HUT69400A

HUT69400A - Pharmaceutical compositions containing nonionic surfractants

Info

Publication number: HUT69400A
Application number: HU9302774A
Authority: HU
Inventors: William John Curatolo; Michael J Gumkowski; Julian B Lo
Original assignee: Pfizer
Priority date: 1992-10-02
Filing date: 1993-09-30
Publication date: 1995-09-28
Also published as: JPH07507565A; FI934317A0; FI934317A; ZA937268B; AU5095393A; WO1994007472A1; HU9302774D0; KR950703333A; TW253838B; IL107084A0; CA2145763A1; EP0662826A1; MX9306125A

Abstract

Pharmaceutical compositions comprise an enzymatically labile pharmaceutically active agent which is permeable through the intestinal wall or requires an intestinal permeability enhancer to permeate the intestinal wall, and at least one nonionic surfactant which is capable of protecting said active agent against deactivation by enzymes. A method for the inhibition of the degradation of an enzymatically labile pharmaceutically active agent by gastrointestinal enzymes comprises combining said agent with a nonionic surfactant.

Description

A találmány gyógyászati kompozíciókra vonatkozik, amelyek nemionos felületaktív anyagokat tartalmaznak, valamint olyan eljárásokra, amelyek szerint meghatározott gyógyászatilag aktív anyagokat nemionos felületaktív anyagokkal kombinálnak, ezáltal lebomlásukat akadályozzák, végül eljárásokra az említett aktív anyagok és felületaktív anyagok együttes beadására.The present invention relates to pharmaceutical compositions comprising nonionic surfactants, to methods of combining certain pharmaceutically active substances with nonionic surfactants to prevent their degradation, and to methods for co-administering said active ingredients and surfactants.

Egy gyógyászatilag aktív anyag és egy felületaktív anyag együttes beadását Swenson és Curatolo is említi: Advanced Drug Delivery Reviews, 8, 39-92 (1992). A felületaktív anyagot úgy írják le, mint amelyik növelte egy gyógyszer permeabilitását a bélfalon keresztül.Co-administration of a pharmacologically active substance with a surfactant is also mentioned by Swenson and Curatolo in Advanced Drug Delivery Reviews, 8, 39-92 (1992). The surfactant is described as having increased the permeability of a drug through the intestinal wall.

A 4,479,730 lajstromszámú amerikai egyesült államokbeli szabadalom szerint a nátrium-kólát ionos epesó, amely felületaktív anyag, a vékonybélben proteáz inhibitorként működik, ezáltal az inzulin felszívódását elősegíti. A felületaktív anyagok proteáz inhibitorként való általános alkalmazhatóságát a gyomor-bél rendszerben nem említik.In U.S. Patent No. 4,479,730, sodium cholate ionic bile salt, a surfactant, acts as a protease inhibitor in the small intestine, thereby promoting the absorption of insulin. The general utility of surfactants as protease inhibitors in the gastrointestinal tract is not mentioned.

A nem felületaktív proteáz inhibitorok gasztrointesztinális proteázok elleni védőanyagként való használatát Lee, J. írja le Controlled Release, 13(1990)213-223, valamint Ziv et al. Biochem.The use of non-surfactant protease inhibitors as protective agents against gastrointestinal proteases is described by Lee, J. Controlled Release, 13, 213-223 (1990) and Ziv et al. Biochem.

Pharmacol., 36(1987)1035-1039, és a 4,579,730. lajstromszámú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás. Hayakawa et al, Life Sciences 45,167-174(1989) szerint a nátrium glikokolát nevű epesó, valamint a polioxietilén-9-lauril-éter nevű nemionos felületaktív anyag a felületaktív anyag koncentrációjától függően vagy akadályozza, vagy elősegíti az inzulin orr homogenizátumok általi lebontását. A 332,222 számú európai szabadalmi közrebocsátási irat szerint a vaginális öblítővíz proteáz aktivitása csökken a nátrium-dodecil-szulfát nevű felületaktív anyag jelenlétében, valamint ez a leírás feltárja azt az eljárást is, amely szerint egy ionos vagy nemionos felületaktív anyag a vaginában együttműködik egy biológiailag aktív polipeptiddel, hogy megakadályozza a vaginális proteáz működését.Pharmacol. 36: 1035-1039 (1987); and 4,579,730. U.S. Pat. Hayakawa et al., Life Sciences 45,167-174 (1989) reported that bile salt sodium glycolate and nonionic surfactant polyoxyethylene-9-lauryl ether either inhibit or promote the breakdown of insulin by nasal homogenates, depending on the concentration of the surfactant. EP 332,222 discloses a reduction in vaginal lavage protease activity in the presence of a sodium dodecyl sulfate surfactant, and discloses a method in which an ionic or nonionic surfactant interacts with a biologically active polypeptide in the vagina. to block the function of the vaginal protease.

A találmány szerint a szájon át alkalmazott gyógyászati anyagok tartalmaznak egy enzimatikusan labilis, gyógyászatilag aktív anyagot, amely anyag a bélfalon keresztül felszívódik, valamint legalább egy nemionos felületaktív anyagot, amely képes az említett aktív anyagot az enzimek dezaktiváló hatásával szemben megóvni.According to the invention, the oral therapeutic agents comprise an enzymatically labile pharmaceutically active agent which is absorbed through the intestinal wall and at least one nonionic surfactant which is capable of protecting said active agent against the deactivating action of the enzymes.

A találmány egyik kiviteli módjában az aktív anyag egy peptid, amelynek molekulatömege kevesebb, mint kb.3,000. Az alkalmas nemionos felületaktív anyagra példák az etoxilált alkoholok, etoxilált zsírsavak, szorbitánszármazékok és etoxilált fenolok, különösen az etoxilált laurinsav, a polioxietilén(40)sztearát, a polioxietilén(20)szorbitán monooleát, a polioxi-etilén(23)-lauril-éter, a nonil-fenoxi-poli(etilénoxi)-etanol-30, a nonilfenoxi-poli(etilénoxi)-etanol-50, vagy pedig pálmamagolaj gliceril- és polietilén-glikol-1500 észtereinek keveréke.In one embodiment of the invention, the active ingredient is a peptide having a molecular weight of less than about 3,000. Examples of suitable nonionic surfactants include ethoxylated alcohols, ethoxylated fatty acids, sorbitan derivatives and ethoxylated phenols, in particular ethoxylated lauric acid, polyoxyethylene (40) stearate, polyoxyethylene (20) sorbitan monooleate, polyoxyethylene (23) a mixture of glyceryl and polyethylene glycol 1500 esters of nonylphenoxy-poly (ethyleneoxy) -ethanol-30, nonyl-phenoxy-poly (ethyleneoxy) -ethanol-50 or palm kernel oil.

A találmány egy másik kiviteli módjában a vegyületnek alkotórésze egy olaj is. A megfelelő olajok lehetnek monogliceridek, pl. mono-oktanoin vagy mono-dekanoin, digliceridek, pl.In another embodiment of the invention, the compound is also an oil. Suitable oils include monoglycerides, e.g. mono-octanoin or mono-decanoin; diglycerides, e.g.

gliceril-1,2-dioktanoát és trigliceridek, pl. növényolaj vagy kapril/kaprin- triglicerid.glyceryl 1,2-dioctanoate and triglycerides, e.g. vegetable oil or caprylic / capric triglyceride.

A találmány tárgya ezenkívül egy szájon át alkalmazható gyógyászati kompozíció, amely tartalmaz (1) egy enzimatikusan labilis aktív anyagot, amely csak bél-permeabilitás növelő szer je- 4 lenlétében permeábilis a bélfalon keresztül, (2) legalább egy nemionos felületaktív anyagot, amely képes megvédeni az említett aktív anyagot a proteolitikus enzimek által okozott dezaktiválásától és amely nem növeli a bélfal permeabilitását, valamint (3) egy bél-permeabilitás növelő szert, amely nem azonos az említett nemionos felületaktív anyaggal. A találmány egyik kiviteli módjában ez a kompozíció olyan nemionos felületaktív anyagot tartalmaz, amelynek HLB értéke k.b.14 és kb. 20 között van.The invention further relates to an oral pharmaceutical composition comprising (1) an enzymatically labile active agent which is permeable through the intestinal wall only in the presence of an enteric permeability enhancer, (2) at least one nonionic surfactant capable of protecting said active substance being deactivated by proteolytic enzymes and not increasing intestinal wall permeability; and (3) an intestinal permeability enhancer other than said nonionic surfactant. In one embodiment of the present invention, the composition comprises a nonionic surfactant having an HLB of k.b.14 and ca. It is between 20.

A találmány tárgya továbbá egy szájon át alkalmazható gyógyászati kompozíció, amely tartalmaz (1) egy enzimatikusan labilis, gyógyászatilag aktív anyagot, amely gyógyító hatását helyileg fejti ki a gyomorban vagy a belekben és (2) legalább egy nemionos felületaktív anyagot, amely képes az említett aktív anyagot az enzimek által okozott dezaktiváló hatás ellen megvédeni.The present invention further relates to an oral pharmaceutical composition comprising (1) an enzymatically labile pharmaceutically active agent which exerts a curative effect locally in the stomach or intestines and (2) at least one nonionic surfactant capable of providing said active ingredient. to prevent deactivation by enzymes.

A találmány leír ezenkívül egy eljárást egy enzimatikusan labilis, gyógyászatilag aktív ágens enzimatikus degradációjának gátlására, amely ágens permeábilis a bélfalon keresztül. Az eljárás szerint az említett aktív ágenst nemionos felületaktív anyaggal elegyítjük, ez utóbbi képes az aktív ágenst az enzimek által okozott dezaktiválástól megvédeni.The invention further describes a method for inhibiting the enzymatic degradation of an enzymatically labile, pharmaceutically active agent which is permeable to the intestinal wall. The method comprises combining said active agent with a nonionic surfactant which is capable of protecting the active agent from deactivation by enzymes.

A találmány szerinti második eljárás egy enzimatikusan labilis, gyógyászatilag aktív ágens szájon át való alkalmazására vonatkozik, amely szer felszívódik a bélfalon keresztül a gazdaszervezetbe; az eljárás abból áll, hogy az említett gazdaszervezetbe együtt adjuk be az aktív ágenst, és legalább egy olyan nemionos felületaktív anyagot, amely meg tudja védeni az említett ágenst az enzimek okozta dezaktiválástól.The second process of the invention relates to the oral administration of an enzymatically labile pharmaceutically active agent which is absorbed through the intestinal wall into the host; the method comprising co-administering to said host an active agent and at least one nonionic surfactant that can protect said agent from deactivation by enzymes.

A találmány szerinti harmadik eljárás egy enzimatikusan labilis, ·· · ·**»·*·» ♦**' • ·· · · * «««· • · · · · · ·· · · ··· · ·· »4 ··«The third method of the present invention is an enzymatically labile, <RTIgt; »4 ··«

Μ · - 5 gyógyászatilag aktív ágens szájon át való alkalmazására vonatkozik, amely csak egy bélpermeabilitás-növelő szer jelenlétében tud felszívódni a bélfalon keresztül; az eljárás abban áll, hogy a gazdaszervezetbe együtt adjuk be az említett aktív ágenst, továbbá egy nemionos felületaktív anyagot, amely képes az említett ágenst az enzimek által okozott dezaktiválás ellen megvédeni és amely nem bélpermeabilitás-növelő ágens, valamint egy bélpermeabilitás -növelő ágenst, amely nem azonos az említett nemionos felületaktív anyaggal.Μ · - refers to the oral administration of 5 pharmaceutically active agents which can be absorbed through the intestinal wall only in the presence of an enteric permeability enhancer; the method comprising co-administering said active agent, a nonionic surfactant, which is capable of protecting said agent against deactivation by enzymes and which is not a gut permeation enhancer and a gut permeation enhancer which is not the same as said nonionic surfactant.

A találmány szerinti enzimatikusan labilis, gyógyászatilag aktív ágensek enzimatikusan labilis kötéseket tartalmaznak, így például észter-, amid- és/vagy peptidkötéseket, és a gasztrointesztinális szakaszban emésztőenzimek révén inaktiválódnak. Ilyen emésztőenzimekre példa a pepszin, tripszin, kimotripszin, elasztin, aminopeptidáz, karboxipeptidáz, lipáz, valamint intesztinális glikozidázok és észterázok.The enzymatically labile pharmaceutically active agents of the invention contain enzymatically labile bonds, such as ester, amide and / or peptide bonds, and are inactivated in the gastrointestinal tract by digestive enzymes. Examples of such digestive enzymes are pepsin, trypsin, chymotrypsin, elastin, aminopeptidase, carboxypeptidase, lipase, as well as intestinal glycosidases and esterases.

Az enzimatikusan labilis, gyógyászatilag aktív szerekre (az aktív ágensekre) példa a kalcitonin, prolaktin, adrenokortikotropin, tirotropin, növekedési hormon, gonadotróp hormon, oxitocin, vazopresszin, gasztrin, tetragasztrin, pentagasztrin, glukagon, inzulin, szekretin, P anyag, gonadotropin, leutinizáló hormont felszabadító hormon, leuprolid, enkefalin, follikulusz stimuláló hormon, kolecisztokinin, timopentin, endotelin, neurotensin, interferon, interleukinok, inzulinotropin és terápiás antitestek; ezen ágensek analógjai, amelyek D-aminosavat , blokkolt aminovagy karboxil végcsoportokat tartalmaznak, pl. nafarelin-acetát és YdAGFdL (eniafalin analóg), valamint nem természetes aminosavak, mint pl. az S-metil cisztein és sztatin. Ide tartoznak • ·· ·♦ «··« * · · « · · • · · 4« ····· ·· · « természetes eredetű tisztított extraktok és ezek kémiai módosulatai, valamint szövettenyészetekből származó anyagok, valamint olyan anyagok, amelyek genetikai módszerekkel termékennyé tett szaporított mikroorganizmus-, vagy sejttenyészetekből származnak. Szintén ide tartoznak szintetikus peptidek és származtatott szintetikus peptidek, mint a terlakiren (izopropil-N-[N-(4-morfolin-karbonil)-L-fenilalanin-S-metil-cisztein)-2(R)-hidroxi-3(S)amino-4-ciklohexil-butanoát), amelyeket a 4,814,342 lajstromszámú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás 4. példája ír le, amelyet e helyt referanciaként használunk. Végül ide értjük aktív ágensek elő-anyagait, pl. az aktív ágensek származékait, amelyek in vivő visszaalakulnak a valódi aktív anyaggá.Examples of enzymatically labile pharmacologically active agents (active agents) are calcitonin, prolactin, adrenocorticotropin, thyrotropin, growth hormone, gonadotropic hormone, oxytocin, vasopressin, gastrin, tetragastrin, pentagastrin, glucagon, insulin, secretin, hormone releasing hormone, leuprolide, enkephalin, follicle stimulating hormone, cholecystokinin, thymopentin, endothelin, neurotensin, interferon, interleukins, insulinotropin, and therapeutic antibodies; analogues of these agents containing D-amino acids, blocked amino or carboxyl end groups, e.g. nafarelin acetate and YdAGFdL (eniaphalin analogue); S-methyl cysteine and statin. This subheading includes purified extracts of natural origin and their chemical modifications, as well as materials derived from tissue culture and substances which derived from cultured micro-organisms or cell cultures which have been fertilized by genetic means. Also included are synthetic peptides and derived synthetic peptides such as terlakiren (isopropyl-N- [N- (4-morpholine carbonyl) -L-phenylalanine-S-methyl-cysteine) -2 (R) -hydroxy-3 (S)). amino-4-cyclohexylbutanoate) described in Example 4 of U.S. Patent No. 4,814,342, which is incorporated herein by reference. Finally, it includes precursors of active agents, e.g. derivatives of active agents which are converted in vivo to the true active substance.

Az aktív ágensek között talájuk továbbá egy gyógyászatilag aktív vegyület előanyagait, amely vegyület maga nem tartalmaz szükségszerűen enzimatikusan labilis kötéseket. Az ilyen előanyagok maguk enzimatikusan labilisek, mivel az előanyag-csoportot a gyógyászatilag aktív összetevőhöz enzimatikusan labilis kötéssel kötik, mint pl. az észter- vagy amidkötéssel.Further, the active agents include prodrugs of a pharmaceutically active compound which does not necessarily have enzymatically labile bonds. Such precursors are themselves enzymatically labile, since the precursor group is bound to the pharmaceutically active ingredient by an enzymatically labile bond, e.g. with an ester or amide bond.

A találmány szerint amikor az aktív ágens permeábilis a bélfalon keresztül, legalább egy nemionos felületaktív anyaggal együtt adjuk be, amely képes az aktív ágenst az enzimek okozta dezaktiváló hatástól megmenteni. A nemionos felületaktív anyagot olyan mennyiségben használjuk, amely elegendő ahhoz, hogy az aktív ágenst az enzimek okozta dezaktiváló hatástól megóvja.According to the invention, when the active agent is permeable through the intestinal wall, it is administered with at least one nonionic surfactant capable of rescuing the active agent from the deactivating effect of the enzymes. The nonionic surfactant is used in an amount sufficient to protect the active agent from the deactivating action of the enzymes.

Általánosságban egy aktív ágenst vagy előanyagot akkor tekintenek a bélfalon keresztül felszívódni képesnek, ha permeabilitásnövelő segítsége nélkül szívódik fel. Az enzimatikusan labilis aktív ágens vagy előanyag intesztinális permeabilitását az • · · · · · «··· ··« « · « <· • «· · · A ···« • ···«· » · « « ··· · ·· ·· ··· alapján határozzák meg, hogy elaltatott patkány meghatározott bélszakaszán milyen az aktív ágens vagy előanyag oldatának perfúziója. Ezt a tesztet az emésztőenzimek kiküszöbölésével kell végezni, annak érdekében, hogy a tesztelt aktív ágens vagy előanyag enzimatikus degradációját csökkentsük. A kérdéses bélszakaszt tehát alaposan meg kell mosni a teszt végzése előtt, vagy pedig a tesztet emésztőenzim-gátlók jelenlétében kell végezni, amilyen pl. a Bowman-Birk tripszin/kimotripszin inhibitor.In general, an active agent or prodrug is considered to be capable of being absorbed through the gut wall when absorbed without the aid of a permeability enhancer. The intestinal permeability of the enzymatically labile active agent or precursor is determined by the ability of the active agent or precursor to undergo intestinal permeability. Determine the perfusion of a solution of the active agent or precursor in a specific section of anesthetized rat. This test should be performed by eliminating digestive enzymes in order to reduce the enzymatic degradation of the active agent or precursor tested. Thus, the intestinal tract in question should be thoroughly washed prior to the assay or the assay should be performed in the presence of digestive enzyme inhibitors such as. a Bowman-Birk trypsin / chymotrypsin inhibitor.

A találmány céljaira az enzimatikusan labilis aktív ágenst vagy előanyagot a bélfalon felszívódónak tekintjük, ha a Papp nagyobb, mint kb. 3,5X10-6 cm/sec. Egy vegyület Papp értéke a következő egyenletből állapítható meg:For purposes of the present invention, an enzymatically labile active agent or prodrug is considered to be absorbed into the intestinal wall if the Papp is greater than about 10. 3.5X10-6 cm / sec. The Papp value of a compound can be derived from the following equation:

KA = A X PappKA = A X Papp

V ahol KA a vegyület abszorpciós sebességi állandója, A a bélszegmens nagysága, V pedig a bélszegmens térfogata. Ha a béldarab hengeres és a bél sugara kb. 0,2 cm, mint a patkányban, A/V kb.10 cm-1.V where KA is the rate constant of the compound for absorption, A is the size of the gut segment, and V is the volume of the gut segment. If the bowel is cylindrical and the bowel radius is approx. 0.2 cm as in the rat, A / V about 10 cm -1.

Egy vegyület KA abszorpciós sebességi állandóját a patkány bélpermeabilitás teszt alapján számoljuk, a következő egyenlet alapj án:The KA absorption rate constant of a compound is calculated from the rat intestinal permeability test based on the following equation:

KA = Qíl-CO/Ci) (2)KA = Qi-CO / Ci) (2)

V ahol Ci a keverék koncentrációja a kísérlet kezdetén, CO a keverék koncentrációja a perfuzátumban 22 cm-es béldarabon való • · ·· ·· · • · · ··«·· • · · · · · ···· • ····· ·· · · • · · · ·· ·« ··· > - 8 átáramoltatás után, Q az áramlási sebesség átfolyás és V a béldarab térfogata, az előzőekhez hasonlóan.V where Ci is the concentration of the mixture at the start of the experiment, CO is the concentration of the mixture in the perfusate on a 22 cm gut piece · ········································································ After 8 flow-throughs, Q is the flow velocity and V is the volume of the gut, as before.

A terlakiren jó példája az enzimatikusan labilis gyógyszereknek, amelyeknek jó a bélen keresztüli felszívódási képessége és amely nem igényel permeabilitás-növelőt, hogy szájon át való alkalmazása kielégítő eredményt hozzon. A terlakiren KA értéke 0,02 min-1, Papp értéke 3,3 X 10-5 cm/sec, vízben való oldékonysága 0,08 mg/ml.Terlakiren is a good example of enzymatically labile drugs which have good intestinal absorption and do not require permeability enhancers to give satisfactory results when administered orally. Terlakiren has a KA value of 0.02 min-1, a Papp value of 3.3 X 10 -5 cm / sec, and a solubility in water of 0.08 mg / ml.

Friedman és Amidőn, Pharmaceutical Research, 8,93-96 (1990), a Leu-enkefalin és Leu-D(Ala)2- enkefalin nevű pentapeptidek permeabilitását a patkány bélperfúziós modell segítségével állapítja meg. Az adatok elemzésével a fenti (1), (2) egyenletek alapján aFriedman and Am conductor, Pharmaceutical Research, 1990, 8, 93-96, determined the permeability of the pentapeptides Leu-enkephalin and Leu-D (Ala) 2-enkephalin in a rat intestinal perfusion model. By analyzing the data based on equations (1), (2) above,

Papp-re 1,3 X 10-3 cm/sec-t kaptak, mindkét enkefalin esetében.For Papp, they received 1.3 X 10-3 cm / sec for both encephalins.

Ezek a keverékek tehát permeabilisak a találmány szerinti definíció értelmében. A keverékek ugyanakkor enzimatikusan labilisak. Példa egy enzimatikusan labilis, a találmány definíciója szerint impermeabilis keverékre az inzulin 4,97 X 10-7 cm/sec Papp értékkel.These mixtures are thus permeable to the present invention. However, the mixtures are enzymatically labile. An example of an enzymatically labile, impermeable mixture according to the invention is insulin with a Papp value of 4.97 X 10-7 cm / sec.

Általánosságban a nemionos felületaktív anyagok enzimatikusan labilis, gyógyászatilag aktív szerekkel vagy előanyagokkal való együttes beadása megvédi az ágenst vagy előanyagot az enzimatikus hidrolízistől, függetlenül attól, hogy a felületaktív anyagot és a ágenst vagy előanyagot orálisan, rektálisan, nazálisán vagy vaginálisan alkalmazzák.In general, co-administration of nonionic surfactants with enzymatically labile pharmaceutically active agents or prodrugs will protect the agent or prodrug from enzymatic hydrolysis, whether the surfactant and the agent or prodrug are administered orally, rectally, nasally or vaginally.

Permeabilis aktív ágensekre példák olyan peptidek, amelyeknek molekulatömege kisebb, mint 3,000, de több, mint 200 és amelyeket a bélfal passzívan abszorbeál, valamint olyan dipeptidek, amelyeknek molekulatömege kisebb mint 200, ezek aktívanExamples of permeable active agents are peptides having a molecular weight of less than 3,000 but more than 200, which are passively absorbed by the intestinal wall, and dipeptides having a molecular weight of less than 200, which are

• · · · szállítódnak. Ahogy a peptid polaritása csökken, permeabilitása nő. Ugyanakkor 2000 molekulatömeg felett, mintegy 3000 molekulatömegig a felszívódás nem következik be permeabilitás-növelő nélkül. Speciális példái a peptideknek, amelyeknek molekulatömege 2000-nél kisebb, tehát permeabilisek az oxitocin, vazopresszin, leutinizáló hormont felszabadító hormon, leuprolid, enkefalin, timopentin, oktreotid, tirotropin felszabadító hormon, CCK-8, bradikinin, angiotenzin 1, szomatosztatin, dezmopresszin, P anyag, valamint a gonadotropin felszabadító hormon. Példák a kb.3000 molekulatömegű, így lassan felszívódó peptidekre a kalcitonin, glukagon, szekretin, endorfin és inzulinotropin.• · · · are shipped. As the polarity of the peptide decreases, its permeability increases. However, above 2000 molecular weights, up to about 3000 molecular weights, absorption does not occur without a permeability enhancer. Specific examples of peptides having a molecular weight of less than 2000, i.e., permeable to oxytocin, vasopressin, leutinizing hormone releasing hormone, leuprolide, enkephalin, thymopentin, octreotide, thyrotropin releasing hormone, CCK-8, bradykinin, angiotensin 1, and gonadotropin-releasing hormone. Examples of peptides with a molecular weight of about 3,000 and thus slowly absorbed are calcitonin, glucagon, secretin, endorphin and insulinotropin.

Az olyan aktív ágensekre, amelyek terápiás aktivitásukat a gyomorban vagy a vékonybélben lokálisan fejtik ki, példák a gyomorfekély-elleni gyógyszerek, mint a szukralfát, a koleszterincsökkentő gyógyszerek, mint a kolesztiramin, hormonok, mint a gasztrin és a kolecisztokinin, valamint antibiotikumok és más terápiás ágensek.Examples of active agents that exert their therapeutic activity locally in the stomach or small intestine include anti-gastric ulcer drugs such as sucralfate, cholesterol-lowering drugs such as cholestyramine, hormones such as gastrin and cholecystokinin, and antibiotics and other drugs. agents.

Azok a felületaktív anyagok, amelyek képesek az aktív ágenst az enzimek deaktivációja ellen megvédeni (védő felületaktív anyagok), azonosíthatók in vitro enzimgátlási próbával, mint azt az 1,2 és 11 sz. példa leírja.Surfactants that are capable of protecting the active agent against enzyme deactivation (protective surfactants) can be identified by an in vitro enzyme inhibition assay as described in Nos. 1,2 and 11. example.

A kedveltebb védő nemionos felületaktív anyagokra példák lehetnek a következők:Examples of more preferred protective nonionic surfactants include:

Kémiai leírásChemical description

Szacharóz zsirsavészterekSucrose fatty acid esters

Szacharóz monolaurát RyotoSucrose monolaurate Ryoto

Szacharóz monooleát RyotoSucrose Monoolea Ryoto

Példa Example HLB HLB Sugár Ester LWA 1540 Radius Ester LWA 1540 15,0 15.0 Sugár Ester OWA 1570 Radius Ester OWA 1570 15,0 15.0

• 4 • 44 • 4 » *« • · · 4 4* · • 4 · ·« • · 4 · ·4 · ·• 4 • 44 • 4 »*« • · 4 4 * · • 4 · · «• · 4 · · 4 · ·

Szacharóz monopalmitát Ryoto Sugár Ester P1570Sucrose Monopalmitate Ryoto Radius Ester P1570

Szacharóz monosztearát Ryoto Sugár Ester S1570Sucrose Monostearate Ryoto Radius Ester S1570

Szorbitánszármazékoksorbitan derivatives

15,015.0

POE POE (20) (20) szorbitán sorbitan monooleát monooleate POE POE (20) (20) szorbitán sorbitan monosztearát monostearate POE POE (20) (20) szorbitán sorbitan monolaurát monolaurate

Etoxilált zsírsavakEthoxylated fatty acids

POE (40) sztearátPOE (40) stearate

Pálmamagolaj zsírsavainak glicerin- és PEG 1500 észterei Etoxilált laurilsavGlycerol and PEG 1500 esters of palm kernel fatty acids Ethoxylated lauric acid

Etoxilált alkoholokEthoxylated alcohols

POE (23) lauril-éterPOE (23) lauryl ether

Etoxilált alkil-fenolokEthoxylated alkyl phenols

Tween 80 Tween 80 15,0 15.0 Tween 60 Tween 60 14,9 14.9 Tween 20 Tween 20 16,7 16.7 Myrj-52 Myrj 52 16,9 16.9 Gelucire Gelucire 44/14 44/14 14,0 14.0 Acconon Accont 1000 ML 1000 ML 16,5 16.5 Brij-35 Brij-35 16,9 16.9

Nonil-fenoxi-poli(etilénoxi)- Igepal CO-970 etanolNonyl-phenoxy-poly (ethyleneoxy) - Igepal CO-970 ethanol

EgyébOther

Igepal CO-710Igepal CO-710

18,318.3

14,014.0

Telített poliglikolizált gliceridSaturated polyglycolized glyceride

LabrasolLabrasol

A kedvelt nemionos felületaktív anyagokra példák a következők: Examples of preferred nonionic surfactants include: Kémiai leírás Chemical description Példa Example HLB HLB Kajszimag-olaj PEG-6 komplex Apricot oil PEG-6 complex Labrafil Labrafil M1944CS M1944CS 3,0 3.0 Polioxil 35 ricinusolaj Polyoxyl 35 castor oil Cremophor Cremophor EL EL 12 12 -14 -14 PEG-6 oktaonil/dekaonil PEG-6 octonyl / deca Softigen Soft Yes 767 767 17 17 gliceridek glycerides Polioxietilált növényi olaj Polyoxyethylated vegetable oil Emulphor Emulphor EL-620 EL-620 12 12 Szorbitán-monooleát Sorbitan monooleate Span 80 Span 80 4,3 4.3

Poloxamerekpoloxamer

PluronicsPluronics

14-20 • 4 4« « ♦ < ·4 4 •44 9 * 4 ·4 • · · · 44 ·« · 4 • 4 4 · 4 · 4 · ·« ··· · <4 4 ·«·»14-20 • 4 4 «« ♦ <· 4 4 • 44 9 * 4 · 4 • · · · 44 · «· 4 • 4 4 · 4 · 4 · ·« ··· · <4 4 · «·»

Polioxietilén-glicerin- Polyoxyethylene glycerol Tagat TO Tagat TO 11,3 11.3 trioleát trioleate Szorbitán-monolaurát Sorbitan monolaurate Span 20 Span 20 8,6 8.6 Acetogliceridek acetoglycerides Myvacets Myvacets 3,8-4,0 3.8-4.0

Dekaglicerol-mono/dioleátDecaglycerol mono / dioleate

Caprol PGE860Caprol PGE860

Polioxietilén(4)-lauril-éterPolyoxyethylene (4) lauryl ether

POE 9 monooleátPOE 9 monooleae

POE (20) szorbitán-trioleátPOE (20) sorbitan trioleate

POE (4) szorbitán monolaurátPOE (4) sorbitan monolaurate

Oktanoil/dekanoil savak mono/digliceridj eiOctanoyl / decanoyl acid mono / diglyceride

Glicerol-monooleát Mono-oktanoinGlycerol monooleate Monooctanoin

Brij 309,5Brij 309.5

Pegosperse 400 MO11Pegosperse 400 MO11

Tween 8511Tween 8511

Tween 2113,3Tween 2113.3

Imwitor-742;5,5Imwitor-742, 5.5

Capmul-MCM6CAPM MCM6

Capmul-GMO3,4CAPM GMO3,4

Imwitor-3086Imwitor-3086

Az olaj együtt adható be az aktív ágenssel és a védő nemionos felületaktív anyaggal. A találmány szövegértelmezése szerint az olaj folyékony és vízzel nem elegyedik. Az olaj segítheti az aktív ágens oldhatóvá tételét, ha az aktív ágens nem poláris.The oil may be administered together with the active agent and the protective nonionic surfactant. According to the present invention, the oil is liquid and immiscible with water. Oil can help solubilize the active agent if the active agent is not polar.

Néhány esetben az olaj maga is lehet védő felületaktív anyag, így például a a Capmul-MCM (monooktanoin). Más alkalmas olajok a trigliceridek, digliceridek és monogliceridek. A monoglicerideket, pl. mono-oleint és mono-oktanoin (Capmul MCM; Imwitor-308) nem szokták használni, mivel poláris olajok a di- és trigliceridekhez képest, de használhatók akár felületaktív anyagként, akár emulgeátorként is. A monogliceridek akkor szolgálhatnak emulgeátorként, ha nem poláris olajokkal, pl. triglicerid növényolajokkal vagy közepesen hosszú láncú C4-C12 trigliceridekkel, pl. Miglyol-812-vel elegyítik őket. Amikor monogliceridek szolgálnak védő felületaktív anyagként, akkor a monoglicerid a vízoldhatatlan olaj fázis. Ebben az esetben egy további felületaktív anyag/emulgeátor alkalmazható, amely emulgeálja a monogliceridet a vizes közegben. Ha kiegészítő felületaktív anyagot/emulgeátort nem alkalmazunk, a monoglicerid szolgál mind olaj fázisként, mind felületaktív anyagként/emulgeátorként. Például ha mono-oktanoint (Capmul-MCM) helyezünk vizes közegbe, ez olajként is, felületaktív anyagként/emulgeátorként is fog hatni.In some cases, the oil itself may be a protective surfactant such as Capmul-MCM (monooctanoin). Other suitable oils include triglycerides, diglycerides and monoglycerides. Monoglycerides, e.g. mono-olein and mono-octanoin (Capmul MCM; Imwitor-308) are not used because they are polar oils relative to di- and triglycerides, but they can be used as surfactants or as emulsifiers. Monoglycerides can serve as emulsifiers when used with non-polar oils, e.g. triglycerides with vegetable oils or medium-chain C4-C12 triglycerides, e.g. They are mixed with Miglyol-812. When monoglycerides serve as protective surfactants, the monoglyceride is the water-insoluble oil phase. In this case, an additional surfactant / emulsifier may be used which emulsifies the monoglyceride in the aqueous medium. When no additional surfactant / emulsifier is used, the monoglyceride serves as both an oil phase and a surfactant / emulsifier. For example, when monooctanoin (Capmul-MCM) is added to an aqueous medium, it will also act as an oil, surfactant / emulsifier.

A felületaktív anyag és az olaj megfelelő kombinációi a Tween-80 Miglyol-812-vel vagy Capmul-MCM-mel és a Labrafil-M-1944CS Miglyol-812-vel. Kettőnél több felületaktív anyag és olaj keveréke is lehetséges. Például Tween-80 és Capmul-MCM kombinációja Miglyol-812-vel.Suitable combinations of surfactant and oil are Tween-80 Miglyol-812 or Capmul-MCM and Labrafil-M-1944CS Miglyol-812. A mixture of more than two surfactants and oils is possible. For example, a combination of Tween-80 and Capmul-MCM with Miglyol-812.

A találmány szerinti alkalmas olajok:Suitable oils of the invention include:

Példa Example Kémiai leírás Chemical description Miglyol 812 Miglyol 812 Oktanoil/dekanoil triglicerid Octanoyl / decanoyl triglyceride Szőj aolaj Weave oil Növényi olaj Vegetable oil Szezámolaj sesame oil Növényi olaj Vegetable oil Olívaolaj Olive oil Növényi olaj Vegetable oil Olaj sav Oil week Zsírsav Fatty acid Imwitor-308 Imwitor 308 Mono-oktanoin Mono-octanoin

Imwitor 742; Capmul-MCM Oktán- és dekán sav mono/digliceridj eiImwitor 742; Capmul-MCM Mono / diglycerides of octane and decane acids

Lipiodol Jódozott növényi olajLipiodol Iodized vegetable oil

Capmul-GMO Glicerin-monooleátCapmul-GMO Glycerol monooleate

A találmány szerint egy aktív ágenst, amely csak bélpermeabilitás-növelő jelenlétében permeabilis a bélfalon keresztül (nem < · ·* ·♦·· ·· ♦ « « * * · • 44· · 4· ··« • ···· 4 4 · 4» *·· « ·ι *»««, permabilis aktív ágens), legalább egy védő nemionos felületaktív anyaggal együtt adunk be, amely nem permeabilitás-növelő (permeabilitást nem növelő felületaktív anyag), valamint egy permeabilitás -növelővel , amely nem a védő nemionos felületaktív anyag. Általánosságban a nem permeabilis aktív ágensek kb. egy óra után sem tűnnek el a perfúziós folyadékból a fent leírt permeabilitási tesztben. Az ilyen aktív ágensekre példák a 3000-nél nagyobb molekulatömegu peptidek, pl. prolaktin, növekedési hormon, inzulin, gonadotropin, follikulusz stimuláló hormon, interferonok, interleukinok és terápiás antitestek.According to the present invention, an active agent which is permeable through the intestinal wall only in the presence of an enteric permeability enhancer (not <RTI ID = 0.0> 44 </RTI> · 4 · ········ 4) 4 4 4 m · «« «« «« per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per per, permeable active agent) be administered with at least one protective nonionic surfactant which is not a permeability enhancer not the protective nonionic surfactant. In general, non-permeabilizing active agents will have a concentration of approx. do not disappear from the perfusion fluid after one hour in the permeability test described above. Examples of such active agents are peptides of molecular weight greater than 3000, e.g. prolactin, growth hormone, insulin, gonadotropin, follicle stimulating hormone, interferons, interleukins and therapeutic antibodies.

A nemionos felületaktív anyagok azon tulajdonsága, hogy növelik a nem permeabilis aktív ágensek permeabilitását a következő kísérlettel igazolható. Érzéstelenített patkány belének egy részét kivezetjük és gyengén abszorbeált fenolvörös a gyógyszer és a tesztelni kívánt felületaktív anyag oldatát egy órán keresztül a béldarabon keresztülpumpáljuk. Az egy órás perfúzió után a szisztémás vért levesszük, majd megmérjük benne a gyógyszerkoncentrációt pl. nagyteljesítményű folyadékkromatográfiával. Ezt a kísérletet nagyszámú nemionos nonil-fenoxi-polioxietilén (NP-POE) felületaktív anyaggal elvégeztük, amelyek POE egységeinek száma 9 és 100 között volt. Ezek a felületaktív anyagok rendelkeznek a nem poláris NP szegmenssel, valamint a poláris POE szegmenssel. Minél több benne az oxietilén (OE) egység, annál polárisabb a felületaktív anyag. Kiderült, hogy a kevésbé poláris felületaktív anyagok, amelyek 9-20 OE egységgel rendelkeznek, permeabilitás növelők, míg a polárisabb felületaktív anyagok 30-100 OE egységgel nem azok. Ezt az A táblázat szemlélteti, amely bemutatja a plazma fenolvörös szintjét az egyórás patkány bélperfúzió után, *9 *· «« ··«· »♦ * · · te · · • * · 9 · · · • ···· * i -· · · • ·· ί ·· ·· ··· amelyet fenolvörössel végeztek 1% (g/100 ml) NP-POE-9, -10.5,The property of nonionic surfactants to increase the permeability of non-permeable active agents can be demonstrated in the following experiment. Part of the intestine of anesthetized rat is expelled and a solution of poorly absorbed phenol red drug and surfactant to be tested is pumped through the gut for one hour. After one hour of perfusion, systemic blood is drawn and the drug concentration measured, e.g. by high performance liquid chromatography. This experiment was carried out with a large number of nonionic nonylphenoxy-polyoxyethylene (NP-POE) surfactants with a number of POE units between 9 and 100. These surfactants have a non-polar NP segment and a polar POE segment. The more oxyethylene (OE) units it contains, the more polar the surfactant is. It has been found that less polar surfactants having 9-20 OE units increase permeability while more polar surfactants having 30-100 OE units are not. This is illustrated in Table A, which shows the plasma phenol red levels after 1 hour of rat intestinal perfusion, ♦ * · te 9 9 9 9 9 9 9 9 9 - with phenol red 1% (g / 100 ml) NP-POE-9, -10.5,

-20, -30, -50, -100 jelenlétében.In the presence of -20, -30, -50, -100.

A táblázat The table Hozzáadott NP-POE Added NP-POE HLB HLB Plazma fenolvörös Plasma phenol red koncentráció concentration (mcg/ml) (Mcg / ml) semmi nothing - - 0.35 0:35 NP-POE-9 NP-POE-9 13.4 22.49 13.4 22.49 NP-POE-10.5 NP-POE-10.5 14.0 14.0 31.06 31.06 NP-POE-20 NP-POE-20 16.3 16.3 25.47 25.47 NP-POE-30 NP-POE-30 17.4 17.4 0.24 0:24 NP-POE-50 NP-POE-50 18.3 18.3 0.15 0:15 NP-POE-100 NP-POE-100 19.1 19.1 0.42 0:42

A nemionos felületaktív anyagok polaritásának mérésére egy alkalmas eljárás a hidrofil-lipofil egyensúly (HLB) meghatározása, Griffin, J.Soc.Cosmet.Chem., 5, 249-256 (1954). Az NP-POE-kal kapcsolatban azok a felületaktív anyagok, amelyek HLB értéke kevesebb, mint 17, permeabilitás növelők, amelyek HLB-je több, mint 17, nem azok. Ehhez hasonlóan különböző hosszúságú POE-val rendelkező NP-POE-k keveréke esetében is elengedhetetlen, ha a permeabilitást növelni akarjuk, hogy a HLB 17 vagy kevesebb legyen.A suitable method for measuring the polarity of nonionic surfactants is the determination of hydrophilic lipophilic balance (HLB), Griffin, J. Soc. Cosmet.Chem., 5, 249-256 (1954). For NP-POE, surfactants with an HLB of less than 17, permeability enhancers with an HLB of more than 17, are not. Similarly, for a mixture of NP-POEs with different length POEs, it is essential to increase the permeability to an HLB of 17 or less.

A 17 vagy annál kevesebb HLB nem feltétele a permeabilitás növelésének a felületaktív anyagok összes szerkezeti osztályánál, így például a poliszorbát-80 nemionos felületaktív anyag (Tween80; POE-szorbitán-monooleát), amelynek HLB-je 15, nem permeabi15 litás növelő a fenolvörös perfúziós tesztet elvégezve. A POEszorbitán észterek esetében a permeabilitás-fokozás HLB-je kevesebb, mint 15; az e szerkezeti osztályba tartozó felületaktív anyagok közül azok, amelyek HLB-je nagyobb, mint 15, nem permeabilitás növelők. Ugyanakkor egy másik szerkezeti osztályban a Gelucire 44/14 14-es HLB-vel nem permeabilitás-növelő, de hatékony peptidvédő ágens. Példák olyan nemionos felületaktív anyagokra, amelyek petidvédo ágensek, de nem permeabilitás növelők az NP-POE-30 (Igepal CO-880), NP-POE-50 (Igepal CO-970), NP-POE-lOO (Igepal CO-990), Gelucire 44/14 és a poliszorbát-80.HLB of 17 or less is not a prerequisite for increasing permeability in all structural classes of surfactants, such as polysorbate-80 nonionic surfactant (Tween80; POE-sorbitan monooleate) with an HLB of 15, non-permeability enhancer of phenol red perfusion. test. For POE sorbitan esters, the HLB for permeability enhancement is less than 15; surfactants in this structural class having a HLB greater than 15 are non-permeability enhancers. However, in another structural class, Gelucire 44/14 with HLB 14 is not a permeability enhancer but an effective peptide protecting agent. Examples of nonionic surfactants that are pesticidal agents but not permeability enhancers are NP-POE-30 (Igepal CO-880), NP-POE-50 (Igepal CO-970), NP-POE-100 (Igepal CO-990). , Gelucire 44/14 and polysorbate-80.

A találmány egy jellemző kiviteli módjában egy lágy zselatin kapszula 50 mg aktív ágenst, 640 mg olajat (Capmul-MCM) és 160 mg felületaktív anyagot (poliszorbát-80) tartalmaz. Egy másik jellemző kiviteli módban egy #00 kemény zselatin kapszula 50 mg gyógyszert és 650 mg felületaktív anyagot (Gelucire 44/14) tartalmaz. A felületaktív anyag, vagy a felületaktív anyag plusz olaj mennyisége egy találmány szerinti dózis formában nagy mértékben különbözhet. Egy egyedi egységforma azonban általában kb. 1-500 mg aktív ágenst és kb.25-1000 mg felületaktív anyagot vagy felületaktív anyag plusz olajat tartalmaz.In a typical embodiment of the invention, a soft gelatin capsule contains 50 mg of active agent, 640 mg of oil (Capmul-MCM) and 160 mg of surfactant (polysorbate-80). In another typical embodiment, a # 00 hard gelatin capsule contains 50 mg of drug and 650 mg of surfactant (Gelucire 44/14). The amount of surfactant or surfactant plus oil in a dosage form of the invention may vary widely. However, a single unit form generally has a size of approx. It contains from 1 to 500 mg of active agent and from about 25 to 1000 mg of surfactant or surfactant plus oil.

A következő példák illusztrálják a találmányt.The following examples illustrate the invention.

1. példaExample 1

A felületaktív anyagokkal kiváltott kimotripszin gátlást in vitro mutatjuk be, a terlakiren vonatkozásában. A kontroll oldatokat 0.06 mM terlakirenből készítjük izotóniás pufferben. A kimotripszin oldatot 0.001 n hidrogén-kloridban adjuk hozzá, így a végső kimotripszin koncentráció 0.25 M vagy 2.5 M. A kezdeti terlakiren koncentrációt, majd a különböző időben mért koncentrációkat • · · ·Surfactant-induced inhibition of chymotrypsin is demonstrated in vitro for terlakiren. Control solutions were prepared from 0.06 mM terlakiren in isotonic buffer. The chymotrypsin solution is added in 0.001N hydrochloric acid, resulting in a final concentration of 0.25 M or 2.5 M. Initial concentration of terlakiren followed by concentrations at various times.

HPLC-vel elemezzük. 1% és 5% tömegszázalékos felületaktív anyagot és izotóniás pufferben lévő 0.06 mM terlakirent tartalmazó tesztoldatokat készítünk, majd a fenti kimotripszin oldatot hozzáadjuk. A terlakiren koncentrációt a reakció előtt és közben elemezzük, az adatokat az 1.táblázatban összegezzük. A degradáció kezdeti sebességét a koncentráció és az idő függvényének meredekségéből határozzuk meg.Analyze by HPLC. Test solutions containing 1% and 5% by weight surfactant and 0.06 mM terlakiren in isotonic buffer are prepared and the above solution of chymotrypsin is added. The terlakiren concentration was analyzed before and during the reaction, and the data are summarized in Table 1. The initial rate of degradation is determined from the slope of the concentration versus time.

• ·• ·

I.táblázatI.táblázat

Kontroll, control, HLB HLB Kimo- Kimo- Kezdeti Initial Kezdeti Initial %-os %-ancestor Terla- Terla- ill.felü- ill.felü- tripszin- trypsin sebesség speed seb.(fe- wound. (Fe gátlás inhibition kiren release letaktív surface-active konc. conc. (μΜ/perc)lület- (ΜΜ / min) lület- [100X [100X mara- for today- anyag material (μΜ) (ΜΜ) aktív active (1-kezde- (1 initia- dék 30 d anyag/ material/ ti seb. you wound. perc minute /kontr. / Ref. arány) gold) után after Kontroll control 1% NP-POE 1% NP-POE 0,25 0.25 1,85 1.85 0,23 0.23 77 77 36 36 -10.5 -10.5 14,0 14.0 0,25 0.25 0,25 0.25 85 85 Kontroll control 1% NP-POE 50 1% NP-POE 50 0,25 0.25 1,90 1.90 0,31 0.31 69 69 34 34 18,3 18.3 0,25 0.25 0,59 0.59 76 76 Kontroll control 0,25 0.25 2210 2210 32 32 1% poly- 1% poly- 15 15 0,25 0.25 0,65 0.65 0,31 0.31 69 69 73 73 szorbát 80 sorbate 80 5% poli- 5% Poly 15 15 0,25 0.25 0,33 0.33 0,16 0.16 84 84 87 87 szorbát 80 sorbate 80 Kontroll control 0,25 0.25 2,09 2.09 91 91 32 32 1% Gelucire 1% Gelucire 14 14 0,25 0.25 0,18 0.18 0,09 0.09 92 92 44/14 44/14 Kontroll control 0,25 0.25 1,82 1.82 36 36 1% PEG 400 1% PEG 400 20 20 0,25 0.25 1,84 1.84 1,00 1.00 0 0 37 37 5% PEG 400 5% PEG 400 0,25 0.25 1,55 1.55 0,85 0.85 15 15 42 42 Kontroll control 2,5 2.5 15,4 15.4 <2 <2 1% poli- 1% Poly 15 15 2,5 2.5 3,54 3.54 0,23 0.23 77 77 9 9 szorbát 80 sorbate 80 Kontroll control 2,5 2.5 12,2 12.2 89 89 <2 <2 5% poli- 5% Poly 15 15 2,5 2.5 1,39 1.39 0,11 0.11 51 51 szorbát 80 sorbate 80 Kontroll control 2,5 2.5 14,7 14.7 <3 <3

• · · · • · ·• · · · • · ·

5% Brij 35 5% Brij 35 16,9 16.9 2,5 2.5 1,08 1.08 0,07 0.07 93 93 57 57 Kontroll control 2,5 2.5 14,1 14.1 <3 <3 5% Myrj 52 5% Myrj 52 16,9 16.9 2,5 2.5 1,07 1.07 0,08 0.08 92 92 61 61

2.példaExample 2

Standard eljárást alkalmazunk, hogy felbecsüljük az olyan olajokkal kevert felületaktív anyagok, amelyek vízzel keverve emulziót alkotnak in vitro képességét a terlakiren kimotripszines degradációjának megakadályozásában. A terlakirent acetonitrilben oldjuk és hordozók oldatához vagy diszperziójához adjuk (0.2 vagy 1 % gm/100 ml koncentrációban) 6.5 pH-jú izotóniás citrát-foszfát pufferben. A gyógyszer (0.056 mM) koncentrációját mérjük. Ezután kimotripszint adunk hozzá a reakció megindítása érdekében. Az oldatot 37 oC-os vízfürdőbe helyezzük és 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40 valamint 45 percnél mintát veszünk. A reakciót a pH 2.5 mobil fázis használatával leállítjuk. A mintákat ezután a terlakiren reverz fázisú nagyteljesítményű folyadékkromatográfiájával elemezzük, amelyhez Water Novapak C-18 oszlopot használunk. A mobil fázis: acetonitril:víz 50:50 arányú keveréke, amelyhez 1 ml foszforsavat adunk literenként.A standard procedure is used to evaluate the ability of oil-mixed surfactants, which, when mixed with water, to form an emulsion to prevent chymotrypsin degradation of terlakiren. The terlakiren is dissolved in acetonitrile and added to a solution or dispersion of carriers (0.2 or 1% gm / 100 mL) in isotonic citrate phosphate buffer pH 6.5. The concentration of the drug (0.056 mM) was measured. Chymotrypsin is then added to initiate the reaction. Place the solution in a 37 oC water bath and take samples at 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40 and 45 minutes. The reaction was quenched using the pH 2.5 mobile phase. Samples were then analyzed by reverse phase high performance liquid chromatography on terlakiren using a Water Novapak C-18 column. A 50:50 mixture of mobile phase: acetonitrile: water to which 1 ml of phosphoric acid is added per liter.

A II. táblázatban látható eredmények azt mutatják, hogy az olaj/felületaktív anyag emulziók csökkentik a terlakiren kimotripszin katalizálta degradációját.II. The results shown in Table 6 show that oil / surfactant emulsions reduce the chromotrypsin-catalyzed degradation of terlakiren.

A vizsgált emulziós hordozók:Emulsion carriers tested:

A hordozó: Capmul-MCM/Poliszorbát-80 (80/20)Carrier: Capmul-MCM / Polysorbate-80 (80/20)

B hordozó: Capmul-MCM/Miglyol-812/Poliszorbát-80 (40/40/20)Carrier B: Capmul-MCM / Miglyol-812 / Polysorbate-80 (40/40/20)

C hordozó: Capmul-MCM • « • · • · · ·C substrate: Capmul-MCM

D hordozó: Capmul-MCM/Poliszorbát-80/Etanol (57/38/5)Carrier D: Capmul-MCM / Polysorbate-80 / Ethanol (57/38/5)

II. ' II. ' táblázat spreadsheet Közeg/ kontroll Medium / Control Kimotripszin (μΜ) Chymotrypsin (μΜ) Kezdeti sebesség (μΜ/perc) Initial speed (μΜ / min) Kezdeti sebesség aránya Initial speed ratio %-os gátlás [100X (1kezdeti seb. arímy % inhibition [100X (1 Initial wound. arímy Terlakiren maradék 30 perc után Terlakiren remaining After 30 minutes Kontroll control 0,25 0.25 1,9 1.9 41 41 0.2% A 0.2% A 0,25 0.25 0,045 0,045 0,023 0.023 98 98 98 98 1% A 1% A 0,25 0.25 0,040 0,040 0,021 0,021 98 98 98 98 Kontroll control 0,25 0.25 1,9 1.9 41 41 0.2% B 0.2% B 0,25 0.25 0,068 0,068 0, 0 035 96 035 96 95 95 1% B 1% B 0,25 0.25 0,098 0.098 0, 0 051 95 051 95 95 95 Kontroll control 0,25 0.25 1,9 1.9 41 41 0.2% C 0.2% C 0,25 0.25 0,55 0.55 0, 0 28 71 28 71 82 82 Kontroll control 0,25 0.25 2,6 2.6 41 41 1% D 1% D 0,25 0.25 0,034 0,034 0, 0 013 99 013 99 98 98

3. példaExample 3

A terlakiren biológiai hozzáférhetőségének meghatározására irányuló kísérleteket kutyán ebben, valamint 4. és 10. példában a következő módon hajtjuk végre. Kópéknak adunk orálisan terlakiren kapszulákat, amelyet 150 ml H20-vel öblítés követ. A terlakiren hatóanyag-szintjét 6 időpontban mérjük a gyógyszeradagolás után: 15 percnél, 30 percnél, 1 óránál, 2 óránál, 3 óránál és 4 óránál. Minden kutya saját kontrolijául szolgál egy előző heti eredmény alapján. A szérumot N-butil-kloriddal vonjuk ki, amelyet kimot• · · · · • · * · ··· • · · ♦ ⁹ ,, ·· ·· · ripszin vizes oldatával végzett inkubáció követ. A degradációs terméket fluoreszkaminnel végzett derivitizáció után vizsgáljuk.Experiments to determine the bioavailability of terlakiren in dogs were conducted in this and in Examples 4 and 10 as follows. Copes are administered orally with terlakiren capsules followed by rinsing with 150 ml H 2 O. Terlakiren drug levels are measured at 6 time points after drug administration: 15 minutes, 30 minutes, 1 hour, 2 hours, 3 hours and 4 hours. Each dog serves as its own control based on a previous week's result. The serum is extracted with N-butyl chloride followed by incubation with a ⁹ µM aqueous solution of rhodopsin chymotryl · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · The degradation product is assayed after derivatization with fluorescamine.

A fluoreszcencia detektor Spectroflow 280. Az oszlop típusa Novapak C-18. A kibocsátás hullámhosszúsága 380 nm. A mobil fázis 75:25 arányban víz:acetonitril, az időegységenkénti átfolyás 1.0 ml/perc. Az észlelési határ 10 ng/ml. A gyógyszer biológiai hozzáférhetőségének mérésére nullától négy óráig terjedő görbe alatti területeket (AUC) számolunk ki a koncentráció-idő adatpárokból minden kutyára a trapézszabály alkalmazásával.The fluorescence detector is Spectroflow 280. The column type is Novapak C-18. The emission wavelength is 380 nm. The mobile phase is 75:25 water: acetonitrile, the flow rate is 1.0 ml / min. The limit of detection is 10 ng / ml. Zero-to-four-hour curves (AUC) are calculated from concentration-time data pairs for each dog using the trapezoidal rule to measure drug bioavailability.

A terlakirent (0.5053 g) 100% etanolban oldjuk, majd az oldatot olvasztott Gelucire 44/14-hez adjuk keverés közben. A Gelucire pálmamag-olajból való glicerin és polietilén-glikol (PEG) 1500 észtereinek zsírsavakkal alkotott keveréke, amelynek olvadáspontja 44 oC, a HLB-je 14. Ezt a keveréket 50oC-ra hevítjük, azért, hogy az etanol eltávozzon az oldatból és ezáltal tiszta oldatot kapjunk, ahol a terlakiren 7,18% tömegszázalékban van jelen a Gelucire 44/14-ben. A kapszulákat (#00) egyenként 700 mg Gelucire 44/14 oldattal töltjük meg. Két-két kapszulát (100 mg terlakiren) adunk mind a négy kutyának. A vérben lévő gyógyszer szintjét adagolás után 4 óránként mérjük. A kutyák vér-szintjének görbe alatti területét kiszámoljuk és ezt összehasonlítjuk az egy darab 100 mg-os, porral töltött kapszulára ugyanabban a kutyában kapott adatokkal. Ezen adagolási módban az átlagos javulás a biológiai hozzáférhetőségben a szilárd kapszulákkal szemben 22-szeres.The terracene (0.5053 g) was dissolved in 100% ethanol and added to melted Gelucire 44/14 with stirring. A mixture of 1500 glycerol and polyethylene glycol (PEG) esters of Gelucire palm kernel oil with fatty acids having a melting point of 44 ° C and an HLB of 14. This mixture is heated to 50 ° C to remove ethanol from the solution and thereby to a solution wherein terlakiren is present at 7.18% by weight in Gelucire 44/14. The capsules (# 00) are filled with 700 mg of Gelucire 44/14 solution each. Two capsules (100 mg terlakiren) were administered to each of the four dogs. The level of drug in the blood is measured every 4 hours after dosing. The area under the dog's blood level curve is calculated and compared to the data obtained for one 100 mg powder filled capsule in the same dog. In this mode of administration, the mean improvement in bioavailability over solid capsules is 22-fold.

4.példaExample 4

Terlakirent (egy rész) keverünk és porítunk Gelucire-rel (5 rész) Attritor keverőben 5 órán keresztül, hogy homogén diszperziót kapjunk. A kemény zselatin kapszulákat (#0) 600 mg diszperzióval • · ···· • · · · • * · · · · töltjük, amely 100 mg terlakirent tartalmaz. Egy négy kutyából álló csoportban (két nőstény, két hím) minden kutyának egy kapszulát adunk be. A biológiai hozzáférhetőség növekedése a Gelucire 44/14-nek köszönhetően 21-szeres a porral töltött kapszulákhoz képest.Terracene (one part) is mixed and pulverized with Gelucire (5 parts) in an Attritor mixer for 5 hours to obtain a homogeneous dispersion. Hard gelatine capsules (# 0) are filled with a dispersion of 600 mg containing 100 mg of terlakiren. In a group of four dogs (two females, two males) one capsule was administered to each dog. The bioavailability of Gelucire 44/14 is increased 21-fold compared to powder-filled capsules.

5. példaExample 5

A 4.példában leírthoz hasonló eljárás során 100 mg terlakirentIn a similar procedure to that described in Example 4, 100 mg of terlakiren

500 mg Myrj 52-vel keverünk és #0 kapszulákba töltünk. A Myrj 52 sztearinsav polioxietilén-monoésztereinek és diésztereinek keveréke, az átlagos polimerhosszúság mintegy 40 oxietilén egység.500 mg of Myrj 52 is mixed and filled into # 0 capsules. Myrj is a blend of polyoxyethylene monoesters and diesters of 52 stearic acids with an average polymer length of about 40 oxyethylene units.

A 4 kutya görbe alatti területeit (AUC) összehasonlítottuk. A biológiai hozzáférhetőség átlagos növekedése a Myrj 52-vel 14szeres, a porral töltött kapszulákhoz képest.The areas under the curve (AUC) of the 4 dogs were compared. The average increase in bioavailability compared to Myrj 52 is 14 times that of the powder filled capsules.

6. példaExample 6

A 4. példában leírthoz hasonló eljárás során 100 mg terlakirentIn a procedure similar to that described in Example 4, 100 mg of terlakiren

500 mg Acconon 1000 ML-lel keverünk és #0 kapszulákba töltünk. Az Acconon PEG 1000 ML PEG (1,000 molekulatömeg)-gél etoxilált laurinsav, amelynek olvadáspontja 37,3oC, HLB értéke 16.5. A négy kutya AUC-ját összehasonlítjuk. A biológiai hozzáférhetőség átlagos növekedése az Acconon hatásaként 10-szeres a porral töltött kapszulákhoz képest.500 mg of Acconon is mixed with 1000 ML and filled into # 0 capsules. Acconon PEG 1000 ML PEG (1,000 molecular weight) gel is ethoxylated lauric acid, m.p. 37.3 ° C, HLB 16.5. The AUC of the four dogs is compared. The average increase in bioavailability due to Acconon is 10 times higher than the powder filled capsules.

7. példaExample 7

Terlakirent (1 rész) és Gelucire 44/14-t (5 rész) összekeverünk és Dynomill-ben őriünk 8 órán keresztül, hogy homogén diszperziót kapjunk. A terlakiren részecske mérete így jelentősen csökken. A 600 mg diszperziót tartalmazó kapszulákat (100 mg terlakiren), mind kutyákban, mind emberekben teszteltük. A biológiai hozzáférhetőség javulása a Gelucire 44/14 hatására 14-szeres a négy kutyában és 2.8-szeres 11 egészséges, önként jelentkező páciensnél, a porral töltött kapszulákhoz képest.Terlakiren (1 part) and Gelucire 44/14 (5 parts) were mixed and cured in Dynomill for 8 hours to obtain a homogeneous dispersion. The size of the terlakiren particle is thus significantly reduced. Capsules containing 600 mg dispersion (100 mg terlakiren) were tested in both dogs and humans. The bioavailability of Gelucire 44/14 is increased 14-fold in four dogs and 2.8-fold in 11 healthy volunteers compared to powder-filled capsules.

8.példa8.példa

Terlakirent (1 rész) és Gelucire 44/14-t (5 rész) összekeverjük és homogenizáljuk részecskeméret-csökkenés nélkül és homogén diszperziót kapjunk. A 600 mg tartalmazó kapszulákat (100 mg terlakiren), mind kutyákban, mind emberekben teszteljük. A biológiai hozzáférhetőség javulása a Gelucire 44/14 hatására 1.7szeres a négy kutyában és 2.3-szeres 11 egészséges, önként jelentkező páciensnél, a porral töltött kapszulákhoz képest.Terlakiren (1 part) and Gelucire 44/14 (5 parts) were mixed and homogenized without loss of particle size to give a homogeneous dispersion. Capsules containing 600 mg (100 mg terlakiren) were tested in both dogs and humans. The bioavailability of Gelucire 44/14 is 1.7-fold higher than that of the powder-filled capsules in four dogs and 2.3-fold in 11 healthy volunteers.

9.példaexample 9

Vízzel keverve emulziót képző, olajokkal kevert felületaktív anyagokban kiszerelt terlakirent kutyáknak adunk. Minden kutya 100 mg-os dózis terlakirent kap.When mixed with water, it is given to terlairent dogs in emulsion-formulated oil-mixed surfactants. Each dog receives a dose of 100 mg of terlakiren.

A III. és IV. táblázat mutatja meg a kiszerelés béltartalmát, ide értve a kontrollként alkalmazott porral töltött kapszuláét is (por), amely nem tartalmaz védő felületaktív anyagot.In III. and IV. Table I shows the intestinal contents of the formulation, including the control powder filled capsule (powder), which does not contain a protective surfactant.

Az V.táblázat mutatja be a készítmények átlagos görbe alatti területét, valamint az átlagos hatékonysági növekedés-szorzót a porral töltött kapszulához képest.Table V shows the area under the curves of the formulations as well as the average potency multiplier relative to the powder filled capsule.

III. táblázatIII. spreadsheet

A terlakirent tartalmazó kiszerelések felületaktív anyagban, illetve olaj-felületaktív anyag keverékben (mg/egység dózis)Formulations containing terlacyrene as surfactant or oil-surfactant mixture (mg / unit dose)

Komponens component CPE CPE C C CP CP CMP CMP Por Powder Terlakiren terlakiren 50 50 50 50 50 50 33,3 33.3 100 100 Capmul MCM Capmul MCM 426 426 600 600 640 640 386,7 386.7 - - poliszorbát 80 polysorbate 80 284 284 - - 160 160 193,3 193.3 - - etanol ethanol 40 40 - - - - - - - - Miglyol 812 Miglyol 812 - - - - - - 386,7 386.7 - - laktóz lactose - - - - - - - - 80 80 kroszkarmellóz croscarmellose - - - - - - - - 12 12 nátrium sodium Na lauril-szulfát Na lauryl sulfate - - - - - - - - 2 2 Mg sztearát Mg stearate - - - - - - - - 6 6 kapszula mérete capsule size #00 # 00 #11.5 # 11.5 #14 # 14 #16 # 16 #2 # 2 zselatin burok gelatin shell kemény hard lágy soft lágy soft lágy soft kém spy

IV.táblázatIV.táblázat

Terlakiren kiszerelések, amelyek olaj és felületaktív anyag keverékét tartalmazzák (mg/egység dózis)Terlakiren formulations containing a mixture of oil and surfactant (mg / unit dose)

Komponens component SoyLab SoyLab MigPS80 MigPS80 MigLab MigLab CapOIPS8 CapOIPS8 Por Powder Terlakiren terlakiren 50 50 50 50 50 50 50 50 100 100 Miglyol 812 Miglyol 812 - - 420 420 366 366 - - - - Szőj aolaj Weave oil 365 365 - - - - - - - - Labrafil Labrafil 5 5 - - 4 4 - - - - M1944CS M1944CS Poliszorbát 80 Polysorbate 80 - - 170 170 - - 100 100 - - Capmul MCM Capmul MCM - - - - - - 195 195 - - Olaj sav Oil week - - - - - - 195 195 - - Laktóz Lactose - - - - - - - - 80 80 kroszkarmellóz croscarmellose - - - - - - - - 12 12 nátrium sodium Na lauril- Well laurel- - - - - - - - - 2 2 szulfát sulfate Mg sztearát Mg stearate - - - - - - - - 6 6 kapszula méret capsule size #0 # 0 #0 # 0 #0 # 0 #00 # 00 #2 # 2

zselatin burok kemény kemény kemény kemény kém • *gelatin shell hard hard hard hard spy • *

V.táblázatV.táblázat

A terlakiren biológiai hozzáférhetősége kopó kutyákban 100 mg dózis szájon át való adagolása utánBioavailability of terlakiren after administration of a 100 mg oral dose in dogs

Készítmény preparation Kutyák száma Number of dogs Átlagos (meg hr Average (and hr AUC mll) AUC mll) Átlagos j avulás Average improvement CPE CPE 12 12 0,312 0.312 12,5 12.5 C C 12 12 0,258 0.258 11,7 11.7 CP CP 12 12 0,296 0.296 11,2 11.2 CMP CMP 12 12 0,443 0.443 20,8 20.8 SoybLab SoybLab 4 4 0,105 0.105 3,5 3.5 MigPS80 MigPS80 4 4 0,275 0,275 10,3 10.3 MigLab MigLab 4 4 0,243 0.243 8,2 8.2 CapOIPS80 CapOIPS80 4 4 0,596 0.596 25,2 25.2 Por Powder 12 12 0,086 0.086 1,0 1.0

10.példa10.példa

Vízzel keverve emulziót képző olajokkal kevert felületaktív anyagban lévő kiszereléseket is adunk önként jelentkezőknek. A készítmények összeállítása ugyanaz, amelyet a III. táblázat bemutat. Minden jelentkező 100 mg terlakiren dózist kap. Az AUC eredményeket a VI.táblázatban mutatjuk be. Az eredmények azt mutatják, hogy az olajjal kevert felületaktív anyagok növelték a terlakiren biológiai hozzáférhetőségét a porral töltött kapszulákhoz képest, amelyek egyik védőanyagot sem tartalmazták.Formulations in surfactant mixed with emulsion-forming oils, mixed with water, are also given to volunteers. The formulation is the same as that described in Annex III. Table below shows. Each candidate will receive a dose of terlakiren 100 mg. The AUC results are shown in Table VI. The results show that the oil-mixed surfactants increased the bioavailability of terlakiren compared to powder-filled capsules, which did not contain any preservatives.

VI. táblázatVI. spreadsheet

A terlakiren biológiai hozzáférhetősége emberben 4 különböző készítmény szájon át való alkalmazása utánBioavailability of terlakiren in man after oral administration of 4 different formulations

Készítmény preparation Alanyok száma The girls number Átalagos AIC/ng/ /óra ml”l Average Piece AIC / ng / / hour ml ”l átalgos j avulás average progression C C 12 12 4,58 4.58 6,3 6.3 CP CP 12 12 4,39 4.39 6,2 6.2 CMP CMP 12 12 5,90 5.90 8,5 8.5 Por Powder 12 12 0,82 0.82 1,0 1.0

* A számításnál csak 11 alanyt vettünk figyelembe, mivel egy alanyban egyáltalán nem volt észlelhető terlakiren szérum-szint a porral töltött kapszula beadása után* Only 11 subjects were included in the calculation because one subject had no detectable terlakiren serum levels after administration of the powder filled capsule

11.példa11.példa

A felületaktív anyagok által előidézett in vitro tripszin gátlást benzol-arginin-para-nitroaniliddel (ΒΑΡΝΑ), mint enzimatikusan labilis aktív ágenssel vizsgáljuk. A tesztoldatokat 1.25 g/ml tripszinből (103 benzoil arginin etilészter egység/ml) , 0.5 mg/ml BAPNA-ból és 0.5 mg/ml felületaktív anyagból készítjük, 0.048 M TRIS és 0.019 M kalcium-klorid pufferben, amelynek pH-ja 8 és amely 3.75 g/ml marhaszérum albumint tartalmaz. A tesztoldatokat 37oC-on inkubáljuk.In vitro surfactant inhibition of trypsin is assayed with benzene arginine para-nitroanilide (ΒΑΡΝΑ) as an enzymatically labile active agent. Test solutions are prepared from 1.25 g / ml trypsin (103 benzoyl arginine ethyl ester units / ml), 0.5 mg / ml BAPNA, and 0.5 mg / ml surfactant in 0.048 M TRIS and 0.019 M calcium chloride buffer at pH 8 and containing 3.75 g / ml bovine serum albumin. Test solutions are incubated at 37 ° C.

perc után mintákat veszünk, majd 5 perces időközönként 40After 5 minutes, samples are taken and then at 5 minute intervals

- 27 percig. A mintákat azonos mennyiségű 30% tömegszázalékos ecetsavval fojtjuk le az elemzés előtt. A ΒΑΡΝΑ hidrolízis bomlási termékét, a 4-nitro-anilint Perkin-Elmer Lambda 3B UV/Vis spektrofotométerrel analizáljuk. A lefojtott minták abszorbanciáját 410 nm-en mérjük.- 27 minutes. Samples were quenched with an equal volume of 30% w / w acetic acid prior to analysis. The decomposition product of ΒΑΡΝΑ hydrolysis, 4-nitroaniline, was analyzed on a Perkin-Elmer Lambda 3B UV / Vis spectrophotometer. The absorbance of the suppressed samples was measured at 410 nm.

A ΒΑΡΝΑ-lebomlás százalékos gátlását felületaktív anyagot nem tartalmazó kontrollal való összehasonlítás alapján számoljuk, a következőképpen:Percent inhibition of ΒΑΡΝΑ-degradation is calculated from a comparison with a non-surfactant control as follows:

% gátlás = 100% x [l-(Si/So)l, ahol Sí az abszorbancia időbeli változásának sebessége felületaktív anyag jelenlétében, So pedig az abszorbancia időbeni változásának sebessége felületaktív anyag nélkül.% inhibition = 100% x [l- (Si / So) l, where S1 is the rate of change in absorbance over time in the presence of surfactant and So is the rate of change in absorbance over time in the absence of surfactant.

A VII. táblázatban található eredmények mutatják, hogy a vizsgált felületaktív anyagok csökkentik a ΒΑΡΝΑ tripszin katalizálta lebomlását.VII. The results in Table 1 show that the surfactants tested reduce the ΒΑΡΝΑ trypsin catalyzed degradation.

VII.táblázatVII.táblázat

A ΒΑΡΝΑ TRIPSZIN-KATALIZÁLT LEBOMLÁSÁNAK CSÖKKENÉSEREDUCING THE ΒΑΡΝΑ Trypsin-catalyzed degradation

FELÜLETAKTÍV ANYAGOKKALWITH SURFACTANTS

Kompozíció Sebességxl03 ( A/ min)Composition Speedxl03 (A / min)

Kiindulási sebesség felületaktív anyag/ kontroll)Initial Rate Surfactant / Control)

Gátlás%Inhibition%

Kontroll control 8,25 8.25 BRIJ35 0.2% BRIJ35 0.2% 7,01 7.01 BRIJ35 1% BRIJ35 1% 3,98 3.98 ★ ★★★★★★★★★★★ ★ ★★★★★★★★★★★ Kontroll control 8,25 8.25 Poli- poly- szorbát 80 sorbate 80 0,2% 0.2% 7,02 7.02 Poli- poly- szorbát 80 sorbate 80 1% 1% 4,38 4.38 ★ ★★★★★★★★★★★ ★ ★★★★★★★★★★★ ★ ★★★★★★★★★★★★★★★★★★ ★★★★★★★★★★★★★★★★★★★ Kontroll control 8,25 8.25 MYRJ 52S MYRJ 52S 0.2% 0.2% 7,44 7.44 MYRJ 52S 1% MYRJ 52S 1% 5,21 5.21 ★ ★★★★★★★★★★★ ★ ★★★★★★★★★★★ Kontroll control 8,25 8.25 IGEPAL IGEPAL CO-970 0.2% CO-970 0.2% 7,93 7.93

IGEPAL CO-970IGEPAL CO-970

0,850 0,850 15 15 0,482 .482 52 52 ★★★★★★★ ★★★★★★★ ★ ★★★★★★★★★★★★★★★★★★űr** ★★★★★★★★★★★★★★★★★★★ Space ** 0,850 0,850 15 15 0,530 0.530 47 47 ★ ★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★ ★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★ 0,901 0.901 10 10 0,631 0.631 37 37

0,960 40.960 4

1%1%

5,675.67

0,687 ★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★Λ**0.687 ★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★ ★★★★★★★★ Λ **

Kontroll 7,76Control 7.76

GelucireGelucire

44/14 0.2% 6,9844/14 0.2% 6.98

GelucireGelucire

44/14 1% 4,3844/14 1% 4.38

0,8980.898

0,5640.564

12. példaExample 12

A felületaktív anyagok által előidézett in vitro kimotripszin gátlás mértékét benzoiltirozin-etil-észterrel (BTEE) mérjük fel, mint olyan észterezett gyógyszer vagy előgyógyszer modelljével, amelynek hidrolízisét a kimotripszin katalizálja. 0.6 mikrogramm/ml kimotripszinből, 0.43 mikromólos BTEE-ből és 3 vagy 10 mg/ml felületaktív anyagból álló tesztoldatokat készítünk 0.034 M Tris HC1 pufferben, amely 0.43 M kalcium- kloridot tartalmaz és amelynek pH-ja 7.8. A vizsgálatokat szobahőmérsékleten végezzük.The degree of in vitro inhibition of surfactant-induced chymotrypsin is measured by benzoyl tyrosine ethyl ester (BTEE) as a model of esterified drug or prodrug which is hydrolyzed by chymotrypsin. Test solutions of 0.6 microgram / ml chymotrypsin, 0.43 micromolar BTEE and 3 or 10 mg / ml surfactant are prepared in 0.034 M Tris HCl buffer containing 0.43 M calcium chloride and pH 7.8. The tests were performed at room temperature.

A BTEE hidrolízis folyamatát Perkin-Elmer Lambda 3B UV/Vis spektrofotométerrel végezzük. A reakcióelegyet küvettába töltjük, amelyet a spektrofotométerbe helyezünk az abszorbancia közvetlen leolvasása céljából 256 nm-en, az idő függvényében.Hydrolysis of BTEE was performed on a Perkin-Elmer Lambda 3B UV / Vis spectrophotometer. The reaction mixture was filled into a cuvette which was placed in a spectrophotometer for direct reading of absorbance at 256 nm as a function of time.

A VIII.táblázat megmutatja a BTEE %-át, amely 10 perc után megmarad. Az eredmények azt mutatják, hogy a vizsgált felületaktív anyagok csökkentették a BTEE kimotripszin által katalizált hidrolízisét .Table VIII shows the percentage of BTEE remaining after 10 minutes. The results show that the surfactants tested reduced the chymotrypsin-catalyzed hydrolysis of BTEE.

8.táblázatTable 8

Kompozíció perc után megmaradóRemaining composition after one minute

BTEE %BTEE%

Kontroll control 19 19 Poliszorbát 80 0.3% Polysorbate 80 0.3% 23 23 Poliszorbát 80 1% Polysorbate 80 1% 36 36 Kontroll control 19 19 Myrj 52S 0.3% Myrj 52S 0.3% 26 26

Myrj 52S 1%Myrj 52S 1%

Claims

A pharmaceutical composition for oral use, comprising an enzymatically labile pharmaceutically active agent which is permeable through the intestinal wall and at least one nonionic surfactant capable of protecting said active agent from deactivation by enzymes.

The composition of claim 1, wherein the active agent is a peptide having a molecular weight of less than about 3000.

Composition according to claim 1 or 2, characterized in that said nonionic surfactant is ethoxylated alcohol, ethoxylated fatty acid, sorbitan derivative, ethoxylated alkylphenol or monoglyceride.

The composition of claim 3 wherein the nonionic surfactant is ethoxylated lauric acid, polyoxyethylene (40) stearate, polyoxyethylene (20) sorbitan monooleate, polyoxyethylene (23) lauryl ether, nonyl phenoxypoly (ethyleneoxy) ethanol. -30, a mixture of glycerol and polyethylene glycol 1500 esters of nonylphenoxypoly (ethyleneoxy) ethanol-50 or palm kernel oil, monooctanoin, monodecanoin or mono-olein.

5. Composition according to claims 1 to 5, wherein the composition is characterized by the following: a, a, a, a, a, a,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,, |

- 32 discs for containing oil.

The composition of claim 5, wherein said oil is a monoglyceride, diglyceride or triglyceride.

The composition of claim 6, wherein said triglyceride is a vegetable oil or caprylic / caprine triglyceride, said monoglyceride is monooctanoin or mono-decanoin, said diglyceride is glyceryl-1,2-dioctanoate.

8. A pharmaceutical composition for oral administration comprising (1) an enzymatically labile, pharmaceutically active agent which is permeable through the intestinal wall when administered with only one enteric permeation enhancer, (2) at least one nonionic surfactant capable of protecting said active agent from deactivation by enzymes and not a gut permeation enhancer; and (3) a gut permeability enhancer other than said nonionic surfactant.

9. The composition of claim 8, wherein the nonionic surfactant has an HLB of from about 14 to about 20.

Composition according to claim 9, characterized in that said nonionic surfactant is an ethoxylated alcohol, such a toxic fatty acid, a sorbitan derivative, an ethoxylated alkyl phenol, or a monoglyceride.

• «•« · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·

11. The composition of claim 10 wherein said nonionic surfactant is ethoxylated lauric acid, polyoxyethylene (40) stearate, polyoxyethylene (20) sorbitan monooleate, polyoxyethylene (23) lauryl ether, or nonylphenoxypoly (ethyleneoxy). a mixture of glyceryl and polyethylene glycol 1500 esters of nonylphenoxypoly (ethyleneoxy) ethanol 50 or nonyl phenoxypoly (ethyleneoxy) ethanol, monooctanoin, mono-decanoin or mono-olein).

The composition of claim 8, wherein the active agent is a polypeptide having a molecular weight of about 150 to about 150,000.

13. A method of inhibiting the degradation of an enzymatically labile pharmaceutically active agent which is permeable to the intestinal wall by means of enzymes comprising combining said active agent with a nonionic surfactant capable of protecting said active agent against deactivating enzymes.

14. The method of claim 13, wherein said active agent is a peptide having a molecular weight of less than about 3000.

The process of claim 13, wherein said nonionic surfactant is an ethoxylated alcohol, an ethoxylated fatty acid, a sorbitan derivative, an ethoxylated alkyl phenol or a monoglyceride.

The method of claim 13, characterized in that: 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 44 4 4

4 44444 44 * 4 ··· 4 ·· 4 44 4 * '- 34 that said nonionic surfactant is ethoxylated lauric acid, polyoxyethylene (40) stearate, polyoxyethylene (20) sorbitan monooleate, polyoxyethylene (23) lauryl ether, or a mixture of glyceryl and polyethylene glycol 1500 esters of nonylphenoxypoly (ethyleneoxy) ethanol-30, nonylphenoxypoly- (ethyleneoxy) ethanol-50, monooctanoine, mono-decanoin or monoolein.

17. A method of delivering an enzymatically labile pharmaceutically active agent orally to a host which is permeable through the intestinal wall, wherein said host comprises at least one nonionic surfactant capable of protecting said active agent from deactivation by said enzymes. give it.

18. A method of orally delivering an enzymatically labile pharmaceutically active agent which is permeable to the intestinal wall when used with only one enteric permeation enhancer, characterized in that said active agent comprises at least one nonionic surfactant capable of active agent, which is not a permeability enhancer, and an enteric permeability enhancer.

19. A pharmaceutical composition for oral use, characterized in that it comprises an enzymatically labile, pharmaceutically active agent which exerts its therapeutic activity in the stomach or intestine, and at least one nonionic surfactant capable of depressing said active agent. «Protect from tidal effect, stands.