JP2002501932A - Liquid and Solid Sulfoxide Glycosylation: Synthesis of β-Linked Oligosaccharides Using a 2-Deoxy-2-N-trifluoroacetamide-Glycopyranosyl Donor - Google Patents
Liquid and Solid Sulfoxide Glycosylation: Synthesis of β-Linked Oligosaccharides Using a 2-Deoxy-2-N-trifluoroacetamide-Glycopyranosyl DonorInfo
- Publication number
- JP2002501932A JP2002501932A JP2000529604A JP2000529604A JP2002501932A JP 2002501932 A JP2002501932 A JP 2002501932A JP 2000529604 A JP2000529604 A JP 2000529604A JP 2000529604 A JP2000529604 A JP 2000529604A JP 2002501932 A JP2002501932 A JP 2002501932A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- deoxy
- glycosyl
- phenylsulfenyl
- acetyl
- glycosyl donor
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Withdrawn
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H5/00—Compounds containing saccharide radicals in which the hetero bonds to oxygen have been replaced by the same number of hetero bonds to halogen, nitrogen, sulfur, selenium, or tellurium
- C07H5/08—Compounds containing saccharide radicals in which the hetero bonds to oxygen have been replaced by the same number of hetero bonds to halogen, nitrogen, sulfur, selenium, or tellurium to sulfur, selenium or tellurium
- C07H5/10—Compounds containing saccharide radicals in which the hetero bonds to oxygen have been replaced by the same number of hetero bonds to halogen, nitrogen, sulfur, selenium, or tellurium to sulfur, selenium or tellurium to sulfur
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/02—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures
- C07H15/12—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to a nitrogen atom of the saccharide radical
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
- C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
- C07B2200/11—Compounds covalently bound to a solid support
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C40—COMBINATORIAL TECHNOLOGY
- C40B—COMBINATORIAL CHEMISTRY; LIBRARIES, e.g. CHEMICAL LIBRARIES
- C40B40/00—Libraries per se, e.g. arrays, mixtures
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
Abstract
(57)【要約】 本発明は、β−オリゴ糖の合成プロセスに関する。β−オリゴ糖は、グリコシル供与体として、アルキルスルフェニル−またはアリールスルフェニル−2−デオキシ−2−N−トリフルオロアセトアミドグリコピラノースを使用して、スルホキシドグリコシル化を介して、液相および固相中の両方で合成される。一旦、グリコシル化条件下で活性化されると、これらの供与体は排他的にかつ高収率でβ−グリコシドを生成する。トリフルオロアセトアミド基は穏和な条件下で容易に除去されるので、対応するアミノ基は、非保護ヒドロキシル基の存在下でさえ適切に誘導体化できる。二糖ライブラリーを、設計、構築および分析する。本発明はまた、グリコシル供与体の合成プロセスにも関する。 (57) [Summary] The present invention relates to a process for synthesizing β-oligosaccharides. Beta-oligosaccharides can be converted to liquid and solid phases via sulfoxide glycosylation using alkylsulfenyl- or arylsulfenyl-2-deoxy-2-N-trifluoroacetamidoglycopyranose as the glycosyl donor. Synthesized in both. Once activated under glycosylation conditions, these donors produce β-glycosides exclusively and in high yield. Since the trifluoroacetamide group is easily removed under mild conditions, the corresponding amino group can be appropriately derivatized even in the presence of an unprotected hydroxyl group. A disaccharide library is designed, constructed and analyzed. The present invention also relates to a process for synthesizing a glycosyl donor.
Description
【0001】 (技術分野) 本発明は、一般に、β−オリゴ糖、並びに、グリコシル供与体とグリコシル受
容体を反応させることを含む、β−オリゴ糖の合成プロセスに関する。より具体
的には、本発明は、液相および固相スルホキシドグリコシル化における、グリコ
シル供与体として2−デオキシ−2−N−トリフルオロアセトアミドグリコピラ
ノシルスルホキシドを使用するβ−オリゴ糖の合成プロセスに関する。本発明は
また、二糖コンビナトリアルライブラリーの設計、構築および分析にも関する。TECHNICAL FIELD The present invention relates generally to β-oligosaccharides and processes for synthesizing β-oligosaccharides, including reacting a glycosyl donor with a glycosyl acceptor. More specifically, the present invention relates to a process for the synthesis of β-oligosaccharides using 2-deoxy-2-N-trifluoroacetamidoglycopyranosylsulfoxide as a glycosyl donor in liquid and solid phase sulfoxide glycosylation. About. The invention also relates to the design, construction and analysis of a disaccharide combinatorial library.
【0002】 (発明の背景) 糖タンパク質および糖脂質のオリゴ糖鎖の生物学的関連性が、次第に明らかと
なっている。両方共が、細胞表面膜上に見出され、生物学的液体中を循環してい
るので、これらのグリコシド残基は、正常な細胞発達および機能において鍵とな
る事象を媒介する認識シグナルとして作用する。それらは、胚形成、ホルモン活
性、ニューロン発達、炎症、細胞増殖、受精、および様々な細胞型の特定の組織
への組織化に関与している。それらは、タンパク質の細胞間輸送を調節すること
ができ、よって、代謝のシグナル物質として見なされるべきである。それらはま
た、糖タンパク質の細胞内局在化および分泌、並びに、循環からの血漿糖タンパ
ク質の排除にも関与しており、多くのオリゴ糖が、細胞間認識、細胞性免疫応答
、細胞発癌性形質転換および炎症、および他の細胞生物学的現象に関与している
。Sharon et al.、Sci.Am.268:82−89(1993
);Karlsson、Trends Pharm.Sci.、12(7):2
65−272(1991);Drickamer et al.、Curr.O
pn.Struct.Biol.、2(5):653−654(1992)参照
。BACKGROUND OF THE INVENTION The biological relevance of oligosaccharide chains of glycoproteins and glycolipids is becoming increasingly clear. As both are found on cell surface membranes and circulate in biological fluids, these glycoside residues act as recognition signals that mediate key events in normal cell development and function I do. They are involved in embryogenesis, hormonal activity, neuronal development, inflammation, cell proliferation, fertilization, and organization of various cell types into specific tissues. They can regulate the intercellular transport of proteins and should therefore be regarded as metabolic signalers. They are also involved in the intracellular localization and secretion of glycoproteins, and the elimination of plasma glycoproteins from the circulation, and many oligosaccharides are involved in cell-cell recognition, cellular immune responses, cell carcinogenesis. It is involved in transformation and inflammation, and other cell biological phenomena. Sharon et al. , Sci. Am. 268: 82-89 (1993)
); Karlsson, Trends Pharm. Sci. , 12 (7): 2
65-272 (1991); Drickamer et al. Curr. O
pn. Struct. Biol. 2 (5): 653-654 (1992).
【0003】 オリゴ糖は、疾患の予防および治療にも関与している。このクラスの化合物は
、グルコサミンおよびマクロライド抗生物質、アントラサイクリンおよびエンジ
イン(enediyne)抗癌抗生物質を含む。例えば、細胞表面上のオリゴ糖
は、ウイルス、毒素、感染性細菌、ホルモン、病原体、酵素、タンパク質のレセ
プターとして、並びに、より良好なリガンドとして機能する。修飾された細胞表
面炭水化物は、腫瘍形成および転移に関与していた。オリゴ糖構造は、胚発達中
の細胞の移動、感染プロセスおよび他の現象を媒介する。Rademacher
et al.Annu.Rev.Biochem.、57:785(1988
);Feizi et al.、TIBS、24(1985);Hakomor
i、TIBS、45(1984);Feizi TIBS、84(1991);
DennisおよびLaferte Cancer Res.、45:6034
(1985);Markwell et al.Proc.Natl.Acad
.Sci.USA、78:5406(1981);WileyおよびSkehe
l、J.Annu.Rev.Biochem.、56:365(1987);W
alz et al.、Science、250(1990);Kleinma
n et al.Proc.Natl.Acad.Sci.USA、76:33
67(1979)。[0003] Oligosaccharides are also involved in the prevention and treatment of diseases. This class of compounds includes glucosamine and macrolide antibiotics, anthracyclines and enediyne anticancer antibiotics. For example, oligosaccharides on the cell surface function as receptors for viruses, toxins, infectious bacteria, hormones, pathogens, enzymes, proteins, as well as better ligands. Modified cell surface carbohydrates have been implicated in tumorigenesis and metastasis. Oligosaccharide structures mediate cell migration, the process of infection, and other phenomena during embryonic development. Rademacher
et al. Annu. Rev .. Biochem. 57: 785 (1988).
); Feizi et al. , TIBS, 24 (1985); Hakomor.
i, TIBS, 45 (1984); Feizi TIBS, 84 (1991);
Dennis and Laferte Cancer Res. , 45: 6034
(1985); Markwell et al. Proc. Natl. Acad
. Sci. USA, 78: 5406 (1981); Wiley and Skehe.
l. Annu. Rev .. Biochem. 56: 365 (1987); W.
alz et al. , Science, 250 (1990); Kleinma.
net et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 76:33
67 (1979).
【0004】 オリゴ糖に関連する製品を開発する努力が続けられており、これは、炭水化物
レセプターを認識する薬物送達ベヒクル、細胞表面炭水化物を認識するウイルス
による感染を遮断するワクチン、様々な疾患に関連した炭水化物を同定、検出お
よび分析するための診断キット、および薬物として使用する、異常炭水化物を認
識するモノクローナル抗体を含む。これらおよび他の炭水化物をもとにした生物
医学的製品の開発は、オリゴ糖および他のグリココンジュゲートを、迅速に、効
率的に、そして基礎および発展研究に実践的な量で生産する技術が利用できるか
に依存する。[0004] Efforts to develop products related to oligosaccharides continue, including drug delivery vehicles that recognize carbohydrate receptors, vaccines that block infection by viruses that recognize cell surface carbohydrates, and various diseases. Diagnostic kits for identifying, detecting and analyzing isolated carbohydrates, and monoclonal antibodies recognizing abnormal carbohydrates for use as drugs. The development of biomedical products based on these and other carbohydrates has led to the technology to produce oligosaccharides and other glycoconjugates quickly, efficiently, and in practical quantities for basic and developmental research. Depends on availability.
【0005】 より具体的には、様々なオリゴ糖および他のグリココンジュゲートの混合物を
含むグリコシドライブラリーの迅速な調製を可能とする方法が必要とされ、これ
はその後、特定の生物学的活性についてスクリーニングできる。例えば、ペプチ
ド混合物のスクリーニングは、活性な化合物の同定および構造−活性相関の解明
の効率的な方法であることが示されている。化学的に異なったペプチド混合物の
製造および活性化合物の決定には、数多くの方法がある。例えば、Zucker
mann et al.、Proc.Natl.Acad.Sci.USA、8
9:4505(1992);Lam et al.、Nature、354:8
2(1991);Houghten、Nature、354:84(1991)
;Petithory、Proc.Natl.Acad.Sci.USA、88
:11510(1991);Geyse、Proc.Natl.Acad.Sc
i.USA、81:3998(1984);Houghten、Proc.Na
tl.Acad.Sci.USA、82:5131(1985);Fodor、
Science、251:767(1991)参照。[0005] More specifically, there is a need for a method that allows for the rapid preparation of glycoside libraries containing a mixture of various oligosaccharides and other glycoconjugates, which is then followed by a specific biological activity Can be screened for For example, screening of peptide mixtures has been shown to be an efficient method of identifying active compounds and elucidating structure-activity relationships. There are a number of methods for the production of chemically distinct peptide mixtures and for determining the active compound. For example, Zucker
mann et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 8
9: 4505 (1992); Lam et al. , Nature, 354: 8
2 (1991); Houghten, Nature, 354: 84 (1991).
Petritory, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88
: 11510 (1991); Geyse, Proc. Natl. Acad. Sc
i. ScL USA, 81: 3998 (1984); Houghten, Proc. Na
tl. Acad. Sci. USA, 82: 5131 (1985); Fodor,
Science, 251: 767 (1991).
【0006】 オリゴ糖合成は、断然、現代有機化学の最もやりがいのある分野の1つである
。オリゴ糖またはグリココンジュゲートの効率的作成は、高収率だけでなく高立
体制御で、グリコシル部分を、グリコシル受容体の特異的部位に付着させること
を含む。この挑戦をもとにして、いくつかのグリコシル化法が開発された。[0006] Oligosaccharide synthesis is by far one of the most challenging areas of modern organic chemistry. Efficient production of oligosaccharides or glycoconjugates involves attaching glycosyl moieties to specific sites on glycosyl receptors with high yields as well as high steric control. Based on this challenge, several glycosylation methods have been developed.
【0007】 グリコシル化の古典的供与体は、グリコシルハロゲン化物である。Nicol
aou et al.、調製用炭水化物の化学、Hanessian,S.編、
Marcel Dekker,Inc.(1997)は、グリコシルフルオライ
ドからのオリゴ糖合成を再検討した。最も古いグリコシル化方法の1つは、ケー
ニッヒス−クノール法であり、これは、銀または水銀などの重金属塩の存在下、
臭素物または塩素物などのグリコシドハロゲン化物の分解によるアノマー中心の
活性化を含む。しかし、グリコシドまたはグリコシルエステルなどの多くのオリ
ゴ糖のグリコシルハロゲン化物への変換において問題が生じることがあり、その
結果、合成順序とは程遠い低収率の段階となる。さらに、グリコシルハロゲン化
物の製造には厳しい条件が必要であること、その低い熱安定性、および加水分解
を非常に受け易いことから、例えば、ルイスまたはプロトン酸条件下においてグ
リコシル供与体としてトリクロロアセトアミデートを使用するなどの、他の方法
を開発しなければならなかった。グリコシル化は、関与基がC−2に存在しなけ
れば、立体配置の反転を伴って進行し、その場合、β−グリコシドが得られる。
Schmidt et al.、Tetrahedron Lett.、25:
821(1984)。[0007] The classic donor of glycosylation is a glycosyl halide. Nicol
aou et al. Preparative carbohydrate chemistry, Hanesian, S .; Hen,
Marcel Dekker, Inc. (1997) reviewed oligosaccharide synthesis from glycosyl fluoride. One of the oldest glycosylation methods is the König-Knoll method, which is carried out in the presence of heavy metal salts such as silver or mercury.
Includes activation of the anomeric center by decomposition of a glycoside halide such as bromide or chloride. However, problems can occur in the conversion of many oligosaccharides, such as glycosides or glycosyl esters, to glycosyl halides, resulting in low yield steps far from the synthesis sequence. In addition, the stringent requirements for the production of glycosyl halides, their low thermal stability, and their high susceptibility to hydrolysis make it possible, for example, to use trichloroacetamide as a glycosyl donor under Lewis or protonic acid conditions. Other methods had to be developed, such as using dating. Glycosylation proceeds with an inversion of the configuration if the participating group is not present at C-2, in which case a β-glycoside is obtained.
Schmidt et al. , Tetrahedron Lett. , 25:
821 (1984).
【0008】 いくつかの種類のグリカールグリコシド化法が、Lemieux et al
.、Can.J.Chem.、43:2190(1965);Thiem et
al.、Synthesis、696(1978);Sinay et al
.、J.Chem.Soc.Chem.Commun.、p.572(1981
);Ogawa et al.、Tetrahedron Lett.、28:
2723(1987)およびDanishefsky et al.、J.Am
.Chem.Soc.、111:6661(1989)により開拓された。この
方法では、求電子試薬(E+)をアノマー中心を活性化する手段として使用し、
電子に富むグリカールを攻撃し、その後、炭水化物受容体と反応すると、グリコ
シドが得られる。その後、C−2の置換基を除去すると、2−デオキシグリコシ
ドが得られる。[0008] Several types of glycal glycosidation methods are described in Lemieux et al.
. , Can. J. Chem. 43: 2190 (1965); Thiem et.
al. , Synthesis, 696 (1978); Sinay et al.
. J. Chem. Soc. Chem. Commun. , P. 572 (1981)
Ogawa et al.); , Tetrahedron Lett. , 28:
2723 (1987) and Danishefsky et al. J. Am
. Chem. Soc. , 111: 6661 (1989). In this method, an electrophile (E + ) is used as a means to activate the anomeric center,
Attacks the electron-rich glycal, and then reacts with the carbohydrate receptor to give the glycoside. Thereafter, the C-2 substituent is removed to give 2-deoxyglycoside.
【0009】 n−ペンテニルグリコシド法は、Fraser−Reid et al.、J
.Chem.Soc.Chem.Commun.、p.823(1988)によ
り導入された。この方法は、オレフィンへの求電子付加、その後、環酸素による
分子内置換、および最終的なペンテニル鎖の除去によるオキソニウム種の形成に
依存する。グリコシド受容体でのトラッピング(捕獲)により、所望のグリコシ
ドが得られる。The n-pentenyl glycoside method is described in Fraser-Reid et al. , J
. Chem. Soc. Chem. Commun. , P. 823 (1988). This method relies on electrophilic addition to olefins, followed by intramolecular displacement by ring oxygen and eventual removal of the pentenyl chain to form an oxonium species. Trapping (capture) at the glycoside receptor gives the desired glycoside.
【0010】 Schmidt et al.、Tetrahedron Lett.、33
:6123(1992)は、グリコシル供与体としてのグリコシルホスファイト
を含む、比較的新規な方法を記載した。この方法は、シアル誘導体の合成に重要
な適用を見出す。[0010] Schmidt et al. , Tetrahedron Lett. , 33
: 6123 (1992) described a relatively new method involving glycosyl phosphite as a glycosyl donor. This method finds important application in the synthesis of sial derivatives.
【0011】 チオグリコシドは、グリコシル供与体としてかなりの注目を集めている。チオ
アルキルまたはアリール基は、アノマー中心を効率的に一時的に保護し、同時に
、様々な条件下で選択的に活性化され得る。チオグリコシドを使用した多くのグ
リコシル化反応が報告されている。グリコシル供与体としてチオグリコシドを使
用した初期の試みは、硫酸水銀(II)、Ferrier et al.、J.
Glycoconjugate、4:97−108(1987);塩化水銀(I
I)、Tsai et al.、Can.J.Chem.、62:1403−5
(1984);トリフルオロメタンスルホン酸フェニル水銀、Garegg e
t al.、Carbohyd.Res.、116:162−65(1983)
;安息香酸水銀(II)、van Cleve、Carbohyd.Res.、
116:162−65(1983);硝酸水銀、Hanessian et a
l.、Carbohyd.Res.、80:C17−22(1980);銀トリ
フラート、Hanessian et al.、Carbohyd.Res.、
53:C13(1977);トリフルオロメタンスルホン酸銅(II)、Muk
aiyama et al.、Chem.Lett.、487−90(1979
);N−ブロモスクシンイミド(NBS)、Hanessian、上記およびN
icolaou et al.、J.Am.Chem.Soc.、105:24
30−34(1982);過塩素酸鉛(II)、Woodward et al
.、J.Am.Chem.Soc.、103:3215−17(1981);ベ
ンゼンセレネニルトリフラート、Ito et al.、Tetrahed.L
ett.、1061−64(1988)、メチルトリフラート、Lonn、Ca
rbohyd.Res.、39:105−113(1985);ジメチル(メチ
ルチオ)スルホニウムトリフラート(DMTST)、Andersson et
al.、Tetrahed.Lett.3919−3922(1986);ベ
ンゼンスルホニル誘導体、Brown et al.、Tetrahed.Le
tt.、29/38:4873−4876(1988);アルキルスルホニルト
リフラート、Dasgupta et al.、Carbohyd.Resea
rch.、177:c13−c17(1988)による活性化を含む。これらの
様々な促進剤は、オリゴ糖合成にその後広く使用されるという結果には至らなか
った。重金属は、一般的な適用に十分な反応性がない。より反応性のあるヘテロ
環式チオグリコシドの使用により、この問題は回避された。Hanessian
et al.およびMukaiyama et al.上記。[0011] Thioglycosides have received considerable attention as glycosyl donors. Thioalkyl or aryl groups can efficiently and temporarily protect the anomeric center, while being selectively activated under a variety of conditions. Many glycosylation reactions using thioglycosides have been reported. Early attempts to use thioglycosides as glycosyl donors were made by mercury (II) sulfate, Ferrier et al. J.
Glycoconjugate, 4: 97-108 (1987); mercury chloride (I
I), Tsai et al. , Can. J. Chem. , 62: 1403-5.
(1984); phenylmercury trifluoromethanesulfonate, Garegge
t al. , Carbohyd. Res. , 116: 162-65 (1983).
Mercury (II) benzoate, van Cleve, Carbohyd. Res. ,
116: 162-65 (1983); mercuric nitrate, Hanesian et a.
l. , Carbohyd. Res. , 80: C17-22 (1980); silver triflate, Hanesian et al. , Carbohyd. Res. ,
53: C13 (1977); copper (II) trifluoromethanesulfonate, Muk
aiyama et al. Chem. Lett. 487-90 (1979).
N-bromosuccinimide (NBS), Hanesian, supra and N
icolaou et al. J. Am. Chem. Soc. , 105: 24
30-34 (1982); Lead (II) perchlorate, Woodward et al.
. J. Am. Chem. Soc. , 103: 3215-17 (1981); benzeneselenenyl triflate, Ito et al. Tetrahed. L
ett. , 1061-64 (1988), methyl triflate, Lonn, Ca.
rbhyd. Res. 39: 105-113 (1985); dimethyl (methylthio) sulfonium triflate (DMTST), Andersson et al.
al. Tetrahed. Lett. 3919-3922 (1986); benzenesulfonyl derivatives, Brown et al. Tetrahed. Le
tt. , 29/38: 4873-4876 (1988); Alkylsulfonyl triflate, Dasgupta et al. , Carbohyd. Resea
rch. 177: c13-c17 (1988). These various accelerators did not result in widespread use in oligosaccharide synthesis. Heavy metals are not reactive enough for general applications. This problem was circumvented by the use of more reactive heterocyclic thioglycosides. Hanesian
et al. And Mukaiyama et al. the above.
【0012】 チオグリコシドを使用したグリコシド化法は、Kahne et al.、J
.Am.Chem.Soc.、111:6881−2(1989)により開発さ
れ、 ここでは、アノマースルフィドを、最初に対応するスルホキシドに酸化し
、その後、グリコシル受容体の存在下で無水トリフラートの添加により活性化し
て、グリコシドを生成する。無水トリフラートで活性化したグリコシル供与体は
、溶液中で非常に反応性の高いことが判明し、穏和な条件下で極度に反応性の低
い基質をグリコシル化するために使用できる。Glycosidation methods using thioglycosides are described in Kahne et al. , J
. Am. Chem. Soc. , 111: 6881-2 (1989), wherein the anomeric sulfide is first oxidized to the corresponding sulfoxide and then activated by the addition of anhydrous triflate in the presence of a glycosyl receptor to produce a glycoside I do. Glycosyl donors activated with anhydrous triflate have been found to be very reactive in solution and can be used to glycosylate extremely unreactive substrates under mild conditions.
【0013】 Kahne et al.、米国特許第5,635,612号および米国特許
第5,638,866号(この内容は、参考文献として本明細書に組込む)は、
複数のグリコシド連鎖を、溶液中で、1段階で、グリコシル供与体としてアノマ
ー糖スルホキシドを使用して形成する方法、および固相並びに液相で連続グリコ
シド連鎖を構築する方法を記載する。活性化剤は、トリフルオロメタンスルホン
酸またはトリフラート酸(TfOH)、p−トルエンスルホン酸またはメタンス
ルホン酸などの強酸を含む。[0013] Kahne et al. Nos. 5,635,612 and 5,638,866, the contents of which are incorporated herein by reference.
Methods are described for forming multiple glycoside chains in solution in one step using anomeric sugar sulfoxides as glycosyl donors and for constructing continuous glycoside chains in solid and liquid phases. Activators include strong acids such as trifluoromethanesulfonic acid or triflate acid (TfOH), p-toluenesulfonic acid or methanesulfonic acid.
【0014】 近年の研究により、チオグリコシドは、少なくとも2つの他の異なる技術で、
好都合かつ再生的に活性化され得ることが示された。第一は、最初にグリコシル
ハロゲン化物を形成し、その後、これを好塩性試薬でさらに活性化することを含
む、「2段階」活性化である。Sato et al.、Carbohyd.R
es.、155:C6−10(1986)。[0014] Recent studies have shown that thioglycosides can be used in at least two other different technologies,
It has been shown that it can be conveniently and regeneratively activated. The first is a "two-step" activation that involves first forming a glycosyl halide and then further activating it with a halophilic reagent. Sato et al. , Carbohyd. R
es. 155: C6-10 (1986).
【0015】 オリゴ糖合成のためにグリコシルフルオライドとスルフィドとの混合を用いる
2段階活性化法が、Nicolaou et al.、J.Am.Chem.S
oc.、106:4189(1984)により開発された。グリコシルフルオラ
イドは、Mukaiyama et al.、Chem.Lett.、p.43
1(1981)によりグリコシル供与体として記載された。この方法は、過塩素
酸銀および二塩化スズの存在下における、炭水化物中間体の活性化およびグリコ
シル受容体へのカップリングを含んでいた。活性化の機序は、ケーニッヒス−ク
ノールプロセスに類似し、反応の選択性も同様である。C2にエカトリアル関与
基が存在すれば、βグリコシドが形成される。かかる部分がなければ、αアノマ
ーが優先的な生成物である。チオグリコシドは、アノマー位にエチルチオ基を使
用して、Ferrier et al.、Carbohyd.Res.、127
:157(1984)により、グリコシル供与体として記載された。Hanes
sian et al.、Carbohyd.Res.、80:C17(198
0)は、2−ピリジルチオグリコシドの使用を実証した。Nicolaou e
t al.、J.Am.Chem.Soc.、106:4189(1984)の
戦略は、鍵となる基礎単位として安定なフェニルチオグリコシドを使用する。フ
ェニルチオグリコシドは、NBSおよびジエチルアミノ硫黄トリフルオライド(
DAST)での処理により、より反応性の高いグリコシルフルオライドへと変換
される。第二の活性化で、オリゴ糖鎖の調製において、グリコシルフルオライド
を、アノマー位にフェニルチオを有するグリコシル受容体とカップリングさせる
。2段階活性化法は、固相オリゴ糖合成に特に適している。A two-step activation method using a mixture of glycosyl fluoride and sulfide for oligosaccharide synthesis is described in Nicolaou et al. J. Am. Chem. S
oc. , 106: 4189 (1984). Glycosyl fluoride is described in Mukaiyama et al. Chem. Lett. , P. 43
1 (1981) as a glycosyl donor. This method involved the activation of a carbohydrate intermediate and coupling to a glycosyl receptor in the presence of silver perchlorate and tin dichloride. The mechanism of activation is similar to the Königs-Knoll process, as is the selectivity of the reaction. If an equatorial participation group is present at C2, a β glycoside is formed. Without such moieties, the alpha anomer is the preferred product. Thioglycosides are described in Ferrier et al. Using an ethylthio group at the anomeric position. , Carbohyd. Res. , 127
157 (1984) as glycosyl donors. Hanes
Sian et al. , Carbohyd. Res. , 80: C17 (198
0) demonstrated the use of 2-pyridylthioglycoside. Nicolaou e
t al. J. Am. Chem. Soc. , 106: 4189 (1984) uses stable phenylthioglycosides as key building blocks. Phenylthioglycoside can be obtained from NBS and diethylaminosulfur trifluoride (
DAST) converts it to more reactive glycosyl fluoride. In the second activation, in the preparation of the oligosaccharide chain, glycosyl fluoride is coupled to a glycosyl receptor having phenylthio at the anomeric position. The two-step activation method is particularly suitable for solid-phase oligosaccharide synthesis.
【0016】 第二の技術は、メチルトリフラートまたはジメチル(メチルチオ)スルホニウ
ムトリフルオロメタンスルホネート(DMTST)などの親硫試薬を用いた1段
階活性化を含む。完全な立体特異性は、反応の立体結果を制御する、2−アシル
置換基由来の隣接基関与を使用するために、1,2トランス結合でのみ達成され
る。DMTSTは、グリコシル供与体として2−置換基の関与を有する様々なチ
オグリコシドを使用した1,2トランスグリコシドの合成において、非常に親硫
性の促進剤である。Fugedi et al.、J.Glycoconjug
ate、4:97−108(1987)。それは、1,2シスグリコシドの合成
にも使用されている、Andersson et al.、Tetrahed.
Lett.、27:3919−3922(1986)。[0016] The second technique involves one-step activation with a sulfurizing reagent such as methyl triflate or dimethyl (methylthio) sulfonium trifluoromethanesulfonate (DMTST). Full stereospecificity is achieved only at the 1,2 trans linkage, due to the use of adjacent group participation from the 2-acyl substituent, which controls the steric outcome of the reaction. DMTST is a very lipophilic promoter in the synthesis of 1,2 transglycosides using various thioglycosides with 2-substituent participation as glycosyl donors. Fugedi et al. J. Glycoconjug
ate, 4: 97-108 (1987). It has also been used in the synthesis of 1,2 cis glycosides, Andersson et al. Tetrahed.
Lett. , 27: 3919-3922 (1986).
【0017】 隣接基が関与しないβ−選択的グリコシル化は、不溶性銀触媒を使用して実施
されている。Garegg et al.、Carbohyd.Res.、70
:C13(1979)またはアセトニトリルなどのカチオン相互作用能をもつ溶
媒、Hashimoto et al.、Tetrahed.Lett.、25
:1379(1984)。Β-selective glycosylation without the involvement of neighboring groups has been performed using an insoluble silver catalyst. Garegg et al. , Carbohyd. Res. , 70
: A solvent capable of cationic interaction such as C13 (1979) or acetonitrile; Hashimoto et al. Tetrahed. Lett. , 25
: 1379 (1984).
【0018】 CF3SO3SiMe3、TrBF4またはBF3・Et2Oなどのルイス酸
の存在下で、−35℃で行う、グリコシル受容体であるスルフェネートエステル
と、ベンジル化メチルまたはフェニル1−チオ−β−グルコピラノシドの反応に
より、一般に、α−β混合物が得られる。Ito et al.、Tetrah
ed.Lett.、28:4701−4704(1987)。立体選択性は、溶
媒に非常に依存する。A sulfonate ester, which is a glycosyl acceptor, and a benzylated methyl or phenyl ester at −35 ° C. in the presence of a Lewis acid such as CF 3 SO 3 SiMe 3 , TrBF 4 or BF 3 .Et 2 O The reaction of 1-thio-β-glucopyranoside generally produces an α-β mixture. Ito et al. , Tetrah
ed. Lett. , 28: 4701-4704 (1987). Stereoselectivity is very dependent on the solvent.
【0019】 Sinay et al.、Pure Appl.Chem.63:519(
1991)により開発された別のチオグリコシド活性化法は、硫黄から、活性化
剤であるトリス(α−ブロモフェニル)アンモニウミルヘキサクロロアンチモネ
ート(TBPA)への電子転移を含む。製造されたグリコシルラジカルカチオン
はチイル(thiyl)ラジカルへの開裂を受け、オキソニウム種を残し、これ
はその後グリコシド化を受ける。[0019] Sinay et al. Pure Appl. Chem. 63: 519 (
Another thioglycoside activation method developed by 1991) involves the electron transfer from sulfur to the activator tris ([alpha] -bromophenyl) ammonium hexachloroantimonate (TBPA). The glycosyl radical cation produced undergoes cleavage to a thiyl radical, leaving an oxonium species, which subsequently undergoes glycosidation.
【0020】 Garegg et al.、Carbohyd.Res.、116:162
−65(1983)は、グリコシル供与体として、ベンジル化またはアシル化フ
ェニル−1−チオ−β−D−グルコピラノシドまたは1−チオ−β−D−ガラク
トピラノシドの使用を記載した。同様に、Van Cleve、Carbohy
d.Res.、70:161−164(1979)は、グリコシル供与体として
のフェニル−1−チオ−β−D−グルコピラノシドの使用を記載した。Ferr
ier et al.、J.Glycoconjugate、4:97−108
(1987)は、グリコシル供与体としてのベンジル化フェニルチオグリコシド
の使用を記載した。先の方法は、α−およびβ−アノマーの両方を生成する。Garegg et al. , Carbohyd. Res. , 116: 162
-65 (1983) described the use of benzylated or acylated phenyl-1-thio-β-D-glucopyranoside or 1-thio-β-D-galactopyranoside as a glycosyl donor. Similarly, Van Cleve, Carbohy
d. Res. , 70: 161-164 (1979) described the use of phenyl-1-thio-β-D-glucopyranoside as a glycosyl donor. Ferr
ier et al. J. Glycoconjugate: 4: 97-108
(1987) described the use of benzylated phenylthioglycosides as glycosyl donors. The previous method produces both α- and β-anomers.
【0021】 その結果、グリコシル供与体の立体選択性およびグリコシル化生成物の安定性
および収率を向上させる必要がある。本発明のスルホキシドグリコシル化法は、
液相および固相の両方で成功することが示された。それにより、低温および実質
的に中性条件下で、感受性および/または非反応性基質の、一般に高度の立体選
択性の、グリコシル化が可能となる。As a result, there is a need to improve the stereoselectivity of the glycosyl donor and the stability and yield of the glycosylated product. The sulfoxide glycosylation method of the present invention comprises:
It has been shown to be successful in both liquid and solid phases. It allows glycosylation of sensitive and / or non-reactive substrates, generally at high stereoselectivity, under low temperature and substantially neutral conditions.
【0022】 (発明の要約) 本発明は、一般に、β−二糖およびそのコンジュゲートを含む、β−オリゴ糖
の合成プロセスに関し、該プロセスは、グリコシル供与体とグリコシル受容体を
反応させることを含む。特に本発明は、溶液中または固相でのスルホキシド媒介
グリコシル化反応において、グリコシル供与体としてアルキルスルフェニル−ま
たはアリールスルフェニル−2−デオキシ−2−N−トリフルオロアセトアミド
グリコピラノースを使用したβ−オリゴ糖の合成プロセスに関する。好適なte
rt−ブチルスルフェニル−またはフェニルスルフェニル−2−デオキシ−2−
N−トリフルオロアセトアミドグリコピラノースを含む、グリコシル供与体を、
同物の調製法と共に記載する。SUMMARY OF THE INVENTION The present invention generally relates to a process for synthesizing β-oligosaccharides, including β-disaccharides and conjugates thereof, wherein the process comprises reacting a glycosyl donor with a glycosyl acceptor. Including. In particular, the present invention relates to the use of β-alkylsulfenyl- or arylsulfenyl-2-deoxy-2-N-trifluoroacetamidoglycopyranoses as glycosyl donors in sulfoxide-mediated glycosylation reactions in solution or solid phase. The present invention relates to an oligosaccharide synthesis process. Suitable te
rt-butylsulfenyl- or phenylsulfenyl-2-deoxy-2-
A glycosyl donor, including N-trifluoroacetamidoglycopyranose,
It is described together with the preparation method of the same.
【0023】 本発明のさらなる態様は、グリコシル供与体として、アリールスルフェニル−
またはアルキルスルフェニル−2−デオキシ−2−N−トリフルオロアセトアミ
ドグリコピラノースを使用して、グリコシド連鎖を構築するプロセスを提供する
ことである。選択した条件、およびガラクトサミンハイドロクロライドおよびグ
ルコサミンハイドロクロライドなどの出発物質を使用して、β−アノマー(すな
わち、β−グリコシド連鎖)を、グリコシル供与体としてアノマー糖スルホキシ
ドを使用して固相上で生産できる。本発明のプロセスは、特定のオリゴ糖または
グリココンジュゲートの調製に、または、グリコシド化学ライブラリー(これは
後に所望の生物学的活性を有する化合物を検出するためにスクリーニングできる
)の創製のための、様々なオリゴ糖またはグリココンジュゲートの混合物の調製
に適用し得る。[0023] A further aspect of the present invention is that the glycosyl donor is arylsulfenyl-
Or using alkylsulfenyl-2-deoxy-2-N-trifluoroacetamidoglycopyranose to provide a process for building glycoside linkages. Using selected conditions and starting materials such as galactosamine hydrochloride and glucosamine hydrochloride, produce β-anomers (ie, β-glycoside chains) on a solid phase using the anomeric sugar sulfoxide as a glycosyl donor. it can. The process of the present invention may be used for the preparation of specific oligosaccharides or glycoconjugates, or for the creation of glycoside chemical libraries, which can subsequently be screened to detect compounds with the desired biological activity. Can be applied to the preparation of mixtures of various oligosaccharides or glycoconjugates.
【0024】 別の態様において、本発明は、α−異性体の実質的な非存在下で、高収率でβ
−グリコシドを合成するプロセスに関する。In another embodiment, the present invention provides a method for preparing β-isomers in high yield in the substantial absence of
A process for synthesizing glycosides;
【0025】 さらに別の態様において、本発明は、広く、アミド、エステル、イミド、また
はカルバメートなどの隣接基の関与ができるC−2保護基をもつグリコシル供与
体を使用したグリコシル化におけるβ−選択性に関する。In yet another aspect, the present invention is broadly directed to β-selection in glycosylation using a glycosyl donor with a C-2 protecting group that can involve neighboring groups such as amides, esters, imides, or carbamates. About sex.
【0026】 本発明の別の態様は、複数の本発明の新規化合物(塩およびそのコンジュゲー
ト、好ましくは固相に結合したものを含む)を含む、コンビナトリアルライブラ
リーの設計、構築および分析に関する。Another aspect of the invention relates to the design, construction and analysis of combinatorial libraries comprising a plurality of novel compounds of the invention, including salts and conjugates thereof, preferably those attached to a solid phase.
【0027】 本発明の他の態様は、本開示を考察すれば当業者には明らかであろう。[0027] Other embodiments of the invention will be apparent to those skilled in the art from consideration of the present disclosure.
【0028】 (発明の詳細な説明) 以下の用語集は、本明細書で使用した用語の使用を理解するための補助として
提供する。提供される定義は、説明、例示目的のみのためである。それらは、狭
く解釈したり、本発明の範囲を不当に限定するために使用されるべきではなく、
本発明は、従来技術の開示によってのみ限定される。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION The following glossary is provided as an aid to understanding the use of terms used herein. The definitions provided are for explanation and illustration purposes only. They should not be construed narrowly or to unduly limit the scope of the invention.
The present invention is limited only by the disclosure of the prior art.
【0029】 オリゴ糖: グリコシド結合を介して連結した、1個以上の単糖(または糖)
単位を含む、オリゴマー糖(または炭水化物)。オリゴ糖は加水分解時に生成す
る単糖の数に応じて、二糖、三糖、四糖等と称され得る。本明細書で使用したよ
うに、オリゴ糖は、そのコンジュゲートを含み得る(すなわち、抗癌剤、マクロ
ライド、他の天然物、アミノ酸、ペプチド、ヌクレオシド、オリゴヌクレオチド
等を含む、別の非糖化学部分に共有結合した、一、二、三、等々の糖を含む化合
物)。Oligosaccharide: One or more monosaccharides (or sugars) linked via glycosidic bonds
Oligomeric sugars (or carbohydrates) containing units. Oligosaccharides can be referred to as disaccharides, trisaccharides, tetrasaccharides, etc., depending on the number of monosaccharides generated during hydrolysis. As used herein, an oligosaccharide may include its conjugate (ie, another non-sugar chemical moiety, including anticancer agents, macrolides, other natural products, amino acids, peptides, nucleosides, oligonucleotides, etc.). Compounds containing one, two, three, etc. sugars covalently bonded to
【0030】 グリコシド: アノマー炭素は無水素置換基を有する、少なくとも1個のペン
トースまたはヘキソース残基を含む任意の糖。典型的には、無水素置換基は、ヘ
テロ原子、例えば窒素、酸素、リン、ケイ素または硫黄である。Glycoside: Any sugar containing at least one pentose or hexose residue, wherein the anomeric carbon has a hydrogen-free substituent. Typically, the hydrogen-free substituent is a heteroatom, such as nitrogen, oxygen, phosphorus, silicon or sulfur.
【0031】 グリコシド連結(グリコシド結合または連鎖ともいう): 環式形のアルドー
スまたはケトースなどの糖がアルコールROHと反応して混合アセタールまたは
グリコシドが形成されることにより形成される連結、結合、または連鎖。アルコ
ールが、それ自体、単糖のヒドロキシル基である場合、生成物は二糖である。こ
の二糖は、さらに同じように反応して、高次のオリゴ糖および最終的には多糖を
形成し得る。従って、多糖の単糖単位は、グリコシド結合を介して連結している
。結合は、C−1またはC−2ヘミアセタールヒドロキシルと、他の単糖のヒド
ロキシル基のいずれかとの反応により形成され得る。結合は、アノマー炭素がど
ちらかの立体配置を有するように形成され得る。慣用的には、β−グリコシド連
鎖の標準的な環配向(構造の極度に右手側にあるヘミアセタール炭素原子)にお
いて、連結は、環平面の上を向き、α−グリコシド連鎖では、連結は、環の平面
の下を向く。Glycoside linkage (also referred to as a glycosidic linkage or linkage): A linkage, linkage, or linkage formed by the reaction of a sugar, such as a cyclic aldose or ketose, with an alcohol ROH to form a mixed acetal or glycoside. . If the alcohol is itself a hydroxyl group of a monosaccharide, the product is a disaccharide. The disaccharide can react in a similar manner to form higher oligosaccharides and ultimately polysaccharides. Thus, the monosaccharide units of the polysaccharide are linked via glycosidic bonds. The linkage may be formed by the reaction of C-1 or C-2 hemiacetal hydroxyl with any of the hydroxyl groups of other monosaccharides. The bond can be formed such that the anomeric carbon has either configuration. By convention, in the standard ring orientation of the β-glycoside linkage (the hemiacetal carbon atom on the extreme right hand side of the structure), the linkage is pointing up the ring plane, and in the α-glycoside linkage, the linkage is Point below the plane of the ring.
【0032】 活性化剤: グリコシルスルホキシドに添加すると、アノマースルホキシド基
と反応して、アノマー炭素を求核攻撃を受けやすくする化学試薬。二官能性糖ま
たはグリコシド残基の場合、活性化剤はまた、アノマースルホキシド基の活性化
に使用した同条件下で、遮断した求核基を脱保護することができる。Activator: A chemical reagent that, when added to glycosyl sulfoxide, reacts with the anomeric sulfoxide group to render the anomeric carbon susceptible to nucleophilic attack. In the case of a bifunctional sugar or glycoside residue, the activator can also deprotect a blocked nucleophile under the same conditions used to activate the anomeric sulfoxide group.
【0033】 グリコシル受容体: 本発明のプロセスの条件下で、グリコシル供与体のアノ
マー炭素と共有結合を形成できる、少なくとも1個の求核基を含む任意の化合物
。本明細書に記載したように、グリコシル受容体は、非保護ヒドロキシル、アミ
ノ、またはメルカプト基、または、その場で、すなわち、本発明の反応条件下で
除去できる保護基により遮断された基を含む、糖を含む、任意の有機分子である
。Glycosyl acceptor: Any compound containing at least one nucleophilic group capable of forming a covalent bond with the anomeric carbon of a glycosyl donor under the conditions of the process of the invention. As described herein, a glycosyl receptor includes an unprotected hydroxyl, amino, or mercapto group, or a group blocked by a protecting group that can be removed in situ, ie, under the reaction conditions of the invention. , Any organic molecule, including sugars.
【0034】 グリコシル供与体: アノマー炭素にスルホキシド基を有する糖またはグリコ
シド残基であって、この基は、活性化時にアノマー炭素が、グリコシル受容体の
求核基による攻撃を受け易くしてグリコシド連鎖を形成させる。好適なグリコシ
ル供与体は、フェニルスルフェニル−2−デオキシ−2−N−トリフルオロアセ
トアミドグリコピラノースである。普通の技術的理解力を有する者が、供与体グ
リコシドは、単糖、二糖、三糖等であり得ることを理解するであろうことを指摘
することは重要である。従って、本発明の方法および化合物を用いておそらく生
産できる化学ライブラリーは、全ての形のオリゴ糖またはそのコンジュゲートま
たはグリココンジュゲートを含む。Glycosyl Donor: A sugar or glycoside residue having a sulfoxide group at the anomeric carbon, which group upon activation activates the anomeric carbon to be attacked by the nucleophilic group of the glycosyl acceptor, resulting in a glycosidic linkage. Is formed. A preferred glycosyl donor is phenylsulfenyl-2-deoxy-2-N-trifluoroacetamidoglycopyranose. It is important to point out that those of ordinary skill in the art will understand that donor glycosides can be monosaccharides, disaccharides, trisaccharides, and the like. Thus, chemical libraries that can possibly be produced using the methods and compounds of the present invention include all forms of oligosaccharides or conjugates or glycoconjugates thereof.
【0035】 グリコシドライブラリー: 生物学的活性を示す化合物または分子を同定する
ために、スクリーニング法にかけることのできる、混合物、コレクション、また
は複数の様々な配列のオリゴ糖。この化学ライブラリーは、様々なコンジュゲー
トまたはグリココンジュゲートも含む。Glycoside library: An oligosaccharide of a mixture, collection, or a plurality of different sequences that can be subjected to screening methods to identify compounds or molecules that exhibit biological activity. The chemical library also contains various conjugates or glycoconjugates.
【0036】 グリココンジュゲート: グリコシド残基に共有結合した無糖部分を含む、任
意の化合物または分子。上記のオリゴ糖の定義も参照。Glycoconjugate: Any compound or molecule that contains a sugar-free moiety covalently linked to a glycoside residue. See also the definition of oligosaccharides above.
【0037】 保護基: その場で、好ましくは、必ずしも必要ではないが、アノマースルホ
キシド基の活性化に使用した同条件下で除去できる遮断基または保護基。それは
、反応実施中のヒドロキシルまたはアミノ基の反応を防ぐためにオリゴ糖合成に
通常使用される部分を意味する。好適な保護基は、トリフルオロアセチル部分で
ある。Protecting group: A blocking or protecting group that can be removed in situ, preferably, but not necessarily, under the same conditions used to activate the anomeric sulfoxide group. It means a moiety commonly used in oligosaccharide synthesis to prevent hydroxyl or amino group reactions during the reaction. A preferred protecting group is a trifluoroacetyl moiety.
【0038】 遮断基: 保護基と同様に、遮断基は、目的の官能基の不適切な反応を防ぐた
めに使用される。保護基または遮断基という用語は、同義語として使用できる。Blocking Group: Like protecting groups, blocking groups are used to prevent inappropriate reaction of a functional group of interest. The terms protecting group or blocking group can be used as synonyms.
【0039】 「実質的に含まない」という用語は、本発明の好適な実施形態において、有意
量のα−アノマーの存在が排除された、本発明の条件下で形成されたグリコシル
化生成物を意味し得る。The term “substantially free” refers, in a preferred embodiment of the invention, to a glycosylation product formed under the conditions of the invention, in which the presence of significant amounts of α-anomers has been excluded. Could mean.
【0040】 本スルホキシドグリコシル化法において、ガラクトサミンおよびグルコサミン
に基づくグリコシルスルホキシド供与体の使用が研究される。より具体的には、
高いβ−選択性を与える、スルホキシド供与体を開発する。一般に、グリコシル
化反応のβ−選択性は、アミド、エステル、イミド、またはカルバメートを含む
がこれに限定されない、隣接基関与できるC−2保護基をもつグリコシル供与体
の使用により達成される。グルコサミンおよびガラクトサミンに基づくスルホキ
シドの場合、C−2のこの保護基の性質は重要である。これは、スルホキシドは
、比較的非反応性の求核試薬をグリコシル化するに十分なほど反応性であるべき
のみならず、この基は、アミノ官能性の続く誘導体化が可能となるように容易に
除去されるべきであるからである。In the present sulfoxide glycosylation method, the use of a glycosyl sulfoxide donor based on galactosamine and glucosamine is investigated. More specifically,
Develop sulfoxide donors that provide high β-selectivity. Generally, the β-selectivity of the glycosylation reaction is achieved by the use of a glycosyl donor with a C-2 protecting group that can participate in adjacent groups, including but not limited to amides, esters, imides, or carbamates. In the case of sulphoxides based on glucosamine and galactosamine, the nature of this protecting group at C-2 is important. This means that the sulfoxide should not only be reactive enough to glycosylate the relatively non-reactive nucleophiles, but the group should be easy enough to allow subsequent derivatization of the amino functionality. Because it should be removed.
【0041】 β−オリゴ糖の合成プロセスの1つの実施形態において、グリコシル受容体を
、溶液中または固相中で、グリコシル供与体(これは、フェニルスルフェニル−
2−デオキシ−2−N−トリフルオロアセトアミド−3,4,6−トリ−O−ア
セチル−β−D−グリコピラノースである)と反応させる。In one embodiment of the process for synthesizing β-oligosaccharides, the glycosyl acceptor is converted to a glycosyl donor (e.g., phenylsulfenyl-
2-deoxy-2-N-trifluoroacetamide-3,4,6-tri-O-acetyl-β-D-glycopyranose).
【0042】 本発明の別の実施形態は、グリコシル供与体(これは、フェニルスルフェニル
−2−デオキシ−2−N−トリフルオロアセトアミド−3,4,6−トリ−O−
アセチル−β−D−グリコピラノースである)の合成プロセスである。これらの
供与体は、もっぱらβ−グリコシドのみを高収率で与えることがわかっている。
その後、トリフルオロアセトアミドを穏和な条件下で除去し、得られた2−アミ
ノ基をアミドとして選択的に誘導体化する。従って、この化学で新規に使用する
この保護基は、スルホキシドグリコシル化法に融通性を付与する。Another embodiment of the present invention is a glycosyl donor, which is a phenylsulfenyl-2-deoxy-2-N-trifluoroacetamide-3,4,6-tri-O-
Acetyl-β-D-glycopyranose). These donors have been found to give exclusively β-glycosides in high yield.
Thereafter, the trifluoroacetamide is removed under mild conditions and the resulting 2-amino group is selectively derivatized as an amide. Thus, this protecting group, which is newly used in this chemistry, provides flexibility to the sulfoxide glycosylation process.
【0043】 本発明のさらに別の実施形態において、 a)グリコサミンハイドロクロライドを、アルカリの存在下で、p−メトキシ
ベンズアルデヒドと反応させて、2−N−p−メトキシ−ベンジリデングリコサ
ミンを形成させ; b)2−N−p−メトキシベンジリデングリコサミンを、ピリジンおよびジメ
チルアミノピリジン(DMAP)の存在下で、無水酢酸を用いてアセチル化し、
O−アセチル化2−N−p−メトキシベンジリデングリコサミンを形成させ; c)p−メトキシベンズアルデヒド基を、アセトン中塩酸を用いて除去し、O
−アセチル化グリコサミンハイドロクロライドを形成させ; d)該O−アセチル化グリコサミンハイドロクロライドを、ピリジンおよび塩
化メチレンの存在下で、無水トリフルオロ酢酸を用いて保護し、O−アセチル化
2−N−トリフルオロアセトアミドグリコピラノースを形成させ; e)O−アセチル化トリフルオロアセトアミドグリコピラノースを、チオフェ
ノール、三フッ化ホウ素エテレートおよび塩化メチレンに供して、フェニル−1
−チオO−アセチル化2−N−トリフルオロアセトアミドグリコピラノースを形
成させ; f)フェニル−1−チオ−O−アセチル化2−N−トリフルオロアセトアミド
を、m−クロロペルオキシ安息香酸と反応させ、対応するフェニルスルフェニル
−2−デオキシ−2−N−トリフルオロアセトアミド−3,4,6−トリ−O−
アセチル−β−D−グリコピラノースを生じさせ; g)該グリコピラノースを回収する 段階を含む、フェニルスルフェニル−2−デオキシ−2−N−トリフルオロアセ
トアミド−3,4,6−トリ−O−アセチル−β−D−グリコピラノースの合成
プロセスを提供する。In yet another embodiment of the present invention: a) reacting glycosamine hydrochloride with p-methoxybenzaldehyde in the presence of an alkali to form 2-Np-methoxy-benzylideneglycosamine. B) acetylating 2-Np-methoxybenzylideneglycosamine with acetic anhydride in the presence of pyridine and dimethylaminopyridine (DMAP);
O-acetylated 2-N-p-methoxybenzylidene glycosamine is formed; c) The p-methoxybenzaldehyde group is removed using hydrochloric acid in acetone and O
To form an acetylated glycosamine hydrochloride; d) protecting the O-acetylated glycosamine hydrochloride with trifluoroacetic anhydride in the presence of pyridine and methylene chloride; E) subjecting the O-acetylated trifluoroacetamidoglycopyranose to thiophenol, boron trifluoride etherate and methylene chloride to give phenyl-1
-Thio-O-acetylated 2-N-trifluoroacetamido glycopyranose; f) reacting phenyl-1-thio-O-acetylated 2-N-trifluoroacetamide with m-chloroperoxybenzoic acid; The corresponding phenylsulfenyl-2-deoxy-2-N-trifluoroacetamido-3,4,6-tri-O-
G) phenylsulfenyl-2-deoxy-2-N-trifluoroacetamide-3,4,6-tri-O-, which comprises the step of producing acetyl-β-D-glycopyranose; A process for the synthesis of acetyl-β-D-glycopyranose is provided.
【0044】 tert−ブチルスルフェニルに相当する物の調製は、同じ様式で、チオフェ
ノール試薬の代わりに、チオtert−ブタノール試薬を使用することにより達
成できる。反応溶媒は、隣接基関与がない場合のグリコシル化の立体選択性に役
割を担う。非極性非プロトン溶媒を使用する場合、α−グリコシド結合形成の選
択性は高まり、一方、プロピオニトリルなどの極性非プロトン溶媒の使用は、β
−グリコシド結合形成の選択性を高める。The preparation of the tert-butylsulphenyl equivalent can be achieved in the same manner by using a thiotert-butanol reagent instead of a thiophenol reagent. The reaction solvent plays a role in the stereoselectivity of glycosylation in the absence of neighboring group participation. When a non-polar aprotic solvent is used, the selectivity of α-glycosidic bond formation increases, while the use of a polar aprotic solvent such as propionitrile increases β
-Increase the selectivity of glycosidic bond formation.
【0045】 グリコシル供与体上の保護基も、グリコシル化反応の立体化学的過程に影響を
及ぼす。グリコシル供与体のC−2中心のエカトリアル位の保護基がトリフルオ
ロアセトアミドである場合、反応に非プロトン非極性溶媒または非プロトン極性
溶媒を使用するかにかかわらず、グリコシル化プロセスでβ−グリコシド結合の
みが形成される。アミノ基の保護基として使用するのに適した多くの官能性が、
T.W.Greene、有機合成の保護基、John Wiley & Son
sに開示されている。適切な保護基は、9−フルオレニルメトキシカルボニル(
Fmoc)などのカルバメート;およびアリルオキシカルボニル(Alloc)
;フタルイミド(Phth)およびテトラクロロフタルイミド(PhthCl4 )などのイミド;またはトリフルオロアセトアミド(TFA)などのアミドを含
む。グリコシル供与体に使用する多くの可能な保護基の中で、本発明者は、TF
Aが予想されなかった利点を与えることを見出した。第一に、対応するグリコシ
ルスルホキシドは、非常に反応性が高く、液相および固相の両方において高いグ
リコシル化収率を与えることが示された。第二に、反応生成物の分析により、β
異性体が形成され、明らかなα異性体の痕跡は全くないことが示された。第三に
、トリフルオロアセトアミド基は、穏和な条件下で脱保護され、対応するアミノ
基はアミドとして誘導体化された。Protecting groups on glycosyl donors also influence the stereochemical course of the glycosylation reaction. If the protecting group at the equatorial position at the C-2 center of the glycosyl donor is trifluoroacetamide, the β-glycosidic bond will be involved in the glycosylation process, regardless of whether an aprotic non-polar or aprotic polar solvent is used in the reaction. Only are formed. Many functionalities suitable for use as protecting groups for amino groups include
T. W. Greene, Protecting Group for Organic Synthesis, John Wiley & Son
s. A suitable protecting group is 9-fluorenylmethoxycarbonyl (
Carbamates such as Fmoc); and allyloxycarbonyl (Alloc)
; Including amides such or trifluoroacetamide (TFA); phthalimide (Phth) and imide such tetrachlorophthalimides (PhthCl 4). Among the many possible protecting groups used for glycosyl donors, the inventors have found that TF
A was found to provide unexpected benefits. First, the corresponding glycosyl sulfoxides were shown to be very reactive, giving high glycosylation yields in both liquid and solid phases. Second, the analysis of the reaction products gives β
The isomer was formed, indicating that there was no obvious trace of the alpha isomer. Third, the trifluoroacetamide group was deprotected under mild conditions and the corresponding amino group was derivatized as an amide.
【0046】 TFA基は、50:50MeOH−THFの無水混合物中LiOHでの処理に
より容易に除去される。この方法は、固相法に適合している。本発明の条件下で
、全ての一般的なエステル基も除去される。アミンは非保護アルコールの存在下
で、選択的にアミドに転換できるので、これは欠点ではない。The TFA group is easily removed by treatment with LiOH in an anhydrous mixture of 50:50 MeOH-THF. This method is compatible with the solid phase method. Under the conditions of the present invention, all common ester groups are also removed. This is not a disadvantage since the amine can be selectively converted to an amide in the presence of an unprotected alcohol.
【0047】 (オリゴ糖を得るための溶液法) オリゴ糖を得るための2つの一般的な方法は、a)天然源からの単離(このア
プローチは、大量に生産される天然に存在するオリゴ糖に限られる);およびb
)酵素または化学合成である。酵素合成は、酵素は高度に特異的であり、一定の
基質しか受け入れることができないため限られている。これに対し、化学合成は
、酵素合成よりも融通がきき、莫大な種類のオリゴ糖を生産する可能性を有する
。化学合成の問題は、それが時間および労働の点で、極めて費用がかかることで
ある。Solution Methods for Obtaining Oligosaccharides Two general methods for obtaining oligosaccharides are: a) isolation from natural sources (this approach involves the production of large quantities of naturally occurring oligosaccharides). Sugars); and b
2.) Enzymes or chemical synthesis. Enzyme synthesis is limited because enzymes are highly specific and can only accept certain substrates. In contrast, chemical synthesis is more versatile than enzyme synthesis and has the potential to produce a vast variety of oligosaccharides. The problem with chemical synthesis is that it is extremely expensive in terms of time and labor.
【0048】 オリゴ糖は、グリコシド連鎖により接続された単糖から形成される。典型的な
オリゴ糖の液相化学合成において、完全に保護されたグリコシル供与体を活性化
し、溶液中でグリコシル受容体(典型的には、非保護ヒドロキシル基を有する別
の単糖)と反応させる。グリコシル化反応それ自体は、使用する方法に応じて、
数分から数日間で、どこでも行うことができる。その後、カップリング生成物を
精製し、化学修飾して、それをグリコシル供与体に転換する。各精製は時間がか
かり、また、かなりの材料の損失につながり得る。新規なグリコシル供与体であ
る二糖を、その後、別のグリコシル受容体にカップリングさせる。その後、生成
物を単離し、前記のように化学修飾する。三糖の合成に、成分の単糖から10以
上の段階が必要となることは珍しいことではない。従って、オリゴ糖合成に関与
する時間および費用は、炭水化物薬物および他の生物医学的な製品の開発の深刻
な障害となっている。[0048] Oligosaccharides are formed from monosaccharides connected by glycosidic linkages. In a typical liquid-phase chemical synthesis of oligosaccharides, a fully protected glycosyl donor is activated and reacted in solution with a glycosyl acceptor, typically another monosaccharide having an unprotected hydroxyl group. . The glycosylation reaction itself depends on the method used,
It can be done anywhere, in minutes to days. Thereafter, the coupling product is purified and chemically modified to convert it to a glycosyl donor. Each purification is time consuming and can lead to considerable material loss. The new glycosyl donor, disaccharide, is then coupled to another glycosyl acceptor. Thereafter, the product is isolated and chemically modified as described above. It is not uncommon for the synthesis of trisaccharides to require 10 or more steps from the component monosaccharide. Thus, the time and expense involved in oligosaccharide synthesis has been a serious obstacle to the development of carbohydrate drugs and other biomedical products.
【0049】 (オリゴ糖の固相合成) オリゴ糖の固相合成は、単離および精製の必要がない。(Solid Phase Synthesis of Oligosaccharides) The solid phase synthesis of oligosaccharides does not require isolation and purification.
【0050】 FrechetおよびSchuerch、J.Am.Chem.Soc.、9
3:492−496(1971)に従って、オリゴ糖の固相合成は、a)C1に
反応性脱離基を有する糖誘導体の使用;b)容易に除去可能な遮断基により保護
された1個のヒドロキシル基;c)安定な遮断基により保護された残りのヒドロ
キシル;およびd)形成されたオリゴ糖誘導体を生成物分解が分解されることな
く、分離することができるレジンを必要とする。[0050] Frechet and Schuerch, J. et al. Am. Chem. Soc. , 9
3: 492-496 (1971), solid phase synthesis of oligosaccharides comprises: a) the use of a sugar derivative having a reactive leaving group at C1; A resin that can separate the hydroxyl group; c) the remaining hydroxyl protected by a stable blocking group; and d) the formed oligosaccharide derivative without degradation of the product degradation.
【0051】 不溶性レジン上でオリゴ糖を合成する以前の試みにより、カップリング収率は
低く、立体化学制御は、特に、β−グリコシド連鎖の作成には不適切であった。
これは明らかに、固相上の反応動力学が、液相の場合よりも遅いためである。E
byおよびSchuerch、Carbohyd.Res.、39:151−1
55(1975)参照。その結果、立体化学制御および収率などの因子が影響を
受ける。FrechetおよびSchuerchは、2つのグリコシル化反応(
これは、両方共、触媒の存在下でアノマーハロゲン化物の置換に関与する)によ
り、溶液中では優先的にβ−アノマーが得られるが、固相上では混合物が得られ
ることを発見した。固相上でβ−グリコシド連鎖を形成するには隣接基関与を使
用する必要があるのだろうと結論づけられた。Previous attempts to synthesize oligosaccharides on insoluble resins have resulted in low coupling yields and stereochemical control was inadequate, especially for the creation of β-glycoside linkages.
This is clearly because the reaction kinetics on the solid phase is slower than in the liquid phase. E
by and Schuerch, Carbohyd. Res. , 39: 151-1
55 (1975). As a result, factors such as stereochemical control and yield are affected. Frechet and Schuerch describe two glycosylation reactions (
It is found that both involve the displacement of anomeric halide in the presence of a catalyst), but preferentially give β-anomers in solution, but give mixtures on solid phase. It was concluded that the formation of β-glycoside linkages on the solid phase would require the use of adjacent group participation.
【0052】 しかし、現存するグリコシル化法は固相には適応できないことが判明した。な
ぜなら、隣接関与基(NPG)はしばしばグリコシル供与体を不活性化するから
である。しばしば、グリコシル供与体は、グリコシル化が起こる前に、レジン混
合物中で分解される。EbyおよびSchuerch、上記を参照。ある場合で
は、レジンもまた、グリコシル化に必要な厳しい条件のために分解されることが
知られている。さらに、多くのエステル型NPGでは、グリコシル供与体からレ
ジン上のグリコシル受容体へのアシル転移にかなりの問題がある。この副反応は
、レジンを覆い、さらなる反応を防ぐ。However, it has been found that existing glycosylation methods cannot be applied to solid phases. This is because adjacent participating groups (NPGs) often inactivate glycosyl donors. Often, the glycosyl donor is broken down in the resin mixture before glycosylation occurs. See Eby and Schuerch, supra. In some cases, resins are also known to degrade due to the harsh conditions required for glycosylation. In addition, many ester-type NPGs have significant problems with acyl transfer from a glycosyl donor to a glycosyl acceptor on the resin. This side reaction covers the resin and prevents further reaction.
【0053】 Frechetは、固相オリゴ糖合成の戦略の実施を試みるにあたり生じる問
題を再検討した。Frechet、有機合成におけるポリマーで支持された反応
、p.407、P.HodgeおよびD.C.Sherrington編、Jo
hn Wiley & Sons、1980参照。Frechet reviewed the issues that arise in attempting to implement a strategy for solid phase oligosaccharide synthesis. Frechet, Polymer Supported Reactions in Organic Synthesis, p. 407, p. Hodge and D.M. C. Sherrington edition, Jo
hn Wiley & Sons, 1980.
【0054】 可溶性レジンは、固相反応に関連した望ましくない反応動態を克服するために
使用した。Douglas et al.、J.Am.Chem.Soc.、1
13:5095(1991)は、コハク酸リンカーを有する可溶性ポリエチレン
グリコールレジンを使用し、ケーニッヒス−クノール反応を使用して、アノマー
立体化学の優れた制御と共に、85〜95%のカップリング収率を達成した。可
溶性レジンは、より「溶液様」環境を与えるので、あるグリコシル化反応には利
点があり得る。しかし、可溶性ポリマー上の段階的合成は、中間体を各段階後に
沈殿させ、別の糖残基をカップリングさせ得る前に、結晶化させる必要がある。[0054] Soluble resin was used to overcome the undesirable reaction kinetics associated with the solid phase reaction. Douglas et al. J. Am. Chem. Soc. , 1
13: 5095 (1991) use a soluble polyethylene glycol resin with a succinic acid linker and use the Koenigs-Knoll reaction to achieve 85-95% coupling yields with excellent control of anomeric stereochemistry. Achieved. Certain glycosylation reactions may be advantageous because soluble resins provide a more "solution-like" environment. However, stepwise synthesis on a soluble polymer requires that the intermediate be precipitated after each step and crystallized before another sugar residue can be coupled.
【0055】 従って、迅速で、効率的で、高収率なオリゴ糖の固相合成を提供する、グリコ
シル化法が必要とされる。Thus, there is a need for a glycosylation method that provides for rapid, efficient, and high yield solid phase synthesis of oligosaccharides.
【0056】 (溶液中でのグリコシド連鎖の形成) アノマー位にアルキルまたはアリールスルホキシドを有するグリコシル供与体
、および、1つ以上の遊離ヒドロキシルおよび/または他の求核基(例えばアミ
ン)および/またはシリルエーテル保護ヒドロキシルを有するグリコシル受容体
を、反応容器中で化合させる。Glycoside Linkage Formation in Solution Glycosyl donors with alkyl or aryl sulfoxides at the anomeric position, and one or more free hydroxyl and / or other nucleophilic groups (eg, amines) and / or silyl A glycosyl acceptor having an ether-protected hydroxyl is combined in the reaction vessel.
【0057】 グリコシル供与体は、C−2位でTFAなどの適切な保護基により遮断され、
1,2−トランスグリコシド結合が得られる。The glycosyl donor is blocked at the C-2 position by a suitable protecting group such as TFA,
A 1,2-transglycoside linkage is obtained.
【0058】 グリコシル供与体と受容体の混合物を、無水条件下、非求核溶媒(これは、ト
ルエン、エーテル、テトラヒドロフラン(THF)、塩化メチレン、クロロホル
ム、プロピオニトリル、酢酸エチルまたはその混合物を含むがこれに限定されな
い)に溶かす。溶媒の選択は、隣接基関与のない反応におけるグリコシル化の立
体化学結果に影響を及ぼすことが判明した。一般に、所与の供与体/受容体対に
おいて、トルエンなどの非極性溶媒の使用により、α−異性体がより高い比率で
形成され、一方、プロピオニトリルなどの、より極性の高い溶媒の使用により、
β−アノマーがより高い比率で形成される。The mixture of glycosyl donor and acceptor can be prepared under anhydrous conditions using a non-nucleophilic solvent, including toluene, ether, tetrahydrofuran (THF), methylene chloride, chloroform, propionitrile, ethyl acetate or a mixture thereof. Is not limited to this). The choice of solvent was found to affect the stereochemical consequences of glycosylation in reactions without neighboring group involvement. In general, for a given donor / acceptor pair, the use of a non-polar solvent, such as toluene, results in the formation of a higher proportion of α-isomers, while the use of a more polar solvent, such as propionitrile. By
The β-anomer is formed in a higher proportion.
【0059】 さらに、本発明の別の実施形態において、ライブラリー(これは生物学的活性
についてスクリーニングされ得る)創製のために、化学的に多様なオリゴ糖また
はグリココンジュゲート生成物の混合物を製造するために、反応混合物中にいく
つかの異なる型の糖を含めることが望ましくあり得る。Further, in another embodiment of the present invention, a mixture of chemically diverse oligosaccharide or glycoconjugate products is produced for the creation of a library, which can be screened for biological activity. In order to do so, it may be desirable to include several different types of sugars in the reaction mixture.
【0060】 (固相上でのグリコシド連鎖の形成) グリコシル受容体は、不溶性支持体(以後レジンと称する)に、グリコシド連
鎖に傷害を及ぼさない条件を使用して合成の終わりに容易に切断できる連鎖を通
して付着させる。レジンは、有機溶媒中で膨潤する任意の不溶性ポリマーであり
得、グリコシル受容体付着部位を有する。好適なレジンは、ポリスチレンレジン
、例えば、メリフィールドレジン、およびPEG誘導体化ポリスチレンレジン、
例えばテンタゲル(TentaGel)(登録商標)レジンを含むが、これに限
定されない。連鎖の型は、ポリマー相上およびグリコシル受容体上で利用できる
官能基部位の型に依存する。Glycosidic Linkage Formation on Solid Phase Glycosyl receptors can be readily cleaved at the end of synthesis using conditions that do not damage the glycosidic linkage on the insoluble support (hereinafter referred to as resin). Attach through the chain. The resin can be any insoluble polymer that swells in an organic solvent and has a glycosyl receptor attachment site. Suitable resins are polystyrene resins, such as Merrifield resin, and PEG-derivatized polystyrene resins,
Examples include, but are not limited to, TentaGel® resin. The type of linkage depends on the type of functional group available on the polymer phase and on the glycosyl acceptor.
【0061】 グリコシル受容体は、反応性ヒドロキシル、アミンおよび/またはチオールを
含む、1個以上の反応性求核剤を有する任意の分子であり得、ただし、それはレ
ジンの付着に適した部位も有する。反応性求核剤は、遊離求核剤、またはグリコ
シル受容体がレジンに付着すれば容易に除去できる一時的保護基をもつ求核剤で
ある。グリコシル受容体は永久的保護求核剤を有してもよく、これは、一時的保
護基の除去に使用した条件下で脱保護できない求核剤である。グリコシル受容体
は、糖でも、またはステロイド、アミノ酸またはペプチド、極性脂質、多環式芳
香族化合物、マクロライド、天然物等を含むがこれに限定されない、いくつかの
他の求核剤を有する分子でもよい。リンクアミドポリスチレン上に固定する好適
な受容体(13〜15)を図3に示す。任意の位置での選択的な保護および脱保
護が可能な糖の保護基スキームは公知である。例えば、Brinkley、現代
炭水化物化学、Marcel Dekker,Inc.:ニューヨーク(198
8)。A glycosyl receptor can be any molecule having one or more reactive nucleophiles, including reactive hydroxyls, amines and / or thiols, provided that it also has suitable sites for resin attachment . Reactive nucleophiles are free nucleophiles or nucleophiles with temporary protecting groups that can be easily removed once the glycosyl receptor is attached to the resin. Glycosyl receptors may have permanent protected nucleophiles, which are nucleophiles that cannot be deprotected under the conditions used to remove the temporary protecting groups. Glycosyl receptors can also be sugars or molecules with some other nucleophiles, including but not limited to steroids, amino acids or peptides, polar lipids, polycyclic aromatic compounds, macrolides, natural products, etc. May be. Suitable receptors (13-15) for immobilization on link amide polystyrene are shown in FIG. Sugar protecting group schemes that allow selective protection and deprotection at any position are known. See, for example, Brinkley, Modern Carbohydrate Chemistry, Marcel Dekker, Inc. : New York (198
8).
【0062】 潜在的に反応性の求核剤をレジンに付着させた後、必要であれば選択的に脱保
護する。After attaching the potentially reactive nucleophile to the resin, it is optionally deprotected, if necessary.
【0063】 全ての引用した特許、出版物および文献を参考により本明細書に組込む。以下
の特定の例は、本発明を実施する様々な態様において、読者を補佐するために提
供される。これらの具体的な例は単に例示的なものであり、以下の何れの記載も
、決して本発明を限定するものと解釈するべきではない。[0063] All cited patents, publications and literature are incorporated herein by reference. The following specific examples are provided to assist the reader in various aspects of practicing the invention. These specific examples are merely illustrative, and nothing in the following should be construed as limiting the invention in any way.
【0064】 (例) グリコシルスルホキシド供与体の合成 フェニルスルフェニル2−デオキシ−2−N−トリフルオロアセトアミドグリ
コピラノースは、図1および2に示したように、市販で入手可能なグルコサミン
およびガラクトサミンハイドロクロライドから合成される。どちらの合成も、マ
ルチグラムスケールで実施する。対応するスルホキシドは、市販で入手可能な糖
から容易に合成でき、室温で数週間安定である。Example Synthesis of Glycosyl Sulfoxide Donor Phenylsulfenyl 2-deoxy-2-N-trifluoroacetamidoglycopyranose was obtained from commercially available glucosamine and galactosamine hydrochlorides, as shown in FIGS. Synthesized from Both syntheses are performed on a multigram scale. The corresponding sulfoxide can be easily synthesized from commercially available sugars and is stable for several weeks at room temperature.
【0065】 例1 フェニルスルフェニル−2−デオキシ−2−N−トリフルオロアセトア
ミド−3,4,6−トリ−O−アセチル−β−D−グルコピラノース(6)の合
成 2−N−p−メトキシベンジリデン−β−D−グルコサミン(1) 方法は、Bergman,M,およびZervas,L.、Chem.Ber
.1931、975から採用した。グルコサミンハイドロクロライド(50g;
0.232モル)を240mLの1M水酸化ナトリウム水に溶かすと、無色溶液
が形成される。アニスアルデヒド(28.5mL;0.235モル)を、強く撹
拌しながらシリンジを介して加えると、濁った溶液が形成される。数分間撹拌し
た後、白色の沈殿物が形成される。系を氷浴中に1時間おき、完全に沈殿させる
。その後、固体を濾過により集め、水(2×200mL)およびメタノールとエ
ーテルの1:1混合物(2×200mL)で連続的に洗浄する。沈殿物を真空下
で一晩乾燥させると、1(50g;72%収率)が得られる。1H NMR(3
00MHz、DMSO−d6):δ8.17(s、1H)、7.74(d、2H
、J=8.1Hz)、7.04(d、2H、J=7.8Hz)、6.60(d、
1H、J=6.6Hz)、4.99(d、1H、J=4.5Hz)、4.88(
d、1H、J=4.8Hz)、4.75(d、1H、J=7.2Hz)、4.6
2(t、1H、J=5.4Hz)、3.85(s、3H)、3.69(dd、1
H、J=5.4、11.1Hz)、3.58−3.42(m、2H)、3.32
−3.16(m、2H)、2.85(t、1H、J=8.7Hz)。13C N
MR(75.4MHz、DMSO−d6):δ161.24、161.06、1
29.65、129.11、113.91、95.64、78.21、76.8
8、74.61、70.36、61.27、55.29。C14H19NO6(
297.31)の元素分析:C、56.56%;H、6.44%;N、4.71
%。実測値:C、55.97%;H、6.38%;N、4.56%。融点148
〜150℃(分解)。Example 1 Synthesis of phenylsulfenyl-2-deoxy-2-N-trifluoroacetamido-3,4,6-tri-O-acetyl-β-D-glucopyranose (6) 2-Np- Methoxybenzylidene-β-D-glucosamine (1) The method is described in Bergman, M, and Zervas, L .; Chem. Ber
. Adopted from 1931 and 975. Glucosamine hydrochloride (50 g;
(0.232 mol) is dissolved in 240 mL of 1 M aqueous sodium hydroxide to form a colorless solution. Anisaldehyde (28.5 mL; 0.235 mol) is added via syringe with vigorous stirring to form a cloudy solution. After stirring for a few minutes, a white precipitate forms. The system is left in an ice bath for 1 hour to completely settle. The solid is then collected by filtration and washed successively with water (2 × 200 mL) and a 1: 1 mixture of methanol and ether (2 × 200 mL). The precipitate is dried under vacuum overnight to give 1 (50 g; 72% yield). 1 H NMR (3
00 MHz, DMSO-d 6 ): δ 8.17 (s, 1H), 7.74 (d, 2H)
, J = 8.1 Hz), 7.04 (d, 2H, J = 7.8 Hz), 6.60 (d,
1H, J = 6.6 Hz), 4.99 (d, 1H, J = 4.5 Hz), 4.88 (
d, 1H, J = 4.8 Hz), 4.75 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 4.6
2 (t, 1H, J = 5.4 Hz), 3.85 (s, 3H), 3.69 (dd, 1
H, J = 5.4, 11.1 Hz), 3.58-3.42 (m, 2H), 3.32
-3.16 (m, 2H), 2.85 (t, 1H, J = 8.7 Hz). 13 CN
MR (75.4 MHz, DMSO-d 6 ): δ161.24, 161.06, 1
29.65, 129.11, 113.91, 95.64, 78.21, 76.8
8, 74.61, 70.36, 61.27, 55.29. C 14 H 19 NO 6 (
297.31) Elemental analysis: C, 56.56%; H, 6.44%; N, 4.71.
%. Found: C, 55.97%; H, 6.38%; N, 4.56%. Melting point 148
150150 ° C. (decomposition).
【0066】 2−デオキシ−2−N−p−メトキシベンジリデン−1,3,4,6−テトラ−
O−アセチル−β−D−グルコピラノース(2) 1(50g;0.168モル)を、氷水浴中で、無水酢酸(150mL;1.
59モル)、ピリジン(270mL;3.34モル)およびDMAP(0.5g
)で処理する。固体はゆっくりと溶液になり、反応混合物を室温で一晩放置する
。溶液を1.5Lの氷に注ぐと、白色の結晶状固体が形成される。結晶を濾過に
より集め、水(2×100mL)およびエーテル(2×100mL)で洗浄し、
真空下で乾燥させると、2(60g;77%収率)が得られる。TLC Rf=
0.45(50%酢酸エチル−ヘキサン)。1H NMR(300MHz、CD
Cl3):δ8.15(s、1H)、7.64(d、2H、J=8.4Hz)、
6.91(d、2H、J=8.7Hz)、5.94(d、1H、J=8.1Hz
)、5.42(t、1H、J=9.3Hz)、5.14(t、1H、J=9.6
Hz)、4.37(dd、1H、J=4.5、12.3Hz)、4.12(dd
、1H、J=2.1、12.6Hz)、3.97(ddd、1H、J=2.4、
4.8、9.6Hz)、3.84(s、3H)、3.44(t、1H、J=9.
6Hz)、2.10(s、3H)、2.03(s、3H)、2.01(s、3H
)、1.88(s、3H)。13C NMR(75.4MHz、CDCl3):
δ170.69、169.89、169.54、168.77、164.27、
162.26、130.22、128.24、114.02、93.12、73
.20、72.91、72.72、67.98、61.78、55.39、20
.79、20.67、20.49(br)。IR(ニート、cm−1):294
8、2869、1752、1640、1606、1508、1372、1223
、1039。C22H27NO10のFAB+:[MH]計算値m/z466、
実測値m/z466;[MNa]計算値m/z488、実測値m/z488。C 22 H27NO10(465.46)の元素分析:C、56.77%;H、5.
85%;N、3.01%。実測値:C、56.56%;H、5.90%;N、2
.99%。融点168〜172℃(分解)。2-deoxy-2-Np-methoxybenzylidene-1,3,4,6-tetra-
O-acetyl-β-D-glucopyranose (2) 1 (50 g; 0.168 mol) was added to acetic anhydride (150 mL;
59 mol), pyridine (270 mL; 3.34 mol) and DMAP (0.5 g)
). The solid slowly goes into solution and the reaction mixture is left at room temperature overnight
. When the solution is poured onto 1.5 L of ice, a white crystalline solid is formed. Crystals for filtration
Collected and washed with water (2 × 100 mL) and ether (2 × 100 mL),
Drying under vacuum gives 2 (60 g; 77% yield). TLCRf=
0.45 (50% ethyl acetate-hexane).11 H NMR (300 MHz, CD
Cl3): Δ 8.15 (s, 1H), 7.64 (d, 2H, J = 8.4 Hz),
6.91 (d, 2H, J = 8.7 Hz), 5.94 (d, 1H, J = 8.1 Hz)
), 5.42 (t, 1H, J = 9.3 Hz), 5.14 (t, 1H, J = 9.6)
Hz), 4.37 (dd, 1H, J = 4.5, 12.3 Hz), 4.12 (dd
, 1H, J = 2.1, 12.6 Hz), 3.97 (ddd, 1H, J = 2.4,
4.8, 9.6 Hz), 3.84 (s, 3H), 3.44 (t, 1H, J = 9.
6 Hz), 2.10 (s, 3H), 2.03 (s, 3H), 2.01 (s, 3H)
), 1.88 (s, 3H).13C NMR (75.4 MHz, CDCl3):
δ 170.69, 169.89, 169.54, 168.77, 164.27,
162.26, 130.22, 128.24, 114.02, 93.12, 73
. 20, 72.91, 72.72, 67.98, 61.78, 55.39, 20
. 79, 20.67, 20.49 (br). IR (neat, cm-1): 294
8, 2869, 1752, 1640, 1606, 1508, 1372, 1223
, 1039. C22H27NO10FAB + of [MH] calculated m / z 466;
Found m / z 466; [MNa] Calculated m / z 488, Found m / z 488. C 22 H27NO10Elemental analysis for (465.46): C, 56.77%;
85%; N, 3.01%. Found: C, 56.56%; H, 5.90%; N, 2
. 99%. Melting point 168-172 [deg.] C (decomposition).
【0067】 2−デオキシ−2−アミノ−1,3,4,6−テトラ−O−アセチル−β−D−
グルコピラノシルハイドロクロライド(3) 2(50g;0.108モル)を250mLの還流アセトンに溶かし、この溶
液に25mLの5N HClを滴下して加える。5分後に、白色の厚い沈殿物が
形成され、系を室温に冷却する。沈殿物を濾過し、アセトン(100mL)およ
びエーテル(2×250mL)で洗浄する。粗生成物3を真空下で一晩乾燥させ
ると、41.8g(定量的)が得られる。1H NMR(300MHz、DMS
O−d6):δ8.93(s、br、2.6H)、5.97(d、1H、J=8
.7Hz)、5.42(t、1H、J=9.9Hz)、4.99(t、1H、J
=9.3Hz)、4.25(dd、1H、J=3.9、12Hz)、4.11−
4.03(m、2H)、3.62(t、1H、J=9.3Hz)、2.23(s
、3H)、2.09(s、3H)、2.05(s、3H)、2.03(s、3H
)。13C NMR(75.4MHz、DMSO−d6):δ169.98、1
69.78、169.32、168.67、90.08、71.59、70.3
1、67.76、61.25、52.11、20.97、20.88、20.5
1、20.37。IR(ニート、cm−1):2805、2745、2683、
1757、1595、1519、1366、1247、1208、1084、1
060、1040。C14H27NO9ClのFAB+:[M−Cl]計算値m
/z348、実測値m/z348;[MNa−HCl]計算値m/z370、実
測値m/z370。C14H22NO9Cl(383.78)の元素分析:C、
43.81%;H、5.78%:N、3.65%;Cl、9.24%。実測値:
C、43.80%;H、5.80%;N、3.57%;Cl、9,15%。融点
>200℃。2-Deoxy-2-amino-1,3,4,6-tetra-O-acetyl-β-D-
Glucopyranosyl hydrochloride (3) 2 (50 g; 0.108 mol) is dissolved in 250 mL of refluxing acetone and 25 mL of 5N HCl is added dropwise to this solution. After 5 minutes, a thick white precipitate forms and the system is cooled to room temperature. Filter the precipitate and wash with acetone (100 mL) and ether (2 × 250 mL). Drying the crude product 3 under vacuum overnight gives 41.8 g (quant.). 1 H NMR (300 MHz, DMS
O-d 6): δ8.93 ( s, br, 2.6H), 5.97 (d, 1H, J = 8
. 7 Hz), 5.42 (t, 1H, J = 9.9 Hz), 4.99 (t, 1H, J
= 9.3 Hz), 4.25 (dd, 1H, J = 3.9, 12 Hz), 4.11-
4.03 (m, 2H), 3.62 (t, 1H, J = 9.3 Hz), 2.23 (s
, 3H), 2.09 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.03 (s, 3H)
). 13 C NMR (75.4 MHz, DMSO-d 6 ): δ 169.98, 1
69.78, 169.32, 168.67, 90.08, 71.59, 70.3
1, 67.76, 61.25, 52.11, 20.97, 20.88, 20.5
1, 20.37. IR (neat, cm -1 ): 2805, 2745, 2683,
1757, 1595, 1519, 1366, 1247, 1208, 1084, 1
060, 1040. C 14 H 27 NO 9 Cl in FAB +: [M-Cl] calcd m
/ Z 348, found m / z 348; [MNa-HCl] calculated m / z 370, found m / z 370. C 14 H 22 NO 9 elemental analysis of Cl (383.78): C,
43.81%; H, 5.78%: N, 3.65%; Cl, 9.24%. Measured value:
C, 43.80%; H, 5.80%; N, 3.57%; Cl, 9,15%. Melting point> 200 ° C.
【0068】 2−デオキシ−2−N−トリフルオロアセトアミド−1,3,4,6−テトラ−
O−アセチル−β−D−グルコピラノース(4) 3(41.6g;0.108モル)を、ピリジン(90mL;1.11モル)
および塩化メチレン(90mL)に懸濁する。無水トリフルオロ酢酸(18.5
mL;0.131モル)をゆっくりとシリンジを介して加える。固体は、温度の
僅かな上昇と共にゆっくりと溶液になる。反応混合物を真空で濃縮して乾燥させ
る。残渣を100mLの塩化メチレンに溶かし、2N HCl(1×100mL
)、NaHCO3水(2×100mL)および食塩水(1×50mL)で洗浄し
、無水Na2SO4で乾燥させる。透明な溶液を濃縮して乾燥させると、オフイ
エローの固体4(48.5g;定量的)が得られる。TLC Rf=0.47(
50%酢酸エチル−ヘキサン)。1H NMR(300MHz、CDCl3):
δ7.24(d、1H、J=9.0Hz)、5.75(d、1H、J=9.0H
z)、5.31(t、1H、J=10.0Hz)、5.13(t、1H、J=9
.6Hz)、4.35(q、1H、J=9.9Hz)、4.27(dd、1H、
J=4.8、12.6Hz)、4.15(dd、1H、J=2.1、12.6H
z)、3.90(ddd、1H、J=2.1、4.8、9.9Hz)、2.12
(s、3H)、2.10(s、3H)、2.06(s、3H)、2.05(s、
3H)。13C NMR(75.4MHz、CDCl3):δ171.67、1
70.67、169.43、169.34、157.50(J=38Hz)、1
15.51(J=286Hz)、91.78、72.95、72.00、67.
76、61.54、53.15、20.67−20.37(br)。IR(ニー
ト、cm−1):3326、3100、2952;1748、1560、137
4、1219、1079、1042。C16H20NO10F3のFAB+:[
MNa]計算値m/z466、実測値m/z466。C16H20NO10F3 (443.33)の元素分析:C、43.35%;H、4.55%;N、3.1
6%。実測値:C、43.16%;H、4.51%;N、3.15%。2-deoxy-2-N-trifluoroacetamide-1,3,4,6-tetra-
O-acetyl-β-D-glucopyranose (4) 3 (41.6 g; 0.108 mol) was added to pyridine (90 mL; 1.11 mol).
And suspended in methylene chloride (90 mL). Trifluoroacetic anhydride (18.5)
mL; 0.131 mol) is added slowly via syringe. The solid slowly goes into solution with a slight increase in temperature. The reaction mixture is concentrated in vacuo and dried. The residue was dissolved in 100 mL of methylene chloride and 2N HCl (1 × 100 mL)
), Washed with aqueous NaHCO 3 (2 × 100 mL) and brine (1 × 50 mL), dried over anhydrous Na 2 SO 4. The clear solution is concentrated and dried to give off-yellow solid 4 (48.5 g; quantitative). TLC R f = 0.47 (
50% ethyl acetate-hexane). 1 H NMR (300 MHz, CDCl 3 ):
δ 7.24 (d, 1H, J = 9.0 Hz), 5.75 (d, 1H, J = 9.0 H)
z), 5.31 (t, 1H, J = 10.0 Hz), 5.13 (t, 1H, J = 9)
. 6 Hz), 4.35 (q, 1H, J = 9.9 Hz), 4.27 (dd, 1H,
J = 4.8, 12.6 Hz), 4.15 (dd, 1H, J = 2.1, 12.6H)
z), 3.90 (ddd, 1H, J = 2.1, 4.8, 9.9 Hz), 2.12
(S, 3H), 2.10 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.05 (s,
3H). 13 C NMR (75.4 MHz, CDCl 3 ): δ 171.67, 1
70.67, 169.43, 169.34, 157.50 (J = 38 Hz), 1
15.51 (J = 286 Hz), 91.78, 72.95, 72.00, 67.
76, 61.54, 53.15, 20.67-20.37 (br). IR (neat, cm- 1 ): 3326, 3100, 2952; 1748, 1560, 137
4, 1219, 1079, 1042. FAB + for C 16 H 20 NO 10 F 3 :
MNa] Calculated m / z 466, found m / z 466. C 16 H 20 NO 10 F elemental analysis of 3 (443.33): C, 43.35 %; H, 4.55%; N, 3.1
6%. Found: C, 43.16%; H, 4.51%; N, 3.15%.
【0069】 フェニル−1−チオ−2−デオキシ−2−N−トリフルオロアセトアミド−3,
4,6−トリ−O−アセチル−β−D−グルコピラノース(5) 4(48.25g;0.109モル)を、400mLの無水塩化メチレンに溶
かし、チオフェノール(17mL;0.166モル)および三フッ化ホウ素エテ
レート(42mL;0.331モル)で処理する。反応混合物を一晩室温で放置
し、その後、100mLの飽和NaHCO3水、100mLのNa2CO3水、
および50mLの食塩水の溶液に注ぐ。有機層をさらに50mLの飽和NaHC
O3水および50mLのNa2CO3水の混合物で洗浄する。有機層を無水Na 2 SO4で乾燥させ、真空下で濃縮する。得られた固体を300mLの沸騰ヘキ
サンで洗浄し、濾過する。濾液をさらに300mLの氷水ヘキサンで洗浄し、真
空で乾燥させると、5(49.2g;92%収率)が得られる。TLC Rf=
0.54(50%酢酸エチル−ヘキサン)。1H NMR(300MHz、CD
Cl3):δ7.51−7.48(m、2H)、7.33−7.26(m、3H
)、7.02(d、1H、J=9.3Hz)、5.28(t、1H、J=9.9
Hz)、5.03(t、1H、J=9.6Hz)、4.78(d、1H、J=1
0.2Hz)、4.22−4.13(m、2H)、4.08(q、1H、J=1
0.2Hz)、3.78(m、1H)、2.08(s、3H)、2.00(s、
3H)、1.93(s、3H)。13C NMR(75.4MHz、CDCl3 ):δ168.32、167.55、166.15、154.03(q、J=3
8Hz)、130.38、128.02、125.95、125.68、112
.46(q、J=288Hz)、82.87、72.82、70.23、65.
13、59.12、50.12、17.64、17.34、17.29。IR(
ニート、cm−1):3302、3103、2951、2879、1748、1
706、1557、1371、1217、1178、1077、1037。C2 0 H22NO8F3のFAB+:[MNa]計算値m/z516、実測値m/z
516。融点178〜180℃(分解)。Phenyl-1-thio-2-deoxy-2-N-trifluoroacetamido-3,
4,6-Tri-O-acetyl-β-D-glucopyranose (5) 4 (48.25 g; 0.109 mol) was dissolved in 400 mL of anhydrous methylene chloride.
Sulfur, thiophenol (17 mL; 0.166 mol) and boron trifluoride
Treat with rate (42 mL; 0.331 mol). Leave the reaction mixture at room temperature overnight
And then 100 mL of saturated NaHCO3Water, 100 mL of Na2CO3water,
And pour into 50 mL of saline solution. The organic layer was further washed with 50 mL of saturated NaHC
O3Water and 50 mL of Na2CO3Wash with a mixture of water. The organic layer was dried over anhydrous Na 2 SO4And concentrated under vacuum. The obtained solid is quenched with 300 mL boiling water.
Wash with sun and filter. The filtrate was further washed with 300 mL of ice water hexane,
Drying in the air gives 5 (49.2 g; 92% yield). TLCRf=
0.54 (50% ethyl acetate-hexane).11 H NMR (300 MHz, CD
Cl3): Δ 7.51-7.48 (m, 2H), 7.33-7.26 (m, 3H)
), 7.02 (d, 1H, J = 9.3 Hz), 5.28 (t, 1H, J = 9.9)
Hz), 5.03 (t, 1H, J = 9.6 Hz), 4.78 (d, 1H, J = 1
0.2Hz), 4.22-4.13 (m, 2H), 4.08 (q, 1H, J = 1
0.2Hz), 3.78 (m, 1H), 2.08 (s, 3H), 2.00 (s,
3H), 1.93 (s, 3H).13C NMR (75.4 MHz, CDCl3 ): Δ 168.32, 167.55, 166.15, 154.03 (q, J = 3
8 Hz), 130.38, 128.02, 125.95, 125.68, 112
. 46 (q, J = 288 Hz), 82.87, 72.82, 70.23, 65.
13, 59.12, 50.12, 17.64, 17.34, 17.29. IR (
Neat, cm-1): 3302, 3103, 2951, 2879, 1748, 1
706, 1557, 1371, 1217, 1178, 1077, 1037. C2 0 H22NO8F3FAB +: [MNa] calculated m / z 516, measured m / z
516. Melting point 178-180 [deg.] C (decomposition).
【0070】 フェニルスルフェニル−2−デオキシ−2−N−トリフルオロアセトアミド−3
,4,6−トリ−O−アセチル−β−D−グルコピラノース(6) 4(49g;0.099モル)を500mLのCH2Cl2に溶かし、−78
℃に冷却する。重炭酸ナトリウム(0.5g)およびmCPBA(26.3g;
68.7%純粋:0.104モル)を加え、温度をゆっくりと−25℃に上昇さ
せる。反応が進行するにつれて、生成物は溶液から沈殿する。反応がTLCによ
り完了したと判定されると、1mL硫化ジメチルでクエンチし、室温に到達させ
る。反応混合物を200mLの水、200mLのNaHCO3水および100m
LのCH2Cl2で希釈する。有機層を100mLのNa2CO3水および10
0mLの食塩水の混合物で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、真空下で濃縮
する。固体を300mLの熱エーテルで洗浄し、濾過し、さらに300mLの氷
冷エーテルで洗浄し、真空下で乾燥させると、5(48g;95%収率)が得ら
れる。TLC Rf=0.15−0.26(50%酢酸エチル−ヘキサン)。1 H NMR(300MHz、CDCl3、5:1比のジアステレオ異性体):δ
8.37(d、0.16H、J=7.8Hz)、7.83(d、0.84H、J
=8.7Hz)、7.68−7.41(m、5H)、5.65(t、0.16H
、J=9.9Hz)、5.45(t、0.84H、J=9.6Hz)、5.02
(t、0.16H、J=9.9Hz)、4.96−4.88(m、1.84Hz
)、4.21−3.94(m、3H)、3.81(ddd、0.84H、J=2
.7、3.9、10.2Hz)、3.68(ddd、0.16H、J=2.4、
6.0、9.6Hz)、2.22−1.93(m、9H)。13C NMR(7
5.4MHz、CDCl3、5:1比のジアステレオ異性体):δ170.76
、170.42、169.33、157.27(q、J=38Hz)、137.
42、137.00、131.970、131.88、129.08、125.
60、125.40、115.23(q、J=288Hz)、92.03、88
.52、76.75、76.28、72.30、71.53、68.23、67
.58、61.81、61.33、51.51、50.17、20.60、20
.49、20.37。IR(ニート、cm−1):3232、3070、295
5、1750、1372、1222、1182、1110、1037。C20H 27 NSO9F3のFAB+:[MNa]計算値m/z532、実測値m/z5
32。C20H22NSO9F3(509.45)の元素分析:C、47.15
%;H、4.35%;N、2.75%;S、6.29%。実測値:C、47.0
2%;H、4.34%;N、2.70%;S、6.21%。融点134〜140
℃(分解)。Phenylsulfenyl-2-deoxy-2-N-trifluoroacetamido-3
, 4,6-Tri-O-acetyl-β-D-glucopyranose (6) 4 (49 g; 0.099 mol) in 500 mL of CH2Cl2Melted into -78
Cool to ° C. Sodium bicarbonate (0.5 g) and mCPBA (26.3 g;
68.7% pure: 0.104 mol) and slowly raise the temperature to -25 ° C.
Let As the reaction proceeds, the product precipitates out of solution. Reaction by TLC
Quenched with 1 mL dimethyl sulfide and allowed to reach room temperature
You. The reaction mixture was washed with 200 mL of water, 200 mL of NaHCO3Water and 100m
L CH2Cl2Dilute with. The organic layer was washed with 100 mL of Na2CO3Water and 10
Wash with a mixture of 0 mL saline and dry2SO4And concentrated under vacuum
I do. Wash the solid with 300 mL hot ether, filter and add another 300 mL ice
Wash with cold ether and dry under vacuum to give 5 (48 g; 95% yield).
It is. TLCRf= 0.15-0.26 (50% ethyl acetate-hexane).1 1 H NMR (300 MHz, CDCl35: 1 ratio of diastereoisomers): δ
8.37 (d, 0.16H, J = 7.8 Hz), 7.83 (d, 0.84H, J
= 8.7 Hz), 7.68-7.41 (m, 5H), 5.65 (t, 0.16H)
, J = 9.9 Hz), 5.45 (t, 0.84 H, J = 9.6 Hz), 5.02
(T, 0.16H, J = 9.9Hz), 4.96-4.88 (m, 1.84Hz
), 4.21-3.94 (m, 3H), 3.81 (ddd, 0.84H, J = 2)
. 7, 3.9, 10.2 Hz), 3.68 (ddd, 0.16H, J = 2.4,
6.0, 9.6 Hz), 2.22-1.93 (m, 9H).13C NMR (7
5.4 MHz, CDCl35: 1 ratio of diastereoisomers): δ 170.76
, 170.42, 169.33, 157.27 (q, J = 38 Hz), 137.
42, 137.00, 131.970, 131.88, 129.08, 125.
60, 125.40, 115.23 (q, J = 288 Hz), 92.03, 88
. 52, 76.75, 76.28, 72.30, 71.53, 68.23, 67
. 58, 61.81, 61.33, 51.51, 50.17, 20.60, 20
. 49, 20.37. IR (neat, cm-1): 3232, 3070, 295
5, 1750, 1372, 1222, 1182, 1110, 1037. C20H 27 NSO9F3FAB +: [MNa] calculated value m / z 532, measured value m / z 5
32. C20H22NSO9F3Elemental analysis for (509.45): C, 47.15
%; H, 4.35%; N, 2.75%; S, 6.29%. Found: C, 47.0
H, 4.34%; N, 2.70%; S, 6.21%. 134-140
° C (decomposition).
【0071】 図1は、化合物(6)に至る合成スキームを示す。FIG. 1 shows a synthetic scheme leading to compound (6).
【0072】 例2 フェニルスルフェニル−2−デオキシ−2−N−トリフルオロアセトア
ミド−3,4,6−トリ−O−アセチル−β−D−ガラクトピラノース(12)
の合成 2−N−p−メトキシベンジリデン−β−D−ガラクトサミン(7) 方法は、Bergman,M,およびZervas,L.、Chem.Ber
.1931、975から採用する。ガラクトサミンハイドロクロライド(5.0
g;215.64g/モル;23.2ミリモル)を24mLの1M水酸化ナトリ
ウム水(24ミリモル)に溶かすと、無色溶液が形成される。アニスアルデヒド
(2.85mL;3.2g;136g/モル;ρ1.119;23.5モル)を
強く撹拌しながらシリンジを介して加えると、濁った溶液が形成される。数分間
撹拌した後、白色の沈殿物が形成される。系を氷浴中に1時間おき、完全に沈殿
させる。その後、固体を濾過により集め、水(100mL)およびメタノールと
エーテルの1:1混合物(2×25mL)で洗浄する。沈殿物を真空下で一晩乾
燥させると、7(4.5g;297g/モル)が得られる。1H NMR(30
0MHz、DMSO−d6):δ8.18(s、1H)、7.73(d、2H、
J=8.7Hz)、7.04(d、2H、J=8.7Hz)、6.52(d、1
H、J=6.9Hz)、4.72−4.67(m、2H)、4.61(d、1H
、J=6.9Hz)、4.53(d、1H、J=4.5Hz)、3.85(s、
3H)、3.73(t、1H、J=3.9Hz)、3.67−3.49(m、4
H)、3.15(t、1H、J=7.8Hz)。13C NMR(75.4MH
z、DMSO−d6):161.21、160.97、129.54、129.
20、113.88、96.15、75.15、74.51、71.62、67
.18、60.79、55.28。C14H19NO6のES−MS:[MH] + 計算値m/z298、実測値m/z298;[M−H]−計算値m/z296
、実測値296。C14H19NO6(297.31)の元素分析:C、56.
56%;H、6.44%;N、4.71%。実測値:C、55.46%;H、6
.42%;N、4.58%。Example 2 Phenylsulfenyl-2-deoxy-2-N-trifluoroacetoa
Mido-3,4,6-tri-O-acetyl-β-D-galactopyranose (12)
2-Np-methoxybenzylidene-β-D-galactosamine (7) The method was described by Bergman, M, and Zervas, L. Chem. Ber
. Adopted from 1931 and 975. Galactosamine hydrochloride (5.0
g; 215.64 g / mol; 23.2 mmol) in 24 mL of 1 M sodium hydroxide.
When dissolved in water (24 mmol), a colorless solution is formed. Anisaldehyde
(2.85 mL; 3.2 g; 136 g / mol; ρ1.119; 23.5 mol)
Upon addition via syringe with vigorous stirring, a cloudy solution is formed. For a few minutes
After stirring, a white precipitate forms. Place the system in an ice bath for 1 hour to completely precipitate
Let it. Thereafter, the solid was collected by filtration and combined with water (100 mL) and methanol.
Wash with a 1: 1 mixture of ethers (2 × 25 mL). Dry the precipitate overnight under vacuum
Drying gives 7 (4.5 g; 297 g / mol).11 H NMR (30
0 MHz, DMSO-d6): Δ 8.18 (s, 1H), 7.73 (d, 2H,
J = 8.7 Hz), 7.04 (d, 2H, J = 8.7 Hz), 6.52 (d, 1
H, J = 6.9 Hz), 4.72-4.67 (m, 2H), 4.61 (d, 1H)
, J = 6.9 Hz), 4.53 (d, 1H, J = 4.5 Hz), 3.85 (s,
3H), 3.73 (t, 1H, J = 3.9 Hz), 3.67-3.49 (m, 4
H), 3.15 (t, 1H, J = 7.8 Hz).13C NMR (75.4 MH
z, DMSO-d6): 161.21, 160.97, 129.54, 129.
20, 113.88, 96.15, 75.15, 74.51, 71.62, 67
. 18, 60.79, 55.28. C14H19NO6ES-MS of [MH] + M / z 298, m / z 298; [M-H]−Calculated value m / z 296
, Found 296. C14H19NO6Elemental analysis for (297.31): C, 56.
56%; H, 6.44%; N, 4.71%. Found: C, 55.46%; H, 6
. 42%; N, 4.58%.
【0073】 2−デオキシ−2−N−p−メトキシベンジリデン−1,3,4,6−テトラ−
O−アセチル−β−D−ガラクトピラノース(8) 7(4.5g;83%純粋;297g/モル;13ミリモル)を、氷水浴中で
、無水酢酸(15mL;102.09g/モル;1.082;159ミリモル)
、ピリジン(79.10g/モル;ρ0.978;27mL;334ミリモル)
およびDMAP(0.05g)で処理する。固体はゆっくりと溶液になり、反応
混合物を室温で3時間放置する。溶液を200mLの氷に注ぐと、白色の結晶状
固体が形成される。結晶を濾過により集め、水(100mL)およびエーテル(
100mL)で洗浄し、真空下で乾燥させると、8(3.8g;465g/モル
;63%収率)が得られる。TLC Rf=0.71(60%酢酸エチル−ヘキ
サン)。1H NMR(300MHz、CDCl3):δ8.21(s、1H)
、7.65(d、2H、J=9.0Hz)、6.92(d、2H、J=8.4H
z)、5.92(d、1H、J=8.1Hz)、5.45(d、1H、J=3.
3Hz)、5.25(dd、1H、J=3.3、10.5Hz)、4.22−4
.14(m、3H)、3.84(s、3H)、3.61(dd、1H、J=8.
4、10.5Hz)、2.17(s、3H)、2.06(s、3H)、2.02
(s、3H)、1.88(s、3H)。13C NMR(75.4MHz、CD
Cl3):δ170.45、170.12、169.69、168.75、16
4.47、162.17、130.16、128.36、11.97、93.4
5、93.45、71.71、71.52、68.78、65.90、61.2
9、55.41、20.71−20.54(m)。C22H27NO10のES
−MS:[M−H]+計算値m/z466、実測値m/z466;[M+OAc
]−計算値m/z524、実測値m/z524。2-Deoxy-2-Np-methoxybenzylidene-1,3,4,6-tetra-
O-acetyl-β-D-galactopyranose (8) 7 (4.5 g; 83% pure; 297 g / mol; 13 mmol) was treated with acetic anhydride (15 mL; 102.09 g / mol; 082; 159 mmol)
, Pyridine (79.10 g / mol; ρ0.978; 27 mL; 334 mmol)
And DMAP (0.05 g). The solid slowly goes into solution and the reaction mixture is left at room temperature for 3 hours. Upon pouring the solution into 200 mL of ice, a white crystalline solid is formed. The crystals were collected by filtration, and water (100 mL) and ether (
100 mL) and dried under vacuum to give 8 (3.8 g; 465 g / mol; 63% yield). TLC Rf = 0.71 (60% ethyl acetate-hexane). 1 H NMR (300 MHz, CDCl 3 ): δ 8.21 (s, 1H)
, 7.65 (d, 2H, J = 9.0 Hz), 6.92 (d, 2H, J = 8.4 H)
z), 5.92 (d, 1H, J = 8.1 Hz), 5.45 (d, 1H, J = 3.
3 Hz), 5.25 (dd, 1H, J = 3.3, 10.5 Hz), 4.22-4
. 14 (m, 3H), 3.84 (s, 3H), 3.61 (dd, 1H, J = 8.
4, 10.5 Hz), 2.17 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.02
(S, 3H), 1.88 (s, 3H). 13 C NMR (75.4 MHz, CD
Cl 3 ): δ 170.45, 170.12, 169.69, 168.75, 16
4.47, 162.17, 130.16, 128.36, 11.97, 93.4
5, 93.45, 71.71, 71.52, 68.78, 65.90, 61.2
9, 55.41, 20.71-20.54 (m). ES of C 22 H 27 NO 10
-MS: [M-H] + calculated m / z 466, found m / z 466; [M + OAc
- Calculated m / z524, Found m / z524.
【0074】 2−デオキシ−2−アミノ−1,3,4,6−テトラ−O−アセチル−β−D−
ガラクトピラノシルハイドロクロライド(9) 8(7.3g;465g/モル;15.7ミリモル)を37mLの還流アセト
ンに溶かし、この溶液に3.65mLの5N HClを滴下して加える。5分後
に、白色の厚い沈殿物が形成され、系を室温に冷却する。沈殿物を濾過し、アセ
トン(30mL)およびエーテル(60mL)で洗浄する。さらに多くの固体が
この濾液から分離されれば、最初の濾液から得られた固体と統合する。合わせた
生成物を真空下で一晩乾燥させると、5.8gの粗9(95%収率)が得られる
。1H NMR(300MHz、DMSO−d6):δ8.81(s、br、2
.46H)、5.95(d、1H、J=8.7Hz)、5.36−5.33(m
、2H)、4.35(t、1H、J=6.3Hz)、4.12−4.073(m
、2H)、3.48(br、1H)、2.22(s、3H)、2.18(s、3
H)、2.06(s、3H)、2.05(s、3H)。13C NMR(75.
4MHz、DMSO−d6):169.98、169.89、169.33、1
68.65、90.258、71.04、68.80、65.76、61.18
、49.33、20.85、20.88、20.70、20.53、20.36
。C14H27NO9ClのES−MS:[M−Cl]+計算値m/z348、
実測値m/z348;[M−H]−計算値m/z382および384、実測値m
/z382および384。2-Deoxy-2-amino-1,3,4,6-tetra-O-acetyl-β-D-
Galactopyranosyl hydrochloride (9) 8 (7.3 g; 465 g / mol; 15.7 mmol) is dissolved in 37 mL of refluxing acetone, and to this solution 3.65 mL of 5N HCl is added dropwise. After 5 minutes, a thick white precipitate forms and the system is cooled to room temperature. Filter the precipitate and wash with acetone (30 mL) and ether (60 mL). If more solids are separated from this filtrate, it will integrate with the solids obtained from the first filtrate. The combined products are dried under vacuum overnight to give 5.8 g of crude 9 (95% yield). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 8.81 (s, br, 2
. 46H), 5.95 (d, 1H, J = 8.7 Hz), 5.36-5.33 (m
, 2H), 4.35 (t, 1H, J = 6.3 Hz), 4.12-4.073 (m
, 2H), 3.48 (br, 1H), 2.22 (s, 3H), 2.18 (s, 3H)
H), 2.06 (s, 3H), 2.05 (s, 3H). 13 C NMR (75.
4MHz, DMSO-d 6): 169.98,169.89,169.33,1
68.65, 90.258, 71.04, 68.80, 65.76, 61.18
, 49.33, 20.85, 20.88, 20.70, 20.53, 20.36
. C 14 H 27 NO 9 Cl of ES-MS: [M-Cl ] + calcd m / z348,
Found m / z348; [M-H ] - calcd m / z 382 and 384, found m
/ Z 382 and 384.
【0075】 2−デオキシ−2−トリフルオロアセトアミド−1,3,4,6−テトラ−O
−アセチル−β−D−ガラクトピラノ−ス(10) 9(5.6g;383.5g/モル;14.6ミリモル)を、ピリジン(15
mL;14.7g;79.1g/モル;ρ0.978;185ミリモル)および
塩化メチレン(15mL)に懸濁する。無水トリフルオロ酢酸(2.5mL;3
.7g;210.3g/モル;ρ1.487;17.7ミリモル)をゆっくりと
シリンジを介して加える。固体は温度の僅かな上昇と共にゆっくりと溶液になる
。反応混合物を真空で濃縮して乾燥させる。残渣を塩化メチレン(50mL)に
溶かし、2N HCl(2×50mL)、NaHCO3水(50mL)および食
塩水(20mL)で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させる。透明な溶液を濃縮
して乾燥させると、オフイエローの固体10(5.6g;443g/モル;12
.6ミリモル;87%収率)が得られる。TLC Rf=0.36(40%酢酸
エチル−ヘキサン)。1H NMR(300MHz、CDCl3):δ7.15
(d、1H、J=9.6Hz)、5.77(d、1H、J=8.7Hz)、5.
40(d、1H、J=2.7Hz)、5.17(dd、1H、J=3.3、11
.1Hz)、4.48(q、1H、J=9.3Hz)、4.19−4.14(m
、2H)、4.07(q、1H、J=6.6Hz)、2.19(s、3H)、2
.13(s、3H)、2.05(s、3H)、2.01(s、3H)。13C
NMR(75.4MHz、CDCl3):δ170.81、170.64、17
0.14、169.61、157.66(q、J=38Hz)、115.52(
J=286Hz)、92.22、71.97、69.84、67.92、66.
10、61.33、50.152、20.63−20.41(m)。C16H2 0 NO10F3のES−MS:[M+NH4]+計算値m/z461、実測値m
/z461;[M−H]−計算値m/z442、実測値m/z442。C16H 20 NO10F3(443.33)の元素分析:C、43.35%;H、4.5
5%;N、3.16%。実測値:C、43.34%;H、4.60%;N、3.
11%。2-Deoxy-2-trifluoroacetamide-1,3,4,6-tetra-O
-Acetyl-β-D-galactopyranoose (10) 9 (5.6 g; 383.5 g / mol; 14.6 mmol) was converted to pyridine (15
mL; 14.7 g; 79.1 g / mol; ρ 0.978; 185 mmol) and
Suspend in methylene chloride (15 mL). Trifluoroacetic anhydride (2.5 mL; 3
. 7g; 210.3 g / mol; ρ 1.487; 17.7 mmol) slowly
Add via syringe. Solids slowly go into solution with a slight increase in temperature
. The reaction mixture is concentrated in vacuo and dried. Residue in methylene chloride (50 mL)
Dissolve, 2N HCl (2 × 50 mL), NaHCO3Water (50 mL) and food
Wash with brine (20 mL) and dry with anhydrous Na2SO4And dry. Concentrate clear solution
To dry off-yellow solid 10 (5.6 g; 443 g / mol; 12
. 6 mmol; 87% yield). TLCRf= 0.36 (40% acetic acid
Ethyl-hexane).11 H NMR (300 MHz, CDCl3): Δ7.15
(D, 1H, J = 9.6 Hz), 5.77 (d, 1H, J = 8.7 Hz), 5.77.
40 (d, 1H, J = 2.7 Hz), 5.17 (dd, 1H, J = 3.3, 11
. 1 Hz), 4.48 (q, 1H, J = 9.3 Hz), 4.19-4.14 (m
, 2H), 4.07 (q, 1H, J = 6.6 Hz), 2.19 (s, 3H), 2
. 13 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.01 (s, 3H).13C
NMR (75.4 MHz, CDCl3): Δ 170.81, 170.64, 17
0.14, 169.61, 157.66 (q, J = 38 Hz), 115.52 (
J = 286 Hz), 92.22, 71.97, 69.84, 67.92, 66.
10, 61.33, 50.152, 20.63-20.41 (m). C16H2 0 NO10F3ES-MS: [M + NH4]+Calculated value m / z 461, measured value m
/ Z461; [M-H]−Calculated value m / z 442, measured value m / z 442. C16H 20 NO10F3Elemental analysis for (443.33): C, 43.35%; H, 4.5
5%; N, 3.16%. Found: C, 43.34%; H, 4.60%;
11%.
【0076】 フェニル−1−チオ−2−デオキシ−2−N−トリフルオロアセトアミド−3
,4,6−テトラ−O−アセチル−β−D−ガラクトピラノ−ス(11) 10(5.55g;443g/モル;12.5ミリモル)を、無水塩化メチレ
ン(20mL)に溶かし、チオフェノール(2.0mL;110.15g/モル
;ρ1.073;19.5ミリモル)および三フッ化ホウ素エテレート(4.8
mL;141.93g/モル;ρ1.120;37.9ミリモル)で処理する。
反応混合物を一晩室温で放置し、その後、25mLの塩化メチレン、15mLの
飽和NaHCO3水、15mLのNa2CO3水、15mLの食塩水の混合物に
注ぐ。有機層をさらに15mLの飽和NaHCO3水および15mLのNa2C
O3水の混合物で洗浄する。有機層を無水Na2SO4で乾燥させ、真空下で濃
縮する。得られた固体を50mLの沸騰ヘキサンで洗浄し、濾過する。濾液をさ
らに50mLの氷水ヘキサンで洗浄し、真空で乾燥させると、11(5.75g
;493g/モル;11.7ミリモル;93%収率)が得られる。TLC Rf =0.35(40%酢酸エチル−ヘキサン)。1H NMR(300MHz、C
DCl3):δ7.53−7.50(m、2H)、7.34−7.31(m、3
H)、6.63(d、1H、J=9.0Hz)、5.39(d、1H、J=3.
0Hz)、5.20(dd、1H、J=3.3、10.8Hz)、4.87(d
、1H、J=10.2Hz)、4.30−4.10(m、3H)、3.96(t
、1H、J=6.3Hz)、2.13(s、3H)、2.040(s、3H)、
1.97(s、3H)。13C NMR(75.4MHz、CDCl3):δ1
70.63、170.50、170.10、157.24(q、J=37Hz)
、132.87、131.71、129.00、128.48、115.48(
q、J=286Hz)、86.43、74.60、70.76、66.60、6
1.69、50.05、20.65−20.41(br)。C20H22NSO 8 F3のES−MS:[M+NH4]+計算値m/z511、実測値m/z51
1;[M−H]−計算値m/z492、実測値m/z492。C20H22NS
O8F3(493.45)の元素分析:C、48.68%;H、4.49%;N
、2.84%;S、6.50%。実測値:C、48.43%;H、4.37%;
N、2.75%;S、6.40%。Phenyl-1-thio-2-deoxy-2-N-trifluoroacetamido-3
, 4,6-Tetra-O-acetyl-β-D-galactopyranoose (11) 10 (5.55 g; 443 g / mol; 12.5 mmol) was added to anhydrous methyl chloride
Thiophenol (2.0 mL; 110.15 g / mol)
1.073; 19.5 mmol) and boron trifluoride etherate (4.8).
mL; 141.93 g / mol; ρ1.120; 37.9 mmol).
The reaction mixture was left at room temperature overnight, after which 25 mL of methylene chloride, 15 mL of
Saturated NaHCO3Water, 15 mL of Na2CO3To a mixture of water and 15 mL of saline
pour it up. The organic layer was washed with an additional 15 mL of saturated NaHCO3Water and 15 mL of Na2C
O3Wash with a mixture of water. The organic layer was dried over anhydrous Na2SO4And concentrated under vacuum
Shrink. Wash the resulting solid with 50 mL boiling hexane and filter. Remove the filtrate
After washing with 50 mL of ice-water hexane and drying in vacuo, 11 (5.75 g) was obtained.
493 g / mol; 11.7 mmol; 93% yield). TLCRf = 0.35 (40% ethyl acetate-hexane).11 H NMR (300 MHz, C
DCI3): Δ 7.53-7.50 (m, 2H), 7.34-7.31 (m, 3
H), 6.63 (d, 1H, J = 9.0 Hz), 5.39 (d, 1H, J = 3.0 Hz).
0 Hz), 5.20 (dd, 1H, J = 3.3, 10.8 Hz), 4.87 (d
, 1H, J = 10.2 Hz), 4.30-4.10 (m, 3H), 3.96 (t
, 1H, J = 6.3 Hz), 2.13 (s, 3H), 2.040 (s, 3H),
1.97 (s, 3H).13C NMR (75.4 MHz, CDCl3): Δ1
70.63, 170.50, 170.10, 157.24 (q, J = 37 Hz)
, 132.87, 131.71, 129.00, 128.48, 115.48 (
q, J = 286 Hz), 86.43, 74.60, 70.76, 66.60, 6
1.69, 50.05, 20.65-20.41 (br). C20H22NSO 8 F3ES-MS: [M + NH4]+Calculated value m / z 511, measured value m / z 51
1; [MH]−Calculated value m / z 492, measured value m / z 492. C20H22NS
O8F3Elemental analysis for (493.45): C, 48.68%; H, 4.49%; N
, 2.84%; S, 6.50%. Found: C, 48.43%; H, 4.37%;
N, 2.75%; S, 6.40%.
【0077】 フェニルスルフェニル−2−デオキシ−2−N−トリフルオロアセトアミド−3
,4,6−トリ−O−アセチル−β−D−ガラクトピラノ−ス(12) 11(5.85g;493g/モル;11.9ミリモル)を、50mLのCH 2 Cl2に溶かし、−78℃に冷却する。重炭酸ナトリウム(0.1g)および
mCPBA(3.13g;68.7%純粋:172.57g/モル;12.5ミ
リモル)を加え、温度をゆっくりと−25℃に上昇させる。反応が進行するにつ
れて、生成物は溶液から沈殿する。反応がTLCにより完了したと判定される場
合、1mL硫化ジメチルでクエンチし、室温に到達させる。反応混合物を、50
mLのNaHCO3水および50mLのCH2Cl2で希釈する。有機層を50
mLのNa2CO3水および10mLの食塩水の混合物で洗浄し、無水Na2S
O4で乾燥させ、真空下で濃縮する。固体を75mLの熱エーテルで洗浄し、濾
過し、さらに100mLの氷冷エーテルで洗浄し、真空下で乾燥させると、単一
ジアステレオ異性体として12(4.75g;509g/モル;9.3ミリモル
;78%収率)が得られる。TLC Rf=0.31(60%酢酸エチル−ヘキ
サン)。1H NMR(300MHz、CDCl3):δ7.72−7.53(
m、6H)、5.40(dd、1H、J=3.3、10.8Hz)、5.34(
d、1H、J=3.3Hz)、4.84(d、1H、J=10.5Hz)、4.
34(q、1H、J=10.2Hz)、4.09−3.94(m、3H)、2.
00−1.96(m、9H)。13C NMR(75.4MHz、CDCl3)
:δ170.33、170.27、169.83、157.46(J=38Hz
)、138.01、131.85、128.95、125.57、115.23
(J=286Hz)、92.33、74.95、69.74、66.21、61
.09、46.80、20.60−20.39(br)。C20H27NSO9 F3のES−MS:[M+H]+計算値m/z510、実測値m/z510;[
M+NH4]+計算値m/z527、実測値m/z527;[M−H]−計算値
m/z508、実測値m/z508。C20H22NSO9F3(509.45
)の元素分析:C、47.15%;H、4.35%;N、2.75%;S、6.
29%実測値:C、47.35%;H、4.50%;N、2.63%;S、6.
10%。融点116−118℃。Phenylsulfenyl-2-deoxy-2-N-trifluoroacetamide-3
, 4,6-Tri-O-acetyl-β-D-galactopyranoose (12) 11 (5.85 g; 493 g / mol; 11.9 mmol) in 50 mL of CH 2 Cl2And cooled to -78 ° C. Sodium bicarbonate (0.1 g) and
mCPBA (3.13 g; 68.7% pure: 172.57 g / mol; 12.5 mi
) And the temperature is slowly raised to -25 ° C. As the reaction progresses
The product precipitates out of solution. If the reaction is determined to be complete by TLC
Quench with 1 mL dimethyl sulfide and allow to reach room temperature. The reaction mixture is
mL NaHCO3Water and 50 mL CH2Cl2Dilute with. 50 organic layers
mL of Na2CO3Wash with a mixture of water and 10 mL of brine and dry with anhydrous Na2S
O4And concentrated under vacuum. Wash the solid with 75 mL hot ether and filter
Wash with an additional 100 mL of ice-cold ether and dry under vacuum to give a single
12 as diastereoisomer (4.75 g; 509 g / mol; 9.3 mmol
; 78% yield). TLCRf= 0.31 (60% ethyl acetate-hex
Sun).11 H NMR (300 MHz, CDCl3): Δ 7.72-7.53 (
m, 6H), 5.40 (dd, 1H, J = 3.3, 10.8 Hz), 5.34 (
d, 1H, J = 3.3 Hz), 4.84 (d, 1H, J = 10.5 Hz);
34 (q, 1H, J = 10.2 Hz), 4.09-3.94 (m, 3H), 2.
00-1.96 (m, 9H).13C NMR (75.4 MHz, CDCl3)
: Δ170.33, 170.27, 169.83, 157.46 (J = 38 Hz
), 138.01, 131.85, 128.95, 125.57, 115.23.
(J = 286 Hz), 92.33, 74.95, 69.74, 66.21, 61
. 09, 46.80, 20.60-20.39 (br). C20H27NSO9 F3ES-MS of [M + H]+Calculated value m / z 510, measured value m / z 510;
M + NH4]+Calculated value m / z 527, measured value m / z 527; [M-H]−Calculated value
m / z 508, found m / z 508. C20H22NSO9F3(509.45
)): C, 47.15%; H, 4.35%; N, 2.75%; S, 6.
29% found: C, 47.35%; H, 4.50%; N, 2.63%; S, 6.
10%. Melting point 116-118 [deg.] C.
【0078】 図2は、化合物(12)に至る合成スキームを示す。FIG. 2 shows a synthetic scheme leading to compound (12).
【0079】 例3 固相上でのβ二糖またはグリココンジュゲートの合成 フェニルスルフェニル2−デオキシ−2−N−トリフルオロアセトアミドグリ
コピラノシル供与体を使用した典型的なグリコシル化法において、リンクアミド
レジン上に固定され、遊離ヒドロキシル基を含むグリコシル受容体を、高真空下
で乾燥させ、その後、アルゴン下におく。このレジンに、スルホキシドグリコシ
ル化反応条件に適合できる溶媒系(一般に、無水塩化メチレンと無水酢酸エチル
の9:1混合物)中、グリコシル供与体(4等量)および2,6−ジ−t−ブチ
ル−4−メチル−ピリジン(2等量)の溶液を加える。この混合物を室温で5分
間撹拌し、その後−78℃に冷却する。無水トリフルオロメタンスルホン酸(4
等量)をゆっくりと加え、系を−70℃で1時間保つ。その後、反応混合物を、
3〜16時間、−45℃から−40℃に保ち、メタノールとジイソプロピルエチ
ルアミンの混合物でクエンチする。反応混合物を室温まで加温し、レジンを、D
MF(3×)、テトラヒドロフラン(2×)、メタノール(2×)、および塩化
メチレン(2×)で洗浄する。分析目的のために、その後、レジンのサンプルを
トリフルオロ酢酸と塩化メチレンの30%反応混液を用いて30分間で取り外し
た。上清を蒸発させて乾燥させ、残渣を溶かし、HPLCおよびLC−MSによ
り分析する。Example 3 Synthesis of β-Disaccharide or Glycoconjugate on Solid Phase In a typical glycosylation method using a phenylsulfenyl-2-deoxy-2-N-trifluoroacetamidoglycopyranosyl donor, The glycosyl receptor immobilized on Linkamide resin and containing free hydroxyl groups is dried under high vacuum and then placed under argon. The resin is combined with a glycosyl donor (4 eq) and 2,6-di-t-butyl in a solvent system compatible with sulfoxide glycosylation reaction conditions (generally a 9: 1 mixture of anhydrous methylene chloride and anhydrous ethyl acetate). Add a solution of -4-methyl-pyridine (2 equivalents). The mixture is stirred at room temperature for 5 minutes and then cooled to -78C. Trifluoromethanesulfonic anhydride (4
Eq) is added slowly and the system is kept at -70 ° C for 1 hour. Thereafter, the reaction mixture is
Maintain at -45 ° C to -40 ° C for 3-16 hours and quench with a mixture of methanol and diisopropylethylamine. The reaction mixture was warmed to room temperature and the resin was added to D
Wash with MF (3 ×), tetrahydrofuran (2 ×), methanol (2 ×), and methylene chloride (2 ×). For analytical purposes, a sample of the resin was then removed using a 30% reaction mixture of trifluoroacetic acid and methylene chloride for 30 minutes. The supernatant is evaporated to dryness, the residue is dissolved and analyzed by HPLC and LC-MS.
【0080】 グリコシル供与体(6)を、グリコシル受容体(13)、(14)および(1
5)とカップリングさせると、対応するβ連結二糖(16)、(17)および(
18)がそれぞれ得られる。トリフルオロアセトアミド基は、スルホキシドグリ
コシル化に高度の融通性をもたらす。一旦活性化されると、スルホキシドは反応
性が高く、グリコシル受容体(13)などの非反応性求核剤をグリコシル化する
。(6)および(12)などのグリコシル供与体の高い反応性は、それらを、他
の研究されたスルホキシドと比較することにより評価できる。Glycosyl donor (6) is converted to glycosyl acceptors (13), (14) and (1)
When coupled with 5), the corresponding β-linked disaccharides (16), (17) and (17)
18) are obtained respectively. The trifluoroacetamide group provides a high degree of flexibility for sulfoxide glycosylation. Once activated, sulfoxides are highly reactive and glycosylate non-reactive nucleophiles such as the glycosyl receptor (13). The high reactivity of glycosyl donors such as (6) and (12) can be evaluated by comparing them with other studied sulfoxides.
【0081】 グリコシル受容体(13)の>90%変換のグリコシル化は、4等量のグリコ
シル供与体(6)または(12)を用いて達成できる。対応するフタルイミド保
護スルホキシドを使用する場合、同変換レベルを達成するために、8等量までの
スルホキシドを使用しなければならない。AllocおよびFmoc保護基を含
む関連スルホキシドを4等量使用することにより、最大10%の対応する二糖へ
の変換がもたらされた。グリコシル供与体(6)は、図3に示すように、受容体
(13)、(14)および(15)を成功裡にグリコシル化するために使用され
てきた。グリコシル化生成物(16)、(17)および(18)(図4)は、>
90%収率で得られる(TFA−CH2Cl2反応混液を用いてレジンから生成
物を開裂し、それをHPLCにより分析することにより決定)。各生成物におい
て、グリコシド連鎖の立体化学は、1H NMRによりβであり、α−アノマー
の痕跡は全くないことが判明する(図5)。グリコシル供与体(12)はまた、
>90%収率(HPLCにより決定)で受容体(13)をグリコシル化すること
が示される。Glycosylation with> 90% conversion of the glycosyl acceptor (13) can be achieved with 4 equivalents of the glycosyl donor (6) or (12). When using the corresponding phthalimide protected sulfoxide, up to 8 equivalents of sulfoxide must be used to achieve the same level of conversion. The use of 4 equivalents of the relevant sulfoxide containing Alloc and Fmoc protecting groups resulted in up to 10% conversion to the corresponding disaccharide. Glycosyl donors (6) have been used to successfully glycosylate acceptors (13), (14) and (15), as shown in FIG. The glycosylated products (16), (17) and (18) (FIG. 4) have>
Obtained in 90% yield (with TFA-CH 2 Cl 2 the reaction mixture to cleave the product from the resin, determined by analyzing it by HPLC). In each product, the stereochemistry of the glycosidic linkage is β by 1 H NMR, indicating no trace of the α-anomer (FIG. 5). The glycosyl donor (12) also
It is shown to glycosylate receptor (13) in> 90% yield (determined by HPLC).
【0082】 β−二糖生成物(16)および(17)において、トリフルオロアセトアミド
基は、1:1MeOH−THF溶液中LiOHでレジンを処理することにより完
全に除去されることが示される。これらの条件下で、ベンゾエートおよびアセテ
ート基も除去される。非保護アルコール存在下でのカルボン酸を用いたアミノ基
の選択的誘導体化が、HATU−DIPEAカップリング条件を使用して可能で
ある。β−二糖生成物(16)は、図6に示すような反応順序を受ける。各反応
生成物の実体および純度は、HPLCおよびLC−MSにより決定する(図7)
。In the β-disaccharide products (16) and (17), the trifluoroacetamide group is shown to be completely removed by treating the resin with LiOH in a 1: 1 MeOH-THF solution. Under these conditions, benzoate and acetate groups are also removed. Selective derivatization of amino groups with carboxylic acids in the presence of unprotected alcohol is possible using HATU-DIPEA coupling conditions. The β-disaccharide product (16) undergoes a reaction sequence as shown in FIG. The identity and purity of each reaction product is determined by HPLC and LC-MS (FIG. 7)
.
【0083】 液相グリコシル化 これまで、これらのグリコシル供与体の液相グリコシル化化学における研究は
、グリコシル供与体(6)とのイソプロパノールのグリコシル化に限定されてき
た。標準的なグリコシル化条件下で、β−イソプロポキシグリコシドが、60%
収率で単離され、質量分析および1H NMRにより特徴づけられる。対応する
α−異性体の痕跡は全く観察されない。Liquid-Phase Glycosylation So far, studies in the liquid-phase glycosylation chemistry of these glycosyl donors have been limited to the glycosylation of isopropanol with the glycosyl donor (6). Under standard glycosylation conditions, β-isopropoxy glycoside has 60%
Isolated in yield and characterized by mass spectroscopy and 1 H NMR. No trace of the corresponding α-isomer is observed.
【0084】 固相ライブラリー 前に示した化学に従って、16および17の周りのコンビナトリアルライブラ
リーを設計する。16の場合、二糖コアは、8個の異なるイソシアネートおよび
12個の異なるカルボン酸を用いて誘導体化する(図8)。このライブラリーで
は、受容体糖のアノマー基は、β−チオフェニル基またはα,β−ヒドロキシ基
(ラクトール)のいずれかである。これらの3つの多様な要素により、192メ
ンバーのコンビナトリアルライブラリーが生じる。17の場合、二糖コアは、6
個の異なるイソシアネートおよび8個の異なるカルボン酸を用いて誘導体化し、
48メンバーのコンビナトリアルライブラリーが得られる(図9)。Solid Phase Library Design combinatorial libraries around 16 and 17 according to the chemistry set forth above. In the case of 16, the disaccharide core is derivatized with 8 different isocyanates and 12 different carboxylic acids (FIG. 8). In this library, the anomeric group of the acceptor sugar is either a β-thiophenyl group or an α, β-hydroxy group (lactol). These three diverse elements give rise to a combinatorial library of 192 members. In the case of 17, the disaccharide core is 6
Derivatised with two different isocyanates and eight different carboxylic acids,
A combinatorial library of 48 members is obtained (FIG. 9).
【0085】 例4 ライブラリーの構築 各二糖ライブラリー用に、リンクアミドレジンに固定した対応する二糖(16
または17)を、1:1THF−MeOH中LiOHでの処理により完全に脱保
護する。その後、脱保護されたレジンを、塩化メチレンとテトラヒドロフランの
4:1混合物に懸濁し、この懸濁液のアリコートを、RFマイクロタグを含む、
イロリ・マイクロカン(Irori MicroKan)(登録商標)に分配す
る。アリコートは、各マイクロカン(登録商標)が15mgのレジン(16の場
合)または20mgのレジン(17の場合)を含むように計算する。各マイクロ
カン(登録商標)およびそのRFタグを、イロリ合成ソフトウェアに走査し、確
認番号を割り当てる。その後、ライブラリーを図19および11に示される反応
スキームに従って合成する。LC−MS分析の結果は、その分子量に基づき所望
のライブラリー化合物の生成と一致する(下記の図14および15参照)。Example 4 Library Construction For each disaccharide library, the corresponding disaccharide (16
Or 17) is completely deprotected by treatment with LiOH in 1: 1 THF-MeOH. The deprotected resin is then suspended in a 4: 1 mixture of methylene chloride and tetrahydrofuran, and an aliquot of this suspension containing the RF microtag,
Dispense into Irori MicroKan®. Aliquots are calculated so that each Microcan® contains 15 mg resin (for 16) or 20 mg resin (for 17). Each Microcan® and its RF tag are scanned by Irori synthesis software and assigned a confirmation number. The library is then synthesized according to the reaction scheme shown in FIGS. The results of the LC-MS analysis are consistent with the production of the desired library compound based on its molecular weight (see FIGS. 14 and 15 below).
【0086】 合成段階が完了すれば、誘導体化レジンを含むマイクロカン(登録商標)容器
を別々の試験チューブに配置し、30%TFA−CH2Cl2反応混液で30分
間処理する。その後上清をマイクロタイタープレートのウェルに移し、サバント
(Savant)蒸発器を使用して真空下で濃縮する。その後、得られた残渣を
1mlのDMSO中で再構成し、溶液を、LC−MS分析による対照、抗菌スク
リーンおよび化合物貯蔵用に分注する。Once the synthesis step is complete, place the Microcan® container containing the derivatized resin in a separate test tube and treat with a 30% TFA-CH 2 Cl 2 reaction mixture for 30 minutes. The supernatant is then transferred to the wells of a microtiter plate and concentrated under vacuum using a Savant evaporator. The residue obtained is then reconstituted in 1 ml of DMSO and the solution is dispensed for control by LC-MS analysis, antimicrobial screen and compound storage.
【0087】 骨格16をもとにしたライブラリーについて、代表的な生成物のLC−MSト
レースを図12に示す。このライブラリーのLC−MS分析から得られた分析結
果は図13に要約する。An LC-MS trace of a representative product for the scaffold 16 based library is shown in FIG. The analytical results obtained from LC-MS analysis of this library are summarized in FIG.
【0088】 骨格17をもとにしたライブラリーについて、代表的な生成物のLC−MSト
レースを図14に示す。このライブラリーのLC−MS分析から得られた分析結
果は図15に要約する。An LC-MS trace of a representative product for the scaffold 17 based library is shown in FIG. The analytical results obtained from LC-MS analysis of this library are summarized in FIG.
【0089】 上記の例は例示の目的のみのために示し、本発明の範囲または実施形態を限定
するものではない。本発明は本明細書に続く特許請求の範囲を参照してさらに説
明される。The above examples are provided for illustrative purposes only and do not limit the scope or embodiments of the present invention. The invention is further described with reference to the claims that follow this specification.
【図1】 図1は、フェニルスルフェニル−2−デオキシ−2−N−トリフルオロアセト
アミド−3,4,6−トリ−O−アセチル−β−D−グルコピラノース(6)の
合成プロセスを示す。FIG. 1 shows a process for synthesizing phenylsulfenyl-2-deoxy-2-N-trifluoroacetamide-3,4,6-tri-O-acetyl-β-D-glucopyranose (6). .
【図2】 図2は、フェニルスルフェニル−2−デオキシ−2−N−トリフルオロアセト
アミド−3,4,6−トリ−O−アセチル−β−D−ガラクトピラノース(12
)の合成プロセスを示す。FIG. 2 shows phenylsulfenyl-2-deoxy-2-N-trifluoroacetamide-3,4,6-tri-O-acetyl-β-D-galactopyranose (12
2) shows the synthesis process.
【図3】 図3は、リンクアミドポリスチレンレジンに固定した受容体13〜15を示す
。FIG. 3 shows receptors 13-15 immobilized on Rink amide polystyrene resin.
【図4】 図4は、固相グリコシル化反応の特徴づけられた生成物16〜18を示す。FIG. 4 shows the characterized products 16-18 of the solid-phase glycosylation reaction.
【図5】 図5は、β−二糖のみが形成された(対応するα−異性体の痕跡は全く観察さ
れない)ことを示す反応生成物の1H NMRスペクトルを示す。FIG. 5 shows a 1 H NMR spectrum of the reaction product showing that only β-disaccharide was formed (no trace of the corresponding α-isomer is observed).
【図6】 図6は、16の固相誘導体化を示す。FIG. 6 shows solid phase derivatization of 16.
【図7】 図7は、16の誘導体化における中間体および最終生成物の分析的特徴づけ(
HPLCおよびLC−MS)を示す。FIG. 7 shows the analytical characterization of intermediates and end products in derivatization of 16 (
HPLC and LC-MS).
【図8】 図8は、16をもとにしたコンビナトリアルライブラリーに使用する一般構造
および基礎単位を示す。FIG. 8 shows the general structure and building blocks used for a combinatorial library based on 16.
【図9】 図9は、17をもとにしたコンビナトリアルライブラリーに使用する一般構造
および基礎単位を示す。FIG. 9 shows the general structure and building blocks used for a combinatorial library based on 17.
【図10】 図10は、ライブラリーを生成するための16の誘導体化に使用する反応順序
を示す。FIG. 10 shows the reaction sequence used for derivatization of 16 to generate a library.
【図11】 図11は、ライブラリーを生成するための17の誘導体化に使用する反応順序
を示す。FIG. 11 shows the reaction sequence used for derivatization of 17 to generate a library.
【図12】 図12は、16の周りに作成されたコンビナトリアルライブラリーの代表的な
メンバーのLC−MSスペクトルを示す。FIG. 12 shows LC-MS spectra of representative members of a combinatorial library generated around 16.
【図13】 図13は、16の周りで作成されたライブラリーについて得られた分析データ
を示す。FIG. 13 shows analytical data obtained for a library created around 16.
【図14】 図14は、17の周りで作成されたコンビナトリアルライブラリーの代表的な
メンバーのLC−MSスペクトルを示す。FIG. 14 shows LC-MS spectra of representative members of a combinatorial library generated around 17.
【図15】 図15は、17の周りで作成されたライブラリーについて得られた分析データ
を示す。FIG. 15 shows analytical data obtained for a library created around 17.
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 FI テーマコート゛(参考) C07H 15/203 C07H 15/203 (81)指定国 EP(AT,BE,CH,CY, DE,DK,ES,FI,FR,GB,GR,IE,I T,LU,MC,NL,PT,SE),OA(BF,BJ ,CF,CG,CI,CM,GA,GN,GW,ML, MR,NE,SN,TD,TG),AP(GH,GM,K E,LS,MW,SD,SZ,UG,ZW),EA(AM ,AZ,BY,KG,KZ,MD,RU,TJ,TM) ,AL,AM,AT,AU,AZ,BA,BB,BG, BR,BY,CA,CH,CN,CZ,DE,DK,E E,ES,FI,GB,GE,GH,GM,HR,HU ,ID,IL,IN,IS,JP,KE,KG,KR, KZ,LC,LK,LR,LS,LT,LU,LV,M D,MG,MK,MN,MW,MX,NO,NZ,PL ,PT,RO,RU,SD,SE,SG,SI,SK, SL,TJ,TM,TR,TT,UA,UG,UZ,V N,YU,ZW (72)発明者 ソフィア,ミカエル ジェイ. アメリカ合衆国 08648 ニュージャージ ー州 ローレンスビル, ホリー レーン 3 Fターム(参考) 4C057 BB03 BB04 CC03 JJ03 JJ13 JJ24 4H055 AA01 AA02 AB29 AB81 AC01 AD30 BA30 ──────────────────────────────────────────────────続 き Continued on the front page (51) Int.Cl. 7 Identification symbol FI Theme coat ゛ (Reference) C07H 15/203 C07H 15/203 (81) Designated country EP (AT, BE, CH, CY, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE), OA (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG), AP (GH, GM, KE, LS, MW, SD, SZ, UG, ZW), EA (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM ), AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BY, CA, CH, CN, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, GB, GE, H, GM, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, MD, MG, MK, MN, MW , MX, NO, NZ, PL, PT, RO, RU, SD, SE, SG, SI, SK, SL, TJ, TM, TR, TT, UA, UG, UZ, VN, YU, ZW (72) Inventors Sofia, Michael Jay. United States 08648 Lawrenceville, New Jersey Holly Lane 3F Term (Reference) 4C057 BB03 BB04 CC03 JJ03 JJ13 JJ24 4H055 AA01 AA02 AB29 AB81 AC01 AD30 BA30
Claims (26)
デオキシ−2−N−トリフルオロアセトアミドグリコピラノースである、化合物
。1. An alkylsulfenyl- or arylsulfenyl-2-amine.
A compound which is deoxy-2-N-trifluoroacetamidoglycopyranose.
ロアセトアミドグルコピラノースである、請求項1に記載の化合物。2. The compound according to claim 1, which is phenylsulfenyl-2-deoxy-2-N-trifluoroacetamidoglucopyranose.
ロアセトアミド−3,4,6−トリ−O−アセチル−β−D−グルコピラノース
である、請求項2に記載の化合物。3. The compound according to claim 2, which is phenylsulfenyl-2-deoxy-2-N-trifluoroacetamido-3,4,6-tri-O-acetyl-β-D-glucopyranose.
ロアセトアミドガラクトピラノースである、請求項1に記載の化合物。4. The compound according to claim 1, which is phenylsulfenyl-2-deoxy-2-N-trifluoroacetamidogalactopyranose.
ロアセトアミド−3,4,6−トリ−O−アセチル−β−D−ガラクトピラノー
スである、請求項4に記載の化合物。5. The compound according to claim 4, which is phenylsulfenyl-2-deoxy-2-N-trifluoroacetamido-3,4,6-tri-O-acetyl-β-D-galactopyranose.
ルスルフェニル−2−デオキシ−2−N−トリフルオロアセトアミドグリコピラ
ノースであるグリコシル供与体と反応させることを含む、グリコシドβグリコシ
ド連鎖を形成するプロセス。6. A glycoside β-glycosidic chain comprising reacting a glycosyl acceptor with a glycosyl donor that is an alkylsulfenyl- or arylsulfenyl-2-deoxy-2-N-trifluoroacetamido glycopyranose. Process to do.
−2−N−トリフルオロアセトアミドグルコピラノースである、請求項6に記載
のプロセス。7. The process of claim 6, wherein the glycosyl donor is phenylsulfenyl-2-deoxy-2-N-trifluoroacetamidoglucopyranose.
−2−N−トリフルオロアセトアミド−3,4,6−トリ−O−アセチル−β−
D−グルコピラノースである、請求項7に記載のプロセス。8. The glycosyl donor is phenylsulfenyl-2-deoxy-2-N-trifluoroacetamide-3,4,6-tri-O-acetyl-β-
The process of claim 7, wherein the process is D-glucopyranose.
アセトアミド−3,4,6−トリ−O−アセチル−β−D−ガラクトピラノース
スルホキシドである、請求項6に記載のプロセス。9. The method according to claim 6, wherein the glycosyl donor is 2-deoxy-2-N-trifluoroacetamide-3,4,6-tri-O-acetyl-β-D-galactopyranose sulfoxide. process.
シ−2−N−トリフルオロアセトアミド−3,4,6−トリ−O−アセチル−β
−D−ガラクトピラノースである、請求項7に記載のプロセス。10. The glycosyl donor is phenylsulfenyl-2-deoxy-2-N-trifluoroacetamide-3,4,6-tri-O-acetyl-β
The process according to claim 7, which is -D-galactopyranose.
6に記載のプロセス。11. The process of claim 6, wherein the linkage is substantially free of α-glycoside linkages.
12に記載のプロセス。13. The process of claim 12, wherein the glycosyl receptor is bound to a solid support.
体に結合している、請求項12に記載のプロセス。14. The process of claim 12, wherein the glycosyl receptor is attached to the solid support via a linker arm.
スチレンレジンからなる群から選択される、請求項12に記載のプロセス。15. The process of claim 12, wherein the solid support is selected from the group consisting of a polystyrene resin and a PEG-derived polystyrene resin.
有する、請求項6のプロセス。17. The process of claim 6, wherein the glycosyl donor has an adjacent participating group (NPG) at the C-2 position.
からなる群から選択される、請求項17のプロセス。18. The process of claim 17, wherein said NPG is selected from the group consisting of amides, esters, imides and carbamates.
請求項11のプロセス。19. The glycosyl donor is activated with an effective amount of an activating agent.
The process of claim 11.
その酸である、請求項19のプロセス。20. The process of claim 19, wherein the activator is trifluoromethanesulfonic anhydride or an acid thereof.
ルキルスルフェニル−またはアリールスルフェニル−2−デオキシ−2−N−ト
リフルオロアセトアミドグリコピラノースで処理し、 b)グリコシル供与体とグリコシル受容体を反応させて、対応するβ−グリコ
シル化生成物を生じる 段階を含む上記プロセス。21. A process for the synthesis of β-oligosaccharides, comprising: a) converting a glycosyl acceptor bound to a solid support into an alkylsulfenyl- or arylsulfenyl-2-deoxy-2-N as glycosyl donor. Treating with trifluoroacetamidoglycopyranose; b) reacting a glycosyl donor with a glycosyl acceptor to yield the corresponding β-glycosylation product.
オロアセトアミド−3,4,6−トリ−O−アセチル−β−D−グリコピラノー
スの合成プロセスであって、 a)グリコサミンハイドロクロライドを、アルカリの存在下で、p−メトキシ
ベンズアルデヒドと反応させて、2−N−p−メトキシ−ベンジリデングリコサ
ミンを形成させ; b)2−N−p−メトキシベンジリデングリコサミンを、ピリジンおよびジメ
チルアミノピリジン(DMAP)の存在下で、無水酢酸を用いてアセチル化し、
O−アセチル化2−N−p−メトキシベンジリデングリコサミンを形成させ; c)p−メトキシベンズアルデヒドを、アセトン中塩酸を用いて除去し、O−
アセチル化グリコサミンハイドロクロライドを形成させ; d)該O−アセチル化グリコサミンハイドロクロライドを、ピリジンおよび塩
化メチレンの存在下で、無水トリフルオロ酢酸を用いて保護し、O−アセチル化
2−N−トリフルオロアセトアミドグリコピラノースを形成させ; e)O−アセチル化トリフルオロアセトアミドグリコピラノースを、チオフェ
ノール、三フッ化ホウ素エテレートおよび塩化メチレンに供して、フェニル−1
−チオO−アセチル化2−N−トリフルオロアセトアミドグリコピラノースを形
成させ; f)フェニル−1−チオ−O−アセチル化2−N−トリフルオロアセトアミド
を、m−クロロペルオキシ安息香酸と反応させ、対応するフェニルスルフェニル
−2−デオキシ−2−N−トリフルオロアセトアミド−3,4,6−トリ−O−
アセチル−β−D−グリコピラノースを生じさせ;そして g)該グリコピラノースを回収する 段階を含む上記プロセス。22. A process for the synthesis of phenylsulfenyl-2-deoxy-2-N-trifluoroacetamido-3,4,6-tri-O-acetyl-β-D-glycopyranose, comprising: a) glycosamine Reacting hydrochloride with p-methoxybenzaldehyde in the presence of an alkali to form 2-Np-methoxy-benzylidene glycosamine; b) converting 2-Np-methoxybenzylidene glycosamine to pyridine and Acetylation with acetic anhydride in the presence of dimethylaminopyridine (DMAP)
O-acetylated 2-N-p-methoxybenzylideneglycosamine is formed; c) p-methoxybenzaldehyde is removed using hydrochloric acid in acetone and O-
Forming an acetylated glycosamine hydrochloride; d) protecting the O-acetylated glycosamine hydrochloride with trifluoroacetic anhydride in the presence of pyridine and methylene chloride to form O-acetylated 2-N- E) subjecting the O-acetylated trifluoroacetamidoglycopyranose to thiophenol, boron trifluoride etherate and methylene chloride to give phenyl-1
-Thio-O-acetylated 2-N-trifluoroacetamido glycopyranose; f) reacting phenyl-1-thio-O-acetylated 2-N-trifluoroacetamide with m-chloroperoxybenzoic acid; The corresponding phenylsulfenyl-2-deoxy-2-N-trifluoroacetamido-3,4,6-tri-O-
Producing acetyl-β-D-glycopyranose; and g) recovering said glycopyranose.
のライブラリー。26. The compound of the formula [Wherein, The library according to claim 25, which is a compound corresponding to the above, a salt thereof, or a conjugate thereof.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US7357098P | 1998-02-03 | 1998-02-03 | |
US60/073,570 | 1998-02-03 | ||
PCT/US1999/002180 WO1999039201A1 (en) | 1998-02-03 | 1999-02-03 | SOLUTION AND SOLID PHASE SULFOXIDE GLYCOSYLATION: SYNTHESIS OF β-LINKED OLIGOSACCHARIDES USING 2-DEOXY-2-N-TRIFLUOROACETAMIDO-GLYCOPYRANOSYL DONORS |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2002501932A true JP2002501932A (en) | 2002-01-22 |
Family
ID=22114503
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2000529604A Withdrawn JP2002501932A (en) | 1998-02-03 | 1999-02-03 | Liquid and Solid Sulfoxide Glycosylation: Synthesis of β-Linked Oligosaccharides Using a 2-Deoxy-2-N-trifluoroacetamide-Glycopyranosyl Donor |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP1053471A1 (en) |
JP (1) | JP2002501932A (en) |
AU (1) | AU2573699A (en) |
CA (1) | CA2319339A1 (en) |
WO (1) | WO1999039201A1 (en) |
-
1999
- 1999-02-03 JP JP2000529604A patent/JP2002501932A/en not_active Withdrawn
- 1999-02-03 AU AU25736/99A patent/AU2573699A/en not_active Abandoned
- 1999-02-03 WO PCT/US1999/002180 patent/WO1999039201A1/en not_active Application Discontinuation
- 1999-02-03 EP EP99905611A patent/EP1053471A1/en not_active Withdrawn
- 1999-02-03 CA CA002319339A patent/CA2319339A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CA2319339A1 (en) | 1999-08-05 |
WO1999039201A1 (en) | 1999-08-05 |
EP1053471A1 (en) | 2000-11-22 |
AU2573699A (en) | 1999-08-16 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2134693C1 (en) | Methods of forming glycoside bonds, chemical composition, glycoside and glycoside library | |
Merritt et al. | n-Pentenyl mannoside precursors for synthesis of the nonamannan component of high mannose glycoproteins | |
AU2007235408A1 (en) | Processes for chemical synthesis of lipochitooligosaccharides | |
Paulsen et al. | New solid-phase oligosaccharide synthesis on glycopeptides bound to asolid phase | |
US6274716B1 (en) | Combinatorial library of moenomycin analogs and methods of producing same | |
Lindberg et al. | Efficient routes to glucosamine-myo-inositol derivatives, key building blocks in the synthesis of glycosylphosphatidylinositol anchor substances | |
EP0977763A1 (en) | Protected aminosugars | |
Hashihayata et al. | Convergent total syntheses of oligosaccharides by one-pot sequential stereoselective glycosylations | |
US5635612A (en) | Method of forming multiple glycosidic linkages in a single step | |
EP1144430A1 (en) | Protecting groups for carbohydrate synthesis | |
US6040433A (en) | Sulfinyl hexose derivatives useful for glycosylation | |
US20040019198A1 (en) | Method of forming glycosidic bonds from thioglycosides using an N,N-dialkylsulfinamide | |
Sawant et al. | Formal synthesis of a disaccharide repeating unit (IdoA–GlcN) of heparin and heparan sulfate | |
Jamoisa et al. | How to improve chemical synthesis of laminaribiose on a large scale | |
JP2002501932A (en) | Liquid and Solid Sulfoxide Glycosylation: Synthesis of β-Linked Oligosaccharides Using a 2-Deoxy-2-N-trifluoroacetamide-Glycopyranosyl Donor | |
JP2001512737A (en) | Substituted tetrahydropyran derivatives, processes for their preparation, their use as medicaments or diagnostics and medicaments containing them | |
Fraser-Reid et al. | Oligosaccharide synthesis by n-pentenyl glycosides | |
CN110041377B (en) | Synthetic method of O-mannan core structure | |
CA2071178C (en) | Polymer-supported solution synthesis of oligosaccharides | |
US20140303363A1 (en) | Preparation and Use of Isolactosamine and Intermediates therefor | |
US5128463A (en) | Process for the preparation of 2-deoxy sugars | |
Byramova et al. | 1, 6-anhydro-N-acetyl-β-D-glucosamine in oligosaccharide synthesis: II. The synthesis of the spacered Le y tetrasaccharide | |
Traboni | FEDERICO II | |
JPH0656901A (en) | Polymeric lewis x saccharide and its production | |
Neves | Synthesis towards defined oligosaccharides for functional genomic studies of the primary plant cell wall |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A300 | Withdrawal of application because of no request for examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A300 Effective date: 20060404 |