JP2002131220A - Microarray chip - Google Patents

Microarray chip

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JP2002131220A
JP2002131220A JP2000322166A JP2000322166A JP2002131220A JP 2002131220 A JP2002131220 A JP 2002131220A JP 2000322166 A JP2000322166 A JP 2000322166A JP 2000322166 A JP2000322166 A JP 2000322166A JP 2002131220 A JP2002131220 A JP 2002131220A
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Japan
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transparent substrate
microarray chip
specific binding
light
substances
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Akira Shimoma
昌 下間
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Starlite Co Ltd
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Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To inexpensively and highly accurately form a transparent substrate to be used for a microarray chip, to prevent adjacent specifically coupling substances from coupling with one another, when a large number of the specifically coupling substances are applied in a high-density matrix onto the transparent substrate, and to prevent test specimens from being supplied to the different specifically coupling substances, when the test specimens are dropped by a pipette, etc., to each specifically coupling substance. SOLUTION: In the microarray chip, in which a large number of the known specifically coupling substances 12 to be coupled with the test specimens 15 which emit light by exciting light, are arranged on the transparent substrate 11, the transparent substrate is constituted of a plastic material, of which the light emission by the excitation light is low. Housing parts 13 for separating and housing each of the known specifically coupling substances are provided in the transparent substrate.

Description

【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【0001】[0001]

【発明の属する技術分野】この発明は、DNA解析や免
疫学的解析等に用いられるマイクロアレイチップに係
り、特に、励起光によって発光する被検体と結合させる
既知の特異的結合物質が透明基板上に多数配列されてな
るマイクロアレイチップに関するものである。
BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to a microarray chip used for DNA analysis, immunological analysis, and the like, and in particular, a known specific binding substance that binds to an analyte that emits light by excitation light is provided on a transparent substrate. The present invention relates to a microarray chip having a large number of arrays.

【0002】[0002]

【従来の技術】近年、遺伝子工学分野における技術が急
速に発展し、例えば10万個にもおよぶと考えられてい
るヒトゲノムの塩基配列を解読することを目的とするヒ
トゲノムプロジェクトが展開されており、その1つの方
法としてマイクロアレイチップを用いたマイクロアレイ
技術が注目されている。
2. Description of the Related Art In recent years, the technology in the field of genetic engineering has been rapidly developed, and for example, the human genome project aimed at decoding the base sequence of the human genome, which is considered to reach 100,000, has been developed. As one of the methods, a microarray technology using a microarray chip has attracted attention.

【0003】ここで、このマイクロアレイ技術において
は、図1に示すように、スライドガラス等の透明基板1
a上に、既に解読されている異なった種類のcDNA等
の特異的結合物質1bをドットとして所定の間隔でマト
リックス状に高密度で塗布したマイクロアレイチップ1
を用いるようにしている。
In this microarray technology, as shown in FIG. 1, a transparent substrate 1 such as a slide glass is used.
a) a microarray chip 1 in which specific binding substances 1b, such as different kinds of cDNA, which have already been decoded, are applied as dots at predetermined intervals in a matrix at a high density.
Is used.

【0004】そして、このように特異的結合物質1bが
マトリックス状に高密度で塗布されたマイクロアレイチ
ップ1に対して、例えば、蛍光色素を用いて励起光によ
り発光するようにしたDNA等の被検体をピペット等で
滴下し、この被検体とマイクロアレイチップに設けた適
当な特異的結合物質1bとハイブリダイズさせるように
する。
[0004] The microarray chip 1 on which the specific binding substance 1b is coated at a high density in the form of a matrix, for example, an analyte such as DNA which emits light by excitation light using a fluorescent dye. Is dropped by using a pipette or the like, and the specimen is hybridized with an appropriate specific binding substance 1b provided on a microarray chip.

【0005】その後、このマイクロアレイチップ1に対
して上記の蛍光色素を励起させる励起光を走査させて照
射し、被検体が既知の特異的結合物質1bとハイブリダ
イズされた位置における蛍光を光検出器で検出して、マ
イクロアレイチップ1上のどの位置における特異的結合
物質1bと被検体とが結合したかを検知し、これにより
被検体を特定するようにしている。
Thereafter, the microarray chip 1 is scanned and irradiated with excitation light for exciting the above-mentioned fluorescent dye, and the fluorescence at the position where the subject is hybridized with the known specific binding substance 1b is detected by a photodetector. The detection is performed to detect at which position on the microarray chip 1 the specific binding substance 1b has bound to the analyte, thereby identifying the analyte.

【0006】ここで、このようなマイクロアレイチップ
1の透明基板1aとして、従来においては、一般にスラ
イドガラス等が用いられていた。
Here, as a transparent substrate 1a of such a microarray chip 1, a slide glass or the like has generally been used in the past.

【0007】しかし、スライドガラスの場合、材料コス
トが高くつくと共に、その成形が困難で、厚みにバラツ
キが生じやすい等の問題があった。
However, in the case of the slide glass, there are problems that the material cost is high, the molding is difficult, and the thickness tends to vary.

【0008】また、従来のマイクロアレイチップ1にお
いては、上記のように透明基板1a上に多数の特異的結
合物質1bをドットとして所定の間隔でマトリックス状
に高密度で塗布する際に、隣り合う特異的結合物質1b
が結合したり、また各特異的結合物質1bに対してDN
A等の被検体をピペット等で滴下する際に、被検体が異
なった特異的結合物質1bにも供給されたりするという
問題があった。
In the conventional microarray chip 1, when a large number of specific binding substances 1b are applied as dots at high density in a matrix at predetermined intervals on the transparent substrate 1a as described above, adjacent specific bonding substances 1b are applied. Binding substance 1b
Binds to each other, and DN binds to each specific binding substance 1b.
When the sample such as A is dropped by a pipette or the like, there is a problem that the sample is supplied to a different specific binding substance 1b.

【0009】[0009]

【発明が解決しようとする課題】この発明は、励起光に
よって発光する被検体と結合させる既知の特異的結合物
質が透明基板上に多数配列されてなるマイクロアレイチ
ップにおける上記のような問題を解決することを課題と
するものである。
SUMMARY OF THE INVENTION The present invention solves the above-mentioned problems in a microarray chip in which a large number of known specific binding substances to be bound to an analyte emitting light by excitation light are arranged on a transparent substrate. That is the task.

【0010】すなわち、この発明においては、マイクロ
アレイチップに用いる透明基板を安価で精度よく成形で
きるようにし、また透明基板上に多数の特異的結合物質
をマトリックス状に高密度で塗布する際に、隣り合う特
異的結合物質が結合したり、各特異的結合物質に対して
被検体をピペット等で滴下する際に、被検体が異なった
特異的結合物質にも供給されたりするのを確実に防止で
きるようにすることを課題とするものである。
That is, according to the present invention, a transparent substrate used for a microarray chip can be formed at low cost and with high precision, and when a large number of specific binding substances are applied in a matrix at a high density on a transparent substrate, adjacent substrates can be formed. It is possible to reliably prevent the analyte from being supplied to a different specific binding substance when a matching specific binding substance is bound or when the analyte is dropped onto each specific binding substance with a pipette or the like. It is an object to do so.

【0011】[0011]

【課題を解決するための手段】この発明におけるマイク
ロアレイチップにおいては、上記のような課題を解決す
るため、励起光によって発光する被検体15と結合させ
る既知の特異的結合物質12が透明基板11上に多数配
列されてなるマイクロアレイチップにおいて、上記の透
明基板11を、上記の励起光による発光が低いプラスチ
ック材料で構成するようにしたのである。
In the microarray chip according to the present invention, in order to solve the above-mentioned problems, a known specific binding substance 12 to be bound to a subject 15 which emits light by excitation light is provided on a transparent substrate 11. In the microarray chip in which a large number is arranged, the transparent substrate 11 is made of a plastic material which emits light with low excitation light.

【0012】そして、この発明におけるマイクロアレイ
チップのように、透明基板11を被検体15を発光させ
る励起光による発光が低いプラスチック材料で構成する
と、特異的結合物質12と被検体15とが結合した部分
以外における発光が抑制されて、特異的結合物質12と
被検体15とが結合した部分における発光が適切に検知
されるようになる。
When the transparent substrate 11 is made of a plastic material that emits a low amount of light due to excitation light that causes the subject 15 to emit light, as in the microarray chip of the present invention, the portion where the specific binding substance 12 and the subject 15 are bound The luminescence in other regions is suppressed, and the luminescence in the portion where the specific binding substance 12 and the analyte 15 are bound is appropriately detected.

【0013】また、このように透明基板11にプラスチ
ック材料を用いると、ガラスに比べて透明基板11の材
料コストが安くなると共に、その成形精度も高くなり、
厚みのバラツキも少ない精度の良いマイクロアレイチッ
プが得られるようになる。
When a plastic material is used for the transparent substrate 11 as described above, the material cost of the transparent substrate 11 is lower than that of glass, and the molding accuracy is higher.
A highly accurate microarray chip with little thickness variation can be obtained.

【0014】さらに、上記のように透明基板11にプラ
スチック材料を用いると、この透明基板11を成形する
際に、既知の特異的結合物質12をそれぞれ分離させて
収容する収容部13を設けることも容易に行えるように
なる。
Further, when a plastic material is used for the transparent substrate 11 as described above, a housing 13 for separately storing the known specific binding substances 12 may be provided when the transparent substrate 11 is molded. It will be easy to do.

【0015】そして、このように透明基板11上に既知
の特異的結合物質12をそれぞれ分離させて収容する収
容部13を設けると、多数の特異的結合物質12をマト
リックス状に高密度で塗布する際に隣り合う特異的結合
物質12が結合するのが防止されると共に、各特異的結
合物質12に対して被検体15をピペット等で滴下する
際に、被検体15が隣の異なった特異的結合物質12に
供給されるのも防止できるようになる。
By providing the accommodating portions 13 for separately accommodating the known specific binding substances 12 on the transparent substrate 11 as described above, a large number of specific binding substances 12 are applied in a matrix at a high density. In this case, the specific binding substances 12 adjacent to each other are prevented from binding, and when the test substance 15 is dropped on each specific binding substance 12 with a pipette or the like, the test substance 15 may be different from the next specific binding substance 12. Supply to the binding substance 12 can also be prevented.

【0016】ここで、この発明におけるマイクロアレイ
チップにおいて、透明基板11に使用する被検体15を
発光させる励起光による発光が低いプラスチック材料と
しては、例えば、ポリメチルメタクリレートの水素原子
をフッ素原子に置換したフッ化ポリメチルメタクリレー
ト等のフッ素系のプラスチック材料を用いることができ
る。
Here, in the microarray chip according to the present invention, as a plastic material which emits light from the subject 15 used for the transparent substrate 11 and emits light with low excitation light, for example, hydrogen atoms of polymethyl methacrylate are replaced by fluorine atoms. Fluorine-based plastic materials such as fluorinated polymethyl methacrylate can be used.

【0017】[0017]

【発明の実施の形態】以下、この発明の実施形態に係る
マイクロアレイチップを添付図面に基づいて具体的に説
明する。
DETAILED DESCRIPTION OF THE PREFERRED EMBODIMENTS Hereinafter, a microarray chip according to an embodiment of the present invention will be specifically described with reference to the accompanying drawings.

【0018】この実施形態のマイクロアレイチップ10
においては、図1及び図2に示すように、被検体15を
発光させる励起光による発光が低いプラスチック材料を
用いて射出成形等により透明基板11を成形するように
し、この透明基板11上に縦,横に所要間隔を介して多
数の隔壁14を設けて、この透明基板11上に多数の収
容部13を設け、各収容部13に異なった種類の既知の
特異的結合物質12をそれぞれ分離させて収容させてい
る。
The microarray chip 10 of this embodiment
In FIG. 1, as shown in FIGS. 1 and 2, the transparent substrate 11 is molded by injection molding or the like using a plastic material that emits light with low excitation light that causes the subject 15 to emit light. , A large number of partition walls 14 are provided laterally at a required interval, and a large number of storage sections 13 are provided on the transparent substrate 11 so that different types of known specific binding substances 12 are separated from each other in the storage sections 13. And housed.

【0019】そして、図2に示すように、上記のように
既知の特異的結合物質1が収容された各収容部13に、
ピペット(図示せず)等で紫外線等の励起光によって発
光するように蛍光色素を付与した被検体15を供給す
る。
As shown in FIG. 2, each of the accommodating portions 13 accommodating the known specific binding substance 1 as described above,
A test object 15 provided with a fluorescent dye so as to emit light by excitation light such as ultraviolet light is supplied by a pipette (not shown) or the like.

【0020】このように被検体15を各収容部13に供
給すると、この被検体15が適当な収容部13に収容さ
れた既知の特異的結合物質12とハイブリダイズされる
ようになる。
When the specimen 15 is supplied to each of the storage sections 13 as described above, the specimen 15 is hybridized with the known specific binding substance 12 stored in the appropriate storage section 13.

【0021】そして、このように既知の特異的結合物質
12とハイブリダイズされた被検体15だけが残留する
ようにして、ハイブリダイズされていない被検体15を
除去する。
Then, the non-hybridized analyte 15 is removed such that only the analyte 15 hybridized with the known specific binding substance 12 remains.

【0022】その後は、このマイクロアレイチップ10
に対して上記の蛍光色素を励起させる励起光を走査させ
て照射し、蛍光色素が付与された被検体15が既知の特
異的結合物質12とハイブリダイズされた部分における
蛍光を光検出器(図示せず)で検出し、マイクロアレイ
チップ10の何れの収容部13に収容された既知の特異
的結合物質12と被検体15とが結合したかを検知し、
これにより被検体15を特定するようにしている。
Thereafter, the microarray chip 10
Is irradiated with the excitation light for exciting the above-mentioned fluorescent dye, and the fluorescence in the portion where the subject 15 to which the fluorescent dye is added is hybridized with the known specific binding substance 12 is detected by a photodetector (FIG. (Not shown) to detect which known specific binding substance 12 contained in the containing portion 13 of the microarray chip 10 and the subject 15 have bound,
Thus, the subject 15 is specified.

【0023】ここで、このように蛍光色素が付与された
被検体15が既知の特異的結合物質12とハイブリダイ
ズされた部分における蛍光を光検出器で検出するにあた
り、この実施形態のマイクロアレイチップ10では、上
記のように透明基板11を、被検体15を発光させる励
起光による発光が低いプラスチック材料で構成している
ため、被検体15が既知の特異的結合物質12とハイブ
リダイズされた部分以外での蛍光が抑制され、被検体1
5が既知の特異的結合物質12とハイブリダイズされた
部分の検知が適切に行えるようになる。
Here, when the test substance 15 to which the fluorescent dye has been applied as described above detects the fluorescence in the portion hybridized with the known specific binding substance 12 with the photodetector, the microarray chip 10 of this embodiment is used. Since the transparent substrate 11 is made of a plastic material that emits a low amount of light due to the excitation light that causes the subject 15 to emit light as described above, the portion where the subject 15 is hybridized with the known specific binding substance 12 is used. Of the specimen 1
5 can appropriately detect a portion hybridized with the known specific binding substance 12.

【0024】また、マイクロアレイチップ10の何れの
収容部13において蛍光が検出されたかを容易に確認で
きるようにするため、図4に示すように、透明基板11
上に設けられた多数の収容部13の縦列にa,b,c,
…の符号を、横列に1,2,3,4,…の番号を付ける
ようにすることも可能である。
As shown in FIG. 4, a transparent substrate 11 is provided so that it is possible to easily confirm in which receiving section 13 of the microarray chip 10 fluorescence has been detected.
The columns a, b, c,
. Can be numbered 1, 2, 3, 4,... In the rows.

【0025】また、この実施形態のマイクロアレイチッ
プ10においては、透明基板11上に縦,横に所要間隔
を介して多数の隔壁14を設けて、この透明基板11上
に多数の収容部13を設けるようにしたが、図5に示す
ように、透明基板11上に縦,横に所要間隔を介して多
数の凹所からなる収容部13を設けることも可能であ
り、この収容部13の平面形状は特に限定されず、例え
ば、四角形状や円形状等に形成することができる。
In the microarray chip 10 of this embodiment, a large number of partition walls 14 are provided on the transparent substrate 11 vertically and horizontally at a required interval, and a large number of accommodation sections 13 are provided on the transparent substrate 11. However, as shown in FIG. 5, it is also possible to provide a housing 13 comprising a large number of recesses on the transparent substrate 11 at required intervals in the vertical and horizontal directions. Is not particularly limited, and for example, can be formed in a square shape, a circular shape, or the like.

【0026】[0026]

【発明の効果】以上詳述したように、この発明における
マイクロアレイチップにおいては、透明基板を被検体を
発光させる励起光による発光が低いプラスチック材料で
構成するようにしたため、特異的結合物質と被検体とが
結合した部分における発光が適切に検知されるようにな
り、またガラスに比べて透明基板の材料コストが安くな
って安価に製造できるようになると共に、その成形精度
も高くなって、厚みのバラツキ等の少ない精度の良いマ
イクロアレイチップが得られるようになった。
As described in detail above, in the microarray chip according to the present invention, the transparent substrate is made of a plastic material that emits light with low excitation light that emits light from the subject. The emission of light at the part where is bonded to the substrate is properly detected, and the material cost of the transparent substrate is lower than that of glass so that the transparent substrate can be manufactured at a low cost. It has become possible to obtain a high-precision microarray chip with little variation or the like.

【0027】また、上記のように透明基板をプラスチッ
ク材料で構成すると、この透明基板上に既知の特異的結
合物質をそれぞれ分離させて収容する収容部を設けるこ
とも容易に行えるようになった。
Further, when the transparent substrate is made of a plastic material as described above, it is possible to easily provide the accommodating portions for separately accommodating the known specific binding substances on the transparent substrate.

【0028】そして、このように透明基板上に既知の特
異的結合物質をそれぞれ分離させて収容する収容部を設
けると、多数の特異的結合物質をマトリックス状に高密
度で塗布する際に、隣り合う特異的結合物質相互が結合
するのを確実に防止できるようになり、また各特異的結
合物質に対して被検体をピペット等で滴下する際に、被
検体が隣の異なった特異的結合物質に供給されるのも防
止され、精度の良い検知が行えるようになった。
By providing the accommodating portions for separately accommodating the known specific binding substances on the transparent substrate as described above, when a large number of specific binding substances are applied in a matrix at a high density, adjacent specific binding substances can be placed adjacent to each other. The specific binding substances that match each other can be reliably prevented from binding to each other, and when the analyte is dropped on each specific binding substance with a pipette or the like, the analytes are placed next to different specific binding substances. Is also prevented, and accurate detection can be performed.

【図面の簡単な説明】[Brief description of the drawings]

【図1】従来のマイクロアレイチップの概略平面図であ
る。
FIG. 1 is a schematic plan view of a conventional microarray chip.

【図2】この発明の一実施形態に係るマイクロアレイチ
ップの概略平面図である。
FIG. 2 is a schematic plan view of a microarray chip according to one embodiment of the present invention.

【図3】同実施形態に係るマイクロアレイチップの部分
拡大断面図である。
FIG. 3 is a partially enlarged cross-sectional view of the microarray chip according to the same embodiment.

【図4】同実施形態に係るマイクロアレイチップにおい
て、透明基板上に設けられた多数の収容部の縦列にa,
b,c,…の符号を、横列に1,2,3,4,…の番号
を付けた状態を示した部分拡大説明図である。
FIG. 4 shows a microarray chip according to the same embodiment in which a,
FIG. 3 is a partially enlarged explanatory view showing a state where reference numerals b, c,... are assigned numbers 1, 2, 3, 4,.

【図5】同実施形態に係るマイクロアレイチップにおい
て、透明基板上に設ける収容部の変更例を示した部分拡
大断面図である。
FIG. 5 is a partially enlarged cross-sectional view showing a modified example of a housing provided on a transparent substrate in the microarray chip according to the embodiment.

【符号の説明】[Explanation of symbols]

10 マイクロアレイチップ 11 透明基板 12 特異的結合物質 13 収容部 15 被検体 Reference Signs List 10 Microarray chip 11 Transparent substrate 12 Specific binding substance 13 Housing 15 Subject

Claims (2)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項1】 励起光によって発光する被検体15と結
合させる既知の特異的結合物質12が透明基板11上に
多数配列されてなるマイクロアレイチップにおいて、上
記の透明基板11を、上記の励起光による発光が低いプ
ラスチック材料で構成したことを特徴とするマイクロア
レイチップ。
1. In a microarray chip in which a number of known specific binding substances 12 to be bound to a subject 15 which emits light by excitation light are arranged on a transparent substrate 11, the transparent substrate 11 is moved by the excitation light. A microarray chip comprising a plastic material having low light emission.
【請求項2】 請求項1に記載したマイクロアレイチッ
プにおいて、上記の透明基板11に、既知の特異的結合
物質12をそれぞれ分離させて収容する収容部13を設
けたことを特徴とするマイクロアレイチップ。
2. The microarray chip according to claim 1, wherein said transparent substrate 11 is provided with storage portions 13 for separately storing known specific binding substances 12.
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