FR3140174A1 - Procédé de détection de punaises de lit - Google Patents

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Isabelle Lacaze
Olivier Ramalho
Mélanie NICOLAS
Enric ROBINE
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Centre Scientifique et Technique du Batiment CSTB
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Abstract

Procédé de détection de punaises de lit La présente invention a pour objet un procédé de détection de punaises de lit dans un local, caractérisé par le fait qu’il comprend les étapes consistant à : - sélectionner un groupe de composés organiques volatils (COV) cibles ; - construire avec le groupe de composés organiques volatils cibles un arbre de décision en fonction de la corrélation entre le composé organique volatil et la présence de punaises de lits ; et - prélever l’air dans au moins un emplacement déterminé d’un local; - extraire les composés organiques volatils du groupe de composés organiques volatils présents dans l’air prélevé ; et - parcourir l’arbre de décision en fonction des concentrations des composés organiques volatils présents dans l’air prélevé pour en déduire l’absence ou la présence de punaises de lit dans le local. Figure à publier avec l’abrégé : Figure 1

Description

Procédé de détection de punaises de lit
La présente invention concerne le domaine technique de la détection d’insectes nuisibles et porte sur un procédé de détection de punaises de lit, en particulier dans des locaux (logements ou environnements intérieurs).
Les punaises de lit sont des insectes hématophages ectoparasites de l’homme en constante recrudescence depuis la fin des années 90 dans les pays industrialisés. La résurgence de cet insecte nuisible est observable sur tous les continents, y compris en France. La multiplication des déplacements nationaux et internationaux des personnes et la résistance des punaises de lit aux principaux insecticides autorisés expliquent en partie l’augmentation du nombre de nouveaux foyers d’infestation.
De tels insectes piqueurs/suceurs sont souvent vecteurs de maladies, même si aucune maladie à transmission vectorielle incriminant spécifiquement la punaise de lit n’a été à ce jour décrite. Pour autant, les conséquences, qu’elles soient allergiques ou psychologiques, peuvent nécessiter une prise en charge médicale.
La plupart des environnements intérieurs occupés par l’homme peuvent être concernés par la punaise de lit : l’habitat, l’hôtellerie, les transports, les cinémas, les établissements de santé…
Le traitement pour se débarrasser des punaises de lit peut être onéreux et le budget à y consacrer est difficilement prévisible.
Les techniques de détection et de surveillance usuelles de la présence de ces insectes nuisibles, complexes et onéreuses, reposent sur une inspection visuelle approfondie basée sur la recherche des insectes et de leurs déjections par un expert et, dans une moindre mesure, la détection canine. Cette dernière approche donne de très bons résultats dus à la très bonne capacité de détection olfactive des chiens. Cependant, la disponibilité d’animaux entraînés quotidiennement avec un seul maître référent et leur capacité à se concentrer sur des durées importantes ne permettent pas d’envisager une massification de la pratique.
Dans ce contexte, la détection précoce et/ou la surveillance post-remédiation des punaises de lit constituent un enjeu majeur.
Le Demandeur développe depuis de nombreuses années des indices basés sur la présence/absence de composés organiques volatils dans l’air spécifiques d’agents biologiques nuisibles pour les bâtiments, les biens et/ou les personnes. Ceux-ci permettent de diagnostiquer précocement des infestations d’origine fongique ou entomologique non détectées/détectables visuellement, comme la présence de moisissures, de la mérule ou encore d’insectes. Ces outils sont complémentaires des techniques usuelles de détection basées essentiellement sur une inspection visuelle par un expert. Ces précédents indices reposent sur un calcul qui prend en compte la présence/absence de cibles chimiques volatiles avec ou sans pondération. De telles techniques sont par exemple décrites dans les demandes de brevets français FR3075964, FR2913501 et FR3028043.
Ainsi, bien que la punaise de lit soit un agent biologique majeur, aucun indice, en particulier chimique, n’a pu être développé à ce jour, ou alors avec des résultats peu probants.
La diversité des composés organiques volatils émis par les punaises de lit rend une analyse exhaustive, coûteuse et complexe.
La présente invention a donc pour objet un procédé de détection de punaises de lit dans un local, caractérisé par le fait qu’il comprend les étapes consistant à :
- sélectionner un groupe de composés organiques volatils (COV) cibles ;
- construire avec le groupe de composés organiques volatils cibles un arbre de décision en fonction de la corrélation entre chaque composé organique volatil du groupe de composés organiques volatils cibles et la présence de punaises de lits, les entrées de l’arbre de décision construit étant des composés organiques discriminants représentant un sous-groupe des composés organiques cibles ; et, pour chaque détection de punaises de lit dans un local:
- prélever l’air dans au moins un emplacement déterminé du local ;
- extraire les composés organiques volatils du groupe de composés organiques volatils présents dans l’air prélevé ; et
- parcourir l’arbre de décision en fonction des concentrations des composés organiques volatils discriminants présents dans l’air prélevé pour en déduire l’absence ou la présence de punaises de lit dans le local.
Les feuilles de l’arbre de décision correspondent chacune soit à la présence, soit à l’absence de punaises de lit, de telle sorte que le parcours de l’arbre de décision avec les concentrations des composés organiques volatils discriminants trouvées permet de conclure à la présence ou à l’absence de punaises de lit à l’issue du parcours de l’arbre de décision.
Le procédé de la présente invention, l’arbre de décision étant construit une fois pour toutes, est donc parcimonieux en ce qu’il permet d’analyser dans l’air prélevé uniquement les composés organiques volatils discriminants du groupe de composés organiques volatils cibles, ce qui réduit la complexité et le coût d’analyse, pour obtenir un résultat de détection fiable. L’arbre de décision est établi une seule fois et servira pour détecter l’absence ou la présence de punaises de lit dans tout local. Autrement dit, l’arbre de décision est indépendant du local pour lequel on souhaite détecter l’absence ou la présence de punaises de lit.
En outre, contrairement aux techniques antérieures (examen visuel, détection canine), le procédé de l’invention est peu invasif, puisqu’un simple prélèvement d’air dans le local suffit, avec une très bonne probabilité de détection de la présence de punaises de lit et pas assujetti à la variabilité des opérateurs et à leur niveau d’expertise.
Le local peut être tout local quel que soit son usage (à usage d’habitation (privée, habitation collective, hôtellerie), à usage d’enseignement, à usage de bureau, à usage professionnel, à usage commercial, à usage de loisirs (cinéma, salles de spectacle), etc.) et peut être, de manière préférée, une pièce de sommeil ou une pièce adjacente à la pièce de sommeil.
Selon un mode de réalisation, la sélection du groupe de composés organiques volatils cibles comprend les étapes consistant à :
  1. prélever et identifier les composés organiques volatils présents dans au moins un environnement d’élevage, la présence de punaises de lit et leur stade de développement dans ledit au moins un environnement d’élevage étant connus ;
  2. prélever et identifier les composés organiques volatils (COV) présents dans au moins un local d’étalonnage, la présence ou l’absence de punaises de lit dans ledit au moins un local d’étalonnage étant connue.
La sélection du groupe de composés organiques volatils cibles est donc rendue robuste, dans un premier temps, par une analyse des composés organiques volatils présents dans un environnement d’élevage, en laboratoire, puis dans un local d’étalonnage, notamment dans des locaux, ce qui permet d’établir la corrélation entre la présence ou l’absence de punaises de lit et la présence d’un composé organique volatil dans le groupe de composés organiques cibles. Cette seconde étape est en général effectuée sur un panel de locaux ayant une bonne représentativité statistique, par exemple sur un panel d’une centaine de locaux.
Selon un mode de réalisation, à l’étape A, les différents stades de développement sont : œufs, larves et adultes.
Selon un mode de réalisation, les composés organiques discriminants sont choisis parmi la 6-méthyl-5-heptén-2-one (6-MHO), le 1-hexanol, le (2E)-octénal, le disulfure de diméthyle (DMDS), la E-géranylacétone, la 2-pentanone, le 3-méthyl-butanal, l’acétophénone, l’hexanal, le nonanal, le décanal, facultativement parmi le benzaldéhyde, le benzyl acétate, l’hexane, le 2-n-butylfurane, le (2E, 4Z)-octadiénal, la 3-(N-méthyl-2-pyrrolidinyl)pyridine, le (2E)-buténal, l’acétone, le phénylméthanol, le 3-méthyl-2-buténal, le (2E, 4E)-heptadiénal.
Selon un mode de réalisation, l’arbre de décision est construit par un algorithme CART (arbre de classification et de régression, acronyme de l’anglais Classification And Regression Tree) en utilisant comme variables les composés organiques volatils (COV) cibles et comme critère de segmentation l’indice de diversité de Gini (défini par exemple ici : https://www.insee.fr/fr/metadonnees/definition/c1551), par sélection successive des variables prises une à une et séparant le mieux l’échantillon par rapport à la présence ou à l’absence de punaises de lit, en testant les points de coupure possibles pour chaque variable et en sélectionnant le seuil de coupure qui rend maximal le critère de segmentation, avec à chaque niveau de l’arbre un indice moyen de Gini G qui comptabilise la perte d’informations associée à un composé organique volatil j (COVj) et un seuil de coupure c :
avec :
: nombre de locaux pour lesquels les valeurs de Xj<c du COVj
: nombre de locaux pour lesquels les valeurs de Xj≥c du COVj
: fréquence de la i-ème modalité de la variable à prédire (modalité 0 pour absence et modalité 1 pour présence de punaises de lit) pour les locaux vérifiant Xj<c du COVj
: fréquence de la i-ème modalité de la variable à prédire (modalité 0 pour absence et modalité 1 pour présence de punaises de lit) pour les locaux vérifiant Xj≥c du COVj,
M : le nombre de modalités à prédire qui est de 2 (modalité 0 – absence et modalité 1 – présence de punaises de lit)
n : le nombre total de locaux,
puis on mesure l’indice d’amélioration associé à chaque division par le calcul de J :
avec , fidésignant la fréquence de la i-ème modalité de la variable binaire associée à la présence/absence de punaises de lit, déterminée au niveau du nœud parent (avant division) et M le nombre de modalités à prédire, le composé organique volatil ayant la valeur de J la plus élevée étant retenu pour la division correspondante de l’arbre avec sa valeur de seuil c associée.
Selon un mode de réalisation, l’effectif de segmentation minimum du nœud est fixé à 5, le nombre maximal de niveau de l’arbre est 10, le seuil de spécialisation ou critère d’arrêt est 1, l’effectif d’admissibilité est 1 local d’étalonnage, et l’arbre est sans élagage.
Selon un mode de réalisation, le prélèvement d’air est réalisé sur un adsorbant thermodésorbable, de préférence du Tenax®TA, avec un volume de prélèvement compris entre 9 et 15 litres d’air, ce qui correspond à une durée de 1 heure à un débit de 150 à 250 mL/min, de préférence 10 litres d’air.
Selon un mode de réalisation, les composés organiques volatils sont piégés sur un tube contenant l’adsorbant lors du prélèvement et sont analysés par une technique de thermodésorption – chromatographie en phase gazeuse – spectromètre de masse (TD-GC-MS). Des adsorbants adaptés à une technique de désorption par solvant pourraient être utilisés en adaptant toutefois le volume de prélèvement de façon à obtenir les mêmes performances en termes de limite de détection des COV cibles que la thermodésorption.
Selon un mode de réalisation, l’air est prélevé dans le local, d’étalonnage ou à diagnostiquer, typiquement dans une pièce de sommeil ou une pièce immédiatement adjacente suspectée d’abriter des punaises de lit.
La présente invention se distingue donc de l’état de la technique par un coût moins élevé, une plus grande répétabilité, un caractère moins intrusif. Il n’était pas évident pour l’homme du métier, connaissant les techniques de détection de composés organiques volatils appliquées à la détection d’autres insectes, que la détection de composés organiques volatils pourrait permettre la détection de punaises de lit. En outre, les procédés de l’état antérieur de la technique ont été transposés aux punaises de lit, mais ont conduit à une complexité de calcul plus importante que n’a pas l’arbre de décision selon la présente invention, ce qui rend le procédé de la présente invention plus immédiatement applicable et moins onéreux.
Le procédé de détection selon la présente invention peut être utilisé dans un objectif de diagnostic de la présence ou non de punaises de lit et/ou dans un objectif de surveillance de la présence ou non de punaises de lit après un traitement.
Le Demandeur a donc inventé un procédé de détection innovant utilisant des traceurs chimiques volatils spécifiques des punaises de lit. Selon un mode de réalisation particulier, le prélèvement d’air réalisé dans un local est analysé, de préférence par une technique d’analyse chimique TD-GC-MS, afin de déterminer la concentration de composés organiques volatils (COV) cibles. Puis, une analyse statistique, de préférence par arbre de décision binaire utilisant l’algorithme CART, permet de déterminer si une infestation par des punaises de lit est en cours ou non.
Pour mieux illustrer l’objet de la présente invention, un mode de réalisation préféré de l’invention va maintenant être décrit, en référence au dessin annexé. Sur ce dessin :
est un arbre de décision binaire obtenu selon le procédé de la présente invention.
Le procédé de l’invention va maintenant être décrit plus en détail dans ses différentes phases.
A titre d’exemple, dans une première phase du procédé, l’empreinte chimique de punaises de lit est caractérisée in vitro en laboratoire, plus précisément dans un environnement d’élevage en laboratoire. Les composés organiques volatils présents dans au moins un environnement d’élevage sont prélevés et identifiés, la présence de punaises de lit et leur stade de développement dans ledit au moins un environnement d’élevage étant connus.
Un effectif connu de punaises de lit (Cimex lectularius) à différents stades de leur développement (œufs, larves et adultes) est ainsi placé dans un insectarium adapté à la collecte des émissions de COV dans l’air, appelé également chambre d’émission statique. Des prélèvements d’air sur tubes adsorbants suivis d’une analyse par thermodésorption – chromatographie en phase gazeuse – spectromètre de masse (TD-GC-MS) permettent ensuite de caractériser ces émissions.
L’espèceCimex lectulariusutilisée dans les expériences est sensible aux insecticides. L’élevage des punaises est réalisé en flacons en polypropylène contenant un papier-filtre Whatman®plié en accordéon. Ce support permet aux punaises de s’agréger et/ou de se cacher. Le bouchon est doté d’une toile synthétique à mailles fines, qui laisse passer l’air et permet le nourrissage des insectes. Les punaises sont incubées à 24°C, à une humidité relative de 60 % et une photopériode 12 h/12 h leur est imposée. Les punaises sont « gorgées » artificiellement avec du sang d’origine humaine et préalablement chauffé (37°C), au travers d’une membrane polymère (Parafilm®) deux fois par semaine. Dans ces conditions, le cycle de développement complet (de l’œuf au stade adulte) est d’environ 1 mois. Les punaises sont triées (œufs, larves et adultes femelles et mâles), extemporanément, avant leur mise en chambre d’émission statique.
Pendant la durée des expériences (3, 7 et/ou 14 jours) en chambre d’émission statique, les conditions thermohydriques sont les suivantes : température de 22 ± 2 °C, humidité relative d’environ 50% et photopériode naturelle.
Les COV produits au cours de la vie en chambre de collecte des émissions des punaises de lit sont prélevés sur des tubes adsorbants.
Le prélèvement de l’air est actif, réalisé à l’aide d’une pompe à débit massique. Le débit de prélèvement est fixé à 100 ml/min et le temps de prélèvement est suffisant pour renouveler à minima trente fois le volume de la chambre de 300 ml. Les tubes sont ensuite analysés par TD-GC-MS.
Les prélèvements d’air sont réalisés sur deux types de tubes différents, présentés dans le Tableau 1 :
Référence du tube Nature des adsorbants Gamme de COV identifiables (nombre d’atomes de carbone)
TTA Tenax ® TA C6~C26
MIXTES Carbosieve ® SIII C2~C4
Tenax ® TA C6~C26
Les tubes TTA contiennent uniquement du Tenax®TA, qui est l’adsorbant présentant une large gamme de composés identifiables (C6~ C26). L’association d’adsorbants dans les tubes MIXTES, qui contiennent la même quantité de Tenax®TA que les tubes TTA, permet d’élargir cette gamme (C2~ C26) en intégrant les composés organiques très volatils grâce à la présence de Carbosieve®SIII.
L’analyse des COV collectés sur les différents adsorbants est réalisée par chromatographie suivant trois phases :
1) Extraction par thermodésorption des composés adsorbés sur les tubes de collecte (TD)
2) Séparation des composés par Chromatographie Gazeuse (GC)
3) Identification des composés par Spectrométrie de Masse (MS)
La chaîne analytique utilisée est une chaîne Perkin Elmer®comprenant un thermodésorbeur automatique (Turbomatrix®650), un chromatographe gazeux (Clarus®580) équipé d’une colonne capillaire, ainsi qu’un spectromètre de masse (Clarus®SQ8S).
Les composés sont identifiés par comparaison de leur spectre de masse avec ceux d’étalons disponibles dans la bibliothèque internationale NIST (2012) de spectres de masse.
La quantification de chaque composé est effectuée par rapport à leur propre facteur de réponse (à savoir, quantification spécifique) ou par rapport au facteur de réponse du toluène (à savoir, quantification relative en équivalent toluène). La quantification spécifique implique la réalisation de gammes d’étalonnage dédiées pour chaque composé considéré.
Les conditions analytiques appliquées sont conformes aux normes :
- NF EN ISO 16000-6 (2012) : Air intérieur - Partie 6 : dosage des composés organiques volatils dans l'air intérieur des locaux et chambres d'essai par échantillonnage actif sur le sorbant Tenax TA®, désorption thermique, et chromatographie en phase gazeuse utilisant MS ou MS/FID (AFNOR 2012)
- NF EN 16516 (2017) : Produits de construction : évaluation de l'émission de substances dangereuses - Détermination des émissions dans l'air intérieur (AFNOR 2017).
Les paramètres de la méthode d’analyse TD-GC-MS générique employée pour l’analyse des COV sont les suivants :
  • Extraction par thermo-désorption (TD) :
Désorption du tube : 280°C pendant 20 minutes à un débit de 50 mL/min d’azote
Division d’entrée (inlet split) = 0 mL/min
Température du piège (Tenax TA®) lors de la désorption : -30°C
Température du piège lors de l’injection : de - 30 à 280°C avec une rampe de 40 °C.s-1puis maintien à 280 °C pendant 10 min
Température de la ligne de transfert et de vanne d’injection : 210°C
Injection dans la colonne, Division de sortie : 7 mL/min
  • Chromatographie en phase gazeuse (GC) :
Gaz vecteur : Hélium
Colonne capillaire : Elite 5 ms 60 m x 0,25 mm x 1 μm (5% diphényl diméthylpolysiloxane) (Perkin Elmer)
Programme de températures : de 0 min à 5 min, température de 40°C ; puis à partir de 5 min, rampe de température de 2,5 °C / min jusqu’à 170 °C ; puis à compter de 73 min, rampe de température de 7,5 °C/min jusqu’à 300 °C ; maintenue pendant 26,34 min.
Durée de l’analyse : 100 minutes
  • Spectrométrie de masse (MS):
Mode d’ionisation : impact électronique (El+), balayage complet de 33 à 550 m/z.
Un travail bibliographique préalable permet d’établir une liste de composés cibles traceurs potentiels deCimex lectularius: acétone, propanal, 2-butanone, diméthyl disulfure, (2E)-hexénal, hexanal, benzaldéhyde, alcool benzylique, heptanal, (2E,4Z)-octadiénal, (2E,4E)-octadiénal, 6-méthyl-5-heptèn-2-one, (2E)-octénal, octanal, D-limonène, nonanal, acétate de benzyle, décanal, undécanal, (E)-géranylacétone, (Z)-géranylacétone.
A partir des étalons standards de ces composés (lorsqu’ils étaient disponibles), un étalonnage spécifique est réalisé afin de (i), disposer du temps de rétention et du spectre de masse du composé dans les conditions analytiques utilisées dans les conditions de laboratoire de cette première phase et ainsi pouvoir confirmer son identification et (ii), déterminer son facteur de réponse analytique propre permettant de le quantifier spécifiquement. Cet étalonnage permet également de définir les limites de détection et de quantification de chaque composé.
Quatre expériences (PS, S1, S2 et S3) sont alors réalisées en laboratoire, pour caractériser exhaustivement les émissions de COV au regard du stade de développement des insectes (œufs, larves et adultes), après différents temps d’incubation et en piégeant les émissions générées sur deux différents types de tubes adsorbants, la première expérience (PS) permettant de mettre en évidence les émissions de composés volatils par un effectif mixte réduit constitué de larves et d’adultes. Les expériences sont indiquées dans le Tableau 2 suivant, représentant le bilan des expériences réalisées précisant les effectifs d’insectes, la nature des adsorbants utilisés pour collecter les émissions COV et la durée des incubations en chambres avant collecte.
Chambre Contenu de la chambre Différentes expériences
PS S1 S2 S3
1 Papier Filtre (PF) X X X X
2 PF + œufs - Effectif : 110 - -
3 PF+ larves gorgées de stade 1 à 5 - - - Effectif : 100
4 PF + Adultes femelles et mâles - Effectif : 25 femelles+25 mâles Effectif : 25 femelles+25 mâles Effectif : 25 femelles+25 mâles
5 PF + Déjections provenant de la chambre 4 - X X X
6 PF + Adultes (A) et larves (L) Effectif : 13A+5L - - -
Type de tube
TTA X X X
MIXTES X X X
Prélèvement réalisé après 3 et 14 jours 7 jours 7 jours 7 jours
L’identification des émissions de COV par les punaises de lit issus des prélèvements réalisés dans les chambres de collecte est organisée en deux phases : une première phase de recherche systématique des COV issus de la bibliographie indiquée ci-dessus et quantifiés de manière spécifique, et une deuxième phase de recherche d’autres COV traceurs potentiels des punaises de lit, par identification individuelle de chaque pic et quantification en équivalent toluène.
Les pics correspondant à des composés détectés uniquement en présence de punaises de lit sont sélectionnés et identifiés sur les chromatogrammes obtenus par comparaison de leur temps de rétention et analyse de leur spectre de masse par rapport à ceux disponibles notamment dans la bibliothèque internationale (NIST).
Une synthèse des résultats est présentée ci-dessous.
Les prélèvements réalisés dans les chambres d’émission statique contenant le même effectif d’insectes adultes, dans les différentes séries, ne conduisent pas systématiquement aux mêmes COV identifiés et/ou quantifiés dans des proportions équivalentes. Ces écarts peuvent s’expliquer par l’hétérogénéité du matériel biologique employé dans les différentes expériences qui n’est jamais tout à fait dans le même état physiologique, malgré la rigueur mise en œuvre dans la reproductibilité de la méthode.
La série S1 permet d’étudier les émissions de COV des adultes, des œufs et des déjections. Globalement, lorsque des COV sont identifiés chez les adultes en quantités significatives (supérieure à 1 ng/tube dans les conditions d’essai), ils sont systématiquement identifiés chez les œufs et/ou pour les déjections mais en quantité relative plus faible. Cependant, cette tendance n’est pas observée pour deux molécules (2-butanone et hexane) qui sont retrouvées en quantités significativement plus importantes dans la chambre contenant des œufs. Concernant les déjections, il faut noter la persistance de deux traceurs spécifiques des punaises de lit, le (2E)-hexénal et le (2E)-octénal, dont les quantités restent significatives (~500 ng/tube) même en l’absence d’insectes.
Les résultats obtenus sur les tubes TTA et MIXTES sont qualitativement identiques, les mêmes COV sont identifiés (série S2 après 15 jours de vie en chambre des punaises de lit). Même si l’information quantitative diffère selon la nature de l’adsorbant, celle-ci reste toujours supérieure aux limites de quantification.
Comme dans le cas des déjections, les COV présents chez les adultes sont fréquemment retrouvés chez les larves en quantité moindre. La quantité de (2E)-hexénal chez les larves est drastiquement abaissée alors que la quantité de (2E)-octénal est quasiment identique, pour un effectif de 50 adultes ou 100 larves dans les chambres d’émission statique. Le (2E)-octénal est décrit comme une phéromone d’alarme, de défense et d’agrégation, d’où sa production par les stades larvaires et adulte.
Les expériences réalisées dans cette approche laboratoire permettent de caractériser l’empreinte chimique volatile deCimex lectulariusavec une méthodologie d’échantillonnage employant différents adsorbants, couplée à une méthode d’analyse par TD/GC/MS. Au total, 45 COV sont identifiés dont 21 déjà décrits dans la littérature. Cette approche permet d’identifier 26 nouvelles molécules, contribuant ainsi à une caractérisation plus complète de l’empreinte chimique volatile deCimex lectularius: acétone, propanal, acide acétique, 2-butanone, butanal, 2-pentanone, pentanal, 3-méthyl-butanal, hexane, 3-méthyl-2-buténal, phénol, diméthyl disulfure, (2E,4E)-hexadiénal, (2E)-hexénal, 3-hexénal, hexanal, (2E)-hexén-1-ol, benzaldéhyde, alcool benzylique, (2E,4E)-heptadiénal, heptanal, 2-heptanone, 1-hexanol, acétophénone, (2E,4Z)-octadiénal, (2E,4E)-octadiénal, 2-n-butyl furane, 6-méthyl-5-heptène-2-one, (2E)-octénal, 1-nonène, diméthyl trisulfure, octanal, 2-éthyl-1-hexanol, d-limonène, nonanal, 2-nonèn-1-ol, 1-nonanol, acétate de benzyle, décanal, dihydromyrcénol, 2-décen-1-ol, undécanal, E-géranylacétone, Z-géranylacétone, et 2,4,4-triméthyl-3-(3-méthylbutyl)cyclohex-2-enone.
La quantification de ces COV traceurs des punaises de lit met en évidence une large gamme de valeurs allant de 1 ng (voire en deçà, soit au niveau de la limite de détection) à près de 2000 ng détectés dans les tubes de prélèvement.
Les COV identifiés comme spécifiques des insectes dans cette première phase de laboratoire peuvent également potentiellement provenir d’autres sources dans les environnements intérieurs : les émissions par d’autres insectes, des micro-organismes, des produits de construction et de décoration, des produits d’entretien... Ces autres sources potentielles, qui peuvent avoir ou non des origines biologiques, sont appelées facteurs de confusion.
Ainsi, chez les insectes, le (E)-2-hexénal a été identifié chez deux espèces de blattes,Blatta orientalisetPeriplanata americana(Brossut, R, 1983, « Allomonal Secretions in Cockroaches » (Sécrétions allomonales chez les blattes), Journal of Chemical Ecology 9 (1): 143‑58, https://doi.org/10.1007/BF00987778 ; Krivosheina, G. G., et K. S. Shatov, 1995, « Functions of the cockroach (Blattidae) sternal gland » (Fonctions de la glande sternale de la blatte (Blattidae))), qui sont des insectes nuisibles que l’on peut retrouver dans les environnements intérieurs. De plus, le (E)-2-octénal est un COV que l’on peut retrouver chez certains champignons (Lacaze, Isabelle, 2016, « Etude des mécanismes de colonisation des produits de construction par les micromycètes », Université Paris Diderot - Paris 7) qui peuvent également être des contaminants retrouvés dans les espaces clos.
Pour aller plus loin, une recherche des deux substances les plus emblématiques émises par les punaises de lit que sont le (2E)-hexénal et le (2E)-octénal a été réalisée dans la base de données PANDORE (comPilAtioN of inDOor aiR pollutAnt emissions (compilation d’émissions de polluants d’air intérieur), Abadie MO., Blondeau P (2011): PANDORA database: A compilation of indoor air pollutant emissions (Base de données PANDORA : Une compilation des émissions de polluants de l'air intérieur), HVAC&R Research, 17:4, 602-613). La base de données comprend les paramètres d’émissions spécifiques en COV et particules de 599 produits à usage domestique et matériaux, provenant d’une revue de la littérature couvrant la période 1982-2014.
Au terme de cette première phase de laboratoire, et après étude des facteurs de confusion potentiels indiqués ci-dessus, les COV sont catégorisés afin de rendre compte de leur pertinence. Les catégories sont définies comme suit :
• Catégorie 1 : COV spécifiques des punaises de lit, d’après la littérature et/ou les expériences réalisées dans cette première phase, ayant possiblement une autre origine que celle des punaises mais rarement observés dans les logements et de ce fait pertinents : acétone, 2-butanone, 2-pentanone, diméthyl disulfure, (2E)-hexénal, 3-hexénal, hexanal, (2E)-hexén-1-ol, benzaldéhyde, heptanal, 1-hexanol, (2E,4Z)-octadiénal, (2E,4E)-octadiénal, 2-n-butyl furane, (2E)-octénal, diméthyl trisulfure, octanal, nonanal, 2-nonèn-1-ol, décanal ;
• Catégorie 2 : COV spécifiques des punaises de lit d’après les expériences réalisées dans cette première phase, mais à ce jour non décrits dans la littérature et pouvant possiblement avoir une autre origine que celle des punaises. Ces COV sont moyennement observés en général dans les logements et présentent donc une pertinence relative : 3-méthyl-2-buténal, (2E,4E)-hexadiénal, (2E,4E)-heptadiénal, 2-heptanone, 1-nonanol, et 2,4,4-triméthyl-3-(3-méthylbutyl)cyclohex-2-enone ;
• Catégories 3 : COV ubiquitaires retrouvés très fréquemment dans les logements français et provenant quasi systématiquement d’une autre origine que celle des punaises de lit : butanal, pentanal, 3-méthyl-butanal, hexane, acétophénone, 2-éthyl-1-hexanol, dihydromyrcénol.
Plus un COV est fréquemment retrouvé dans les logements, plus sa pertinence au regard des punaises de lit peut être remise en question. Ainsi, seize substances sont détectées systématiquement, cinq substances sont très souvent détectées (plus de 40 % du temps) et six substances sont moins souvent détectées (entre 1 % et 9 % du temps).
L’acétone est fortement associée au métabolisme humain et donc à la présence des occupants. Il n’est donc pas considéré comme une cible spécifique aux punaises de lits car les facteurs de confusion sont nombreux. De même, le propanal n’est pas systématiquement recherché car mesuré selon la même voie analytique que l’acétone, mais il est en général observé à des concentrations élevées aussi bien en environnement intérieur qu’en extérieur. Il n’est de ce fait pas considéré non plus comme spécifique des punaises de lits.
Seuls 18 COV ne sont jamais détectés dans des logements neufs. Parmi ces COV, 8 sont des substances identifiées dans la bibliographie et 10 sont considérées pertinentes à l’issue de la phase expérimentale. Les COV à la fois pertinents du point de vue expérimental et préalablement observés dans d’autres études sont au nombre de quatre, il s’agit des composés suivants : (2E)-hexénal, (2E)-octénal et des 2 isomères de l’octadiénal (2E,4Z) et (2E,4E).
Les autres COV non spécifiques aux punaises de lit peuvent néanmoins s’avérer utiles pour la gestion des facteurs de confusion.
Dans une deuxième phase du procédé, les composés organiques volatils (COV) présents dans au moins un local d’étalonnage (un panel statistiquement représentatif de locaux habités) sont prélevés et identifiés, la présence ou l’absence de punaises de lit dans ces locaux d’étalonnage étant connue. La société Demanderesse a effectué cette phase sur un panel de 102 locaux.
Dans cette deuxième phase, la méthodologie d’échantillonnage active employée repose sur l’emploi de deux types de tubes de prélèvements (TTA et MIXTES) associé à la méthodologie d’analyse présentée et déployée dans la première phase du procédé. Cette deuxième phase permet de valider la liste des COV retenue lors de la première phase.
Dans les conditions environnementales réalistes, les cibles (2E)-hexénal et (2E)-octénal sont retrouvées dans les locaux infestés ou anciennement infestés. Cependant, le (2E)-hexénal n’est jamais détecté dans des locaux non infestés par des punaises de lit et il est quantifié en spécifique à des masses comprises entre 1 et 24 ng dans les locaux infestés ou anciennement infestés. Ce n’est pas le cas du (2E)-octénal qui est détecté ou non que l’infestation soit inexistante, en cours ou passée, à des quantités très variables comprises entre 0,02 ng et 60 ng.
Les molécules suivantes : (2E,2Z)-octadiénal, (2E,2E)-octadiénal, 3-hexénal, (2E)-hexén-1-ol, 1-nonanol, diméthyl trisulfure ainsi que le 2,4,4-triéthyl-1-hexène, ne sont pas identifiées dans les locaux, que ceux-ci soient non infestés, anciennement infestés ou infestés. Ces cibles, pourtant détectées dans la première phase du procédé, ne sont pas donc retrouvées au cours de la deuxième phase du procédé et ne sont donc pas retenues.
L’ensemble des autres molécules est identifié à des concentrations variables.
Dans cette deuxième phase du procédé, les cibles distinguées pertinentes au terme de la première phase sont à nouveau classées en trois catégories en vue d’élaborer en fonction de leur pertinence pour une infestation de punaises de lit :
• A : cible pertinente : 3-méthyl-2-buténal, diméthyl disulfure, (2E,4E)-hexadiénal, (2E)-hexénal, alcool benzylique, (2E,4E)-heptadiénal, 2-n-butyl furane, (2E)-octénal, undécanal, Z-géranylacétone, E-géranylacétone ;
• B : cible potentiellement pertinente : 2-pentanone, 2-heptanone ;
• C : cible optionnelle, à ne pas exclure, potentiellement pertinente : 3-hexénal, (2E)-hexén-1-ol, (2E,4Z)-octadiénal, (2E,4E)-octadiénal, diméthyl trisulfure, et 2,4,4-triméthyl-3-(3-méthylbutyl)cyclohex-2-enone.
Cette classification prend en compte les résultats obtenus sur tubes TTA, qui apporte une information qualitative sensiblement plus importante que les tubes MIXTES.
Une analyse statistique des données est ensuite effectuée.
A l’issue des deux premières phases, on aboutit à une liste de 40 COV cibles, les COV n’étant jamais rencontrés en situation réelle étant éliminés.
Un modèle prédictif est ensuite construit, en utilisant un arbre de classification CART alimenté en données d’entrée par les données de concentration des 40 COV (variables continues) cibles mesurées dans 102 locaux parmi lesquels certains sont infestés. C’est un modèle parcimonieux qui va sélectionner les variables les plus pertinentes.
Le processus de construction du modèle se fait par la sélection successive des variables prises une à une et séparant le mieux l’échantillon au regard de la variable à prédire (variable binaire de présence/absence des punaises de lit). Ce processus de binarisation permet d’établir un arbre de décision, avec à chaque niveau une variable sélectionnée permettant la meilleure séparation des observations, jusqu’à n’obtenir que des nœuds terminaux les plus purs (composés uniquement soit d’observations de cas d’absences ou soit d’observations de présences de punaises de lits).
Le critère de sélection des variables à chaque niveau est basé sur l’indice de Gini en testant tous les points de coupures possibles à chaque variable et en déduisant un seuil de coupure optimal qui maximise le critère de segmentation.
A chaque niveau de l’arbre, correspond un indice moyen de Gini G qui comptabilise la perte d’information associée à un COV j et un seuil de coupure c :
Avec :
: nombre de locaux pour lesquels les valeurs de Xj<c du COVj
: nombre de locaux pour lesquels les valeurs de Xj≥c du COVj
: fréquence de la i-ème modalité de la variable à prédire (modalité 0 pour absence et modalité 1 pour présence de punaises de lit) pour les locaux vérifiant Xj<c du COVj
: fréquence de la i-ème modalité de la variable à prédire (modalité 0 pour absence et modalité 1 pour présence de punaises de lit) pour les locaux vérifiant Xj≥c du COVj,
M : le nombre de modalités à prédire qui est de 2 (modalité 0 – absence et modalité 1 – présence de punaises de lit)
n : le nombre total de locaux,
L’objectif du modèle est de minimiser la perte d’information à chaque division de l’arbre et donc que la valeur G(j,c) soit la plus faible possible. A cette valeur optimale G(j*,c*), va donc correspondre la variable optimale j* (donc le COV le plus pertinent) et un seuil de coupure optimal c* (valeur de concentration optimale).
On mesure ensuite l’indice d’amélioration (gain) associé à chaque division par le calcul de J :
avec ,
où fidésigne la fréquence de la i-ème modalité de la variable binaire associée à la présence/absence de punaises de lit, déterminée au niveau du nœud parent (avant division) et M le nombre de modalités à prédire.
Cet indice d’amélioration J varie typiquement entre 0,5 (gain maximal pour une distribution initiale en deux modalités à 50/50) et 0 (aucun gain).
L’impact de chaque COV et paramètre du modèle est donné à chaque division par cet indice d’amélioration J. Le COV présentant la valeur d’impact la plus haute à chaque division est retenu dans le modèle. Il est dit actif.
A l’échelle de l’arbre, chaque COV se voit attribuer une valeur d’impact global qui représente la moyenne pondérée de l’impact sur chaque segmentation, en donnant moins d’importance aux parties basses de l’arbre. Un COV peut avoir un impact global élevé tout en restant inactif (le COV n’a jamais été retenu pour une division donnée, il est très souvent arrivé en deuxième ou troisième position par exemple).
Les autres paramètres du modèle ont été fixés comme suit pour établir les critères d’arrêt de la segmentation :
Effectif minimum de segmentation du nœud : 5 (pas de segmentation pour un nœud de 4 locaux ou moins)
Nombre maximum de niveau de l’arbre fixé à 10
Seuil de spécialisation ou critère d’arrêt : 1
Effectif d'admissibilité : 1 local
Pas d’élagage de l’arbre
L’arbre final retenu illustré en .
L’impact global de chaque COV est donné dans le Tableau 3 suivant. Les COV listés en gras sont ceux qui interviennent directement dans l’arbre de décision, à savoir les COV dits discriminants. Les autres COV, comme le 3-méthyl-2-buténal sont dit inactifs. Ils peuvent parfois être bien positionnés mais sont surclassés par d’autres COV.
Le COV qui présente le plus d’impact globalement est un COV inactif, le décanal. Bien que bien positionné dans les premières segmentations, il a été surclassé par le 6-MHO pour le premier nœud, il est en 6èmeposition dans le deuxième nœud, en troisième dans le troisième nœud et en concurrence égale avec l’hexanal pour le nœud 11.
[Tableau 3] : Impact global de chaque COV et paramètre dans le modèle CART (en gras COV actif)
Variable Impact global Nœud(s) associé(s)
Décanal 0,0164 3, 8
6-MHO (6-méthyl-5-heptèn-2-one) 0,0159 1, 12
Nonanal 0,0143 23
E-géranylacétone 0,0130 7
3-méthyl-2-buténal 0,0125
Octanal 0,0122
Heptanal 0,0118
Hexanal 0,0118 11
(2E)-Octénal 0,0117 2, 6
D-limonène 0,0101
Dihydromyrcénol 0,0096
(2E,4E)-hexadiénal 0,0086
Acétate de benzyle 0,0072
(2E)-buténal 0,0070
DMDS (diméthyl disulfure) 0,0069 5
(2E)-hexénal 0,0066
2-pentanone 0,0063 10
Nicotine 0,0062
2-heptanone 0,0060
(2E,4E)-heptadiénal 0,0057
Acétophénone 0,0057 19
Pyridine 0,0056
1-hexanol* 0,0055
Benzaldéhyde 0,0055
2-n-butyl furane 0,0054
Propanal 0,0051
Undécanal 0,0051
2-butanone 0,0049
Alcool benzylique 0,0049
Acétone 0,0047
2-éthyl-1-hexanol 0,0046
(2E,4E)-octadiénal 0,0040
(2E,4Z)-octadiénal 0,0037
Pentanal 0,0033
3-méthyl-butanal 0,0030
Hexane 0,0029
Z-géranylacétone 0,0027
2-nonèn-1-ol 0,0025
Butanal 0,0025
1-Nonanol 0,0024
Le Tableau 4 suivant liste les COV actifs par nœud ainsi que le ou les concurrents directs avec une valeur d’impact inférieure. En gras sont représentés les COV actifs retenus (COV discriminants) ou les COV concurrents qui présentent une valeur d’impact identique. Un COV concurrent (avec son propre seuil de coupure) peut donc être aussi performant que le COV actif retenu. Un COV suppléant présente par contre un impact local inférieur au COV actif, qui se traduirait par une dégradation des performances du modèle.
[Tableau 4] : Impact des COV actif à chaque nœud de segmentation et premiers concurrents
Nœud COV actif Impact local Concurrents/suppléants Impact local
1 6-MHO 0.1531 Décanal 0.129
2 (2E)-octénal 0,0309 Nicotine 0,0294
3 Décanal 0,0436 E-2-buténal 0,0402
5 DMDS 0,0423 E-géranyl acétone 0,0377
6 (2E)-octénal 0,0245 6 COV 0,0224
7 E-géranylacétone 0,0487 Acétophénone 0,0316
8 Décanal 0,018 2 COV 0,018
10 2-Pentanone 0,018 Benzaldéhyde 0,009
11 Hexanal 0,0339 2 COV 0,0339
12 6-MHO 0,0294 5 COV 0,0163
19 Acétophénone 0,0191 (2E,4E)-heptadiénal 0,0093
23 Nonanal 0,0092 3-méthyl-butanal 0,0092
Par exemple pour le nœud 8, le décanal, COV actif, présente la même valeur d’impact que deux autres COV concurrents qui sont le 1-hexanol et l’acétophénone. De même, pour le nœud 11, l’impact local de l’hexanal est le même que deux autres COV, le nonanal et le décanal. Le 3-méthyl-butanal est un COV concurrent du nonanal au niveau du nœud 23.
Pour le nœud 6, le (2E)-octénal a été retenu comme COV actif avec une valeur d’impact à 0,0245. Mais six autres COV sont des suppléants avec une valeur d’impact plus faible (benzaldéhyde, acétate de benzyle, E-géranylacétone, 2-n-butylfurane, (2E,4Z)-octadiénal, hexane). Ceci signifie que l’un de ces COV pourrait éventuellement se substituer au (2E)-octénal (s’il n’est pas disponible) en dégradant un peu le modèle.
Pour le nœud 12, les cinq COV suppléants sont acétone, alcool benzylique, E-géranylacétone, 3-méthyl-2-buténal et DMDS.
Les COV retenus pour l’application du modèle sont les neuf COV et leurs seuils de coupure retenus avec l’impact local le plus élevé à chaque division.
Les COV inactifs à concurrence égale peuvent supplanter au besoin un COV actif pour les nœuds correspondants. L’utilisation de COV inactifs suppléants n’est pas conseillée.
Un arbre équivalent peut donc être construit en supplantant par exemple le nonanal (seuil > 13,65 µg/m3) par le 3-méthyl-butanal (seuil ≤ 0,02 µg/m3) au niveau du nœud 23. Les deux arbres aboutissent exactement à la même classification des observations.
A titre comparatif, en prenant les indices définis ci-dessous respectivement 2H2O, 2HZGA et 2H2P comme indices d’infestation sur un panel de 41 locaux infestés, similairement à ce qui existe pour d’autres agents biologiques nuisibles, la société Demanderesse a obtenu une valeur prédictive de présence de punaises de lit, respectivement de 46%, 31% et 36%, ce qui est clairement insuffisant :
- Indice 2H2O (valeur 0, 1 ou 2) : une limite de détection (LD) analytique du 2-hexénal (2H) de 0,005 μg/m3pour un volume de prélèvement de 12 L est définie : si 2H < LD (0,005 μg/m3) alors 2H2O=0, et si 2H ≥ LD, alors si le ratio (2E)-octénal/(2E)-hexénal < 2, alors 2H2O=1, si le ratio (2E)-octénal/(2E)-hexénal ≥ 2, alors 2H2O=2.
- Indice 2H2P (valeur 0, 1 ou 2) : une limite de détection (LD) analytique du 2-hexénal (2H) de 0,005 μg/m3pour un volume de prélèvement de 12 L est définie : si 2H < LD (0,005 μg/m3) alors 2H2P=0, et si 2H ≥ LD, alors si le ratio 2-octénal/2-pentanone < 4, alors 2H2P=1, si le ratio 2-octénal/2-pentanone ≥ 4, alors 2H2P=2.
- Indice 2HZGA (valeur 0, 1 ou 2) : une limite de détection (LD) analytique du 2-hexénal (2H) de 0,005 μg/m3pour un volume de prélèvement de 12 L est définie : si 2H < LD (0,005 μg/m3) alors 2HZGA=0, et si 2H ≥ LD, alors si la concentration de la Z-géranyl-acétone < 0,05 μg/m3, 2HZGA=1 et si la concentration de la Z-géranyl-acétone ≥ 0,05 μg/m3, 2HZGA=2.
L’arbre de décision selon la présente invention, construit comme détaillé ci-dessus et appliqué sur un panel indépendant de 41 locaux, permet quant à lui de détecter à 93% qu’un local est infesté. De même, un diagnostic négatif par l’arbre de décision s’avère vrai à 95%. Avec un impact intrusif minime, un coût de mise en œuvre simple, puisque l’arbre de décision n’est construit qu’une fois pour toutes et peut par la suite être utilisé sur tous les prélèvements effectués dans des locaux, on obtient donc de manière surprenante une excellente prédiction, par l’opération préalable de choix des COV utilisés pour construire l’arbre de décision.

Claims (9)

  1. Procédé de détection de punaises de lit dans un local, caractérisé par le fait qu’il comprend les étapes consistant à :
    - sélectionner un groupe de composés organiques volatils (COV) cibles ;
    - construire avec le groupe de composés organiques volatils cibles un arbre de décision en fonction de la corrélation entre chaque composé organique volatil du groupe de composés organiques volatils cibles et la présence de punaises de lits, les entrées de l’arbre de décision construit étant des composés organiques discriminants représentant un sous-groupe des composés organiques cibles ; et, pour chaque détection de punaises de lit dans un local :
    - prélever l’air dans au moins un emplacement déterminé du local ;
    - extraire les composés organiques volatils du groupe de composés organiques volatils présents dans l’air prélevé ; et
    - parcourir l’arbre de décision en fonction des concentrations des composés organiques volatils discriminants présents dans l’air prélevé pour en déduire l’absence ou la présence de punaises de lit dans le local.
  2. Procédé selon la revendication 1, dans lequel la sélection du groupe de composés organiques volatils cibles comprend les étapes consistant à :
    A - prélever et identifier les composés organiques volatils présents dans au moins un environnement d’élevage, la présence de punaises de lit et leur stade de développement dans ledit au moins un environnement d’élevage étant connus ;
    B - prélever et identifier les composés organiques volatils (COV) présents dans au moins un local d’étalonnage, la présence ou l’absence de punaises de lit dans ledit au moins un local d’étalonnage étant connue.
  3. Procédé selon la revendication 2, caractérisé par le fait que, à l’étape A, les stades de développement sont œufs, larves et adultes.
  4. Procédé selon l’une des revendications 1 à 3, caractérisé par le fait que les composés organiques discriminants sont choisis parmi la 6-méthyl-5-heptén-2-one (6-MHO), le 1-hexanol, le (2E)-octénal, le disulfure de diméthyle (DMDS), la E-géranylacétone, la 2-pentanone, le 3-méthyl-butanal, l’acétophénone, l’hexanal, le nonanal, le décanal, facultativement parmi le benzaldéhyde, le benzylacétate, l’hexane, le 2-n-butylfurane, le (2E, 4Z) octadiénal, la 3-(N-méthyl-2-pyrrolidinyl)pyridine, le (2E)-buténal, l’acétone, le phénylméthanol, le 3-méthyl-2-buténal, le (2E, 4E)-heptadiénal.
  5. Procédé selon l’une des revendications 1 à 4, caractérisé par le fait que l’arbre de décision est construit par un algorithme CART en utilisant comme variables les composés organiques volatils (COV) cibles et comme critère de segmentation l’indice de diversité de Gini, par sélection successive des variables prises une à une et séparant le mieux l’échantillon par rapport à la présence ou à l’absence de punaises de lit, en testant les points de coupure possibles pour chaque variable et en sélectionnant le seuil de coupure qui rend maximal le critère de segmentation, avec à chaque niveau de l’arbre un indice moyen de Gini G qui comptabilise la perte d’informations associée à un composé organique volatil j (COVj) et un seuil de coupure c :

    avec :


    : nombre de locaux pour lesquels les valeurs de Xj<c du COVj
    : nombre de locaux pour lesquels les valeurs de Xj≥c du COVj
    : fréquence de la i-ème modalité de la variable à prédire (modalité 0 pour absence et modalité 1 pour présence de punaises de lit) pour les locaux vérifiant Xj<c du COVj
    : fréquence de la i-ème modalité de la variable à prédire (modalité 0 pour absence et modalité 1 pour présence de punaises de lit) pour les locaux vérifiant Xj≥c du COVj,
    M : le nombre de modalités à prédire qui est de 2 (modalité 0 – absence et modalité 1 – présence de punaises de lit)
    n : le nombre total de locaux,
    puis on mesure l’indice d’amélioration associé à chaque division par le calcul de J :
    avec , fidésignant la fréquence de la i-ème modalité de la variable binaire associée à la présence/absence de punaises de lit, déterminée au niveau du nœud parent (avant division) et M le nombre de modalités à prédire, le composé organique volatil ayant la valeur de J la plus élevée pour une division donnée de l’arbre étant retenu pour la division correspondante de l’arbre avec sa valeur c associée.
  6. Procédé selon la revendication 5, caractérisé par le fait que l’effectif de segmentation minimum du nœud est fixé à 5, le nombre maximal de niveau de l’arbre est 10, le seuil de spécialisation ou critère d’arrêt est 1, l’effectif d’admissibilité est 1 local d’étalonnage, et l’arbre est sans élagage.
  7. Procédé selon l’une des revendications 1 à 6, caractérisé par le fait que le prélèvement d’air est réalisé sur un adsorbant thermodésorbable, de préférence du Tenax®TA avec un volume de prélèvement compris entre 9 et 15 litres d’air, de préférence 10 litres d’air.
  8. Procédé selon la revendication 7, caractérisé par le fait que les composés organiques volatils sont piégés sur un tube contenant l’adsorbant lors du prélèvement et sont analysés par une technique de thermodésorption – chromatographie en phase gazeuse – spectromètre de masse (TD-GC-MS).
  9. Procédé selon l’une des revendications 1 à 8, caractérisé par le fait que l’air est prélevé dans le local suspecté abriter des punaises de lit.
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