FR3047176A1 - Utilisation cosmetique d'un extrait aqueux de feuilles de diospyros mespiliformis pour resserrer les pores de la peau - Google Patents
Utilisation cosmetique d'un extrait aqueux de feuilles de diospyros mespiliformis pour resserrer les pores de la peau Download PDFInfo
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- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
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- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
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Abstract
L'invention a pour objet l'utilisation cosmétique d'un extrait aqueux de feuilles de Diospyros mespiliformis et/ou d'une composition cosmétique le comprenant, pour réduire la visibilité des pores cutanés et/ou resserrer les pores cutanés et/ou prévenir la dilatation des pores cutanés. Elle a également pour objet une méthode de soin cosmétique de la peau pour réduire la visibilité des pores cutanés et/ou resserrer les pores cutanés et/ou prévenir la dilatation des pores cutanés, comprenant l'application topique sur la peau d'un extrait aqueux de feuilles de Diospyros mespiliformis et/ou une composition cosmétique le comprenant.
Description
UTILISATION COSMETIQUE D'UN EXTRAIT AQUEUX DE FEUILLES DE DIOSPYROS MESPILIFORMIS POUR RESSERRER LES PORES DE LA
PEAU
OBJET DE L’INVENTION
La présente invention concerne l'utilisation cosmétique d'un extrait aqueux de feuilles de Diospyros mespiliformis pour réduire la visibilité des pores cutanés et/ou resserrer les pores cutanés et/ou prévenir la dilatation des pores cutanés, ainsi qu'une méthode de soin cosmétique de la peau utilisant cet extrait.
ARRIERE-PLAN DE L’INVENTION
Au cours du vieillissement de la peau, il se produit un certain nombre de modifications des fonctions biologiques cutanées, qui se traduisent par l'apparition de rides et de taches pigmentaires, une perte de fermeté et d'élasticité de la peau, un teint terne et une dilatation des pores. Il est maintenant bien établi que certains de ces signes de vieillissement cutané sont liés à une réduction du taux de collagène, qui est elle-même la conséquence d'une prolifération réduite des fibroblastes, d'une diminution de la synthèse de collagène par les fibroblastes et d'une augmentation de l'activité des métalloprotéinases responsables de la dégradation du collagène. Tel est ainsi le cas de la dilatation des pores.
Les pores sont de petites ouvertures à la surface de la peau, qui sont en communication avec les glandes sébacées, souvent par l'intermédiaire d'un follicule pileux se terminant par un canal excréteur, unique et très court. Les glandes sébacées sont situées dans le derme, qui est un tissu conjonctif composé d'une matrice extracellulaire (MEC) renfermant des protéines fibreuses (collagène, élastine), des glycosaminoglycanes et des protéoglycanes et des cellules tels que les fibroblastes. Le canal excréteur des glandes sébacées gagne la surface de l'épiderme. Le derme et l'épiderme sont séparés l'un de l'autre par une membrane basale qui constitue la jonction dermo-épidermique. Cette dernière est une structure complexe dont le collagène de type IV est un constituant majoritaire. Avec l'âge, la dégradation du collagène de type I, qui est le constituant majoritaire de la MEC, entraîne une dégradation de cette dernière qui joue moins bien son rôle de soutien, ce qui conduit à une déformation des canaux excréteurs et donc à une dilatation des pores. Par ailleurs, la diminution avec l’âge du taux de collagène IV entraîne une altération de la membrane basale qui tend à s'aplatir, et induit un élargissement des pores qui deviennent plus visibles.
On comprend donc qu'il serait utile de disposer d'un moyen permettant de renforcer les tissus de soutien de la glande sébacée et de réduire ainsi la dilatation inesthétique des pores avec l'âge.
Pour réduire la visibilité des pores, plusieurs techniques médicales ont été proposées, y compris l'utilisation de lumière pulsée, de diodes électroluminescentes (LED) médicales, de lasers et de peelings chimiques. Il a également été suggéré d'appliquer sur la peau des compositions cosmétiques renfermant des actifs augmentant la synthèse de collagène.
RESUME DE L’INVENTION
Il est apparu à la Demanderesse qu'un extrait de feuilles de Diospyros mespiliformis permettait de réduire l'apparence des pores.
Le genre Diospyros qui appartient à la famille des EBENACEAE comprend de nombreuses espèces dont Diospyros mespiliformis ou ébène d'Afrique et qui ne doit pas être confondu avec Diospyros kaki, ou plaqueminier, qui est originaire de Chine. Il a déjà été suggéré que des extraits de feuilles et de fruits de Diospyros kaki permettaient d'augmenter la synthèse de collagène (JP2006-160629), d'inhiber les métalloprotéinases (EP 1 284 134 ; JP2000-159631) et de réduire la taille des pores (KR100955389 ; KR20090105222). De leur côté, en usage externe, les feuilles de Diospyros mespiliformis sont traditionnellement utilisées sous forme de décoction contre la fièvre, la pneumonie ou la jaunisse ou encore pour soigner les furoncles. Elles sont également employées sous forme de broyât pour leurs propriétés homéostatiques, antiseptiques et cicatrisantes. Par ailleurs, il a été suggéré dans le document WO 2012/033634 que des extraits de feuilles de Diospyros mespiliformis étaient utiles pour augmenter la synthèse de collagène et inhiber l'expression des métalloprotéinases. Toutefois, il n'existe pas à ce jour, à la connaissance de la Demanderesse, de preuves expérimentales de ces allégations. En outre, ces extraits ont été préparés dans le document WO 2012/033634 par broyage de la partie de plante, suivie d'un séchage, puis d'un lavage avec de l'heptane et de l'acétate d'éthyle. La matière lavée a ensuite été extraite avec 100% de méthanol. Ce document ne décrit donc pas d'extrait aqueux de Diospyros mespiliformis. Il n'indique pas non plus quel type de collagène est visé, de sorte qu'il ne suggère pas qu'un extrait aqueux de feuilles de Diospyros mespiliformis puisse précisément agir sur la synthèse des collagènes I et IV.
La Demanderesse a démontré que l'utilisation d'un extrait aqueux de feuilles de Diospyros mespiliformis permettait d'augmenter précisément l’expression de collagènes I et/ou IV et/ou V par les fibroblastes et donc de lutter contre la dilatation des pores due à l'âge. L’invention a ainsi pour objet l'utilisation cosmétique d'un extrait aqueux de feuilles de Diospyros mespiliformis et/ou d’une composition cosmétique le comprenant, pour réduire la visibilité des pores cutanés et/ou resserrer les pores cutanés et/ou prévenir la dilatation des pores cutanés.
Elle a également pour objet une méthode de soin cosmétique de la peau pour réduire la visibilité des pores cutanés et/ou resserrer les pores cutanés et/ou prévenir la dilatation des pores cutanés, comprenant l'application topique sur la peau d'un extrait aqueux de feuilles de Diospyros mespiliformis et/ou d’une composition cosmétique le comprenant.
DESCRIPTION DETAILLEE
Un premier objet de la présente invention concerne donc l’utilisation cosmétique d’un extrait de la plante Diospyros mespiliformis pour réduire la visibilité des pores et/ou resserrer les pores cutanés et/ou prévenir la dilatation des pores cutanés de la peau.
Au sens de la présente invention, on entend par « utilisation cosmétique » une utilisation non pharmaceutique, c’est-à-dire une utilisation non thérapeutique, autrement dit telle que l’extrait de Diospyros mespiliformis est appliqué sur tout ou partie du corps saine, de façon particulière sur une zone de peau saine.
On entend par « peau » toute zone de peau du corps, et préférentiellement, la peau du visage, avantageusement humain.
Au sens de la présente invention, on entend par « zone de peau saine » une zone de peau qualifiée de non pathologique par un dermatologue, c’est-à-dire qui ne présente pas d’infection, de maladie ou d’affection cutanée telle que candidose, impétigo, psoriasis, eczéma, acné ou dermatite, de plaies ou de blessures.
De façon particulière, on entend par une « zone de peau saine » une zone de peau constituée de cellules qualifiées de « normales » par un médecin, c’est-à-dire de cellules non cancéreuses. L’extrait selon l’invention peut être administré par voie orale sous forme de complément nutraceutique et/ou sous forme topique. Préférentiellement, il est administré par voie topique. Ainsi, l’extrait selon l’invention est un extrait topiquement et/ou oralement acceptable. Au sens de la présente invention, on entend par « extrait topiquement et/ou oralement acceptable », un extrait non toxique, non irritant pour la peau et/ou les muqueuses, un extrait n’induisant pas de réponse inflammatoire, de façon particulière pas de réponse allergique, et stable chimiquement.
Au sens de la présente invention, on entend par « utilisation topique » ou « voie topique », l’utilisation de l’extrait selon l’invention par application locale directe, tel que par massage avec des mouvements circulaires, et/ou vaporisation de l’ingrédient sur la surface de la zone concernée de la peau.
Au sens de la présente invention, on entend par « resserrer les pores cutanés » diminuer l’ouverture des pores à la surface de la peau par l’intermédiaire d’un renforcement de la matrice extra-cellulaire et/ou de la jonction dermo-épidermique, ledit renforcement étant induit par une augmentation de l’expression de collagène tel que défini ci-après.
De même, on entend par « réduire la visibilité des pores », réduire leur apparence en diminuant leur ouverture par l’intermédiaire d’un renforcement de la matrice extra cellulaire et/ou de la jonction dermo-épidermique, ledit renforcement étant induit par le maintien ou l’augmentation de l’expression de collagène tel que défini ci-après. D’autre part, on entend par « prévenir la dilatation des pores cutanés », ralentir et/ou inhiber l’ouverture des pores à la surface de la peau, en inhibant la dégradation de la matrice extra-cellulaire et/ou en inhibant la dégradation de la jonction dermo-épidermique, et ce en inhibant la diminution de l’expression de collagène tel que défini ci-après.
Une dégradation de la matrice extra-cellulaire et/ou de la jonction dermo-épidermique sont en effet fréquemment observées lors du vieillissement de la peau, en particulier de la peau du visage, entraînant une diminution de la fonction de soutien de la glande sébacée, et par conséquent une déformation des canaux sébacés et l’ouverture des pores.
Au sens de la présente invention, on entend par « collagène » le collagène de type I et/ou III et/ou IV et/ou V et/ou VI et/ou VII et/ou XII et/ou ΧΠΙ et/ou XIV et/ou XVI et/ou XVII et/ou XVIII et/ou XXIV et/ou XXIX, en particulier présent dans la peau et/ou les muqueuses. Préférentiellement, il s’agit du collagène de type I et/ou IV et/ou V, en particulier présent dans la peau, et plus préférentiellement du collagène de type I et/ou de type V, en particulier présent dans la peau, en particulier humaine.
Au sens de la présente invention, on entend par « maintenir et/ou augmenter l’expression de collagène » l’augmentation de l’expression génique, c’est-à-dire des ARNm, et/ou l’expression protéique de collagène, préférentiellement l’augmentation de l’expression protéique de collagène, plus préférentiellement de collagène de type I et/ou de type IV et/ou de type V, en particulier au niveau de la peau, avantageusement de collagène de type I et/ou IV et/ou V humain.
On entend au sens de la présente invention par « maintenir l’expression de collagène » maintenir l’expression protéique et/ou génique de collagène, préférentiellement l’expression protéique. On entend encore par le terme « maintenir » inhiber la dégradation du collagène, rencontrée par exemple au cours du vieillissement de la peau, en particulier la peau du visage.
Dans un mode de réalisation de l’invention, l’extrait est considéré comme en quantité efficace pour augmenter l’expression génique et/ou protéique de collagène de type I lorsque l’augmentation génique et/ou protéique du collagène I est d’au moins 5%, préférentiellement au moins 15%, encore préférentiellement d’au moins 20%, par rapport au niveau d’expression protéique dudit collagène détectée en l’absence de l’extrait. Préférentiellement, il s’agit de l’augmentation protéique du collagène de type I.
Avantageusement encore, la mesure de l’expression protéique du collagène de type I est effectuée par technique immunochimique à l’aide d’un anticorps anti-collagène I dans des fibroblastes cultivés in vitro, selon le protocole décrit dans l’exemple 3. Avantageusement au sens de la présente invention, les fibroblastes humains mis en culture sont normaux, c’est-à-dire non pathologiques, non cancéreux et ne nécessitent par conséquent aucun traitement thérapeutique.
Dans un mode particulièrement préféré de réalisation de l’invention, il s’agit d’une augmentation de l’expression protéique de collagène de type I détectée en présence de l’extrait de feuilles de Diospyros mespiliformis préparé selon les conditions décrites dans l’exemple la).
Dans un mode de réalisation alternatif de réalisation de l’invention, la mesure de l’expression protéique du collagène de type I est effectuée par mesure par microscopie confocale après marquage immunocytochimique, dans les conditions décrites selon l’exemple 2.
Dans un autre mode de réalisation de l’invention, l’extrait est considéré comme en quantité efficace pour augmenter l’expression génique et/ou protéique de collagène de type IV lorsque l’augmentation génique et/ou protéique du collagène IV est d’au moins 4%, préférentiellement d’au moins 15%, encore préférentiellement d’au moins 20% par rapport au niveau d’expression protéique dudit collagène détectée en l’absence de l’extrait. Préférentiellement, il s’agit de l’augmentation protéique du collagène de type IV. Avantageusement encore, la mesure de l’expression protéique du collagène de type IV est effectuée par technique immunocytochimique selon le protocole décrit dans l’exemple 2. Avantageusement au sens de la présente invention, les fibroblastes humains mis en culture sont normaux, c’est-à-dire non pathologiques, non cancéreux et ne nécessitent par conséquent aucun traitement thérapeutique.
Dans un mode particulièrement préféré de réalisation de l’invention, il s’agit d’une augmentation de l’expression protéique de collagène de type IV détectée en présence de l’extrait de feuilles de Diospyros mespiliformis préparé selon les conditions décrites dans l’exemple la).
Dans encore un autre mode de réalisation de l’invention, l’extrait est considéré comme en quantité efficace pour augmenter l’expression génique et/ou protéique de collagène de type V lorsque l’augmentation génique et/ou protéique du collagène V est d’au moins 10%, préférentiellement d’au moins 20%, encore préférentiellement d’au moins 30 % par rapport au niveau d’expression protéique dudit collagène détectée en l’absence de l’extrait. Préférentiellement, il s’agit de l’augmentation protéique du collagène de type V.
Avantageusement encore, la mesure de l’expression protéique du collagène de type V est effectuée par technique immunochimique à l’aide d’un anticorps anti-collagène V dans des fibroblastes cultivés in vitro, selon le protocole décrit dans l’exemple 3. Avantageusement au sens de la présente invention, les fibroblastes humains mis en culture sont normaux, c’est-à-dire non pathologiques, non cancéreux et ne nécessitent par conséquent aucun traitement thérapeutique.
Dans un mode particulièrement préféré de réalisation de l’invention, il s’agit d’une augmentation de l’expression protéique de collagène de type V détectée en présence de l’extrait de feuilles de Diospyros mespiliformis préparé selon les conditions décrites dans l’exemple la).
Ainsi donc la présente invention a pour objet l’utilisation d’un extrait de feuilles, préférentiellement aqueux, de la plante Diospyros mespiliformis pour maintenir et/ou augmenter l’expression, préférentiellement protéique, de collagène, préférentiellement de collagène I et/ou IV et/ou V pour réduire la visibilité des pores et/ou resserrer les pores cutanés et/ou prévenir la dilatation des pores cutanés de la peau. L’extrait selon l’invention est un extrait aqueux de feuilles de Diospyros mespiliformis. Par "extrait aqueux" on entend, dans la présente description, un produit obtenu par extraction aqueuse, quelle que soit la forme (liquide, semi-liquide ou solide) qu'il puisse présenter. Cet extrait est obtenu par extraction de feuilles de Diospyros mespiliformis à l'aide d'un solvant contenant de l'eau et éventuellement d'au moins un solvant organique miscible à l'eau, tel qu'un glycol et/ou un alcool et/ou un polyol. On peut ainsi notamment utiliser un mélange d’eau avec l'éthanol et/ou le glycérol et/ou le butylène glycol en toutes proportions.
Dans un mode préférentiel de réalisation de l’invention, l'eau est utilisée comme seul solvant d'extraction. Ainsi, le solvant d'extraction renferme au moins 60% en poids d'eau, de préférence au moins 70% en poids d'eau, plus préférentiellement au moins 80% en poids d'eau, mieux, au moins 90% en poids d'eau et, encore mieux, 100% en poids d'eau. De façon particulière, l’extrait peut être obtenu par extraction de feuilles de Diospyros mespiliformis dans un mélange eau/éthanol, préférentiellement dans un mélange eau/éthanol (70/30 ; p/p). En outre, il est possible d'ajouter au solvant un acide organique ou inorganique pour ajuster son pH dans la plage de 5 à 6. L'extraction est effectuée à une température de 4°C à 95°C, avantageusement de 20°C à 95°C, encore avantageusement de 60 à 95°C, de préférence de 70 à 90°C. Dans un mode préférentiel de réalisation de l’invention, l’extraction est effectuée à 80°C.
Elle peut être réalisée pendant une durée allant de 30 minutes à 5 heures et de préférence de 1 à 2 heures, par exemple. Préférentiellement, l’extraction est réalisée pendant une durée de 1 heure. L’extrait peut être obtenu par extraction d’une quantité de 5% à 40 % en poids de feuilles de Diospyros mespiliformis par rapport au poids total du mélange solvant/plante (p/p). Préférentiellement, l’extrait est obtenu par extraction d’une quantité de 10% à 15% en poids, et avantageusement encore de 15% en poids de feuilles, par rapport au poids total du mélange constitué du solvant, préférentiellement l’eau, et de la plante (p/p).
Il est bien entendu que les feuilles de Diospyros mespiliformis peuvent être broyées et/ou séchées avant extraction.
Dans un mode préférentiel de réalisation de l’invention, l’extrait est obtenu par extraction d’une quantité de 15 kg de feuilles de Diospyros mespiliformis, dans un volume de 100 litres d’eau distillée préalablement chauffée à 80°C. L'extraction est conduite à une température de 80°C sous agitation, pendant une durée de 1 heure, dans les conditions décrites selon l’exemple la). Après centrifugation, le surnageant est récupéré puis filtré (5 pm). Après décoloration, la teneur en matière sèche est déterminée. De la maltodextrine est ajoutée à la solution, en quantité de 50% en poids par rapport au taux de matière sèche, puis la solution est filtrée et déshydratée par atomisation.
Dans un autre mode de réalisation de l’invention, l’extrait est obtenu par extraction d’une quantité de 10 kg de feuilles de Diospyros mespiliformis, dans un volume de 100 litres d’eau distillée préalablement chauffée à 80°C. L'extraction est conduite à une température de 80°C sous agitation, pendant une durée de 1 heure, dans les conditions décrites selon l’exemple lb). Après centrifugation, le surnageant est récupéré puis filtré (5 pm). Après décoloration, la teneur en matière sèche est déterminée. De la maltodextrine est ajoutée à la solution, en quantité de 50% en poids par rapport au taux de matière sèche, puis la solution est filtrée et déshydratée par atomisation.
Dans encore un autre mode de réalisation tel que décrit dans l’exemple le), l’extrait est obtenu par extraction d’une quantité de 10 kg de feuilles de Diospyros mespiliformis, dans un volume de 100 litres d’eau distillée à une température de 20°C sous agitation, pendant une durée de 5 heures. Après centrifugation, le surnageant est récupéré puis filtré (5 μηι). Après décoloration, la teneur en matière sèche est déterminée. De la maltodextrine est ajoutée à la solution, en quantité de 50% en poids par rapport au taux de matière sèche, puis la solution est filtrée et déshydratée par atomisation.
Dans encore un autre mode de réalisation de l’extrait tel que décrit dans l’exemple ld), l’extrait est obtenu à partir d’une quantité de 10 kg de feuilles de Diospyros mespiliformis, dans un mélange eau/éthanol (70/30 ; p/p) de 100 litres à une température de 60°C sous agitation, pendant une durée de 1 heure, dans les conditions décrites selon l’exemple ld). Après centrifugation, le surnageant est récupéré puis filtré (5 μηι). Après décoloration, la teneur en matière sèche est déterminée. De la maltodextrine est ajoutée à la solution, en quantité de 50% en poids par rapport au taux de matière sèche, puis la solution est filtrée et déshydratée par atomisation. L’extrait aqueux peut être décoloré par tout moyen, notamment à l'aide de charbon actif ou de terres décolorantes, auquel cas le procédé comprend généralement une étape supplémentaire de réajustement du pH de l'extrait. En variante ou en plus, le procédé décrit ci-dessus peut comprendre une étape de désodorisation de l'extrait selon toute technique connue de l'homme de l'art, avant ou après l'étape de décoloration. L'extrait éventuellement décoloré et/ou désodorisé peut ensuite être concentré par évaporation ou déshydraté par tout moyen, notamment par atomisation ou lyophilisation. Il peut être utile de lui ajouter un adjuvant, préférentiellement la maltodextrine, avant cette étape de déshydratation. L'extrait utilisé dans la présente invention peut être tel qu'obtenu après l'une des étapes précitées et éventuellement solubilisation ultérieure dans un solvant polaire choisi parmi l'eau, un alcool, un glycol, un polyol et leurs mélanges. Un ajusteur de pH peut si besoin être ajouté à ce solvant. L'extrait utilisé selon l'invention peut ainsi se présenter soit sous forme liquide, soit sous forme sèche. On a observé qu'il renfermait un ou plusieurs flavonoïdes, en particulier un ou plusieurs glycosides de flavanols tels que la rutine, le 3-P-D-glucoside de quercétine, le 3-O-rutinoside de kaempférol, le 3-O-glucoside de kaempférol et leurs mélanges. Il a été observé que cet extrait aqueux de feuilles de Diospyros mespiliformis permettait d'augmenter l’expression de collagène I et/ou IV et/ou V, comme cela a été mis en évidence in vitro sur culture de fibroblastes, par rapport à un témoin qui n'a pas été mis en contact avec l'extrait selon l'invention. L’extrait de Diospyros mespiliformis selon l’invention est généralement formulé dans une composition cosmétique, préférentiellement destinée à une application par voie topique. Au sens de la présente invention, on entend par composition cosmétique une composition non pharmaceutique, c’est-à-dire qui n’est pas destinée à un traitement thérapeutique de la peau, appliquée par voie topique sur au moins une zone de peau qualifiée de saine par un dermatologue.
Dans un mode de réalisation de l’invention, la composition cosmétique utilisée selon l’invention est destinée à réduire la visibilité des pores cutanés et/ou resserrer les pores cutanés et/ou prévenir la dilatation des pores cutanés. Ainsi, la composition cosmétique utilisée selon l’invention permet de maintenir et/ou augmenter l’expression, préférentiellement protéique, de collagène, préférentiellement de collagène I et/ou IV et/ou V.
Pour une utilisation dans la présente invention, l'extrait précité est généralement formulé dans la composition cosmétique ci-dessus en une concentration de 0,01 à 5% en poids sec, de préférence de 0,05 à 1% en poids sec, par rapport au poids total de la composition. Celle-ci renferme habituellement un milieu cosmétiquement acceptable, c'est-à-dire qui est adapté à être appliqué sur la peau sans générer de réponse allergique ni de rougeurs, tiraillements ou picotements inacceptables.
Ce milieu cosmétiquement acceptable renferme généralement de l'eau et peut éventuellement contenir en outre une phase grasse. La composition peut se présenter sous forme de solution aqueuse, de gel aqueux, d'émulsion eau-dans-huile ou huile-dans-eau ou encore d'émulsion multiple. En variante, elle peut se présenter sous forme de poudre. Suivant sa consistance, la composition utilisée selon l'invention peut être conditionnée dans un tube, un pot, un boîtier, ou encore un dispositif aérosol. Elle peut être utilisée pour le soin et/ou le nettoyage de la peau. En variante, elle peut être utilisée comme composition de maquillage de la peau ou comme composition photoprotectrice.
La composition peut renfermer un ou plusieurs excipients choisis parmi des agents tensioactifs et/ou émulsifiants, des conservateurs, des agents tampons, des agents chélatants, des dénaturants, des agents opacifiants, des ajusteurs de pH, des agents réducteurs, des agents stabilisants, des épaississants, des gélifiants, des polymères filmogènes, des charges, des agents matifiants, des agents de brillance, des pigments, des colorants, des parfums, et leurs mélanges. Le CTFA (Cosmetic Ingrédient Handbook, Second Edition (1992)) décrit différents excipients cosmétiques adaptés à une utilisation dans la présente invention.
Avantageusement, le ou les excipients sont choisis dans le groupe comprenant les polyglycérols, les esters, les polymères et dérivés de cellulose, les dérivés de lanoline, les phospholipides, les lactoferrines, les lactoperoxidases, les stabilisants à base de sucrose, la vitamine E et ses dérivés, les gommes de xanthane, les cires naturelles et synthétiques, les huiles végétales, les triglycérides, les insaponifiables, les phytostérols, les silicones, les hydrolysats de protéines, les betaines, les aminoxides, les extraits de plantes, les esters de saccharose, les dioxydes de titane, les glycines, et les parabens, et encore de préférence parmi le groupe consistant en le stéareth-2, le stéareth-21, le glycol-15 stéaryle éther, le cétéaryl alcool, le phénoxyéthanol, le méthylparaben, l'éthylparaben, le propylparaben, le butylparaben, le butylène glycol, le caprylyl glycol, les tocophérols naturels, la glycérine, le dihydroxycetyl sodium phosphate, l'isopropyl hydroxycétyl éther, le glycol stéarate, la triisononanoine, l'octyl cocoate, le polyacrylamide, l'isoparaffine, le laureth-7, un carbomer, le propylène glycol, l'hexylène glycol, le glycérol, le bisabolol, une diméthicone, l'hydroxyde de sodium, le PEG 30-dipolyhydroxystérate, les triglycérides caprique/caprylique, le cétéaryl octanoate, le dibutyl adipate, l'huile de pépins de raisin, l'huile de jojoba, le sulfate de magnésium, l'EDTA, une cyclométhicone, la gomme de xanthane, l'acide citrique, le lauryl sulfate de sodium, les cires et les huiles minérales, l'isostéaryl isostéarate, le dipélargonate de propylène glycol, l'isostéarate de propylène glycol, le PEG 8, la cire d'abeille, les glycérides d'huile de coeur de palme hydrogénée, l'huile de lanoline, l'huile de sésame, le cétyl lactate, le lanoline alcool, l'huile de ricin, le dioxyde de titane, le lactose, le saccharose, le polyéthylène basse densité, une solution isotonique salée, et leurs mélanges.
La composition utilisée selon l'invention peut en outre contenir des ingrédients actifs cosmétiques conduisant à un effet complémentaire ou éventuellement synergique tels que des actifs anti-âge. Il peut ainsi s'agir par exemple d'agents dépigmentants, éclaircissants ou anti-pigmentants de la peau, d'agents de coloration de la peau ou propigmentants, d'inhibiteurs de NO-synthase, d'agents stimulant la synthèse de macromolécules dermiques ou épidermiques, notamment de la matrice extracellulaire et/ou empêchant leur dégradation, d'agents stimulant la prolifération des fibroblastes ou des kératinocytes et/ou la différenciation des kératinocytes, d'agents myorelaxants ou dermo-décontractants, d'agent tenseurs, d'agents antipollution ou anti-radicalaires, d'agents apaisants, calmants ou relaxants, d'agents agissant sur la microcirculation pour améliorer l'éclat du teint, d'agents photoprotecteurs, d'agent desquamants, d'agents hydratants et/ou renforçant la barrière épidermique, et de leurs mélanges. Comme actifs hydratants, on peut citer à titre d'exemple non limitatif les actifs suivants : la sérine, l'urée et ses dérivés, les produits commercialisés sous le nom de Marine Filling sphères™, Advances moisturizing complex™, Hyaluronic Filling Sphères™, végétal filling sphères™ Osmogelline™, Micropatch™, les alkylcelluloses, les lécithines, les composés à base de sphingoïde, les céramides, les phospholipides, le cholestérol et ses dérivés, les glycosphingolipides, les phytostérols (stigmastérol et béta-sitostérol, campestérol), les acides gras essentiels, le 1-2 diacylglycérol, la 4 - chromanone, les triterpènes pentacycliques tels que l'acide ursolique, la vaseline, la lanoline, les sucres en particulier le tréhalose et ses dérivés, le fructose, le maltose, le lactose, l'érythritol, le mannitol, le D-xylose et le glucose, l'adénosine et ses dérivés, le sorbitol, les alcools polyhydriques, avantageusement en C2-C6, et de façon encore avantageuse en C3-C6, tels que la glycérine, le propylène glycol, le 1,3-butylène glycol, le dipropylène glycol, la diglycérine, la polyglycérine et leur mélange, le glycérol et ses dérivés, le polyacrylate de glycérol, le lactate de sodium, le pentanediol, la sérine, les acides lactiques, les AHA, les BHA, le pidolate de sodium, le xylitol, le lactate de sodium, l'ectoine et ses dérivés, le chitosane et ses dérivés, le collagène, le plancton, les dérivés stéroïdiens (dont la DHEA, ses dérivés 7-oxydés et/ou 17-alkylés et les sapogénines), le dihydrojasmonate de méthyle, la vitamine D et ses dérivés, un extrait de Malva sylvestres ou un extrait de Centella asiatica, des homopolymères d'acide acrylique, le beta-glucan et en particulier le sodium carboxymethyl beta-glucane, une huile de rosier muscat, un extrait de microalgue Prophyridium cruentum enrichi en zinc commercialisé par Vincience sous la dénomination Algualane Zinc™ , l'arginine, l'acetyl hexapeptide commercialisé par Lipotech sous le nom Diffuporine™, l'hydralysat de Viola tricolor commercialisé par Silab sous le nom Aquaphyline™. L'agent ayant un effet restructurant de la barrière cutanée peut être choisi parmi un extrait de levure comme le Relipidium™ de BASF Beauty Care Solutions France SAS, des sphingosines comme la salicyloyl sphingosine, un mélange de xylitol, de xylityl polyglycoside et de xylitan, des extraits de solanacée comme le Lipidessence™ de BASF Beauty Care Solutions France SAS et leurs mélanges. On peut encore citer notamment les céramides, les composés à base de sphingoides, les glycosphingolipides, les phospholipides, le cholestérol et ses dérivés, les phytostérols, les acides gras essentiels, le diacylglycérol, la 4-chromanone et dérivés de chromone et leurs mélanges, la vitamine B5 ou pantothenate et ses dérivés.
Comme exemple d'agents dépigmentants, éclaircissants ou anti-pigmentants de la peau utilisables dans le cadre de la présente invention on peut citer notamment les composés suivants : l'acide kojique, l'acide ellagique, l'acide férulique et ses dérivés, l'arbutine, l'hydroquinone, le pantothénosulfonate de calcium, la boldine, la diacétylboldine, l'acide ascorbique et ses dérivés, notamment le glucoside d'ascorbyle.
Les agents de coloration de la peau ou pro-pigmentants peuvent être notamment choisis parmi les agents favorisant la mélanogénèse, les agents de coloration artificielle de la peau, et leurs mélanges. Les agents favorisant la mélanogénèse sont notamment choisis parmi : - les substrats de la biosynthèse de la mélanine, notamment la L-tyrosine et ses dérivés, la L- dihydrophénylalanine ; -les agents capables de stimuler la synthèse de mélanine, et en particulier les complexes d'ions métalliques tels que le cuivre et de peptones tels qu'un hydrolysat protéique provenant du soja, du collagène ou de caséine, comme décrits dans le brevet US5698184 ; - les agents capables de stimuler l'activité ou l'expression de la tyrosinase, éventuellement par augmentation du taux d'AMPc intra-cellulaire tels que, notamment les peptides pro-opiomélanocortiques ; les alpha-MSH ou analogues d'alpha-MSH; ou les agonistes des récepteurs MC1R (US5683981, W09825584), les analogues de l'AMPc, la Forskoline et les bases xanthiques (par exemple la caféine ou la théophylline) ou par activation de la protéine kinase C tels que les diacylglycérols ou bien les psoralènes ; - les agents capables de stimuler le transfert des mélanosomes des mélanocytes vers les kératinocytes, par exemple en stimulant les récepteurs PAR-2 tels que les polyphénols catéchiques, en particulier la catéchine, épicatéchine, gallocatéchine, épigallocatéchine, leurs sels et leurs esters, sous forme monomères ou oligomères, ainsi que les extraits végétaux en contenant, en particulier les extraits de thé vert.
Les agents de coloration artificielle de la peau sont notamment choisis parmi : - les agents autobronzants, tels que l'isatine, l'alloxane, la ninhydrine, le glycéraldéhyde, l'aldéhyde mésotartrique, la glutaraldéhyde, l'érythrulose, la dihydroxyacétone (DHA), -les agents de coloration additionnels tels que les extraits de sorgho et un extrait de Chicorium intybus, en particulier en combinaison avec un extrait de Gymnema sylvestre ou muirapuama, commercialisés sous le nom de QUICKSUN par BASF Beauty Care Solutions France SAS.
Des exemples d'inhibiteurs de NO-synthase sont notamment un extrait de végétal de l'espèce Vitis vinifera.
Parmi les actifs stimulant la synthèse des macromolécules du derme ou empêchant leur dégradation, on peut citer : - un agent stimulant la synthèse de fibronectine, en particulier un extrait de maïs, un tel extrait étant notamment commercialisé par la Demanderesse sous le nom Deliner™ et le palmitoyl pentapeptide commercialisé par la société SEDERMA sous la dénomination commerciale Matrixil® ; - un agent de protection du facteur de croissance des fibroblastes (FGF2) de la matrice extracellulaire contre sa dégradation et/ou sa dénaturation, notamment un extrait d'Hibiscus Abelmoscus tel que décrit dans la demande de brevet au nom de la Demanderesse déposée sous le numéro FR0654316 et/ou un agent de stimulation de croissance des fibroblastes par exemple un extrait de soja fermenté contenant des peptides, connu sous le nom de Phytokine™ commercialisé par la Demanderesse et également décrit dans la demande de brevet EPI 119344 B1 (Laboratoires Expanscience), et préférentiellement une combinaison de ces deux extraits ; - un agent stimulant la synthèse de laminine, en particulier un extrait de malt modifié par biotechnologie, un tel extrait étant notamment commercialisé par la Demanderesse sous le nom Basaline™ ; - un agent stimulant l'expression et/ou l'activité de la Hyaluronane synthase 2 (HAS2) tels que les extraits végétaux décrits dans la demande de brevet FR2 893 252 Al et en particulier un extrait aqueux de Galanga (Alpinia galanga) ; - un agent stimulant la synthèse de lysyl oxydase like (LOXL) tel qu'un extrait de Geophila cordifolia et ceux décrits dans la demande de brevet FR2855968, et en particulier un extrait d'aneth ; - un agent stimulant la synthèse d'ATP intracellulaire, notamment un extrait d'algue Laminaria digitata ; - un actif stimulant la synthèse des glycosaminoglycanes, tels que le produit de fermentation du lait ; - un actif stimulateur de collagène tel que le rétinol et/ou la vitamine C ; - un actif inhibiteur des métalloprotéinases (MMP) telles que plus particulièrement les MMP 1, 2, 3, 9 tel que les rétinoïdes et dérivés, les oligopeptides et les lipopeptides, les lipoaminoacides, l'extrait de malt commercialisé par BASF Beauty Care Solutions
France sous la dénomination commerciale Collalift®, l'extrait hydrolysé de pomme de terre commercialisé sous le nom Extracellium™ par BASF Beauty Care solutions France SAS; le lycopène ; les isoflavones, la quercetine, le kaempferol, l'apigénine.
Les agents stimulant la prolifération des kératinocytes, utilisables dans la composition selon l'invention, comprennent notamment les rétinoïdes tels que le rétinol et ses esters, dont le palmitate de rétinyle, et le phloroglucinol. Les agents stimulant la différenciation des kératinocytes comprennent par exemple les minéraux tels que le calcium et les lignanes tels que le sécoisolaricirésinol, ainsi que l'extrait d'Achillea millefollium commercialisé sous le nom de Neurobiox™ par BASF Beauty Care Solutions France.
Les agents myorelaxants ou dermo-décontractants utilisables dans la composition selon l'invention comprennent le gluconate de manganèse, le Diazepam, certaines amines secondaires et tertiaires carbonylées, l'adénosine, ainsi que les sapogénines. Les agents antimicrobiens susceptibles d'être utilisés dans la composition selon l'invention peuvent notamment être choisis parmi le 2,4,4'-trichloro-2'-hydroxy diphényl éther (ou triclosan), le 3,4,4'-trichlorobanilide, le phénoxyéthanol, le phénoxypropanol, le phénoxyisopropanol, l'hexamidine iséthionate, le métronidazole et ses sels, le miconazole et ses sels, l'itraconazole, le terconazole, l'éconazole, le kétoconazole, le saperconazole, le fluconazole, le clotrimazole, le butoconazole, l'oxiconazole, le sulfaconazole, le sulconazole, le terbinafine, le l'acide undécylénique et ses sels, le peroxyde de benzoyle, l'acide 3-hydroxy benzoïque, l'acide 4-hydroxy benzoïque, l'acide phytique, l'acide N-acétyl-L-cystéine, l'acide lipoïque, l'acide azélaïque et ses sels, l'acide arachidonique, le résorcinol, l'octoxyglycérine, l'octanoylglycine, le caprylyl glycol, l'acide 10- hydroxy-2-décanoïque, le farnesol, les phytosphingosines et leurs mélanges.
Parmi les agents tenseurs utilisables dans la composition selon la présente invention, on peut citer notamment les polymères synthétiques, tels que les latex de polyuréthanne ou les latex acryliques ; les polymères d'origine naturelle, notamment les polyholosides sous forme d'amidon ou sous forme de carraghénanes, alginates, agars, gellanes, polymères cellulosiques et pectines; les protéines et hydrolysats de protéines végétales de soja ; les silicates mixtes ; les microparticules de cire ; les particules colloïdales de charge inorganique choisies par exemple parmi la silice, les composites silice-alumine ; ainsi que leurs mélanges.
La composition peut comprendre des agents dits antipollution, en particulier piégeurs d'ozone, que sont par exemple la vitamine C et ses dérivés dont le glucoside d'ascorbyle; les phénols et polyphénols, en particulier les tannins, l'acide ellagique et l'acide tannique; l'épigallocatéchine et les extraits naturels en contenant, en particulier les extraits de thé vert; les anthocyanes; les acides phénols, les stilbènes, le resvératrol; des actifs piégeurs de composés aromatiques mono- ou polycycliques, les tannins tels que l'acide ellagique et les dérivés indoles et/ou des actifs piégeurs de métaux lourds tels que 1 "EDTA, des actifs anti- radicalaires tels que la vitamine E et ses dérivés tels que l'acétate de tocophéryle ; les bioflavonoïdes; la coenzyme Q10 ou ubiquinone.
Comme agents apaisants utilisables dans la composition selon l'invention, on peut citer : les triterpènes pentacycliques, l'acide ursolique et ses sels, l'acide oléanolique et ses sels, l'acide bétulinique et ses sels, les sels de l'acide salicylique et en particulier le salicylate de zinc, le bisabolol, l'allantoïne, les huiles insaturées en oméga 3, la cortisone, l'hydrocortisone, l'indométhacine et la beta méthasone, les actifs antiinflammatoires, et notamment ceux décrits dans la demande FR2847267, en particulier l'extrait de racine de Pueraria lobata commercialisé sous le nom Inhipase® par BASF Beauty Care Solutions France SAS, les extraits de Theobroma cacao.
Les ingrédients actifs agissant sur la microcirculation (vasoprotecteurs ou vasodilatateurs) peuvent être choisis parmi les flavonoïdes, les ruscogénines, les nicotinates, les huiles essentielles.
Les ingrédients actifs photoprotecteurs ou filtres utilisables selon la présente invention sont notamment les agents photoprotecteurs actifs dans l'UV-A et/ou l'UV-B, tels que les dérivés de l'acide para-aminobenzoique notamment « UVINUL P25 » commercialisé par BASF, les dérivés salicyliques, en particulier l'homosalate seul ou en association avec des oxydes de titane, les dérivés du dibenzoylméthane, les dérivés cinnamiques, les dérivés de diphénylacrylate, dont l'octocrylene vendu notamment sous le nom commercial « UYINUL N539 » par BASF, les dérivés de la benzophénone, notamment la benzophénone-1 vendue notamment sous le nom commercial « UVINUL 400 » par BASF, les dérivés du benzylidène camphre, les dérivés de benzimidazole, les dérivés de triazine, dont Ethylhexyl triazone vendu notamment sous le nom commercial «UYINUL T150 » par BASF, les dérivés de benzotriazole, les dérivés anthranilique, les dérivés d'imidazolines, les dérivés de benzalmalonate, les dérivés de 4,4-diarylbutadiène, et leurs mélanges.
Par "agent desquamant", on entend tout composé capable d'agir : • soit directement sur la desquamation en favorisant l'exfoliation, tels que les β-hydroxyacides (BHA), en particulier l'acide salicylique et ses dérivés tels que l'acide n-octanoyl-5-salicylique, les acides de fruits, les alpha-hydroxyacides (AHA), tels que les acides glycolique, citrique, lactique, tartrique, malique ou mandélique, l'acide gentisique ou ses esters en particulier le gentisate de tocophérol, les oligofucoses, l'acide cinnamique, le resvératrol et certains dérivés d'acide jasmonique, et/ou leurs dérivés et/ou leurs mélanges, • soit sur les enzymes impliquées dans la desquamation ou la dégradation des cornéodesmosomes, les glycosidases, les agents chélatants des sels minéraux : l'EDTA, les composés aminosulfoniques, le méthyl glycine diacétate de sodium commercialisé par BASF sous la dénomination commerciale TR TT,ON™, le miel, les dérivés de sucre tels que l'0-octanoyl-6-D-maltose et la N-acétyl glucosamine.
Les actifs procurant un effet de bien-être tels que ceux mimant les effets des béta-endorphines pour améliorer la fonction barrière de la peau, tels que ceux cités dans la demande de brevet US 2006069032 ; les actifs stimulant la synthèse des béta-endorphines tels qu'un extrait de la plante Tephrosia purpurea.
La composition cosmétique décrite précédemment est utilisée pour réduire la visibilité des pores cutanés et/ou resserrer les pores cutanés et/ou prévenir la dilatation des pores cutanés, due en particulier au vieillissement cutané. Pour ce faire, la composition est plus particulièrement appliquée sur le visage. L'application peut être effectuée le matin et/ou le soir. Après application, la composition peut ou non être rincée selon qu'elle est adaptée ou non au nettoyage de la peau. Il s'agit de préférence d'une composition non rincée. En outre, cette composition est particulièrement adaptée au soin des peaux âgées, notamment des peaux ridées et/ou présentant des signes de relâchement cutané, telles que des peaux d'hommes et/ou de femmes ayant au moins 35 ans et elle est donc de préférence appliquée sur de telles peaux.
Un autre objet de la présente invention concerne une méthode soin cosmétique de la peau pour réduire la visibilité des pores cutanés et/ou resserrer les pores cutanés et/ou prévenir la dilatation des pores cutanés, comprenant l'application topique sur la peau d'un extrait aqueux de feuilles de Diospyros mespiliformis, avantageusement un extrait obtenu par extraction aqueuse de feuilles à 15% en poids par rapport au poids total des feuilles et du solvant (p/p). Dans un mode de réalisation de la présente invention, la méthode de soin cosmétique comprend l’application, préférentiellement par voie topique, d’une composition cosmétique comprenant l’extrait selon l’invention, avantageusement en une concentration de 0,01 à 5% en poids sec, de préférence de 0,05 à 1% en poids sec, par rapport au poids total de la composition.
EXEMPLES L’invention sera mieux comprise à la lumière des exemples suivants, qui sont donnés à titre purement illustratif et n’ont pas pour but de limiter la portée de l’invention, définie par les revendications annexées.
Exemple 1 : Préparation d'un extrait de Diospyros mespiliformis
Exemple la)
Dans un réacteur muni d'un agitateur, on a introduit 100 litres d'eau distillée qui a ensuite été chauffée à 80°C avant d'y ajouter 15 kg de feuilles de Diospyros mespiliformis. L'extraction a été effectuée à 80°C sous agitation, pendant une heure. On a ensuite refroidi le contenu du réacteur, puis il a été centrifugé afin de recueillir le surnageant. On a alors effectué une filtration en cascade du surnageant jusqu'à une porosité d'environ 5 pm, puis on l'a décoloré. Après décoloration, la teneur en matière sèche a été déterminée. On a ensuite ajouté de la maltodextrine à la solution, en quantité de 50% en poids par rapport au taux de matière sèche, puis la solution a été filtrée et déshydratée par atomisation.
On a ainsi obtenu un extrait aqueux sec de feuilles de Diospyros mespiliformis.
Exemple lb)
Dans un réacteur muni d'un agitateur, on a introduit 100 litres d'eau distillée qui a ensuite été chauffée à 80°C avant d'y ajouter 10 kg de feuilles de Diospyros mespiliformis. L'extraction a été effectuée à 80°C sous agitation, pendant une heure. On a ensuite refroidi le contenu du réacteur, puis il a été centrifugé afin de recueillir le surnageant. On a alors effectué une filtration en cascade du surnageant jusqu'à une porosité d'environ 5 pm, puis on l'a décoloré. Après décoloration, la teneur en matière sèche a été déterminée. On a ensuite ajouté de la maltodextrine à la solution, en quantité de 50% en poids par rapport au taux de matière sèche, puis la solution a été filtrée et déshydratée par atomisation.
On a ainsi obtenu un extrait aqueux sec de feuilles de Diospyros mespiliformis. Exemple le)
Dans un réacteur muni d'un agitateur, on a introduit 100 litres d'eau distillée avant d'y ajouter 10 kg de feuilles de Diospyros mespiliformis. L'extraction a été effectuée à 20°C sous agitation, pendant une durée de 5 heures. Le contenu du réacteur a ensuite été centrifugé afin de recueillir le surnageant. On a alors effectué une filtration en cascade du surnageant jusqu'à une porosité d'environ 5 pm, puis on l'a décoloré. Après décoloration, la teneur en matière sèche a été déterminée. On a ensuite ajouté de la maltodextrine à la solution, en quantité de 50% en poids par rapport au taux de matière sèche, puis la solution a été filtrée et déshydratée par atomisation.
On a ainsi obtenu un extrait aqueux sec de feuilles de Diospyros mespiliformis.
Exemple ld)
Dans un réacteur muni d'un agitateur, on a introduit 100 litres d'un mélange eau/éthanol (70, 30 ; p/p) qui a ensuite été chauffé à 60°C avant d'y ajouter 10 kg de feuilles de Diospyros mespiliformis. L'extraction a été effectuée à 60°C sous agitation, pendant une durée de 1 heure. Le contenu du réacteur a ensuite été centrifugé afin de recueillir le surnageant. On a alors effectué une filtration en cascade du surnageant jusqu'à une porosité d'environ 5 pm. Après décoloration, la teneur en matière sèche a été déterminée. On a ensuite ajouté de la maltodextrine à la solution, en quantité de 50% en poids par rapport au taux de matière sèche, puis la solution a été filtrée et déshydratée par atomisation.
On a ainsi obtenu un extrait aqueux sec de feuilles de Diospyros mespiliformis.
Exemple 2 : Effet d'un extrait de Diospyros mespiliformis sur l’expression protéique de collagènes I et IV.
Protocole : a) Culture de fibroblastes
Des fibroblastes humains sont isolés à partir de biopsies de peaux humaines adultes. Les fibroblastes sont mis en culture sur des lames de culture 2 puits, dans un milieu de croissance contenant du sérum de veau foetal, et incubés à 37°C en présence de 5% de C02 et de 95% d'humidité relative. A confluence des fibroblastes, le milieu est remplacé par un milieu standard contenant les produits à évaluer: l'extrait de Diospyros mespiliformis aux concentrations: 5xl04 % (p/v), lxlO"3% (p/v), et 5xl0"3% (p/v)) en poids par rapport au volume final du milieu de culture, et le TGFbetal (10 ng/ml) en tant que contrôle positif. Un milieu standard sans produit correspond au contrôle.
b) Révélation par immunocytochimie des collagènes de type I et IV
Après incubation des fibroblastes pendant 3 jours pour l'étude du collagène I et pendant 4 jours pour l'étude du collagène IV, le milieu de culture est enlevé, et les fibroblastes sont rincés avec du PBS (phosphate buffered saline). Les fibroblastes sont ensuite fixés par l'acétone pendant 10 minutes à -20°C. Après rinçage avec du tampon PBS, les fibroblastes sont incubés à température ambiante en présence des anticorps primaires: soit anti-collagène I (pendant 1 heure) ou anti-collagène IV (pendant 2 heures). Les fibroblastes sont ensuite rincés par du PBS et incubés durant une période de 45 minutes à température ambiante en présence de l'anticorps secondaire marqué au FITC (Fluorescein isothiocyanate). Les fibroblastes sont rincés par du PBS et contre-colorés par du bleu Evans. Les lames sont ensuite recouvertes d'une lamelle avant l'observation au microscope confocal. La fluorescence verte émise par le FITC révèle la présence des collagènes. c) Analyse d'images et quantification du marquage
Les lames contenant les cellules sont observées au microscope confocal et pour chaque condition, six images sont réalisées. L'immunomarquage (fluorescence verte) révélant la présence des collagènes I ou IV, est quantifié par analyse d'images. Les résultats sont exprimés en pourcentage de surface occupée par l'immunomarquage au sein de la culture (n =6). Résultats :
Tableau I
Dans le tableau ci-dessus, "MOY" se réfère à la moyenne des valeurs obtenues et "ET" à l'écart-type.
Conclusion /L'extrait selon l'invention a augmenté, et de manière dose-dépendante, l’expression protéique des collagènes I et IV, respectivement, en comparaison avec le contrôle.
Exemple 3 : Effet d'un extrait de Diospyros mespiltformts sur l’expression protéique des collagènes I et V.
Le protocole expérimental de mise en évidence de l’augmentation de l’expression protéique des collagènes I et V est celui exposé dans la demande WO2012/175454.
Protocole de mesure de l ’expression protéique du collagène de type /:
Des fibroblastes humains dits normaux, c’est-à-dire non pathologiques, en particulier non cancéreux, ont été obtenus à partir d’une biopsie abdominale d’un donneur sain de 42 ans et ont été ensemencés en plaque de 96 puits contenant un milieu de culture (Fibroblast Growth Medium) durant une période de 96 heures à 37 °C sous atmosphère
CO2 de 5%. Au stade de la confluence, l’extrait selon l’invention préparé selon l’exemple la) a été ajouté au milieu de culture à une concentration finale dans le milieu de 0,02 % (p/v) puis la culture poursuivie durant une période de 2 jours. Le même milieu de culture sans ajout d’extrait selon l’invention a été utilisé comme contrôle (témoin non traité). Après 48 heures de culture post confluence à 37°C, le milieu de culture a été prélevé et éliminé. Une étape de lyse des cellules a été effectuée puis le lysat a été prélevé et analysé. Un dosage d’ADN a été réalisé sur les lysats de façon à exprimer l’expression protéique du collagène par cellule. L’ADN double brin a été dosé par la méthode au bisbenzimide (Invitrogen, Quant-iT™ PicoGreen ® dsDNA). La concentration en ADN est proportionnelle au nombre de cellules viables et permet de rationaliser la fluorescence lue par un nombre de cellules.
Le dosage du collagène de type I a été effectué par technique immunochimique comme suit : un anticorps anti-collagène de type I a été incubé durant 30 minutes avec le lysat cellulaire. Après rinçage au PBS, l’anticorps secondaire couplé à l’europium (Perkin Elmer) a été ajouté. Une solution de révélation a été ajoutée et la fluorescence a été mesurée en utilisant un lecteur multiplaque En Vision (Perkin Elmer).
Pour chaque condition, la fluorescence en temps retardée (TRF) a été mesurée dans chaque puits et rationalisée par la quantité d’ADN dosée dans le puits. Le ratio (fluorescence/concentration d’ADN) a été calculé.
Pour chaque condition, les résultats sont exprimés par le pourcentage de la moyenne des expressions protéiques par rapport aux expressions protéiques mesurées dans le contrôle (témoin non traité) (n=3).
Protocole de mesure de l ’expression protéique du collagène de type V : le protocole est identique à celui décrit ci-dessus, avec l’utilisation d’un anticorps primaire anticollagène de type V à la place de l’anticorps primaire anti-collagène de type I. Résultats :
Les résultats obtenus sont rassemblés dans le Tableau 2 ci-dessous.
Tableau 2
Dans le tableau ci-dessus, "MOY" se réfère à la moyenne des valeurs obtenues et "ET" à l'écart-type.
Conclusion : Comme il ressort de ce tableau, l'extrait selon l'invention permet d'augmenter l’expression protéique de collagène I par rapport au témoin et augmente en outre l’expression protéique de collagène V qui joue un rôle important dans la régulation de la taille des fibres de collagène I.
Exemple 4 : Ingrédient actif cosmétique comprenant l’extrait de feuilles de Diospyros mespiliformis selon l’invention
Les proportions sont exprimées en pourcentage (poids)
Extrait de feuilles de
Diospyros mespiliformis exemple la) 50%
Maltodextrine 50%
Exemple 5 : Emulsion cosmétique
Nous avons préparé une émulsion à partir des constituants indiqués dans le Tableau 3 ci-dessous, qui ont été mélangés dans les proportions pondérales mentionnées dans ce tableau.
Tableau 3
Pour préparer cette émulsion, les phases A et B ont été préparées et chauffées séparément à 75°C, puis la phase B a été introduite dans la phase A sous agitation douce jusqu'à 60°C. On a ensuite laissé refroidir le mélange sous agitation douce avant d'y ajouter la phase C.
Exemple 6 : Emulsion cosmétique
Nous avons préparé une émulsion à partir des constituants indiqués dans le Tableau 4 ci-dessous, qui ont été mélangés dans les proportions pondérales mentionnées dans ce tableau.
Tableau 4
Pour préparer cette émulsion, les conservateurs de la phase A ont été solubilisés dans l'eau à 50°C avant d'ajouter le polymère. La phase A a ensuite été mélangée jusqu'à homogénéisation complète avant d'y introduire la phase B sous agitation. On a ensuite laissé le mélange refroidir à température ambiante sous agitation puis on y a introduit la phase C après solubilisation de l'extrait dans l'eau.
Claims (11)
- REVENDICATIONS1. Utilisation cosmétique d'un extrait aqueux de feuilles de Diospyros mespiliformis et/ou d’une composition cosmétique le comprenant, pour réduire la visibilité des pores cutanés et/ou resserrer les pores cutanés et/ou prévenir la dilatation des pores cutanés.
- 2. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que l'extrait est obtenu par extraction à l'aide d'un solvant contenant de l'eau et éventuellement au moins un solvant organique miscible à l'eau tel qu'un glycol et/ou un alcool et/ou un polyol.
- 3. Utilisation selon la revendication 2, caractérisée en ce que le solvant d'extraction renferme au moins 60% en poids d'eau, de préférence au moins 70% en poids d'eau, plus préférentiellement au moins 80% en poids d'eau, mieux, au moins 90% en poids d'eau et, encore mieux, 100% en poids d'eau.
- 4. Utilisation selon la revendication 2, caractérisée en ce que l'extraction est effectuée à une température de 4 à 95°C, de préférence de 70 à 90°C.
- 5. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 2 à 4, caractérisée en ce que l'étape d'extraction est suivie d'une étape d'élimination des matières solides, de purification de la phase liquide résiduelle et éventuellement de concentration par évaporation ou de déshydratation.
- 6. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que l'extrait aqueux de feuilles de Diospyros mespiliformis augmente l’expression de collagène I et/ou IV et/ou V par les fibroblastes.
- 7. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisée en ce que l'extrait aqueux de feuilles de Diospyros mespiliformis renferme un ou plusieurs glycosides de flavanols.
- 8. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisée en ce que l’extrait aqueux de feuilles de Diospyros mespiliformis est appliqué par voie topique sur la peau, préférentiellement du visage.
- 9. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisée en ce que l'extrait est formulé dans une composition cosmétique comprenant un ou plusieurs excipients, ledit extrait étant formulé en une concentration de 0,01 à 5% en poids sec, de préférence de 0,05 à 1% en poids sec, par rapport au poids total de la composition.
- 10. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, caractérisée en ce que la composition est appliquée sur des peaux ridées et/ou présentant des signes de relâchement cutané.
- 11. Méthode de soin cosmétique de la peau pour réduire la visibilité des pores cutanés et/ou resserrer les pores cutanés et/ou prévenir la dilatation des pores cutanés, comprenant l'application topique sur la peau d'un extrait aqueux de feuilles de Diospyros mespiliformis tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 7 et/ou d’une composition cosmétique le comprenant.
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US20130216635A1 (en) * | 2010-09-09 | 2013-08-22 | Mary Kay Inc. | Topical skin care formulations comprising plant extracts |
-
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