FR3056224A1 - PETRI BOX IN INERT MATERIAL FOR CELL CULTURE - Google Patents
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Abstract
L'invention concerne une boîte de Pétri pour une culture cellulaire in vitro, ladite boîte de Pétri étant en matériau inerte et comportant : - une plaque de fond, et - au moins un logement formé dans la plaque de fond et configuré pour recevoir des cellules en culture.The invention relates to a petri dish for an in vitro cell culture, said petri dish being made of an inert material and comprising: - a bottom plate, and - at least one housing formed in the bottom plate and configured to receive cells in culture.
Description
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58857 ® RÉPUBLIQUE FRANÇAISE58857 ® FRENCH REPUBLIC
INSTITUT NATIONAL DE LA PROPRIÉTÉ INDUSTRIELLE © N° de publication :NATIONAL INSTITUTE OF INDUSTRIAL PROPERTY © Publication number:
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COURBEVOIECOURBEVOIE
©) Int Cl8 : C 12 M 1/22 (2017.01), C12M 3/00, C 12 N 5/073, 5/ 075, 5/076©) Int Cl 8 : C 12 M 1/22 (2017.01), C12M 3/00, C 12 N 5/073, 5/075, 5/076
DEMANDE DE BREVET D'INVENTION A1A1 PATENT APPLICATION
Pty BOITE DE PETRI EN MATERIAU INERTE POUR LA CULTURE CELLULAIRE.Pty PETRI BOX IN INERT MATERIAL FOR CELL CULTURE.
L'invention concerne une boîte de Pétri pour une culture cellulaire in vitro, ladite boîte de Pétri étant en matériau inerte et comportant:The invention relates to a petri dish for an in vitro cell culture, said petri dish being made of inert material and comprising:
- une plaque de fond, et- a bottom plate, and
- au moins un logement formé dans la plaque de fond et configuré pour recevoir des cellules en culture.- at least one housing formed in the bottom plate and configured to receive cells in culture.
FR 3 056 224 - A1FR 3 056 224 - A1
5a xL5a xL
-5b-5b
4a^4a ^
5d5d
DOMAINE DE L’INVENTIONFIELD OF THE INVENTION
La présente invention concerne des boites de Pétri pour une culture cellulaire in vitro, en particulier destinée à une fécondation in vitro.The present invention relates to petri dishes for an in vitro cell culture, in particular intended for in vitro fertilization.
ARRIERE-PLAN TECHNOLOGIQUETECHNOLOGICAL BACKGROUND
Le nombre de naissances médicalement assistées n’a cessé d’augmenter depuis la naissance du premier « bébé éprouvette » en 1978, et concerne désormais près de 2,5% des naissances en France.The number of medically assisted births has steadily increased since the birth of the first "test tube baby" in 1978, and now concerns almost 2.5% of births in France.
La fécondation in vitro (FIV) consiste à mettre en présence in vitro un ovocyte et des spermatozoïdes. Après une culture cellulaire, l’œuf ainsi obtenu est replacé dans l’utérus : c’est le transfert embryonnaire.In vitro fertilization (IVF) consists of bringing together an oocyte and sperm in vitro. After a cell culture, the egg thus obtained is replaced in the uterus: it is the embryo transfer.
La fécondation in vitro peut également être réalisée avec injection cytoplasmique de sperme (ICSI) : cette technique consiste à injecter un spermatozoïde directement dans l’ovocyte.In vitro fertilization can also be performed with cytoplasmic sperm injection (ICSI): this technique involves injecting a sperm directly into the oocyte.
Malgré le succès de la fécondation in vitro, de récentes études ont montré que les enfants nés selon cette technique présentent davantage de cas de malformations congénitales notamment liées à une perturbation de l’expression des gènes soumis à emprunte parentale (Beckwith Wiedemann par exemple) (4,24% vs. 2-3% dans le reste de la population), de maladies cardiaques, de malformations du système urogénital (2,6% vs. 1,4% dans le reste de la population), d’angiomes, de troubles génétiques et de rétinoblastomes (0.03% vs. 0.006% dans le reste de la population) (M. Hansen et al. The New England Journal of Medecine 2002, 346, 10, 725— 730 et European Genetics Conférence 2010 - Gothenburg, Sweden - June 12-15, 2010 - Abstract C06.1). Enfin, les enfants nés par fécondation in vitro sont généralement de plus petite taille et de plus faible poids à la naissance que ceux nés de conception naturelle.Despite the success of in vitro fertilization, recent studies have shown that children born using this technique have more cases of congenital malformations, notably linked to a disturbance in the expression of genes subject to parental borrowing (Beckwith Wiedemann for example) ( 4.24% vs. 2-3% in the rest of the population), heart disease, malformations of the urogenital system (2.6% vs. 1.4% in the rest of the population), angiomas, genetic disorders and retinoblastomas (0.03% vs. 0.006% in the rest of the population) (M. Hansen et al. The New England Journal of Medicine 2002, 346, 10, 725-730 and European Genetics Conference 2010 - Gothenburg, Sweden - June 12-15, 2010 - Abstract C06.1). Finally, children born by in vitro fertilization are generally smaller in size and lower birth weight than those born of natural conception.
Les causes de ces risques sont encore à l’heure actuelle mal identifiées et les hypothèses émises mettent notamment en cause les traitements médicamenteux pour provoquer l’ovulation ou maintenir la grossesse ou encore les procédures en elles-mêmes qui consistent en particulier à congeler puis décongeler les embryons.The causes of these risks are still poorly identified at the present time and the hypotheses put forward notably question drug treatments to induce ovulation or maintain pregnancy or even the procedures themselves which consist in particular in freezing and then thawing embryos.
Lors des FIV et des ICSI, les gamètes et les embryons humains sont conservés jusqu’à 5 jours dans des boites de Pétri en matière plastique, dont la toxicité sur les embryons et les gamètes n’a jamais été étudiée.During IVF and ICSI, human gametes and embryos are kept for up to 5 days in plastic petri dishes, the toxicity of which to embryos and gametes has never been studied.
De plus, les cultures embryonnaires et les gamètes sont conservés dans les boites de Pétri dans des microgouttes sous huile. Des gouttes de milieu sont déposées dans le fond de la boite et sont recouvertes d’huile pour éviter leur évaporation et les échanges avec l’atmosphère afin d’éviter la désaturation des milieux et leur variation de pH en dehors des incubateurs. Pour éviter que les gouttes de milieu ne s’étalent dans le fond de la boite avant d’être recouvertes d’huile, celui-ci est enduit d’un revêtement qui garde la goutte en place et dont la toxicité pour les embryons et les gamètes est également méconnue.In addition, the embryonic cultures and the gametes are stored in the petri dishes in oil microdrops. Drops of medium are deposited in the bottom of the box and are covered with oil to avoid their evaporation and exchanges with the atmosphere in order to avoid the desaturation of the media and their pH variation outside the incubators. To prevent drops of medium from spreading at the bottom of the box before being covered with oil, it is coated with a coating which keeps the drop in place and whose toxicity for embryos and gametes is also unrecognized.
RESUME DE L’INVENTIONSUMMARY OF THE INVENTION
Un objectif de l’invention est donc de proposer un système permettant de réaliser une culture cellulaire, qui réduise les risques de toxicité pour les embryons en comparaison avec les systèmes actuels et qui évite en particulier tout contact entre les cultures embryonnaires et les gamètes avec d’éventuelles substances toxiques ou des perturbateurs endocriniens.An objective of the invention is therefore to propose a system making it possible to carry out a cell culture, which reduces the risks of toxicity for the embryos in comparison with the current systems and which avoids in particular any contact between the embryonic cultures and the gametes with d 'possible toxic substances or endocrine disruptors.
Pour cela, l’invention propose une boîte de Pétri pour une culture cellulaire in vitro, ladite boîte de Pétri étant réalisée dans un matériau inerte et comportant une plaque de fond, et au moins un logement formé dans la plaque de fond et configuré pour recevoir des cellules en culture.For this, the invention provides a petri dish for an in vitro cell culture, said petri dish being made of an inert material and comprising a bottom plate, and at least one housing formed in the bottom plate and configured to receive cells in culture.
Certaines caractéristiques préférées mais non limitatives de la boîte de Pétri décrite ci-dessus sont les suivantes :Some preferred but non-limiting characteristics of the Petri dish described above are as follows:
- le logement présente une forme concave- the housing has a concave shape
- le logement présente une forme hémisphérique- the housing has a hemispherical shape
- le logement présente un volume interne compris entre 1 μί et 40 μί, de préférence entre 20 μί et 30 μί- the housing has an internal volume of between 1 μί and 40 μί, preferably between 20 μί and 30 μί
- la plaque de fond présente une épaisseur, au niveau du logement, inférieure ou égale à 1.2 mm, de préférence inférieure ou égale à 1.0 mmthe bottom plate has a thickness, at the level of the housing, less than or equal to 1.2 mm, preferably less than or equal to 1.0 mm
- la boîte de Pétri comprend en outre une paroi latérale fixée sur la plaque de fond et un couvercle configuré pour venir en appui sur la paroi latérale, la paroi latérale, la plaque de fond et le couvercle définissant ensemble une chambre interne de la boîte de Pétri,- the Petri dish further comprises a side wall fixed to the bottom plate and a cover configured to bear on the side wall, the side wall, the bottom plate and the cover together defining an internal chamber of the dish Petri,
- la boîte de Pétri comprend en outre au moins une butée formée sur l’un parmi le couvercle et la paroi latérale de sorte que lorsque le couvercle vient en appui sur la paroi latérale, un jeu subsiste entre ledit couvercle et ladite paroi latérale de manière à permettre une circulation de fluide entre un milieu externe à la boîte de Pétri et la chambre interne,- The petri dish further comprises at least one stop formed on one of the cover and the side wall so that when the cover bears on the side wall, a clearance remains between said cover and said side wall so to allow a circulation of fluid between a medium external to the Petri dish and the internal chamber,
- la boîte de Pétri comprend au moins une butée discrète, de préférence au moins deux butées discrètes, par exemple entre trois et quatre butées discrètes, fixées sur le couvercle de sorte que, lorsque le couvercle est placé sur la paroi latérale, lesdites butées discrètes viennent en appui contre ladite paroi latérale,- the Petri dish comprises at least one discrete stop, preferably at least two discrete stops, for example between three and four discrete stops, fixed on the cover so that, when the cover is placed on the side wall, said discrete stops abut against said side wall,
- la paroi latérale et le couvercle présentent chacun une largeur maximale, la largeur maximale du couvercle étant plus grande que la largeur maximale de la paroi latérale,the side wall and the cover each have a maximum width, the maximum width of the cover being greater than the maximum width of the side wall,
- le matériau inerte comprend l’un au moins des matériaux suivants : verre borosilicate, verre sodocalcique, verre de quartz, verre d’aluminosilicate, polycarbonate, polyméthacrylate de méthyle.the inert material comprises at least one of the following materials: borosilicate glass, soda-lime glass, quartz glass, aluminosilicate glass, polycarbonate, polymethyl methacrylate.
Avantageusement, les boites pour culture cellulaire selon la présente invention sont conçues en un matériau inerte et/ou ne nécessitent pas de revêtement particulier, permettant ainsi de s’affranchir des problèmes de toxicité potentielle pour les embryons et les gamètes.Advantageously, the cell culture dishes according to the present invention are designed from an inert material and / or do not require any particular coating, thus making it possible to overcome problems of potential toxicity for embryos and gametes.
Avantageusement, les boites pour la culture cellulaire selon la présente invention sont également translucides et n’induisent pas de déformations de l’image des objets observés au microscope ou la loupe au travers desdites boites.Advantageously, the boxes for cell culture according to the present invention are also translucent and do not induce deformations of the image of the objects observed under the microscope or the magnifying glass through said boxes.
Avantageusement, les boites pour culture cellulaire selon la présente invention sont réutilisables après nettoyage et stérilisation.Advantageously, the cell culture dishes according to the present invention are reusable after cleaning and sterilization.
BREVE DESCRIPTION DES DESSINSBRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS
D’autres caractéristiques, buts et avantages de la présente invention apparaîtront mieux à la lecture de la description détaillée qui va suivre, et au regard des dessins annexés donnés à titre d’exemples non limitatifs et sur lesquels :Other characteristics, objects and advantages of the present invention will appear better on reading the detailed description which follows, and with regard to the appended drawings given by way of nonlimiting examples and in which:
La figure 1 est une vue éclatée de profil d’un exemple de réalisation d’une boîte de Pétri conforme à un mode de réalisation de l’invention,FIG. 1 is an exploded side view of an exemplary embodiment of a Petri dish in accordance with an embodiment of the invention,
La figure 2 est une vue du dessus de la boîte de Pétri de la figure 1.Figure 2 is a top view of the Petri dish of Figure 1.
DESCRIPTION DETAILLEE D’UN MODE DE REALISATIONDETAILED DESCRIPTION OF AN EMBODIMENT
L’invention propose de réaliser une culture cellulaire dans un environnement inerte afin de préserver les cellules des milieux ou composés susceptibles de les contaminer. Plus précisément, l’invention propose une boîte de Pétri 1 réalisée dans un matériau inerte et comportant :The invention proposes to carry out a cell culture in an inert environment in order to preserve the cells from the media or compounds liable to contaminate them. More specifically, the invention provides a Petri dish 1 made of an inert material and comprising:
- une plaque de fond 2, et- a bottom plate 2, and
- au moins un logement 3 formé dans la plaque de fond 2 et configuré pour recevoir des cellules en culture.- At least one housing 3 formed in the bottom plate 2 and configured to receive cells in culture.
Par matériau inerte, on comprendra ici un matériau ne diffusant aucune substance et n’interagissant avec aucune substance ni aucune molécule. La boîte de Pétri 1 ne comprend donc pas non plus de revêtement hydrophobe, puisque la fonction de ce revêtement est remplie par le ou les logements 3 formés dans la plaque de fond 2. Le matériau inerte est donc ici dépourvu de perturbateur endocrinien, et notamment de paraben, de bisphenol A ou de phtalates.The term inert material is understood here to mean a material which does not diffuse any substance and does not interact with any substance or molecule. The petri dish 1 therefore also does not include a hydrophobic coating, since the function of this coating is fulfilled by the housing (s) 3 formed in the bottom plate 2. The inert material is therefore here devoid of endocrine disruptor, and in particular paraben, bisphenol A or phthalates.
Le matériau inerte peut notamment comprendre l’un au moins des matériaux suivants : les verres minéraux tel que le verre borosilicate, le verre sodocalcique, le verre de quartz, le verre d’aluminosilicate ou des verres organiques tel que le polycarbonate ou le polyméthacrylate de méthyle. De préférence, le matériau inerte est transparent, afin de permettre une visualisation des cellules à travers la plaque de fond 2. Par ailleurs, en vue de permettre sa réutilisation, le matériau inerte est de préférence stérilisable suivant les méthodes de stérilisation conventionnelles (stérilisation par rayonnement gamma ou par la chaleur).The inert material may in particular comprise at least one of the following materials: mineral glasses such as borosilicate glass, soda-lime glass, quartz glass, aluminosilicate glass or organic glasses such as polycarbonate or polymethacrylate methyl. Preferably, the inert material is transparent, in order to allow visualization of the cells through the bottom plate 2. Furthermore, in order to allow its reuse, the inert material is preferably sterilizable according to conventional sterilization methods (sterilization by gamma radiation or by heat).
Cette boîte de Pétri 1 pourra aussi bien être celle mise en œuvre pour réaliser une FIV à proprement parler que pour recueillir ou laver des cumulus ou faire des micro-injections.This Petri dish 1 may as well be the one used to carry out an IVF strictly speaking as to collect or wash cumulus or make micro-injections.
Dans une forme de réalisation, la boîte de Pétri 1 est une enceinte fermée. Elle comporte donc en outre au moins une paroi latérale 4 fixée sur la plaque de fond 2 et un couvercle 5 configuré pour venir en appui sur la paroi latérale 4. La plaque de fond 2, la paroi latérale 4 et le couvercle 5 délimitent donc ensemble une chambre interne de la boîte de Pétri 1, dans laquelle s’étendent le ou les logements 3 pour les cellules en culture.In one embodiment, the Petri dish 1 is a closed enclosure. It therefore further comprises at least one side wall 4 fixed to the bottom plate 2 and a cover 5 configured to come to bear on the side wall 4. The bottom plate 2, the side wall 4 and the cover 5 therefore delimit together an internal chamber of the Petri dish 1, in which extend the housing (s) 3 for the cells in culture.
La boîte de Pétri 1 peut par exemple présenter une forme sensiblement circulaire. La plaque de fond 2 et le couvercle 5 présentent donc la forme d’un disque tandis que la plaque latérale est de forme sensiblement cylindrique de révolution.The Petri dish 1 may for example have a substantially circular shape. The bottom plate 2 and the cover 5 therefore have the shape of a disc while the side plate is of substantially cylindrical shape of revolution.
En variante, la boîte de Pétri 1 peut présenter toute autre forme, typiquement une forme parallélépipédique, et plus précisément une forme carrée ou rectangulaire. La boîte de Pétri 1 peut alors comprendre quatre parois latérales, la plaque de fond 2 et le couvercle 5 présentant une forme parallélépipédique.As a variant, the Petri dish 1 can have any other shape, typically a parallelepiped shape, and more precisely a square or rectangular shape. The Petri dish 1 can then include four side walls, the bottom plate 2 and the cover 5 having a parallelepiped shape.
On notera que la boîte de Pétri 1 peut être réalisée dans un unique matériau inerte, ou en variante comprendre des parties (couvercle 5, paroi latérale 4, plaque de fond 2) réalisées dans des matériaux inertes distincts.Note that the Petri dish 1 can be made of a single inert material, or alternatively comprise parts (cover 5, side wall 4, bottom plate 2) made of separate inert materials.
Dans une forme de réalisation, plusieurs logements 3 sont formés dans la plaque de fond 2 afin de permettre à la boîte de Pétri 1 de recevoir plusieurs cellules en culture en parallèle.In one embodiment, several housings 3 are formed in the bottom plate 2 in order to allow the petri dish 1 to receive several cells in culture in parallel.
Les logements 3 peuvent être identiques en forme et en volume, ou en variante être distincts les uns des autres.The housings 3 may be identical in shape and in volume, or alternatively be distinct from each other.
Un logement 3 peut notamment présenter une forme concave, par exemple une forme sensiblement hémisphérique. Une telle forme permet ainsi de localiser facilement les cellules dans le logement 3 lors de leur examen. Ceci n’est cependant pas limitatif, d’autres formes de logement 3 pouvant être réalisées tant qu’elles permettent d’isoler les cellules cultivées et d’assurer leur visualisation par un opérateur. Ainsi, le logement 3 peut par exemple présenter un fond sensiblement plan et être délimité par une paroi cylindrique de révolution ou conique.A housing 3 may in particular have a concave shape, for example a substantially hemispherical shape. Such a shape thus makes it possible to easily locate the cells in the housing 3 during their examination. This is not, however, limiting, other forms of housing 3 which can be produced as long as they make it possible to isolate the cultured cells and ensure their visualization by an operator. Thus, the housing 3 may for example have a substantially planar bottom and be delimited by a cylindrical wall of revolution or conical.
Chaque logement 3 peut présenter un volume interne compris entre 1 μΙ_ et 40 μί, de préférence entre 20 μΙ_ et 30 μΙ_.Each housing 3 can have an internal volume of between 1 μΙ_ and 40 μί, preferably between 20 μΙ_ and 30 μΙ_.
Les logements 3 peuvent être creusés dans la plaque de fond 2, ou en variante être obtenu par moulage lors de la réalisation de la plaque de fondThe housings 3 can be hollowed out in the bottom plate 2, or alternatively be obtained by molding during the production of the bottom plate
2.2.
La plaque de fond 2 présente une épaisseur e au niveau du logement 3 inférieure ou égale à la distance focale du microscope utilisé pour observer les cellules placées dans le logement 3. Par épaisseur e on comprendra ici la dimension sensiblement perpendiculaire à la surface de la plaque dans laquelle sont formés le ou les logements 3. De manière générale, la plaque peut ainsi présenter une épaisseur e, au niveau du logement 3, inférieure ou égale à 1.2 mm, de préférence inférieure ou égale à 1.0 mm. Une telle épaisseur e permet ainsi d’utiliser une majorité des microscopes actuels employés pour l’observation de cellules en culture, tout en étant suffisamment fine pour garantir une bonne visualisation des cellules à travers la plaque de fond 2.The bottom plate 2 has a thickness e at the level of the housing 3 less than or equal to the focal distance of the microscope used to observe the cells placed in the housing 3. By thickness e we will understand here the dimension substantially perpendicular to the surface of the plate in which the housing or housings are formed 3. In general, the plate can thus have a thickness e, at the level of the housing 3, less than or equal to 1.2 mm, preferably less than or equal to 1.0 mm. Such a thickness e thus makes it possible to use a majority of the current microscopes used for the observation of cells in culture, while being thin enough to guarantee good visualization of the cells through the bottom plate 2.
Afin de permettre à des gaz, et notamment à de l’oxygène et à l’azote, d’entrer dans la boîte de Pétri 1 et d’atteindre les cellules, un jeu peut être ménagé entre le couvercle 5 et la paroi latérale 4 lorsque la boîte de Pétri 1 est fermée. Le jeu peut être obtenu notamment en fixant une butée 6 discrète sur la paroi latérale 4 (respectivement sur le couvercle 5) et configurée pour recevoir le couvercle 5 (respectivement la paroi latérale 4) lorsque la boîte deIn order to allow gases, and in particular oxygen and nitrogen, to enter the Petri dish 1 and reach the cells, a clearance can be made between the cover 5 and the side wall 4 when the Petri dish 1 is closed. The clearance can be obtained in particular by fixing a discreet stop 6 on the side wall 4 (respectively on the cover 5) and configured to receive the cover 5 (respectively the side wall 4) when the box
Pétri 1 est fermée. En variante, le couvercle 5 et/ou la paroi latérale 4 peuvent comprendre un orifice traversant, le cas échéant fermé par un diaphragme, afin de permettre une circulation des gaz entre la chambre interne de la boîte de Pétri 1 et l’environnement externe.Petri 1 is closed. As a variant, the cover 5 and / or the side wall 4 may comprise a through orifice, if necessary closed by a diaphragm, in order to allow gas circulation between the internal chamber of the Petri dish 1 and the external environment.
A cet effet, dans l’exemple de réalisation illustré sur les figures, le couvercle 5 comprend un fond 5a et une bordure périphérique 5b qui s’étend depuis le fond 5a de manière à former une cuvette de sorte que, lorsque le couvercle 5 est positionné sur la paroi latérale 4 pour fermer la boîte 1, le fond 5a du couvercle 5 s’étend en regard de la tranche supérieure de la paroi latérale 4 tandis que sa bordure périphérique 5b s’étend en dehors de la chambre interne de la boîte 1, sur une partie de la hauteur de la paroi latéraleTo this end, in the embodiment illustrated in the figures, the cover 5 comprises a bottom 5a and a peripheral edge 5b which extends from the bottom 5a so as to form a bowl so that, when the cover 5 is positioned on the side wall 4 to close the box 1, the bottom 5a of the cover 5 extends opposite the upper edge of the side wall 4 while its peripheral edge 5b extends outside the internal chamber of the box 1, over part of the height of the side wall
4. Une butée 6 discrète - c’est-à-dire ne s’étendant pas sur tout le tour du couvercle 5 - est fixée sur une face interne 5c de la bordure périphérique 5b. Lorsque la boîte de Pétri 1 est fermée, le couvercle 5 repose donc sur la tranche supérieure 4a de la paroi latérale 4 par l’intermédiaire de la butée 6. Un jeu est ainsi formé entre le couvercle 5 et la paroi latérale 4, de part et d’autre de la butée 6.4. A discreet stop 6 - that is to say not extending all around the cover 5 - is fixed to an internal face 5c of the peripheral edge 5b. When the Petri dish 1 is closed, the cover 5 therefore rests on the upper edge 4a of the side wall 4 by means of the stopper 6. A clearance is thus formed between the cover 5 and the side wall 4, and on the other side of the stop 6.
Dans une variante de réalisation, la boîte de Pétri 1 comprend plusieurs butées 6 discrètes, par exemple quatre butées 6 qui s’étendent deux à deux en regard, de manière à former un appui stable pour le couvercleIn an alternative embodiment, the Petri dish 1 comprises several discrete stops 6, for example four stops 6 which extend in pairs facing each other, so as to form a stable support for the lid
5. Un espace entre deux butées 6 discrètes adjacentes permet ainsi à des gaz de circuler vers la chambre interne et d’en sortir.5. A space between two adjacent discrete stops 6 thus allows gases to circulate towards the internal chamber and to leave there.
En variante, la ou les butées 6 discrètes peuvent être fixées sur la paroi latérale 4, typiquement sur sa face externe 4b, et être configurées pour recevoir la tranche inférieure 5d de la bordure périphérique 5b du couvercle 5.As a variant, the discrete stop (s) 6 can be fixed on the side wall 4, typically on its external face 4b, and be configured to receive the lower edge 5d of the peripheral edge 5b of the cover 5.
Dans tous les cas le nombre de butées doit assurer la stabilité du couvercle en position horizontale.In all cases the number of stops must ensure the stability of the cover in a horizontal position.
On comprendra que, le couvercle 5 est alors plus grand que la paroi latérale 4. Par exemple, dans le cas d’une boîte de Pétri 1 circulaire, le diamètre interne du couvercle 5 est plus grand que le diamètre externe de la paroi latérale 4. A titre indicatif, le couvercle peut par exemple présenter un diamètre interne égal à 6.2 cm tandis que la paroi latérale peut présenter un diamètre externe égal à 6.0 cm. Plus généralement, la largeur maximale du couvercle 5 est plus grande que la largeur maximale de la paroi latérale 4, sachant que par « largeur » on comprend ici la distance entre deux droites parallèles (ou « lignes d’appui) qui sont tangentes à la courbe fermée formée par la périphérique 5b du couvercle 5 (ou de la paroi interne) en deux points distincts.It will be understood that the cover 5 is then larger than the side wall 4. For example, in the case of a circular Petri dish 1, the internal diameter of the cover 5 is larger than the external diameter of the side wall 4 As an indication, the cover may for example have an internal diameter equal to 6.2 cm while the side wall may have an external diameter equal to 6.0 cm. More generally, the maximum width of the cover 5 is greater than the maximum width of the side wall 4, knowing that by "width" is understood here the distance between two parallel lines (or "support lines) which are tangent to the closed curve formed by the peripheral 5b of the cover 5 (or of the internal wall) at two distinct points.
La hauteur de la paroi latérale 4 peut notamment être comprise entre 0.5 cm et plusieurs centimètres, par exemple de l’ordre d’1 cm. En variante, les boîtes peuvent être beaucoup plus petites pour s’adapter à des incubateurs spéciaux.The height of the side wall 4 can in particular be between 0.5 cm and several centimeters, for example of the order of 1 cm. Alternatively, the boxes can be much smaller to accommodate special incubators.
L’utilisation d’une boîte de Pétri 1 conforme à l’invention va à présent être décrite dans le cas d’une boîte de Pétri 1 circulaire en verre comprenant plusieurs logements 3 et un couvercle 5 comportant des butées 6 discrètes configurées pour venir en appui sur la tranche supérieure 4a de la paroi latérale 4. Ceci n’est cependant pas limitatif, la forme de la boîte 1, la présence de butées 6 et le matériau inerte choisi pouvant être différents.The use of a petri dish 1 according to the invention will now be described in the case of a circular petri dish 1 made of glass comprising several housings 3 and a cover 5 comprising discrete stops 6 configured to come in support on the upper edge 4a of the side wall 4. This is not, however, limiting, the shape of the box 1, the presence of stops 6 and the inert material chosen may be different.
Au cours d’une première étape, des cellules sont ensemencées dans les logements 3.During a first step, cells are seeded in the housings 3.
Pour cela, un ovocyte et au moins un spermatozoïde (de préférence plusieurs) peuvent être placés dans chaque logement 3.For this, an oocyte and at least one sperm (preferably several) can be placed in each housing 3.
Au cours d’une deuxième étape, la boîte de Pétri 1 est fermée en posant le couvercle 5 sur la paroi latérale 4, de manière à ménager un jeu entre la paroi latérale 4 et le couvercle permettant la circulation de l’air. Ici, le couvercle 5 est par exemple posé sur la tranche supérieure 4a de la paroi latérale 4 par l’intermédiaire de quatre butées discrètes 6.During a second step, the Petri dish 1 is closed by placing the cover 5 on the side wall 4, so as to leave a clearance between the side wall 4 and the cover allowing the circulation of air. Here, the cover 5 is for example placed on the upper edge 4a of the side wall 4 by means of four discrete stops 6.
Au cours d’une troisième étape, les cellules sont mises en culture dans des conditions physiques qui permettent leur multiplication. Les conditions physiques peuvent notamment comprendre l’ajout d’un milieu de culture, la mise dans un incubateur à une température d’environ 37 °C, éventuellement dans un air enrichi en CO2..In a third step, the cells are cultured under physical conditions which allow them to multiply. The physical conditions can in particular include the addition of a culture medium, the placing in an incubator at a temperature of approximately 37 ° C., possibly in an air enriched with CO2.
Pour cela, la boîte de Pétri peut par exemple être placée dans un 5 incubateur.For this, the petri dish can for example be placed in an incubator.
Dans le cas de cellules comprenant un ovocyte et des spermatozoïdes, l’étape de multiplication permet d’obtenir un embryon de mammifère, de préférence un embryon de mammifères humains. La culture des cellules doit pouvoir avoir lieu pendant au moins cinq jours, de préférence au moins six jours.In the case of cells comprising an oocyte and sperm, the multiplication step makes it possible to obtain a mammalian embryo, preferably an embryo of human mammals. The cell culture must be able to take place for at least five days, preferably at least six days.
Lors de cette troisième étape, un opérateur peut alors surveiller l’évolution des cellules dans la boîte de Pétri sans avoir besoin de l’ouvrir, par exemple en plaçant un microscope 7 sous la plaque de fond 2.During this third step, an operator can then monitor the progress of the cells in the Petri dish without having to open it, for example by placing a microscope 7 under the bottom plate 2.
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|---|---|---|---|
| FR1658857A FR3056224A1 (en) | 2016-09-21 | 2016-09-21 | PETRI BOX IN INERT MATERIAL FOR CELL CULTURE |
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| FR (1) | FR3056224A1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP4330372A4 (en) * | 2021-11-02 | 2024-07-10 | Aktas Ranan Guelhan | Multi-purpose container for biological materials and methods |
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| CN201473539U (en) * | 2009-07-10 | 2010-05-19 | 曾勇 | Cell culture dish |
| EP2189519A1 (en) * | 2007-09-12 | 2010-05-26 | Kitakyushu Foundation for the Advancement of Industry, Science and Technology | Cell culture instrument and cell culture method using the same |
| CN202519259U (en) * | 2012-04-28 | 2012-11-07 | 王怀秀 | Embryo culture dish |
-
2016
- 2016-09-21 FR FR1658857A patent/FR3056224A1/en active Pending
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