FR3046422A1 - Methode d'evaluation d'actifs anti-age utilisant les cellules dermiques papillaires regroupees - Google Patents
Methode d'evaluation d'actifs anti-age utilisant les cellules dermiques papillaires regroupees Download PDFInfo
- Publication number
- FR3046422A1 FR3046422A1 FR1563470A FR1563470A FR3046422A1 FR 3046422 A1 FR3046422 A1 FR 3046422A1 FR 1563470 A FR1563470 A FR 1563470A FR 1563470 A FR1563470 A FR 1563470A FR 3046422 A1 FR3046422 A1 FR 3046422A1
- Authority
- FR
- France
- Prior art keywords
- papillary
- dermal
- cells
- grouped
- nuclei
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 5
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 title description 5
- 230000003712 anti-aging effect Effects 0.000 title description 4
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 claims abstract description 48
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 14
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims abstract description 8
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims abstract description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 35
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 claims description 33
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 claims description 31
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 claims description 26
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 9
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 claims description 6
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 claims description 5
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 claims description 5
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 claims description 4
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 claims description 4
- 238000002372 labelling Methods 0.000 claims description 4
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims description 4
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 claims description 3
- 239000003550 marker Substances 0.000 abstract description 6
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 abstract description 3
- 238000012216 screening Methods 0.000 abstract description 3
- 230000009759 skin aging Effects 0.000 abstract 1
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 20
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 20
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 10
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 6
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 6
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 6
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- 108010040149 Junctional Adhesion Molecule B Proteins 0.000 description 5
- 102100023430 Junctional adhesion molecule B Human genes 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 5
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 4
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 4
- 108050001370 Tight junction protein ZO-1 Proteins 0.000 description 4
- 102000013127 Vimentin Human genes 0.000 description 4
- 108010065472 Vimentin Proteins 0.000 description 4
- 102000044820 Zonula Occludens-1 Human genes 0.000 description 4
- SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N all-trans-retinoic acid Chemical compound OC(=O)\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N 0.000 description 4
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 4
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 4
- 229930002330 retinoic acid Natural products 0.000 description 4
- 229960001727 tretinoin Drugs 0.000 description 4
- 210000005048 vimentin Anatomy 0.000 description 4
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000002274 Matrix Metalloproteinases Human genes 0.000 description 3
- 108010000684 Matrix Metalloproteinases Proteins 0.000 description 3
- 102000007000 Tenascin Human genes 0.000 description 3
- 108010008125 Tenascin Proteins 0.000 description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 3
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- 102000015225 Connective Tissue Growth Factor Human genes 0.000 description 2
- 108010039419 Connective Tissue Growth Factor Proteins 0.000 description 2
- 102000004237 Decorin Human genes 0.000 description 2
- 108090000738 Decorin Proteins 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 210000000744 eyelid Anatomy 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 2
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 230000000050 nutritive effect Effects 0.000 description 2
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 2
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- UZOVYGYOLBIAJR-UHFFFAOYSA-N 4-isocyanato-4'-methyldiphenylmethane Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1CC1=CC=C(N=C=O)C=C1 UZOVYGYOLBIAJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N Chromium Chemical compound [Cr] VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000012422 Collagen Type I Human genes 0.000 description 1
- 108010022452 Collagen Type I Proteins 0.000 description 1
- 102000005927 Cysteine Proteases Human genes 0.000 description 1
- 108010005843 Cysteine Proteases Proteins 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 108060003393 Granulin Proteins 0.000 description 1
- 241001516685 Harungana Species 0.000 description 1
- 235000001018 Hibiscus sabdariffa Nutrition 0.000 description 1
- 101000599951 Homo sapiens Insulin-like growth factor I Proteins 0.000 description 1
- 101150088952 IGF1 gene Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 102100037852 Insulin-like growth factor I Human genes 0.000 description 1
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 102000005741 Metalloproteases Human genes 0.000 description 1
- 108010006035 Metalloproteases Proteins 0.000 description 1
- 108010057466 NF-kappa B Proteins 0.000 description 1
- 102000003945 NF-kappa B Human genes 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 235000005291 Rumex acetosa Nutrition 0.000 description 1
- 240000007001 Rumex acetosella Species 0.000 description 1
- 206010039710 Scleroderma Diseases 0.000 description 1
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 1
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 206010054094 Tumour necrosis Diseases 0.000 description 1
- 229930003316 Vitamin D Natural products 0.000 description 1
- QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N Vitamin D3 Natural products C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C/C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000016571 aggressive behavior Effects 0.000 description 1
- 101150115889 al gene Proteins 0.000 description 1
- 230000001195 anabolic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000003305 autocrine Effects 0.000 description 1
- 230000003376 axonal effect Effects 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 230000001925 catabolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002771 cell marker Substances 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 210000001612 chondrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229910052804 chromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011651 chromium Substances 0.000 description 1
- 239000000512 collagen gel Substances 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000030944 contact inhibition Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 230000003292 diminished effect Effects 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 210000004177 elastic tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 230000003328 fibroblastic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000000799 fluorescence microscopy Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000008611 intercellular interaction Effects 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000001001 laser micro-dissection Methods 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000007102 metabolic function Effects 0.000 description 1
- 238000001531 micro-dissection Methods 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000009149 molecular binding Effects 0.000 description 1
- 238000004264 monolayer culture Methods 0.000 description 1
- 230000003387 muscular Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 1
- 230000003076 paracrine Effects 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 1
- 238000012805 post-processing Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000009993 protective function Effects 0.000 description 1
- 230000006916 protein interaction Effects 0.000 description 1
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 230000007115 recruitment Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 1
- 230000037152 sensory function Effects 0.000 description 1
- 210000001044 sensory neuron Anatomy 0.000 description 1
- 235000003513 sheep sorrel Nutrition 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 210000004500 stellate cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 1
- 210000000106 sweat gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000028016 temperature homeostasis Effects 0.000 description 1
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 1
- 230000001331 thermoregulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 1
- 235000019166 vitamin D Nutrition 0.000 description 1
- 239000011710 vitamin D Substances 0.000 description 1
- 150000003710 vitamin D derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229940046008 vitamin d Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6881—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids from skin
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
- G01N33/5044—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics involving specific cell types
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
- G01N33/5082—Supracellular entities, e.g. tissue, organisms
- G01N33/5088—Supracellular entities, e.g. tissue, organisms of vertebrates
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/70—Mechanisms involved in disease identification
- G01N2800/7042—Aging, e.g. cellular aging
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pathology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
La présente invention se rapporte à l'identification d'un nouveau marqueur du vieillissement de la peau consistant en un nouveau type de population de cellules dermiques papillaires regroupées en îlots ; elle a ainsi pour objet un procédé pour tester l'effet d'actifs sur ce marqueur, un kit d'évaluation de la capacité d'une substance à protéger les cellules dermiques papillaires regroupées et son utilisation pour le criblage d'actifs cosmétiques.
Description
La présente invention se rapporte au domaine de l’évaluation d’actifs cosmétiques, en particulier d’actifs anti-âge.
Elle repose'plus spécifiquement sur l’identification d’unnouveau type de population de cellules' dermiques, papillaires regroupées en îlots; dont les caractéristiques évoluent au cours du vieillissement de la peau, pouvant' ainsi servir de marqueur du vieillissement dermique ; ainsi la présente, inventtofl. .a. pour objet un procédé pour tester l’effet d’actifs sur ce marqueur et son utilisation pour· le criblage d’actifs cosmétiques.
La peau est l’organe, le plus lourd et· le. plus étendu·'de l’organisme. Chez.· l’homme adulte, sa surface représente. ,2 m2 pour une masse d’environ 4 kg. Son; épaisseur'Varie de 0,05 mm aumiveau des· paupières; à 4 mm au niveau de la paumé des mains et de la plante des pieds. Cependant, la peau n’est pas qu’une simple enveloppe corporelle y elle assure en effet de multiples fonctions : fonction de protection vis-à-vis des agressions extérieures· (stress· mécaniques, chimiques, thermiques et infectieux), de conservation des fluides, de thermorégulation, d’échanges, fonction métabolique (synthèse de vitamine. D, de lipides) et fonction sensorielle (toucher, douleur) (Alexandre, M. & Christine, L. La peau (2e eci). Lavoisier, 2012). L'ensemble de ces fonctions est assuré par une structure complexe, associant des éléments tissulaires variés (épithéliaux, conjonctifs, vasculaires, musculaires et nerveux), organisés en trois compartiments distincts qui sont, de la surface vers la profondeur ; l’épiderme (auquel sont rattachés les annexes épidermiques, les follicules pilo-sébacés, les ongles et les glandes sudoripares) ; - le derme, séparé de l’épiderme par la jonction dermo-épidermique ; - l’hypoderme.
Le derme est un tissu fibreux, élastique, beaucoup plus épais que l’épiderme. Ces deux tissus, donne et épiderme, sont reliés par une zone d’adhérence centrée autour de la jonction dermo-épidermique, véritable surface d’échange entre les deux tissus. Le derme est un tissu conjonctif dense qui constitue le support solide de la peau et d’où proviennent les différentes annexes cutanées. Il joue un rôle nutritif, thermorégulateur et intervient de façon active dans la défense contre les micro-organismes, pathogènes, De plus, il'.renferme le· système vasculaire cutané (Γépiderme en est dépourvu). Le derme est composé de fibroblastes, de dendrocytes, de cellules du système immunitaire et d’une matrice extracellulaire (MEC).
Il fait l’objet d’un remodelage continuel, régulé par des mécanismes de contrôle de la synthèse (fibrogenèse) et de la dégradation (fibrolyse) des composants matriciels. Dans un derme sain, des facteurs à fonctions opposées sont mis enjeu : des facteurs anabotiques, tels que le TGF-βΙ (« Transforming Growth Factor-fil »), le CTGF («Connective Tissue Growth Factor») ou encore l’IGF-l (« Insulin-like Growth Factor-1 »), stimulent de façon autocrine ou paracrine la synthèse des composants matriciels par les fibroblastes ou s’opposent à leur dégradation en inhibant la synthèse des MMPs (« Matrix Metalloproteinases ») et/ou en favorisant l’expression de leurs inhibiteurs naturels, les TIMPs (« Tissue Inhibitors ofMetalloproteinases »), - des facteurs cataboliques, tels que le TNF-α (« Tumor Necrosis Factor-a »), FIL-1 (Interleukine-1) ou l’IFN-γ (« Interféron-y »), qui inhibent l’expression des protéines de la matrice dermique et des TIMPs, alors qu'elles induisent la production d’enzymes protéolytiques (MMPs et cystéine-protéases) (Beauchef, G., ..Bigot, N., Kypriotou, M., .Renard, E., Forée, B., Widom, R,, DompmailifeBlanchere, A., Oddos, T.,,Maquart, F.X., Demoor, M., Boumediene,..K, & Galéra, P. The p65 subunit of NF-kappaB irihibits COL! Al gene transcription in. hum an demiaî. and :scleroderma fibroblaste through its recruitment· on prornoter by protein interaction with transcriptional: aetivators (ç-Rrox, Spl «nd. Sp3). ./. Biol. Chem. 287 (5), 3462-3478· (2012)).
Son épaisseur varie considérablement en fonction du site anatomique (maximale dans le dos, minimale au niveau, des paupières), et sa structure varie quelque peu en fonction de la profondeur : derme superficiel ou papillaire, et derme profond ou réticulaire.
En surface, les papilles dermiques et le tissu immédiatement sous-jacent forment le derme papillaire ; lâche et très vascularisé, riche en fibres de collagène entrelacées et orientées perpendiculairement à l’épiderme, le derme papillaire renferme les fines connexions axonales des terminaisons nerveuses libres sensitives de F épiderme et, dans les zones très sensibles, les corpuscules encapsulés de Meissner. C’est dans cette partie du dénué que s’effectuent les échanges nutritifs avec les couches profondes de Γ épiderme.
La couche réticulaire, appelée ainsi en raison de l’agencement entrelacé de ses fibres de collagène, constitue la majeure partie du denne. Les fibres de collagène y sont grossières et disposées en faisceaux épais et irréguliers. Le derme réticulaire est en contact avec l’hypoderme.
Le fibroblaste est le principal type cellulaire du denne. Embryologiquement, les fibroblastes sont issus du mésenchyme qui donne également naissance aux chondroblastes et aux ostéoblastes. Ce sont de longues cellules fusiformes ou stellaires avec des prolongements cytoplasmiques parfois ramifiés (Bernard, 2003; Kanitakis, 1997). Les fibroblastes produisent et organisent la MEC. De plus, ils communiquent entre eux et avec tes autres types cellulaires résidents, jouant ainsi un rôle primordial dans la régulation de la physiologie de la peau (Sorrell, J, M. & Caplan, A. 1. Fibroblast hetérogeneîty: more than skîn deep. J Cell Sci 117, 667-675 (2004)).
Dans un denne sain, on distingue deux principales sous-populations de fibroblastes : - les fibroblastes dermiques.papillaires,, localisés dans le derme superficiel ; - les fibroblastes dermiques réticulaires, localisés dans le dermeprofond. II, a été remarqué qu’en, culture in vitro, les· .fibroblastes papillaires, proliféraient plus rapidement, que les .fibroblastes réticulaires (Sorrell et al 2004). De plus, ces derniers possèdent des propriétés contractiles supérieures à celles des fibroblastes papillaires lorsqu’ils sont, cultivés dans des gels de collagène de· type· I (Schafer, I. A., Fandy, M., Ferguson, R. & Davis, B·,. R. Comparative observation of fibroblasts derived front the papillary and reticular dermisof infants and adults:: growth Mnetics, packing density at confluence .and surface morphdlogy. Mech. Ageing.Dev, 31, .275-293 (1985)).. II. a également.· été'mis en évidence sur· des cultures en monocouche·, .que les fibroblastes papillaires atteignent une plus, 'haute densité cellulaire que les fibroblastes réticulaires, notamment parce qu’ils ne subissent pas complètement, l’inhibition de contact (Sorrell et al. et Schafer et al).
Par ailleurs,, les .dermes papillaire et réticulaire diffèrent par la 'Composition et l’organisation de-leur MEC (voir tableau Ici-après).
Tableau I: [A] Distribution des composants matriciels dans les compartiments dermiques et [B] Expression des composants matriciels par des fibroblastes dermiques en culture monocouche -D'après Sorrel et Caplan, 2004.
Les fibroblastes étant les cellules responsables de la régulation de rboméostasie de la MEC dermique, les observations présentées ci-dessus suggèrent que différents types fibroblastiques sont localisés de façon précise afin d’attribuer à chaque compartiment dermique une structure qui soit compatible avec ses fonctions biologiques et ses propriétés biomécaniques.
Dans le cadre d’études approfondies de la biologie du derme, la Demanderesse a montré une organisation tout à fait singulière des fibroblastes dans le derme papillaire ; elle consiste en l’observation de deux types de populations cellulaires dans le derme : les cellules dermiques papillaires isolées et les cellules dermiques papillaires regroupées. La Figure 1, qui représente.une··observation microscopique.d’une coupe de peau colorée au Tri chrome .'de Masson,, met en. exergue ces deux sous-types de population cellulaire papillaire : les cellules dermiques papillaires isolées (« I ») et les cellules dermiques papillaifeS'.regroupées («.R.»).
Ces populations ont été caractérisées par des études transcriptomiques (exemple IB) qui ont permis d’identifier des marqueurs spécifiques des cellules regroupées du derme papillaire ; il s’agit de la tenascine C (TNC), « Secreted Protein Acidic and Rich in Cysteiïiedike 1 » (SPARCL1), « Tight Junction Protein 1 » (TJP1) et « Junctional Adhesion Molécule 2 » (JAM2) qui sont bien moins exprimés dans les cellules dermiques papillaires isolées, en comparaison avec les cellules dermiques papillaires regroupées.
En outre, il a été montré que les cellules dermiques papillaires regroupées se caractérisaient par une diminution de leur nombre avec l’âge (exemple IC) contrairement aux cellules isolées ; par la découverte de cette nouvelle population de cellules du derme papillaire, la Demanderesse a ainsi identifié un nouveau marqueur dû vieillissement de la peau.
Cette découverte a permis la mise au point d’un nouveau test d’évaluation de. l’activité protectrice des cellules dermiques papillaires regroupées par des actifs ; cette activité protectrice pouvant se traduire par la prévention et/ou le ralentissement de la disparition des cellules dermiques papillaires regroupées qui survient au cours du vieillissement, voire la restauration de leur population. Ces actifs protecteurs des cellules dermiques papillaires regroupées permettent de lutter contre le vieillissement de la peau.
La mise en œuvre du test d’évaluation de substances dont on souhaite tester, l’activité-protectrice des cellules dermiques papillaires regroupées est réalisée par le procédé qui suit : a- mise en survie d’explant de peau pendant 2 à 10 jours, de préférence pendant 6 à 8 jours, sur une grille et de telle sorte que la base de l’expiant est en contact avec un milieu de culture pour expiant comprenant ou non ladite substance à tester ; il est à la portée de l’homme du métier de choisir un milieu de culture pour expiant ; préférentiellement, le milieu de culture est renouvelé tous les deux à trois jours durant cëtte^ mise en survie ; b- fixation des expiants, coupe des expiants fixés et inclus, (en particulier en paraffine) et marquage des noyaux cellulaires desdits expiants inclus ; de préférence, ce marquage.· des noyaux., est'réalisé avec une molécule fluorescente se liant, à l’ADN et. permettant .le· marquage, des noyaux, comme le DAPI ou le Hoeehst ; Γ ensemble de. ces étapes est réalisé par les techniques classiques connues· de Γhomme du métier ; c- photographie, des -coupes de peau à grossissement, .identique et fiaitement.informatique de rimagerobtenue par·,la mesure de la surface des. noyaux des cellules dermiques: papillaires regroupées ; les noyaux marqués sont considérés.comme appartenant à· des cellules dermiques papillaires regroupées s’ils sont espacés d’au plus. 10 pm et si leur .surface globale correspond, au moins à 2,3 fois la surface moyenne d’un, noyau cellulaire, cette surface moyenne étant'définie par l’algorithme; d- comparaison des surfaces mesurées à partir de coupes de peau traitées avec ladite substance avec celles des coupes de peau traitées sans ladite substance afin de déterminer si ladite substance produit ou non un effet sur le nombre de •cellules dermiques papillaires ..regroupées.
En complément: ou alternativement, les marqueurs suivants, propres à la population de cellules dermiques papillaires regroupées, tenascine C, SFARCL1, TJP1 et JAM2, peuvent, être ..mesurés dans les expiants de peaux après traitement selon les étapes a) et b)·ci-dessus.
La présenté invention se rapporte également à un kit d’évaluation de la capacité d’une, 'substance, à protéger les cellules dermiques papillaires 'regroupées comprenant un expiant de peau ; un dispositif et un milieu de culture pour expiant ; les réactifs et ustensiles nécessaires à la fixation, à la coupe et au marquage, 'des noyaux dudit expiant et un dispositif informatique comprenant un algorithme de traitement d’image· capable d’identifier les: noyaux demeliules-dermiques papillaires regroupées et d’en calculerlavsurface. 'La présente invention se rapporte,enfin à Γutilisation d’un tel kit pour le criblage et L'identification d’actifs capables de prévenir la disparition et/ou d’augmenterle·.nombre de cellules dermiques .papillaires regroupées.
Figures
La Figure 1 représente une..observation microscopique d’une coupe de peau colorée au Trichrome de Masson qui met .en exergue, ces deux sous-types· de· population cellulaire papillaire: les· cellules, dermiques papillaires isolées (I) et· les cellules dermiques: papillaires regroupées (R).
La Figure 2 représente la proportion de cellules R marquées (à la vimentine ou au. SPARCL1.') par ..rapport à celle· de· cellules I. marquées. La surface .des noyaux des cellules dermiques papillaires isolées, et des cellules, dermiques papillaires regroupées a été quantifiée par un algorithme et un rapport entre la surface des'."noyaux· des. cellules R. marquées et-celle, des noyaux des cellules I marquées a été calculé. .La moyenne des calculs faits· sur l’ensemble des coupes montre que SPARCL1 est; un marqueur spécifique des cellules dermiques papillaires regroupées car il révèle un rapport au moins 2 fois.plus élevé que la vimentine : en d’autres termes, SPARCL1 est un.marqueur plus spécifique des cellules;R que la vimentine ; *p<0.G5,
La Figure 3 illustre la réalisation de microdissections effectuées sur des cellules dermiques papillaires isolées et des cellules dermiques papillaires regroupées de trois peaux distinctes. L’ARM a été extrait et étudié en puces Aifymetrix® afin de déterminer les différences d’expression de gènes entre ces deux populations. dermiques.
La Figure 4 est un histogramme représentant les aires des noyaux des cellules dermiques papillaires isolées (I) et des noyaux des cellules dermiques papillaires regroupées (R) ; ces aires sont repérées et calculées par un algorithme.
La Figure 5 illustre les principales opérations réalisées par Γ algorithme en post-traitement d’images afin de sélectionner les regroupements cellulaires aü sein d’une population hétérogène de cellules dermiques.
La Figure 6 représente l’évolution de la. surface des noyaux des cellules .dermiques papillaires regroupées après traitement avec un extrait d’Haningana à 0.025 % ou avec l’acide rétinoïque à 10 μΜ. La significativité statistique a été mesurée· en utilisant le test de Tukey-Kramer ; * P<0.,05.
EXEMPLE 1 - CARACTERISATION DES CELLULES DERMIQUES
PAPILLAIRES REGROUPEES l.A. Définition d’un marquage spécifique des cellules dermiques papillaires regroupées (témoins positifs et négatifs (T+/T-))
Les pourcentages de cellules dermiques papillaires isolées (I) et de cellules dermiques papillaires regroupées (R) marquées sont calculés par un algorithme déterminant la surface de chacun de ces deux types cellulaires. Le rapport —°-—~ond^ j ——définit un degré de corrélation. Plus ce rapport est élevé, plus le .proportion de 1 marques ‘ 1 marquage; est considéré comme spécifique des cellules dermiques papillaires regroupées.
Il a été montré que SPARCLl avait un fort degré de corrélation et était donc spécifique des cellules dermiques .papillaires regroupées : il constitue un bon témoin positif (T+) ; à l’inverse, la vimentine, qui marque toutes: les cellules mésenchymateuses que sont les fîbroblastes du demse, qu’ils soient regroupés ou isolés, constitue un'bon témoin négatif (T-). car elle ne .marque pas spécifiquement les cellules dermiques papillaires regroupées (faible degré de corrélation) ; ces résultats sont présentés à la Figure .2, 1 .B, Marqueurs du microenvironnement des cellules dermiques papillaires regroupées Afin de déterminer les marqueurs micro-enviromementaux spécifiques des populations de cellules dermiques regroupées, des microdissections laser des deux sous-populations, cellules dermiques papillaires, 'regroupées et cellules dermiques papillaires·.isolées, ont:été.réalisées. L’ARN a. ensuite été extrait.· et soumis à une analyse pangénomique (puces, Affymetrix® de 40,000 gènes):, sur trois: peaux issues d’abdomen de patients âgés de,moins de 40 ans· ; cette démarche est illustrée à la Figure 3.
Les. résultats· génomiques ont permis·, d’identifier 4' marqueurs surexprimés chez les cellules dermiques'.papillaîres regroupées,.par rapport; aux cellules .dermiques papillaires isolées ; il..s’agit, de :
- La ténascine C ;· très impliquée: dans, les phénomènes de cicatrisation cutanée, cette protéine est, intimement. liée à la voie TGF-beta (et donc indirectement dans la synthèsefoe collagène).puisqu’elle régule et est régulée par ce facteur de croissance (Chiquet-Ehri.sm.ann., R. Tenascins. Int J
Biochem Cell Biol 36, 986-990 (2004)) ; - 'SPARCL1 ; Sullivan et al. ont décrit son implication phare dans la production de la décorine et dans l’assemblage du collagène, deux protéines essentielles dans la structure de la matrice dermique (Sullivan, Μ. M. et al. MatricelMar hevin régulâtes decorin production and collagen assembly. J. Biol. Chem. 281,27621-27632 (2006)) ; - TJPl et JAM2, deux protéines jonctionnelles impliquées dans les interactions cellule-cellule. Ces protéines retrouvées dans les jonctions semées, entre autres, .sont, souvent présentes, dans les épithéliums, y compris dans l’épiderme cutané. Les études génomiques et immunohistochimies réalisées montrent toutefois leur réelle expression dans le derme. Il est probable que ces protéines, bien .plus exprimées par les cellules dermiques papillaires regroupées que par les. cellules dermiques papillaires isolées, pourraient contribuer à maintenir la cohésion des cellules dermiques papillaires regroupées de par leurs fonctions dans les jonctions cellulaires.
Les résultats obtenus en immunohistochimie (montrés en partie en Figure 2) ont permis de confirmer, la spécificité de ces marqueurs pour les cellules dermiques papillaires regroupées, confirmant ainsi les résultats obtenus en génomique. 1. C. Evolution de la population de cellules dermiques papillaires regroupées avec l’âge
Les Inventeurs ont également mis en évidence que la diminution de la quantité totale des noyaux dermiques survenant lors du vieillissement est principalement due à la diminution du nombre de noyau des cellules dermiques papillaires regroupées, la quantité de noyaux des cellules dermiques papillaires isolées n’évoluant pas au cours du vieillissement comme illustré à la Figure 4.
Il résulte de ces observations que les marqueurs spécifiques des cellules dermiques papillaires regroupées, tels que SPARCL1 ou JAM2, seront, de fait, diminués avec l’âge. Ils constituent donc d’autant plus des marqueurs essentiels à la physiologie de la peau.
EXEMPLE 2 - PREPARATION D’UN MODELE SELON L’INVENTION 2. A, Préparation des expiants de peau et maintien en survie
La peau est ôtée de.sa partie adipeuse ; elle est. ensuite rincée 2 fois au PBS (tampon.'Salin) puis lavée 10 minutes.à..l’éthanol 70° et rincée 2 fois au PBS.avec. antibiotiques, La peau, découpée en punchs de 12 mm de diamètre, est maintenue en survie pendant 7 jours sur grille (permettant une interface air-liquide mimant les conditions physiologiques) en boîte 6 puits. La maintenance en survie est rendue possible grâce à Futilisation de 4 ml par puits d’un milieu de culture dédié pour les expiants (2/3 de milieu IMDM et 1/3 de milieu destiné à la culture in vitro des kératinocytes + antibiotiques pénicilline/streptomyeine + 5 % de sérum de veau fœtal) en atmosphère humide, à 37°C et 5% de COa. 2.B. Maintien en survie des expiants avec les actifs de référence
Les punchs de peau sont maintenus en survie pendant 7 jours, avec changement du milieu tous les 2 à 3 jours, en présence ou non (témoin) d’un actif de référence connu pour son activité anti-âge (extrait d’Harangana à 0.025 % dilué dans le milieu de culture ou 10 μΜ d’acide rétinoïque dilué dans milieu de culture). 2.C. Immunohistochimie
Après 7 jours de culture, avec ou sans les actifs de référence, les expiants de peau sont fixés en formaline (paraformaldéhyde 4%) 4 à 7 jours puis déshydratés et inclus en paraffine. Les blocs de paraffine sont coupés au microtome en tranches de 5 microns d’épaisseur qui sont déposées sur lames de verre. Après déparaffinages, les coupes de· peau sont montées entre lame et lamelle' avec .24 μ.1 de· DAPI 'à 20 μ§/ι«1 (permettant, la visualisation .dès noyaux cellulaires) dans 800 μΐ de· montage. 2.D. Algorithme utilisé en post-traitement d’image permettant Γisolement et la quantification des cellules dermiques papillaires regroupées ou isolées
Pour chaque condition, l’ensemble du demie superficiel est pris en photo au grossissement X20, tout le long de l’épiderme. Dans le derme, tous les noyaux sont capturés par l’algorithme. La taille moyenne d’un noyau est calculée à partir des noyaux présents dans la zone étudiée et renvoyée à l’algorithme ; Les noyaux proches de 10 microns (taille moyenne d’une cellule de mammifère) sont regroupés. Si la surface d’un groupe de cellules correspond à au moins 2,3 fois la surface moyenne d’un noyau, ce groupe est considéré comme étant un regroupement de cellules dermiques papillaires· regroupées (R) (cf. Figure 5). L’algorithme peut aussi' permettre d’identifier, les cellules dermiques papillaires isolées qui correspondent à celles qui ne sont pas des cellules dermiques papillaires regroupées (données non montrées). 2.E. Résultats
Des punchs de peau d’un même individu ont été cultivés 7 jours durant en présence ou non (témoin) d’un actif de référence connu pour ses propriétés anti-âge (extrait végétal d’Harungana ou acide rétinoïque). Après fixation, inclusion en paraffine et découpe au microtome, l’ensemble du derme superficiel a été capturé au grossissement 20X en microscopie à fluorescence avec le filtre DAPI permettant de repérer les noyaux cellulaires. Les images ont été post-traitées et les surfaces des noyaux des cellules dermiques papillaires regroupées ont été comparées selon les conditions de culture, puis représentées sous forme d’histogrammes. Les résultats présentés à la Figure 6 montrent que Γextrait d’Hârungana, tout comme l’acide rétinoïque, augmentent de manière significative, d’un facteur proche de 2, l’aire des noyaux des cellules dermiques papillaires regroupées, par rapport au témoin.
Claims (3)
- REVENDICATIONS1. Procédé d’évaluation de T activité'.protectrice des cellules dermiques papillaires regroupées d’une substance, comprenant les étapes, suivantes;.: a- mise en survie d’explant de peau pendant 2 à 10 jours sur une grille et de telle sorte que la..base de l’expiant est en. contact avec un .milieu, de culture pour expiant comprenant ou non ladite substance à. tester ; b- fixation des expiants, coupe des expiants fixés et marquage des noyaux cellulaires ; c- photographie des coupes de peau à grossissement identique et traitement informatique de l’image obtenue par calcul de la surface des noyaux des cellules dermiques papillaires regroupées ; les noyaux marqués sont considérés comme appartenant à des cellules dermiques papillaires regroupé® s’ils sont espacés d’au plus 10 μιη et s’ils ont une surface globale d’au moins 2,3 fois celle de la surface moyenne d’un noyau ; et d- comparaison des surfaces mesurées à partir de coupes de peau traitées avec ladite substance avec celles de coupes de peau traitées sans ladite substance afin de déterminer si ladite substance produit ou non un effet sur le nombre de cellules dermiques papillaires regroupées.
- 2. Kit d’évaluation de· la capacité, d’une substance à protéger les· cellules dermiques papillaires regroupées "Comprenant un..expiant de peau.;.un dispositif et un milieu.de culture: pour expiant;; lestéactifs et ustensiles nécessaires à la fixation, .à. la coupe et: au marquage des noyaux de l’explant et un dispositif informatique .comprenant un algorithme de. traitement d’image capable d’identifier les noyaux de "Cellules dermiques papillaires regroupées,et.d’en calculer la surface.
- 3. Utilisation, d’un '.kit: selon la revendication 2 pour l’identification d’actifs capables de prévenir la disparition et/ou d’augmenter le nombre de cellules dermiques papillaires regroupées.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR1563470A FR3046422B1 (fr) | 2015-12-30 | 2015-12-30 | Methode d'evaluation d'actifs anti-age utilisant les cellules dermiques papillaires regroupees |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR1563470 | 2015-12-30 | ||
| FR1563470A FR3046422B1 (fr) | 2015-12-30 | 2015-12-30 | Methode d'evaluation d'actifs anti-age utilisant les cellules dermiques papillaires regroupees |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FR3046422A1 true FR3046422A1 (fr) | 2017-07-07 |
| FR3046422B1 FR3046422B1 (fr) | 2020-02-07 |
Family
ID=55411647
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FR1563470A Active FR3046422B1 (fr) | 2015-12-30 | 2015-12-30 | Methode d'evaluation d'actifs anti-age utilisant les cellules dermiques papillaires regroupees |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| FR (1) | FR3046422B1 (fr) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20100291250A1 (en) * | 2008-01-28 | 2010-11-18 | Societe Industrielle Limousine D'application Biologique, Dite Silab | Use of an active ingredient that is obtained from cyperus esculentus for its anti-aging cutaneous action |
| WO2013076240A1 (fr) * | 2011-11-25 | 2013-05-30 | Chanel Parfums Beaute | Nouveaux marqueurs de fibroblastes réticulaires et papillaires et utilisations de ceux-ci |
| US20130337087A1 (en) * | 2012-06-18 | 2013-12-19 | The Procter & Gamble Company | Methods and models for assessing anti-aging benefits of agents |
-
2015
- 2015-12-30 FR FR1563470A patent/FR3046422B1/fr active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20100291250A1 (en) * | 2008-01-28 | 2010-11-18 | Societe Industrielle Limousine D'application Biologique, Dite Silab | Use of an active ingredient that is obtained from cyperus esculentus for its anti-aging cutaneous action |
| WO2013076240A1 (fr) * | 2011-11-25 | 2013-05-30 | Chanel Parfums Beaute | Nouveaux marqueurs de fibroblastes réticulaires et papillaires et utilisations de ceux-ci |
| US20130337087A1 (en) * | 2012-06-18 | 2013-12-19 | The Procter & Gamble Company | Methods and models for assessing anti-aging benefits of agents |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| DAVID JANSON ET AL: "Papillary fibroblasts differentiate into reticular fibroblasts after prolonged in vitro culture", EXPERIMENTAL DERMATOLOGY, vol. 22, no. 1, 27 December 2012 (2012-12-27), COPENHAGEN; DK, pages 48 - 53, XP055302232, ISSN: 0906-6705, DOI: 10.1111/exd.12069 * |
| SCHAFER I A ET AL: "Comparative observation of fibroblasts derived from the papillary and reticular dermis of infants and adults: Growth kinetics, packing density at confluence and surface morphology", MECHANISMS OF AGEING AND DEVELOPMENT, ELSEVIER SEQUOIA, LAUSANNE, CH, vol. 31, no. 3, 1 September 1985 (1985-09-01), pages 275 - 293, XP023428514, ISSN: 0047-6374, [retrieved on 19850901], DOI: 10.1016/0047-6374(85)90095-8 * |
| SOLÈNE MINE ET AL: "Aging alters functionally human dermal papillary fibroblasts but not reticular fibroblasts: a new view of skin morphogenesis and aging", PL O S ONE, PUBLIC LIBRARY OF SCIENCE, US, vol. 3, no. 12, 30 December 2008 (2008-12-30), pages E4066 - 1, XP002675626, ISSN: 1932-6203, DOI: 10.1371/JOURNAL.PONE.0004066 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FR3046422B1 (fr) | 2020-02-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Mathur et al. | Treg-cell control of a CXCL5-IL-17 inflammatory axis promotes hair-follicle-stem-cell differentiation during skin-barrier repair | |
| Sorrell et al. | Fibroblasts—a diverse population at the center of it all | |
| Swartzlander et al. | Immunomodulation by mesenchymal stem cells combats the foreign body response to cell-laden synthetic hydrogels | |
| White et al. | Intrinsic cardiac origin of human cardiosphere-derived cells | |
| Liau et al. | Developmental stage-dependent effects of cardiac fibroblasts on function of stem cell-derived engineered cardiac tissues | |
| Emmert et al. | Higher frequencies of BCRP+ cardiac resident cells in ischaemic human myocardium | |
| Bian et al. | An immunoprotective privilege of corneal epithelial stem cells against Th17 inflammatory stress by producing glial cell-derived neurotrophic factor | |
| Middleton et al. | Newt cells secrete extracellular vesicles with therapeutic bioactivity in mammalian cardiomyocytes | |
| Wei et al. | Differentiation of rodent bone marrow mesenchymal stem cells into intervertebral disc-like cells following coculture with rat disc tissue | |
| EP2961830B1 (fr) | Modèle de peau | |
| JP2024038101A (ja) | ヒト真皮線維芽細胞の単離方法 | |
| JP2021105047A (ja) | 高齢細胞集団由来の高い分化能を有するヒト間葉系幹細胞の濃縮および増幅 | |
| EP3688141B1 (fr) | Modele ex vivo de peau humaine inflammee et ses utilisations pour le criblage de composes anti-inflammatoires | |
| KR20120043127A (ko) | 인간 피부 외식체 배양 시스템 및 그 용도 | |
| FR3071512A1 (fr) | Signatures moleculaires de trois sous-populations de fibroblastes dermiques et equivalent de derme comprenant une de ces sous-populations | |
| Sun et al. | Dynamic interplay between IL-1 and WNT pathways in regulating dermal adipocyte lineage cells during skin development and wound regeneration | |
| Owenier et al. | Novel technique for the simultaneous isolation of cardiac fibroblasts and epicardial stromal cells from the infarcted murine heart | |
| EP2893345B1 (fr) | Procédé d'évaluation de la cellulite et procédé d'évaluation d'un médicament efficace sur la cellulite en utilisant de la fibuline-3 et/ou de la gamma-sarcoglycane comme indicateur | |
| FR3046422A1 (fr) | Methode d'evaluation d'actifs anti-age utilisant les cellules dermiques papillaires regroupees | |
| US20210230536A1 (en) | Products for therapy of a musculoskeletal condition and methods for their production | |
| EP3642326A1 (fr) | Modeles de peau sensible reconstituee | |
| Witt | Establishment of 3D mucosa equivalents for the investigation of oral inflammation: the influence of antimicrobial peptides and prospective periodontitis treatment by the polymer dPGS-PCL97 | |
| WO2022243447A1 (fr) | Modèle humain ex vivo destiné à l'évaluation du potentiel inflammatoire de type allergique ou pseudo-allergique | |
| Saito et al. | CD146/MCAM surface marker for identifying human periodontal ligament-derived mesenchymal stem cells | |
| Garbieri et al. | Response of Cultured Primary Human Gingival and Periodontal Ligament Cells to Angiotensin II and IL1β Challenges |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PLFP | Fee payment |
Year of fee payment: 2 |
|
| PLSC | Publication of the preliminary search report |
Effective date: 20170707 |
|
| PLFP | Fee payment |
Year of fee payment: 3 |
|
| PLFP | Fee payment |
Year of fee payment: 4 |
|
| PLFP | Fee payment |
Year of fee payment: 5 |
|
| PLFP | Fee payment |
Year of fee payment: 6 |
|
| PLFP | Fee payment |
Year of fee payment: 7 |
|
| PLFP | Fee payment |
Year of fee payment: 8 |
|
| PLFP | Fee payment |
Year of fee payment: 9 |
|
| PLFP | Fee payment |
Year of fee payment: 10 |