FR3089759A1 - Water-soluble extract and process for obtaining it from insect cuticles - Google Patents
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Abstract
Extrait hydrosoluble et procédé d’obtention à partir de cuticules d’insectes La présente invention concerne un extrait hydrosoluble issu d’insectes, ainsi que son procédé d’obtention. Cet extrait hydrosoluble comprend entre 13 % et 30 % en poids sec de protéines présentant une taille comprise dans la gamme ]555 ; 1400] Daltons, sur le poids sec total de protéines de l’extrait hydrosoluble, et présente une teneur en chitine comprise entre 0,5 % et 6 % en poids sec, sur le poids sec total de l’extrait hydrosoluble. Pas de figureThe present invention relates to a water-soluble extract obtained from insects, as well as to the process for obtaining it. This water-soluble extract comprises between 13% and 30% by dry weight of proteins having a size included in the range] 555; 1400] Daltons, on the total dry weight of proteins of the water-soluble extract, and has a chitin content of between 0.5% and 6% by dry weight, on the total dry weight of the water-soluble extract. No figure
Description
DescriptionDescription
Titre de l'invention : Extrait hydrosoluble et procédé d’obtention à partir de cuticules d’insectesTitle of the invention: Water-soluble extract and process for obtaining it from insect cuticles
[0001] La présente invention concerne un extrait hydrosoluble issu d’insectes, ainsi que son procédé d’obtention.The present invention relates to a water-soluble extract from insects, as well as to the process for obtaining it.
[0002] De par leur faible impact écologique, les insectes représentent une bonne alternative aux sources d’alimentation comme la viande ou le poisson et s’inscrivent dans le cadre d’une alimentation durable. En particulier, les insectes peuvent être utilisés en tant que source de protéines alternative notamment dans l’alimentation animale.Due to their low ecological impact, insects are a good alternative to food sources such as meat or fish and are part of a sustainable diet. In particular, insects can be used as an alternative source of protein, especially in animal feed.
[0003] Afin que le bénéfice de l’apport en protéines par des insectes soit maximal, il est nécessaire que ces protéines soient hautement digestibles (ou assimilables). Plus la taille des protéines diminue, plus leur digestibilité augmente. Or, les protéines de très petite taille (inférieure ou égale à 555 Daltons) ont également le désavantage d’être très amères.In order for the benefit of protein intake by insects to be maximum, these proteins must be highly digestible (or assimilable). The more the size of proteins decreases, the more their digestibility increases. However, very small proteins (less than or equal to 555 Daltons) also have the disadvantage of being very bitter.
Ainsi, il existe donc un besoin pour un produit issu d’insectes qui présente une haute digestibilité pepsique tout en limitant son caractère d’amertume.Thus, there is therefore a need for a product derived from insects which has a high pepsic digestibility while limiting its bitterness character.
[0004] Le travail des inventeurs a permis de mettre en évidence que, de manière surprenante, les protéines extraites de cuticules d’insectes par une solution aqueuse présentaient une haute digestibilité tout en gardant une bonne palatabilité.The work of the inventors has made it possible to demonstrate that, surprisingly, the proteins extracted from insect cuticles by an aqueous solution exhibited high digestibility while retaining good palatability.
[0005] La présente invention concerne donc un extrait hydrosoluble comprenant entre 13 % et 30 % en poids de protéines présentant une taille comprise dans la gamme ]555 ;The present invention therefore relates to a water-soluble extract comprising between 13% and 30% by weight of proteins having a size within the range] 555;
1400] Daltons, sur le poids total de protéines de l’extrait hydrosoluble, et présentant une teneur en chitine comprise entre 0,5 % et 6 % en poids, sur le poids sec total de l’extrait hydrosoluble.1400] Daltons, on the total weight of proteins of the water-soluble extract, and having a chitin content of between 0.5% and 6% by weight, on the total dry weight of the water-soluble extract.
[0006] On notera que dans le cadre de la présente demande, et sauf stipulation contraire, les gammes de valeurs indiquées s’entendent bornes incluses.It will be noted that within the framework of the present application, and unless otherwise stipulated, the ranges of values indicated are understood to be bounds included.
[0007] L’extrait hydrosoluble selon l’invention présente l’avantage que la majorité des protéines d’un tel extrait ont une taille inférieure ou égale à 1400 Daltons, ce qui est associé à une très bonne digestibilité, tout en ayant une part importante des protéines dont la taille est comprise dans la gamme ]555 ; 1400] Daltons, ce qui se traduit par une bonne palatabilité.The water-soluble extract according to the invention has the advantage that the majority of the proteins of such an extract have a size less than or equal to 1400 Daltons, which is associated with very good digestibility, while having a share important proteins whose size is in the range] 555; 1400] Daltons, which translates into good palatability.
La taille des protéines est de préférence déterminée par chromatographie, notamment dans les conditions décrites à l’Exemple 2 ci-après.The size of the proteins is preferably determined by chromatography, in particular under the conditions described in Example 2 below.
[0008] Par « extrait hydrosoluble », on entend que, pour 1 mg d’extrait sec, au moins 85% en poids de l’extrait sec est soluble dans 30 mL d’eau dans les conditions ambiantes de température (25°C) et de pression (1 atm), de préférence, au moins 90% en poids, plus préférentiellement, au moins 95% en poids, tel que par exemple 98 % en poids.By “water-soluble extract” is meant that, for 1 mg of dry extract, at least 85% by weight of the dry extract is soluble in 30 ml of water under ambient temperature conditions (25 ° C. ) and pressure (1 atm), preferably at least 90% by weight, more preferably, at least 95% by weight, such as for example 98% by weight.
[0009] Par « protéines », on entend les protéines brutes. La quantification des protéines brutes est bien connue de l’homme du métier. A titre d’exemple, on peut citer la méthode Dumas ou la méthode Kjeldhal. De préférence, la méthode Kjeldhal est utilisée.By "proteins" is meant crude proteins. The quantification of crude proteins is well known to those skilled in the art. An example is the Dumas method or the Kjeldhal method. Preferably, the Kjeldhal method is used.
[0010] La présence de chitine dans l’extrait hydrosoluble selon l’invention est due au fait que l’extrait hydrosoluble selon l’invention est obtenu par extraction aqueuse effectuée à partir de cuticules d’insectes.The presence of chitin in the water-soluble extract according to the invention is due to the fact that the water-soluble extract according to the invention is obtained by aqueous extraction carried out from insect cuticles.
La cuticule est la couche externe (ou exosquelette) sécrétée par l'épiderme des insectes. Elle est en général formée de trois couches : l’épicuticule, l’exocuticule et l’endocuticule.The cuticle is the outer layer (or exoskeleton) secreted by the epidermis of insects. It is usually made up of three layers: the epicuticle, the exocuticle and the endocuticle.
[0011] Par « chitine », on entend un polymère comportant entre 55% et 98% en poids, de préférence entre 75 et 90% en poids d’unités glucosamine et N-acétyl-glucosamine, lesdites unités pouvant être optionnellement substituées par des acides aminés et/ou des peptides.By "chitin" is meant a polymer comprising between 55% and 98% by weight, preferably between 75 and 90% by weight of glucosamine and N-acetyl-glucosamine units, said units possibly being optionally substituted by amino acids and / or peptides.
[0012] De préférence, l’extrait hydrosoluble selon l’invention a une teneur en chitine comprise entre 1,0 % et 5,8 % en poids, plus préférentiellement entre 1,5 % et 5,3 % en poids, sur le poids sec total de l’extrait hydrosoluble.Preferably, the water-soluble extract according to the invention has a chitin content of between 1.0% and 5.8% by weight, more preferably between 1.5% and 5.3% by weight, on the total dry weight of the water-soluble extract.
[0013] L’extrait hydrosoluble selon l’invention comporte des fibres, la chitine représentant entre 50 % et 100 % en poids du poids total des fibres de l’extrait hydrosoluble.The water-soluble extract according to the invention comprises fibers, the chitin representing between 50% and 100% by weight of the total weight of the fibers of the water-soluble extract.
Ainsi, l’extrait hydrosoluble selon l’invention présente avantageusement une teneur en fibres comprise entre 0,5 % et 6,0 % en poids, de préférence, entre 1,0 % et 5,8 % en poids, plus préférentiellement entre 1,5 % et 5,3 % en poids, sur le poids sec total de l’extrait hydrosoluble.Thus, the water-soluble extract according to the invention advantageously has a fiber content of between 0.5% and 6.0% by weight, preferably between 1.0% and 5.8% by weight, more preferably between 1 , 5% and 5.3% by weight, based on the total dry weight of the water-soluble extract.
[0014] Sauf stipulation contraire, dans la présente demande, les pourcentages en poids sont des pourcentages en poids sec.Unless otherwise stipulated, in the present application, the percentages by weight are percentages by dry weight.
[0015] A titre d’exemple et de manière préférée, la teneur en fibres est déterminée suivant la méthode AO AC 991.43.By way of example and preferably, the fiber content is determined according to the AO AC 991.43 method.
[0016] Par « insectes », on entend des insectes à n’importe quel stade de développement, tel qu’un stade adulte, larvaire ou un stade de nymphe.By "insects" is meant insects at any stage of development, such as an adult, larval or pupa stage.
[0017] Avantageusement, les insectes préférés selon l’invention sont les coléoptères, les diptères, les lépidoptères, les orthoptères, les hyménoptères, les dictyoptères regroupant notamment les blattoptères, y inclus isoptères, et les mantoptères, les phasmoptères, les hémiptères, les hétéroptères, les éphéméroptères et les mécoptères, ou leurs mélanges, de préférence, les coléoptères, les diptères, les lépidoptères, les orthoptères ou leurs mélanges, plus préférentiellement, les coléoptères.Advantageously, the preferred insects according to the invention are the beetles, the diptera, the lepidoptera, the orthoptera, the hymenoptera, the dictyoptera including in particular the blattoptera, including isoptera, and the mantoptera, the phasmoptera, the hemiptera, the heteroptera, ephemeroptera and mecoptera, or their mixtures, preferably, beetles, diptera, lepidoptera, orthoptera or their mixtures, more preferably, beetles.
Préférentiellement, les diptères appartiennent au sous-ordre des Brachycera. Préférentiellement, les lépidoptères appartiennent au sous-ordre des Ditrysia, plus préférentiellement à la super-famille des Pyraloidea.Preferably, the dipterans belong to the suborder Brachycera. Preferably, the lepidoptera belong to the suborder Ditrysia, more preferably to the superfamily Pyraloidea.
Préférentiellement, les coléoptères appartiennent à Γinfra-ordre des Cucujiformia, en particulier aux familles des Tenebrionidae, Coccinellidae, Cerambycidae, Dryophihoridae. ou leurs mélanges.Preferably, the beetles belong to the infra-order of Cucujiformia, in particular to the families of Tenebrionidae, Coccinellidae, Cerambycidae, Dryophihoridae. or their mixtures.
Plus préférentiellement, les coléoptères sont choisis parmi Tenebrio molitor, Alphitobius diaperinus, Zophobas morio, Tenebrio obscurus, Tribolium castaneum, Rhynchophorus ferrugineus, et leurs mélanges, encore plus préférentiellement Tenebrio molitor.More preferably, the beetles are chosen from Tenebrio molitor, Alphitobius diaperinus, Zophobas morio, Tenebrio obscurus, Tribolium castaneum, Rhynchophorus ferrugineus, and their mixtures, even more preferably Tenebrio molitor.
[0018] L’extrait hydrosoluble visé par l’invention est donc de préférence un extrait hydrosoluble de cuticules de coléoptères et plus particulièrement un extrait hydrosoluble de cuticules de Tenebrio molitor.The water-soluble extract targeted by the invention is therefore preferably a water-soluble extract of beetle cuticles and more particularly a water-soluble extract of Tenebrio molitor cuticles.
[0019] Avantageusement, les cuticules d’insectes sont obtenues à partir du stade larvaire des espèces d’insectes visées ci-avant.Advantageously, the insect cuticles are obtained from the larval stage of the insect species referred to above.
[0020] Préférentiellement, l’extrait hydrosoluble selon l’invention a une teneur en protéines comprise entre 37 % et 65% en poids sec, sur le poids sec total de l’extrait hydrosoluble.Preferably, the water-soluble extract according to the invention has a protein content of between 37% and 65% by dry weight, based on the total dry weight of the water-soluble extract.
Plus préférentiellement, l’extrait hydrosoluble selon l’invention a une teneur en protéines comprise entre 40 et 61 % en poids, plus préférentiellement entre 42 et 56 % en poids, encore plus préférentiellement entre 47 % et 51 % en poids, sur le poids sec total de l’extrait hydrosoluble.More preferably, the water-soluble extract according to the invention has a protein content of between 40 and 61% by weight, more preferably between 42 and 56% by weight, even more preferably between 47% and 51% by weight, by weight. total dryness of the water-soluble extract.
[0021] Avantageusement, au moins 50 % en poids des protéines de l’extrait hydrosoluble selon l’invention présentent une taille inférieure ou égale à 1400 Daltons, sur le poids total de protéines, de préférence, au moins 60 % en poids, plus préférentiellement, au moins 70 % en poids. L’extrait hydrosoluble selon l’invention a donc préférentiellement une teneur en protéines présentant une taille inférieure ou égale à 1400 Daltons comprise entre 50 % et 100 % en poids, sur le poids total de protéines, plus préférentiellement, entre 60 % et 90 % en poids, encore plus préférentiellement entre 70 % et 80 % en poids.Advantageously, at least 50% by weight of the proteins of the water-soluble extract according to the invention have a size less than or equal to 1400 Daltons, of the total weight of proteins, preferably, at least 60% by weight, more preferably, at least 70% by weight. The water-soluble extract according to the invention therefore preferably has a protein content having a size less than or equal to 1400 Daltons of between 50% and 100% by weight, of the total weight of proteins, more preferably, between 60% and 90% by weight, even more preferably between 70% and 80% by weight.
[0022] Les protéines présentant une taille inférieure ou égale à 1400 Daltons ont l’avantage d’être très digestes.Proteins with a size less than or equal to 1400 Daltons have the advantage of being very digestible.
Ainsi, les protéines de l’extrait hydrosoluble selon l’invention sont particulièrement digestes.Thus, the proteins of the water-soluble extract according to the invention are particularly digestible.
[0023] Avantageusement, les protéines de l’extrait hydrosoluble selon l’invention présentent une digestibilité supérieure ou égale à 85% en poids, préférentiellement supérieure ou égale à 88 % en poids, plus préférentiellement supérieure ou égale à 92 % en poids, sur le poids total de protéines brutes, telle que par exemple égale à 94 % en poids sur le poids total de protéines brutes.Advantageously, the proteins of the water-soluble extract according to the invention have a digestibility greater than or equal to 85% by weight, preferably greater than or equal to 88% by weight, more preferably greater than or equal to 92% by weight, on the total weight of crude protein, such as for example equal to 94% by weight on the total weight of crude protein.
La digestibilité est une digestibilité pepsique qui est préférentiellement mesurée par la méthode décrite dans la directive 72/199/CE.Digestibility is a pepsic digestibility which is preferably measured by the method described in Directive 72/199 / EC.
De préférence, la teneur en protéines présentant une taille comprise dans la gamme ]555 ; 1400] Daltons de l’extrait hydrosoluble selon l’invention est comprise entre 15 % et 25 % en poids, sur le poids total de protéines, plus préférentiellement, entre 18 % et 22 % en poids, telle que par exemple, 20 % en poids.Preferably, the protein content having a size in the range] 555; 1400] Daltons of the water-soluble extract according to the invention is between 15% and 25% by weight, on the total weight of proteins, more preferably, between 18% and 22% by weight, such as for example, 20% weight.
[0024] L’avantage des protéines présentant une taille comprise dans la gamme ]555 ; 1400] Daltons est qu’elles sont très digestes mais ne présentent pas de caractère d’amertume.The advantage of proteins having a size in the range] 555; 1400] Daltons is that they are very digestible but have no bitterness.
Ainsi, l’extrait hydrosoluble selon l’invention combine les avantages d’une haute digestibilité pepsique tout en gardant une bonne palatabilité.Thus, the water-soluble extract according to the invention combines the advantages of a high pepsic digestibility while retaining good palatability.
[0025] Les protéines sont constituées d’acides aminés, certains acides aminés étant essentiels pour l’organisme.Proteins are made up of amino acids, certain amino acids being essential for the organism.
A titre d’exemple, on peut citer la proline qui joue plusieurs rôles dans le métabolisme, notamment en permettant la synthèse d’autres acides aminés tels que l’arginine et le glutamate. Or, les taux de synthèse endogène de la proline par les poissons, les oiseaux ou encore les nouveau-nés est insuffisante, c’est pourquoi une supplémentation en proline est parfois mise en place afin d’accroître la croissance de certains animaux.As an example, we can cite proline which plays several roles in metabolism, in particular by allowing the synthesis of other amino acids such as arginine and glutamate. However, the rates of endogenous synthesis of proline by fish, birds or newborns is insufficient, which is why supplementation with proline is sometimes implemented in order to increase the growth of certain animals.
[0026] Préférentiellement, l’extrait hydrosoluble selon l’invention a une teneur en proline comprise entre 4,1 % et 8,9 % en poids sec, sur le poids sec total de l’extrait hydrosoluble.Preferably, the water-soluble extract according to the invention has a proline content of between 4.1% and 8.9% by dry weight, based on the total dry weight of the water-soluble extract.
[0027] L’extrait hydrosoluble selon l’invention présente une forte teneur en proline. La proline est notamment utilisée pour accroître la croissance de certains animaux comme les oiseaux ou les poissons, dont les taux de synthèse endogène sont insuffisants.The water-soluble extract according to the invention has a high proline content. Proline is especially used to increase the growth of certain animals such as birds or fish, whose endogenous synthesis rates are insufficient.
L’extrait hydrosoluble selon l’invention présente donc également l’avantage de ne pas avoir à recourir à des compléments alimentaires de proline.The water-soluble extract according to the invention therefore also has the advantage of not having to resort to proline food supplements.
[0028] Plus préférentiellement, l’extrait hydrosoluble selon l’invention a une teneur en proline comprise entre 4,6 % et 8,4 % en poids, plus préférentiellement, entre 5,1 % et 7,9 % en poids, encore plus préférentiellement, entre 5,6 % et 7,4 % en poids, sur le poids sec total de l’extrait hydrosoluble.More preferably, the water-soluble extract according to the invention has a proline content of between 4.6% and 8.4% by weight, more preferably, between 5.1% and 7.9% by weight, again more preferably, between 5.6% and 7.4% by weight, on the total dry weight of the water-soluble extract.
La détermination des quantités en acides aminés est de préférence réalisée selon la méthode NE EN ISO 13904 pour le tryptophane et NE EN ISO 13903 pour les autres acides aminés.The determination of the amounts of amino acids is preferably carried out according to the method NE EN ISO 13904 for tryptophan and NE EN ISO 13903 for the other amino acids.
[0029] Préférentiellement, l’extrait hydrosoluble selon l’invention a une teneur en lipides comprise entre 10 % et 25 % en poids, sur le poids sec total de l’extrait hydrosoluble.Preferably, the water-soluble extract according to the invention has a lipid content of between 10% and 25% by weight, based on the total dry weight of the water-soluble extract.
Plus préférentiellement, l’extrait hydrosoluble selon l’invention a une teneur en lipides (ou matière grasse) comprise entre 15 % et 22% en poids, plus préférentiellement, entre 16 % et 18 % en poids, sur le poids sec total de l’extrait hydrosoluble. [0030] Les méthodes de détermination de la teneur en matière grasse sont bien connues de l’homme du métier. A titre d’exemple et de manière préférée, la détermination de cette teneur sera effectuée en suivant la méthode du règlement CE 152/2009.More preferably, the water-soluble extract according to the invention has a lipid (or fat) content of between 15% and 22% by weight, more preferably, between 16% and 18% by weight, based on the total dry weight of l 'water-soluble extract. The methods for determining the fat content are well known to those skilled in the art. By way of example and preferably, the determination of this content will be carried out according to the method of the EC regulation 152/2009.
[0031] Dans toute la demande, lorsqu’aucune date n’est précisée pour un règlement, une norme ou une directive, il s’agit du règlement, de la norme ou de la directive en vigueur à la date de dépôt.Throughout the application, when no date is specified for a regulation, standard or directive, it is the regulation, standard or directive in force on the filing date.
[0032] Préférentiellement, l’extrait hydrosoluble selon l’invention a une teneur en cendres comprise entre 5,0 % et 15,0 % en poids, sur le poids sec total de l’extrait hydrosoluble.Preferably, the water-soluble extract according to the invention has an ash content of between 5.0% and 15.0% by weight, based on the total dry weight of the water-soluble extract.
Plus préférentiellement, l’extrait hydrosoluble selon l’invention a une teneur en cendres comprise entre 7,5 % et 13,0 % en poids, plus préférentiellement, entre 9,5 % et 12,5 % en poids, encore plus préférentiellement, entre 10,5 % et 11,5 % en poids, sur le poids sec total de l’extrait hydrosoluble.More preferably, the water-soluble extract according to the invention has an ash content of between 7.5% and 13.0% by weight, more preferably between 9.5% and 12.5% by weight, even more preferably, between 10.5% and 11.5% by weight, based on the total dry weight of the water-soluble extract.
[0033] Les cendres constituent le résidu résultant de la combustion de l’extrait hydrosoluble selon l’invention et sont majoritairement constituées de phosphore, calcium, sodium, magnésium et potassium.The ashes constitute the residue resulting from the combustion of the water-soluble extract according to the invention and consist mainly of phosphorus, calcium, sodium, magnesium and potassium.
La méthode de détermination de la teneur en cendres est bien connue de l’homme du métier. De préférence, les cendres ont été déterminées selon la méthode relevant du règlement CE 152/2009 du 27-01-2009.The method for determining the ash content is well known to those skilled in the art. Preferably, the ashes were determined according to the method covered by EC regulation 152/2009 of 27-01-2009.
[0034] Avantageusement, l’extrait hydrosoluble selon l’invention a une teneur en sucres (ou glucides) comprise entre 1 % et 20 % en poids sec, de préférence, entre 4 % et 16 % en poids sec, plus préférentiellement, entre 7 % et 12 % en poids sec, sur le poids sec total de l’extrait hydrosoluble.Advantageously, the water-soluble extract according to the invention has a sugar (or carbohydrate) content of between 1% and 20% by dry weight, preferably between 4% and 16% by dry weight, more preferably between 7% and 12% by dry weight, based on the total dry weight of the water-soluble extract.
La teneur en sucres est de préférence déterminée par un dosage à 1’anthrone. Un tel dosage est plus amplement décrit à l’Exemple 2 ci-après.The sugar content is preferably determined by an anthronone assay. Such an assay is more fully described in Example 2 below.
L’extrait hydrosoluble selon l’invention a donc une faible teneur en sucres ; il peut ainsi être administré à des animaux souffrant de diabète.The water-soluble extract according to the invention therefore has a low sugar content; it can thus be administered to animals suffering from diabetes.
[0035] L’invention concerne également un procédé d’obtention d’un extrait hydrosoluble selon l’invention.The invention also relates to a process for obtaining a water-soluble extract according to the invention.
[0036] Le procédé d’obtention d’un extrait hydrosoluble comprend les étapes suivantes :The process for obtaining a water-soluble extract comprises the following steps:
i) la fourniture d’insectes, ii) l’abattage desdits insectes, iii) la séparation des cuticules de la partie molle des insectes, iv) le broyage desdites cuticules, simultanément ou préalablement à l’étape v), v) le mélange des cuticules avec de l’eau pour former un extrait hydrosoluble, vi) la récupération de l’extrait hydrosoluble, dans lequel le procédé ne comporte pas d’hydrolyse.i) the supply of insects, ii) the slaughter of said insects, iii) the separation of the cuticles from the soft part of the insects, iv) the grinding of said cuticles, simultaneously or prior to step v), v) mixing cuticles with water to form a water-soluble extract, vi) recovering the water-soluble extract, in which the process does not involve hydrolysis.
[0037] Les insectes de l’étape i) sont ceux décrits ci-avant. En particulier, les insectes sont préférentiellement des coléoptères et plus préférentiellement Tenebrio Molitor.The insects of step i) are those described above. In particular, the insects are preferably beetles and more preferably Tenebrio Molitor.
En outre, les insectes de l’étape i) sont de préférence à un stade larvaire.In addition, the insects of stage i) are preferably at a larval stage.
[0038] De préférence, l’étape ii) d’abattage est réalisée par choc thermique, tel que par exemple par ébouillantage ou blanchiment des insectes. Ceci a l’avantage d’abattre les insectes tout en abaissant leur charge microbienne et en inactivant leurs enzymes internes pouvant déclencher une autolyse, permettant ainsi d’éviter un brunissement rapide de ceux-ci.Preferably, step ii) of slaughter is carried out by thermal shock, such as for example by scalding or bleaching of insects. This has the advantage of killing insects while lowering their microbial load and inactivating their internal enzymes which can trigger autolysis, thus preventing their rapid browning.
[0039] Selon un premier mode de réalisation, l’étape ii) est une étape d’ébouillantage, dans laquelle les insectes sont ébouillantés à l’eau pendant 2 à 20 min, préférentiellement, 5 à 15 min. De préférence, l’eau est à une température comprise entre 87 à 100°C, préférentiellement 92 à 95°C.According to a first embodiment, step ii) is a scalding step, in which the insects are scalded with water for 2 to 20 min, preferably 5 to 15 min. Preferably, the water is at a temperature between 87 to 100 ° C, preferably 92 to 95 ° C.
Lors de l’ébouillantage, le ratio du volume d’eau en mL sur le poids en g d’insectes est de préférence compris entre 0,3 et 10, plus préférentiellement entre 0,5 et 5, encore plus préférentiellement entre 0,7 et 3, encore plus préférentiellement de l’ordre de 1. [0040] Selon un second mode de réalisation, l’étape ii) est une étape de blanchiment, dans laquelle les insectes sont blanchis à l’eau ou à la vapeur (buses ou lit de vapeur) à une température comprise entre 80 et 105 °C, de préférence entre 87 et 105 °C, plus préférentiellement entre 95 et 100°C, encore plus préférentiellement 98°C ou bien à l’eau à une température comprise entre 90 et 100°C, préférentiellement entre 92 et 95 °C (par buses d’aspersion) ou en mode mixte (eau + vapeur) à une température comprise entre 80 et 130°C, de préférence entre 90 et 120°C, plus préférentiellement entre 95 et 105°C, encore plus préférentiellement 98°C. Lorsque les insectes sont blanchis uniquement à la vapeur, le blanchiment est avantageusement réalisé dans des blancheurs à vapeur à circulation forcée (« forced steaming »). Le temps de séjour dans la chambre de blanchiment est compris entre 5 secondes et 15 minutes, préférentiellement entre 1 et 7 min.During scalding, the ratio of the volume of water in mL to the weight in g of insects is preferably between 0.3 and 10, more preferably between 0.5 and 5, even more preferably between 0.7 and 3, even more preferably of the order of 1. According to a second embodiment, step ii) is a bleaching step, in which the insects are bleached with water or steam (nozzles or steam bed) at a temperature between 80 and 105 ° C, preferably between 87 and 105 ° C, more preferably between 95 and 100 ° C, even more preferably 98 ° C or with water at a temperature between 90 and 100 ° C, preferably between 92 and 95 ° C (by spray nozzles) or in mixed mode (water + steam) at a temperature between 80 and 130 ° C, preferably between 90 and 120 ° C, more preferably between 95 and 105 ° C, even more preferably 98 ° C. When the insects are only bleached with steam, bleaching is advantageously carried out in forced whitening steam whiteners. The residence time in the bleaching chamber is between 5 seconds and 15 minutes, preferably between 1 and 7 min.
[0041] Avantageusement, les insectes sont directement utilisés après l’étape ii) d’abattage pour la mise en œuvre de l’étape iii) de séparation des cuticules de la partie molle des insectes, c’est-à-dire que les insectes ne sont soumis à aucun traitement, tel qu’un broyage, une congélation ou une déshydratation entre l’étape ii) et l’étape iii).Advantageously, the insects are used directly after step ii) of slaughter for the implementation of step iii) of separation of the cuticles from the soft part of the insects, that is to say that the insects are not subjected to any treatment, such as crushing, freezing or dehydration between stage ii) and stage iii).
Ainsi, l’étape iii) de séparation s’effectue avantageusement immédiatement après l’étape ii) d’abattage, de manière à ce que les larves n’aient pas le temps de refroidir à température ambiante.Thus, step iii) of separation advantageously takes place immediately after step ii) of slaughter, so that the larvae do not have time to cool to room temperature.
[0042] Par « partie molle », on vise la chair (comportant notamment les muscles et les viscères) et le jus (comportant notamment les liquides biologiques, l’eau et l’hémolymphe) des insectes. En particulier, la partie molle ne consiste pas en le jus des insectes.By "soft part" is meant the flesh (comprising in particular the muscles and viscera) and the juice (comprising in particular biological liquids, water and hemolymph) of insects. In particular, the soft part does not consist of the juice of insects.
[0043] De préférence, la séparation des cuticules de la partie molle des insectes du procédé selon l’invention est effectuée à l’aide d’un filtre presse ou d’un séparateur à bande.Preferably, the separation of the cuticles from the soft part of the insects of the process according to the invention is carried out using a filter press or a band separator.
Plus préférentiellement, cette étape iii) de séparation est effectuée à l’aide d’un séparateur à bande.More preferably, this separation step iii) is carried out using a belt separator.
[0044] Par « séparateur à bande », on vise un dispositif qui comporte une bande de serrage (ou bande presseuse) et un tambour perforé.By "belt separator" is meant a device which comprises a tightening band (or press band) and a perforated drum.
La bande de serrage permet l’apport et l’application des insectes contre le tambour perforé de sorte à faire passer, par pression, la partie molle des insectes à travers les perforations du tambour, tandis que les cuticules restent à l‘extérieur du tambour.The tightening band allows the insects to be brought in and applied against the perforated drum so that the soft part of the insects passes through the perforations of the drum by pressure, while the cuticles remain outside the drum .
Les cuticules peuvent ensuite être récupérées à l’aide d’un couteau racleur.The cuticles can then be retrieved using a scraper knife.
A titre d’exemple, on peut citer les séparateurs à bande provenant de la société Baader, tels que les séparateurs à bande 601 à 607 (« soft separator 601 to 607 »), ou encore les séparateurs à bande SEPAmatic® de BLD Corporation (gamme 410 à 4000V).By way of example, mention may be made of belt separators from the company Baader, such as belt separators 601 to 607 (“soft separator 601 to 607”), or even SEPAmatic® belt separators from BLD Corporation ( range 410 to 4000V).
Avantageusement, le diamètre des perforations du tambour est compris entre 0,5 et 3 mm, de préférence entre 1 et 2 mm.Advantageously, the diameter of the perforations of the drum is between 0.5 and 3 mm, preferably between 1 and 2 mm.
Concernant la pression, l’homme du métier est à même de déterminer la pression à exercer permettant la séparation des cuticules de la partie molle des insectes.Regarding the pressure, the skilled person is able to determine the pressure to be exerted allowing the separation of the cuticles from the soft part of the insects.
[0045] Cette étape de séparation des insectes se distingue d’un pressage classique pouvant être réalisé par exemple avec une presse mono-vis ou bi-vis en ce qu’elle permet une séparation (nette) de la partie molle et des cuticules des insectes et non une séparation d’un jus d’une fraction solide.This insect separation step differs from a conventional pressing which can be carried out for example with a single-screw or twin-screw press in that it allows a separation (clear) of the soft part and the cuticles of the insects and not a separation of a juice from a solid fraction.
En particulier, la séparation des cuticules de la partie molle s’effectue sans qu’aucune étape préalable de broyage des insectes, notamment sous forme de particules, n’ait été effectuée.In particular, the cuticles are separated from the soft part without any prior grinding of the insects, in particular in the form of particles, having been carried out.
[0046] Avantageusement, l’étape iv) de broyage permet d’obtenir des cuticules broyées dont la taille est comprise entre 0,5 et 10 mm, de préférence, entre 1 et 7 mm, plus préférentiellement, entre 1 et 5 mm.Advantageously, step iv) of grinding makes it possible to obtain milled cuticles whose size is between 0.5 and 10 mm, preferably between 1 and 7 mm, more preferably between 1 and 5 mm.
[0047] Optionnellement, l’étape iv) de broyage des cuticules du procédé selon l’invention s’effectue sur des cuticules congelées.Optionally, step iv) of grinding the cuticles of the process according to the invention is carried out on frozen cuticles.
[0048] Selon un mode de réalisation particulier, l’étape iv) de broyage est réalisée avant l’étape v) de mélange des cuticules, alors broyées, avec de l’eau. Selon ce mode de réalisation particulier, les cuticules sont broyées à l’aide d’un hachoir à viande, d’un broyeur à marteaux, d’un moulin à lames et/ou d’un broyeur à couteaux, préférentiellement à l’aide d’un hachoir à viande.According to a particular embodiment, step iv) of grinding is carried out before step v) of mixing the cuticles, then ground, with water. According to this particular embodiment, the cuticles are ground using a meat grinder, a hammer mill, a blade mill and / or a knife mill, preferably using a meat grinder.
[0049] Selon un mode de réalisation préféré, l’étape iv) de broyage est réalisée simultanément à l’étape v) de mélange des cuticules avec de l’eau. A titre d’exemple, dans ce cas, les étapes iv) et v) sont effectuées par broyage humide.According to a preferred embodiment, step iv) of grinding is carried out simultaneously with step v) of mixing the cuticles with water. By way of example, in this case, steps iv) and v) are carried out by wet grinding.
[0050] Selon ce mode de réalisation préféré, les cuticules sont broyées à l’aide d’un broyeur à couteaux et/ou d’un disperseur, préférentiellement à l’aide d’un broyeur à couteaux tel que par exemple un Thermomix.According to this preferred embodiment, the cuticles are crushed using a knife mill and / or a disperser, preferably using a knife mill such as for example a Thermomix.
[0051] L’eau utilisée dans l’étape v) du procédé selon l’invention est avantageusement de l’eau distillée ou de l’eau du robinet, préférentiellement de l’eau du robinet. Ainsi, le pH de cette eau est compris entre 6 et 8, préférentiellement, entre 7,2 et 7,6.The water used in step v) of the process according to the invention is advantageously distilled water or tap water, preferably tap water. Thus, the pH of this water is between 6 and 8, preferably between 7.2 and 7.6.
Eventuellement, des sels peuvent être ajoutés à l’eau conduisant à une phase aqueuse légèrement saline ou afin de former une solution tampon dont le pH est compris entre 6 et 8, avantageusement entre 7,2 et 7,6.Optionally, salts can be added to the water leading to a slightly saline aqueous phase or in order to form a buffer solution whose pH is between 6 and 8, advantageously between 7.2 and 7.6.
[0052] Avantageusement, lors de l’étape v) de mélange, le ratio eau/cuticules en millilitres d’eau par gramme de cuticules est compris entre 1 et 15, de préférence, entre 2 et 6, plus préférentiellement, entre 2,5 et 5,0, encore plus préférentiellement entre 3,0 et 4,0.Advantageously, during step v) of mixing, the water / cuticle ratio in milliliters of water per gram of cuticles is between 1 and 15, preferably between 2 and 6, more preferably between 2, 5 and 5.0, even more preferably between 3.0 and 4.0.
[0053] De préférence, l’étape v) de mélange est réalisée à température ambiante, c’est-à-dire que la température est comprise entre 15°C et 25°C, préférentiellement d’environ 20°C.Preferably, step v) of mixing is carried out at room temperature, that is to say that the temperature is between 15 ° C and 25 ° C, preferably about 20 ° C.
[0054] Avantageusement, la durée totale de l’étape v) de mélange est comprise entre 10 s et 10 min, préférentiellement, entre 0,5 min et 5 min, plus préférentiellement, entre 0,8 min et 2 min, telle que par exemple 1 min. La durée totale de l’étape v) de mélange ne comprend pas les éventuelles périodes d’interruption du mélange. Par exemple, si le mélange de cuticules et d’eau est effectué pendant 1 minute, arrêté, puis repris pendant 1 minute, alors la durée totale de l’étape de v) de mélange est de 2 minutes.Advantageously, the total duration of step v) of mixing is between 10 s and 10 min, preferably between 0.5 min and 5 min, more preferably between 0.8 min and 2 min, such that for example 1 min. The total duration of step v) of mixing does not include any periods of interruption of mixing. For example, if the mixing of cuticles and water is carried out for 1 minute, stopped and then resumed for 1 minute, then the total duration of the v) mixing step is 2 minutes.
[0055] Avantageusement, l’étape v) de mélange est réalisée à une pression absolue comprise entre 10 mbar et 5 bar, préférentiellement, entre 0,1 bar et 2 bar, plus préférentiellement, entre 0,6 bar et 1,4 bar, encore plus préférentiellement, de l’ordre de 1 bar (pression atmosphérique).Advantageously, step v) of mixing is carried out at an absolute pressure of between 10 mbar and 5 bar, preferably between 0.1 bar and 2 bar, more preferably between 0.6 bar and 1.4 bar , even more preferably, of the order of 1 bar (atmospheric pressure).
[0056] Selon le mode de réalisation particulier, dans lequel l’étape iv) de broyage est réalisée avant l’étape v) de mélange des cuticules avec de l’eau, l’étape v) de mélange est de préférence réalisé à l’aide d’un agitateur à hélice ou à pales, tel que par exemple un agitateur à hélice double lame.According to the particular embodiment, in which step iv) of grinding is carried out before step v) of mixing the cuticles with water, step v) of mixing is preferably carried out with using a propeller or paddle agitator, such as for example a double blade propeller agitator.
Selon ce mode de réalisation particulier, l’étape v) de mélange est de préférence réalisée à au moins 20 tours par minute (rpm), plus préférentiellement, au moins 250 rpm, encore plus préférentiellement, au moins 350 rpm, tel que par exemple environ 1500 rpm.According to this particular embodiment, step v) of mixing is preferably carried out at least 20 revolutions per minute (rpm), more preferably, at least 250 rpm, even more preferably, at least 350 rpm, such as for example around 1500 rpm.
[0057] Selon le mode de réalisation préféré, dans lequel l’étape iv) de broyage est réalisée simultanément à l’étape v) de mélange, l’étape v) de mélange est réalisée à l’aide de l’appareil utilisé pour l’étape iv) de broyage.According to the preferred embodiment, in which step iv) of grinding is carried out simultaneously with step v) of mixing, step v) of mixing is carried out using the apparatus used for step iv) of grinding.
Selon ce mode de réalisation préféré, l’étape v) de mélange est réalisée entre 250 et 15000 tours par minute (rpm), préférentiellement, entre 1000 et 13000 rpm, plus préférentiellement, entre 5000 et 12000 rpm, encore plus préférentiellement, entre 9500 et 11000 rpm.According to this preferred embodiment, step v) of mixing is carried out between 250 and 15,000 revolutions per minute (rpm), preferably between 1000 and 13,000 rpm, more preferably between 5,000 and 12,000 rpm, even more preferably between 9,500 and 11,000 rpm.
[0058] L’étape iv) de broyage permet d’améliorer l’accès de l’eau aux protéines qui ne sont pas liées de façon covalente aux cuticules. Ainsi, cela permet d’améliorer la solubilisation des protéines lors de l’étape v) de mélange et donc d’augmenter la teneur en protéines de l’extrait hydrosoluble en résultant.Step iv) grinding improves the access of water to proteins which are not covalently linked to the cuticles. Thus, this improves the solubilization of proteins during step v) of mixing and therefore increases the protein content of the resulting water-soluble extract.
En outre, un effet synergique est observé lorsque l’étape iv) de broyage et l’étape v) de mélange sont simultanées, permettant d’optimiser l’extraction des protéines.In addition, a synergistic effect is observed when step iv) of grinding and step v) of mixing are simultaneous, making it possible to optimize the extraction of proteins.
[0059] L’étape vi) de récupération du procédé selon l’invention permet de séparer les cuticules de l’extrait hydrosoluble.Step vi) of recovery of the process according to the invention makes it possible to separate the cuticles from the water-soluble extract.
[0060] Avantageusement, l’étape vi) de récupération est une centrifugation, une filtration, une décantation ou un pressage, de préférence, une centrifugation ou une filtration, plus préférentiellement, une filtration.Advantageously, step vi) of recovery is centrifugation, filtration, decantation or pressing, preferably, centrifugation or filtration, more preferably, filtration.
[0061] Préférentiellement, l’étape vi) de récupération est une filtration réalisée avec un filtre présentant une taille de mailles comprise entre 0,45 mm et 2 mm, de préférence, entre 0,6 mm et 0,9 mm, plus préférentiellement, de 0,75 mm.Preferably, step vi) of recovery is a filtration carried out with a filter having a mesh size of between 0.45 mm and 2 mm, preferably between 0.6 mm and 0.9 mm, more preferably , 0.75 mm.
[0062] Avantageusement, le filtre utilisé dans ce mode de réalisation est un filtre Buchner, ou un filtre presse, ou un filtre à bandes, ou un filtre à tamis, ou un réacteur-filtre Nutsche. De préférence, le filtre utilisé dans l’étape de filtration est un filtre Buchner, notamment un filtre Buchner de porosité comprise entre 1 et 5, de préférence une porosité égale à 3. La porosité d’un filtre Buchner est bien connue de l’homme du métier : une porosité 1 correspond à une taille de pores comprise entre 100 et 160 pm, une porosité 2 correspond à une taille de pores comprise entre 40 et 100 pm, une porosité 3 correspond à une taille de pores comprise entre 16 et 40 pm, une porosité 4 correspond à une taille de pores comprise entre 10 et 16 pm, et une porosité 5 correspond à une taille de pores comprise entre 4 et 10 pm.Advantageously, the filter used in this embodiment is a Buchner filter, or a press filter, or a band filter, or a screen filter, or a Nutsche reactor-filter. Preferably, the filter used in the filtration step is a Buchner filter, in particular a Buchner filter with a porosity between 1 and 5, preferably a porosity equal to 3. The porosity of a Buchner filter is well known from skilled in the art: a porosity 1 corresponds to a pore size between 100 and 160 pm, a porosity 2 corresponds to a pore size between 40 and 100 pm, a porosity 3 corresponds to a pore size between 16 and 40 pm, a porosity 4 corresponds to a pore size between 10 and 16 pm, and a porosity 5 corresponds to a pore size between 4 and 10 pm.
[0063] Avantageusement, la filtration de ce mode de réalisation est réalisée en appliquant une variation de pression, de préférence, une diminution de la pression appliquée sous le filtre ou une augmentation de la pression appliquée sur le filtre, plus préférentiellement, une diminution de la pression.Advantageously, the filtration of this embodiment is carried out by applying a pressure variation, preferably, a decrease in the pressure applied under the filter or an increase in the pressure applied to the filter, more preferably, a decrease in pressure.
Par « augmentation de la pression », on vise en particulier une augmentation de pression entre 0,1 bar et 4 bar, préférentiellement, entre 0,2 bar et 2 bar, plus préférentiellement, entre 0,3 bar et 1,5 bar, encore plus préférentiellement, entre 0,5 bar et 1,0 bar.By “pressure increase”, we mean in particular a pressure increase between 0.1 bar and 4 bar, preferably between 0.2 bar and 2 bar, more preferably between 0.3 bar and 1.5 bar, even more preferably, between 0.5 bar and 1.0 bar.
Par « diminution de la pression », on vise en particulier une pression absolue entre 1 mbar et 600 mbar, préférentiellement, entre 10 mbar et 300 mbar, plus préférentiellement, entre 20 mbar et 250 mbar, encore plus préférentiellement, entre 100 mbar et 200 mbar.By “pressure reduction” is meant in particular an absolute pressure between 1 mbar and 600 mbar, preferably between 10 mbar and 300 mbar, more preferably between 20 mbar and 250 mbar, even more preferably between 100 mbar and 200 mbar.
[0064] L’étape v) du procédé selon l’invention est une étape de solubilisation et de séparation physique des protéines des cuticules et n’est pas être une étape d’hydrolyse.Step v) of the process according to the invention is a step of solubilization and physical separation of proteins from the cuticles and is not a step of hydrolysis.
Ceci présente notamment l’avantage d’éviter la formation de protéines de très petite taille (inférieure ou égale à 555 Da).This has the particular advantage of avoiding the formation of very small proteins (less than or equal to 555 Da).
[0065] Par « hydrolyse », on entend une hydrolyse enzymatique, ou une hydrolyse en milieu acide ou basique. En particulier, une hydrolyse conduit à une coupure d’une liaison covalente, provoquant la libération de protéines de taille réduite voire d’acides aminés.By "hydrolysis" means an enzymatic hydrolysis, or hydrolysis in an acidic or basic medium. In particular, hydrolysis leads to a cut of a covalent bond, causing the release of proteins of reduced size or even amino acids.
[0066] Avantageusement, l’extrait récupéré à l’étape vi) subit en outre une étape de séchage par des méthodes connues de l’homme du métier, telles que par exemple par pulvérisation/atomisation ou lyophilisation.Advantageously, the extract recovered in step vi) also undergoes a drying step by methods known to those skilled in the art, such as for example by spraying / atomization or lyophilization.
[0067] Avantageusement, le procédé selon l’invention comporte les étapes suivantes :Advantageously, the method according to the invention comprises the following steps:
i) une étape de fourniture d’insectes, puis ii) une étape d’abattage desdits insectes par ébouillantage ou blanchiment, puis iii) une étape de séparation des cuticules de la partie molle des insectes, puis iv) une étape de broyage desdites cuticules simultanément à une étape v) de mélange des cuticules avec de l’eau pour former un extrait hydrosoluble, puis vi) une étape de récupération par filtration de l’extrait hydrosoluble, dans lequel le procédé ne comporte pas d’hydrolyse..i) a step of supplying insects, then ii) a step of slaughtering said insects by scalding or bleaching, then iii) a step of separating the cuticles from the soft part of the insects, then iv) a step of grinding said cuticles simultaneously with a step v) of mixing the cuticles with water to form a water-soluble extract, then vi) a step of recovering the water-soluble extract by filtration, in which the process does not involve hydrolysis.
Les caractéristiques de ces étapes étant celles décrites ci-avant, y inclus les modes de réalisation.The characteristics of these stages being those described above, including the embodiments.
[0068] L’invention concerne enfin l’utilisation de l’extrait hydrosoluble de cuticules d’insectes selon l’invention, ou obtenu par le procédé selon l’invention, dans l’alimentation.The invention finally relates to the use of the water-soluble extract of insect cuticles according to the invention, or obtained by the process according to the invention, in food.
[0069] De préférence, l’extrait hydrosoluble selon l’invention est utilisé dans l’alimentation de poissons et/ou d’oiseaux, plus préférentiellement dans l’alimentation de poissons.Preferably, the water-soluble extract according to the invention is used in the feeding of fish and / or birds, more preferably in the feeding of fish.
[0070] La présente invention est illustrée, de manière non limitative, par les exemples ciaprès ainsi que la figure suivante :The present invention is illustrated, without limitation, by the examples below as well as the following figure:
[0071] [fig.l] : La figure 1 est un graphique qui représente l’absorbance des protéines d’extraits hydrosoluble de cuticules d’insectes obtenus selon quatre procédés différents en fonction du temps.[Fig.l]: Figure 1 is a graph which represents the absorbance of proteins from water-soluble extracts of insect cuticles obtained according to four different processes as a function of time.
[0072] Exemple 1 : Préparation d’un extrait hydrosoluble de cuticules d’insectes selon l’inventionExample 1: Preparation of a water-soluble extract of insect cuticles according to the invention
[0073] a) Obtention de cuticules d’insectesA) Obtaining insect cuticles
Des larves vivantes de Tenebrio molitor, ayant reçu un régime alimentaire à base de coproduits céréaliers (de type son de blé), sont convoyées en couche d’épaisseur comprise entre 2 et 10 cm, sur un tapis à bande perforée (1mm) jusqu’à une chambre de blanchiment. Les larves sont ainsi blanchies à l’eau à 92°C (buses d’aspersion) pendant 5 min. La température des larves en sortie de blanchiment est comprise entre 75°C et 92°C.Live larvae of Tenebrio molitor, having received a diet based on cereal co-products (wheat bran type), are conveyed in a layer of thickness between 2 and 10 cm, on a carpet with a perforated strip (1mm) up to to a laundering room. The larvae are thus blanched in water at 92 ° C (spray nozzles) for 5 min. The temperature of the larvae after bleaching is between 75 ° C and 92 ° C.
Une fois blanchies, les larves sont convoyées jusqu’à la trémie d’alimentation d’un séparateur à bande (séparateur à bande 601 de la société Baader), afin de séparer les cuticules de la partie molle des larves. Le diamètre des perforations du tambour est de 1,3 mm. La séparation s’effectue immédiatement après l’abattage de manière à ce que les larves n’aient pas le temps de refroidir à température ambiante. La partie molle des insectes est récupérée dans une cuve et les cuticules sont récupérées à l’aide d’un couteau racleur.Once bleached, the larvae are conveyed to the feed hopper of a band separator (band separator 601 from the company Baader), in order to separate the cuticles from the soft part of the larvae. The diameter of the perforations of the drum is 1.3 mm. Separation takes place immediately after slaughter so that the larvae do not have time to cool to room temperature. The soft part of the insects is collected in a tank and the cuticles are collected using a scraper knife.
[0074] b) Obtention d’un extrait hydrosoluble de cuticules d’insectes g de cuticules congelées sont mélangées avec 200 mL d’eau du robinet à température ambiante (pH d’environ 7, 20°C) puis broyées à l’aide d’un Thermomix (TM 31) pendant 1 min et à une vitesse de 10000 rpm (sélection de la vitesse 10).B) Obtaining a water-soluble extract of insect cuticles g of frozen cuticles are mixed with 200 ml of tap water at room temperature (pH around 7, 20 ° C) and then ground using a Thermomix (TM 31) for 1 min and at a speed of 10,000 rpm (selection of speed 10).
[0075] Le mélange obtenu à Tissue de ce broyage humide est alors filtré sous vide à l’aide d’un filtre Buchner de porosité 3 et d’une pompe à membrane, puis l’extrait récupéré est séché par lyophilisation pour conduire à 600 pg d’extrait hydrosoluble sec selon l’invention.The mixture obtained at Tissue from this wet grinding is then filtered under vacuum using a Buchner filter of porosity 3 and a membrane pump, then the recovered extract is dried by lyophilization to yield 600 pg of dry water-soluble extract according to the invention.
[0076] Exemple 2 : Caractérisation de l’extrait hydrosoluble obtenu dans l’Exemple 1 [0077] L’extrait hydrosoluble obtenu dans TExemple 1 (broyage humide) a été caractérisé suivant les méthodes suivantes :Example 2: Characterization of the water-soluble extract obtained in Example 1 The water-soluble extract obtained in Example 1 (wet grinding) was characterized according to the following methods:
- protéines : méthode Kjeldhal avec un coefficient de corrélation de 6,25 et conforme au règlement CE 152/2009- proteins: Kjeldhal method with a correlation coefficient of 6.25 and in accordance with EC regulation 152/2009
- matière grasse : méthode du règlement CE 152/2009- fat: method of EC regulation 152/2009
- cendres : méthode du règlement CE 152/2009- ash: method of EC regulation 152/2009
- fibres : méthode AO AC 991.43- fibers: method AO AC 991.43
- digestibilité pepsique : méthode décrite dans la directive 72/199/CE.- pepsic digestibility: method described in Directive 72/199 / EC.
Pour les sucres, un dosage à T anthrone basé sur la méthode décrite par S. Sadasivam et A. Manickam, « Carbohydrates », Biochemical methods 2008, pp. 1-19, a été réalisé :For sugars, a T anthrone assay based on the method described by S. Sadasivam and A. Manickam, "Carbohydrates", Biochemical methods 2008, pp. 1-19, was carried out:
- Préparation d’une courbe de calibration : une solution aqueuse à 1 mg de glucose par mL d’eau a été préparée puis diluée à l’eau avec un facteur de dilution de 10. Différentes quantités de cette solution aqueuse sont placées dans des tubes à essais : 0, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, et 0,5 mL puis le volume est complété à 0,5 mL avec de l’eau distillée dans tous les tubes. 2 mL d’une solution d’anthrone (200 mg d’anthrone dissouts dans 100 mL d’une solution aqueuse à 95 % H2SO4) sont alors ajoutés dans chaque tube. Les tubes sont ensuite chauffés à 80°C pendant 8 minutes puis refroidis dans un bain de glace. L’absorbance de chaque solution est mesurée à 630 nm (spectromètre UVvisible : Thermo Scientific GENESYS 10S UV-Vis). Les essais sont dupliqués en vue d’établir la courbe.- Preparation of a calibration curve: an aqueous solution containing 1 mg of glucose per ml of water was prepared and then diluted with water with a dilution factor of 10. Different quantities of this aqueous solution are placed in tubes test: 0, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, and 0.5 mL then the volume is made up to 0.5 mL with distilled water in all the tubes. 2 mL of an anthron solution (200 mg of anthron dissolved in 100 mL of an aqueous solution at 95% H 2 SO 4 ) are then added to each tube. The tubes are then heated at 80 ° C for 8 minutes and then cooled in an ice bath. The absorbance of each solution is measured at 630 nm (UV visible spectrometer: Thermo Scientific GENESYS 10S UV-Vis). The tests are duplicated in order to establish the curve.
- Analyse de l’extrait hydrosoluble : 100 mg d’extrait sec sont traités en additionnant mL d’une solution aqueuse à 2,5M HCl et en chauffant à 100°C pendant 3h. Le milieu réactionnel est ensuite neutralisé avec Na2CO3 jusqu’à ce qu’aucune bulle ne soit observée après la dernière addition. Il est ensuite dilué jusqu’à 100 mL avec de l’eau distillée et filtré (taille des pores : 0,45 pm) pour enlever la matière insoluble. Ceci est dupliqué pour chaque échantillon. 0,5 mL de la solution obtenue sont ensuite placés dans un tube à essais et 2 mL de la solution d’anthrone préalablement préparée sont ajoutés. Le mélange est chauffé à 80°C pendant 8 minutes et refroidi dans un bain de glace. L’absorbance est mesurée à 630 nm et la concentration en sucres est calculée grâce à la courbe de calibration.- Analysis of the water-soluble extract: 100 mg of dry extract are treated by adding mL of a 2.5M HCl aqueous solution and heating at 100 ° C for 3 h. The reaction medium is then neutralized with Na 2 CO 3 until no bubble is observed after the last addition. It is then diluted to 100 ml with distilled water and filtered (pore size: 0.45 μm) to remove the insoluble material. This is duplicated for each sample. 0.5 mL of the solution obtained is then placed in a test tube and 2 mL of the anthrax solution previously prepared is added. The mixture is heated at 80 ° C for 8 minutes and cooled in an ice bath. The absorbance is measured at 630 nm and the sugar concentration is calculated using the calibration curve.
[0078] La composition de l’extrait hydrosoluble est détaillée dans le Tableau 1 ci-après, les pourcentages indiqués étant des pourcentages en poids sec sur le poids total de l’extrait hydro soluble sec.The composition of the water-soluble extract is detailed in Table 1 below, the percentages indicated being percentages by dry weight of the total weight of the dry water-soluble extract.
[Tableaux 1][Tables 1]
[0079] Par ailleurs, l’extrait hydrosoluble présente une digestibilité pepsique de 94% et est soluble dans l’eau à 98,4%.Furthermore, the water-soluble extract has a pepsic digestibility of 94% and is soluble in water to 98.4%.
[0080] Détermination des quantités en acides aminésDetermination of the Amino Acid Amounts
La détermination des quantités des acides aminés présents dans l’extrait hydrosoluble de l’Exemple 1 a été réalisée selon la méthode NF EN ISO 13904 pour le tryptophane et NF EN ISO 13903 pour les autres acides aminés.. Elle est présentée dans le Tableau 2 ci-après, les pourcentages indiqués étant des pourcentages en poids sec sur le poids total sec de l’extrait hydrosoluble.The amounts of amino acids present in the water-soluble extract of Example 1 were determined according to the method NF EN ISO 13904 for tryptophan and NF EN ISO 13903 for the other amino acids. It is presented in Table 2 below, the percentages indicated being percentages by dry weight on the total dry weight of the water-soluble extract.
[Tableaux!][Paintings!]
[0081 ] Détermination de la taille des protéinesProtein size determination
La taille des protéines de l’extrait hydrosoluble de TExemple 1 a été déterminée par HPLC dans les conditions suivantes :The size of the proteins of the water-soluble extract of Example 1 was determined by HPLC under the following conditions:
- Préparation de l’échantillon : 30 mg d’extrait hydrosoluble sec sont solubilisés dans 1 L de phase mobile et filtrés utilisant le filtre chromafil xtra PES-45/25.- Preparation of the sample: 30 mg of dry water-soluble extract are dissolved in 1 L of mobile phase and filtered using the chromafil xtra PES-45/25 filter.
- Analyse par chromatographie (HPLC Nexera XR de Shimadzu) : la colonne utilisée est une Superdex Peptide GL 10/300 (GE Healthcare), la détection est réalisée par un détecteur DAD à 215 nm, la vitesse de la phase mobile est de 0,3 mL/min et elle est composée de ACN (acétonitrile)/H2O/TFA (acide trifluoroacétique) (30/70/0,1), l’analyse est réalisée à 25 °C.- Analysis by chromatography (HPLC Nexera XR from Shimadzu): the column used is a Superdex Peptide GL 10/300 (GE Healthcare), the detection is carried out by a DAD detector at 215 nm, the speed of the mobile phase is 0, 3 mL / min and it is composed of ACN (acetonitrile) / H2O / TFA (trifluoroacetic acid) (30/70 / 0.1), the analysis is carried out at 25 ° C.
Elle est présentée pour deux échantillons dans le Tableau 3 ci-après, les pourcentages indiqués étant des pourcentages en poids sur le poids total de l’extrait hydrosoluble. [Tableaux3]It is presented for two samples in Table 3 below, the percentages indicated being percentages by weight on the total weight of the water-soluble extract. [Tables3]
[0082] Ainsi, l’essentiel des protéines (75,3 %) de l’extrait hydrosoluble selon l’invention a une masse molaire inférieure à 1,4 kDa, celles-ci correspondant à des protéines très digestes. En revanche, la part des protéines peu digestes (de masse molaire supérieure à 1,4 kDa) représente moins de 25 % de l’extrait hydrosoluble de l’Exemple 1.Thus, most of the proteins (75.3%) of the water-soluble extract according to the invention have a molar mass of less than 1.4 kDa, these corresponding to very digestible proteins. On the other hand, the share of poorly digestible proteins (of molar mass greater than 1.4 kDa) represents less than 25% of the water-soluble extract of Example 1.
Ceci explique la haute digestibilité pepsique de l’extrait hydrosoluble de l’Exemple 1 (94 %).This explains the high pepsic digestibility of the water-soluble extract of Example 1 (94%).
[0083] De plus, les protéines ne présentant aucun caractère d’amertume (de masse molaire supérieure à 555 Da) représentent environ 45 % de l’extrait hydrosoluble de l’Exemple 1.In addition, the proteins having no bitterness character (of molar mass greater than 555 Da) represent approximately 45% of the water-soluble extract of Example 1.
[0084] Par conséquent, l’extrait hydrosoluble selon l’invention associe les avantages d’une haute digestibilité pepsique tout en gardant une bonne palatabilité.Consequently, the water-soluble extract according to the invention combines the advantages of a high pepsic digestibility while retaining good palatability.
Exemple 3 : Effet du broyage humideExample 3: Effect of wet grinding
[0085] Des cuticules d’insectes obtenues selon le procédé a) de l’Exemple 1 sont utilisées dans cet Exemple.Insect cuticles obtained according to method a) of Example 1 are used in this Example.
[0086] Quatre lots comportant 200 mL d’eau du robinet à température ambiante (pH d’environ 7, 20°C) et 15 g de cuticules congelées sont préparés.Four batches comprising 200 ml of tap water at room temperature (pH around 7.20 ° C.) and 15 g of frozen cuticles are prepared.
Les trois premiers lots sont chacun mélangés à une vitesse spécifique à l’aide d’un agitateur magnétique (250 rpm, 350 rpm ou 1500 rpm) pendant 150 minutes. Toutes les 10 min, un échantillon de 1 mL est prélevé dans chaque milieu réactionnel et 50 pL sont utilisés pour les mesures d’absorbance des protéines par la méthode BCA (pour « BiCinchoninic acid Assay »).The first three batches are each mixed at a specific speed using a magnetic stirrer (250 rpm, 350 rpm or 1500 rpm) for 150 minutes. Every 10 min, a 1 mL sample is taken from each reaction medium and 50 μL are used for the protein absorbance measurements by the BCA method (for "BiCinchoninic acid Assay").
Le quatrième lot subit un broyage humide à l’aide d’un Thermomix (TM 31) pendant 1 min et à une vitesse de 10000 rpm (sélection de la vitesse 10).The fourth batch undergoes wet grinding using a Thermomix (TM 31) for 1 min and at a speed of 10,000 rpm (selection of speed 10).
[0087] Les résultats sont représentés sur la Ligure 1 et montrent que, pour les trois essais sans broyage, plus la vitesse d’agitation est élevée, plus la teneur en protéines de l’extrait hydrosoluble est élevée.The results are shown in Ligure 1 and show that, for the three tests without grinding, the higher the stirring speed, the higher the protein content of the water-soluble extract.
Le quatrième essai est celui pour lequel l’extrait hydrosoluble montre la plus haute teneur en protéines et ce, après seulement 1 min de broyage humide.The fourth test is the one for which the water-soluble extract shows the highest protein content, after only 1 min of wet grinding.
Ainsi, le broyage humide permet de diminuer considérablement la durée du procédé nécessaire à l’obtention d’un extrait hydrosoluble selon l’invention comparé à un procédé sans broyage.Thus, wet grinding makes it possible to considerably reduce the duration of the process necessary for obtaining a water-soluble extract according to the invention compared to a process without grinding.
En outre, le broyage humide a également l’avantage de diminuer encore la durée du procédé en comparaison à deux étapes séparées de broyage et d’agitation.In addition, wet grinding also has the advantage of further reducing the duration of the process compared to two separate stages of grinding and agitation.
[0088] Exemple 4 ; Procédé comparatif dans lequel les protéines issues notamment de cuticules sont hydrolyséesExample 4; Comparative method in which the proteins, especially from cuticles, are hydrolyzed
[0089] Pour comparer à l’extrait hydrosoluble selon l’invention, un hydrolysat a été préparé à partir de larves de T. molitor.To compare to the water-soluble extract according to the invention, a hydrolyzate was prepared from T. molitor larvae.
[0090] Le procédé est celui décrit dans l’Exemple 1 de la demande W02016/108033 et présente les étapes suivantes :The method is that described in Example 1 of application W02016 / 108033 and has the following steps:
- abattage par ébouillantage, puis- slaughter by boiling, then
- mélange avec de l’eau, puis- mix with water, then
- pressage du mélange, puis- pressing of the mixture, then
- hydrolyse enzymatique du gâteau de presse, puis- enzymatic hydrolysis of the press cake, then
- récupération d’un hydrolysat par filtration.- recovery of a hydrolyzate by filtration.
[0091] Dans l’hydrolysat, la teneur en protéines présentant une taille comprise dans la gamme ]555 ; 1400] Da est de 8,4 % en poids, sur le poids total de protéines, et celle des protéines présentant une taille inférieure ou égale à 555 Da est de 89,4 % en poids, sur le poids total de protéines.In the hydrolyzate, the protein content having a size in the range] 555; 1400] Da is 8.4% by weight, on the total weight of proteins, and that of proteins having a size less than or equal to 555 Da is 89.4% by weight, on the total weight of proteins.
Ainsi, les protéines de cet hydrolysat sont très digestes mais ce dernier a également le désavantage d’être plus amer que l’extrait hydrosoluble selon l’invention.Thus, the proteins of this hydrolyzate are very digestible, but the latter also has the disadvantage of being more bitter than the water-soluble extract according to the invention.
[0092] On constate donc que l’extrait hydrosoluble selon l’invention possède un profil caractéristique d’une extraction aqueuse non hydrolytique de cuticules pures, et donc différent du profil obtenu pour une hydrolyse d’un gâteau de presse (comprenant non seulement des cuticules mais aussi une fraction de la chair des insectes).It can therefore be seen that the water-soluble extract according to the invention has a profile characteristic of a non-hydrolytic aqueous extraction of pure cuticles, and therefore different from the profile obtained for hydrolysis of a press cake (comprising not only cuticles but also a fraction of the flesh of insects).
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| WO2018122353A1 (en) * | 2016-12-28 | 2018-07-05 | Ynsect | Method for treating insects, in which the cuticles are separated from the soft part of the insects using a belt separator |
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2018
- 2018-12-12 FR FR1872800A patent/FR3089759B1/en active Active
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Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| S. SADASIVAMA. MANICKAM: "Carbohydrates", BIOCHEMICAL METHODS, 2008, pages 1 - 19 |
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| Publication number | Publication date |
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