HK40112914A

HK40112914A - 用於治疗与lpa受体活性相关的病症的化合物和组合物

Info

Publication number: HK40112914A
Application number: HK62024100888.2A
Authority: HK
Inventors: H·雷; Q·张; A·M·鲁文斯基
Original assignee: 罗特斯生物公司
Priority date: 2021-10-21
Filing date: 2022-10-21
Publication date: 2025-01-28

Description

用于治疗与LPA受体活性相关的病症的化合物和组合物

相关申请的交叉引用

本申请要求于2022年3月21日提交的国际专利申请号PCT/CN2022/082072；以及2021年10月21日提交的国际专利申请号PCT/CN2021/125409的权益，将其中的每一个专利申请通过引用以其整体并入本文。

技术领域

本公开文本提供了LPA拮抗剂以及包含本文公开的化合物的药物组合物。还提供了用于治疗LPA相关疾病、障碍和病症的方法。

背景技术

各种脂质介质(包括类二十烷酸和血小板活化因子(PAF))由来自细胞膜的磷脂酶的活性产生。溶血磷脂是一类膜源性生物活性脂质介质并且包括溶血磷脂酸(LPA)。LPA不是单分子实体，而是具有不同长度和饱和度的脂肪酸的内源性结构变体的集合。LPA影响包括细胞增殖、分化、存活、迁移、粘附、侵袭和形态发生的细胞功能。这些功能影响包括神经发生、血管生成、伤口愈合、免疫和肿瘤发生的许多生物过程。LPA具有作为生物效应分子的作用，并且具有广泛的生理作用(如但不限于对血压、血小板活化和平滑肌收缩的影响)，以及多种细胞效应，所述细胞效应包括细胞生长、细胞变圆、神经突回缩和肌动蛋白应力纤维形成和细胞迁移。LPA的效应主要是受体介导的。用LPA激活LPA受体(LPA₁、LPA₂、LPA₃、LPA₄、LPA₅、LPA₆)介导一系列下游信号传导级联。

发明内容

拮抗性LPA受体(如LPA₁受体)可以用于治疗多种障碍，包括纤维化(如肺纤维化、肝纤维化、肾纤维化、动脉纤维化和系统性硬化病)、以及因此由纤维化引起的疾病(例如，肺纤维化(例如，特发性肺纤维化(IPF))、肝纤维化(包括非酒精性脂肪性肝炎(NASH))、肾脏纤维化(如糖尿病性肾病)、系统性硬化病-硬皮病等)、COVID-19、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、神经炎症或多发性硬化。本申请描述了LPA拮抗剂以及包含本文公开的化合物的药物组合物。还提供了用于治疗LPA相关疾病、障碍和病症的方法。

在一个实施方案中，提供了表1的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。在一个实施方案中，提供了表2的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体或立体异构体的混合物。

本文还提供了药物组合物，所述药物组合物包含表1的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物以及药学上可接受的赋形剂。

本文还提供了用于治疗或预防有需要的受试者的LPA相关疾病的方法，所述方法包括向受试者施用治疗有效量的本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或其药物组合物。在一些实施方案中，所述LPA相关疾病是LPA₁相关疾病，如但不限于纤维化、移植排斥、癌症、骨质疏松症或炎性障碍。

在一些实施方案中，所述LPA相关疾病是纤维化、移植排斥、癌症、骨质疏松症或炎性障碍。在这些实施方案中的某些中，所述纤维化是肺、肝、肾、心脏、皮肤、眼或胰腺纤维化。在某些实施方案中，所述癌症是膀胱、血液、骨骼、脑、乳腺、中枢神经系统、子宫颈、结肠、子宫内膜、食管、胆囊、生殖器、泌尿生殖道、头、肾、喉、肝、肺、肌肉组织、颈、口腔粘膜或鼻粘膜、卵巢、胰腺、前列腺、皮肤、脾、小肠、大肠、胃、睾丸或甲状腺的癌症。

在一些实施方案中，所述LPA相关疾病是特发性肺纤维化(IPF)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、慢性肾脏病、糖尿病肾病、系统性硬化病、COVID-19、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、神经炎症或多发性硬化。

本文还提供了用于治疗或预防有需要的受试者的纤维化的方法，所述方法包括向受试者施用治疗有效量的本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或其药学上可接受盐或溶剂化物或其药物组合物。

在一些实施方案中，所述纤维化是特发性肺纤维化(IPF)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、慢性肾脏病、糖尿病肾病和系统性硬化病。例如，所述纤维化可以是IPF。

具体实施方式

定义

以下描述阐述了本发明技术的示例性实施方案。然而，应认识到，这样的描述并不旨在作为对本公开文本的范围的限制，而是旨在作为示例性实施方案的描述而提供。

如在本说明书中所用，以下词语、短语和符号通常旨在具有如下文所阐述的含义，但使用它们的上下文另有说明除外。

如本文所用，术语“化合物”意在包括所描绘结构的所有立体异构体、几何异构体、互变异构体和同位素。除非另外说明，否则本文中通过名称或结构鉴别为一种特定互变异构体形式的化合物旨在包括其他互变异构体形式。

化合物中的一些以互变异构体存在。互变异构体彼此处于平衡。例如，含有酰胺的化合物可以与亚氨酸互变异构体平衡地存在。无论显示哪种互变异构体，并且无论互变异构体之间的平衡性质如何，本领域普通技术人员都将化合物理解为包括酰胺和亚氨酸互变异构体两者。因此，含有酰胺的化合物应理解为包括它们的亚氨酸互变异构体。同样，含有亚氨酸的化合物应理解为包括它们的酰胺互变异构体。

本文得到的任何化合物或结构也旨在表示化合物的未标记的形式以及同位素标记的形式。这些形式的化合物也可以称为“同位素富集的类似物”。同位素标记的化合物具有由本文描绘的结构，除了一个或多个原子被具有选定的原子质量或质量数的原子替代。可以并入所公开的化合物的同位素的例子分别包括氢、碳、氮、氧、磷、氟、氯以及碘的同位素，如²H、³H、¹¹C、¹³C、¹⁴C、¹³N、¹⁵N、¹⁵O、¹⁷O、¹⁸O、³¹P、³²P、³⁵S、¹⁸F、³⁶Cl、¹²³I以及¹²⁵I。本公开文本的各种同位素标记的化合物，例如掺入放射性同位素(如³H和¹⁴C)的化合物。此类同位素标记的化合物可以用于代谢研究、反应动力学研究、检测或成像技术(如正电子发射断层扫描术(PET)或单光子发射计算机断层扫描术(SPECT)，包括药物或基底组织分布测定)中，或者用于患者的放射性治疗中。

术语“同位素富集的类似物”包括本文所述的化合物的“氘代类似物”，其中一个或多个氢被氘替代(如碳原子上的氢)。这些化合物展现出增加的代谢抗性，并且因此当施用于哺乳动物(特别是人时)可用于增加任何化合物的半衰期。参见例如，Foster,“DeuteriumIsotope Effects in Studies of Drug Metabolism,”Trends Pharmacol.Sci.5(12):524-527(1984)。此类化合物通过本领域熟知的手段来合成，例如通过采用一个或多个氢已经被氘替代的起始材料来合成。

本公开文本的氘标记或取代的治疗化合物可以具有改善的DMPK(药物代谢和药代动力学)特性，涉及分布、代谢和排泄(ADME)。用较重的同位素如氘取代因为代谢稳定性更高而可以提供某些治疗优势，例如体内半衰期延长、剂量需求减少和/或治疗指数改善。¹⁸F、³H、¹¹C标记的化合物可以用于PET或SPECT或其他成像研究。本公开文本的同位素标记的化合物及其前药通常可以通过用容易获得的同位素标记的试剂取代非同位素标记的试剂，通过实施在方案中或在下述的实施例和制备中公开的程序来制备。应当理解，在此上下文中的氘被认为是本文所述的化合物中的取代基。

这种较重同位素(特别是氘)的浓度可以通过同位素富集因子来定义。在本公开文本的化合物中，未特别指定为特定同位素的任何原子意在代表所述原子的任何稳定同位素。除非另有说明，否则当位置被具体指定为“H”或“氢”时，所述位置应理解为具有其天然丰度同位素组成的氢。因此，在本公开文本的化合物中，被具体指定为氘(D)的任何原子意在代表氘。

在许多情况下，由于存在氨基和/或羧基或与其类似的基团，本公开文本的化合物能够形成酸性和/或碱性盐。

还提供了本文所述化合物的药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、互变异构形式、多晶型物和前药。“药学上可接受的”或“生理学上可接受的”是指可用于制备适合于兽医或人药物用途的药物组合物的化合物、盐、组合物、剂型和其他材料。

术语给定化合物的“药学上可接受的盐”是指保留给定化合物的生物有效性和特性并且在生物学上或其他方面不是不合需要的盐。“药学上可接受的盐”或“生理学上可接受的盐”包括例如与无机酸形成的盐和与有机酸形成的盐。另外，如果作为酸加成盐获得本文描述的化合物，则可以通过将酸式盐的溶液碱化来获得游离碱。相反，如果产物是游离碱，则可以按照用于从碱化合物制备酸加成盐的常规程序，通过将游离碱溶解在合适的有机溶剂中并且用酸处理所述溶液来产生加成盐(特别是药学上可接受的加成盐)。本领域技术人员将认识到可用于制备无毒的药学上可接受的加成盐的各种合成方法。药学上可接受的酸加成盐可以由无机酸和有机酸制备。衍生自无机酸的盐包括例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等。衍生自有机酸的盐包括例如乙酸、丙酸、葡萄糖酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等。同样，药学上可接受的碱加成盐可以由无机碱和有机碱制备。仅举例来说，衍生自无机碱的盐包括钠盐、钾盐、锂盐、铝盐、铵盐、钙盐和镁盐。衍生自有机碱的盐包括但不限于NH₃、或伯胺、仲胺、叔胺的盐，如衍生自含N杂环、含N杂芳基或衍生自式N(R^N)₃的胺(例如，HN⁺(R^N)₃或(烷基)N⁺(R^N)₃)的盐，其中每个R^N独立地是氢、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，其中各自任选地被取代，如被一个或多个(例如，1-5个或1-3个)取代基(例如，卤代基、氰基、羟基、氨基、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、烷氧基或卤代烷氧基)取代。仅举例来说，合适的胺的具体例子包括异丙胺、三甲基胺、二乙基胺、三(异丙基)胺、三(正丙基)胺、乙醇胺、2-二甲基氨基乙醇、哌嗪、哌啶、吗啉、N-乙基哌啶等。

术语“取代的”意指在指定原子或基团上的任一个或多个氢原子被一个或多个不是氢的取代基替代，条件是不超过指定原子的正常化合价。所述一个或多个取代基包括但不限于烷基、烯基、炔基、烷氧基、酰基、氨基、酰胺基、脒基、芳基、叠氮基、氨基甲酰基、羧基、羧基酯、氰基、胍基、卤代基、卤代烷基、卤代烷氧基、杂烷基、杂芳基、杂环基、羟基、肼基、亚氨基、氧代基、硝基、烷基亚磺酰基、磺酸、烷基磺酰基、硫氰酸酯、硫醇、硫酮或其组合。

通过定义具有无限附加的其他取代基的取代基而得到的聚合物或类似的不定结构(例如，具有取代的烷基的取代的芳基，所述取代的烷基自身被取代的芳基取代，所述取代的芳基进一步被取代的杂烷基取代，等)并不旨在包括在本文中。除非另有说明，否则本文所述的化合物中的最大连续取代数为三。例如，被两个其他取代的芳基取代的芳基的连续取代限于((取代的芳基)取代的芳基)取代的芳基。类似地，以上定义不旨在包括不允许的取代模式(例如，被5个氟或具有两个相邻氧环原子的杂芳基取代的甲基)。此类不允许的取代模式是技术人员熟知的。当用于修饰化学基团时，术语“取代的”可以描述本文定义的其他化学基团。除非另有说明，否则当基团被描述为任选取代的时，所述基团的任何取代基本身是未取代的。例如，在一些实施方案中，术语“取代的烷基”是指具有一个或多个取代基的烷基，所述一个或多个取代基包括羟基、卤代基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基。在其他实施方案中，所述一个或多个取代基可以进一步被卤代基、烷基、卤代烷基、羟基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基取代，其中每一个都是取代的。在其他实施方案中，取代基可以进一步被卤代基、烷基、卤代烷基、烷氧基、羟基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基取代，其中每一个都是未取代的。

术语“任选的”或“任选地”意指随后描述的事件或情况可以发生或者可以不发生，并且所述描述包括发生所述事件或情况的情形和不发生所述事件或情况的情形。此外，术语“任选地经取代”是指指定原子或基团上的任何一个或多个氢原子可以或可以不被除氢之外的部分替代。

不位于两个字母或符号之间的划线(“-”)用于指示取代基的附接点。例如，-C(O)NH₂是通过碳原子附接。化学基团前端或末端的划线是为了方便起见；化学基团可以用或不用一个或多个划线描绘，而不丧失它们的普通含义。在结构中通过线绘制的波浪线指示基团的附接点。除非在化学或结构上要求，否则书写或命名化学基团的顺序不指示或暗示方向性。

前缀“C_u-v”指示以下基团具有u至v个碳原子。例如，“C_1-6烷基”指示烷基具有1至6个碳原子。

本文提及“约”某一值或参数时包括(并描述)涉及该值或参数本身的实施方案。在某些实施方案中，术语“约”包括所指示的量±10％。在其他实施方案中，术语“约”包括所指示的量±5％。在某些其他实施方案中，术语“约”包括所指示的量±1％。此外，关于术语“约X”包括对“X”的描述。此外，除非上下文另有明确规定，否则单数形式“一个/一种”和“所述”包括复数指示物。因此，例如，提及“所述化合物”包括多种此类化合物，并且提及“所述测定”包括提及本领域技术人员已知的一种或多种测定及其等效物。

“烷基”是指未支化或支化的饱和烃链。如本文所用，烷基具有1至20个碳原子(即，C_1-20烷基)、1至12个碳原子(即，C_1-12烷基)、1至8个碳原子(即，C_1-8烷基)、1至6个碳原子(即，C_1-6烷基)或1至4个碳原子(即，C_1-4烷基)。烷基的例子包括例如甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、戊基、2-戊基、异戊基、新戊基、己基、2-己基、3-己基和3-甲基戊基。当具有特定碳数的烷基残基通过化学名称来命名或通过分子式来标识时，具有该碳数的所有位置异构体都可以涵盖在内；因此，例如，“丁基”包括正丁基(即，-(CH₂)₃CH₃)、仲丁基(即，-CH(CH₃)CH₂CH₃)、异丁基(即，-CH₂CH(CH₃)₂)和叔丁基(即，-C(CH₃)₃)，并且“丙基”包括正丙基(即，-(CH₂)₂CH₃)和异丙基(即，-CH(CH₃)₂)。

“烯基”是指这样的烷基，其含有至少一个(例如，1-3个或1个)碳-碳双键，并且具有从2至20个碳原子(即，C_2-20烯基)、2至12个碳原子(即，C_2-12烯基)、2至8个碳原子(即，C_2-8烯基)、2至6个碳原子(即，C_2-6烯基)或2至4个碳原子(即，C_2-4烯基)。烯基的例子包括例如，乙烯基、丙烯基、丁二烯基(包括1,2-丁二烯基和1,3-丁二烯基)。

“炔基”是指这样的烷基，其含有至少一个(例如，1-3个或1个)碳-碳三键，并且具有从2至20个碳原子(即，C_2-20炔基)、2至12个碳原子(即，C_2-12炔基)、2至8个碳原子(即，C_2-8炔基)、2至6个碳原子(即，C_2-6炔基)或2至4个碳原子(即，C_2-4炔基)。术语“炔基”还包括具有一个三键和一个双键的那些基团。

可以使用某些常用的可替代的化学名称。例如，二价基团如二价“烷基”基团、二价“芳基”基团等也可以分别称为“亚烷基(alkylene)”基团(或“alkylenyl”基团)、“亚芳基(arylene)”基团(或“arylenyl”基团)。

“烷氧基”是指基团“烷基-O-”。烷氧基的例子包括例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、正戊氧基、正己氧基和1,2-二甲基丁氧基。

“卤代烷基”是指如上定义的无支链烷基或支链烷基，其中一个或多个(例如，1至6个或1至3个)氢原子被卤素替代。例如，在残基被超过一个卤素取代的情况下，它可以通过使用对应于所附接的卤素部分的数量的前缀来提及。二卤代烷基和三卤代烷基是指被两个(“二”)或三个(“三”)卤代基取代的烷基，所述卤代基可以是但不一定是相同的卤素。卤代烷基的例子包括例如三氟甲基、二氟甲基、氟甲基、三氯甲基、2,2,2-三氟乙基、1,2-二氟乙基、3-溴-2-氟丙基、1,2-二溴乙基等。

“卤代烷氧基”是指如上定义的烷氧基，其中一个或多个(例如，1至6个或1至3个)氢原子被卤素替代。

“羟基烷基”是指如上文所定义的烷基，其中一个或多个(例如，1至6个或1至3个)氢原子被羟基替代。

“烷硫基”是指基团“烷基-S-”。

“酰基”是指基团-C(O)R，其中R是氢、烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂烷基或杂芳基；如本文所定义，其中每一个可以任选地被取代。酰基的例子包括甲酰基、乙酰基、环己基羰基、环己基甲基-羰基和苯甲酰基。

“酰胺基”是指“C-酰胺基”基团(其是指基团-C(O)NR^yR^z)和“N-酰胺基”基团(其是指基团-NR^yC(O)R^z)，其中R^y和R^z独立地是氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂烷基或杂芳基；如本文所定义，其中每一个可以任选地被取代，或R^y和R^z一起形成环烷基或杂环基；如本文所定义，其中每一个可以任选地被取代。

“氨基”是指基团-NR^yR^z，其中R^y和R^z独立地是氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂烷基或杂芳基；如本文所定义，其中每一个可以任选地被取代。

“脒基”是指-C(NR^y)(NR^z ₂)，其中R^y和R^z独立地是氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂烷基或杂芳基；如本文所定义，其中每一个可以任选地被取代。

“芳基”是指具有单环(例如，单环)或多环(例如，双环或三环)的芳香族碳环基团，包括稠合体系。如本文所用，芳基具有6至20个环碳原子(即，C_6-20芳基)、6至12个碳环原子(即，C_6-12芳基)、或6至10个碳环原子(即，C_6-10芳基)。芳基的例子包括例如苯基、萘基、芴基和蒽基。然而，芳基不以任何方式涵盖下文所定义的杂芳基或与下文所定义的杂芳基重叠。如果一个或多个芳基与杂芳基稠合，则所得的环体系是杂芳基，而不管附接点如何。如果一个或多个芳基与杂环基稠合，则所得的环体系是杂环基，而不管附接点如何。如果一个或多个芳基与环烷基稠合，则所得的环体系是环烷基，而不管附接点如何。

“氨基甲酰基”是指“O-氨基甲酰基”基团，其是指-O-C(O)NR^yR^z基团；和“N-氨基甲酰基”基团，其是指-NR^yC(O)OR^z基团，其中R^y和R^z独立地是氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂烷基或杂芳基；如本文所定义，其中每一个可以任选地被取代。

“羧基酯”或“酯”是指-OC(O)R^x和-C(O)OR^x二者，其中R^x是烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂烷基或杂芳基；如本文所定义，其中每一个可以任选地被取代。

“环烷基”是指具有单个环或多个环的饱和或部分不饱和的环状烷基，包括稠合、桥接和螺环体系。术语“环烷基”包括环烯基(即，具有至少一个双键的环状基团)和具有至少一个sp³碳原子的碳环稠环体系(即，至少一个非芳族环)。如本文所用，环烷基具有3至20个环碳原子(即，C_3-20环烷基)、3至14个环碳原子(即，C_3-14环烷基)、3至12个环碳原子(即，C_3-12环烷基)、3至10个环碳原子(即，C_3-10环烷基)、3至8个环碳原子(即C_3-8环烷基)或3至6个环碳原子(即，C_3-6环烷基)。单环基团包括例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。多环基团包括例如，双环[2.2.1]庚基、双环[2.2.2]辛基、金刚烷基、降冰片基、十氢萘基、7,7-二甲基-双环[2.2.1]庚基等。此外，术语环烷基旨在涵盖可以与芳基环稠合的任何非芳族环，而不管与分子的其余部分的附接情况如何。此外，当在相同碳原子上具有两个取代位置时，环烷基还包括“螺环烷基”，例如螺[2.5]辛基、螺[4.5]癸基、或螺[5.5]十一烷基。

“亚氨基”是指基团-C(NR^y)R^z，其中R^y和R^z各自独立地是氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂烷基或杂芳基；如本文所定义，其中每一个可以任选地被取代。

“卤素”或“卤代基”是指占据周期表VIIA族的原子，如氟、氯、溴或碘。

“杂烷基”是指烷基，其中一个或多个碳原子(和任何相关的氢原子)各自独立地被相同或不同的杂原子基团替代。术语“杂烷基”包括具有碳和杂原子的无支链的饱和链或支链饱和链。举例来说，1、2或3个碳原子可以独立地被相同或不同的杂原子基团替代。杂原子基团包括但不限于-NR-、-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)₂-等，其中R是H、烷基、芳基、环烷基、杂烷基、杂芳基或杂环基，其中每一个可以任选地被取代。杂烷基的例子包括-OCH₃、-CH₂OCH₃、-SCH₃、-CH₂SCH₃、-NRCH₃和-CH₂NRCH₃，其中R是氢、烷基、芳基、芳基烷基、杂烷基或杂芳基，其中每一个可以任选地被取代。如本文所用，杂烷基包括1至10个碳原子、1至8个碳原子或1至4个碳原子；以及1至3个杂原子、1至2个杂原子或1个杂原子。

“杂芳基”是指具有单环或多个稠环的芳族基团，其中一个或多个环杂原子独立地选自氮、氧和硫。如本文所用，杂芳基包括1至20个环碳原子(即，C_1-20杂芳基)、3至12个环碳原子(即，C_3-12杂芳基)或3至8个碳环原子(即，C_3-8杂芳基)，以及1至5个环杂原子、1至4个环杂原子、1至3个环杂原子、1至2个环杂原子或1个环杂原子，所述环杂原子独立地选自氮、氧和硫。在某些情况下，杂芳基包括5-10元环体系、5-7元环体系或5-6元环体系，各自独立地具有1至4个环杂原子、1至3个环杂原子、1至2个环杂原子或1个环杂原子，所述环杂原子独立地选自氮、氧和硫。杂芳基的例子包括例如，吖啶基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并萘并呋喃基、苯并噁唑基、苯并噁唑基、苯并噻吩基(benzothienyl/benzothiophenyl)、苯并三唑基、苯并[4,6]咪唑并[1,2-a]吡啶基、咔唑基、噌啉基、二苯并呋喃基、二苯并噻吩基、呋喃基、异噻唑基、咪唑基、吲唑基、吲哚基、吲唑基、异吲哚基、异喹啉基、异噁唑基、萘啶基、噁二唑基、噁唑基、1-氧吡啶基、1-氧化嘧啶基、1-氧化吡嗪基、1-氧化哒嗪基、吩嗪基、酞嗪基、喋啶基、嘌呤基、吡咯基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、喹啉基、奎宁环基、异喹啉基、噻唑基、噻二唑基、三唑基、四唑基和三嗪基。稠合杂芳基环的例子包括但不限于苯并[d]噻唑基、喹啉基、异喹啉基、苯并[b]苯硫基、吲唑基、苯并[d]咪唑基、吡唑并[1,5-a]吡啶基和咪唑并[1,5-a]吡啶基，其中杂芳基可以经由稠合体系的任一环结合。具有含有至少一个杂原子的单个或多个稠环的任何芳族环被认为是杂芳基，而不管与分子其余部分的附接情况(即，通过任何一个稠环)如何。杂芳基不涵盖如上定义的芳基或与如上定义的芳基重叠。

“杂环基”是指饱和或部分不饱和的环状烷基，其中一个或多个环杂原子独立地选自氮、氧和硫。术语“杂环基”包括杂环烯基(即，具有至少一个双键的杂环基)、桥接的杂环基、稠合的杂环基基团和螺杂环基。杂环基可以是单环或多环，其中多环可以是稠合的、桥接的或螺环，并且可以包括一个或多个(例如，1至3个)氧代(＝O)或N-氧化物(-O-)部分。含有至少一个杂原子的任何非芳族环被认为是杂环基，而不管附接情况(即，可以通过碳原子或杂原子结合)如何。此外，术语杂环基旨在涵盖含有至少一个杂原子的任何非芳族环，所述环可以与环烷基、芳基或杂芳基环稠合，而不管与分子其余部分的附接情况如何。如本文所用，杂环基具有2至20个环碳原子(即，C_2-20杂环基)、2至12个环碳原子(即，C_2-12杂环基)、2至10个环碳原子(即，C_2-10杂环基)、2至8个环碳原子(即，C_2-8杂环基)、3至12个环碳原子(即，C_3-12杂环基)、3至8个环碳原子(即，C_3-8杂环基)、或3至6个环碳原子(即，C_3-6杂环基)；具有1至5个环杂原子、1至4个环杂原子、1至3个环杂原子、1至2个环杂原子、或1个环杂原子，所述环杂原子独立地选自氮、硫或氧。杂环基的例子包括例如氮杂环丁烷基、氮杂环庚三烯基、苯并二氧杂环戊烯基、苯并[b][1,4]二氧杂环庚三烯基、1,4-苯并二噁烷基、苯并吡喃基、苯并二噁英基、苯并吡喃酮基、苯并呋喃酮基、二氧戊环基、二氢吡喃基、氢吡喃基、噻吩基[1,3]二噻烷基、十氢异喹啉基、呋喃酮基、咪唑啉基、咪唑烷基、吲哚啉基、吲哚嗪基、异吲哚啉基、异噻唑烷基、异噁唑烷基、吗啉基、八氢吲哚基、八氢异吲哚基、2-氧代哌嗪基、2-氧代哌啶基、2-氧代吡咯烷基、噁唑烷基、环氧乙烷基、氧杂环丁烷基、吩噻嗪基、吩噁嗪基、哌啶基、哌嗪基、4-哌啶酮基、吡咯烷基、吡唑烷基、奎宁环基、噻唑烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、三噻烷基、四氢喹啉基、噻吩基(thiophenyl)(即，噻吩基(thienyl))、硫代吗啉基、硫杂吗啉基、1-氧代-硫代吗啉基和1,1-二氧代-硫代吗啉基。当在相同碳原子上有两个取代位置时，术语“杂环基”还包括“螺杂环基”。螺杂环基环的例子包括例如双环的环体系和三环的环体系，如氧杂双环[2.2.2]辛烷基、2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬基、2-氧杂-6-氮杂螺[3.4]辛基和6-氧杂-1-氮杂螺[3.3]庚基。稠合杂环基环的例子包括但不限于1,2,3,4-四氢异喹啉基、4,5,6,7-四氢噻吩并[2,3-c]吡啶基、吲哚啉基和异吲哚啉基，其中杂环基可以经由稠合体系的任一环结合。

“磺酰基”是指基团-S(O)₂R^y，其中R^y是氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂烷基或杂芳基；如本文所定义，其中每一个可以任选地被取代。磺酰基的例子是甲基磺酰基、乙基磺酰基、苯基磺酰基和甲苯磺酰基。

“烷基磺酰基”是指基团-S(O)₂R，其中R是烷基。

“烷基亚磺酰基”是指基团-S(O)R，其中R是烷基。

如本文所用，“药学上可接受的载体”或“药学上可接受的赋形剂”包括任何和所有溶剂、分散介质、包衣、抗细菌剂和抗真菌剂、等渗和吸收延迟剂等。此类介质和药剂用于药物活性物质的用途在本领域是熟知的。除非任何常规介质或药剂与活性成分不相容，否则考虑其在治疗组合物中的用途。还可以将补充性活性成分并入组合物中。

“溶剂化物”是通过溶剂与化合物的相互作用形成的。还提供了本文所述化合物的盐的溶剂化物。还提供了本文所述化合物的水合物。

如本文所用的术语“LPA相关疾病”意指包括但不限于这样的疾病、障碍或病症，其中通过LPA激活至少一种LPA受体促成疾病、障碍或病症的症候或进展。这些疾病、障碍或病症可以由遗传、医源性、免疫、感染、代谢、肿瘤、毒性、外科和/或创伤病因中的一种或多种引起。因此，抑制一种或多种溶血磷脂酸(LPA)受体(例如，LPA₁、LPA₂、LPA₃、LPA₄、LPA₅或LPA₆受体)信号传导可以改变疾病、障碍或病症的病状和/或症状和/或进展。在一些实施方案中，LPA相关疾病是LPA1相关疾病，其中调制LPA1受体信号传导可以改变疾病、障碍或病症的病理和/或症状和/或进展。

如本文所用，术语“纤维化”或“纤维化障碍”是指与细胞和/或纤连蛋白和/或胶原蛋白的异常积累和/或成纤维细胞募集增加相关的病症，包括但不限于个体器官或组织(如心脏、肾、肝、关节、肺、胸膜组织、腹膜组织、皮肤、角膜、视网膜、肌肉骨骼和消化道)的纤维化。

如本文所用，术语“药学上可接受的”指示化合物或其盐或组合物在化学上和/或毒理学上与构成配制品的其他成分和/或用其治疗的受试者相容。

术语“施用(administration)”或“施用(administering)”是指将一定剂量的化合物或药物组合物给与脊椎动物或无脊椎动物(包括哺乳动物、鸟、鱼或两栖动物)的方法。施用方法可以根据各种因素而变，例如药物组合物的组分、疾病的部位以及疾病的严重程度。

如本文所用，术语“有效量”或“有效剂量”或“药学上有效量”或“治疗有效量”是指所施用的足够量的化学实体(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)，所述量将在一定程度上缓解所治疗的疾病或病症的一或多种症状，并且可以包括治愈疾病。“治愈”意指活动性疾病的症状被消除。结果包括疾病的体征、症状或原因的减少和/或减轻或生物系统的任何其他希望的改变。例如，针对治疗用途的“有效量”是提供临床上显著的疾病症状降低所需的包含如本文公开的化合物的组合物的量。在任何单独情况下的适当“有效”量是使用任何合适技术确定，如剂量递增研究。在一些实施方案中，如本文所提供的化合物的“治疗有效量”是指作为单药疗法或组合疗法有效的化合物的量。

术语“赋形剂”或“药学上可接受的赋形剂”意指药学上可接受的材料、组合物或媒介物，如液体或固体填充剂、稀释剂、载体、溶剂或包囊材料。在一些实施方案中，各组分在与药物配制品的其他成分相容并且适合于与人和动物的组织或器官接触而无过度毒性、刺激、过敏反应、免疫原性或其他问题或并发症，与合理的益处/风险比相称的意义上是“药学上可接受的”。参见例如，Remington:The Science and Practice of Pharmacy,第21版；Lippincott Williams&Wilkins:Philadelphia,PA,2005；Handbook of PharmaceuticalExcipients,第6版；Rowe等人编辑；The harmaceutical Press and the AmericanPharmaceutical Association:2009；Handbook of Pharmaceutical Additives,第3版；Ash和Ash编辑；Gower Publishing Company:2007；Pharmaceutical Preformulation andFormulation,第2版；Gibson编辑；CRC Press LLC:Boca Raton,FL,2009。

术语“药物组合物”是指本文公开的化合物，或本文提供的其药学上可接受的盐或溶剂化物与其他化学成分(在本文中统称为“赋形剂”)(如载体、稳定剂、稀释剂、分散剂、助悬剂和/或增稠剂)的混合物。药物组合物有助于将化合物施用于生物体。本领域中存在多种施用化合物的技术，包括但不限于直肠、口服、静脉内、气雾剂、肠胃外、眼部、肺部和外用施用。

在治疗疾病、障碍或病症的上下文中，术语“治疗(treat、treating和treatment)”意在包括缓解或根除障碍、疾病或病症或与所述障碍、疾病或病症相关的一种或多种症状；或减缓疾病、障碍或病症或其一种或多种症状的进展、扩散或恶化。

如本文所用，术语“预防”是完全或部分预防如本文所述的疾病或病症或其症状的发作、复发或扩散。

如本文所用，术语“受试者”、“患者”或“个体”可互换使用并且是指任何动物，包括哺乳动物，如小鼠、大鼠、其他啮齿动物、兔、犬、猫、猪、牛、绵羊、马、灵长类动物和人。在一些实施方案中，术语是指希望或需要诊断、预后或疗法的受试者，特别是指哺乳动物受试者。在一些实施方案中，受试者是人。在一些实施方案中，受试者已经历和/或展现出待治疗和/或预防的疾病、障碍或病症的至少一种症状。

术语“治疗方案”和“给药方案”可互换地使用以指代组合中每种治疗剂的施用剂量和时间。

如本文所用，术语“药物组合”是指由多于一种活性成分的混合或组合产生的药物治疗，并且包括活性成分的固定组合和非固定组合两者。

如本文所用，术语“组合疗法”是指两种不同治疗活性剂(即，组合的组分或组合配偶物)的给药方案，其中治疗活性剂以医护人员规定的方式或根据如本文定义的管理机构一起或分开施用。

如本文所用，术语“调节(modulate、modulating或modulation)”是指调控或调整(例如，增加或减少)，并且可以包括例如激动作用、部分激动作用或拮抗作用。

化合物

本文提供了作为LPA拮抗剂的化合物。在一些实施方案中，提供了选自表1的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物：

表1

本文提供的化合物涵盖所述化合物的立体化学形式(例如，旋光异构体，如对映异构体、非对映异构体)及其混合物，例如，对映异构体和/或非对映异构体的混合物，包括外消旋混合物以及单独对映异构体和/或非对映异构体的均等混合物或非均等混合物。本领域已知的方法可以用于确定绝对和/或相对构型，包括但不限于色谱法、光谱学、X射线晶体学等。本公开文本中考虑了所有立体化学形式。除非另有指示，否则当公开的化合物以结构命名或描述而没有指定立体化学并且具有一个或多个手性中心时，应理解为表示所述化合物的所有可能立体异构体，如表2中所描述的那些。在一些实施方案中，提供了选自表2的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体或立体异构体的混合物。

表2

本文公开的化合物包括其药学上可接受的盐。另外，本文公开的化合物还包括此类化合物的其他盐，所述盐不一定是药学上可接受的盐，并且所述盐可以用作制备和/或纯化本文公开的化合物和/或分离所述化合物的异构体或对映异构体的中间体。本文公开的化合物的药学上可接受的盐的非限制性例子包括三氟乙酸盐。

进一步应理解，本文公开的化合物或其盐可以以溶剂化物的形式分离，并且相应地，任何此类溶剂化物包括在本公开文本的范围内。例如，本文公开的化合物及其盐可以以非溶剂化形式以及与药学上可接受的溶剂(如水、乙醇等)形成的溶剂化形式存在。

治疗方法与用途

本文所述的方法可以在体内或离体应用于细胞群。“体内”意指在活个体内，如在动物体或人体内。在此背景中，本文所述的方法可以在个体中治疗性地使用。“离体”意指在活个体外。离体细胞群的例子包括体外细胞培养物和生物样品(包括从个体获得的流体或组织样品)。可以通过本领域熟知的方法获得此类样品。示例性生物流体样品包括血液、脑脊液、尿液和唾液。在此背景中，本文描述的化合物和组合物可用于多种目的，包括治疗和实验目的。例如，可以离体使用本文所述的化合物和组合物，以确定针对给定的适应证、细胞类型、个体和其他参数而言的本公开文本的化合物的施用的最佳时间表和/或配量。从这种用途中收集的信息可以用于实验目的，或者在临床中用于设定体内治疗方案。本文所述的化合物和组合物可适用的其他离体用途描述于下文或对本领域技术人员而言将变得清楚。可以进一步表征选定的化合物以检查在人类受试者或非人类受试者中的安全性或耐受剂量。可以使用本领域技术人员熟知的方法检查此类特性。

如本文所提供的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或此类化合物的药物组合物可用作一种或多种LPA受体的抑制剂。如本文中进一步描述的，拮抗LPA受体的化合物可以用于预防和/或治疗疾病，如包括以下的各种类疾病：例如纤维化(例如，肾脏纤维化、肺纤维化、肝纤维化、动脉纤维化、系统性硬化病)、泌尿系统疾病、癌相关疾病、增殖性疾病、炎症/免疫系统疾病、由分泌功能障碍引起的疾病、脑相关疾病和慢性疾病。

在一些实施方案中，本公开文本提供了用于治疗患有疾病、障碍或病症的受试者(例如，人)的方法，在所述疾病、障碍或病症中一种或多种LPA受体(即，LPA相关疾病)的抑制有益于治疗所述疾病、障碍或病症的根本病理和/或症状和/或进展。在一些实施方案中，本文所提供的方法可以包括或进一步包括治疗与本文所提供的任一种或多种病症相关的一种或多种病症、共病或后遗症。

本文提供了一种用于治疗LPA相关疾病的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用有效量的本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所公开的药物组合物。

在一些实施方案中，LPA相关疾病包括但不限于治疗器官(例如，肝、肾、肺、心脏和皮肤)纤维化、肝疾病(急性肝炎、慢性肝炎、肝纤维化、肝硬化、门静脉高压、再生失效(regenerative failure)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、肝功能减退、肝血流障碍等)、细胞增殖性疾病(例如，癌症，包括实体瘤、实体瘤转移、血管纤维瘤、骨髓瘤、多发性骨髓瘤、卡波西肉瘤(Kaposi's sarcoma)、白血病和慢性淋巴细胞白血病(CLL)和癌细胞的侵袭性转移)、炎性疾病(例如，银屑病、肾病和肺炎)、胃肠道疾病(例如，肠易激综合征(TBS)、炎性肠病(IBD)和胰腺分泌异常)、肾脏疾病、泌尿道相关疾病(例如，良性前列腺增生症或神经性膀胱疾病相关症状)、脊髓肿瘤、腰椎间盘突出症(hernia of intervertebral disk)、椎管狭窄症、源自糖尿病的症状、下泌尿道疾病(例如，下尿路梗阻)、下泌尿道的炎性疾病、排尿困难(dysuna)和尿频)、胰腺疾病、异常血管生成相关疾病(例如，动脉栓塞)、硬皮病、脑相关疾病(例如，脑梗死和脑出血)、神经性疼痛、外周神经病变、眼病(例如，年龄相关性黄斑病变(AMD)、糖尿病性视网膜病变、增生性玻璃体视网膜病变(PVR)、瘢痕性类天疱疮、和青光眼滤过术后瘢痕化(glaucoma filtration surgery scarring))。

在一些实施方案中，本文提供了治疗或预防纤维化的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所公开的药物组合物。例如，方法可以包括治疗肾脏纤维化、肺纤维化、肝纤维化、动脉纤维化或系统性硬化病。在一些实施方案中，本文提供了治疗肺纤维化(例如，特发性肺纤维化(IPF))的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所提供的药物组合物。

在一些实施方案中，本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所提供的药物组合物用于治疗或预防受试者的纤维化。例如，本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所提供的药物组合物可以用于治疗受试者的器官或组织的纤维化。在一些实施方案中，本文提供了一种用于预防受试者的纤维化病症的方法，所述方法包括向有风险患上一种或多种纤维化病症的受试者施用治疗有效量的本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所提供的药物组合物。例如，受试者可能暴露于已知会增加器官或组织的纤维化风险的一种或多种环境条件。在一些实施方案中，受试者暴露于已知会增加肺、肝或肾纤维化风险的一种或多种环境条件下。在一些实施方案中，受试者具有发生器官或组织的纤维化的遗传易感性。在一些实施方案中，将本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所提供的药物组合物施用于受试者，以预防或最小化损伤后的瘢痕化。例如，损伤可以包括手术。

涉及纤维化的示例性疾病、障碍或病症包括但不限于：与纤维化相关的肺疾病(例如，特发性肺纤维化)；医源性药物诱导的、职业/环境诱导的纤维化(农民肺)；肉芽肿性疾病(结节病、过敏性肺炎)；胶原血管疾病(硬皮病以及其他)；肺泡蛋白沉积症；朗格汉斯细胞肉芽肿病；淋巴管平滑肌瘤病；遗传病(例如，海-普综合征(Hermansky-PudlakSyndrome)、结节性硬化症、神经纤维瘤病、代谢蓄积障碍和家族性间质性肺疾病)；继发于全身性炎性疾病(如类风湿性关节炎、硬皮病、狼疮、隐源性致纤维化肺泡炎、辐射诱导的纤维化、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、硬皮病、博来霉素诱导的肺纤维化、慢性哮喘、硅肺病、石棉诱导的肺或胸膜纤维化、急性肺损伤、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)和急性呼吸窘迫(包括细菌性肺炎诱导的、创伤诱导的、病毒性肺炎诱导的、呼吸机诱导的、非肺脓毒症诱导的和误吸诱导的))的肺纤维化。与损伤/纤维化相关的慢性肾病、肾纤维化(肾脏纤维化)、继发于全身性炎性疾病(如狼疮和硬皮病、肾小管间质纤维化、肾小球肾炎、肾小球硬化、局灶节段性、糖尿病、肾小球肾炎、局灶节段性肾小球硬化、IgA肾病、高血压、同种异体移植和奥尔波特综合征(Alport syndrome))的血管球性肾炎；皮肤病学障碍、肠纤维化(例如，硬皮病和辐射诱导的肠纤维化)；肝纤维化，例如肝硬化、酒精诱导的肝纤维化、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、非酒精性脂肪肝病(NAFLD)、毒性/药物诱导的肝纤维化(例如，血色素沉着病)、胆管损伤、原发性胆汁性肝硬化、感染或病毒诱导的纤维化(例如，慢性HCV感染)、炎性/免疫障碍和自身免疫性肝炎；头颈部纤维化，例如，角膜瘢痕(例如，LASIK(激光辅助原位角膜磨削术(laser-assisted in situ keratomileusis))、角膜移植和小梁切除术)；增生性瘢痕、掌肌膜孪缩症(Duputren disease)、皮肤纤维化、皮肤硬皮病(cutaneousscleroderma)、瘢痕疙瘩(例如，烧伤诱导的或术后的)；和其他纤维化疾病，例如结节病、硬皮病、脊髓损伤/纤维化、骨髓纤维化、血管再狭窄、动脉粥样硬化、动脉硬化、韦氏肉芽肿病、慢性淋巴细胞白血病、肿瘤转移、器官移植排斥(例如，闭塞性细支气管炎)、子宫内膜异位症、新生儿呼吸窘迫综合征和神经性疼痛、纤维肌痛、混合性结缔组织病和佩罗尼氏病(Peyronie's disease)。

本文提供了一种改善受试者的肺功能的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所提供的药物组合物。在一些实施方案中，受试者已被诊断为患有肺纤维化。在一些实施方案中，本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所提供的药物组合物用于治疗受试者的特发性肺纤维化。在一些实施方案中，本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所提供的药物组合物用于治疗受试者的寻常型间质性肺炎。

在一些实施方案中，本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所提供的药物组合物用于治疗受试者的弥漫性实质间质性肺疾病，如医源性药物诱导的、职业/环境诱导的纤维化(农民肺)、肉芽肿性疾病(结节病、过敏性肺炎)、胶原血管病(硬皮病以及其他)、肺泡蛋白沉积症、朗格汉斯细胞肉芽肿病、淋巴管平滑肌瘤病、遗传病(例如，海-普综合征、结节性硬化症、神经纤维瘤病、代谢蓄积障碍和家族性间质性肺疾病)。

在一些实施方案中，本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所提供的药物组合物用于治疗受试者的与慢性排斥相关的移植后纤维化，如肺移植后的闭塞性细支气管炎。

在一些实施方案中，本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所提供的药物组合物用于治疗受试者的皮肤纤维化，如皮肤硬皮病、掌肌膜挛缩症和瘢痕疙瘩。

在一些实施方案中，本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所提供的药物组合物用于治疗受试者的伴有或不伴有肝硬化的肝纤维化。例如，毒性/药物诱导的(血色素沉着病)、酒精性肝病、病毒性肝炎(乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、HCV)、非酒精性肝病(NAFLD、NASH)以及代谢性和自身免疫性疾病。

在一些实施方案中，本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所提供的药物组合物用于治疗受试者的肾脏纤维化(例如，肾小管间质纤维化和肾小球硬化)。

如本文所提供的疾病、障碍或病症的进一步例子包括动脉粥样硬化、血栓形成、心脏病、血管炎、瘢痕组织形成、再狭窄、静脉炎、COPD(慢性阻塞性肺疾病)、肺动脉高压、肺纤维化、肺部炎症、肠粘连、膀胱纤维化和膀胱炎、鼻道纤维化、鼻窦炎、中性粒细胞介导的炎症和由成纤维细胞介导的纤维化。

在一些实施方案中，将本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所提供的药物组合物与用于治疗纤维化的一种或多种其他药剂一起施用于患有器官或组织纤维化或具有患上器官或组织纤维化的倾向的受试者。在一些实施方案中，所述一种或多种药剂包括皮质类固醇、免疫抑制剂、B细胞拮抗剂和子宫珠蛋白。

在一些实施方案中，本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所提供的药物组合物用于治疗受试者的皮肤病学障碍。此类皮肤病学障碍包括但不限于皮肤的增殖性或炎性障碍，如特应性皮炎、大疱性障碍、胶原性疾病(collagenoses)、银屑病、硬皮病、银屑病性病变(psoriatic lesion)、皮炎、接触性皮炎、湿疹、荨麻疹、酒渣鼻、伤口愈合、瘢痕、增生性瘢痕、瘢痕疙瘩、川崎病、酒渣鼻、舍格伦-拉松综合征(Sjogren-Larsso syndrome)或荨麻疹。在一些实施方案中，本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)用于治疗系统性硬化病。

在一些实施方案中，本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)用于治疗或预防受试者的炎症。例如，本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)用于治疗或预防受试者的炎性/免疫障碍。

炎性/免疫障碍的例子包括银屑病、类风湿性关节炎、血管炎、炎性肠病、皮炎、骨关节炎、哮喘、炎性肌肉疾病、过敏性鼻炎、阴道炎、间质性膀胱炎、硬皮病、湿疹、同种异体或异种移植(器官、骨髓、干细胞以及其他细胞和组织)移植物排斥、移植物抗宿主病、红斑狼疮、炎性疾病、I型糖尿病、肺纤维化、皮肌炎、舍格伦综合征(Sjogren's syndrome)、甲状腺炎(例如，桥本氏甲状腺炎和自身免疫性甲状腺炎)、重症肌无力、自身免疫性溶血性贫血、多发性硬化、囊性纤维化、慢性复发性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、变应性结膜炎和特应性皮炎。

在一些实施方案中，本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所提供的药物组合物用于治疗受试者的疼痛。在一些实施方案中，疼痛是急性疼痛或慢性疼痛。在一些实施方案中，疼痛是神经性疼痛。

在一些实施方案中，本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所提供的药物组合物用于治疗纤维肌痛。纤维肌痛被认为起源于收缩肌(随意肌)中纤维瘢痕组织的形成。纤维化会束缚组织并且抑制血流，从而导致疼痛。

在一些实施方案中，本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所提供的药物组合物用于治疗癌症。在一些实施方案中，本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所提供的药物组合物用于治疗恶性增殖性疾病和良性增殖性疾病。在一些实施方案中，本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所提供的药物组合物用于预防或减少肿瘤细胞的增殖、癌的侵袭和转移、胸膜间皮瘤(Yamada,Cancer Sci.,2008,99(8),1603-1610)或腹膜间皮瘤、癌性疼痛、骨转移癌(Boucharaba等人,J Clin.Invest.,2004,114(12),1714-1725；Boucharaba等人,Proc.Natl.Acad.Sci.,2006,103(25)9643-9648)。本文提供了一种治疗受试者的癌症的方法，所述方法包括向受试者施用治疗有效量的本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所提供的药物组合物。在一些实施方案中，本文提供的方法进一步包括施用第二治疗剂，其中所述第二治疗剂是抗癌剂。

如本文所用，术语“癌症”是指倾向于以不受控制的方式增殖并且在一些情况下转移(扩散)的细胞的异常生长。癌症的类型包括但不限于处于具有或不具有转移的任何疾病阶段的实体瘤(如膀胱、肠、脑、乳腺、子宫内膜、心脏、肾、肺、淋巴组织(淋巴瘤)、卵巢、胰腺或其他内分泌器官(甲状腺)、前列腺、皮肤(黑色素瘤或基底细胞癌)的那些)或血液肿瘤(如白血病)。

癌症的另外的非限制性例子包括急性成淋巴细胞性白血病、急性髓系白血病、肾上腺皮质癌、肛门癌、阑尾癌、星形细胞瘤、非典型畸胎瘤样/横纹肌样瘤、基底细胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌(骨肉瘤和恶性纤维组织细胞瘤)、脑干胶质瘤、脑肿瘤、脑和脊髓肿瘤、乳腺癌、支气管肿瘤、伯基特淋巴瘤、宫颈癌、慢性淋巴细胞白血病、慢性髓细胞性白血病、结肠癌、结直肠癌、颅咽管瘤、皮肤T细胞淋巴瘤、胚胎性肿瘤(embryonal tumor)、子宫内膜癌、成室管膜细胞瘤、室管膜瘤、食道癌、尤文氏肉瘤家族肿瘤(ewing sarcoma family oftumor)、眼癌、视网膜母细胞瘤、胆囊癌症、胃癌(gastric/stomach cancer)、胃肠道类癌肿瘤(gastrointestinal carcinoid tumor)、胃肠道间质瘤(GIST)、胃肠道间质细胞瘤、生殖细胞瘤、神经胶质瘤、毛细胞白血病、头颈癌、肝细胞(肝)癌、霍奇金淋巴瘤、下咽癌、眼内黑色素瘤、胰岛细胞瘤(内分泌胰腺)、卡波西肉瘤、肾癌、朗格汉斯细胞组织细胞增生症、喉癌、白血病、急性成淋巴细胞白血病，急性髓系白血病、慢性淋巴细胞白血病、慢性髓细胞性白血病、毛细胞白血病、肝癌、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、伯基特淋巴瘤、皮肤T细胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、淋巴瘤、华氏巨球蛋白血症(Waldenstrommacroglobulinemia)、髓母细胞瘤、髓上皮瘤、黑色素瘤、间皮瘤、口癌(mouth cancer)、慢性髓细胞性白血病、髓系白血病、多发性骨髓瘤、鼻咽癌、神经母细胞瘤、非霍奇金淋巴瘤、非小细胞肺癌、口腔癌(oral cancer)、口咽癌、骨肉瘤、骨恶性纤维组织细胞瘤、卵巢癌、上皮性卵巢癌、卵巢生殖细胞瘤、卵巢低度恶性潜能肿瘤(ovarian low malignantpotential tumor)、胰腺癌、乳头瘤病、甲状旁腺癌、阴茎癌、咽癌、中分化松果体实质瘤、松果体母细胞瘤和幕上原始神经外胚层肿瘤、垂体瘤、浆细胞肿瘤/多发性骨髓瘤、胸膜肺胚细胞瘤、原发性中枢神经系统淋巴瘤、前列腺癌、直肠癌、肾细胞(肾)癌、视网膜母细胞瘤、横纹肌肉瘤、唾腺癌、肉瘤、尤文氏肉瘤家族肿瘤、肉瘤、卡波西肉瘤(kaposi)、塞扎里综合征(Sezary syndrome)、皮肤癌、小细胞肺癌、小肠癌、软组织肉瘤、鳞状细胞癌、胃癌(stomach/gastric cancer)、幕上原始神经外胚层肿瘤、T细胞淋巴瘤、睾丸癌、喉癌、胸腺瘤和胸腺癌、甲状腺癌、尿道癌、子宫癌、子宫肉瘤、阴道癌、外阴癌、华氏巨球蛋白血症和肾母细胞瘤。

在一些实施方案中，本文提供了一种治疗受试者的过敏性障碍的方法，所述方法包括施用治疗有效量的如本文所提供的本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)。在一些实施方案中，本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)可用于治疗受试者的呼吸系统疾病、障碍或病症。例如，本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)可以治疗受试者的哮喘(例如，慢性哮喘)。

如本文所用，术语“呼吸系统疾病”是指影响涉及呼吸的器官(如鼻、咽喉、喉、咽鼓管、气管、支气管、肺、相关肌肉(例如，膈和肋间的)和神经)的疾病。呼吸系统疾病的非限制性例子包括哮喘、成人型呼吸窘迫综合征和过敏性(外因性)哮喘、非过敏性(内因性)哮喘、急性重症哮喘、慢性哮喘、临床哮喘、夜间哮喘、过敏原诱导的哮喘、阿司匹林敏感性哮喘、运动诱发性哮喘、等二氧化碳过度通气(isocapnic hyperventilation)、儿童发作哮喘、成人发作哮喘、咳嗽变异性哮喘、职业性哮喘、类固醇抵抗型哮喘(steroid-resistantasthma)、季节性哮喘、季节性过敏性鼻炎、常年性过敏性鼻炎、慢性阻塞性肺疾病(包括慢性支气管炎或肺气肿、肺动脉高压、间质性肺纤维化和/或气道炎症和囊性纤维化、和缺氧)。

如本文所用的术语“哮喘”是指特征在于与任何原因(内因性、外因性或两者兼有；过敏性的或非过敏性的)的气道狭窄相关的肺气流变化的任何肺部障碍。术语哮喘可以与一个或多个形容词一起使用以表明原因。

本文进一步提供了用于治疗或预防受试者的慢性阻塞性肺疾病的方法，所述方法包括施用治疗有效量的如本文所提供的本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)。慢性阻塞性肺疾病的例子包括但不限于慢性支气管炎或肺气肿、肺动脉高压、间质性肺纤维化和/或气道炎症以及囊性纤维化。

在一些实施方案中，本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)用于治疗或预防受试者的神经系统障碍。如本文所用，术语“神经系统障碍”是指改变脑、脊髓或外周神经系统的结构或功能的病症，包括但不限于阿尔茨海默病、脑水肿、脑缺血、中风、多发性硬化、神经病变、帕金森病、钝挫伤或手术创伤后发现的病症(包括术后认知功能障碍和脊髓或脑干损伤)；以及神经学方面的障碍(如退行性椎间盘疾病和坐骨神经痛)。

在一些实施方案中，本文提供了用于治疗或预防受试者的CNS障碍的方法。CNS障碍的非限制性例子包括多发性硬化、帕金森病、阿尔茨海默病、中风、脑缺血、视网膜缺血、术后认知功能障碍、偏头痛、外周神经病变/神经性疼痛、脊髓损伤、脑水肿和头部损伤。

本文还提供了治疗或预防受试者的心血管疾病的方法。如本文所用的术语“心血管疾病”是指影响心脏或血管或两者的疾病，包括但不限于：心律失常(arrhythmia)(心房性或心室性或两者)；动脉粥样硬化及其后遗症；心绞痛；心脏节律异常(cardiac rhythmdisturbance)；心肌缺血；心肌梗塞；心脏或血管动脉瘤；血管炎、中风；肢体、器官或组织的外周阻塞性动脉病；脑、心脏或其他器官或组织的缺血后再灌注损伤；内毒素休克、手术休克或创伤性休克；高血压、瓣膜性心脏病、心力衰竭、血压异常；休克；血管收缩(包括与偏头痛有关的血管收缩)；血管异常、炎症、局限于单一器官或组织的功能不全。例如，本文提供了用于治疗或预防血管收缩、动脉粥样硬化及其后遗症心肌缺血、心肌梗死、主动脉瘤、血管炎和中风的方法，所述方法包括施用治疗有效量的本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)。

在一些实施方案中，本文提供了用于减少心肌缺血和/或内毒素休克后的心脏再灌注损伤的方法，所述方法包括给向有需要的受试者施用治疗有效量的本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)。

本文进一步提供了用于减少受试者的血管收缩的方法，所述方法包括施用治疗有效量的本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)。例如，本文提供了用于降低受试者血压或预防受试者血压升高的方法，所述方法包括施用治疗有效量的本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)。

可以通过本领域已知的测定来证明测试化合物充当LGA受体抑制剂的能力。本文提供的作为LGA受体抑制剂的化合物和组合物的活性可以在体外、体内或细胞系中测定。

例如，可以将过表达人LPA1的中国仓鼠卵巢细胞铺板在微孔板中的DMEM/F12培养基中过夜(15,000个细胞/孔)。过夜培养后，向细胞加载钙指示剂染料，在37℃下持续30分钟。然后在测定前将细胞平衡至室温持续30分钟。将溶解在DMSO中的测试化合物转移到多孔非结合表面板上并且用测定缓冲液(例如，具有钙/镁、20mM HEPES和0.1％无脂肪酸BSA的IX HBSS)稀释至最终浓度为0.5％ DMSO。将稀释的化合物以0.08nM至5mM范围的最终浓度添加到细胞，并且然后在室温下孵育20min，此时以10nM的最终浓度添加LPA以刺激细胞。将化合物IC₅₀值定义为将由LPA单独诱导的钙通量抑制50％的测试化合物浓度。可以通过将数据拟合到4参数逻辑斯谛方程来确定IC₅₀值。

在另一个例子中，在LPA激发之前2小时用本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)向CD-l雌性小鼠口服给药。然后用0.15mL的在0.l％BSA/PBS中的LPA(2pg/pL)经由尾静脉(IV)向小鼠给药。确切地在LPA激发后2分钟，通过断头术使小鼠安乐死并且收集躯干血。将这些样品集体离心并且将单独的75pL样品在-20℃下冷冻，直到进行组胺测定。血浆组胺分析可以通过标准EIA(酶免疫测定)方法进行。将血浆样品解冻并且在PBS中的0.1％ BSA中以1:30稀释。如前所述的组胺分析的EIA方案可以用于本测定。

LPA具有作为生物效应分子的作用，并且具有广泛的生理作用(包括对血压、血小板活化和平滑肌收缩的影响)，以及多种细胞效应，所述细胞效应包括细胞生长、细胞变圆、神经突回缩和肌动蛋白应力纤维形成和细胞迁移。这些作用主要是受体介导的。

用LPA激活LPA受体(LPA₁、LPA₂、LPA₃、LPA₄、LPA₅、LPA₆)介导一系列下游信号传导级联。非限制性例子包括丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)激活、腺苷酸环化酶(AC)抑制/激活、磷脂酶C(PLC)激活/Ca2+动员、花生四烯酸释放、Akt/PKB激活和小GTP酶、Rho、ROCK、Rae和Ras的激活。由LPA受体激活影响的另外的途径包括例如环腺苷一磷酸(cAMP)、细胞分裂周期42/GTP结合蛋白(Cdc42)、原癌基因丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Raf(c-RAF)、原癌基因酪氨酸蛋白激酶Src(c-src)、细胞外信号调节激酶(ERK)、粘附斑激酶(FAK)、鸟嘌呤核苷酸交换因子(GEF)、糖原合成酶激酶3b(GSK3b)、c-jun氨基末端激酶(JNK)、MEK、肌球蛋白轻链II(MLCII)、核因子kB(NF-kB)、N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体激活、磷脂酰肌醇3激酶(PBK)、蛋白激酶A(PKA)、蛋白激酶C(PKC)、ms相关C3肉毒菌毒素底物1(RAC1)。几乎所有哺乳动物的细胞、组织和器官都共同表达几种LPA受体亚型，这表明LPA受体以合作的方式进行信号传导。LPA1、LPA2和LPA3共享高氨基酸序列相似性。

LPA₁(以前称为VZG-l/EDG-2/mrecl.3)与三类G蛋白(G_i/o、G_q和G_12/13)偶联。通过激活这些G蛋白，LPA通过LPA₁诱导一系列细胞反应，包括例如细胞增殖、血清反应元件(SRE)激活、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)激活、腺苷酸环化酶(AC)抑制、磷脂酶C(PLC)激活、Ca²⁺动员、Akt激活和Rho激活。

在小鼠的睾丸、脑、心脏、肺、小肠、胃、脾脏、胸腺和骨骼肌中观察到LPA₁的表达。类似地，LPA₁在如脑、心脏、肺、胎盘、结肠、小肠、前列腺、睾丸、卵巢、胰腺、脾脏、肾、骨骼肌和胸腺的人组织中表达。

LPA₂(EDG-4)还与三类G蛋白(G_i/o、G_q和G_12/13)偶联以介导LPA诱导的细胞信号传导。在成年小鼠的睾丸、肾、肺、胸腺、脾脏和胃以及人的睾丸、胰腺、前列腺、胸腺、脾脏和外周血白细胞中观察到LPA₂的表达。LPA₂的表达在各种癌细胞系中上调，并且已经观察到几种在3'-非翻译区具有突变的人LPA₂转录变体。

LPA₃可以介导多效性LPA诱导的信号传导，包括PLC激活、Ca²⁺动员、AC抑制/激活和MAPK激活。LPA3在神经母细胞瘤细胞中的过表达导致神经突伸长。在成年小鼠睾丸、肾、肺、小肠、心脏、胸腺和脑中观察到LPA₃的表达。在人类中，它发现于心脏、胰腺、前列腺、睾丸、肺、卵巢和脑(皮质额叶、海马体和杏仁体)。

与LPA₁、LPA₂和LPA₃相比，LPA₄(p2y₉/GPR23)具有不同的序列，与血小板活化因子(PAF)受体的相似性更近。LPA₄介导LPA诱导的Ca²⁺动员和cAMP积累，以及与G蛋白Gs的功能偶联以激活AC，以及与其他G蛋白的偶联。LPA₄基因在卵巢、胰腺、胸腺、肾和骨骼肌中表达。

LPA₅(GPR92)是GPCR的嘌呤簇(purinocluster)的成员并且结构上与LPA₄关系最密切。LPA₅在人的心脏、胎盘、脾脏、脑、肺和肠道中表达。LPA在胃肠道的CD8+淋巴细胞隔室也显示出非常高的表达。

LPA₆(p2y5)是GPCR的嘌呤簇(purinocluster)的成员并且结构上与LPA₄关系最密切。LPA₆是一种与Gl2/13-Rho信号传导通路偶联的LPA受体并且在人类毛囊的内根鞘中表达。

通过本公开文本的方法具体提供了对任何前述反应标准的改进。

组合疗法

在一个实施方案中，本文公开的化合物可以与用于和/或开发用于治疗疾病、障碍或病症的一种或多种另外的治疗剂组合使用，其中一种或多种LPA受体的抑制对于治疗所述疾病、障碍或病症(即，LPA相关疾病)的潜在病理和/或症状和/或进展有益。

涉及纤维化的示例性疾病、障碍或病症包括但不限于：与纤维化相关的肺疾病(例如，特发性肺纤维化)；医源性药物诱导的、职业/环境诱导的纤维化(农民肺)；肉芽肿性疾病(结节病、过敏性肺炎)；胶原血管疾病(硬皮病以及其他)；肺泡蛋白沉积症；朗格汉斯细胞肉芽肿病；淋巴管平滑肌瘤病；遗传病(例如，海-普综合征(Hermansky-PudlakSyndrome)、结节性硬化症、神经纤维瘤病、代谢蓄积障碍和家族性间质性肺疾病)；继发于全身性炎性疾病(如类风湿性关节炎、硬皮病、狼疮、隐源性致纤维化肺泡炎、辐射诱导的纤维化、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、硬皮病、博来霉素诱导的肺纤维化、慢性哮喘、硅肺病、石棉诱导的肺或胸膜纤维化、急性肺损伤、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)和急性呼吸窘迫(包括细菌性肺炎诱导的、创伤诱导的、病毒性肺炎诱导的、呼吸机诱导的、非肺脓毒症诱导的和误吸诱导的))的肺纤维化。与损伤/纤维化相关的慢性肾病、肾纤维化(肾脏纤维化)、继发于全身性炎性疾病(如狼疮和硬皮病、肾小管间质纤维化、肾小球肾炎、肾小球硬化、局灶节段性、糖尿病、肾小球肾炎、局灶节段性肾小球硬化、IgA肾病、高血压、同种异体移植和奥尔波特综合征(Alport syndrome))的血管球性肾炎；皮肤病学障碍、肠纤维化(例如，硬皮病和辐射诱导的肠纤维化)；肝纤维化，例如肝硬化、酒精诱导的肝纤维化、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、非酒精性脂肪肝病(NAFLD)、毒性/药物诱导的肝纤维化(例如，血色素沉着病)、胆管损伤、原发性胆汁性肝硬化、感染或病毒诱导的纤维化(例如，慢性HCV感染)、炎性/免疫障碍和自身免疫性肝炎；头颈部纤维化，例如，角膜瘢痕(例如，LASIK(激光辅助原位角膜磨削术(laser-assisted in situ keratomileusis))、角膜移植和小梁切除术)；增生性瘢痕、掌肌膜孪缩症(Duputren disease)、皮肤纤维化、皮肤硬皮病(cutaneoussceroderma)、瘢痕疙瘩(例如，烧伤诱导的或术后的)；和其他纤维化疾病，例如结节病、硬皮病、脊髓损伤/纤维化、骨髓纤维化、血管再狭窄、动脉粥样硬化、动脉硬化、韦氏肉芽肿病、慢性淋巴细胞白血病、肿瘤转移、器官移植排斥(例如，闭塞性细支气管炎)、子宫内膜异位症、新生儿呼吸窘迫综合征和神经性疼痛、纤维肌痛、混合性结缔组织病和佩罗尼氏病(Peyronie's disease)。

在一些实施方案中，本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所提供的药物组合物可用于治疗COVID-19的一种或多种症状。

在一些实施方案中，本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所提供的药物组合物可用于治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)。

在一些实施方案中，本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所提供的药物组合物可用于治疗神经炎症。

在一些实施方案中，本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所提供的药物组合物可用于治疗多发性硬化。

药物组合物和施用模式

本文提供的化合物通常以药物组合物的形式施用。

当用作药物时，本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)(包括其药学上可以接受的盐或溶剂化物)可以以药物组合物的形式施用。这些组合物能以药学领域中所熟知的方式制备，并且可以通过各种途径施用，这取决于是希望局部治疗还是希望全身治疗以及待治疗的区域。施用可以是外用(包括透皮、表皮、眼部和粘膜，包括鼻内、阴道和直肠递送)、肺部(例如，通过吸入或吹入散剂或气雾剂，包括通过雾化器；气管内或鼻内)、口服或肠胃外。口服施用可以包括配制用于每天一次或每天两次(BID)施用的剂型。肠胃外施用包括静脉内、动脉内、皮下、腹膜内肌内或注射或输注；或颅内，例如鞘内或心室内施用。肠胃外施用可以呈单次推注剂量的形式或者可以例如通过连续灌注泵。用于外用施用的药物组合物和配制品可以包括透皮贴剂、软膏、洗剂、乳膏、凝胶、滴剂、栓剂、喷雾剂、液体以及散剂。常规的药物载体、水性基质、粉末基质或油性基质、增稠剂等可以是需要的或希望的。

本文还提供了药物组合物，所述药物组合物含有作为活性成分的本文公开的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)与一种或多种药学上可接受的赋形剂(载体)的组合。例如，使用本文公开的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)制备的药物组合物。在一些实施方案中，组合物适用于局部施用。在制造本文提供的组合物中，典型地将活性成分与赋形剂混合，用赋形剂稀释或封装在这样的载体内，所述载体呈例如胶囊、小药囊(sachet)、纸或其他容器的形式。当赋形剂用作稀释剂时，它可以是固体、半固体或液体材料，所述材料充当活性成分的媒介物、载体或介质。因此，组合物可以处于片剂、丸剂、散剂、锭剂、小袋、扁囊剂、酏剂、混悬剂、乳剂、溶液、糖浆、气雾剂(作为固体或在液体介质中)、软膏(含有例如以活性化合物的重量计至多10％)、软和硬明胶胶囊、栓剂、无菌注射溶液、和无菌包装散剂的形式。在一些实施方案中，组合物被配制用于口服施用。在一些实施方案中，组合物是固体口服配制品。在一些实施方案中，组合物被配制为片剂或胶囊。

本文进一步提供了含有本文公开的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)与药学上可接受的赋形剂的药物组合物。含有本文公开的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)作为活性成分的药物组合物可以通过根据常规药物混配技术将本文公开的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物(例如，表1或表2中的化合物或其药学上可以接受的盐或溶剂化物)与药物载体紧密混合来制备。载体可以采用许多种形式，取决于所希望的施用途径(例如，口服、肠胃外)。在一些实施方案中，组合物是固体口服组合物。

合适的药学上可接受的载体是本领域熟知的。这些药学上可接受的载体中的一些的描述可以在由the American Pharmaceutical Association and the PharmaceuticalSociety of Great Britain出版的The Handbook of Pharmaceutical Excipients中找到。

配制药物组合物的方法已描述在大量出版物中，如Pharmaceutical DosageForms:Tablets,第二版,增订版,第1-3卷,由Lieberman等人编辑；Pharmaceutical DosageForms:Parenteral Medications,第1-2卷,由Avis等人编辑；和Pharmaceutical DosageForms:Disperse Systems,第1-2卷,由Lieberman等人编辑；由Marcel Dekker,Inc.出版。

药学上可接受的赋形剂包括但不限于离子交换剂；氧化铝；硬脂酸铝；卵磷脂；自乳化药物递送系统(SEDDS)，如d-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯；以药物剂型使用的表面活性剂，如Tween、泊洛沙姆(poloxamer)或其他类似聚合物递送基体；血清蛋白，如人血清白蛋白；缓冲物质，如磷酸盐、tris、甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾；饱和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物；水、盐或电解质，如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠；锌盐；胶态二氧化硅；三硅酸镁；聚乙烯吡咯烷酮；基于纤维素的物质；聚乙二醇；羧甲基纤维素钠；聚丙烯酸酯；蜡；聚乙烯-聚氧化丙烯嵌段共聚物；以及羊毛脂。环糊精(如α-环糊精、β-环糊精和γ-环糊精)或经化学改性的衍生物如羟基烷基环糊精(包括2-和3-羟基丙基-β-环糊精)或其他溶解衍生物也可以用于增强如本文所提供的化合物的递送。可以制备含有在0.005％至100％范围内的如本文所提供的化学实体并且其余部分由无毒赋形剂构成的剂型或组合物。所考虑的组合物可以含有0.001％-100％、在一个实施方案中0.1％-95％、在另一实施方案中75％-85％、在另一实施方案中20％-80％的本文提供的化学实体。制备此类剂型的实际方法是本领域技术人员已知的或将清楚的；例如，参见Remington:The Science andPractice of Pharmacy,第22版(Pharmaceutical Press,London,UK.2012)。

在一些实施方案中，本文公开的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所提供的药物组合物可以通过任何可接受的施用途径施用于有需要的受试者。可接受的施用途径包括但不限于经颊、皮肤、宫颈内、鼻窦内、气管内、肠内、硬膜外、间质、腹腔内、动脉内、支气管内、囊内、脑内、脑池内、冠状动脉内、皮内、导管内、十二指肠内、硬膜内、表皮内、食管内、胃内、牙龈内、回肠内、淋巴管内、髓内、脑膜内、肌肉内、卵巢内、腹膜内、前列腺内、肺内、窦内、脊柱内、滑膜内、睾丸内、鞘内、管内、瘤内、宫内、血管内、静脉内、鼻(例如，鼻内)、鼻胃、口服、肠胃外、经皮、经硬膜、直肠、呼吸(吸入)、皮下、舌下、粘膜下、外用、透皮、透粘膜、透气管、输尿管、尿道和阴道。在一些实施方案中，优选的施用途径为肠胃外(例如，瘤内)。

在一些实施方案中，如本文所提供的本文公开的化合物(例如表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或其药物组合物可以配制用于肠胃外施用，例如被配制用于经由动脉内、胸骨内、颅内、静脉内、肌内、皮下或腹膜内途径注射。例如，此类组合物可以制备为可注射剂，作为液体溶液或混悬剂；也可以制备适合于在注射之前添加液体后制备溶液或混悬剂的固体形式；并且制剂也可以乳化。鉴于本公开文本，此类配制品的制备将是本领域技术人员已知的。在一些实施方案中，使用装置进行肠胃外施用。例如，此类装置可以包括针注射器、微针注射器、无针注射器和输注技术。

在一些实施方案中，适合于注射的药物形式包括无菌水溶液或分散体；包含芝麻油、花生油或丙二醇的配制品；以及用于临时制备无菌可注射溶液或分散体的无菌粉末。在一些实施方案中，所述形式必须是无菌的并且必须在其可容易注射的程度上是流体的。在一些实施方案中，所述形式在制造和储存条件下应是稳定的并且必须在抵抗微生物(如细菌和真菌)的污染作用的情况下保存。

在一些实施方案中，载体也可以是溶剂或分散介质，所述溶剂或分散介质含有例如水、乙醇、多元醇(例如，甘油、丙二醇和液体聚乙二醇等)、其合适的混合物以及植物油。在一些实施方案中，例如通过使用包衣(如卵磷脂)，在分散液的情况下通过维持所希望的粒度，以及通过使用表面活性剂，可以维持适当的流动性。在一些实施方案中，防止微生物的作用可以通过各种抗细菌和抗真菌剂(例如，对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸、硫柳汞等)来达到。在一些实施方案中，包括等渗剂，例如糖或氯化钠。在一些实施方案中，通过在组合物中使用延迟吸收的药剂(例如，单硬脂酸铝和明胶)，可以延长可注射组合物的吸收。

在一些实施方案中，无菌可注射溶液是通过将本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)根据需要掺入具有以上列举的各种其他成分的适当溶剂中，然后进行过滤杀菌来制备的。在一些实施方案中，分散体通过以下方式制备：将各种无菌活性成分掺入无菌媒介物中，所述媒介物含有基础分散介质和来自上文列举的那些成分的所需其他成分。在一些实施方案中，无菌粉末用于制备无菌可注射溶液。在一些实施方案中，制备方法是真空干燥和冷冻干燥技术，其由其先前无菌过滤的溶液产生活性成分加上任何另外希望成分的粉末。

在一些实施方案中，在作为凝胶、乳膏、灌肠剂或直肠栓剂的直肠组合物中可使用的药理学上可接受的赋形剂包括但不限于以下中的任一个或多个：可可脂甘油酯、合成聚合物(如聚乙烯吡咯烷酮)、PEG(如PEG软膏)、甘油、经甘油处理的明胶、氢化植物油、泊洛沙姆、各种分子量的聚乙二醇与聚乙二醇脂肪酸酯的混合物、凡士林、无水羊毛脂、鲨鱼肝油、糖精钠、薄荷醇、甜杏仁油、山梨糖醇、苯甲酸钠、anoxid SBN、香草精油、气雾剂、苯氧基乙醇中的对羟基苯甲酸酯、甲基对氧基苯甲酸钠、丙基对氧基苯甲酸钠、二乙胺、卡波姆、卡波普(carbopol)、甲基氧基苯甲酸酯、聚乙二醇鲸蜡硬脂基醚、椰油酰基辛酰癸酸酯(cocoylcaprylocaprate)、异丙醇、丙二醇、液体石蜡、黄原胶、羧基-偏亚硫酸氢盐、依地酸钠、苯甲酸钠、偏亚硫酸氢钾、葡萄柚种子提取物、甲基磺酰基甲烷(MSM)、乳酸、甘氨酸、维生素(如维生素A和E)和乙酸钾。

在一些实施方案中，栓剂可以通过将本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或如本文所提供的药物组合物与合适的无刺激性赋形剂或载体(如可可脂、聚乙二醇、栓剂蜡)混合来制备，所述无刺激性赋形剂或载体(如可可脂、聚乙二醇、栓剂蜡)在环境温度下是固体但在体温下是液体并且因此在直肠中融化并释放活性化合物。在一些实施方案中，用于直肠施用的组合物呈灌肠剂的形式。

在一些实施方案中，如本文所提供的本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或其药物组合物被配制用于通过口服施用的方式(例如，固体或液体剂型)局部递送至消化道或GI道。

在一些实施方案中，用于口服施用的固体剂型包括胶囊、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在一些实施方案中，将本文公开的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)与一种或多种药学上可接受的赋形剂如柠檬酸钠或磷酸二钙和/或以下物质混合：a)填充剂或增量剂，如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和硅酸；b)粘合剂，例如像羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；c)保湿剂，如甘油；d)崩解剂，如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠；e)溶液阻滞剂，如石蜡；f)吸收促进剂，如季铵化合物；g)润湿剂，例如像鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；h)吸附剂，如高岭土和膨润土；以及i)润滑剂，如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠及其混合物。例如，在胶囊、片剂及丸剂的情况下，剂型还可以包含缓冲剂。在一些实施方案中，类似类型的固体组合物也可作为填充剂用于使用如乳糖或奶糖以及高分子量聚乙二醇等的赋形剂的软和硬填充明胶胶囊中。

在一些实施方案中，药物组合物将采用如丸剂或片剂的单位剂型的形式，并且因此，所述组合物可以含有与如本文所提供的本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)一起的稀释剂，如乳糖、蔗糖、磷酸二钙等；润滑剂，如硬脂酸镁等；以及粘合剂，如淀粉、阿拉伯胶、聚乙烯吡咯烷酮、明胶、纤维素、纤维素衍生物等。在一些实施方案中，将作为另一种固体剂型的散剂、球形造粒物(marume)、溶液或混悬剂(例如，在碳酸亚丙酯、植物油、PEG、泊洛沙姆124或三酸甘油酯中)包囊在胶囊(明胶或纤维素基质胶囊)中。在一些实施方案中，还考虑了如本文所提供的一种或多种化合物和药物组合物或额外活性剂在物理上分离的单位剂型；例如，具有各药物的颗粒的胶囊(或胶囊中的片剂)；二层片剂；二室囊形片(gel caps)等。在一些实施方案中，还考虑了肠溶包衣或延迟释放口服剂型。

在一些实施方案中，其他生理学上可接受的化合物可以包含湿润剂、乳化剂、分散剂或特别可用于防止微生物生长或活动的防腐剂。例如，各种防腐剂是熟知的并且包括例如苯酚和抗坏血酸。

在一些实施方案中，赋形剂是无菌的并且一般不含不希望的物质。例如，这些组合物可以通过常规的熟知的杀菌技术来杀菌。在一些实施方案中，对于各种口服剂型赋形剂，如片剂及胶囊，不需要杀菌。例如，美国药典/国家处方集(United States Pharmacopeia/National Formulary，USP/NF)标准可以是足够的。

在一些实施方案中，如本文所提供的本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或其药物组合物被配制用于眼部施用。在一些实施方案中，眼部组合物可以包括而不限于以下中的一种或多种：粘精(viscogen)(例如，羧甲基纤维素、甘油、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇)；稳定剂(例如，普洛尼克(pluronic)(三嵌段共聚物)、环糊精)；防腐剂(例如，苯扎氯铵(benzalkonium chloride)、ETDA、SofZia(硼酸、丙二醇、山梨糖醇和氯化锌；Alcon Laboratories,Inc.)、Purite(稳定化的氧氯复合物；Allergan,Inc.))。

在一些实施方案中，如本文所提供的本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)或其药物组合物被配制用于皮肤或粘膜的局部施用(例如，经皮或透皮)。在一些实施方案中，外用组合物可以包括软膏和乳膏。在一些实施方案中，软膏是典型地基于矿脂或其他石油衍生物的半固体制剂。在一些实施方案中，含有所选活性剂的乳膏典型地是粘稠液体或半固体乳剂，常常是水包油或油包水的。例如，乳膏基质典型地是可水洗的，并且含有油相、乳化剂和水相。例如，油相，有时也称作“内部”相，通常由矿脂和脂肪醇如鲸蜡醇或硬脂醇构成；尽管不是必需的，但水相的体积通常超过油相，并且通常含有保湿剂。在一些实施方案中，乳膏配制品中的乳化剂通常是非离子、阴离子、阳离子或两性表面活性剂。在一些实施方案中，像其他载体或媒介物那样，软膏基质应是惰性、稳定、无刺激性且不致敏的。

在任一个前述实施方案中，如本文所提供的药物组合物可以包含以下中的一种或多种：脂质、双层间交联多层囊泡、生物可降解的基于聚(D,L-乳酸-共-乙醇酸)[PLGA]的或基于聚酐的纳米颗粒或微颗粒，以及纳米多孔颗粒负载型脂质双层。

在一些实施方案中，本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)的剂量是基于多种因素来确定的，所述因素包括但不限于受试者的类型、年龄、体重、性别、医学病症，受试者的医学病症的严重程度，施用途径以及化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物的活性。在一些实施方案中，用于特定情况的适当剂量可以通过医学领域技术人员来确定。在一些实施方案中，总每日剂量可以分成多份并且在一整天内以多份施用或借助提供连续递送的方式施用。

在一些实施方案中，将本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)以约0.01至约1000mg的剂量施用。例如，约0.1至约30mg、约10至约80mg、约0.5至约15mg、约50mg至约200mg、约100mg至约300mg、约200至约400mg、约300mg至约500mg、约400mg至约600mg、约500mg至约800mg、约600mg至约900mg、或约700mg至约1000mg。在一些实施方案中，剂量是治疗有效量。

在一些实施方案中，将如本文所提供的本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)以如下剂量施用：约0.0002mg/Kg至约100mg/Kg(例如，约0.0002mg/Kg至约50mg/Kg；约0.0002mg/Kg至约25mg/Kg；约0.0002mg/Kg至约10mg/Kg；约0.0002mg/Kg至约5mg/Kg；约0.0002mg/Kg至约1mg/Kg；约0.0002mg/Kg至约0.5mg/Kg；约0.0002mg/Kg至约0.1mg/Kg；约0.001mg/Kg至约50mg/Kg；约0.001mg/Kg至约25mg/Kg；约0.001mg/Kg至约10mg/Kg；约0.001mg/Kg至约5mg/Kg；约0.001mg/Kg至约1mg/Kg；约0.001mg/Kg至约0.5mg/Kg；约0.001mg/Kg至约0.1mg/Kg；约0.01mg/Kg至约50mg/Kg；约0.01mg/Kg至约25mg/Kg；约0.01mg/Kg至约10mg/Kg；约0.01mg/Kg至约5mg/Kg；约0.01mg/Kg至约1mg/Kg；约0.01mg/Kg至约0.5mg/Kg；约0.01mg/Kg至约0.1mg/Kg；约0.1mg/Kg至约50mg/Kg；约0.1mg/Kg至约25mg/Kg；约0.1mg/Kg至约10mg/Kg；约0.1mg/Kg至约5mg/Kg；约0.1mg/Kg至约1mg/Kg；约0.1mg/Kg至约0.5mg/Kg)。在一些实施方案中，将如本文所提供的本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)以约100mg/Kg的剂量施用。

在一些实施方案中，本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)的前述剂量可以在每日基础上(例如，作为单剂量或作为两个或更多个分剂量)或在非每日基础上(例如，每隔一天、每两天、每三天、每周一次、每周两次、每两周一次、一个月一次)施用。

在一些实施方案中，如本文所提供的本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)的施用时间段是1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周、12周、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月或更长时间。在一些实施方案中，停止施用的时间段是1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周、12周、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月或更长时间。在一些实施方案中，将本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)施用于受试者一段时间，随后是停止施用本文公开的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)的单独时间段。在一些实施方案中，将本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)施用持续第一时间段，以及在第一时间段后的第二时间段，其中在第二时间段期间停止施用，随后是开始施用本文公开的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)的第三时间段，并且随后是在第三时间段后的第四时间段，在所述第四时间段停止施用。例如，施用本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)的时间段、随后停止施用的时间段在确定或未确定的时间段内重复。在一些实施方案中，施用时间段是1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周、12周、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月或更长时间。在一些实施方案中，停止施用的时间段是1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周、12周、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月或更长时间。

在一些实施方案中，将本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)口服施用于受试者，每天一或多次(例如，每天一次、每天两次、每天三次、每天四次或单次每日剂量)。

在一些实施方案中，将本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)通过肠胃外施用而施用于受试者，每天一或多次(例如，1至4次，每天一次、每天两次、每天三次、每天四次或单次每日剂量)。

在一些实施方案中，将本文公开的化合物(例如，表1或表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物)每周通过肠胃外施用而施用于受试者。

化合物的合成

本公开文本的化合物可以使用例如以下通用方法和程序从容易获得的起始材料制备。将理解，除非另有说明，否则在得到某种工艺条件(即，反应温度、时间、反应物的摩尔比、溶剂、压力等)的情况下，也可以使用其他工艺条件。最佳反应条件可以随所用的反应物或溶剂而变化，但是此类条件可以由本领域技术人员通过常规优化程序确定。

另外，如对于本领域技术人员而言将清楚的，常规保护基团可能是必要的以防止某些官能团经历不希望的反应。用于各种官能团的合适保护基团以及用于保护和去保护某种官能团的合适条件是本领域熟知的。例如，在T.W.Greene和G.M.Wuts(1999)ProtectingGroups in Organic Synthesis,第3版,Wiley,New York以及其中引用的参考文献中描述了许多保护基团。

此外，本公开文本的化合物可以含有一个或多个手性中心。因此，如果需要，可以将此类化合物制备或分离为纯的立体异构体，即作为单独的对映异构体或非对映异构体或者作为立体异构体富集的混合物。除非另有指示，否则所有此类立体异构体(和富集的混合物)都被包括在本公开文本的范围内。纯的立体异构体(或富集的混合物)可以使用例如本领域熟知的光活性起始材料或立体选择性试剂来制备。可替代地，可以使用例如手性柱色谱法、手性拆分剂等来分离此类化合物的外消旋混合物。

用于以下反应的起始材料通常是已知的化合物，或者可以通过已知的程序或其明显的修改来制备。例如，许多起始材料可从商业供应商(如Aldrich Chemical Co.(美国威斯康辛州密尔沃基)、Bachem(美国加利福尼亚州托伦斯)、EMKA Chemie Gmbh&Co.KG(德国埃青)或Millipore Sigma(美国密苏里州圣路易斯))处获得。其他起始材料可以通过在标准参考文本中描述的程序或其明显的修改来制备，所述标准参考文本如Fieser andFieser's Reagents for Organic Synthesis,第1-15卷(John Wiley,and Sons,1991)、Rodd's Chemistry of Carbon Compounds,第1-5卷和增刊(Elsevier SciencePublishers,1989)、Organic Reactions,第1-40卷(John Wiley,and Sons,1991)、March'sAdvanced Organic Chemistry(John Wiley,and Sons,第5版,2001)和Larock'sComprehensive Organic Transformations(VCH Publishers Inc.,1989)。

一般合成

本文所述的化合物的典型实施方案可以使用以下所述的通用反应方案来合成。鉴于本文的描述，应清楚的是，可以通过用具有类似结构的其他材料替代起始材料来改变通用方案，以产生相应不同的产物。以下合成的描述提供了关于起始材料可以如何变化以提供相应产物的许多实施例。鉴于定义了取代基团的所希望的产物，通常可以通过检查确定必需的起始原料。起始材料通常从商业来源获得或者使用公开的方法合成。为了合成作为本公开文本中所述的实施方案的化合物，对待合成的化合物的结构的检查将提供每个取代基团的身份。鉴于本文的实施例，通过简单的检查过程，最终产物的身份通常将使必需的起始材料的身份变得清楚。通常，本文所述的化合物在室温和压力下典型地是稳定的和可分离的。

实施例

包括以下实施例以展示本公开文本的具体实施方案。本领域技术人员应理解，以下实施例中公开的技术代表在本公开文本的实践中很好地起作用的技术，并且因此可以被认为是构成其实践的具体模式。然而，根据本公开文本，本领域技术人员应理解，在不脱离本公开文本的精神和范围的情况下，可以在所公开的具体实施方案中进行许多改变并且仍然获得相同或相似的结果。

缩写(如本文所用)：

一般信息：所有蒸发或浓缩均在真空中用旋转蒸发器进行。在室温下在真空中(1-5mmHg)干燥分析样品。在硅胶板上进行薄层色谱法(TLC)，用紫外光(214和254nm)可视化斑点。使用硅胶(100-200目)通过柱和快速色谱法进行纯化。溶剂体系报告为按体积的混合物。NMR谱是在Bruker 400或Varian(400MHz)波谱仪上记录的。¹H化学位移以按ppm计的δ值报告，其中氘化溶剂作为内标。数据如下报告：化学位移、多重性(s＝单峰，d＝双重峰，t＝三重峰，q＝四重峰，br＝宽峰，m＝多重峰)、耦合常数(Hz)、积分。除非另有说明，否则LCMS谱是在SHIMADZU LC20-MS2020或Agilent 1260系列6125B质谱仪或Agilent 1200系列、具有电喷雾电离的6110或6120质谱仪上获得的。

实施例A1

2-((2S,3R)-2-(环戊基氧基)-3-羟基-3-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丙基)-6-乙氧基苯并[d]噻唑-4-

甲酸(化合物101)

步骤A：2-氨基-5-乙氧基苯甲酸甲酯

在25℃下向2-氨基-5-羟基-苯甲酸甲酯(10.0g，59.8mmol)、EtOH(5.51g，6.99mL)和PPh₃(31.4g，120mmol)在THF(150mL)中的溶液中逐滴添加DIAD(24.2g，23.3mL)。将所得反应混合物在25℃下搅拌72h。在减压下去除溶剂以得到残余物。将残余物通过快速硅胶色谱法(120g 硅胶快速柱，在100mL/min下的0-15％ EtOAc/PE梯度洗脱液)纯化以得到2-氨基-5-乙氧基-苯甲酸甲酯(10.9g，93.0％产率)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ7.17(d,J＝2.8Hz,1H),6.97(dd,J＝8.8,3.2Hz,1H),6.74(d,J＝8.8Hz,1H),6.29(s,2H),3.89(q,J＝6.8Hz,2H),3.78(s,3H),1.27(t,J＝7.0Hz,3H)。

步骤B：2-氨基-3-溴-5-乙氧基苯甲酸甲酯

向2-氨基-5-乙氧基-苯甲酸甲酯(10.9g，55.6mmol)在AcOH(80mL)中的溶液中添加NBS(9.90g，55.6mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌24h。将反应混合物倒入水(60mL)中并搅拌10min。将水相用EtOAc(30mL x 3)萃取。将合并的有机层用无水Na₂SO₄干燥，过滤并且在真空中浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱法(120g硅胶快速柱，在100mL/min下的0-5％ EtOAc/PE梯度洗脱液)纯化以得到2-氨基-3-溴-5-乙氧基-苯甲酸甲酯(6.65g，43.7％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.32(d,J＝2.8Hz,1H),7.20(d,J＝2.8Hz,1H),5.59(brs,2H),3.87(q,J＝7.0Hz,2H),3.80(s,3H),1.29(t,J＝7.0Hz,3H)。

步骤C：2-氨基-5-乙氧基-3-((3-((2-乙基己基)氧基)-3-氧代丙基)硫代)苯甲酸甲酯

向2-乙基己基3-硫烷基丙酸酯(5.30g，24.3mmol)和2-氨基-3-溴-5-乙氧基-苯甲酸甲酯(6.65g，24.3mmol)在甲苯(80mL)中的溶液中添加Pd₂(dba)₃(1.11g，1.21mmol)、Xantphos(1.40g，2.43mmol)和DIEA(7.84g，60.7mmol，10.6mL)。将混合物在110℃下搅拌36h。将残余物倒入水(150mL)中并且搅拌10min。将水相用EtOAc(80mLx3)萃取。将合并的有机层用无水Na₂SO₄干燥，过滤并且在真空中浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱法(120g硅胶快速柱，在100mL/min下的以0-5％ EtOAc/PE梯度洗脱液)纯化以得到2-氨基-5-乙氧基-3-[3-(2-乙基己基)-3-氧代-丙基]硫烷基-苯甲酸甲酯(8.29g，83.0％产率)。

步骤D：2-氨基-5-乙氧基-3-[(3-乙氧基-5-甲氧基羰基-苯基)二硫烷基]苯甲酸甲酯

向2-氨基-5-乙氧基-3-[2-(2-乙基己氧基)-2-氧代-乙基]硫烷基-苯甲酸甲酯(8.29g，20.9mmol)在EtOH(50mL)中的溶液中添加EtONa(9.22g，27.1mmol，在EtOH中20％)。将反应混合物在25℃下搅拌12h。将残余物用水(100mL)稀释，用37％ HCl酸化至pH＝6，用EtOAc(100mL x 3)萃取。将合并的有机层用无水Na₂SO₄干燥，过滤并且在真空中浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱法(120g硅胶快速柱，在100mL/min下的0-5％EtOAc/PE梯度洗脱液)纯化以得到2-氨基-5-乙氧基-3-[(3-乙氧基-5-甲氧基羰基-苯基)二硫烷基]苯甲酸甲酯(1.09g，12.0％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.46(d,J＝3.2Hz,2H),6.84(d,J＝3.2Hz,2H),6.37(brs,4H),4.27(q,J＝7.2Hz,4H),3.75(q,J＝6.8Hz,4H),1.32(t,J＝7.0Hz,6H),1.24(t,J＝7.0Hz,6H)。

步骤E：2-(环戊基氧基)乙酸

在0℃下向环戊醇(3g，34.83mmol)在THF(50mL)中的溶液中添加NaH(2.79g，69.66mmol，60％纯度)。在60℃下搅拌30min后，然后在25℃下将2-氯乙酸(3.29g，34.83mmol)缓慢添加到反应混合物中。将所得混合物在60℃下搅拌16h。冷却后，将反应混合物用H₂O(10mL)淬灭，用H₂O(50mL)稀释，将pH值用1N HCl调节至5。将混合物用EtOAc(40mLx 3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL x 3)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下浓缩以得到残余物。将残余物通过硅胶柱色谱法(PE/EtOAc＝1/0至1/1)纯化以得到2-(环戊基氧基)乙酸(3.7g，73％产率)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.21-4.19(m,1H),3.94(s,2H),1.71-1.28(m,8H)。

步骤F：2-(环戊基氧基)乙酰氯

向2-(环戊基氧基)乙酸(3.7g，25.66mmol)在DCM(20mL)中的溶液中添加草酰氯(4.89g，38.50mmol)和DMF(0.1mL)。然后将混合物在25℃下搅拌1h。将反应混合物在减压下浓缩，以得到2-(环戊基氧基)乙酰氯(4.17g，粗品)，将其无需进一步纯化直接用于下一步骤。

步骤G：(R)-4-苄基-3-(2-(环戊基氧基)乙酰基)噁唑烷-2-酮

在-78℃下在N₂下向(4R)-4-苄基噁唑烷-2-酮(6.82g，38.47mmol)在THF(30mL)中的溶液中逐滴添加n-BuLi(14.36mL，35.9mmol，在己烷中的2.5M溶液)。添加后，在-78℃下将2-(环戊基氧基)乙酰氯(4.17g，25.64mmol)在THF(8mL)中的溶液添加到混合物中。将所得混合物在25℃下搅拌2h。然后将反应混合物通过饱和NH₄Cl水溶液(50mL)淬灭，用EtOAc(30mL x 3)萃取。将合并的有机层用水(20mL x 3)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下浓缩以得到残余物。将残余物通过硅胶柱色谱法(PE/EtOAc＝1/0至1/1)纯化以得到(4R)-4-苄基-3-[2-(环戊基氧基)乙酰基]噁唑烷-2-酮(2.14g，23％产率)。LC-MS:m/z 304.1(M+H)⁺。

步骤H：(R)-4-苄基-3-((2R,3S)-2-(环戊基氧基)-3-羟基-3-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丙酰基)噁唑烷-2-酮

在-78℃下在氮气下向(R)-4-苄基-3-(2-(环戊基氧基)乙酰基)噁唑烷-2-酮(1.8g，5.93mmol)在DCM(45mL)中的溶液中添加TiCl₄(683μL，6.23mmol)。将混合物在-78℃下搅拌15min。然后在-78℃下逐滴添加DIEA(2.58mL，14.8mmol)。将所得混合物在-78℃下搅拌40分钟。然后逐滴添加NMP(577μL，5.93mmol)。将反应混合物在-78℃下在氮气下搅拌10min。然后逐滴添加在干DCM(10mL)中的3-甲氧基-4-甲基苯甲醛(980mg，6.53mmol)。将所得混合物在-78℃下在氮气下搅拌2h。然后将反应混合物用饱和NH₄Cl水溶液(50mL)淬灭，用DCM(60mL x 3)萃取。将有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩以得到残余物。将残余物通过快速硅胶色谱法(40g Sepa 硅胶快速柱，在40mL/min下的0-45％EtOAc/PE梯度洗脱液)纯化以得到(R)-4-苄基-3-((2R,3S)-2-(环戊基氧基)-3-羟基-3-(3-甲氧基-4-甲苯基)丙酰基)噁唑烷-2-酮(2.27g，84.4％产率)。LC-MS:m/z 476.2(M+Na)⁺。

步骤I：(R)-1-((R)-4-苄基-2-氧代噁唑烷-3-基)-2-(环戊基氧基)-3-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丙烷-1,3-二酮

在0℃下，向(R)-4-苄基-3-((2R,3S)-2-(环戊基氧基)-3-羟基-3-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丙酰基)噁唑烷-2-酮(2.27g，5.01mmol)在DCM(30mL)中的混合物中分批添加戴斯-马丁高碘烷(4.25g，10.0mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌2h。然后将混合物用H₂O(50mL)和DCM(50mL)淬灭。将混合物通过硅藻土过滤并且用DCM(50mL x 2)萃取。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并且在真空下浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱法(40g Sepa硅胶快速柱，在40mL/min下的0-35％ EtOAc/PE梯度洗脱液)纯化以得到(R)-1-((R)-4-苄基-2-氧代噁唑烷-3-基)-2-(环戊基氧基)-3-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丙烷-1,3-二酮(2.2g，97.4％产率)。LC-MS:m/z 474.1(M+Na)⁺。

步骤J：(R)-4-苄基-3-((2R,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丙酰基)噁唑烷-2-酮

在-10℃下，向(R)-1-((R)-4-苄基-2-氧代噁唑烷-3-基)-2-(环戊基氧基)-3-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丙烷-1,3-二酮(2.2g，4.87mmol)在TFA(21.7mL)和DCM(22mL)中的混合物中逐滴添加二甲基(苯基)硅烷(2.27mL，14.6mmol)。将反应混合物在-10℃下搅拌2h。将溶液倒入饱和NaHCO₃水溶液(200mL)中，用DCM(30mL x 3)萃取。将合并的有机物经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱法(40g Sepa硅胶快速柱，在40mL/min下的0-50％ EtOAc/PE梯度洗脱液)纯化以得到(R)-4-苄基-3-((2R,3R)-2-(环戊基氧基)-3-羟基-3-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丙酰基)噁唑烷-2-酮(1.85g，83.7％产率)。LC-MS:m/z 476.1(M+Na)⁺。

步骤K：(R)-4-苄基-3-((2R,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丙酰基)噁唑烷-2-酮

在0℃下，向(R)-4-苄基-3-((2R,3R)-2-(环戊基氧基)-3-羟基-3-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丙酰基)噁唑烷-2-酮(1.85g，4.08mmol)在DCM(15mL)和2,6-二甲基吡啶(950μL，8.16mmol)中的混合物中添加[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]三氟甲磺酸酯(1.88mL，8.16mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌2h。然后将混合物用H₂O(50mL)淬灭，用DCM(50mL x3)萃取。将有机层用H₂O(50mL x 2)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，并且在真空下浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱法(20g Sepa硅胶快速柱，在35mL/min下的0-10％ EtOAc/PE梯度洗脱液)纯化以得到(4R)-4-苄基-3-[(2S,3R)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-(环戊基氧基)-3-(3-甲氧基-4-甲基-苯基)丙酰基]噁唑烷-2-酮(2.2g，产率95.0％)。

步骤L：(2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丙-1-醇

在0℃下，在N₂下向LiBH₄(9.69mL，38.76mmol，在THF中的4M溶液)在THF(10mL)中的混合物中逐滴添加H₂O(15.4mg，852μmol)。将混合物在0℃下搅拌0.5h。然后逐滴添加(R)-4-苄基-3-((2R,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丙酰基)噁唑烷-2-酮(2.2g，3.87mmol)在THF(20mL)中的溶液。将反应混合物温热至15℃并且在15℃下搅拌16h。将反应混合物用1M HCl水溶液小心地中和，用EtOAc(30mL x 3)萃取。将有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱法(40g Sepa硅胶快速柱，在40mL/min下的0-10％ EtOAc/PE梯度洗脱液)纯化以得到(2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丙-1-醇(1.26g，82.4％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.04(d,J＝7.2Hz,1H),6.85(s,1H),6.79(d,J＝7.6Hz,1H),4.61(d,J＝6.8Hz,1H),3.82(s,3H),3.81-3.70(m,3H),3.36-3.35(m,1H),2.20(s,3H),1.58-1.26(m,8H),0.89(s,9H),0.05(s,3H),-0.16(s,3H)。

步骤M：(2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丙基甲磺酸酯

在0℃下向(2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丙-1-醇(1.26g，3.19mmol)在DCM(20mL)和TEA(667μL，4.79mmol)中的混合物中逐滴添加MsCl(439mg，3.83mmol，297μL)。将反应混合物在0℃下搅拌0.5h。将混合物用饱和NaHCO₃(50mL)水溶液淬灭，用DCM(20mL x 3)萃取。将有机层用0.5N HCl(20mL x2)、盐水(20mL x 2)洗涤，经Na₂SO₄干燥，并且在真空下浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱法(20g Sepa硅胶快速柱，在35mL/min下的0-15％ EtOAc/PE梯度洗脱液)纯化以得到(2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丙基甲磺酸酯(1.42g，94.1％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.05(d,J＝7.6Hz,1H),6.84(s,1H),6.79-6.76(m,1H),4.65(d,J＝5.6Hz,1H),4.41-4.27(m,2H),3.82(s,4H),3.57-3.56(m,1H),2.99(s,3H),2.20(s,3H),1.61-1.30(m,8H),0.89(s,9H),0.07(s,3H),-0.14(s,3H)。

步骤N：(3S,4R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(环戊基氧基)-4-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丁腈

向[(2S,3R)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-(环戊基氧基)-3-(3-甲氧基-4-甲基-苯基)丙基]甲磺酸酯(6.0g，12.69mmol)在DMSO(60mL)中的溶液中添加NaCN(3.11g，63.46mmol)。将混合物在85℃下搅拌3h。冷却后，将混合物用H₂O(60mL)淬灭，用EtOAc(60mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱(PE/EtOAc＝10/1)纯化以得到(3S,4R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(环戊基氧基)-4-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丁腈(4g，78.1％产率)。LC-MS:m/z426.2(M+Na)⁺。

步骤O：(3S,4R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(环戊基氧基)-4-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丁醛

在-78℃下向(3S,4R)-4-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-3-(环戊基氧基)-4-(3-甲氧基-4-甲基-苯基)丁腈(4.0g，9.91mmol)在甲苯(50mL)中的溶液中添加DIBAL-H(19.82mL，19.82mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌1h。然后将混合物用酒石酸钾钠溶液(50mL)淬灭，用EtOAc(50mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩以得到粗(3S,4R)-4-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-3-(环戊基氧基)-4-(3-甲氧基-4-甲基-苯基)丁醛(4.0g，99.2％产率)，将其无需进一步纯化用于下一步骤。

步骤P：(3S,4R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(环戊基氧基)-4-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丁酸

向(3S,4R)-4-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-3-(环戊基氧基)-4-(3-甲氧基-4-甲基-苯基)丁醛(4.0g，9.84mmol)在t-BuOH(40mL)和H₂O(10mL)中的溶液中添加NaH₂PO₄(1.18g，9.84mmol)、亚氯酸钠(3.20g，35.41mmol)和2-甲基丁-2-烯(3.10g，44.27mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌1h。然后将混合物用H₂O(60mL)淬灭，用EtOAc(60mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱(PE/EtOAc＝10/1)纯化以得到(3S,4R)-4-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-3-(环戊基氧基)-4-(3-甲氧基-4-甲基-苯基)丁酸(1.6g，38.5％产率)。LC-MS:m/z 445.1(M+Na)⁺。

步骤Q：2-((2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丙基)-6-乙氧基苯并[d]噻唑-4-甲酸乙酯

向(3S,4R)-4-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-3-(环戊基氧基)-4-(3-甲氧基-4-甲基-苯基)丁酸(300mg，709.84μmol)和2-氨基-3-[(2-氨基-5-乙氧基-3-乙氧基羰基-苯基)二硫烷基]-5-乙氧基-苯甲酸乙酯(341mg，709.84μmol)在甲苯(10mL)中的溶液中添加三丁基膦(430mg，2.13mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌12h。将混合物用H₂O(30mL)淬灭，用EtOAc(30mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱(PE/EtOAc＝10/1)纯化以得到化合物2-[(2S,3R)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-(环戊基氧基)-3-(3-甲氧基-4-甲基-苯基)丙基]-6-乙氧基-1,3-苯并噻唑-4-甲酸乙酯(110mg，产率24.7％)。LC-MS:m/z 628.3(M+H)⁺。

步骤R：2-((2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丙基)-6-乙氧基苯并[d]噻唑-4-甲酸

向2-[(2S,3R)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-(环戊基氧基)-3-(3-甲氧基-4-甲基-苯基)丙基]-6-乙氧基-1,3-苯并噻唑-4-甲酸乙酯(110mg，175.19μmol)在THF(2mL)、EtOH(2mL)和H₂O(2mL)中的溶液中添加LiOH·H₂O(37mg，875.93μmol)。将混合物在25℃下搅拌1h。将反应混合物用1N HCl调节至pH＝4，用EtOAc(20mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩以得到2-[(2S,3R)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-(环戊基氧基)-3-(3-甲氧基-4-甲基-苯基)丙基]-6-乙氧基-1,3-苯并噻唑-4-甲酸(100mg，产率95.1％)，将其无需进一步纯化用于下一步骤。LC-MS:m/z600.3(M+H)⁺。

步骤S：2-((2S,3R)-2-(环戊基氧基)-3-羟基-3-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丙基)-6-乙氧基苯并[d]噻唑-4-甲酸(化合物101)

向2-[(2S,3R)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-(环戊基氧基)-3-(3-甲氧基-4-甲基-苯基)丙基]-6-乙氧基-1,3-苯并噻唑-4-甲酸(100mg，166.71μmol)在THF(5mL)中的溶液中添加TBAF(1.67mL，1.67mmol)。将混合物在25℃下搅拌1h。将反应混合物用H₂O(30mL)稀释，用EtOAc(30mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过制备型HPLC(柱：Welch Xtimate C18 150*30mm*5μm；流动相A：[水(0.1％ HCOOH)]，流动相B：CH₃CN；梯度：在7min内从55％ B％到85％ B％)纯化以得到2-[(2S,3R)-2-(环戊基氧基)-3-羟基-3-(3-甲氧基-4-甲基-苯基)丙基]-6-乙氧基-1,3-苯并噻唑-4-甲酸(30mg，36.5％产率)。LC-MS:m/z486.1(M+Na)⁺。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ7.74(d,J＝4.0,1H),7.71(d,J＝4.0Hz,1H),7.07(d,J＝8.0Hz,1H),6.98(s,1H),6.88(d,J＝8.0Hz,1H),4.69(d,J＝8.0Hz,1H),4.15(q,J＝8.0Hz,2H),3.98-3.88(m,2H),3.84(s,3H),3.43(d,J＝4.0Hz,2H),2.15(s,3H),1.54-1.40(m,8H),1.38-1.28(m,3H)。

实施例A2

2-((2S,3R)-2-(环戊基氧基)-3-(4-(二氟甲基)-3-甲氧基苯基)-3-羟基丙基)-6-甲氧基苯并[d]

噻唑-4-甲酸(化合物102)

根据对于实施例A1的制备所述的程序(在方案1中的步骤H到步骤P)，通过在步骤H中使用4-溴-3-甲氧基-苯甲醛合成(3S,4R)-4-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(环戊基氧基)丁酸(2-1)。

根据对于实施例A1的制备所述的程序(在方案1中的步骤C至步骤D)，通过在步骤C中使用2-氨基-3-溴-5-甲氧基苯甲酸甲酯合成2-氨基-3-[(2-氨基-3-乙氧基羰基-5-甲氧基-苯基)二硫烷基]-5-甲氧基-苯甲酸乙酯(2-2)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.53(d,J＝3.2Hz,2H),6.88(d,J＝3.2Hz,2H),4.35(q,J＝7.2Hz,4H),3.63(s,6H),1.40(t,J＝7.2Hz,6H)。

步骤A：2-((2S,3R)-3-(4-溴-3-甲氧基苯基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)丙基)-6-甲氧基苯并[d]噻唑-4-甲酸乙酯

向(3S,4R)-4-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(环戊基氧基)丁酸(850mg，1.74mmol)和2-氨基-3-[(2-氨基-3-乙氧基羰基-苯基)二硫烷基]苯甲酸乙酯(789mg，1.74mmol)在甲苯(10mL)中的溶液中添加三丁基膦(1.06g，5.23mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌12h。冷却后，将混合物用H₂O(30mL)淬灭，用EtOAc(30mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱(PE/EtOAc＝10/1)纯化以得到呈黄色油状物的2-[(2S,3R)-3-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-(环戊基氧基)丙基]-6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-4-甲酸乙酯(500mg，42.2％产率)。LC-MS:m/z 680.1(M+H)⁺。

步骤B：2-((2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3-甲氧基-4-乙烯基苯基)丙基)-6-甲氧基苯并[d]噻唑-4-甲酸乙酯

向2-[(2S,3R)-3-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-(环戊基氧基)丙基]-6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-4-甲酸乙酯(330mg，486.19μmol)在H₂O(2mL)和二噁烷(8mL)中的溶液中添加Pd(dppf)Cl₂(36mg，48.62μmol)、乙烯基三氟硼酸钾(130mg，972.38μmol)和Cs₂CO₃(475mg，1.46mmol)。将混合物在80℃下搅拌12h。冷却后，将混合物用H₂O(30mL)稀释，用EtOAc(30mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱(PE/EtOAc＝10/1)纯化以得到2-[(2S,3R)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-(环戊基氧基)-3-(3-甲氧基-4-乙烯基-苯基)丙基]-6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-4-甲酸乙酯(240mg，78.8％产率)。LC-MS:m/z 626.2(M+H)⁺。

步骤C：2-((2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(4-甲酰基-3-甲氧基苯基)丙基)-6-甲氧基苯并[d]噻唑-4-甲酸乙酯

向2-[(2S,3R)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-(环戊基氧基)-3-(3-甲氧基-4-乙烯基-苯基)丙基]-6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-4-甲酸乙酯(200mg，319.55μmol)在THF(3mL)和H₂O(3mL)中的溶液中添加NaIO₄(273mg，1.28mmol)和K₂OsO₄.2H₂O(1mg，1.92μmol)。将反应混合物在25℃下搅拌3h。将混合物用H₂O(30mL)淬灭，用EtOAc(30mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱(PE/EtOAc＝10/1)纯化以得到2-[(2S,3R)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-(环戊基氧基)-3-(4-甲酰基-3-甲氧基-苯基)丙基]-6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-4-甲酸乙酯(150mg，74.7％产率)。LC-MS:m/z 628.3(M+H)⁺。

步骤D：2-((2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(4-(二氟甲基)-3-甲氧基苯基)丙基)-6-甲氧基苯并[d]噻唑-4-甲酸乙酯

在0℃下向2-[(2S,3R)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-(环戊基氧基)-3-(4-甲酰基-3-甲氧基-苯基)丙基]-6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-4-甲酸乙酯(150mg，238.91μmol)在DCM(3mL)中的溶液中添加DAST(192.55mg，1.19mmol)。将混合物在25℃下搅拌12h。将混合物用饱和NaHCO₃水溶液(30mL)淬灭，用DCM(30mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱(PE/EtOAc＝10/1)纯化以得到2-[(2S,3R)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-(环戊基氧基)-3-[4-(二氟甲基)-3-甲氧基-苯基]丙基]-6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-4-甲酸乙酯(70mg，45.1％产率)。LC-MS:m/z 672.2(M+Na)⁺。

根据对于实施例A1的制备所述的程序(在方案1中的步骤R至步骤S)，通过使用2-((2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(4-(二氟甲基)-3-甲氧基苯基)丙基)-6-甲氧基苯并[d]噻唑-4-甲酸乙酯合成2-((2S,3R)-2-(环戊基氧基)-3-(4-(二氟甲基)-3-甲氧基苯基)-3-羟基丙基)-6-甲氧基苯并[d]噻唑-4-甲酸(化合物102)。LC-MS:m/z508.0(M+H)⁺。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ7.75-7.72(m,1H),7.71-7.68(m,1H),7.46(d,J＝8.0Hz,1H),7.16(s,1H),7.09(d,J＝7.8Hz,1H),7.06-6.76(m,1H),6.92(t,J＝55.6Hz,1H),4.74(d,J＝4.0Hz,1H),3.99-3.93(m,2H),3.91(s,3H),3.90(s,3H),3.52-3.39(m,2H),1.58-1.45(m,3H),1.42-1.30(m,5H)。

实施例A3

2-((2S,3R)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)-3-羟基丙基)-6-(羟基甲基)苯并[d]

噻唑-4-甲酸(化合物103)

根据对于实施例A1的制备所述的程序(在方案1中的步骤B至步骤D)，通过在步骤B中使用2-氨基-5-氯-苯甲酸甲酯合成3,3’-二硫烷二基双(2-氨基-5-氯苯甲酸二乙酯)(3-4)。LC-MS:m/z 460.9(M+H)⁺。

根据对于实施例A1的制备所述的程序(方案1中的步骤H至步骤P)，通过在步骤H中使用3,5-二甲氧基-4-甲基苯-1-甲醛合成(3S,4R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(环戊基氧基)-4-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)丁酸(3-5)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ6.51(s,2H),4.71-4.70(m,1H),3.98-3.95(m,1H),3.84-3.77(m,7H),2.60-2.57(m,2H),2.06(s,3H),1.67-1.26(m,8H),0.91(s,9H),0.07(s,3H),-0.11(s,3H)。

根据对于实施例A1的制备所述的程序(在方案1中的步骤Q)，通过在步骤Q中使用3,3'-二硫烷二基双(2-氨基-5-氯苯甲酸二乙酯)(3-4)和(3S,4R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(环戊基氧基)-4-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)丁酸(3-5)合成2-((2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)丙基)-6-氯苯并[d]噻唑-4-甲酸乙酯(3-6)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.96-7.99(m,2H),6.55(s,2H),4.75-4.74(m,1H),4.49-4.44(m,2H),3.94-3.92(m,1H),3.83-3.82(m,7H),3.46-3.35(m,2H),2.05(s,3H),1.51-1.32(m,11H),0.91(s,9H),0.07(s,3H),-0.12(s,3H)。

根据对于实施例A2的制备所述的程序(在方案2中的步骤B至步骤C)，通过使用2-((2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)丙基)-6-氯苯并[d]噻唑-4-甲酸乙酯(3-6)合成2-((2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)丙基)-6-甲酰基苯并[d]噻唑-4-甲酸乙酯(3-8)。LC-MS:m/z 642.2(M+H)⁺。

步骤G：2-((2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)丙基)-6-(羟基甲基)苯并[d]噻唑-4-甲酸乙酯

向2-((2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)丙基)-6-甲酰基苯并[d]噻唑-4-甲酸乙酯(30mg，46.78μmol)在MeOH(1mL)中的溶液中添加NaBH₄(5.30mg，140.21μmol)。将反应混合物在25℃下搅拌3h。然后将混合物用饱和NH₄Cl水溶液(10mL)淬灭，用DCM(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩以得到2-((2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)丙基)-6-(羟基甲基)苯并[d]噻唑-4-甲酸乙酯(20mg，66％产率)。LC-MS:m/z 644.3(M+H)⁺。

根据对于实施例A1的制备所述的程序(在方案1中的步骤S和步骤R)，通过在步骤S中使用2-((2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)丙基)-6-(羟基甲基)苯并[d]噻唑-4-甲酸乙酯(3-9)合成2-((2S,3R)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)-3-羟基丙基)-6-(羟基甲基)苯并[d]噻唑-4-甲酸(化合物103)。LC-MS:m/z 502.3(M+H)⁺。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.05(s,1H),7.94(s,1H),6.64(s,2H),4.75(s,1H),4.61(s,2H),3.97-3.93(m,1H),3.86-3.79(m,1H),3.79(s,6H),3.45-3.43(m,2H),3.30-3.29(m,1H),1.99(s,3H),1.42-1.32(m,8H)。

实施例A4

2-((2S,3R)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)-3-羟基丙基)-6-(甲氧基甲基)苯并

[d]噻唑-4-甲酸(化合物104)

步骤A：5-(溴甲基)-2-硝基苯甲酸甲酯

向5-甲基-2-硝基-苯甲酸甲酯(23.5g，120.41mmol)在CCl₄(200mL)中的溶液中添加AIBN(1.98g，12.04mmol)和NBS(32.15g，180.61mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌16h。冷却后，将反应用H₂O(300mL)稀释，用DCM(300mL x 3)萃取。将合并的有机物在减压下浓缩以得到残余物。将残余物通过柱(PE/EtOAc＝7/1)纯化以得到5-(溴甲基)-2-硝基苯甲酸甲酯(19.12g，38.6％产率)。

步骤B：5-(甲氧基甲基)-2-硝基苯甲酸甲酯

向5-(溴甲基)-2-硝基苯甲酸甲酯(19.12g，69.77mmol)在MeOH(180mL)中的溶液中添加K₂CO₃(9.64g，69.77mmol)。将混合物在80℃下搅拌2h。将反应用H₂O(300mL)稀释，用EtOAc(300mL x 3)萃取。将合并的有机物经无水Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下浓缩以得到残余物。将残余物通过硅胶柱(PE/EtOAc＝5/1)纯化以得到5-(甲氧基甲基)-2-硝基苯甲酸甲酯(10.52g，产率66.9％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.85(d,J＝8.4Hz,1H),7.60(d,J＝1.2Hz,1H),7.51(d,J＝8.4Hz,1H),4.48(s,2H),3.86(s,3H),3.38(s,3H)。

步骤C：2-氨基-5-(甲氧基甲基)苯甲酸甲酯

在N₂下向5-(甲氧基甲基)-2-硝基-苯甲酸甲酯(7.52g，33.39mmol)在EtOAc(100mL)中的溶液中添加10％ Pd/C(2.6g)，并且将混合物脱气并且用N₂吹扫3次。然后将混合物脱气并且用H₂吹扫3次。将混合物在25℃下在H₂(45psi)下搅拌16h。过滤后，将滤液在减压下浓缩以得到残余物。将残余物通过硅胶柱(PE/EtOAc＝6/1)纯化以得到2-氨基-5-(甲氧基甲基)苯甲酸甲酯(5.85g，79.6％产率)。LC-MS:m/z 195.8(M+H)⁺。

根据对于实施例A1的制备所述的程序(在方案1中的步骤B至步骤D)，通过在步骤B中使用2-氨基-5-(甲氧基甲基)苯甲酸甲酯，合成3,3’-二硫烷二基双(2-氨基-5-(甲氧基甲基)苯甲酸二甲酯)(4-7)。LC-MS:m/z 474.8(M+Na)⁺。

根据对于实施例A1的制备所述的程序(在方案1中的步骤Q至步骤S)，通过在步骤Q中使用3,3’-二硫烷二基双(2-氨基-5-(甲氧基甲基)苯甲酸二甲酯)(4-7)和(3S,4R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(环戊基氧基)-4-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)丁酸(3-5)合成2-((2S,3R)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)-3-羟基丙基)-6-(甲氧基甲基)苯并[d]噻唑-4-甲酸(化合物104)。LC-MS:m/z 516.1(M+H)⁺。¹H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.19(d,J＝1.2Hz,1H),8.12(d,J＝1.6Hz,1H),6.67(s,2H),4.69(d,J＝5.6Hz,1H),4.65(s,2H),4.04-3.99(m,1H),3.97-3.90(m,1H),3.83(s,6H),3.53-3.48(m,2H),3.46(s,3H),1.99(s,3H),1.55-1.34(m,8H)。

实施例A5

2-((2S,3R)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)-3-羟基丙基)-6-(甲基氨基)苯并[d]

噻唑-4-甲酸(化合物105)

步骤A：6-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-((2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)丙基)苯并[d]噻唑-4-甲酸乙酯

向2-[(2S,3R)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基-苯基)丙基]-6-氯-1,3-苯并噻唑-4-甲酸乙酯(500mg，771.22μmol)和氨基甲酸叔丁酯(271.04mg，2.31mmol)在甲苯(10mL)中的溶液中添加Pd(dba)₂(44.35mg，77.12μmol)、K₂CO₃(319.76mg，2.31mmol)和S-Phos(63.32mg，154.24μmol)。将混合物在100℃下搅拌16h。将反应混合物通过在0℃下添加H₂O(10mL)淬灭，用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下浓缩以得到残余物。将残余物通过硅胶柱(PE/EtOAc＝100/1至10/1)纯化以得到6-(叔丁氧基羰基氨基)-2-[(2S,3R)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基-苯基)丙基]-1,3-苯并噻唑-4-甲酸乙酯(500mg，88.9％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.46(br s,1H),7.66(d,J＝2.1Hz,1H),6.70(s,1H),6.56(s,2H),4.73(d,J＝4.6Hz,1H),4.48-4.42(m,3H),3.95-3.90(m,1H),3.82(s,6H),3.45-3.40(m,1H),3.31-3.25(m,1H),2.06(s,3H),1.53(s,9H),1.43-1.25(m,10H),1.43-1.24(m,1H),0.91(s,9H),0.07(s,3H),-0.12(s,3H)。

步骤B：6-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-2-((2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)丙基)苯并[d]噻唑-4-甲酸乙酯

向6-(叔丁氧基羰基氨基)-2-[(2S,3R)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基-苯基)丙基]-1,3-苯并噻唑-4-甲酸乙酯(200mg，274.35μmol)在DMF(2mL)中的溶液中添加K₂CO₃(189.58mg，1.37mmol)和MeI(194.70mg，85.40μL)。将混合物在80℃下搅拌12h。冷却后，将反应混合物用H₂O(5mL)稀释，用EtOAc(5mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL x 3)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下浓缩以得到残余物。将残余物通过制备型TLC(SiO₂，PE/EtOAc＝10/1)纯化以得到6-[叔丁氧基羰基(甲基)氨基]-2-[(2S,3R)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基-苯基)丙基]-1,3-苯并噻唑-4-甲酸乙酯(40mg，19.6％产率)。LC-MS:m/z 765.3(M+Na)⁺。

步骤C：2-((2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)丙基)-6-(甲基氨基)苯并[d]噻唑-4-甲酸乙酯

向6-[叔丁氧基羰基(甲基)氨基]-2-[(2S,3R)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基-苯基)丙基]-1,3-苯并噻唑-4-甲酸乙酯(30mg，40.37μmol)在DCM(1mL)中的溶液中添加TFA(29.89μL，400μmol)。将反应混合物在0℃下搅拌0.5h。将反应混合物用H₂O(10mL)稀释，用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩以得到2-((2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)丙基)-6-(甲基氨基)苯并[d]噻唑-4-甲酸乙酯(22.5mg，86.7％产率)，将其无需进一步纯化用于下一步骤。LC-MS:m/z 643.1(M+H)⁺。

步骤D：2-((2S,3R)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)-3-羟基丙基)-6-(甲基氨基)苯并[d]噻唑-4-甲酸乙酯

在0℃下向2-[(2S,3R)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基-苯基)丙基]-6-(甲基氨基)-1,3-苯并噻唑-4-甲酸乙酯(30mg，46.66μmol)在THF(0.5mL)中的溶液中添加TBAF(466.62μL，466.62μmol，在THF中的1M溶液)。将混合物在0℃下搅拌1h。将反应混合物用H₂O(10mL)稀释，并且用EtOAc(10mL x3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩以得到2-[(2S,3R)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基-苯基)-3-羟基-丙基]-6-(甲基氨基)-1,3-苯并噻唑-4-甲酸乙酯(20mg，81.1％产率)，将其无需进一步纯化用于下一步骤。LC-MS:m/z 528.7(M+H)⁺。

步骤E：2-((2S,3R)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)-3-羟基丙基)-6-(甲基氨基)苯并[d]噻唑-4-甲酸(化合物105)

向2-[(2S,3R)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基-苯基)-3-羟基-丙基]-6-(甲基氨基)-1,3-苯并噻唑-4-甲酸乙酯(20mg，37.83μmol)在THF(0.8mL)、MeOH(0.2mL)和H₂O(0.2mL)中的溶液中添加LiOH(4.53mg，189.16μmol)。将混合物在20℃下搅拌1h。将反应混合物用H₂O(10mL)稀释，用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过制备型HPLC(柱：Kromasil100-5-C18；流动相A：水(0.1％ HCOOH)，流动相B：CH₃CN；梯度：在10min内50％ B至90％ B)纯化以得到2-[(2S,3R)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基-苯基)-3-羟基-丙基]-6-(甲基氨基)-1,3-苯并噻唑-4-甲酸(7.92mg，产率41.8％)。LC-MS:m/z 501.3(M+H)⁺。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.57(d,J＝2.3Hz,1H),7.09(d,J＝2.3Hz,1H),6.57(s,2H),4.93(d,J＝4.3Hz,1H),4.02-3.97(m,2H),3.84(s,6H),3.31-3.24(m,1H),3.11(dd,J＝3.5,15.2Hz,1H),2.92(s,3H),2.06(s,3H),1.61-1.40(m,8H)。

实施例A6

2-((2S,3R)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)-3-羟基丙基)-6-(二甲基氨基)苯并

[d]噻唑-4-甲酸(化合物106)

步骤A：6-氨基-2-((2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)丙基)苯并[d]噻唑-4-甲酸乙酯

向6-(叔丁氧基羰基氨基)-2-[(2S,3R)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基-苯基)丙基]-1,3-苯并噻唑-4-甲酸乙酯(100mg，137.17μmol)在DCM(1mL)中的溶液中添加TFA(101.56μL，1.37mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌0.5h。将反应混合物通过添加H₂O(10mL)淬灭，用DCM(10mL x 3)萃取。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下浓缩以得到6-氨基-2-[(2S,3R)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基-苯基)丙基]-1,3-苯并噻唑-4-甲酸乙酯(80mg，92.74％产率)，将其无需进一步纯化用于下一步骤。LC-MS:m/z 629.2(M+H)⁺。

步骤B：2-((2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)丙基)-6-(二甲基氨基)苯并[d]噻唑-4-甲酸乙酯

向6-氨基-2-((2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)丙基)苯并[d]噻唑-4-甲酸乙酯(60mg，95.41μmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加K₂CO₃(39.56mg，286.22μmol)和MeI(23.76μL，381.62μmol)。将反应混合物在80℃下搅拌12h。冷却后，将反应混合物用H₂O(10mL)稀释，用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL x 3)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩以得到2-((2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)丙基)-6-(二甲基氨基)苯并[d]噻唑-4-甲酸乙酯(55mg，87.75％产率)，将其无需进一步纯化用于下一步骤。LC-MS:m/z 657.3(M+H)⁺。

根据对于实施例A5的制备所述的程序(在方案5中的步骤D至步骤E)，通过在步骤D中使用2-((2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)丙基)-6-(二甲基氨基)苯并[d]噻唑-4-甲酸乙酯(6-2)合成2-((2S,3R)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)-3-羟基丙基)-6-(二甲基氨基)苯并[d]噻唑-4-甲酸，实施例A6(化合物106)。LC-MS:m/z 515.3(M+H)⁺。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.73(d,J＝2.7Hz,1H),7.19(d,J＝2.6Hz,1H),6.58(s,2H),4.94(d,J＝4.3Hz,1H),4.03-3.97(m,2H),3.85(s,6H),3.31-3.24(m,1H),3.14-3.09(m,1H),3.08(s,6H),2.07(s,3H),1.56-1.32(m,8H)。

实施例A7

2-((2S,3R)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)-3-羟基丙基)-7-甲氧基苯并[d]噻唑-4-甲酸(化合物107)

步骤A：4-甲氧基-2-特戊酰胺基苯甲酸甲酯

在25℃下向2-氨基-4-甲氧基苯甲酸甲酯(25g，137.98mmol)在DCM(200mL)中的溶液中添加吡啶(22.27mL，275.96mmol)和DMAP(168.57mg，1.38mmol)。然后在0℃下将2,2-二甲基丙酰氯(18.67mL，151.78mmol)逐滴添加到混合物中。将所得混合物在0℃下搅拌2h。将反应混合物用1N HCl溶液(50mL)淬灭，并且用DCM(100mL)稀释。将有机层分离，用1N HCl溶液(40mL)、饱和NaHCO₃水溶液(50mL)和盐水(40mL)洗涤。将有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩以得到粗4-甲氧基-2-特戊酰胺基苯甲酸甲酯(18g，60.9％产率)，将其无需进一步纯化直接用于下一步骤。LC-MS:m/z 266.3(M+H)⁺。

步骤B：3-溴-4-甲氧基-2-特戊酰胺基苯甲酸甲酯

向2-(2,2-二甲基丙酰基氨基)-4-甲氧基-苯甲酸甲酯(36g，135.69mmol)在甲苯(400mL)中的溶液中添加Pd(OAc)₂(6.09g，27.14mmol)、NBS(53.13g，298.53mmol)和4-甲基苯磺酸(46.73g，271.39mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌16h。然后将反应混合物用H₂O(200mL)稀释并且过滤。将滤液用EtOAc(150mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL x3)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱法(80g硅胶快速柱，在65mL/min下的0-15％EtOAc/PE梯度洗脱液)纯化以得到3-溴-2-(2,2-二甲基丙酰基氨基)-4-甲氧基-苯甲酸甲酯(4.8g，10.3％产率)。LC-MS:m/z 344.2(M+H)⁺。

步骤C：2-氨基-3-溴-4-甲氧基苯甲酸甲酯

在0℃下向3-溴-4-甲氧基-2-特戊酰胺基苯甲酸甲酯(4.8g，13.95mmol)在MeOH(2mL)中的溶液中逐滴添加浓H₂SO₄(44.66g，24.27mL)。将反应混合物脱气并且用N₂吹扫3次。将所得混合物在70℃下在N₂气氛下搅拌4h。冷却后，将反应用水(50mL)稀释，用EtOAc(30mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物与PE(10mL)一起研磨，并且将悬浮液通过过滤分离。将滤饼用PE(20mL)洗涤，然后在减压下干燥以得到2-氨基-3-溴-4-甲氧基苯甲酸甲酯(2.4g，66.2％产率)，将其无需进一步纯化直接用于下一步骤。LC-MS:m/z 262.1(M+H)⁺。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.82(d,J＝9.0Hz,1H),6.45(d,J＝9.0Hz,1H),3.87(s,3H),3.79(s,3H)。

根据对于实施例A1的制备所述的程序(在方案1中的步骤B至步骤D)，通过在步骤C中使用2-氨基-3-溴-4-甲氧基苯甲酸甲酯(7-4)合成3,3’-二硫烷二基双(2-氨基-4-甲氧基苯甲酸二乙酯)(7-6)。LC-MS:m/z 474.9(M+Na)⁺。

根据对于实施例A1的制备所述的程序(在方案1中的步骤Q、S和R)，通过在步骤D中使用3,3'-二硫烷二基双(2-氨基-4-甲氧基苯甲酸二乙酯)(7-6)合成2-((2S,3R)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)-3-羟基丙基)-7-甲氧基苯并[d]噻唑-4-甲酸(化合物107)。LC-MS:m/z 502.3(M+H)⁺。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ13.36(brs,1H),8.32(d,J＝8.6Hz,1H),6.95(d,J＝8.4Hz,1H),6.58(s,2H),4.95(d,J＝4.3Hz,1H),4.07(s,3H),4.06-3.98(m,2H),3.85(s,6H),3.39(dd,J＝8.3,15.1Hz,1H),3.21(dd,J＝3.7,15.1Hz,1H),2.06(s,3H),1.59-1.34(m,8H)。

实施例A8

2-((2S,3R)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)-3-羟基丙基)-4-(甲基氨基)吡唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸(化合物108)

根据对于实施例A1的制备所述的程序(在方案1中的步骤H至步骤O)，通过在步骤H中使用3,5-二甲氧基-4-甲基苯-1-甲醛合成(3S,4R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(环戊基氧基)-4-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)丁醛(8-1)。

步骤A：叔丁基(((1R,2S)-2-(环戊基氧基)-1-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)戊-4-炔-1-基)氧基)二甲基硅烷

在0℃下，将1-二唑-1-二甲氧基磷酰基-丙-2-酮(3.8g，19.8mmol)逐滴添加到(3S,4R)-4-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-3-(环戊基氧基)-4-(3,5-二甲氧基-4-甲基-苯基)丁醛(7.2g，16.5mmol)和K₂CO₃(4.56g，33.0mmol)在MeOH(70mL)中的混合物中。将反应混合物在15℃下在氮气下搅拌16h。将混合物在真空下浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱法(220g 硅胶快速柱，在150mL/min下的0-4％ EtOAc/PE梯度洗脱液)纯化以得到叔丁基-[(1R,2S)-2-(环戊基氧基)-1-(3,5-二甲氧基-4-甲基-苯基)戊-4-炔氧基]-二甲基硅烷(3.2g，44.9％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ6.54(s,2H),4.59-4.58(m,1H),3.85 -3.81(m,7H),3.50-3.46(m,1H),2.48-2.46(m,2H),2.07(s,3H),1.97(s,1H),1.46-1.34(m,8H),0.90(s,9H),0.07(s,3H),-0.15(s,3H)。

步骤B：5-氨基-6-碘吡啶甲酸甲酯

向5-氨基吡啶甲酸甲酯(10g，65.7mmol)在DMF(80mL)中的溶液中添加NaIO₄(5.61g，26.2mmol)和I₂(13.4g，52.7mmol。将反应混合物在60℃下搅拌48h。冷却后，向反应混合物中添加10％亚硫酸钠水溶液(100mL)。将所得混合物搅拌10分钟。通过过滤收集晶体。将收集的晶体用水洗涤，在减压下干燥以得到5-氨基-6-碘-吡啶-2-甲酸甲酯(7.84g，42.9％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.88(d,J＝8.2Hz,1H),6.95(d,J＝8.2Hz,1H),4.68(brs,2H),3.93(s,3H)。

步骤C：5-氨基-6-((4S,5R)-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4-(环戊基氧基)-5-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)戊-1-炔-1-基)吡啶甲酸甲酯

向叔丁基-[(1R,2S)-2-(环戊基氧基)-1-(3,5-二甲氧基-4-甲基-苯基)戊-4-炔氧基]-二甲基硅烷(1.71g，3.96mmol)和5-氨基-6-碘-吡啶-2-甲酸甲酯(1g，3.60mmol)在MeCN(40mL)中的溶液中添加Pd(PPh₃)₂Cl₂(252mg，360μmol)、CuI(68.5mg，360μmol)和DIEA(3.13mL，17.95mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌3h。将混合物用水(200mL)稀释，用EtOAc(150mL x 3)萃取。将合并的有机相经无水Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩以得到残余物。将残余物通过快速硅胶色谱法(40g硅胶快速柱，在100mL/min下的0-20％EtOAc/PE梯度洗脱液)纯化以得到5-氨基-6-[(4S,5R)-5-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-4-(环戊基氧基)-5-(3,5-二甲氧基-4-甲基-苯基)戊-1-炔基]吡啶-2-甲酸甲酯(1.77g，84.2％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.88(d,J＝8.6Hz,1H),6.99(d,J＝8.6Hz,1H),6.55(s,2H),4.75(s,2H),4.65(d,J＝6.0Hz,1H),3.93(s,3H),3.87(d,J＝2.8Hz,1H),3.83(s,6H),3.66-3.57(m,1H),2.91-2.81(m,1H),2.80-2.70(m,1H),2.08(s,3H),1.73-1.63(m,2H),1.52-1.30(m,6H),0.91(s,9H),0.08(s,3H),-0.13(s,3H)。

步骤D：4-氨基-2-((2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)丙基)吡唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸甲酯

将((均三甲苯基磺酰基)氧基)氨基甲酸叔丁酯(946mg，3mmol)和TFA(5mL)的混合物在0℃下搅拌1h。将混合物倒入冰冷的水(150mL)中，用DCM(20mL x 2)萃取。在25℃下将合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥、过滤并且将滤液逐滴添加到5-氨基-6-[(4S,5R)-5-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-4-(环戊基氧基)-5-(3,5-二甲氧基-4-甲基-苯基)戊-1-炔基]吡啶-2-甲酸甲酯(0.96g，1.65mmol)在DCM(20mL)中的溶液中。将所得混合物在25℃下搅拌15h。将反应混合物用饱和NaHCO₃水溶液(150mL)淬灭。将有机层分离，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩以得到残余物。将残余物通过快速硅胶色谱法(20g硅胶快速柱，在80mL/min下的0-20％-40％ EtOAc/PE梯度洗脱液)纯化以得到4-氨基-2-[(2S,3R)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基-苯基)丙基]吡唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸甲酯(168mg，17.1％产率)。LC-MS:m/z 598.8(M+H)⁺。

步骤E：2-((2S,3R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)丙基)-4-(甲基氨基)吡唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸甲酯

向4-氨基-2-[(2S,3R)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基-苯基)丙基]吡唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸甲酯(84mg，141μmol)在DMF(2mL)中的溶液中添加K₂CO₃(58.3mg，422μmol)和MeI(70.0μL，1.12mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌12h。冷却后，将混合物用水(30mL)稀释，用EtOAc(30mL x 4)萃取。将合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩以得到残余物。将残余物通过快速硅胶色谱法(4g 硅胶快速柱，在100mL/min下的0-20％ EtOAc/PE梯度洗脱液)纯化以得到2-[(2S,3R)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基-苯基)丙基]-4-(甲基氨基)吡唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸甲酯(20mg，23.3％产率)。LC-MS:m/z 634.0(M+Na)⁺。

步骤F：2-((2S,3R)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基苯基)-3-羟基丙基)-4-(甲基氨基)吡唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸

向2-[(2S,3R)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基-苯基)丙基]-4-(甲基氨基)吡唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸甲酯(20mg，32.7μmol)在THF(2mL)、MeOH(5mL)和H₂O(2mL)中的溶液中添加NaOH(261mg，6.54mmol)。将反应混合物在60℃下搅拌12h。在真空下去除溶剂。将残余物用水(5mL)稀释，用6N HCl酸化至pH＝4-5。将混合物用EtOAc(30mL x 3)萃取。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并且在真空下浓缩以得到残余物。将残余物通过制备型HPLC(柱：Kromasil100-5-C18；流动相A：水(0.1％HCOOH)，流动相B：CH₃CN；梯度：在8min内50％ B至80％ B)纯化以得到2-[(2S,3R)-2-(环戊基氧基)-3-(3,5-二甲氧基-4-甲基-苯基)-3-羟基-丙基]-4-(甲基氨基)吡唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸(2.33mg，14.52％产率)。LC-MS:m/z 484.3(M+H)⁺。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ7.76(d,J＝8.2Hz,1H),6.71(s,1H),6.64(s,2H),6.24(d,J＝8.2Hz,1H),4.61-4.58(m,2H),3.87-3.74(m,8H),3.22-3.14(m,1H),3.07-3.01(m,1H),3.00(s,3H),1.99(s,3H),1.46 -1.24(m,8H)。

表1中的化合物可以或已经使用上述实施例中所述的类似程序使用合适的起始材料合成。某些化合物的数据如下表所示。某些化合物的纯化条件如下。

化合物102的制备型HPLC分离条件：色谱柱：Welch Xtimate C18 150*30mm*5μm；流动相A：水(0.1％ HCOOH)，流动相B：CH₃CN；梯度：在7min内57％ B至87％B。

化合物103的制备型HPLC分离条件：色谱柱：Kromasil 100-5-C18；流动相A：水(0.1％ HCOOH)，流动相B：CH₃CN；梯度：在10min内50％ B至80％ B。

化合物104的制备型HPLC分离条件：色谱柱：Welch Xtimate C18 150*30mm*5μm；流动相A：水(0.01％ NH₃H₂O+10mM NH₄HCO₃)，流动相B：CH₃CN；梯度：在9min内20％ B至50％B。

化合物106的制备型HPLC分离条件：色谱柱：Kromasil 100-5-C18；流动相A：水(0.1％ HCOOH)，流动相B：CH₃CN；梯度：在10min内50％ B至90％ B。

化合物107的制备型HPLC分离条件：色谱柱：Kromasil 100-5-C18；流动相A：水(0.1％ HCOOH)，流动相B：CH₃CN；梯度：在10min内50％ B至85％ B。

化合物109的制备型HPLC分离条件：色谱柱：Kromasil 100-5-C18；流动相A：水(0.1％ CF3COOH)，流动相B：CH₃CN；梯度：在10min内50％ B至90％ B。

化合物110的制备型HPLC分离条件：色谱柱：Kromasil 100-5-C18；流动相A：水(0.1％ HCOOH)，流动相B：CH₃CN；梯度：在9min内55％ B至95％ B。

化合物111的制备型HPLC分离条件：色谱柱：Boston Green ODS(150*30mm*5μm)；流动相A：水(0.225％ HCOOH)，流动相B：CH₃CN；梯度：在8min内60％ B至90％ B。

化合物112的制备型HPLC分离条件：色谱柱：Phenomenex Gemini-NX C18 75*30mm*3μm；流动相A：水(0.225％ HCOOH)，流动相B：CH₃CN；梯度：在8min内63％B至93％ B。

化合物113的制备型HPLC分离条件：色谱柱：Kromasil 100-5-C18；流动相A：水(0.1％ HCOOH)，流动相B：CH₃CN；梯度：在10min内55％ B至100％ B。

化合物114的制备型HPLC分离条件：色谱柱：DAICEL CHIRALPAK IF(250mm*30mm*10μm)；流动相A：水(0.1％ NH₃H₂O)，流动相B：EtOH；梯度：在8min内20％ B至20％ B。

生物学测定

体外LPA1功能拮抗剂测定

在测试之前，将过表达人LPA1的CHO-K1细胞以总体积20μL接种到黑壁、透明底、多聚-D-赖氨酸包被的384孔微板上并且在37℃下孵育适当时间。在由在HBSS/20mM Hepes中的1x染料、1x添加剂A和2.5mM丙磺舒组成的1x染料加载缓冲液中进行测定。丙磺舒是新鲜制备的。在测试之前，将细胞与染料一起加载。从细胞抽出培养基并且用20μL染料加载缓冲液替代。将细胞在37℃下孵育30-60分钟。染料加载后，将细胞从培养箱中取出并且添加10μL 3X测试化合物。将细胞在室温下在黑暗中孵育30分钟以平衡板温度，然后进行0.018μM的油酰基LPA激发。在FLIPR Tetra(MDS)上测量化合物拮抗剂活性。监测钙动员2分钟并且测定5秒后将10μL在HBSS/20mM Hepes中的油酰基LPA添加到细胞。使用CBIS数据分析套件(ChemInnovation，加利福尼亚州)分析化合物活性。使用以下公式计算百分比抑制：

抑制％＝100％x(1-(测试样品的平均RFU-媒介物对照的平均RFU)/(LPA对照的平均RFU-媒介物对照的平均RFU))。

体外LPA1钙通量拮抗剂测定

将过表达人LPA1和G15a的CHO-K1细胞以总体积20μL(15000个细胞/孔)接种到基质胶预包被的384孔板(corning-3764)中并且在37℃下孵育。孵育过夜后，将细胞血清饥饿4h。在含有在HBSS/20mM Hepes中的1x Fluo-8 AM(AAT Bioquest，21080)和2.5mM丙磺舒(Thermo Fisher，36400)的染料加载缓冲液中进行测定。细胞饥饿后，用20μL染料加载缓冲液代替培养基，并且在37℃下孵育30min。然后将5μL在染料加载缓冲液中滴定的5X化合物添加到细胞，并且孵育30min，随后在EC80下通过LPA进行激发。在FLIPR Tetra(MDS)上测量钙动员。对于LPA EC80测定，将饥饿的细胞与20μL染料加载缓冲液一起孵育1h，然后将5μL在染料加载缓冲液中滴定的5X化合物添加到细胞。在FLIPR上监测由LPA诱导的钙信号。

使用以下公式计算百分比抑制：

抑制％＝100％x(1-(测试样品的平均RFU-DMSO的平均RFU)/(LPA对照的平均RFU-DMSO的平均RFU))。

表B1示出了在体外LPA1钙离子通量拮抗剂测定中化合物的生物活性。测试化合物的活性提供于下表B1中，如下：+++＝IC₅₀<10nM；++＝IC₅₀ 10nM-100nM；+＝IC₅₀>100nM。

表B1

体内研究

在小鼠中的药代动力学测量

在单次口服(5mg/kg)施用后，在CD1雌性小鼠中测量所选化合物的PK特性。

将化合物103和104分别以1mg/mL在10％ Solutol HS15和90％生理盐水的溶液中制备，以用于以5mL/kg口服施用，并且被施用于3只小鼠/3组。给药后，在0.25、0.5、1、2、4、6、8、24h通过跖背静脉取样进行血液采集，随后离心以获得血浆。在化合物萃取和LC-MS/MS分析之前，样品在-80℃下冷冻保存。在小鼠中的化合物103和104药代动力学参数通过标准非房室模型从全身血浆浓度-时间曲线计算。

表B2示出了通过非房室模型确定的化合物103和104在小鼠(CD1；雌性)中的平均药代动力学参数。

表B2

在大鼠中的药代动力学测量

在SD雄性大鼠中在单次口服(5mg/kg)和静脉内施用(1mg/kg)后测量所选化合物的PK特性。

将化合物103和104分别以1mg/mL在10％ Solutol HS15和90％生理盐水的溶液中制备，以用于以5mL/kg口服施用；以及以0.2mg/mL在10％ Solutol HS15和90％生理盐水的溶液中制备，以用于以1mL/kg静脉内施用，并且施用于每组3只大鼠。给药后，分别在0.25、0.5、1、2、4、6、8、24h以及在0.083、0.25、0.5，1、2，4、8、24h，通过颈静脉取样(通过插管)进行血液采集，随后离心以获得血浆。在化合物萃取和LC-MS/MS分析之前，样品在-80℃下冷冻保存。在大鼠中的化合物103和104的药代动力学参数通过标准非房室模型从全身血浆浓度-时间曲线计算。

表B3示出了通过非房室模型确定的化合物103和104在大鼠(SD；雄性)中的平均药代动力学参数。

表B3

Claims

1.一种选自表1的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

2.一种选自表2的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

3.一种药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求1或2所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物以及药学上可接受的载体。

4.一种用于治疗LPA相关疾病、障碍或病症的方法，所述方法包括向有需要的患者施用有效量的根据权利要求1或2所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或根据权利要求3所述的药物组合物。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述LPA相关疾病、障碍或病症是LPA₁相关疾病。

6.根据权利要求4或5所述的方法，其中所述LPA相关疾病、障碍或病症是纤维化、移植排斥、癌症、骨质疏松症或炎性障碍。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述纤维化是肺纤维化、肝纤维化、肾脏纤维化、心脏纤维化、皮肤纤维化、眼纤维化或胰腺纤维化。

8.根据权利要求6所述的方法，其中所述癌症是膀胱、血液、骨骼、脑、乳腺、中枢神经系统、子宫颈、结肠、子宫内膜、食管、胆囊、生殖器、泌尿生殖道、头、肾、喉、肝、肺、肌肉组织、颈、口腔粘膜或鼻粘膜、卵巢、胰腺、前列腺、皮肤、脾、小肠、大肠、胃、睾丸或甲状腺的癌症。

9.根据权利要求4或5所述的方法，其中所述LPA相关疾病、障碍或病症是特发性肺纤维化(IPF)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、慢性肾脏病、糖尿病肾病、系统性硬化病、COVID-19、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、神经炎症或多发性硬化。