JP2003116523A - Yeast isolated from cherry blossom, method for obtaining the same, and method for producing sake or other food and beverage using the same - Google Patents

Yeast isolated from cherry blossom, method for obtaining the same, and method for producing sake or other food and beverage using the same

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JP2003116523A
JP2003116523A JP2001316048A JP2001316048A JP2003116523A JP 2003116523 A JP2003116523 A JP 2003116523A JP 2001316048 A JP2001316048 A JP 2001316048A JP 2001316048 A JP2001316048 A JP 2001316048A JP 2003116523 A JP2003116523 A JP 2003116523A
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sake
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drink
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邦雄 山岡
Mitsuko Kato
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Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To produce Sake or other food and beverages with rich mellow flavor through isolating yeast presenting good characters for brewing Sake or the like from cherry blossoms. SOLUTION: The Sake or other food and beverages with rich fruity flavor better in balance than conventional products is produced by using a yeast strain belonging to the genus Saccharomyces cerevisiae isolated from cherry blossoms after isolating and selecting the strain. The Sake thus produced has a harmony between sweetness and acidity with delicate flavor, being high in commodity value as a unique Sake.

Description

【発明の詳細な説明】Detailed Description of the Invention

【0001】[0001]

【発明の属する技術分野】本発明は、桜の花から分離さ
れ、甘くフルーティーな香りを持つ清酒醸造用酵母及び
その取得方法並びに清酒その他の飲食品の製造方法に関
するものである。
TECHNICAL FIELD The present invention relates to a yeast for sake brewing which is separated from cherry blossoms and has a sweet and fruity fragrance, a method for obtaining the yeast, and a method for producing sake and other foods and drinks.

【0002】[0002]

【従来の技術】各種アルコール飲料は、各々要求される
性質が異なることからその製造に用いられる醸造用酵母
は、その製造するアルコール飲料に適したもの、例えば
清酒には清酒酵母、ビールにはビール酵母等が選択され
使用されている。近年、清酒の消費は長期低落傾向にあ
り、最も消費された1970年代の60% 程度にまで減少して
いるが、これは清酒の仕込み配合等が旧態依然であり、
消費者の嗜好の変化に十分に対応しきれていないこと
や、清酒の殆どのものが、既存の醸造協会系酵母を使用
して製造され、その個性が無くなっていること、さらに
は飲酒時のアルコール度数が他の酒類に比べて高いこと
などがその要因として考えられる。また、酵母を使用し
て得られる飲食品、特には発酵飲食品、例えば、ワイ
ン、ビール、清酒などのアルコール含有飲料、味噌、醤
油、酢などの発酵調味料、パンなどは、その使用される
酵母の産生する香気成分、例えば、エステル類やアルコ
ール類により、それらが有する香りの特性が決定され、
それにより発酵生産物の品質に大きな影響を与えている
と考えられている。したがって、それら香気成分を産生
する性状により、得られた製品の香気特性が大きく異な
ることとなり、得られた製品品質に大きく影響すること
となり、酵母を利用する産業にとって如何なる酵母を得
てそれを利用するかは重要な課題となっている。
BACKGROUND OF THE INVENTION Since various alcoholic beverages have different required properties, brewing yeasts used for their production are suitable for alcoholic beverages to be produced, such as sake yeast for sake and beer for beer. Yeast and the like are selected and used. In recent years, the consumption of sake has been declining for a long period of time, and it has decreased to about 60% of the most consumed sake in the 1970s, but this is due to the fact that the preparation mix of sake is still old,
Not being able to fully respond to changes in consumers' tastes, most of sake is produced using existing brewing association yeast, and its individuality is lost. It is considered that the alcohol content is higher than that of other alcoholic beverages. Further, foods and drinks obtained by using yeast, especially fermented foods and drinks, for example, alcohol-containing beverages such as wine, beer and sake, fermented seasonings such as miso, soy sauce, vinegar, bread and the like are used. Aroma components produced by yeast, for example, esters and alcohols determine the characteristics of the scent they have,
It is considered that this has a great influence on the quality of the fermentation product. Therefore, the aroma characteristics of the obtained product greatly differ depending on the property of producing those aroma components, which greatly affects the quality of the obtained product, and any yeast for the industry using yeast should be obtained and used. Whether to do it is an important issue.

【0003】[0003]

【発明が解決しようとする課題】したがって、現代的な
嗜好に適合した新たな清酒用酵母の開発が求められてい
る。また、そうした酵母は優れた香りや味の飲食品の製
造に有用と考えられる。例えば、日本酒の香りには、日
本酒らしい香り「基調香」と、「上立香」及び「含み
香」とがある。「上立香」は盃に鼻を近づけるとふわっ
と香る果実のような、そして花のような香を言い、吟醸
香が代表的なものである。「含み香」は、口の中に入れ
たとき口中に広がる落ちついた香で、揮発性の弱い成分
で構成されている。日本酒の香りの成分は300 種類近く
が報告されており、主な香り成分は上記したように高級
アルコール類、エステル類などの系統に分けられている
が、それら含まれる成分の微妙な調和の上により優れる
と評価される清酒が生まれている。最近では、食生活の
変化などに伴い、フルーティーな香りを持った飲食品、
特にはワイン、ビール、清酒などのアルコール含有飲
料、味噌、醤油、酢、漬物などの発酵調味料、パン、菓
子などが好まれている。特に、清酒などにおいて、さわ
やかな果物様の高貴で好ましい香りをもつアルコール含
有飲料、さらには食品材料などが好まれる傾向にあるの
で、こうした嗜好に適した酵母の開発が求められてい
る。
Therefore, there is a demand for the development of a new yeast for sake which meets modern tastes. Moreover, such yeasts are considered to be useful for producing foods and drinks having an excellent scent and taste. For example, the scents of sake include "basic scent", "upper scent", and "inclusive scent" that are typical of sake. "Uedachika" is a fragrance like a fruit and a flower, which is fluffy when you bring your nose close to the cup, and the ginjo scent is typical. The “inclusion scent” is a calm scent that spreads in the mouth when placed in the mouth, and is composed of a weakly volatile component. It has been reported that nearly 300 types of scent components of sake have been reported, and the main scent components are classified into higher alcohols, esters, etc. as described above. Sake that is evaluated as superior to is being born. Recently, along with changes in eating habits, food and drink with a fruity fragrance,
Especially, alcohol-containing beverages such as wine, beer and sake, fermented seasonings such as miso, soy sauce, vinegar and pickles, bread and confectionery are preferred. In particular, in sake and the like, alcohol-containing beverages having a noble and pleasant aroma such as refreshing fruits tend to be favored, and further food materials and the like tend to be favored, so that development of yeast suitable for such taste is required.

【0004】[0004]

【課題を解決するための手段】本発明者等は、鋭意研究
の結果、日本を代表する桜の花から清酒用酵母としても
利用でき且つ新規な特性を持つ酵母を分離することに成
功し、当該酵母を使用して清酒を製造することに成功
し、本発明をなすに至った。すなわち、本発明は、 〔1〕 桜の花の花びらより採取された酵母を、乳酸酸
性条件下の酵母培養培地を使用して、この培地上でアル
コール濃度を段階的に高めていって生育していく株を分
離し、この分離株を米糖化液を培地に使用して培養し、
生育旺盛で且つ高濃度のアルコールを生産する株を選択
することを特徴とする桜の花から分離した酵母の取得方
法; 〔2〕 上記〔1〕に記載の方法により桜の花の花びら
から分離された酵母から選択される有機酸の生成が少な
く且つ甘くフルーティーな香りを持つ清酒を醸造するこ
とができることを特徴とする桜の花から分離した酵母; 〔3〕 清酒醸造用酵母であることを特徴とする上記
〔2〕記載の酵母; 〔4〕 桜の花の花びらより単離され、米糖化液を使用
しての発酵において、生育旺盛で且つ高濃度のアルコー
ルを生産する清酒製造に適した酵母サッカロミセス セ
レビッシエ(Saccharomyces cerevisiae)〔独立行政法人
産業技術総合研究所 特許生物寄託センター(IPOD)受
託番号 FERM P-18560〕であることを特徴とする上記
〔2〕又は〔3〕記載の酵母;
Means for Solving the Problems As a result of earnest research, the present inventors have succeeded in separating a yeast, which can be used as sake yeast, from cherry blossoms representing Japan and have novel characteristics. Succeeding in producing sake using yeast, the present invention has been accomplished. That is, the present invention [1] grows yeast collected from the petals of cherry blossoms by using a yeast culture medium under lactic acid conditions and gradually increasing the alcohol concentration on this medium. Iku isolate is cultivated, the isolate is cultivated using rice saccharified solution as the medium,
A method for obtaining yeast isolated from cherry blossoms, which comprises selecting a strain that is vigorous and produces a high concentration of alcohol; [2] Isolated from petals of cherry blossoms by the method described in [1] above. Yeast isolated from cherry blossoms characterized by being able to brew sake with a sweet and fruity scent that produces less organic acids selected from yeast; [3] characterized by being yeast for sake brewing [4] The yeast described in [2] above. [4] A yeast Saccharomyces cerevisiae, which is isolated from the petals of cherry blossoms and is suitable for the production of sake, which produces a high-concentration alcohol in a fermentation process using a rice saccharified solution. (Saccharomyces cerevisiae) [Institute of Industrial Science and Technology, National Institute of Advanced Industrial Science and Technology, Patent Organism Depositary (IPOD) Deposit No. FERM P-18560] above [2] or [3] Yeast;

【0005】〔5〕 上記〔2〕〜〔4〕のいずれか一
に記載の酵母を用いて醸造することを特徴とする清酒の
製造方法; 〔6〕 上記〔2〕〜〔4〕のいずれか一に記載の酵母
を用いて発酵して得られたフルーティーな芳香をもつ飲
食品; 〔7〕 飲食品が、例えば、ビール、ワイン、サイダ
ー、清酒、老酒など、またアルコール発酵製品をさらに
蒸留して得られるウイスキー、ブランデー、焼酎などの
アルコール含有飲料、味噌、醤油、酢、漬物などの発酵
調味料、パン、酒饅頭、中華饅頭などの菓子製品などの
フルーティーな芳香をもつ発酵飲食品である上記〔6〕
記載の芳香をもつ飲食品; 〔8〕 フルーティーな芳香をもつアルコール含有飲料
が、清酒、果実酒又は雑種発酵酒である上記〔7〕記載
の芳香をもつ飲食品;
[5] A method for producing sake which comprises brewing with the yeast according to any one of [2] to [4] above; [6] Any of [2] to [4] above Foods and drinks having a fruity aroma obtained by fermentation using the yeast described in Kaichi; [7] Foods and drinks are, for example, beer, wine, cider, sake, old sake, and alcohol-fermented products are further distilled. Alcoholic beverages such as whiskey, brandy, shochu, fermented seasonings such as miso, soy sauce, vinegar and pickles, and fermented food and drink with fruity aroma such as confectionery products such as bread, sake buns and Chinese buns. Above [6]
Foods and drinks having the aroma described above; [8] Foods and drinks having the aroma described in [7] above, wherein the alcohol-containing beverage having a fruity aroma is sake, fruit sake or hybrid fermented sake;

〔9〕 酵母を、米又は小麦を原料として発酵させるも
のである上記〔8〕記載の芳香をもつ飲食品; 〔10〕 アルコール含有飲料が、フルーティーな芳香を
もつ清酒である上記〔8〕又は
[9] A food or drink having the aroma according to the above [8], which is obtained by fermenting yeast with rice or wheat as a raw material; [10] The above [8] or the alcohol-containing beverage is sake having a fruity aroma.

〔9〕記載の芳香をもつ
飲食品; 〔11〕 上記〔2〕〜〔4〕のいずれか一に記載の酵母
を用いて発酵することを特徴とするフルーティーな芳香
をもつ飲食品の製造方法;及び 〔12〕 飲食品が、果物様芳香をもつアルコール含有飲
料である上記〔11〕記載の芳香をもつ飲食品の製造方法
を提供する。
[9] A food or drink having an aroma; [11] A method for producing a food or drink having a fruity aroma, which comprises fermenting with the yeast according to any one of [2] to [4] above. And [12] A method for producing a food or drink having an aroma according to the above [11], wherein the food or drink is an alcohol-containing beverage having a fruity aroma.

【0006】本発明のその他の目的、特徴、優秀性及び
その有する観点は、以下の記載より当業者にとっては明
白であろう。しかしながら、以下の記載及び具体的な実
施例等の記載を含めた本件明細書の記載は本発明の好ま
しい態様を示すものであり、説明のためにのみ示されて
いるものであることを理解されたい。本明細書に開示し
た本発明の意図及び範囲内で、種々の変化及び/又は改
変(あるいは修飾)をなすことは、以下の記載及び本明
細書のその他の部分からの知識により、当業者には容易
に明らかであろう。本明細書で引用されている全ての文
献は、説明の目的で引用されているもので、それらは本
明細書の一部としてその内容はここに含めて解釈される
べきものである。
Other objects, features, excellences, and aspects possessed by the present invention will be apparent to those skilled in the art from the following description. However, it is understood that the description of the present specification, including the description below and the description of specific examples and the like, shows the preferred embodiments of the present invention and is provided only for the purpose of explanation. I want to. Various changes and / or alterations (or modifications) within the spirit and scope of the invention disclosed herein can be made by those of ordinary skill in the art based on knowledge from the following description and other portions of the specification. Would be readily apparent. All references cited herein are incorporated by reference for the purpose of explanation and are to be construed as part of this specification, the contents of which are hereby incorporated.

【0007】[0007]

【発明の実施の形態】自然界の花にはそれぞれ酵母が付
着していることが知られている。そこで、日本を代表す
る花「桜」を対象として、桜の花から清酒醸造に適した
酵母を分離することを行った。先ず、それぞれの桜の木
から1本あたり5〜6輪の花を採取する。桜の花に付着
する酵母は、次に培養プレート上で培養を繰り返す。培
地には、乳酸を添加して酸性条件とし、より高いアルコ
ール濃度を与えるものを選別する。徐々により高いアル
コール濃度を与えるものを分離することができた。例え
ば、山口県宇部市阿知須町の桜の木(ソメイヨシノ)の
花びらから分離され、「やまぐち・桜酵母」と命名され
た酵母では、花から採取されてから一年目の培養では、
アルコール濃度は1〜2%と低かったが、二年目では、
アルコール濃度は5%から徐々にその濃度が上がり、10
%の濃度で生育するようになった。桜の花から該酵母を
分離するにあたっては、乳酸酸性下の培地を使用して、
アルコール濃度を段階的に高めていることなどをする必
要があった。
BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION It is known that yeasts are attached to natural flowers. Therefore, we targeted yeast "Sakura", which represents Japan, and isolated yeast suitable for sake brewing from cherry blossoms. First, 5 to 6 flowers are collected from each cherry tree. The yeast adhering to the cherry blossoms is then repeatedly cultured on the culture plate. Lactic acid is added to the medium to make it acidic, and a medium that gives a higher alcohol concentration is selected. It was possible to separate those which gave progressively higher alcohol concentrations. For example, in a yeast isolated from the petals of a cherry tree (Some Yoshino cherry tree) in Achisu-cho, Ube City, Yamaguchi Prefecture, and named "Yamaguchi / Sakura Yeast", in the first year of culture after being collected from the flowers,
Alcohol concentration was as low as 1-2%, but in the second year,
Alcohol concentration gradually increases from 5% to 10
It began to grow at a concentration of%. In separating the yeast from the cherry blossoms, use a medium under lactic acid acidity,
It was necessary to increase the alcohol concentration in stages.

【0008】かくして、桜の花の花びらより採取された
酵母を、乳酸酸性条件下の酵母培養培地を使用して、こ
の培地上でアルコール濃度を段階的に高めていって生育
していく株を分離し、この分離株を米糖化液を培地に使
用して培養し、生育旺盛で且つ高濃度のアルコールを生
産する株を選択することにより、清酒醸造に適し且つ桜
の花より分離された酵母が得られる。得られた分離株を
清酒醸造用酵母として清酒を製造することにより、有機
酸の生成が少なく且つ甘くフルーティーな香りを持つ清
酒が得られる。ここに得られる酵母のうち、最も優れた
性状を有すると評価され、「やまぐち・桜酵母」と命名
された酵母は、 (1) 既存の清酒酵母に対して無害(キラー因子を持たな
い); (2) 発酵の至適温度は、15〜20℃であり、既存の清酒酵
母よりも高い; (3) アルコールの生成速度は、既存の清酒酵母とほぼ同
じ程度である; (4) 有機酸の生成が少ない; (5) 官能評価で発酵により甘くフルーティーな香りを生
産する; といった特性を示す菌株であり、優れた味わいを持つ清
酒を製造可能な菌株である。該酵母株は、米糖化液を使
用しての発酵において、生育旺盛で且つ高濃度のアルコ
ールを生産する。
[0008] Thus, the yeast collected from the petals of cherry blossoms is separated using a yeast culture medium under lactic acid acid conditions, and a strain that grows by gradually increasing the alcohol concentration on this medium is isolated. Then, by culturing this isolate using rice saccharified solution as a medium, and selecting a strain that grows vigorously and produces a high concentration of alcohol, yeast suitable for sake brewing and isolated from cherry blossoms can be obtained. To be By using the obtained isolate as a yeast for sake brewing to produce sake, it is possible to obtain sake having a small amount of organic acids and a sweet and fruity aroma. Among the yeasts obtained here, the yeast that is evaluated as having the most excellent properties and named "Yamaguchi / Sakura yeast" is (1) harmless to existing sake yeasts (has no killer factor); (2) The optimum temperature for fermentation is 15 to 20 ° C, which is higher than that of existing sake yeast; (3) The production rate of alcohol is almost the same as that of existing sake yeast; (4) Organic acid Is produced; (5) A sweet and fruity aroma is produced by fermentation by sensory evaluation; and a strain capable of producing sake having an excellent taste. The yeast strain produces a vigorous and high-concentration alcohol during fermentation using a saccharified liquid of rice.

【0009】本発明により提供される、桜の花から分離
した新規微生物は、下述するサッカロミセス セレビッ
シエ(Saccharomyces cerevisiae)に属する菌株である。
即ち、(i) 古川、秋山の方法(古川敏郎、秋山裕一:農
化, 37, 398(1963))に従ってTTC 染色性試験、即ち菌体
を適当に希釈し(1プレートに約200 程度となるよ
う)、TTC 下層培地に30℃で2日間プレート培養したコ
ロニー上へ、TTC 寒天を溶解後45℃程度にしてから静か
に重層し、固まった後30℃に2〜3時間放置し、コロニ
ーの染色性を観察したとき、ピンク色を示し、且つ(ii)
溝口、藤田の方法(溝口晴彦、藤田栄信:醗工, 59, 18
5(1981))に従ってD.C.染色性試験、すなわち菌体を適当
に希釈し(1プレートに約200 程度となるよう)、TTC
下層培地に30℃で2日間プレート培養したコロニー上
へ、上層用軟寒天を溶解後45℃程度にしてから静かに重
層し、固まった後室温に30分放置し、コロニーの染色を
観察したとき、白色を示すことにより識別され、さらに
遺伝子解析により「やまぐち・桜酵母」の同定を行い、
28 rRNA 遺伝子 (rDNA) D1/D2 領域塩基配列を決定し、
両者相互の比較 DNAデータベース (GenBankTM) での相
同性検索を行った結果、当該さくら酵母の帰属分類群
が、サッカロミセス セレビッシエであった。これらの
解析から、サッカロミセス セレビッシエに属する新菌
株である。
The novel microorganism isolated from cherry blossoms provided by the present invention is a strain belonging to Saccharomyces cerevisiae described below.
That is, (i) TTC staining test according to the method of Furukawa and Akiyama (Toshiro Furukawa, Yuichi Akiyama: Agricultural Chemistry, 37, 398 (1963)), that is, the cells were diluted appropriately (about 200 per plate) ), TTC agar was thawed for 2 days at 30 ° C on a colony, and TTC agar was thawed to about 45 ° C and then gently layered. When the dyeability is observed, it shows a pink color, and (ii)
The method of Mizoguchi and Fujita (Haruhiko Mizoguchi, Eibu Fujita: Ogaku, 59, 18
5 (1981)) DC staining test, that is, the cells are diluted appropriately (so that about 200 per plate), and TTC
When the upper layer of soft agar was thawed to about 45 ° C and gently layered on the colonies that had been plate-cultured in the lower layer medium at 30 ° C for 2 days, and allowed to stand for 30 minutes at room temperature after observing the colony staining , Identified by showing white color, and further identified "Yamaguchi / Sakura yeast" by genetic analysis.
28 Determine the rRNA gene (rDNA) D1 / D2 region nucleotide sequence,
As a result of a homology search in the comparative DNA database (GenBank ™), the taxonomic group to which the sakura yeast belongs was Saccharomyces cerevisiae. From these analyzes, it is a new strain belonging to Saccharomyces cerevisiae.

【0010】該「やまぐち・桜酵母」と命名された酵母
は、醸造用酵母(サッカロミセスセレビッシエ)であっ
て下記の菌学的性質を有する菌株、すなわち (a) YM培地を用い、30℃で2日間培養したときの菌の形
態: (1) 栄養細胞の大きさ:4〜8μm (2) 栄養細胞の形状:卵型 (3) 増殖の形態:出芽 (b) YM寒天培地を用い、30℃で2日間培養したときのコ
ロニーの形態: (1) 形態:円 (2) 隆起:凸円状 (3) 周縁:円滑 (4) 大きさ(直径):2〜3mm (5) 色調:白色で不透明 (6) 表面:円滑で光沢あり (c) 炭素源資化性:グルコース、ガラクトース、シュク
ロース、D-マルトース、トレハロース、ラフィノース、
イヌリン、マンノース、エタノール、乳酸、フラクトー
ス及びアラビノースは資化する,セロビオース、ラクト
ース、メリビオース、メレヂトース、スターチ、α−メ
チルグルコシド、D-キシロース、D-リボース、L-ラムノ
ース、グリセロール、メソ−エリスリトール、D-ソルビ
トール、D-マンニトール、サリシン、コハク酸、クエン
酸及びイノシトールは資化しない, (d) ビタミン要求性:パントテン酸カルシウム及びビオ
チンについては要求性があるが、ピリドキシン、イノシ
トール、チアミンについては要求性がない, (e) 耐塩性:18%の塩化ナトリウムを含む2%YPD 寒天
培地において成育可能である。
The yeast named "Yamaguchi / Sakura Yeast" is a brewing yeast (Saccharomyces cerevisiae) having the following mycological properties, that is, (a) YM medium at 30 ° C. Morphology of the bacteria after culturing for 2 days at: (1) Size of vegetative cells: 4-8 μm (2) Shape of vegetative cells: Egg type (3) Morphology of growth: Budding (b) Using YM agar medium, Morphology of colonies after culturing at 30 ° C for 2 days: (1) Morphology: circle (2) ridge: convex circle (3) rim: smooth (4) size (diameter): 2-3 mm (5) color: White and opaque (6) Surface: Smooth and glossy (c) Carbon source utilization: glucose, galactose, sucrose, D-maltose, trehalose, raffinose,
Inulin, mannose, ethanol, lactic acid, fructose and arabinose are assimilated, cellobiose, lactose, melibiose, melezitose, starch, α-methylglucoside, D-xylose, D-ribose, L-rhamnose, glycerol, meso-erythritol, D -Sorbitol, D-mannitol, salicin, succinic acid, citric acid and inositol are not assimilated, (d) Vitamin requirement: Requirement for calcium pantothenate and biotin, but requirement for pyridoxine, inositol and thiamine (E) Salt tolerance: It can grow on 2% YPD agar medium containing 18% sodium chloride.

【0011】本発明の酵母の培地としては、炭素源、窒
素源、無機イオン、さらに必要に応じ有機微量栄養素を
含有する通常の培地が使用できる。炭素源としては、資
化可能な炭素化合物またはこれを含有するものであれば
よく、例えば、グルコース、ガラクトース、フラクトー
ス、マンノース、シュクロース、デンプン加水分解物、
果汁、セルロース分解物などの炭水化物が良好に用いら
れる。窒素源としては、資化可能な窒素化合物またはこ
れを含有するものであればよく、例えば、硫安、カザミ
ノ酸、ペプトンなどが使用される。また、リン酸、鉄、
カリウム、マグネシウム、亜鉛、マンガン、銅、カルシ
ウムなどの無機塩類を適宜使用することができる。さら
に必要に応じ菌の生育に必要なアミノ酸、ビオチン、リ
ボフラビン、ピリドキシン、ニコチン酸、パントテン
酸、葉酸、チアミンなどのビタミン類などを培地に添加
して用いることができる。例えば、麦芽汁培地、麦芽汁
寒天培地、YM寒天培地(酵母エキス、麦芽エキス、ペプ
トン、グルコース、寒天、蒸留水、pH 5〜6)、PGY 培地
(酵母エキス、ペプトン、グルコース、蒸留水、pH 5〜
6)、V-8 ジュース培地(V-8 ジュース、圧搾パン酵母、
KOH 、寒天、蒸留水)、ゴロドワ(Gorodkowa) 寒天培地
(グルコース、ペプトン、NaCl、寒天、蒸留水)などが
挙げられる。
As the yeast culture medium of the present invention, an ordinary culture medium containing a carbon source, a nitrogen source, inorganic ions and, if necessary, an organic micronutrient can be used. The carbon source may be any assimilable carbon compound or one containing the same, for example, glucose, galactose, fructose, mannose, sucrose, starch hydrolyzate,
Carbohydrates such as fruit juice and cellulose decomposition products are preferably used. The nitrogen source may be any assimilable nitrogen compound or one containing it, and for example, ammonium sulfate, casamino acid, peptone, etc. are used. Also, phosphoric acid, iron,
Inorganic salts such as potassium, magnesium, zinc, manganese, copper and calcium can be appropriately used. Furthermore, if necessary, amino acids necessary for the growth of the bacterium, vitamins such as biotin, riboflavin, pyridoxine, nicotinic acid, pantothenic acid, folic acid, thiamine and the like can be added to the medium and used. For example, wort medium, wort agar medium, YM agar medium (yeast extract, malt extract, peptone, glucose, agar, distilled water, pH 5-6), PGY medium (yeast extract, peptone, glucose, distilled water, pH Five~
6), V-8 juice medium (V-8 juice, pressed baker's yeast,
KOH, agar, distilled water), Gorodkowa agar medium (glucose, peptone, NaCl, agar, distilled water) and the like.

【0012】特に好適な培地は、酵母エキス、ポリペプ
トン、グルコースなどよりなる培地が挙げられる。ま
た、培地中に、乳酸を添加して、本酵母を優先的に保持
しておくことも好ましい。この場合乳酸は、培地中に、
例えば1 μg/ml〜250 mg/ml 、好ましくは200 μg/ml〜
50 mg/ml添加しておくことができる。培養は、温度10〜
40℃、好ましくは15〜37℃で、pH3.0 〜7.0 、好ましく
は3.5 〜6.0 で行われる。酵母の培養は、震盪培養、通
気培養、攪拌培養、静置培養などの好気的、嫌気的培養
など適宜好ましい方法を選択して行うことができる。
[0012] A particularly preferable medium is a medium consisting of yeast extract, polypeptone, glucose and the like. It is also preferable to add lactic acid to the medium to preferentially retain the yeast. In this case, lactic acid is added to the medium
For example, 1 μg / ml to 250 mg / ml, preferably 200 μg / ml to
50 mg / ml can be added. Culture temperature is 10 ~
It is carried out at 40 [deg.] C., preferably 15-37 [deg.] C., pH 3.0-7.0, preferably 3.5-6.0. The yeast can be cultivated by appropriately selecting a preferable method such as aerobic or anaerobic culturing such as shaking culturing, aeration culturing, stirring culturing, and static culturing.

【0013】本発明の酵母を用いてフルーティーな芳香
を持つ清酒などのアルコール含有飲料を製造する場合、
酵母は予め前培養しておくことが好ましい。例えば、寒
天斜面培地などに保持されている酵母は、適当な液体栄
養培地で静置培養され、それを酵母源とされることがで
きる。清酒製造などでは、例えばもろみの約7%にあた
る米と麹を用い酒母の製造がなされる。発酵の原料とし
ては、糖質を含有するもの、セルロース質あるいはデン
プン質のもの、例えば、サトウキビやこれから採った糖
蜜、サツマイモ、ジャガイモ、トウモロコシ、キャサ
バ、テンサイなど、果物あるいは野菜の汁、例えば、麦
芽汁、ブドウ、リンゴ、マルメロ、グレープフルーツ、
オレンジ、ミカンなどの柑橘類、カリン、ナシ、西洋ナ
シ、ビワ、アンズ、ウメ、カキ、サクランボ、スモモ、
ナツメ、モモ、ネクタリン、イチジク、キイチゴ、グ
ミ、ザクロ、キウイフルーツ、マンゴー、バナナ、パイ
ンアップル、パパイヤ、グアバ、ヤシなどの果汁、穀
物、例えば、米、小麦などから調整されたもろみなど、
小麦粉を主として含むもの、例えば、パン生地、菓子パ
ン生地、饅頭生地などが挙げられる。穀物、例えば、
米、小麦など、ジャガイモ、サツマイモなどのイモ類な
どに含まれるセルロース質あるいはデンプン質のものを
利用する場合、それらセルロース質あるいはデンプン質
のものを予め発酵可能な糖類に変換しておくことが好ま
しい。清酒用のもろみは特に好ましく用いられる。
When an alcohol-containing beverage such as sake having a fruity aroma is produced using the yeast of the present invention,
The yeast is preferably pre-cultured in advance. For example, yeast retained in an agar slant medium or the like can be statically cultured in a suitable liquid nutrient medium and used as a yeast source. In sake brewing, for example, rice liquor, which is about 7% of moromi, and koji are used to produce a sake mother. Raw materials for fermentation include those containing sugar, those of cellulose or starch, such as sugar cane and molasses obtained therefrom, sweet potato, corn, cassava, sugar beet, etc., fruit or vegetable juices, such as malt. Juice, grape, apple, quince, grapefruit,
Oranges, citrus fruits such as oranges, karin, pear, pear, loquat, apricot, plum, oyster, cherry, plum,
Juice, peach, nectarine, fig, raspberry, gummy, pomegranate, kiwi fruit, mango, banana, pineapple, papaya, guava, palm and other fruit juices, cereals such as rice and wheat mash, etc.,
Those mainly containing wheat flour, such as bread dough, confectionery bread dough, and bun dough, are mentioned. Grain, for example
When utilizing cellulosic or starchy substances contained in potatoes such as rice and wheat, potatoes, sweet potatoes and the like, it is preferable to convert those cellulosic or starchy substances into fermentable sugars in advance. . Moromi for sake is particularly preferably used.

【0014】アルコール含有飲料を製造する場合などで
は目的とする飲料の種類に応じ、酒税法及び酒税法施行
令や規則などの法令に定められた原料を用いることが好
ましい。例えば、清酒では、米、麦、ヒエ、アワ、トウ
モロコシ、コウリャン、キビ、及びこれらから得られる
糖質を用いることができる。糖質は酵母によりそのまま
発酵しうるが、デンプン質、セルロース質などのものは
まず液化酵素、糖化酵素などにより発酵可能な糖質に転
化された後、本酵母の作用を受け発酵せしめられる。こ
のような酵素源としては当該分野で公知のもののうちか
ら選択して用いることができ、例えば、麦芽、麹などに
含まれるもの、乳酸菌、糸状菌、例えば、アスペルギル
ス オリゼー(Aspergillus oryzae)などの麹生産菌など
が生産するもの、α−アミラーゼ、グルコアミラーゼ、
ジアスターゼ、セルラーゼ、プロテアーゼ、ラクターゼ
などの酵素などを挙げることができる。醸造は、所望製
品により異なるが、例えば、清酒では温度5 〜20℃、好
ましくは10〜20℃で行われる。
In the case of producing alcohol-containing beverages, it is preferable to use the raw materials stipulated by the liquor tax law and the liquor tax law enforcement ordinances and regulations according to the type of the intended beverage. For example, in sake, rice, wheat, millet, millet, corn, ginger, millet, and sugars obtained from these can be used. Although sugars can be fermented as they are by yeast, starches, cellulosics and the like are first converted into fermentable sugars by liquefying enzymes, saccharifying enzymes and the like and then fermented by the action of the yeast. Such an enzyme source can be selected from those known in the art and used, for example, malt, those contained in koji, lactic acid bacteria, filamentous fungi, for example, koji such as Aspergillus oryzae. What is produced by production bacteria, α-amylase, glucoamylase,
Enzymes such as diastase, cellulase, protease, lactase and the like can be mentioned. Brewing is carried out at a temperature of 5 to 20 ° C., preferably 10 to 20 ° C., for sake, for example, though it depends on the desired product.

【0015】例えば、清酒では、まずもろみの約7%に
あたる蒸米と麹を用い酵母の培養物たる酒母の製造がな
される。次に炭素源とする原料、水及び無機塩類を温度
管理のできるタンクに仕込み、酒母を添加して発酵を開
始する。一般に清酒、焼酎などの製造では、発酵の始め
に炭素源の一部を仕込み、発酵に伴い残りの炭素源を追
加していく段仕込みが行われる。もろみの製造は、清酒
では、おおよそ約15℃を中心に約10℃〜約18℃で管理さ
れるが、より低温で処理し香りを重視した方法を採るこ
ともできる。もろみの発酵は、約15日〜45日程度で終了
されるのが一般的である。焼酎製造では、清酒よりやや
高い温度で処理され、かつもろみの期間も短縮できる。
もろみは発酵が順調に進むように攪拌することもできる
し、その温度も各段階に応じて変化調整することができ
る。
For example, in sake, first, steamed rice, which is about 7% of moromi, and koji are used to produce a sake mother, which is a yeast culture. Next, the raw material to be used as a carbon source, water and inorganic salts are charged into a temperature-controllable tank, and liquor is added to start fermentation. Generally, in the production of sake, shochu, etc., a part of the carbon source is charged at the beginning of fermentation, and the remaining carbon source is added during fermentation. The production of moromi is controlled at about 10 ° C to about 18 ° C centering on about 15 ° C in sake, but it is also possible to adopt a method in which the moromi is treated at a lower temperature and the aroma is emphasized. Fermentation of moromi is generally completed in about 15 to 45 days. In the process of producing shochu, it is processed at a temperature slightly higher than that of sake, and the mashing period can be shortened.
The moromi can be stirred so that the fermentation proceeds smoothly, and its temperature can be adjusted by changing according to each stage.

【0016】清酒では、こうして得られたもろみは圧搾
濾過などにより酒粕と分離されて原酒となる。本発明の
酵母を用いて得られるフルーティーな芳香を持つアルコ
ール含有飲料としては、ビール、ワイン、サイダー、清
酒、老酒、紹興酒など、また発酵製品をさらに蒸留して
得られるウイスキー、ブランデー、焼酎、ジン、テキー
ラ、ウォッカ、その他の酒類などが挙げられる。特に好
ましいものとしては清酒が挙げられる。果実から得られ
る果汁、例えば、ブドウ果汁、ミカン果汁を利用すれ
ば、ワインが得られる。パンの製造には、酵母が用いら
れ、得られる製品の風味は使用する酵母の産生する香気
成分に大きな影響を受けている。パン生地は、小麦粉を
主な原料とし、食塩、油脂、水に、酵母を加えて形成さ
れる。必要に応じ、砂糖、脱脂粉乳、製パン用改良剤
(フード)、卵、その他調味剤などが配合されてよい。
In refined sake, the moromi obtained in this way is separated from sake lees by press filtration or the like to become raw liquor. Examples of the alcohol-containing beverage having a fruity aroma obtained by using the yeast of the present invention include beer, wine, cider, sake, old sake, Shaoxing sake, and whiskey obtained by further distilling a fermentation product, brandy, shochu, gin. , Tequila, vodka, and other alcoholic beverages. Particularly preferred is sake. Wine can be obtained by using fruit juice obtained from fruits, for example, grape juice or mandarin orange juice. Yeast is used for the production of bread, and the flavor of the resulting product is greatly affected by the aroma components produced by the yeast used. The bread dough is formed from wheat flour as a main raw material, and yeast is added to salt, fats and oils, and water. If necessary, sugar, skim milk powder, a bread improving agent (food), eggs, and other seasoning agents may be added.

【0017】代表的な製パン法としては、直捏法と中種
法が挙げられる。パン生地の配合例としては、例えば、
2kgの全小麦粉使用の場合の70%中種製パン法では、
小麦粉70重量%、酵母2.2 重量%、フード0.1 重量%及
び水43重量%を中種とし、約24℃で捏ね、次に小麦粉30
重量%、砂糖5重量%、食塩2重量%、油脂5重量%、
脱脂粉乳3重量%及び水28重量%の本捏とするなどが挙
げられる。この他、中華饅頭、酒饅頭などの和菓子、中
華料理材料の製造に利用できる。また調味料、発酵飲料
などの製品の風味はその使用する酵母の産生する香気成
分に大きな影響を受けている。焼肉のタレは、例えば、
薄口醤油20重量%、砂糖10重量%、味噌5重量%、白ゴ
マ0.5 重量%、水63.5重量%、そして酵母1重量%を含
むといった組成を有する。また、漬物、食酢、例えば、
米酢、リンゴ酢、ワインビネガーなど、ミリン製造など
にも応用できる。本発明の酵母を利用する際、酵母は固
定化して用いることもできる。酵母の固定化は、通常当
該分野で一般的に用いられている方法によることができ
るが、例えば、アルギン酸カルシウムゲル法(「バイオ
リアクターの応用技術、−固定化生体触媒の製法と利用
−」、19頁、シーエムシー発行、1986年)などが挙
げられる。
As a typical bread-making method, there are a direct kneading method and a medium seed method. As an example of the mix of bread dough, for example,
In the 70% medium bread making method using 2 kg of whole flour,
70% by weight of wheat flour, 2.2% by weight of yeast, 0.1% by weight of food and 43% by weight of water were kneaded as a medium seed and kneaded at about 24 ° C.
% By weight, sugar 5% by weight, salt 2% by weight, fats and oils 5% by weight,
For example, 3% by weight of skim milk powder and 28% by weight of water may be used as the main kneading. In addition, it can be used for producing Japanese sweets such as Chinese steamed buns and sake buns, and Chinese food ingredients. In addition, the flavor of products such as seasonings and fermented drinks is greatly affected by the aroma components produced by the yeast used. Sauce of yakiniku is, for example,
It has a composition containing 20% by weight of light soy sauce, 10% by weight of sugar, 5% by weight of miso, 0.5% by weight of white sesame, 63.5% by weight of water, and 1% by weight of yeast. Also, pickles, vinegar, for example,
It can be applied to rice vinegar, cider vinegar, wine vinegar, and other millin production. When using the yeast of the present invention, the yeast can be immobilized and used. Immobilization of yeast can be carried out by a method generally used in the art, for example, calcium alginate gel method (“application technology of bioreactor, -production method and utilization of immobilized biocatalyst-”, 19 pages, published by CMC, 1986).

【0018】[0018]

【実施例】以下に実施例を掲げ、本発明を具体的に説明
するが、この実施例は単に本発明の説明のため、その具
体的な態様の参考のために提供されているものである。
これらの例示は本発明の特定の具体的な態様を説明する
ためのものであるが、本願で開示する発明の範囲を限定
したり、あるいは制限することを表すものではない。本
発明では、本明細書の思想に基づく様々な実施形態が可
能であることは理解されるべきである。全ての実施例
は、他に詳細に記載するもの以外は、標準的な技術を用
いて実施したもの、又は実施することのできるものであ
り、これは当業者にとり周知で慣用的なものである。
EXAMPLES The present invention will be described in detail below with reference to examples, but these examples are provided merely for the purpose of explaining the present invention and for reference to specific modes thereof. .
These exemplifications are intended to illustrate certain specific embodiments of the invention, but are not meant to limit or limit the scope of the invention disclosed herein. It should be understood that the present invention is capable of various embodiments based on the ideas of the present specification. All examples, unless otherwise indicated in detail, are carried out or can be carried out using standard techniques, which are well known and routine to those skilled in the art. ..

【0019】実施例1:山口県内の桜の木(延べ50本)
の花びらを対象に、グルコースと麹を使用してそれを培
地とし、発酵を行った。アルコール生成量の多いものを
選択した。桜の花びらは一本の木当たり5〜6輪を摘ん
で使用した。花びらは滅菌水で洗ってそこに付着してい
る菌を採取する。採取された菌は、次にYPD 培地(酵母
エキス1%、ポリペプトン2%、グルコース2%)5ml
で30℃にて24時間培養した。菌体を遠心分離で集菌した
後、滅菌水で2回洗浄した。次いで、適宜希釈し、乳酸
(5 mg/ml) を含む YPM寒天平板培地(酵母エキス1%、
ポリペプトン2%、アルコール1%、寒天2%)に塗布
した。これを20℃で2日間培養し、生育の早い株を分
離した。この分離株は、次に、米糖化液(しょ糖度8
%)に植菌し、30℃で2日間培養後、10 ml の該培養液
をアルコール及び乳酸添加米糖化液(しょ糖度11.5%)
400 mlに加えた。これを20℃で7日間培養し、菌体を遠
心分離後、培養液のアルコール濃度及びエキス分を測定
し、アルコール生産性が優れた株の選択を行った。
Example 1: Cherry trees in Yamaguchi prefecture (50 trees in total)
Fermentation was carried out on petals of peach using glucose and koji as a medium. The one that produced a large amount of alcohol was selected. Cherry petals were used by picking 5 to 6 rings per tree. The petals are washed with sterile water to collect the bacteria attached to them. The collected bacteria were 5 ml of YPD medium (1% yeast extract, 2% polypeptone, 2% glucose).
The cells were cultured at 30 ° C for 24 hours. The cells were collected by centrifugation and washed twice with sterile water. Then, dilute appropriately and lactic acid
(5 mg / ml) containing YPM agar plate (1% yeast extract,
Polypeptone 2%, alcohol 1%, agar 2%). This was cultivated at 20 ° C. for 2 days to isolate a fast growing strain. This isolate was then transformed into rice saccharified liquid (sucrose content 8
%), And cultivated at 30 ° C for 2 days.
Added to 400 ml. This was cultured at 20 ° C. for 7 days, the bacterial cells were centrifuged, the alcohol concentration and extract content of the culture solution were measured, and a strain having excellent alcohol productivity was selected.

【0020】こうして得られた酵母株について発酵試験
を行い、発酵力及び産生香気成分の官能評価をした。先
ずYEPD培地に、桜の花から得られた酵母株を接種し、30
℃で24時間振とう培養した。こうして得られた前培養酵
母液3 mlを麹エキス・α−麹培地(ファルコンチューブ
入り麹エキス(Be 6.0) 20 ml及びα−麹8 g)に接種し、
30℃で10日間培養した。重量減少から発酵力の強いもの
を15株選抜した。発酵生成物を専門家パネラーによる官
能試験にかけた。官能試験の結果すべてフルーティーで
好ましい香気を持つとの評価を得たものを選抜した。こ
こに得られる酵母のうち、最も優れた性状を有すると評
価されたものを「やまぐち・桜酵母」と呼称する。この
株は、米糖化液に生育旺盛で高濃度にアルコール (17%)
を生産する。「やまぐち・桜酵母」株と各種協会酵母と
の培養液の分析値を表1に示す。
The yeast strain thus obtained was subjected to a fermentation test, and the fermentative power and the produced aroma components were sensory-evaluated. First, inoculate the YEPD medium with the yeast strain obtained from the cherry blossoms,
The cells were shake-cultured at ℃ for 24 hours. 3 ml of the thus obtained pre-cultured yeast solution was inoculated into a koji extract / α-koji medium (koji extract (Be 6.0) 20 ml and α-koji 8 g in a falcon tube),
It was cultured at 30 ° C for 10 days. Fifteen strains with strong fermentative power were selected because of their weight reduction. The fermentation product was subjected to a sensory test by an expert panel. Those which were evaluated as having a fruity and preferable aroma as a result of the sensory test were selected. Among the yeasts obtained here, the one evaluated to have the most excellent properties is referred to as "Yamaguchi / Sakura yeast". This strain grows vigorously in rice saccharified liquid and has a high concentration of alcohol (17%).
To produce. Table 1 shows the analytical values of the culture solutions of the "Yamaguchi / Sakura yeast" strain and the yeasts of various associations.

【0021】[0021]

【表1】 [Table 1]

【0022】この結果から明らかなように、桜の花から
分離された酵母「やまぐち・桜酵母」は他の酵母に比べ
て特に酢酸の生成が極端に少なく、このことは酸度が低
いことにも連動しており、清酒としてふくらみがあり、
甘く感じる要因である。清酒用酵母としてユニークなも
のであることが判る。
As is clear from these results, the yeast "Yamaguchi / Sakura yeast" isolated from the cherry blossoms produces extremely less acetic acid than other yeasts, which is linked to the low acidity. There is a bulge as sake,
It is a factor to feel sweet. It turns out that it is a unique yeast for sake.

【0023】実施例2:実施例1で分離選択されて得ら
れた「やまぐち・桜酵母」株及び市販清酒酵母株につい
て総米 200 gを用いての小仕込試験を行い、発酵力及び
産生する香気成分などを専門家パネラーによって官能評
価をした。この試験に用いた仕込配合を表2に示す。
Example 2: The "Yamaguchi / Sakura Yeast" strain and the commercially available sake yeast strain obtained by separation and selection in Example 1 were subjected to a small-volume test using 200 g of total rice to produce fermentative power and production. Sensory evaluation was conducted by expert panelists on aroma components and the like. Table 2 shows the charging composition used in this test.

【0024】[0024]

【表2】 [Table 2]

【0025】酒母には、ボーメ6の麹エキスに各酵母を
植菌し、30℃で2日間培養した培養液30 ml とした。こ
の分、汲水をつめる。この仕込配合のもと、10℃一定と
して20日間醸造した。重量の減少、アルコール、総酸
度、アミノ酸度と専門家パネラーによる官能評価の結果
を表3に示す。
For the mother of liquor, each yeast was inoculated into the koji extract of Baume 6 and cultured at 30 ° C. for 2 days to obtain 30 ml of a culture solution. Fill the pumped water for this amount. Brewing was carried out for 20 days at a constant temperature of 10 ° C. under this mixing composition. Table 3 shows the results of sensory evaluation by weight loss, alcohol, total acidity, amino acid content and expert panelists.

【0026】[0026]

【表3】 [Table 3]

【0027】清酒製造にあたっては、高温経過の発酵を
とり、仕込み水の使用量を増やすとよいなどの特性が認
められ、ほのかな香りの中に甘さと酸味が調和している
ものが得られるとの評価が得られた。
[0027] In the production of sake, it is recognized that it is preferable to take fermentation at a high temperature and increase the amount of water used, and it is possible to obtain a sweet scent and a sour taste in harmony. The evaluation was obtained.

【0028】実施例3:実施例1で分離選択されて得ら
れた「やまぐち・桜酵母」株につき仕込醸造試験を行っ
た。総米 100 kg を用いた。この仕込試験に用いた仕込
配合を表4に示す。
Example 3: A "brewing brewing test" was carried out on the "Yamaguchi / Sakura yeast" strains obtained by separation and selection in Example 1. 100 kg of total rice was used. Table 4 shows the preparation composition used in this preparation test.

【0029】[0029]

【表4】 [Table 4]

【0030】酒母歩合7%、麹歩合20%、汲水歩合135
%で、乳酸は汲水100 リットル当たり300 ml添加する。
醸造工程の概略を図1に示す。米は山口県産の新米で精
白は50%としたものを用いた。洗米は吟醸用洗米機を用
いて行った。洗米の手順は、先ずステンレスのザルに米
5キログラムを計量して入れ、水を張った半切れ中に浸
漬し、手で軽く攪拌する。90秒後水から上げて、洗米機
にかけ、20秒運転する。停止後続いて200 リットル/分
の水で掛け水し、再び20秒洗米機にかけ運転する。停止
後続いてさらに200 リットル/分の水で60秒掛け水した
後、目的の吸水率になるまで浸漬する。蒸しの工程は、
ホリケン社製の吟醸こしきG-100 型を用いて40分間蒸し
を行った。製麹は、麹室で箱麹法により行った。はぜ回
り3〜4割程度のつきはぜタイプのものとした。酒母
は、それぞれのタンクで温度制御のできる酒母タンクで
普通速醸、12日目使用とした。
Sake mother ratio 7%, Koji ratio 20%, Pumping water ratio 135
%, Add lactic acid 300 ml per 100 liters of pump water.
The outline of the brewing process is shown in FIG. The rice used was fresh rice from Yamaguchi Prefecture and the whitening was 50%. The rice was washed using a brewing machine for ginjo. To wash rice, first weigh 5 kg of rice in a stainless steel colander, immerse it in a water-filled half-slice, and stir it lightly by hand. After 90 seconds, remove from water, put on a rice washer and run for 20 seconds. After stopping, sprinkle with 200 liters / min of water and put it on the rice-washing machine for 20 seconds to operate again. After stopping, pour another 200 liters / min of water for 60 seconds and then soak until the desired water absorption is reached. The steaming process is
Steaming was carried out for 40 minutes using Ginjo Koshiki G-100 type manufactured by Horiken. The koji making was performed by the box koji method in the koji room. About 30 to 40% of the swirl around was a wrinkle type. The liquor mother was used for the 12th day, with normal brewing in the liquor mother tank whose temperature could be controlled in each tank.

【0031】仕込みは300 リットル容の温度制御醪タン
クで、初添え15℃、仲添え8℃、留添え6℃を目標に仕
込みを行った。後半は切れが鈍り、最終的に40日〜43日
の長期醪になった。上槽は、320 リットル容の油圧の自
動絞り機を用い、念入りに洗浄した酒袋を用い、1本の
醪を数回に分けて搾った。得られた清酒原酒について香
気成分などの分析を行った。ガスクロマトグラフィーは
島津製GC-14A、カラムはDB-WAX 0.32 mm×30 Mを用い、
カラム温度85℃、注入温度250 ℃、検出器はFID 、検出
温度250 ℃、キャリアガスHeで、30 ml/min.、スプリッ
ト比10:1の条件で行った。試料の調製は、10 ml 容ガラ
スバイアルに、試料の清酒を0.8 mlずつサンプリング
し、内部標準液を0.1 ml加えた後、セプタムを穴あきア
ルミキャップで密栓し、50℃で30分間加温後、予め70℃
に保温しておいた5 ml容シリンジで1 ml注入した。
The preparation was carried out in a temperature-controlled moromi tank having a capacity of 300 liters, aiming at 15 ° C for the first time, 8 ° C for the Nakatsume, and 6 ° C for the distillate. The second half became dull and finally became a long-term mood for 40-43 days. The upper tank was a 320 liter hydraulic automatic squeezing machine, and a sake bag that had been thoroughly washed was used to squeeze one mash into several batches. The obtained sake sake was analyzed for aroma components and the like. GC-14A made by Shimadzu for gas chromatography, DB-WAX 0.32 mm × 30 M for column,
The column temperature was 85 ° C, the injection temperature was 250 ° C, the detector was FID, the detection temperature was 250 ° C, the carrier gas He was 30 ml / min., And the split ratio was 10: 1. To prepare the sample, sample 0.8 ml of the sample sake into a 10 ml glass vial, add 0.1 ml of the internal standard solution, seal the septum with a perforated aluminum cap, and heat at 50 ° C for 30 minutes. , 70 ℃ in advance
1 ml was injected with a 5 ml volume syringe kept warm.

【0032】[0032]

【表5】 [Table 5]

【0033】表5に示す官能検査は5点法(1:優、
3:可、5:不可)で行い、パネラー11名の平均値で
示した。この結果、「やまぐち・桜酵母」株で醸造した
清酒は、清酒の香気成分の中で特に重要な成分とされて
いる酢酸イソアミルやカプロン酸エチルの含有量が多
く、官能的にもフルーティーな香りが強く認められる新
しいタイプの清酒となった。また、清酒中の有機酸の主
成分であるコハク酸含量が抑えられ、官能的にさわやか
な風味の清酒となった。
The sensory test shown in Table 5 is a 5-point method (1: excellent,
3: Yes, 5: No), and the average value of 11 panelists was shown. As a result, sake brewed with the "Yamaguchi / Sakura Yeast" strain contains a large amount of isoamyl acetate and ethyl caproate, which are considered to be particularly important aroma components of sake, and has a sensually fruity aroma. Is a new type of sake that is strongly recognized. In addition, the content of succinic acid, which is the main component of the organic acid in sake, was suppressed, resulting in a sake with a sensory refreshing flavor.

【0034】「やまぐち・桜酵母」を使用して、製造さ
れた清酒の特性を以下に示す: 製品 清酒 A 清酒 B 清酒 C 清酒 D アルコール (%) 6.5 13.5 9.5 13.5 日本酒度 -74 4.5 -30 -16 酸度 4.6 1.5 4.7 1.5
The characteristics of sake produced using "Yamaguchi / Sakura yeast" are as follows: Product Sake A Sake B Sake C Sake D Alcohol (%) 6.5 13.5 9.5 13.5 Sake degree -74 4.5 -30- 16 Acidity 4.6 1.5 4.7 1.5

【0035】いずれも官能試験でフルーティーで香りが
優れ、すっきりしたタイプの酒に仕上がっていると評価
された。甘口でワインに似た飲み心地の清酒と評価され
る。また、比較的さっぱりしたもの、適度な酸味があ
り、深みがあると評価されるものが得られていた。酵母
「やまぐち・桜酵母」株は、平成13年10月11日から茨城
県つくば市東1丁目1番地1 中央第6(旧住所表記:
茨城県つくば市東1丁目1番3号) (郵便番号 305-856
6)の独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託セン
ター(National Institute of Advanced Industrial Sc
ience and Technology, International Patent Organis
m Depositary: IPOD)(旧名称:経済産業省産業技術総
合研究所生命工学工業技術研究所(NIBH))に寄託され
て保管されている(受託番号 FERM P-18560)。
All of them were evaluated by a sensory test as fruity, excellent in aroma and finished in a refreshing type of sake. It is regarded as sweet sake that is sweet and has a drinking feel similar to wine. In addition, a relatively refreshing product, a product having an appropriate sourness and a product evaluated as having a deepness were obtained. Yeast "Yamaguchi / Sakura Yeast" strain has been used since October 11, 2001, 1-chome, 1-chome, Higashi 1-1-chome, Tsukuba, Ibaraki Prefecture (former address notation:
1-3-1, Higashi, Tsukuba-shi, Ibaraki) (Postal code 305-856)
6) National Institute of Advanced Industrial Science and Technology
ience and Technology, International Patent Organis
m Depositary: IPOD) (former name: Ministry of Economy, Trade and Industry, National Institute of Advanced Industrial Science and Technology, National Institute of Advanced Industrial Science and Technology (NIBH)) (deposit number FERM P-18560).

【0036】実施例4:実施例1で分離され、「やまぐ
ち・桜酵母」と命名された菌株の菌学的性質(形態的性
質及び生理学的性質)について観察した。 4-(1).形態学的性質 YM培地を用い、当該酵母菌体を30℃の温度で2日間静置
培養し、得られたものについて光学顕微鏡で観察した。
観察結果から明らかなように、いずれの栄養細胞もその
大きさは4〜8μm で卵型であった。そしてまたYM寒天
培地上ではいずれの菌株もつやのある白色のコロニーを
形成した。
Example 4: The mycological properties (morphological and physiological properties) of the strain isolated in Example 1 and named "Yamaguchi-Sakura Yeast" were observed. 4- (1). Morphological Properties Using YM medium, the yeast cells were statically cultivated at a temperature of 30 ° C. for 2 days, and the obtained ones were observed with an optical microscope.
As is clear from the observation results, all the vegetative cells were oval-shaped with a size of 4 to 8 μm. And again, on YM agar medium, white colonies with a nuance of any strain were formed.

【0037】a. TTC染色性 古川、秋山の方法(古川敏郎、秋山裕一:農化, 37, 39
8 (1963)) に従って試験した。即ち、菌体を適当に希釈
し(1プレートに200 程度となるよう)、下層培地に30
℃で2日間プレート培養したコロニー上へ、TTC 寒天を
溶解後45℃程度にしてから静かに重層し、固まった後30
℃に2〜3時間放置し、コロニーの染色状況を観察し
た。協会7号、協会 901号は赤く染色したが、当該酵母
はピンクであった。 b. D.C.染色性 溝口、藤田の方法(溝口晴彦、藤田栄信:醗工, 59, 18
5 (1981)) に従って試験した。即ち、菌体を適当に希釈
し(1プレートに約200 程度となるよう)、TTC 下層培
地に30℃で2日間プレート培養したコロニー上へ、上層
用軟寒天を溶解後45℃程度にしてから静かに重層し、固
まった後室温に30分放置しコロニーの染色状況を観察し
た。当該酵母は白色であった。
TTC stainability Furukawa, Akiyama's method (Toshiro Furukawa, Yuichi Akiyama: Agriculturalization, 37, 39
8 (1963)). That is, the cells are diluted appropriately (to about 200 per plate), and 30
After TTC agar was thawed onto a colony that had been plate-cultured at ℃ for 2 days, gently layer it up to about 45 ℃, and after hardening,
The mixture was left standing at a temperature of 2 to 3 hours for observation of the colony staining status. Association 7 and 901 stained red, but the yeast was pink. b. DC dyeing method Mizoguchi, Fujita's method (Haruhiko Mizoguchi, Eibu Fujita: Ogaku, 59, 18)
5 (1981)). That is, the cells were appropriately diluted (to about 200 in one plate), and the upper layer soft agar was thawed to about 45 ° C on the colonies plated in TTC lower layer medium at 30 ° C for 2 days. The layers were gently overlaid, allowed to harden, and allowed to stand at room temperature for 30 minutes to observe the staining state of colonies. The yeast was white.

【0038】以上の菌学的性質の観察から、本菌、即
ち、「やまぐち・桜酵母」は、従来の酵母から客観的に
区別されるものであることが判明し、本発明者らは、こ
れを新菌と認定した。さらにこれらの性質は、20代に
わたる継代培養を行っても維持されて、本菌、即ち、
「やまぐち・桜酵母」の独特の性質である。 4-(2).アルコール耐性 本菌株のアルコール耐性を調べた。即ち、10 ml のYPD
培地で30℃、2日間静置培養した各酵母洗浄菌体を、エ
タノール濃度が 8, 11, 14%で、グルコース濃度が1%
である、0.1 M 酢酸緩衝液(pH4.3) のそれぞれ6 ml中に
懸濁して、30℃で3日間自己消化を行い、生存率を測定
した。その結果を表6に示した。
From the above observation of mycological properties, it was found that the present bacterium, that is, "Yamaguchi / Sakura Yeast" is objectively distinguished from conventional yeasts. This was certified as a new bacterium. Furthermore, these properties are maintained even after subculture for 20 generations.
This is the unique property of "Yamaguchi / Sakura Yeast". 4- (2). Alcohol tolerance The alcohol tolerance of this strain was investigated. That is, 10 ml YPD
Each yeast-washed bacterial cell that had been statically cultivated in the medium at 30 ° C for 2 days had ethanol concentration of 8, 11, 14% and glucose concentration of 1%.
Each of the suspensions was suspended in 6 ml of 0.1 M acetate buffer (pH 4.3) and autolysed at 30 ° C. for 3 days to measure the survival rate. The results are shown in Table 6.

【0039】[0039]

【表6】 [Table 6]

【0040】本発明は、前述の説明及び実施例に特に記
載した以外も、実行できることは明らかである。上述の
教示に鑑みて、本発明の多くの改変及び変形が可能であ
り、従ってそれらも本件添付の請求の範囲の範囲内のも
のである。
It will be appreciated that the present invention may be practiced other than as specifically described in the foregoing description and examples. Many modifications and variations of the present invention are possible in light of the above teachings, and are therefore within the scope of the claims appended hereto.

【0041】[0041]

【発明の効果】本発明では、桜の木の桜の花から分離選
択された酵母から、バランスよい香気と適度なバランス
の口当たりの清酒を生成する酵母を分離育種する方法が
提供される。この方法で得られた酵母を用いて従来にな
いユニークな特性を持ち、吟醸香の豊かな清酒を含めた
酒類及び飲食品を製造することができる。本発明の新規
な桜の花の酵母を用いれば、高貴で好ましい香りであ
り、非常に上品な芳香の製品、特には清酒などのアルコ
ール含有飲料を与えることのでき、フルーティーな香り
を持った飲食品、特にはワイン、ビール、清酒などのア
ルコール含有飲料、味噌、醤油、酢、漬物などの発酵調
味料、パン、菓子など、特に、清酒などにおいて、高貴
で好ましい香りをもつ飲食品を製造することができる。
INDUSTRIAL APPLICABILITY The present invention provides a method for separating and breeding yeast which produces a sake with a well-balanced aroma and a proper balance from the yeast selected and isolated from the cherry blossoms of the cherry tree. Using the yeast obtained by this method, it is possible to produce alcoholic beverages and foods and drinks, including sake, which has unique characteristics that have never existed and is rich in ginjo flavor. By using the novel cherry blossom yeast of the present invention, it is possible to give a product with a noble and favorable fragrance and a very elegant fragrance, particularly alcohol-containing beverages such as sake, and foods and drinks with a fruity fragrance. , Especially wine, beer, alcohol-containing beverages such as sake, fermented seasonings such as miso, soy sauce, vinegar, pickles, bread, confectionery, etc., in particular, to produce food and drink with a noble and preferable aroma, such as sake. You can

【図面の簡単な説明】[Brief description of drawings]

【図1】仕込醸造工程の概説図[Figure 1] Schematic diagram of the brewing process

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 柏木 享 山口県山口市平井567−14 (72)発明者 山岡 邦雄 山口県宇部市北琴芝2−12−25 (72)発明者 加藤 美都子 山口県宇部市西岐波1905−1 Fターム(参考) 4B014 GG18 GK05 4B032 DB01 DK54 DL05 4B047 LB07 LE01 LG59 LP19 4B065 AA80X AC05 AC11 AC20 BA23 BB26 CA42    ─────────────────────────────────────────────────── ─── Continued front page    (72) Inventor Kashiwagi Ryo             567-14 Hirai, Yamaguchi City, Yamaguchi Prefecture (72) Inventor Kunio Yamaoka             2-12-25 Kitakotoshiba, Ube City, Yamaguchi Prefecture (72) Inventor Mitsuko Kato             1905-1 Nishikinami, Ube City, Yamaguchi Prefecture F term (reference) 4B014 GG18 GK05                 4B032 DB01 DK54 DL05                 4B047 LB07 LE01 LG59 LP19                 4B065 AA80X AC05 AC11 AC20                       BA23 BB26 CA42

Claims (12)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項1】 桜の花の花びらより採取された酵母を、
乳酸酸性条件下の酵母培養培地を使用して、この培地上
でアルコール濃度を段階的に高めていって生育していく
株を分離し、この分離株を米糖化液を培地に使用して培
養し、生育旺盛で且つ高濃度のアルコールを生産する株
を選択することを特徴とする桜の花から分離した酵母の
取得方法。
1. A yeast collected from petals of cherry blossoms,
Using a yeast culture medium under lactic acid acid conditions, isolate a strain that grows by gradually increasing the alcohol concentration on this medium, and culture this isolate using a rice saccharified solution as the medium. And a method for obtaining yeast isolated from cherry blossoms, which comprises selecting a strain that grows vigorously and produces a high concentration of alcohol.
【請求項2】 請求項1に記載の方法により桜の花の花
びらから分離された酵母から選択される有機酸の生成が
少なく且つ甘くフルーティーな香りを持つ清酒を醸造す
ることができることを特徴とする桜の花から分離した酵
母。
2. The method according to claim 1, characterized in that it is possible to brew sake having a sweet and fruity scent with less production of organic acids selected from yeast isolated from the petals of cherry blossoms. Yeast isolated from cherry blossoms.
【請求項3】 清酒醸造用酵母であることを特徴とする
請求項2記載の酵母。
3. The yeast according to claim 2, which is a yeast for sake brewing.
【請求項4】 桜の花の花びらより単離され、米糖化液
を使用しての発酵において、生育旺盛で且つ高濃度のア
ルコールを生産する清酒製造に適した酵母サッカロミセ
ス セレビッシエ(Saccharomyces cerevisiae)〔特許生
物寄託センター(IPOD)受託番号 FERM P-18560〕であ
ることを特徴とする請求項2又は3記載の酵母。
4. A yeast Saccharomyces cerevisiae (Saccharomyces cerevisiae), which is isolated from the petals of cherry blossoms and is suitable for the production of sake that produces a high-concentration alcohol with vigorous growth in fermentation using a saccharified liquid of rice. Biological Depository Center (IPOD) accession number FERM P-18560], The yeast according to claim 2 or 3.
【請求項5】 請求項2〜4のいずれか一に記載の酵母
を用いて醸造することを特徴とする清酒の製造方法。
5. A method for producing sake, which comprises brewing using the yeast according to any one of claims 2 to 4.
【請求項6】 請求項2〜4のいずれか一に記載の酵母
を用いて発酵して得られたフルーティーな芳香をもつ飲
食品。
6. A food or beverage product having a fruity aroma, which is obtained by fermenting the yeast according to any one of claims 2 to 4.
【請求項7】 飲食品が、例えば、ビール、ワイン、サ
イダー、清酒、老酒など、またアルコール発酵製品をさ
らに蒸留して得られるウイスキー、ブランデー、焼酎な
どのアルコール含有飲料、味噌、醤油、酢、漬物などの
発酵調味料、パン、酒饅頭、中華饅頭などの菓子製品な
どのフルーティーな芳香をもつ発酵飲食品である請求項
6記載の芳香をもつ飲食品。
7. The food and drink is, for example, beer, wine, cider, sake, old sake, etc., and alcohol-containing beverages such as whiskey, brandy and shochu obtained by further distilling alcohol-fermented products, miso, soy sauce, vinegar, The fermented food and drink product having a fruity aroma such as fermented seasonings such as pickles, and confectionery products such as bread, sake buns and Chinese buns.
【請求項8】 フルーティーな芳香をもつアルコール含
有飲料が、清酒、果実酒又は雑種発酵酒である請求項7
記載の芳香をもつ飲食品。
8. The alcohol-containing beverage having a fruity aroma is sake, fruit liquor or hybrid fermented liquor.
Foods and drinks with the stated aroma.
【請求項9】 酵母を、米又は小麦を原料として発酵さ
せるものである請求項8記載の芳香をもつ飲食品。
9. The fragrant food or drink according to claim 8, wherein the yeast is fermented from rice or wheat as a raw material.
【請求項10】 アルコール含有飲料が、フルーティー
な芳香をもつ清酒である請求項8又は9記載の芳香をも
つ飲食品。
10. The fragranced food or drink according to claim 8, wherein the alcohol-containing beverage is sake having a fruity fragrance.
【請求項11】 請求項2〜4のいずれか一に記載の酵
母を用いて発酵することを特徴とするフルーティーな芳
香をもつ飲食品の製造方法。
11. A method for producing a food or drink product having a fruity aroma, which comprises fermenting the yeast according to any one of claims 2 to 4.
【請求項12】 飲食品が、果物様芳香をもつアルコー
ル含有飲料である請求項11記載の芳香をもつ飲食品の
製造方法。
12. The method for producing an aromatic food or drink according to claim 11, wherein the food or drink is an alcohol-containing beverage having a fruity aroma.
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