【発明の詳細な説明】
新規のシステイン誘導体、その製造のための方法及びそれを含む医薬品
本発明はアミノ酸Ｌ−又はＤ−システインであってそのアミノ及びカルボキシ
ル官能基において非ペプチド型基により誘導されているもの（式１）の利用を基
礎とする新規のマトリックス金属プロテイナーゼインヒビターを含んで成る。本
発明はこのインヒビターの製造及び治療分野におけるその利用についての方法を
含んで成る。
マトリックス金属プロテイナーゼ(MMP)のファミリーは薬剤デザインの主たる
標的となり始めており、なぜならこのような酵素は組織の再造形及び接続組織の
代謝回転に関与し、その結果深刻な症状、即ち（ｉ）急速な細胞外マトリックス
分解が起こる症状、例えばうっ血性心不全及び高度な転移性腫瘍細胞の管外遊出
、又は（ii）ゆっくりとした細胞外マトリックス分解が起こる症状、例えば動脈
硬化損傷形成及び破裂、変形性関節症における軟骨マトリックスの損失、骨粗し
ょう症における骨マトリックス分解、歯周病における歯肉分解、アルツハイマー
プラーク形成及びリウマチ様関節炎におけるマトリックス再造形及び沈着に関与
する。
MMPファミリーは現在14の構成員から成り、このうちの10は可溶性形態で細胞
から分泌され、そして４つの構成員は膜結合型酵素である。MMPは亜鉛依存性且
つカルシウム要求性の酵素であり、金属プロテイナーゼ（TIMP）ファミリーの組
織インヒビターの構成員のいずれかにより阻害される。このクラスの酵素の合成
インヒビターはヒドロキサメート、Ｎ−カルボキシアルキル誘導体、ホスホンア
ミデート及びホスホフィネートとして、並びにチオール基の利用を
介して活性部位亜鉛原子のためのリガンドとして開発されている（約80残基のＮ
末端プロペプチド）。このプロペプチドは３つのα−ヘリックスを含む独立の小
さめのドメインと活性部位を占める長いペプチドを形成している。このような構
造全体における触媒ドメインは２個のZn2+イオン、即ち、「構造」亜鉛イオンと
「触媒」亜鉛イオンとを含む。「触媒」亜鉛イオンには共通配列HEXXHXXGXXHの
３個のヒスチジル残基の側鎖が配位している。阻害された酵素における「触媒」
亜鉛の４番目のリガンドはヒドロキサメート又はカルボキシレートの如きインヒ
ビターの配位基である；プロ−MMPプロペプチドにおいては、それはシステイン
残基のチオール基である（１）。
関連して、今までに提唱されてきたチオールベースコラゲナーゼインヒビター
は一般にシステイン又はシステイン様アミノ酸含有のペプチド構造をとり、そし
てそのデザインは基質の結合態様、そしてより最近になってはシステイン含有プ
ロペプチドの結合態様に基づいている。
本発明はシステインから誘導された一般式Ｉに示す非ペプチド様のMMPインヒ
ビターの新規のクラス、その調製のための方法及びこのような化合物を含む医薬
組成物、並びに医薬品におけるその治療的用途に関連する：
（式中、
Ａは−CO−、−SO2−、−NH−CO−又は−Ｏ−CO−を表わし、
Ｒ1は水素；１〜15個の炭素原子の直鎖もしくは枝分れした飽和もしくは不飽
和アルキル基；ハロゲン、メルカプト、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノもしく
はニトロにより置換された、又は任意的に１もしくは複数の置換基により置換さ
れた炭素環式芳香族もしくは非芳香族環系により置換された、又は任意的に置換
された芳香族もしくは非芳香族複素環により置換されたＣ1−Ｃ15アルキル基、
その医薬的に許容される塩、又はその光学活性形態を表わし、
Ｒはヒドロキシ；１〜15個の炭素原子の直鎖もしくは枝分れした飽和もしくは
不飽和アルキル基；又は任意的に１もしくは複数個の置換基により置換された炭
素環式芳香族もしくは非芳香族環系により置換された、又は任意的に置換された
芳香族もしくは非芳香族複素環により置換されたＣ1−Ｃ15アルキル基、その医
薬的に許容される塩、又はその光学活性形態を表わす）。
式Ｉに関し、Ｒ及び／又はＲ1はメチル、エチル、プロピル、ｎ−ブチル、ter
t−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウン
デシル、ドデシル、等、ビニル等、並びに対応のアルキニル基、例えばアセチレ
ンから選ばれる１〜15個の炭素原子の枝分れした飽和又は不飽和アルキル基を表
わす。
当該アルキル基についての炭素環式芳香族又は非芳香族置換基はＣ3−Ｃ6シク
ロアルキル、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルもしくはシ
クロヘキシル、又はＣ6−Ｃ14炭素環式芳香族置換基、例えばフェニル、ナフチ
ルもしくはアントラニル、又は複素環式非芳香族置換基、例えばピロリジニル、
ピペリジニル、ピペラジニルもしくはモルホリニル、又は複素環式芳香族置換基
、例えばピロリル、ピリジニル、フリル、チエニル、チアゾリル、イミダゾリル
、ピリミジニル、プリニル、インドリル、キノリル、カルバゾリルから選ばれる
。
炭素環式芳香族又は非芳香族環系のそれぞれ、複素環は任意的に例えば１又は
複数のハロゲン−、ニトロ−、ヒドロキシ−、Ｃ1−Ｃ6アルキル−、Ｃ1−Ｃ6ア
ルコキシ−、アミノ−、メルカプト−、カルボキシル−、シアノ−、又はスルホ
ニル基により置換されていてよい。
Ａが−CO−を表わすなら、残基R1CO−は好ましくは下記のカルボン酸残基から
選ばれる：
ギ酸、酢酸、プロピオン酸、ヘキサノン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パル
ミチン酸、ステアリン酸、アラキドン酸、ベヘン酸、オクタデセノン酸、リノー
ル酸、リノレン酸、３−メルカプトプロピオン酸、グリオキシル酸、マロン酸、
コハク酸、４−アミノブタノン酸、６−アミノカプロン酸、３−ニトロプロピオ
ン酸、ナフチル酢酸、４−アミノフェニル酢酸、アクリル酸、桂皮酸、４−アミ
ノ桂皮酸、アミノクロトン酸、フマル酸、マレイン酸、フタル酸、安息香酸、ニ
トロ安息香酸、３−アミノ安息香酸、４−アミノ安息香酸、アントラニル酸、サ
リチル酸、３−アミノ−サリチル酸、４−アミノサリチル酸、５−アミノ−サリ
チル酸、ナフトン酸、ｐ−フェニル安息香酸、フェナントロン酸、ニコチン酸、
３−アミノピラジン−２−炭酸、ピリジンカルボン酸、ピペラジンカルボン酸、
ピペリジンカルボン酸。
Ａが−SO2を表わすなら、残基R1SO2−は好ましくは下記のスルホン酸残基から
選ばれる：
メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、プロパンスルホン酸、３−ヒドロキシ
プロパンスルホン酸、オルタニル酸（アニリン−２−スルホン酸）、ナフタレン
スルホン酸、ナフチルアミンスルホン酸、アミノメタンスルホン酸、２−メルカ
プトエタンスルホン酸、２−クロロエタンスルホン酸、Ｎ，Ｎ’−ジメチルスル
ファミン酸、
ピペリジンスルホン酸、５−（２−アミノエチルアミノ）−１−ナフタレン−ス
ルホン酸、ヨードキシキノリンスルホン酸、ピリジン−３−スルホン酸、ｐ−ト
ルエンスルホン酸、２−（ｐ−トルイジノ）ナフタレン−６−スルホン酸、デシ
ルメタンスルホン酸、２−〔（２−アミノ−２−オキソエチル）アミノ〕エタン
スルホン酸、２−（Ｎ−シクロヘキシルアミノ）エタンスルホン酸、２−〔ビス
（２−ヒドロキシエチル）アミノ〕エタンスルホン酸、Ｎ−２−ヒドロキシエチ
ルピペラジン−Ｎ’−２−エタンスルホン酸、Ｎ−トリス（ヒドロキシメチル）
メチル−２−アミノ−エタンスルホン酸、２−（Ｎ−モルホリノ）エタンスルホ
ン酸、ピペラジン−Ｎ，Ｎ’−ビス（２−エタンスルホン酸）、３−（２−ピリ
ジル）−５，６−ビス（４−フェニルスルホン酸）−１，２，４−トリアジン。
Ａが−NHCO−を表わすなら、残基R1−NH−CO−は好ましくは下記の尿素誘導体
残基から選ばれる：
ｎ−ブチル、Ｒ−（＋）−アルファ−フェニルエチル−、Ｒ−（−）−１−（
１−ナフチル）−エチル−、エチル−、プロピル−、ヘキシル−、オクチル−、
ベンジル−、クロロベンジル−、メチルベンジル−、３−ピコリル−、２−（ア
ミノメチル）−ピリジル尿素。
Ａが−Ｏ−CO−を表わすなら、残基R1−Ｏ−CO−は好ましくは下記のカルバメ
ート残基から選ばれる：
メチルカルバメート、エチルカルバメート、９−フルオレニルメチルカルバメ
ート、９−（２−スルホ）−フルオレニルメチルカルバメート、９−（２，７−
ジブロモ）フルオレニルメチルカルバメート、４−メトキシフェナシルカルバメ
ート、２，２，２−トリクロロエチルカルバメート、２−フェニルエチルカルバ
メート、１−（１−アダマンチル）−１−メチルエチルカルバメート、１，１−
ジメチル−２−ハロエチルカルバメート、１−メチル−１−（４−ビフェニル）
−１−メチルエチルカルバメート、２−（２’−ピリジル）エチルカルバメート
、１−アダマンチルカルバメート、ビニルカルバメート、アリルカルバメート、
１−イソプロピルアリルカルバメート、４−ニトロシンナミルカルバメート、８
−キノリルカルバメート、シクロヘキシルカルバメート、ベンジルカルバメート
、ｐ−メトキシベンジルカルバメート、ｐ−ニトロベンジルカルバメート、ｐ−
ブロモベンジルカルバメート、９−アントリルメチルカルバメート、ジフェニル
メチルカルバメート、２−メチルスルホニルエチルカルバメート、２−（ｐ−ト
ルエンスルホニル）エチルカルバメート、４−メチルチオフェニルカルバメート
。
Ｒは好ましくは下記の残基から選ばれる：
エチル−、プロピル−、ヘキシル−、オクチル−、ベンジル−、４−クロロベ
ンジル−、４−メチルベンジル−、３−ピコリル−、２−（メチル）−ピリジル
−、４−（メチル）ピリジル−、３−フェニルプロピル−、４−フェニルブチル
−、２−（ｐ−トリル）エチル−、３−ニトロベンジル−、ベンジルエチル−、
２−フェニルエチル−、アダマンチル−、ピリジル−、フェニル−、コレステニ
ル−、ナフチル−、４−フェノキシ−フェニル又はインドリエチル。
式Ｉに係る好適な化合物は実施例５〜22の化合物、及び下記の表の化合物であ
る： 式Ｉに係る化合物は異なる構造及び異なる特性を有する３つの部から成る：活
性部位Zn2+イオンについてのキレート形成基SH、疎水性Ｓ1’タンパク質ポケッ
トと相互作用する並びにＰ1基質結合クレフトと共に更なる疎水性相互作用を担
う疎水性基Ｒ1又はＲo
一般式Ｉのインヒビターはその様々な病理学的処置、例えば骨粗しょう症リウ
マチ様関節炎、歯周病、動脈硬化症、うっ血性心不全、腫瘍の侵襲及び転移、並
びに脈管形成のために必要とされる様々なMMPの選択的インヒビターの開発を可
能にする。
論文の中に似たような化合物が記載されていることが知られている。しかしな
がら、これらはペプチド化合物であり、そしてヒト血漿において劣悪な半減期を
示す。
システイン誘導体の化学構造は増大した代謝安定性の観点で選定した。対応し
て、アミノ基はアミドを供するようにカルボン酸でアシル化したが、好適にはウ
レタニル誘導体が酵素的代謝に対してより安定であることが知られている。似た
ように、Ｃ−末端カルボキシル基は、リパーゼによるエステルの加水分解に基づ
く迅速な浄化速度を避けるためエステル化の代わりにアミドとして誘導化した。
更に、ペプチダーゼに対してより安定であることで知られるＮ−アルキル及びＮ
−アリールアミドを選定した。
インヒビターの合成のためには有機合成の伝統的な手順を適用した（２）。式
IIの関連のＬ−及びＤ−システイン誘導体はペプチド化学の標準手順、それに次
ぐスキームＩに従うEDCI／HOBtによるアミド化に従って調製した。式IIIのシス
チン化合物の式Ｉのシステイン誘導体に至るその後の還元はスキーム１に示すよ
うにメルカプタン又は好ましくはトリブチルホスフィンの如きホスフィンのよう
な還元剤により実施した。
スキーム１。本発明のMMPインヒビターの合成のための汎用のルート
MMPを特異的に阻害する本発明の化合物はリウマチ様関節炎、並びにコラーゲ
ン分解活性が原因となる関連の病気、例えば角膜潰瘍、骨粗しょう症、歯周病、
パジェット病、歯肉炎、腫瘍侵襲、ジストロフィー表皮剥離、水疱、全身性潰瘍
、表皮潰瘍、胃潰瘍等の処置において薬理学的に有用である。このような化合物
はリウマチ様関節炎(一次慢性多発性関節炎、PCP)、全身性エリテマトーデス(SL
E)、若年性リウマチ様関節炎、シェーグレン症候群（RA＋乾燥症候群）、結節多
発性動脈炎及び関連の脈管炎、例えばウェゲナー肉芽腫症、巨大細胞動脈炎、グ
ッドパスチャー症候群、過敏性血管炎、多発性筋炎及び皮膚筋炎、進行性全身硬
化症、M．Bechet，Reiter症候群（関節炎＋尿道炎＋結膜炎）、複合接続組織病
（シャープ症候群）、強直性脊椎炎（M．Bechterew）の処置において極めて有用
である。
本発明の化合物は任意の適当なルートにより、好ましくはかかるルートに適応
させた医薬組成物の形態で、且つ意図する処置のために有効な用量で投与してよ
い。医学症状の進行を予防する又は止めるために必要とされる本発明の化合物の
治療的有効量は当業者により容易に確認される。
従って、本発明は１又は複数種の本発明の化合物を、１又は複数種の無毒な医
薬的に許容される担体及び／又は助剤（まとめて以降、「担体材料」と呼ぶ）、
並びに所望するならその他の化合物と一緒に含んで成る新規の医薬組成物のクラ
スを提供し、かかる化合物及び組成物は例えば脈管内的に、腹腔内的に、皮下的
に、筋肉内的に、又は局所的に投与されうる。
あらゆる投与のため、当該医薬組成物は例えば錠剤、カプセル、懸濁物又は液
体の形態であってよい。この医薬組成物は好ましくは特定量の活性成分を含む剤
型として作る。哺乳動物のための適当な
毎回の用量は患者の症状及びその他の要因に依存して幅広く変えられうる。しか
しながら、約0.1〜300mg／kg体重、特に約１〜30mg／kg体重の用量が適当であり
うる。この活性成分は注射によっても投与してよい。
本発明の化合物及び／又は組成物による病気症状を処置するための投与療法は
様々な要因、例えばタイプ、年齢、性別及び患者の医療状況、感染症の症度並び
に投与の機能及び採用する特定の化合物に応じて選択され、従って幅広く変えら
れうる。
治療目的のため、本発明の化合物は通常指示された投与のルートに合うｌ又は
複数の助剤と組合せる。経口投与の場合、この化合物はラクトース、スクロース
、デンプン粉、アルカノン酸のセルロースエステル、セルロースアルキルエステ
ル、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、酸化マグネシウム、リ
ン酸及び硫酸のナトリウム及びカルシウム塩、ゼラチン、アカシア、アルギン酸
ナトリウム、ポリビニル−ピロリドン及び／又はポリビニルアルコールと混合し
、それ故慣用の投与のために錠剤化又は封入する。他方、この化合物は水、ポリ
エチレングリコール、プロピレングリコール、エタノール、コーン油、綿実油、
ピーナッツ油、ごま油、ベンジルアルコール、塩化ナトリウム及び／又は様々な
バッファーに溶解してよい。その他の助剤及び投与モードが医薬業界において十
分且つ幅広く知られている。むろん、任意の所定の状況における適切な用量は処
置すべき症状の種類及び症度、投与のルート、並びに処置する哺乳動物の種、そ
の大きさ及び任意の個体特質に依存する。
代表的な担体、希釈剤及び助剤には、例えば水、ラクトース、ゼラチンデンプ
ン、ステアリン酸マグネシウム、タルク、植物油、ゴム、ポリアルキレングリコ
ール、石油ゼリー等が挙げられる。この
医薬組成物は固体形態、例えば顆粒、粉末又は座薬、又は液体形態、例えば溶液
、懸濁物又はエマルションにしてよい。この医薬組成物は慣用の医薬の助剤、例
えば保存剤、安定化剤、湿潤剤、乳化剤、緩衝剤、等に委ねてよい。
リウマチ様関節炎の処置において利用するため、本発明の化合物は任意の慣用
のルートを介して、好ましくはかかるルートに適応する医薬組成物の形態で意図
する処置のために有効な用量で投与してよい。関節炎の処置において、投与は経
口ルートを介して、又は冒された関節への関節内注射を介することが好都合であ
りうる。
前述の通り、投与する用量及び処置療法は例えば病気、その症度、処置する患
者、及びその応答に依存し、それ故幅広く変えられうる。
酵素アッセイ
MMP8の触媒ドメイン(Phe79−MMP8)及びMMP3を阻害実験のために用いた。酵素
アッセイは25℃で10mMのCaCl2、100mMのNaCl、50mMのトリス／HCl(pH7.6)の中で
８nMの酵素濃度、並びにMMP8のための蛍光原基質Dnp-Pro-Leu-Gly-Leu-Trp-Ala-
D-Arg-NH2（Bachem Ｍ−1855、1.10-5Ｍ）及びMMP3のためのMca-Arｇ−Pro-Lys-
Pro-Val-Glu-Nva-Trp-Arg-Lys(Dnp)-NH2(Bachem Ｍ−2110、4.10-6Ｍ)を用いて
実施した。測定はMMP8についてはStackら（３）、そしてMMP3についてはNagase
ら（４）により本質的に発表の通りにして実施した。350nm(MMP8)又は390nm(MMP
3)での蛍光の増大を100secの周期で追跡し、加水分解の初期速度を決定した。反
応速度データーの評価はCopelandら（５）により報告の通りに実施した。
表１．一般式Ｉの非ペプチドＬ−システイン誘導体によるMMP8及びMMP3の阻害の
例
合成一般的方法：
Ａ）アミド化：１mmoleのＮ，Ｎ’−ウレタニル−システイン、２mmolのHOBT（
ヒドロキシベンゾトリアゾール）及び2.08mmoleのEDCI（Ｎ−エチル−Ｎ’−（
３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド塩酸塩）を10mlのTHFに溶解又
は懸濁する。アミンを過剰量(2.5〜５mmol)で加え、そして塩酸塩の場合、当量
のＮ−メチルモルホリンを加える。反応混合物を室温で一夜撹拌し、小容量にま
で濃縮し、そして酢酸エチルと水として分配させる。有機層を５％のNaHCO3、５
％ KHSO4及び水で２回洗い、そしてMgSO4で乾かす。溶媒をエバポレーションし
、そしてその残渣を酢酸エチルと適当な溶媒、例えば石油エーテル、ジイソプロ
ピルエーテル、tert−ブチルメチルエーテル又はペンタンで沈殿させる。
Ｂ）還元：シスチン化合物（１mmol）を10mlの95％のトリフルオロエタノールの
中で1.5mmolのトリブチルホスフィンと反応させる。
この反応混合物を室温で一夜撹拌し、小容量にまでエバポレーションし、そして
酢酸エチルで希釈してからその生成物を適当な溶媒、例えば石油エーテル、ジイ
ソプロピルエーテル、tert−ブチルメチルエーテル又はペンタンで沈殿させる。
Ｎ，Ｎ’−ビス−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−シスチン−ビス−ヒドロキサ
メート（５ａ）
手順（Ａ）に従いＮ，Ｎ’−ビス−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−シスチン
（２）及びヒドロキシルアミンから調製。収率22％；TLCで均質(溶媒系：クロロ
ホルム／メタノール；４：１、Ｒf＝0.5)。
FAB−MS：ｍ／ｚ＝539.2〔Ｍ＋Ｈ+〕；Ｍr＝538.2、C22H26N4O8S2で計算。
ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−システイン−ヒドロキサメート（５）
手順（Ｂ）に従い、5aから調製。フラッシュクロマトグラフィーにより精製（
溶出液：CH2Cl2／MeOH、95：５、しかる後45：５）。収率：18％。
ビス−tert−ブチルオキシカルボニル−Ｌ−シスチン−ビス−ベンジルアミド（
６ａ）
（Ａ）に従ってＮ，Ｎ’−ビス−tert−ブチルオキシカルボニル−Ｌ−シスチ
ン（12）及びベンジルアミンから調製。収率：77％。TLCで均質(溶媒系：シクロ
ヘキサン／クロロホルム／酢酸、45：45：10、Ｒf＝0.7)。
Ｌ−シスチン−ビス−ベンジルアミド塩酸塩（６ｂ）
ジオキサン中の4.6ＭのHCl 100ml中の13.87ｇ（22.4mmol）の６ａを室温で一
夜撹拌した：沈殿物を集め、そしてエーテルでよく洗った。収量：11ｇ（定量）
。
Ｎ，Ｎ’−ビス−アセチル−Ｌ−シスチン−ビス−ベンジルアミド（６ｃ）
300mg(0.61mmol)の６ｂを酢酸エチル及び40mlのNaHCO3（５％）に分配し、次
いで無水酢酸(0.27ｇ、2.6mmol)と反応させる。有機層を水で洗い、MgSO4で乾か
し、そして乾くまでエバポレーションする。収率：94％；TLCで均質(溶媒系：シ
クロヘキサン／クロロホルム／酢酸；45：45：10、Ｒf＝0.4)。
Ｎ−アセチル−Ｌ−システイン−ベンジルアミド（６）
６ｃを手順（Ｂ）に従って還元した。収率65％；TLCで均質(溶媒系：CHCl3／M
eOH；４：１、Ｒf＝0.7)；m.p．186−189℃；
FAB−MS：ｍ／ｚ＝253.1〔Ｍ＋Ｈ+〕；Ｍr＝252.1、CH12H16N2O2Sで計算。
Ｎ，Ｎ’−ビス−ホルミル−Ｌ−シスチン−ビス−ベンジルアミド（７ａ）
手順（Ａ）に従って６ｂ及びギ酸から調製。収率：59％；TLCで均質(溶媒系：
シクロヘキサン／CHCl3／酢酸、45：45：10；Ｒf＝0.1)。
Ｎ−ホルミル−Ｌ−システイン−ベンジルアミド（７）
手順（Ｂ）に従う７ａの還元。収率：62％；TLCで均質（溶媒系：シクロヘキ
サン／CHCl3／酢酸；45：45：10；Ｒf＝0.45）；m.p．180−183℃；
FAB−MS：ｍ／ｚ＝239.0〔Ｍ＋Ｈ+〕；Ｍr＝238.3、C11H14N2O2Sで計算。
tert−ブチルオキシカルボニル−Ｌ−システイン−ベンジルアミド（８）
手順（Ｂ）に従う６ａの還元。収率：38％；TLCで均質(溶媒系：ヘプタン／ｔ
−ブタノール／酢酸、５：５：１、Ｒf＝0.7)；m.p.97−100℃；FAB−MS：ｍ／ｚ＝311.1〔Ｍ＋Ｈ+〕；Ｍr＝310.1、C15H22N2O3Sで計算。
Ｎ，Ｎ’−ビス−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−シスチン−ビス−ベンジルア
ミド（９ａ）
（Ａ）に従ってＮ，Ｎ’−ビス−ベンジルオキシカルボニル−シスチン及びベ
ンジルアミンから調製。収率：90％。
Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−システイン−ベンジルアミド（９）
（Ｂ）に従う９ａの還元。収率：41％；TLCで均質(溶媒系：シ
クロヘキサン／CHCI3／酢酸、45：45：10、Ｒf＝0.4)；m.p．148−152℃；
FAB−MS：ｍ／ｚ＝345.0〔Ｍ＋Ｈ+〕；Ｍr＝344.4、C18H20N2O3Sで計算。
Ｎ，Ｎ’−ビス−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−シスチン−ビス−４−ピリジ
ルメチルアミド（10ａ）
手順（Ａ）に従ってＮ，Ｎ’−ビス−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−シスチ
ン及び４−（アミノメチル）ピリジンから調製。収率59％；TLCで均質（溶媒系
：CHCl3／MeOH、４：１、Ｒf＝0.65）。
Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−システイン−４−ピリジルメチルアミド（
10）
手順（Ｂ）に従って10ａから調製。収率：65％；TLCで均質(溶媒系：CHCl3／M
eOH、４：１、Ｒf＝0.8)；m.p．122−125℃；FAB−MS：ｍ／ｚ＝346.2〔Ｍ＋Ｈ-〕；Ｍr＝345.1、C17H19N3O3Sで計算。
Ｎ，Ｎ’−ビス−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−シスチン−ビス−３−ピリジ
ルメチルアミド（11ａ）
手順（Ａ）に従ってＮ，Ｎ’−ビス−ベンジルオキシカルボニル
−シスチン及び３−（アミノメチル）ピリジンから調製。収率：69％；TLCで均
質(溶媒系：CHCl3／MeOH、４：１、Ｒf＝0.2)。
Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−システイン−ピリジルメチルアミド（11）
手順（Ｂ）に従う11ａの還元。収率：14％；TLCで均質(溶媒系CHCl3／MeOH、
４：１、Ｒf＝0.8)；m.p．125−127℃；
FAB−MS：ｍ／ｚ＝346.1〔Ｍ＋Ｈ+〕；Ｍr＝345.1、C17H19N3O3Sで計算。
Ｎ，Ｎ’−ビス−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−シスチン−ビス−２−ピリジ
ルメチルアミド（12ａ）
（Ａ）に従ってＮ，Ｎ’−ビス−ベンジルオキシカルボニル−シスチン及び２
−（アミノメチル）ピリジンから調製。収率：96％；TLCで均質(溶媒系：CHCl3
／MeOH、４：１、Ｒf＝0.7)。
Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−システイン−２−ピリジルメチルアミド（
12）
（Ｂ）に従う12ａの還元。収率33％；TLCで均質(溶媒系；CHCl3／MeOH、４：
１、Ｒf＝0.8);m.p．129−131℃；
FAB−MS：ｍ／ｚ＝346.1〔Ｍ＋Ｈ+〕；Ｍr＝345.1、C17H19N3O3Sで計算。
Ｎ，Ｎ’−ビス−ベンゾイル−Ｌ−シスチン−ビス−ベンジルアミド（13ａ）
（Ａ）に従って６ｂ及び安息香酸から調製。収率：78％；TLCで均質（溶媒系
：シクロヘキサン／CHCl3／酢酸：45：45：10、Ｒf＝0.65）。
Ｎ−ベンゾイル−Ｌ−システイン−ベンジルアミド（13）
（Ｂ）に従う13ａの還元により調製。収率57％；TLCで均質（溶媒系：シクロ
ヘキサン／CHCl3／酢酸；45：45：10、Ｒf＝0.55）；m.p．174−176℃；
FAB−MS：ｍ／ｚ＝315.1〔Ｍ＋Ｈ+〕；Ｍr＝314.1、C17H18N2O2Sで計算。
Ｎ，Ｎ’−ビス−トシル−Ｌ−シスチン−ビス−ベンジルアミド（14ａ）
390mg（0.794mmol）の６ｂを６mlのピリジン中の180mg（0.952mmol）の塩化ト
シルと反応させた。室温で12時間撹拌後、固体を濾過除去し、そしてその濾液を
トルエン、そして最後にtert−ブチルメチルエーテルを加えながら乾くまでエバ
ポレーションした。収率：81％；TLCで均質(溶媒系：CHCl3／MeOH、４：１、Ｒr
＝0.7)。Ｎ−トシル−Ｌ−システイン−ベンジルアミド（14）
（Ｂ）に従う14ａの還元により調製。収率：54％；TLCで均質(溶媒系：CHCl3
／MeOH、４：１、Ｒf＝0.6);m.p．180−182℃；FAB−MS：ｍ／ｚ=365.1〔Ｍ＋Ｈ+〕；Ｍr＝364.1、C17H20N2O3Sで計算。
Ｎ，Ｎ’−ビス−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−シスチン−ビス−２−フェニ
ルエチルアミド（15ａ）
（Ａ）に従いＮ，Ｎ’−ビス−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−シスチン及び
２−フェニルエチルアミンから調製。収率：34％；TLCで均質(溶媒系：CHCl3／M
eOH、19：1、Ｒf＝0.8)。
Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−システイン−２−フェニルエチルアミド（
15）
（Ｂ）に従う15ａの還元。収率：61％；TLCで均質(溶媒系：シクロヘキサン／
CHCl3／酢酸、45：45：10、Ｒf＝0.6);m.p．119−121℃。
FAB−MS：ｍ／ｚ＝359.1〔Ｍ＋Ｈ+〕；Ｍr＝358.1、C19H22N2O3Sで計算。
Ｎ，Ｎ’−ビス−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−シスチン−ビス−２−（４−
ヒドロキシフェニル）エチルアミド（16ａ）
（Ａ）に従ってＮ，Ｎ’−ビス−ベンジルオキシカルボニル−シスチン及び２
−（４−ヒドロキシフェニル）エチルアミンから調製。収率：71％；TLCで均質(
溶媒系：シクロヘキサン／CHCl3／酢
酸、45：45：10、Ｒf＝0.5)。
Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−システイン−２−（４−ヒドロキシフェニ
ル）エチルアミド（16）
（Ｂ）に従う16ａの還元。収率：24％；TLCで均質(溶媒系：シクロヘキサン／
CHCl3／酢酸、45：45：10、Ｒf＝0.6);m.p．133−135℃。
FAB−MS：ｍ／ｚ＝375.2〔Ｍ＋Ｈ+〕；Ｍr＝374.1、C19H22N2O4Sで計算。
Ｎ，Ｎ’−ビス−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−シスチン−ビス−４−クロロ
ベンジルアミド（17ａ）
（Ａ）に従ってＮ，Ｎ’−ビス−ベンジルオキシカルボニル−シスチン及び４
−クロロベンジルアミンから調製。収率：99％；TLCで均質(溶媒系：CHCl3／MeO
H、19：１、Ｒf＝0.8)。
Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−システイン−クロロベンジルアミド（17）
（Ｂ）に従う17ａの還元。収率：71％；TLCで均質(溶媒系：シクロヘキサン／
CHCl3／酢酸、45：45：10、Ｒf＝0.85)；m.p．137−139℃；
FAB−MS：ｍ／ｚ＝379.1〔Ｍ＋Ｈ+〕；Ｍr＝378.1、C18H19ClN2O3Sで計算。
Ｎ，Ｎ’−ビス−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−シスチン−ビス−３−フェニ
ルプロピルアミド（18ａ）
（Ａ）に従ってＮ，Ｎ’−ビス−ベンジルオキシカルボニル−シスチン及び３
−フェニルプロピルアミンから調製。収率：94％；TLCで均質(溶媒系：シクロヘ
キサン／CHCl3／酢酸、45：45：10、Ｒf＝0.7)。
Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−システイン−３−フェニルプロピルアミド
（18）
（Ｂ）に従う18ａの還元により調製。収率：76％；TLCで均質（溶媒系：シク
ロヘキサン／CHCl3／酢酸、45：45：10、Ｒf＝0.7）；m.p．104−106℃；FAB−MS：ｍ／ｚ＝373.2〔Ｍ＋Ｈ+〕；Ｍr＝372.2、C20H24N2O3Sで計算。
Ｎ，Ｎ’−ビス−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−シスチン−ビス−トリプトア
ミド（19ａ）
（Ａ）に従ってＮ，Ｎ’−ビス−ベンジルオキシカルボニル−シスチン及びト
リプトアミドから調製。収率：75％；TLCで均質(溶媒系：シクロヘキサン／CHCl3
／酢酸、45：45：10、Ｒf＝0.6)。ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−システイン
−トリプトアミド（19）
（Ｂ）に従う19ａの還元：収率：62％；TLCで均質(溶媒系：シクロヘキサン／
CHCl3／酢酸、45：45：10、Ｒf＝0.7);m.p．150−152℃；
FAB−MS：ｍ／ｚ＝398.2〔Ｍ＋Ｈ+〕；Ｍr＝397.2、C21H23N3O3Sで計算。
Ｎ，Ｎ’−ビス−ヘキサノール−Ｌ−システイン−ビス−ベンジルアミド（20ａ
）
手順（Ａ）に従って６ｂ及びヘキサノン酸から調製。収率：86％；TLCで均質(
溶媒系：シクロヘキサン／クロロホルム／酢酸、45：45：10；Ｒf＝0.6)。Ｎ−ヘキサノイル−Ｌ−システイン−ベンジルアミド（20）
手順（Ｂ）に従う20ａの還元。収率：69％；m.p．141−143℃；
FAB−MS：ｍ／ｚ＝309.2〔Ｍ＋Ｈ+〕；Ｍr＝308.2、C16H24N2O2Sで計算。
Ｎ，Ｎ’−ビス−オクタノイル−Ｌ−シスチン−ビス−ベンジルアミド（21ａ）
手順（Ａ）に従って６ｂ及びオクタノン酸から調製。収率：86％；TLCで均質(
溶媒系：シクロヘキサン／クロロホルム／酢酸、45：45：10、Ｒf＝0.6)。
Ｎ−オクタノイル−Ｌ−システイン−ベンジルアミド（21）
手順（Ｂ）に従う21ａの還元。収率：73％；m.p．137−139℃；
FAB−MS：ｍ／ｚ＝337.2〔Ｍ＋Ｈ+〕；Ｍr＝336.2、C18H28N2O2Sで計算。
Ｎ，Ｎ’−ビス−デカノイル−Ｌ−シスチン−ビス−ベンジルアミド（22ａ）
手順（Ａ）に従う６ｂ及びドデカノン酸から調製。収率：定量；TLCで均質(溶
媒系：シクロヘキサン／クロロホルム／酢酸、45：45：10、Ｒf＝0.9)。
Ｎ−デカノン−Ｌ−システイン−ベンジルアミド（22）
手順（Ｂ）に従う22ａの還元。収率：33％；Ｒf＝0.7);m.p．138−140℃； FAB−MS：ｍ／ｚ＝365.2〔Ｍ＋Ｈ+〕；Ｍr＝364.2、C20H32N2O2Sで計算。
１．Beckett，R．P．；Davidson，A．H．；Drummond，A．H．；Huxley，P．；Wh
ittaker，M．Drug Disc．Today 1996。
ie，Vol.15／I，Springer Verlag，Stuttgart，1974。
３．Stack，M．S．；Gray，R．D．J．Biol．Chem．1989，264，4277。
４．Nagase，H．；Fields，C．G．；Fields，G．B．J．Biol．Chem．1994，269
，20952。
５．Copeland，R．A．；Lombardo，D．；Giannaras，J．；Decicco，C．P．Bioo
rg．Med．Chem．Lett．1995，5，1947。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
Novel cysteine derivatives, methods for their production and pharmaceuticals containing them
The present invention relates to the amino acids L- or D-cysteine and their amino and carboxy
Based on the use of non-peptidyl groups derived from non-peptidyl groups (Formula 1)
Comprising a novel matrix metalloproteinase inhibitor as a foundation. Book
The invention provides a method for the manufacture of this inhibitor and its use in the therapeutic field.
Comprising.
The family of matrix metalloproteinases (MMPs) is a major drug design
It is beginning to be targeted because such enzymes can remodel tissue and
Are involved in turnover and consequently severe symptoms, ie (i) rapid extracellular matrix
Conditions in which degradation occurs, such as congestive heart failure and extravasation of highly metastatic tumor cells
Or (ii) a condition in which slow extracellular matrix degradation occurs, such as an artery
Sclerotic injury formation and rupture, loss of cartilage matrix in osteoarthritis, bone roughening
Decomposition of bone matrix in acne disease, gingival degradation in periodontal disease, Alzheimer's disease
Involved in matrix remodeling and deposition in plaque formation and rheumatoid arthritis
I do.
The MMP family currently consists of 14 members, 10 of which are soluble
And four members are membrane-bound enzymes. MMP is zinc dependent and
A family of metalloproteinases (TIMPs)
Inhibited by any of the members of the textile inhibitor. Synthesis of this class of enzymes
Inhibitors include hydroxamates, N-carboxyalkyl derivatives,
Utilization of thiol group as midid and phosphofinate
Has been developed as a ligand for the active site zinc atom (about 80 residues of N
Terminal propeptide). This propeptide is an independent small containing three α-helices.
It forms a long peptide occupying the shark domain and active site. Such a structure
The catalytic domain in the whole structure is two Zn2+Ions, or "structure" zinc ions
"Catalyst" containing zinc ions. The “catalyst” zinc ion has a common sequence HEXXHXXGXXH
The side chains of three histidyl residues are coordinated. "Catalysis" in inhibited enzymes
The fourth ligand of zinc is an inhibitor such as a hydroxamate or carboxylate.
Bitter coordination group; in the pro-MMP propeptide it is cysteine
It is a thiol group of a residue (1).
Relatedly, thiol-based collagenase inhibitors proposed so far
Generally has a peptide structure containing cysteine or cysteine-like amino acids, and
The design depends on the mode of attachment of the substrate and, more recently, on cysteine-containing
Based on the mode of attachment of the peptide.
The present invention relates to non-peptide-like MMP inhibitors of general formula I derived from cysteine.
A new class of bitters, methods for their preparation and medicaments containing such compounds
Related to the composition, and its therapeutic use in medicine:
(Where
A is -CO-, -SOTwo-, -NH-CO- or -O-CO-,
R1Is hydrogen; linear or branched saturated or unsaturated of 1 to 15 carbon atoms
Sum alkyl group; halogen, mercapto, hydroxy, alkoxy, amino or
Is substituted by nitro or, optionally, by one or more substituents
Substituted or optionally substituted by a substituted carbocyclic aromatic or non-aromatic ring system
Substituted by a substituted aromatic or non-aromatic heterocycle1-CFifteenAlkyl group,
Represents a pharmaceutically acceptable salt thereof, or an optically active form thereof,
R is hydroxy; linear or branched saturated or 1 to 15 carbon atoms
Unsaturated alkyl groups; or chars optionally substituted by one or more substituents
Substituted or optionally substituted by a cyclic aromatic or non-aromatic ring system
C substituted by an aromatic or non-aromatic heterocycle1-CFifteenAlkyl group, the doctor
A pharmaceutically acceptable salt, or an optically active form thereof).
With respect to formula I, R and / or R1Is methyl, ethyl, propyl, n-butyl, ter
t-butyl, pentyl, hexyl, heptyl, octyl, nonyl, decyl,
Decyl, dodecyl, etc., vinyl and the like, and the corresponding alkynyl groups such as acetylene
Represents a branched saturated or unsaturated alkyl group of 1 to 15 carbon atoms selected from
I forgot.
The carbocyclic aromatic or non-aromatic substituent for the alkyl group is CThree-C6Shiku
Loalkyl such as cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl or cycloalkyl
Clohexyl or C6-C14Carbocyclic aromatic substituents such as phenyl, naphthyl
Or anthranyl, or a heterocyclic non-aromatic substituent, such as pyrrolidinyl,
Piperidinyl, piperazinyl or morpholinyl, or heterocyclic aromatic substituent
For example, pyrrolyl, pyridinyl, furyl, thienyl, thiazolyl, imidazolyl
, Pyrimidinyl, purinyl, indolyl, quinolyl, carbazolyl
.
In each of the carbocyclic aromatic or non-aromatic ring systems, the heterocycle may optionally be, for example, 1 or
Multiple halogen-, nitro-, hydroxy-, C1-C6Alkyl-, C1-C6A
Lucoxy-, amino-, mercapto-, carboxyl-, cyano- or sulfo-
It may be substituted by a nyl group.
If A represents -CO-, the residue R1CO- is preferably from the following carboxylic acid residues
To be elected:
Formic acid, acetic acid, propionic acid, hexanoic acid, lauric acid, myristic acid, pal
Mitic acid, stearic acid, arachidonic acid, behenic acid, octadecenoic acid, linoleic acid
Luic acid, linolenic acid, 3-mercaptopropionic acid, glyoxylic acid, malonic acid,
Succinic acid, 4-aminobutanoic acid, 6-aminocaproic acid, 3-nitropropio
Acid, naphthylacetic acid, 4-aminophenylacetic acid, acrylic acid, cinnamic acid, 4-amino
Cinnamate, aminocrotonic acid, fumaric acid, maleic acid, phthalic acid, benzoic acid,
Torobenzoic acid, 3-aminobenzoic acid, 4-aminobenzoic acid, anthranilic acid,
Lylic acid, 3-amino-salicylic acid, 4-aminosalicylic acid, 5-amino-sali
Formic acid, naphthoic acid, p-phenylbenzoic acid, phenanthroic acid, nicotinic acid,
3-aminopyrazine-2-carbonic acid, pyridinecarboxylic acid, piperazinecarboxylic acid,
Piperidine carboxylic acid.
A is -SOTwoRepresents the residue R1SOTwo-Is preferably from the following sulfonic acid residues
To be elected:
Methanesulfonic acid, ethanesulfonic acid, propanesulfonic acid, 3-hydroxy
Propane sulfonic acid, orthonylic acid (aniline-2-sulfonic acid), naphthalene
Sulfonic acid, naphthylaminesulfonic acid, aminomethanesulfonic acid, 2-merca
Putethanesulfonic acid, 2-chloroethanesulfonic acid, N, N'-dimethylsulfur
Famic acid,
Piperidinesulfonic acid, 5- (2-aminoethylamino) -1-naphthalene-
Sulfonic acid, iodoxyquinolinesulfonic acid, pyridine-3-sulfonic acid, p-to
Ruenesulfonic acid, 2- (p-toluidino) naphthalene-6-sulfonic acid, deci
Methanesulfonic acid, 2-[(2-amino-2-oxoethyl) amino] ethane
Sulfonic acid, 2- (N-cyclohexylamino) ethanesulfonic acid, 2- [bis
(2-hydroxyethyl) amino] ethanesulfonic acid, N-2-hydroxyethyl
Lupiperazine-N'-2-ethanesulfonic acid, N-tris (hydroxymethyl)
Methyl-2-amino-ethanesulfonic acid, 2- (N-morpholino) ethanesulfonic acid
Acid, piperazine-N, N'-bis (2-ethanesulfonic acid), 3- (2-pyri
(Jill) -5,6-bis (4-phenylsulfonic acid) -1,2,4-triazine.
If A represents -NHCO-, the residue R1-NH-CO- is preferably the following urea derivative:
Selected from residues:
n-butyl, R-(+)-alpha-phenylethyl-, R-(-)-1- (
1-naphthyl) -ethyl-, ethyl-, propyl-, hexyl-, octyl-,
Benzyl-, chlorobenzyl-, methylbenzyl-, 3-picolyl-, 2- (A
Minomethyl) -pyridylurea.
If A represents -O-CO-, the residue R1-O-CO- is preferably
Selected from the following residues:
Methyl carbamate, ethyl carbamate, 9-fluorenylmethyl carbamate
, 9- (2-sulfo) -fluorenylmethyl carbamate, 9- (2,7-
Dibromo) fluorenylmethyl carbamate, 4-methoxyphenacyl carbamate
2,2,2-trichloroethylcarbamate, 2-phenylethylcarbamate
Mate, 1- (1-adamantyl) -1-methylethyl carbamate, 1,1-
Dimethyl-2-haloethyl carbamate, 1-methyl-1- (4-biphenyl)
-1-methylethyl carbamate, 2- (2'-pyridyl) ethyl carbamate
, 1-adamantyl carbamate, vinyl carbamate, allyl carbamate,
1-isopropylallyl carbamate, 4-nitrocinnamyl carbamate, 8
-Quinolyl carbamate, cyclohexyl carbamate, benzyl carbamate
, P-methoxybenzyl carbamate, p-nitrobenzyl carbamate, p-
Bromobenzyl carbamate, 9-anthrylmethyl carbamate, diphenyl
Methyl carbamate, 2-methylsulfonylethyl carbamate, 2- (p-to
Ruensulfonyl) ethyl carbamate, 4-methylthiophenyl carbamate
.
R is preferably selected from the following residues:
Ethyl-, propyl-, hexyl-, octyl-, benzyl-, 4-chlorobe
Benzyl-, 4-methylbenzyl-, 3-picolyl-, 2- (methyl) -pyridyl
-, 4- (methyl) pyridyl-, 3-phenylpropyl-, 4-phenylbutyl
-, 2- (p-tolyl) ethyl-, 3-nitrobenzyl-, benzylethyl-,
2-phenylethyl-, adamantyl-, pyridyl-, phenyl-, cholesteni
Ru-, naphthyl-, 4-phenoxy-phenyl or indoriethyl.
Suitable compounds according to Formula I are the compounds of Examples 5 to 22 and the compounds in the table below.
RU: The compounds according to formula I consist of three parts having different structures and different properties:
Sex site Zn2+Chelating group SH for the ion, hydrophobic S1’Protein pocket
And interact with P1Responsible for further hydrophobic interactions with the substrate binding cleft
Hydrophobic group R1Or Ro
Inhibitors of general formula I are useful for various pathological treatments, such as osteoporosis
Machi-like arthritis, periodontal disease, arteriosclerosis, congestive heart failure, tumor invasion and metastasis,
And development of selective inhibitors of various MMPs required for angiogenesis
Make it work.
It is known that similar compounds are described in the paper. But
However, these are peptide compounds and have a poor half-life in human plasma.
Show.
The chemical structure of the cysteine derivative was chosen in view of increased metabolic stability. Correspondingly
The amino group was acylated with a carboxylic acid to provide an amide, but preferably
Retanyl derivatives are known to be more stable to enzymatic metabolism. alike
Thus, the C-terminal carboxyl group is based on the hydrolysis of the ester by lipase.
It was derivatized as an amide instead of an esterification to avoid rapid purification rates.
Furthermore, N-alkyl and N-alkyl, which are known to be more stable
-An arylamide was chosen.
The traditional procedure of organic synthesis was applied for the synthesis of inhibitors (2). formula
Related L- and D-cysteine derivatives of II are standard procedures in peptide chemistry, followed by
Prepared according to amidation with EDCI / HOBt according to Scheme I. Formula III cis
The subsequent reduction of the tin compound to the cysteine derivative of Formula I is shown in Scheme 1.
Such as mercaptan or, preferably, a phosphine such as tributylphosphine.
This was carried out using various reducing agents.
Scheme 1. A general route for the synthesis of MMP inhibitors of the present invention
Compounds of the invention that specifically inhibit MMPs are useful for rheumatoid arthritis,
Related diseases caused by degradative activity, such as corneal ulcers, osteoporosis, periodontal disease,
Paget's disease, gingivitis, tumor invasion, dystrophic dermabrasion, blister, generalized ulcer
, Pharmacologically useful in the treatment of epidermal ulcer, gastric ulcer and the like. Such compounds
Is rheumatoid arthritis (primary chronic polyarthritis, PCP), systemic lupus erythematosus (SL
E), juvenile rheumatoid arthritis, Sjogren's syndrome (RA + drying syndrome), nodular polymorphism
Spontaneous arteritis and related vasculitis such as Wegener's granulomatosis, giant cell arteritis,
Dodpture syndrome, irritable vasculitis, polymyositis and dermatomyositis, progressive systemic stiffness
Sclerosis, M. Bechet, Reiter syndrome (arthritis + urethritis + conjunctivitis), complex connective tissue disease
(Sharp syndrome), extremely useful in the treatment of ankylosing spondylitis (M. Bechterew)
It is.
The compounds of the present invention may be adapted by any suitable route, preferably to such routes
Administered in the form of an admixed pharmaceutical composition and at an effective dose for the intended treatment.
No. The compounds of the present invention required to prevent or stop the progress of medical conditions
A therapeutically effective amount is readily ascertained by one skilled in the art.
Accordingly, the present invention provides one or more compounds of the present invention with one or more non-toxic medical agents.
Pharmaceutically acceptable carriers and / or auxiliaries (hereinafter collectively referred to as "carrier materials"),
And, if desired, a class of novel pharmaceutical compositions comprising together with other compounds.
Such compounds and compositions can be administered intravascularly, intraperitoneally, subcutaneously, for example.
Can be administered intramuscularly or topically.
For any administration, the pharmaceutical composition may be, for example, a tablet, capsule, suspension or liquid.
It may be in the form of a body. The pharmaceutical composition is preferably an agent comprising a certain amount of active ingredient.
Make as a mold. Suitable for mammals
Each dose can vary widely depending on the condition of the patient and other factors. Only
However, doses of about 0.1-300 mg / kg body weight, especially about 1-30 mg / kg body weight, are suitable.
sell. The active ingredient may also be administered by injection.
Dosage therapies for treating disease symptoms with the compounds and / or compositions of the present invention
Various factors, such as type, age, gender and medical condition of the patient, severity of infection,
The choice will depend on the function of the administration and the particular compound employed, and will therefore vary widely.
Can be.
For therapeutic purposes, the compounds of the invention will generally be compatible with the indicated routes of administration or
Combine with multiple auxiliaries. For oral administration, this compound is lactose, sucrose
, Starch powder, cellulose esters of alkanonic acids, cellulose alkyl esters
Talc, stearic acid, magnesium stearate, magnesium oxide,
Sodium and calcium salts of acid and sulfuric acid, gelatin, acacia, alginic acid
Mixed with sodium, polyvinyl-pyrrolidone and / or polyvinyl alcohol
Tableting or encapsulating for conventional administration. On the other hand, this compound
Ethylene glycol, propylene glycol, ethanol, corn oil, cottonseed oil,
Peanut oil, sesame oil, benzyl alcohol, sodium chloride and / or various
It may be dissolved in a buffer. Other auxiliaries and modes of administration are adequate in the pharmaceutical industry.
It is widely known. Of course, the appropriate dose for any given situation is
The type and severity of the condition to be placed, the route of administration, and the species of mammal to be treated,
Depends on the size and any individual characteristics.
Representative carriers, diluents and auxiliaries include, for example, water, lactose, gelatin starch.
, Magnesium stearate, talc, vegetable oil, rubber, polyalkylene glyco
And petroleum jelly. this
Pharmaceutical compositions may be in solid form, such as granules, powders or suppositories, or liquid forms, such as solutions
, Suspensions or emulsions. The pharmaceutical composition is a conventional pharmaceutical auxiliary, e.g.
For example, a preservative, a stabilizing agent, a wetting agent, an emulsifying agent, a buffering agent and the like may be used.
For use in the treatment of rheumatoid arthritis, the compounds of the invention may be of any conventional
Via the route of, preferably in the form of a pharmaceutical composition adapted to such a route
May be administered at a dose effective for the treatment to be performed. In the treatment of arthritis, administration is
It may be convenient via the oral route or via intra-articular injection into the affected joint.
Can be.
As mentioned above, the dose to be administered and the treatment regimen are, for example, the disease, its severity, the patient to be treated.
Depending on the individual and its response, and therefore can vary widely.
Enzyme assays
MMP8 catalytic domain (Phe79-MMP8) and MMP3 were used for inhibition experiments. enzyme
Assay is 10 mM CaCl at 25 ° CTwoIn 100 mM NaCl, 50 mM Tris / HCl (pH 7.6)
An enzyme concentration of 8 nM, as well as a fluorogenic substrate for MMP8 Dnp-Pro-Leu-Gly-Leu-Trp-Ala-
D-Arg-NHTwo(Bachem M-1855, 1.10-FiveM) and Mca-Arg-Pro-Lys- for MMP3
Pro-Val-Glu-Nva-Trp-Arg-Lys (Dnp) -NHTwo(Bachem M-2110, 4.10-6M)
Carried out. Measurements were made by Stack et al. (3) for MMP8 and Nagase for MMP3.
(4) essentially performed as announced. 350 nm (MMP8) or 390 nm (MMP
The increase in fluorescence in 3) was followed at a cycle of 100 sec to determine the initial rate of hydrolysis. Anti
Evaluation of kinetic data was performed as reported by Copeland et al. (5).
Table 1. Inhibition of MMP8 and MMP3 by non-peptide L-cysteine derivatives of general formula I
An example
SynthesisGeneral method:
A) Amidation: 1 mmol of N, N'-uretanyl-cysteine, 2 mmol of HOBT (
Hydroxybenzotriazole) and 2.08 mmole of EDCI (N-ethyl-N '-(
3-dimethylaminopropyl) -carbodiimide hydrochloride) in 10 ml of THF or
Suspends. The amine is added in excess (2.5-5 mmol) and, in the case of the hydrochloride, an equivalent
Of N-methylmorpholine is added. The reaction mixture is stirred overnight at room temperature and reduced to a small volume.
And partition as ethyl acetate and water. Organic layer is 5% NaHCOThree, 5
% KHSOFourAnd twice with water and MgSOFourDry with. Evaporate the solvent
And the residue is treated with ethyl acetate and a suitable solvent such as petroleum ether, diisopro
Precipitate with pill ether, tert-butyl methyl ether or pentane.
B) Reduction: The cystine compound (1 mmol) was added to 10 ml of 95% trifluoroethanol.
With 1.5 mmol of tributylphosphine in water.
The reaction mixture was stirred overnight at room temperature, evaporated to a small volume, and
After dilution with ethyl acetate, the product is dissolved in a suitable solvent such as petroleum ether,
Precipitate with isopropyl ether, tert-butyl methyl ether or pentane.
N, N'-bis-benzyloxycarbonyl-L-cystine-bis-hydroxa
Mate (5a)
N, N'-bis-benzyloxycarbonyl-L-cystine according to procedure (A)
Prepared from (2) and hydroxylamine. 22% yield; homogeneous by TLC (solvent system: chloro
Form / methanol; 4: 1, Rf= 0.5).
FAB-MS: m / z = 539.2 [M + H+]; Mr= 538.2, Ctwenty twoH26NFourO8STwoCalculated by
Benzyloxycarbonyl-L-cysteine-hydroxamate (5)
Prepared from 5a according to procedure (B). Purification by flash chromatography (
Eluent: CHTwoClTwo/ MeOH, 95: 5, then 45: 5). Yield: 18%.
Bis-tert-butyloxycarbonyl-L-cystine-bis-benzylamide (
6a)
According to (A) N, N'-bis-tert-butyloxycarbonyl-L-cyst
(12) and benzylamine. Yield: 77%. Homogeneous by TLC (solvent system: cyclo
Hexane / chloroform / acetic acid, 45:45:10, Rf= 0.7).
L-cystine-bis-benzylamide hydrochloride (6b)
13.87 g (22.4 mmol) of 6a in 100 ml of 4.6M HCl in dioxane was added at room temperature.
Stirred overnight: The precipitate was collected and washed well with ether. Yield: 11 g (quantitative)
.
N, N'-bis-acetyl-L-cystine-bis-benzylamide (6c)
300 mg (0.61 mmol) of 6b was treated with ethyl acetate and 40 ml of NaHCOThree(5%), then
Then react with acetic anhydride (0.27 g, 2.6 mmol). The organic layer is washed with water and MgSOFourDry with
And evaporate until dry. Yield: 94%; homogeneous by TLC (solvent system:
Chlorohexane / chloroform / acetic acid; 45:45:10, Rf= 0.4).
N-acetyl-L-cysteine-benzylamide (6)
6c was reduced according to procedure (B). Yield 65%; homogeneous by TLC (solvent system: CHClThree/ M
eOH; 4: 1, Rf= 0.7); m.p. 186-189 ° C;
FAB-MS: m / z = 253.1 [M + H+]; Mr= 252.1, CH12H16NTwoOTwoCalculated with S.
N, N'-bis-formyl-L-cystine-bis-benzylamide (7a)
Prepared from 6b and formic acid according to procedure (A). Yield: 59%; homogeneous by TLC (solvent system:
Cyclohexane / CHClThree/ Acetic acid, 45:45:10; Rf= 0.1).
N-formyl-L-cysteine-benzylamide (7)
Reduction of 7a according to procedure (B). Yield: 62%; homogeneous by TLC (solvent system: cyclohexene)
Sun / CHClThree/ Acetic acid; 45:45:10; Rf= 0.45); m.p. 180-183 ° C;
FAB-MS: m / z = 239.0 [M + H+]; Mr= 238.3, C11H14NTwoOTwoCalculated with S.
tert-butyloxycarbonyl-L-cysteine-benzylamide (8)
Reduction of 6a according to procedure (B). Yield: 38%; homogeneous by TLC (solvent system: heptane / t
-Butanol / acetic acid, 5: 5: 1, Rf= 0.7); m.p. 97-100 ° C;FAB-MS: m / z = 311.1 [M + H+]; Mr= 310.1, CFifteenHtwenty twoNTwoOThreeCalculated with S.
N, N'-bis-benzyloxycarbonyl-L-cystine-bis-benzyla
Mid (9a)
According to (A) N, N'-bis-benzyloxycarbonyl-cystine and vein
Prepared from benzylamine. Yield: 90%.
N-benzyloxycarbonyl-L-cysteine-benzylamide (9)
Reduction of 9a according to (B). Yield: 41%; homogeneous by TLC (solvent system:
Clohexane / CHCIThree/ Acetic acid, 45:45:10, Rf= 0.4); m.p. 148-152 ° C;
FAB-MS: m / z = 345.0 [M + H+]; Mr= 344.4, C18H20NTwoOThreeCalculated with S.
N, N'-bis-benzyloxycarbonyl-L-cystine-bis-4-pyridi
Rumethylamide (10a)
According to procedure (A), N, N'-bis-benzyloxycarbonyl-L-cystyl
And 4- (aminomethyl) pyridine. 59% yield; homogeneous by TLC (solvent system)
: CHClThree/ MeOH, 4: 1, Rf= 0.65).
N-benzyloxycarbonyl-L-cysteine-4-pyridylmethylamide (
Ten)
Prepared from 10a according to procedure (B). Yield: 65%; homogeneous by TLC (solvent system: CHClThree/ M
eOH, 4: 1, Rf= 0.8); m.p. 122-125 ° C;FAB-MS: m / z = 346.2 [M + H-]; Mr= 345.1, C17H19NThreeOThreeCalculated with S.
N, N'-bis-benzyloxycarbonyl-L-cystine-bis-3-pyridi
Rumethylamide (11a)
N, N'-bis-benzyloxycarbonyl according to procedure (A)
-Prepared from cystine and 3- (aminomethyl) pyridine. Yield: 69%; average by TLC
Quality (solvent system: CHClThree/ MeOH, 4: 1, Rf= 0.2).
N-benzyloxycarbonyl-L-cysteine-pyridylmethylamide (11)
Reduction of 11a according to procedure (B). Yield: 14%; homogeneous by TLC (solvent system CHClThree/ MeOH,
4: 1, Rf= 0.8); m.p. 125-127 ° C;
FAB-MS: m / z = 346.1 [M + H+]; Mr= 345.1, C17H19NThreeOThreeCalculated with S.
N, N'-bis-benzyloxycarbonyl-L-cystine-bis-2-pyridi
Rumethylamide (12a)
According to (A) N, N'-bis-benzyloxycarbonyl-cystine and 2
-Prepared from (aminomethyl) pyridine. Yield: 96%; homogeneous by TLC (solvent system: CHClThree
/ MeOH, 4: 1, Rf= 0.7).
N-benzyloxycarbonyl-L-cysteine-2-pyridylmethylamide (
12)
Reduction of 12a according to (B). 33% yield; homogeneous by TLC (solvent system; CHClThree/ MeOH, 4:
1, Rf= 0.8); m.p. 129-131 ° C;
FAB-MS: m / z = 346.1 [M + H+]; Mr= 345.1, C17H19NThreeOThreeCalculated with S.
N, N'-bis-benzoyl-L-cystine-bis-benzylamide (13a)
Prepared from 6b and benzoic acid according to (A). Yield: 78%; homogeneous by TLC (solvent system
： Cyclohexane / CHClThree/ Acetic acid: 45:45:10, Rf= 0.65).
N-benzoyl-L-cysteine-benzylamide (13)
Prepared by reduction of 13a according to (B). 57% yield; homogeneous by TLC (solvent system: cyclo
Hexane / CHClThree/ Acetic acid; 45:45:10, Rf= 0.55); m.p. 174-176 ° C;
FAB-MS: m / z = 315.1 [M + H+]; Mr= 314.1, C17H18NTwoOTwoCalculated with S.
N, N'-bis-tosyl-L-cystine-bis-benzylamide (14a)
390 mg (0.794 mmol) of 6b was converted to 180 mg (0.952 mmol) of chloride in 6 ml of pyridine.
Reacted with sill. After stirring at room temperature for 12 hours, the solid was filtered off and the filtrate was filtered.
Evaporate to dryness with toluene and finally tert-butyl methyl ether.
Porated. Yield: 81%; homogeneous by TLC (solvent system: CHClThree/ MeOH, 4: 1, Rr
= 0.7). N-tosyl-L-cysteine-benzylamide (14)
Prepared by reduction of 14a according to (B). Yield: 54%; homogeneous by TLC (solvent system: CHClThree
/ MeOH, 4: 1, Rf= 0.6); m.p. 180-182 ° C;FAB-MS: m / z = 365.1 [M + H+]; Mr= 364.1, C17H20NTwoOThreeCalculated with S.
N, N'-bis-benzyloxycarbonyl-L-cystine-bis-2-phenyl
Ruethylamide (15a)
According to (A) N, N'-bis-benzyloxycarbonyl-L-cystine and
Prepared from 2-phenylethylamine. Yield: 34%; homogeneous by TLC (solvent system: CHClThree/ M
eOH, 19: 1, Rf= 0.8).
N-benzyloxycarbonyl-L-cysteine-2-phenylethylamide (
15)
Reduction of 15a according to (B). Yield: 61%; homogeneous by TLC (solvent system: cyclohexane /
CHClThree/ Acetic acid, 45:45:10, Rf= 0.6); m.p. 119-121 ° C.
FAB-MS: m / z = 359.1 [M + H+]; Mr= 358.1, C19Htwenty twoNTwoOThreeCalculated with S.
N, N'-bis-benzyloxycarbonyl-L-cystine-bis-2- (4-
(Hydroxyphenyl) ethylamide (16a)
According to (A) N, N'-bis-benzyloxycarbonyl-cystine and 2
Prepared from-(4-hydroxyphenyl) ethylamine. Yield: 71%; homogeneous by TLC (
Solvent system: cyclohexane / CHClThree/vinegar
Acid, 45:45:10, Rf= 0.5).
N-benzyloxycarbonyl-L-cysteine-2- (4-hydroxyphenyl
Le) ethylamide (16)
Reduction of 16a according to (B). Yield: 24%; homogeneous by TLC (solvent system: cyclohexane /
CHClThree/ Acetic acid, 45:45:10, Rf= 0.6); m.p. 133-135 ° C.
FAB-MS: m / z = 375.2 [M + H+]; Mr= 374.1, C19Htwenty twoNTwoOFourCalculated with S.
N, N'-bis-benzyloxycarbonyl-L-cystine-bis-4-chloro
Benzylamide (17a)
According to (A) N, N'-bis-benzyloxycarbonyl-cystine and 4
-Prepared from chlorobenzylamine. Yield: 99%; homogeneous by TLC (solvent system: CHClThree/ MeO
H, 19: 1, Rf= 0.8).
N-benzyloxycarbonyl-L-cysteine-chlorobenzylamide (17)
Reduction of 17a according to (B). Yield: 71%; homogeneous by TLC (solvent system: cyclohexane /
CHClThree/ Acetic acid, 45:45:10, Rf= 0.85); m.p. 137-139 ° C;
FAB-MS: m / z = 379.1 [M + H+]; Mr= 378.1, C18H19ClNTwoOThreeCalculated with S.
N, N'-bis-benzyloxycarbonyl-L-cystine-bis-3-phenyl
Rupropylamide (18a)
According to (A) N, N'-bis-benzyloxycarbonyl-cystine and 3
-Prepared from phenylpropylamine. Yield: 94%; homogeneous by TLC (solvent system: cyclohexane
Xan / CHClThree/ Acetic acid, 45:45:10, Rf= 0.7).
N-benzyloxycarbonyl-L-cysteine-3-phenylpropylamide
(18)
Prepared by reduction of 18a according to (B). Yield: 76%; homogeneous by TLC (solvent system:
Hexane / CHClThree/ Acetic acid, 45:45:10, Rf= 0.7); m.p. 104-106 ° C;FAB-MS: m / z = 373.2 [M + H+]; Mr= 372.2, C20Htwenty fourNTwoOThreeCalculated with S.
N, N'-bis-benzyloxycarbonyl-L-cystine-bis-tryptoate
Mid (19a)
According to (A), N, N'-bis-benzyloxycarbonyl-cystine and
Prepared from lipamide. Yield: 75%; homogeneous by TLC (solvent system: cyclohexane / CHClThree
/ Acetic acid, 45:45:10, Rf= 0.6). Benzyloxycarbonyl-L-cysteine
-Tryptoamide (19)
Reduction of 19a according to (B): yield: 62%; homogeneous by TLC (solvent system: cyclohexane /
CHClThree/ Acetic acid, 45:45:10, Rf= 0.7); m.p. 150-152 ° C;
FAB-MS: m / z = 398.2 [M + H+]; Mr= 397.2, Ctwenty oneHtwenty threeNThreeOThreeCalculated with S.
N, N'-bis-hexanol-L-cysteine-bis-benzylamide (20a
)
Prepared from 6b and hexanoic acid according to procedure (A). Yield: 86%; homogeneous by TLC (
Solvent system: cyclohexane / chloroform / acetic acid, 45:45:10; Rf= 0.6).N-hexanoyl-L-cysteine-benzylamide (20)
Reduction of 20a according to procedure (B). Yield: 69%; m.p. 141-143 ° C;
FAB-MS: m / z = 309.2 [M + H+]; Mr= 308.2, C16Htwenty fourNTwoOTwoCalculated with S.
N, N'-bis-octanoyl-L-cystine-bis-benzylamide (21a)
Prepared from 6b and octanoic acid according to procedure (A). Yield: 86%; homogeneous by TLC (
Solvent system: cyclohexane / chloroform / acetic acid, 45:45:10, Rf= 0.6).
N-octanoyl-L-cysteine-benzylamide (21)
Reduction of 21a according to procedure (B). Yield: 73%; m.p. 137-139 ° C;
FAB-MS: m / z = 337.2 [M + H+]; Mr= 336.2, C18H28NTwoOTwoCalculated with S.
N, N'-bis-decanoyl-L-cystine-bis-benzylamide (22a)
Prepared from 6b and dodecanonic acid according to procedure (A). Yield: quantitative; homogeneous by TLC
Medium system: cyclohexane / chloroform / acetic acid, 45:45:10, Rf= 0.9).
N-Decanone-L-cysteine-benzylamide (22)
Reduction of 22a according to procedure (B). Yield: 33%; Rf= 0.7); m.p. 138-140 ° C; FAB-MS: m / z = 365.2 [M + H+]; Mr= 364.2, C20H32NTwoOTwoCalculated with S.
1. Beckett, R .; P. Davidson, A .; H. Drummond, A .; H. Huxley, P .; ; Wh
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(51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考）
Ａ６１Ｐ 19/02 Ａ６１Ｐ 19/02
29/00 １０１ 29/00 １０１
43/00 １１１ 43/00 １１１
Ｃ０７Ｄ 209/16 Ｃ０７Ｄ 209/16
213/56 213/56
(81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，
ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ
Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ
，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，
ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，Ｌ
Ｓ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ
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ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，Ｅ
Ｅ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ
，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，
ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，Ｍ
Ｗ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ
，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，
ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ
(72)発明者 グラフ，フォン レーデルン エリッヒ
ドイツ連邦共和国，デー63628，バート
ゾデン―ザルミュンスター ヒュッテンタ
ルシュトラーセ 20
(72)発明者 モローデル，ルイス
ドイツ連邦共和国，デー―82152 マルテ
ィンスリート，アー．フレミンクシュトラ
ーセ 10デー──────────────────────────────────────────────────続 き Continued on the front page (51) Int.Cl. 7 Identification symbol FI Theme coat ゛ (Reference) A61P 19/02 A61P 19/02 29/00 101 29/00 101 43/00 111 43/00 111 C07D 209 / 16 C07D 209/16 213/56 213/56 (81) Designated country EP (AT, BE, CH, CY, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL , PT, SE), OA (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, ML, MR, NE, SN, TD, TG), AP (GH, GM, KE, LS, MW, SD, SZ, UG, ZW), EA (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM), AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, B Y, CA, CH, CN, CU, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, GB, GE, HU, IL, IS, JP, KE, KG, KP, KR, KZ, LC, LK, LR , LS, LT, LU, LV, MD, MG, MK, MN, MW, MX, NO, NZ, PL, PT, RO, RU, SD, SE, SG, SI, SK, TJ, TM, TR, TT, UA, UG, US, UZ, VN (72) Inventor Graff, von Redeln Erich Germany, Day 63628, Bad Soden-Salmunster Huttentha Ruststraße 20 (72) Inventor Morrodel, Lewis Germany, Day 82152 Martin Sliet, Ah. Fleming Strasse 10 days