FR3058056A1 - Utilisation cosmetique et methode pour ameliorer les fonctions physiologiques de la peau en augmentant l'expression d'ubiad1 - Google Patents

Utilisation cosmetique et methode pour ameliorer les fonctions physiologiques de la peau en augmentant l'expression d'ubiad1 Download PDF

Info

Publication number
FR3058056A1
FR3058056A1 FR1771134A FR1771134A FR3058056A1 FR 3058056 A1 FR3058056 A1 FR 3058056A1 FR 1771134 A FR1771134 A FR 1771134A FR 1771134 A FR1771134 A FR 1771134A FR 3058056 A1 FR3058056 A1 FR 3058056A1
Authority
FR
France
Prior art keywords
skin
ubiadl
peptide
keratinocytes
expression
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
FR1771134A
Other languages
English (en)
Other versions
FR3058056B1 (fr
Inventor
Karine CUCUMEL
Catherine Gondran
Florian LABARRADE
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
ISP Investments LLC
Original Assignee
ISP Investments LLC
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ISP Investments LLC filed Critical ISP Investments LLC
Publication of FR3058056A1 publication Critical patent/FR3058056A1/fr
Application granted granted Critical
Publication of FR3058056B1 publication Critical patent/FR3058056B1/fr
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/004—Aftersun preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/02—Preparations for care of the skin for chemically bleaching or whitening the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/10—General cosmetic use
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/52—Stabilizers
    • A61K2800/522—Antioxidants; Radical scavengers

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

L'invention porte sur une utilisation cosmétique d'une composition comprenant un peptide de formule (I) ou son dérivé pour améliorer les fonctions physiologiques de la peau, comprenant l'étape de mise en contact de la peau, des phanères ou des cellules épidermiques incluant les kératinocytes, avec ladite composition et augmenter l'expression d'Ubiadl dans cette peau, ces phanères ou ces cellules épidermiques. L'invention concerne également une méthode pour augmenter l'expression d'Ubiadl dans la peau, les phanères ou les cellules épidermiques, incluant les kératinocytes, comprenant la mise en contact de cette peau, de ces phanères et de ces cellules épidermiques avec une composition contenant le peptide de formule (I) ou son dérivé. L'expression augmentée d'Ubiadl dans la peau, les phanères ou les cellules épidermiques contribuera à l'amélioration des fonctions physiologiques de la peau.

Description

© N° de publication : 3 058 056 (à n’utiliser que pour les commandes de reproduction)
©) N° d’enregistrement national : 17 71134 ® RÉPUBLIQUE FRANÇAISE
INSTITUT NATIONAL DE LA PROPRIÉTÉ INDUSTRIELLE
COURBEVOIE © Int Cl8 : A 61 K8/64 (2017.01), A 61 Q 19/08
DEMANDE DE BREVET D'INVENTION A1
©) Date de dépôt : 27.10.17. © Demandeur(s) : ISP INVESTMENTS LLC— US.
© Priorité : 28.10.16 CN 201610968180.1.
@ Inventeur(s) : CUCUMEL KARINE, GONDRAN
CATHERINE et LABARRADE FLORIAN.
(43) Date de mise à la disposition du public de la
demande : 04.05.18 Bulletin 18/18.
©) Liste des documents cités dans le rapport de
recherche préliminaire : Ce dernier n'a pas été
établi à la date de publication de la demande.
(© Références à d’autres documents nationaux ® Titulaire(s) : ISP INVESTMENTS LLC.
apparentés :
©) Demande(s) d’extension : ©) Mandataire(s) : AXE Pl.
UTILISATION COSMETIQUE ET METHODE POUR AMELIORER LES FONCTIONS PHYSIOLOGIQUES DE LA PEAU EN AUGMENTANT L'EXPRESSION D'UBIADI.
FR 3 058 056 - A1 by L'invention porte sur une utilisation cosmétique d'une composition comprenant un peptide de formule (I) ou son dérivé pour améliorer les fonctions physiologiques de la peau, comprenant l'étape de mise en contact de la peau, des phanères ou des cellules épidermiques incluant les kératinocytes, avec ladite composition et augmenter l'expression d'Ubiadl dans cette peau, ces phanères ou ces cellules épidermiques. L'invention concerne également une méthode pour augmenter l'expression d'Ubiadl dans la peau, les phanères ou les cellules épidermiques, incluant les kératinocytes, comprenant la mise en contact de cette peau, de ces phanères et de ces cellules épidermiques avec une composition contenant le peptide de formule (I) ou son dérivé. L'expression augmentée d'Ubiadl dans la peau, les phanères ou les cellules épidermiques contribuera à l'amélioration des fonctions physiologiques de la peau.
peptide (SEC JD NO 2)
Les valeurs ROnrrtnax sort basées sir «i écart type “hautement skjiificatif avec 1e test de Stajdert n=3
2B
UTILISATION COSMÉTIQUE ET MÉTHODE POUR AMÉLIORER LES FONCTIONS PHYSIOLOGIQUES DE LA PEAU EN AUGMENTANT L’EXPRESSION D’UBIADl
Domaine de l’invention
La présente invention porte sur une utilisation cosmétique d’une composition comprenant un peptide de formule (I) ou son dérivé pour améliorer les fonctions physiologiques de la peau, comprenant l’étape de mise en contact avec la peau, les phanères ou les cellules épidermiques incluant les kératinocytes avec ladite composition, et augmenter l’expression d’Ubiadl dans cette peau, ces phanères ou ces cellules épidermiques. La présente invention porte aussi sur une méthode pour augmenter l’expression d’Ubiadl. Plus spécifiquement, l’invention porte sur une méthode pour augmenter l’expression d’Ubiadl en utilisant le peptide de formule (I).
Contexte
La peau est un organe couvrant composé de l’épiderme, la jonction dermoépidermique, le derme, etc. La partie la plus à l’extérieur est l’épiderme, un épithélium multistratifié consistant essentiellement en kératinocytes liés étroitement les uns aux autres. La couche basale de l’épiderme comprend une couche de cellules prolifératives, principalement des kératinocytes et des mélanocytes qui sont ancrés dans la jonction dermoépidermique. Le derme est le tissu supportant la peau et est composé d’eau, de fibres d’élastine et de fibres de collagène (70% des fibres dermiques), enveloppées dans une matrice interstitielle de protéoglycanes. Les fibroblastes sont le principal composant cellulaire du derme et sont la source de la synthèse des fibres de collagène et des fibres d’élastine.
Le vieillissement chronologique provoquera le déclin de l’anti-oxydation intrinsèque et de la réparation de la peau. En outre, la peau humaine est exposée à des facteurs de stress environnementaux incluant les rayonnements UV, la pollution de Pair et des substances toxiques chimiques qui provoqueront le vieillissement de la peau.
Des individus ont développé de nombreux produits afin d’améliorer les fonctions physiologiques de la peau, incluant des produits capables d’activer la régénération des cellules, le renforcement de la matrice de collagène extracellulaire et d’élastine, et l’augmentation des niveaux de vitamines E, de CoQlO, et d’acide ascorbique. Cependant, l’identification de nouveaux mécanismes/cibles en matière de soin de la peau reste importante pour le développement de produits concernés.
Description de l’invention
L’invention porte sur une utilisation cosmétique d’une composition comprenant le peptide de formule (I) ou son dérivé,
Ri-(AA)n-Ala-Val-Leu-Ala-Gly-(AA)p-R2 (I) dans laquelle
AA représente un quelconque acide aminé ou un de ses dérivés, et n et p sont des nombres entiers entre 0 et 4 ;
Ri représente la fonction amine primaire de l’acide aminé N-terminal, libre ou substituée par un groupe protecteur qui peut être sélectionné parmi l’acétyle, le benzyle, le tosyle et le benzyloxycarbonyle ;
1<2 représente la fonction hydroxyle de l’acide carboxyle de l’acide aminé C-terminal, libre ou substituée par un groupe protecteur qui peut être sélectionné parmi un alkyle Ci à C30, -NH2, -NHY et le groupe -NYY où Y représente un alkyle Ci à C4, pour améliorer les fonctions physiologiques de la peau, comprenant l’étape de mise en contact de la peau, des phanères ou des cellules épidermiques incluant les kératinocytes avec ladite composition et augmenter l’expression d’Ubiadl dans cette peau, ces phanères ou ces cellules épidermiques.
Dans un mode de réalisation, le peptide de formule (I) comprend la séquence d’acides aminés SEQID NO : 1 ou SEQID NO : 2.
Dans un mode de réalisation, le peptide de formule (I) consiste en la séquence d’acides aminés SEQID NO : 1 ou SEQID NO ; 2, préférentiellement SEQ ID NO : 2.
Dans un mode de réalisation, les cellules sont des kératinocytes, préférentiellement des kératinocytes épidermiques.
Dans un mode de réalisation, les peaux sont des organes incluant la peau et les phanères.
Dans un mode de réalisation, la peau est préférentiellement un tissu épidermique, plus préférentiellement la couche épineuse et la couche basale de l’épiderme.
La composition de la présente invention peut augmenter l’expression d’Ubiadl qui peut améliorer les fonctions physiologiques de la peau, incluant par exemple la protection contre le stress oxydatif et la peroxydation lipidique, ainsi que la préservation de la fluidité/perméabilité de la membrane cellulaire. La présente invention a une bonne perspective d’application dans le soin de la peau.
Un autre objet de la présente invention est dirigé vers une méthode d’augmentation de l’expression d’Ubiadl dans les organes, les tissus ou les cellules, c.-à-d. les phanères ou les cellules épidermiques incluant les kératinocytes pour améliorer les fonctions physiologiques de la peau, comprenant la mise en contact des organes, des tissus ou des cellules avec une composition contenant le peptide de formule (I) ou un dérivé de ce dernier,
Ri-(AA)n-Ala-Val-Leu-Ala-Gly-(AA)p-R2 (I) dans laquelle
AA représente un quelconque acide aminé ou un de ses dérivés, et n et p sont des nombres entiers entre 0 et 4 ;
Ri représente la fonction amine primaire de l’acide aminé N-terminal, libre ou substituée par un groupe protecteur qui peut être sélectionné parmi l’acétyle, le benzyle, le tosyle, et le benzyloxycarbonyle ;
R2 représente la fonction hydroxyle de l’acide carboxyle de l’acide aminé C-terminal, libre ou substituée par un groupe protecteur qui peut être sélectionné parmi un alkyle Ci à C30, -NH2, -NHY et le groupe -NYY où Y représente un alkyle Ci à C4.
Brève description des figures
Figure 1 : Expression de la protéine Ubiadl dans une peau normale.
(A) Immunodétection d’Ubiadl (vert) et d’ADN coloré au DAPI (bleu), Ubiadl est positif dans la couche épineuse et la couche basale de l’épiderme (lentille d’objectif x20, échelle graphique = 31 pm).
(B) Immunodétection d’Ubiadl (vert) et d’ADN coloré au DAPI (bleu), Ubiadl apparaît avec une localisation périnucléaire étroite, polarisée (comme des organites) (lentille d’objectif x63, échelle graphique =10 pm).
(C) Immunodétection d’Ubiadl (vert), de Giantine (rouge) et d'ADN coloré au DAPI (bleu), colocalisation de protéines (jaune) dans des cultures de kératinocytes humains, le coefficient de corrélation de Pearson pour les cellules au milieu du champ est relativement élevé 0,79 et 0,77 (lentille d’objectif x63, échelle graphique =10 pm).
Figure 2 : L’expression augmentée d’Ubiadl dans des kératinocytes humains par le peptide inducteur d’Ubiadl et les conséquences.
(A) Immunotransfert d’Ubiadl après des passages successifs de culture de kératinocytes (E signifie passage précoce, L signifie passage tardif) et immunotransfert d’Ubiadl après traitement avec 1 pM (1%) du peptide inducteur d’Ubiadl.
(B) qPCR d’Ubiadl après traitement avec 1 pM (1%) du peptide inducteur d’Ubiadl.
(C) Images de microscopie électronique représentatives de kératinocytes traités avec le peptide inducteur d’Ubiadl et doublement colorés avec de l’acétate uranyle et du citrate de plomb (échelle graphique des photos à gauche = 1 pm ; échelle graphique des photos à droite = 0,5 pm).
Figure 3 : Effet de protection de l’expression augmentée d’Ubiadl sur des kératinocytes (A) Mesure d’espèces réactives de l’oxygène (ROS) cellulaires dans des kératinocytes exposés pendant 1 heure à 200 μΜ d’hydroperoxyde de cumène en utilisant le marqueur CellROX vert (lentille d’objectif x20, échelle graphique = 31 pm).
(B) Graphique de quantification CellROX avec une analyse de variance à un facteur, affichant des diamants des moyennes d’intervalle de confiance (vert). La ligne à travers chaque diamant représente la moyenne de groupe. La portée verticale de chaque diamant représente l’intervalle de confiance de 95% pour chaque groupe. La moyenne du grand échantillon est représentée par une ligne noire horizontale.
(C) Peroxydation lipidique dans des kératinocytes exposés pendant 1 heure à 200 μΜ d’hydroperoxyde de cumène (BODIPY réduit en rouge ; BODIPY oxydé en vert) (lentille d’objectif x20, échelle graphique = 31 pm).
(D) Graphique de quantification de peroxydation lipidique avec une analyse de variance à un facteur, affichant des diamants des moyennes d’intervalle de confiance (vert). La ligne à travers chaque diamant représente la moyenne de groupe. La portée verticale de chaque diamant représente l’intervalle de confiance de 95% pour chaque groupe. La moyenne du grand échantillon est représentée par une ligne noire horizontale.
(E) Immunodétection de 3-nitrotyrosine (vert), coloration de F-actine avec la phalloïdine (rouge) et ADN coloré au DAPI (bleu) dans des kératinocytes soumis à un stress d’espèces nitriques réactives (lentille d’objectif x20, échelle graphique = 31 pm).
(F) Graphique de quantification 3 NT avec une analyse de variance à un facteur, affichant des diamants de moyennes d’intervalle de confiance (vert). La ligne à travers chaque diamant représente la moyenne de groupe. La portée verticale de chaque diamant représente l’intervalle de confiance de 95% pour chaque groupe. La moyenne du grand échantillon est représentée par une ligne noire horizontale.
(G) Mesure d’intégrité de membrane plasmique avec une sonde TMA-DPH (bleue) dans des kératinocytes exposés pendant une heure à 2 mM d’hydroperoxyde de cumène (lentille d’objectif x20), échelle graphique = 31 pm).
(H) Graphique de quantification TMA-DPH avec analyse de variance à un facteur, affichant des diamants de moyennes d’intervalle de confiance (vert). La ligne à travers chaque diamant représente la moyenne de groupe. La portée verticale de chaque diamant représente l’intervalle de confiance de 95% pour chaque groupe. La moyenne du grand échantillon est représentée par une ligne noire horizontale.
Description détaillée
L’invention porte sur une utilisation cosmétique d’une composition comprenant le peptide de formule (I) ou son dérivé,
Ri-(AA)n-Ala-Val-Leu-Ala-Gly-(AA)p-R2 (I) dans laquelle
AA représente un quelconque acide aminé ou un de ses dérivés, et n et p sont des nombres entiers entre 0 et 4 ;
Ri représente la fonction amine primaire de l’acide aminé N-terminal, libre ou substituée par un groupe protecteur qui peut être sélectionné parmi l’acétyle, le benzyle, le tosyle, et le benzyloxycarbonyle ;
R2 représente la fonction hydroxyle de l’acide carboxyle de l’acide aminé C-terminal, libre ou substituée par un groupe protecteur qui peut être sélectionné parmi un alkyle Ci à C30, -NH2, -NHY et le groupe -NYY où Y représente un alkyle de Ci à C4, pour améliorer les fonctions physiologiques de la peau comprenant l’étape de mise en contact de la peau, des phanères ou des cellules épidermiques incluant les kératinocytes avec ladite composition et augmenter l’expression d’Ubiadl dans cette peau, ces phanères ou ces cellules épidermiques.
Ubiadl (aussi connu sous le nom de Terel) a été cloné en 2001 (McGarvey
TW, et al., Oncogene 2001 ; 20:1042-51). Les inventeurs de la présente invention ont découvert qu’Ubiadl est localisé dans les kératinocytes de l’épiderme. L’imagerie microscopique légère de la colocalisation d’Ubiadl et de la Giantine (une protéine de la famille des Golgines) a défini les domaines de Golgi alors que la coloration du réseau plus large d’Ubiadl a pointé vers le réseau mitochondrial. Les inventeurs ont découvert que l’expression augmentée d’Ubiadl est accompagnée d’une amélioration significative du profil ultra structurel des kératinocytes de la mitochondrie et du complexe de Golgi. Un effet positif sur les composants de la mitochondrie notée ci-dessus est bénéfique pour les énergies cellulaires des kératinocytes. Les dommages oxydatifs sur T ADN mitochondrial et les protéines dans les kératinocytes sont liés à la diminution des fonctions physiologiques de la peau, telles que le vieillissement.
En outre, les inventeurs ont par ailleurs trouvé qu’Ubiadl joue des rôles importants dans la prévention des cellules de la peau contre ce stress oxydatif et cette peroxydation lipidique. L’expression augmentée d’Ubiadl dans les cellules de la peau telles que les kératinocytes peut diminuer efficacement le stress oxydatif et la peroxydation lipidique. De plus, l’expression augmentée d’Ubiadl contribue également à la préservation de la fluidité/perméabilité de la membrane cellulaire.
Le terme « peptide » fait référence à une chaîne de deux ou plusieurs acides aminés liés les uns aux autres par des liaisons peptidiques. L’expression « le peptide de la présente invention » fait référence au peptide de formule (I). Le peptide de la présente invention peut être obtenu, soit par une synthèse chimique classique (dans la phase solide ou dans la phase homogène liquide), soit par synthèse enzymatique (Kullman et al. J. Biol. Chem., 1980, vol. 225, p. 8234) à partir d’acides aminés constituants. Dans un mode de réalisation, le peptide de la présente invention peut être d’origine naturelle ou synthétique.
Pour améliorer la résistance à la dégradation, il peut être nécessaire de modifier le peptide de façon à obtenir une forme protégée du peptide de la présente invention. La modification doit être effectuée sous une forme physiologiquement acceptable ou cosmétiquement acceptable. Dans un mode de réalisation, la fonction amine primaire de l’acide aminé N-terminal du peptide de la présente invention peut faire l’objet d’une acylation ou d’une acétylation. De préférence, le groupe protecteur de l’acide aminé N-terminal peut être sélectionné parmi l’acétyle, le benzyle, le tosyle et le benzyloxycarbonyle. Dans un mode de réalisation, la fonction hydroxyle de l’acide aminé C-terminal du peptide de la présente invention peut faire l’objet d’une amidation ou d’une estérification. De préférence, le groupe protecteur de l’acide aminé C-terminal peut être sélectionné à partir d’alkyle Ci à C30, -NH2, -NHY et du groupe -NYY où Y représente un alkyle Ci à C4.
Dans un mode de réalisation, le peptide de la présente invention comprend la séquence suivante : Ala-Val-Leu-Ala-Gly (SEQ ID NO : 1). Dans un autre mode de réalisation, le peptide de la présente invention comprend la séquence suivante : Ala-Val-Leu-Ala-Gly-NHb (SEQ ID NO : 2). Dans un autre mode de réalisation, le peptide de la présente invention consiste en la séquence d’acides aminés SEQ ID NO : 1 ou SEQ ID NO : 2, de préférence SEQ ID NO : 2. Dans un autre mode de réalisation, la présente invention comprend l’utilisation d’un mélange d’Ala-Val-Leu-Ala-Gly (SEQ ID NO : 1) et d’Ala - Val-Leu-Ala-GlyNH2 (SEQ ID NO : 2).
Dans un mode de réalisation, l’organe est la peau. Le terme « peau » inclut de façon constante la peau et les « phanères ». Les phanères incluent toutes les kératines annexes présentes à la surface du corps, en particulier les poils, les cils, les sourcils, les ongles et les cheveux. La peau comprend l’épiderme, la jonction dermoépidermique, le derme, etc. L’épiderme comprend par ailleurs une couche cornée, une couche granuleuse, une couche épineuse et une couche basale. Dans un mode de réalisation, les tissus sont des tissus épidermiques, de préférence la couche épineuse et la couche basale de l’épiderme. Dans un mode de réalisation, les cellules sont des kératinocytes, de préférence des kératinocytes épidermiques.
Dans un mode de réalisation, l’invention porte sur une méthode pour augmenter l’expression d’Ubiadl dans les kératinocytes, comprenant la mise en contact des organes ou des tissus incluant les kératinocytes, c.-à-d. la peau, les phanères ou les cellules épidermiques, incluant les kératinocytes, avec un peptide ou une composition incluant le peptide, dans laquelle le peptide est sélectionné à partir du peptide de SEQ ID NO : 1, le peptide de SEQ ID NO : 2 et la combinaison de ceux-ci.
L’invention porte aussi sur l’utilisation cosmétique du peptide de formule (I) pour augmenter l’expression d’Ubiadl dans les kératinocytes pour améliorer les fonctions physiologiques de la peau,
Ri-(AA)n-Ala-Val-Leu-Ala-Gly-(AA)p-R2 (I) dans laquelle
AA représente un quelconque acide aminé ou l’un de ses dérivés, et n et p sont des nombres entiers entre 0 et 4 ;
Ri représente la fonction amine primaire de l’acide aminé N-terminal, libre ou substituée par un groupe protecteur qui peut être sélectionné parmi l’acétyle, le benzyle, le tosyle, et le benzyloxycarbonyle ;
R2 représente la fonction hydroxylé de l’acide carboxyle de l’acide aminé C-terminal, libre ou substituée par un groupe protecteur qui peut être sélectionné parmi un alkyle Ci à C30, -NH2, -NHY et le groupe -NYY où Y représente un alkyle Ci à C4.
Dans un mode de réalisation, le peptide de formule (I) comprend ou consiste en des séquences d’acides aminés suivantes : SEQ ID NO : 1 ou SEQ ID NO : 2, de préférence SEQ ID NO : 2.
Le peptide de la présente invention est avantageusement solubilisé dans un ou plusieurs solvants physiologiquement ou cosmétiquement acceptables, tels que l’eau, le glycérol, l’éthanol, le propylène glycol, le butylène glycol, le dipropylène glycol, les diglycols éthoxylés ou propoxylés, les polyols cycliques, ou tout mélange de ces solvants. L’expression « physiologiquement ou cosmétiquement acceptable » signifie que le solvant choisi est approprié pour entrer en contact avec la peau sans causer de toxicité ou de réactions d’intolérance. Dans un mode de réalisation, le peptide de la présente invention peut être dissous dans un ou plusieurs solvants cosmétiquement acceptables, sélectionnés parmi l’eau, le glycérol, l’éthanol, le propylène glycol, le butylène glycol, le dipropylène glycol, les diglycols éthoxylés ou propoxylés, les polyols cycliques, ou tout mélange de ces solvants.
Le peptide de la présente invention peut être encapsulé ou contenu dans un vecteur cosmétique tel que des liposomes ou toute autre microcapsule utilisée dans le domaine cosmétique ou adsorbé dans des polymères organiques poudreux, des transporteurs de minéraux tels que les talcs et les bentonites.
Par conséquent, la présente invention porte aussi sur une composition comprenant le peptide de formule (I) qui peut augmenter l’expression d’Ubiadl dans les kératinocytes de la peau. L’invention porte aussi sur l’utilisation du peptide de formule (I) comme ingrédient actif pour augmenter l’expression d’Ubiadl dans les kératinocytes de la peau dans une composition de soin cosmétique. L’invention porte aussi sur une méthode de soin cosmétique pour améliorer l’expression d’Ubiadl dans les kératinocytes de la peau, comprenant l’administration d’une composition de soin cosmétique comprenant le peptide de formule (I) sur la peau.
La composition de la présente invention peut en particulier avoir la forme d’une solution aqueuse, hydroalcoolique ou huileuse ; d’une émulsion huile dans eau ou d’une émulsion eau dans huile ou d’émulsions multiples ; d’un gel aqueux ou anhydre ; d’un colloïde. Ces compositions peuvent aussi avoir la forme de crèmes, de suspensions, ou de poudre, appropriées pour une application sur la peau, les membranes muqueuses, les lèvres et/ou les phanères. Ces compositions peuvent être plus ou moins fluides et avoir l’apparence d’une crème, d’une lotion, d’un lait, d’un sérum, d’une pommade, d’une crème, d’une pâte ou d’une mousse. Elles peuvent aussi exister sous forme solide, telle qu’un bâtonnet ou être appliquées sur la peau avec un aérosol. Dans un mode de réalisation, la composition de la présente invention est une composition de soin cosmétique.
La composition de la présente invention inclut tout additif communément utilisé dans le domaine cosmétique ainsi que tout adjuvant nécessaire à sa formulation, tel que les co-solvants (éthanol, glycérol, alcool benzylique, humectant, etc.), les agents épaississants, les diluants, les émulsifiants, les antioxydants, les agents colorants, les écrans solaires, les pigments, les agents de remplissage, les conservateurs, les parfums, les agents d’absorption d’odeur, les huiles essentielles, les oligo-éléments, les acides gras essentiels, les tensioactifs, les polymères filmogènes, les filtres chimiques ou minéraux, les agents hydratants ou l’eau thermale, et ainsi de suite. Il est possible par exemple de citer les polymères solubles dans l’eau d’un type naturel, tels que les polysaccharides ou les polypeptides, les dérivés cellulosiques de type méthylcellulose ou hydroxypropyle métylcellulose ou les polymères synthétiques, les poloxamères, les carbomères, les siloxanes, PVA ou PVP et en particulier les polymères vendus par la société ISP.
Quel que soit le cas, l’homme de métier s’assurera que ces adjuvants ainsi que leurs proportions sont choisis de façon à ne pas contrer les propriétés avantageuses recherchées dans la composition selon l’invention. Ces adjuvants peuvent, par exemple, être présents dans des concentrations variant de 0,01 à 20% du poids total de la composition. Lorsque la composition de l’invention est une émulsion, la phase lipidique peut représenter 5 à 80% en poids et de préférence 5 à 50% en poids par rapport au poids total de la composition. Les émulsifiants et co-émulsifiants utilisés dans la composition seront choisis à partir de ceux qui sont utilisés conventionnellement dans le domaine envisagé. Par exemple, ils peuvent être utilisés dans une proportion allant de 0,3 à 30% en poids par rapport au poids total de la composition.
Dans un mode de réalisation, le peptide de la présente invention est présent dans la composition dans une concentration entre 0,0005-500 μΜ, de préférence 0,01-5 μΜ, sur la base du poids total de la composition.
Bien sûr, le peptide de la présente invention peut être utilisé seul ou en association avec d’autres agents actifs. Par exemple, la composition de soin cosmétique de la présente invention contient, en plus, au moins un autre agent actif destiné à améliorer les fonctions physiologiques de la peau tels que les régénérants, les agents antivieillissement, les antirides, les épaississants, les anti-radicaux libres, les agents contre la glycation, les hydratants, les antibactériens, les antifongiques, les kératolytiques, les relaxants musculaires, les exfoliants et les agents toniques, les agents stimulant la synthèse des macromolécules dermiques ou du métabolisme énergétique, les agents modulant la différenciation cutanée, la pigmentation ou la dépigmentation, les agents stimulant la croissance des ongles ou des cheveux, les agents stimulant la microcirculation, les écrans solaires ou les agents inhibiteurs de métalloprotéinase. Dans un mode particulier de l’invention, l’expression augmentée du gène Ubiadl dans les kératinocytes de la peau peut effectivement engendrer une diminution du stress oxydatif et de la peroxydation lipidique dans les kératinocytes de la peau, ce qui aide à la prévention du vieillissement de la peau.
Dans un mode de réalisation, la composition de la présente invention comprendra, en plus du peptide de la présente invention :
- des écrans solaires, des écrans contre les infrarouges et les ultraviolets
- des agents anti-radicaux libres,
- de la DHEA (déhydroépiandrostérone),
- au moins un composé activateur du cytochrome C, et/ou ;
- un (ou plusieurs) composé activateur d’aquaporine et/ou ;
- un (ou plusieurs) composé activateur de sirtuine et/ou ;
- un (ou plusieurs) composé augmentant l’adhésion des cellules et/ou ;
- un (ou plusieurs) composé augmentant la production des protéines de la matrice du type collagène ou laminine, etc. ;
- un (ou plusieurs) composé modulateur de protéine HSP ;
- un (ou plusieurs) composé augmentant l’énergie des cellules ;
- un (ou plusieurs) composé modulateur de la pigmentation tel qu’un extrait peptidique de levure, amarante, graine de lin, haricot, cacao, maïs, soja, tournesol, colza ou pois ;
- un (ou plusieurs) composé améliorant la fonction de barrière de la peau ;
- un (ou plusieurs) composé protecteur des mitochondries.
- de la vitamine A et notamment l’acide rétinoïque, le rétinol, le propionate de rétinol, le palmitate de rétinol,
- de la vitamine B3 et notamment la niacinamide, le niconitate de tocophérol,
- de la vitamine B5, de la vitamine B6, de la vitamine B12, du panthénol,
- de la vitamine C et notamment de l’acide ascorbique, du glucoside ascorbyle, du tétrapalmitate ascorbyle, du magnésium et du phosphate ascorbyle de sodium,
- des vitamines E, F, H, K, PP et du coenzyme Q10,
- un inhibiteur de métalloprotéinase, un activateur de l’inhibiteur tissulaire de métalloprotéinase (TIMP),
- des acides aminés et notamment arginine, omithine, hydroxyproline, dipalmitate d’hydroxyproline, palmitoglycine, hydroxylysine, méthionine et ses dérivés, acides aminés N-acylés,
- des peptides naturels ou synthétiques, incluant les di -, tri-, tétra -, pentaet hexapeptides et leurs dérivés lipophiles, isomères et complexes avec d’autres molécules telles que des ions métalliques (c.-à-d. le cuivre, le zinc, le manganèse, le magnésium et d’autres), des peptides vendus sous les noms commerciaux MATRIXYL®, ARGIRELINE®, COLLAXYL™, PEPTIDE VINCI 02™, CHRONOGEN™, LAMINIXYLIS™,
- des extraits peptidiques de plante obtenus par hydrolyse ou tout autre procédé tel qu’un extrait de soja, extrait de petit épeautre, extrait de vitis vinefira, extrait de colza, extrait de graine de lin, extrait de riz, extrait de maïs ou extrait de pois, extrait de caroube, extrait de haricot, extrait de fève,
- un extrait de levure, un extrait d’artémia salina,
- de l’acide déhydroacétique (DHA),
- des phytostérols naturels ou synthétiques,
- des alpha- et bêta-hydroxyacides, des silanols,
- des sucres aminés, de la glucosamine, de la D-glucosamine, du Nacétylglucosamine, du N-acétyl-D-glucosamine, de la mannosamine, du Nacétylmannosamine, de la galactosamine, du N-acétylgalactosamine,
- des polyphénols, des isoflavones, des flavonoïdes, tels qu’un extrait de raisin, extrait de pin, extrait d’olive,
- des lipides tels que les céramides ou les phospholipides,
- des huiles animales telles que les squalènes ou squalanes,
- des huiles végétales telles que l’huile d’amande, l’huile de noix de coco, l’huile de ricin, l’huile de jojoba, l’huile d’olive, l’huile de colza, l’huile d’arachide, l’huile de tournesol, l’huile de germe de blé, l’huile de germe de maïs, l’huile de soja, l’huile de coton, l’huile d’alfafa, l’huile de pavot, l’huile de graine de citrouille, l’huile d’onagre, l’huile de millet, l’huile d’orge, l’huile de seigle, l’huile de carthame, l’huile de passion, l’huile de noisette, l’huile de palme, l’huile de noyau d’abricot, l’huile d’avocat, l’huile de calendula, les huiles végétales éthoxylées, ou le beurre de karité. Les composés mentionnés cidessus peuvent être naturels tels que les hydrolysats peptidiques de plantes mais aussi synthétiques, tels que les composés peptides.
L’expression « entrer en contact » fait référence à l’application du peptide de la présente invention ou d’une composition incluant ce dernier sur la surface d’un organe ou d’un tissu incluant des kératinocytes, c.-à-d. la peau, les phanères ou les cellules épidermiques incluant les kératinocytes. Le peptide de la présente invention ou une composition incluant ce dernier peut être appliqué par voie topique sur un individu. Le terme « individu » fait référence à un mammifère, y compris sans s’y limiter, à un humain. « Application topique » fait référence à l’application, à l’étalement du peptide de la présente invention ou à une composition le contenant, à la surface de la peau ou d’une membrane muqueuse. Dans un mode de réalisation, le peptide de la présente invention ou la composition le contenant est appliqué sur les parties du corps humain exposées à l’environnement, incluant sans s’y limiter, la tête, le visage, la tête et le cou, le front, la cavité de l’œil, le nez, le cou, le bras et la jambe.
L’expression « fonctions physiologiques améliorées de la peau » signifie toutes les modifications de l’apparence extérieure de la peau et des phanères, par exemple, l’amélioration des signes de vieillissement de la peau et du photovieillissement. « Les signes de vieillissement de la peau ou photovieillissement » font référence à tous les changements dans l’apparence externe de la peau et des phanères dus au vieillissement, tels que par exemple, l’amincissement de la peau, l’affaissement, la perte d’hydratation et l’atonie, les rides profondes et les lignes fines, la perte de fermeté et de tonicité, l’atrophie dermique, la perte d’homogénéité du teint de la peau, les cernes, ou toute autre dégradation interne de la peau résultant de l’exposition aux rayonnements ultraviolets, les taches brunes et taches de vieillissement. Les taches brunes également connues sous le nom de « lentigo solaire », « lentigo senilis », « taches de vieillesse » « taches de rousseur séniles », sont des imperfections de la peau associées au vieillissement et au photo-vieillissement dues à l’exposition aux rayonnements ultraviolets du soleil. Leurs couleurs varient de marron clair à rouge ou noir et elles sont situées dans des endroits exposés le plus souvent au soleil, particulièrement les mains, le visage, les épaules, les bras et le front, et le crâne, s’il est chauve. Dans un mode de réalisation particulier de l’invention, l’expression augmentée du gène Ubiadl dans les kératinocytes de la peau peut donner les améliorations ci-dessus, incluant par exemple les améliorations des signes du vieillissement de la peau et du photo-vieillissement, la diminution des rides, des cernes, etc.
D’autres avantages et caractéristiques de l’invention deviendront plus clairs au regard des exemples suivants fournis à titre d’illustration et sans objectif restrictif.
Exemples
1. Matériels et méthodes
1.1 Structure du peptide inducteur d’Ubiadl
La séquence d’acides aminés du peptide inducteur d’Ubiadl est Ala-ValLeu-Ala-Gly-NH2 (SEQ ID NO : 2) et le peptide inducteur d’Ubiadl est synthétisé artificiellement. La solution de travail était 1 μΜ.
1.2 Anticorps et sondes
Les anticorps principaux utilisés étaient l’anti-Ubiadl (sc-377013, Santa Cruz Biotechnology, Heidelberg, Allemagne), l’anti-Giantine (ab24586, Abcam, Cambridge, RU), anti-3-Nitrotyrosine (ab61392, Abcam). Des anticorps secondaires couplés à l’Alexa Fluor® ont été utilisés (Sondes moléculaires, Eugene, OR, USA). Une sonde Alexa Fluor® 594 Phalloïdine a été utilisée pour la détection de F-actine (Al2381, sondes moléculaires). Une sonde CellROX verte a été utilisée pour suivre le ROS intracellulaire (Cl0444, sondes moléculaires). Cll-BODIPY (581/591) a été utilisé pour suivre la peroxydation lipidique (C10445, sondes moléculaires). Une sonde TMA-DPH a été utilisée à 2 μΜ dans des expériences de fluidité de membrane (43060, Sigma, St. Louis, MO, USA).
1.3 Interférence ARN
Ubiadl siRNA (HSS179099, Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) a été transfecté avec la lipofectamine RNAiMAX (Invitrogen). Après 48 heures, les cellules ont été prélevées et analysées par réaction en chaîne par polymérase quantitative. Pour le contrôle négatif, des duplexes Stealth RNAi contrôle négatif (Invitrogen) avec un contenu en GC moyen ont été utilisés, conformément à la recommandation du fabricant.
1.4 Culture de cellules
Des kératinocytes épithéliaux humains normaux ont été isolés à partir de peau obtenue par chirurgie esthétique chez des femmes en bonne santé qui avaient donné leur consentement éclairé. Les kératinocytes ont été cultivés dans un milieu sans sérum avec un facteur de croissance épidermique humain recombinant et un extrait hypophysaire bovin (Gibco, Auckland, NZ), et 0,1 mg/ml Primocin™ (Invivogen, San Diego, CA, USA).
1.5 Test Transcriptase inverse -PCR
L’ARN total a été extrait en utilisant le kit d’isolation mirVana miRNA conformément aux instructions du fabricant (Ambion, Austin, TX, USA). L’ARN total a été retranscrit avec le kit de transcription inverse à haute capacité ADNc (Applied Biosystems, Branchburg, NJ, USA). La réaction en chaîne par polymérase en temps réel a été effectuée selon la méthode Taqman, en utilisant le mélange TaqMan Universal PCR Master Mix (Applied Biosystems) avec le système StepOnePlus Real-time PCR (Applied Biosystems). L’expression relative des niveaux de chaque gène cible a été calculée selon la méthode deltadelta-CT.
1.6 Analyse par Western blot
Les kératinocytes ont été lysés dans un tampon RIPA (Thermo Scientific, Rockford, IL, USA) contenant un cocktail d’inhibiteur de protéase et de l’EDTA (Thermo Scientific). La concentration de protéines a été déterminée en utilisant le kit de test de protéine BCA (Thermo Scientific) et des quantités égales de protéine totale ont été chargées dans un gel 4 à 12% NuPage Bis-Tris (Invitrogen) et transférées sur des membranes de nitrocellulose en utilisant le système iBlot dry blotting (Invitrogen). Des sites de liaison non spécifiques ont été bloqués et les membranes ont ensuite été marquées avec des anticorps appropriés, et développées en utilisant le kit de substrat à forte sensibilité SuperSignal West Femto Maximum Sensitivity Substrate (Thermo Scientific).
1.7 Immunofluorescence
Des cellules fixées par méthanol ont été perméabilisées dans 0,1% de triton XI00, bloquées dans 1% de solution ASB. Les cellules ont été incubées avec des anticorps primaires dilués dans une solution saline tamponnée au phosphate, suivi d’une incubation avec des anticorps secondaires couplés à l’Alexa Fluor (Invitrogen). L’acquisition d’images a été réalisée en utilisant un microscope Axiovert 200M (Cari Zeiss, Oberkochen, Allemagne). Des photos ont été prises avec une caméra Exi bleue (Qimaging, Surrey, BC, Canada) couplée au logiciel d’acquisition Volocity (Perkin Elmer, Waltham, MA, USA). La colocalisation d’Ubiadl et de Giantine a été effectuée par une approche statistique (17) éliminant ainsi le biais de l’interprétation visuelle. Le coefficient de corrélation de Pearson a été utilisé comme paramètre statistique pour quantifier le degré de colocalisation.
1.8 Fluorescence immunohistologique
Des échantillons de peau humaine ont été obtenus par chirurgie esthétique sur des femmes en bonne santé qui avaient donné leur consentement éclairé. Après l’élimination de tissu gras sous-cutané, du tissu a été utilisé pour prendre 6 mm de biopsies à l’emporte pièce, fixées dans du formaldéhyde et traitées dans le processeur automatisé Shandon Hypercenter XP (Shandon Ltd., Runcor, RU) pour l’inclusion de paraffine. Des sections de 4 pm d’épaisseur ont été découpées avec un microtome (Shandon) et collectées sur des lamelles de verre recouvertes de polylysine (Menzel Glaser, Braunschweig, Allemagne) pour l’immunocoloration. La récupération de l’antigène enzymatique pepsine et le chauffage ont été effectués avant l’incubation avec l’anticorps d’Ubiadl.
1.9 Microscopie électronique
Les kératinocytes cultivés, traités avec le peptide à une concentration de 1 μΜ pendant 48 heures ont été fixés dans une solution de Karnovsky (Emsdiasum, Hatfield, PA, USA) pendant 1 h à température ambiante et laissés pendant 12 h à 4°C. Les cellules ont été ensuite soigneusement retirées de la boîte de pétri, agglomérées par une brève centrifugation et lavées avec 0,1 M de tampon cacodylate de sodium. Les granulés ont été régulièrement traités à l’acide osmique, déshydratés dans des bains successifs à concentration croissante d’éthanol et infiltrés avec ; et incorporés dans, une résine d’eponepoxy à faible viscosité. Des sections ultraminces de couleur d’interférence grisargent ont été découpées et doublement colorées à l’acétate d’uranyle et au citrate de plomb, puis examinées au microscope électronique de transmission Zeiss 10. Des photos microscopiques ont été prises avec une caméra numérique Gatan (Gatan, Pleasanton, CA, USA).
1.10 Analyse statistique
Toutes les expériences ont été répétées, la quantification de la fluorescence a été effectuée en mesurant l’intensité fluorescente de la coloration qui a été normalisée par zone cellulaire. La peroxydation lipidique dans les cellules a été quantifiée conformément aux directives du fabricant avec des ratios de signal du canal 590 au canal 510. Les analyses statistiques ont été effectuées en utilisant le logiciel JMP (SAS, Cary, NC, USA). Le test de normalité des données a été effectué avec le test Shapiro-Wilk. L’analyse à un facteur de variance (ANOVA) a été utilisée pour déterminer s’il y avait des différences significatives entre les moyennes de deux ou plusieurs groupes indépendants. La différence entre deux moyennes a été effectuée avec un test-t de Student. Une valeur-p <0,05 a été considérée comme statistiquement significative (*), une valeur-p <0,01 comme très significative (**) et une valeur-p <0,005 comme hautement significative (***).
2. Résultats
2.1 Expression et localisation d’Ubiadl dans l’épiderme de peau humaine
L’immunocoloration d’Ubiadl sur des sections de peau humaine (Fig.lA et IB) a montré une localisation principale de l’enzyme dans l’épiderme bien que certaines cellules du derme fussent aussi positives. À l’intérieur de l’épiderme, la localisation d’Ubiadl était forte dans la couche épineuse et la couche basale (Fig. IA) alors qu’elle était à peine détectable dans le stratum granulosum. Ubiadl a montré une localisation sous-cellulaire particulière par une forte agrégation de fluorescence près des noyaux et de plusieurs vésicules cytoplasmiques alors que la membrane plasmique était virtuellement incolore (Fig. IA). Une telle localisation périnucléaire asymétrique suggère fortement que l’enzyme est situé à l’intérieur des organites cytosoliques (Fig. IB).
2.2 Expression et localisation d’Ubiadl à l’intérieur des kératinocytes in vitro
La coloration par immunofluorescence des cellules cultivées pour Ubiadl endogène a indiqué deux modèles de distribution distincts : premièrement une coloration ponctuée et deuxièmement, une localisation périnucléaire réminiscente de l’appareil Golgi (Fig. IC). Comme indiqué dans les images en surimpression de couleur, Ubiadl a montré une colocalisation significative avec la Giantine, une protéine qui est localisée dans le complexe de Golgi. Par conséquent, le coefficient de corrélation de Pearson a été relativement élevé (0,79, 0,77) ; ces observations suggèrent fortement que Ubiadl s’associe avec le réseau trans-Golgi (TGN). Les zones de Giantine négative et d’Ubiadl positive sont considérées comme étant une localisation mitochondriale.
2.3 Diminution de l’expression d’Ubiadl dans les kératinocytes en passage tardif.
Pour déterminer si l’expression d’Ubiadl diminuait pendant le vieillissement des kératinocytes, le niveau d’Ubiadl a été mesuré par immunotransfert dans des kératinocytes cultivés au cours de passages successifs précoces et tardifs. Une diminution clairement définie de l’expression d’Ubiadl a été observée entre les passages de cultures de cellules précoces et tardifs in vitro (Fig. 2A).
2.4 Le peptide inducteur d’Ubiadl augmente l’expression d’Ubiadl dans les kératinocytes de la peau
Le peptide inducteur d’Ubiadl, c.-à-d. Ala-Val-Leu-Ala-Gly-NIL (SEQ ID NO : 2) a été utilisé pour augmenter l’expression d’Ubiadl dans les kératinocytes de la peau. Comme le montrent les Figs. 2A et 2B, l’expression d’Ubiadl dans les kératinocytes de la peau a été augmentée par le traitement du peptide inducteur d’Ubiadl, données mesurées par qPCR (+102%) et par immunotransfert (+53%).
2.5 Effet protecteur d’Ubiadl sur les kératinocytes de la peau heures après la transfection, un silençage d’Ubiadl induit par siARN a donné une expression en ARNm réduite de 84%. Afin d’enquêter sur les mécanismes compensateurs des cellules pour se préserver du stress oxydatif et de la peroxydation lipidique subséquente, nous avons quantifié l’expression de Cyplal, une des plus importantes enzymes de détoxification, due à sa grande spécificité de substrat. Il a été observé que le silençage d’Ubiadl est associé à une expression plus élevée de Cyplal, suggérant un mécanisme compensateur pour gérer le stress oxydatif.
Le peptide inducteur d’Ubiadl Ala-Val-Leu-Ala-Gly-NH? (SEQ ID NO :
2) a été utilisé pour augmenter l’expression d’Ubiadl dans des kératinocytes de la peau. Comme le montre la Fig. 2C, la microscopie électronique de transmission des kératinocytes traités avec le peptide a révélé des différences frappantes dans la morphologie des cellules entre les cellules de contrôle et les cellules traitées. Le traitement du peptide a été associé à une forte augmentation du contenu des cellules de Golgi et des mitochondries, résultant en un état de morphologie des kératinocytes hautement « activé ». Alors que les mitochondries sont apparues comme ayant une apparence élargie et interconnectée à l’intérieur du cytosol, le complexe Golgi est devenu très proéminent, à la fois en nombres d’agrégats et en éléments trans-Golgi.
L’hydroperoxyde de cumène a induit une accumulation massive de ROS dans les kératinocytes (Fig. 3A), + 151% comparé à la condition contrôle (Fig. 3B). Il a été observé que les kératinocytes traités avec le peptide étaient plus résistants à l’accumulation de ROS (Figs. 3A and 3B) et à la peroxydation lipidique (Figs. 3C and 3D) accompagnés par l’expression augmentée d’Ubiadl, suggérant un rôle de modulation d’Ubiadl pour contrer le stress oxydatif.
De plus, Ubiadl confère une protection contre l’oxydation induite par SIN1 peroxynitrite, le stress nitrosant a été évalué par immunolabellisation de 3nitrotyrosine, un marqueur d’empreinte de peroxynitrite (ONOO-) et d’autres espèces de nitrogène réactif. Les kératinocytes exprimant un niveau plus élevé d’Ubiadl semblent être plus résistants au stress nitrosant (Figs. 3E and 3F).
La perméabilité de la membrane des kératinocytes a été suivie avec la TMA-DPH (triméthylamine-diphénylhexatriène) ; une sonde hydrophobique présentant une fluorescence après incorporation dans la membrane plasmique ; l’hydroperoxyde de cumène a été associé à un changement observé dans la perméabilité de la membrane de la cellule (Fig.
3G) (+ 83% en intensité de fluorescence comparée à la condition contrôle) (Fig.
3H). Toutefois, cette perturbation de la fluidité de la membrane n’a pas été observée dans les kératinocytes exprimant un niveau plus élevé d’Ubiadl (Fig.
3H).

Claims (6)

  1. REVENDICATIONS
    1. Utilisation cosmétique d’une composition comprenant un peptide de formule (I) ou son dérivé,
    Ri-(AA)n-Ala-Val-Leu-Ala-Gly-(AA)p-R2 (I) dans laquelle
    AA représente un quelconque acide aminé ou un de ses dérivés, et n et p sont des nombres entiers entre 0 et 4 ;
    Ri représente la fonction amine primaire de l’acide aminé N-terminal, libre ou substituée par un groupe protecteur qui peut être sélectionné parmi l’acétyle, le benzyle, le tosyle, et le benzyloxycarbonyle ;
    R2 représente la fonction hydroxyle de l’acide carboxyle de l’acide aminé C-terminal, libre ou substituée par un groupe protecteur pouvant être sélectionné parmi un alkyle Ci à C30, -NH2, -NHY et le groupe -NYY où Y représente un alkyle de Ci à C4, pour améliorer les fonctions physiologiques de la peau comprenant l’étape de mise en contact de la peau, des phanères ou des cellules épidermiques incluant les kératinocytes avec ladite composition et augmenter l’expression d’Ubiadl dans cette peau, ces phanères ou ces cellules épidermiques.
  2. 2. Utilisation cosmétique selon la revendication 1, dans laquelle le peptide de la formule (I) comprend la séquence d’acide aminé SEQ ID NO : 1 ou SEQ IDNO:2.
  3. 3. Utilisation cosmétique selon la revendication 1 ou 2, dans laquelle le peptide de la formule (I) consiste en la séquence d’acide aminé SEQ ID NO : 1 ou SEQ ID NO : 2, de préférence SEQ ID NO:2.
  4. 4. Utilisation cosmétique selon l’une quelconque des revendications 1-3, dans laquelle les cellules sont des kératinocytes épidermiques.
  5. 5. Utilisation cosmétique selon l’une quelconque des revendications 1-4, dans laquelle la peau est des tissus épidermiques.
  6. 6. Utilisation cosmétique selon la revendication 5, dans laquelle les tissus épidermiques sont la couche épineuse et la couche basale de l’épiderme.
    1/7
FR1771134A 2016-10-28 2017-10-27 Utilisation cosmetique et methode pour ameliorer les fonctions physiologiques de la peau en augmentant l'expression d'ubiad1 Active FR3058056B1 (fr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610968180.1 2016-10-28
CN201610968180.1A CN107997978A (zh) 2016-10-28 2016-10-28 提高Ubiad1表达的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
FR3058056A1 true FR3058056A1 (fr) 2018-05-04
FR3058056B1 FR3058056B1 (fr) 2022-06-10

Family

ID=60320840

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FR1771134A Active FR3058056B1 (fr) 2016-10-28 2017-10-27 Utilisation cosmetique et methode pour ameliorer les fonctions physiologiques de la peau en augmentant l'expression d'ubiad1

Country Status (5)

Country Link
US (1) US20190269596A1 (fr)
EP (1) EP3532024B1 (fr)
CN (1) CN107997978A (fr)
FR (1) FR3058056B1 (fr)
WO (1) WO2018078079A1 (fr)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109750053A (zh) * 2019-03-12 2019-05-14 中国科学院合肥物质科学研究院 一种利用重组毕赤酵母表达芳香族异戊烯基转移酶合成维生素k2的方法
JP7325234B2 (ja) * 2019-04-19 2023-08-14 株式会社 資生堂 皮膚老化度の評価方法

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2915391B1 (fr) * 2007-04-27 2011-08-12 Soc Extraction Principes Actif Composition pharmaceutique et/ou cosmetique contenant un principe actif antioxydant et activateur de l'energie cellulaire.
FR2915395B1 (fr) * 2007-04-27 2012-03-09 Vincience Composition pharmaceutique et/ou cosmetique contenant des peptides
WO2012107073A1 (fr) * 2011-02-07 2012-08-16 Santoro Massimo Ubiad1 pour la synthèse de la coenzyme cellulaire q10 pour la protection contre le stress oxydatif cardiovasculaire
WO2012151346A1 (fr) * 2011-05-03 2012-11-08 Dermachip Inc. Signatures d'expression de gènes et réseaux de gènes associés au vieillissement de la peau

Also Published As

Publication number Publication date
FR3058056B1 (fr) 2022-06-10
CN107997978A (zh) 2018-05-08
EP3532024B1 (fr) 2021-02-24
US20190269596A1 (en) 2019-09-05
EP3532024A1 (fr) 2019-09-04
WO2018078079A1 (fr) 2018-05-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP2515840B1 (fr) Composition cosmetique et/ou pharmaceutique comprenant un extrait de caroube en tant qu&#39;agent actif activateur de l&#39;expression des aquaporines
EP2953611B1 (fr) Utilisation d&#39;une composition comprenant un perséose d&#39;avocat dans la protection des cellules souches épidermiques
EP2376529B1 (fr) Nouveaux peptides anti-age et composition cosmetique et/ou pharmaceutique les contenant
EP3370833B1 (fr) Extrait synergique de palmaria palmata
EP2675825B1 (fr) Nouveaux peptides activateurs de la synthese des proteines de la matrice extracellulaire et compositions cosmetiques les comprenant
JP2018537455A (ja) 低分子ｒｎａオニユリ抽出物を含む局所組成物および加齢に関する皮膚の徴候を低減するための美容ケア方法
EP1948128B1 (fr) Substance pour restaurer une co-expression et une interaction normales entre les proteines lox et nrage
FR3058056A1 (fr) Utilisation cosmetique et methode pour ameliorer les fonctions physiologiques de la peau en augmentant l&#39;expression d&#39;ubiad1
EP2827836B1 (fr) Composition cosmétique comprenant un système activateur de la protéine trf2 a action synergique constitue d&#39;une association d&#39;un extrait peptidique de soja et de levure et ses utilisations
EP2413891B1 (fr) Peptides anti-age activateurs du proteasome et compositions les contenant
EP2670766A1 (fr) Nouveaux peptides intervenant dans la voie de signalisation scf c-kit et compositions les comprenant
WO2013136174A1 (fr) Utilisation cosmétique d&#39;un extrait d&#39;avoine en tant qu&#39;agent activateur de la caspase-14
WO2020157428A1 (fr) Nouvelles utilisations cosmétiques d&#39;un extrait de rose
EP2496211A2 (fr) Utilisation d&#39;une composition comprenant un hydrolysat peptidique de riz non fermente pour stimuler la pousse des cheveux
EP2531517B1 (fr) Peptides activateurs de la caspase-14 et compositions les comprenant
EP3280387B1 (fr) Nouvelles utilisations du peptide de sequence his-d-trp-ala-trp-d-phe-lys-nh2 pour diminuer ou retarder l&#39;apparition de la senescence cellulaire et des signes du vieillissement cutane
FR2958848A1 (fr) Utilisation d&#39;un extrait de son de riz non germe et non fermente en tant qu&#39;agent actif anti-age
FR2971711A1 (fr) Composition cosmetique comprenant un extrait de petit epeautre en tant qu&#39;agent activateur de la synthese des proteines de la matrice extracellulaire
EP3487474B1 (fr) Procédé de traitement cosmétique de la peau

Legal Events

Date Code Title Description
PLFP Fee payment

Year of fee payment: 2

PLSC Publication of the preliminary search report

Effective date: 20190906

PLFP Fee payment

Year of fee payment: 3

PLFP Fee payment

Year of fee payment: 4

PLFP Fee payment

Year of fee payment: 5

PLFP Fee payment

Year of fee payment: 6

PLFP Fee payment

Year of fee payment: 7