HK1145708B - Peptide-lipid constructs and their use in diagnostic and therapeutic applications - Google Patents

Claims (16)

1. Verfahren zum Detektieren von reaktivem Antikörper im Serum eines Subjekts, das folgende Schritte einschließt:

   • Kontaktieren einer Probe des Serums mit einer Suspension von Zellen, die modifiziert ist, ein wasserlösliches Peptid-Lipidkonstrukt der Struktur (L-S-) _iF(-S-L)_j zu inkorporieren, um eine Mischung bereitzustellen;

   • Inkubieren der Mischung für eine Zeit und bei einer Temperatur, die ausreicht, Agglutination zu ermöglichen; und

   • Bestimmen des Grads der Agglutination der Zellen in der Mischung;

   wobei:

   F ein Peptid ist, das ein Epitop für den reaktiven Antikörper umfasst;

   S ein Oligomer von Ethylenglykol ist, das

   F kovalent an L bindet; und

   L ein Glycerophospholipid ist; und

   i und j unabhängig 0 oder 1 sind und die Summe von i und j 1 ist.
2. Verfahren nach Anspruch 1, wobei das Verfahren den Zwischenschritt des Hinzufügens eines Anti-Subjekt-Globulin-Antikörpers vor dem Bestimmen des Grades der Agglutination der Zellen der Mischung einschließt.
3. Verfahren nach Anspruch 1 oder Anspruch 2, wobei das Verfahren den folgenden vorläufigen Schritt einschließt:

   • Hinzufügen einer Menge des Peptids zur Serumprobe;

   wobei die Menge des Peptids ausreicht nicht spezifische Agglutination zu neutralisieren oder Spezifität des reaktiven Antikörpers zu bestätigen.
4. Verfahren nach einem beliebigen der Ansprüche 1 bis 3, wobei das Subjekt ein Mensch ist.
5. Verfahren nach einem beliebigen der Ansprüche 1 bis 4, wobei die Zellen rote Blutzellen sind.
6. Verfahren nach Anspruch 5, wobei die Struktur des Peptid-Lipidkonstrukts ist: wobei M ein monovalentes Kation (M⁺) ist, n 6 bis 14 ist, w 1 oder 2 ist, die Summe von x und y größer als 5 und * anders als H ist.
7. Verfahren nach Anspruch 6, wobei die terminale Sequenz des Peptids aus der Gruppe selektiert wurde, die aus Folgendem besteht:
8. Verfahren nach Anspruch 7, wobei F ein Peptid ist, das aus der Gruppe selektiert wurde, die aus Folgendem besteht:
9. Verfahren nach einem beliebigen der Ansprüche 6 bis 8, wobei der reaktive Antikörper auf ein Antigen reagiert, das aus der Gruppe selektiert wurde, aus Folgendem besteht: Glycophorin A, Glycophorin B oder Mutationen davon.
10. Verfahren nach Anspruch 5, wobei die Struktur des Peptid-Lipidkonstrukts ist: wobei M ein monovalentes Kation (M⁺) ist, n 6 bis 14 ist, z größer als 5 und * anders als H ist.
11. Verfahren nach Anspruch 10, wobei F ein Peptid ist, das aus der Gruppe selektiert wurde, die aus Folgendem besteht:

    (Xaa) _{z 7} ValMetTyrAlaSerSerGly.
12. Verfahren nach Anspruch 11, wobei die terminale Sequenz des Peptids ((Xaa)_{z_7}) aus der Gruppe selektiert wurde, die aus Folgendem besteht:

    SerLysLysLysLysGly

    AlaAlaAlaAla

    GlySerGlySerGly
13. Verfahren nach Anspruch 12. wobei F ein Peptid ((Xaa)z) ist, das aus der Gruppe selektiert wurde, die aus Folgendem besteht:

    SerLysLysLysLysGlyValMetTyrAlaSerSerGly

    AlaAlaAlaAlaValMetTyrAlaSerSerGly

    GlySerGlySerGlyValMetTyrAlaSerSerGly
14. Verfahren nach einem beliebigen der Ansprüche 6 bis 13, wobei n 6 ist.
15. Verfahren nach einem beliebigen der Ansprüche 1 bis 14, wobei das Glycerophospholipid 1, 2-0-Dioleoyl-s/i-Glycero-3-Phosphatidylethanolamin (DOPE) oder 1,2-0-Distearyl-sn-Glycero-3-Phosphatidylethanolamin (DSPE) ist.
16. Suspension menschlicher roter Blutzellen zur Verwendung im Verfahren nach einem beliebigen der Ansprüche 1 bis 15, wobei die Zellen modifiziert worden sind, um ein Peptid-Lipidkonstrukt, wie in einem beliebigen der Ansprüche 6 bis 15 definiert, zu inkorporieren.