JP2001508407A

JP2001508407A - Human protein having transmembrane domain and DNA encoding the same

Info

Publication number: JP2001508407A
Application number: JP52237498A
Authority: JP
Inventors: 誠志加藤; 伸吾関根; 知子木村; みどり小林
Original assignee: Sagami Chemical Research Institute (Sagami CRI)
Current assignee: Sagami Chemical Research Institute (Sagami CRI)
Priority date: 1996-11-13
Filing date: 1997-11-07
Publication date: 2001-06-26

Abstract

(57)【要約】配列番号１から配列番号２あるいは配列番号４から配列番号２５で表されるアミノ酸配列のいずれかを含む蛋白質および該蛋白質をコードするＤＮＡ、例えば配列番号２６から配列番号５０で表される塩基配列を含むｃＤＮＡ。膜貫通ドメインを有するヒト蛋白質をコードしているｃＤＮＡ、およびこのヒトｃＤＮＡの組換え体を発現させることにより該蛋白質を提供することができる。 (57) [Summary] A protein comprising any of the amino acid sequences represented by SEQ ID NO: 1 to SEQ ID NO: 2 or SEQ ID NO: 4 to SEQ ID NO: 25, and a DNA encoding the protein, for example, a base sequence represented by SEQ ID NO: 26 to SEQ ID NO: 50 CDNA containing. By expressing a cDNA encoding a human protein having a transmembrane domain and a recombinant of this human cDNA, the protein can be provided.

Description

【発明の詳細な説明】膜貫通ドメインを有するヒト蛋白質およびそれをコードするＤＮＡ技術分野本発明は、膜貫通ドメインを有するヒト蛋白質、およびそれをコードしているＤＮＡに関する。本発明の蛋白質は、医薬品として、あるいは該蛋白質に対する抗体を作製するための抗原として用いることができる。本発明のヒトｃＤＮＡは、遺伝子診断用プローブや遺伝子治療用遺伝子源として用いることができる。また、該ｃＤＮＡがコードしている蛋白質を大量生産するための遺伝子源として用いることができる。背景技術膜蛋白質は、シグナルレセプター、イオンチャンネル、トランスポーターなどとして、細胞膜を介する物質輸送や情報伝達において重要な役割を担っている。例えば、各種サイトカインに対するレセプター、ナトリウムイオン・カリウムイオン・塩素イオン等に対するイオンチャンネル、糖・アミノ酸等に対するトランスポーターなどが知られており、その多くはすでに遺伝子もクローン化されている。これらの膜蛋白質の異常は、これまで原因不明であつた多くの病気と関連していることがわかってきた。例えば、嚢胞性線維症の原因遺伝子として１２個の膜貫通ドメインを有する膜蛋白質の遺伝子が同定された［Rommens，J.M．et al. ，Science 245：1059−1065(1989)］。また、いくつかの膜蛋白質は、ウイルスが細胞に感染する際のレセプターとして働いていることがわかってきた。、例えば、ＨＩＶ−１は、Ｔ細胞膜上の膜蛋白質、ＣＤ４抗原と７個の膜貫通ドメインを有する膜蛋白質ヒュージンを介して細胞内に感染することが示された［Feng,Y ．et al.，Science 272：872−877(1996)］。従って、新しい膜蛋白質が見い出せれば、多くの病気の原因解明につながるものと期待され、膜蛋白質をコードする新たな遺伝子の単離が望まれている。従来、膜蛋白質は、精製することが困難なので、遺伝子の方からのアプローチによって単離されたものが多い。一般的な方法は、ｃＤＮＡライブラリーを動物細胞に導入して、ｃＤＮＡを発現させたのち、目的とする膜蛋白質を膜上に発現している細胞を、抗体を用いる免疫学的な手法や膜の透過性の変化を生理学的な手法で検出する、いわゆる発現クローニングである。しかしこの方法では機能のわかった膜蛋白質の遺伝子しかクローン化できない。一般に膜蛋白質は、蛋白質内部に疎水性の膜貫通ドメインを有しており、リボソームで合成された後、このドメインがリン脂質膜内に留まり膜にトラップされる。従って、完全長ｃＤＮＡの全塩基配列を決定してやり、そのｃＤＮＡがコードしている蛋白質のアミノ酸配列の中に疎水性の高い膜貫通ドメインが存在すれば、そのｃＤＮＡは膜蛋白質をコードしていると考えられる。本発明の目的は、膜貫通ドメインを有する新規のヒト蛋白質、および該蛋白質をコードするＤＮＡを提供することである。本発明者らは鋭意研究の結果、ヒト完全長ｃＤＮＡバンクの中から膜貫通ドメインを有するｃＤＮＡをクローン化し、本発明を完成した。すなわち、本発明は膜貫通ドメインを有するヒト蛋白質である、配列番号１から配列番号２あるいは配列番号４から配列番号２５で表されるアミノ酸配列のいずれかを含む蛋白質を提供する。また本発明は上記蛋白質をコードするＤＮＡ、例えば配列番号２６から配列番号５０で表される塩基配列のいずれかを含むｃＤＮＡを提供する。本発明の蛋白質は、ヒトの臓器、細胞株などから単離する方法、本発明のアミノ酸配列に基づき化学合成によってペプチドを調製する方法、あるいは本発明の膜貫通ドメインをコードするＤＮＡを用いて組換えＤＮＡ技術で生産する方法などにより取得することができるが、組換えＤＮＡ技術で取得する方法が好ましく用いられる。例えば、本発明のｃＤＮＡを有するベクターからインビトロ転写によってＲＮＡを調製し、これを鋳型としてインビトロ翻訳を行なうことによりインビトロで蛋白質を発現できる。また翻訳領域を公知の方法により適当な発現ベクターに組換えてやれば、大腸菌、枯草菌、酵母、動物細胞等で、コードしている蛋白質を大量に生産することができる。本発明の蛋白質を、大腸菌などの微生物で生産させる場合には、微生物中で複製可能なオリジン、プロモーター、リボソーム結合部位、ｃＤＮＡクローニング部位、ターミネーター等を有する発現ベクターに、本発明のｃＤＮＡの翻訳領域を組換えた発現ベクターを作成し、該発現ベクターで宿主細胞を形質転換したのち、得られた形質転換体を培養してやれば、該ｃＤＮＡがコードしている蛋白質を微生物内で大量生産することができる。この際、任意の翻訳領域の前後に開始コドンと停止コドンを付加して発現させてやれば、任意の領域を含む蛋白質断片を得ることができる。あるいは、他の蛋白質との融合蛋白質として発現させることもできる。該融合蛋白質を適当なプロテアーゼで切断することによって該ｃＤＮＡがコードする蛋白質部分のみを取得することもできる。本発明の蛋白質を、動物細胞で生産させる場合には、該ｃＤＮＡの翻訳領域を、プロモーター、スプライシング領域、ポリ（Ａ）付加部位等を有する動物細胞用発現ベクターに組換え、動物細胞内に導入してやれば、本発明の蛋白質を膜蛋白質として細胞膜表面上で生産することができる。本発明の蛋白質には、配列番号１から配列番号２あるいは配列番号４から配列番号２５で表されるアミノ酸配列のいかなる部分アミノ酸配列を含むペプチド断片（５アミノ酸残基以上）も含まれる。これらのペプチド断片は抗体を作製するための抗原として用いることができる。また、本発明の蛋白質の中でシグナル配列を有するものは、シグナル配列が除去された後、成熟蛋白質の形で細胞表面に出てくる。したがって、これらの成熟蛋白質は本発明の蛋白質の範疇にはいる。成熟蛋白質のＮ末端アミノ酸配列は、シグナル配列切断部位決定法［特開平８− １８７１００］を用いて容易に求めることができる。また、いくつかの膜蛋白質は、細胞表面でプロセシングを受けて分泌型となる。このような分泌型となった蛋白質あるいはペプチドも本発明の蛋白質の範疇にはいる。アミノ酸配列の中に糖鎖結合部位が存在すると、適当な動物細胞で発現させれば糖鎖が付加した蛋白質が得られる。したがって、このような糖鎖が付加した蛋白質あるいはペプチドも本発明の蛋白質の範疇にはいる。本発明のＤＮＡには、上記蛋白質をコードするすべてのＤＮＡが含まれる。該ＤＮＡは、化学合成による方法、ｃＤＮＡクローニングによる方法などを用いて取得することができる。本発明のｃＤＮＡは、例えばヒト細胞由来ｃＤＮＡライブラリーからクローン化することができる。ｃＤＮＡはヒト細胞から抽出したポリ（Ａ）⁺ＲＮＡを鋳型として合成する。ヒト細胞としては、人体から手術などによって摘出されたものでも培養細胞でも良い。ｃＤＮＡは、岡山−Ｂｅｒｇ法［Okayama,H．and Be rg,P.,Mol.Cell.Biol．2：161−170(1982)］、Gubler−Hoffman法［Gubler,U．a nd Hoffman,J.,Gene 25：263−269(1983)］などいかなる方法を用いて合成してもよいが、完全長クローンを効率的に得るためには、実施例にあげたようなキャッピング法［Kato,S．et al.,Gene 163：193−196(1995)］を用いることが望ましい。膜貫通ドメインを有するヒト蛋白質をコードするｃＤＮＡの第一次選別は、ｃＤＮＡライブラリーから任意に選択したｃＤＮＡクローンの部分塩基配列決定、塩基配列がコードするアミノ酸配列の決定、得られたＮ末端アミノ酸配列領域内の疎水性部分の有無の確認によって行なう。次いでシーケンシングによる全塩基配列の決定、インビトロ翻訳による蛋白質発現によって第二次選別行なう。本発明のｃＤＮＡが、分泌シグナル配列を有する蛋白質をコードしていることの確認は、シグナル配列検出法［Yokoyama−Kobayashi,M．et al.,Gene 163：193−1 96(1995)］を用いて行う。すなわち、ターゲット蛋白質のＮ末端をコードするｃＤＮＡ断片を、ウロキナーゼのプロテアーゼドメインをコードするｃＤＮＡと融合させたのち、ＣＯＳ細胞内で発現させ、ウロキナーゼ活性が細胞培養液中に検出された場合には、挿入したｃＤＮＡ断片がコードしている部分が、シグナル配列として機能していることを意味する。一方、ウロキナーゼ活性が培地中に検出できない場合には、Ｎ末端部は膜中に留まっていることを意味する。本発明のｃＤＮＡは、配列番号２６から配列番号５０で表される塩基配列あるいは配列番号５１から配列番号７５で表される塩基配列のいずれかを含むことを特徴とするものである。それぞれのクローン番号（ＨＰ番号）、ｃＤＮＡクローンが得られた細胞、ｃＤＮＡの全塩基数、コードしている蛋白質のアミノ酸残基数をそれぞれ表１にまとめて示した。なお、配列番号５１から配列番号７５のいずれかに記載のｃＤＮＡの塩基配列に基づいて合成したオリゴヌクレオチドプローブを用いて、本発明で用いたヒト細胞株やヒト組織から作製したｃＤＮＡライブラリーをスクリーニングすることにより、本発明のｃＤＮＡと同一のクローンを容易に得ることができる。一般にヒト遺伝子は個体差による多型が頻繁に認められる。従って配列番号５１から配列番号７５において、１又は複数個のヌクレオチドの付加、欠失および／又は他のヌクレオチドによる置換がなされているｃＤＮＡも本発明の範疇にはいる。同様に、これらの変更によって生じる、１又は複数個のアミノ酸の付加、欠失および／又は他のアミノ酸による置換がなされている蛋白質も、配列番号１から配列番号２あるいは配列番号４から配列番号２５で表されるアミノ酸配列を有するそれぞれの蛋白質の活性を有する限り、本発明の範疇に入る。本発明のｃＤＮＡには、配列番号２６から配列番号５０で表される塩基配列あるいは配列番号５１から配列番号７５で表される塩基配列のいかなる部分塩基配列を含むｃＤＮＡ断片（１０ｂｐ以上）も含まれる。また、センス鎖およびアンチヤンス鎖からなるＤＮＡ断片もこの範疇にはいる。これらのＤＮＡ断片は遺伝子診断用のプローブとして用いることができる。図面の簡単な説明図１：分泌シグナル配列検出ベクターｐＳＳＤ３の構造を表す図である。図２：クローンＨＰ００４４２がコードする蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す図である。図３：クローンＨＰ００８０４がコードする蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す図である。図４：クローンＨＰ００８０４のノザンブロットハイブリダイゼーションの結果を示す図である。図５：クローンＨＰ０１０９８がコードする蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す図である。図６：クローンＨＰ０１１４８がコードする蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す図である。図７：クローンＨＰ０１１４８のノザンブロットハイブリダイゼーションの結果を示す図である。図８：クローンＨＰ０１２９３がコードする蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す図である。図９：クローンＨＰ１００１３がコードする蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す図である。図１０：クローンＨＰ１００３４がコードする蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す図である。図１１：クローンＨＰ１００５０がコードする蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す図である。図１２：クローンＨＰ１００７１がコードする蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す図である。図１３：クローンＨＰ１００７６がコードする蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す図である。図１４：クローンＨＰ１００８５がコードする蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す図である。図１５：クローンＨＰ１０１２２がコードする蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す図である。図１６：クローンＨＰ１０１３６がコードする蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す図である。図１７：クローンＨＰ１０１７５がコードする蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す図である。図１８：クローンＨＰ１０１７９がコードする蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す図である。図１９：クローンＨＰ１０１９６がコードする蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す図である。図２０：クローンＨＰ１０２３５がコードする蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す図である。図２１：クローンＨＰ１０２９７がコードする蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す図である。図２２：クローンＨＰ１０２９９がコードする蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す図である。図２３：クローンＨＰ１０３０１がコードする蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す図である。図２４：クローンＨＰ１０３０２がコードする蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す図である。図２５：クローンＨＰ１０３０４がコードする蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す図である。図２６：クローンＨＰ１０３０５がコードする蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す図である。図２７：クローンＨＰ１０３０６がコードする蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す図である。図２８：クローンＨＰ１０３２８がコードする蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す図である。発明を実行するための好ましい方法実施例次に実施例により発明を具体的に説明するが、本発明はこれらの例に限定されるものではない。ＤＮＡの組換えに関する基本的な操作および酵素反応は、文献［“Molecular Cloning．A Laboratory Manual”，Cold Spring Harbor L aboratory，1989］に従った。制限酵素および各種修飾酵素は特に記載の無い場合宝酒造社製のものを用いた。各酵素反応の緩衝液組成、並びに反応条件は付属の説明書に従った。ｃＤＮＡ合成は文献［Kato,S．et al.，Gene 150：243−2 50(1994)］に従った。（１）ポリ（Ａ）⁺ＲＮＡの調製ｍＲＮＡを抽出するためのヒト細胞として、繊維肉腫細胞株ＨＴ−１０８０（ＡＴＣＣＣＣＬ１２１）、類表皮癌細胞株ＫＢ（ＡＴＣＣＣＲＬ１７）、組織球リンホーマ細胞株Ｕ９３７（ＡＴＣＣＣＲＬ１５９３）、骨肉腫細胞株Ｕ−２ＯＳ（ＡＴＣＣＨＴＢ９６）、末梢血から分離した白血球、手術によって摘出された胃癌組織並びに肝臓を用いた。それぞれの細胞株の培養は、常法に従って行った。ヒト細胞約１ｇを５.５Ｍグアニジウムチオシアネート溶液２０ｍｌ中でホモジナイズした後、文献［Okayama,H．et al.，“Methods in Enzymology”Vol .164、Academic Press，1987］に従い、総ｍＲＮＡを調製した。これを２０mM トリス塩酸緩衝液（ｐＨ７.６）、０.５ＭＮａＣｌ、１mM ＥＤＴＡで洗浄したオリゴｄＴセルロースカラムにかけ、上掲文献に従いポリ（Ａ）⁺ＲＮＡを得た。（２）ｃＤＮＡライブラリーの作製上記ポリ（Ａ）⁺ＲＮＡ１０μｇを１００mMトリス塩酸緩衝液（ｐＨ８）に溶解し、ＲＮａｓｅを含まないバクテリア由来アルカリホスファターゼ１単位を添加し、３７℃１時間反応させた。反応液をフェノール抽出後、エタノール沈殿を行ない、ペレットを５０mM酢酸ナトリウム（ｐＨ６）、１mM ＥＤＴＡ、０.１％２−メルカプトエタノール、０.０１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００溶液に溶解した。これに、タバコ由来酸ピロホスファターゼ（エピセンターテクノロジーズ社製、１単位を添加して、総量１００μｌで３７℃１時間反応させた。反応液をフェノール抽出後、エタノール沈殿を行ない、ペレットを水に溶解し、脱キャップ処理したポリ（Ａ）⁺ＲＮＡ溶液を得た。脱キャップ処理したポリ（Ａ）⁺ＲＮＡ、ＤＮＡ−ＲＮＡキメラオリゴヌクレオチド（５’−ｄＧ−ｄＧ−ｄＧ−ｄＧ−ｄＡ−ｄＡ−ｄＴ−ｄＴ−ｄＣ−ｄＧ −ｄＡ−Ｇ−Ｇ−Ａ−３’）３nmolを５０mMトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７.５）、０.５mM ＡＴＰ、５mM ＭｇＣｌ₂、１０mM ２−メルカプトエタノール、２５％ポリエチレングリコール水溶液に溶解し、Ｔ４ＲＮＡリガーゼ５０単位を添加し、総量３０μｌで２０℃１２時間反応させた。反応液をフェノール抽出後、エタノール沈殿を行ない、ペレットを水に溶解し、キメラオリゴキャップ付加ポリ（Ａ）⁺ＲＮＡを得た。本発明者らが開発したベクターｐＫＡ１（特開平４−１１７２９２号公報）をＫｐｎＩで消化後、末端転移酵素により約６０個のｄＴテールを付加した。これをＥｃｏＲＶ消化して片側のｄＴテールを除去したものをベクタープライマーとして用いた。先に調製したキメラオリゴキャップ付加ポリ（Ａ）⁺ＲＮＡ６μｇを、ベクタープライマー１.２μｇとアニールさせた後、５０mMトリス塩酸緩衝液（ｐＨ８. ３）、７５mM ＫＣｌ、３mM ＭｇＣｌ₂、１０mMジチオスレイトール、１.２５mM ｄＮＴＰ（ｄＡＴＰ＋ｄＣＴＰ＋ｄＧＴＰ＋ｄＴＴＰ）溶液に溶解し、逆転写酵素（ＧＩＢＣＯ−ＢＲＬ社製）２００単位を添加し、総量２０μｌで４２℃１時間反応させた。反応液をフェノール抽出後、エタノール沈殿を行ない、ペレットを５０mMトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７.５）、１００mM ＮａＣｌ、１０mM ＭｇＣｌ₂、１mMジチオスレイトール溶液に溶解した。これにＥｃｏＲＩ１００単位を添加し、総量２０μｌで37℃１時間反応させた。反応液をフェノール抽出後、エタノール沈殿を行ない、ペレットを２０mMトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７.５）、１００mM ＫＣｌ、４mM ＭｇＣｌ₂、１０mM（ＮＨ₄）₂ＳＯ₄、５０μｇ／ｍｌ牛血清アルブミン溶液に溶解した。これに大腸菌ＤＮＡリガーゼ６０単位を添加し、１６℃１６時間反応させた。反応液に２mM ｄＮＴＰ２μｌ、大腸菌ＤＮＡポリメラーゼＩ４単位、大腸菌ＲＮａｓｅＨ０.１単位を添加し、１２℃１時間ついで２２℃１時間反応させた。次いでｃＤＮＡ合成反応液を用いて大腸菌ＤＨ１２Ｓ（ＧＩＢＣＯ−ＢＲＬ社製）の形質転換を行なった。形質転換はエレクトロポレーション法によって行なった。形質転換体の一部を１００μｇ／ｍｌアンピシリン含有２ｘＹＴ寒天培地上に蒔いて３７℃一晩培養した。寒天上に生じた任意のコロニーを拾い１００μ ｇ／ｍｌアンピシリン含有２ｘＹＴ培地２ｍｌに接種して３７℃で一晩培養した。培養液を遠心して、菌体からアルカリリシス法によりプラスミドＤＮＡを調製した。プラスミドＤＮＡはＥｃｏＲＩとＮｏｔＩで二重消化した後、０.８％アガロースゲル電気泳動を行ないｃＤＮＡインサートの大きさを求めた。また、得られたプラスミドを鋳型にして、蛍光色素で標識したＭ１３ユニバーサルプライマーとＴａｑポリメラーゼ（アプライドバイオシステムズ社製キット）を用いてシーケンス反応を行なった後、蛍光ＤＮＡシーケンサー（アプライドバイオシステムズ社）にかけてｃＤＮＡの５’末端約４００ｂｐの塩基配列を決定した。配列データはホモ・プロテインｃＤＮＡバンクデータベースとしてファイル化した。（３）膜貫通ドメインを有する蛋白質をコードしているｃＤＮＡの選択ホモ・プロテインｃＤＮＡバンクに登録された塩基配列を３フレームのアミノ酸配列に変換し、開始コドンから始まるオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）の有無を調べた。次いでＯＲＦがコードしている部分のＮ末端に分泌蛋白質に特有なシグナル配列が認められるものを選択した。これらのクローンについては、エキソヌクレアーセIIIによる欠失法を用いて、５’並びに３’両方向からシーケンシングを行い、全塩基配列の決定を行った。ＯＲＦがコードしている蛋白質について、Kyte−Doolittleの方法［Kyte,J ＆ Doolittle,R.F.,J.Mol.Biol ．157：105−132(1982)］により、疎水性／親水性プロフィールを求め、疎水性領域の有無を調べた。コードしている蛋白質のアミノ酸配列中に膜貫通ドメインと思われる疎水的な領域がある場合には、この蛋白質は膜蛋白質であると見なした。（４）分泌シグナル検出ベクターｐＳＳＤ３の構築ＳＶ４０プロモーターとウロキナーゼのプロテアーゼドメインｃＤＮＡを有するｐＳＳＤ１［Yokoyama−Kobayashi,M．et al.,Gene 163：193−196(1995)］１μｇを、ＢｇｌＩＩ５単位とＥｃｏＲＶ５単位で消化した。ついでＣＩＰ処理によって５’末端の脱リン酸化を行った後、アガロースゲル電気泳動によって約４.２ｋｂｐのＤＮＡ断片をゲルから切り出し精製した。２本のオリゴＤＮＡリンカ−Ｌ１（５’−ＧＡＴＣＣＣＧＧＧＴＣＡＣＧＴＧＧＧＡＴ−３’）とＬ２（５’−ＡＴＣＣＣＡＣＧＴＧＡＣＣＣＧＧ−３’）を合成し、Ｔ４ポリヌクレオチドキナーゼによりリン酸化した。両者をアニールしたのち、先に調製したｐＳＳＤ１の切断片とＴ４ＤＮＡリガーゼにより連結し、大腸菌ＪＭ１０９を形質転換した。形質転換体からプラスミドｐＳＳＤ３を調製し、リンカー挿入部分の塩基配列を決定することにより目的とする組換え体を確認した。得られたプラスミドの構造を図１に示す。本プラスミドベクターは、ポリクローニング部位に３種の平滑末端生成制限酵素部位、ＳｍａＩ、ＰｍａＣＩ、ＥｃｏＲＶを有している。これらの切断部位は７ｂｐの間隔で並んでいるので、この中のいずれかを選べば、挿入するｃＤＮＡ断片の３種のフレームと合わせて融合蛋白質を発現するベクターを構築できる。（５）分泌シグナル配列の機能確認上記工程の結果得られた分泌蛋白質候補クローンについて、Ｎ末端の疎水性領域が分泌シグナル配列として機能することを、文献記載の方法［Yokoyama−Koba yashi,M．et al.,Gene 163：193−196(1995)］によって確認した。まずターゲットｃＤＮＡを含んでいるプラスミドを、分泌シグナル配列をコードしていると考えられる部分の下流に存在する適当な制限酵素部位で切断した。もしこの制限酵素部位が突出末端である場合には、クレノウ処理やマングビーンヌクレアーゼ処理によって平滑末端にした。さらにＨｉｎｄIIIによる消化を行い、ＳＶ４０プロモーターとその下流に分泌シグナル配列をコードしているｃＤＮＡを含むＤＮＡ断片をアガロースゲル電気泳動によって単離した。この断片を、ｐＳＳＤ３のＨｉｎｄIIIと、ウロキナーゼのコーディングフレームと合うように選択した制限酵素部位の間に挿入し、ターゲットｃＤＮＡの分泌シグナル配列部分とウロキナーゼプロテアーゼドメインの融合蛋白質を発現するためのベクターを構築した。融合蛋白質発現ベクターを有する大腸菌（宿主：ＪＭ１０９）を１００μｇ／ｍｌアンピシリン含有２ｘＹＴ培地２ｍｌ中で３７℃２時間培養した後、ヘルパーファージＭ１３ＫＯ７（５０μｌ）を添加し、３７℃で一晩培養した。遠心によって分離した上澄からポリエチレングリコール沈殿によって一本鎖ファージ粒子を得た。これを１００μｌの１mMトリス−０.１mM ＥＤＴＡ、ｐＨ８（ＴＥ）に懸濁した。また対照として、ｐＳＳＤ３、並びにウロキナーゼの完全長ｃＤＮＡを含むベクターｐＫＡ１−ＵＰＡ［Yokoyama−Kobayashi,M．et al.,Gene 1 63：193−196(1995)］から同様にして調製した一本鎖ファージ粒子懸濁液を用いた。サル腎臓由来培養細胞ＣＯＳ７は、１０％ウシ胎児血清を含むダルベッコ改変イーグル（ＤＭＥＭ）培地中、５％ＣＯ₂存在下、３７℃で培養した。１×１０⁵ 個のＣＯＳ７細胞を６穴プレート（ヌンク社、穴の直径３ｃｍ）に植え、５％ＣＯ₂存在下、３７℃で２２時間培養した。培地除去後、リン酸緩衝液で細胞表面を洗浄し、さらに５０mMトリス塩酸（ｐＨ７.５）を含むＤＭＥＭ（ＴＤＭＥＭ）で再度洗浄した。この細胞に一本鎖ファージ懸濁液１μｌ、ＤＭＥＭ培地０ .６ｍｌ、ＴＲＡＮＳＦＥＣＴＡＭＴＭ（ＩＢＦ社）３μｌを懸濁したものを添加し、５％ＣＯ₂存在下、37℃で３時間培養した。サンプル液を除去後、ＴＤＭＥＭで細胞表面を洗浄し、１０％ウシ胎児血清含有ＤＭＥＭを１穴あたり２ｍｌ加え、５％ＣＯ₂存在下、３７℃にて２日間培養した。２％ウシフィブリノーゲン（マイルス社）、０.５％アガロース、１mM塩化カルシウムを含む５０mMリン酸緩衝液（ｐＨ７.４）１０ｍｌに１０単位のヒトトロンビン（持田製薬）を加え、直径９ｃｍのプレート中で固化させ、フィブリンプレートを調製した。トランスフェクションしたＣＯＳ７細胞の培養上清１０μ ｌをフィブリンプレートに載せ、３７℃１５時間インキュベートした。得られた溶解円の直径をウロキナーゼ活性の指標とした。もし、ｃＤＮＡ断片が分泌シグナル配列として機能するアミノ酸配列をコードしていること場合には、融合蛋白質が分泌され、そのウロキナーゼ活性による溶解円を形成する。したがって、溶解円を形成しない場合には、融合蛋白質が膜にトラップされたままになっており、ｃＤＮＡ断片は膜貫通ドメインをコードしていると考えられる。（６）インビトロ翻訳による蛋白質合成本発明のｃＤＮＡを有するプラスミドベクターを用いて、Ｔ_NＴウサギ網状赤血球溶解物キット（プロメガ社製）によるインビトロ転写／翻訳を行なった。この際［³⁵Ｓ］メチオニンを添加し、発現産物をラジオアイソトープでラベルした。いずれの反応もキットに付属のプロトコールに従って行なった。プラスミド２ μｇを、Ｔ_NＴウサギ網状赤血球溶解物１２.５μｌ、緩衝液（キットに付属）０ .５μｌ、アミノ酸混合液（メチオニンを含まない）２μｌ、［³⁵Ｓ］メチオニン（アマーシャム社）２μｌ（０.３７ＭＢｑ／μｌ）、Ｔ７ＲＮＡポリメラーゼ０.５μｌ、ＲＮａｓｉｎ２０Ｕを含む総量２５μｌの反応液中で３０℃で９０分間反応させた。反応液３μｌにＳＤＳサンプリングバッファー（１２５mMトリス塩酸緩衝液、ｐＨ６.８、１２０mM２−メルカプトエタノール、２％ＳＤＳ溶液、０.０２５％ブロモフェノールブルー、２０％グリセロール）２μｌを加え、９５℃３分問加熱処理した後、ＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動にかけた。オートラジオグラフィーを行ない、翻訳産物の分子量を求めた。（７）ノザンブロットハイブリダイゼーションヒト組織における発現パターンを調べるため、ノザンブロットハイブリダイゼーションを行った。ヒトの各組織から単離したポリ（Ａ）⁺ＲＮＡをブロットした膜をクローンテック社から購入した。目的とするクローンからｃＤＮＡ断片を適当な制限酵素で切り出し、アガロースゲル電気泳動で単離したのち、ランダムプライマーラベリングキット（宝酒造社）により、［³²Ｐ］ｄＣＴＰ（アマーシャム社）で標識した。ハイブリダイゼーションは、ブロット膜に付属の溶液を用いプロトコールに従って行った。（８）クローン例＜ＨＰ００４４２＞（配列番号１、２６、５１）ヒト繊維肉腫細胞株ＨＴ−１０８０ｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨＰ００４４２のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定したところ、８１ｂｐの５’非翻訳領域、６１８ｂｐのＯＲＦ、２８７ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有していた。ＯＲＦは２０５アミノ酸残基からなる蛋白質をコードしており、５箇所の膜貫通ドメインが存在した。図２にKyte−Doolittleの方法で求めた本蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す。インビトロ翻訳の結果、翻訳産物の明瞭なバンドは認められず、高分子量の位置にスメアなバンドが認められた。本蛋白質のアミノ酸配列を用いてプロテインデータベースを検索したところ、パン酵母プロトンＡＴＰａｓｅのプロテオリピッドプロテインＰＰＡ１（ＳＷＩＳＳ−ＰＲＯＴアクセション番号Ｐ２３９６８）と類似性を有していた。表２に、本発明のヒト蛋白質（ＨＰ）とパン酵母プロトンＡＴＰａｓｅのプロテオリピッドプロテインＰＰＡ１（ＰＬ）のアミノ酸配列の比較を示す。−はギャップを、＊は本発明の蛋白質と同一アミノ酸残基を、．は本発明の蛋白質と類似アミノ酸残基をそれぞれ表す。両者は、Ｎ末端を除く全領域にわたって５６.８％の相同性を有していた。また、本ｃＤＮＡの塩基配列を用いてＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中に、９０％以上の相同性を有し、かつ開始コドンから含んでいるもの（例えば、アクセション番号Ｈ８７３７９）が存在したが、この配列から本蛋白質を予想することはできない。パン酵母プロトンＡＴＰａｓｅのプロテオリピッドプロテインは、細胞の成育に必須の膜蛋白質である［Apperson,M.et al.,Biochem.Biophys.Res.Commun.16 8：574−579(1990)］。したがって、そのホモログである本発明の蛋白質も、ヒト細胞の成育において必須であると考えられ、この蛋白質の異常に起因する病気の診断や治療に用いることができる。＜ＨＰ００８０４＞（配列番号２、２７、５２）ヒト白血球細胞ｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨＰ００８０４のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定したところ、１３２ｂｐの５’非翻訳領域、１１１６ｂｐのＯＲＦ、５７６ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有していた。ＯＲＦは３７１アミノ酸残基からなる蛋白質をコードしており、７箇所の膜貫通ドメインが存在した。図３にKyte−Doolittleの方法で求めた本蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す。インビトロ翻訳の結果、翻訳産物の明瞭なバンドは認められなかった。本発明のｃＤＮＡ断片を用いて、ノザンブロットハイブリダイゼーションにより組織における発現パターンを検討したところ、図４に示すように、検討したすべての組織で発現していることが示された。したがって本発明の蛋白質はハウスキーピング蛋白質であると思われる。本蛋白質のアミノ酸配列を用いてプロテインデータベースを検索したところ、ラットＮＭＤＡレセプターグルタミン酸結合サブユニット（Ｇｅｎｂａｎｋアクセション番号Ｓ６１９７３）と類似性を有していた。表３に、本発明のヒト蛋白質（ＨＰ）とラットＮＭＤＡレセプターグルタミン酸結合サブユニット（ＲＮ）のアミノ酸配列の比較を示す。−はギャップを、＊は本発明の蛋白質と同一アミノ酸残基を、．は本発明の蛋白質と類似アミノ酸残基をそれぞれ表す。このサブユニットは５１６アミノ酸残基からなり、その６８番目のグルタミンから３４２番目のアルギニンまでの領域が、本発明の蛋白質のＣ末端２７０アミノ酸残基と９２.６％の相同性を有していた。しかし、Ｎ末端領域に相同性は認められなかった。なお、本発明の蛋白質のＮ末端には、プロリン、チロシン、グリシンに富む特徴的な繰り返し配列が認められた。また、本ｃＤＮＡの塩基配列を用いてＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中に、９０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセション番号Ｗ２５９３６）が存在したが、いずれも本ｃＤＮＡより短く、開始コドンから含んでいるものは見いだせなかった。ラットＮＭＤＡレセプターグルタミン酸結合サブユニットは、脳に特異的に存在するＮＭＤＡレセプター複合体のサブユニットの一つとして見いだされた［Ku mar,K.N.et al.,Nature 354：70−73(1991)］。本発明の蛋白質との高い相同性にも関わらず、Ｎ末端の配列や組織における発現パターンが異なることから、両者は異なる機能を有しているものと思われる。本発明の蛋白質は、チャンネルやトランスポーターに特徴的な７個の膜貫通ドメインを有することから、チャンネルやトランスポーターとしての役割を担っていると思われる。本発明の蛋白質は、細胞にとって必須であるハウスキーピング蛋白質であるので、この蛋白質の異常に起因する病気の診断や治療に用いることができる。＜ＨＰ０１０９８＞（配列番号３、２８、５３）ヒト胃癌ｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨＰ０１０９８のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定したところ、６１ｂｐの５’非翻訳領域、５４０ｂｐのＯＲＦ、４７５ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有していた。ＯＲＦは１７９アミノ酸残基からなる蛋白質をコードしており、１箇所の膜貫通ドメインが存在した。図５にKyte−Doolittleの方法で求めた本蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す。インビトロ翻訳の結果、ＯＲＦから予想される分子量２０，６２５にほぼ一致する２０ｋＤａの翻訳産物が生成した。本蛋白質のアミノ酸配列を用いてプロテインデータベースを検索したところ、イヌミクロソームシグナルペプチダーゼ１８ｋＤａサブユニット（ＳＷＩＳＳ− ＰＲＯＴアクセション番号Ｐ２１３７８）と完全に一致していた。したがって、本発明のｃＤＮＡは、ミクロソームシグナルペプチダーゼ１８ｋＤａサブユニットのヒトホモローグをコードしていることが示された。本ｃＤＮＡの塩基配列を用いてＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中に、９０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセション番号Ｔ６０５４９）が存在したが、不明瞭な配列が多く、本ｃＤＮＡと同じＯＲＦは見いだせなかった。イヌミクロソームシグナルペプチダーゼ１８ｋＤａサブユニットは、ミクロソームに存在するシグナルペプチダーゼ複合体のサブユニットの一つとして見いだされた［Shelness,G.S．& Blobel,G.，J.Biol.Chem．265：9512−9519(1990)］。シグナルペプチダーゼは、分泌蛋白質が小胞体で分泌される際に、シグナル配列を切断する酵素である。したがって、本発明のｃＤＮＡは、本蛋白質の生産や、本蛋白質の異常に起因する病気の診断や治療に用いることができる。＜ＨＰ０１１４８＞（配列番号４、２９、５４）ヒト肝臓ｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨＰ０１１４８のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定したところ、１０１ｂｐの５’非翻訳領域、１０４４ｂｐのＯＲＦ、４４６ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有していた。ＯＲＦは３４７アミノ酸残基からなる蛋白質をコードしており、Ｎ末端に１箇所の膜貫通ドメインが存在した。図６にKyte−Doolittleの方法で求めた本蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す。本蛋白質のＮ末端１７８アミノ酸残基をコードしているｃＤＮＡ部分を含むＨｉｎｄIII−ＰｖｕＩＩ断片をｐＳＳＤ３のＨｉｎｄIII−ＰｍａＣＩ部位に挿入した発現ベクターをＣＯＳ７細胞に導入したが、ウロキナーゼの分泌は認められず、本蛋白質は膜に留まっていることが示された。従って、本蛋白質はＩＩ型膜蛋白質であると思われる。インビトロ翻訳の結果、ＯＲＦから予想される分子量３８,１０１にほぼ一致する４１ｋＤａの翻訳産物が生成した。本発明のｃＤＮＡ断片を用いて、ノザンブロットハイブリダイゼーションにより組織における発現パターンを検討したところ、図７に示すように、脾臓で強い発現が認められた。また肝臓においてもわずかに発現していることが示された。本蛋白質のアミノ酸配列を用いてプロテインデータベースを検索したところ、ウシＷＣ１抗原（ＳＷＩＳＳ−ＰＲＯＴアクセション番号Ｐ３０２０５）と類似性を有していた。表４に、本発明のヒト蛋白質（ＨＰ）とウシＷＣ１抗原（ＷＣ）のアミノ酸配列の比較を示す。−はギャップを、＊は本発明の蛋白質と同一アミノ酸残基を、．は本発明の蛋白質と類似アミノ酸残基をそれぞれ表す。両者は３８％の相同性を有していた。また、本ｃＤＮＡの塩基配列を用いてＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中に、９０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセション番号Ｈ９１２００）が存在したが、部分配列なので本発明の蛋白質と同じ蛋白質をコードしているかどうかは判定できない。ウシＷＣ１抗原は、γδＴ細胞に特異的に発現している膜抗原として見いだされた［Wijngaard,P.L.J．et al.,J.Immunol．149:3273−3277(1992)］。類似性を示している領域は、スカベンジャーレセプターシステインリッチ（ＳＲＣＲ）ドメインと呼ばれており、他にもマクロファージスカベンジャーレセプター［Ma tsumoto,A.et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 87：9133−9137(1990)］やＴ細胞分化抗原ＣＤ６［Aruffo,A.et al.，J.Exp.Med．174：949−952(1991)］などに繰り返し配列として存在する。本蛋白質は、膵臓に特異的に発現していることから、膵臓の機能と深い関係があると思われ、他のＳＲＣＲファミリーと同様、レセプターとして働いていると考えられる。＜ＨＰ０１２９３＞（配列番号５、３０、５５）ヒト肝臓ｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨＰ０１２９３のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定したところ、８９ｂｐの５’非翻訳領域、１６６５ｂｐのＯＲＦ、１３４ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有していた。ＯＲＦは５５４アミノ酸残基からなる蛋白質をコードしており、１２箇所の膜貫通ドメインが存在した。図８にKyte−Doolittleの方法で求めた本蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す。インビトロ翻訳の結果、明瞭なバンドは認められず、高分子量の位置にスメアなバンドが認められた。本蛋白質のアミノ酸配列を用いてプロテインデータベースを検索したところ、ラットカチオントランスポーター（Ｇｅｎｂａｎｋアクセション番号Ｘ７８８５５）と類似性を有していた。表５に、本発明のヒト蛋白質（ＨＰ）とラットカチオントランスポーター（ＲＮ）のアミノ酸配列の比較を示す。−はギャップを、＊は本発明の蛋白質と同一アミノ酸残基を、．は本発明の蛋白質と類似アミノ酸残基をそれぞれ表す。両者は、全領域にわたって７８.１％の相同性を有していた。また、本ｃＤＮＡの塩基配列を用いてＧｅｎＢａｎｋを検索したが、ヒト遺伝子並びにヒトＥＳＴの中に９０％以上の相同性を有するものは見いだせなかった。ラットカチオントランスポーターは、腎臓における薬物排出に関与する膜蛋白質として見いだされた［Grundemann,D.et al.，Nature 372：549−552(1994) ］。したがって、そのホモローグである本発明の蛋白質も、同様の機能を有していると考えられ、この蛋白質の異常に起因する病気の診断や治療に用いることができる。また、薬物の排出に関与していると考えられることから、この蛋白質を発現させた細胞はこれらの薬物をデザインするための道具として用いることができる。さらに、この蛋白質は肝臓や腎臓で主に発現していることから、この蛋白質に対して親和性を有するものを作製すれば、これらの組織へのドラッグデリファミリーシステムに応用できる。＜ＨＰ１００１３＞（配列番号６、３１、５６）ヒト類表皮癌細胞株ＫＢｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨＰ１００１３のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定したところ、９６ｂｐの５’非翻訳領域、１０５３ｂｐのＯＲＦ、８８４ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有していた。ＯＲＦは３５０アミノ酸残基からなる蛋白質をコードしており、Ｎ末端にシグナル配列を、また内部に１箇所の膜貫通ドメインを有していた。図９にKyte−Doolittleの方法で求めた本蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す。本蛋白質のＮ末端６５アミノ酸残基をコードしているｃＤＮＡ部分を含むＨｉｎｄIII−ＥｃｏＯ６５Ｉ（マングビーンヌクレアーゼ処理）断片をｐＳＳＤ３のＨｉｎｄIII−ＥｃｏＲＶ部位に挿入した発現ベクターをＣＯＳ７細胞に導入したところ、培地中にウロキナーゼ活性が検出され、Ｎ末端がシグナル配列として機能していることが示された。従って、本蛋白質はＩ型膜蛋白質であると思われる。インビトロ翻訳の結果、ＯＲＦから予想される分子量３９,００８にほぼ一致する３９ｋＤａの翻訳産物が生成した。本蛋白質のアミノ酸配列を用いてプロテインデータベースを検索したが、類似性を有する既知蛋白質はなかった。また、本ｃＤＮＡの塩基配列を用いてＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中に、９０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセション番号Ｈ０７９９８）が存在したが、いずれも本ｃＤＮＡより短く、開始コドンから含んでいるものは見いだせなかった。＜ＨＰ１００３４＞（配列番号７、３２、５７）ヒト繊維肉腫細胞株ＨＴ−１０８０ｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨＰ１００３４のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定したところ、１７５ｂｐの５’非翻訳領域、６３０ｂｐのＯＲＦ、１０６ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有していた。ＯＲＦは２０９アミノ酸残基からなる蛋白質をコードしており、４箇所の膜貫通ドメインが存在した。図１０にKyte−Doolittleの方法で求めた本蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す。インビトロ翻訳の結果、ＯＲＦから予想される分子量２２,４３２にほぼ一致する２１ｋＤａの翻訳産物が生成した。本蛋白質のアミノ酸配列を用いてプロテインデータベースを検索したところ、ヒト腫瘍関連抗原Ｌ６（ＳＷＩＳＳ−ＰＲＯＴアクセション番号Ｐ３０４０８）と類似性を有していた。表６に、本発明のヒト蛋白質（ＨＰ）とヒト腫瘍関連抗原Ｌ６（Ｌ６）のアミノ酸配列の比較を示す。−はギャップを、＊は本発明の蛋白質と同一アミノ酸残基を、．は本発明の蛋白質と類似アミノ酸残基をそれぞれ表す。両者は、３１.８％の相同性を有していた。また、本ｃＤＮＡの塩基配列を用いてＧｅｎＢａｎｋを検索したが、ヒト遺伝子並びにヒトＥＳＴの中に９０％以上の相同性を有するものは見いだせなかった。ヒト腫瘍関連抗原Ｌ６は、ヒト腫瘍の細胞表面に大量に発現している膜抗原ＴＭ４スーパーファミリー蛋白質の一つである［Marken,J.S.et al.，Proc.Natl. Acad.Sci.USA 89：3503−3507(1992)］。これらの膜抗原は、ある特定の細胞や癌細胞に特異的に発現しているので、これに対する抗体を作製すれば、各種診断やドラッグデリバリー用キャリアーとして利用できる。また、これらの膜抗原遺伝子を導入して膜抗原を発現させた細胞は、対応するリガンドの検出などに応用できる。＜ＨＰ１００５０＞（配列番号８、３３、５８）ヒト繊維肉腫細胞株ＨＴ−１０８０ｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨＰ１００５０のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定したところ、９ｂｐの５’非翻訳領域、４９２ｂｐのＯＲＦ、１００ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有していた。ＯＲＦは１６３アミノ酸残基からなる蛋白質をコードしており、１箇所の膜貫通ドメインが存在した。図１１にKyte−Doolittleの方法で求めた本蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す。インビトロ翻訳の結果、ＯＲＦから予想される分子量１８,３６４にほぼ一致する２３ｋＤａの翻訳産物が生成した。本蛋白質のアミノ酸配列を用いてプロテインデータベースを検索したが、類似性を有する既知蛋白質はなかった。また、本ｃＤＮＡの塩基配列を用いてＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中に、９０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセション番号Ｈ０３１１７）が存在したが、不明瞭な配列が多く、本ｃＤＮＡと同じＯＲＦは見いだせなかった。＜ＨＰ１００７１＞（配列番号９、３４、５９）ヒト胃癌ｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨＰ１００７１のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定したところ、４６ｂｐの５’非翻訳領域、２７９ｂｐのＯＲＦ、６９ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有していた。ＯＲＦは９２アミノ酸残基からなる蛋白質をコードしており、２箇所の膜貫通ドメインが存在した。図１２にKyte−Doolittleの方法で求めた本蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す。インビトロ翻訳の結果、ＯＲＦから予想される分子量１０,０９４にほぼ一致する１２ｋＤａの翻訳産物が生成した。本蛋白質のアミノ酸配列を用いてプロテインデータベースを検索したが、類似性を有する既知蛋白質はなかった。また、本ｃＤＮＡの塩基配列を用いてＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中に、９０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセション番号Ｒ９７４４２）が存在したが、不明瞭な配列が多く、本ｃＤＮＡと同じＯＲＦは見いだせなかった。＜ＨＰ１００７６＞（配列番号１０、３５、６０）ヒトリンホーマ細胞株Ｕ９３７ｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨＰ１００７６のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定したところ、８１ｂｐの５’非翻訳領域、５１９ｂｐのＯＲＦ、１３２ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有していた。ＯＲＦは１７２アミノ酸残基からなる蛋白質をコードしており、２箇所の膜貫通ドメインが存在した。図１３にKyte−Doolittleの方法で求めた本蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す。本蛋白質のＮ末端１６７アミノ酸残基をコードしているｃＤＮＡ部分を含むＨｉｎｄIII−ＥｃｏＯ６５Ｉ（マングビーンヌクレアーゼ処理）断片をｐＳＳＤ３のＨｉｎｄIII−ＥｃｏＲＶ部位に挿入した発現ベクターをＣＯＳ７細胞に導入したが、ウロキナーゼの分泌は認められず、本蛋白質は膜に留まっていることが示された。インビトロ翻訳の結果、ＯＲＦから予想される分子量１８,４５０にほぼ一致する２４ｋＤａの翻訳産物が生成した。本蛋白質のアミノ酸配列を用いてプロテインデータベースを検索したところ、パン酵母仮想蛋白質２３.１ｋＤａ（ＳＷＩＳＳ−ＰＲＯＴアクセション番号Ｐ３４２２２）と類似性を有していた。表７に、本発明のヒト蛋白質（ＨＰ）と酵母仮想蛋白質２３.１ｋＤａ（ＳＣ）のアミノ酸配列の比較を示す。−はギャップを、＊は本発明の蛋白質と同一アミノ酸残基を、．は本発明の蛋白質と類似アミノ酸残基をそれぞれ表す。両者は、Ｃ末端１３９アミノ酸残基の領域で４７. ５％の相同性を有していた。また、本ｃＤＮＡの塩基配列を用いてＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中に、９０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセション番号Ｔ７４８４７）が存在したが、不明瞭な配列が多く、本ｃＤＮＡと同じＯＲＦは見いだせなかった。＜ＨＰ１００８５＞（配列番号１１、３６、６１）ヒトリンホーマ細胞株Ｕ９３７ｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨＰ１００８５のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定したところ、１５０ｂｐの５’非翻訳領域、４５０ｂｐのＯＲＦ、９７ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有していた。ＯＲＦは１４９アミノ酸残基からなる蛋白質をコードしており、Ｎ末端に１箇所の膜貫通ドメインが存在した。図１４にKyte−Doolittleの方法で求めた本蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す。本蛋白質のＮ末端５７アミノ酸残基をコードしているｃＤＮＡ部分を含むＨｉｎｄIII−ＥｃｏＲＩ（クレノウ処理）断片をｐＳＳＤ３のＨｉｎｄIII−ＥｃｏＲＶ部位に挿入した発現ベクターをＣＯＳ７細胞に導入したが、ウロキナーゼの分泌は認められず、本蛋白質は膜に留まっていることが示された。従って、本蛋白質はＩＩ型膜蛋白質であると思われる。インビトロ翻訳の結果、ＯＲＦから予想される分子量１７ ,３０７にほぼ一致する２０ｋＤａの翻訳産物が生成した。本蛋白質のアミノ酸配列を用いてプロテインデータベースを検索したところ、ヒト初期活性化抗原ＣＤ６９（ＳＷＩＳＳ−ＰＲＯＴアクセション番号Ｑ０７１０８）と類似性を有していた。表８に、本発明のヒト蛋白質（ＨＰ）とヒト初期活性化抗原ＣＤ６９（ＣＤ）のアミノ酸配列の比較を示す。−はギャップを、＊は本発明の蛋白質と同一アミノ酸残基を、．は本発明の蛋白質と類似アミノ酸残基をそれぞれ表す。両者は、Ｃ末端１１２アミノ酸残基の領域で３６.６％の相同性を有していた。また、本ｃＤＮＡの塩基配列を用いてＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中に、９０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセション番号Ｈ１１８０８）が存在したが、不明瞭な配列が多く、本ｃＤＮＡと同じＯＲＦは見いだせなかった。ヒト初期活性化抗原ＣＤ６９は、リンパ球を刺激した際に細胞表面に出現する糖蛋白質であり、Ｃ型レクチンスーパーファミリー蛋白質の一つである［Hamann ,J.et al.,J.Immunol．150：4920−4927(1993)］。これらの膜抗原は、ある特定の細胞に特異的に発現しているので、これに対する抗体を作製すれば、各種診断やドラッグデリバリー用キャリアーとして利用できる。また、これらの膜抗原遺伝子を導入して膜抗原を発現させた細胞は、対応するリガンドの検出などに応用できる。＜ＨＰ１０１２２＞（配列番号１２、３７、６２）ヒト胃癌ｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨＰ１０１２２のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定したところ、１３８ｂｐの５’非翻訳領域、５６７ｂｐのＯＲＦ、４８１ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有していた。ＯＲＦは１８８アミノ酸残基からなる蛋白質をコードしており、２箇所の膜貫通ドメインが存在した。図１５にKyte−Doolittleの方法で求めた本蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す。インビトロ翻訳の結果、ＯＲＦから予想される分子量２１,１７５にほぼ一致する２２ｋＤａの翻訳産物が生成した。本蛋白質のアミノ酸配列を用いてプロテインデータベースを検索したが、類似性を有する既知蛋白質はなかった。また、本ｃＤＮＡの塩基配列を用いてＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中に、９０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセション番号Ｔ８０３６０）が存在したが、不明瞭な配列が多く、本ｃＤＮＡと同じＯＲＦは見いだせなかった。＜ＨＰ１０１３６＞（配列番号１３、３８、６３）ヒトリンホーマ細胞株Ｕ９３７ｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨＰ１０１３６のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定したところ、８１ｂｐの５’非翻訳領域、６４８ｂｐのＯＲＦ、６８０ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有していた。ＯＲＦは２１５アミノ酸残基からなる蛋白質をコードしており、Ｃ末端に１箇所の膜貫通ドメインが存在した。図１６にKyte−Doolittleの方法で求めた本蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す。インビトロ翻訳の結果、ＯＲＦから予想される分子量２４,７４０にほぼ一致する２８ｋＤａの翻訳産物が生成した。本蛋白質のアミノ酸配列を用いてプロテインデータベースを検索したところ、パン酵母蛋白質輸送蛋白質ＳＬＹ２（ＳＷＩＳＳ−ＰＲＯＴアクセション番号Ｐ２２２１４）と類似性を有していた。表９に、本発明のヒト蛋白質（ＨＰ）とパン酵母蛋白質輸送蛋白質ＳＬＹ２（ＳＣ）のアミノ酸配列の比較を示す。−はギャップを、＊は本発明の蛋白質と同一アミノ酸残基を、．は本発明の蛋白質と類似アミノ酸残基をそれぞれ表す。両者は、全領域にわたって３６.１％の相同性を有していた。また、本ｃＤＮＡの塩基配列を用いてＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中に、９０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセション番号Ｒ８０１３６）が存在したが、いずれも本ｃＤＮＡより短く、開始コドンから含んでいるものは見いだせなかった。パン酵母蛋白質輸送蛋白質ＳＬＹ２は、蛋白質を小胞体からゴルジ装置へ輸送するために必須であり、細胞周期の制御にも関与していることが知られている［ Dascher,C．et al.，Mol.Cell.Biol．11：872−885(1991)］。したがって、本発明のｃＤＮＡは、本蛋白質の生産や、本蛋白質の異常に起因する病気の診断や治療に用いることができる。＜ＨＰ１０１７５＞（配列番号１４、３９、６４）ヒト胃癌ｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨＰ１０１７５のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定したところ、１７３ｂｐの５’非翻訳領域、３３９ｂｐのＯＲＦ、４６２ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有していた。ＯＲＦは１１２アミノ酸残基からなる蛋白質をコードしており、４箇所の膜貫通ドメインが存在した。図１７にKyte−Doolittleの方法で求めた本蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す。インビトロ翻訳の結果、ＯＲＦから予想される分子量１１,５６４にほぼ一致する１３ｋＤａの翻訳産物が生成した。本蛋白質のアミノ酸配列を用いてプロテインデータベースを検索したが、類似性を有する既知蛋白質はなかった。また、本ｃＤＮＡの塩基配列を用いてＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中に、９０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセション番号Ｗ５２８５２）が存在したが、不明瞭な配列が多く、本ｃＤＮＡと同じＯＲＦは見いだせなかった。＜ＨＰ１０１７９＞（配列番号１５、４０、６５）ヒト類表皮癌細胞株ＫＢｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨＰ１０１７９のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定したところ、１２１ｂｐの５’ 非翻訳領域、３４５ｂｐのＯＲＦ、４５９ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有していた。ＯＲＦは１１４アミノ酸残基からなる蛋白質をコードしており、４箇所の膜貫通ドメインが存在した。図１８にKyte−Doolittleの方法で求めた本蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す。インビトロ翻訳の結果、ＯＲＦから予想される分子量１２,０７８にほぼ一致する１４ｋＤａの翻訳産物が生成した。本蛋白質のアミノ酸配列を用いてプロテインデータベースを検索したが、類似性を有する既知蛋白質はなかった。しかし、本発明のｃＤＮＡクローンＨＰ１０１７５がコードする蛋白質と類似性を有していた。表１０に、ＨＰ１０１７９がコードしている蛋白質とＨＰ１０１７５がコードしている蛋白質のアミノ酸配列の比較を示す。−はギャップを、＊は本発明の蛋白質と同一アミノ酸残基を、．は本発明の蛋白質と類似アミノ酸残基をそれぞれ表す。両者は、全領域にわたって８０.８％の相同性を有していた。また、本ｃＤＮＡの塩基配列を用いてＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中に、９０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセション番号Ｎ５５９９１）が存在したが、不明瞭な配列が多く、本ｃＤＮＡと同じＯＲＦは見いだせなかった。＜ＨＰ１０１９６＞（配列番号１６、４１、６６）ヒト繊維肉腫細胞株ＨＴ−１０８０ｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨＰ１０１９６のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定したところ、９ｂｐの５’非翻訳領域、９８４ｂｐのＯＲＦ、１２２ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有していた。ＯＲＦは３２７アミノ酸残基からなる蛋白質をコードしており、Ｎ末端に１箇所の膜貫通ドメインが存在した。図１９にKyte−Doolittleの方法で求めた本蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す。本蛋白質のＮ末端１６２アミノ酸残基をコードしているｃＤＮＡ部分を含むＨｉｎｄIII−ＢｇｌＩＩ（クレノウ処理）断片をｐＳＳＤ３のＨｉｎｄIII−ＥｃｏＲＶ部位に挿入した発現ベクターをＣＯＳ７細胞に導入したが、ウロキナーゼの分泌は認められず、本蛋白質は膜に留まっていることが示された。従って、本蛋白質はＩＩ型膜蛋白質であると思われる。インビトロ翻訳の結果、ＯＲＦから予想される分子量３６,１６３にほぼ一致する３７ｋＤａの翻訳産物が生成した。本蛋白質のアミノ酸配列を用いてプロテインデータベースを検索したが、高い類似性を有する既知蛋白質はなかった。また、本ｃＤＮＡの塩基配列を用いてＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中に、９０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセション番号Ｔ１７０２６）が存在したが、いずれも本ｃＤＮＡより短く、開始コドンから含んでいるものは見いだせなかった。＜ＨＰ１０２３５＞（配列番号１７、４２、６７）ヒト繊維肉腫細胞株ＨＴ−１０８０ｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨＰ１０２３５のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定したところ、５ｂｐの５’非翻訳領域、１１２２ｂｐのＯＲＦ、５９４ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有していた。ＯＲＦは３７３アミノ酸残基からなる蛋白質をコードしており、１１箇所の膜貫通ドメインが存在した。図２０にKyte−Doolittleの方法で求めた本蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す。インビトロ翻訳の結果、明瞭なバンドは認められず、高分子量の位置にスメアなバンドが認められた。本蛋白質のアミノ酸配列を用いてプロテインデータベースを検索したところ、ヒト核小体蛋白質ＨＮＰ３６（ＥＭＢＬアクセション番号Ｘ８６６８１）と類似性を有していた。表１１に、本発明のヒト蛋白質（ＨＰ）とヒト核小体蛋白質ＨＮＰ３６（ＮＰ）のアミノ酸配列の比較を示す。−はギャップを、＊は本発明の蛋白質と同一アミノ酸残基を、．は本発明の蛋白質と類似アミノ酸残基をそれぞれ表す。両者は、全領域にわたって４５.３％の相同性を有していた。また、本ｃＤＮＡの塩基配列を用いてＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中に、９０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセション番号Ｒ５７３７２）が存在したが、部分配列なので本発明の蛋白質と同じ蛋白質をコードしているかどうかは判定できない。ヒト核小体蛋白質ＨＮＰ３６は、細胞の成長や増殖に際して役割を担っている遺伝子産物としてとして見いだされた［Williams,J.B.＆ Lanahan,A.A.，Bioch em.Biophys.Res.Commun．213：325−333(1995)］。したがって、その類縁体である本発明の蛋白質は、細胞の成長や増殖にとって必須であるハウスキーピング蛋白質であると考えられ、この蛋白質の異常に起因する病気の診断や治療に用いることができる。＜ＨＰ１０２９７＞（配列番号１８、４３、６８）ヒト胃癌ｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨＰ１０２９７のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定したところ、６２ｂｐの５’非翻訳領域、５５２ｂｐのＯＲＦ、８９０ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有していた。ＯＲＦは１８３アミノ酸残基からなる蛋白質をコードしており、Ｎ末端にシグナル配列を、また内部に１箇所の膜貫通ドメインを有していた。従って、本蛋白質はＩ型膜蛋白質であると思われる。図２１にKyte−Doolittleの方法で求めた本蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す。インビトロ翻訳の結果、ＯＲＦから予想される分子量２０,５７４にほぼ一致する２４ｋＤａの翻訳産物が生成した。本蛋白質のアミノ酸配列を用いてプロテインデータベースを検索したが、類似性を有する既知蛋白質はなかった。また、本ｃＤＮＡの塩基配列を用いてＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中に、９０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセション番号Ｒ４７８２３）が存在したが、不明瞭な配列が多く、本ｃＤＮＡと同じＯＲＦは見いだせなかった。＜ＨＰ１０２９９＞（配列番号１９、４４、６９）ヒト胃癌ｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨＰ１０２９９のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定したところ、９２ｂｐの５’非翻訳領域、３５１ｂｐのＯＲＦ、８９ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有していた。ＯＲＦは１１６アミノ酸残基からなる蛋白質をコードしており、Ｎ末端に１箇所の膜貫通ドメインが存在した。図２２にKyte−Doolittleの方法で求めた本蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す。本蛋白質のＮ末端６５アミノ酸残基をコードしているｃＤＮＡ部分を含むＨｉｎｄIII−ＶｓｐＩ（クレノウ処理）断片をｐＳＳＤ３のＨｉｎｄIII−ＰｍａＣＩ部位に挿入した発現ベクターをＣＯＳ７細胞に導入したが、ウロキナーゼの分泌は認められず、本蛋白質は膜に留まっていることが示された。従って、本蛋白質はＩＩ型膜蛋白質であると思われる。インビトロ翻訳の結果、ＯＲＦから予想される分子量１２,４９８にほぼ一致する１３ｋＤａの翻訳産物が生成した。本蛋白質のアミノ酸配列を用いてプロテインデータベースを検索したところ、パン酵母仮想蛋白質１６.５ｋＤａ（ＳＷＩＳＳ−ＰＲＯＴアクセション番号Ｐ４２８３４）と類似性を有していた。表１２に、本発明のヒト蛋白質（ＨＰ）とパン酵母仮想蛋白質１６.５ｋＤａ（ＳＣ）のアミノ酸配列の比較を示す。−はギャップを、＊は本発明の蛋白質と同一アミノ酸残基を、．は本発明の蛋白質と類似アミノ酸残基をそれぞれ表す。両者は、Ｃ末端６６アミノ酸残基の領域で５３.０％の相同性を有していた。また、本ｃＤＮＡの塩基配列を用いてＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中に、９０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセション番号Ｒ２７７４８）が存在したが、不明瞭な配列が多く、本ｃＤＮＡと同じＯＲＦは見いだせなかった。＜ＨＰ１０３０１＞（配列番号２０、４５、７０）ヒト類表皮癌細胞株ＫＢｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨＰ１０３０１のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定したところ、９１ｂｐの５’非翻訳領域、４５９ｂｐのＯＲＦ、１１２ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有していた。ＯＲＦは１５２アミノ酸残基からなる蛋白質をコードしており、４箇所の膜貫通ドメインが存在した。図２３にKyte−Doolittleの方法で求めた本蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す。インビトロ翻訳の結果、ＯＲＦから予想される分子量１６,５１６にほぼ一致する１８ｋＤａの翻訳産物が生成した。本蛋白質のアミノ酸配列を用いてプロテインデータベースを検索したが、類似性を有する既知蛋白質はなかった。また、本ｃＤＮＡの塩基配列を用いてＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中に、９０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセション番号Ｎ２８８２８）が存在したが、不明瞭な配列が多く、本ｃＤＮＡと同じＯＲＦは見いだせなかった。＜ＨＰ１０３０２＞（配列番号２１、４６、７１）ヒト肝臓ｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨＰ１０３０２のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定したところ、１３３ｂｐの５’非翻訳領域、１６８０ｂｐのＯＲＦ、５６０ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有していた。ＯＲＦは５５９アミノ酸残基からなる蛋白質をコードしており、１２箇所の膜貫通ドメインが存在した。図２４にKyte−Doolittleの方法で求めた本蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す。インビトロ翻訳の結果、明瞭なバンドは認められず、高分子量の位置にスメアなバンドが認められた。本蛋白質のアミノ酸配列を用いてプロテインデータベースを検索したが、類似性を有する既知蛋白質はなかった。また、本ｃＤＮＡの塩基配列を用いてＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中に、９０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセション番号Ｎ７２４３４）が存在したが、いずれも本ｃＤＮＡより短く、開始コドンから含んでいるものは見いだせなかった。＜ＨＰ１０３０４＞（配列番号２２、４７、７２）ヒト骨肉腫細胞株Ｕ−２ＯＳｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨＰ１０３０４のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定したところ、１０ｂｐの５’非翻訳領域、９９３ｂｐのＯＲＦ、３１３ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有していた。ＯＲＦは３３０アミノ酸残基からなる蛋白質をコードしており、Ｎ末端にシグナル配列を、また内部に１箇所の膜貫通ドメインを有していた。従って、本蛋白質はＩ型膜蛋白質であると思われる。図２５にKyte−Doolittle の方法で求めた本蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す。インビトロ翻訳の結果、ＯＲＦから予想される分子量３６,８４０にほぼ一致する３６ｋＤａの翻訳産物が生成した。本蛋白質のアミノ酸配列を用いてプロテインデータベースを検索したが、類似性を有する既知蛋白質はなかつた。また、本ｃＤＮＡの塩基配列を用いてＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中に、９０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセション番号Ｎ２６８４０）が存在したが、本ｃＤＮＡと同じＯＲＦは見いだせなかった。＜ＨＰ１０３０５＞（配列番号２３、４８、７３）ヒト骨肉腫細胞株Ｕ−２ＯＳｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨＰ１０３０５のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定したところ、１０９ｂｐの５’非翻訳領域、３２７ｂｐのＯＲＦ、４５７ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有していた。ＯＲＦは１０８アミノ酸残基からなる蛋白質をコードしており、１箇所の膜貫通ドメインが存在した。図２６にKyte−Doolittleの方法で求めた本蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す。本蛋白質のＮ末端１６２アミノ酸残基をコードしているｃＤＮＡ部分を含むＨｉｎｄIII−ＡｐａＩ（マングビーンヌクレアーゼ処理）断片をｐＳＳＤ３のＨｉｎｄIII−ＰｍａＣＩ部位に挿入した発現ベクターをＣＯＳ７細胞に導入したが、ウロキナーゼの分泌は認められず、本蛋白質は膜に留まっていることが示された。従って、本蛋白質はＩＩ型膜蛋白質であると思われる。インビトロ翻訳の結果、ＯＲＦから予想される分子量１２，１９９にほぼ一致する１５ｋＤａの翻訳産物が生成した。本蛋白質のアミノ酸配列を用いてプロテインデータベースを検索したが、類似性を有する既知蛋白質はなかった。また、本ｃＤＮＡの塩基配列を用いてＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中に、９０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセション番号Ｈ０２７６８）が存在したが、不明瞭な配列が多く、本ｃＤＮＡと同じＯＲＦは見いだせなかった。＜ＨＰ１０３０６＞（配列番号２４、４９、７４）ヒト骨肉腫細胞株Ｕ−２ＯＳｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨＰ１０３０６のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定したところ、２２９ｂｐの５’非翻訳領域、３０６ｂｐのＯＲＦ、１５５ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有していた。ＯＲＦは１０１アミノ酸残基からなる蛋白質をコードしており、２箇所の膜貫通ドメインが存在した。図２７にKyte−Doolittleの方法で求めた本蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す。インビトロ翻訳の結果、ＯＲＦから予想される分子量１２,０２９にほぼ一致する１４ｋＤａの翻訳産物が生成した。本蛋白質のアミノ酸配列を用いてプロテインデータベースを検索したが、類似性を有する既知蛋白質はなかった。また、本ｃＤＮＡの塩基配列を用いてＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中に、９０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセション番号Ｈ４４７１１）が存在したが、不明瞭な配列が多く、本ｃＤＮＡと同じＯＲＦは見いだせなかった。＜ＨＰ１０３２８＞（配列番号２５、５０、７５）ヒト類表皮癌細胞株ＫＢｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨＰ１０３２８のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定したところ、１１７ｂｐの５’ 非翻訳領域、１１１９ｂｐのＯＲＦ、９５０ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有していた。ＯＲＦは３７２アミノ酸残基からなる蛋白質をコードしており、１箇所の膜貫通ドメインが存在した。図２８にKyte−Doolittleの方法で求めた本蛋白質の疎水性／親水性プロフィールを示す。本蛋白質のＮ末端１２９アミノ酸残基をコードしているｃＤＮＡ部分を含むＨｉｎｄIII−ＰｍａＣＩ断片をｐＳＳＤ３のＨｉｎｄIII−ＳｍａＩ部位に挿入した発現ベクターをＣＯＳ７細胞に導入したが、ウロキナーゼの分泌は認められず、本蛋白質は膜に留まっていることが示された。従って、本蛋白質はＩＩ型膜蛋白質であると思われる。インビトロ翻訳の結果、ＯＲＦから予想される分子量４２,５１４にほぼ一致する４１ｋＤａの翻訳産物が生成した。本蛋白質のアミノ酸配列を用いてプロテインデータベースを検索したところ、ショウジョウバエ神経性分泌信号蛋白質（ＧｅｎＢａｎｋアクセション番号Ｕ４１４４９）と類似性を有していた。表１３に、本発明のヒト蛋白質（ＨＰ）とショウジョウバエ神経性分泌信号蛋白質（ＤＭ）のアミノ酸配列の比較を示す。− はギャップを、＊は本発明の蛋白質と同一アミノ酸残基を、．は本発明の蛋白質と類似アミノ酸残基をそれぞれ表す。両者は、中間領域２０２アミノ酸残基で３８.６％の相同性を有していた。また、本ｃＤＮＡの塩基配列を用いてＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中に、９０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセション番号Ｒ７５８１５）が存在したが、いずれも本ｃＤＮＡより短く、開始コドンから含んでいるものは見いだせなかった。本発明は膜貫通ドメインを有するヒト蛋白質、およびそれをコードしているｃＤＮＡを提供する。本発明の蛋白質は、いずれも細胞膜に存在するので、細胞の増殖や分化を制御している蛋白質と考えられる。したがって、本発明の蛋白質は、医薬品として、あるいは該蛋白質に対する抗体を作製するための抗原として用いることができる。本発明のｃＤＮＡは、遺伝子診断用プローブや遺伝子治療用遺伝子源として用いることができる。また、該ＤＮＡを用いることにより、該蛋白質を大量に発現することができる。これら膜蛋白質遺伝子を導入して膜蛋白質を大量発現させた細胞は、対応するリガンドの検出、新しい低分子医薬のスクリーニングなどに応用できる。上記の活性および使用に加えて、本発明のポリヌクレオチドおよびタンパク質は、以下に定義した使用または生物活性（本明細書に記載のアッセイに関するものも含む）を１つ以上示し得る。本発明のタンパク質について記載した使用または活性は、かかるタンパク質の投与または使用により、またはかかるタンパク質をコードするポリヌクレオチドの投与または使用（例えば、遺伝子治療またはＤＮＡの導入に適当なベクターにおいて）により得られ得る。研究使用および有用性本発明により提供されるポリヌクレオチドは、研究分野で種々の目的のために使用することができる。このポリヌクレオチドは、解析、定性または治療使用のための組換えタンパク質を発現させるために；対応するタンパク質が（構造的に、または組織分化または発達の特定の段階において、または疾患の状態において）選択的に発現されている組織のマーカーとして；サザンゲル上の分子量マーカーとして；染色体の同定または関連遺伝子配座を位置付けるための染色体マーカーまたはタグ（標識されている場合）として；潜在的な遺伝子疾患を同定するために患者の内因性ＤＮＡ配列と比較するために；ハイブリダイズさせて、新規な、関連性のあるＤＮＡ配列を見つけるためのプローブとして；遺伝子フィンガープリント法のためのＰＣＲプライマーを誘導する情報源として；他の新規ポリヌクレオチドを見つける過程において既知配列を「引く」ためのプローブとして；「遺伝子チップ」または他の支持体に付着させるためのオリゴマーを選択および製造するために（これは発現パターンを調査することも含む）；ＤＮＡ免疫技術を用いて抗タンパク質抗体を産生させるために；および抗ＤＮＡ抗体を産生させるか、または他の免疫応答を引き起こすための抗原として、使用することができる。ポリヌクレオチドが、他のタンパク質に結合、または結合し得るタンパク質をコードしている場合（例えば、レセプター−リガンド相互作用において）、ポリヌクレオチドを、相互作用トラップアッセイ（例えば、Gyuris et al.、Cell 75:791-803(1993)に記載）に使用すると、結合する別のタンパク質をコードするポリヌクレオチドを同定、または結合相互作用の阻害剤を同定することができる。本発明により提供されるタンパク質は、同じようにアッセイにおいて、高スループット・スクリーニング用の多重タンパク質のパネルに含まれる生物活性を測定するために；抗体を産生または他の免疫応答を引き起こすために；生物学的液体中におけるタンパク質（またはそのレセプター）レベルを定量的に測定するために作成したアッセイにおける試薬（標識試薬を含む）として；対応するタンパク質が（構造的に、または組織分化または発達の特定の段階において、または疾患の状態において）選択的に発現されている組織のマーカーとして；および、当然、相関するレセプターまたはリガンドを単離するために使用することができる。タンパク質が他のタンパク質に結合しているか、または結合し得る場合（例えば、レセプター−リガンド相互作用において）、結合する他のタンパク質を同定、または結合相互作用の阻害剤を同定することができる。また、これらの結合相互作用に関与するタンパク質を用いると、ペプチドまたは結合相互作用の小分子阻害剤またはアゴニストをスクリーニングすることができる。これらの研究使用の一部または全ては、研究製品として市販できる試薬グレードまたはキット形態にすることができる。上記にあげた用途の使用法は、当業者によりよく知られている。このような方法を開示する参考文献は、「Molecular Cloning:A Laboratory Manual」、第２版、Cold Spring Harbor Laboratory Press，Sambrook,J.、E.F.Fritsch and T. Maniatis編、1989、および「Methods in Enzymology:Guide to Molecular Cloni ng Techniques」、Academic Press、Berger,S.L．and A.R.Kimmel編、1987を制限なく含む。栄養剤としての使用本発明のポリヌクレオチドおよびタンパク質はまた、栄養源または補足として使用することができる。このような使用は、タンパク質またはアミノ酸補足としての使用、炭素源としての使用、窒素源としての使用、および炭水化物源としての使用を制限なく含む。このような場合、本発明のタンパク質またはポリヌクレオチドは、特定の生物の食餌に添加できるか、または単離固体または液体製剤として、例えば粉末、丸剤、溶液、懸濁液またはカプセル剤の形で投与することができる。微生物の場合、本発明のタンパク質またはポリヌクレオチドは、微生物を培養した培地中またはその上に加えることができる。サイトカインおよび細胞増殖／分化活性本発明のタンパク質は、サイトカイン、細胞増殖（誘導または阻害のいずれか）または細胞分化（誘導または阻害のいずれか）活性を示し得るか、または特定の細胞群において他のサイトカインの産生を誘導し得る。全ての既知のサイトカインを含む、現在までに発見されている多くのタンパク質因子が、１つ以上の因子依存性細胞増殖アッセイにおいて活性を示し、従って、このアッセイはサイトカイン活性を確認するのに便利である。本発明のタンパク質の活性は、３２Ｄ、ＤＡ２、ＤＡ１Ｇ、Ｔ１０、Ｂ９、Ｂ９／１１、ＢａＦ３、ＭＣ９／Ｇ、Ｍ＋（プレＢＭ＋）、２Ｅ８、ＲＢ５、ＤＡ１、１２３、Ｔ１１６５、ＨＴ２、ＣＴＬＬ２、ＴＦ−１、Ｍｏ７ｅおよびＣＭＫを制限なく含む、数多くの細胞系のルーチン因子依存性細胞増殖アッセイのいずれか１つにより確認される。本発明のタンパク質の活性は、とりわけ、以下の方法により測定し得る：Ｔ細胞または胸腺細胞増殖アッセイは、以下に記載されているものを制限なく含む：Current Protocols in Immunology、J.E.Coligan、A.M.Kruisbeek、D.H.M argulies、E.M.Shevach、W Strober、Pub.Greene Publishing Associates and W iley-Interscience(第３章、In Vitro assays for Mouse Lymphocyte Function 3.1-3.19;第７章、Immunologic studies in Humans)；Takai et al.、J.Immunol .137:3494-3500,1986;Bertagnolli et al.、J.Immunol.145:1706-1712,1990;Ber tagnolli et al.、Cellular Immunology 133:327-341,1991;Bertagnolli,et al. 、J.Immunol.149:3778-3783,1992;Bowman et al．、J.Immunol.152:1756-1761,1 994。脾臓細胞、リンパ節細胞または胸腺細胞のサイトカイン産生および／または増殖アッセイは、以下に記載されているものを制限なく含む：Polyclonal T cell stimulaion、Kruisbeek,A.M.およびShevach,E.M.、Current Protocols in Immun ology.J.E.e.a．Coligan編Vol 1 p.3.12.1-3.12.14、John Wiley and Sons、Tor onto.1994；およびMeasurement of mouse and human interleukinγ、Schreiber ,R.D.、Current Protocols in Immunology、J.E.e.a.Coligan編Vol 1 p.6.8.1-6 .8.8、John Wiley and Sons、Tronto.1994。造血およびリンパ球生成細胞の増殖および分化アッセイは、以下に記載のものを制限なく含む：Measurement of Human and Murine Interleukin 2 and Interl eukin 4、Bottomly,K.、Davis,L.S．and Lipsky,P.E.、Current Protocols in I mmunology、J.E.e.a.Coligan編Vol 1 p.6.3.1-6.3.12、John Wiley and Sons、T ronto.1991;deVries et al.、J.Exp.Med.173:1205-1211,1991;Moreau et al.、N ature 336:690-692,1988;Greenberger et al.、Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.80:2 931-2938,1983;Measurement of mouse and human interleukin 6-Nordan,R.、Cu rrent Protocols in Immunology、J.E.e.a.Coligan編Vol 1 p.6.6.1-6.6.5、Joh n Wiley and Sons、Tronto 1991;Smith et al.、Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.83: 1857-1861,1986;Measurement of human Interleukin 11-Bennett,F.、Giannotti ,J.、Clark,S.C.and Turner,K.J.、Current Protocols in Immunology、J.E.e.a .Coligan編、Vol 1 p.6.15.1 John Wiley and Sons、Tronto.1991;Measurement of mouse and human Interleukin 9-Ciarletta,A.、Giannotti,J.、Clark,S.C.a nd Turner,K.J.、Current Protocols in Immunology、J.E.e.a.Coligan編、Vol 1 p.6.13.1、John Wiley and Sons、Tronto.1991。抗原に対するＴ細胞クローン応答アッセイ（これにより、とりわけ、ＡＰＣ− Ｔ細胞相互作用に影響を与え、並びに増殖およびサイトカイン産生を測定することにより、Ｔ細胞効果を指示するタンパク質が同定される）は、以下に記載のものを制限なく含む：Current Protocols in Immunology、J.E.Coligan、A.M.,Kru isbeek、D.H.,Margulies、E.M.,Shevach、W Strober、Pub.Greene Publishing A ssociates and Wiley-Interscience(第３章、In Vitro assays for Mouse Lymph ocyte Function;第６章、Cytokines and their cellular receptors;第７章、Im munologic studies in Humans)；Weinberger et al.、Proc.Natl.Acad.Sci.USA 77:6091-6095,1980;Weinberger et al.、Eur.J.Immun.11:405-411,1981;Tak ai et al.、J.Immunol.137:3494-3500、1986;Takai et al.、J.Immunol.140:508 -512,1988。免疫刺激または抑制活性本発明のタンパク質はまた、本明細書に記載のアッセイの活性を制限なく含む、免疫刺激または免疫抑制活性も示し得る。タンパク質は、種々の免疫不全および障害（重症複合免疫不全症(ＳＣＩＤ)を含む）の処置、例えば、Ｔおよび／またはＢリンパ球の成長および増殖の制御（上昇または下降）、並びにＮＫ細胞および他の細胞群の細胞障害活性に影響を与えるのに有用であり得る。これらの免疫不全は、遺伝的なものであるか、またはウイルス（例えば、ＨＩＶ）並びに細菌または真菌感染により引き起こされ得るか、または自己免疫疾患から生じ得る。より具体的には、ウイルス、細菌、真菌または他の感染により引き起こされた感染病（これは、ＨＩＶ、肝炎ウイルス、ヘルペスウイルス、マイコバクテリア、リーシュマニア種、マラリア種、およびカンジダ症などの種々の真菌感染を含む）は、本発明のタンパク質を用いて、処理可能であり得る。当然、この観点から、本発明のタンパク質はまた、免疫系の亢進が一般的に望ましい場合、すなわち、癌の処置において有用であり得る。本発明のタンパク質を用いて処置し得る自己免疫疾患は、例えば、結合組織病、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス、慢性関節リウマチ、自己免疫性肺炎、ギラン・バレー症候群、自己免疫性甲状腺炎、インシュリン依存性糖尿病、重症筋無力症、移植片対宿主疾患および自己免疫性眼疾患を含む。かかる本発明のタンパク質はまた、喘息（特にアレルギー性喘息）または他の呼吸障害などのアレルギー反応および症状の処置に有用であり得る。免疫抑制が望ましい他の症状（例えば、臓器移植を含む）もまた、本発明のタンパク質を用いて処置可能であり得る。本発明のタンパク質を用いて、様々な方法で免疫応答を抑制することが可能である。ダウンレギュレーションは、すでに進行している免疫応答を阻害または遮断する形態であり得るか、または免疫応答の誘導を妨げることに関与し得る。活性化Ｔ細胞の機能は、Ｔ細胞応答を抑制することにより、またはＴ細胞に特異的耐性を誘導することにより、またはその両方により阻害され得る。Ｔ細胞応答の免疫抑制は、一般的に、活発で、非抗原特異的な過程であり、これには、Ｔ細胞が抑制剤に連続的に接触することが必要である。Ｔ細胞における非応答またはアネルギーの誘導に関与する耐性は、一般的に抗原特異的であり、抑制剤への接触を停止した後にも持続する点から、免疫抑制とは相違する。手術時に、耐性剤の非存在下において特異的抗原に再び接触させたときにＴ細胞応答が欠如していることにより耐性を実証することができる。１つ以上の抗原機能（Ｂリンパ球抗原機能（例えば、Ｂ７）を制限なく含む）のダウンレギュレーションまたは阻害、例えば、活性化Ｔ細胞による高レベルのリンホカイン合成阻害は、組織、皮膚および臓器移植の状況および移植片対宿主疾患（ＧＶＨＤ）に有用である。例えば、Ｔ細胞機能の遮断により、組織移植における組織破壊が減少する。典型的には、組織移植において、移植片の拒絶は、Ｔ細胞による異物の認識を介して始まり、ついで、移植片を破壊する免疫応答が起こる。免疫細胞上でＢ７リンパ球抗原と天然リガンドとの相互作用を阻害または遮断する分子を移植前に投与することにより（例えば、Ｂ７−２活性のみを有するペプチドの可溶性モノマー形、または別のＢリンパ球抗原（例えば、Ｂ７− １、Ｂ７−３）または遮断抗体の活性を有するペプチドのモノマー形とのコンジュゲートで）、対応する共刺激シグナルを伝達することなく、分子は免疫細胞上の天然リガンドに結合することができる。このように、Ｂリンパ球抗原機能を遮断すると、Ｔ細胞などの免疫細胞によるサイトカイン合成が妨げられ、従って、免疫抑制剤として作用する。さらに、共刺激の欠如はＴ細胞の免疫性を低下させるに十分であり、これにより概体に耐性が生じる。Ｂリンパ球抗原遮断剤による長期耐性の誘導により、これらの遮断剤を反復投与する必要性がなくなることがある。概体が十分な免疫抑制または耐性を得るために、組合せＢリンパ球抗原機能の遮断が必要なこともある。臓器移植拒絶またはＧＶＨＤを防ぐ特定の遮断剤の効力は、ヒトにおける効力が予見される動物モデルを用いて測定できる。使用できる適当な系の例は、ラットにおける同種心臓移植片、およびマウスにおける異種膵臓島細胞移植片を含み、その両方を用いて、Lenschow et al.、Science 257:789-792(1992)およびTurk a et al.、Proc.Natl.Acad.Sci USA、89:11102-11105(1992)に記載のようにインビボにおけるＣＴＬＡ４Ｉｇ融合タンパク質の免疫抑制効果を調べる。さらに、ＧＶＨＤのネズミモデル（Paul編、Fundamental Immunology、Raven Press、New Y ork、1989、p.846-847参照）を用いて、その疾患の発症時にインビボにおけるＢリンパ球抗原機能の遮断効果を決定することができる。抗原機能遮断はまた、自己免疫疾患の処置に治療的に有用であり得る。数多くの自己免疫疾患は、自己組織に対して反応性のあるＴ細胞の不適当な不活性化の結果であり、ここでは、疾患の病因に関与するサイトカインおよび自己抗体の産生が促進されている。自己反応性Ｔ細胞の活性化を妨げると、疾患の徴候は減少または消失し得る。Ｂリンパ球抗原のレセプター：リガンド相互作用を阻害することによりＴ細胞の共刺激を遮断する試薬を投与すると、Ｔ細胞活性化を阻害し、疾患の経緯に関与し得る自己抗体またはＴ細胞由来サイトカインの産生を防ぐことができる。さらに、遮断剤により、自己反応性Ｔ細胞の抗原特異的耐性を誘導し得、これにより、疾患を長期間軽減することができる。自己免疫疾患の予防または軽減における遮断剤の効力は、数多くのヒト自己免疫疾患の十分に特徴付けられた動物モデルを用いて決定することができる。例は、ネズミ実験的自己免疫性脳炎、ＭＲＬ／ｌｐｒ／ｌｐｒマウスまたはＮＺＢハイブリッドマウスにおける全身性エリテマトーデス、ネズミ自己免疫性コラーゲン関節炎、ＮＯＤマウスおよびＢＢラットにおける糖尿病、およびネズミ実験的重症筋無力症（Paul編、Fundamental Immunology、Raven Press、New York、1989、p.840-856参照）を含む。免疫応答をアップレギュレーションする手段としての、抗原機能（好ましくは、Ｂリンパ球抗原機能）のアップレギュレーションもまた、治療に有用であり得る。免疫応答のアップレギュレーションは、現存する免疫応答を亢進、または最初の免疫応答を発現する形態であり得る。例えば、Ｂリンパ球抗原機能を刺激することにより免疫応答を亢進することは、ウイルス感染の場合には有用であり得る。さらに、インフルエンザ、風邪および脳炎などの全身性ウイルス疾患は、Ｂリンパ球抗原を刺激形で全身投与することにより軽減し得る。また、抗ウイルス免疫応答は、感染患者において、患者からＴ細胞を取り出し、Ｔ細胞をインビトロで、本発明のペプチドを発現しているか、または本発明の刺激形の可溶性ペプチドと共に、ウイルス抗原パルスＡＰＣを用いて共刺激し、インビトロ活性化Ｔ細胞を患者に再び導入することにより亢進し得る。抗ウイルス免疫応答を亢進する別の方法は、患者から感染細胞を単離し、細胞がその表面上にタンパク質を全てまたは一部発現するように、本明細書に記載の本発明のタンパク質をコードする核酸を用いてトランスフェクションさせ、トランスフェクション細胞を患者に再び導入することである。ここで、感染細胞は、共刺激シグナルをＴ細胞に伝達することができるようになり、従って、インビボにおいてＴ細胞を活性化することができる。別の応用において、抗原機能（好ましくはＢリンパ球抗原機能）のアップレギュレーションまたは亢進は、腫瘍免疫の誘導に有益であり得る。少なくとも１つの本発明のペプチドをコードしている核酸でトランスフェクションさせた腫瘍細胞（例えば、肉腫、黒色腫、リンパ腫、白血病、神経芽腫、癌）は、概体における腫瘍特異的耐性を克服するために概体に投与することができる。所望であれば、腫瘍細胞をトランスフェクションさせて、組合せペプチドを発現させることもできる。例えば、患者から得られた腫瘍細胞を、生体外でＢ７−２様活性のみを有するペプチドの発現を指向した発現ベクターを用いて、またはＢ７−１様活性および／またはＢ７−３様活性を有するペプチドと組み合わせてトランスフェクションすることができる。トランスフェクションした腫瘍細胞を患者に戻すと、トランスフェクション細胞の表面上にペプチドが発現される。また、遺伝子療法技術を使用すると、インビボでトランスフェクションした腫瘍細胞を標的とすることができる。腫瘍細胞表面上にＢリンパ球抗原活性を有する本発明のペプチドが存在することにより、必要な共刺激シグナルがＴ細胞にもたらされ、トランスフェクション腫瘍細胞に対してＴ細胞仲介免疫応答が誘導される。さらに、ＭＨＣクラスＩまたはＭＨＣクラスII分子を欠失する、または十分量のＭＨＣクラスＩまたはＭＨＣクラスII分子を再発現できない腫瘍細胞は、ＭＨＣクラスＩα鎖タンパク質およびβ₂ミクログロブリンタンパク質、またはＭＨＣクラスIIα鎖タンパク質およびＭＨＣクラスIIβ鎖タンパク質の全てまたは一部をコードする核酸を用いてトランスフェクションさせ、よって、細胞表面上にＭＨＣクラスＩまたはＭＨＣクラスIIタンパク質を発現させることができる。Ｂリンパ球抗原（例えば、Ｂ７ −１、Ｂ７−２、Ｂ７−３）活性を有するペプチドと組み合わせた適当なクラスＩまたはクラスIIＭＨＣの発現は、トランスフェクション腫瘍細胞に対してＴ細胞仲介免疫応答を誘導する。所望により、不変鎖などのＭＨＣクラスII関連タンパク質の発現を遮断するアンチセンス構築物をコードする遺伝子もまた、Ｂリンパ球抗原活性を有するペプチドをコードするＤＮＡを用いて、共トランスフェクションさせると、腫瘍関連抗原の提示を促進し、腫瘍特異的免疫を誘導することができる。従って、ヒト概体におけるＴ細胞仲介免疫応答の誘導は、概体における腫瘍特異的耐性を克服するに十分であり得る。本発明のタンパク質の活性は、とりわけ、以下の方法により測定し得る：胸腺細胞または脾臓細胞傷害性に関する適当なアッセイには、以下に記載のものを制限なく含む：Current Protocols in Immunology、J.E.Coligan、A.M.,Kru isbeek、D.H.,Margulies、E.M.,Shevach、W Strober編、Pub.Greene Publishing Associates and Wiley-Interscience(第３章、In Vitro assays for Mouse Lym phocyte Function 3.1-3.19;第７章、Immunologic studies in Humans)；Herrma nn et al.、Proc.Natl.Acad.Sci.USA 78:2488-2492,1981;Herrmann et al.、J.I mmunol.128:1968-1974,1982;Handa et al.、J.Immunol.135:1564-1572,1985;Tak ai et al.、J.Immunol.137:3494-3500,1986;Takai et al.、J.Immunol.140:508- 512,1988;Herrmann et al.、Proc.Natl.Acad.Sci.USA 78:2488-2492,1981;Herrm ann et al.、J.Immunol.128:1968-1974,1982;Handa et al.、J.Immunol.135:156 4-1572,1985;Takai et al.、J.Immunol.137:3494-3500,1986;Bowmanet al.、J.V irology 61:1992-1998;Takai et al.、J.Immunol.140:508-512,1988;Bertagnoll i et al.、Cellular Immunology 133:327-341,1991;Brown et al.、J.Immunol.1 53:3079-3092,1994。Ｔ細胞依存性イムノグロブリン応答およびアイソタイプスイッチ（これにより、とりわけ、Ｔ細胞依存性抗体応答を調節し、Ｔｈｌ／Ｔｈ２プロフィールに影響を与えるタンパク質を同定する）のアッセイには、以下に記載のものを制限なく含む：Maliszewski、J.Immunol.144:3028-3033,1990;およびAssays for B cel l function:In vitro antibody production、Mond,J.J.and Brunswick,M、Curre nt Protocols in Imrnunology、J.E.e.a.Coligan編Vol 1 p.3.8.1-3.8.16、John Wiley and Sons、Toronto、1994。混合リンパ球反応（ＭＬＲ）アッセイ（これにより、とりわけ、優先的にＴｈ１およびＣＴＬ応答を引き起こすタンパク質が同定される）は、以下に記載のものを制限なく含む：Current Protocols in Immunology、J.E．Coligan、A.M.Kru isbeek、D.H.Margulies、E.M.Shevach、W Strober、Pub.Greene Publishing Ass ociates and Wiley-Interscience(第３章、In Vitro assays for Mouse Lymphoc yte Function 3.1-3.19;第７章、Immunologic studies in Humans)；Takai et a l.、J.Immunol.137:3494-3500,1986;Takai et al.、J.Immunol.140:508-512,198 8;Bertagnolli et al.、J.Immunol.149:3778-3783,1992。樹状細胞依存性アッセイ（これにより、とりわけ、天然Ｔ細胞を活性化する樹状細胞により発現されるタンパク質が同定される）は、以下に記載のものを制限なく含む：Guery et al.、J.Immunol.134:536-544,1995;Inaba et al.、Journal of Experimental Medicine 173:549-559、1991;Macatonia et al.、Journal of Immunology 154:5071-5079,1995;Porgador et al.、Journal of Experimental Medicine 182:255-260、1995;Nair et al.、Journal of Virology 67:4062-4069 ,1993;Huang et al.、Science 264:961-965,1994;Macatonia et al.、Journal o f Experimental Medicinel 69:1255-1264,1989;Bhardwaj et al.、Journal of C linical Investigation 94:797-807,1994;およびInaba et al.、Journal of Exp erimental Medicine 172:631-640,1990。リンパ球生存／アポトーシス（これにより、とりわけ、スーパー抗原導入後のアポトーシスを防ぐタンパク質およびリンパ球ホメオスタシスを調節するタンパク質が同定される）は、以下に記載のものを制限なく含む：Darzynkiewicz et a l.、Cytometry 13:795-808,1992;Gorczyca et al.、Leukemia 7:659-670,1993;G orczyca et al.、Cancer Research 53:1945-1951,1993;Itoh et al.、Cell 66:2 33-243,1991;Zacharchuk、Journal of Immunology 145:4037-4045,1990;Zamai e t al.、Cytometry 14:891-897,1993;Gorczyca et al.、International Journal of Oncology1:639-648,1992。Ｔ細胞拘束および発達の初期段階に影響を及ぼすタンパク質のアッセイは、以下に記載のものを制限なく含む：Antica et al.、Blood 84:111-117,1994;Fine et al.、Cellular Imminology 155:111-122,1994;Galy et al．、Blood 85:2770 -2778,1995;Toki et al.、Proc.Natl.Acad.Sci.USA 88:7548-7551,1991。造血調節活性本発明のタンパク質は、造血調節に、および結果として、骨髄またはリンパ系細胞障害の処置に有用であり得る。コロニー形成細胞または因子依存性細胞系に関与するほんのわずかな生物活性でも、例えば単独でまたは他のサイトカインと組合せて赤芽球前駆細胞の成長および増殖を支持するといった造血調節に関与していることを示しており、それにより、例えば種々の貧血の処置に、または照射／化学療法と組み合わせて赤芽球前駆体および／または赤芽球細胞の産生を刺激するための使用に；例えば化学療法と組み合わせて結果として起こる骨髄抑制の予防または処置に有用な顆粒球および単球／マクロファージ（すなわち、古典的ＣＳＦ活性）などの骨髄細胞の成長および増殖の支持に；巨核球および結果として血小板の成長および増殖を支持することにより血小板減少症などの種々の血小板障害の予防または処置をなし、一般的に血小板輸血の代替または適当なものとして使用され；および／または、上記造血細胞のいずれかまたは全てに成熟でき、従って、種々の幹細胞障害（再生不良性貧血および発作性夜間ヘモグロビン尿症を制限なく含み、通常移植で処置されるもの）に治療有用性がある造血幹細胞の成長および増殖の支持に、並びに、生体内または生体外（すなわち、骨髄移植または末梢先祖細胞移植（同種または異種）と組合せて）で、正常細胞または遺伝子療法で遺伝子操作した細胞として幹細胞コンパートメントを照射／化学療法後に再集合させるのに有用性を示す。本発明のタンパク質は、とりわけ、以下の方法により測定し得る：種々の造血系の適当な増殖および分化アッセイは、上記に示す。胚幹細胞分化アッセイ（これにより、とりわけ、胚分化造血に影響を及ぼすタンパク質が同定される）は、以下に記載のものを制限なく含む：Johansson et a l.Cellular Biology 15:141-151,1995;Keller et al.、Molecular and Cellular Biology 13:473-486、1993;McClanahan et al.、Blood 81:2903-2915,1993。幹細胞生存および分化アッセイ（これにより、とりわけ、リンパー造血を調節するタンパク質が同定される）は、制限なく、以下に記載のものを含む：Methyl cellulose colony forming assays、Freshney,M.G.、Culture of Hematopoieti c Cells、R.I.Freshney,et al.編Vol p.265-268、Wiley-Liss、Inc.、New York, NY.1994;Hirayama et al.、Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89:5907-5911,1992;Primit ive hematopoietic colony forming cells with high proliferative potential 、McNiece,I.K．and Briddell,R.A.、Culture of Hematopoietic Cells、R.I.Fr eshney,et al.編Vol p.23-39、Wiley-Liss,Inc.、New York,NY.1994;Neben et a l.、Experimental Hematology 22:353-359,1994;Cobblestone area forming cel l assay、Ploemacher,R.E.、Culture of Hematopoietic Cells、R.I.Freshney,e t al.編Vol p.1-21、Wiley-Liss,Inc.、New York,NY.1994;Long term bone marr ow cultures in the presence of stromal cells、Spooncer,E.、Dexter,M.and Allen,T.、Culture of Hematopoietic Cells、R.I.Freshney,et al.編Vol p.163 -179、Wiley-Liss,Inc.、New York,NY.1994;Long term culture initiating cel l assay、Sutherland,H.J.、Culture of Hematopoietic Cells、R.I.Freshney， et al.編Vol p.139-162、Wiley-Liss,Inc.、New York,NY.1994。組織成長活性本発明のタンパク質はまた、骨、軟骨、腱、靭帯および／または神経組織成長または再生、並びに創傷治癒および組織修復および置換に使用する組成物、および火傷、切開および潰瘍の処置において有用性を示し得る。骨が通常形成されない環境下において軟骨および／または骨成長を誘導する本発明のタンパク質は、ヒトおよび他の動物における、骨折および軟骨傷害または不足の治癒に適用される。本発明のタンパク質を使用したかかる製剤は、皮下骨折並びに開放骨折治癒に、および人工関節の固定化促進に予防的に使用し得る。骨形成剤により誘導される新規骨形成は、先天性、外傷誘導、または腫瘍切除誘導頭骸骨傷害治癒に寄与し、また、美容形成外科においても有用である。本発明のタンパク質はまた、歯周病の処置、および他の歯治療過程にも使用し得る。かかる薬剤は、骨形成細胞を引き付けるか、骨形成細胞を刺激するか、または骨形成細胞の先祖の分化を誘導する環境を提供し得る。本発明のタンパク質はまた、骨および／または軟骨修復を刺激することにより、または炎症過程が仲介する炎症または組織破壊（コラゲナーゼ活性、破骨細胞活性等）過程を遮断することにより、骨粗鬆症または変形性関節症の処置に有用であり得る。本発明のタンパク質に起因し得る組織再生活性の別のカテゴリーは、腱／靭帯形成である。腱／靭帯様組織または他の組織形成を、通常かかる組織が形成されない環境下で誘導する本発明のタンパク質は、ヒトおよび他の動物における、腱または靭帯破壊、変形および他の腱または靭帯障害の治癒に適用される。腱／靭帯様組織誘導タンパク質を使用したかかる製剤は、腱または靭帯組織の傷害からの保護、並びに腱または靭帯の骨または他の組織への固定化を亢進、並びに腱または靭帯組織傷害を治癒するために予防的に使用し得る。本発明の組成物により誘導される新規腱／靭帯様組織形成は、先天性、外傷誘導、または他の起源の他の腱または靭帯障害の治癒に寄与し、また、腱または靭帯の接着または修復といった美容形成外科においても有用である。本発明の組成物は、腱または靭帯形成細胞を引き付けるか、腱または靭帯形成細胞の成長を刺激するか、腱または靭帯形成細胞の先祖の分化を誘導するか、または、生体内に戻して組織を修復するために、腱／靭帯細胞または先祖の成長を生体外で誘導する環境を提供し得る。本発明の組成物はまた、腱炎、毛根管症候群および他の腱または靭帯障害の処置に有用であり得る。組成物はまた、当該分野でよく知られているように、適当なマトリックス、および／または担体として金属イオン封印剤を含み得る。本発明のタンパク質はまた、神経細胞増殖並びに神経および脳組織再生、すなわち、中枢および末梢神経系疾患並びにニューロパシー、並びに機械的および外傷的疾患（これは、神経細胞または神経組織の変性、壊死または外傷を含む）の処置に有用であり得る。より具体的には、タンパク質は、例えば末梢神経傷害、末梢ニューロパシーおよび局所的ニューロパシーなどの末梢神経系疾患、およびアルツハイマー、パーキンソン病、ハンティングトン舞踏病、筋萎縮性側索硬化、およびシャイ・ドレーガー症候群などの中枢神経系疾患の処置に使用し得る。本発明により処置し得る別の症状は、脊髄障害、頭部外傷、および卒中などの脳血管障害といった機械的および外傷的障害を含む。化学療法または他の医学療法が引き起こす末梢ニューロパシーもまた、本発明のタンパク質を用いて処置可能である。本発明のタンパク質はまた、圧迫潰瘍、血管障害に関連した潰瘍、手術的および外傷的創傷等を制限なく含む、治癒されていない創傷のより良く早い治癒を促進するのに有用であり得る。本発明のタンパク質は、臓器（例えば、膵臓、肝臓、腸、腎臓、皮膚、内皮を含む）、筋肉（平滑筋、骨格筋または心筋）および血管（血管内皮を含む）組織などの他の組織の生成または再生、またはかかる組織を含む細胞の成長を促進する活性を示し得る。所望の効果の一部は、正常組織が再生するように線状の創傷を阻害または調節することにより得られ得る。本発明のタンパク質はまた、血管新生活性も示し得る。本発明のタンパク質はまた、消化管保護または再生、および肺または肝繊維症の処置、種々の組織における再還流障害、および全身性サイトカイン傷害から引き起こされる症状に有用であり得る。本発明のタンパク質はまた、前駆体組織または細胞から上記の組織の分化を促進または阻害するのに、または上記の組織の成長を阻害するのに有用であり得る。本発明のタンパク質の活性は、とりわけ、以下の方法により測定し得る：組織生成活性のアッセイは、以下に記載のものを制限なく含む：国際特許公開番号ＷＯ95/16035（骨、軟骨、腱）；国際特許公開番号ＷＯ95/05846（神経、ニューロン）；国際特許公開番号ＷＯ91/07491（皮膚、内皮）。創傷治癒活性アッセイは、以下に記載のものを制限なく含む：Winter、Epider mal Wound Healing 、p.71-112(Maibach,HI and Rovee,DT編)、Year Book Medica l Publishers,Inc.、Chicago、これはEaglstein and Mertz,J.、Invest.Dermato l 71:382-84(1978)により修飾されている。アクチビン／インヒビン活性本発明のタンパク質はまた、アクチビンまたはインヒビン関連活性を示し得る。インヒビンは、卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）放出阻害能により特徴付けられ、一方、アクチビンは、卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）放出刺激能により特徴付けられる。従って、本発明のタンパク質は、単独で、またはインヒビンαファミリーの１つとのヘテロダイマーの形で、雌哺乳動物における生殖能力を減少させ、雄哺乳動物における精子形成を減少させるインヒビン効力に基いた避妊薬として有用であり得る。十分量の別のインヒビンを投与することで、これらの哺乳動物において避妊を誘導することができる。また、ホモダイマーまたは他のインヒビン- β基のタンパク質サブユニットとのヘテロダイマーである、本発明のタンパク質は、前下垂体細胞からＦＳＨ放出を刺激するアクチビン分子の能力に基づく、生殖誘導治療薬として有用であり得る。例えば、米国特許4,798,885参照。本発明のタンパク質はまた、ウシ、ヒツジおよびブタなどの家畜動物の生殖行動の期間を延ばすために、性的に未熟な哺乳動物における生殖能力の開始を早めるのに有用であり得る。本発明のタンパク質はまた、とりわけ、以下の方法により測定し得る：アクチビン／インヒビン活性のアッセイは、以下に記載のものを制限なく含む：Vale et al.、Endocrinology 91:562-572,1972;Ling et al.、Nature 321:779 -782,1986;Vale et al.、Nature 321:776-779,1986;Mason et al.、Nature 318: 659-663,1985;Forage et al.、Proc.Natl.Acad.Sci.USA 83:3091-3095,1986。走化性／化学運動性本発明のタンパク質は、例えば、単球、繊維芽細胞、好中球、Ｔ細胞、肥満細胞、好酸球、上皮および／または内皮細胞を含む、哺乳動物細胞の走化性または化学運動性（例えば、ケモカインとして働く）を有し得る。走化性および化学運動性タンパク質は、所望の細胞群を所望の作用部位に移動または引き付けるために使用することができる。走化性または化学運動性タンパク質は、組織の傷および他の外傷の処置、並びに局所的感染の処置に特に利点がある。例えば、リンパ球、単球または好中球を腫瘍または感染部位に引き付けると、腫瘍または感染剤に対する免疫応答が充進され得る。タンパク質またはペプチドが、もし直接的または間接的に、特定の細胞群の指示方向および運動を刺激することができるならば、それはこのような細胞群に対して走化性を有する。好ましくは、タンパク質またはペプチドは直接的に細胞の指示された運動を刺激することができる。特定のタンパク質が細胞群に対して走化性を有するかどうかは、細胞走化性に関する任意の公知のアッセイにおいてかかるタンパク質またはペプチドを使用することにより容易に決定することができる。本発明のタンパク質の活性は、とりわけ、以下の方法により測定し得る：走化性のアッセイ（これにより、走化性を誘導または妨害するタンパク質が同定される）は、膜を通して細胞の移動を誘導するタンパク質の能力、並びに１つの細胞群から別の細胞群への癒着を誘導するタンパク質の能力について測定するアッセイから構成されている。移動および癒着に適当なアッセイは、以下に記載のものを制限なく含む：Current Protocols in Immunology、J.E.Coligan、A.M. ,Kruisbeek、D.H.,Margulies、E.M.,Shevach、W.Strober編、Pub.Greene Publis hing Associates and Wiley-Interscience(第6.12章、Measurement of alpha an d beta Chemokines 6.12.1-6.12.28;Taub et al.J.Clin.Invest.95:1370-1376、 1995;Lind et al.APMIS 103:140-146,1995;Muller et al.Eur.J.Immunol.25:174 4-1748;Gruber et al.J.of Immunol.152:5860-5867,1994;Johnston et al.J.of Immunol.153:1762-1768,1994。止血および血栓活性本発明のタンパク質はまた、止血または血栓活性を示し得る。結果として、かかるタンパク質は、種々の凝固疾患（血友病などの遺伝性疾患を含む）の処置、または外傷、手術または他の原因から生じた傷の処置における凝固および他の血栓症状の亢進に有用であると期待される。本発明のタンパク質はまた、血栓形成の溶解または阻害、およびそれから生じた症状(例えば、心筋梗塞および中枢神経系血管閉塞(例えば、卒中))の処置および予防に有用であり得る。本発明のタンパク質は、とりわけ、以下の方法により測定し得る：止血および血栓活性のアッセイは、以下に記載のものを制限なく含む：Linet et al.、J.Clin.Pharmacol.26:131-140,1986;Burdick et al.、Thrombosis Res. 45:413-419,1987;Humphrey et al.、Fibrinolysis 5:71-79(1991);Schaub、Pros taglandins 35:467-474、1988。レセプター／リガンド活性本発明のタンパク質はまた、レセプター、レセプターリガンドまたはレセプター／リガンド相互作用の阻害剤またはアゴニストとして活性を示し得る。かかるレセプターおよびリガンドの例は、サイトカインレセプターおよびそのリガンド、レセプターキナーゼおよびそのリガンド、レセプターホスファターゼおよびそのリガンド、細胞−細胞相互作用に関与するレセプターおよびそのリガンドを制限なく含む（制限なく、抗原提示、抗原認識および細胞性および体液性免疫応答に関与する、細胞癒着分子（例えば、セレクチン、インテグリンおよびそのリガンド）およびレセプター／リガンド対を含む）。レセプターおよびリガンドはまた、可能性のあるペプチドまたは関連するレセプター／リガンド相互作用の小分子阻害剤をスクリーニングするのに有用である。本発明のタンパク質（レセプターおよびリガンドのフラグメントを制限なく含む）は、それ自体レセプター／リガンド相互作用の阻害剤として有用であり得る。本発明のタンパク質は、とりわけ、以下の方法により測定し得る：レセプター−リガンド活性の適当なアッセイは、以下に記載のものを制限なく含む：Current Protocols in Immunology、J.E.Coligan、A.M.,Kruisbeek、D.H. ,Margulies、E.M.,Shevach、W.Strober編、Pub.Greene Publishing Associates and Wiley-Interscience(第7.28章、Measurement of Cellular Adhesion under static conditions 7.28.1-7.28.22)、Takai et al.、Proc.Natl.Acad.Sci.USA 84:6864-6868,1987;Bierer et al.、J.Exp.Med.168:1145-1156,1988;Rosenstein et al.、J.Exp.Med.169:149-160，1989;Stoltenborg et al.、J.Immunol.Metho ds 175:59-68,1994;Stitt et al.、Cell 80:661-670,1995。抗炎症活性本発明のタンパク質はまた、抗炎症活性を示し得る。抗炎症活性は、炎症応答に関与する細胞に刺激を与えるか、細胞−細胞相互作用（例えば、細胞癒着）を阻害または促進するか、炎症過程に関与する細胞の走化性を阻害または促進するか、細胞遊出を阻害または促進し、炎症応答をより直接的に阻害または促進する他の因子の産生を刺激または抑制することにより得られ得る。このような活性を示すタンパク質を使用すると、感染(例えば、敗血症性ショック、敗血症または全身性炎症応答症候群(ＳＩＲＳ))、虚血−再還流障害、エンドトキシン致死、関節炎、補体仲介超急性拒絶、腎炎、サイトカインまたはケモカイン誘導肺障害、炎症性腸疾患、クローン病またはＴＮＦまたはＩＬ−２などのサイトカインの産生過剰から生じた疾患に関連する炎症を制限なく含む、慢性または急性状態を含む炎症症状を処置することができる。本発明のタンパク質はまた、抗原性基質または物質に対するアナフィキラシーおよび過敏症の処置に有用であり得る。腫瘍阻害活性腫瘍の免疫学的処置または予防で上記した活性に加えて、本発明のタンパク質は他の抗腫瘍活性を示し得る。タンパク質は、直接的または間接的に（例えば、ＡＤＣＣを介して）腫瘍成長を阻害し得る。タンパク質は、腫瘍組織または腫瘍前駆体組織に作用するか、腫瘍成長に必要な組織形成を阻害するか（例えば、血管形成を阻害することにより）、腫瘍成長を阻害する他の因子、薬剤または細胞型を産生することにより、または腫瘍成長を促進する因子、薬剤または細胞型を抑制、削除または阻害することにより、腫瘍阻害活性を示し得る。他の活性本発明のタンパク質はまた、以下の付加的な活性または効果を１つ以上示し得る：細菌、ウイルス、真菌および他の寄生虫を制限なく含む、感染性病原体の成長、感染または機能の阻害または殺滅；身長、体重、髪の色、目の色、皮膚、脂肪対肉比または他の組織色素を制限なく含む体の特徴、または臓器または体部分サイズまたは型（例えば、胸部増大または減少、骨の形または型の変化）に対する影響（抑制または亢進）；バイオリズムまたは心（caricadic）周期またはリズムに対する影響；雄または雌概体の生殖能力に対する影響；食用脂肪、脂質、タンパク質、炭水化物、ビタミン、ミネラル、補因子または他の栄養因子または成分の代謝、異化、同化、プロセシング、利用、貯蔵または削除に対する影響；食欲、性欲、ストレス、認知（認知障害を含む）、抑鬱（鬱病を含む）および暴力行動を制限なく含む、行動特性に対する影響；鎮痛効果または他の疼痛軽減効果；造血系以外の系における胚幹細胞の分化および成長の促進；ホルモンまたは内分泌活性；酵素の場合、酵素の欠乏の修正、および欠乏性関連疾患の処置；過増殖疾患（例えば、乾癬）の処置；イムノグロブリン様活性（例えば、抗原または補体と結合する能力）；および、ワクチン組成物中で抗原として作用し、かかるタンパク質またはかかるタンパク質と交差反応する他の物質または実体に対して免疫応答を引き起こす能力。 DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION Human protein having transmembrane domain and DNA encoding the same Technical field The present invention provides a human protein having a transmembrane domain, and encodes the same. DNA. The protein of the present invention may be used as a pharmaceutical or for the protein. It can be used as an antigen for producing an antibody. The human cDNA of the present invention It can be used as a probe for gene diagnosis or a gene source for gene therapy. Ma In addition, it is used as a gene source for mass-producing the protein encoded by the cDNA. Can be. Background art Membrane proteins include signal receptors, ion channels, transporters, etc. It plays an important role in transporting substances and transmitting information through cell membranes. For example, receptors for various cytokines such as sodium ion and potassium ion Ion channels for on / chlorine ions, etc. There are known sporters, many of which have already been cloned. You. Abnormalities in these membrane proteins have been linked to a number of previously unknown diseases. I knew it was there. For example, twelve membranes are responsible for cystic fibrosis. A gene for a membrane protein with a transmembrane domain has been identified [Rommens, J.M. et al. , Science 245: 1059-1065 (1989)]. Also, some membrane proteins are viruses Has been found to act as a receptor in infecting cells. ,example For example, HIV-1 is a membrane protein on the T cell membrane, CD4 antigen and seven transmembrane domains. Has been shown to infect cells via the membrane protein Fugin, which has . et al., Science 272: 872-877 (1996)]. Therefore, new membrane proteins are found If it can be released, it is expected to lead to the elucidation of the causes of many diseases, and it encodes membrane proteins It is desired that a new gene be isolated. Conventionally, membrane proteins have been difficult to purify. Many have been isolated by A common method is to use cDNA libraries in animals. After introducing cDNA into cells and expressing cDNA, express target membrane protein on membrane Cells are analyzed by immunological techniques using antibodies or changes in membrane permeability. This is so-called expression cloning, which is detected by a technique. But this way, Only genes with known membrane proteins can be cloned. Generally, a membrane protein has a hydrophobic transmembrane domain inside the protein, After being synthesized by the some, this domain remains in the phospholipid membrane and is trapped in the membrane. You. Therefore, the entire base sequence of the full-length cDNA is determined and the cDNA is coded. The presence of a highly hydrophobic transmembrane domain in the amino acid sequence of the loaded protein If so, the cDNA is considered to encode a membrane protein. An object of the present invention is to provide a novel human protein having a transmembrane domain, and the protein Is to provide a DNA encoding The present inventors have conducted intensive studies and found that transmembrane domains were selected from human full-length cDNA banks. The present invention was completed by cloning a cDNA having an in. That is, the present invention SEQ ID NO: 1 or SEQ ID NO: 2 which is a human protein having a transmembrane domain A protein comprising any of the amino acid sequences represented by SEQ ID NOs: 4 to 25; provide. The present invention also relates to a DNA encoding the above protein, for example, SEQ ID NO: 26 And a cDNA comprising any one of the nucleotide sequences represented by SEQ ID NO: 50. The protein of the present invention can be isolated from human organs, cell lines, etc. A method for preparing a peptide by chemical synthesis based on the amino acid sequence, or the method of the present invention. A method for producing recombinant DNA technology using DNA encoding a transmembrane domain Although it can be obtained by any method, a method obtained by recombinant DNA technology is preferable. Used. For example, for in vitro transcription from a vector having the cDNA of the present invention. Therefore, RNA is prepared, and in vitro translation is performed using the RNA as a template. Protein can be expressed in vitro. Also, the translation region can be appropriately expressed by a known method. If it is recombined into a vector, it is encoded by Escherichia coli, Bacillus subtilis, yeast, animal cells, etc. In large quantities. When the protein of the present invention is produced by a microorganism such as E. coli, Origin, promoter, ribosome binding site, cDNA cloning Translation region of the cDNA of the present invention in an expression vector having a site, a terminator, etc. A recombinant expression vector was prepared, and host cells were transformed with the expression vector. If the obtained transformant is cultured, the protein encoded by the cDNA Can be mass-produced in microorganisms. At this time, start before and after any translation area A protein fragment containing any region if expressed by adding codons and stop codons Can be obtained. Alternatively, it may be expressed as a fusion protein with another protein. Can also be. By cleaving the fusion protein with an appropriate protease, the cD Only the protein portion encoded by NA can be obtained. When the protein of the present invention is produced in animal cells, the translation region of the cDNA is Animal cells having a promoter, a splicing region, a poly (A) addition site, etc. Once the protein of the present invention is recombined into an expression vector for It can be produced on the cell membrane surface as white matter. The protein of the present invention has a sequence from SEQ ID NO: 1 to SEQ ID NO: 2 or SEQ ID NO: 4 Peptide fragment containing any partial amino acid sequence of the amino acid sequence represented by No. 25 Fragments (5 amino acid residues or more) are also included. These peptide fragments create antibodies Can be used as an antigen. In addition, a signal distribution in the protein of the present invention. Those with rows have the cell surface in the form of the mature protein after the signal sequence has been removed. Come out. Therefore, these mature proteins fall within the scope of the proteins of the present invention. The N-terminal amino acid sequence of the mature protein can be determined by a signal sequence cleavage site determination method [Japanese Unexamined Patent Publication No. 187100]. Also some membrane proteins Is processed to be secreted at the cell surface. Became such a secretory type Proteins and peptides are also included in the category of the protein of the present invention. In the amino acid sequence If a sugar chain binding site is present, a protein with a sugar chain added when expressed in appropriate animal cells Quality is obtained. Therefore, proteins or peptides to which such sugar chains are added Also fall into the category of the proteins of the present invention. The DNA of the present invention includes all DNAs encoding the above proteins. The DNA can be prepared by chemical synthesis or cDNA cloning. Can be obtained. The cDNA of the present invention can be cloned, for example, from a human cell-derived cDNA library. Can be cDNA is poly (A) extracted from human cells⁺Cast RNA Synthesize as a type. Human cells that have been removed from the human body by surgery, etc. Or cultured cells. The cDNA was prepared by the Okayama-Berg method [Okayama, H .; and Be rg, P., Mol. Cell. Biol. 2: 161-170 (1982)], Gubler-Hoffman method [Gubler, U.S.A. a nd Hoffman, J., Gene 25: 263-269 (1983)]. However, in order to obtain a full-length clone efficiently, the key as described in the example is used. Capping method [Kato, S .; et al., Gene 163: 193-196 (1995)]. desirable. The primary selection of a cDNA encoding a human protein having a transmembrane domain comprises c Partial base sequence determination of a cDNA clone arbitrarily selected from a DNA library, Determination of the amino acid sequence encoded by the nucleotide sequence, within the obtained N-terminal amino acid sequence region Is performed by confirming the presence or absence of a hydrophobic portion. Then all bases by sequencing A second selection is performed by determining the sequence and expressing the protein by in vitro translation. Departure Confirmation that light cDNA encodes a protein having a secretory signal sequence Is a signal sequence detection method [Yokoyama-Kobayashi, M .; et al., Gene 163: 193-1 96 (1995)]. That is, c encoding the N-terminus of the target protein The DNA fragment was fused with the cDNA encoding the urokinase protease domain. After cloning, it is expressed in COS cells, and urokinase activity is detected in the cell culture. If it is issued, the part encoded by the inserted cDNA fragment It means that it is functioning as a column. On the other hand, urokinase activity is detected in the medium If not, it means that the N-terminus remains in the membrane. The cDNA of the present invention has a base sequence represented by SEQ ID NO: 26 to SEQ ID NO: 50. Or any of the nucleotide sequences represented by SEQ ID NO: 51 to SEQ ID NO: 75. It is a feature. Each clone number (HP number), cDNA clone Cell, total number of bases of cDNA, amino acid residue of encoded protein The numbers are summarized in Table 1. In addition, the nucleotide sequence of any one of SEQ ID NO: 51 to SEQ ID NO: 75 Using the oligonucleotide probe synthesized based on the human Screen cDNA libraries from cell lines and human tissues As a result, the same clone as the cDNA of the present invention can be easily obtained. Generally, polymorphism due to individual differences is frequently observed in human genes. Therefore, SEQ ID NO: 5 1 to SEQ ID NO: 75, addition or deletion of one or more nucleotides and CDNAs substituted with other nucleotides are also included in the scope of the present invention. I have. Similarly, the addition or deletion of one or more amino acids caused by these changes And / or a protein in which substitution by another amino acid is also performed. Has the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 2 or SEQ ID NO: 4 to SEQ ID NO: 25 As long as it has the activity of each protein, it falls within the scope of the present invention. The cDNA of the present invention has a base sequence represented by SEQ ID NO: 26 to SEQ ID NO: 50. Or any partial base sequence of the base sequence represented by SEQ ID NO: 51 to SEQ ID NO: 75 A cDNA fragment containing a sequence (10 bp or more) is also included. In addition, the sense strand and A DNA fragment consisting of a chain is also included in this category. These DNA fragments are It can be used as a probe for child diagnosis. BRIEF DESCRIPTION OF THE FIGURES FIG. 1 is a diagram showing the structure of a secretory signal sequence detection vector pSSD3. Figure 2: Hydrophobic / hydrophilic profile of the protein encoded by clone HP00442 FIG. Figure 3: The hydrophobic / hydrophilic profile of the protein encoded by clone HP00804. FIG. Figure 4: Northern blot hybridization results for clone HP00804. It is a figure showing a result. Figure 5: The hydrophobic / hydrophilic profile of the protein encoded by clone HP01098 FIG. Figure 6: The hydrophobic / hydrophilic profile of the protein encoded by clone HP01148 FIG. Figure 7: Northern blot hybridization results for clone HP01148. It is a figure showing a result. Figure 8: The hydrophobic / hydrophilic profile of the protein encoded by clone HP01293 FIG. Figure 9: Hydrophobic / hydrophilic profile of the protein encoded by clone HP10013 FIG. Figure 10: Hydrophobic / hydrophilic profile of the protein encoded by clone HP10034 FIG. Figure 11: Hydrophobic / hydrophilic profile of the protein encoded by clone HP10050 FIG. Figure 12: Hydrophobic / hydrophilic profile of the protein encoded by clone HP10071 FIG. Figure 13: The hydrophobic / hydrophilic profile of the protein encoded by clone HP10076 FIG. Figure 14: The hydrophobic / hydrophilic profile of the protein encoded by clone HP10085 FIG. Figure 15: The hydrophobic / hydrophilic profile of the protein encoded by clone HP10122 FIG. Figure 16: The hydrophobic / hydrophilic profile of the protein encoded by clone HP10136 FIG. Figure 17: The hydrophobic / hydrophilic profile of the protein encoded by clone HP10175 FIG. Figure 18: The hydrophobic / hydrophilic profile of the protein encoded by clone HP10179 FIG. Figure 19: Hydrophobic / hydrophilic profile of the protein encoded by clone HP10196 FIG. Figure 20: The hydrophobic / hydrophilic profile of the protein encoded by clone HP10235 FIG. Figure 21: The hydrophobic / hydrophilic profile of the protein encoded by clone HP10297 FIG. Figure 22: The hydrophobic / hydrophilic profile of the protein encoded by clone HP10299 FIG. Figure 23: Hydrophobic / hydrophilic profile of the protein encoded by clone HP10301 FIG. Figure 24: The hydrophobic / hydrophilic profile of the protein encoded by clone HP10302 FIG. Figure 25: The hydrophobic / hydrophilic profile of the protein encoded by clone HP10304 FIG. Figure 26: The hydrophobic / hydrophilic profile of the protein encoded by clone HP10305 FIG. Figure 27: The hydrophobic / hydrophilic profile of the protein encoded by clone HP10306 FIG. Figure 28: The hydrophobic / hydrophilic profile of the protein encoded by clone HP10328 FIG. Preferred method for carrying out the invention Example Next, the present invention will be specifically described by way of examples, but the present invention is not limited to these examples. Not something. The basic operations and enzyme reactions for DNA recombination are described in the literature. [“Molecular Cloning. A Laboratory Manual”, Cold Spring Harbor L aboratory, 1989]. Unless otherwise specified, restriction enzymes and various modifying enzymes The product made by Heho Shuzo was used. Includes buffer composition and reaction conditions for each enzyme reaction Followed the instructions. cDNA synthesis is described in the literature [Kato, S .; et al., Gene 150: 242-2 50 (1994)]. (1) Poly (A)⁺Preparation of RNA As human cells for extracting mRNA, fibrosarcoma cell line HT-1080 (ATCC CCL 121), epidermoid carcinoma cell line KB (ATCC CRL 17) ), Histiocyte lymphoma cell line U937 (ATCC CRL 1593), osteosarcoma Cell line U-2 OS (ATCC HTB 96), leukocytes isolated from peripheral blood, Stomach cancer tissue and liver removed by surgery were used. Culture of each cell line Was performed according to a conventional method. About 1 g of human cells was homogenized in 20 ml of a 5.5 M guanidium thiocyanate solution. After genizing, the literature [Okayama, H .; et al., “Methods in Enzymology” Vol .164, Academic Press, 1987]. This is 20mM Washed with Tris-HCl buffer (pH 7.6), 0.5 M NaCl, 1 mM EDTA Apply to an oligo dT cellulose column and apply poly (A) according to the above-mentioned literature.⁺RNA obtained . (2) Preparation of cDNA library Poly (A) above⁺Dissolve 10 μg of RNA in 100 mM Tris-HCl buffer (pH 8) And add 1 unit of RNase-free bacterial alkaline phosphatase. And reacted at 37 ° C. for 1 hour. After extracting the reaction solution with phenol, ethanol precipitation was performed. Perform the pelleting and add 50 mM sodium acetate (pH 6), 1 mM EDTA, 0.1% Dissolve in 2-mercaptoethanol, 0.01% Triton X-100 solution Was. This includes tobacco acid pyrophosphatase (Epicenter Technologies, Inc.) And 1 unit was added, and reacted at 37 ° C. for 1 hour in a total volume of 100 μl. Reaction solution After ethanol extraction, ethanol precipitation is performed, and the pellet is dissolved in water and uncapped. Treated poly (A)⁺An RNA solution was obtained. Decapped poly (A)⁺RNA, DNA-RNA chimeric oligonucleotide Otide (5'-dG-dG-dG-dG-dA-dA-dT-dT-dC-dG -DA-GG-A-3 ') 3 nmol in 50 mM Tris-HCl buffer (pH 7.5), 0.5 mM ATP, 5 mM MgCl_Two, 10 mM 2-mercaptoethanol, 25% Dissolve in aqueous polyethylene glycol solution and add 50 units of T4 RNA ligase The reaction was carried out at 20 ° C. for 12 hours in a total volume of 30 μl. After extracting the reaction solution with phenol, The pellet was dissolved in water, and the chimeric oligo-capped poly ( A)⁺RNA was obtained. The vector pKA1 (JP-A-4-117292) developed by the present inventors was used. After digestion with KpnI, about 60 dT tails were added by terminal transferase. this Was digested with EcoRV to remove one side of the dT tail, Used. Chimera oligo-capped poly (A) prepared above⁺Transfer 6 μg of RNA to vector -After annealing with 1.2 µg of primer, 50 mM Tris-HCl buffer (pH 8. 3), 75 mM KCl, 3 mM MgCl_Two, 10 mM dithiothreitol, 1.25 mM Dissolve in dNTP (dATP + dCTP + dGTP + dTTP) solution and reverse transcription Add 200 units of enzyme (manufactured by GIBCO-BRL). Allowed to react for hours. After extracting the reaction solution with phenol, ethanol precipitation was performed. Was added to 50 mM Tris-HCl buffer (pH 7.5), 100 mM NaCl, 10 mM Mg. Cl_TwoAnd dissolved in 1 mM dithiothreitol solution. 100 units of EcoRI Was added and reacted at 37 ° C. for 1 hour in a total volume of 20 μl. After extracting the reaction solution with phenol, After ethanol precipitation, the pellet was washed with 20 mM Tris-HCl buffer (pH 7.5), 100 mM KCl, 4 mM MgCl_Two, 10 mM (NH_Four)_TwoSO_Four, 50μg / ml cow It was dissolved in a serum albumin solution. Add 60 units of E. coli DNA ligase to this At 16 ° C. for 16 hours. 2 μl of 2 mM dNTP and E. coli DNA Add 4 units of remerase I and 0.1 units of Escherichia coli RNase H, and add The reaction was carried out at 22 ° C. for 1 hour. Next, Escherichia coli DH12S (GIBCO-BRL) was used using the cDNA synthesis reaction solution. Was carried out. Transformation is performed by electroporation. Was. A part of the transformant was used as a 2 × YT agar medium containing 100 μg / ml ampicillin. The cells were sown on the plate and cultured overnight at 37 ° C. Pick up any colonies that formed on the agar and 100μ 2 ml of 2 × YT medium containing g / ml ampicillin was inoculated and cultured at 37 ° C. overnight. . Centrifuge the culture and prepare plasmid DNA from the cells by alkaline lysis did. Plasmid DNA was double digested with EcoRI and NotI, followed by 0.8% Galose gel electrophoresis was performed to determine the size of the cDNA insert. Also, M13 universal ply labeled with a fluorescent dye using the resulting plasmid as a template And Taq polymerase (Applied Biosystems kit) Shi After performing a sequencing reaction, a fluorescent DNA sequencer (Applied Biosystem Muzu) to determine the nucleotide sequence of about 400 bp at the 5 'end of the cDNA. Array The data was filed as a homoprotein cDNA bank database. (3) Selection of cDNA encoding a protein having a transmembrane domain The nucleotide sequence registered in the Homoprotein cDNA Bank can be converted to a three-frame amino acid sequence. Open reading frame (ORF) starting from the start codon after converting to an acid sequence ). Next, a secretory protein is added to the N-terminal of the portion encoded by the ORF. Those having a unique signal sequence were selected. For these clones Using the deletion method with Exonuclease III, from both 5 'and 3' directions. After sequencing, the entire nucleotide sequence was determined. The protein encoded by the ORF For quality, the method of Kyte-Doolittle [Kyte, J & Doolittle, R.F., J. Mol. Biol . 157: 105-132 (1982)] to determine the hydrophobic / hydrophilic profile, The presence or absence of the area was checked. Transmembrane domain in the amino acid sequence of the encoding protein If there is a hydrophobic region that seems to be Was. (4) Construction of secretion signal detection vector pSSD3 Has SV40 promoter and urokinase protease domain cDNA PSSD1 [Yokoyama-Kobayashi, M .; et al., Gene 163: 193-196 (1995)] 1 μg was digested with 5 units of BglII and 5 units of EcoRV. Then CIP processing After dephosphorylation of the 5 'end by agarose gel electrophoresis. A 4.2 kbp DNA fragment was cut out of the gel and purified. Two oligo DNA linkers L1 (5'-GATCCCGGGTCACGTG GGAT-3 ') and L2 (5'-ATCCCACGTGACCCGG-3') Synthesized and phosphorylated by T4 polynucleotide kinase. Anneal both Thereafter, the cut piece of pSSD1 prepared above was ligated with T4 DNA ligase, E. coli JM109 was transformed. Preparation of plasmid pSSD3 from transformants Then, by determining the nucleotide sequence of the linker insertion part, the target recombinant is identified. I accepted. FIG. 1 shows the structure of the obtained plasmid. This plasmid vector is Three blunt-end generating restriction enzyme sites at the recloning site, SmaI, PmaCI , It has EcoRV. Since these cleavage sites are arranged at intervals of 7 bp, If you select one of these, you can combine it with the three frames of the cDNA fragment to be inserted. A vector expressing the fusion protein can be constructed. (5) Confirmation of function of secretory signal sequence For the secretory protein candidate clone obtained as a result of the above step, the N-terminal hydrophobic region That the region functions as a secretory signal sequence, according to the method described in the literature [Yokoyama-Koba yashi, M. et al., Gene 163: 193-196 (1995)]. First target Plasmid containing a cDNA encoding a secretory signal sequence Cleavage was made at the appropriate restriction site downstream of the possible site. If this limit If the enzyme site has a protruding end, use Klenow treatment or mung bean nuclease. It was made blunt by treatment. Furthermore, digestion with HindIII was carried out to obtain SV40. D containing the promoter and cDNA encoding a secretory signal sequence downstream thereof NA fragments were isolated by agarose gel electrophoresis. This fragment was converted into pSSD3 Of HindIII and Urokinase coding frame Insert between the restriction enzyme site and the secretory signal sequence Construction of a Vector for Expressing a Kinase Protease Domain Fusion Protein Was. E. coli having a fusion protein expression vector (host: JM109) was 100 μg / After culturing at 37 ° C. for 2 hours in 2 ml of 2 × YT medium containing 2 ml of ampicillin, -Phage M13KO7 (50 µl) was added, and the mixture was cultured at 37 ° C overnight. To centrifuge Therefore, single-stranded phage particles were separated from the separated supernatant by polyethylene glycol precipitation. Got a child. 100 μl of 1 mM Tris-0.1 mM EDTA, pH 8 (TE) Suspended in water. As controls, pSSD3 and urokinase full-length cDN were also used. A containing pKA1-UPA [Yokoyama-Kobayashi, M .; et al., Gene 1 63: 193-196 (1995)]. Was. Monkey kidney-derived cultured cells COS7 were modified with Dulbecco's containing 10% fetal bovine serum. 5% CO in Eagle (DMEM) medium_TwoThe cells were cultured at 37 ° C in the presence. 1 × 10^Five COS7 cells were plated in a 6-well plate (Nunc, 3 cm in diameter) and 5% C O_TwoThe cells were cultured at 37 ° C. for 22 hours in the presence. After removing the medium, the cell surface is The surface was washed, and DMEM (TDME) containing 50 mM Tris-HCl (pH 7.5) was further added. M) and washed again. 1 μl of a single-stranded phage suspension was added to the cells, and DMEM medium 0 .6 ml, 3 μl of TRANSFECTAM ™ (IBF) was added. 5% CO_TwoThe cells were cultured at 37 ° C. for 3 hours in the presence. After removing the sample solution, TDME Wash the cell surface with M and add 2 ml of DMEM containing 10% fetal bovine serum per well. Well, 5% CO_TwoThe cells were cultured at 37 ° C for 2 days in the presence. 2% bovine fibrinogen (Miles), 0.5% agarose, 1 mM potassium chloride 10 units of human per 10 ml of 50 mM phosphate buffer (pH 7.4) containing Lucium Add Rombin (Mochida Pharmaceutical), solidify in a 9 cm diameter plate, and add fibrin Plates were prepared. Culture supernatant of transfected COS7 cells 10μ 1 was placed on a fibrin plate and incubated at 37 ° C. for 15 hours. Got The diameter of the dissolved circle was used as an index of urokinase activity. If the cDNA fragment is If it encodes an amino acid sequence that functions as a null sequence, the fusion protein Quality is secreted and forms a lytic circle due to its urokinase activity. Therefore, If no rounding occurs, the fusion protein remains trapped in the membrane The cDNA fragment is considered to encode a transmembrane domain. (6) Protein synthesis by in vitro translation Using a plasmid vector having the cDNA of the present invention, T_NT rabbit reticulated red In vitro transcription / translation was performed with a blood cell lysate kit (Promega). This At the time of [³⁵[S] methionine was added and the expression product was labeled with a radioisotope . All reactions were performed according to the protocol attached to the kit. Plasmid 2 μg to T_N12.5 μl of T rabbit reticulocyte lysate, buffer (supplied with kit) 0 0.5 μl, 2 μl of amino acid mixture (without methionine), [³⁵S] Methoni (Amersham) 2 μl (0.37 MBq / μl), T7 RNA polymerase In a total reaction volume of 25 μl containing 0.5 μl of RNasin The reaction was performed for 0 minutes. Add 3 μl of the reaction solution to SDS sampling buffer (125 mM Squirrel HCl buffer, pH 6.8, 120 mM 2-mercaptoethanol, 2% SDS Solution, 0.025% bromophenol blue, 20% glycerol). After heating at 95 ° C for 3 minutes, SDS-polyacrylamide gel It was subjected to electrophoresis. Perform autoradiography to determine the molecular weight of the translation product Was. (7) Northern blot hybridization Northern blot hybridization to examine expression patterns in human tissues Session. Poly (A) isolated from human tissues⁺Blot the RNA Was purchased from Clonetech. CDNA fragment from target clone Cleavage with appropriate restriction enzymes, isolation by agarose gel electrophoresis, and random With the primer labeling kit (Takara Shuzo), [³²P] dCTP (Amarshi JAM). For hybridization, use the solution provided with the blot membrane. Was performed according to the new protocol. (8) Clone example <HP00442> (SEQ ID NOs: 1, 26, 51) Clos obtained from human fibrosarcoma cell line HT-1080 cDNA library The total nucleotide sequence of the cDNA insert of HP00442 was determined to be 81b. p, the 618 bp ORF and the 287 bp 3 'untranslated region. The structure had ORF encodes a protein consisting of 205 amino acid residues And there were five transmembrane domains. Figure 2 shows the results obtained using the Kyte-Doolittle method. 1 shows the hydrophobicity / hydrophilicity profile of the present protein. In vitro translation results No clear band of the translation product was observed, and a smear band was observed at the high molecular weight position. Was. When a protein database was searched using the amino acid sequence of this protein, Proteolipid protein PPA1 of baker's yeast proton ATPase (SWI SS-PROT accession number P23968). Table 2 Proteolipi of human protein (HP) of the present invention and baker's yeast proton ATPase 1 shows a comparison of the amino acid sequences of human protein PPA1 (PL). − Indicates a gap , * Indicate the same amino acid residue as the protein of the present invention,. Is an amino acid similar to the protein of the present invention. Each represents an acid residue. Both have 56.8% phase over the entire region except for the N-terminus. Had the same sex. When GenBank was searched using the base sequence of this cDNA, T having 90% or more homology and including from the start codon (eg, For example, accession number H87379) was present. I can't predict. Proteolipid protein of baker's yeast proton ATPase is used for cell growth [Apperson, M. et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 16] 8: 574-579 (1990)]. Therefore, the homologue of the protein of the present invention is also Disease that is thought to be essential for the growth of It can be used for diagnosis and treatment. <HP00804> (SEQ ID NO: 2, 27, 52) Of clone HP00804 obtained from human white blood cell cDNA library When the entire nucleotide sequence of the cDNA insert was determined, a 132 bp 5 'untranslated region was determined. With a structure consisting of an ORF of 1116 bp and a 3 'untranslated region of 576 bp Was. The ORF encodes a protein consisting of 371 amino acid residues, There was a transmembrane domain. FIG. 3 shows the protein of the present invention obtained by the method of Kyte-Doolittle. Shows a hydrophobic / hydrophilic profile. In vitro translation results in a clear translation product No band was observed. Northern blot hybridization using the cDNA fragment of the present invention. When the expression pattern in the tissue was examined, as shown in FIG. It was shown to be expressed in all tissues. Therefore, the protein of the present invention It seems to be a keeping protein. When a protein database was searched using the amino acid sequence of this protein, Rat NMDA receptor glutamate binding subunit (Genbank Accessory) (Session number S61973). Table 3 shows the human protein of the present invention. Quality (HP) and rat NMDA receptor glutamate binding subunit (RN) 1 shows a comparison of the amino acid sequences of -Indicates a gap, and * indicates the same amino acid as the protein of the present invention. Noic acid residues are represented by. Represents an amino acid residue similar to that of the protein of the present invention. This sub The unit consists of 516 amino acid residues, from the glutamine at position 68 to 342 The region up to the arginine corresponds to the C-terminal 270 amino acid residues of the protein of the present invention. It had 92.6% homology. However, no homology was found in the N-terminal region Was. The N-terminal of the protein of the present invention is rich in proline, tyrosine and glycine. Characteristic repetitive sequences were observed. When GenBank was searched using the base sequence of this cDNA, T having a homology of 90% or more (for example, accession number W25) 936), which were shorter than the present cDNA and included from the start codon. Nothing could be found. The rat NMDA receptor glutamate binding subunit is specifically located in the brain. One of the subunits of the existing NMDA receptor complex [Ku mar, K.N. et al., Nature 354: 70-73 (1991)]. High homology with the protein of the present invention Despite the sex, the N-terminal sequence and the expression pattern in the tissue are different, Both seem to have different functions. The protein of the present invention comprises a channel And seven transporter-specific transmembrane domains, It seems to play a role as a tunnel or transporter. The protein of the present invention Is a housekeeping protein that is essential for cells, It can be used for diagnosis and treatment of diseases caused by abnormalities. <HP01098> (SEQ ID NOs: 3, 28, 53) CDN of clone HP01098 obtained from human gastric cancer cDNA library The total nucleotide sequence of the A insert was determined to be 61 bp of the 5 'untranslated region, 54 It had a structure consisting of a 0 bp ORF and a 475 bp 3 'untranslated region. OR F encodes a protein consisting of 179 amino acid residues and has a single transmembrane domain. Inn was present. FIG. 5 shows the hydrophobicity / parent of this protein determined by the Kyte-Doolittle method. 3 shows an aqueous profile. Molecular weight expected from ORF as a result of in vitro translation A 20 kDa translation product was generated, which approximately matched 20,625. When a protein database was searched using the amino acid sequence of this protein, Canine microsomal signal peptidase 18 kDa subunit (SWISS- PROT accession number P21378). Therefore, The cDNA of the present invention comprises a microsomal signal peptidase 18 kDa subunit. It encodes a human homolog of the same. When GenBank was searched using the nucleotide sequence of this cDNA, EST Those having 90% or more homology (for example, accession number T60549) ) Was present, but there were many unclear sequences, and the same ORF as this cDNA could not be found. Was. The canine microsomal signal peptidase 18 kDa subunit is As one of the subunits of the signal peptidase complex [Shelness, G.S. & Blobel, G., J. Biol. Chem. 265: 9512-9519 (1990)] . Signal peptidases signal signals when secreted proteins are secreted in the endoplasmic reticulum. An enzyme that cuts a row. Therefore, the cDNA of the present invention can be used for production of the present protein, It can be used for diagnosis and treatment of diseases caused by abnormalities of the present protein. <HP01148> (SEQ ID NOs: 4, 29, 54) CDN of clone HP01148 obtained from human liver cDNA library When the entire nucleotide sequence of the A insert was determined, a 101 bp 5 'untranslated region, 1 It had a structure consisting of a 044 bp ORF and a 446 bp 3 'untranslated region. ORF encodes a protein consisting of 347 amino acid residues and has Of the transmembrane domains. Fig. 6 shows the protein obtained by the Kyte-Doolittle method. 1 shows a hydrophobic / hydrophilic profile of N-terminal 178 amino acid residues of this protein The HindIII-PvuII fragment containing the encoding cDNA portion was cloned into pSSD3 Expression vector inserted into HindIII-PmaCI site of COS7 cells However, urokinase was not secreted, indicating that the protein remained in the membrane. Indicated. Therefore, this protein seems to be a type II membrane protein. In vitro translation As a result, 41 kDa almost coincides with the molecular weight of 38,101 predicted from the ORF. Translation product was produced. Northern blot hybridization using the cDNA fragment of the present invention. When the expression pattern in the tissue was examined, as shown in FIG. Expression was observed. It was also shown that it was slightly expressed in the liver. When a protein database was searched using the amino acid sequence of this protein, Similarity to WC1 antigen (SWISS-PROT accession number P30205) Had. Table 4 shows the human protein (HP) and bovine WC1 antigen (WC) of the present invention. 1 shows a comparison of the amino acid sequences of -Indicates a gap, and * indicates the same amino acid as the protein of the present invention. Noic acid residues are represented by. Represents an amino acid residue similar to that of the protein of the present invention. Both are 3 It had 8% homology. When GenBank was searched using the base sequence of this cDNA, T having a homology of 90% or more (for example, accession number H91) 200) was present, but since it is a partial sequence, it encodes the same protein as the protein of the present invention. Cannot be determined. Bovine WC1 antigen has been found as a membrane antigen specifically expressed on γδ T cells. [Wijngaard, P.L.J. et al., J. Immunol. 149: 3273-3277 (1992)]. Similarity Indicates a scavenger receptor cysteine rich (SRCR) Domains, and other macrophage scavenger receptors [Ma tsumoto, A. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87: 9133-9137 (1990)] Vesicle differentiation antigen CD6 [Aruffo, A. et al., J. Exp. Med. 174: 949-952 (1991)] Exists as a repeating sequence. This protein must be specifically expressed in the pancreas Suggests a close relationship with pancreatic function, similar to other SRCR families, It is thought to work as a receptor. <HP01293> (SEQ ID NOs: 5, 30, 55) CDN of clone HP01293 obtained from human liver cDNA library When the entire nucleotide sequence of the A insert was determined, 89 bp of the 5 'untranslated region, 16 It had a structure consisting of a 65 bp ORF and a 134 bp 3 'untranslated region. O RF encodes a protein consisting of 554 amino acid residues and has 12 transmembrane sites. There was a domain. Figure 8 shows the hydrophobicity of this protein determined by the Kyte-Doolittle method. / Hydrophilic profile. In vitro translation shows clear bands No smear band was observed at the high molecular weight position. When a protein database was searched using the amino acid sequence of this protein, Rat cation transporter (Genbank Accession No. X7885) It had similarity with 5). Table 5 shows the human protein (HP) of the present invention and rat 2 shows a comparison of the amino acid sequences of on-transporters (RN). − Indicates a gap, * Indicates the same amino acid residue as the protein of the present invention; Is a protein of the present invention and similar amino acids Each represents a residue. Both have 78.1% homology over the entire region. Was. GenBank was searched using the nucleotide sequence of this cDNA. None of the offspring and human ESTs with more than 90% homology were found . Rat cation transporter is a membrane protein involved in drug excretion in the kidney [Grundemann, D. et al., Nature 372: 549-552 (1994)] ]. Therefore, the homologue of the protein of the present invention has a similar function. It can be used for diagnosis and treatment of diseases caused by this protein abnormality. it can. In addition, since this protein is thought to be involved in drug excretion, The expressed cells can be used as a tool to design these drugs. Wear. Furthermore, since this protein is mainly expressed in liver and kidney, If one has affinity for quality, drug delivery to these tissues Applicable to the family system. <HP10013> (SEQ ID NOs: 6, 31, 56) Clone HP10 obtained from human epidermoid carcinoma cell line KB cDNA library When the entire base sequence of the cDNA insert of No. 013 was determined, a 96 bp 5 'non- A structure consisting of a translation region, an ORF of 1053 bp, and a 3 'untranslated region of 884 bp Had. ORF encodes a protein consisting of 350 amino acid residues, It had a signal sequence at the end and one transmembrane domain inside. FIG. Shows the hydrophobic / hydrophilic profile of this protein determined by the Kyte-Doolittle method. You. H containing the cDNA portion encoding the N-terminal 65 amino acid residues of the protein The indIII-EcoO65I (mung bean nuclease treated) fragment was converted to pSSD Expression vector inserted into the HindIII-EcoRV site of No. 3 was introduced into COS7 cells. As a result, urokinase activity was detected in the medium, and the N-terminus It was shown to be working. Therefore, this protein is considered to be a type I membrane protein. Will be As a result of the in vitro translation, the molecular weight estimated from the ORF was 39,008. A nearly identical translation product of 39 kDa was produced. A protein database was searched using the amino acid sequence of this protein. There was no known protein having any properties. In addition, using the base sequence of this cDNA, Gen When a bank was searched, ESTs having a homology of 90% or more ( For example, the accession number H07998) was present, but none of these cDNAs Nothing was found from the start codon. <HP10034> (SEQ ID NO: 7, 32, 57) Clos obtained from human fibrosarcoma cell line HT-1080 cDNA library The total nucleotide sequence of the cDNA insert of HP10034 was determined to be 175 bp 5 'untranslated region, 630 bp ORF, 106 bp 3' untranslated region Had the following structure. ORF encodes a protein consisting of 209 amino acid residues And there were four transmembrane domains. Figure 10 shows the Kyte-Doolittle method 2 shows the hydrophobicity / hydrophilicity profile of the present protein determined in the above. In vitro translation results , 21 kDa translation product almost matching the predicted molecular weight of 22,432 from the ORF Things have formed. When a protein database was searched using the amino acid sequence of this protein, Human tumor-associated antigen L6 (SWISS-PROT accession number P30408) And similarities. Table 6 shows that the human protein (HP) of the present invention and human tumor-associated 2 shows a comparison of the amino acid sequences of the original L6 (L6). -Indicates a gap and * indicates the protein of the present invention. Amino acid residues identical to white matter Represents a similar amino acid residue to the protein of the present invention, respectively. Represent. Both had 31.8% homology. GenBank was searched using the nucleotide sequence of this cDNA. None of the offspring and human ESTs with more than 90% homology were found . Human tumor-associated antigen L6 is a membrane antigen T expressed in large amounts on the cell surface of human tumors. One of the M4 superfamily proteins [Marken, J.S. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89: 3503-3507 (1992)]. These membrane antigens Since it is specifically expressed in cancer cells, if an antibody against it is prepared, And can be used as a carrier for drug delivery. In addition, these membrane antigens Transfected cells expressing a membrane antigen can be used for detection of the corresponding ligand it can. <HP10050> (SEQ ID NOs: 8, 33, 58) Clos obtained from human fibrosarcoma cell line HT-1080 cDNA library The total nucleotide sequence of the cDNA insert of HP10050 was determined to be 9 bp. 5 'untranslated region, 492 bp ORF, 100 bp 3' untranslated region Had a structure. ORF encodes a protein consisting of 163 amino acid residues. And there was one transmembrane domain. Figure 11 shows the results obtained using the Kyte-Doolittle method. 1 shows the hydrophobicity / hydrophilicity profile of the present protein. As a result of in vitro translation, O A 23 kDa translation product, which almost matches the molecular weight of 18,364 predicted from RF, Generated. A protein database was searched using the amino acid sequence of this protein. There was no known protein having any properties. In addition, using the base sequence of this cDNA, Gen When a bank was searched, ESTs having a homology of 90% or more ( For example, accession number H03117) was present, but there were many unclear sequences, The same ORF as this cDNA could not be found. <HP10071> (SEQ ID NOs: 9, 34, 59) CDN of clone HP10071 obtained from human gastric cancer cDNA library The total nucleotide sequence of the A insert was determined, and the 5 'untranslated region of 46 bp, 27 It had a structure consisting of a 9 bp ORF and a 69 bp 3 'untranslated region. ORF Encodes a protein consisting of 92 amino acid residues and has two transmembrane domains. There was. FIG. 12 shows the hydrophobicity / hydrophilicity of this protein determined by the Kyte-Doolittle method. 2 shows a gender profile. As a result of in vitro translation, the expected molecular weight 1 A 12 kDa translation product was generated, which almost matched 0.0094. A protein database was searched using the amino acid sequence of this protein. There was no known protein having any properties. In addition, using the base sequence of this cDNA, Gen When a bank was searched, ESTs having a homology of 90% or more ( For example, accession number R97442) was present, but there were many unclear sequences, The same ORF as this cDNA could not be found. <HP10076> (SEQ ID NOs: 10, 35, 60) Clone H obtained from human lymphoma cell line U937 cDNA library When the entire nucleotide sequence of the cDNA insert of P10076 was determined, it was 81 bp. It is composed of a 5 'untranslated region, a 519 bp ORF, and a 132 bp 3' untranslated region. Had a structure. ORF encodes a protein consisting of 172 amino acid residues. There were two transmembrane domains. Figure 13 shows the results obtained using the Kyte-Doolittle method. 1 shows the hydrophobic / hydrophilic profile of the present protein. N-terminal 167 amino acids of this protein No HindIII-EcoO65I (macro) containing the cDNA portion encoding the acid residue Ng bean nuclease treatment) The fragment was treated with HindIII-EcoRV part of pSSD3. Was inserted into COS7 cells, but secretion of urokinase was No protein was observed, indicating that the protein remained on the membrane. In vitro translation As a result, the translation of 24 kDa almost corresponds to the molecular weight of 18,450 predicted from the ORF. The product formed. When a protein database was searched using the amino acid sequence of this protein, Baker's yeast virtual protein 23.1 kDa (SWISS-PROT accession number P 34222). Table 7 shows the human protein (HP) and the enzyme of the present invention. 2 shows a comparison of the amino acid sequence of the mother hypothetical protein 23.1 kDa (SC). − * Indicates the same amino acid residue as the protein of the present invention,. Is similar to the protein of the present invention. Each represents a amino acid residue. Both have 47.47 amino acid residues in the C-terminal region. It had 5% homology. When GenBank was searched using the base sequence of this cDNA, T having a homology of 90% or more (for example, accession number T74). 847) was present, but there were many unclear sequences, and the same ORF as this cDNA was found. I didn't. <HP10085> (SEQ ID NOS: 11, 36, 61) Clone H obtained from human lymphoma cell line U937 cDNA library The total nucleotide sequence of the cDNA insert of P10085 was determined to be 150 bp. A 5 'untranslated region, a 450 bp ORF, and a 97 bp 3' untranslated region. Had a structure. ORF encodes a protein consisting of 149 amino acid residues. , There was one transmembrane domain at the N-terminus. Figure 14 shows Kyte-Doolittle 1 shows the hydrophobicity / hydrophilicity profile of the present protein determined by the method. N-terminal 5 of this protein HindIII-EcoRI containing cDNA portion encoding 7 amino acid residues (Klenow treatment) Fragment was inserted into HindIII-EcoRV site of pSSD3 The expression vector was introduced into COS7 cells, but no secretion of urokinase was observed. This protein was shown to remain on the membrane. Therefore, this protein is a type II membrane protein Seems to be quality. As a result of in vitro translation, a molecular weight of 17 307, a 20 kDa translation product was generated. When a protein database was searched using the amino acid sequence of this protein, Human early activation antigen CD69 (SWISS-PROT accession number Q071) 08). Table 8 shows the human protein (HP) of the present invention and the early human phase. 3 shows a comparison of the amino acid sequences of the activation antigens CD69 (CD). − Indicates a gap, * Represents the same amino acid residue as the protein of the present invention; Is similar to the protein of the present invention Represents a group. Both have a 36.6% phase in the C-terminal 112 amino acid residue region. Had the same sex. When GenBank was searched using the base sequence of this cDNA, T having a homology of 90% or more (for example, accession number H11) 808), but there were many unclear sequences, and the same ORF as this cDNA was found. I didn't. Human early activation antigen CD69 appears on cell surface when stimulating lymphocytes It is a glycoprotein and one of the C-type lectin superfamily proteins [Hamann J. et al., J. Immunol. 150: 4920-4927 (1993)]. These membrane antigens have certain characteristics. Is specifically expressed in certain cells. It can be used as a carrier for drug delivery and drug delivery. Also, these membrane antigens Cells into which the gene has been expressed to express the membrane antigen can respond to detection of the corresponding ligand, etc. Can be used. <HP10122> (SEQ ID NOs: 12, 37, 62) CDN of clone HP10122 obtained from human gastric cancer cDNA library The total nucleotide sequence of the A insert was determined, and the 138 bp 5 'untranslated region, 5 It had a structure consisting of a 67 bp ORF and a 481 bp 3 'untranslated region. O RF encodes a protein consisting of 188 amino acid residues and has two transmembrane domains. There was a main. Figure 15 shows the hydrophobicity of this protein determined by the Kyte-Doolittle method. / Hydrophilic profile. As expected from ORF as a result of in vitro translation, A translation product of 22 kDa was generated, which almost coincided with the amount of 21,175. A protein database was searched using the amino acid sequence of this protein. There was no known protein having any properties. In addition, using the base sequence of this cDNA, Gen When a bank was searched, ESTs having a homology of 90% or more ( For example, accession number T80360) was present, but there were many unclear sequences, The same ORF as this cDNA could not be found. <HP10136> (SEQ ID NOs: 13, 38, 63) Clone H obtained from human lymphoma cell line U937 cDNA library The total nucleotide sequence of the cDNA insert of P10136 was determined, It consists of a 5 'untranslated region, a 648 bp ORF, and a 680 bp 3' untranslated region. Had a structure. ORF encodes a protein consisting of 215 amino acid residues. , There was one transmembrane domain at the C-terminus. Figure 16 shows Kyte-Doolittle 1 shows the hydrophobicity / hydrophilicity profile of the present protein determined by the method. In vitro translation As a result, a translation of 28 kDa almost coincides with the molecular weight of 24,740 predicted from the ORF. The product formed. When a protein database was searched using the amino acid sequence of this protein, Baker's yeast protein transport protein SLY2 (SWISS-PROT accession number P 22214). Table 9 shows the human protein (HP) of the present invention and 2 shows a comparison of amino acid sequences of yeast protein transport protein SLY2 (SC). -Is gi * Indicates the same amino acid residue as the protein of the present invention,. Are the proteins and classes of the present invention. Each represents a similar amino acid residue. Both have 36.1% homology over the entire region Had. When GenBank was searched using the base sequence of this cDNA, T having a homology of 90% or more (for example, accession number R80). 136) was present, but all were shorter than the present cDNA and included from the start codon. Nothing could be found. Baker's yeast protein transport protein SLY2 transports proteins from the endoplasmic reticulum to the Golgi apparatus And is known to be involved in cell cycle control [ Dascher, C.A. et al., Mol. Cell. Biol. 11: 872-885 (1991)]. Therefore, the book The cDNA of the present invention can be used for production of the present protein, diagnosis of diseases caused by abnormalities of the present protein, Can be used for treatment. <HP10175> (SEQ ID NOs: 14, 39, 64) CDN of clone HP10175 obtained from human gastric cancer cDNA library When the entire base sequence of the A insert was determined, a 5 'untranslated region of 173 bp, 3 It had a structure consisting of a 39 bp ORF and a 462 bp 3 'untranslated region. O RF encodes a protein consisting of 112 amino acid residues and has four transmembrane domains. There was a main. Figure 17 shows the hydrophobicity of this protein determined by the Kyte-Doolittle method. / Hydrophilic profile. As expected from ORF as a result of in vitro translation, A 13 kDa translation product was generated, which almost coincided with the amount of 11,564. A protein database was searched using the amino acid sequence of this protein. There was no known protein having any properties. In addition, using the base sequence of this cDNA, Gen When a bank was searched, ESTs having a homology of 90% or more ( For example, accession number W52852) was present, but there were many unclear sequences, The same ORF as this cDNA could not be found. <HP10179> (SEQ ID NOS: 15, 40, 65) Clone HP10 obtained from human epidermoid carcinoma cell line KB cDNA library When the entire nucleotide sequence of the cDNA insert of 179 was determined, 121 bp of 5 ' A structure consisting of an untranslated region, a 345 bp ORF, and a 459 bp 3 'untranslated region Had. ORF encodes a protein consisting of 114 amino acid residues, There were several transmembrane domains. Figure 18 shows a book obtained by the Kyte-Doolittle method. 1 shows a hydrophobic / hydrophilic profile of a protein. ORF as a result of in vitro translation A 14 kDa translation product was generated, which almost matches the predicted molecular weight of 12,078. Was. A protein database was searched using the amino acid sequence of this protein. There was no known protein having any properties. However, the cDNA clone HP10 of the present invention 175 had similarity to the protein encoded by it. In Table 10, HP10179 Amino acid sequence of protein encoded by HP10175 and protein encoded by HP10175 The following shows a comparison. -Indicates a gap, * indicates the same amino acid residue as the protein of the present invention,. Represents an amino acid residue similar to that of the protein of the present invention. Both are spread across all areas Had a homology of 80.8%.When GenBank was searched using the nucleotide sequence of this cDNA, EST Among them, those having a homology of 90% or more (for example, accession number N559) 91) was present, but there were many unclear sequences, and the same ORF as this cDNA was found. Did not. <HP10196> (SEQ ID NOs: 16, 41, 66) Clos obtained from human fibrosarcoma cell line HT-1080 cDNA library The total nucleotide sequence of the cDNA insert of HP10196 was determined to be 9 bp. 5 'untranslated region, 984 bp ORF, 122 bp 3' untranslated region Had a structure. ORF encodes a protein consisting of 327 amino acid residues. Thus, there was one transmembrane domain at the N-terminus. FIG. 19 shows Kyte-Doolittle 1 shows the hydrophobicity / hydrophilicity profile of the protein determined by the method. N-terminal of this protein HindIII-Bgl containing cDNA portion encoding 162 amino acid residues II (Klenow-treated) fragment inserted into HindIII-EcoRV site of pSSD3 The expressed expression vector was introduced into COS7 cells, but urokinase was secreted. In other words, it was shown that this protein remained on the membrane. Therefore, this protein is a type II membrane It seems to be a protein. Molecular weight expected from ORF as a result of in vitro translation A translation product of 37 kDa was generated which was almost identical to 36,163. A protein database was searched using the amino acid sequence of this protein. There were no known proteins with similarities. In addition, using the base sequence of this cDNA, When enBank was searched, ESTs with 90% or more homology (For example, accession number T17026), Nothing shorter than A and containing anything from the start codon was found. <HP10235> (SEQ ID NOs: 17, 42, 67) Clos obtained from human fibrosarcoma cell line HT-1080 cDNA library The total nucleotide sequence of the cDNA insert of HP10235 was determined to be 5 bp. 5 'untranslated region, a 1122 bp ORF, and a 594 bp 3' untranslated region. The structure had ORF encodes a protein consisting of 373 amino acid residues And 11 transmembrane domains were present. Figure 20 shows the Kyte-Doolittle method 2 shows the hydrophobicity / hydrophilicity profile of the present protein determined in the above. In vitro translation results No clear band was observed, and a smear band was observed at a high molecular weight position. When a protein database was searched using the amino acid sequence of this protein, Similar to human nucleolar protein HNP36 (EMBL Accession No. X86681) Had the nature. Table 11 shows that the human protein (HP) of the present invention and the human nucleolar protein H 3 shows a comparison of the amino acid sequence of NP36 (NP). -Indicates a gap, and * indicates the present invention. Amino acid residues identical to the protein Represents the amino acid residues similar to those of the protein of the present invention. Represent. Both had 45.3% homology over the entire region. When GenBank was searched using the base sequence of this cDNA, T having a homology of 90% or more (for example, accession number R57) 372) was present, but because it is a partial sequence, it codes for the same protein as the protein of the present invention. Cannot be determined. Human nucleolar protein HNP36 plays a role in cell growth and proliferation As a gene product [Williams, J.B. & Lanahan, A.A., Bioch em.Biophys.Res.Commun. 213: 325-333 (1995)]. Therefore, its analogs The protein of the present invention is a housekeeping protein essential for cell growth and proliferation. It is thought to be white matter and is used to diagnose and treat diseases caused by abnormalities in this protein be able to. <HP10297> (SEQ ID NOs: 18, 43, 68) CDN of clone HP10297 obtained from human gastric cancer cDNA library The total nucleotide sequence of the A insert was determined to be 62 bp of the 5 'untranslated region, 55 It had a structure consisting of a 2 bp ORF and an 890 bp 3 'untranslated region. OR F encodes a protein consisting of 183 amino acid residues and has a signal sequence at the N-terminus. The rows also had one transmembrane domain inside. Therefore, this protein is I It appears to be a type membrane protein. FIG. 21 shows the protein obtained by the Kyte-Doolittle method. 1 shows a quality hydrophobic / hydrophilic profile. As a result of in vitro translation, ORF A translation product of 24 kDa was generated, which almost matched the expected molecular weight of 20,574. A protein database was searched using the amino acid sequence of this protein. There was no known protein having any properties. In addition, using the base sequence of this cDNA, Gen When a bank was searched, ESTs having a homology of 90% or more ( For example, accession number R47823) was present, but there were many unclear sequences, The same ORF as this cDNA could not be found. <HP10299> (SEQ ID NO: 19, 44, 69) CDN of clone HP10299 obtained from human gastric cancer cDNA library The entire base sequence of the A insert was determined, and the 5 'untranslated region of 92 bp, 35 It had a structure consisting of a 1 bp ORF and an 89 bp 3 'untranslated region. ORF Encodes a protein consisting of 116 amino acid residues and has a single transmembrane Domain existed. FIG. 22 shows the sparseness of this protein determined by the Kyte-Doolittle method. 1 shows an aqueous / hydrophilic profile. Encodes the N-terminal 65 amino acid residues of this protein HindIII-VspI (Klenow-treated) fragment containing the cDNA portion The expression vector inserted into the HindIII-PmaCI site of SSD3 was Urokinase was not secreted, and the protein remained in the membrane. Rukoto has been shown. Therefore, this protein seems to be a type II membrane protein. Inn As a result of in vitro translation, the molecular weight, which is approximately equal to the predicted molecular weight of 12,498 from the ORF, is 1 A 3 kDa translation product was generated. When a protein database was searched using the amino acid sequence of this protein, Baker's yeast virtual protein 16.5 kDa (SWISS-PROT accession number P 42834). Table 12 shows the human protein (HP) of the present invention and FIG. 4 shows a comparison of the amino acid sequences of the baker's yeast hypothetical protein 16.5 kDa (SC). − Is Gap, * indicates the same amino acid residue as the protein of the present invention,. Is the protein of the present invention. Each represents a similar amino acid residue. Both are 5 in the region of the C-terminal 66 amino acid residues. It had a homology of 3.0%. When GenBank was searched using the base sequence of this cDNA, T having a homology of 90% or more (for example, accession number R27). 748) was present, but there were many unclear sequences, and the same ORF as this cDNA was found. I didn't. <HP10301> (SEQ ID NOs: 20, 45, 70) Clone HP10 obtained from human epidermoid carcinoma cell line KB cDNA library When the entire nucleotide sequence of the cDNA insert 301 was determined, 91 bp of the 5 'non- It has a structure consisting of a translated region, a 459 bp ORF, and a 112 bp 3 'untranslated region. Was. ORF encodes a protein consisting of 152 amino acid residues, There were several transmembrane domains. FIG. 23 shows the present protein obtained by the Kyte-Doolittle method. 1 shows a hydrophobic / hydrophilic profile of white matter. In vitro translation results from ORF An 18 kDa translation product was generated, which approximately matched the expected molecular weight of 16,516. . A protein database was searched using the amino acid sequence of this protein. There was no known protein having any properties. In addition, using the base sequence of this cDNA, Gen When a bank was searched, ESTs having a homology of 90% or more ( For example, accession number N28828) was present, but there were many unclear sequences, The same ORF as this cDNA could not be found. <HP10302> (SEQ ID NOs: 21, 46, 71) CDN of clone HP10302 obtained from human liver cDNA library The entire base sequence of the A insert was determined, and the 133 bp 5 'untranslated region, 1 It had a structure consisting of a 680 bp ORF and a 560 bp 3 'untranslated region. The ORF encodes a protein consisting of 559 amino acid residues and has 12 transmembrane sites. Domain existed. FIG. 24 shows the sparseness of this protein determined by the Kyte-Doolittle method. 1 shows an aqueous / hydrophilic profile. In vitro translation shows clear bands No smear band was observed at the high molecular weight position. A protein database was searched using the amino acid sequence of this protein. There was no known protein having any properties. In addition, using the base sequence of this cDNA, Gen When a bank was searched, ESTs having a homology of 90% or more ( For example, accession number N72434) was present, Nothing was found from the start codon. <HP10304> (SEQ ID NOS: 22, 47, 72) Clone H obtained from human osteosarcoma cell line U-2 OS cDNA library When the entire nucleotide sequence of the cDNA insert of P10304 was determined, A structure consisting of a 5 'untranslated region, a 993 bp ORF and a 313 bp 3' untranslated region Had a structure. ORF encodes a protein consisting of 330 amino acid residues , A signal sequence at the N-terminus and one transmembrane domain inside. Therefore, it is considered that the present protein is a type I membrane protein. FIG. 25 shows Kyte-Doolittle 2 shows the hydrophobicity / hydrophilicity profile of the present protein determined by the method described above. In vitro translation As a result, a 36 kDa molecular weight almost matching the molecular weight of 36,840 predicted from the ORF A translation product was generated. A protein database was searched using the amino acid sequence of this protein. There is no known protein having any properties. In addition, using the base sequence of this cDNA, Gen When a bank was searched, ESTs having a homology of 90% or more ( For example, the accession number N26840) was present, but the same OR F could not be found. <HP10305> (SEQ ID NOS: 23, 48, 73) Clone H obtained from human osteosarcoma cell line U-2 OS cDNA library When the entire nucleotide sequence of the cDNA insert of P10305 was determined, it was 109 bp. 5 'untranslated region, a 327 bp ORF, and a 457 bp 3' untranslated region Had a structure. The ORF encodes a protein consisting of 108 amino acid residues. And there was one transmembrane domain. Figure 26 shows the results obtained using the Kyte-Doolittle method. 1 shows the hydrophobicity / hydrophilicity profile of the present protein. N-terminal 162 a of the protein HindIII-ApaI (man) containing the cDNA portion encoding the amino acid residue The fragment was treated with HindIII-PmaCI site of pSSD3. Was introduced into COS7 cells, but secretion of urokinase was observed. It was shown that the protein remained on the membrane. Therefore, this protein is I It appears to be a type I membrane protein. In vitro translation results, expected from ORF A translation product of 15 kDa was generated, which almost coincided with the molecular weight of 12,199. A protein database was searched using the amino acid sequence of this protein. There was no known protein having any properties. In addition, using the base sequence of this cDNA, Gen When a bank was searched, ESTs having a homology of 90% or more ( For example, accession number H02768) was present, but there were many unclear sequences, The same ORF as this cDNA could not be found. <HP10306> (SEQ ID NOS: 24, 49, 74) Clone H obtained from human osteosarcoma cell line U-2 OS cDNA library The total nucleotide sequence of the cDNA insert of P10306 was determined to be 229 bp. 5 'untranslated region, 306 bp ORF, 155 bp 3' untranslated region Had a structure. ORF encodes a protein consisting of 101 amino acid residues. And there were two transmembrane domains. Figure 27 shows the results obtained using the Kyte-Doolittle method. 1 shows the hydrophobicity / hydrophilicity profile of the present protein. As a result of in vitro translation, O A 14 kDa translation product which almost matches the molecular weight of 12,029 predicted from RF Generated. A protein database was searched using the amino acid sequence of this protein. There was no known protein having any properties. In addition, using the base sequence of this cDNA, Gen When a bank was searched, ESTs with 90% or more homology (Eg, accession number H44711), but many unclear sequences The same ORF as this cDNA could not be found. <HP10328> (SEQ ID NOS: 25, 50, 75) Clone HP10 obtained from human epidermoid carcinoma cell line KB cDNA library When the entire base sequence of the 328 cDNA insert was determined, 117 bp of 5 ' Structure comprising an untranslated region, an ORF of 1119 bp, and a 3 'untranslated region of 950 bp Had. ORF encodes a protein consisting of 372 amino acid residues, There was one transmembrane domain. Figure 28 shows the results obtained by the Kyte-Doolittle method. 1 shows the hydrophobic / hydrophilic profile of the protein. N-terminal 129 amino acids of this protein The HindIII-PmaCI fragment containing the cDNA portion encoding the acid residue was An expression vector inserted into the HindIII-SmaI site of SSD3 was transformed into COS7 cells. Urokinase is not secreted, and the protein remains on the membrane It was shown that. Therefore, this protein seems to be a type II membrane protein. Imbi As a result of the Toro translation, the molecular weight almost matches the predicted molecular weight of 42,514 41 A translation product of kDa was produced. When a protein database was searched using the amino acid sequence of this protein, Drosophila neuronal secretory signal protein (GenBank accession number U4 1449). Table 13 shows the human protein (HP) of the present invention and 2 shows a comparison of the amino acid sequences of Drosophila neuronal secretory signal protein (DM). − Indicates a gap, * indicates the same amino acid residue as the protein of the present invention,. Is the protein of the present invention And similar amino acid residues, respectively. Both are 3 residues at 202 amino acid residues in the middle region. It had 8.6% homology. When GenBank was searched using the base sequence of this cDNA, T having a homology of 90% or more (for example, accession number R75) 815) was present, but all were shorter than the present cDNA and included from the start codon. Nothing could be found. The present invention relates to a human protein having a transmembrane domain, and a c protein encoding the same. DNA is provided. Since all of the proteins of the present invention exist in the cell membrane, It is considered a protein that controls proliferation and differentiation. Therefore, the protein of the present invention , As a pharmaceutical, or as an antigen for producing an antibody against the protein Can be. The cDNA of the present invention can be used as a probe for gene diagnosis or for gene therapy. It can be used as a gene source. In addition, by using the DNA, the protein White matter can be expressed in large quantities. By introducing these membrane protein genes, Cells expressing a large amount of are used to detect the corresponding ligand, It can be applied to training. In addition to the activities and uses described above, polynucleotides and proteins of the invention Is defined as the use or biological activity defined below (for the assays described herein). One or more). The use described for the protein of the invention or Is determined by administration or use of such a protein, or Administration or use of a polynucleotide encoding (eg, gene therapy or D) (In a vector suitable for the introduction of NA). Research use and usefulness The polynucleotide provided by the present invention can be used for various purposes in the research field. Can be used. This polynucleotide can be used for analysis, qualitative or therapeutic use. The corresponding protein (structurally Or at a particular stage of tissue differentiation or development, or in a disease state ) As markers for selectively expressed tissues; molecular weight markers on Southern gels As chromosome markers to identify chromosomes or locate related gene loci Or as a tag (if labeled); to identify potential genetic disorders For comparison with the patient's endogenous DNA sequence; As a probe to find relevant DNA sequences; gene fingers As a source of information for deriving PCR primers for printing; other novel polynucleotides As a probe to "pull" known sequences in the process of finding nucleotides; Select and select oligomers for attachment to a "gene chip" or other support To manufacture (this also includes examining expression patterns); DNA immunization techniques To produce an anti-protein antibody using the method; and to produce an anti-DNA antibody Or can be used as an antigen to elicit other immune responses You. A protein to which a polynucleotide binds or can bind to another protein (Eg, in a receptor-ligand interaction) The oligonucleotides can be used in an interaction trap assay (eg, Gyuris et al., Cell 75: 791-803 (1993)) encodes another protein that binds Identify polynucleotides or identify inhibitors of binding interactions . The protein provided by the present invention can also be used in assays to Determine biological activity in a panel of multiplex proteins for put screening To produce antibodies or elicit other immune responses; biological fluids For quantitatively measuring protein (or its receptor) levels in the body As reagents (including labeling reagents) in assays made for Quality (either structurally or at a particular stage of tissue differentiation or development, or disease As a marker for a tissue that is selectively expressed (in the disease state); and However, it can be used to isolate correlated receptors or ligands . When a protein is or can bind to another protein (eg, Identify other proteins that bind (eg, in receptor-ligand interactions) Alternatively, inhibitors of the binding interaction can be identified. In addition, these bonded phases With proteins involved in interactions, peptides or small molecules in binding interactions Inhibitors or agonists can be screened. Some or all of these research uses may be reagent gray products that are commercially available as research products. In kit or kit form. Uses for the above-listed applications are well known by those skilled in the art. Such person References disclosing the method are "Molecular Cloning: A Laboratory Manual", Edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Sambrook, J., E.F.Fritsch and T. Maniatis eds., 1989, and `` Methods in Enzymology: Guide to Molecular Cloni ng Techniques ", Academic Press, Berger, S.L. and A.R.Kimmel ed., 1987 Including without limit. Use as a nutritional supplement The polynucleotides and proteins of the present invention may also be used as a nutritional source or supplement. Can be used. Such use is intended as a protein or amino acid supplement. Use as a carbon source, use as a nitrogen source, and as a carbohydrate source Including without limitation the use of In such a case, the protein or polynucleotide of the present invention Otides can be added to the diet of a particular organism or can be added to isolated solid or liquid formulations. And can be administered, for example, in the form of powders, pills, solutions, suspensions, or capsules. it can. In the case of a microorganism, the protein or polynucleotide of the present invention is a microorganism or microorganism. Can be added in or on the cultured medium. Cytokines and cell proliferation / differentiation activity The proteins of the present invention may be cytokines, cell proliferation (either induced or inhibited). ) Or cell differentiation (either induction or inhibition) activity, or specific Can induce the production of other cytokines. All known sites Many protein factors that have been discovered to date, including Active in the cell-dependent cell proliferation assay, It is useful for confirming the activity of Caine. The activity of the protein of the present invention is 32D, DA2, DA1G, T10, B9, B9 / 11, BaF3, MC9 / G, M + ( Pre-B M +), 2E8, RB5, DA1, 123, T1165, HT2, CT A number of cell lines, including, without limitation, LL2, TF-1, Mo7e and CMK As determined by any one of the factor-dependent cell proliferation assays. The activity of the protein of the invention can be measured, inter alia, by the following method: T cell or thymocyte proliferation assays are not limited to those described below. Including: Current Protocols in Immunology, J.E.Coligan, A.M.Kruisbeek, D.H.M argulies, E.M.Shevach, W Strober, Pub.Greene Publishing Associates and W iley-Interscience (Chapter 3, In Vitro assays for Mouse Lymphocyte Function 3.1-3.19; Chapter 7, Immunologic studies in Humans); Takai et al., J. Immunol .137: 3494-3500,1986; Bertagnolli et al., J. Immunol. 145: 1706-1712,1990; Ber tagnolli et al., Cellular Immunology 133: 327-341,1991; Bertagnolli, et al. J. Immunol. 149: 3778-3783, 1992; Bowman et al. , J. Immunol. 152: 1756-1761,1 994. Cytokine production and / or increase of spleen cells, lymph node cells or thymocytes Proliferation assays include, but are not limited to, those listed below: Polyclonal T cell stimulaion, Kruisbeek, A.M. and Shevac, E.M., Current Protocols in Immun ology.J.E.e.a. Edited by Coligan, Vol 1 p.3.12.1-3.12.14, John Wiley and Sons, Tor onto. 1994; and Measurement of mouse and human interleukinγ, Schreiber , R.D., Current Protocols in Immunology, edited by J.E.e.a.Coligan, Vol. 1 p.6.8.1-6 .8.8, John Wiley and Sons, Fronto. 1994. Hematopoietic and lymphopoietic cell proliferation and differentiation assays are described below. Including without limitation: Measurement of Human and Murine Interleukin 2 and Interl eukin 4, Bottomly, K., Davis, L.S. and Lipsky, P.E., Current Protocols in I mmunology, edited by J.E.e.a.Coligan, Vol. 1 p.6.3.1-6.3.12, John Wiley and Sons, T. ronto. 1991; deVries et al., J. Exp. Med. 173: 1205-11211, 1991; Moreau et al., N. ature 336: 690-692, 1988; Greenberger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 80: 2 931-2938,1983; Measurement of mouse and human interleukin 6-Nordan, R., Cu rrent Protocols in Immunology, edited by J.E.e.a.Coligan, Vol 1 p. 6.6.1-6.6.5, Joh n Wiley and Sons, Toronto 1991; Smith et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 83: 1857-1861, 1986; Measurement of human Interleukin 11-Bennett, F., Giannotti , J., Clark, S.C. and Turner, K.J., Current Protocols in Immunology, J.E.e.a. Ed. Coligan, Vol. 1 p. 6.15.1 John Wiley and Sons, Fronto. 1991; Measurement of mouse and human Interleukin 9-Ciarletta, A., Giannotti, J., Clark, S.C.a nd Turner, K.J., Current Protocols in Immunology, J.E.e.a.Coligan, Vol. 1 p.6.13.1, John Wiley and Sons, Fronto. 1991. T cell clonal response assay for antigens (this amongst others, APC- Affect T cell interactions and measure proliferation and cytokine production And thereby identify a protein that directs the T cell effect). Including, without limitation: Current Protocols in Immunology, J.E.Coligan, A.M., Kru isbeek, D.H., Margulies, E.M., Shevach, W Strober, Pub.Greene Publishing A ssociates and Wiley-Interscience (Chapter 3, In Vitro assays for Mouse Lymph Cellocyte Function; Chapter 6, Cytokines and their cellular receptors; Chapter 7, Im munologic studies in Humans); Weinberger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77: 6091-6095,1980; Weinberger et al., Eur.J.Immun. 11: 405-411,1981; Tak ai et al., J. Immunol. 137: 3494-3500, 1986; Takai et al., J. Immunol. 140: 508 -512,1988. Immunostimulatory or suppressive activity The proteins of the invention also include without limitation the activity of the assays described herein. , May also exhibit immunostimulatory or immunosuppressive activity. Proteins are involved in various immunodeficiencies and And disorders (including severe combined immunodeficiency (SCID)), such as T and / or Or control the growth and proliferation of B lymphocytes (up or down) and NK cells and And may affect the cytotoxic activity of other cell populations. These exemptions Plasmid deficiency can be genetic or caused by viruses (eg, HIV) and cells. Can be caused by a fungal or fungal infection or can result from an autoimmune disease . More specifically, caused by a virus, bacteria, fungus or other infection Infectious diseases (this includes HIV, hepatitis virus, herpes virus, mycobacteria And various fungal infections such as Leishmania, malaria, and candidiasis. May be treatable using the proteins of the present invention. Of course, from this perspective Furthermore, the proteins of the present invention may also be useful when enhancing the immune system is generally desired, i.e. That may be useful in the treatment of cancer. Autoimmune diseases that can be treated using the proteins of the invention include, for example, connective tissue diseases. , Multiple sclerosis, systemic lupus erythematosus, rheumatoid arthritis, autoimmune pneumonia , Guillain-Barre syndrome, autoimmune thyroiditis, insulin-dependent diabetes, severe Includes myasthenia gravis, graft-versus-host disease and autoimmune eye disease. Of the present invention Proteins can also be found in other sources such as asthma (particularly allergic asthma) or other respiratory disorders. It may be useful in treating allergic reactions and symptoms. Other symptoms for which immunosuppression is desired (Including, for example, organ transplants) can also be treated with the proteins of the invention. Can get. Using the protein of the present invention, it is possible to suppress the immune response in various ways. is there. Downregulation inhibits or blocks the immune response already in progress. Or may be involved in preventing the induction of an immune response. Activity The function of sexualized T cells may be by suppressing T cell responses or by T cell specific It can be inhibited by inducing resistance, or both. T cell response Immunosuppression is generally an active, non-antigen-specific process that involves T cell Need to be in continuous contact with the inhibitor. Non-response or a Resistances involved in the induction of energy are generally antigen-specific, and exposure to inhibitors Is different from immunosuppression in that it persists after cessation. At the time of surgery, Lack of T cell response when re-contacted with specific antigen in the absence This can demonstrate resistance. One or more antigen functions (including, without limitation, B lymphocyte antigen functions (eg, B7)) Down-regulation or inhibition of, eg, high levels of Inhibition of lymphokine synthesis depends on the status of tissue, skin and organ transplantation and graft versus host Useful for diseases (GVHD). For example, by blocking T cell function, tissue transplantation Tissue destruction is reduced. Typically, in tissue transplants, graft rejection is Beginning through the recognition of foreign bodies by T cells, then an immune response that destroys the graft Occur. Inhibits the interaction of B7 lymphocyte antigen with natural ligand on immune cells or Can be administered by administering a blocking molecule prior to transplantation (eg, having only B7-2 activity). A soluble monomeric form of the peptide, or another B lymphocyte antigen (eg, B7- 1, B7-3) or a monomeric form of a peptide having the activity of a blocking antibody Without transmitting the corresponding costimulatory signal) Of natural ligands. Thus, B lymphocyte antigen function is blocked. This would prevent cytokine synthesis by immune cells such as T cells, Acts as an immunosuppressant. Furthermore, the lack of costimulation reduces T cell immunity. Enough to make the general body resistant. By B lymphocyte antigen blocker Induction of long-term tolerance eliminates the need for repeated administration of these blockers is there. Combined B-lymphocyte antigen machinery for the general body to obtain sufficient immunosuppression or tolerance It may be necessary to interrupt the ability. The efficacy of certain blocking agents to prevent organ transplant rejection or GVHD is Can be measured using animal models that are expected. Examples of suitable systems that can be used are Allogeneic heart grafts in mice and xenogeneic pancreatic islet cell grafts in mice Using both, Lenschow et al., Science 257: 789-792 (1992) and Turk a et al., Proc. Natl. Acad. Sci USA, 89: 11102-11105 (1992). Bi The immunosuppressive effect of the CTLA4Ig fusion protein in vivo is examined. Furthermore, G A rat model of VHD (Paul, Fundamental Immunology, Raven Press, New Y ork, 1989, pp. 846-847) using B in vivo at the onset of the disease. The blocking effect of lymphocyte antigen function can be determined. Antigen function blockade may also be therapeutically useful for treating autoimmune diseases. Many Autoimmune diseases are caused by inappropriate inactivation of T cells that are reactive to self tissue. Here, the production of cytokines and autoantibodies involved in the pathogenesis of the disease Life is promoted. Preventing activation of self-reactive T cells reduces signs of disease Or may disappear. B lymphocyte antigen receptor: inhibits ligand interaction Thus, administration of a reagent that blocks costimulation of T cells inhibits T cell activation. Prevents the production of autoantibodies or T cell-derived cytokines that may be involved in the history of the disease be able to. In addition, blocking agents induce antigen-specific resistance of autoreactive T cells. Can lead to long term disease relief. Prevention of autoimmune diseases Or the efficacy of blockers in alleviation is well characterized for many human autoimmune diseases Can be determined using an animal model. An example is the rat experimental self-immunity Epidemic encephalitis, MRL / lpr / lpr mice or NZB hybrid mice Systemic lupus erythematosus, murine autoimmune collagen arthritis, NOD mau In diabetic and BB rats and experimental myasthenia gravis in rats (Paul , Fundamental Immunology, Raven Press, New York, 1989, pp. 840-856). Including. Antigen function (preferably as a means of up-regulating the immune response) Up-regulation of B lymphocyte antigen function) can also be useful in therapy You. Up-regulation of the immune response enhances or maximizes the existing immune response. It may be a form that develops an initial immune response. For example, stimulate B lymphocyte antigen function Boosting the immune response can be useful in the case of a viral infection. You. In addition, systemic viral diseases such as influenza, colds and encephalitis are It can be reduced by systemic administration of the lymphocyte antigen in a stimulating form. In addition, anti-viral immune response is based on removing T cells from patients in infected patients. , A T cell expressing the peptide of the invention in vitro, or the T cell of the invention. thorn Co-stimulation with viral antigen-pulsed APC with the intense form of soluble peptide It can be enhanced by reintroducing the in vitro activated T cells into the patient. Antivirus Another way to boost the immune response is to isolate infected cells from the patient and allow the cells to In order to express the protein in whole or in part, Transfected with nucleic acid encoding the protein, Is to reintroduce the cells into the patient. Here, the infected cells are Can be transmitted to T cells, and thus T cells can be transmitted in vivo. Vesicles can be activated. In another application, upregulation of antigen function (preferably B lymphocyte antigen function) Modulation or enhancement may be beneficial in inducing tumor immunity. At least one Tumor cells transfected with a nucleic acid encoding a peptide of the invention Vesicles (eg, sarcomas, melanomas, lymphomas, leukemias, neuroblastomas, cancers) Can be generally administered to overcome tumor specific resistance. If desired Can also transfect tumor cells to express the combined peptide it can. For example, tumor cells obtained from a patient can be transformed in vitro with only B7-2-like activity. Using an expression vector directed to the expression of a peptide having B7-1 or B7-1-like activity And / or transfection in combination with a peptide having B7-3-like activity Can be When the transfected tumor cells are returned to the patient, The peptide is expressed on the surface of the transfected cells. Also gene therapy Using technology to target transfected tumor cells in vivo be able to. The presence of the peptide of the present invention having B lymphocyte antigen activity on the surface of tumor cells Provides the necessary co-stimulatory signal to T cells, A T cell mediated immune response is induced against the tumor cells. In addition, MHC class I or Or MHC class II molecules are deleted or sufficient MHC class I or MH Tumor cells that are unable to reexpress C class II molecules are MHC class I α chain proteins and And β_TwoMicroglobulin protein or MHC class II α chain protein or And nucleic acids encoding all or part of MHC class II β chain protein Transfected, and thus MHC class I or MHC on the cell surface Class II proteins can be expressed. B lymphocyte antigen (eg, B7 -1, B7-2, B7-3) Suitable classes in combination with peptides having activity Expression of I or class II MHC is expressed in T cells on transfected tumor cells. Induces a vesicle-mediated immune response. If desired, MHC class II related proteins such as invariant chains The gene encoding the antisense construct that blocks expression of the protein is also Cotransfection using DNA encoding a peptide having papocyte antigen activity Stimulates the presentation of tumor-associated antigens and induces tumor-specific immunity Can be. Thus, induction of a T cell-mediated immune response in the human body is not May be sufficient to overcome such tumor-specific resistance. The activity of the protein of the invention can be measured, inter alia, by the following method: Suitable assays for thymocyte or spleen cytotoxicity include those described below. Including, without limitation: Current Protocols in Immunology, J.E.Coligan, A.M., Kru Isbeek, D.H., Margulies, E.M., Shevach, W Strober, Pub. Greene Publishing Associates and Wiley-Interscience (Chapter 3, In Vitro assays for Mouse Lym phocyte Function 3.1-3.19; Chapter 7, Immunologic studies in Humans); Herrma nn et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 78: 2488-2492, 1981; Herrmann et al., J.I. mmunol. 128: 1968-1974, 1982; Handa et al., J. Immunol. 135: 1564-1572, 1985; Tak ai et al., J. Immunol. 137: 3494-3500, 1986; Takai et al., J. Immunol. 140: 508- 512, 1988; Herrmann et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 78: 2488-2492, 1981; Herrm ann et al., J. Immunol. 128: 1968-1974, 1982; Handa et al., J. Immunol. 135: 156 4-1572, 1985; Takai et al., J. Immunol. 137: 3494-3500, 1986; Bowman et al., J. V. irology 61: 1992-1998; Takai et al., J. Immunol. 140: 508-512,1988; Bertagnoll i et al., Cellular Immunology 133: 327-341,1991; Brown et al., J. Immunol. 1 53: 3079-3092, 1994. T cell dependent immunoglobulin response and isotype switching (this allows Modulates, inter alia, T cell-dependent antibody responses and affects Thl / Th2 profiles. Assays to identify proteins that affect Including: Maliszewski, J. Immunol. 144: 3028-3033, 1990; and Assays for Bcel l function: In vitro antibody production, Mond, J.J. and Brunswick, M, Curre nt Protocols in Imrnunology, edited by J.E.e.a.Coligan, Vol. 1 p.3.8.1-3.8.16, John Wiley and Sons, Toronto, 1994. Mixed lymphocyte reaction (MLR) assay (which, inter alia, preferentially 1 and proteins that cause a CTL response are identified) Including, without limitation: Current Protocols in Immunology, J.E. Coligan, A.M.Kru isbeek, D.H.Margulies, E.M.Shevach, W Strober, Pub.Greene Publishing Ass ociates and Wiley-Interscience (Chapter 3, In Vitro assays for Mouse Lymphoc yte Function 3.1-3.19; Chapter 7, Immunologic studies in Humans); Takai et a l., J. Immunol. 137: 3494-3500, 1986; Takai et al., J. Immunol. 140: 508-512, 198. 8; Bertagnolli et al., J. Immunol. 149: 3778-3783, 1992. Dendritic cell-dependent assays, which include, inter alia, trees that activate native T cells Proteins identified by dendritic cells) are limited to those described below Including: Guery et al., J. Immunol. 134: 536-544, 1995; Inaba et al., Journal of Experimental Medicine 173: 549-559, 1991; Macatonia et al., Journal of Immunology 154: 5071-5079, 1995; Porgador et al., Journal of Experimental Medicine 182: 255-260, 1995; Nair et al., Journal of Virology 67: 4062-4069 , 1993; Huang et al., Science 264: 961-965, 1994; Macatonia et al., Journal o. f Experimental Medicinel 69: 1255-1264,1989; Bhardwaj et al., Journal of C linical Investigation 94: 797-807, 1994; and Inaba et al., Journal of Exp erimental Medicine 172: 631-640, 1990. Lymphocyte survival / apoptosis (this is especially true after superantigen transfer) Proteins that prevent apoptosis and proteins that regulate lymphocyte homeostasis Are identified without limitation, including: Darzynkiewicz et a l., Cytometry 13: 795-808,1992; Gorczyca et al., Leukemia 7: 659-670,1993; G orczyca et al., Cancer Research 53: 1945-1951, 1993; Itoh et al., Cell 66: 2 33-243, 1991; Zacharchuk, Journal of Immunology 145: 4037-4045, 1990; Zamai t al., Cytometry 14: 891-897, 1993; Gorczyca et al., International Journal of Oncology1: 639-648,1992. Assays for proteins that affect T cell commitment and early stages of development include: Including but not limited to: Antica et al., Blood 84: 111-117, 1994; Fine et al., Cellular Imminology 155: 111-122, 1994; Galy et al. , Blood 85: 2770 -2778, 1995; Toki et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88: 7548-7551, 1991. Hematopoietic regulatory activity The proteins of the present invention are useful for hematopoietic regulation and, consequently, in the bone marrow or lymphatic system. It may be useful for treating cell disorders. For colony forming cells or factor-dependent cell lines Even the slightest biological activity involved, for example alone or with other cytokines Involved in hematopoietic regulation, such as supporting the growth and proliferation of erythroid progenitor cells in combination And thus, for example, in the treatment of various anemias or in irradiation / Stimulates production of erythroid progenitors and / or erythroid cells in combination with chemotherapy For use in the treatment of bone marrow depression that results in combination with, for example, chemotherapy Granulocytes and monocytes / macrophages useful for prevention or treatment (ie, classical CSF activity) to support the growth and proliferation of bone marrow cells; megakaryocytes and consequently Supports platelet growth and proliferation by supporting various blood vessels such as thrombocytopenia Prevent or treat plate disorders and generally replace platelet transfusions or And / or mature to any or all of the above hematopoietic cells Therefore, various stem cell disorders (aplastic anemia and paroxysmal nocturnal hemoglobinuria) Hematopoietic stem cells that have therapeutic utility, including, without limitation, those normally treated by transplantation To support the growth and proliferation of, and in vivo or in vitro (ie, bone marrow transplantation) Or in combination with peripheral progenitor cell transplantation (allogeneic or xenogeneic) Irradiation of stem cell compartment as cells genetically engineered by gene therapy / chemotherapy Demonstrates usefulness for later reassembly. The protein of the invention can be measured, inter alia, by the following method: Suitable proliferation and differentiation assays for various hematopoietic systems are set forth above. Embryonic stem cell differentiation assays, which include, inter alia, Proteins are identified) include, but are not limited to, those described below: Johansson et a l. Cellular Biology 15: 141-151, 1995; Keller et al., Molecular and Cellular Biology 13: 473-486, 1993; McClanahan et al., Blood 81: 2903-2915,1993. Stem cell survival and differentiation assays, which, among other things, regulate Are identified, without limitation, include: Methyl cellulose colony forming assays, Freshney, M.G., Culture of Hematopoieti c Cells, R.I.Freshney, et al. eds.Vol. 265-268, Wiley-Liss, Inc., New York, NY.1994; Hirayama et al., Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89: 5907-5911,1992; Primit ive hematopoietic colony forming cells with high proliferative potential McNiece, I.K. and Briddell, R.A., Culture of Hematopoietic Cells, R.I.Fr eshney, et al., Vol. p. 23-39, Wiley-Liss, Inc., New York, NY. 1994; Neben et a. l., Experimental Hematology 22: 353-359, 1994; Cobblestone area forming cel l assay, Ploemacher, R.E., Culture of Hematopoietic Cells, R.I.Freshney, e t al. ed.Vol p.1-21, Wiley-Liss, Inc., New York, NY.1994; Long term bone marr ow cultures in the presence of stromal cells, Spooncer, E., Dexter, M. and Allen, T., Culture of Hematopoietic Cells, R.I.Freshney, et al., Vol. 163 -179, Wiley-Liss, Inc., New York, NY. 1994; Long term culture initiating cel l assay, Sutherland, H.J., Culture of Hematopoietic Cells, R.I.Freshney, et al. eds. Vol. pp. 139-162, Wiley-Liss, Inc., New York, NY. 1994. Tissue growth activity The protein of the present invention may also be used for bone, cartilage, tendon, ligament and / or neural tissue growth. Or compositions used for regeneration and wound healing and tissue repair and replacement, and It may show utility in treating burns, incisions and ulcers. Books that induce cartilage and / or bone growth in an environment where bone is not normally formed The proteins of the invention are useful in humans and other animals for fracture and cartilage injury or Applied to deficiency healing. Such a formulation using the protein of the present invention can be used for subcutaneous bone It can be used prophylactically for healing of open and open fractures and for promoting fixation of artificial joints. Novel bone formation induced by osteogenic agents can be congenital, traumatic, or induce tumor resection It contributes to the healing of skeletal wounds and is also useful in cosmetic plastic surgery. The proteins of the present invention may also be used in the treatment of periodontal disease, and in other dental treatment processes. obtain. Such agents may attract, stimulate, or otherwise induce osteogenic cells. Alternatively, it can provide an environment for inducing osteogenic ancestral cell differentiation. The protein of the present invention It may also stimulate bone and / or cartilage repair or mediate inflammatory processes. Block the process of inflammation or tissue destruction (collagenase activity, osteoclast activity, etc.) This may be useful for treating osteoporosis or osteoarthritis. Another category of tissue regeneration activity that can be attributed to the proteins of the invention is tendon / ligament Is the formation. Tendon / ligament-like tissue or other tissue formation, usually such tissue is formed The protein of the present invention, which is induced in an environment free of Or applied to ligament destruction, deformation and healing of other tendon or ligament disorders. Tendon / tough Such preparations using zonal tissue-inducing proteins can protect against injury to tendon or ligament tissue. Protection of bones and the fixation of tendons or ligaments to bone or other tissues, Or it can be used prophylactically to heal ligament tissue injury. With the composition of the present invention Induced new tendon / ligament-like tissue formation may be congenital, traumatic, or of other origin. Contributes to the healing of tendon or ligament disorders, It is also useful in cosmetic plastic surgery. The composition of the present invention may be used for tendon or ligament formation. Attract cells, stimulate growth of tendon or ligament forming cells, tendon or ligament To induce the differentiation of the ancestors of the forming cells, or To provide an environment for inducing the growth of tendon / ligament cells or ancestors in vitro. Book The compositions of the invention are also useful in the treatment of tendinitis, root canal syndrome and other tendon or ligament disorders. Can be useful. The composition can also be made of a suitable matrix, as is well known in the art. The matrix may include a sequestering agent as a trick and / or carrier. The proteins of the present invention may also be used for nerve cell proliferation and nerve and brain tissue regeneration, That is, central and peripheral nervous system diseases and neuropathy, and mechanical and Of traumatic disease (including degeneration, necrosis or trauma of nerve cells or nerve tissue) It may be useful for treatment. More specifically, the protein is, for example, peripheral nerve injury, Peripheral nervous system disorders such as peripheral and regional neuropathy, and Alzheimer's, Parkinson's disease, Huntington's chorea, amyotrophic lateral sclerosis And central nervous system diseases such as Shy-Drager syndrome. Another condition that can be treated according to the present invention is brain disorders such as spinal cord injury, head trauma, and stroke. Includes mechanical and traumatic disorders such as vascular disorders. Chemotherapy or other medical therapy -Induced peripheral neuropathy can also be treated with the protein of the invention It is. The proteins of the present invention may also be used for pressure ulcers, ulcers associated with vascular disorders, Promotes faster healing of unhealed wounds, including without limitation, wounds and traumatic wounds It may be useful to proceed. The protein of the present invention is used for organs (eg, pancreas, liver, intestine, kidney, skin, endothelium). Muscle) (including smooth, skeletal or cardiac muscle) and vascular (including vascular endothelium) tissue Promote the production or regeneration of other tissues, such as, or the growth of cells containing such tissues Activity. Some of the desired effects include linear wounds as normal tissue regenerates Can be obtained by inhibiting or regulating The proteins of the present invention also It may also exhibit neoplastic activity. The proteins of the present invention may also be used to protect or regenerate gastrointestinal Treatment, reperfusion injury in various tissues, and systemic cytokine injury It may be useful for the symptoms that are caused. The protein of the present invention also promotes the differentiation of the aforementioned tissue from precursor tissue or cells. May be useful to promote or inhibit or to inhibit the growth of the above tissues . The activity of the protein of the invention can be measured, inter alia, by the following method: Tissue generating activity assays include, without limitation, those described below: International Patent Publication No. WO95 / 16035 (bone, cartilage, tendon); International Patent Publication No. WO95 / 05846 (nerve, International Patent Publication No. WO 91/07491 (skin, endothelium). Wound healing activity assays include, without limitation, those described below: Winter,Epider mal Wound Healing , P.71-112 (Maibach, HI and Rovee, DT), Year Book Medica l Publishers, Inc., Chicago, which is Eaglstein and Mertz, J., Invest. l 71: 382-84 (1978). Activin / inhibin activity The proteins of the invention may also exhibit activin or inhibin related activity . Inhibin is characterized by its ability to inhibit follicle stimulating hormone (FSH) release, Activin, on the other hand, is characterized by its ability to stimulate follicle stimulating hormone (FSH) release. It is. Therefore, the protein of the present invention may be used alone or in the inhibin α family. In the form of a heterodimer with one of the Useful as a contraceptive based on inhibin efficacy to reduce spermatogenesis in mammals for Can be Administering a sufficient amount of another inhibin to these mammals Can induce contraception. Also, homodimers or other inhibin- The protein of the present invention, which is a heterodimer with a β-subunit protein subunit Is based on the ability of activin molecules to stimulate FSH release from anterior pituitary cells, It may be useful as a reproduction-inducing therapeutic. See, for example, U.S. Patent 4,798,885. The present invention Proteins are also involved in the reproductive behavior of livestock animals such as cattle, sheep and pigs. To accelerate the onset of fertility in sexually immature mammals to prolong Can be for The proteins of the invention can also be measured, inter alia, by the following methods: Activin / inhibin activity assays include, without limitation, those described below : Vale et al., Endocrinology 91: 562-572,1972; Ling et al., Nature 321: 779. -782,1986; Vale et al., Nature 321: 776-779,1986; Mason et al., Nature 318: 659-663, 1985; Forage et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83: 3091-3095, 1986. Chemotaxis / chemomotility The proteins of the present invention include, for example, monocytes, fibroblasts, neutrophils, T cells, obese cells. Chemotaxis of mammalian cells, including vesicles, eosinophils, epithelial and / or endothelial cells It can have chemokinetic properties, such as acting as a chemokine. Chemotaxis and chemical luck Kinetic proteins are used to move or attract a desired group of cells to a desired site of action. Can be used for Chemotactic or chemokinetic proteins can damage tissues and And other traumas, as well as local infections. For example, lymph Attracting spheres, monocytes or neutrophils to a tumor or site of infection The immune response to the can be enhanced. If the protein or peptide is directly or indirectly If it can stimulate the direction and movement, it will And has chemotaxis. Preferably, the protein or peptide is directly Instructed exercise can be stimulated. Specific proteins run against a group of cells Chemotaxis in any known assay for cell chemotaxis Can be easily determined by using such proteins or peptides You. The activity of the protein of the invention can be measured, inter alia, by the following method: Chemotaxis assay (where proteins that induce or interfere with chemotaxis are also identified) ) Is the ability of the protein to induce cell migration through the membrane, as well as one The ability of a protein to induce adhesion from one cell group to another It consists of an assay. Suitable assays for migration and adhesion are described below. Including, without limitation: Current Protocols in Immunology, J.E.Coligan, A.M. , Kruisbeek, D.H., Margulies, E.M., Shevach, W. Strober, Pub. Greene Publis hing Associates and Wiley-Interscience (Chapter 6.12, Measurement of alpha an d beta Chemokines 6.12.1-6.12.28; Taub et al. J. Clin. Invest. 95: 1370-1376, 1995; Lind et al. APMIS 103: 140-146, 1995; Muller et al. Eur. J. Immunol. 25: 174 4-1748; Gruber et al. J. of Immunol. 152: 5860-5867, 1994; Johnston et al. J. of Immunol. 153: 1762-1768, 1994. Hemostasis and thrombotic activity The proteins of the invention may also exhibit hemostatic or thrombotic activity. As a result, Such proteins are used in the treatment of various coagulation diseases (including genetic diseases such as hemophilia), Or coagulation and other blood in the treatment of wounds resulting from trauma, surgery or other causes It is expected to be useful for enhancing the thrombotic symptoms. The proteins of the present invention may also Dissolution or inhibition, and symptoms resulting therefrom (e.g., myocardial infarction and central It may be useful for treating and preventing transvascular occlusion (eg, stroke). The protein of the invention can be measured, inter alia, by the following method: Assays for haemostatic and thrombotic activity include, without limitation, the following: Linet et al., J. Clin. Pharmacol. 26: 131-140, 1986; Burdick et al., Thrombosis Res. 45: 413-419, 1987; Humphrey et al., Fibrinolysis 5: 71-79 (1991); Schaub, Pros. taglandins 35: 467-474, 1988. Receptor / ligand activity The protein of the present invention may also comprise a receptor, a receptor ligand or a receptor. It may exhibit activity as an inhibitor or agonist of a-/ ligand interaction. Take Examples of receptors and ligands are cytokine receptors and their ligands. , Receptor kinase and its ligand, receptor phosphatase and its Restricts ligands, receptors involved in cell-cell interactions and their ligands (Including, without limitation, antigen presentation, antigen recognition and cellular and humoral immune responses) Involved, cell adhesion molecules such as selectins, integrins and their ligands C) and receptor / ligand pairs). Receptors and ligands also , Potential peptides or small molecules of related receptor / ligand interactions Useful for screening inhibitors. The protein (receptor) of the present invention And without limitation fragments of the ligand) are themselves receptor / liga And may be useful as inhibitors of gland interactions. The protein of the invention can be measured, inter alia, by the following method: Suitable assays for receptor-ligand activity include, but are not limited to, those described below. Including: Current Protocols in Immunology, J.E.Coligan, A.M., Kruisbeek, D.H. , Margulies, E.M., Shevach, W. Strober, Pub. Greene Publishing Associates and Wiley-Interscience (Chapter 7.28, Measurement of Cellular Adhesion under static conditions 7.28.1-7.28.22), Takai et al., Proc.Natl.Acad.Sci.USA 84: 6864-6868,1987; Bierer et al., J. Exp.Med. 168: 1145-1156,1988; Rosenstein et al., J. Exp. Med. 169: 149-160, 1989; Stoltenborg et al., J. Immunol. Metho. ds 175: 59-68, 1994; Stitt et al., Cell 80: 661-670,1995. Anti-inflammatory activity The proteins of the present invention may also exhibit anti-inflammatory activity. Anti-inflammatory activity, inflammatory response Stimulates cells involved in cell-mediated or cell-cell interactions (eg, cell adhesion) Inhibits or promotes or inhibits or promotes the chemotaxis of cells involved in the inflammatory process Inhibit or promote cell migration and more directly inhibit or promote the inflammatory response It can be obtained by stimulating or suppressing the production of other factors. Such activity The use of the indicated protein allows for infection (e.g., septic shock, sepsis or Systemic inflammatory response syndrome (SIRS)), ischemia-reperfusion injury, endotoxin lethality, Arthritis, complement-mediated hyperacute rejection, nephritis, cytokine or chemokine induced lung injury Inflammatory bowel disease, Crohn's disease or cytokines such as TNF or IL-2 Chronic or acute conditions, including without limitation inflammation associated with diseases resulting from overproduction Including Inflammatory conditions can be treated. The proteins of the present invention may also include antigenic substrates. Or anaphylaxis to substances and hypersensitivity. Tumor inhibitory activity In addition to the activities described above in the immunological treatment or prevention of tumors, the proteins of the present invention May exhibit other antitumor activities. Proteins can be directly or indirectly (eg, Tumor growth (via ADCC). The protein is Act on precursor tissue or inhibit tissue formation necessary for tumor growth (eg, blood Other factors, drugs or cells that inhibit tumor growth (by inhibiting tube formation) Factors, drugs or cell types that produce tumor types or promote tumor growth By suppressing, eliminating or inhibiting, it may exhibit tumor inhibitory activity. Other activities The proteins of the invention may also exhibit one or more of the following additional activities or effects: : The formation of infectious agents, including without limitation bacteria, viruses, fungi and other parasites Inhibition or killing of length, infection or function; height, weight, hair color, eye color, skin, oil Body features, or organs or body parts, including without limitation fat to meat ratio or other tissue pigments For size or type (eg, breast increase or decrease, change in bone shape or type) Effects (suppression or enhancement); biorhythm or caricadic cycle or Effects on male or female general fertility; edible fats, lipids, Proteins, carbohydrates, vitamins, minerals, cofactors or other nutritional factors or Effects on the metabolism, catabolism, assimilation, processing, utilization, storage or elimination of components; Appetite, libido, stress, cognition (including cognitive impairment), depression (including depression) and violence Influence on behavioral characteristics, including without limitation power behavior; analgesic or other pain relief Fruit; promoting differentiation and growth of embryonic stem cells in systems other than the hematopoietic system; Endocrine activity; in the case of enzymes, correction of enzyme deficiency and treatment of deficiency-related diseases; Treatment of a proliferative disease (eg, psoriasis); immunoglobulin-like activity (eg, antigen or Acts as an antigen in the vaccine composition; Proteins or other substances or entities that cross-react with such proteins Ability to elicit an immune response.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者小林みどり神奈川県大和市南林間３―２―３ロイヤルコート306────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of front page (72) Inventor Midori Kobayashi 3-2-3 Roiya, Minamirinkan, Yamato City, Kanagawa Prefecture Le Cote 306

Claims

[Claims] 1. SEQ ID NO: 1 to SEQ ID NO: 2 or SEQ ID NO: 4 to SEQ ID NO: 25 A protein comprising any of the following amino acid sequences: 2. A DNA encoding any of the proteins of claim 1. 3. CD containing any of the nucleotide sequences represented by SEQ ID NO: 26 to SEQ ID NO: 50 NA. 4. Consisting of any of the base sequences represented by SEQ ID NO: 75 from SEQ ID NO: 51, The cDNA according to claim 3. 5. The DNA according to any one of claims 2 to 4 is expressed, and the DNA according to claim 1 is expressed. A transformed eukaryotic cell capable of producing a protein.