JP2000137020A - Multicapillary electrophoretic device - Google Patents
Multicapillary electrophoretic deviceInfo
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- JP2000137020A JP2000137020A JP10311675A JP31167598A JP2000137020A JP 2000137020 A JP2000137020 A JP 2000137020A JP 10311675 A JP10311675 A JP 10311675A JP 31167598 A JP31167598 A JP 31167598A JP 2000137020 A JP2000137020 A JP 2000137020A
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Abstract
Description
【０００１】[0001]
【発明の属する技術分野】本発明は複数のキャピラリー
カラムが配列され、複数の試料が１つずつキャピラリー
カラムに注入されて、全てのキャピラリーカラムで同時
に電気泳動されるマルチキャピラリーアレイ泳動部、及
びマルチキャピラリーアレイ泳動部でキャピラリーに光
を照射し、その照射された部分の試料による吸光度や試
料からの蛍光を測定する光学的測定部を備えたマルチキ
ャピラリー電気泳動装置に関するものである。このよう
なマルチキャピラリー電気泳動装置は、タンパク質の分
離やＤＮＡの塩基配列決定に用いられている。ＤＮＡの
塩基配列決定のためのマルチキャピラリー電気泳動装置
では、サンガー反応を用い、プライマー又はターミネー
タを蛍光物質で標識したＤＮＡフラグメント(断片)試料
を電気泳動させ、泳動途中でＤＮＡフラグメント試料か
らの蛍光を検出して塩基配列を決定する。BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to a multi-capillary array electrophoresis section in which a plurality of capillary columns are arranged, a plurality of samples are injected into the capillary columns one by one, and all the capillary columns are electrophoresed simultaneously. The present invention relates to a multi-capillary electrophoresis apparatus provided with an optical measuring section for irradiating light to a capillary at a section and measuring the absorbance of the irradiated portion by a sample and the fluorescence from the sample. Such a multi-capillary electrophoresis apparatus is used for protein separation and DNA base sequence determination. In a multi-capillary electrophoresis apparatus for DNA base sequence determination, a DNA fragment (fragment) sample labeled with a fluorescent substance with a primer or a terminator is electrophoresed using a Sanger reaction, and fluorescence from the DNA fragment sample is analyzed during the electrophoresis. Detect and determine the base sequence.
【０００２】[0002]
【従来の技術】ヒトゲノムのような長大な塩基配列をも
つＤＮＡの塩基配列決定には、高感度で、高速で、かつ
大処理能力をもったＤＮＡシーケンサが必要となる。そ
の１つの方法として、平板状のスラブゲルを用いたもの
に代わってゲルを充填したキャピラリーカラムを複数本
配列したマルチキャピラリーＤＮＡシーケンサが提案さ
れている。キャピラリーカラムは、スラブゲルに比べ
て、試料の取扱いや注入が容易であるだけでなく、高速
に泳動させて高感度で検出できる。つまり、スラブゲル
で高電圧を印加すれば、ジュール熱の影響によりバンド
が広がったり、温度勾配が生じるなどの問題が生じる
が、キャピラリーカラムではそのような問題は少なく、
高電圧を印加して高速泳動をさせても、バンドの広がり
が少なく高感度検出ができるのである。2. Description of the Related Art A DNA sequencer having high sensitivity, high speed, and large processing capacity is required for base sequence determination of DNA having a long base sequence such as a human genome. As one of the methods, there has been proposed a multi-capillary DNA sequencer in which a plurality of capillary columns filled with a gel are arranged instead of using a plate-shaped slab gel. Capillary columns not only allow easier handling and injection of samples than slab gels, but also allow high-speed migration and high-sensitivity detection. In other words, if a high voltage is applied to slab gel, problems such as broadening of the band due to the influence of Joule heat and a temperature gradient occur, but such problems are small in the capillary column,
Even when a high voltage is applied and high-speed migration is performed, band broadening is small and high-sensitivity detection can be performed.
【０００３】キャピラリー電気泳動におけるキャピラリ
ーカラムへの試料導入は、圧力を用いる方法や、電圧を
印加する電気泳動的方法が行われている。そのうち、電
気泳動的に試料を導入する方法は、装置構成の簡便さ、
操作の容易さ、パラメータの制御性の良さの点から広く
一般的に採用されている。[0003] In capillary electrophoresis, a sample is introduced into a capillary column by a method using pressure or an electrophoretic method by applying a voltage. Among them, the method of introducing a sample by electrophoresis is simple in device configuration,
It is widely and generally employed in terms of ease of operation and good controllability of parameters.
【０００４】図１は試料導入時に印加する電圧と時間の
一例を表す図である。縦軸は電圧(ｋＶ)を表し、横軸は
時間(秒)を表す。この例では７．６ｋＶの電圧を３０秒
間印加している。従来の試料導入時の電圧印加では、電
圧のかけ始めは所定の高電圧が数秒以内にかかるように
し、切る際には数秒以内に高電圧を０に落している。FIG. 1 is a diagram showing an example of a voltage applied during sample introduction and time. The vertical axis represents voltage (kV), and the horizontal axis represents time (second). In this example, a voltage of 7.6 kV is applied for 30 seconds. In the conventional voltage application at the time of introducing a sample, a predetermined high voltage is applied within a few seconds at the start of application of the voltage, and the high voltage is reduced to 0 within a few seconds when the voltage is turned off.
【０００５】[0005]
【発明が解決しようとする課題】キャピラリーカラムに
高電圧を印加すると、発熱などによりキャピラリーカラ
ム端に位置するゲルに大きなストレスがかかり、キャピ
ラリーカラムへの試料の導入に支障を来し、泳動分離時
に分離できる塩基数が制約を受けるなどの悪影響が出る
という問題があった。また、急激に高電圧を印加する
と、電気浸透流によりキャピラリーカラム端からゲルが
ずり出すことがあり、そのずり出したゲルが損傷を受け
ると泳動分離状態が悪化するという問題もあった。When a high voltage is applied to the capillary column, a large stress is applied to the gel located at the end of the capillary column due to heat generation or the like, which hinders the introduction of the sample into the capillary column, and the base that can be separated during electrophoretic separation. There is a problem that the number is restricted and adverse effects occur. Also, when a high voltage is applied suddenly, the gel may slip from the end of the capillary column due to the electroosmotic flow, and there is a problem that if the slipped gel is damaged, the electrophoretic separation state deteriorates.
【０００６】そこで本発明は、試料導入時におけるキャ
ピラリーカラム端に位置するゲルのストレスを軽減した
り、キャピラリーカラム端からのゲルのずり出しを抑制
することによって、マルチキャピラリー電気泳動装置に
おける泳動分離能を向上させることを目的とするもので
ある。Accordingly, the present invention improves the electrophoretic separation ability in a multi-capillary electrophoresis apparatus by reducing the stress of the gel located at the end of the capillary column at the time of sample introduction and suppressing the gel from slipping out of the end of the capillary column. The purpose is to make
【０００７】[0007]
【課題を解決するための手段】本発明のマルチキャピラ
リー電気泳動装置は、複数のキャピラリーカラムが配列
され、複数の試料が１つずつキャピラリーカラムに注入
されて、全てのキャピラリーカラムで同時に電気泳動さ
れるマルチキャピラリーアレイ泳動部と、マルチキャピ
ラリーアレイ泳動部でキャピラリーに光を照射し、その
照射された部分の試料による吸光度や試料からの蛍光を
測定する光学的測定部とを備えたマルチキャピラリー電
気泳動装置であって、高圧電源により高電圧を印加して
キャピラリーカラムに試料を導入する際、高電圧のかけ
始めでは電圧を徐々に上げ、高電圧のかけ終りでは電圧
を徐々に下げるように高圧電源を制御する印加電圧制御
部を備えたものである。According to the multi-capillary electrophoresis apparatus of the present invention, a plurality of capillary columns are arranged, a plurality of samples are injected into the capillary columns one by one, and all of the capillary columns are electrophoresed simultaneously. A multi-capillary electrophoresis apparatus comprising: an array electrophoresis section; and an optical measurement section for irradiating the capillary with light in the multi-capillary array electrophoresis section and measuring the absorbance of the irradiated portion by the sample and the fluorescence from the sample. When applying a high voltage from a high-voltage power supply to introduce a sample into a capillary column, the high-voltage power supply is controlled so that the voltage gradually increases at the beginning of high voltage application and gradually decreases at the end of high voltage application. It has a voltage control unit.
【０００８】キャピラリーカラムへの試料注入時には、
試料導入用の容器にそれぞれ試料を入れ、容器内の試料
にそれぞれのキャピラリーカラムの一端を浸す。容器内
の試料とキャピラリーカラムの他端側のバッファ液との
間に高圧電源により高電圧を印加して試料を電気泳動的
にキャピラリーに注入する。このとき、印加電圧制御部
により、かけ始めでは電圧を所定の高電圧まで徐々に上
げ、かけ終りでは電圧を所定の高電圧から徐々に下げる
ように高圧電源を制御する。その結果、急激な熱の発生
及び減退を抑制してキャピラリーカラム端に位置するゲ
ルのストレスを軽減することができる。さらに、大きな
電気浸透流の発生を抑制し、キャピラリーカラム端から
のゲルのずり出しを抑制することができる。When injecting a sample into a capillary column,
Each sample is placed in a sample introduction container, and one end of each capillary column is immersed in the sample in the container. A high voltage is applied between the sample in the container and the buffer solution at the other end of the capillary column by a high-voltage power supply, and the sample is electrophoretically injected into the capillary. At this time, the high voltage power supply is controlled by the applied voltage control unit so that the voltage is gradually increased to a predetermined high voltage at the beginning of the application and is gradually decreased from the predetermined high voltage at the end of the application. As a result, it is possible to suppress rapid generation and decline of heat and reduce the stress of the gel located at the end of the capillary column. Further, generation of a large electroosmotic flow can be suppressed, and the gel can be prevented from slipping out of the capillary column end.
【０００９】[0009]
【実施例】図２は、一実施例を表す概略斜視図である。
一対のリザーバ１１０と１２０にそれぞれバッファ液１
１２と１２２が収容されており、両バッファ液中にそれ
ぞれ電極１３０と１３２が設けられている。サンプルプ
レート１００は絶縁性の材質にてなり、平面状の表面
と、それにつながるコネクタ部１０６とを備えている。
サンプルプレート１００の表面には複数個のウェル１０
２が縦方向と横方向にそれぞれ一定間隔で配列されてい
る。ウェル１０２は底をもつ穴であり、各ウェル１０２
にはその底からベースプレート表面を経てコネクタ部１
０６に至る個別の電極パターンが形成されている。サン
プルプレート１００の各ウェル１０２に試料を入れ、コ
ネクタ部１０６に高圧配線ケーブルを接続する。FIG. 2 is a schematic perspective view showing one embodiment.
Buffer solution 1 is stored in a pair of reservoirs 110 and 120, respectively.
12 and 122 are accommodated, and electrodes 130 and 132 are provided in both buffer solutions, respectively. The sample plate 100 is made of an insulating material and has a flat surface and a connector portion 106 connected to the surface.
A plurality of wells 10 are provided on the surface of the sample plate 100.
2 are arranged at regular intervals in the vertical and horizontal directions, respectively. Each well 102 is a hole having a bottom.
Connector part 1 from the bottom through the base plate surface
Individual electrode patterns up to 06 are formed. A sample is put into each well 102 of the sample plate 100, and a high-voltage wiring cable is connected to the connector section 106.
【００１０】リザーバ１１０とサンプルプレート１００
とは配線が切り換えられるように高圧切換え部１３６で
切換え可能に接続され、高圧電源１３４がその高圧切換
え部１３６と他方のリザーバ１２０に設けられた電極１
３２との間に接続されている。高圧電源１３４には、試
料導入用と泳動用の印加電圧及び時間を制御する印加電
圧制御部１３８が接続されている。印加電圧制御部１３
８はマイコンなどにより実現される。[0010] Reservoir 110 and sample plate 100
The high voltage power supply 134 is connected to the high voltage switching unit 136 and the other electrode 120 provided on the other reservoir 120 so that the wiring is switched.
32. The high voltage power supply 134 is connected to an applied voltage control unit 138 that controls the applied voltage and time for sample introduction and electrophoresis. Applied voltage controller 13
8 is realized by a microcomputer or the like.
【００１１】試料注入時にはキャピラリーアレイ２の一
端部２ａはサンプルプレート１００の各ウェル１０２に
一本ずつ挿入され、試料注入後はリザーバ１１０に切り
換えられて一端部２ａがバッファ液１１２に浸される。
キャピラリーアレイ２の他端部２ｂが他方のリザーバ１
２０のバッファ液１２２に浸され、その他端側には吸光
度や蛍光により試料を検出する光学的測定部１０から測
定光や励起光が照射され、吸光度や蛍光が測定される被
検出部２ｃが設けられている。At the time of sample injection, one end 2a of the capillary array 2 is inserted one by one into each well 102 of the sample plate 100. After the sample injection, the one end 2a is switched to the reservoir 110 and the one end 2a is immersed in the buffer solution 112.
The other end 2b of the capillary array 2 is connected to the other reservoir 1
20 is immersed in a buffer solution 122, and the other end side is provided with a detected part 2c which is irradiated with measurement light or excitation light from an optical measurement part 10 for detecting a sample by absorbance or fluorescence and measures absorbance or fluorescence. Have been.
【００１２】キャピラリーアレイ２は一端側２ａではサ
ンプルプレート１００のウェル１０２の配列に対応した
二次元的な配列を持ち、被検出部２ｃではキャピラリー
カラムが一列に配列され、そのキャピラリーカラムの配
列面に垂直な方向から測定光や励起光が照射される。The capillary array 2 has a two-dimensional arrangement corresponding to the arrangement of the wells 102 of the sample plate 100 at one end 2a, and the capillary columns are arranged in a line in the detected part 2c, and are perpendicular to the arrangement surface of the capillary columns. Measurement light or excitation light is emitted from the direction.
【００１３】キャピラリーカラムは、石英ガラスやホウ
ケイ酸ガラス(例えばパイレックス)等を材質とするもの
であり、外形が２００〜３００μｍ、内径が７５〜１０
０μｍのものである。キャピラリーカラムはその外周を
ＳｉＯ2など、紫外領域から近赤外領域の励起光によっ
ては蛍光を発生しないか、発生しても蛍光測定の妨げに
ならない程度である無蛍光材質の被膜により被覆された
ものが好ましい。その場合には、被検出部２ｃでも被膜
を除去する必要がない。それに対し、キャピラリーカラ
ムが被膜として蛍光を発する樹脂被膜をもったものであ
る場合は、被検出部２ｃではその被膜を除去しておく。
キャピラリーアレイ２にはそのようなキャピラリーカラ
ムが複数本配列されている。The capillary column is made of quartz glass or borosilicate glass (for example, Pyrex) or the like, and has an outer diameter of 200 to 300 μm and an inner diameter of 75 to 10 μm.
It is 0 μm. Capillary columns whose outer periphery is coated with a coating of a non-fluorescent material, such as SiO 2 , that does not generate fluorescence by excitation light in the ultraviolet to near-infrared region or does not interfere with fluorescence measurement when generated. Is preferred. In that case, it is not necessary to remove the coating on the detected portion 2c. On the other hand, when the capillary column has a resin film that emits fluorescence as a film, the film is removed in the detection target portion 2c.
The capillary array 2 includes a plurality of such capillary columns.
【００１４】キャピラリーカラム内には分離媒体のゲル
として、ポリアクリルアミドゲル、リニアアクリルアミ
ドゲル、ポリエチレンオキサイド(ＰＥＯ)ゲルなどが充
填されている。各キャピラリーカラムには末端塩基別に
異なる螢光物質ＦＡＭ、ＪＯＥ、ＴＡＭＲＡ、ＲＯＸ、
Ｒ６Ｇ、Ｒ−１１０などの螢光物質から選ばれた４種類
のそれぞれの蛍光物質により標識され、又は２種類以上
の蛍光物質を割合を異ならせて４種類に標識された４種
類のＤＮＡフラグメントを含む試料がそれぞれ注入さ
れ、同時に電気泳動がなされる。サンプルプレート１０
０とリザーバ１１０は移動機構(図２では図示略)によっ
ていずれかが選択的にキャピラリー端２ａと接触するよ
うに切り換えて配置される。The capillary column is filled with a separation medium gel such as polyacrylamide gel, linear acrylamide gel, polyethylene oxide (PEO) gel and the like. Each capillary column has different fluorescent substances FAM, JOE, TAMRA, ROX,
Four kinds of DNA fragments labeled with four kinds of fluorescent substances selected from fluorescent substances such as R6G and R-110, or two kinds or more of fluorescent substances with different ratios are used. The contained samples are respectively injected and simultaneously electrophoresed. Sample plate 10
0 and the reservoir 110 are switched and arranged by a moving mechanism (not shown in FIG. 2) so that either one of them selectively contacts the capillary end 2a.
【００１５】次に本実施例の動作を説明する。サンプル
プレート１００のウェル１０２にそれぞれ試料をいれ
る。ウェル１０２には、すでに処理された試料が入れら
れる場合だけでなく、ウェル１０２を用いてＰＣＲ(Pol
ymerase Chain Reaction)法により試料を処理した後
に、そのウェル１０２内の試料にキャピラリーカラム端
を挿入して試料注入を行なうように用いることもでき
る。ＰＣＲ法はＤＮＡのうちの目的とする一部分のみを
大幅に増幅させる方法である。ＰＣＲ法では試料のＤＮ
Ａにプライマーを加え、温度を上げて二本鎖ＤＮＡを一
本鎖に解離させ、次に温度を下げてプライマーをＤＮＡ
鎖に結合させ、少し温度を上げてＤＮＡを合成させ、さ
らに温度を上げて一本鎖にする。このように温度を上下
に変化させる操作を繰り返すことにより、ＤＮＡの所定
部分を大量に増幅合成する方法である。Next, the operation of this embodiment will be described. A sample is put in each well 102 of the sample plate 100. The well 102 can be used for PCR (Pol
After the sample is processed by the ymerase chain reaction (Ymerase Chain Reaction) method, the end of the capillary column can be inserted into the sample in the well 102 and used to inject the sample. The PCR method is a method for greatly amplifying only a desired portion of DNA. In the PCR method, the DN of the sample
A. Add primer to A, raise temperature to dissociate double-stranded DNA into single strands, then lower temperature to add primer
Attach to the strands, raise the temperature slightly to synthesize DNA, and further raise the temperature to single strands. This is a method of amplifying and synthesizing a large amount of a predetermined portion of DNA by repeating the operation of changing the temperature up and down.
【００１６】ウェル１０２に試料をいれた後、サンプル
プレート１００のウェル１０２内の試料にキャピラリー
カラム端２ａが１本ずつ浸され、リザーバ１２０のバッ
ファ液１２２にキャピラリーカラム端２ｂがまとめて浸
される。そして、高圧切換え部１３６を介して、コネク
タ１０６及び電極パターンを介してウェル１０２と高圧
電源１３４を接続する。After the sample is placed in the well 102, the capillary column ends 2 a are immersed one by one in the sample in the well 102 of the sample plate 100, and the capillary column ends 2 b are immersed in the buffer solution 122 of the reservoir 120. Then, the well 102 and the high-voltage power supply 134 are connected via the connector 106 and the electrode pattern via the high-voltage switching unit 136.
【００１７】高電圧電源１３４によりウェル１０２とバ
ッファ液１２２との間に高電圧を印加してキャピラリー
カラムに試料を注入する。このとき印加される電圧及び
時間は印加電圧制御部１３８により制御される。図３は
印加電圧制御部により制御される試料導入時に印加する
電圧と時間の一例を表す図である。縦軸は電圧(ｋＶ)を
表し、横軸は時間(秒)を表す。印加電圧制御部１３８に
より高電圧電源１３４を制御して、試料導入の開始から
１５秒後に電圧が７．６ｋＶになるように徐々に電圧を
上げる。その後１５秒間は７．６ｋＶの電圧を印加す
る。さらに１５秒をかけて電圧を７．６ｋＶから０Ｖに
落して試料導入時の電圧印加を終了する。ここで印加す
る電圧と時間の積は、図１に示した印加する電圧と時間
の積に相当する。ここで、印加する電圧と時間は試料の
種類や装置の種類などにより異なるものであり、この例
に限定されるものではない。A high voltage is applied between the well 102 and the buffer solution 122 by a high voltage power supply 134 to inject a sample into the capillary column. The applied voltage and time are controlled by the applied voltage control unit 138. FIG. 3 is a diagram illustrating an example of a voltage and a time applied during sample introduction controlled by an applied voltage control unit. The vertical axis represents voltage (kV), and the horizontal axis represents time (second). The high voltage power supply 134 is controlled by the applied voltage control unit 138, and the voltage is gradually increased so that the voltage becomes 7.6 kV 15 seconds after the start of the sample introduction. Thereafter, a voltage of 7.6 kV is applied for 15 seconds. Further, it takes 15 seconds to reduce the voltage from 7.6 kV to 0 V, and the voltage application at the time of sample introduction is completed. Here, the product of the applied voltage and time corresponds to the product of the applied voltage and time shown in FIG. Here, the applied voltage and time vary depending on the type of the sample, the type of the device, and the like, and are not limited to this example.
【００１８】このように印加する電圧と時間を制御する
ことにより、キャピラリーカラム中のゲルにおける急激
な熱の発生及び減退を抑制することができ、キャピラリ
ーカラム端に位置するゲルのストレスを柔らげることが
できる。さらに、大きな電気浸透流の発生を抑え、キャ
ピラリーカラム端からゲルがずり出すことを抑制するこ
ともできる。さらに、高電圧を急激に印加することによ
り生じる電流のオーバーシュートを抑制することもでき
る。上記のようにしてキャピラリーカラムに試料を導入
することにより、泳動分離能を向上させることができ、
従来１００ベース(塩基)程度の泳動分離能を２００〜３
００ベースに向上させることができた。By controlling the voltage and time to be applied in this way, it is possible to suppress rapid generation and decline of heat in the gel in the capillary column, and it is possible to soften the stress of the gel located at the end of the capillary column. it can. Further, generation of a large electroosmotic flow can be suppressed, and the gel can be prevented from slipping from the end of the capillary column. Further, it is possible to suppress the overshoot of the current caused by suddenly applying a high voltage. By introducing the sample into the capillary column as described above, the electrophoretic separation ability can be improved,
Conventionally, electrophoresis separation ability of about 100 bases (base)
00 base could be improved.
【００１９】試料注入後、移動機構によりサンプルプレ
ート１００とリザーバ１１０を動かすことにより、試料
側のキャピラリー端２ａをリザーバ１１０のバッファ液
１１２中に浸す。その後、両リザーバ１１０と１２０間
に高電圧を印加して電気泳動分離を行なう。泳動用の電
源電圧は例えば３０ｋＶで、電流容量は１０〜３０ｍＡ
である。After the sample is injected, the sample plate 100 and the reservoir 110 are moved by the moving mechanism, so that the capillary end 2 a on the sample side is immersed in the buffer solution 112 of the reservoir 110. Thereafter, a high voltage is applied between the two reservoirs 110 and 120 to perform electrophoretic separation. The power supply voltage for electrophoresis is, for example, 30 kV, and the current capacity is 10 to 30 mA.
It is.
【００２０】移動機構はサンプルプレート１００とリザ
ーバ１１０を水平面内で移動させ、キャピラリー端２ａ
を垂直方向に移動させるようにするものでもよい。サン
プルプレート１１０のウェルの数はキャピラリーアレイ
の本数に合わせて任意に設定することができる。また、
リザーバ１１０もサンプルプレート１００のように複数
のウェルにバッファ液を収容する形式とし、各ウェルに
個別の電極パターンを設けることにより、ウェルごとに
独立した電圧を印加できるようして、異なる条件での電
気泳動を同時に行なうようにしてもよい。The moving mechanism moves the sample plate 100 and the reservoir 110 in a horizontal plane, and moves the capillary end 2a.
May be moved in the vertical direction. The number of wells in the sample plate 110 can be arbitrarily set according to the number of capillary arrays. Also,
The reservoir 110 also has a format in which a buffer solution is stored in a plurality of wells like the sample plate 100, and by providing an individual electrode pattern for each well, an independent voltage can be applied to each well. Electrophoresis may be performed simultaneously.
【００２１】[0021]
【発明の効果】本発明のマルチキャピラリー電気泳動装
置は、高圧電源により高電圧を印加してキャピラリーカ
ラムに試料を導入する際、印加電圧制御部により高圧電
源を制御して高電圧のかけ始めでは電圧を徐々に上げ、
高電圧のかけ終りでは電圧を徐々に下げるようしたの
で、急激な熱の発生及び減退を抑制してキャピラリーカ
ラム端に位置するゲルのストレスを軽減することができ
る。さらに、急激な電気浸透流の発生を抑制し、キャピ
ラリーカラム端からのゲルのずり出しを抑制することも
できる。その結果、泳動分離能を向上させることができ
る。According to the multi-capillary electrophoresis apparatus of the present invention, when a high voltage is applied by a high-voltage power supply and a sample is introduced into the capillary column, the high-voltage power supply is controlled by the applied voltage control unit to start applying a high voltage. Gradually increase
Since the voltage is gradually lowered at the end of the application of the high voltage, it is possible to suppress the rapid generation and decrease of heat and reduce the stress of the gel located at the end of the capillary column. Furthermore, it is possible to suppress the generation of a rapid electroosmotic flow and to suppress the gel from slipping out of the capillary column end. As a result, the electrophoretic separation ability can be improved.
【図１】 従来の試料導入時に印加する電圧と時間の一
例を表す図であり、縦軸は電圧(ｋＶ)を表し、横軸は時
間(秒)を表す。FIG. 1 is a diagram showing an example of a voltage and a time applied when a conventional sample is introduced, in which the vertical axis represents voltage (kV) and the horizontal axis represents time (second).
【図２】 一実施例を表す概略斜視図である。FIG. 2 is a schematic perspective view showing one embodiment.
【図３】 同実施例の印加電圧制御部により制御される
試料導入時に印加する電圧と時間の一例を表す図であ
り、縦軸は電圧(ｋＶ)を表し、横軸は時間(秒)を表す。FIG. 3 is a diagram illustrating an example of a voltage and a time applied at the time of sample introduction controlled by an applied voltage control unit according to the embodiment. The vertical axis represents voltage (kV), and the horizontal axis represents time (second). Represent.
２ キャピラリーアレイ １０ 光学的測定部 １００ サンプルプレート １０６ コネクタ部 １０２ ウェル １３６ 高圧切換え部 １３４ 高圧電源 １３８ 印加電圧制御部 2 Capillary array 10 Optical measuring section 100 Sample plate 106 Connector section 102 Well 136 High voltage switching section 134 High voltage power supply 138 Applied voltage control section
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 狭間 一 京都府京都市中京区西ノ京桑原町１番地 株式会社島津製作所内 ──────────────────────────────────────────────────続 き Continuation of the front page (72) Inventor Kazuma Hazama 1 Shiwazu Works, Nishinokyo Kuwaharacho, Nakagyo-ku, Kyoto City, Kyoto Prefecture
Claims (1)
複数の試料が１つずつ前記キャピラリーカラムに注入さ
れて、全てのキャピラリーカラムで同時に電気泳動され
るマルチキャピラリーアレイ泳動部と、前記マルチキャ
ピラリーアレイ泳動部でキャピラリーに光を照射し、そ
の照射された部分の試料による吸光度や試料からの蛍光
を測定する光学的測定部とを備えたマルチキャピラリー
電気泳動装置において、 高圧電源により高電圧を印加して前記キャピラリーカラ
ムに試料を導入する際、高電圧のかけ始めでは電圧を徐
々に上げ、高電圧のかけ終りでは電圧を徐々に下げるよ
うに前記高圧電源を制御する印加電圧制御部を備えたこ
とを特徴とするマルチキャピラリー電気泳動装置。1. A method according to claim 1, wherein a plurality of capillary columns are arranged,
A plurality of samples are injected one by one into the capillary column, and a multi-capillary array migrating unit that is simultaneously electrophoresed in all the capillary columns, and irradiates the capillary with the multi-capillary array migrating unit, In a multi-capillary electrophoresis apparatus equipped with an optical measurement unit for measuring the absorbance of a sample and the fluorescence from the sample, when a high voltage is applied by a high voltage power supply to introduce the sample into the capillary column, a high voltage is applied at the beginning. A multi-capillary electrophoresis apparatus comprising: an applied voltage control unit that controls the high-voltage power supply so as to gradually increase the voltage and gradually decrease the voltage when the high voltage is applied.
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