JP2001106608A - Plant growth promoter - Google Patents

Plant growth promoter

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JP2001106608A
JP2001106608A JP32004399A JP32004399A JP2001106608A JP 2001106608 A JP2001106608 A JP 2001106608A JP 32004399 A JP32004399 A JP 32004399A JP 32004399 A JP32004399 A JP 32004399A JP 2001106608 A JP2001106608 A JP 2001106608A
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JP
Japan
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klebsiella
plant growth
genus
culture
microorganism belonging
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JP32004399A
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Japanese (ja)
Inventor
Kunio Nakada
邦穂 仲田
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BASIC INDUSTRIES BUREAU MITI
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BASIC IND BUREAU MITI
BASIC INDUSTRIES BUREAU MITI
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Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a new medicine for raising a plant, useful for the control of symbiosis, and a plant growth promoter having higher effects and containing a cultured product of microorganisms belonging to the genus Pseudomonas as a component. SOLUTION: This plant growth promoter or adjuvant for the plant growth promoter contains polysaccharides obtained from the cultured product of microorganisms belonging to the genus Klebsiella. The plant growth promoter comprises the polysaccharides obtained from the cultured product of the microorganisms belonging to the genus Klebsiella, and the cultured product of microorganisms belonging to the genus Pseudomonas. The microorganism belonging to the genus Klebsiella is exemplified by the microorganisms belonging to Klebsiella pneumoniae or Klebsiella oxytoca. The microorganism belonging to the genus Pseudomonas is exemplified by the microorganisms belonging to Pseudomonas fluorescens.

Description

【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【0001】[0001]

【発明の属する技術分野】本発明は、クレブシエラ(K
lebsiella)属に属する微生物の培養物から得
られる多糖類を含む植物成長促進剤または植物成長促進
助剤に関する。さらに、本発明は、クレブシエラ(Kl
ebsiella)属に属する微生物の培養物から得ら
れる多糖類とシュードモナス(Pseudomona
s)属に属する微生物の培養物からなる植物成長促進剤
に関する。
TECHNICAL FIELD The present invention relates to a Klebsiella (K)
The present invention relates to a plant growth promoter or a plant growth promotion aid containing a polysaccharide obtained from a culture of a microorganism belonging to the genus Lebsiella. Furthermore, the present invention relates to Klebsiella (Kl
polysaccharides obtained from cultures of microorganisms belonging to the genus Ebsiella and Pseudomonas
s) A plant growth promoter comprising a culture of a microorganism belonging to the genus.

【0002】[0002]

【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】シュー
ドモナス・フルオレッセンス(Pseudomonas
fluorescens)は植物根の周囲の土壌中に
生育し、ピオルテオリン、2,4−ジアセチルフロログ
ルシノール、フェナジンカルボン酸など各種の抗生物質
を生産することにより、宿主である植物体を各種の病原
菌から防御していると考えられている。従って、当菌の
抗生物質の生産メカニズム、その生産性向上、土壌中に
おける生態の研究は重要なテーマとされてきた。最近こ
れらの抗生物質の高生産株であるP.fluoresc
ens S272株が分離され[Z.Yuanら,J.
Ferment.Bioeng.86,6,559−5
63(1998)]、高いアルコール濃度や塩濃度、高
温ショックなどの各種のストレスが抗生物質生産性を数
倍向上させることが報告されている[Nakata,
K.ら,Biosci.Biotechnol.Bio
chem.63,293−297(1999)]。S2
72株の抗生物質生産は、オートインジューサー物質N
−acyl−homoserine lactoneに
より調節され、ストレス下での高いオートインジューサ
ー活性が抗生物質生産誘導をもたらしていることも示さ
れている。S272株の培養物を用いた植物成長促進
剤、および植物の腐敗防止剤としての利用については既
に特許出願されている〔特願平10−261026
号〕。
2. Description of the Related Art Pseudomonas fluorescens (Pseudomonas)
fluorescens) grows in the soil around the plant roots and produces various antibiotics such as piorteolin, 2,4-diacetylphloroglucinol, phenazine carboxylic acid, etc., thereby transforming the host plant from various pathogens. It is believed to be defending. Therefore, research on the mechanism of antibiotic production by the bacterium, improvement of its productivity, and ecology in soil have been important themes. Recently, a high producing strain of P. fluoresc
ens S272 strain was isolated [Z. Yuan et al.
Ferment. Bioeng. 86,6,559-5
63 (1998)], and it has been reported that various stresses such as high alcohol concentration and salt concentration and high temperature shock improve antibiotic productivity several times [Nakata,
K. Et al., Biosci. Biotechnol. Bio
chem. 63, 293-297 (1999)]. S2
The antibiotic production of 72 strains is based on the autoinducer substance N
It has also been shown that high autoinducer activity under stress, regulated by -acyl-homoseline lactone, leads to induction of antibiotic production. A patent application has already been filed for a plant growth promoter using a culture of the S272 strain and for use as a plant spoilage inhibitor [Japanese Patent Application No. 10-261046.
issue〕.

【0003】本発明者らは、上記S272株の培養物を
用いた植物成長促進剤および植物の腐敗防止剤としての
利用について、さらに検討した。その結果、培養物中に
含まれるピオルテオリン、2,4−ジアセチルフロログ
ルシノール、フェナジンカルボン酸など各種の抗生物質
が有する優れた効果が、自然界では必ずしも有効に利用
されていないことが判明した。
[0003] The present inventors have further studied the use of the above-mentioned culture of the S272 strain as a plant growth promoter and a plant spoilage inhibitor. As a result, it has been found that the excellent effects of various antibiotics such as pioluteolin, 2,4-diacetylphloroglucinol, and phenazinecarboxylic acid contained in the culture are not always effectively used in nature.

【0004】ところで、自然界では細胞の凝集、接着反
応が頻繁におこなわれている。例えば、微生物はコロニ
ーを形成したり、あるいは宿主に寄生、共生すること
で、生物間競争における優位性を保つよう工夫してい
る。このような自然界の仕組みを模して、凝集剤を用い
ることにより複数の種類の細胞を吸着、凝集させる試み
が行われている。例えば、国府田らの固定化菌体触媒の
ような例がある[Biotechnol.Bioen
g.,31,382,(1988)]。しかし、凝集剤
は植物体に悪影響を及ぼす例が多い。
[0004] In the natural world, cell aggregation and adhesion reactions occur frequently. For example, microorganisms are devised to maintain their superiority in competition between organisms by forming colonies or parasitizing and symbiotic with the host. Attempts have been made to imitate such a natural mechanism and to adsorb and aggregate a plurality of types of cells by using an aggregating agent. For example, there is an example of the immobilized bacterial cell catalyst of Kokuda et al. [Biotechnol. Bioen
g. , 31, 382, (1988)]. However, flocculants often have an adverse effect on plants.

【0005】自然界には豆科植物における根粒のような
特にめだった構造体を形成しない共生例も多い。異種生
物間の接着の強さはそれぞれの細胞表層の親和性や、接
着物質の存在の有無により決められるが、pHやイオン
等の周囲の様々な環境因子によっても影響を受けてい
る。異種生物間の接着が双方の生育上有利に働く場合は
多いと予想されるので、人為的な共生制御は農業におけ
る重要な課題となる。
[0005] In nature, there are many symbiotic cases that do not form a special structure such as nodules in legumes. The strength of adhesion between heterologous organisms is determined by the affinity of each cell surface and the presence or absence of an adhesive substance, but is also affected by various environmental factors such as pH and ions. Artificial symbiosis control is an important issue in agriculture, as adhesion between heterogeneous organisms is expected to often favor both growths.

【0006】前記S272株の培養物を植物成長促進剤
として、より有効に利用するという観点から、本発明者
らは上記のような人為的な植物育成を目的とする共生制
御の活用について注目した。しかしながら、上述のよう
に、これまでに知られている凝集剤の使用は必ずしも植
物に有利ではなく、前記S272株の培養物を植物成長
促進剤としてより有効に利用するという観点から、新た
な植物育成のための共生制御を開発する必要があった。
また、自然界には特色ある能力を有する微生物が多数存
在するが、その植物体との共生関係の人為的調節強化に
ついてはこれまで研究例が極めて少ない。また、細菌が
菌体外に生産する多糖類は、しばしば植物の病原菌感染
防御システムを破壊することも知られている[Robe
rts,Annu.Rev.Microbiol.5
0,285−315(1996)]。
From the viewpoint of more effectively using the culture of the S272 strain as a plant growth promoter, the present inventors have paid attention to the utilization of symbiotic control for the purpose of artificial plant growth as described above. . However, as described above, the use of a coagulant known so far is not always advantageous for plants, and from the viewpoint of more effectively utilizing the culture of the S272 strain as a plant growth promoter, a new plant is used. It was necessary to develop symbiotic control for rearing.
In addition, there are many microorganisms having a characteristic ability in the natural world, but there have been very few studies on enhancing artificial regulation of the symbiotic relationship with plants. It is also known that polysaccharides produced by bacteria extracellularly often disrupt the plant defense system against pathogenic bacteria [Robe]
rts, Annu. Rev .. Microbiol. 5
0, 285-315 (1996)].

【0007】そこで本発明の目的は、植物育成のための
共生制御に有用な新たな薬剤を提供することにある。さ
らに本発明の目的は、S272株を含むシュードモナス
(Pseudomonas)属に属する微生物の培養物
を成分として含む、より効果の高い植物成長促進剤を提
供することにある。
Accordingly, an object of the present invention is to provide a new drug useful for controlling symbiosis for plant growth. It is a further object of the present invention to provide a more effective plant growth promoter comprising, as a component, a culture of a microorganism belonging to the genus Pseudomonas including S272 strain.

【0008】[0008]

【課題を解決するための手段】本発明は、クレブシエラ
(Klebsiella)属に属する微生物の培養物か
ら得られる多糖類を含む植物成長促進剤または植物成長
促進助剤に関する。さらに本発明は、クレブシエラ(K
lebsiella)属に属する微生物の培養物から得
られる多糖類とシュードモナス(Pseudomona
s)属に属する微生物の培養物からなる植物成長促進剤
に関する。尚、本明細書において、植物成長促進剤は、
そのもの単独で植物の成長を促進させるものをいい、植
物成長促進助剤は、そのもの単独では植物の成長を促進
させることはできないが、他の植物成長促進剤と併用す
ることにより、その作用を増強させるものをいう。
SUMMARY OF THE INVENTION The present invention relates to a plant growth promoter or a plant growth promoter containing a polysaccharide obtained from a culture of a microorganism belonging to the genus Klebsiella. The present invention further relates to Klebsiella (K
polysaccharides obtained from cultures of microorganisms belonging to the genus Lebsiella and Pseudomonas
s) A plant growth promoter comprising a culture of a microorganism belonging to the genus. In this specification, the plant growth promoter is
A substance that promotes the growth of plants by itself. A plant growth promotion aid cannot promote plant growth by itself, but enhances its effect when used in combination with other plant growth promoters. It means something to be done.

【0009】[0009]

【発明の実施の形態】クレブシエラ(Klebsiel
la)属に属する微生物は、通性嫌気性菌であり、嫌気
条件下で窒素固定能を有する菌株とされており、その遺
伝的改良研究が精力的に行われている。クレブシエラ
(Klebsiella)属に属する微生物としては、
例えば、クレブシエラ・ニュウモニアエ(Klebsi
ellapneumoniae)及びクレブシエラ・オ
キシトカ(Klebsiella oxytoca)を
挙げることができる。また、クレブシエラ(Klebs
iella)属に属する微生物については、菌株散布に
よる生育促進の研究例は既にある。しかるに、自然界に
おいて植物との特別の強い共生構造体を形成するという
報告はない。
BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION Klebsiel
The microorganism belonging to the genus la) is a facultative anaerobic bacterium, and is considered to be a strain having a nitrogen fixing ability under anaerobic conditions. Genetic improvement research has been energetically conducted. As microorganisms belonging to the genus Klebsiella,
For example, Klebsiella pneumoniae
ellapneumoniae) and Klebsiella oxytoca. Also, Klebs
For microorganisms belonging to the genus iella), there are already examples of research on growth promotion by spraying strains. However, there is no report of forming a special strong symbiotic structure with plants in nature.

【0010】本発明では、クレブシエラ(Klebsi
ella)属に属する微生物の培養物から得られる多糖
類を植物成長促進剤または植物成長促進助剤として用い
る。クレブシエラ(Klebsiella)属に属する
微生物は、その培養物中に多糖類を生産することが知ら
れている。例えば、クレブシエラ・ニュウモニアエ(K
lebsiella pneumoniae)H12株
の生産する多糖類については、平成10年度の生物工学
会大会において、「K.pneumoniaeH12株
の生産する多糖類系凝集剤 第1報:生産、単離、活性
検討」、及び「微生物産生多糖類系凝集剤の構成成分
(多糖類系凝集剤 第2報)」として既に報告されてい
る。しかるに、クレブシエラ(Klebsiella)
属に属する微生物の培養物に含まれる成分が、植物成長
促進剤及び植物成長促進助剤として用いることができる
ことはこれまで知られていない。尚、K.pneumo
niae H12株は、平成11年9月 日に通商産
業省工業技術院生命工学技術研究所にFERM P−
として寄託されている。
In the present invention, Klebsiella (Klebsiella) is used.
A polysaccharide obtained from a culture of a microorganism belonging to the genus ella) is used as a plant growth promoter or a plant growth promoter. Microorganisms belonging to the genus Klebsiella are known to produce polysaccharides in their cultures. For example, Klebsiella pneumoniae (K
lebsiella pneumoniae) H12 produced polysaccharides at the 1998 meeting of the Society of Biotechnology, "K. pneumoniae H12 strain produced polysaccharide-based flocculant 1st report: production, isolation, activity study", and It has already been reported as "Component of Microbial Polysaccharide Flocculant (Polysaccharide Flocculant No. 2)". However, Klebsiella
It has not been known that components contained in cultures of microorganisms belonging to the genus can be used as plant growth promoters and plant growth promoters. In addition, K. pneumo
niae H12 strain was registered on September 1999 by the FERM P-
Has been deposited as

【0011】クレブシエラ(Klebsiella)属
に属する微生物の培養は、多糖類を生産する場合にはエ
タノールを炭素源とする培地を用いて良好に行うことが
できる。窒素源には制限はなく、例えば、ポリペプト
ン、酵母エキス、大豆粉等を用いることができる。多糖
類を生産しなくても良い場合には、クレブシエラ(Kl
ebsiella)属に属する微生物の培養に用いる炭
素源及び窒素源は、後述のシュードモナス属に属する微
生物の培養に用いるものから適宜選択することができ
る。
Cultivation of a microorganism belonging to the genus Klebsiella can be favorably carried out using a medium containing ethanol as a carbon source when producing a polysaccharide. There is no limitation on the nitrogen source, and for example, polypeptone, yeast extract, soybean powder and the like can be used. If it is not necessary to produce polysaccharides, Klebsiella (Kl
The carbon source and the nitrogen source used for culturing microorganisms belonging to the genus ebsiella) can be appropriately selected from those used for culturing microorganisms belonging to the genus Pseudomonas described below.

【0012】培養条件は、使用するクレブシエラ(Kl
ebsiella)属に属する微生物の特性、外部条件
などに応じて適宜変更できる。具体的に、クレブシエラ
・ニュウモニアエ(Klebsiella pneum
oniae)H12株の場合、培地のpHは、6〜8程
度である。通常、中性付近とすることが好ましい。培養
温度は、微生物が良好に生育する温度である。すなわ
ち、培養温度は、15℃〜40℃で、好ましくは25℃
〜35℃である。培養時間は、他の培養条件によっても
左右されるが、一般には、2〜10日間程度でよく、好
ましくは、2〜5日間である。
The culture conditions are Klebsiella (Kl)
It can be changed as appropriate according to the characteristics of the microorganism belonging to the genus ebsiella), external conditions, and the like. More specifically, Klebsiella pneum
oniae) In the case of the H12 strain, the pH of the medium is about 6 to 8. Usually, it is preferable to be near neutral. The culture temperature is a temperature at which the microorganism grows well. That is, the culture temperature is 15 ° C to 40 ° C, preferably 25 ° C.
~ 35 ° C. The culturing time depends on other culturing conditions, but is generally about 2 to 10 days, preferably 2 to 5 days.

【0013】クレブシエラ・ニュウモニアエ(Kleb
siella pneumoniae)及びクレブシエ
ラ・オキシトカ(Klebsiella oxytoc
a)は、より具体的には、後述の実施例において示す通
り、エタノールを炭素源とする培地(例えば2%エタノ
ール,1%グリセリン,0.5%酵母エキス,0.5%
ポリペプトン,0.05%KHPO,0.05%M
gSO・7HO,0.2%NaCl,0.2%Ca
CO)で培養することができる。後述の表1に示すよ
うに、クレブシエラ・ニュウモニアエ(Klebsie
lla pneumoniae)及びクレブシエラ・オ
キシトカ(Klebsiella oxytoca)
は、エタノールを含まない培地では実質的に多糖類を生
産することができず、本発明の目的を達成することがで
きない。クレブシエラ(Klebsiella)属に属
する微生物の培養物は、細胞外に産生された多糖類を含
有する。クレブシエラ・ニュウモニアエ(Klebsi
ella pneumoniae)H12株の培養物に
含まれる多糖類の構成糖の組成は、実施例2に示すよう
に例えば、ガラクトース(35.23%)、グルコース
(16.29%)、マンノース(2.33%)、ガラク
ツロン酸(6.89%)、グルクロン酸(2.12
%)、グルコサミン+ガラクトサミン(7.38%)で
あり、ゲルろ過により求めた上記多糖類の平均分子量は
少なくとも20万を超える。
[0013] Klebsiella pneumoniae (Kleb
siella pneumoniae and Klebsiella oxytoc
More specifically, a) is a medium containing ethanol as a carbon source (for example, 2% ethanol, 1% glycerin, 0.5% yeast extract, 0.5%
Polypeptone, 0.05% K 2 HPO 4 , 0.05% M
gSO 4 · 7H 2 O, 0.2 % NaCl, 0.2% Ca
CO 3 ). As shown in Table 1 below, Klebsiella pneumoniae
lla pneumoniae) and Klebsiella oxytoca
Cannot substantially produce polysaccharides in a medium containing no ethanol, and cannot achieve the object of the present invention. Cultures of microorganisms belonging to the genus Klebsiella contain extracellularly produced polysaccharides. Klebsiella pneumoniae
As shown in Example 2, the composition of the constituent sugars of the polysaccharide contained in the culture of S. ella pneumoniae strain H12 is, for example, galactose (35.23%), glucose (16.29%), mannose (2.33). %), Galacturonic acid (6.89%), glucuronic acid (2.12)
%), Glucosamine + galactosamine (7.38%), and the average molecular weight of the polysaccharide determined by gel filtration exceeds at least 200,000.

【0014】エタノールを含む培地で培養したクレブシ
エラ(Klebsiella)属に属する微生物の培養
物は上記のように多糖類を含有する。多糖類を含有する
クレブシエラ(Klebsiella)属に属する微生
物の培養物、例えば、培養液中の微生物菌体、培養液及
びそれらの処理物は、そのまま植物成長促進剤、植物成
長促進助剤として用いることができる。また、培養液は
凍結乾燥し保存しておくこともできる。微生物菌体は、
マイクロ波などによる乾燥菌体として保存しておくこと
もできる。凍結乾燥させた培養液や、乾燥菌体を調製
し、再度水に懸濁した場合でも植物成長促進剤、植物成
長促進助剤として用いることができる。また、培養液等
の培養物から含まれる多糖類を回収精製し、回収精製し
た多糖類を植物成長促進剤、植物成長促進助剤として用
いることもできる。多糖類の回収精製には、イオン交換
クロマトグラフィーやゲルろ過クロマトグラフィーが有
効であるが、エタノールをはじめとする水溶性有機溶媒
の添加による沈殿でも高い回収率と精製度が得られる。
A culture of a microorganism belonging to the genus Klebsiella cultured in a medium containing ethanol contains a polysaccharide as described above. A culture of a microorganism belonging to the genus Klebsiella containing a polysaccharide, for example, a microbial cell in a culture solution, a culture solution, and a processed product thereof are directly used as a plant growth promoter or a plant growth promoter. Can be. Further, the culture solution can be freeze-dried and stored. Microbial cells are
It can also be stored as dried cells by microwaves or the like. Even when a freeze-dried culture solution or a dried bacterial cell is prepared and suspended again in water, it can be used as a plant growth promoter or a plant growth promoter. Further, polysaccharides contained in a culture such as a culture solution can be recovered and purified, and the recovered and purified polysaccharide can be used as a plant growth promoter and a plant growth promotion aid. Although ion exchange chromatography and gel filtration chromatography are effective for the recovery and purification of polysaccharides, a high recovery and a high degree of purification can be obtained by precipitation by addition of a water-soluble organic solvent such as ethanol.

【0015】培養物や回収精製した多糖類からなる植物
成長促進剤、植物成長促進助剤に、必要により、植物生
育促進効果を減少させない範囲で、その他の添加物を加
えることもできる。あるいは、培養物や回収精製した多
糖類からなる植物成長促進剤、植物成長促進助剤は、何
倍かに希釈して用いても良い。クレブシエラ(Kleb
siella)属に属する微生物の培養物から得られる
多糖類を含む植物成長促進剤、植物成長促進助剤は、例
えば、水耕栽培の場合、多糖類の濃度が1〜100pp
mの範囲の濃度となるように添加することができる。
If necessary, other additives can be added to the plant growth promoting agent and the plant growth promoting aid comprising the cultured product or the recovered and purified polysaccharide as long as the effect of promoting plant growth is not reduced. Alternatively, the plant growth promoting agent and the plant growth promoting aid composed of the culture or the recovered and purified polysaccharide may be diluted several times before use. Kleb Sierra
A plant growth promoting agent and a plant growth promoting agent containing a polysaccharide obtained from a culture of a microorganism belonging to the genus siella) include, for example, in the case of hydroponics, the concentration of the polysaccharide is 1 to 100 pp.
m can be added.

【0016】上記のクレブシエラ(Klebsiell
a)菌は、日本細菌学雑誌(50,p.1023,’9
5)による微生物安全性基準によればレベルは1とさ
れ、そのために適正な管理の下での大量培養生産も容易
に行われる。特に多糖類物質の生産量が特に優れている
クレブシエラ・オキシトカ(Klebsiella o
xytoca)ATCC 13182株は窒素固定菌と
しての研究例が多く、安全性が指摘されている。
The above Klebsiella (Klebsiell)
a) Bacteria are described in Japanese Bacteriological Magazine (50, p. 1023, '9).
According to the microbial safety standard according to 5), the level is set to 1, so that mass culture production under proper management is easily performed. In particular, Klebsiella oxytoka (Klebsiella o
xytoca) ATCC 13182 strain has many studies as nitrogen fixing bacteria, and its safety has been pointed out.

【0017】クレブシエラ(Klebsiella)属
に属する微生物の培養物に含まれる多糖類は、C
2+、Mg2+などのカチオンの共存のもとで微生物
の凝集能を有するとともに、様々な微生物を植物体へ付
着をさせるのにも有効である。従って、本発明のクレブ
シエラ(Klebsiella)属に属する微生物の培
養物からなる植物成長促進剤、植物成長促進助剤は、凝
集効果を必要とする場合、Ca2+、Mg2+などのカ
チオンの共存した形で用いることが好ましい。
Polysaccharides contained in cultures of microorganisms belonging to the genus Klebsiella are C
It has the ability to aggregate microorganisms in the presence of cations such as a 2+ and Mg 2+ , and is also effective for attaching various microorganisms to plants. Therefore, the plant growth promoter and the plant growth promoter of the present invention comprising a culture of a microorganism belonging to the genus Klebsiella may have a coexistence of cations such as Ca 2+ and Mg 2+ when an aggregating effect is required. It is preferable to use them.

【0018】本発明のクレブシエラ(Klebsiel
la)属に属する微生物の培養物から得られる多糖類と
シュードモナス(Pseudomonas)属に属する
微生物の培養物からなる植物成長促進剤は、上記クレブ
シエラ(Klebsiella)属に属する微生物の培
養物から得られる多糖類とシュードモナス(Pseud
omonas)属に属する微生物の培養物との混合物で
ある。シュードモナス(Pseudomonas)属に
属する微生物の培養物について以下に説明する。シュー
ドモナス(Pseudomonas)属に属する微生物
としては、例えば、シュードモナス・フルオレッセンス
(Pseudomonas fluorescens)
に属する微生物を用いることができる。シュードモナス
属に属する微生物としては、好ましくは、ピオルテオリ
ン、2,4−ジアセチルフロログルシノール及びN−
(3−オキソドデカノイル)−L−ホモセリンラクトン
の生産能を有するシュードモナス・フルオレッセンス
(Pseudomonas fluorescens)
に属する微生物を挙げることができ、特に好ましい例と
してシュードモナス・フルオレッセンスS272菌株を
挙げることができる。シュードモナス・フルオレッセン
ス(Pseudomonasfluorescens)
S272菌株は、平成10年8月26日に通商産業省工
業技術院生命工学技術研究所にFERM P−1696
2として寄託されている。
The Klebsiel of the present invention
la) A plant growth promoter comprising a polysaccharide obtained from a culture of a microorganism belonging to the genus and a culture of a microorganism belonging to the genus Pseudomonas is a polysaccharide obtained from a culture obtained from the culture of the microorganism belonging to the genus Klebsiella. Sugars and Pseudomonas (Pseud
omonas) mixture with a culture of a microorganism belonging to the genus Omonas. A culture of a microorganism belonging to the genus Pseudomonas will be described below. Examples of microorganisms belonging to the genus Pseudomonas include, for example, Pseudomonas fluorescens.
Can be used. Preferred microorganisms belonging to the genus Pseudomonas include piorteoline, 2,4-diacetylphloroglucinol and N-
Pseudomonas fluorescens capable of producing (3-oxododecanoyl) -L-homoserine lactone
And particularly preferred examples include Pseudomonas fluorescens S272 strain. Pseudomonas fluorescens
The S272 strain was transferred to FERM P-1696 on August 26, 1998 by the Ministry of International Trade and Industry, National Institute of Advanced Industrial Science and Technology.
Deposited as No. 2.

【0019】シュードモナス属に属する微生物の培養に
は、一般的な微生物の培養方法を用いることができる。
好ましくは、液体培養による振とう培養、通気攪拌培養
などの好気的条件下で培養を行う。シュードモナス属に
属する微生物を栄養培地に接種し、好気的に培養し菌体
を増殖させる。培養は、後述するようにストレス負荷状
態下で行う。
For culturing microorganisms belonging to the genus Pseudomonas, a general method for culturing microorganisms can be used.
Preferably, the culture is performed under aerobic conditions such as shaking culture by liquid culture and aeration and agitation culture. A microorganism belonging to the genus Pseudomonas is inoculated into a nutrient medium, and cultured aerobically to grow the cells. The culturing is performed under a stress load state as described later.

【0020】培養に用いることができる培地は、特に限
定されることはなく、シュードモナス属に属する微生物
が利用できる栄養源を含有する培地であればよい。この
ような培地として各種合成培地、半合成培地、天然培地
などを挙げることができる。培地組成に炭素源、窒素源
を用いることができる。炭素源としては、例えば、エタ
ノール、グルコース、シュークロース、水あめ、糖み
つ、デキストリン、澱粉、グリセロール、動物油、植物
油などを単独または組み合わせて使用することができ
る。また、窒素源としては、大豆粉、小麦胚芽、コーン
ステープリカー、綿実粕、肉エキス、ペプトン、酵母エ
キス、尿素、硫酸アンモニウムなどを単独または組み合
わせて使用することができる。また必要に応じて、塩化
ナトリウム、硫酸マグネシウム、炭酸カルシウム、リン
酸塩、金属塩などの無機酸塩を加えることができる。
The medium that can be used for the culture is not particularly limited, and may be any medium containing a nutrient that can be used by microorganisms belonging to the genus Pseudomonas. Examples of such media include various synthetic media, semi-synthetic media, and natural media. A carbon source and a nitrogen source can be used for the medium composition. As the carbon source, for example, ethanol, glucose, sucrose, syrup, molasses, dextrin, starch, glycerol, animal oil, vegetable oil and the like can be used alone or in combination. As the nitrogen source, soybean flour, wheat germ, corn staple liquor, cottonseed meal, meat extract, peptone, yeast extract, urea, ammonium sulfate and the like can be used alone or in combination. If necessary, an inorganic acid salt such as sodium chloride, magnesium sulfate, calcium carbonate, phosphate, and metal salt can be added.

【0021】培養条件は、用いる菌株が良好に生育して
上記抗生物質、シグナル物質を生産し得る範囲で適宜選
択することができる。培養条件は、また、使用するシュ
ードモナス属に属する微生物の特性、外部条件などに応
じて適宜変更できる。具体的に、シュードモナス・フル
オレッセンスS272株の場合、培地のpHは、6〜8
程度である。通常、中性付近とすることが好ましい。培
養温度は、微生物が良好に生育する温度である。すなわ
ち、培養温度は、15℃〜30℃で、好ましくは25℃
〜28℃である。培養時間は、他の培養条件によっても
左右されるが、一般には、2〜10日間程度でよく、好
ましくは、3〜5日間である。
Culture conditions can be appropriately selected within a range in which the strain used can grow well and produce the above antibiotics and signal substances. The culture conditions can be appropriately changed according to the characteristics of the microorganism belonging to the genus Pseudomonas to be used, external conditions, and the like. Specifically, in the case of Pseudomonas fluorescens S272 strain, the pH of the medium is 6-8.
It is about. Usually, it is preferable to be near neutral. The culture temperature is a temperature at which the microorganism grows well. That is, the culture temperature is 15 ° C to 30 ° C, preferably 25 ° C.
~ 28 ° C. The culturing time depends on other culturing conditions, but is generally about 2 to 10 days, preferably 3 to 5 days.

【0022】シュードモナス・フルオレッセンスS27
2株の培養は、培養期間の少なくとも一部をストレス負
荷状態下で行うことが好ましい。培養の少なくとも一部
で足り、全体をストレス負荷状態下で行う必要は必ずし
もない。ストレス負荷とは、生物にとり生育を抑制する
ストレス因子を負荷することであるということができ
る。このストレス因子は、例えば、高濃度の水溶性有機
溶媒、塩類、糖類、アミノ酸などの添加の他、加熱、冷
凍処理などを挙げることができる。水溶液有機溶媒とし
て、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロ
パノールなどのアルコール類、アセトンなどのケトン
類、酢酸エチルなどのエステル類などを挙げることがで
きる。塩類としては、塩化ナトリウム、塩化カリウム、
塩化カルシウム、塩化アンモニウム、硫酸ナトリウム、
硫酸カリウム、硫酸アンモニウムなどを挙げることがで
きる。またストレス因子が加熱、冷凍処理などによる場
合、培養の途中で、培養温度を急激に変化させることが
好ましい。
Pseudomonas fluorescens S27
The culturing of the two strains is preferably performed at least partly during the culturing period under a stress-loaded state. It is not necessary that at least a part of the culture be sufficient, and that the whole be performed under stress. It can be said that stress loading is to load an organism with a stress factor that suppresses growth. Examples of the stress factor include addition of a high-concentration water-soluble organic solvent, salts, saccharides, and amino acids, as well as heating and freezing. Examples of the aqueous organic solvent include alcohols such as methanol, ethanol, propanol and isopropanol, ketones such as acetone, and esters such as ethyl acetate. Salts include sodium chloride, potassium chloride,
Calcium chloride, ammonium chloride, sodium sulfate,
Potassium sulfate, ammonium sulfate and the like can be mentioned. When the stress factor is caused by heating, freezing, or the like, it is preferable to rapidly change the culture temperature during the culture.

【0023】上述の培養条件により、培養液中のピオル
テオリン、2,4−ジアセチルフロログルシノール等の
抗生物質及びシグナル物質であるN−(3−オキソドデ
カノイル)−L−ホモセリンラクトンの蓄積量が最大と
なった時に培養を停止し、培養液を得ることができる。
Under the above-mentioned culture conditions, the amount of accumulated antibiotics such as pioluteolin and 2,4-diacetylphloroglucinol and N- (3-oxododecanoyl) -L-homoserine lactone as a signal substance in the culture medium. Is stopped, the culture is stopped, and a culture solution can be obtained.

【0024】本発明の植物生育促進剤は、上記方法でシ
ュードモナス属に属する微生物を培養して得られた培養
物と、前記クレブシエラ(Klebsiella)属に
属する微生物の培養物から得られる多糖類との混合物か
らなる。シュードモナス属に属する微生物を培養して得
られた培養物は、そのまま植物成長促進剤として用いて
も良いが、クレブシエラ(Klebsiella)属に
属する微生物の培養物から得られる多糖類の場合と同様
に、培養液を凍結乾燥したり、微生物菌体を、マイクロ
波などによる乾燥菌体として保存し、凍結乾燥させた培
養液や、乾燥菌体を水に懸濁して植物成長促進剤として
用いることもできる。尚、シュードモナス属に属する微
生物の培養液等は、ストレス因子として、エタノールを
用いて得たものを利用することが好ましい。ストレス因
子として、塩化ナトリウムを添加する場合、培養液を脱
塩処理する必要が生じる可能性があり、また、ストレス
因子として加熱処理する場合、培養の規模が大きくなる
と対応しにくくなるからである。
The plant growth promoter of the present invention comprises a culture obtained by culturing a microorganism belonging to the genus Pseudomonas by the above method, and a polysaccharide obtained from a culture of the microorganism belonging to the genus Klebsiella. Consists of a mixture. A culture obtained by culturing a microorganism belonging to the genus Pseudomonas may be used as a plant growth promoter as it is, but as in the case of a polysaccharide obtained from a culture of a microorganism belonging to the genus Klebsiella, The culture solution may be freeze-dried, or the microbial cells may be stored as dried cells by microwaves or the like, and the freeze-dried culture solution or the dried cells may be suspended in water and used as a plant growth promoter. . In addition, as a culture solution or the like of a microorganism belonging to the genus Pseudomonas, it is preferable to use one obtained using ethanol as a stress factor. This is because when sodium chloride is added as a stress factor, it is necessary to desalinate the culture solution, and when heat treatment is performed as a stress factor, it becomes difficult to cope with a large-scale culture.

【0025】本発明のクレブシエラ(Klebsiel
la)属に属する微生物の培養物から得られる多糖類と
シュードモナス(Pseudomonas)属に属する
微生物の培養物からなる植物成長促進剤は、何倍かに希
釈して用いても良く、また、植物成長促進効果を減少し
ない程度に、その他の添加物を加えることもできる。
The Klebsiel of the present invention
la) A polysaccharide obtained from a culture of a microorganism belonging to the genus and a plant growth promoter comprising a culture of a microorganism belonging to the genus Pseudomonas may be used after being diluted several times. Other additives can be added to such an extent that the promoting effect is not reduced.

【0026】[0026]

【実施例】以下実施例により本発明をさらに詳細に説明
する。 実施例1 K.pneumoniae H12株発酵生
産条件検討 多糖類生産のための炭素源と窒素源を最適化した。K.
pneumoniae H12株を50mlのMY培地
(0.3%酵母エキス、0.3%麦芽エキス、0.5%
ポリペプトン、1%グルコース)を含む500mlフラ
スコで一夜振とう培養した。70mlの生産培地(3%
炭素源,1%窒素源,0.05%KHPO,0.0
5%MgSO・7HO,0.2%NaCl,0.2
%CaCO)を含む500mlのフラスコで3日振と
う培養した。多糖類の定量はエタノール沈殿精製操作後
の乾燥重量で測定した。すなわち、培養液30mlを3
000rpmで15分遠心した。上清液に60mlのエ
タノールを添加し、4℃で一夜放置した。沈殿を300
0rpmで15分遠心することで取得し、吸引乾燥後定
量した。その結果、H12株はエタノール培地特異的に
多糖類を3.0g/lの濃度で菌体外生産した(表
1)。グリセリンやグルコースの単独炭素源では、菌体
外生産量は低かった。窒素源としては、ポリペプトン、
酵母エキス、大豆粉のいずれも良好であった。また、培
養温度を検討したところ、37℃以上では多糖類の生産
はなかった。
The present invention will be described in more detail with reference to the following examples. Example 1 K. Examination of fermentation production conditions of pneumoniae H12 strain The carbon source and nitrogen source for polysaccharide production were optimized. K.
pneumoniae H12 strain in 50 ml of MY medium (0.3% yeast extract, 0.3% malt extract, 0.5%
Shake culture overnight in a 500 ml flask containing polypeptone (1% glucose). 70 ml of production medium (3%
Carbon source, 1% nitrogen source, 0.05% K 2 HPO 4 , 0.0
5% MgSO 4 · 7H 2 O , 0.2% NaCl, 0.2
% CaCO 3 ) in a 500 ml flask with shaking for 3 days. The quantification of the polysaccharide was measured by the dry weight after the ethanol precipitation purification operation. That is, 30 ml of the culture solution is
Centrifugation was performed at 000 rpm for 15 minutes. 60 ml of ethanol was added to the supernatant and left at 4 ° C. overnight. 300 precipitates
It was obtained by centrifugation at 0 rpm for 15 minutes, quantified after suction drying. As a result, the H12 strain produced extracellular polysaccharide at a concentration of 3.0 g / l in an ethanol medium-specific manner (Table 1). Extracellular production was low with a single carbon source of glycerin or glucose. As a nitrogen source, polypeptone,
Both yeast extract and soy flour were good. When the culture temperature was examined, no polysaccharide was produced at 37 ° C. or higher.

【0027】[0027]

【表1】 [Table 1]

【0028】実施例2 発酵生産と精製 K.pneumoniae H12株を50mlのMY
培地(0.3%酵母エキス、0.3%麦芽エキス、0.
5%ポリペプトン、1%グルコース)を含む500ml
フラスコで一夜振とう培養した。1.5Lの生産培地を
含む3Lのミニジャーファーメンターに1%シードし、
28℃、0.5vvmの空気通気、300rpmのプロ
ペラ攪拌で3日培養した。培養液を遠心ろ過し、上清に
2倍体積量のエタノールを添加し、一晩4℃に保ち静置
した。遠心ろ過し、沈殿を1Lの脱イオン水に溶解し、
再び2倍量のエタノールで沈殿させた。吸引乾燥後、
3.57gの白い粉末を得た。植物成長促進剤及び植物
成長促進助剤としての使用にはこの精製度で十分ではあ
る。但し、さらに純度の高いものを得る目的で、10g
/lになるように脱イオン水に再溶解し、1000ml
のセファデックスG−100にチャージし、脱イオン水
を流し、非保持画分を集めた。溶出液の2倍量のエタノ
ール添加で沈殿し、減圧乾燥して標品とした。分子量は
デキストラン(M.W.200,000)より大きかっ
た。100℃で熱することと、超音波処理を施すことに
より、5g/lまでの水溶解性が得られた。
Example 2 Fermentation Production and Purification pneumoniae H12 strain in 50 ml of MY
Medium (0.3% yeast extract, 0.3% malt extract, 0.
500ml containing 5% polypeptone, 1% glucose)
The cells were cultured in a flask with shaking overnight. 1% seed 3 L mini jar fermenter with 1.5 L production medium,
The cells were cultured at 28 ° C. for 3 days with aeration of 0.5 vvm and stirring with a propeller at 300 rpm. The culture solution was subjected to centrifugal filtration, and a 2-fold volume of ethanol was added to the supernatant. Centrifugal filtration, dissolve the precipitate in 1 L of deionized water,
The precipitate was again precipitated with twice the amount of ethanol. After suction drying,
3.57 g of a white powder were obtained. This degree of purification is sufficient for use as a plant growth promoter and a plant growth promoter. However, for the purpose of obtaining a higher purity, 10 g
/ L and re-dissolve in deionized water to 1000 ml
Sephadex G-100 was charged, and deionized water was allowed to flow to collect non-retained fractions. A precipitate was obtained by adding ethanol twice the amount of the eluate, and dried under reduced pressure to obtain a sample. The molecular weight was greater than Dextran (MW 200,000). Heating at 100 ° C. and sonication resulted in a water solubility of up to 5 g / l.

【0029】実施例3 他のKlebsiella菌株
の多糖類生産 表2に示す各株を50mlのMY培地(0.3%酵母エ
キス、0.3%麦芽エキス、0.5%ポリペプトン、1
%グルコース)を含む500mlフラスコで一夜振とう
培養した。70mlの生産培地(2%エタノール,1%
グリセリン,0.5%酵母エキス,0.5%ポリペプト
ン,0.05%KHPO,0.05%MgSO
7HO,0.5%NaCl,0.2%CaCO)を
含む500mlのフラスコで3日振とう培養した。その
結果、凝集性多糖類の生産はK.oxytocaATC
C 13182株でもK.pneumoniae H1
2株と同程度認められた。
Example 3 Production of polysaccharides from other Klebsiella strains Each strain shown in Table 2 was treated with 50 ml of MY medium (0.3% yeast extract, 0.3% malt extract, 0.5% polypeptone, 1%).
% Glucose) in a 500 ml flask containing shaking overnight. 70 ml of production medium (2% ethanol, 1%
Glycerin, 0.5% yeast extract, 0.5% polypeptone, 0.05% K 2 HPO 4 , 0.05% MgSO 4.
The cells were shake-cultured for 3 days in a 500 ml flask containing 7H 2 O, 0.5% NaCl, 0.2% CaCO 3 ). As a result, the production of cohesive polysaccharides was oxytocaATC
Even with the C13182 strain, K.K. pneumoniae H1
As much as two strains were recognized.

【0030】[0030]

【表2】 [Table 2]

【0031】参考例1 P.fluorescens
S272菌液の調製 P.fluorescens S272菌株(FERM
P−16962)を50mlのYSE培地(2%(V
/V)エタノール、0.3%酵母エキス、0.3%大豆
粉、0.05%KHPO,0.05%MgSO
7HO,0.2%NaCl,0.2%CaCO)を
含む500mlのフラスコで2日振とう培養してP.f
luorescens S272菌液を得た。
Reference Example 1 fluorescens
Preparation of bacterial solution of S272 fluorescens S272 strain (FERM)
P-16962) in 50 ml of YSE medium (2% (V
/ V) ethanol, 0.3% yeast extract, 0.3% soy flour, 0.05% K 2 HPO 4 , 0.05% MgSO 4.
7H 2 O, 0.2% NaCl, 0.2% CaCO 3 ) in a 500 ml flask containing shake culture for 2 days. f
fluorescens S272 was obtained.

【0032】実施例4 P.fluorescens
S272菌液のカイワレ成長促進への効果 6穴のプレートに脱脂綿を敷き、10mlの水で湿ら
せ、10粒のカイワレ種を播種した。28℃光照射下で
栽培し、2日後に表に示す量のP.fluoresce
ns S272培養液(参考例1)とK.pneumo
niae H12株培養液から得られる多糖類(実施例
2)の1%水溶液を適当量添加し、さらにCaCO
0mgを懸濁液の形で添加した。さらに3日栽培した時
の茎の平均伸長(mm)を計測した。その結果、表3に
示すように、S272培養液を添加しない場合は、K.
pneumoniae H12株培養物からの多糖類に
よる成長促進はなかった。S272菌液を添加した場合
にはそれだけでも生長促進作用があるが、K.pneu
moniae H12株培養物からの多糖類によりさら
に成長促進した。S272培養液の添加量は10〜10
0μlの範囲が良く、K.pneumoniae H1
2株培養物からの多糖類の添加量は10〜100ppm
の範囲で良好な結果が得られた。
Example 4 fluorescens
Effect of S272 Bacterial Solution on Promotion of Kaiware Growth Absorbent cotton was spread on a 6-hole plate, moistened with 10 ml of water, and 10 seeds of Kaiware were seeded. After cultivation under light irradiation at 28 ° C., the amount of P. fluoresce
ns S272 culture solution (Reference Example 1) and K. pneumo
An appropriate amount of a 1% aqueous solution of a polysaccharide (Example 2) obtained from the culture solution of Niae H12 strain was added, and CaCO 3 1
0 mg was added in the form of a suspension. Further, the average elongation (mm) of the stem when cultivated for 3 days was measured. As a result, as shown in Table 3, when the S272 culture solution was not added,
There was no growth promotion by polysaccharides from pneumoniae strain H12 cultures. When the S272 bacterial solution is added, it alone has a growth promoting action. pneu
The growth was further enhanced by polysaccharides from the culture of Moniae H12. The addition amount of the S272 culture solution is 10 to 10
The range of 0 μl is good. pneumoniae H1
The amount of polysaccharide added from two strain cultures is 10 to 100 ppm
In the range, good results were obtained.

【0033】[0033]

【表3】 [Table 3]

【0034】実施例5 P.fluorescens
S272菌液のカイワレ食塩耐性への効果 6穴のプレートに脱脂綿を敷き、10mlの水で湿ら
せ、10粒のカイワレ種を播種した。28℃光照射下
で、2日後に表に示す量のP.fluorescens
S272培養液(参考例1)とK.pneumoni
ae H12株培養液から得られる多糖類(実施例2)
の1%水溶液を適当量添加し、さらにCaCOを10
mg懸濁液の形で添加した。翌日食塩を2%になるよう
に添加し、さらに2日栽培した時の茎の平均伸長(m
m)を計測した。その結果、表4に示すように、S27
2菌液を添加しない場合でもH12株培養物からの多糖
類添加による成長促進があった。S272菌液を添加し
た場合にはそれだけでも生長促進作用があるが、H12
株培養物からの多糖類添加によりさらに成長促進した。
S272培養液の添加量は10〜100μlの範囲が良
く、H12株培養物からの多糖類の添加量は10〜10
0ppmの範囲で良好な結果が得られた。このように、
S272培養液とH12株多糖類の併用では、塩無添加
の通常の栽培に比較し、約80%の生育速度が得られ、
塩害を軽減する事が出来る。
Example 5 fluorescens
Effect of S272 Bacterial Solution on Kaiware Salt Resistance A 6-well plate was covered with absorbent cotton, moistened with 10 ml of water, and 10 seeds of Kaiware were seeded. Under light irradiation at 28 ° C., the amount of P.P. fluorescens
S272 culture solution (Reference Example 1) and K. pneumoni
Polysaccharide obtained from aeH12 strain culture solution (Example 2)
By adding an appropriate amount of an aqueous solution of 1%, further CaCO 3 10
mg in the form of a suspension. The next day, salt was added to 2%, and the average elongation (m
m) was measured. As a result, as shown in Table 4, S27
Even when the two bacterial solutions were not added, the growth was promoted by adding the polysaccharide from the H12 strain culture. When the S272 bacterial solution is added, it alone has a growth promoting action.
Growth was further promoted by the addition of polysaccharide from the strain culture.
The addition amount of the S272 culture solution is preferably in the range of 10 to 100 μl, and the addition amount of the polysaccharide from the H12 strain culture was 10 to 10 μl.
Good results were obtained in the range of 0 ppm. in this way,
With the combined use of the S272 culture solution and the H12 strain polysaccharide, a growth rate of about 80% was obtained as compared with normal cultivation without salt,
Salt damage can be reduced.

【0035】[0035]

【表4】 [Table 4]

【0036】実施例6 P.fluorescens
S272菌液の千日紅のポット栽培への効果 4ヶ月間の屋外ポット土壌試験を行った。25cm草丈
で1区画5連で試験を行なった。5日おきにS272培
養液の所定希釈液とH12株培養物から得られた多糖類
液を各10ml散布した。その結果、菌液の草丈への効
果があり、50ppmのH12株培養物から得られた多
糖類液の併用により効果増強が認められた(図1,
2)。また、図示していないが、葉数、分枝数、開花数
いずれにも効果が認められた。
Example 6 fluorescens
Effect of S272 Bacterial Solution on Aspergillus pot cultivation A four-month outdoor pot soil test was performed. The test was performed in 5 sections per section at 25 cm plant height. Every 5 days, a predetermined dilution of the S272 culture solution and 10 ml of the polysaccharide solution obtained from the H12 strain culture were sprayed. As a result, the bacterial solution had an effect on the plant height, and the effect was enhanced by the combined use of a polysaccharide solution obtained from the H12 strain culture at 50 ppm (FIG. 1, FIG. 1).
2). In addition, although not shown, effects were observed in all of the number of leaves, the number of branches, and the number of flowers.

【0037】[0037]

【発明の効果】本発明によれば、クレブシエラ(Kle
bsiella)属に属する微生物の培養物から得られ
る多糖類からなる、植物育成のための共生制御に有用な
新たな薬剤を提供することができる。さらに本発明によ
れば、クレブシエラ(Klebsiella)属に属す
る微生物の培養物から得られる多糖類とS272株を含
むシュードモナス(Pseudomonas)属に属す
る微生物の培養物を成分として含む、より効果の高い植
物成長促進剤を提供することができる。特に、クレブシ
エラ(Klebsiella)属に属する微生物の培養
物から得られる多糖類に、植物体の病原菌や腐敗菌の感
染防止に有効であるP.fluorescens S2
72株を併用することで、優れた成長促進効果が得られ
る。また、植物体にシュードモナス(Pseudomo
nas)属に属する微生物の培養物と、クレブシエラ
(Klebsiella)属に属する微生物の培養物か
ら得られる多糖類とを与え、Ca2+、Mg2+などの
カチオンをpH7以上で共存させることにより、これら
の成分が凝集し、共生状態を強固にすることもできる。
According to the present invention, Klebsiella (Kle)
The present invention can provide a novel agent comprising a polysaccharide obtained from a culture of a microorganism belonging to the genus bsiella) and useful for controlling symbiosis for plant growth. Further, according to the present invention, a more effective plant growth comprising, as components, a polysaccharide obtained from a culture of a microorganism belonging to the genus Klebsiella and a culture of a microorganism belonging to the genus Pseudomonas including strain S272. An accelerator can be provided. In particular, polysaccharides obtained from cultures of microorganisms belonging to the genus Klebsiella are useful for preventing the infection of pathogenic bacteria and spoilage bacteria in plants. fluorescens S2
By using 72 strains in combination, an excellent growth promoting effect can be obtained. In addition, Pseudomonas (Pseudomo
and culture of a microorganism belonging to nas) genus, giving a polysaccharide derived from a culture of a microorganism belonging to Klebsiella (Klebsiella) genus, Ca 2+, by coexistence with the cations such as Mg 2+ pH 7 or more, of these Ingredients can be aggregated to strengthen the symbiotic state.

【図面の簡単な説明】[Brief description of the drawings]

【図1】 実施例6で得られたP.fluoresce
ns S272菌液の千日紅のポット栽培への効果の試
験結果。
FIG. 1 is a graph showing the P.P. fluoresce
Test results of the effect of ns S272 bacterial solution on pot cultivation of Aspergillus niger.

【図2】 実施例6で得られたP.fluoresce
ns S272菌液の千日紅のポット栽培への効果の試
験結果。
FIG. 2 shows a graph of P. fluoresce
Test results of the effect of ns S272 bacterial solution on pot cultivation of Aspergillus niger.

Claims (8)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項1】 クレブシエラ(Klebsiella)
属に属する微生物の培養物から得られる多糖類を含む植
物成長促進剤または植物成長促進助剤。
1. Klebsiella
A plant growth promoter or a plant growth promoter comprising a polysaccharide obtained from a culture of a microorganism belonging to the genus.
【請求項2】 クレブシエラ(Klebsiella)
属に属する微生物が、クレブシエラ・ニュウモニアエ
(Klebsiella pneumoniae)また
はクレブシエラ・オキシトカ(Klebsiella
oxytoca)に属する微生物である請求項1に記載
の植物成長促進剤または植物成長促進助剤。
2. Klebsiella
The microorganism belonging to the genus is Klebsiella pneumoniae or Klebsiella oxytoca (Klebsiella).
The plant growth promoting agent or the plant growth promoting auxiliary according to claim 1, which is a microorganism belonging to oxytoca).
【請求項3】 クレブシエラ(Klebsiella)
属に属する微生物が、クレブシエラ・ニュウモニアエ
(Klebsiella pneumoniae)H1
2株(FERM P− )またはクレブシエラ・
オキシトカ(Klebsiella oxytoca)
ATCC13182株である請求項1または2に記載の
植物成長促進剤または植物成長促進助剤。
3. Klebsiella
The microorganism belonging to the genus is Klebsiella pneumoniae H1
2 strains (FERMP-) or Klebsiella
Oxytoka (Klebsiella oxytoca)
The plant growth promoting agent or plant growth promoting agent according to claim 1 or 2, which is ATCC 13182 strain.
【請求項4】 クレブシエラ(Klebsiella)
属に属する微生物の培養物から得られる多糖類とシュー
ドモナス(Pseudomonas)属に属する微生物
の培養物からなる植物成長促進剤。
4. Klebsiella
A plant growth promoter comprising a polysaccharide obtained from a culture of a microorganism belonging to the genus and a culture of a microorganism belonging to the genus Pseudomonas.
【請求項5】 クレブシエラ(Klebsiella)
属に属する微生物が、クレブシエラ・ニュウモニアエ
(Klebsiella pneumoniae)また
はクレブシエラ・オキシトカ(Klebsiella
oxytoca)に属する微生物である請求項4に記載
の植物成長促進剤。
5. Klebsiella
The microorganism belonging to the genus is Klebsiella pneumoniae or Klebsiella oxytoca (Klebsiella).
The plant growth promoter according to claim 4, which is a microorganism belonging to oxytoca).
【請求項6】 クレブシエラ(Klebsiella)
属に属する微生物が、クレブシエラ・ニュウモニアエ
(Klebsiella pneumoniae)H1
2株(FERM P− )またはクレブシエラ・
オキシトカ(Klebsiella oxytoca)
ATCC13182株である請求項4または5に記載の
植物成長促進剤。
6. Klebsiella
The microorganism belonging to the genus is Klebsiella pneumoniae H1
2 strains (FERMP-) or Klebsiella
Oxytoka (Klebsiella oxytoca)
The plant growth promoter according to claim 4 or 5, which is ATCC 13182 strain.
【請求項7】 シュードモナス(Pseudomona
s)属に属する微生物がシュードモナス・フルオレッセ
ンス(Pseudomonas fluorescen
s)に属する微生物である請求項4〜6のいずれか1項
に記載の植物成長促進剤。
7. A pseudomonas (Pseudomona)
s) The microorganism belonging to the genus is Pseudomonas fluorescens.
The plant growth promoter according to any one of claims 4 to 6, which is a microorganism belonging to s).
【請求項8】 シュードモナス(Pseudomona
s)属に属する微生物が、シュードモナス・フルオレッ
センス(Pseudomonas fluoresce
ns)S272株(FERM P−16962)である
請求項4〜7のいずれか1項に記載の植物成長促進剤。
8. Pseudomonas
s) The microorganism belonging to the genus is Pseudomonas fluorescein.
(ns) S272 strain (FERM P-16962). The plant growth promoter according to any one of claims 4 to 7.
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