JP2000292420A - Method for sampling serum or plasma and reagent for separating serum or plasma - Google Patents
Method for sampling serum or plasma and reagent for separating serum or plasmaInfo
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Abstract
Description
【０００１】[0001]
【発明の属する技術分野】本発明は、血液検査等におい
て全血試料から血清もしくは血漿を採取する方法に関
し、より詳細には、遠心分離を行わずに短時間で血清も
しくは血漿を採取することを可能とする方法に関する。The present invention relates to a method for collecting serum or plasma from a whole blood sample in a blood test or the like, and more particularly, to a method for collecting serum or plasma in a short time without centrifugation. How to make it possible.
【０００２】[0002]
【従来の技術】血液検査分野では、血液を用いて人や動
物の種々の疾患の診断が行われている。この場合、全血
から、血清もしくは血漿を採取し、該血清もしくは血漿
を用いて検査が行われている。2. Description of the Related Art In the blood test field, various diseases of humans and animals are diagnosed using blood. In this case, serum or plasma is collected from whole blood, and a test is performed using the serum or plasma.
【０００３】従来、全血から血清や血漿を採取するに
は、以下のような方法が用いられていた。すなわち、血
漿を採取する場合には、血液にヘパリンやエチレンジア
ミン四酢酸（ＥＤＴＡ）などの抗凝固剤を加え、遠心分
離した後、上清すなわち、血漿を採取する。遠心分離に
際しては、予め遠心容器中に、比重が血漿と血球との間
に調整された酸化エラグ酸のような血漿分離剤を投入す
ることも試みられている。Conventionally, the following method has been used to collect serum or plasma from whole blood. That is, when collecting plasma, an anticoagulant such as heparin or ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) is added to blood, and after centrifugation, the supernatant, ie, plasma, is collected. At the time of centrifugation, attempts have been made to put a plasma separating agent such as oxidized ellagic acid, whose specific gravity is adjusted between plasma and blood cells, into a centrifugal container in advance.
【０００４】また、血清を得る場合には、血液にシリカ
などの凝固促進剤を加えて血球成分を凝集させた後、遠
心分離を行い、遠心分離後に上清、すなわち血清を採取
している。この場合においても、血漿の場合と同様に、
遠心分離に際しては、予め遠心容器中に、比重が血清と
血球との間に調整された酸化エラグ酸のような血清分離
剤を投入する方法も採用されている。[0004] When serum is obtained, a blood coagulation accelerator such as silica is added to blood to aggregate blood cell components, and then centrifuged. After centrifugation, a supernatant, that is, serum is collected. In this case, as in the case of plasma,
At the time of centrifugation, a method of introducing a serum separating agent such as oxidized ellagic acid, whose specific gravity is adjusted between serum and blood cells, into a centrifugal container in advance is also adopted.
【０００５】他方、特開平６−５８９２４号公報には、
ガラス繊維で作られたガラスペーパーを投入した採血管
に血液を採取した後、遠心分離操作を行って血清を採取
する方法が開示されている。On the other hand, JP-A-6-58924 discloses that
A method is disclosed in which blood is collected in a blood collection tube into which glass paper made of glass fiber has been put, and then centrifugation is performed to collect serum.
【０００６】上記先行技術に記載の方法では、ガラスペ
ーパーを構成しているガラス繊維がガラスペーパーから
分離することなく突出し、それによって血清中のフィブ
リンが該突出繊維に絡み易くなり、フィブリンの混入が
少ない血清を得ることができるとされている。In the method described in the above prior art, the glass fibers constituting the glass paper protrude without being separated from the glass paper, whereby the fibrin in the serum is easily entangled with the protruding fibers, and the contamination of the fibrin is reduced. It is said that a small amount of serum can be obtained.
【０００７】しかしながら、上述した各種血清もしくは
血漿採取方法では、遠心分離装置を必要とする。従っ
て、屋外や遠心分離器のない診療所などでは、血清や血
漿を採取することは非常に困難であった。このような場
合には、凝固促進剤などを用い、血液試料を３０分以上
静置し、上清と固形分とに分離し、上清を分取する方法
が採用されることもある。しかしながら、上清と固形分
とに分離するまでに長い時間がかかるため、緊急を要す
る場合にはそのような操作では血清もしくは血漿を速や
かに採取することができなかった。[0007] However, the above-mentioned various methods for collecting serum or plasma require a centrifugal separator. Therefore, it has been very difficult to collect serum or plasma outdoors or in clinics without a centrifuge. In such a case, a method in which a blood sample is allowed to stand for 30 minutes or more using a coagulation promoter or the like, separated into a supernatant and a solid content, and the supernatant is collected may be adopted. However, since it takes a long time to separate the supernatant and the solid, it is not possible to quickly collect serum or plasma by such an operation in an emergency.
【０００８】[0008]
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、上述
した欠点を解消し、遠心分離操作を行うことなく、血清
もしくは血漿を短時間で効率良く採取することを可能と
する方法及びそのような方法に用いることができる血清
もしくは血漿分離試薬を提供することにある。SUMMARY OF THE INVENTION An object of the present invention is to solve the above-mentioned drawbacks and to provide a method for efficiently collecting serum or plasma in a short time without performing a centrifugation operation. Another object of the present invention is to provide a serum or plasma separation reagent that can be used in various methods.
【０００９】[0009]
【課題を解決するための手段】本願の第１の発明に係る
血清または血漿採取方法は、抗赤血球抗体を用いて血液
中の赤血球を凝集させ、次に上清の血清または血漿を採
取することを特徴とする。According to a first aspect of the present invention, there is provided a serum or plasma collection method comprising agglutinating red blood cells in blood using an anti-red blood cell antibody, and then collecting serum or plasma of a supernatant. It is characterized by.
【００１０】第１の発明においては、好ましくは、抗赤
血球抗体として、不溶性担体に担持された抗赤血球抗体
が用いられる。また、好ましくは、上記不溶性担体とし
て、正の電荷を有するものが用いられる。In the first invention, preferably, an anti-red blood cell antibody carried on an insoluble carrier is used as the anti-red blood cell antibody. Preferably, a carrier having a positive charge is used as the insoluble carrier.
【００１１】本願の第２の発明に係る血清または血漿採
取方法は、正の電荷を有する不溶性担体を用いて赤血球
を凝集させ、次に上清の血清または血漿を採取すること
を特徴とする。[0011] The method for collecting serum or plasma according to the second invention of the present application is characterized in that red blood cells are aggregated using an insoluble carrier having a positive charge, and then the serum or plasma of the supernatant is collected.
【００１２】本願の第３の発明に係る血清もしくは血漿
分離試薬は、抗赤血球抗体を主成分とすることを特徴と
する。この場合、好ましくは、抗赤血球抗体は、不溶性
担体に担持されている。The serum or plasma separation reagent according to the third invention of the present application is characterized by containing an anti-red blood cell antibody as a main component. In this case, preferably, the anti-red blood cell antibody is carried on an insoluble carrier.
【００１３】本願の第４の発明に係る血清もしくは血漿
分離試薬は、正の電荷を有する不溶性担体を主成分とす
る。以下、本発明の詳細を説明する。[0013] The serum or plasma separation reagent according to the fourth invention of the present application contains an insoluble carrier having a positive charge as a main component. Hereinafter, details of the present invention will be described.
【００１４】本願発明者らは、遠心分離操作を行うこと
なく、速やかに全血試料から血清または血漿を採取する
方法について検討した結果、抗赤血球抗体あるいは正の
電荷を有する不溶性担体を血清もしくは血漿分離試薬と
して用いれば、遠心分離操作を行わずとも、血清もしく
は血漿を速やかに分離し得ることを見出し、本発明をな
すに至った。The present inventors have studied a method for rapidly collecting serum or plasma from a whole blood sample without performing a centrifugation operation. As a result, the inventors found that an anti-red blood cell antibody or a positively charged insoluble carrier could be used in serum or plasma. The present inventors have found that serum or plasma can be rapidly separated without using a centrifugal separation operation when used as a separation reagent, and the present invention has been accomplished.
【００１５】すなわち、本願の第１の発明に係る血清ま
たは血漿採取方法では、第３の発明に係る血清もしくは
血漿分離試薬の主成分である抗赤血球抗体を用いて、血
液中の赤血球が凝集される。この凝集は、赤血球と抗赤
血球抗体との抗原抗体反応によるものであり、従って凝
集は速やかに進み、遠心分離操作を行わずとも、５〜１
５分程度の短時間で赤血球が凝集する。従って、遠心分
離操作を行わずとも、容易に血清もしくは血漿を採取す
ることができる。That is, in the serum or plasma collection method according to the first invention of the present application, red blood cells in blood are agglutinated using an anti-red blood cell antibody which is a main component of the serum or plasma separation reagent according to the third invention. You. This agglutination is due to the antigen-antibody reaction between the red blood cells and the anti-red blood cell antibody.
Erythrocytes agglutinate in as little as 5 minutes. Therefore, serum or plasma can be easily collected without performing centrifugation.
【００１６】上記抗赤血球抗体としては、ウサギ、ヤ
ギ、めん羊またはマウスなどの動物に、使用する赤血球
を免疫することにより産生させればよい。上記抗赤血球
抗体を用いて血液中の赤血球を凝集させるには、抗体の
力価や動物種により異なるが、重量濃度比で、血液：抗
赤血球抗体＝１：１〜１：５００の範囲とすることが望
ましい。抗赤血球抗体の使用割合が上記範囲よりも少な
い場合には、凝集が速やかに進まず、上記範囲より多く
とも、凝集時間はそれ以上短くならない。The above-mentioned anti-erythrocyte antibody may be produced by immunizing an animal such as a rabbit, goat, sheep or mouse with the erythrocyte to be used. In order to agglutinate red blood cells in blood using the above-mentioned anti-red blood cell antibody, the blood: anti-red blood cell antibody is in the range of 1: 1 to 1: 500 by weight concentration ratio, depending on the antibody titer and animal species. It is desirable. When the use ratio of the anti-erythrocyte antibody is less than the above range, the aggregation does not proceed rapidly, and even if it is more than the above range, the aggregation time does not become shorter.
【００１７】第１の発明においては、上記のように、抗
赤血球抗体を血液と接触させ、血液中の赤血球を凝集さ
せることにより、上清と固形分とに分離される。この場
合、上清として、血清を得る場合には、従来法と同様に
血液にシリカなどの凝固促進剤を加えればよい。In the first invention, as described above, the anti-red blood cell antibody is brought into contact with blood, and the red blood cells in the blood are agglutinated to be separated into a supernatant and a solid content. In this case, when serum is obtained as a supernatant, a coagulation promoter such as silica may be added to blood as in the conventional method.
【００１８】また、血漿を得る場合には、血液にヘパリ
ンやＥＤＴＡなどの適宜の抗凝固剤を加えた後、血液を
混和した後、抗赤血球抗体と接触させればよい。第１の
発明に係る血清または血漿採取方法では、好ましくは、
上記抗赤血球抗体は、不溶性担体に担持されている。不
溶性担体としては、特に限定されるわけではないが、抗
赤血球抗体を容易に担持させ得る有機高分子粉末が好適
に用いられる。When plasma is obtained, an appropriate anticoagulant such as heparin or EDTA is added to blood, the blood is mixed, and the blood is brought into contact with an anti-red blood cell antibody. In the method for collecting serum or plasma according to the first invention, preferably,
The anti-red blood cell antibody is supported on an insoluble carrier. The insoluble carrier is not particularly limited, but an organic polymer powder capable of easily carrying an anti-red blood cell antibody is suitably used.
【００１９】上記有機高分子粉末としては、例えば、不
溶性アガロース、セルロース、不溶性デキストランなど
の天然高分子粉末；ポリスチレン、スチレン−スチレン
スルホン酸（塩）共重合体、スチレン−メタクリル酸共
重合体、アクリロニトリル−ブタジエン−スチレン共重
合体、塩化ビニル−アクリル酸エステル共重合体、酢酸
ビニル−アクリル酸エステル共重合体などの合成高分子
からなる粉末などを挙げることができる。特に、合成高
分子を均一に懸濁させたラテックスが好適に用いられ
る。Examples of the organic polymer powder include natural polymer powders such as insoluble agarose, cellulose, and insoluble dextran; polystyrene, styrene-styrenesulfonic acid (salt) copolymer, styrene-methacrylic acid copolymer, acrylonitrile Powders of synthetic polymers such as butadiene-styrene copolymers, vinyl chloride-acrylate copolymers, and vinyl acetate-acrylate copolymers. In particular, a latex in which a synthetic polymer is uniformly suspended is preferably used.
【００２０】上記不溶性担体は、通常の化学合成により
得ることができ、あるいは市販されているものを用いる
ことができる。また、不溶性担体を血液中で分散させる
ために、表面にスルホン酸基やカルボキシル基を導入し
た不溶性担体も用いることができる。The insoluble carrier can be obtained by ordinary chemical synthesis, or a commercially available one can be used. Further, in order to disperse the insoluble carrier in blood, an insoluble carrier having a sulfonic acid group or a carboxyl group introduced on its surface can also be used.
【００２１】なお、上記不溶性担体としてラテックスを
用いる場合、そのラテックスの粒径は０．１〜１００μ
ｍの範囲とすることが好ましい。第１の発明に係る血清
または血漿採取方法では、上記不溶性担体として、好ま
しくは正の電荷を有するものが用いられる。正の電荷を
有する不溶性担体としては、ｐＨ６〜８において正に荷
電する官能基を導入した有機高分子粉末からなる不溶性
担体が好適に用いられる。When latex is used as the insoluble carrier, the particle size of the latex is 0.1 to 100 μm.
m. In the method for collecting serum or plasma according to the first invention, a carrier having a positive charge is preferably used as the insoluble carrier. As the insoluble carrier having a positive charge, an insoluble carrier composed of an organic polymer powder into which a functional group positively charged at pH 6 to 8 is introduced is preferably used.
【００２２】このような有機高分子粉末としては、前述
した種々の有機高分子粉末を適宜用いることができ、こ
の場合においても、有機合成高分子粉末を均一に懸濁さ
せたラテックスが好適に用いられる。As the organic polymer powder, the various organic polymer powders described above can be appropriately used. In this case, a latex in which the organic synthetic polymer powder is uniformly suspended is preferably used. Can be
【００２３】また、正の電荷を有する不溶性担体の場合
には、表面の官能基が正の電荷を帯びておればよく、例
えばアミノ基やジエチルアミノ基などを有する不溶性担
体が好適に用いられる。In the case of an insoluble carrier having a positive charge, it is sufficient that the functional group on the surface has a positive charge. For example, an insoluble carrier having an amino group, a diethylamino group or the like is preferably used.
【００２４】本願の第２の発明に係る血清または血漿採
取方法では、血液に正の電荷を有する不溶性担体が接触
し、それによって赤血球の表面荷電が低下し、赤血球が
凝集する。この場合、正の電荷を有する不溶性担体とし
ては、上述した第１の発明において好ましく用いられる
正の電荷を有する不溶性担体を用いることができる。In the method for collecting serum or plasma according to the second aspect of the present invention, a positively charged insoluble carrier comes into contact with blood, whereby the surface charge of erythrocytes is reduced and erythrocytes are aggregated. In this case, as the insoluble carrier having a positive charge, the insoluble carrier having a positive charge, which is preferably used in the first aspect described above, can be used.
【００２５】第２の発明に係る不溶性担体においても、
好ましくは有機高分子からなるラテックスが用いられ、
この場合ラテックスの粒径は０．１〜１００μｍ程度で
あることが望ましい。In the insoluble carrier according to the second invention,
Preferably an organic polymer latex is used,
In this case, the particle size of the latex is desirably about 0.1 to 100 μm.
【００２６】上記正の電荷を有する不溶性担体の投入量
については、不溶性担体の種類や動物種によっても異な
るが、重量比で、血液：正の電荷を有する不溶性担体＝
１：０．０１〜１：０．２程度とすることが望ましい。The amount of the positively charged insoluble carrier varies depending on the type of the insoluble carrier and the animal species, but the weight ratio of blood: positive insoluble carrier =
It is desirable that the ratio be about 1: 0.01 to 1: 0.2.
【００２７】第２の発明では、正の電荷を有する不溶性
担体と、赤血球とが、電気的に引き合い、赤血球が不溶
性担体表面に速やかに凝集する。従って、遠心分離操作
を行わずとも、赤血球が速やかに凝集するため、血液を
上清と固形分とに分離することができる。この凝集時間
は、通常５〜１０分程度であり、非常に短い。In the second aspect, the insoluble carrier having a positive charge and the red blood cells are electrically attracted, and the red blood cells rapidly aggregate on the surface of the insoluble carrier. Therefore, the blood can be separated into the supernatant and the solid content because the red blood cells rapidly aggregate without performing the centrifugation operation. The aggregation time is usually about 5 to 10 minutes, which is very short.
【００２８】第２の発明においても、血清を得る場合に
は、血液にシリカなどの凝固促進剤を加え、しかる後血
液を混和し、正の電荷を有する不溶性担体と接触させ
て、赤血球を凝集させるとよい。また、血漿を採取する
場合には、血液に予めヘパリンやＥＤＴＡなどの抗凝固
剤を加え、混和し、しかる後正の電荷を有する不溶性担
体に接触させて赤血球を凝集させればよい。Also in the second invention, when serum is obtained, a coagulation promoter such as silica is added to blood, and then the blood is mixed and brought into contact with an insoluble carrier having a positive charge to agglutinate erythrocytes. It is good to let. When plasma is collected, an anticoagulant such as heparin or EDTA is added to blood in advance, mixed, and then brought into contact with a positively charged insoluble carrier to cause red blood cells to aggregate.
【００２９】なお、第１，第２の発明に係る血清または
血漿採取方法は、併用されてもよい。すなわち、抗赤血
球抗体と、正の電荷を有する不溶性担体の双方を血液中
に投入し、赤血球を凝集させてもよく、それによってよ
り一層速やかに血清または血漿と固形分とに分離するこ
とができる。The serum or plasma collection method according to the first and second inventions may be used in combination. That is, both the anti-erythrocyte antibody and the positively-charged insoluble carrier are put into the blood, and the erythrocytes may be agglutinated, whereby the serum or plasma and the solids can be separated more rapidly. .
【００３０】第３の発明に係る血清もしくは血漿分離試
薬は、上記抗赤血球抗体を主成分とすることを特徴と
し、このような抗赤血球抗体としては、上述したものを
用いることができる。また、第３の発明に係る分離試薬
では、好ましくは、上述したように、抗赤血球抗体は不
溶性担体に担持された状態とされる。The serum or plasma separation reagent according to the third invention is characterized by containing the above-mentioned anti-red blood cell antibody as a main component, and the above-mentioned anti-red blood cell antibody can be used. Further, in the separation reagent according to the third invention, preferably, as described above, the anti-red blood cell antibody is in a state of being supported on an insoluble carrier.
【００３１】第３の発明に係る血清もしくは血漿分離試
薬を用いることにより、第１の発明に従って、遠心分離
操作を行うことなく、赤血球を速やかに凝集させること
ができ、血清または血漿を速やかに採取することができ
る。By using the serum or plasma separation reagent according to the third invention, erythrocytes can be rapidly agglutinated without centrifugation according to the first invention, and the serum or plasma can be quickly collected. can do.
【００３２】また、第４の発明に係る血清もしくは血漿
分離試薬は、正の電荷を有する不溶性担体を主成分と
し、このような正の電荷を有する不溶性担体としては、
第２の発明に係る血清または血漿採取方法において説明
したものを用いることができる。Further, the serum or plasma separation reagent according to the fourth invention comprises an insoluble carrier having a positive charge as a main component, and such an insoluble carrier having a positive charge includes:
The method described in the method for collecting serum or plasma according to the second invention can be used.
【００３３】第４の発明に係る血清もしくは血漿分離試
薬は、上記正の電荷を有する不溶性担体を主成分とする
ので、第２の発明の場合と同様に、正の電荷を有する不
溶性担体により赤血球が速やかに凝集し、遠心分離操作
を行うことなく短時間で上清の血清または血漿を採取す
ることができる。Since the serum or plasma separation reagent according to the fourth invention comprises the above-mentioned positively charged insoluble carrier as a main component, the erythrocyte is separated by the positively charged insoluble carrier as in the case of the second invention. Rapidly agglutinate, and the serum or plasma of the supernatant can be collected in a short time without performing a centrifugation operation.
【００３４】第３，第４の発明に係る分離試薬は、それ
ぞれ、上記抗赤血球抗体や正の電荷を有する不溶性担体
を主成分として含むが、本発明の目的を阻害しない範囲
で、ポリエチレングリコール、プルラン、ポリビニルピ
ロリドンなどを含有していてもよい。Each of the separation reagents according to the third and fourth inventions contains the above-mentioned anti-erythrocyte antibody and a positively charged insoluble carrier as main components, respectively, as long as the object of the present invention is not impaired. It may contain pullulan, polyvinylpyrrolidone and the like.
【００３５】[0035]
【実施例】以下、本発明の具体的な実施例を挙げること
により、本発明をより詳細に説明する。Hereinafter, the present invention will be described in more detail by giving specific examples of the present invention.
【００３６】（実施例１）ＥＤＴＡ２Ｎａが１ｍｇ入れ
られているポリスチレン製の口径１２ｍｍ、長さ１１ｃ
ｍの採血管にヒトの血液１ｃｃを入れ、これに抗ヒト赤
血球ヤギ抗体５００μｇを入れ、１０分間放置した後、
上清と固形分とに完全に分離していることが確認された
ので、上清を分取することにより２００μＬの血漿を採
取することができた。Example 1 Polystyrene made of polystyrene containing 1 mg of EDTA2Na and having a diameter of 12 mm and a length of 11 c
1 cc of human blood into a blood collection tube of m, 500 μg of anti-human erythrocyte goat antibody, and left for 10 minutes.
Since it was confirmed that the supernatant and the solid content were completely separated, 200 μL of plasma could be collected by collecting the supernatant.
【００３７】（実施例２）ポリスチレン製の口径１２ｍ
ｍ、長さ１１ｃｍの採血管にヒトの血液１ｃｃを入れ、
これに正に荷電している官能基としてジエチルアミノエ
チル基を有する不溶性アガロース（ファルマシア社製、
商品名：ＤＥＡＥ−ｓｅｐｈａｃｅｌ）５００μｇを入
れ、１０分間放置した後、上清と固形分とに完全に分離
していることが確認されたので、上清を分取することに
より２００μＬの血漿を採取することができた。(Example 2) Polystyrene 12 m diameter
m, put 1cc of human blood into a blood collection tube 11cm in length,
Insoluble agarose having a diethylaminoethyl group as a positively charged functional group (manufactured by Pharmacia,
500 μg of trade name (DEAE-sephacel) was added, and after standing for 10 minutes, it was confirmed that the supernatant and the solid content were completely separated. 200 μL of plasma was collected by collecting the supernatant We were able to.
【００３８】（実施例３）アミノ基を官能基にもつポリ
スチレン製ラテックスビーズ（粒径０．４μｍ、商品
名：アミノラテックスＮ−４００、積水化学工業社製）
を０．０５重量％濃度となるように、１００ｍＭリン酸
ナトリウム緩衝液（ｐＨ＝７．０）１ｍＬに試験管内で
分散させた。しかる後、抗ヒト赤血球ヤキ抗体１ｍｇを
添加し、３７℃で２時間攪拌し、ラテックスビーズと抗
ヒト赤血球ヤギ抗体を物理吸着させ、その後１００００
ｒｐｍで試験管を１５分間旋回させた後上清を取り除い
た。Example 3 Polystyrene latex beads having an amino group as a functional group (particle size: 0.4 μm, trade name: amino latex N-400, manufactured by Sekisui Chemical Co., Ltd.)
Was dispersed in 1 mL of 100 mM sodium phosphate buffer (pH = 7.0) in a test tube so as to have a concentration of 0.05% by weight. Thereafter, 1 mg of anti-human erythrocyte goat antibody was added, and the mixture was stirred at 37 ° C. for 2 hours to physically adsorb the latex beads and the anti-human erythrocyte goat antibody.
After spinning the test tube for 15 minutes at rpm, the supernatant was removed.
【００３９】しかる後、１５０ｍＭリン酸ナトリウム緩
衝液（ｐＨ＝７．４）にポリエチレングリコール（平均
分子量１００００）を１．０重量％添加してなる溶液１
ｍＬに、上記上清を取り除いたポリスチレンラテックス
と抗ヒト赤血球ヤギ抗体が投入された抗赤血球抗体が担
持されたラテックス含有溶液を分散させ、凝集試薬とし
た。Thereafter, a solution 1 was prepared by adding 1.0% by weight of polyethylene glycol (average molecular weight: 10,000) to a 150 mM sodium phosphate buffer (pH = 7.4).
The polystyrene latex from which the supernatant was removed and a latex-containing solution carrying an anti-red blood cell antibody loaded with an anti-human erythrocyte goat antibody were dispersed in mL to obtain an agglutinating reagent.
【００４０】ポリスチレン製の口径１２ｍｍ、長さ１１
ｃｍの採血管にヒト血液を１ｃｃ入れ、次に上記凝集試
薬５００μＬを入れ、１０分間放置した。放置後、上清
と固形分とに分離していることが確認されたので、上清
を分取し、血漿のリン酸緩衝液稀釈液４００μＬを採取
することができた。Polystyrene diameter 12 mm, length 11
1 cc of human blood was placed in a blood collection tube of cm, then 500 μL of the agglutinating reagent was placed therein, and left for 10 minutes. After standing, it was confirmed that the supernatant was separated into solids. Therefore, the supernatant was separated and 400 μL of a diluted phosphate buffer solution of plasma could be collected.
【００４１】（比較例１）ガラス製の口径１２ｍｍ及び
長さ１１ｃｍの採血管に、ヒト血液１ｃｃを入れ、凝固
させた。１時間放置した後、上清として２００μＬの血
清を採取することができた。Comparative Example 1 1 cc of human blood was placed in a glass blood collection tube having a diameter of 12 mm and a length of 11 cm, and was allowed to coagulate. After standing for 1 hour, 200 μL of serum could be collected as supernatant.
【００４２】（比較例２）ポリスチレン製の口径１２ｍ
ｍ及び長さ１１ｃｍの採血管にＥＤＴＡ２Ｎａを１ｍｇ
添加し、しかる後ヒト血液１ｃｃを入れ、放置した。１
時間後に、上清として２００μＬの血漿を採取すること
ができた。(Comparative Example 2) 12 m diameter made of polystyrene
1 mg of EDTA2Na in a blood collection tube of m and 11 cm in length
After addition, 1 cc of human blood was added and allowed to stand. 1
After time, 200 μL of plasma could be collected as supernatant.
【００４３】上記のように、比較例１，２では、血清あ
るいは血漿を採取するのに、採血管を１時間放置するこ
とが必要であった。これに対して、上述した実施例１〜
３によれば、本発明に従って抗赤血球抗体あるいは正の
電荷を有する不溶性担体が用いられているので、血清あ
るいは血漿の採取に必要な時間を大幅に短縮し得ること
がわかる。As described above, in Comparative Examples 1 and 2, it was necessary to leave the blood collection tube for one hour to collect serum or plasma. On the other hand, in the above-described first to third embodiments,
According to No. 3, it can be seen that, since the anti-red blood cell antibody or the insoluble carrier having a positive charge is used according to the present invention, the time required for collecting serum or plasma can be greatly reduced.
【００４４】[0044]
【発明の効果】本願の第１の発明に係る血清または血漿
採取方法では、抗赤血球抗体を用いて血液中の赤血球が
凝集されるが、抗赤血球抗体と赤血球との反応が抗原抗
体反応であり、速やかに進むため、赤血球が短時間で凝
集する。従って、上清の血清または血漿を遠心分離操作
を行うことなく短時間で採取することができる。According to the method for collecting serum or plasma according to the first aspect of the present invention, red blood cells in blood are agglutinated using an anti-red blood cell antibody, but the reaction between the anti-red blood cell antibody and the red blood cells is an antigen-antibody reaction. Red blood cells agglutinate in a short time because they proceed quickly. Therefore, the serum or plasma of the supernatant can be collected in a short time without performing a centrifugation operation.
【００４５】第１の発明において、抗赤血球抗体とし
て、不溶性担体に担持された抗赤血球抗体を用いた場合
には、不溶性担体を介することにより、凝集の生成速度
を上げることができ、より迅速化することができ、凝集
時間を３〜５割短くすることが可能であり、４〜６分で
反応を終了することができる。In the first invention, when an anti-red blood cell antibody carried on an insoluble carrier is used as the anti-red blood cell antibody, the rate of agglutination generation can be increased by interposing the insoluble carrier, whereby the speed is increased. The aggregation time can be shortened by 30 to 50%, and the reaction can be completed in 4 to 6 minutes.
【００４６】また、上記不溶性担体として、正の電荷を
有するものを用いた場合には、不溶性担体の正の電荷に
よっても赤血球の凝集速度が高められるので、より一層
短時間で血清または血漿を採取することができる。When a positively charged carrier is used as the insoluble carrier, the red blood cell agglutination rate can be increased by the positive charge of the insoluble carrier, so that serum or plasma can be collected in a shorter time. can do.
【００４７】第２の発明に係る血清または血漿採取方法
では、正の電荷を有する不溶性担体を用いて赤血球が凝
集されるが、この不溶性担体の正の電荷により赤血球が
速やかに凝集する。従って、遠心分離操作を行わずと
も、短時間で上清と固形分とに分離することができ、上
清の血清または血漿を容易にかつ速やかに採取すること
ができる。In the method for collecting serum or plasma according to the second aspect of the present invention, red blood cells are agglutinated using an insoluble carrier having a positive charge, and red blood cells are rapidly agglutinated by the positive charge of the insoluble carrier. Therefore, the supernatant and the solid can be separated in a short time without performing the centrifugation operation, and the serum or plasma of the supernatant can be easily and quickly collected.
【００４８】第３の発明に係る抗赤血球抗体を主成分と
することを特徴とする血清もしくは血漿分離試薬を用い
れば、第１の発明に従って血液中の赤血球を速やかに凝
集させることができ、従って遠心分離操作を必要とする
ことなく血清もしくは血漿を得ることができる。The use of the serum or plasma separation reagent comprising the anti-red blood cell antibody according to the third invention as a main component enables the red blood cells in the blood to be rapidly agglutinated according to the first invention, and Serum or plasma can be obtained without the need for centrifugation.
【００４９】第３の発明において、抗赤血球抗体が不溶
性担体に担持されている場合には、凝集をより速やかに
行うことができる。第４の発明に係る血清もしくは血漿
分離試薬を用いれば、正の電荷を有する不溶性担体を主
成分とするので、正の電荷により赤血球が速やかに凝集
され、従って第２の発明と同様に、遠心分離操作を行わ
ずとも、血清もしくは血漿を速やかに採取することがで
きる。In the third aspect, when the anti-red blood cell antibody is carried on an insoluble carrier, aggregation can be performed more quickly. When the serum or plasma separation reagent according to the fourth invention is used, since the main component is an insoluble carrier having a positive charge, red blood cells are rapidly aggregated by the positive charge. Serum or plasma can be quickly collected without performing a separation operation.
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き Ｆターム(参考） 2G045 AA01 BA10 BB09 BB34 BB51 BB60 CA02 CA26 FB03 FB15 HB05 HB06 4C038 UA06 UB10 ──────────────────────────────────────────────────続 き Continued on the front page F term (reference) 2G045 AA01 BA10 BB09 BB34 BB51 BB60 CA02 CA26 FB03 FB15 HB05 HB06 4C038 UA06 UB10
Claims (7)
凝集させ、次に上清の血清または血漿を採取することを
特徴とする血清または血漿採取方法。1. A method for collecting serum or plasma, comprising agglutinating red blood cells in blood using an anti-red blood cell antibody, and then collecting serum or plasma of a supernatant.
担持された抗赤血球抗体を用いることを特徴とする請求
項１に記載の血清または血漿採取方法。2. The method for collecting serum or plasma according to claim 1, wherein an anti-red blood cell antibody carried on an insoluble carrier is used as the anti-red blood cell antibody.
るものを用いることを特徴とする請求項１または２に記
載の血清または血漿採取方法。3. The method for collecting serum or plasma according to claim 1, wherein a carrier having a positive charge is used as the insoluble carrier.
血球を凝集させ、次に上清の血清または血漿を採取する
ことを特徴とする血清または血漿採取方法。4. A method for collecting serum or plasma, comprising agglutinating erythrocytes using an insoluble carrier having a positive charge, and then collecting serum or plasma of a supernatant.
とする血清もしくは血漿分離試薬。5. A serum or plasma separation reagent comprising an anti-erythrocyte antibody as a main component.
れている請求項５に記載の血清もしくは血漿分離試薬。6. The serum or plasma separation reagent according to claim 5, wherein the anti-red blood cell antibody is carried on an insoluble carrier.
することを特徴とする血清もしくは血漿分離試薬。7. A serum or plasma separation reagent comprising an insoluble carrier having a positive charge as a main component.
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|---|---|---|---|
| JP11096652A JP2000292420A (en) | 1999-04-02 | 1999-04-02 | Method for sampling serum or plasma and reagent for separating serum or plasma |
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| JP11096652A Pending JP2000292420A (en) | 1999-04-02 | 1999-04-02 | Method for sampling serum or plasma and reagent for separating serum or plasma |
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| JP (1) | JP2000292420A (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006226798A (en) * | 2005-02-17 | 2006-08-31 | Japan Health Science Foundation | Filter for removing blood cell |
| CN102192982A (en) * | 2010-03-08 | 2011-09-21 | 苏州浩欧博生物医药有限公司 | Rapid immune detection method and detection kit for blood sample |
-
1999
- 1999-04-02 JP JP11096652A patent/JP2000292420A/en active Pending
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006226798A (en) * | 2005-02-17 | 2006-08-31 | Japan Health Science Foundation | Filter for removing blood cell |
| JP4621862B2 (en) * | 2005-02-17 | 2011-01-26 | 財団法人ヒューマンサイエンス振興財団 | Chemical sensor |
| CN102192982A (en) * | 2010-03-08 | 2011-09-21 | 苏州浩欧博生物医药有限公司 | Rapid immune detection method and detection kit for blood sample |
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