ITMI20112435A1 - Profilassi e terapia delle malattie autoimmuni con citochine e fattori di crescita, antibatterici e anticorpi, isolati dai tessuti e dai liquidi biologici dei mammiferi - Google Patents
Profilassi e terapia delle malattie autoimmuni con citochine e fattori di crescita, antibatterici e anticorpi, isolati dai tessuti e dai liquidi biologici dei mammiferi Download PDFInfo
- Publication number
- ITMI20112435A1 ITMI20112435A1 IT002435A ITMI20112435A ITMI20112435A1 IT MI20112435 A1 ITMI20112435 A1 IT MI20112435A1 IT 002435 A IT002435 A IT 002435A IT MI20112435 A ITMI20112435 A IT MI20112435A IT MI20112435 A1 ITMI20112435 A1 IT MI20112435A1
- Authority
- IT
- Italy
- Prior art keywords
- disease
- factors
- mice
- factor
- induced
- Prior art date
Links
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 title claims description 16
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 title claims description 14
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 title claims description 14
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 title claims description 5
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 title description 15
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 title description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 title description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 title description 2
- 239000004744 fabric Substances 0.000 title 1
- 210000003022 colostrum Anatomy 0.000 claims description 19
- 235000021277 colostrum Nutrition 0.000 claims description 19
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 claims description 17
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 10
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 claims description 8
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 claims description 8
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 claims description 7
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 claims description 6
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 claims description 6
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 claims description 4
- 108010009583 Transforming Growth Factors Proteins 0.000 claims description 4
- 102000009618 Transforming Growth Factors Human genes 0.000 claims description 4
- 108090000723 Insulin-Like Growth Factor I Proteins 0.000 claims description 3
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 claims description 3
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 claims description 3
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 claims description 3
- 102000015336 Nerve Growth Factor Human genes 0.000 claims description 3
- 108010038512 Platelet-Derived Growth Factor Proteins 0.000 claims description 3
- 102000010780 Platelet-Derived Growth Factor Human genes 0.000 claims description 3
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 claims description 3
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 claims description 3
- 102100021943 C-C motif chemokine 2 Human genes 0.000 claims description 2
- 101710155857 C-C motif chemokine 2 Proteins 0.000 claims description 2
- 102100023688 Eotaxin Human genes 0.000 claims description 2
- 101710139422 Eotaxin Proteins 0.000 claims description 2
- -1 IL -9 Proteins 0.000 claims description 2
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 claims description 2
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 claims description 2
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 claims description 2
- 102000003812 Interleukin-15 Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000172 Interleukin-15 Proteins 0.000 claims description 2
- 102000013691 Interleukin-17 Human genes 0.000 claims description 2
- 108050003558 Interleukin-17 Proteins 0.000 claims description 2
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 claims description 2
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 claims description 2
- 229940044627 gamma-interferon Drugs 0.000 claims description 2
- 102000018233 Fibroblast Growth Factor Human genes 0.000 claims 2
- 108050007372 Fibroblast Growth Factor Proteins 0.000 claims 2
- 101000746367 Homo sapiens Granulocyte colony-stimulating factor Proteins 0.000 claims 2
- 102000013275 Somatomedins Human genes 0.000 claims 2
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 claims 2
- 229940126864 fibroblast growth factor Drugs 0.000 claims 2
- 229940053128 nerve growth factor Drugs 0.000 claims 2
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 claims 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 claims 1
- 102100025248 C-X-C motif chemokine 10 Human genes 0.000 claims 1
- 101710098275 C-X-C motif chemokine 10 Proteins 0.000 claims 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims 1
- 102000046299 Transforming Growth Factor beta1 Human genes 0.000 claims 1
- 101800002279 Transforming growth factor beta-1 Proteins 0.000 claims 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 claims 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 37
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 35
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 34
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 29
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 22
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 20
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 16
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 15
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 13
- 238000011161 development Methods 0.000 description 12
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 12
- 108010062580 Concanavalin A Proteins 0.000 description 11
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 11
- 210000002683 foot Anatomy 0.000 description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 description 11
- ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N streptozocin Chemical compound O=NN(C)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N 0.000 description 11
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 10
- 208000009386 Experimental Arthritis Diseases 0.000 description 10
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 10
- 201000002491 encephalomyelitis Diseases 0.000 description 10
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 10
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 10
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 9
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 9
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 9
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 9
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 8
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 7
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 7
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 7
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 description 7
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 7
- KDNVJBRRDKAHDA-UHFFFAOYSA-L phenyl-[3-[[3-(phenylmercuriooxysulfonyl)naphthalen-2-yl]methyl]naphthalen-2-yl]sulfonyloxymercury Chemical compound C=1C2=CC=CC=C2C=C(CC=2C(=CC3=CC=CC=C3C=2)S(=O)(=O)O[Hg]C=2C=CC=CC=2)C=1S(=O)(=O)O[Hg]C1=CC=CC=C1 KDNVJBRRDKAHDA-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 6
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 6
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 6
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 6
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 6
- 210000001503 joint Anatomy 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 6
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 6
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 6
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 6
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 6
- 102000000503 Collagen Type II Human genes 0.000 description 5
- 108010041390 Collagen Type II Proteins 0.000 description 5
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 5
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 5
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 5
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 5
- 239000004695 Polyether sulfone Substances 0.000 description 5
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 5
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 5
- 210000000227 basophil cell of anterior lobe of hypophysis Anatomy 0.000 description 5
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 5
- 206010009887 colitis Diseases 0.000 description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 5
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 5
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 5
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 5
- 229920006393 polyether sulfone Polymers 0.000 description 5
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 5
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 5
- 239000004627 regenerated cellulose Substances 0.000 description 5
- 239000012465 retentate Substances 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 5
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 4
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 4
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 4
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 4
- 201000011442 Metachromatic leukodystrophy Diseases 0.000 description 4
- 101710098398 Probable alanine aminotransferase, mitochondrial Proteins 0.000 description 4
- ZSJLQEPLLKMAKR-UHFFFAOYSA-N Streptozotocin Natural products O=NN(C)C(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O ZSJLQEPLLKMAKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 4
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 4
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 4
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 4
- 230000000112 colonic effect Effects 0.000 description 4
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 4
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 4
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 4
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 4
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 4
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- NGVDGCNFYWLIFO-UHFFFAOYSA-N pyridoxal 5'-phosphate Chemical compound CC1=NC=C(COP(O)(O)=O)C(C=O)=C1O NGVDGCNFYWLIFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 4
- 229960001052 streptozocin Drugs 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- QCDWFXQBSFUVSP-UHFFFAOYSA-N 2-phenoxyethanol Chemical compound OCCOC1=CC=CC=C1 QCDWFXQBSFUVSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000032116 Autoimmune Experimental Encephalomyelitis Diseases 0.000 description 3
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 3
- 102000003945 NF-kappa B Human genes 0.000 description 3
- 108010057466 NF-kappa B Proteins 0.000 description 3
- 238000011785 NMRI mouse Methods 0.000 description 3
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 3
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 3
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 3
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 3
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 3
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 3
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 3
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 3
- SOROIESOUPGGFO-UHFFFAOYSA-N diazolidinylurea Chemical compound OCNC(=O)N(CO)C1N(CO)C(=O)N(CO)C1=O SOROIESOUPGGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960001083 diazolidinylurea Drugs 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 201000001421 hyperglycemia Diseases 0.000 description 3
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 3
- 210000004153 islets of langerhan Anatomy 0.000 description 3
- 238000011694 lewis rat Methods 0.000 description 3
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 3
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 3
- 229960005323 phenoxyethanol Drugs 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 3
- 239000002510 pyrogen Substances 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 238000009168 stem cell therapy Methods 0.000 description 3
- 238000009580 stem-cell therapy Methods 0.000 description 3
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 3
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 2
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 2
- 208000031648 Body Weight Changes Diseases 0.000 description 2
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000016192 Demyelinating disease Diseases 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 2
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 2
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 2
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 2
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 description 2
- 241001049988 Mycobacterium tuberculosis H37Ra Species 0.000 description 2
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010033885 Paraparesis Diseases 0.000 description 2
- 108091006088 activator proteins Proteins 0.000 description 2
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 2
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000004579 body weight change Effects 0.000 description 2
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 2
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 description 2
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 2
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 2
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 2
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 2
- 210000003371 toe Anatomy 0.000 description 2
- 230000001228 trophic effect Effects 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- UQIBUOXNUPHALR-UVIWMAFZSA-N (3s)-3-[[(2s)-1-[(2s)-2-[[2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-6-amino-2-[[2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-amino-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]acetyl]amino]hexanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoyl]amino]-4-met Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CN=CN1 UQIBUOXNUPHALR-UVIWMAFZSA-N 0.000 description 1
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 1
- 208000026872 Addison Disease Diseases 0.000 description 1
- 206010003827 Autoimmune hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 210000002237 B-cell of pancreatic islet Anatomy 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 208000008439 Biliary Liver Cirrhosis Diseases 0.000 description 1
- 208000033222 Biliary cirrhosis primary Diseases 0.000 description 1
- 108010049931 Bone Morphogenetic Protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100024506 Bone morphogenetic protein 2 Human genes 0.000 description 1
- 241000282832 Camelidae Species 0.000 description 1
- 241000283153 Cetacea Species 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 208000002881 Colic Diseases 0.000 description 1
- 206010010071 Coma Diseases 0.000 description 1
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 1
- 206010012305 Demyelination Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 208000007882 Gastritis Diseases 0.000 description 1
- 208000024869 Goodpasture syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000001204 Hashimoto Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000030836 Hashimoto thyroiditis Diseases 0.000 description 1
- 208000035186 Hemolytic Autoimmune Anemia Diseases 0.000 description 1
- 102100021866 Hepatocyte growth factor Human genes 0.000 description 1
- 101000883515 Homo sapiens Chitinase-3-like protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 206010020565 Hyperaemia Diseases 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 102000004218 Insulin-Like Growth Factor I Human genes 0.000 description 1
- 102000003777 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 description 1
- 108090000193 Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 1
- 102000019223 Interleukin-1 receptor Human genes 0.000 description 1
- 108050006617 Interleukin-1 receptor Proteins 0.000 description 1
- 102000003816 Interleukin-13 Human genes 0.000 description 1
- 108090000176 Interleukin-13 Proteins 0.000 description 1
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 1
- 108010002335 Interleukin-9 Proteins 0.000 description 1
- 102000000585 Interleukin-9 Human genes 0.000 description 1
- 206010023232 Joint swelling Diseases 0.000 description 1
- 102000010445 Lactoferrin Human genes 0.000 description 1
- 108010063045 Lactoferrin Proteins 0.000 description 1
- 108010023244 Lactoperoxidase Proteins 0.000 description 1
- 102000045576 Lactoperoxidases Human genes 0.000 description 1
- 108090000581 Leukemia inhibitory factor Proteins 0.000 description 1
- 102100032352 Leukemia inhibitory factor Human genes 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 241000204031 Mycoplasma Species 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010034277 Pemphigoid Diseases 0.000 description 1
- 201000011152 Pemphigus Diseases 0.000 description 1
- 208000031845 Pernicious anaemia Diseases 0.000 description 1
- 208000012654 Primary biliary cholangitis Diseases 0.000 description 1
- 102000029797 Prion Human genes 0.000 description 1
- 108091000054 Prion Proteins 0.000 description 1
- 206010039710 Scleroderma Diseases 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000021386 Sjogren Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102100021669 Stromal cell-derived factor 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710088580 Stromal cell-derived factor 1 Proteins 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 206010042742 Sympathetic ophthalmia Diseases 0.000 description 1
- 208000031981 Thrombocytopenic Idiopathic Purpura Diseases 0.000 description 1
- 102000003929 Transaminases Human genes 0.000 description 1
- 108090000340 Transaminases Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 1
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 1
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 1
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 1
- UATJOMSPNYCXIX-UHFFFAOYSA-N Trinitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+]([O-])=O)=CC([N+]([O-])=O)=C1 UATJOMSPNYCXIX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 206010046851 Uveitis Diseases 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 210000004100 adrenal gland Anatomy 0.000 description 1
- 210000003423 ankle Anatomy 0.000 description 1
- 210000000436 anus Anatomy 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000002917 arthritic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003286 arthritogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006470 autoimmune attack Effects 0.000 description 1
- 201000000448 autoimmune hemolytic anemia Diseases 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 208000000594 bullous pemphigoid Diseases 0.000 description 1
- 230000035571 calor Effects 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000005482 chemotactic factor Substances 0.000 description 1
- 208000023652 chronic gastritis Diseases 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 208000037893 chronic inflammatory disorder Diseases 0.000 description 1
- 208000025302 chronic primary adrenal insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 201000001981 dermatomyositis Diseases 0.000 description 1
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 1
- 230000001904 diabetogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000035620 dolor Effects 0.000 description 1
- 230000002497 edematous effect Effects 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 1
- 229960000556 fingolimod Drugs 0.000 description 1
- KKGQTZUTZRNORY-UHFFFAOYSA-N fingolimod Chemical compound CCCCCCCCC1=CC=C(CCC(N)(CO)CO)C=C1 KKGQTZUTZRNORY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000234 hepatic damage Toxicity 0.000 description 1
- 231100000753 hepatic injury Toxicity 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 102000054350 human CHI3L1 Human genes 0.000 description 1
- 230000000544 hyperemic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000774 hypoallergenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000000495 immunoinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001024 immunotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000012750 in vivo screening Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 229940076144 interleukin-10 Drugs 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 238000011813 knockout mouse model Methods 0.000 description 1
- CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N l-phenylalanyl-l-lysyl-l-cysteinyl-l-arginyl-l-arginyl-l-tryptophyl-l-glutaminyl-l-tryptophyl-l-arginyl-l-methionyl-l-lysyl-l-lysyl-l-leucylglycyl-l-alanyl-l-prolyl-l-seryl-l-isoleucyl-l-threonyl-l-cysteinyl-l-valyl-l-arginyl-l-arginyl-l-alanyl-l-phenylal Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N 0.000 description 1
- 229940078795 lactoferrin Drugs 0.000 description 1
- 235000021242 lactoferrin Nutrition 0.000 description 1
- 229940057428 lactoperoxidase Drugs 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical group 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000008818 liver damage Effects 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 1
- KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N mitoxantrone Chemical compound O=C1C2=C(O)C=CC(O)=C2C(=O)C2=C1C(NCCNCCO)=CC=C2NCCNCCO KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001156 mitoxantrone Drugs 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000000921 morphogenic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 206010028417 myasthenia gravis Diseases 0.000 description 1
- 229960005027 natalizumab Drugs 0.000 description 1
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013421 nuclear magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 230000032696 parturition Effects 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000008756 pathogenetic mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 201000001976 pemphigus vulgaris Diseases 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 210000001428 peripheral nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009038 pharmacological inhibition Effects 0.000 description 1
- 230000002516 postimmunization Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000036185 rubor Effects 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000008467 tissue growth Effects 0.000 description 1
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/16—Blood plasma; Blood serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/20—Milk; Whey; Colostrum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/48—Reproductive organs
- A61K35/50—Placenta; Placental stem cells; Amniotic fluid; Amnion; Amniotic stem cells
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Virology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Hematology (AREA)
- Pregnancy & Childbirth (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
“PROFILASSI E TERAPIA DELLE MALATTIE AUTOIMMUNI CON CITOCHINE E FATTORI DI CRESCITA, ANTIBATTERICI E ANTICORPI, ISOLATI DAI TESSUTI E DAI LIQUIDI BIOLOGICI DEI MAMMIFERIâ€
La presente invenzione ha per oggetto composizioni comprendenti fattori di crescita, citochine, antibatterici e anticorpi, isolati dai tessuti e dai liquidi biologici dei mammiferi in particolare da siero, placenta e colostro per la terapia orale delle malattie autoimmuni.
Stato della tecnica
La malattia autoimmunitaria (o malattia autoimmune) à ̈ un’alterazione del sistema immunitario tale da comportare lo sviluppo di risposte immuni dirette contro componenti dell’organismo (“self†) in grado di determinare un’alterazione funzionale o anatomica del distretto colpito. Il concetto di malattia autoimmune infatti non coincide con quello di reazione autoimmune dato che quest’ultimo fenomeno biologico à ̈ in realtà estremamente frequente nell’ambito delle normali funzioni di difesa assolte dal sistema immunitario; l’elemento distintivo della malattia autoimmune à ̈ piuttosto l’incapacità del sistema immunitario di spegnere i processi diretti contro il self al termine di una fisiologica risposta infiammatoria o di prevenire lo sviluppo al di fuori di essa. Il processo di attacco autoimmune contro antigeni del self può essere confinato a singoli distretti, tessuti, organi o apparati o avere ricadute dirette o indirette sull’intero organismo (malattia sistemica).
Ciascuna malattia autoimmune presenta caratteristiche patogenetiche peculiari (a partire dal tipo di reazione autoimmune prevalente e dalla sede del danno); ciò determina un’ampia variabilità di quadri clinici. Tuttavia, dato il ruolo centrale della flogosi nell’innesco e nello svolgimento delle reazioni immunitarie, à ̈ frequente il riscontro di segni obiettivi (tumor, calor, rubor, dolor, functio lesa) e biochimici (VES, PRC, consumo del complemento, anticorpi specifici) di infiammazione in atto.
1. Specifici organi: prevalentemente tiroide (p.es. tiroidite Hashimoto), stomaco (p. es. anemia perniciosa, gastrite cronica), pancreas (p. es. diabete mellito I), surreni (p.es. Morbo di Addison).
2. Non specifici a organi con reazioni immunitarie contro auto antigeni di diversi tessuti e deposito sistemico di complessi autoimmunitari:
1. articolazioni (p. es. artrite reumatoide)
2. reni (p. es. Lupus eritematoso sistemico)
3. derma (p. es. sclerodermia)
4. muscoli (p. es. dermatomiosite)
3. Forme varie come p. es.:
1. sindrome di Goodpasture
2. miastenia gravis pseudo paralitica
3. pemphigus vulgaris
4. pemphigoide bollosa
5. oftalmia simpatica
6. uveite facogene
7. anemia emolitica autoimmune
8. Morbo di Werlhof
9. cirrosi biliare primitiva
10. epatite cronica aggressiva
11. colite ulcerosa
12. Sindrome di Sjogren
13. ev sclerosi multipla
Oltre al ruolo dei fattori genetici deve essere considerato anche l’impatto di fattori ambientali (come infezioni virali o batteriche) nel provocare il passaggio da una semplice suscettibilità per la patologia in questione alla malattia conclamata.
Considerato che il sistema immunitario svolge un ruolo chiave nella patogenesi delle malattie autoimmuni si à ̈ recentemente focalizzata l’attenzione sull’individuazione di approcci immunoterapeutici che permettano di arrestare/ritardare la malattia negli individui predisposti o in quei pazienti con nuova diagnosi di malattia.
In generale, l’equilibrio tra citochine pro-infiammatorie di tipo 1, antiinfiammatorie di tipo 2 (IL-4, IL-6, IL-10, IL-13) e di tipo 3 (TGF-beta) sembra svolgere un ruolo cruciale nella patogenesi delle malattie autoimmuni. Infatti, nel caso del diabete di tipo I una prevalenza di citochine pro-infiammatorie di tipo 1 come tumor necrosis factor (TNF)-α, interferon (IFN)-γ e interleukin (IL)-1 promuove l’insulite ed il diabete, mentre una prevalenza di citochine anti-infiammatorie di tipo 2 come IL-4 e IL-10 previene la distruzione delle beta cellule pancreatiche. Il transforming growth factor (TGF)-β sopprime anche la produzione di citochine di tipo 1 e l’iperespressione del suo gene a livello delle cellule beta protegge dallo sviluppo del diabete.
È noto, mediante studi effettuati ex vivo su cellule beta isolate da isole pancreatiche, che nel diabete indotto da Streptozotocina (MLD-STZ) in topi maschi, i livelli di citochine IL-4, IL-10 e TGB-β1 risultano essere down-regolati, mentre quelli di IFN-γ e TNF-α up-regolati. Di contro, nelle isole pancreatiche di topi femmina, resistenti all’azione diabetogena di STZ, i livelli delle citochine IL-4, IL-10 e TGF-β non sono influenzate. Inoltre, nella patogenesi del diabete le specie reattive dell’ossigeno (ROS) rappresentano i mediatori ultimi della distruzione beta-cellulare.
Nelle malattie croniche infiammatorie, l’attivazione di entrambi i fattori di trascrizione nuclear factor (NF)-κB and activator protein (AP)-1 sono essenziali per l’attivazione genica delle proteine e la progressione della patogenesi. Un ruolo fondamentale dell’NF-kB nel diabete indotto da STZ à ̈ stato recentemente dimostrato dalla completa resistenza all’azione diabetogena della STZ nei topi knock-out per la subunità p50 dell’NF-kB. In seguito a tali premesse, l’inibizione farmacologica dell’attivazione dell’NF-kB potrebbe essere efficace per prevenire l’insorgenza del diabete.
Nella patogenesi delle malattie autoimmuni sono implicate forme infettive acute e croniche anche a livello gastrointestinale che possono contribuire a scatenare la patologia autoimmune stessa.
Descrizione dell’invenzione
Secondo la corrente letteratura scientifica, l’azione terapeutica delle cellule staminali può essere riconducibile a due meccanismi: differenziazione delle cellule staminali in cellule residenti e rilascio di fattori trofici rigenerativi da parte delle cellule staminali. I rispettivi contributi di questi due meccanismi rimangono da chiarire, anche se à ̈ stato ipotizzato che non siano le cellule staminali a trasformarsi in cellule mature del tessuto leso, ma che esse trasmettano dei fattori vitali a questo tessuto, che può così tornare a proliferare e a differenziarsi, rigenerandosi (Figura A.I. Caplan and J.E. Denni. Mesenchymal Stem Cells as Trophic Mediators. J. Cell Bioch 98:1076-1084; 2006).
La terapia con cellule staminali presenta molti problemi legati non solo ai costi e a complicazioni tecniche ed applicative, ma anche a scrupoli etici e religiosi.
La terapia con cellule staminali à ̈ attuabile solo per via iniettiva o, in alcuni casi, topica, e non per via orale. Il sovranatante delle cellule staminali in coltura contiene fattori di crescita, citochine, fattori chemiotattici ecc. che si ritiene siano responsabili dell’effetto benefico della terapia staminale sulla crescita e/o riparazione dei tessuti.
L’eventuale utilizzo dei fattori vitali isolabili dal sovranatante delle cellule staminali presenta, tuttavia, non solo gli stessi problemi etici dell’uso delle cellule staminali stesse ma anche costi molto elevati.
Si à ̈ sorprendentemente scoperto che nei liquidi biologici e in alcuni tessuti dei mammiferi sono presenti gli stessi fattori attivi rilasciati dalle cellule staminali e pertanto presenti nel sovranatante delle colture delle cellule staminali stesse. Le migliori sorgenti di questi fattori sono il siero, la placenta e il colostro dei mammiferi.
La Tabella 1 riporta il confronto qualiquantitativo fra i fattori presenti nel sovranatante delle colture di cellule staminali e i fattori isolati da queste nuove sorgenti da noi denominati POOL OF MATERNAL FACTORS
(P.M.F.).
Tabella 1
P.M.F. Mesenchymal NAME (pg/ml ) stem cells (pg/ml) IL-1 r a IL-1 receptor antagonisr 29.05 0.0
IL-1b Interleukin- 1b 0.09 0.0
IL-2 Interleukin-2 32.05 0.0
IL-4 Interleukin-4 0.17 21.12
IL-6 Interleukin-6 1.26 293,01 IL-8 Interleukm-8 0.71 359.56
IL-9 Interleukin-9 3.66 0.78
IL- 10 Interleukin- 10 2.83 0.99
IL- 12 Interleukin-12 1.73 0.0
IL- 15 Interleukin- 15 4.33 0.5
IL-1 7 Interleukin- 17 21.95 0.32 Eotaxin Eotaxin 5.01 0.0
INF-γ Gamma -interferon 5.97 11.14 MCP-1 Monocyte factor-1 4.12 11.23
PDGF Platelet derived growth factor 11.55 3.08
Tumor necrosis factor 40.00 12.30 Vascular endothelial growth 41.00 208.04 VEGF factor
HGF Hepatocyte growth factor 52.3 100.74 FGF Fìbroblast growth factor 180.15 18.21
TGF- 64.00 51.32
beta1 transforming growth factor
IGF-1 insulin-like growth factor 1.60 0.0
GM- Granulocyte/monocyte-colony 183.S5 0.0 CSF stimulating factor
LIF leukemia inhibitory factor 15.20 27.32 SCF stem cell factor 10.55 4.54 SDF-1 stromal derived factor-1 41.75 28.8 NGF Nerve growth factor 8.33 0.0 BMP-2 Bone morphogenic protein 25.01 2.65
RNA 189 ng/ml 48 pg/ml
Presenza di fattori di crescita/citochine in P.M.F. (pg/ml) e nel surnatante di Cellule Staminali Mesenchimali ( 1 milione di cellule).
È evidente (tabella 1) la maggior concentrazione di quasi tutti i fattori
presenti nel P.M.F. rispetto a quella presente nel sovranatante delle cellule staminali.
È inoltre evidente la possibilità di utilizzare concentrazioni terapeutiche anche molto alte di P.M.F., ad esempio dosi da 0,5/1 g per via topica o iniettiva e dosi fino a 20/30 g per via orale, rispetto alle massime concentrazioni terapeutiche utilizzate di cellule staminali che corrispondono a 1/2 milioni/Kg e pertanto a un massimo di 140 milioni per terapia e, dunque, a valori di fattori sempre dell’ordine dei picogrammi.
L’oggetto dell’invenzione à ̈ quindi una composizione (P.M.F.) contenente in altissima concentrazione tutti i fattori attivi presenti nel sovranatante delle cellule staminali ma isolati, con semplici metodiche estrattive, da fonti naturali molto economiche, di facile reperibilità e senza problemi etici.
Inoltre P.M.F., isolato dai liquidi biologici e dai tessuti di mammiferi, contiene anche fattori antibatterici (transferrina, lisozima, lactoperossidasi, lactoferrina) e anticorpi delle classi IgG e IgA. (P.M.F. Ab).
L’assenza di anticorpi e di antibatterici del sovranatante delle cellule staminali à ̈ un’ulteriore ragione per l’utilizzo di P.M.F. Ab in molti usi terapeutici, topici e per via orale.
Il siero presenta il massimo picco dei fattori negli ultimi giorni prima del parto, il colostro nelle prime ore dopo il parto e non oltre la 6° ora. Già dopo 12 ore dal parto i fattori diminuiscono notevolmente, a 24 h molti di loro non sono più dosabili.
Questi fattori sono geneticamente molto conservati nelle varie specie e pertanto à ̈ possibile usare sull’uomo fattori isolati da altre specie di mammiferi come bovini, equini, cammelli, mammiferi marini ecc.
I fattori sono controllati con metodiche ELISA specifiche per la specie, anche se la cross reazione interspecie à ̈ altissima in quanto i fattori sono filogeneticamente molto conservati e, pertanto, solo qualitativamente sono misurabili anche con ELISA utilizzati per specie diverse (es: uomo-bovino e viceversa).
Una prima fonte dei fattori dell’invenzione à ̈ il siero di mammiferi che, negli ultimi giorni (5-15) prima del parto, à ̈ molto ricco dei fattori attivi oggetto dell’invenzione rispetto a mammiferi non gravidi o ai primi mesi di gravidanza. Si descrive di seguito, a titolo di esempio, una metodica di estrazione da siero.
Si preleva 1 litro di sangue in 4 giorni per 4 prelievi complessivi per non danneggiare l’animale, preferibilmente bovino o equino. Il sangue viene sierato a temperatura ambiente per 24 h e quindi centrifugato per spremere il coagulo. Si recupera il siero (circa il 30/40% del volume totale) a cui si aggiungono, come agenti antisettici, fenossietanolo al 2,5% e diazolidinil-urea all’1%. Il siero così trattato viene quindi frazionato con i seguenti passaggi.
Ultrafiltrazione 300’000 Da
Il campione di siero (congelato a -20°C) ottenuto per coagulazione e centrifugazione da sangue di mammifero viene scongelato a temperatura ambiente e diluito con 2 volumi di acqua demineralizzata. La soluzione ottenuta viene ultrafiltrata su membrana piana a flusso tangenziale Millipore Pellicon Biomax in polyethersulfone da 300’000 Da ad una Pi di 0,5 ÷1 bar, in camera fredda a 4°C.
Il retentato e una frazione corrispondente a circa 1:10 del permeato vengono trasferiti in un tubi da dialisi Spectrum Spectrapor in cellulosa rigenerata da 1’000 Da e dializzati contro acqua demineralizzata.
Ultrafiltrazione 5’000 Da
Il restante permeato viene ultrafiltrato su membrana da 5000 Da. Il permeato dell’ultrafiltrazione da 300’000 Da viene concentrato su membrana piana a flusso tangenziale Millipore Pellicon Biomax in polyethersulfone da 5000 ad una Pi di 0,5÷1 bar, in camera fredda a 4°C.
Il retentato viene trasferito in un tubo da dialisi Spectrum Spectrapor in cellulosa rigenerata da 1’000 Da e dializzato contro acqua demineralizzata (con questa dialisi si eliminano anche i conservanti). Il composto à ̈ quindi immediatamente liofilizzato.
Una seconda fonte dei fattori dell’invenzione à ̈ la placenta. Si descrive di seguito, a titolo di esempio, una metodica di estrazione.
Vengono utilizzate preferibilmente placente bovine o equine.
Omogeneizzazione
La placenta (congelata a -20°C) viene scongelata a temperatura ambiente, tagliata in piccoli pezzi, lavata con abbondante soluzione fisiologica (NaCl 0,9%) fredda (4°C) e omogeneizzata tramite cutter Siramm in un buffer di lisi così composto: Tris/HCl 50 mM, EDTA 25mM, triton X-100 0,001% a pH 7,4. Alla sospensione ottenuta viene aggiunto NaCl fino ad una concentrazione dello 0,9%, e i conservanti (fenossietanolo al 2,5% e diazolidinil-urea all’1%). La sospensione viene posta sotto agitazione (agitatore magnetico) per 2 ore e mantenuta statica overnight in camera fredda a 4°C.
Centrifugazione
La sospensione viene centrifugata a 13’000 rpm con centrifuga Sorvall RC6 e rotore SLA 15000 per 45 minuti a 4°C. Il surnatante della centrifugazione viene recuperato, prefiltrato sotto vuoto su Dicalite e su filtri in cellulosa rigenerata da 0,45 µm e 0,22 µm.
Ultrafiltrazione 300’000 Da
Il prodotto filtrato viene ultrafiltrato su membrana piana a flusso tangenziale Millipore Pellicon Biomax in polyethersulfone da 300’000 Da ad una Pi di 0,5÷1 bar, in camera fredda a 4°C.
Ultrafiltrazione 5’000 Da
Il permeato dell’ultrafiltrazione da 300’000 Da viene concentrato su membrana piana a flusso tangenziale Millipore Pellicon Biomax in polyethersulfone da 5’000 ad una Pi di 0,5 ÷1 bar, in camera fredda a 4°C.
Il retentato viene trasferito in un tubo da dialisi Spectrum Spectrapor in cellulosa rigenerata da 1’000 Da e dializzato contro acqua demineralizzata (si eliminano pertanto anche i conservanti) e quindi immediatamente liofilizzato.
Una ulteriore fonte dei fattori dell’invenzione à ̈ il colostro. Si usa preferibilmente colostro bovino per la facilità di approvvigionamento e le quantità disponibili. E’ particolarmente preferito il colostro da mucche di razza Holstein (Frisona) e Guernsey.E’ stato provato che tali mucche producono colostro con la maggior concentrazione di fattori attivi. Le mucche sono preferibilmente al secondo o terzo parto. Il colostro à ̈ preferibilmente raccolto fra la 1° e la 6° ora dal parto in quanto, in questo periodo, si assiste alla maggior concentrazione di attivi. Nel colostro a partire dalla sesta ora dal parto i fattori attivi diminuiscono rapidamente (dopo 24 ore ne sono presenti solo il 15%).
Il colostro raccolto à ̈ sottoposto a test per tubercolosi, citotossicità su culture cellulari, controllo di micoplasmi, prioni e di virus umani e bovini.
Il colostro nella cisterna mammaria à ̈ praticamente sterile, ma una volta munto, nonostante ogni precauzione, per l’alta concentrazione di fattori di crescita, la sua carica batterica sale molto rapidamente durante la gelatura e la sgelatura, processi piuttosto lenti data l’alta densità del colostro nelle prime ore.
L’utilizzo di raggi γ permette di ottenere un colostro sterile solo se si utilizzano radiazioni superiori a 10 Kgy che tuttavia distruggono gran parte dei fattori attivi, e d’altronde questo metodo non impedisce la formazione di pirogeni il cui utilizzo à ̈ sconsigliabile per via orale o topica e proibito per via parenterale.
È stata pertanto messa a punto una filiera di raccolta innovativa, per ottenere un composto anallergico sterile, senza conservanti e senza pirogeni.
Al colostro raccolto in taniche sterili (sterilizzate a vuoto a 25 Kgy) si aggiungono agenti antisettici in quantità tali da garantire la sterilità e l’assenza di pirogeni. Si impiegano preferibilmente fenossietanolo alla concentrazione del 2,5% e diazolidinil-urea a una concentrazione dell’1%.
Il colostro così trattato può, per brevi periodi (max 30 gg) non essere conservato congelato prima dei processi di estrazione dei fattori attivi, con evidente risparmio dei costi industriali.
I fattori possono essere estratti con i seguenti passaggi:
Centrifugazione
Il colostro bovino viene diluito 1:10 con acqua demineralizzata, si aggiunge NaCl fino ad ottenere una concentrazione dello 0,9%.
La sospensione viene centrifugata in continuo a 8’000 rpm a temperatura di 20-25°C con una centrifuga Alfa Laval scartando il pellet corrispondente alla parte lipidica.
Ultrafiltrazione ceramica da 300’000 Da
Il prodotto ottenuto dalla centrifugazione viene ultrafiltrato su membrana ceramica con cut-off 300’000 Da ad una temperatura di 20-25°C recuperando il permeato.
Ultrafiltrazione su 5000 Da
Il permeato dell’ultrafiltrazione 300’000 Da viene concentrato su membrana a spirale avvolta da 5’000 Da in polyethersulfone ad una temperatura di 20-25°C e dializzato contro acqua demineralizzata fino ad una conducibilità del retentato di circa 600 µs/cm<2>(con questa dialisi si eliminano anche i conservanti).
Liofilizzazione:
Il retentato dell’ultrafiltrazione da 5’000 Da viene filtrato sotto vuoto su filtri Millipore in cellulosa rigenerata da 0,2 µm, congelato a -20°C e liofilizzato.
I prodotti, denominati P.M.F. Ab, presentano sostanzialmente la stessa composizione in fattori attivi indipendentemente dalla fonte (siero, placenta o colostro).
Per i previsti impieghi terapeutici, P.M.F. Ab potrà essere opportunamente formulata in adatte forme di somministrazione orale, endovenosa o topica. Esempi di formulazioni adatte sono capsule, compresse, polveri, fiale sterili, gel o pomate. Il dosaggio per via orale à ̈ tipicamente compreso fra 20 e 40 g/die, mentre quello endovenoso fra 1 e 20 g/die. Il trattamento può essere prolungato per diversi mesi, fino a tre- cinque mesi o più.
L’invenzione à ̈ descritta in maggior dettaglio nella seguente parte sperimentale, data a titolo di esempio, in cui sono stati valutati gli effetti della somministrazione orale profilattica di P.M.F. Ab su diversi modelli di malattie autoimmunitarie quali l’encefalomielite allergica sperimentale (EAE), il diabete di tipo 1, la colite ulcerosa indotta da TNBS, l’epatite indotta da ConA e l’artrite da adiuvante e artrite indotta da collagene.
Esempio 1 - Encefalomielite Allergica Sperimentale
L’encefalomielite allergica sperimentale (Experimental Allergic Encephalomielitis, EAE) à ̈ una malattia immunoinfiammatoria e demielinizzante del sistema nervoso centrale (SNC) ampiamente usata come modello preclinico di sclerosi multipla (SM). L’EAE nel topo offre un prezioso strumento che può essere utilizzato sia per una migliore comprensione dei meccanismi immunopatogenetici coinvolti nella demielinizzazione sia per lo screening in vivo di nuovi composti immunomodulanti che possano eventualmente essere considerati in ambito clinico per la cura dei pazienti con SM. Attualmente la sclerosi multipla nell’uomo à ̈ trattata con composti immunomodulatori/immunosoppressori come gli steroidi, interferone (IFN)-beta, copolimero, ciclofosfamide (CY), mitoxantrone, natalizumab e più recentemente, fingolimod.
Materiali e Metodi
Animali
Topi SJL femmine di 6-7 settimane di età sono stati mantenuti in condizioni di laboratorio standard (libero da germi e patogeni specifici) con libero accesso a cibo ed acqua e sono stati lasciati ad adattarsi per una settimana all’ambiente prima di iniziare lo studio.
Induzione dell’EAE e valutazione clinica
L’EAE à ̈ stata indotta come descritto da J. St. Louis et al. I topi sono stati immunizzati con 75 µg di proteina proteolipidica PLP (139-151) sintetizzata da Genemed synthesis (San Francisco CA), emulsionata in CFA contenente 0,6 mg/ml di Mycobacterium tuberculosis H37RA (Difco, Detroit, MI, USA) in modo da ottenere una emulsione 1:1. Ciascun topo ha ricevuto 200 µl dell’emulsione per via sottocutanea distribuita nei quattro siti in prossimità dei linfonodi ascellari ed inguinali. La tossina pertossica (Calbiochem, Nottingham, UK) utilizzata come co-adiuvante, à ̈ stata dissolta in acqua alla concentrazione di 2 µg/ml ed à ̈ stata somministrata per via intraperitoneale in un volume di 100 µl a giorno 0 e giorno 2 dopo l’immunizzazione. I topi sono stati osservati giornalmente, pesati e valutati per i segni clinici di EAE fino alla fine del trattamento. La valutazione clinica à ̈ stata effettuata da un osservatore ignaro del trattamento secondo il seguente punteggio: 0 = nessun segno di malattia, 1 = coda flaccida, 2 = paraparesi moderata, 3 = paraparesi severa, 4 = stato moribondo, 5 = morte.
Schema sperimentale
Due gruppi di 6-10 topi ciascuno sono stati trattati per via orale a partire da giorno 0 rispettivamente con P.M.F. Ab alla dose di 0,1 g / topo ed il suo veicolo (acqua).
P.M.F. Ab à ̈ stato dissolto in acqua sotto agitazione alla concentrazione di 0,1 mg/ml ed à ̈ stato somministrato ai topi in un volume finale di 0,25 ml.
Principali readouts
I principali readouts per questo studio sono clinici ed includono valutazione clinica dell’EAE, punteggio medio cumulativo, esordio e durata della malattia e variazione di peso corporeo attraverso il periodo di studio.
Analisi statistica
L’analisi statistica à ̈ stata effettuata mediante il t-student test. Un valore di p<0.05 à ̈ stato considerato statisticamente significativo.
Risultati
TossicitÃ
La dose utilizzata di 0,1 g/topo à ̈ stata ben tollerata dai topi come giudicato dal comportamento clinico, dal loro stato fisico e dal guadagno di peso corporeo.
Effetti di P.M.F. Ab sullo sviluppo dell’EAE
Dopo 42 giorni di trattamento con P.M.F. Ab, la malattia si à ̈ sviluppata in solo 2 topi su 6 (33,3%) in confronto a 9 topi su 10 nel gruppo di topi trattati con il veicolo (90%) (Tabella 2, Figura 2). Inoltre, i topi trattati con P.M.F. Ab hanno sviluppato un decorso della malattia più lieve con un punteggio cumulativo medio ed una durata della malattia minore rispetto ad i topi trattati con il veicolo (Tabella 2).
Tabella 2
Effetti del trattamento profilattico con P.M.F. Ab sui parametri clinici nella EAE indotta in topi SJL dal PLP.
Esempio 2 - Diabete mellito di tipo 1 (DM tipo 1)
Il diabete mellito di tipo 1 (DM tipo 1) à ̈ un sindrome multifattoriale causata dalla mancata produzione di insulina endogena, a seguito di una reazione immunomediata dei macrofagi e linfociti T autoreattivi contro le cellule beta pancreatiche di Langerhans. Sebbene attualmente la mortalità associata ad eventi acuti come il coma chetoacidosico risulta essere rara, questa patologia comporta delle complicanze tardive che interessano principalmente, ma non esclusivamente, i reni, l’organo della vista, il sistema nervoso periferico e il sistema vascolare. Queste complicanze croniche rendono il Diabete di tipo I una malattia di notevole impatto socio-economico che ci inducono ad approfondirne la patogenesi mediante diversi studi con lo scopo di individuare nuove strategie terapeutiche per la prevenzione e la cura.
Materiali e Metodi
Animali
Topi maschi C57Bl6J tra 7 e 8 settimane di età sono stati mantenuti in condizioni di laboratorio standard, con libero accesso a cibo ed acqua e sono stati lasciati una settimana per adattarsi all’ambiente prima di iniziare lo studio.
Induzione del diabete immunoinfiammatorio
Per indurre il diabete, ai topi sono stati somministrati i.p. 40 mg/kg di streptozotocina per 5 giorni consecutivi. La diagnosi del diabete viene effettuata mediante la valutazione degli esami clinici (iperglicemia) ed istologici (insulite). Il diabete nella maggior parte degli animali si sviluppa entro 2 settimane dal trattamento con streptozotocina.
Schema sperimentale
Due gruppi di 7-8 topi sono stati trattati per via orale dal giorno 0 fino al giorno 21 sei volte la settimana con P.M.F. Ab ad una dose di 0,2 g/mouse o con veicolo. P.M.F. Ab à ̈ stato dissolto in acqua sotto agitazione alla concentrazione di 0,4 mg/ml ed à ̈ stato somministrato ai topi per os in un volume finale di 0,5 ml.
Diagnosi del diabete
A partire dalla prima iniezione di streptozotocina, i topi sono stati monitorati per lo sviluppo di diabete una volta alla settimana dosando i livelli di glucosio nel sangue prelevato dalla vena caudale dopo 2 ore di digiuno. Il diabete viene diagnosticato quando i livelli di glucosio nel sangue sono pari o superiori a 11,8 mmol/L.
Analisi statistica
L’analisi statistica à ̈ stata effettuata mediante t-test per valori parametrici. Un valore di P <0,05 à ̈ stato considerato statisticamente significativo.
Risultati
Come previsto, i topi appartenenti al gruppo di controllo trattati con il veicolo hanno sviluppato iperglicemia 2 settimane dopo l’ultima iniezione con STZ raggiungendo il 100% di incidenza entro 3 settimane (Figura 3-4). Di contro, il trattamento profilattico con P.M.F. Ab ha completamente protetto i topi dalla iperglicemia indotta dalla STZ (Fig. 3-4). Il trattamento con P.M.F. Ab per 21 giorni alla dose di 0,2 g/topo à ̈ stato ben tollerato durante tutto il periodo di studio come giudicato dal comportamento clinico, dal loro stato fisico e dal guadagno di peso corporeo.
Esempio 3 - Colite ulcerosa indotta da TNBS
Per lo studio dei possibili effetti della P.M.F. Ab su questa patologia autoimmune organo-specifica à ̈ stato impiegato il modello sperimentale di malattia infiammatoria intestinale indotta da Trinitrobenzene Solfato (TNBS) in topi Balb/C.
In questo modello una singola somministrazione intracolica di TNBS à ̈ responsabile della comparsa, entro 4 giorni, di una condizione patologica con caratteristiche cliniche e immunoistologiche del tutto simili a quelle presenti nelle malattie infiammatorie intestinali umane, come la malattia di Crohn e la rettocolite ulcerosa. Queste includono esteso danno colico con zone iperemiche, edematose e ulcerate oltre che un aumento del peso del colon, che dal punto di vista microscopico sono caratterizzate dalla presenza di necrosi, infiammazione e fibrosi. Come nella controparte umana, sembra che il meccanismo patogenetico principale sia un’attivazione delle cellule T e dei macrofagi accompagnata da una eccessiva produzione di citochine proinfiammatorie di tipo 1 come Tumor Necrosis Factor. La valutazione degli effetti di P.M.F. Ab Autoimmune Disease à ̈ stata attuata testando la molecola e osservando le variazioni dei segni istologici macroscopici del danno colico.
Materiali e metodi
A tale scopo sono stati utilizzati 20 topi Balb/C maschi, di peso compreso tra 20-25 g.
Gli animali, prima dell’inizio dell’esperimento, sono stati sottoposti ad un periodo di adattamento di una settimana alle condizioni di stabulazione; essi sono stati mantenuti in condizioni standard di laboratorio, con libero accesso a cibo ed acqua ed in condizioni di temperatura ed umidità controllate.
La colite à ̈ stata indotta a giorno 0, previa leggera anestesia, attraverso una singola somministrazione per via intracolica (i.c.) di 0,1 mL di etanolo al 50% contenente 4 mg di TNBS (Sigma Aldrich, Milano, Italia) per mezzo di un catetere dal diametro esterno di 0,3 mm posto a circa 7 cm prossimamente all’ano. Dopo la somministrazione di TNBS, sono stati insufflati 0,2 ml di aria e il catetere à ̈ stato rimosso. Gli animali sono stati quindi mantenuti per 30 secondi circa in posizione di Trendelemburg.
Gli animali sono stati distribuiti in due gruppi da 10 animali ciascuno e trattati per os rispettivamente con P.M.F. Ab alla dose di 0,2 g/topo e con il corrispondente veicolo (acqua), giornalmente per quattro giorni consecutivi a partire dal giorno dell’induzione (giorni 0, 1, 2 e 3).
Gli animali sono stati sacrificati al quarto giorno dopo l’induzione (giorno 4) per mezzo di inalazione di CO2ed à ̈ stato prelevato un segmento di colon corrispondente agli ultimi 7 cm distali. Il colon à ̈ stato svuotato del materiale enterico eventualmente presente nel lume, inciso longitudinalmente ed aperto per la valutazione dell’Area di Danno della Mucosa (ADM), corrispondente all’area di necrosi macroscopicamente visibile mediante l’utilizzo di un calibro, e la valutazione dello Score di Danno Macroscopico (SDM) secondo i seguenti criteri: 0 = nessun danno; 1 = iperemia localizzata e/o edema; 2 = ulcera lineare < della metà della larghezza del colon; 3 = ulcera lineare > della metà della larghezza del colon; 4 = ulcera circolare < 1 cm; 5 = ulcera circolare tra 1 e 2 cm; 6 =ulcera circolare > 2 cm.
Inoltre à ̈ stato rilevato il peso corporeo degli animali giornalmente a partire dall’induzione fino al giorno del sacrificio.
Risultati
Durante il periodo di studio, à ̈ stata rilevata il 15% di mortalità .
Come atteso, nel gruppo di controllo à ̈ stata riscontrata una riduzione significativa del peso corporeo tra il giorno 0 ed il giorno del sacrificio (-18%), un aumento del peso del colon (0,47 ± 0,16 g) ed un evidente danno nella mucosa del colon (ADM media 68 ± 57 mm<2>: (Tabella 3, Figure 5-6).
Il trattamento con P.M.F. Ab Autoimmune Disease alla dose di 0,1 g/topo ha mostrato una riduzione significativa dell’area di necrosi ed un trend positivo verso la riduzione del peso del colon (Figure 5-6).
Tabella 3
Effetti del trattamento profilattico con P.M.F. Ab sui parametri clinici nella colite indotta in topi Balb/C da TNBS.
Esempio 4 - Epatite Autoimmune
Per lo studio dei possibili effetti di P.M.F. Ab su questa patologia autoimmune organo-specifica à ̈ stato impiegato il modello sperimentale di epatite indotta da Con A in topi NMRI.
In questo modello la sola iniezione di Con A à ̈ sufficiente per sviluppare lesioni epatiche immuno mediate. Infatti, entro 8-24h dalla somministrazione della Con A il quadro patologico à ̈ caratterizzato da segni sia clinici che istologici di epatite con innalzamento dell’attività transaminasica nel plasma, infiltrazione flogistica intralobulare con accumulo massivo di granulociti, alterazioni necrotiche delle cellule epatiche. L’epatite indotta da Con A à ̈ sia dipendente dalle cellule T CD4+ che dai macrofagi. È stato condotto un esperimento per la valutazione dei possibili effetti benefici di P.M.F. Ab sull’insorgenza e il decorso di questa malattia.
Materiali e metodi
A tale scopo sono stati utilizzati 20 topi albini maschi NMRI, di età compresa tra 6 e 7 settimane.
Gli animali, prima dell’inizio dell’esperimento, sono stati sottoposti ad un periodo di adattamento di una settimana alle condizioni di stabulazione; essi sono stati mantenuti in condizioni standard di laboratorio, con libero accesso a cibo e acqua ed in condizioni di temperatura ed umidità controllate. Il cibo à ̈ stato allontanato 16h prima dell’inizio degli esperimenti.
L’epatite à ̈ stata indotta, previa anestesia, inoculando per via endovenosa attraverso la vena della coda 20 mg/kg di Con A (Sigma Chemical, St. Louis, MO), disciolta in PBS Sterile.
Gli animali sono stati distribuiti in due gruppi da 10 animali ciascuno e trattati per os rispettivamente con P.M.F. Ab alle dosi di 0,2 g/topo e con il corrispondente veicolo (Acqua) 24 h prima e 1h prima dell’inoculazione della Con A.
Gli animali sono stati sacrificati 8h dopo l’iniezione con la Con A (poiché à ̈ stato dimostrato in esperimenti precedenti che à ̈ questo il tempo necessario per evidenziare lesioni epatiche dopo l’inoculo della Con A) per raccogliere campioni di sangue venoso periferico.
L’attività della glutammato-piruvato transaminasi (GPT) nel plasma à ̈ stata determinata da uno standard fotometrico saggiato usando un analizzatore bicromatico.
Risultati
Dopo il sacrificio e in accordo con studi precedenti, si sono riscontrati segni acuti di danni epatici in tutti i topi del gruppo di controllo inoculati con Con A e trattati con acqua. Questi animali presentavano, infatti, aumenti marcati di GPT nel plasma, raggiungendo un valore medio di 1556 ± 869 U/l (Tabella 4).
Tabella 4: Tabella riassuntiva dati esperimento Epatite indotta da Con A in topi NMRI, trattamento con P.M.F. Ab
Il trattamento con P.M.F. Ab alla dose di 0,2 g/topo ha ridotto significativamente i livelli di GPT nel plasma (p<0,01 tramite t test di Student). (Figura 7).
Esempio 5 - Artrite indotta da adiuvante in ratti Lewis (AIA) La malattia può essere indotta sia in ratti inbred (Lewis) che outbred (Sprague Dawley) con una singola inoculazione sottocutanea di micobatteri uccisi sospesi nell’adiuvante incompleto di Freund; l’alterazione macroscopica delle articolazioni tende a diventare clinicamente evidente nell’arco di circa 14 giorni dopo l’induzione. Solitamente la gravità di malattia aumenta nelle prime due settimane per diminuire poi gradualmente nel corso delle 1-3 settimane successive. Rigonfiamento articolare e deformità possono persistere anche per un lungo periodo di tempo, particolarmente alla caviglia.
Questo modello di malattia condivide caratteristiche significative con l’artrite reumatoide umana: infatti l’AIA à ̈ una malattia infiammatoria immunologicamente mediata da cellule T e macrofagi.
Gli effetti di P.M.F. Ab sono stati valutati testando la molecola alla dose di 0,2 g/topo nell’ambito del modello sperimentale in esame; gli animali sono stati osservati a giorni alterni per la valutazione dei parametri clinici significativi di malattia.
Materiali e metodi
A tale scopo sono stati utilizzati 28 ratti Lewis maschi, di età compresa tra 8 e 12 settimane e peso tra 170 g e 215 g. Gli animali, prima dell’inizio dell’esperimento, sono stati sottoposti ad un periodo di adattamento di una settimana alle condizioni di stabulazione; essi sono stati, previa randomizzazione, distribuiti nelle gabbie e mantenuti in condizioni standard di laboratorio, con libero accesso a cibo e acqua ed in condizioni di temperatura ed umidità controllate.
La malattia à ̈ stata indotta con una singola iniezione intradermica alla base della coda di un’emulsione, del volume totale di 200 µl, contenente 1 mg di Mycobacterium tuberculosis ceppo H37Ra (Difco, Detroit, MI) ucciso al calore e l’adiuvante incompleto di Freund (Sigma, Milano, Italia).
Gli animali sono stati distribuiti in 3 gruppi da 8-10 animali ciascuno e trattati rispettivamente per os con P.M.F. Ab alla dose di 0,2 g/topo e con il rispettivo veicolo (acqua) e, per via intraperitoneale, con dexametasone alla dose di 1 mg/Kg per 30 giorni consecutivi a partire dal giorno dell’immunizzazione (regime profilattico).
Gli animali sono stati controllati a giorni alterni da un osservatore ignaro del trattamento, registrandone il peso e valutandone i parametri clinici di malattia secondo i seguenti criteri:
0 = nessun segno clinicamente evidente di artrite
1 = gonfiore e/o rossore di una zampa o di un dito
2 = coinvolgimento di due articolazioni
3 = coinvolgimento di più di due articolazioni
4 = artrite severa dell’intera zampa e delle dita
L’indice clinico di artrite per ogni animale à ̈ stato calcolato sommando i 4 punteggi di ogni zampa.
La gravità clinica à ̈ stata inoltre determinata quantificando settimanalmente la variazione del volume della zampa mediante pletismometria (modello 7140; Ugo Basile).
Risultati
Il gruppo di controllo ha sviluppato segni clinici artrite-associati entro giorno 15 dall’induzione, mostrando un incremento graduale sia nello score artritico, sia nel volume della zampa raggiungendo un valore massimo a giorno 20 post induzione (Figure 8-9) Inoltre non à ̈ stata osservata alcuna mortalità .
Il trattamento con P.M.F. Ab alla dose di 0,2 g/topo ha mostrato la capacità di ridurre in maniera significativa il punteggio clinico di malattia ed il volume della zampa a partire dal giorno 14 post-induzione fino alla fine dell’esperimento. Come atteso il trattamento con Desametasone, assunto come controllo positivo, ha completamente protetto dallo sviluppo della malattia (Figure 10-11). Non à ̈ stata osservata alcuna differenza significativa nella variazione di peso corporeo tra i gruppi trattati ed il gruppo di controllo rispetto al giorno dell’induzione (Dati non mostrati).
Esempio 6 - Artrite indotta da collagene di tipo II in topi DBA/1j (CIA)
La malattia può essere indotta sia in topi che in ratti mediante inoculazione intradermica di collagene di tipo II omologo o eterologo emulsionato in adiuvante completo di Freund.
Un vantaggio di questo modello di artrite rispetto ad altri modelli di artrite come AIA Ã ̈ lo sviluppo di una risposta artritogenica verso un antigene ben definito (Collagene di tipo II) che permette inoltre di studiare i fenomeni immunologici antigene-indotti e le loro selettive modificazioni indotte da interventi farmacologici.
Gli effetti di P.M.F. Ab sono stati valutati testando il composto alla dose di 0,2 g/topo nell’ambito del modello sperimentale in esame. Gli animali sono stati osservati a giorni alterni per la valutazione dei parametri clinici significativi di malattia.
Materiali e metodi
A tal scopo sono stati utilizzati 40 topi DBA/j1 maschi, di età compresa tra 8 e 9 settimane.
Gli animali, prima dell’inizio dell’esperimento, sono stati sottoposti ad un periodo di adattamento di una settimana alle condizioni di stabulazione; essi sono stati, previa randomizzazione, distribuiti nelle gabbie e mantenuti in condizioni standard di laboratorio, con libero accesso a cibo e acqua ed in condizioni di temperatura ed umidità controllate.
La malattia à ̈ stata indotta mediante inoculazione intradermica (i.d.) alla base della coda di un’emulsione del volume di 100 µl contenente 100 µg di Collagene di tipo II bovino (Chondrex, Inc., Redmond, WA) emulsificato in adiuvante completo di Freund (CFA) (Sigma, Milano, Italia). Al giorno 21 post-immunizzazione, gli animali hanno ricevuto un secondo booster mediante iniezione intradermica di 100 µg di Collagene di tipo II in un volume totale di 100 µl in adiuvante incompleto di Freund.
Gli animali sono stati distribuiti in quattro gruppi da 10 animali ciascuno e sono stati trattati rispettivamente per os con P.M.F. Ab alla dose di 0,2 g/topo, con il corrispettivo veicolo (PBS sterile) e con Desametasone alla dose di 0,3 mg/kg, giornalmente a partire dal giorno dell’induzione della malattia fino al giorno 30 post-induzione (regime profilattico), à ̈ stato inoltre aggiunto un gruppo di 10 topi sani (Sham). Gli animali sono stati controllati a giorni alterni da un osservatore ignaro del trattamento, registrandone il peso e valutandone i parametri clinici di malattia secondo i seguenti criteri:
0 = nessun segno clinicamente evidente di artrite
1 = gonfiore e/o rossore di una zampa o di un dito
2 = coinvolgimento di due articolazioni
3 = coinvolgimento di più di due articolazioni
4 = artrite severa dell’intera zampa e delle dita
L’indice clinico di artrite per ogni animale à ̈ stato calcolato sommando i 4 punteggi di ogni zampa. La gravità della malattia à ̈ stata inoltre determinata quantificando a giorni alterni la variazione dello spessore della zampa mediante un calibro digitale.
Risultati
Gli animali appartenenti al gruppo di controllo hanno sviluppato segni clinici artrite-associati entro 29 giorni dall’induzione, mostrando un incremento graduale sia dello score clinico di malattia che dello spessore delle zampe, raggiungendo un valore massimo a giorno 40 (Figure 10-11). Nessuna differenza à ̈ stata evidenziata tra l’incremento di peso corporeo nel gruppo di topi trattato con P.M.F. Ab ed il gruppo di controllo trattato con il veicolo (dati non mostrati). Inoltre non à ̈ stata riscontrata alcuna mortalità .
Il trattamento profilattico con P.M.F. Ab alla dose di 0,2 g/topo ha mostrato la capacità di ridurre in maniera significativa il punteggio clinico di malattia (p<0,05 vs veicolo con t-test) da giorno 30 a giorno 33 post-induzione ed un trend positivo da giorno 34 fino alla fine dello studio. È stata inoltre osservata ed una riduzione significativa dell’edema della zampa nei giorni 30, 40 e 43 post induzione. Il trattamento con Desametasone alla dose di 0,3 mg/kg, assunto come controllo positivo, ha completamente protetto dallo sviluppo della malattia (Figure 10-11).
Nessuna variazione significativa à ̈ stata riscontrata tra i gruppi in esame rispetto al gruppo di controllo dall’analisi delle modificazioni percentuali del peso corporeo rispetto al giorno dell’induzione (Dati non mostrati).
Conclusioni
Questi dati indicano che il trattamento profilattico con P.M.F. Ab esercita effetti benefici sullo sviluppo della malattia indotta in topi SJL da PLP, previene drasticamente lo sviluppo di diabete immunoinfiammatorio indotto da STZ in topi C57Bl6 e riduce in maniera significativa il decorso clinico della colite indotta da TNBS, l’epatite indotta da ConA, l’artrite indotta da adiuvante e l’artrite indotta da collagene. Studi in vivo hanno dimostrato che le citochine pro infiammatorie di tipo 1 quali TNF-alfa, IFN-gamma e IL-1 beta vengono espresse nelle isole pancreatiche durante lo sviluppo di diabete indotto da STZ e che gli inibitori specifici di IL-1 e IFN-gamma prevengono lo sviluppo della malattia. Sembra probabile che un potenziale meccanismo attraverso il quale P.M.F. Ab garantisce la protezione contro il diabete MLD-STZ-indotto si basi sulla sua capacità di sopprimere la produzione di citochine proinfiammatorie di tipo 1 quali IFN-gamma, TNF-alfa e di IL-1. La ridotta produzione di queste citochine potrebbe, a sua volta, ridurre la produzione di radicali liberi e di ossido nitrico che perpetuano ed aggravano il circuito vizioso della distruzione delle cellule beta. Un meccanismo analogo potrebbe essere ipotizzato per gli effetti esercitati da P.M.F. Ab nella sclerosi multipla e nelle altre patologie autoimmuni fin qui considerate in cui il ruolo cruciale che si conferisce alle citochine nell’influenzare il decorso clinico delle suddette malattie, à ̈ evidenziato dai livelli delle stesse durante le varie fasi della malattia.
FIGURA 2
Effetti del trattamento profilattico con P.M.F. Ab sul punteggio medio della malattia nella EAE indotta in topi SJL dal PLP.
FIGURA 3
Effetti del trattamento profilattico con P.M.F. Ab sui livelli di glucosio in topi C57Bl6 con diabete MLD-STZ-indotto.
FIGURA 4
Effetti del trattamento profilattico con P.M.F. Ab sull’incidenza della malattia diabetica MLD-STZ-indotta nei topi C57Bl6.
FIGURA 5
Effetti del trattamento profilattico con P.M.F. Ab sul peso del colon nella colite indotta in topi Balb/C da TNBS
FIGURA 6
Effetti del trattamento profilattico con P.M.F. Ab sul peso del colon nella colite indotta in topi Balb/C da TNBS
FIGURA 7
Valori Sierologici medi esperimento Epatite indotta da Con A in topi NMRI, trattamento con P.M.F. Ab
FIGURA 8
Effetti del trattamento profilattico con P.M.F. Ab sul decorso clinico dell’artrite indotta da adiuvante in ratti Lewis.
FIGURA 9
Effetti del trattamento profilattico con P.M.F. Ab sull’edema della zampa nell’artrite indotta da adiuvante in ratti Lewis.
FIGURA 10
Effetti del trattamento profilattico con P.M.F. Ab sul decorso clinico dell’artrite indotta da collagene in topi DBA1.
FIGURA 11
Effetti del trattamento profilattico con P.M.F. Ab sullo spessore della zampa nell’artrite indotta da collagene in topi DBA1.
Claims (5)
- RIVENDICAZIONI 1. Composizioni comprendenti citochine, fattori di crescita, RNA ed eventualmente anticorpi isolati da siero, placenta e colostro, per la terapia orale delle malattie autoimmuni.
- 2. Composizioni secondo la rivendicazione 1 comprendenti Basic FGF (fibroblast growth factor), TGF-beta1 (transforming growth factor): IGF-1 (insulin-like growth factor), NGF (nerve growth factor), PDGF (platelet-derived growth factor), VEGF (vascular endothelial growth factor), GM-CSF (human granulocyte colony-stimulating factor), LIF SCF (stem cell factor), SDF-1 (stromal derived factor-1), IL-2, IL-6, IL-9, IL-12, IL-15, IL-17, INF-gamma (gamma interferon), TNF (tumor necrosis factor), IL1-ra, IL10, Eotaxina, IP-10, MCP-1, RNA, Immunoglobuline.
- 3. Composizioni secondo la rivendicazione 1 o 2 ottenute da siero di mammiferi.
- 4. Composizioni secondo la rivendicazione 1 o 2 ottenute da placenta.
- 5. Composizioni secondo la rivendicazione 1 o 2 ottenute da colostro.
Priority Applications (9)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT002435A ITMI20112435A1 (it) | 2011-12-30 | 2011-12-30 | Profilassi e terapia delle malattie autoimmuni con citochine e fattori di crescita, antibatterici e anticorpi, isolati dai tessuti e dai liquidi biologici dei mammiferi |
| EP12816671.7A EP2797609B1 (en) | 2011-12-30 | 2012-12-27 | Combination of growth factors, cytokines, antibacterial/antiviral factors, stem cell stimulating factors, complement proteins c3a/c4a, immunoglobulins and chemotactic factors |
| ES12816671.7T ES2609352T3 (es) | 2011-12-30 | 2012-12-27 | Combinación de factores de crecimiento, citoquinas, factores antibacterianos/antivíricos, factores estimulantes de células madre, proteínas del complemento C3a/C4a, inmunoglobulinas y factores quimiotácticos |
| RU2014128297A RU2642650C2 (ru) | 2011-12-30 | 2012-12-27 | Комбинация факторов роста, цитокинов, антибактериальных/антивирусных факторов, факторов стволовых клеток, белков комплемента с3а/с4а, иммуноглобулинов и хемотаксических факторов |
| JP2014549467A JP6139562B2 (ja) | 2011-12-30 | 2012-12-27 | 成長因子、サイトカイン、抗菌／抗ウイルス因子、幹細胞刺激因子、補体タンパク質ｃ３ａ／ｃ４ａ、免疫グロブリンおよび走化性因子の組合せ |
| US14/369,127 US9555084B2 (en) | 2011-12-30 | 2012-12-27 | Combination of growth factors, cytokines, antibacterial/antiviral factors, stem cell stimulating factors, complement proteins C3a/C4a, immunoglobulins and chemotactic factors |
| PCT/EP2012/076962 WO2013098333A1 (en) | 2011-12-30 | 2012-12-27 | Combination of growth factors, cytokines, antibacterial/antiviral factors, stem cell stimulating factors, complement proteins c3a/c4a, immunoglobulins and chemotactic factors |
| DK12816671.7T DK2797609T3 (en) | 2011-12-30 | 2012-12-27 | COMBINING growth factors, cytokines, anti-bacterial / ANTIVIRALS FACTORS STEM CELL-STIMULATING FACTORS, complement C3A / C4A, immunoglobulins, and chemotactic factors |
| US15/377,190 US10098927B2 (en) | 2011-12-30 | 2016-12-13 | Combination of growth factors, cytokines, antibacterial/antiviral factors, stem cell stimulating factors, complement proteins C3A/C4A, immunoglobulins and chemotactic factors |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT002435A ITMI20112435A1 (it) | 2011-12-30 | 2011-12-30 | Profilassi e terapia delle malattie autoimmuni con citochine e fattori di crescita, antibatterici e anticorpi, isolati dai tessuti e dai liquidi biologici dei mammiferi |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ITMI20112435A1 true ITMI20112435A1 (it) | 2013-07-01 |
Family
ID=45809443
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| IT002435A ITMI20112435A1 (it) | 2011-12-30 | 2011-12-30 | Profilassi e terapia delle malattie autoimmuni con citochine e fattori di crescita, antibatterici e anticorpi, isolati dai tessuti e dai liquidi biologici dei mammiferi |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| IT (1) | ITMI20112435A1 (it) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2009113065A1 (en) * | 2008-03-13 | 2009-09-17 | Hadasit Medical Research Services & Development Ltd. | Immuno-modulating compositions for the treatment of immune-mediated disorders |
-
2011
- 2011-12-30 IT IT002435A patent/ITMI20112435A1/it unknown
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2009113065A1 (en) * | 2008-03-13 | 2009-09-17 | Hadasit Medical Research Services & Development Ltd. | Immuno-modulating compositions for the treatment of immune-mediated disorders |
Non-Patent Citations (8)
| Title |
|---|
| CHEN XI ET AL: "Identification and characterization of microRNAs in raw milk during different periods of lactation, commercial fluid, and powdered milk products", CELL RESEARCH, vol. 20, no. 10, October 2010 (2010-10-01), pages 1128 - 1137, XP002680648 * |
| EBINA T ET AL: "Treatment of multiple sclerosis with anti-measles cow colostrum", MEDICAL MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY, SPRINGER, DE, vol. 173, no. 2, 1 September 1984 (1984-09-01), pages 87 - 93, XP009120465, ISSN: 0300-8584, DOI: DOI:10.1007/BF02124822 * |
| GREEN BEAUTY: "MFIII Human Placenta", 2 July 2007 (2007-07-02), XP002680651, Retrieved from the Internet <URL:http://web.archive.org/web/20070702193436/http://www.greenbeautyproduct.com/human-placenta.htm> [retrieved on 20120724] * |
| LANDEK-SALGADO M. ET AL.: "Placenta Extract as a Novel Immunosuppressor of Autoimmune Diseases", 1 January 2009 (2009-01-01), XP002680650, Retrieved from the Internet <URL:http://pathology.jhu.edu/department/research/PYID/2009/Basic_Landek-Salgado.pdf> [retrieved on 20120724] * |
| LANDEK-SALGADO M. ET AL.: "Placental extract suppresses mouse models of autoimmunity", THE JOURNAL OF IMMUNOLOGY, vol. 184, no. 83.4, 1 January 2010 (2010-01-01) - 1 January 2010 (2010-01-01), XP002680649, Retrieved from the Internet <URL:http://www.jimmunol.org/cgi/content/meeting_abstract/184/1_MeetingAbstracts/83.4> [retrieved on 20120724] * |
| MELISSA ANNE LANDEK-SALGADO: "PLACENTAL PROTEINS, INTERLEUKIN-12 AND INTERLEUKIN-15 INFLUENCE - THE PATHOGENESIS OF AUTOIMMUNE DISEASES IN MICE", 1 March 2010 (2010-03-01), XP002680618, Retrieved from the Internet <URL:http://gradworks.umi.com/3410201.pdf> [retrieved on 20120723] * |
| NITSCH A ET AL: "The clinical use of bovine colostrum", JOURNAL OF ORTHOMOLECULAR MEDICINE, REGINA, CA, vol. 13, no. 2, 1 June 1998 (1998-06-01), pages 110 - 118, XP009150950, ISSN: 0834-4825 * |
| STRUFF W G ET AL: "Bovine colostrum as a biologic in clinical medicine: a review--Part II: clinical studies", INTERNATIONAL JOURNAL OF CLINICAL PHARMACOLOGY AND THERAPEUTICS, DUSTRI-VERLAG, DEISENHOFEN-MUENCHEN, DE, vol. 46, no. 5, 1 May 2008 (2008-05-01), pages 211 - 225, XP009150270, ISSN: 0946-1965 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Nave et al. | Morphology and immunology of the human palatine tonsil | |
| Ellis et al. | The role of the spleen in immunity: with special reference to the post-splenectomy problem in infants | |
| Triger et al. | Bacterial and dietary antibodies in liver disease | |
| Waksman et al. | Specialized amplification elements in the immune system | |
| Jacobs et al. | Respiratory syncytial and other viruses associated with respiratory disease in infants | |
| Errahali et al. | Allergen in soy oils. | |
| Ramaswamy et al. | Evidence for an interleukin 4-inducible immunoglobulin E uptake and transport mechanism in the intestine. | |
| Vossen et al. | Successful treatment of an infant with severe combined immunodeficiency by transplantation of bone marrow cells from an uncle | |
| ES2438096T3 (es) | Utilización de péptidos tipo LPA para el tratamiento de enfermedades inflamatorias intestinales y diabetes tipo 1 | |
| Frix III et al. | Acute miliary tuberculosis in a child with anhidrotic ectodermal dysplasia | |
| ITMI20112435A1 (it) | Profilassi e terapia delle malattie autoimmuni con citochine e fattori di crescita, antibatterici e anticorpi, isolati dai tessuti e dai liquidi biologici dei mammiferi | |
| RU2342941C2 (ru) | Применение экстрактов из пеларгонии | |
| Zinneman et al. | Steatorrhea and probable tuberculosis with acquired hypogammaglobulinemia | |
| Frommhagen et al. | Heparin-like anticoagulants from mollusca | |
| Van Oosterhout et al. | Lymphocytes and bronchial hyperresponsiveness | |
| Mestecky et al. | Historical aspects of mucosal immunology | |
| Subramanian et al. | Rejection of mesencephalic retinal xenografts in the rat induced by systemic administration of recombinant interferon-γ | |
| Tharwat et al. | Pyodermatitis-pyostomatitis vegetans associated with autoimmune hepatitis: unreported co-existence | |
| Fuchs et al. | First trimester listeriosis with normal fetal outcome | |
| LEFF et al. | Hemorrhagic and interstitial pneumonitis with nephritis | |
| WO2024098075A1 (en) | Invariant natural killer t cells for treating acute respiratory distress syndrome (ards) | |
| Loria et al. | Maturation of intestinal defenses against peroral infection with group B coxsackievirus in mice | |
| Kimmelman et al. | Immunodeficiency in pediatric otolaryngology | |
| Guy | Erythema Multiforme: A Clinical and Laboratory Study of Forty-Seven Cases | |
| Sargant | Safety of combined antidepressant drugs. |