのような化合物の被検体
への投与は、標準的な手順により、そして本明細書中で参照として援用する、Ｒ
ｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ、最新
版（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．、Ｅａｓｔｏｎ、ＰＡ）中のよう
な処方物を用いる。従って、例えば、本発明の方法を用いて同定された化合物は
、特異的にＣＮＳベースの状態、または他の神経学的ベースの状態のマウスモデ
ルに投与され得、そしてこのモデルにおけるこのような化合物の効果は、この状
態に関連する機構を解明する。
【００２０】 本出願人は、以下に示すように、イオンチャネルＰ／Ｑのカルシウムイオン輸
送を介した、シンタキシン−１Ａの発現の上昇についての性質を本明細書中で実
証する： 初めに、ＨＥＫ２９３細胞中でのヒトα1A（Ｐ／Ｑ型）カルシウムチャネルの
一過性の発現は、負の定常状態の不活性化を引き起こすことが示され、これは次
にはシンタキシンとの対応する相互作用を示唆した。このことは、この定常状態
の不活性化を移動させるが、電流活性化の電圧依存性に影響を及ぼさない、ボツ
リヌス毒素Ｃ１とインキュベーションすることによって確認された。さらに、こ
れらの結果は、予想通り、アンチセンスシンタキシン構築物の存在により影響を
受けた。
【００２１】 さらに、シンタキシン−１Ａタンパク質の存在が、このα1AＰ／Ｑ型カルシウ
ムチャネルをトランスフェクトしたＨＥＫ２９３細胞中で検出されたが、シンタ
キシン−１Ａは、ＨＥＫ２９３細胞中で内因的に発現されなかったことが示され
た；シンタキシン−１Ａに対応するｍＲＮＡもまた検出されたが、この細胞がア
クチノマイシンＤ中でインキュベートされた場合、阻害された。シンタキシン−
１Ａはこれらの細胞中で産生される唯一のＳＮＡＲＥタンパク質であった；シン
タキシン１Ｂ、ＳＮＡＰ−２５、シナプトフィシン、ＶＡＭＰ、およびシナプト
タグミンは検出されなかった。
【００２２】 カルシウムイオンチャネルα2δまたはβ1Bサブユニットをトランスフェクト
したＨＥＫ２９３細胞中での、シンタキシン−１Ａの産生に対する証拠はなかっ
た。α1B（Ｎ型）；α1C（Ｌ型）；α1E（新規型）；およびα1Gならびにα11の
Ｔ型チャネルをトランスフェクトした細胞はまた、シンタキシン−１ＡのｍＲＮ
Ａの産生を引き起こさなかった。可能性は（シンタキシン−１Ａ産生を誘導する
際のＰ／Ｑ型チャネルの特異性）、適当なコントロールを用いることによって排
除された。
【００２３】 多様な選択されたＰ／Ｑ型チャネルのアンタゴニストの存在下で、シンタキシ
ン−１ＡのｍＲＮＡまたはタンパク質の産生は、検出されなかった。
【００２４】 トランスフェクトしたＨＥＫ２９３細胞中でのＰ／Ｑ型チャネルの存在が増大
した細胞内カルシウムイオン濃度を引き起こしたことが、確認された。１０ｎＭ
〜２μＭの濃度のイオノマイシン（これは非特異的に細胞内カルシウムイオン濃
度を増大させる）が、細胞内カルシウムイオン依存性活性化の別個の上限および
下限を規定した（５０ｎＭ〜２００ｎＭのレベルで最大の活性化が起こる）ので
、この細胞内の増大したカルシウムイオンイオン濃度がシンタキシン−１Ａの産
生を引き起こしたようである。
【００２５】 シンタキシン−１Ａ遺伝子の発現が、Ｐ／Ｑイオンチャネルによって媒介され
るカルシウムの流れにより特異的に誘導されることが確立されたので、出願人は
、細胞内カルシウム濃度を変化させる薬剤を用いて、引き続く伝達経路を解明し
た。未トランスフェクト細胞および、ＢＡＰＴＡ−ＡＭおよびＥＧＴＡ−ＡＭの
両方のα1Aトランスフェクト細胞中で、タプシカルギン（ｔｈａｐｓｉｇａｒｇ
ｉｎ）刺激のシンタキシン−１Ａ発現の適用は、カルシウム依存性のシンタキシ
ン−１Ａの誘導をブロックした。カフェインまたはカルバコールのいずれかは、
リアノジン感受性貯蔵およびＩＰ3感受性貯蔵からのカルシウム放出を急速に活
性化し、未トランスフェクト細胞でのシンタキシン−１ＡのｍＲＮＡレベルを刺
激した。これは、これらの貯蔵のいずれかからの放出をブロックする薬剤を用い
ることで阻害された。一般的に先行のデータは、別個のレベルのバジルα1A特異
的なカルシウム流入が、細胞内貯蔵からの二次的なカルシウム放出を介したシン
タキシン−１Ａの発現を誘導することを示唆している。α1Aトランスフェクト細
胞中のシンタキシン−１Ａの発現は、チロシンキナーゼ、カルモジュリン活性ま
たはＣａＭＫ ＩＩ／ＩＶもしくはＰＫＡ活性をブロックすることで公知の化合
物を用いて阻害され得た。ＰＫＡのアクチベーターは、α1Aトランスフェクショ
ンの非存在下でさえもシンタキシンｍＲＮＡを誘導した。プロテインキナーゼＣ
の活性化は、発現を誘導しなかった。伝達経路の一部はまた、トランスフェクト
したＨＥＫ細胞中でリン酸化ＣＲＥＢのレベルがアップレギュレートされること
が決定されたように、転写因子ＣＲＥＢを含み得る。
【００２６】 ＨＥＫ２９３トランスフェクト細胞における先行の結果は、ニューロンの内因
性Ｐ／Ｑ型チャネルと相関した。シンタキシン−１Ａは、小脳顆粒細胞において
基礎的に発現されるが、これは、カルシウムＰ／Ｑ型チャネルを特異的に阻害す
ることが公知のωアガトキシンＩＶＡにより阻害される。Ｎ型またはＬ型チャネ
ルのインヒビターは、カルシウム依存性のシンタキシン−１Ａの発現をブロック
しなかった。ωアガトキシンＩＶＡ中でタプシガルギンと共にインキュベートさ
れたこれらの小脳顆粒細胞の処理により、シンタキシン−１Ａの発現は回復した
。
【００２７】 シンタキシン−１Ａの発現は、貯蔵からのリアノジンのインヒビター（または
ＩＰ3のインヒビター）誘導カルシウム放出のインヒビター、ＣａＭキナーゼＩ
Ｉ／ＩＶのインヒビター、およびＰＫＡのインヒビターまたはＭＡＰＫＫを含む
ＨＥＫ２９３細胞中でシンタキシン−１Ａの発現を阻害したのと同じ薬剤によっ
て阻害された。
【００２８】 要約すると、Ｐ／Ｑ型の選択的なカルシウムの流入は、シンタキシン−１Ａの
発現を誘導するが、小胞の融合および神経伝達物質の放出に関連する他のＳＮＡ
ＲＥタンパク質の発現は誘導しない。それは堅固な空間的および時間的なカルシ
ウム依存性の制御下にあるようであり、細胞内カルシウムの貯蔵との関連により
明らかに媒介される。
【００２９】 さらに、出願人は、伝達経路における最初の重大な工程（これは、ホーマータ
ンパク質のＣ末端に近位のα1Aチャネルサブユニット中の特異的部位への結合で
ある）を同定した。この部位を含むペプチドの利用可能性により、神経経路を解
明する上で有用な化合物、および一般的にＣＮＳ（特に学習および記憶に関与す
るもの）の処置障害を含む、被検体のＣＮＳの調節をする上で有用な化合物の同
定を可能にする。
【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書
【提出日】平成１３年１２月１９日（２００１．１２．１９）
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００１
【補正方法】削除
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００５】 一般的にカルシウムイオンチャネルは、α1サブユニットで構成されており、
α1サブユニットは、任意でさらなるサブユニットと会合するが、単独で機能し
得る。 現在の用語によると、Ｎ型チャネルはα1Bサブユニットを含み、一方、Ｐ／Ｑ
チャネルはα1Aサブユニットから構成される。α1AサブユニットをコードするＤ
ＮＡ配列は、ＷＯ ９５ ０４８２２およびＺｈｕｃｈｅｎｋｏ，Ｏ．ら、（１
９９７）Ｎａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ １５：６２−６８に記載される。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ１２Ｎ 1/16 Ｃ１２Ｎ 1/19 ４Ｈ０４５ 1/19 1/21 1/21 Ｃ１２Ｐ 21/02 Ｃ 5/10 Ｇ０１Ｎ 33/15 Ｚ Ｃ１２Ｐ 21/02 33/50 Ｚ Ｇ０１Ｎ 33/15 33/53 Ｄ 33/50 Ｃ１２Ｎ 15/00 ＺＮＡＡ 33/53 5/00 Ａ Ｆターム(参考） 2G045 AA40 DA36 FB03 4B024 AA01 AA11 BA44 BA80 CA04 DA02 DA05 DA11 EA02 EA03 EA04 FA02 GA01 GA11 HA01 HA11 4B064 AG01 AG26 CA01 CA19 CA20 CC24 DA01 DA13 4B065 AA01X AA57X AA87X AA90Y AB01 AB02 BA01 BA08 CA24 CA25 CA44 CA46 4C084 AA17 NA14 ZA152 4H045 AA30 BA19 CA40 DA00 DA75 EA20 EA50 FA34 FA72 FA74

Claims (17)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 学習および記憶に影響を与える化合物を同定するための方法
    であって、該方法は、 候補化合物を、Ｐ／Ｑカルシウムイオンチャネルのカルボキシ末端に近接する
    ホーマー結合部位を含むペプチドと接触させる工程であって、該ペプチドが該カ
    ルボキシ末端に由来する４４アミノ酸までの配列および４４アミノ酸以下の配列
    を含む、工程；および 該化合物が該ペプチドと結合するか否かを決定する工程； （ここで、該ペプチドと結合する候補化合物は、学習または記憶に影響を与え
    る化合物として同定される） を包含する、方法。
  2. 【請求項２】 前記接触させる工程は、前記ペプチドと結合することが既知
    であるリガンドの存在下であり、そして、前記決定する工程は、前記候補化合物
    が該リガンドを置換する能力を評価する工程を包含する、請求項１に記載の方法
    。
  3. 【請求項３】 前記ペプチドがアミノ酸配列ＰＬＭＦを含む、請求項１に記
    載の方法。
  4. 【請求項４】 前記ＰＬＭＦ配列が、前記Ｐ／Ｑイオンチャネル中の該配列
    ＰＬＭＦの、２０アミノ酸まで上流および／または下流に隣接する、請求項３に
    記載の方法。
  5. 【請求項５】 前記ペプチドが、ペプチド 【化１】 またはＰＬＭＦを含むそのフラグメントと少なくとも９０％の相同性である、請
    求項１に記載の方法。
  6. 【請求項６】 請求項１に記載の方法に従って同定される、学習または記憶
    を調節する化合物。
  7. 【請求項７】 有効な量の請求項６に記載の化合物を含有する、学習または
    記憶を調節する薬学的組成物。
  8. 【請求項８】 Ｐ／Ｑカルシウムイオンチャネルのカルボキシ末端に近接す
    るホーマー結合部位を含むペプチドであって、該ペプチドは、該カルボキシ末端
    に由来する４４アミノ酸までの配列および４４アミノ酸以下の配列を含み、そし
    て配列ＰＬＭＦを含む、ペプチド。
  9. 【請求項９】 前記配列ＰＬＭＦは、哺乳動物のＰ／Ｑカルシウムイオンチ
    ャネル中の該配列ＰＬＭＦのすぐ上流および／またはすぐ下流の配列に対応する
    ２０アミノ酸までの配列が隣接する、請求項８に記載のペプチド。
  10. 【請求項１０】 前記ペプチドが、ペプチド 【化２】 またはＰＬＭＦを含むそのフラグメントと少なくとも９０％の相同性である、請
    求項８に記載のペプチド。
  11. 【請求項１１】 請求項９に記載のペプチドと特異的に免疫反応性の、抗体
    。
  12. 【請求項１２】 請求項１０に記載のペプチドと特異的に免疫反応性の、抗
    体。
  13. 【請求項１３】 Ｐ／Ｑカルシウムイオンチャネルのカルボキシ末端に近接
    するホーマー結合部位を含むペプチドのための発現系であって、該ペプチドは、
    該カルボキシ末端に由来する４４アミノ酸までの配列および４４アミノ酸以下の
    配列を含み、そして配列ＰＬＭＦを含み、該発現系は、発現をもたらす配列と作
    動可能に連結される、該ペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む、発現系
    。
  14. 【請求項１４】 請求項１３に記載の発現系を含む、細胞。
  15. 【請求項１５】 配列ＰＬＭＦを含むペプチドを生成するための方法であっ
    て、該ペプチドが生成する条件下で請求項１４に記載の細胞を培養する工程を包
    含する、方法。
  16. 【請求項１６】 請求項１５に記載の方法により獲得される、前記ペプチド
    を提示する細胞。
  17. 【請求項１７】 前記ペプチドが、該ペプチドのための発現系を含む、組換
    え細胞として提供される、請求項１に記載の方法。
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