HK1237679B

HK1237679B - Fibroin-derived protein composition

Info

Publication number: HK1237679B
Application number: HK17112069.2A
Authority: HK
Inventors: Brian D. Lawrence; David W. INFANGER
Original assignee: Silk Technologies Ltd.
Priority date: 2014-08-20
Filing date: 2015-08-20
Publication date: 2021-01-29

Claims

Composition protéique dérivée de fibroïne qui possède une stabilité accrue en solution aqueuse, dans laquelle :
les séquences d'acides aminés primaires de la composition protéique dérivée de fibroïne diffèrent de la fibroïne endogène d'au moins 4 % par rapport à la teneur combinée en acides aminés de sérine, glycine et alanine ;

les liaisons disulfure au niveau des cystéines entre les chaînes protéiques lourde et légère de la fibroïne sont réduites ou éliminées ;

la composition comprend plus de 46,5 % d'acides aminés glycine et plus de 30 % d'acides aminés alanine ;

la composition a une teneur en sérine qui est réduite de plus de 40 % par comparaison à la protéine de fibroïne endogène de telle sorte que la composition comprend moins de 8 % d'acides aminés sérine ; et

dans laquelle la masse moléculaire moyenne de la composition protéique dérivée de fibroïne est inférieure à environ 100 kDa.
Composition protéique selon la revendication 1, dans laquelle la composition protéique a une viscosité aqueuse de moins de 4 mPa•s (4 cP) en tant que solution à 10 % p/p dans l'eau.
Composition protéique selon la revendication 1, dans laquelle la composition protéique a une viscosité aqueuse de moins de 10 mPa•s (10 cP) en tant que solution à 24 % p/p dans l'eau.
Composition protéique selon la revendication 1, dans laquelle la composition protéique est soluble dans l'eau à 40 % p/p sans précipitation.
Composition protéique selon la revendication 1, dans laquelle la composition protéique ne gélifie pas lors de l'ultrasonication d'une solution aqueuse de la composition protéique à des concentrations jusqu'à 10 % p/p.
Composition protéique selon l'une quelconque des revendications 1-5, dans laquelle la composition protéique comprend moins de 6 % de résidus d'acides aminés sérine.
Composition protéique selon l'une quelconque des revendications 1-5, dans laquelle la composition protéique comprend plus de 48 % d'acides aminés glycine.
Composition protéique selon l'une quelconque des revendications 1-5, dans laquelle la composition protéique comprend plus de 31,5 % d'acides aminés alanine.
Composition protéique selon l'une quelconque des revendications 1-5, dans laquelle la composition protéique se redissout complètement dans l'eau après avoir été séchée en un film mince ; ou dans laquelle la composition protéique est dépourvue de structure protéique en feuillet bêta en solution aqueuse ; ou dans laquelle la composition protéique conserve une absorbance optique en solution aqueuse inférieure à 0,25 à 550 nm après au moins 5 secondes d'ultrasonication.
Composition protéique selon l'une quelconque des revendications 1-5 en combinaison avec de l'eau, dans laquelle la composition protéique se dissout complètement dans l'eau à une concentration de 40 % p/p.
Composition protéique dérivée de fibroïne selon l'une quelconque des revendications 1-5, dans laquelle les séquences d'acides aminés primaires de la composition protéique dérivée de fibroïne diffèrent de la fibroïne endogène par au moins 6 % par rapport aux différences combinées de teneur en sérine, glycine et alanine ; la masse moléculaire moyenne de la protéine dérivée de fibroïne est inférieure à environ 100 kDa et supérieure à environ 30 kDa ; et la composition protéique dérivée de fibroïne conserve une absorbance optique à 550 nm de moins de 0,25 pendant au moins deux heures après 5 secondes d'ultrasonication.
Composition protéique selon l'une quelconque des revendications 1-11 pouvant être obtenue par un procédé comprenant :
chauffer une solution de fibroïne aqueuse à une pression élevée,

dans laquelle la solution de fibroïne aqueuse comprend du bromure de lithium à une concentration d'au moins 8 M, et

dans laquelle la solution de fibroïne aqueuse est chauffée à au moins environ 105°C (221°F) sous une pression d'au moins environ 68,95 kPa (10 PSI) pendant au moins environ 20 minutes ;

pour fournir la composition protéique,

dans laquelle la composition protéique comprend moins de 8,5 % de résidus d'acides aminés sérine et la composition protéique a une viscosité aqueuse de moins de 5 mPa•s (5 cP) en tant que solution à 10 % p/p dans l'eau ; et
dans laquelle la composition protéique comprend des chaînes de peptides qui se terminent en groupes amide (-C(=O)NH₂).
Procédé pour préparer une composition protéique selon l'une quelconque des revendications 1-11, le procédé comprenant :
chauffer une solution de fibroïne aqueuse à une pression élevée,

dans laquelle la solution de fibroïne aqueuse comprend du bromure de lithium à une concentration d'au moins 8 M, et

dans laquelle la solution de fibroïne aqueuse est chauffée à au moins environ 105°C (221°F) sous une pression d'au moins environ 68,95 kPa (10 PSI) pendant au moins environ 20 minutes ;

pour fournir la composition protéique, dans laquelle la composition protéique comprend moins de 8,5 % de résidus d'acides aminés sérine et la composition protéique a une viscosité aqueuse de moins de 5 mPa•s (5 cP) en tant que solution à 10 % p/p dans l'eau.
Procédé selon la revendication 13, dans lequel la composition protéique comprend des chaînes de peptides qui se terminent en groupes amide (-C(=O)NH₂).
Composition alimentaire ou de boisson ou formulation de gouttes ophtalmiques comprenant la composition protéique selon la revendication 1, ou composition protéique préparée par le procédé selon la revendication 13, et un composant alimentaire ou de boissons ou un composant de formulation de gouttes ophtalmiques.