IT202100003032A1 - EVALUATION OF THE IMMUNE SYSTEM THROUGH SEVEN FACTOR "SEVEN TEST" - Google Patents

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Description

VALUTAZIONE DEL SISTEMA IMMUNITARIO MEDIANTE SETTE FATTORI ASSESSMENT OF THE IMMUNE SYSTEM THROUGH SEVEN FACTOR

?SEVEN TEST? ?SEVEN TEST?

DESCRIZIONE CAMPO DELL?INVENZIONE FIELD DESCRIPTION OF THE INVENTION

L?invenzione concerne un metodo per la valutazione della normofunzionalit? del sistema immunitario in un soggetto. Viene altres? descritto un apparato elettronico configurato per eseguire il metodo secondo l?invenzione. Does the invention concern a method for assessing normal functionality? of the immune system in a person. Is it also coming? described an electronic apparatus configured to carry out the method according to the invention.

STATO DELLA TECNICA STATE OF THE ART

Le malattie infettive causate da virus, come ad esempio l?influenza, si presentano con febbre, dolori muscolari e articolari, congestione nasale, cefalea. L'influenza ha un'alta contagiosit?, unita alla capacit? del virus di mutare da una stagione all'altra. Nelle categorie pi? fragili, come anziani e pazienti con patologie croniche, come BPCO, cardiopatie e diabete, l?influenza pu? avere complicanze gravi. Infectious diseases caused by viruses, such as the flu, present themselves with fever, muscle and joint pain, nasal congestion, headache. The flu has a high contagiousness, combined with the ability to of the virus to mutate from one season to another. In the most popular categories frail, such as the elderly and patients with chronic conditions, such as COPD, heart disease and diabetes, the flu can have serious complications.

Altre infezioni, causate da virus differenti, possono avere conseguenze diverse, come ad esempio la malattia da coronavirus (COVID-19), che colpisce in vari modi. La maggior parte delle persone presenta sintomi lievi o moderati e guarisce senza necessit? di ricovero in ospedale, ma i sintomi possono essere molto pi? severi in alcuni casi. Other infections, caused by different viruses, can have different consequences, such as the coronavirus disease (COVID-19), which affects in various ways. Most people have mild or moderate symptoms and recover without need. of hospitalization, but the symptoms can be much more? severe in some cases.

Attualmente non ? ancora stata messa a punto una procedura per prevedere la risposta immunitaria di ciascun soggetto di fronte a un?infezione. Not currently? a procedure has yet to be developed to predict the immune response of each subject in the face of an infection.

La Tipizzazione linfocitaria ? un esame complesso, chiamato anche ?studio delle sottopopolazioni linfocitarie?, che tramite strumenti altamente tecnologici e metodiche avanzate riesce a individuare e quantificare i diversi tipi di linfociti partendo da un prelievo di sangue venoso. Lymphocyte typing? a complex examination, also called ?study of lymphocyte subpopulations?, which through highly technological tools and advanced methods is able to identify and quantify the different types of lymphocytes starting from a venous blood sample.

I linfociti sono globuli bianchi che svolgono un importante ruolo nell?omeostasi immunitaria e si dividono in: Lymphocytes are white blood cells that play an important role in immune homeostasis and are divided into:

- Linfociti T: responsabili della risposta immunitaria cellulo-mediata. A loro volta si dividono in Linfociti T helper e Linfociti T citotossici; - T lymphocytes: responsible for the cell-mediated immune response. In turn, they are divided into helper T lymphocytes and cytotoxic T lymphocytes;

- Linfociti B: responsabili della risposta immunitaria umorale. Producono gli anticorpi (immunoglobuline); - B lymphocytes: responsible for the humoral immune response. They produce antibodies (immunoglobulins);

- Cellule NK: un particolare tipo di linfociti ad attivit? antitumorale e anti-virale. - NK cells: a particular type of lymphocytes with activity? anticancer and anti-viral.

Per il medico lo studio delle popolazioni linfocitarie rappresenta un indispensabile parametro, anche se di non facile interpretazione, nello studio delle patologie ematologiche e immunitarie. Un aumento dei valori normali si osserva in caso di infezioni, allergie e malattie autoimmuni. For the doctor, the study of lymphocyte populations represents an indispensable parameter, even if not easy to interpret, in the study of hematological and immune diseases. An increase in normal values is observed in infections, allergies and autoimmune diseases.

L?esame della tipizzazione linfocitaria rappresenta un indispensabile parametro nella diagnosi di malattie ematologiche e del sistema immunitario, ed ? applicabile a cellule in sospensione (sangue periferico, midollo osseo, tessuti in sospensione) ed a preparati stabili su vetrino (sezioni di tessuto, strisci citocentrifugati) con i metodi: immunofluorescenza diretta ed indiretta, immunoenzimatici, anticorpi monoclonali. The examination of lymphocyte typing represents an indispensable parameter in the diagnosis of hematological and immune system diseases, and is ? applicable to cells in suspension (peripheral blood, bone marrow, tissues in suspension) and to stable preparations on slides (tissue sections, cytocentrifuged smears) with the methods: direct and indirect immunofluorescence, immunoenzymatic, monoclonal antibodies.

Questa analisi trova applicazione in diverse patologie: This analysis finds application in different pathologies:

- nelle malattie linfoproliferative permette di caratterizzare il tipo di neoplasia e definire la prognosi; - in lymphoproliferative diseases it allows to characterize the type of neoplasm and define the prognosis;

- nelle immunodeficienze primitive permette di dimostrare la riduzione o l?assenza di determinate popolazioni di linfociti circolanti; - in primary immunodeficiencies it allows to demonstrate the reduction or the absence of certain populations of circulating lymphocytes;

- nelle immunodeficienze secondarie mediante il rapporto CD4/CD8, per valutare variazioni dovute all?et? (in quanto dopo i 50 anni inizia l?abbassamento dell?attivit? immunitaria), infezioni virali, neoplasie, sarcoidosi; - in secondary immunodeficiencies using the CD4/CD8 ratio, to evaluate variations due to age? (because after the age of 50 the lowering of the immune activity begins), viral infections, neoplasms, sarcoidosis;

- nelle malattie autoimmuni, nelle neoplasie e nelle malattie infettive (virali acute, protratte, croniche), nel periodo post-trapianto d?organo, permette di valutare il grado di attivazione delle cellule immunocompetenti. - in autoimmune diseases, neoplasms and infectious diseases (acute, protracted, chronic viral), in the post-organ transplant period, it allows to evaluate the degree of activation of the immunocompetent cells.

La particolare difficolt? che caratterizza la lettura di questo tipo di analisi, unitamente al fatto che questo tipo di analisi viene fatto per valutare uno stato patologico ? alla base dell?assenza di una valutazione del benessere dello stato immunitario nei soggetti sani. The particular difficulty? that characterizes the reading of this type of analysis, together with the fact that this type of analysis is done to evaluate a pathological state? at the basis of the absence of an assessment of the well-being of the immune status in healthy subjects.

Scopo della presente invenzione ? pertanto quello di fornire un test adatto a una rapida e precoce analisi del benessere del sistema immunitario in un soggetto sano, in modo da poter prevedere l?eventuale difesa da agenti patogeni esterni e di valutare la risposta immunitaria in modo diretto. Purpose of the present invention? therefore that of providing a test suitable for a rapid and early analysis of the well-being of the immune system in a healthy subject, in order to be able to predict any defense against external pathogens and to evaluate the immune response directly.

SOMMARIO DELL?INVENZIONE SUMMARY OF THE INVENTION

In questo periodo ? fondamentale capire lo stato immunitario per l?eventuale somministrazione di vaccini e, aspetto essenziale, stabilire chi ? pi? sensibile ad agenti patogeni. In this time ? it is essential to understand the immune status for the possible administration of vaccines and, essential aspect, to establish who is? more sensitive to pathogens.

L?invenzione concerne un metodo per la valutazione di normofunzionalit? del sistema immunitario in un soggetto mediante le fasi di: The invention concerns a method for the evaluation of normofunctionality? of the immune system in an individual through the stages of:

a. misurare in vitro il valore assoluto dei seguenti parametri da un campione di sangue: CD3, CD4, CD8, CD 19 e CD16; to. measure in vitro the absolute value of the following parameters from a blood sample: CD3, CD4, CD8, CD19 and CD16;

b. misurare i valori in percentuale di CD3/CD4 e di CD3/CD8 ed il rapporto CD4/CD8; b. measure the CD3/CD4 and CD3/CD8 percentage values and the CD4/CD8 ratio;

c. analizzare i valori di CD3, CD3/CD4, CD3/CD8, CD 19 e CD16, e il rapporto CD4/CD8; c. analyze the values of CD3, CD3/CD4, CD3/CD8, CD 19 and CD16, and the CD4/CD8 ratio;

in cui i valori della fase c. sono indice della normofunzionalit? o benessere del sistema immunitario. where the values of phase c. are they an indication of normofunctionality? or well-being of the immune system.

Tale metodo ? stato denominato ?Test di valutazione della funzionalit? del sistema immunitario- Seventest?. This method? been called ?Functionality Evaluation Test? of the immune system - Seventest?.

Le rivendicazioni dipendenti descrivono forme di realizzazione particolari dell?invenzione. The dependent claims describe particular embodiments of the invention.

DESCRIZIONE DETTAGLIATA DELL?INVENZIONE DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

L?invenzione pertanto concerne un metodo, o ?Seventest?, per la valutazione del benessere o normofunzionalit? del sistema immunitario in un soggetto mediante le fasi di: The invention therefore concerns a method, or ?Seventest?, for the assessment of well-being or normofunctionality? of the immune system in an individual through the stages of:

a. misurare in vitro il valore assoluto dei seguenti parametri da un campione di sangue: CD3, CD4, CD8, CD 19 e CD16; to. measure in vitro the absolute value of the following parameters from a blood sample: CD3, CD4, CD8, CD19 and CD16;

b. misurare i valori in percentuale di CD3/CD4 e di CD3/CD8 ed il rapporto CD4/CD8; b. measure the CD3/CD4 and CD3/CD8 percentage values and the CD4/CD8 ratio;

calcolare il rapporto CD4/CD8, che in caso di normo-funzionalit? ? a favore del CD4 ovvero il CD4 (helper) deve essere superiore ai CD8 (suppressor); calculate the ratio CD4/CD8, which in the case of normo-functionality? ? in favor of CD4 or the CD4 (helper) must be superior to the CD8 (suppressor);

c. analizzare i valori di CD3, CD3/CD4, CD3/CD8, CD 19 e CD16 e il rapporto CD4/CD8; c. analyze the values of CD3, CD3/CD4, CD3/CD8, CD 19 and CD16 and the CD4/CD8 ratio;

in cui i valori della fase c. sono indice della normofunzionalit?. Tutti i test attualmente in uso non rilevano la valutazione della combinazione di tali parametri che ci permettono di avere una valutazione globale della nostra attivit? immunitaria. where the values of phase c. are they an indication of normofunctionality?. All the tests currently in use do not detect the evaluation of the combination of these parameters which allow us to have a global evaluation of our activity? immune.

Fino a questo momento, l?attenzione si ? soffermata unicamente sulla valutazione di stati fortemente patologici. ? stato visto dai presenti inventori che ? molto importante valutare la normofunzionalit? del sistema immunitario anche in soggetti apparentemente sani, in quanto mediante tale indagine ? possibile slatentizzare stati di virosi non manifestati clinicamente (sintomi clinici). Up to this moment, attention has been paid. focused solely on the evaluation of highly pathological states. ? been seen by the present inventors that ? very important to evaluate the normofunctionality? of the immune system even in apparently healthy subjects, as through this investigation? it is possible to unveil states of virosis that are not clinically manifested (clinical symptoms).

In una forma di realizzazione preferita, il metodo, per la valutazione del benessere o normofunzionalit? del sistema immunitario in un soggetto prevede le fasi di: a. misurare in vitro il valore assoluto dei seguenti parametri da un campione di sangue: CD3, CD4, CD8, CD 19, CD16, CD56, e CD3/HLA-DR; In a preferred embodiment, the method for assessing well-being or normofunctionality of the immune system in a subject involves the phases of: a. measure in vitro the absolute value of the following parameters from a blood sample: CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, CD56, and CD3/HLA-DR;

b. misurare i valori in percentuale di CD3/CD4 e di CD3/CD8 ed il rapporto CD4/CD8; b. measure the CD3/CD4 and CD3/CD8 percentage values and the CD4/CD8 ratio;

calcolare il rapporto CD4/CD8, che in caso di normo-funzionalit? ? a favore del CD4 ovvero il CD4 (helper) deve essere superiore ai CD8 (suppressor); calculate the ratio CD4/CD8, which in the case of normo-functionality? ? in favor of CD4 or the CD4 (helper) must be superior to the CD8 (suppressor);

c. analizzare i valori di CD3, linfociti CD8 attivati (CD3/HLA-DR), CD3/CD4, CD3/CD8, CD 19 e CD16, CD 56 e il rapporto CD4/CD8; c. analyze the values of CD3, activated CD8 lymphocytes (CD3/HLA-DR), CD3/CD4, CD3/CD8, CD 19 and CD16, CD 56 and the CD4/CD8 ratio;

in cui i valori della fase c. sono indice della normofunzionalit?. where the values of phase c. are they an indication of normofunctionality?.

Seventest qui descritto permette anche di verificare se un soggetto sta migliorando in seguito ad un trattamento, e dunque se proseguire con lo stesso trattamento oppure se cambiare terapia. Seventest described here also allows you to check if a subject is improving following a treatment, and therefore whether to continue with the same treatment or whether to change therapy.

L?aspetto innovativo e probabilmente rivoluzionario ? il ruolo dell?immunit? dei linfociti T. Infatti, nelle indagini connesse alla presente invenzione si ? evidenziato che le persone che hanno sviluppato una risposta immunitaria a causa di una virosi o alla somministrazione di un vaccino, presentano un rialzo del numero assoluto di linfociti T attivati totali. Diversamente da come viene messo in evidenza mediante i test con gli anticorpi sierologici (IgG-IgM), tale valutazione viene fatta mediante la quantizzazione linfociti T (CD3/CD8 e CD3/HLA-DR). Le cellule T riconoscono pezzi diversi del virus rispetto agli anticorpi e sono fondamentali per la memoria dell?infezione. La valutazione della quota attivata dei linfociti T ci permette concretamente di avere certezza dell?avvenuta reazione immunitaria protettiva, molto importante soprattutto in pazienti The innovative and probably revolutionary aspect? the role of? immunity? of T lymphocytes. In fact, in the investigations connected with the present invention, showed that people who have developed an immune response due to a virus or to the administration of a vaccine, show an increase in the absolute number of total activated T lymphocytes. Differently from what is highlighted by tests with serological antibodies (IgG-IgM), this evaluation is made by quantizing T lymphocytes (CD3/CD8 and CD3/HLA-DR). T cells recognize different pieces of the virus than antibodies do and are key to the memory of the infection. The evaluation of the activated amount of T lymphocytes allows us to concretely have the certainty of the protective immune reaction, which is very important especially in patients

1. che devono sottoporsi al vaccino 1. who must undergo the vaccine

2. che hanno contratto il virus 2. who have contracted the virus

3. per vedere se la risposta immunitaria protettiva globale stimolata dal vaccino agisce efficacemente. 3. to see if the global protective immune response stimulated by the vaccine works effectively.

Con il Seventest viene fatta anche una valutazione globale del sistema immunitario. Con questa metodica siamo in grado di quantizzare l?immunit? anche delle cellule T rispetto a quello che finora ? stato rilevato esclusivamente con l?uso dei test sierologici con l?identificazione degli anticorpi IgM e IgG. A global assessment of the immune system is also made with the Seventest. With this method we are able to quantize the? immunity? also of T cells compared to what so far ? was detected exclusively with the use of serological tests with the identification of IgM and IgG antibodies.

In una forma di realizzazione preferita, nel metodo qui descritto ? indice di normofunzionalit? del sistema immunitario quando i valori della fase c. rientrano nei seguenti range: In a preferred embodiment, in the method described herein ? normofunctionality index? of the immune system when the values of phase c. fall into the following ranges:

- valore CD3: %, rispetto al totale nel range 54-85; - CD3 value: %, compared to the total in the range 54-85;

- valore CD3/CD4: %, rispetto al totale nel range 31-59; - CD3/CD4 value: %, compared to the total in the range 31-59;

- valore CD3/CD8: %, rispetto al totale nel range 18-35; - CD3/CD8 value: %, compared to the total in the range 18-35;

- valore CD19: %, rispetto al totale nel range 5-22; - CD19 value: %, compared to the total in the range 5-22;

- valore CD16: %, rispetto al totale nel range 4-28; - CD16 value: %, compared to the total in the range 4-28;

- valore CD56: %, rispetto al totale nel range 10-20; - CD56 value: %, compared to the total in the range 10-20;

- il valore CD3/HLA-DR, che rappresenta la quota attivata dei linfociti T CD8 ? in % (?5); e - the CD3/HLA-DR value, which represents the activated share of CD8 T lymphocytes? in % (?5); And

- rapporto CD4/CD8 maggiore di 1; - CD4/CD8 ratio greater than 1;

viene fatta una valutazione positiva del benessere quindi della normofunzionalit? del sistema immunitario. Is there a positive assessment of well-being and therefore of normofunctionality? of the immune system.

? stato visto che soggetti con valori dei parametri del Seventest nella norma, hanno una pi? elevata resistenza all?infezione da virus e altri patogeni, ad esempio da virus quali il coronavirus nelle sue diverse forme, incluso il coronavirus SARS-CoV-2. I parametri del Seventest hanno una valenza sia per valutare lo stato di salute di un soggetto che per valutare lo stato del sistema immunitario dopo una patologia. Il Seventest permette di valutare l?azione della risposta immunitaria in modo diretto. In un?ulteriore forma di realizzazione preferita, nel metodo qui descritto, quando i valori non rientrano nel range, ? possibile che il soggetto rientri in uno stato patologico e quindi sono necessari ulteriori accertamenti. ? been seen that subjects with values of the parameters of the Seventest in the norm, have a pi? high resistance to infection by viruses and other pathogens, for example by viruses such as the coronavirus in its various forms, including the SARS-CoV-2 coronavirus. The Seventest parameters have a value both for evaluating the state of health of a subject and for evaluating the state of the immune system after a pathology. The Seventest allows you to evaluate the action of the immune response in a direct way. In a further preferred embodiment, in the method described herein, when the values are out of range, It is possible that the subject falls into a pathological state and therefore further investigations are necessary.

In particolare, viene doveroso fare accertamenti sullo stato di funzionalit? del sistema immunitario quando non rientrano nei seguenti range i parametri: In particular, is it necessary to make checks on the state of functionality? of the immune system when the parameters do not fall within the following ranges:

- valore CD3: %, rispetto al totale nel range 54-85 - CD3 value: %, compared to the total in the range 54-85

- valore CD3/CD4: %, rispetto al totale nel range 31-59; - CD3/CD4 value: %, compared to the total in the range 31-59;

- valore CD3/CD8: %, rispetto al totale nel range 18-35; - CD3/CD8 value: %, compared to the total in the range 18-35;

- valore CD19: %, rispetto al totale nel range 5-22; e - CD19 value: %, compared to the total in the range 5-22; And

- valore CD16: %, rispetto al totale nel range 4-28; - CD16 value: %, compared to the total in the range 4-28;

- valore CD56: %, rispetto al totale nel range 10-20; e quando - CD56 value: %, compared to the total in the range 10-20; and when

- il rapporto CD4/CD8 ? minore di 1; e quando - the CD4/CD8 ratio ? less than 1; and when

- il valore CD3/HLA-DR, che rappresenta la quota attivata dei linfociti T CD8 ed ? in % >5. - the CD3/HLA-DR value, which represents the activated amount of CD8 T lymphocytes and ? in % >5.

I parametri del Seventest sorprendentemente permettono di valutare la l?efficienza del sistema immunitario e la sua reazione ad un agente esterno aggressivo. The Seventest parameters surprisingly allow to evaluate the efficiency of the immune system and its reaction to an aggressive external agent.

Fino a questo momento, l?attenzione si ? soffermata unicamente sulla valutazione di stati fortemente patologici. Up to this moment, attention has been paid. focused solely on the evaluation of highly pathological states.

Gli inventori hanno sorprendentemente potuto verificare che mediante l?uso del Seventest ? possibile fare la valutazione su soggetti apparentemente sani e avere un riscontro circa lo stato di normofunzionalit? del loro sistema immunitario e la sua risposta ad un?infezione, ad esempio ad un?infezione da coronavirus. The inventors have surprisingly been able to verify that through the use of the Seventest ? Is it possible to make the assessment on apparently healthy subjects and get feedback on the state of normal function? of their immune system and its response to an infection, for example a coronavirus infection.

La sequenza di parametri, individuata nel Seventest, pu? riconoscere lo stato di funzionalit? del sistema immunitario in quanto risultano evidenti e oggettivi i parametri alterati. The sequence of parameters, identified in the Seventest, can? recognize the state of functionality? of the immune system as the altered parameters are evident and objective.

Nella presente invenzione quando si impiega la definizione: In the present invention when the definition is employed:

- ?CD3? si intende comprendere linfociti T totali (CD3) che giocano un ruolo fondamentale nella cosiddetta immunit? cellulo-mediata; - ?CD3? do you intend to understand total T lymphocytes (CD3) which play a fundamental role in the so-called immunity? cell-mediated;

- ?CD3/CD4? si intende comprendere linfociti T helper (CD4) che aiutano i linfociti B a produrre anticorpi; - ?CD3/CD4? it is intended to include T helper lymphocytes (CD4) which help B lymphocytes to produce antibodies;

- ?CD3/CD8? si intende comprendere linfociti T suppressor (CD8) che svolgono un?azione di sopporto alla risposta del sitema immunitario; - ?CD3/CD8? it is intended to include suppressor T lymphocytes (CD8) which carry out an action to support the response of the immune system;

- ?CD19? si intende comprendere linfociti B (CD19) che hanno un ruolo chiave nella produzione di anticorpi; - ?CD19? it is intended to include B lymphocytes (CD19) which have a key role in the production of antibodies;

- ?CD16 e CD56? si intende comprendere Cellule Natural Killer (CD16 e CD56) che risultano presenti dalla nascita e rappresentano la prima linea di difesa dei soggetti non ancora immunizzati (immunit? innata); - ?CD16 and CD56? we intend to understand Natural Killer Cells (CD16 and CD56) which are present from birth and represent the first line of defense of subjects not yet immunized (innate immunity);

- ?CD3/HLA-DR? sono Linfociti T (attivati) che ci permettono di rilevare l?attivit? del sistema immunitario in caso di virosi; - ?CD3/HLA-DR? are T lymphocytes (activated) that allow us to detect the? activity? of the immune system in case of virosis;

- rapporto CD4/CD8 in caso di normo-funzionalit? ? a favore del CD4 ovvero il CD4 (helper) deve essere superiore ai CD8 (suppressor). - CD4/CD8 ratio in case of normo-functionality? ? in favor of CD4 or the CD4 (helper) must be superior to the CD8 (suppressor).

L?invenzione concerne anche un apparato elettronico configurato per eseguire il metodo secondo la presente invenzione e descritto nelle rivendicazioni 5, 6 e 7. Tale apparecchio pu? essere settato e tarato anche manualmente. The invention also relates to an electronic apparatus configured to carry out the method according to the present invention and described in claims 5, 6 and 7. This apparatus can? also be set and calibrated manually.

Si riporta di seguito un Esempio di realizzazione della presente invenzione fornito a titolo illustrativo. An Example of embodiment of the present invention provided by way of illustration is given below.

ESEMPI EXAMPLES

Esempio 1: Il case study Example 1: The case study

Paziente di 77 anni non fumatore. 77-year-old non-smoker.

In questo caso si ? effettuato il Seventest a causa di un riferito stato influenzale periodico e stagionale. In this case yes? carried out the Seventest due to a reported periodic and seasonal flu.

Vengono valutati 5 dei 7 parametri a tempo: 0 5 of the 7 timed parameters are evaluated: 0

Linfociti T T lymphocytes

1 Il valore di CD3 risultava essere 65% (% rispetto al totale dei linfociti). In un range da 54-85 (%rispetto al totale dei linfociti) questo valore rientra nella norma. 1 The CD3 value was found to be 65% (% of the total lymphocytes). In a range from 54-85 (% of the total number of lymphocytes) this value is within the norm.

2 Il valore della percentuale di CD3/CD4 risultava essere 36%. In un range da 31-59 del test, questo valore rientra nella norma. 2 The value of the CD3/CD4 percentage was found to be 36%. In a range of 31-59 on the test, this value is within the norm.

3 Il valore della percentuale di CD3/CD8 risultava essere 29%, in un range 18-35, questo valore rientra nella norma. 3 The value of the CD3/CD8 percentage was found to be 29%, in a range of 18-35, this value is within the norm.

Il rapporto CD4/CD8 ? di 36/29, tale valore ? nella norma. The CD4/CD8 ratio ? of 36/29, this value ? in the norm.

4 Il valore di CD19 era del 3%. Nel range 5-22 risulta essere al di sotto della norma. 4 The CD19 value was 3%. In the range 5-22 it appears to be below normal.

5 Il valore di CD16 era del 3%. Nel range 4-28 il valore 3% risulta essere al di sotto della norma. 5 The CD16 value was 3%. In the range 4-28 the 3% value is below the norm.

I valori di CD19 e CD16 non sono nella norma, il paziente infatti riferiva uno stato influenzale periodico e stagionale. The CD19 and CD16 values are not normal, in fact the patient reported a periodic and seasonal flu.

A distanza di 3 mesi vengono nuovamente valutati i parametri riportati sopra, dopo aver effettuato una terapia con un prodotto nutraceutico che ha determinato le seguenti variazioni: After 3 months, the parameters listed above are re-evaluated, after having carried out a therapy with a nutraceutical product which has led to the following changes:

Vengono valutati 5 dei 7 parametri a tempo: 3 mesi 5 of the 7 timed parameters are evaluated: 3 months

1 Il valore di CD3 risultava essere 65% (% rispetto al totale dei linfociti). In un range da 54-85 (%rispetto al totale dei linfociti), questo valore rientra nella norma. 1 The CD3 value was found to be 65% (% of the total lymphocytes). In a range from 54-85 (% of total lymphocytes), this value is normal.

2 Il valore della percentuale di CD3/CD4 risultava essere 38%. In un range da 31-59, questo valore rientra nella norma. 2 The value of the CD3/CD4 percentage was found to be 38%. In the range of 31-59, this value is within the norm.

3 Il valore della percentuale di CD3/CD8 risultava essere 27%, nel range 18-35, questo valore rientra nella norma. 3 The value of the CD3/CD8 percentage was found to be 27%, in the range of 18-35, this value is within the norm.

Il rapporto CD4/CD8 era di 38/27, rimane dunque nei range. The CD4/CD8 ratio was 38/27, thus remaining within range.

4 Il valore di CD19 era del 6% quindi (range 5-22) risulta essere rientrato nella norma. 4 The CD19 value was 6% therefore (range 5-22) it appears to have returned to the norm.

5 Il valore di CD16 era dell?17% quindi (range 4-28) risulta essere rientrato nella norma. 5 The CD16 value was 17% therefore (range 4-28) it appears to have returned to the norm.

Si aggiunge, oltre al dato del miglioramento dei valori riportati dal soggetto a distanza di 3 mesi, anche una probabile protezione dal Covid-19, ci? perch? il paziente, a differenza dei familiari, non ha contratto il Covid-19, pur essendone i familiari affetti (figlio e moglie). In addition to the data of the improvement of the values reported by the subject after 3 months, there is also a probable protection from Covid-19. why? the patient, unlike family members, has not contracted Covid-19, despite being affected family members (son and wife).

Ci? vuole dire che una giusta integrazione in situazioni di stato immunitario indebolito, determina un evidente miglioramento. There? it means that a correct integration in situations of weakened immune status determines an evident improvement.

? evidente in questo paziente l?importanza della valutazione del sistema immunitario per verificarne la sua normo-funzionalit?. ? evident in this patient is the importance of assessing the immune system to verify its normo-functionality.

Dalla descrizione dettagliata e dagli esempi sopra riportati, risultano evidenti i vantaggi conseguiti mediante il metodo della presente invenzione. In particolare, tale metodo si ? mostrato sorprendentemente e vantaggiosamente adatto alla diagnosi non invasiva del benessere del sistema immunitario. Al tempo stesso, tale metodo, essendo veloce ed estremamente facile da eseguire, pu? essere convenientemente realizzato in un laboratorio di analisi. From the detailed description and the examples given above, the advantages achieved by the method of the present invention are evident. In particular, this method is ? shown surprisingly and advantageously suitable for the non-invasive diagnosis of immune system well-being. At the same time, this method, being fast and extremely easy to perform, can be conveniently made in an analytical laboratory.

Il test pu? essere eseguito mediante un dispositivo o apparato, in particolare un dispositivo o apparto elettronico, opportunamente configurato. The test can be performed by means of a device or apparatus, in particular an electronic device or apparatus, suitably configured.

In particolare, l?apparato elettronico ? configurato per In particular, the? Electronic apparatus ? configured for

a. misurare in vitro il valore assoluto dei seguenti parametri da un campione di sangue: CD3, CD4, CD8, CD19 e CD16 e CD56; to. measure in vitro the absolute value of the following parameters from a blood sample: CD3, CD4, CD8, CD19 and CD16 and CD56;

b. misurare i valori in percentuale di CD3/CD4 e di CD3/CD8 ed il rapporto CD4/CD8; b. measure the CD3/CD4 and CD3/CD8 percentage values and the CD4/CD8 ratio;

c. fornire un set di dati comprendente: i valori di CD3, CD3/HLA-DR (linfociti CD8 attivati), CD3/CD4, CD3/CD8, CD19 e CD16 e CD56, e il rapporto CD4/CD8. c. provide a data set including: CD3, CD3/HLA-DR (activated CD8 lymphocytes), CD3/CD4, CD3/CD8, CD19 and CD16 and CD56 values, and CD4/CD8 ratio.

Preferibilmente, il suddetto set di dati ? costituito dai valori di CD3, CD3/HLA-DR (linfociti CD8 attivati), CD3/CD4, CD3/CD8, CD19, CD16 e CD56, e il rapporto CD4/CD8. Preferably, the aforementioned set of data ? consisting of CD3, CD3/HLA-DR (activated CD8 lymphocytes), CD3/CD4, CD3/CD8, CD19, CD16, and CD56 values, and the CD4/CD8 ratio.

Ad esempio, l?apparato elettronico ? provvisto di almeno una memoria elettronica su cui sono memorizzate le istruzioni di: misurare in vitro il valore assoluto dei seguenti parametri da un campione di sangue: CD3, CD4, CD8, CD19 e CD16 e CD56; misurare i valori in percentuale di CD3/CD4 e di CD3/CD8 ed il rapporto CD4/CD8; e di fornire detto set di dati. For example, the? Electronic apparatus ? provided with at least one electronic memory on which the instructions are memorized for: measuring in vitro the absolute value of the following parameters from a blood sample: CD3, CD4, CD8, CD19 and CD16 and CD56; measure the CD3/CD4 and CD3/CD8 percentage values and the CD4/CD8 ratio; and to provide said data set.

Il set di dati pu? ad esempio essere fornito sotto forma di un elenco, ad esempio in formato elettronico. The data set can for example be provided in the form of a list, for example in electronic format.

L?apparato elettronico pu? anche essere configurato per consentire la stampa del set di dati, ad esempio mediante la stampa del suddetto elenco in formato elettronico. The electronic device can? also be configured to allow printing of the data set, for example by printing the aforementioned list in electronic format.

Il suddetto apparato elettronico ? in particolare un citofluorimetro. The aforementioned electronic device? especially a flow cytometer.

*I valori di riferimenti (range) possono avere sensibili variazioni da laboratorio a laboratorio ed in relazione alla popolazione studiata (es. fascia di et?). *The reference values (range) may have significant variations from laboratory to laboratory and in relation to the population studied (e.g. age group?).

Claims (7)

RIVENDICAZIONI 1. Metodo per la valutazione del benessere del sistema immunitario in un soggetto mediante le fasi di:1. Method for assessing the well-being of the immune system in a subject through the phases of: a. misurare in vitro il valore assoluto dei seguenti parametri da un campione di sangue: CD3, CD4, CD8, CD 19, CD16;to. measure in vitro the absolute value of the following parameters from a blood sample: CD3, CD4, CD8, CD 19, CD16; b. misurare i valori in percentuale di CD3/CD4 e di CD3/CD8 ed il rapporto CD4/CD8;b. measure the CD3/CD4 and CD3/CD8 percentage values and the CD4/CD8 ratio; c. analizzare i valori di CD3, CD3/CD4, CD3/CD8, CD19, CD16 e il rapporto CD4/CD8;c. analyze the values of CD3, CD3/CD4, CD3/CD8, CD19, CD16 and the CD4/CD8 ratio; in cui i valori della fase c. sono indice del benessere del sistema immunitario.where the values of phase c. they are an indication of the well-being of the immune system. 2. Il metodo secondo la rivendicazione 1, in cui:2. The method according to claim 1, wherein: - alla fase a. si aggiunge misurare in vitro il valore assoluto dei parametri CD56, e CD3/HLA-DR; e- to phase a. it is added to measure in vitro the absolute value of the parameters CD56, and CD3/HLA-DR; And - alla fase c. si aggiunge analizzare i valori di CD56 e CD3/HLA-DR (linfociti CD8 attivati).- to phase c. it is added to analyze the values of CD56 and CD3/HLA-DR (activated CD8 lymphocytes). 3. Il metodo secondo una qualsiasi delle rivendicazioni 1 o 2, in cui quando i valori della fase c. sono nei seguenti range:3. The method according to any one of claims 1 or 2, wherein when the values of step c. are in the following ranges: - valore CD3: %, rispetto al totale nel range 54-85;- CD3 value: %, compared to the total in the range 54-85; - valore CD3/CD4: %, rispetto al totale nel range 31-59;- CD3/CD4 value: %, compared to the total in the range 31-59; - valore CD3/CD8: %, rispetto al totale nel range 18-35;- CD3/CD8 value: %, compared to the total in the range 18-35; - valore CD19: %, rispetto al totale nel range 5-22;- CD19 value: %, compared to the total in the range 5-22; - valore CD16: %, rispetto al totale nel range 4-28;- CD16 value: %, compared to the total in the range 4-28; - valore CD56: %, rispetto al totale nel range 10-20;- CD56 value: %, compared to the total in the range 10-20; - valore CD3/HLA-DR % ?5; e- CD3/HLA-DR value % ?5; And - rapporto CD4/CD8 maggiore di 1;- CD4/CD8 ratio greater than 1; viene fatta una valutazione positiva del benessere del sistema immunitario.a positive assessment of the well-being of the immune system is made. 4. Il metodo secondo una qualsiasi delle rivendicazioni 1 o 2, in cui quando non rientrano nei range:4. The method according to any one of claims 1 or 2, wherein when out of range: - valore CD3: %, rispetto al totale nel range 54-85 - CD3 value: %, compared to the total in the range 54-85 - valore CD3/CD4: %, rispetto al totale nel range 31-59;- CD3/CD4 value: %, compared to the total in the range 31-59; - valore CD3/CD8: %, rispetto al totale nel range 18-35;- CD3/CD8 value: %, compared to the total in the range 18-35; - valore CD19: %, rispetto al totale nel range 5-22;- CD19 value: %, compared to the total in the range 5-22; - valore CD16: %, rispetto al totale nel range 4-28;- CD16 value: %, compared to the total in the range 4-28; - valore CD56: %, rispetto al totale nel range 10-20;- CD56 value: %, compared to the total in the range 10-20; - il valore CD3/HLA-DR % ? >5; e- the CD3/HLA-DR % value? >5; And - il rapporto CD4/CD8 ? minore di 1;- the CD4/CD8 ratio ? less than 1; viene doveroso fare accertamenti sullo stato di funzionalit? del sistema immunitario.is it necessary to make checks on the state of functionality? of the immune system. 5. Apparato elettronico configurato per eseguire il metodo secondo una qualsiasi delle rivendicazioni da 1 a 4.5. Electronic apparatus configured to perform the method according to any one of claims 1 to 4. 6. L?apparato elettronico secondo la rivendicazione 5, configurato per6. The electronic apparatus according to claim 5, configured for a. misurare in vitro il valore assoluto dei seguenti parametri da un campione di sangue: CD3, CD4, CD8, CD 19, CD16, CD56, e CD3/HLA-DR;to. measure in vitro the absolute value of the following parameters from a blood sample: CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, CD56, and CD3/HLA-DR; b. misurare i valori in percentuale di CD3/CD4 e di CD3/CD8 ed il rapporto CD4/CD8;b. measure the CD3/CD4 and CD3/CD8 percentage values and the CD4/CD8 ratio; c. fornire un set di dati comprendente: i valori di CD3, CD3/HLA-DR (linfociti CD8 c. provide a dataset including: CD3, CD3/HLA-DR values (lymphocytes CD8 attivati), CD3/CD4, CD3/CD8, CD19, CD16, CD56 e il rapporto CD4/CD8.activated), CD3/CD4, CD3/CD8, CD19, CD16, CD56 and the CD4/CD8 ratio. 7. L?apparato elettronico secondo la rivendicazione 6, in cui detto set di dati ? costituito da i valori di CD3, CD3/HLA-DR (linfociti CD8 attivati), CD3/CD4, CD3/CD8, CD19, CD16, CD56 e il rapporto CD4/CD8. 7. The electronic apparatus according to claim 6, wherein said data set is consisting of the values for CD3, CD3/HLA-DR (activated CD8 lymphocytes), CD3/CD4, CD3/CD8, CD19, CD16, CD56 and the CD4/CD8 ratio.
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